Nothing Special   »   [go: up one dir, main page]

NO345911B1 - konjugater omfattende disse og farmasøytiske preparater for behandling av cancer, samt polynukleotider som koder for antistoffene, rekombinant vektor og vertscelle. - Google Patents

konjugater omfattende disse og farmasøytiske preparater for behandling av cancer, samt polynukleotider som koder for antistoffene, rekombinant vektor og vertscelle. Download PDF

Info

Publication number
NO345911B1
NO345911B1 NO20091712A NO20091712A NO345911B1 NO 345911 B1 NO345911 B1 NO 345911B1 NO 20091712 A NO20091712 A NO 20091712A NO 20091712 A NO20091712 A NO 20091712A NO 345911 B1 NO345911 B1 NO 345911B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
cells
antibody
antibodies
cell
binding
Prior art date
Application number
NO20091712A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20091712L (no
Inventor
Peter U Park
Laura M Bartle
Anna Skaletskaya
Viktor S Golmakher
Daniel Tavares
Jutta Deckert
Vincent Mikol
VéRONIQUE BLANC
Original Assignee
Sanofi Aventis
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=37831721&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO345911(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Sanofi Aventis filed Critical Sanofi Aventis
Publication of NO20091712L publication Critical patent/NO20091712L/no
Publication of NO345911B1 publication Critical patent/NO345911B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68033—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a maytansine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68035—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a pyrrolobenzodiazepine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6867—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from a cell of a blood cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
    • C07K16/462—Igs containing a variable region (Fv) from one specie and a constant region (Fc) from another
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57426—Specifically defined cancers leukemia
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)

Description

Oppfinnelsens bakgrunn
CD38 er et 45 kD type II transmembran glykoprotein med et langt C-temrinalt, ekstracellulært domene og et kort N-terminalt cytoplasmisk domene. CD38-protein er et bifunksjonelt ektoenzym som kan katalysere konvertering av NAD<+ >til syklisk ACDP-ribose (cADPR) og også hydrolysere cADPR til ADP-ribose. Under ontogeni opptrer CD38 på CD34<+>-belastede stamceller og linje-belastede progenitorer av lymfoid-, erytroid- og myeloidceller. CD38-ekspresjonen forblir som regel i lymfoidlinjen med varierende ekspresjonsnivåer på forskjellige nivåer av T- og B-celleutvikling.
CD38 oppreguleres i mange hematopoietiske malignanser, og i cellelinjer avledet fra forskjellige hematopoietiske malignanser, inkludert ikke-Hodgkins lymfom (NHL), Burkitts lymfom (BL), multippel myelom (MM), B-kronisk lymfocytisk leukemi (B-CLL), B- og T-akutt lymfocytisk leukemi (ALL), T-celle lymfom (TCL), akutt myeloid leukemi (AML), hårcelle leukemi (HCL), Hodgkins lymfom (HL) og kronisk myeloid leukemi (CML). På den annen side er de mest primitive, pluripotente stamceller i det hematopoietiske system CD38-. CD38-ekspresjon i hematopoietiske malignanser og dennes korrelasjon med sykdomsprogresjon gjør CD38 til et attraktivt mål for antistoffterapi.
CD38 er rapporert til å være involvert i Ca<2+>-mobilisering (M. Morra et al., 1998, FASEB J., 12: 581-592; M. T. Zilber et al., 2000, Proc Natl Acad Sci U S A, 97: 2840-2845) og i signaltransduksjon via tyrosinfosforylering av tallrike signalmolekyler, inkludert fosfolipase C- γ, ZAP-70, syk og c-cbl i lymfoid- og myeloidceller eller cellelinjer (A. Funaro et al., 1993, Eur J Immunol, 23: 2407-2411; M. Morra et al., 1998, FASEB J., 12: 581-592; A. Funaro et al., 1990, J Immunol, 145: 2390-2396; M. Zubiaur et al., 1997, J Immunol, 159: 193-205; S. Deaglio et al., 2003, Blood, 102: 2146-2155; E. Todisco et al., 2000, Blood, 95: 535-542; M. Konopleva et al., 1998, J Immunol, 161: 4702-4708; M. T. Zilber et al., 2000, Proc Natl Acad Sci U S A, 97: 2840-2845; A. Kitanaka et al., 1997, J Immunol, 159: 184-192; A. Kitanaka et al., 1999, J Immunol, 162: 1952-1958; R. Mallone et al., 2001, Int Immunol, 13: 397-409). På basis av disse observasjonene ble CD38 foreslått å være et viktig signalerende molekyl ved modning og aktivering av lymfoid- og myeloidceller under deres normale utvikling.
Den eksakte rolle for CD38 i signaltransduksjon og hematopoiese er fremdeles ikke helt avklart, særlig fordi de fleste av disse signaltransduksjonsstudier har benyttet cellelinjer som ektopikalt overeksprimerer CD38 og anti-CD38 monoklonale antistoffer, som er ikke-fysiologiske ligander. Fordi CD38-proteinet har en enzymatisk aktivitet som gir cADPR, et molekyl som kan indusere CD<2+>-mobilisering H. C. Lee et al., 1989, J Biol Chem, 264: 1608-1615; H. C. Lee og R. Aarhus, 1991, Cell Regul, 2: 203-209), er det foreslått at CD38-ligering med monoklonale antistoffer utløser Ca<2+>-mobilisering og signaltransdukering i lymfocytter ved øket produksjon av cADPR (H. C. Lee et al., 1997, Adv Exp Med Biol, 419: 411-419). Mot denne hypotese, viste trunkering og punktmuteringsanalyser av CD38-protein at verken den cytoplasmiske hale eller dens enzymatiske aktivitet er nødvendig for signalering mediert av anti-DD38-antistoffer (A. Kitanaka et al., 1999, J Immunol, 162: 1952-1958; F. E. Lund et al., 1999, J Immunol, 162: 2693-2702; S. Hoshino et al., 1997, J Immunol, 158, 741-747).
Det beste bevis på virkningen av CD38 kommer fra CD38<-/->-knock-out mus som har en defekt i den innate immunitet og en redusert T-celleavhengig humoral respons på grunn av en defekt i dendrittisk cellemigrering (S. Partida-Sanchez et al., 2004, Immunity, 20: 279-291; S. Partida-Sanchez et al., 2001, Nat Med, 7: 1209-1216). Ikke desto mindre er det ikke helt klart hvorvidt den CD38 som virker i mus er identisk med den i humane, fordi CD38-ekspresjonsmønsteret under hematopoiese skiller seg sterkt mellom human og mus: a) forskjellige immature progrenitor stamceller i humaner, tilsvarende progenitor stamceller i mus uttrykket et høyt nivå av CD38 (T. D. Randall et al., 1996, Blood, 87: 4057-4067; R. N. Dagher et al., 1998, Biol Blood Marrow Transplant, 4: 69-74), mens under den humane B-celleutvikling, høye nivåer av CD38-ekspresjon finnes i germinalsenter B-celler og plasmaceller (F. M. Uckun, 1990, Blood, 76: 1908-1923; M. Kumagai et al., 1995, J Exp Med, 181: 1101-1110), i mus er CD38-ekspresjonsnivåene i de tilsvarende celler lave (A. M. Oliver et al., 1997, J Immunol, 158: 1108-1115; A. Ridderstad og D. M. Tarlinton 1998, J Immunol, 160: 4688-4695).
Flere anti-human CD38-antistoffer med forskjellige proliferative egenskaper på forskjellige tumorceller og cellelinjer er beskrevet i litteraturen. For eksempel medierer et kimert OKT10-antistoff med mus Fab og human IgG1 Fc-antistoffmediert cytotoksisitet (ADCC) med meget effektivitet mot lymfomceller i nærvær av nukleære perifere blodeffektorceller fra enten MM-pasienter eller normale individer (F. K.
Stevenson et al.1991, Blood, 77: 1071-1079). En CDR-podet humanisert versjon av anti-CD38-antistoff AT13/5 er påvist å ha potent ADCC-aktivitet mot CD38-positive cellelinjer (US 09/797941 A1). Humane monoklonale anti-CD38-antistoffer er påvist å medierer den in vitro-avlivning av CD38-positive cellelinjer ved ADCC og/eller komplement-avhengig cytotoksisitet (CDC) (WO2005/103083, WO2006/099875), og å forsinkte tumorveksten i SCID-mus med MM-cellelinjen RPMI-8226 (WO 2005/103083 A2). På den annen side induserte flere anti-CD38-antistoffer, IB4, SUN-4B7 og OKT10, men ikke IB6, AT1 eller AT2, proliferering av mononukleære, perifere blodceller (PBMC) fra normale individer (C. M. Ausiello et al.2000, Tissue Antigens, 56: 539-547).
Noen av antistoffene ifølge den kjente teknikken er påvist å være i stand til å utløse apoptose i CD38<+ >B-celler. Imidlertid kan de kun gjøre dette i nærvær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner. Et agonistisk anti-CD38-antistoff (IB4) er rapportert å forhindre apoptose av human germinalsenter (GC) B-celler (S. Zupo et al.1994, Eur J Immunol, 24: 1218-1222), og å indusere proliferering av KG-1- og HL-60 AML-celler (M. Konopleva et al. 1998, J Immunol, 161: 4702-4708), men induserer apoptose i Jurkat T-lymfoblastiske celler (M. Morra et al.1998, FASEB J, 12: 581-592). Et annet anti-CD38-antistoff T16 induserte apoptose av immature lymfoidceller og leukemiske lymfoblastceller fra en ALL-pasient (M. Kumagai et al.1995, J Exp Med, 181: 1101-1110), og av leukemiskee myeloblastceller fra AML-pasienter (E. Todisco et al. 2000, Blood, 95: 535-542), men T16-indusert apoptose kun i nærvær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner (IL-7, IL-3, stamcellefaktor).
På den annen side induserer visse tidligere kjente antistoffer apoptose etter fornettning, men er totalt fri for enhver apoptotisk aktivitet inkubert alene (WO 2006/099875).
Fordi CD38 er et attraktivt mål for antistoffterapi for forskjellige hematopoietiske malignanser, ble det generert og screenet et stort antall av anti-human CD38-antistoffer med henblikk på høy potens i de følgende tre cytotoksiske aktiviteter mot CD38-positive, malignante hematopoietiske celler: indusering av apopose, ADCC og CDC. Foreliggende oppfinnelse beskriver nye anti-CD38-antistoffer som er i stand til å avlive CD38<+>-celler via tre forskjellige, cytotoksiske mekanismer, nemmelig induksjon av apoptose, ADCC og CDC. Bemerkelsesverdi beskriver foreliggende oppfinnelse de første anti-CD38-antistoffer som er i stand til direkte å indusere apoptose av CD38<+>-celler, selv uten nærvær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner.
Oppsummering av oppfinnelsen
En gjenstand for oppfinnelsen er å tilveiebringe antistoffer for spesifikk binding av CD38, og i stand til å avlive CD38<+>-celler ved apoptose. Mens noen antistoffer ifølge en viss kjent teknikk er i stand til å utløse apoptose kun ved fornetning eller kryssbinding, men ellers er fri for enhver apoptotisk aktivitet, er antistoffene ifølge oppfinnelsen i stand til å indusere apoptotisk celledød for CD38<+>-celler, uansett om de er inkubert alene. Bemerkelsesverdi er at antistoffene ifølge oppfinnelsen er de første anti-CD38-antistoffer som er påvist å avlive CD38<+ >B-celler ved alle de tre forskjellige mekanismer, nemmelig apoptose, ADCC og CDC. I en ytterligere utførelsesform av oppfinnelsen er antistoffet i stand til å avlive CD38<+ >B-celler ved apoptose selv i fravær av stromaceller og stroma-avledede cytokiner.
Antistoffene ifølge oppfinnelsen er i stand til særlig å avlive malignante CD38<+ >B-celler inkludert lymfom-, leukemi- og multiple myelomceller. I visse utførelsesformer er denne CD38<+ >B-celle en NHL-, BL-, MM-, B-CLL-, ALL-, TCL-, AML-, HCL-, HL-eller CML-celle.
I et ytterligere aspekt ved oppfinnelsen er antistoffene ifølge oppfinnelsen i stand til å avlive 24% Daudi-lymfomceller og/eller minst 7% av Ramos-lymfoceller og/eller 11% av MOLP-8 multippel myelomceller og/eller 36% av SU-DHL-8-lymfoceller og/eller 62% av DND-41-leukemiceller og/eller 27% av NU-DUL-1-lymfomceller og/eller 9% JVM-13-leukemiceller og/eller 4% av HC-1-leukemiceller ved apoptose i fravær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner.
Antistoffer ifølge oppfinnelsen kan være polyklonale eller monoklonale. Foretrukket er monoklonale anti-CD38-antistoffer. Foreliggende beskrivelse beskriver murine antistoffer valgt blant 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB0, 38SB31 og 38SB39, som alle her er fullt karakterisert med henblikk på aminosyresekvenser for både de variable lette og tunge områder, identifisering av deres CDR’er (komplementaritetsbestemmende områder), identifisering av deres overflate aminosyrer og midler for ekspresjon i rekombinant form.
Foreliggende beskrivelse inkluderer kimere versjoner av det murine anti-CD38-monoklonale antistoff valgt blant 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39. Også beskrevet er resurfaserte eller humaniserte versjoner av 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer der de overflateeksponerte rester i det variable rammeverksområdet i antistoffene, eller deres epitopbindende fragmenter, er erstattet når det gjelder både lette og tunge kjeder til nærmere å minne om kjente humanantistoff overflater. De humaniserte antistoffer og epitopbindende fragmenter beskrevet heri har forbedrede egenskaper dit hen at de er mindre immunogene (eller fullstendig ikke-immunogene) enn murin-versjoner i humane individer til hvilket de er administrert. Således gjenkjenner de forskjellige versjoner av humanisert 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer og epitopbindende fragmenter derav , særlig CD38 uten å være immunogene mot et menneske.
De humaniserte versjoner av 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer karakteriseres fullt ut her med henblikk på de respektive aminosyresekvenser for både lett- og tungkjedevariable områder, DNA-sekvensene for genene for lett- og tungkjedevariable områder, identifisering av de komplementære determinerende områder (CDR), identifisering av disses variable områder når det gjelder rammeverksoverflate aminosyrerester, og beskrivelse av midler for deres ekspresjon i rekombinant form.
Beskrivelsen tar også sikte på konjugater mellom cytotoksiske konjugater omfattende (1) et cellebindende middel som gjenkjenner og binder CD38, og (2) et cytotoksisk middel. I de cytotoksiske konjugater har det cellebindende middel en høy affinitet for CD38 og det cytotoksiske middel har en høy grad av cytotoksisitet for celler som uttrykker CD38, slik at de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen gir effektive avlivningsmidler.
Fortrinnsvis er cellebindingsmidler et anti-CD38-antistoff (for eksempel 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39) eller et epitopbindende fragment derav, og mer spesielt et humanisert anti-CD38-antistoff (for eksempel 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39), eller et epitop-bindende fragment derav, der et cytotoksisk middel kovalent er bundet, direkte eller via en spaltbar eller ikke-spaltbar linker, til antistoffet eller det epitopbindende fragment derav. I større detalj er det cellebindende middel det humaniserte 38SB19--antistoffet , og det cytotoksiske middel er et taksol, et maytansinoid, et tomaymycinderivat, et leptomycinderivat, CC-1065 eller en CC-1065-analog.
Mer foretrukket er det cellebindende middel det humaniserte anti-CD38-antistoff 38SB19, og det cytotoksiske middel er en maytansinforbindelse som DM1 eller DM4.
Foreliggende beskrivelse omfatter også anvendelsen av fragmenter av anti-CD38-antistoffer som bibeholder evnen til å binde CD38. I et ytterligere aspekt av beskrivelsen tas det sikte på bruk av funksjonelle ekvivalenter av anti-CD38-antistoffer.
Foreliggende beskrivelse inkluderer også en metode for inhibering av veksten av en celle som uttrykker CD38. I foretrukne utførelsesformer skjer denne fremgangsmåte for inhibering av vekst av celler som uttrykker CD38 in vivo, og resulterer i celledød selv om in vitro- og ex vivo-anvendelser også er inkludert.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også et farmasøytisk preparat omfattende et anti-CD38-antistoff eller et anti-CD38-antistoff-cytotoksisk middel konjugat, og en farmasøytisk akseptabel bærer eller eksipient. I visse utførelsesformer omfatter det terapeutiske middel et andre terapeutisk middel. Dette andre terapeutiske middel kan velges fra gruppen omfattende antagonister av epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vekstfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MSP) eller vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF), eller en antagonist av en reseptor for epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vekstfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MSP) eller vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF) inkludert HER2-reseptor, HER3-reseptor, c-Met og andre reseptortyrosinkinaser. Dette andre terapeutiske middel kan også velges fra gruppen omfattende antistoffer som tar sikte på differensieringscluster (CD) antigener inkludert CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138 og CD152. Dette andre, terapeutiske middel kan også velges fra gruppen kjemoterapeutika eller immunomodulatoriske midler.
Foreliggende oppfinnelse angår videre antistoffet eller konjugatet ifølge oppfinnelsen til bruk ved behandling av et individ med en cancer- eller en inflammatorisk sykdom inkludert autoimmun sykdom ved bruk av de terapeutiske preparater. I visse utførelsesformer er canceren valgt fra en gruppe bestående av NHL, BL, MM, B-CLL, ALL, TCL, AML, HCL, HL og CML. I nok en utførelsesform er den autoimmune sykdom valgt fra en gruppe bestående av systemisk lupus erytematose, multippel sklerose, reumatoid artritt, Crohns sykdom, ulcerativ kolitt, gastritt, Hashimotos tyroiditt, ankyloserende spondylitt, hepatitt C-assosiert kryoglobulinemisk vaskulitt, kronisk fokal encefalitt, bulløs pemfigoid, hemofili A, membranproliferative glomerulonefritt, Sjøgrens sykdom, adult- og juvenil dermatomyositt, adult polymyositt, kronisk urtikaria, primær biliær cirrhose, idiopatisk trombocytopenisk pupura, neuromyelitis optica, Graves dystyroid sykdom, bulløs pemfigoid, membranproliferativ glonerulonefritt, Churg- Strauss syndrom og astma. I foretrukne utførelsesformer omfatter det cytotoksiske konjugat et anti-CD38-antistoff og et cytotoksisk middel. I mer foretrukne utførelsesformer omfatter det cytotoksiske konjugat et humanisert 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoff DM1-konjugat, humanisert 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoff DM4 eller et humanisert 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoff taksankonjugat, og konjugatet administreres sammen med farmasøytisk akseptable bærere eller eksipienter.
I nok en utførelsesform av oppfinnelsen benyttes anti-CD38-antistoffer til å detektere CD38-proteinet i en biologisk prøve. I en foretrukket utførelsesform benyttes antistoffene for å bestemme CD38-nivåene i tumorvev.
Foreliggende oppfinnelse beskriver også et sett omfatte et anti-CD38-antistoff eller et anti-CD38-antistoff-cytotoksisk middel-konjugat og instruksjoner for bruk. I en foretrukket utførelsesform er disse anti-CD38-antistoffene de humaniserte 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer, det cytotoksiske middel en maytansinforbindelse som DM1 eller DM4, et tomaymycinderivat, et leptomycinderivat eller et taksan, og instruksjoner for anvendelse av konjugater ved behandling av et individ med cancer. Settet kan også inkludere komponenter som er nødvendig for fremstilling av en farmasøytisk, akseptabel formulering, for eksempel en diluent hvis konjugatet foreligger i lyofilisert tilstand, eller i konsentrert form, og for administrering av formuleringen.
Kort beskrivelse av figurene
Figur 1A viser en FACS-analyse av den spesifikke binding av renset murin anti-CD38-antistoffer, 38SB12-, 38SB18-, 38SB19-, 38- og 300-19-celler som uttrykker human CD38- og CD38-positive Ramos-lymfomceller;
Figur 1B viser en FACS-analyse av den spesifikke binding av renset murin anti-CD38-antistoffer, 38SB30-, 38SB31-, 38SB39- og kontroll-anti-CD38-antistoff AT13/15 til 300-19-celler som uttrykker human CD38 og CD38-positive Ramos-lymfomceller; Figur 2 viser bindingstitreringskurvene for 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 etablert med Ramos-celler;
Figur 3 viser FACS-dot-plot (FL4-H; TO-PRO-3-farging; y-akse og FL1-H; Anneksin V-FITC-farging; x-akse) av Ramos-celler som undergår apoptose etter inkubering med 38SB13, 38SB19 eller AT13/5 (10 nM) i 24 timer;
Figur 4A viser midlere prosentandeler av Ramos-celler som undergår apoptose etter en 24-timers inkubering med 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, 38SB39, 38SB7, 38SB23, IB4, AT13/5, OKT10 eller SUN-4B7. Den midlere prosentandel av anneksin V-positive celler (y-akse: inkluderer både TO-PRO-3-positive- og –negative celler) fra duplikatprøver ble plottet;
Figur 4B viser de midlere prosentandeler av Daudi-celler som undergår apoptose etter en 24-timers inkubering med det samme sett av antistoffer som angitt i Figur 4A;
Figur 4C viser de midlere prosentandeler av Molp-8-celler som undergår apoptose etter en 24-timers inkubering med det samme sett av antistoffer som angitt i Figur 4A;
Figur 5A viser et diagram av den humane ekspresjonsvektor som benyttes for å uttrykke hu38SB19-LC;
Figur 5B viser et diagram av den humane ekspresjonsvektor som benyttes for å uttrykke hu38SB19-HC;
Figur 5C viser et diagram av den humane ekspresjonsvektor som benyttes for å uttrykke både hu38SB19LC og hu38SB19HC;
Figur 6A viser ADCC-aktiviteter mediert av antistoffene ch38SB13, ch38SB18 og ch38SB19 mot Ramos-celler;
Figur 6B viser ADCC-aktiviteter mediert av antistoffene ch38SB30, ch38SB31 og ch38SB39 mot Ramos-celler;
Figur 7A viser ADCC-aktiviteter mediert av antistoffene ch38SB18, ch38SB19, ch38SB31, og ikke-bindende, kimere human IgG1-kontrollantistoff mot LP-1 multippel myelomceller;
Figur 7B sammenligner ADCC-aktiviteter, mediert av antistoffene ch38SB19 og murin 38SB19 mot Daudi-celler;
Figur 8A viser ADCC-aktiviteter mediert av ch38SB19-antistoffet og av den ikkebindende, kimere human IgG1-kontrollantistoff mot NALM-6 B-ALL-celler; Figur 8B viser ADCC-aktiviteter mediert av ch38SB19-antistoffet og av den ikkebindende, kimere human IgG1-kontrollantistoff mot MOLT-4 T-ALL-celler;
Figur 9A viser CDC-aktivieter mediert av antistoffene ch38SB13, ch38SB18, ch38SB19, ch38SB30 og ch38SB39 mot Raji-IMG-celler;
Figur 9B viser CDC-aktivieter mediert av antistoffene ch38SB19 og ch38SB31 mot Raji-IMG-celler;
Figur 10 viser CDC-aktiviter mediert av antistoffene ch38SB18, ch28SB19, ch28SB31 og av det ikke-bindende, kimere human IgG1-kontrollantistoff, mot LP-1 multiple myelomceller;
Figur 11A viser CDC-aktiviteter mediert av antistoffene ch38SB13, ch38SB19 og ch38SB39 mot Daudi-celler;
Figur 11B viser CDC-aktiviteter mediert av antistoffene ch38SB18 og ch38SB30 mot Daudi-celler;
Figur 11C viser CDC-aktiviteter mediert av antistoffene ch38SB19 og ch38SB31 mot Daudi-celler;
Figur 12A viser bindingstitreringskurvene for ch38SB19, hu38SB19 v1.00 og hu38SB19 v1.20 for binding til Ramos-celler;
Figur 12B viser bindingskurvene som sammenligner ch38SB19, hu38SB19 v1.00 og hu38SB19 v1.00 med henblikk på evne til å konkurrere med binding av biotinylert murin 38SB19-antistoff til Ramos-celler;
Figur 13 viser de midlere prosentandeler av Daudi-celler som undergår apoptose etter 24-timers inkubering med ch38SB19-, hu38SB19 v1.00- eller hu38SB19 v1.20-antistoff;
Figur 14 viser ADCC-aktiviteter mediert av antistoffene ch38SB19, hu38SB19 v1.00, hu38SB19 v1.20, og av ikke-bindende, kimerisk, human IgG1-kontrollantistoff mot LP-1 multiple myelomceller;
Figur 15A viser CDC-aktiviteter mediert av antistoffer ch38SB19, hu38SB19 v1.00 og hu38SB19 v1.20 mot Raji-IMG lymfomceller;
Figur 15B viser CDC-aktiviteter mediert av antistoffer ch38SB19, hu38SB19 v1.00 og hu38SB19 v1.20 mot LP-1 multiple myelomceller;
Figur 15C viser CDC-aktiviteter mediert av antistoffer ch38SB19, hu38SB19 v1.00 og hu38SB19 v1.20 mot DND-41 T-celleakutte, lymfoblastiske leukemiceller;
Figur 16 viser de midlere prosentandeler av Annexin-V-positive celler etter 24 timers inkubering med hu38SB19 v1.00-antistoff for SU-DHL-8-diffuse store B-cellelymfomceller, NU-DUL-1 B-cellelymfomceller, DND-41 T-celleakutte, lymfoblastiske leukemiceller, JVM-13 B-cellekroniske lymfocytiske leukemiceller og HC-1 hårcelleleukemiceller;
Figur 17 viser den porsentuale overlevelse av SCID-mus som bærer etablerte, disseminerte, humane Ramos-tumorer. Musene ble behandlet med murint 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- eller 38SB39-antistoff eller PBS som antydet;
Figur 18 viser den prosentuale overlevelse av SCID-mus med etablerte, disseminerte, humane Daudi-tumorer. Musene ble behandlet med hu38SB19- eller mu38SB19-antistoff eller PBS som antydet;
Figur 19 viser det midlere tumorvolum av SCID-mus en NCI-H929 multippel myelom xenografttumorer. Musene ble behandlet med hu38SB19, et ikke-bindende kontroll IgG1-antistoff eller PBS som antydet; og
Figur 20 viser det midlere tumorvolum av SCID-mus med MOLP-8 multipple myelom xenografttumorer. Musene ble behandlet med hu38SB19, mu38SB19, et ikke-bindende kontroll IgG1-antistoff og PBS som antydet.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen
Det tilveiebringes nye antistoffer som er i stand til spesifikt å binde CD38. Særlig har foreliggende oppfinnere beskrevet nye antistoffer som spesifikt binder til CD38 på celleoverflaten og avliver CD38<+>-celler ved apoptose,ved antistoffavhengig cytotoksisitet (ADCC)og ved komplementavhengig cytotoksisitet (CDC).
Oppfinnelsen tilveiebringer således de første anti-CD38-antistoffer som er i stand til å avlive en CD38<+>-celle ved tre forskjellige mekanismer.
Antistoffer i stand til å binde CD38 og å utløse apoptotisk celledød i CD38<+>-celler er tidligere beskrevet (M. Kumagai et al., 1995, J Exp Med, 181: 1101-1110; E. Todisco et al. 2000, Blood, 95: 535-542), men antistoffene ifølge oppfinnelsen er de første der en apoptotisk aktivitet i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner, er påvist. Uttrykket ”stroma”, som benyttet her, henviser til det ikke-malignante bærervev av en tumor som inkluderer bindevev, blodkar og inflammatoriske celler. Stromalceller produserer vekstfaktorer og andre stoffer, inkludert cytokiner, som kan påvirke oppførselen for cancerceller. Uttrykket ”cytokin” som benyttet her, henviser til små, utskilte proteiner (for eksempel IL-1, IL-2, IL-4, IL-5 og IL-6, IFNg, IL-3, IL-7 og GM-CSF) som medierer og regulerer immunitet, inflammasjon og hematopoiese. Det er her vist at antistoffene ifølge den kjente teknikk ikke er i stand til å utløse apoptotisk celledød i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner. I motsetning til dette viser anti-CD38-antistoffer ifølge oppfinnelsen, under de samme betingelser, apoptotiske aktiviteter.
I nok et aspekt er antistoffene ifølge oppfinnelsen i stand til å binde CD38-protein med en kD på 3 x 10<-9 >M eller derunder.
Uttrykket ”CD38”, som benyttet her, henviser til et type II transmembranprotein som omfatter for eksempel en aminosyresekvens som i Genban aksesjonsnr. NP_001766. En ”CD38<+>-celle” er en celle som uttrykker CD38-proteinet. Fortrinnsvis er CD38<+>-cellen en mammalske celle.
CD38<+>-cellen er fortrinnsvis en malign celle. CD38<+>-cellen kan være en B-celle.
Fortrinnsvis er CD38<+>-cellen en tumorcelle avledet fra en hematopoietisk malignans. I en foretrukket utførelsesform er CD38<+>-cellen en lymfomcelle, en leukemicelle eller en multippel myelomcelle. I en ytterligere utførelsesform er CD38<+>-cellen en NHL-, BL-, MM-, B-CLL-, ALL-, TCL-, AML-, HCL-, HL- eller CML-celle.
I en utførelsesform tilveiebringer foreliggende oppfinnelse således anti-CD38-antistoffer i stand til å avlive minst 24% av Daudi lymfomceller i fravær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner. I nok en utførelsesform er anti-CD38-antistoffene ifølge oppfinnelse i stand til å avlive minst 7% av Ramos-lymfoaceller i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner. I nok en utførelsesform er anti-CD38antistoffene ifølge oppfinnelsen i stand til avlive minst 11% av MOLP-8 multippel myelomaceller i fravær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner. I nok en utførelsesform er anti-CD38-antistoffene ifølge oppfinnelsen i stand til avlive minst 36% av SU-DHL-8-lymfomceller i fravær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner. I nok en utførelsesform er anti-CD38-antistoffene ifølge oppfinnelsen i stand til å avlive minst 27% av NU-DUL-1-lymfomceller i fravær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner. I nok en utførelsesform er anti-CD38-antistoffene ifølge oppfinnelsen i stand til avlive minst 62% av DND-41 leukemiceller i fravær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner. I nok en utførelsesform er anti-CD38-antistoffer ifølge oppfinnelsen i stand til avlive minst 9% av JVM-13 leukemiceller i fravær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner. I nok en utførelsesform er anti-CD38-antistoffene ifølge oppfinnelsen i stand til å avlive minst 4% av HC-1 leukemiceller i fravær av stromaceller eller stroma-avledede cytokiner.
Antistoffer
Uttrykket ”antistoff” benyttes her i den bredeste betydning og dekker spesifikt monoklonale antistoffer (inkludert fullengde monoklonale antistoffer) av en hvilken som helst isotype som IgG, IgM, IgA, IgD og IgE, polyklonale antistoffer, multispesifikke antistoffer, kimere antistoffer og antistoffragmenter. Et antistoff som er reaktivt med et spesifikt antigen kan genereres ved rekombinante metoder som seleksjon av bibolioteker av rekombinante antistoffer i fag- eller tilsvarende vektorer, eller ved immunisering av et dyr med antigenet eller en antigenkodende nukleinsyre.
Et typisk IgG-antistoff består av to identiske tunge kjeder og to identiske lette kjeder som er forenet via disulfidbindinger. Hver tunge og lette kjede inneholder et konstant område og et variabelt område. Hvert variable område inneholder tre segmenter som kalles ”komplementaritetsbestemmende områder” (”CDR”) eller ”hypervariable områder”, som primært er ansvarlig for binding av en epitop av et antigen. De angis vanligvis som CDR1, CDR2 og CDR3, nummerert sekvensielt fra N-terminus. De sterkere bevarte deler av de variable områder kalles ”rammeverksområder”.
Som benyttet her henviser ”VH” eller ”VH” til de variable områder av en immunoglobulin tungkjede av et antistoff inkludert den tunge kjede av et Fv-, scFv-, dsFv-, Fab-, Fab’- eller F(ab’)2-fragment. Henvisning til ”VL” eller ”VL” henviser til det variable området av den immunoglobulin lette kjede av et antistoff inkludert den lette kjede av et Fv-, scFv-, dsFv-, Fab-, Fab’- eller F(ab’)2-fragment.
Et ”polyklonalt antistoff” er et antistoff som ble produsert blant eller i nærvær av et eller flere andre, ikke-identifiserte antistoffer. Generelt blir polyklonale antistoffer dannet fra en B-lymfocytt i nærvær av andre B-lymfocytter som gir ikke-identiske antistoffer. Vanligvis blir polyklonale antistoffer oppnådd direkte fra et immunisert dyr.
Et ”monoklonalt antistoff”, som benyttet her, er et antistoff som oppnås fra en populasjon av i det vesentlige homogene antistoffer, dvs. at antistoffene som danner denne populasjonen er i det vesentlige identisk, bortsett fra mulige, naturlig forekommende mutasjoner som kan være tilstede i mindre mengder. Disse antistoffer er rettet mot en enkelt epitop og er derfor meget spesifikke.
En ”epitop” er sete for antigenet til hvilket antistoffet binder. Hvis antigenet er en polymer som et protein eller polysakkarid, kan epitopen dannes av tilstøtende rester eller av ikke-tilstøtende rester som er brakt til nærhet ved folding av en antigenisk polymer. I proteiner er epitoper dannet ved tilstøtende aminosyrer typisk bibeholdt ved eksponering til denaturerende oppløsningsmidler, mens epitoper dannet av ikketilstøtende aminosyrer typisk går tapt under nevnte eksponering.
Som benyttet her henviser uttrykket ”KD” til dissosiasjonskonstanten for en spesiell antistoff/antigen interaksjon.
Foreliggende oppfinnelse fortsetter fra nye murin anti-CD38-antistoffer, her 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39, som fullt ut karakteriseres med henblikk på aminosyresekvensene for både lette og tunge kjeder, identifisering av CDRene, identifisering av overflate aminosyrene og midler for deres ekspresjon i rekombinant form. Den primære aminosyre og DNA-sekvenser for antistoffer 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-lett og –tungkjeder, og humaniserte versjoner, er beskrevet her.
Hybridomcellelinjene som produserer 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31-og 38SB39-murin anti-CD38 antistoffer er deponert ved ATCC (10801 University Bld., Manassas, VA, 20110-2209, USA) 21. juni 2006 under depot nr. PTA-7667, PTA-7669, PTA-7670, PTA-7666, PTA-7668 og henholdsvis PTA-7671.
Foreliggende beskrivelse er ikke begrenset til antistoffer og fragmenter omfattende disse sekvenser. Således er det beskrevet antistoffer og antistoff-fragmenter som kan skille seg fra antistoff 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 eller humaniserte derivater når det gjelder aminosyresekvensen av deres rammeverkCDRer, lett- og tungkjede.
Foreliggende beskrivelse tilveiebringer antistoffer eller epitopbindende fragmenter derav omfattende en eller flere CDRer med en aminosyresekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35 og 36. Som det beskrives omfatter antistoffene minst en tungkjede og minst en lettkjede, og der den tunge kjede omfatter tre sekvensielle CDRer med aminosyresekvenser valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR: 1, 2, 3, 7, 8, 9, 13, 14, 15, 19, 20, 21, 25, 26, 27, 31, 32 og 33, og nevnte lette kjede omfatter tre sekvensielle CDRer med aminosyresekvenser valgt blant gruppen bestående av SEKV ID NR: 4, 5, 6, 10, 11, 12, 16, 17, 18, 22, 23, 24, 28, 29, 30, 34, 35 og 36.
Fortrinnsvis omfatter antistoffene ifølgebeskrivelsen tre CDRer med aminosyresekvenser valgt fra gruppen SEKV ID NR: 13, 14, 15, 16, 17 og 18. I nok en ytterligere, mer foretrukket utførelsesform, tilveiebringes det et 38SB19-antistoff som omfatter minst en tungkjede og minst en lettkjede, og der den tunge kjede omfatter tre sekvensielle CDRer med aminosyresekvenser bestående av SEKV ID NR: 13, 14 og 15, og lette kjeder omfattende tre sekvensielle CDRer med aminosyre-sekvenser bestående av SEKV ID NR: 16, 17 og 18.
Fortrinnsvis omfatter anti-CD38-antistoffene ifølge beskrivelsen en VL med en ifølge SEKV ID NR: 42. Mer foretrukkent tilveiebringes det et 38SB19-antistoff omfattende en VL med en aminosyresekvens bestående av SEKV ID NR: 42.
Det frembringes også antistoffer omfattende etVH med en aminosyresekvens ifølge SEKV ID NR: 54. . Mer foretrukkent form tilveiebringes det et 38SB19-antistoff omfattende en VH med en aminosyresekvens bestående av SEKV ID NR: 54.
Kimere og humaniserte 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer
Som benyttet her er et ”kimerisk antistoff” et antistoff der det konstante området, eller en del derav, er endret, erstattet eller byttet ut, slik at det variable området er forbundet med et konstant område av en annen spesie, eller hører til en annen antistoffklasse eller –subklasse. ”Kimerisk antistoff” henviser også til et antistoff der det variable området, eller en del derav, er endret, erstattet eller byttet ut, slik at det konstante området er linket til et variabelt område av en annen spesie, eller hører til en annen antistoffklasse eller –subklasse. Metoder for fremstilling av kimere antistoffer er velkjente i teknikken, se for eksempel Morrison, 1985, Science, 229: 1202; Oi et al., 1986, BioTechniques, 4: 214; Gillies et al., 1989, J. Immunol. Methods, 125: 191-202; US patentnr.5 807 715; 4 816 567 og 4816 397.
I en utførelsesform tilveiebringes det kimere versjoner av 38SB19, . Særlig inneholder de nevnte kimere versjoner minst et humant konstantområde. I en mer foretrukket utførelsesform er dette humane, konstante området det humane IgG1/kappa konstante område.
Uttrykket ”humanisert antistoff”, som benyttet her, henviser til et kimerisk antistoff som inneholder minimalsekvensen avledet fra ikke-human immunoglobulin. Formålet med humanisering er en reduksjon av immunogenisteten for et xenogenisk antistoff som et murint antistoff, for innføring i et menneske, under opprettholdelse av den fulle antigen bindingsaffiniteten og –spesifisitet for antistoffet. Humaniserte antistoffer, eller antistoffet tilpasset ikke-rejeksjon av andre pattedyr, kan fremstilles ved bruk av forskjellig teknologi som ”resurfacing” og CDR-poding. Som benyttet her, anvender resurfacing teknologien en kombinasjon av molekylær modellering, statistisk analyse og mutagenese for å endre ikke-CDR-overflaten av antistoffvariable områder til å minne om overflater for kjente antistoffer i måleverten. CDR podingsteknologien involverer erstatning av de komplementaritetsbestemmende områder av for eksempel et museantistoff til et humant rammeverksområde, se for eksempel WO 92/22653.
Humaniserte, kimeriske antistoff har fortrinnsvis konstante områder og variable områder andre enn de komplementaritetsbestemmende områder (CDRer) avledet i det vesentlige eller utelukkende fra de tilsvarende humane antistoffområder og CDRer avledet i det vesentlige eller utelukkende fra et pattedyr forskjellig fra et menneske.
Strategier og metoder for resurfacing av antistoffer, og eller metoder for å redusere immunogenisiteten for antistoffer i en forskjellig vert, er beskrevet i US 5639 641. Kort sagt blir i en foretrukken metode
(1) posisjonsinnretninger av en sammenslåing av antistoff tunge- og –lettekjede variable områder generert for å gi et sett av tung- og lettkjedevariabelt område rammeverks overflateeksponerte posisjoner der innretningsposisjonen for alle variable områder er minst rundt 98% identisk;
(2) et sett av tung- og lettkjedevariabelt område rammeverksoverflate eksponert aminosyrerester er definert for et gnagerantistoff (eller fragment derav);
(3) et sett av tung- og lettvariable områder rammeverksoverflate eksponerte aminosyrerester som er nærmest identiske med settet av gnageroverflateeksponerte aminosyrerester er identifisert;
(4) settet av tung- og lettkjedevariabelt område rammeverksoverflate eksponerte aminosyrerester som definert i trinn (2) erstattes med settet av tung- og lettkjedevariabelt område rammeverksoverflateeksponerte aminosyrerester identifisert i trinn (3), bortsett fra de aminosyrerester som ligger innen 5Å fra ethvert atom av enhver rest i de komplementaritetsbestemmende områder av gnagerantistoff; og
(5) det humaniserte gnagerantistoff med bindingsspesifisitet, fremstilles.
Antistoffer kan humaniseres ved bruk av et antall andre teknikker inkludert CDR-poding (EP 0239 400, WO 91/09967, US patentnr. 5 530 101 og 5585 089) ”veneering” eller ”resurfacing” (EP 0592 106, EP 0519596, Padlan E. A., 1991, Molecular Immunology 28(4/5): 489-498; Studnicka G. M. et al., 1994, Protein Engineering, 7(6): 805-814; Roguska M.A. et al., 1994, PNAS, 91: 969-973) og kjedeshuffling (US patentnr.5 565 332). Humane antistoffer kan fremstilles ved et antall metoder som velkjent på området, inkludert fag-display metoder, se også US 4 444 887, 4716 111, 5545 806 og 5814 318, samt WO 98/46645, WO 98/50433, WO 98/24893, WO 98/16654, WO 96/34096, WO 96/33735 og WO 91/10741.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer humaniserte antistoffer , som gjenkjenner CD38 og avliver CD38<+>-celler ved apoptose, ADCC og/eller CDC. I en ytterligere utførelsesform er de humaniserte antistoffer eller epitopbindende fragmenter derav ifølge oppfinnelsen i stand til å avlive CD38<+>-celler ved apoptose selv i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner.
En foretrukket utførelsesform av et slikt humanisert antistoff er et 38SB19-antistoff .
I en ytterligere foretrukket utførelsesform tilveiebringes det resurfaserte eller humaniserte versjoner av 38SB19-antistoffene der de overflateeksponerte rester av antistoffet eller dettes fragmenter er erstattet i både lette og tunge kjeder for mer å minne om kjente human antistoff-overflater. De humaniserte 38SB19--antistoffer ifølge oppfinnelsen har forbedrede egenskaper. For eksempel gjenkjenner humaniserte 38SB19--antistoffer eller epitopbindende fragmenter derav spesifikt CD38-proteinet. De humaniserte 38SB19--antistoffer har den ytterligere evne til å avlive en CD38<+>-celle, ved apoptose, ADCC og CDC.
De humaniserte versjoner av 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer er også fult karakterisert her med henblikk på deres respektive aminosyresekvenser for både lett- og tungkjedevariable områder, DNA-sekvensene for genene for lett- og tungkjedevariable områder, identifisering av CDRene, identifisering av deres overflateaminosyrer, beskrivelser av et middel for deres ekspresjon i rekombinant form.
CDRene av 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffene er identifisert ved modellering og deres molekylstrukturer er predikterte. Nok en gang og mens CDRene er viktige for epitopgjenkjennelse, er de ikke vesentlig for antistoffene og fragmentene ifølge oppfinnelsen. I henhold til dette tilveiebringes det antistoffer og fragmenter som har forbedrede egenskaper produsert ved for eksempel affinitetsmodning av et antistoff.
Sekvensene for tungkjede- og lettkjedevariable områder av 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer og sekvensene av deres CDRer var ikke tidligere kjent og er angitt i foreliggende beskrivelse. Slik informasjon kan benyttes for å fremstille humaniserte versjoner av 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer. Disse humaniserte anti-CD38-antistoffer, eller deres derivater, kan også benyttes som cellebindingsmiddel.
Således tilveiebringes i en utførelsesform en humanisert versjon av 38SB19 omfattende minst en tungkjede og minst en lettkjede, og der nevnte tunge kjede omfatter tre sekvensielle, komplementaritetsbestemmende områder med aminosyresekvenser representert ved SEKV ID NR: 13,14 og 15, og der nevnte lette kjede omfatter tre sekvensielle, komplementaritetsbestemmende områder med aminosyresekvenser representert ved SEKV ID NR.16, 17 og 18.
I en foretrukket utførelsesform tilveiebringes et humanisert 38SB19-antistoff som omfatter en VH med en aminosyresekvens representert ved SEKV ID NR: 66
I en foretrukket utførelsesform tilveiebringes det et humanisert 38SB19-antistoff som omfatter en VL med en aminosyresekvens valgt fra gruppen SEKV ID NR: 62 og 64. De humaniserte 38SB19-antistoffer kan også inkludere substitusjoner i lett- og/eller tungkjede aminosyrerester ved en eller flere posisjoner definert ved de grå rester i Tabell 1A og 1B som representerer de murine overflate rammeverksrester som er forandret fra den opprinnelige murinrest til den tilsvarende rammeverksoverflaterest i det humane antistoff 28E4. De stiplede (*) restene i Tabell 1B tilsvarerer de murine tilbakemutasjoner i den humaniserte 38SB19 tungkjedevariant (SEKV ID NR: 69). Restene for returmutasjoner er proksimale til CDRer og ble valgt som beskrevet i US 5 639 641 eller i analogi til seleksjonen av rester som i tidligere humaniseringsforsøk resulterte i en reduksjon i antigen bindingsaffiniteten (Roguska et al., 1996, US publ. 2003/0235582 og 2005/0118183). ;;På samme måte kan de humaniserte 38SB13-, 38SB18-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer og epitopbindende fragmenter derav også inkludere substisjon i lett- og/eller tungkjede aminosyrerester. ;;Polynukleotider, vektorer og vertsceller ;Det tilveiebringes nukleinsyrer som koder anti-CD38-antistoffer ifølge oppfinnelsen. I en utførelsesform koder nukleinsyremolekyl en tung og/eller en lettkjede av et anti-CD38-immunoglobulin. I en foretrukket utførelsesform koder en enkelt nukleinsyre en tung kjede av et anti-CD38-immunoglobulin og et annet nukleinsyremolekyl koder den lette kjede av et anti-CD38-immunoglobulin. ;;Det tilveiebringes også polynukleotider som koder polypeptider med en aminosyresekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 og 72. Fortrinnsvis er polynukleotidene valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR: 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69 og 71. ;Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer vektorer omfattende polynukleotider ifølge oppfinnelsen. I en utførelsesform inneholder vektoren et polynukleotid som koder en tung kjede av et anti-CD38-immunoglobulin. I en annen utførelsesform koder polynukleotid den lette kjede av et anti-CD38-immunoglobulin. Oppfinnelsen tilveiebringer også vektorer omfattende polynukleotidmolekyler som koder fusjonsproteiner, modifiserte antistoffer, antistoffragmenter og prober derav. ;For å uttrykke den tunge og/eller lette kjede av anti-CD38-antistoffer ifølge oppfinnelsen, blir polynukleotiene som koder nevnte tunge og/eller lette kjede skutt inn i ekspresjonsvektorer slik at genene er operativt forbundet til transkripsjonelle og translasjonelle sekvenser. Ekspresjonsvektorer inkluderer plasmider, YACer, kosmider, retrovira, EBV-avledede episomer og alle de andre vektorer som fagmannen vil kjenne som hensiktsmessige for å sikre ekspresjon av nevnte tunge og/eller lette kjeder. ;Fagmannen vil realisere at polynukleotidene som koder de tunge og lette kjeder kan klones inn i forskjellige vektorer eller i samme vektor. I en foretrukket utførelsesform blir disse polynukleotider klonet inn i samme vektor. ;;Polynukleotidene ifølge oppfinnelsen, og vektorer omfattende disse molekyler kan benyttes for transformering av en egnet mammalsk vertscelle. Transformeringen kan skje ved en hvilken som helst kjent metode for innføring av polynukleotider i en vertscelle. Slike metoder er velkjente for fagfolk på området og inkluderer dekstranmediert transformering, kalsiumfosfatpresipitering, polybrenmediert transfeksjon, protoplast fusjon, elektroporering, innkapsling av polynukleotidet i liposomer, biolistisk injeksjon og direkte mikroinjeksjon av DNA inn i kjernen. ;;Antistoffragmenter ;Som benyttet her inkluderer ”antistoffragmenter” en hvilken som helst del av et antistoff som bibeholder evnen til å binde til epitopen gjenkjent av fullengde antistoffet, generelt angitt som ”epitopbindende fragmenter”. Eksempler på antistoffragmenter inkluderer, men er ikke begrenwset til Fab, Fab’ og F(ab’)2, Fd, enkeltkjede Fver (scFv), enkeltkjede antistoffer, disulfidforbundne Fver (dsFv) og fragmenter omfattende enten et VL- eller VH-område. Epitopbindende fragmenter inkludert enkeltkjede antistoffer, kan omfatte det eller de variable områder alene eller i kombinasjon med helheten eller en del av følgende: hengselområde, CH1-, CH2- og CH3-domener. ;;Slike fragmenter kan inneholde en eller begge Fab-fragmenter eller F(ab’)2-fragmentet. Fortrinnvis inneholder antistoffragmenter alle seks CDRer av det hele antistoff, selv om fragmenter inneholder færre enn alle slike områder som tre, fire eller fem CDRer også er funksjonelle. Videre kan fragmentene være per se eller kombinere medlemmer av hvilke som helst av de følgende immunoglobulinklasser: IgG, IgM, IgA, IgD eller IgE, og subklasser derav. ;;Fab og F(ab’)2-fragmenter kan fremstilles ved proteolytisk spalting, ved bruk av enzymer som papain (Fab-fragmenter) og pepsin (F(ab’)2-fragmenter). ;”Enkeltkjede FVer” (”scFver”) fragmenter er epitopbindende fragmenter som inneholder minst et fragment av et antistoff tungkjedevariabelt område (VH) forbundet med minst et fragment av et antistoff lettkjedevariabelt område (VL). Linkeren kan være et kort, fleksibelt peptid valgt for å sikre at den riktige, tredimensjonale folding av VL- og VH-områdene inntrer når først de er forbundet for å bibeholde målmolekylbindende spesifisitet for hele antistoffet hvorfra enkeltkjede antistoffragmentet er avledet. Karboksylterminus for VL- eller VH-sekvensen kan være kovalent forbundet med en linker til aminosyreterminus av en komplementær VL- eller VH-sekvens. ;;Enkeltkjede antistoffragmenter inneholder aminosyresekvenser med minst en av de variable eller komplementaritetsbestemmende regioner (CDR) av de hele antistoffer som beskrevet i beskrivelsen, men mangler noen av eller alle de konstante domener av disse antistoffer. Disse konstante domener er ikke nødvendige for antigen-binding, men utgjør en hovedandel av strukturen av de hele antistoffer. Enkeltkjede antistoffragmenter kan derfor overvinne noen av problemene assosiert med bruken av antistoffer inneholdende en del av eller alt av et konstant domene. For eksempel har enkeltkjede antistoffragmentene en tendens til å være frie for uønskede interaksjoner mellom biologiske molekyler og det tungkjedekonstante område, eller annen uønsket, biologisk aktivitet. I tillegg er enkeltkjede antistoffragmenter betydelig mindre enn de hele antistoffer, og kan derfor ha en større kapillær permeabilitet enn det hele antistoffet, og tillate at enkeltkjede antistoffragmenter lokaliserer og binder til målantigenbindingsseter på en mer effektiv måte. Videre kan antistoffragmenter produseres i relativt liten målestokk i prokaryotiske celler, noen som letter deres produksjon. Videre gjør den relativt lille størrelse av enkelkjede antistoffragmenter disse mindre sannsynlig til å fremtvinge en immunrespons hos en resipient sammenlignet med hele antistoffer. ;;Enkeltkjede antistoffragmenter kan genereres ved molekylær kloning, antistoff fagdisplay biblioteker eller lignende teknikker som velkjent for fagmannen. Disse proteiner kan fremstilles for eksempel i eukaryotiske celler eller prokaryotiske celler, inkludert bakterier. De epitopbindende fragmenter kan også genereres ved bruk av forskjellige fag-displaymetoder, som velkjent på område. I fag-displaymetoder vil funksjonelle antistoffdomener vist på overflaten av fagpartikkelen som bærer polynukleotidsekvensene som koder dem. Særlig kan en slik fag benyttet for å vise epitopbindende domener uttrykt fra et repertoar eller et kombinatorisk antistoffbibliotek (for eksempel human eller murin). Fag som uttrykker et epitopbindende domene som binder antigenet av interesse kan velges eller identifiseres med antigen, for eksempel ved bruk av merket antigen bundet til eller fanget på en fast overflate eller en kule. Fag som benyttes ved disse metoder er typisk et filamentøst fag inkludert fd- og M13-bindende domener uttrykt fra fag med Fab-, Fv- eller disulfid-stabilsiert Fvantistoffdomener som rekombinant er fusert enten til fag-gen III- eller gen VIII-protein. ;;Eksempler på fag-displaymetoder som kan benyttes for å fremstille de epitopbindende fragmenter ifølge oppfinnelsen, inkluderer de som er beskrevet hos Brinkman et al., 1995, J. Immunol. Methods, 182: 41-50; Ames et al., 1995, J. Immunol. Methods, 184: 177-186; Kettleborough et al., 1994, Eur. J. Immunol., 24: 952-958; Persic et al., 1997, Gene, 187: 9-18; Burton et al., 1994, Advances in Immunology, 57: 191-280; ;WO/1992/001047; WO 90/02809; WO 91/10737; WO 92/01047; WO 92/18619; WO 93/11236; WO 95/15982; WO 95/20401; og US patentnr. 5 698 426; 5223 409; 5403 484; 5580 717; 5427 908; 5750 753; 5821 047; 5571 698; 5427 908; 5516 637; 5 780 225; 5658 727; 5733 743 og 5969 108. ;;Etter fagseleksjon kan områdene av fagen som koder fragmentene isoleres og benyttes for å generere de epitopbindende fragmenter via ekspresjon hos en valgt vert, inkludert mammalske celler, insektsceller, planteceller, gjær- og bakterier, ved bruk av rekombinant DNA-tekologi, for eksempel som beskrevet i detalj nedenfor. For eksempel kan teknikker for rekombinant å produsere Fab-, Fab’- og F(ab’)2-fragmenter også benyttes ved bruk av metoder som er velkjente og som beskrevet i WO 92/22324; Mullinax et al., 1992, BioTechniques, 12(6): 864-869; Sawai et al., 1995, AJRI, 34: 26-34; og Better et al., 1988, Science, 240:1041-1043. Eksempler på teknikker som kan brukes for å fremstille enkeltkjede Fver og antistoffer inkluderer de som er beskrevet i US patentnr.4 946 778 og 5 258498; Huston et al., 1991, Methods in Enzymology, 203: 46-88; Shu et al., 1993, PNAS, 90: 7995-7999; Skerra et al., 1988, Science, 240:1038-1040. ;;Foreliggende oppfinnelse inkluderer også cytotoksiske konjugater. Disse cytotoksiske konjugater omfatter to primære komponenter, et cellebindende middel og et cytotoksisk middel. ;;Som benyttet her henviser uttrykket ”cellebindende middel” til et middel som spesifikt gjenkjenner og binder CD38-proteinene på celleoverflaten. I en utførelsesform gjenkjenner det cellebindende middel spesifikke CD38 slik at det tillater at konjugatene virker i en målinnrettet modus, med små bivirkninger som resultat av ikke-spesifikk binding. ;;I en annen utførelsesform gjenkjenner cellebindingsmiddelet ifølge oppfinnelsen også spesifikk CD38-proteinet slik at konjugatene vil være i kontakt med målcellen i et tilstrekkelig tidsrom til å tillate at den cytotoksiske medikamentdel av konjugatet virket på cellen, og/eller å gi konjutatene tilstrekkelig tid til å internaliseres av cellen. ;;I en foretrukket utførelsesform omfatter de cytotoksiske konjugater et anti-CD38-antistoff som cellebindingsmiddel antistoff38SB19-, -antistoff er i stand til spesifikt å gjenkjenne CD38 og styrer det cytotoksiske middel til en anormal celle eller vev, slik som cancerceller, på en målrettet måte. ;;Den andre komponent av de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen, er et cytotoksisk middel. Uttrykket ”cytotoksisk middel”, som benyttet her, henviser til en substans som reduserer eller blokkerer funksjonen, eller veksten, for celler og/eller forårsaker destruering av celler. ;;I foretrukne utførelsesformer er det cytotoksiske middel et lite medikament, et prodrug, et taksoid, et maytansinoid som DM1 eller DM4, et tomaymycinderivat, et leptomycinderivat, CC-1065 eller en CC-1065 analog. I foretrukne utførelsesformer er cellebindingsmiddelet ifølge oppfinnelsen kovalent festet, direkte eller via en spaltbar eller ikke-spaltbar linker, til det cytotoksiske middel. ;;Cellebindingsmidlene, cytotoksiske midler og linkere er diskutert i større detalj nedenfor. ;;Cellebindingsmidler ;Effektiviteten for forbindelsene ifølge oppfinnelsen som terapeutiske midler avhenger av de omhyggelige valg av et egnet cellebindingsmiddel. Cellebindingsmidler kan være av en hvilken som helst type som kjent i dag, eller som blir kjent, og inkluderer peptider og ikke-peptider. Cellebindindmiddelet kan være en hvilken som helst forbindelse som kan binde en celle, enten på spesifikk eller ikke-spesifikk måte. Generelt kan disse være antistoffer (særlig monoklonale antistoffer), lymfokiner, hormoner, vekstfaktorer, vitaminer, næringstransportmolekyler (som transferrin), eller et hvilket som helst annet cellebindende molekyl, eller et slikt stoff. ;Mer spesifikke eksempler på cellebindingsmidler som kan benyttes inkluderer: ;a) polyklonale antistoffer; ;;b) monoklonale antistoffer; ;;c) fragmenter av antistoffer som Fab, Fab’ og F(ab’)2, Fv (Parham, 1983, J. ;Immunol., 131: 2895-2902; Spring et al., 1974, J. Immunol., 113: 470-478; Nisonoff et al., 1960, Arch. Biochem. Biophys., 89: 230-244). ;;Særlig kan et anti-CD38-monoklonalt antistoff valgt blant 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 benyttes som et cellebindingsmiddel. På samme måte kan det nevnte cellebindingsmiddel være en kimer versjon av et av de 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39 monoklonale antistoffer. Fortrinnsvis blir et humanisert anti-CD38-antistoff benyttet som cellebindingsmiddel ifølge oppfinnelsen. Mer spesielt blir det humaniserte anti-CD38-antistoff valgt blant humaniserte eller resurfaced 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer. ;;Cytotoksiske midler ;I en ytterligere utførelsesform kan det humaniserte antistoff være konjugert til et medikament som et maytansinoid, for å gi et prodrug med spesifikk cytotoksisitet mot antigenuttrykkende celler ved innsikting av medikament på CD38-proteinet. ;Cytotoksiske konjugater omfattende slike antistoffer og et lite og sterkt toksisk medikament (for eksempel maytansinoider, taksaner, tomaymycinderivater, leptomycinderivater og CC-1065-analoger) kan benyttes som et terapeutikum for behandling av tumorer som lymfom, leukemi og multippel myelom. ;;Det cytotoksiske middel som benyttes i det cytotoksiske konjugat ifølge oppfinnelsen, kan være en hvilken som helst forbindelse som resulterer i død for en celle, eller induserer celledød, eller på en eller annen måte reduserer cellelevedyktigheten. ;Foretrukne cytotoksiske midler inkluderer for eksempel maytansinoider og maytansinoidanaloger, taksoider, tomaymycinderivater, leptomycinderivater, CC-1065 og CC-1065-analoger, dolastatin og dolastatinanaloger, som definert nedenfor. Disse cytotoksiske midler er konjugert til antistoffene, antistoffragmentene, de funksjonelle ekvivalenter, forbedrede antistoffer og deres analoger som beskrevet her. ;;De cytotoksiske konjugater kan fremstilles ved in vitro-metoder. For å forbinde et medikament eller en prodrug til antistoffet, benyttes en linkergruppe. Egnede linkergrupper er velkjente på området og inkluderer disulfidgrupper, tioetergrupper, syrelabile grupper, fotolabile grupper, peptidaselabile grupper og esteraselabile grupper. Foretrukne linkergrupper er disulfidgrupper og tioetergrupper. For eksempel kan det konstrueres konjugater ved bruk av en disulfid utbyttingsreaksjon eller ved å danne en tioeterbinding mellom antistoffet og medikamentet eller prodruget. ;;Maytansinoider ;Blant de cytotoksiske midler som kan benyttes ifølge oppfinnelsen for å gi et cytotoksisk konjugat, er maytansinoider og maytansinoidanaloger. Eksempler på egnede maytansinoider inkluderer maytansinol og maytansinolanaloger. ;Maytansinoider er medikamenter som inhiberer mikrotubuldannelse, og som er sterkt toksiske mot mammalske celler. ;;Eksempler på egnede maytansinolanaloger inkluderer de med en modifisert aromatisk ring, og de med modifikasjoner på andre posisjoner. Slike egnede maytansinoider er beskrevet i US 4424 219, 4256 746, 4294 757, 4307 016, 4313 943, 4315 929, 4 331 598, 4361 650, 4362 663, 4364 866, 4450 254, 4322 348, 4371 533, ;6 333 410, 5475 092, 5585 499 og 5846 545. ;;Spesifikke eksempler på egnede analoger av maytansinol med en modifisert, aromatisk ring inkluderer: ;;(1) C-19-deklor (US 4256 746) (fremstilt ved LAH-reduksjon av ansamytocin P2); ;;(2) C-20-hydroksy (eller C-20-demetyl) /- C-19-deklor (US 4361 650 og ;4 307 016) (fremstilt ved demetylering ved bruk av Streptomyces eller Actinomyces eller deklorering ved bruk av LAH); og ;;(3) C-20-demetoksy, C-20-acyloksy (-OCOR), /- deklor (US 4294 757) (fremstilt ved acylering ved bruk av acylklorider). ;;Spesifikke eksempler på egnede analoger av maytansinol med modifikasjoner på andre posisjoner inkluderer: ;;(1) C-9-SH (US 4424 219) (fremstilt ved omsetning av maytansinol med H2S eller P2S5); ;(2) C-14-alkoksymetyl (demetoksy/CH2OR) (US 4331 598); ;;(3) C-14-hydroksymetyl eller acyloksymetyl (CH2OH eller CH2OAc) (US ;4 450 254) (fremstilt fra Nocardia); ;;(4) C-15-hydroksy/acyloksy (US 4364 866) (fremstilt ved konvertering av maytansinol med Streptomyces); ;;(5) C-15-metoksy (US 4313 946 og 4315 929) (isolert fra Trewia nudiflora); ;;(6) C-18-N-demetyl (US 4362 663 og 4322 348) (fremstilt ved demetylering av maytansinol med Streptomyces); og ;;(7) 4,5-deoksy (US 4 371533) (fremstilt ved titantriklorid/LAH-reduksjon av maytansinol). ;;I en foretrukket utførelsesform benytter de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen det tiolholdige maytansinoid (DM1), formelt kalt N2’-deacetyl-N2’-(3-merkapto-1-oksopropyl)-maytansin, som cytotoksisk middel. DM1 er representert ved følgende strukturformel (I): ;;;;;;I en annen foretrukket utførelsesform benytter de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen det tiolholdige maytansinoid N2’-deacetyl-N-2’(4-metyl-4-merkapto-1-oksopentyl)-maytansin som cytotoksisk middel. DM4 er representert ved den følgende strukturformel (II): ;;;;NH O ;I ytterligere utførelsesformer av oppfinnels MeneO kan O aHndre maytansiner inkludert tiol- og disulfidholdige maytansinoider som bærer en mono- eller dialkylsubstituering på karbonatomet som bærer svovelatomet, benyttes. Disse inkluderer et maytansinoid med, på C-3, C-14 hydroksymetyl, C-15 hydroksy eller C-20 desmetyl, en acylert aminosyre sidekjede med en acylgruppe som bærer en hindret sulfhydrylgruppe der karbonatomet i acylgruppen som bærer tiolfunksjonaliteten har en eller to substituenter, og der substituenten er CH3, CH2H5, rett eller forgrenet alkyl eller alkenyl med 1 til 10 karbonatomer, syklisk alkyl eller alkenyl med fra 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk, aromatisk eller heterosykloalkyl rester, og videre der en av substituentene kan være H, og der acylgruppen har en lineær kjedelengde på minst tre karbonatomer, mellom karbonylfunksjonalitet og svovelatomet. ;;Slike ytterligere maytansiner inkluderer forbindelser representert ved formel (III): ;;;hvori: ;;Y’ representerer (CR7R8)l(CR9=CR10)p(CΞC)qAr(CR5R6)mDu(CR11=CR12)r(CΞC)sBt(CR3R4)nCR1 R2SZ, ;;hvori: ;;R1 og R2 hver uavhengig er CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med fra 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk, aromatisk eller heterosykloalkyl, og i tillegg kan R2 være H; ;;A, B, D er sykloalkyl eller sykloalkenyl med 3 til 10 karbonatomer, enkelt eller substituert aryl eller heterosyklisk, aromat eller heterosykloalkyl; ;;R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R11 og R12 er hver uavhengig H, CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl; ;;l, m, n, o, p, q, r, s og t hver uavhengig er 0 eller et heltall fra 1 til 5, forutsatt at minst to av l, m, n, o, p, q, r, s og t ikke er null noen gang; og ;;Z er H, SR eller -COR, der R er lineær alkyl eller alkenyl med 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, eller enkel eller substituert aryl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl. ;;Foretrukne utførelsesformer av formel (III) inkluderer forbindelser med formel (III), der: ;;R1 er H, R2 er metyl og Z er H; ;R1 og R2 er metyl og Z er H; ;R1 er H, R2 er metyl og Z er –SCH3; ;R1 og R2 er metyl og Z er –SCH3. ;Slike ytterligere maytansiner inkluderer også forbindelser representert ved formel (IV-L), (IV-D) eller (IV-D,L): ;;;;;der: ;;Y er (CR7R8)l(CR5R6)m(CR3R4)nCR1R2SZ, ;;der: ;;R1 og R2 hver uavhengig er CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med 1 til 10 karboantomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl, og i tillgg kan R2 være H; ;;R3, R4, R5, R6, R7 og R8 hver er uavhengig H, CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbaontomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl; ;;l, m og n hver uavhengig er et heltall fra 1 til 5, og i tillegg n kan være 0; ;;Z er H, SR eller –COR, der R er lineær eller forgrenet alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, eller enkelt eller substituert aryl, eller heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl; og ;;May representerer et maytansinoid som bærer sidekjeden på C-3, C-14 hydroksymetyl, C-15 hydroksy eller C-20 desmetyl. ;;Foretrukne utførelsesformer av formelene (IV-L), (IV-D) og (IV-D,L) inkluderer forbindelser med formlene (IV-L), (IV-D) og (IV-D,L) der: ;R1 er H, R2 er metyl, R5, R6, R7 og R8 hver er H, l og m hver er 1, n er 0 og z er H; ;;R1 og R2 er metyl, R5, R6, R7, R8 hver er H, l og m er 1, n er 0 og Z er H; ;;R1 er H, R2 er metyl, R5, R6, R7, R8 hver er H, l og m hver er 1, n er 0 og Z er –SCH3; ;;R1 og R2 er metyl, R5, R6, R7, R8 hver er H, l og m er 1, n er 0 og Z er –SCH3. ;;Fortrinnsvis er det cytotoksiske middel representert ved formel (IV-L). ;;Slike ytterligere maytansiner inkluderer også forbindelser representert ved formel (V): ;;;;;;der: ;;Y er (CR7R8)l(CR5R6)m(CR3R4)nCR1R2SZ, ;;der: ;;R1 og R2 hver uavhengig er CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl, og i tillegg R2 kan være H; ;;R3, R4, R5, R6, R7 og R8 hver uavhengig er H, CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med fra 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl; ;;l, m og n hver uavhengig er et heltall fra 1 til 5, og i tillegg n kan være 0; og ;;Z er H, SR eller -COR, der R er lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med fra 3 til 10 karbonatomer, eller enkelt eller substituert aryl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl. ;;Foretrukne utførelsesformer av formel (V) inkluderer forbindelser med formel (V), der: ;R1 er H, R2 er metyl, R5, R6, R7 og R8 hver er H; l og m hver er 1; n er 0; og Z er H; ;;R1 og R2 er metyl, R5, R6, R7 og R8 hver er H, l og m er 1; n er 0; og Z er H; ;;R1 er H, R2 er metyl, R5, R6, R7 og R8 hver er H, l og m hver er 1, n er 0 og Z er –SCH3; ;;R1 og R2 er metyl, R5, R6, R7 og R8 hver er H, l og m er 1, n er 0 og Z er –SCH3. ;;Slike ytterligere maytansiner inkluderer videre forbindelser representert ved formelen (VI-L), (VI-D) eller (VI-D,L): ;;;;;der: ;Y2 er (CR7R8)l(CR5R6)m(CR3R4)nCR1R2SZ2, ;;der: ;;R1 og R2 hver uavhengig er CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl, og i tillegg R2 kan være H; ;;R3, R4, R5, R6, R7 og R8 hver uavhengig er H, CH3, C2H5, lineær, syklisk alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl; ;;l, m og n hver uavhengig er et heltall fra 1 til 5, og i tillegg n kan være 0; ;Z2 er SR eller COR, der R er en lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, eller enkelt eller substituert aryl eller heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl; og ;;May er et maytansinoid. ;;Slike ytterligere maytansiner inkluderer også forbindelser representert ved formel (VII): ;;;der: ;;Y2’ er (CR7R8)l(CR9=CR10)p(CΞC)qAr(CR5R6)mDu(CR11=CR12)r (CΞC)sBt(CR3R4)nCR1R2SZ2, ;;der: ;;R1 og R2 hver uavhengig er CH3, C2H5, lineær, forgrenet alkyl eller alkenyl med 1 til 10 karbonatomer, syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl, og i tillegg kan R2 være H; ;;A, B og D hver uavhengig er sykloalkyl eller sykloalkenyl med 3 til 10 karbonatomer, enkel eller substituert aryl, heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl; ;R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R11 og R12 hver uavhengig er H, CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med fra 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl; ;;l, m, n, o, p, q, r, s og t hver uavhengig er 0 eller et helt tall fra 1 til 5, forutsatt at minst to av l, m, n, o, p, q, r, s og t ikke er 0 samtidig; og ;;Z2 er SR eller -COR, der R er lineær alkyl eller alkenyl med 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, eller enkelt eller substituert aryl eller heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl. ;;Foretrukne utførelsesformer av foreliggende oppfinnelse inkluderer forbindelser med formel (VII) der R1 er H og R2 is metyl. ;;De ovenfor nevnte maytansinoider kan være konjugert til et anti-CD38 antistoff 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 eller 38SB39 eller en homolog eller et fragment derav, der antistoffet er forbundet til maytansinoidet ved bruk av tiol- eller disulfidfunksjonaliteten som er tilstede på acylgruppen av en acylert amino sidekjede funnet på C-3, C-14 hydroksymetyl, C-15 hydroksy eller C-20 desmetyl av maytansinoidet, og der acylgruppen I den acylerte aminosyre sidekjede har sin tiol- eller disulfidfunksjonalitet lokalisert på et karbonatom som har en eller to substituenter, der disse er CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med fra 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aromat eller heterosykloalkyl, og i tillegg en av substituentene kan være H, og der acylgruppen har en lineær kjedelengde på minst tre karbonatomer mellom karbonylfunksjonaliteten og svovelatomet. ;;Et foretrukket konjugat ifølge oppfinnelsen er et som omfatter anti-CD38 antistoffet 38SB19, konjugert til et maytansinoid med formel (VIII): ;;;;;;der: ;;Y1’ er (CR7R8)l(CR9=CR10)p(CΞC)qAr(CR5R6)mDu(CR11=CR12)r (CΞC)sBt(CR3R4)nCR1R2S-, ;;der: ;;A, B og D hver uavhengig er sykloalkyl eller sykloalkenyl med 3 til 10 karbonatomer, enkel eller substituert aryl eller heterosyklisk aromat, eller heterosykloalkyl; ;;R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R11 og R12 hver uavhengig er H, CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med fra 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl; og ;;l, m, n, o, p, q, r, s og t hver uavhengige r 0 eller et heltall fra 1 til 5, forutsatt at minst to av l, m, n, o, p, q, r, s og t ikke er 0 samtidig. ;;Det er foretrukket at R1 er H og R2 er metyl eller R1 og R2 er metyl. ;;Et ennå mer foretrukket konjugat ifølge oppfinnelsen er et som omfatter anti-CD38 antistoff 38SB19 konjugert til et maytansinoid med formelen (IX-L), (IX-D) eller (IX-D,L): ;;;;der: ;;Y1 er (CR7R8)l(CR5R6)m(CR3R4)nCR1R2S-, ;;der: ;;R1 og R2 hver uavhengig er CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med fra 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl, heterosyklsik aroma teller heterosykloalkyl, og i tillegg R2 kan være H; ;;R3, R4, R5, R6, R7 og R8 hver uavhengig er H, CH3, C2H5, lineær alkyl eller alkenyl med 1 til 10 karbonatomer, forgrenet eller syklisk alkyl eller alkenyl med fra 3 til 10 karbonatomer, fenyl, substituert fenyl eller heterosyklisk aroma teller heterosykloalkyl; ;;l, m og n hver uavhengig er et heltall fra 1 til 5, og i tillegg n kan være 9; og ;;May representerer et maytansinol som bærer sidekjeden på C-3, C-14 hydroksymetyl, C-15 hydroksy eller C-20 desmetyl. ;Foretrukne utførelsesformer av formlene (IX-L), (IX-D) og (IX-D,L) inkluderer forbindelser med formlene (IX-L), (IX-D) og (IX-D,L) der: ;;R1 er H og R2 er metyl eller R1 og R2 er metyl; ;;R1 er H, R2 er metyl, R5, R6, R7 og R8 hver er H; l og m hver er 0; n er 0; ;;R1 og R2 er metyl; R5, R6, R7 og R8 hver er H; l og m er 1; n er 0. ;;Fortrinnsvis er det cytotoksiske middelet representert ved formel (IX-L). ;;Et ytterligere foretrukket konjugat ifølge oppfinnelsen er et som omfatter anti-CD38 antistoffet 38SB19 konjugert til et maytansinoid med formel (X): ;;;;;;der substituentene er som definert for formel (IX) ovenfor. ;;Spesielt foretrukket er enhver av de ovenfor angitte forbindelser, der R1 er H, R2 er metyl, R5, R6, R7 og R8 hver er H, l og m hver er 1 og n er 0. ;;Ytterligere spesielt foretrukket er en hvilken som helst av de ovenfor beskrevne forbindelser, der R1 og R2 er metyl, R5, R6, R7, R8 hver er H, l og m er 1 og n er 0. ;;Videre er L-aminoacyl stereoisomeren foretrukket. ;;Hver av de maytansinoider som er beskrevet i den verserende US søknad 10/84136 av 20. mai, 2004, kan også benyttes i det cytotoksiske konjugatet ifølge oppfinnelse. ;Disulfidholdige linkergrupper ;For å forbinde maytansinoidet til et cellebindingsmiddel som 28SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- eller 38SB39-antistoffet omfatter maytansinoidet en linkerdel. Denne linkerdel inneholder en kjemisk binding som tillater frigivning av fult aktive maytansinoider på et spesielt sete. Egnede, kjemiske bindinger er velkjente på området og inkluderer disulfidbindinger, syrelabile bindinger, fotolabile bindinger, peptidaselabile bindinger og esteraselabile bindinger. Foretrukket er disulfidbindinger. ;;Linkerdelen omfatter også en reaktiv, kjemisk gruppe. IDen reaktive kjemiske gruppe kan være kovalent bundet til maytansinoidet via en disulfid bindingslinkerdel. ;;Spesielt foretrukne, reaktive kjemiske grupper N-suksinimidylestere og N-sulfosuksinimidylestere. ;;Spesielt foretrukne maytansinoider omfatter en linkerdel som inneholder en reaktiv, kjemisk gruppe og er C-3 estere av maytansinol og dennes analoger der linkerdelen inneholder en disulfidbinding og en kjemisk reaktiv gruppe omfattende en N-suksinimidyl- eller N-sulfosuksinimidylester. ;;Mange posisjoner på maytansinoider kan tjene som posisjon for kjemisk å forbinde linkerdelen. For eksempel er C-3-posisjonen en hydroksylgruppe, C-14-posisjonen modifisert med hydroksymetyl, C-15-poisisjonen modifisert med hydroksy og C-20-posisjonen med en hydroksygruppe, eller ventet å være nyttige. Imidlertid er C-3-posisjonen foretrukket og C-3-posisjonen av maytansinol er spesielt foretrukket. ;;Mens syntesen av estere av maytansinol med en linkerdel er beskrevet uttrykt ved disufldibindingsholdige linkerdeler, vil fagmannen på området forstå at linkerdeler med andre kjemiske bindinger (som beskrevet ovenfor) også kan benyttes ifølge oppfinnelsen på samme måte som andre maytansinoider. Spesifikke eksempler på andre kjemiske bindinger inkluderer syrelabile bindinger, peptidaselabile bindinger og esteraselabile bindinger. Beskrivelsen i US 5 208020 lærer fremstilling av maytansinoider som har slike bindinger. ;;Syntesen av maytansinoider og maytansinoidderivater med en disulfiddel som bærer en reaktiv gruppe er beskrevet i US 6441 163 og 6333 410 samt US søknad 10/161651. ;Maytansinoider som inneholder den reaktive gruppe som DM1, omsettes med et antistoff som 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- eller 38SB39-antistoff for å gi cytotoksiske konjugater. Disse konjugater kan renses med HPLC eller gelfiltrering. ;Flere utmerkede skjemaer for fremstilling av slike antistoff-maytansinoidkonjugater er tilveiebrakt i US 6333 410 samt i US søknadene 09/867598, 10/161651 og 10/024 290. ;;Generelt kan en oppløsning av et antistoff i vandig buffer inkubere med et molart overskudd av maytansinoid med en disulfiddel som bærer en reaktiv gruppe. ;Reaksjonsblandingen kan kvensjes ved tilsetning av et overskudd av amin (som etanolamin, taurin osv.). Maytansinoid-antistoffkonjugat kan så renses ved gelfiltrering. ;;Antallet maytansinoidmolekyler som er bundet per antistoffmolekyl kan bestemmes ved spektrofotometrisk å måle forholdet mellom absorbans ved 252 nm og 280 nm. Et gjennomsnitt på 1-10 maytansinoidmolekyler per antistoffmolekyl er foretrukket. ;;Konjugater av antistoffer med maytansinoidmedikamenter kan evalueres med henblikk på evne til å undertrykke proliferering av forskjellige uønskede cellelinjer in vitro. For eksempel kan cellelinjer som den humane lymfomcellelinje Daudi, den humane lymfomcellelinje Ramos, den humane multippelt myelomcellelinje MOLP-8, og den humant T-akuttlymfocytiske leukemilinje MOLT-4 lett benyttes for bedøvelse av cytotoksisiteten for disse forbindelser. Celler for evaluering kan eksponeres til forbindelsen i 24 timer og de overlevende andeler av celler måles i direkteanalyser på i og for seg kjent måte. IC50-verdier kan så beregnes fra resultatene av disse analyser. ;;PEG-holdige linkergrupper ;Maytansinoider kan også forbindes til cellebindingsmidler ved bruk av PEG-linkergrupper som angitt i US søknad nr.10/024 290. Disse PEG-linkergrupper er oppløselige både i vann og i ikke-vandige oppløsningsmidler, og kan benyttes for å forene et eller flere cytotoksiske midler til et cellebindingsmiddel. Eksempler på PEG-linkergrupper inkluderer heterobifunksjonelle PEG-linkere som binder til cytotoksiske midler, og cellebindingsmidler ved motsatte ender av linkeren via en funksjonell sufhyldryl- eller disulfidgruppe på en ende, og en aktiv ester på den andre ende. ;;Som et generelt eksempel på syntesen av et cytotoksisk konjugat ved bruk av en PEG-linkergruppe, skal det nok en gang henvises til US søknad 10/024290 for spesifikke detaljer. Syntesen begynner med omsetning av et eller flere cytotoksiske midler som bærer en reaktiv PEG-del med et cellebindingsmiddel, noe som resulterer i fortrengning av den terminale, aktive ester av hver reaktive PEG-del, på grunn av en aminosyrerest fra cellebindingsmiddel, og gir derved et cytotoksisk konjugat omfattende et eller flere cytotoksiske midler som kovalent er bundet til et cellebindingsmiddel via en PEG-linkergruppe. ;;Taksaner ;Det cytotoksiske middel som benyttes i de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen kan også være et taksan eller et derivat derav. ;;Taksaner er en familie av forbindelser som inkluderer paklitaksel (Taxol), et cytotoksisk naturprodukt, og docetaksel (Taxotere), et semi-syntetisk derivat, to forbindelser som utstrakt benyttes ved behandling av cancer. Taksaner er mitotiske spindelgifter som inhiberer depolymerisering av tubulin og resulterer i celledød. Mens docetaksel og paklitaksel er nyttige middel ved behandling av cancer, er deres antitumoraktivitet begrenset på grunn av deres ikke-spesifikke toksisitet mot normale celler. Videre er forbindelsene som paklitaksel og docetaksel per se ikke tilstrekkelig potente til å benyttes i konjugater av cellebindingsmidler. ;;Et foretrukket taksan for anvendelse ved fremstilling av cytotoksiske konjugater et taksaner med formel (XI): ;;;;;;Metoder for syntetisering av taksaner som kan benyttes i de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen, sammen med metoder for konjugering av taksanene til cellebindingsmidler som antistoffer, er beskrevet i detalj i US 5416 064, 5475 092, 6 340 701, 6372 738 og 6436 931 samt i US søknadene 10/024290, 10/144042, 10/207 814, 10/210112 og 10/369563. ;;Tomaymycinderivater ;De cytotoksiske midler ifølge oppfinnelsen kan også omfatte et tomaymycinderivat. Tomaymycinderivater er pyrrolo[1,4]benzodiazepiner (PBDer), en kjent klasse forbindelser som utøver sine biologiske egenskaper ved kovalent å binde til N2 av guanin i det mindre spor i DNA. PBDer inkluderer et antall mindre sporbindere som antramycin, neotramycin og DC-81. ;;Nye tomaymycinderivater som bibeholder høy cytotoksisitet og som effektivt kan forbindes til cellebindingsmidler er beskrevet i PCT/IB2007/000142. ;Cellebindingsmiddel-tomaymycinderivatkompleksene tillater fult ut den cytotoksiske virkning av tomaymycinderivatene for applikering i innsiktet måte kun mot uønskede celler, og man unngår derved bivirkninger på grunn av skade på ikke-innsiktede, friske celler. ;;Det cytotoksiske middel ifølge oppfinnelsen omfatter et eller flere tomaymycinderivater, forbundet til et cellebindingsmiddel som 38SB19--antistoff, via en linkergruppe. Denne er en del av en kjemisk del som kovalent er bundet til et tomaymycinderivat på i og for seg kjent måte. I en foretrukket utførelsesform kan den kjemiske del kovalent bindes til tomaymycinderivatet via en disulfidbinding. ;;Tomaymycinderivatene som er nyttige ifølge oppfinnelsen har formel (XII), som vist nedenfor: ;;;;;;der ;;----- representerer en eventuelt enkeltbinding; ;;----- representerer enten en enkelt- eller en dobbeltbinding; ;forutsatt at når ----- representerer en enkeltbinding, representerer U og U’, like eller forskjellige, uavhengig H, og W og W’, like eller forskjellige, uavhengig er valgt fra gruppen bestående av OH, en eter som –OR, en ester (for eksempel et acetat) som –OCOR, et karbonat som –OCOOR, et karbamat som –OCONRR’, et syklisk karbamat, slik at N10 og C11 er en del av sykelen, et urea som – NRCONRR’, et tiokarbamat som –OCSNHR, et syklisk tiokarbamat slik at N10 og C11 er en del av sykelen, -SH, et sulfid som –SR, et sulfoksid som –SOR, et sulfon som –SOOR, et sulfonat som –SO3, et sulfonamid som –NRSOOR, et amin som –NRR’, eventuelt syklisk amin slik at N10 og C11 er en del av sykelen, et hydroksylaminderivat som –NROR’, et amid som –NRCOR, et azido som –N3, en cyano-, et halo-, et trialkyl- eller triarylfosfonium-, eller en aminosyreavledet gruppe; fortrinnsvis er W og W’ like eller forskjellige og er OH, Ome, Oet, NHCONH2, SMe; ;;og når ----- er en dobbeltbinding, er U og U’ fraværende og W og W’ representerer H; ;;R1, R2, R1’ og R2’ er like eller forskjellige og uavhengig er valgt blant halid eller alkyl eventuelt substituert med en eller flere Hal, Cn, NRR’, CF3, OR, aryl, Het, S(O)qR, eller R1 og R2 og R1’ og R2’ sammen danner en dobbeltbindingsholdig gruppe =B, henholdsvis =B’; ;;Fortrinnsvis danner R1 og R2 og R1’ og R2’ sammen en dobbeltbindingsholdig gruppe =B henholdsvis =B’; ;;B og B’ er like eller forskjellige og uavhengig valgt blant alkenyl som eventuelt er substituert med en eller flere Hal, CN, NRR’, CF3, OR, aryl, Het, S(O)qR eller B og B’ representerer et oksygenatom; ;;Fortrinnsvis er B=B’. ;;Mer foretrukket er B=B’= =CH2 eller =CH-CH3, ;;X, X’ er like eller forskjellige og uavhengig valgt blant en eller flere av –O-, -NR-, -(C=O)-, -S(O)q-. ;Fortrinnsvis er X=X’. ;;Mer foretrukket er X=X’=O. ;A, A’ er like eller forskjellige og uavhengig valgt blant alkyl eller alkenyl som uavhengig inneholder et oksygen-, nitrogen- eller svovelatom, hvert eventuelt substituert med en eller flere Hal, CN, NRR’, CF3, OR, S(O)qR, aryl, Het, alkyl, alkenyl. ;;Fortrinnsvis er A=A’. ;;Mer foretrukket A=A’=lineær, usubstituert alkyl. ;;Y, Y’ er like eller forskjellige og uavhengig valgt blant H eller OR. ;;Fortrinnsvis er Y=Y’. ;;Helst er Y=Y’=OAlkyl, og spesielt OMetyl. ;;T er –NR-, -O-, -S(O)q- eller en 4- til 10-leddet aryl, sykloalkyl, heterosykel eller heteroaryl, hver eventuelt substituert med en eller flere Hal, CN, NRR’, CF3, R, OR, S(O)qR og/eller en eller flere linkere, eller en forgrenet alkyl, eventuelt substituert med en eller flere Hal, CN, NRR’, CF3, OR, S(O)qR og/eller en eller flere linkere, eller en lineær alkyl substituert med en eller flere Hal, CN, NRR’, CF3, OR, S(O)qR og/eller en eller linkere. ;;Fortrinnsvis er T en 4- til 10-leddet aryl eller heteroaryl, mer spesielt fenyl eller pyridyl, eventuelt substituert med en eller flere linkere. ;;Nevnte linker omfatter en forbindende gruppe. Egnede slike er velkjent i teknikken og inkluderer tiol, sulfid eller disulfidgrupper, tioetergrupper, syrelabile grupper, fotolabile grupper, peptidaselabile grupper og esteraselabile grupper. Foretrukket er disulfidgrupper og tioetergrupper. ;;Når linkergruppen er en tiol-, sulfid- (såkalt tioeter-S-) eller disulfid (-S-S-)-holdig gruppe, kan sidekjeden som bærer tiol-, sulfid- eller disulfidgruppen være rette eller forgrenet, aromatiske eller heterosykliske. Fagmannen på området kan lett identifisere egnede sidekjeder. ;Fortrinnsvis har linkeren formelen: ;;-G-D-(Z)p-S-Z’ ;;der ;;G er en enkelt- eller dobbeltbinding, -O-, -S- eller –NR-; ;;D er en enkeltbinding eller –E-, -E-NR-, -E-NR-F-, -E-O-, -E-O-F-, -E-NR-CO-, -E-NR-CO-F-, -E-CO-, -CO-E-, -E-CO-F, -E-S-, -E-S-F-, -E-NR-C-S-, -E-NR-CS-F-; ;;der E og F er like eller forskjellige og uavhengig er valgt blant lineær eller forgrenet –(OCH2CH2)iAlkyl(OCH2CH2)j-, -Alkyl(OCH2CH2)i-Alkyl-, -(OCH2CH2)i-, -(OCH2CH2)iSykloalkyl(OCH2CH2)j-, -(OCH2CH2)iHeterosykel(OCH2CH2)j-, -(OCH2CH2)iAryl(OCH2CH2)j-, -(OCH2CH2)iHeteroaryl(OCH2CH2)j-, –Alkyl-(OCH2CH2)iAlkyl(OCH2CH2)j-, -Alkyl-(OCH2CH2)i-, -Alkyl-(OCH2CH2)i-Sykloalkyl(OCH2CH2)j-, -Alkyl(OCH2CH2)iHeterosykel(OCH2CH2)j-, -Alkyl-(OCH2CH2)iAryl(OCH2CH2)j-, -Alkyl(OCH2CH2)iHeteroaryl(OCH2CH2)j-, -Sykloalkyl-Alkyl-, -Alkyl-Sykloalkyl-, -Heterosykel-Alkyl-, -Alkyl-Heterosykel-, -Alkyl-Aryl-, -Aryl-Alkyl-, -Alkyl-Heteroaryl- , -Heteroaryl-Alkyl-; ;;der i og j, like eller forskjellige, er hele tall og uavhengig er valgt blant 0, 1 til 2000; ;;Z er rett eller forgrenet alkyl; ;;p er 0 eller 1; ;;Z’ er H, en tiolbeskyttende gruppe som COR, R20 eller SR20, der R20 er H, metyl, alkyl, eventuelt substituert sykloalkyl, aryl, heteroaryl eller heterosykel, forutsatt at når Z’ er H, er forbindelsen i likevekt med den tilsvarende forbindelse dannet ved intramolekylær ringslutning som resultat av addisjon av tiolgruppen –SH på iminbindingen –NH= av en av PBD-delene; ;;n, n’ er like eller forskjellige og er 0 eller 1; ;;q er 0, 1 eller 2; ;R, R’ er like eller forskjellige og er uavhengig valgt blant H, alkyl, aryl, hver eventuelt substituert med Hal, CN, NRR’, CF3, R, OR, S(O)qR, aryl, Het; ;eller deres farmasøytisk akseptable salter, hydrater eller hydratiserte salter, eller polymorfe, krystallinske strukturer av disse forbindelser, eller deres optiske isomerer, racemater, diastereomerer eller enantiomerer. ;;Forbindelsene med den generelle formel (XII) med geometriske og stereoisomerer er også en del av oppfinnelsen. ;;N.10, C-11 dobbeltbindingen i tomaymycinderivatene med formel (XII) er kjent for å være lett konverterbar på reversibel måte til tilsvarende iminaddukter i nærvær av vann, en alkohol, en tiol, et primært eller sekundært amin, urea og andre nukleofiler. Denne prosess er reversibel og kan lett regenerere det tilsvarende tomaymycinderivat i nærvær av et dehydratiseringsmiddel i et ikke-protisk, organisk oppløsningsmiddel, under vakuum eller ved høye temperaturer (Z. Tozuka, 1983, J. Antibiotics, 36: 276). ;;Således kan reversible derivater av tomaymycinderivater med den generelle formel (XIII) også benyttes ifølge oppfinnelsen: ;;;;;;der A, X, Y, n T, A’, X’, Y’, n’, R1, R2, R1’, R2’ er definert som under frmel (XII) og W og W’ er like eller forskjellige og er valgt fra gruppen bestående av OH, en eter som –OR, en ester (for eksempel et acetat) som –OCOR, -COOR, et karbonat som – OCOOR, et karbamat som –OCONRR’, et syklisk karbamat slik at N10 og C11 er en del av sykelen, et urea som –NRCONRR’, et tiokarbmat som –OCSNHR, et syklisk tiokarbamat slik at N10 og C11 er en del av sykelen, -SH, et sulfid som –SR, et sulfoksid som –SOR, et sulfon som –SOOR, et sulfonat som –SO3-, et sulfonamid som –NRSOOR, et amin som –NRR’, eventuelt syklisk amin slik N10 og C11 er en del av sykelen, et hyroksylaminderivat som –NROR’, et amid som –NRCOR, -NRCONRR’, et azido som –NR, en cyano, halo, trialkyl eller triarylfosfonium, en aminosyreavledet gruppe. Fortrinnsvis er W og W’ like eller forskjellige og er OH, Ome, Oet, NHCONH2, SMe. ;Forbindelser med formel (XIII) kan således anses som solvater som inkluderer vann når oppløsningsmiddelet er vann, disse solvater kan være spesielt nyttige. ;I en foretrukket utførelsesform er tomaymycinderivatene ifølge oppfinnelsen valgt fra gruppen omfattende: ;;8,8’-[1,3-benzendiylbis(metyleneoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11atetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[5-metoksy-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[1,5-pentandiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[1,4-butandiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[3-metyl-1,5-pentandiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11atetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[2,6-pyridinediylbis(oksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11atetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[4-(3-tert-butoksykarbonylaminopropyloksy)-2,6-pyridindiylbis-(metylenoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[5-(3-aminopropyloksy)-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[5-(N-metyl-3-tert-butoksykarbonylaminopropyl)-1,3-benzendiylbis-(metylenoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;8,8’-{5-[3-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)propyloksy]-1,3-benzendiylbis-(metylenoksy)}-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[5-acetyltiometyl-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[(S)-2-metylen-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;bis-{2-[(S)-2-metylen-7-metoksy-5-okso-1,3,,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-8-yloksy]-etyl}-karbaminsyre-tert-butylester; ;;8,8’-[3-(2-acetyltioetyl)-1,5-pentandiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-metylen-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[5-(N-4-merkapto-4,4-dimetylbutanoyl)amino-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[7-metoksy-2-metylen-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[5-(N-4-metylditio-4,4-dimetylbutanoyl)-amino-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[7-metoksy-2-metylen-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[5-(N-metyl-N-(2-merkapto-2,2-dimetyletyl)amino-1,3-benzendiyl(metylenoksy)]-bis[7-metoksy-2-metylen-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[5-(N-metyl-N-(2-metylditio-2,2-dimetyletyl)amino-1,3-benzendiyl(metylenoksy)]-bis[7-metoksy-2-metylen-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(4-(2-(4-merkapto-4-metyl)-pentanamidoetoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(1-(2-(4-metyl-4-metyldisulfanyl)-pentanamidoetoksy)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5-on]; ;8,8’-[(4-(3-(4-metyl-4-metyldisulfanyl)-pentanamidopropoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-5-on]; ;8,8’-[(4-(4-(4-metyl-4-metyldisulfanyl)-pentanamidobutoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(4-(3-[4-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoyl)-piperazin-1-yl]-propyl)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(1-(3-[4-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoyl)-piperazin-1-yl]-propyl)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(4-(2-{2-[2-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(1-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(1-(2-{2-[2-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(4-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(1-(2-[metyl-(2-metyl-2-metyldisulfanylpropyl)-amino]-etoksy)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;8,8’-[(4-(3-[metyl-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoyl)-amino]-propyl)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;8,8’-[(4-(3-[metyl-(2-metyl-2-metyldisulfanylpropyl)-amino]-propyl)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; ;;8,8’-[(1-(4-metyl-4-metyldisulfanyl)-pentanamido)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ;;såvel vel som de tilsvarende merkaptoderivater, eller deres farmasøytisk akseptable salter, hydrater eller hydratiserte salter, eller de polymorfe, krystallinske strukturer av disse forbindelser, eller deres optiske isomerer, racemater, diastereomerer eller enantiomerer. ;;Foretrukne forbindelser er de med formelen: ;;;;;eller ;;;;;;der X, X’, A, A’, Y, Y’ ̈, T, n, n’ er som angitt ovenfor. ;;Forbindelsene med formel (XII) kan fremstilles på et antall måter som er velkjente for fagfolk. Forbindelsene kan syntetiseres for eksempel ved anvendelse eller tilpasning av metoder som beskrevet nedenfor, eller variasjoner av disse slik fagmannen vil vite. De egnede modifikasjoner og substitusjoner vil være lett åpenbare og velkjent eller kan lett oppnås fra den vitenskapelige litteraturen, for fagmannen på området. Særlig kan slike metoder finnes i R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Wiley-VCH Publishers, 1999. ;Metoder for syntetisering av tomaymycinderivater som kan benyttes ifølge oppfinnelsen, er beskrevet i PCT/IB2007/000142. Forbindelser ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved et antall synteseveier. Reagensene og utgangsmaterialene er kommersielt tilgjengelige, eller kan lett syntetiseres på i og for seg kjent teknikk som fagmannen vil kjenne (se for eksempel WO 00/12508, WO 00/12507, W02005/040170, WO 2005/085260, FR1516743, M. Mori et al., 1986, Tetrahedron, 42: 3793-3806). ;;Konjugatmolekylene ifølge oppfinnelsen kan dannes ved bruk av en hvilken som helst teknikk. Tomaymycinderivatene ifølge oppfinnelsen kan forbindes til et antistoff eller annet cellebindende middel via en syrelabil linker, eller via en fotolabil linker. ;Derivatene kan kondenseres med et peptid med en egnet sekvens og deretter likes til et cellebindende middel for å gi en peptidaselabil linker. Konjugatene kan fremstilles til å inneholde en primær hydroksylgruppe som kan suksinylere og forbindes til et cellebindende middel for å gi et konjugat som kan spaltes ved intracellulære esteraser for å frigjøre fritt derivat. Fortrinnsvis blir derivatene syntetisert til å inneholde en fri eller beskyttet tiolgruppe, og deretter blir en eller flere disulfid- eller tiolholdige derivater hver kovalent forbundet med det cellebindende middel via en disulfidbinding eller en tioeterlink. ;;Tallrike metoder for konjugering er beskrevet i US 5416 064 og 5475 092. ;Tomaymycinderivatene kan modifiseres for å gi en fri aminogruppe og så forbindes til et antistoff eller et annet cellebindende middel via en syrelabil linker eller en fotolabil linker. Tomaymycinderivatene med en fri amino- eller karboksylgruppe, kan kondenseres med et peptid og deretter forbindes til et cellebindende middel for å gi en peptidaselabil linker. Tomaymycinderivatene med en fri hydroksylgruppe på linkeren kan suksinyleres og forbindes til et celelbindende middel for å gi et konjugat som kan spaltes ved intracellulære esteraser for å sette fri fritt medikament. Helst blir tomaymycinderivatene behandlet for å danne en fri eller beskyttet tiolgruppe, hvoretter de disulfid- eller tiolholdige tomaymycindimerer forbindes til det cellebindende middel via disulfidbindinger. ;;Fortrinnsvis er monoklonale antistoff- eller cellebindingsmiddel-tomaymycindervatkonjugater de som er forenet via en disulfidbinding som beskrevet ovenfor, som er i stand til å avlevere tomaymycinderivater. Slike cellebindingskonjugater fremstilles på i og for seg kjent måte som ved modifisering av monoklonale antistoffer med suksinimidylpyridyl-ditiopropionat (SPDP) (Carlsson et al., 1978, Biochem. J., 173: 723-737). Den resulterende tiopyridylgruppe fortrenges så ved behandling med tiolholdige tomaymycinderivater for å gi disulfidlinkede konjugater. Alternativt, og når det gjelder arylditio-tomaymycinderivater, blir dannelsen av det cellebindende konjugat gjennomført ved direkte fortrengning av aryl-tiol i tomaymycinderivatet med sulfhydrylgrupper som å forhånd er innført i antistoffmolekyler. Konjugater inneholdende 1 til 10 tomaymycinderivater som er forbundet via en disulfidbro kan lett fremstilles ved disse metoder. ;;Mer spesielt blir en oppløsning av det ditio-nitropyridylmodifiserte antistoff ved en konsentrasjon på 2,5 mg/ml i 0,05 M kaliumfosfatbuffer, ved pH 7,5 inneholdende 2 mM EDTA, behandlet med det tiolholdige tomaymycinderivat (1,3 molare ekvivalenter per diotiopyridylgruppe). Frigivningen av tio-nitropyridinet fra det modifiserte antistoff følges spektrofotometrisk ved 325 nm og er ferdig i løpet av ca.16 timer. Antistofftomaymycinderivatkonjugatet renses og befries for ikke-omsatt medikament og annet lavmolekylvektsmateriale ved gelfiltrering gjennom en kolonne av Sephadex G-25 eller Sephacryl S300. Antallet tomaymycinderivatdeler som er bundet per antistoffmolekyl kan bestemmes ved å måle forholdet mellom absorbansen ved 230 nm og 275 nm. Et gjennomsnitt på 1-10 tomaymycinderivatmolekyler per antistoffmolekyl kan forbindes via disulfidbindinger ved denne metode. ;;Effekten av konjugering på bindingsaffiniteten mot de antigenuttrykkende celler, kan bestemmes ved bruk av de metoder som tidligere er beskrevet av Liu et al., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 93: 8618-8623. Cytotoksisiteten for tomaymycinderivatene og deres antistoffkonjugater mot cellelinjer kan males ved tilbake-ekstrapolering av celleprolifereringskurver som beskrevet hos Goldmacher et al., 1985, J. Immunol., 135: 3648-3651. Cytotoksisiteten for disse forbindelser til adherente cellelinjer kan bestemmes ved klonogeniske analyser som beskrevet hos Goldmacher et al., 1986, J. Cell Biol., 102: 1312-1319. ;;Leptomycinderivater ;Det cytotoksiske middel ifølge oppfinnelsen kan også omfatte et leptomycinderivat. ;;I henhold til oppfinnelsen henviser ”leptomycinderivater” til medlemmer av leptomycinfamilien som definert hos Kalesse et al. (2002, Synthesis 8: 981-1003) og inkluderer: leptomyciner som laptomycin A og leptomycin B, kallystatiner, ratjadoner som ratjadon A og ratjadon B, anguinomyciner som anguinomycin A, B, C, D, kasusamyciner, leptolstatin, leptofuraniner som leptofuranin A, B, C, D. Derivater av leptomycin A og B er foretrukket. ;;Mer spesielt har derivatene ifølge oppfinnelsen formel (I): ;;;;;der ;;Ra og Ra’ er H eller –Alk; det er foretrukket at Ra er –Alk, og særlig metyl og Ra’ er H; ;;R17 er alkyl som eventuelt er substituert med OR, CN, NRR’ eller perfluoralkyl; fortrinnsvis er R17 alkyl, og mer spesielt metyl eller etyl; ;;R9 er alkyl eventuelt substituert med OR, CN, NRR’, perfluoralkyl; fortrinnsvis er R9 alkyl, og mer spesielt metyl; ;;X er –O- eller –NR, og det er foretrukket et X er –NR-; ;;Y er –U-, -NR-U-, -O-U-, -NR-CO-U-, -U-NR-CO-, -U-CO-, -CO-U- ; ;foretrukket er, når X er –O-, Y er –U-, -NR-U-, -U-NR-CO-; ;;der U er valgt fra rett eller forgrenet –Alk-, -Alk(OCH2CH2)m-, -(OCH2CH2)m-Alk-, -Alk(OCH2CH2)m-Alk-, -(OCH2CH2)m-, -Sykloalkyl-, -Heterosykel-, -Sykloalkyl-Alk-, -Alk-Sykloalkyl-, -Heterosykel-Alk-, -Alk-Heterosykel-; ;;der m er et heltall valgt blant 1 til 2000; ;;fortrinnsvis er U lineær eller forgrenet –Alk-; ;;Z er –Alk-; ;;n er 0 eller 1, og foretrukket er n 0; ;T er H, en tiolbeskyttende gruppe som Ac, R1 eller SR1, der R1 er H, metyl, Alk, sykloalkyl, eventuelt substituert aryl eller heterosykel, eller T representerer ;;;;;der: ;;Ra, Ra’, R17, R9, X, Y, Z og n er som angitt ovenfor; ;;fortrinnsvis er T H eller SR1, der R1 er Alk, og mer spesielt metyl; ;;R og R’ er like eller forskjellige og er H eller alkyl; ;;Alk er rett eller forgrenet alkyl, fortrinnsvis representerer Alk (-(CH2-q(CH2)q)p-, der p er et heltall fra 1 til 10; og q et heltall fra 0 til 2; fortrinnsvis representerer Alk –(CH2)-eller –C(CH3)2-; ;;eller deres farmasøytisk akseptable salter, hydrater eller hydratiserte salter, eller polymorfe, krystallinske strukturer av disse forbindelser, eller deres optiske isomerer, racemater, diastereomerer eller enantiomerer. ;;Foretrukne forbindelser kan velges blant: ;;(2-Metylsulfanyletyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5, 7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre; ;;Bis-[(2-merkaptoetyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5, 7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre]; ;(2-Merkaptoetyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5,7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre; ;;(2-Metyldisulfanyletyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5, 7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre; ;;(2-Metyl-2-metyldisulfanylpropyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5,7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre; ;;(2-Merkapto-2-metylpropyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5,7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre ;;eller deres farmasøytisk akseptable salter, hydrater eller hydratiserte salter, eller de polymorfe, krystallinske strukturer av disse forbindelser eller deres optiske isomerer, racemater, diastereomerer eller enantiomerer. ;;For å forbinde derivater til et cellebindende middel, må derivatet inkludere en del (en linkergruppe) som tillater at derivatet kan forbindes med et cellebindingsmiddel via en linker som en disulfidbinding, en sulfid (eller her halt tioeter)binding, en syrelabil gruppe, en fotolabil gruppe, en peptidaselabil gruppe, eller en esteraselabil gruppe. Derivatene fremstilles slik at de inneholder en del som er nødvendig for å forbinde leptomycinderivater til et cellebindingsmiddel via for eksempel en disulfidbinding, en tioeterbinding, en syrelabil gruppe, en fotolabil gruppe, en peptidaselabil gruppe eller en esteraselabil gruppe. For videre å øke oppløseligheten i vandige oppløsninger, kan linkergruppen inneholde en poyletylenglykol spacer. Fortrinnsvis benyttes en sulfideller disulfid-linker fordi den reduserende omgivelse for målcellen resulterer i spalting av sulfidet eller disulfidet, og frigjør derivatene med en assosiert økning i cytotoksisitet. ;;Forbindelser ifølge oppfinnelsen kan fremstilles via et antall synteseveier. Reagenser og utgangsmaterialer er kommersielt tilgjengelige, eller lett syntetiserbare via velkjente teknikker for fagmannen. Metoder for syntetisering av leptomycinderivater som kan benyttes i de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen, sammen med metoder for konjugering av nevnte leptomycinderivater til cellebindingsmidler som antistoffer, er beskrevet i detalj i EP søknad 06290948.6. ;CC-1065-analoger ;Det cytotoksiske middel som benyttes i de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen kan også være CC-1065 eller et derivat derav. ;;CC-1065 er et potent antitumor antibiotikum som er isolert fra kulturbuljongen av Streptomyces zelensis. CC-1065 er rundt 1000 ganger mer potent in vitro enn vanligvis benyttede anti-cancermidler som doksorubicin, metotreksat og vinkristin (B.K. Bhuyan et al., 1982, Cancer Res., 42, 3532-3537). CC-1065 og dennes analoger er beskrevet i US 6372 738, 6340 701, 5846 545 og 5585 499. ;;Den cytotoksiske potens for CC-1065 er korrelert med dens alkylerende aktivitet og dens DNA-binding eller DNA-interkalerende aktivitet. Disse to aktiviteter ligger i separate deler av molekylet. Således er alkyleringsaktiviteten å finne i syklopropapyrroloindol (CPI) subenheten, og DNA-bindingsaktiviteten ligger i de to pyrroloindol subenheter. ;;Selv om CC-1065 har visse attraktive trekk som cytotoksisk middel, har forbindelsen begrensninger ved terapeutisk anvendelse. Administrering av CC-1065 til mus forårsaker en forsinket hepatotoksisitet som førte til mortalitet på dag 50 etter en enkelt intravenøs dose på 12,5 µg/kg (V. L. Reynolds et al., 1986, J. Antibiotics, XXIX: 319-334). Dette har iverksatt forsøk på utvikle analoger som ikke forårsaker forsinket toksisitet, og syntesen av enklere analoger modellert på CC-1065 er beskrevet (M.A. Warpehoski et al., 1988, J. Med. Chem., 31: 590-603). ;;I en annen serie av analoger ble CPI-delen erstattet av en syklopropabenzindol (CBI) del (D.L. Boger et al., 1990, J. Org. Chem., 55: 5823-5833; D.L. Boger et al., 1991, BioOrg. Med. Chem. Lett., 1: 115-120). Disse forbindelser opprettholder den høye in vitro-potens for parentalmedikament uten å forårsake forsinket toksisitet hos mus. På samme måte som i CC-1065, er disse forbindelser alkyleringsmidler som binder til det mindre spor i DNA på kovalent måte og forårsaker celledød. Imidlertid har klinisk evaluering av de mest lovende analoger, adozelesin og karzelesin ført til skuffende resultater (B.F. Foster et al., 1996, Investigational New Drugs, 13: 321-326; I. Wolff et al., 1996, Clin. Cancer Res., 2: 1717-1723). Disse medikamenter viser dårlige terapeutiske effekter på grunn av den høye systemisk toksisitet. ;;Den terapeutiske effektivitet for CC-1065 analoger kan forbedres sterkt ved å endre in vivo-fordeling via målrettet avlevering til tumorsetet, noe som resulterer i lavere toksisitet mot ikke-tilsiktet vev, og derved lavere systemisk toksisitet. For å oppnå dette formål, er det beskrevet konjugater av analoger og derivater av CC-1065 med cellebindende midler som spesifikt sikter på tumorceller (US 5475 092, 5585 499, 5 846 545). Disse konjugater viser typisk høy målspesifikk cytotoksisitet in vitro, og eksepsjonell anti-tumor aktivitet i human tumor xenograftmodeller i mus (R.V. J. Chari et al., 1995, Cancer Res., 55: 4079-4084). ;;I den senere tid er det beskrevet prodrugs av CC-1065-analoger med forbedret oppløselighet i vandig medium (EP 06290379.4). I disse prodrugs er den fenoliske gruppe av alkyleringsdelen i molekylet beskyttet med en funksjonalitet som gjør medikamentet stabilt ved lagring i sur, vandig oppløsning, og gir øket vannoppløselighet til medikamentet sammenlignet med en ubeskyttet analog. Den beskyttende gruppe kan lett spaltes av in vivo ved fysiologisk pH-verdi for å gi det tilsvarende, aktive medikament. I de prodrugs som er beskrevet i EP 06290379.4, er den fenoliske substituent beskyttet som et sulfonsyreholdig fenylkarbamat som har en ladning med fysiologisk pH-verdi, og derfor har forbedret vannoppløselighet. For ytterligere å forbedre vannoppløseligheten kan en eventuell polyetylenglykol spacer innføres i linkeren mellom indolyl subenheten og den spaltbare binding som en disulfidgruppe. Innføringen av denne spacer endrer ikke mediakmentets potens. ;;Metoder for syntetisering av CC-1065-analoger som kan benyttes i de cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen, sammen med metoder for konjugering av analoger til cellebindingsmidler som antistoff, er beskrevet i detalj i EP 06290379.4, i US ;5 475 092, 5846 545, 5585 499, 6534 660 og 6586 618 og i US søknadene 10/116 053 og 10/265452. ;;Andre medikamenter ;Medikamentet som metotreksat, daunorubicin, doksorubicin, vinkristin, vinblastin, melfalan, mitomycin C, klorambucil, kalicheamicin, tubulysin og tubulysinanaloger, duokarmycin og duokarmycinanaloger, dolastatin og dolastatinanaloger er også egnet for fremstilling av konjugater ifølge oppfinnelsen. Medikamentmolekylene kan også forbindes med antistoffmolekylene via et mellomliggende bærermolekyl som serumalbumin. Doksarubicin- og danorubicinforbindelser som for eksempel beskrevet i US SN 09/740991, kan også være nyttige cytotoksiske midler. ;Terapeutiske preparater ;Oppfinnelsen angår også et terapeutisk preparat for behandling av en hyperproliferativ forstyrrelse, eller inflammatorisk sykdom eller en autoimmun sykdom i et pattedyr, omfattende en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge oppfinnelsen, og en farmasøytisk akseptabel bærer. I en utførelsesform er det farmasøytiske preparat ment for behandling av cancer inkludert (men ikke begrenset til) B-celle lymfom, og multippelt myelom. ;Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer farmasøytiske preparater som omfatter: ;;a) en effektiv mengde av et antistoffeller et antistoffkonjugat ifølge oppfinnelsen, og ;;b) en farmasøytisk akseptabel bærer som kan være inert eller fysiologisk aktiv. ;;Som benyttet her inkluderer ”farmasøytisk akseptable bærere” ethvert og alle oppløsningsmidler, dispergeringsmedier, belegg, antibakterielle og antifungale midler og lignende som er fysiologisk kompatible. Eksempler på egnede bærere, diluenter og/eller eksipienter inkluderer en eller flere av vann, saltoppløsning, fosfatbufret saltoppløsning, dekstrose, glyserol etanol og lignende, så vel som kombinasjoner derav. I mange tilfeller vil det være foretrukket å inkludere isotoniske midler som sukkere, polyalkoholer eller natriumklorider, i preparater. Særlig relevante eksempler på egnede bærere inkluderer: (1) Dulbeccos fosfatbufrede saltoppløsning, pH ~7,4, eventuelt inneholdende rundt 1 mg/ml til 25 mg/ml human serumalbumin, (2) 0,9% saltoppløsning (0,9% vekt/volum natriumklorid)) og (3) 5% (vekt/volum) dekstrose; og kan også inneholde en antioksidant som tryptamin og et stabiliseringsmiddel som Tween 20. ;;De her beskrevne preparater kan også inneholde et ytterligere terapeutisk middel, hvis nødvendig for den spesielle forstyrrelse som behandles. Fortrinnsvis vil antistoffet eller antistoffkonjugatet ifølge oppfinnelsen, og den supplementære, aktive forbindelse ha komplementære aktiviteter som ikke ugunstig påvirker hverandre. I en foretrukket utførelsesform er det ytterligere terapeutiske middelet en antagonist av epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vekstfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MSP) eller vaskulær, endotelial vekstfaktor (VEGF), eller en antagonist av en reseptor for epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vesktfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MSP) eller vaskulær, endotelial vekstfaktor (VEGF), inkludert HER2-reseptor, HER3-reseptor, c-MET og andre reseptortyrosinkinaser. I en foretrukket utførelsesform er det ytterligere, terapeutiske middel et middel som sikter på clustere av differensierings (CD) antigener, inkludert CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138 og CD152. I en foretrukket utførelsesform er det ytterligere terapeutiske middel et kjemoterapeutisk eller immunomodulatorisk middel. ;;Preparatene ifølge oppfinnelsen kan foreligge i et antall former. Disse inkluderer for eksempel flytende, halvfaste eller faste doseringsformer, men den foretrukne form avhenger av den tilsiktede administreringsmåte og terapeutiske applikasjoner. Typisk foretrukne preparater foreligger i form av injiserbare eller infuserbare oppløsninger. Den foretrukne administreringsmåte er parenteral (for eksempel intravenøs, intramuskulær, intraperitoneal, subkutan) administrering. I en foretrukket utførelsesform blir preparatene ifølge oppfinnelsen administrert intravenøst som en bolus eller ved kontinuerlig infusjon over et tidsrom. I en annen foretrukket utførelsesform blir de injisert via intramuskulær, subkutan, intra-artikulær, intrasynovial, intratumoral, peritumoral, intralesjonal eller perilesjonal vei for å utøve lokale så vel som systemisk terapeutiske effekter. ;;Sterile preparater for parenteral administrering kan fremstilles ved å innarbeide antistoffeteller antistoffkonjugat ifølge oppfinnelsen, i den nødvendige mengde av det egnede oppløsningsmiddel, fulgt av sterilisering ved mikrofiltrering. Som oppløsningsmiddel eller vehikkel, kan det benyttes vann, saltoppløsning, fosfatbufret saltoppløsning, dekstrose, glyserol, etanol og lignende, så vel som kombinasjoner derav. I mange tilfeller vil det være foretrukket å inkludere isotoniske midler som sukkere, polyalkoholer eller natriumklorid, i preparatet. Disse preparater kan også inneholde adjuvanter og særlig fukte-, isotoniserende-, emulgerings-, dispergerings- og stabiliseringsmidler. Sterile preparater for parenteral administrering kan også fremstilles i form av sterile, faste preparater som kan oppløses på brukstidspunktet i sterilt vann, eller et hvilket som helst annet, injiserbart, sterilt medium. ;;Antistoffeteller antistoffkonjugatet ifølge oppfinnelsen kan også administreres oralt. Som faste preparater for oral administrering, kan det benyttes tabletter, piller, pulvere (gelatinkapsler, poser) eller grauler. I disse preparater blir den aktive bestanddel ifølge oppfinnelsen blandet med en eller flere inerte diluenter som stivelse, cellulose, sukkrose, laktose eller silika, under en argonstrøm. Disse preparater kan også omfatte substanser andre enn diluenter, for eksempel en eller flere lubrikanter som magnesiumsterat eller talkum, en farge, et belegg (sukkerbelagt tablett) eller en glassering. ;;Som flytende preparater for oral administrering kan det benyttes farmasøytisk akseptable oppløsninger, suspensjoner, emulsjoner, siruper og eliksirer inneholdene interte fortynnere som vann, etanol, glyserol, vegetabilske oljer eller parafinolje. Disse preparater kan omfatte stoffer andre enn diluenter, for eksempel fukte-, søtnings-, fortynnings-, smaks- eller stabiliseringsprodukter. ;;Dosene avhenger av den ønskede effekt, behandlingens varighet og den administreringsform som anvendes, dosen ligger generelt mellom 5 mg til 1000 mg per dag oralt for et voksent menneske med enhetsdoser i området 1 mg til 250 mg aktiv bestanddel. Generelt vil legen bestemme den egnede doseringsform avhengig av alder, vekt og andre faktorer som er spesifikke for individer som behandles. ;;Terapeutiske bruksmåter ;Beskrevet heri er en fremgangsmåte for å avlive en CD38<+>-celle ved administrering til en pasient som trenger det, av et antistoff som binder nevnte CD38 og er i stand til avlive nevnte CD38<+ >ved apoptose, ADCC og/eller CDC. En hvilken som helst type av antistoffereller cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen kan benyttes terapeutisk. Oppfinnelsen inkluderer således bruken av anti-CD38 monoklonale antistoffer eller cytotoksiske konjugater derav som medikamenter. ;;I foretrukne utførelsesformer blir antistoffereller cytotoksiske konjugater ifølge oppfinnelsen benyttet for behandling av en hyperproliferativ forstyrrelse eller inflammatorisk sykdom eller autoimmun sykdom hos et pattedyr. I en mer foretrukket utførelsesform blir et av de farmasøytiske preparatene som er beskrevet ovenfor, og som inneholder et antistoffeller cytotoksisk konjugat ifølge oppfinnelsen, benyttet for behandling av en hyperproliferativ forstyrrelse i et pattedyr. I en utførelsesform er forstyrrelsen en cancer. Særlig er canceren en metastatisk cancer. ;;I henhold til dette er de farmasøytiske preparater ifølge oppfinnelsen nyttige ved behandling eller prevensjon av et antall cancere inkludert, men ikke begrenset til B-celle lymfom og multippelt myelom. Andre sykdommer inkluderer de følgende: karsinom, inkluder i blære, bryst, kolon, nyre, lever, lunge, ovarie, pankreas, mage, cerviks, tyroid og hud; inkludert skvamøs cellekarsinom; hematopoietiske tumorer av lymfoidlinje, inkludert leukemi, akutt lymfocytisk leukemi, akutt lymfoblastisk leukemi, B-celle lymfom, T-celle lymfom, Burkitts lymfom; hematopoietiske tumorer av myeloid linje, inkludert akutte og kroniske myelogene leukemier og promyelocytisk leukemi; tumorer av mesenkymal opprinnelse inkludert fibrosarkom og rabdomyosarkom; andre tumorer inkluderer melanoma, seminoma, tetratokarsinom, neuroblastom og gliom; tumorer i det sentrale og perifere nervesystem inkludert astrocytoma, neuroblastoma, glioma og schwannomaer; tumorer av mesenkymal opprinnelse inkludert fibrosarkoma, rabdomyoskarama og osteosarkoma; og andre tumorer inkludert melanom, xeroderma pigmentosum, keratoaktantoma, seminoma, tyroid follikulær cancer og teratokarsinoma og andre cancer som må bestemmes der CD38 uttrykkes. Andre forstyrrelsen er NHL, BL, MED MER, B-CLL, ALL, TCL, AML, HCL, HL eller CML, der CD38 uttrykkes, og andre cancere som kan fastslås der CD38 uttrykkes predominant. Autoimmune sykdommer inkluderer systemisk lupus erytematose, reumatoid artritt, multippel sklerose, Crohns sykdom, ulcerativ kolitt, gastritt, Hashimotos tyroiditt, ankyloserende spondylitt, hepatitt C-assosiert kryoglobulinemisk vaskulitt, kronisk fokal encefalitt, bulløs pemfigoid, hemofili A, membranoproliferativ glomerulonefritt, Sjøgrens syndrom, adult og juvenil dermatomyositt, adult polymyositt, kronisk urtikaria, primær, biliær cirrhose, idiopatisk trombocytopenisk purpura, neuromyelitis optica, Graves dystrofi-sykdom, bulløs pemfigoid, membranproliferative glomerulonefritt, Churg-Strauss syndrom og astma. Andre forstyrrelser inkluderer for eksempel avstøtningreaksjoner som renaltransplantat rejeksjon, levertrnasplantat rejeksjon, lungetransplantat rejeksjon, kardial transplantatrejeksjon og benmarg transplantatrejeksjon; graft-versus-vert-sykdom; virale infeksjoner som mV-infeksjon, HIV-infeksjon, AIDS osv.; og parasittinfeksjoner som giardiase, amøbiase, schistosomiase og andre slike fastlegges av fagmannen på området. ;;Tilsvarende tilveiebringer foreliggende beskrivelse en fremgangsmåte for inhibering av veksten av valgte cellepopulasjoner omfattende å bringe målceller, eller vev inneholdende målcellene, i kontakt med en effektiv mengde av et antistoff eller antistoffkonjugat ifølge oppfinnelsen, eller et antistoffeller terapeutisk middel omfattende et cytotoksisk konjugat, enten alene eller i kombinasjon med andre cytotoksiske eller terapeutiske midler. I en foretrukket utførelsesform er det ytterligere terapeutiske middelet en antagonist av epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vekstfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MSP) eller vaskulær, endotelial vekstfaktor (VEGF), eller en antagonist av en reseptor for epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vesktfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MSP) eller vaskulær, endotelial vekstfaktor (VEGF), inkludert HER2-reseptor, HER3-reseptor, c-MET og andre reseptortyrosinkinaser. I en foretrukket utførelsesform er det ytterligere, terapeutiske middel et middel som sikter på clustere av differensierings (CD) antigener, inkludert CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138 og CD152. I en foretrukket utførelsesform er det ytterligere terapeutiske middel et kjemoterapeutisk eller immunomodulatorisk middel. ;;Fremgangsmåten for inhibering av valgte cellepopulasjoner kan gjennomføres in vitro, in vivo eller ex vivo. Som benyttet her, betyr ”inhibering av vekst” en sinking av veksten hos en celle, redusering av cellelevedyktigheten, forårsake celledød, lysering av en celle og indusering av celledød, uansett om dette går over en kort eller en lang tid. ;;Eksempler på in vitro-anvendelser inkluderer behandlinger av autolog benmarg før transplantering til den samme pasienten for å avlive syke eller malignante celler; behandlinger av benmarg før transplantering for å avlive kompetente T-celler og forhindre graft-versus-vertsssykdom (GVHD); behandlinger av cellekulturer for å avlive alle celler bortsett fra de ønskede varianter som ikke uttrykker målantigenet; eller å avlive varianter som uttrykker uønsket antigen. ;;Betingelsene for ikke-klinisk in vitro-anvendelse kan lett bestemmes av fagmannen. ;;Eksempler på klinisk ex vivo-anvendelse er å fjerne tumorceller eller lymfoidceller fra benmarg før autolog transplantering i cancerbehandling eller ved behandling av autoimmun sykdom, eller for å fjerne T-celler og/eller lymfoidceller fra autolog eller allogenisk benmarg eller vev før transplantering for å forhindre graft-versusvertssykdom (GVHD). Behandlingen kan gjennomføres som følger. Benmarg høstes fra pasienten eller et annet individ, og blir så inkubert i medium inneholdende serum, hvortil det er satt et cytotoksisk middel ifølge oppfinnelsen. Konsentrasjonsområdet er fra rundt 10 µM til 1 pM, i rundt 30 minutter til rundt 48 timer, og ved rundt 37ºC. De eksakte betingelser for konsentrasjon og inkuberingstid, dvs. dose, kan lett bestemmes av fagmannen. Etter inkubering blir benmargcellene vasket med medium inneholdende serum og returnert til pasienten ved intravenøs infusjon i henhold til kjente metoder. Under omstendigheter der pasienten tar annen behandling som en ablativ kjemoterapi eller total kroppsbestrålning mellom tidspunktet for høsting av marg og reinfusjon av de behandlede celler, blir de behandlede margceller lagret frosset i flytende nitrogen ved bruk av medisinsk standardutstyr. ;;For klinisk in vivo-bruk vil antistoffet, eller det cytotoksiske konjugat ifølge oppfinnelsen, leveres som oppløsninger som er testet med henblikk på sterilitet og med henblikk på endotoksinnivåer. Eksempler på egnede protokoller for cytotoksisk konjugatadministrering er som følger. Konjugater gis ukentlig i 4 uker som en i.v. bolus hver uke. Bolusdosene gis i 50 til 100 ml normal saltoppløsning, hvor det kan settes 5 til 10 ml human serumalbumin. Dosene vil være 10 µg til 100 mg per administrering iv. (område på 10 ng til 1 mg/kg/dag). Mer foretrukket vil doseområdet være fra omtrent 50 µg til 30 mg. Helst vil doseområdet være fra 1 til 20 mg. Etter fire ukers behandling kan pasienten fortsatt motta behandling på ukentlig basis. Spesifikke, kliniske protokoller med henblikk på administreringsvei, eksipienter, diluenter, doser, tidsperioder osv., kan bestemmes av en fagmann med vanlig kunnskap på området, alt etter den foreliggende kliniske situasjon. ;;Diagnostikk ;Antistoffene beskrevet kan også benyttes for å detektere CD38 i en biologisk prøve in vitro eller in vivo. Fortrinnsvis blir de beskrevne anti-CD38-antistoffene benyttet in vitro for å bestemme nivå av CD38 i et vev eller i celler avledet fra vevet. Fortrinnsvis er vevet et sykt vev. Mer foretrukket er vevet en tumor eller en biopsi av denne. Mer foretrukketer vevet eller biopsien derav først skåret ut fra en pasient, og nivået av CD38 i vevet eller i biopsien kan så bestemmes i en immuno-analyse med antistoffer beskrevet heri. Beskrivelse frembringer videre bestemmelsen av nivået av CD38 i en prøve av et vev eller en biopsi derav som kan være frosset eller fiksert. Den samme metoden kan benyttes for å bestemme andre egenskaper av CD38-protein som for eksempel celleoverflatenivåene, eller dens cellulære lokasjon. ;;Den ovenfor beskrevne metoden kan benyttes for å diagnostisere en cancer i et individ er som er kjent for å ha eller mistenkt for å ha en cancer, der nivået av CD38 som er målt hos pasienten sammenlignes med det til et normalt referanseindivid eller standard. Metoden kan så benyttes for å bestemme hvorvidt en tumor uttrykker CD38, noe som kan antyde at tumoren vil respondere godt på behandling ved antistoffene, antistofffragmenter eller antistoffkonjugatene ifølge oppfinnelsen. Fortrinnsvis er tumoren en NHL, BL, MM, B-CLL, ALL, TCL, AML, HCL, HL eller CML, der CD38 uttrykkes, og andre cancere som senere må bestemmes der CD38 uttrykkes predominant. ;Foreliggende beskrivelse tilveiebringer videre monoklonale antistoffer, humaniserte antistoffer og epitopbindende fragmenter derav som er ytterligere merket for bruk i forsknings- eller diagnostiske formål. I foretrukne utførelsesformer er merkelappen en radiomerkelapp, en fluorofor, en kromorof, et billedgivende middel eller et metallion. ;;En metode for diagnose beskrives også der nevnte merkede antistoffer eller epitopbindende fragmenter derav administreres til et individ som mistenkes for å ha en cancer eller en inflammatorisk sykdom eller en autoimmun sykdom, og fordelingen av merkelappen i kroppen hos individet måles eller følges. ;;Sett ;Foreliggende beskrivelse inkluderer også sett som for eksempel omfatter et beskrevet cytotoksisk konjugat og instruksjoner for anvendelse av det cytotoksiske konjugat for avlivning av spesielle celletyper. Instruksjonene kan inkludere retningslinjer for bruk av de cytotoksiske konjugater in vitro, in vivo eller ex vivo. ;;Typisk vil settet ha et rom inneholdende det cytotoksiske konjugat. Dette kan foreligge i lyofilisert form, flytende form eller en annen form som kan inkluderes i et sett. Sett kan også inneholde ytterligere elementer som er nødvendige for å utøve oppfinnelsen, beskrevet i instruksjonene i settet, for eksempel en sterlisert oppløsning for rekonstituering av lyofilisert pulver, ytterligere midler for kombinering med cytotoksisk konjugat før administrering til en pasient, og verktøy som understøtter administrering av konjugatet til en pasient. ;;Eksempler ;Oppfinnelsen skal nå beskrives under henvisning til de følgende eksempler som kun er illustrerende og ikke ment å begrense oppfinnelsen. ;;Eksempel 1 ;Muse CD38-antistoffer ;300-19-celler, en pre-B-cellelinje avledet fra Balb/c-mus (M. G. Reth et al.1985, Nature, 317: 353-355) som stabilt uttrykker et høyt nivå av human CD38 ble benyttet for immunisering av Balb/c VAF-mus. Musene ble immunisert subkutant med rundt 5 x 10<6 >CD38-uttrykkende 300-19-celler per mus hver annen til tredje uke ved standard immuniseringsprotokoller benyttet ved ImmunoGen, Inc. De immuniserte mus ble boostet med en ytterligere dose antigen tre dager før de ble avlivet for hybridomgenerering. Milten fra musen ble samlet i henhold til standard dyreprotokoller og ble malt opp mellom to sterile, frostede mikroskopiske planter for å oppnå en enkeltcellesuspensjon i RPMI-1640-medium. Miltcellene ble pelletisert, vasket og fusert med murint myelom P3X63Ag8.653-celler (J. F. Kearney et al. 1979, J Immunol, 123: 1548-1550) ved bruk av polyetylenglykol-1500 (Roche 783641). De fuserte cellene ble resuspendert i RPMI-1640 seleksjonsmedium inneholdende hypoxantinaminopterin-tymidin (HAT) (Sigma H-2062) og selektert med henblikk på vekst i 96-brønners flatbunnet kulturplater (Corning-Costar 3596, 200 µl av cellesuspensjon per brønn) ved 37ºC (5% CO2). Etter 5 dagers inkubering ble 100 µl kultursupernatnat fjernet fra hver brønn og erstattet med 100 µl RPMI-1640-medium inneholdende hypoxantin-tymidin (HT) supplement (Sigma H-0137). Inkubering ved 37ºC (5% CO2) ble fortsatt inntil hybridomkloner var ferdige for antistoffscreening. Andre teknikker for immunisering og hybridomproduksjon kan også benyttes, inkludert de som er beskrevet i J. Langone og H. Vunakis (red., Methods in Enzymology, Vol.121, “Immunochemical Techniques, Part I”; Academic Press, Florida) og E. Harlow og D. Lane (“Antibodies: A Laboratory Manual”;1988; Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York). ;;Ved fluorescensaktivert cellesortering (FACS) ved bruk av en Becton Dickinson FACSCalibur eller en FACSArray-maskin, ble kultursupernatanter fra hybridom screenet (med FITC eller PE-konjugert anti-muse IgG-antiserum) for sekresjon av musemonoklonale antistoffer som binder til de CD38-uttrykkende 300-19-celler, men ikke til de parentale 300-19-celler. Hybridomklonene som testet positiv blir subklonet og isotypen av hvert utskilte anti-CD38-antistoff ble identifisert ved bruk av kommersielle isotypings reagenser (Roche 1493027). Til sammen 29 antistoffer som var positive for CD38-binding ble renset ved Protein A- eller –G-kromatografi ved bruk av en standard protokoll og så karakterisert videre. ;;Eksempel 2 ;Bindingskarakterisering av anti-CD38-antistoffer ;FACS-histogrammer som viste binding av anti-CD38-antistoffer, 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 til CD38-uttrykkende 300-19-celler, og fravær av binding til de parentale 300-19-cellene er vist i Fig.1. 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- eller 38SB39-antistoff (10 nM) ble inkubert i 3 timer med enten CD38-uttrykkende 300-19-celler eller de parentale 300-19-celler (1-2 x 10<5 >celler per prøve) i 100 µl iskald RPMI-1640-medium supplert med 2% normal geiteserum. ;Deretter ble cellene pelletisert, vasket og inkubert i 1 time på is med FITC-konjugert geite-anti-muse-IgG-antistoff (Jackson Laboratory, 100 µl, 6 µg/ml i kald RPMI-1640 medium supplert med 2% normalt geiteserum). Cellene ble pelletisert igjen, vasket, resuspendert i 200 µl PBS inneholdende 1% formaldehyd og analysert ved bruk av et FACSCalibur strømningscytometer med CellQuest program (BD Biosciences). ;;FACS-histogrammene for CD38-uttrykkende 300-19-celler inkubert med 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 viste et sterkt fluorescensskift sammenlignet med det til den negative kontroll (celler inkubert kun med FITC-konjugerte geite-anti-muse IgG-antistoff) (Fig.1). Heller ikke ble signifikant fluorescensskift detektert når parentale 300-19-celler ble inkubert med noen av disse antistoffer. Tilsvarende resultater ble oppnådd når det positive kontroll anti-CD38-antistoff AT13/5 (Serotec, MCA1019) ble benyttet. ;;Et sterkt fluorescensskift ble også observert når Ramos (ATCC CRL 1596) lymfomaceller ble inkubert med 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 (Fig.1). Verdiene for den tilsynelatende dissosiasjonskonstant (KD) for 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 for binding til Ramos-celler ble estimert fra FACS-analysekurvene som vist i fig.2 ved bruk av den ikke-lineære regresjonsmetode for sigmoide doseresponskurver (GraphPad Prizm, versjon 4, program, San Diego, CA). Verdiene er som følger: 0,10 nM, 0,10 nM, 0,12 nM, 0,16 nM, 0,11 nM og henholdsvis 3,3 nM. ;;Eksempel 3 ;Induksjon av apoptose av Ramos- og Daudi-lymfomceller med 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-antistoffer ;Anti-CD38-antistoffene, 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 induserte apoptose av Ramos- og Daudi (ATCC CCL-213) lymfomcellelinjer og den MOLP-8 multiple myelomcellelinje (DSMZ ACC 569). Graden av apoptose ble målt ved FACS-analyse etter farging med FITC-konjugater av Annexin V (Biosource PHN1018) og med TÆO-PRO-3 (Invitrogen T3605). Anneksin V binder fosfoatidylserin på utsiden, men ikke på innsiden av cellemembranbisjiktet av intakte celler. I friske, normale celler, er fosfatidylserin uttrykt på innsiden av membran bisjiktet, og overføring av fosfatidylserin fra det indre til det ytre blad av plasmamembranen er et av de tidligst detekterbare signaler på apoptose. Binding av Anneksin V er således et signal for induksjon av apoptose. TO-PRO-3 er en monomer cyanin nukleinsyrefarge som kun kan penetrere plasmamembranen når membranintegriteten er svekket, slik det skjer i de senere trinn av apoptosen. ;Eksepsjonelt voksende celler ble brakt på plater med rundt 2 x 10<5 >celler/ml i 24-brønners plater i RMPI-1640-medium supplert med 10% fetalt bovinserum (FBS), 2 mM L-glutamin og 50 µg/ml gentamycin (angitt nedenfor som komplett RMPI-1640-medium). Cellene ble generelt dyrket i komplett RMPI-1640-medium, hvis ikke annet er sagt. Cellene ble inkubert med anti-CD38-antistoffer (10 nM) i 24 timer ved 37ºC i en fuktet atmosfære holdende 5% CO2. Cellene ble så pelletisert, vasket to ganger med 500 µl PBS, resuspendert i 100 µl bindingsbuffer (tilveiebrakt i Anneksin V-FITC-settet), inneholdende 5 µl Anneksin V-FITC, og inkubert i 15 minutter på is. Deretter ble 400 µl bindingsbuffer og TO-PRO-3 (til en sluttkonsentrasjon på 1 µM) satt til blandingen og den celleassosierte fluorescens av FITC og TO-PRO-3 ble umiddelbart målt ved FACS. 4000 evenementer ble samlet for hver prøve. Dot-plot for fluorescensen og TO-PRO-3 (FL4-H; y-akse) og fluorescens av Anneksin V-FITC (FL1-H, x-akse) ble generert ved bruk av CellQuest software. ;;Resultatene er vist i figurene 3 og 4. Figur 3 gir et eksempel på et slikt dot-plott for Daudi-celler etter 24-timers inkubering med forskjellige anti-CD38-antistoffer. De midlere prosentandeler av Anneksin V-positive celler (inkluderer både TO-PRO-3-positive og –negative celler) fra duplikatprøver ble bestemt fra disse plott og er vist i figur 4. Uventet viste 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 sterk apoptotisk aktivitet. Mer enn 30% av Daudi-celler som var eksponert til noen av disse antistoffer var Anneksin V-positive sammenlignet med kun 6% av ikke-behandlede celler (Fig.3 og 4A). 38SB13,38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 viste minst 2,4-ganger sterkere apoptotiske aktiviteter (24% etter subtraksjon av den ikkebehandlede kontrollverdi) enn tidligere kjente murine CD38-antistoffer som ble testet ved samme konsentrasjon på 10 nM, (AT13/5, OKT10, IB4 og SUN-4B7, mindre enn 10% Anneksin V-positive etter subraksjon av den ikke-behandlede kontrollverdi) og to andre anti-CD38-antistoffer generert i søkers laboratorium (38SB7 og 38SB23, ikke høyere enn ikke-behandlet kontroll, dvs. rundt 6& Anneksin V-positiv) (Fig.4A). AT13/5 ble ervervet fra Serotec (MCA1019) og OKT10 ble produsert og renset fra hybridom (ATCC CRL-8022). IB4 og SUN-4B7 var en gave fra prof. F. Malavasi, Universitetet i Torino, Italia. Tilsvarende viste 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-anti-CD38-antistoffer minst 3,5-ganger sterkere pro-apoptotisk aktivitet på en annen lymfomcellelinje, Ramos (7% eller mer Anneksin V-positiv etter subtraksjon av den ikke-behandlede kontrollverdi) enn noen av tidligere kjente, murin CD38-antistoffer, AT13/5, OKT10, IB4 og SUYN-4B7, eller to andre nye anti-CD38-antistoffer, 38SB7 og 38SB23 (mindre enn 2% Anneksin V-positiv etter subtraksjon av den ikke-behandlede kontrollverdi) (Fig.4B). Til slutt viste 38SB13-, 38SB18-, 38SB19-, 38SB30-, 38SB31- og 38SB39-anti-CD38-antistoffer sterk pro-apoptotisk aktivitet på den multiple myelomcellelinje MOLP-8 (Fig.4C). Rundt 50% MOLP-8-celler som var behandlet med disse antistoffer var Anneksin V-positive sammenlignet med rundt 39% ikke-behandlede celler. Som kontrast ga behandling med de kjente murin CD38-antistoffer, AT13/5, OKT10, IB4 og SUN-4B7, eller de to andre nye anti-CD38-antistoffer, 38SB7 og 38SB23 ikke noen økning i andelen av apoptotiske celler. ;;Eksempel 4 ;Kloning og sekvensering av lette og tunge kjeder av anti-CD38-antistoffer ;;38SB19-antistoff ;RNA-preparering fra hybridomceller som produserer 38SB19-antistoff. ;;Fremstilling av total RNA ble oppnådd fra 5 x 10<6 >hybrodimceller som produserer 38SB19-antistoff ved bruk av Qiagens RNeasy miniprep kit. Kort sagt ble 5 x 10<6 >celler pelletisert og resuspendert i 350 µl RLT-buffer (inneholdende 1%�-merkaptoetanol). Suspensjonen ble homogenisert ved å føre den gjennom en nål nr.21,5 og sprøytet rundt 10-20 ganger inntil den ikke lenger var viskøs. Etanol (350 µl 70% vandig etanol) ble satt til homogenatet som ble blandet godt. Oppløsningen ble overført til en spin-kolonne, anbrakt i et 2 ml samlerør og spunnet ved >8000 x g i 15 sekunder. Kolonnen ble vasket to ganger med 500 µl RPE-buffer, så overført til et friskt rør og eluert med 30 µl RNase-fritt vann og en 1-minutts spinning. Eluatet på 30 µl ble anbrakt tilbake på kolonnen for en andre 1-minutts elueringsspinning. En alikvot på 30 µl eluant fortynnet med vann og benyttet for å måle UV-absorpsjoner ved 260 nm for RNA-kvantitering. ;;cDNA-preparering med revers transkriptase (RT)-reaksjon ;Det variable område 38SB19-antistoff cDNA ble generert fra total RNA ved bruk av Invitrogens SuperscritII-kit. Kit-protokollen ble fulgt strengt ved anvendelse av opp til 5 µg total RNA fra Qianeasy mini-prepene. Kort sagt ble RNA, 1 µl virkårlig primere og 1 µl dNTP-blanding brakt opp til 12 µl med RNase-fritt, sterilt, destillert vann og inkubert ved 65ºC i 5 minutter. Blandingen ble så brakt på is i minst 1 minutt. Deretter ble 4 µl 5 x reaksjonsbuffer, 2 µl 0,1 M DTT og 1 µl RNaseOUT tilsatt og blandingen inkubert ved 25ºC i 2 minutter i en MJ Research termalsykler. Denne ble stanset slik at 1 µl SuperscriptII-enzym kunne tilsettes og så startet igjen for ytterligere 10 minutter ved 25ºC før skift til 55ºC i 50 minutter. Reaksjonsblandingen ble varmeinaktivert ved oppvarming til 70ºC i 15 minutter, og RNA ble fjernet ved tilsetning av 1 µl RNase H og inkubering ved 37ºC i 20 minutter. ;;Degenerate PCR-reaksjoner ;Prosedyren for denne første runde degnerat PCR-reaksjon på det cDNA som var avledet fra hybridomceller var basert på metoden som beskrevet av Wang et al. (2000) og Co et al. (1992). Primerne for denne runde (Tabell 2) inneholder restriksjonsseter for å lette kloning inn i pBluescriptII-plasmider. ;;PCR-reaksjonskomponenten (Tabell 3) ble blandet på is i tynnvegget PCR-rør og så overført til en MJ research termalsykler som var forvarmet og holdt ved 94ºC. ;Reaksjonen ble gjennomført ved anvendelse av et program avledet fra Wang et al., 2000, som følger: ;;Navn: Wang45 ;94ºC 3:00 min ;94ºC 0:15 sek ;45ºC 1:00 min ;72ºC 2:00 min ;Goto 229 ganger ;72ºC 6:00 min ;4ºC resten ;Slutt ;;PCR-reaksjonsblandingen ble så kjørt på en 1% lavsmelte agarosegel, båndende på 300 til 400 bp ble skåret ut, renset ved bruk av Zymo DNA minikolonner og sendt til Agentcourt biosciences for sekvensering. De respektive 5’- og 3’-PCR-primere ble benyttet som sekvenseringsprimere for å generere disse 38SB19-variable områdecDNAer fra begge retninger. ;;Kloning av 5’ endesekvensen ;Fordi de degenerate primere som ble benyttet for å klone de 38SB19-variabelt område lettkjede- og –tungkjede cDNA-sekvenser endrer 5’ sekvensene, var ytterligere sekvenseringsforsøk nødvendig for å dechiffrere de komplette sekvenser. Den preliminære cDNA-sekvens fra metoden som beskrevet ovenfor, ble benyttet for å søke NCBI IgBlast-sete (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/) for de murine germlinjesekvenser hvorfra 38SB19-sekvensen er avledet. PCR-primere ble designert (Tabell 3) for å annelere ledersekvens av det murine antistoff slik at en ny PCR-reaksjon kunne gi den fullstendige variabelområde cDNA, uendret av PCR-primerne. PCR-reaksjonene, båndrensing og sekvensering ble gjennomført som beskrevet ovenfor. ;;Peptidanalyse for sekvensbekreftelse ;cDNA-sekvensinformasjonen for det variable området ble kombinert med den germilinjekonstante regionsekvens for å oppnå fullengde antistoff-cDNA-sekvenser. Molekylvektene for tungkjede og lettkjede ble så beregnet, og sammenlignet med molekylvekt oppnådd ved LC/MS-analyser av det murine 38SB19-antistoff. ;;Tabell 4 gir de beregnede masser fra cDNA-sekvensen for 38SB19 LC og -HC sammen med verdiene målt ved LC/MS. Molekylvektsmålingene er konsistent med cDNA-sekvensen for både den tunge og lette 38SB19-kjede. ;;Eksempel 5 ;Rekombinant ekspresjon av hu38SB19-antistoffer ;Variabel områdesekvensene for hu38SB19 ble kodonoptimalisert og syntetisert av Blue Heron Biotechnology. Sekvensene er flankert av restriksjonsenzymseter for kloning inframe med de respektive konstante sekvenser i både enkeltkjede- og tandem dualkjede mammalske ekspresjonsplasmider. Det lettkjedevariable området klones inn i EcoRI-og BsiWI-seter i både ps38SB19LCZv1.0 og ps38SB19v1.00 plasmider (Fig.5A og 5C). Det tungkjedevariable området klones inn i HindIII og Apa1-setene i både ps38SB19HCNv1.0 og ps38SB19v1.00 plasmider (Fig.5B og 5C). Disse plasmider kan benyttes for å uttrykke hu38SB19 i enten transient eller stabil transfeksjon i mammalske celler. Tilsvarende ekspresjonsvektorkonstrukter ble benyttet for å produsere andre kimere og humaniserte antistoffer. ;;Transiente transfeksjoner for å uttrykke hu38SB19 i HE-293T-celler ble gjennomført ved bruk av CaPO4-reagenser fra BD biosciences. De leverte protokoller ble noe modifisert for forsterkede ekspresjonsutbytter. Kort sagt ble 2 x 10<6>HE-293T-celler brakt på plate på 10 cm vevskulturplater belagt med polyetylenimin (PEI) 24 timer før transfeksjon. Transfeksjonen begynte med vasking av cellene med PBS og erstatning av mediet med 10 ml DMEM (Invitrogen) med 1% Ultra lav IgG FBS (Hyclone). ;Oppløsning A (10 µg DNA, 86,8 µl Ca<2+>-oppløsning, og opp til 500 µl med H2O) ble dråpevis satt til Oppløsning B under vorteksering. Blandingen ble inkubert ved RT i 1 minutt og 1 ml av blandingen ble dråpevis satt til hver 10 cm plate. Rundt 16 timer etter transfeksjon ble medium erstattet med 10 ml frisk DMEM med 1% Ultra lav IgG FBS. ;Rundt 24 timer senere, ble 2 mM natriumbutyrat satt til hver 10 cm plate. ;Transfeksjonen ble høstet 4 dager senere. ;;Supernatant ble preparert for Protein A affinintetskromatografi ved tilsetning av 1/10 volum i 1 M Tris/HCl-buffer, pH 8,0. Den pH-justerte supernatant ble filtrert gjennom en 0,22 µm filtermembran og lastet på en Protein A Sepharose-kolonne (HiTrap Protein A HP, 1 ml, Amersham Biosciences) som var ekvilibrert med bindingsbuffer (PBS, pH 7,3). En Q-Sepharose prekolonne (10 ml) ble forbundet oppstrøms Protein A-kolonnen under prøvelasting for å redusere kontaminering fra det cellulære materiale som DNA. Etter prøvelastingen ble prekolonnen fjernet og Protein A kolonneorienteringen reversert for vasking og eluering. Kolonnen ble vasket med bindingsbuffer inntil det var oppnådd en stabil bunnlinje, uten noen absorbans ved 280 nm. Et antistoff ble eluert med 0,1 M eddiksyrebuffer inneholdende 0,15 M NaCl, pH 2,8, ved bruk av en strømningshastighet på 0,5 ml/min. Fraksjoner på rundt 0,25 ml ble samlet og nøytralisert ved tilsetning av 1/10 volum 1M Tris/HCl, pH 8,0. Toppfraksjoner ble dialysert over natten to ganger mot PBS og renset antistoff kvantitert ved absorbanse ved OD280. Humaniserte og kimere antistoffer kan også renses ved bruk av en Protein G-kolonne med lett forskjellige prosedyrer. ;;Alle de beskrevne kimere og humaniserte anti-CD38-antistoffer ble uttrykt og renset ved prosedyrer tilsvarende det som er beskrevet ovenfor. ;;Eksempel 6 ;Antistoffavhengige, cellemedierte cytotoksisitets (ADCC)-aktiviteter for kimere anti-CD38-antistoffer ;Fordi noen anti-CD38-antistoffer tidligere er kjent å ha ADCC- og/eller CDC-aktivitet som kimere eller humaniserte antistoffer med humane IgG1-konstante områder (J. H. Ellis et al.1995, J Immunol, 155: 925-937; F. K. Stevenson et al. 1991, Blood, 77: 1071-1079; WO 2005/103083), ble de kimere versjoner av 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39, bestående av murinvariable områder og det humane IgG1/IgKappa-konstante området, tildannet og testet med henblikk på ADCC- og/eller CDC-aktiviteter. ;;Ch38SB13, ch38SB18, ch38SB19, ch38SB30, ch38SB31 og ch38SB39 ble først testet på ADCC ved bruk av Ramos-celler som målceller og human naturlig dreper (NK)-celler som effektor celler. En laktat dehydrogenase (LDH) frigivningsanalyse ble benyttet for å måle cellelysering (R. L. Shields et al., 2001, J Biol Chem, 276: 6591-6604). ;;NK-cellene ble først isolert fra humanblod (fra en normal donor; ervervet fra Research Blood Components, Inc., Brighton, MA) ved bruk av en modifisert protokoll for NK Isolation Kit II (Miltenyi Biotech). Blod ble fortynnet 2-3 ganger med Hansk balanserte saltoppløsning (HBSS). 25 ml fortynnet blod ble omhyggelig sjiktet over 25 ml Ficoll Paque i et 50 ml konisk rør og sentfiguert ved 400 g i 45 min ved 19ºC. De perifere mononukleære blodceller (PBMC) ble samlet fra grenseflaten, overført til et nytt, konisk 50 ml rør og vasket en gang med HBSS. PBMC ble resuspendert i 2 ml NK-isolasjonsbuffer og deretter ble 500 µl Biotin-Antibody Cocktail (fra NK-isolasjonsettet, 130-091-152, Miltenyi Biotech) satt til cellesuspensjonen. Denne Biotin-Antibody Cocktail inneholder biotinylerte antistoffer som binder til lymfocyttene, bortsett fra NK-cellene. Blandingen ble inkubert ved 4ºC i 10 minutter, og deretter ble 1,5 ml NK-isolasjonsbuffer (PBS, 0,1% BSA, 1 mM EDTA) og 1 ml anti-biotin mikrokuler ble tilsatt. Celle-antistoffblandingen ble inkubert i ytterligere 15 min. ved 4ºC. Deretter ble cellene vasket en gang med 50 ml NK-isolasjonsbuffer og resuspendert i 3 ml NK-isolasjonsbuffer. Deretter ble MACS LS-kolonnen (på MACS-separatoren, Miltenyi Biotech) forvasket med 5 ml NK-isolasjonsbuffer. Cellesuspensjonen ble så brakt på LS-kolonnen. Effluenten (fraksjonen med ikke-merkede celler) ble samlet i et nytt, 50 ml konisk rør. Kolonnen ble vasket tre ganger med 3 ml NK-isolasjonsbuffer. Hele efluenten ble samlet i det samme rør og vasket en gang med 50 ml NK-isolasjonsbuffer. NK-celler ble brakt på platen i 30 ml RPMI-1640 supplert med 5% fetal bonvineserum, 50 µg/ml gentamycin. ;;Forskjellige konsentrasjoner av ch38SB13-, ch38SB18-, ch38SB19-, ch38SB30-, ch38SB31- og ch38SB39-antistoffer i RPMI-1640-medium supplert med 0,1% BSA, 20 mM HEPES, pH 7,4, og 50 µg/ml gentamycin (angitt ovenfor som RHBP-medium) ble alikvotert (50 µl/brønn) til en rundbunn 96-brønners plate. Mål-Ramos-cellene ble resuspendert ved 10<6 >celler/ml i RHBP-medium og satt til hver brønn (100 µl/brønn) inneholdende antistoffortynninger. Platen inneholdende målceller og antistofffortynninger ble inkubert i 30 minutter ved 37ºC. NK-celler (50 µl/brønn) ble så satt til brønnene inneholdende målcellene, typisk i et forhold på 1 målcelle per 3-6 NK-celler. RHBP-medium (50 µl/brønn) ble satt til kontrollbrønnene med NK-celler. Også 20 µl tTriton X-100-oppløsning (RPMI-1640-medium, 10% Triton X-100) ble satt til de 3 brønner som kun inneholdt målceller uten antistoff, for å bestemme den maksimalt mulige LDH-frigivning. Blandingene ble inkubert ved 37ºC i 4 timer, og så sentrifugert i 10 minutter ved 12 omdr/min, hvoretter 100 µl av supernatanten forsiktig ble overført til en ny flatbunn 96-brønners plate. LDH-reaksjonsblandingen (100 µl/brønn) fra Cytotoxicity Detection Kit (Roche 1644 793) ble satt til hver brønn og inkubert ved romtemperatur i 5-30 minutter. Den optiske densitet for prøvene ble målt ved 490 nm (OD490). Prosentandel spesifikk lysering av hver prøve ble bestemt ved å tilskrive 100% lysering til OD490-verdien av Triton X-100-behandlede prøver, og 0% lysering til OD490-verdien for den ikke-behandlede kontrollprøve kun inneholdende målceller. Prøvene inneholdende kun NK-celler ga neglisjerbare OD490-avlesninger. ;;Ved testing med Ramos-målceller og NK-effektorceller viste kimere anti-CD38-antistoffer meget potente ADCC-aktiviteter (Fig.6). EC50-verdiene ble estimert ved en ikke-lineær regresjonsmetode med sigmoide doseresponskurver og funnet å være som følger: 0,0013 µg/ml for h38SB13, 0,0013 μg/ml for ch38SB18, 0,0018 μg/ml for ch38SB19, 0,0022 μg/ml for ch38SB30, 0,0012 μg/ml for ch38SB31, 0,1132 μg/ml for ch38SB39. Kimere anti-CD38-antistoffer viste også potent ADCC-aktivitet på LP-1 (DSMZ ACC 41) multiple myelomceller (EC50-verdier: 0,00056 μg/ml for ch38SB18, 0,00034 μg/ml for ch38SB19, 0,00024 μg/ml for ch38SB31) (Fig.7A). Ch38SB19 avlivet også effektivt Daudi-lymfomaceller (Fig.7B), NALM-6 B-ALL-celler (DSMZ ACC 128) (Fig.8A) og MOLT-4 T-ALL-celler (ATTC CRL-1582) (Fig.8B) ved ADCC, noe som antyder at anti-CD38-antistoffer med uvanlig potent apototisk aktivitet også har potent ADCC-aktivitet mot forskjellige tumorceller avledet fra forskjellige hamtopoietiske malignanser. Heller ikke et ikke-bindende IgG1 kontrollantistoff (rituximab, BiogenIdec) (Fig.7A, 8A og 8B) eller mu38SB19 (Fig.7B) hadde i det samme forsøk noe signifikant ADCC-aktivitet. ;;Eksempel 7 ;CDC-aktiviteter av kimere anti-CD38-antistoffer ;CDC-aktivitetne for ch38SB13, ch38SB18, ch38SB19, ch38SB30, ch38SB31 og ch38SB39 ble målt basert på en metode modifisert fra H. Gazzano-Santoro et al.1997, J. Immunol Methods, 202: 163-171. Human komplement var lyofilisert human komplementserum (Sigma-Aldrich S1764) som var rekonstituert med sterilt, renset vann som antydet av produsenten og så fortynnet 5 ganger med RHBP-medium umiddelbart før forsøket. Målceller suspendert til 10<6 >celler/ml i RHBP-medium ble alikvotert inn i brønner av en flatbunn 96-brønners vevkulturplate (50 µl/brønn). ;Deretter ble 50 µl forskjellige konsentrasjoner (fra 10 nM gil 0,001 nM) av anti-CD38-antistoffene i RHBP-medium tilsatt (et antistoff per brønn), noe som ble fulgt av 50 µl/brønn komplementoppløsning. Platen ble så inkubert i 2 timer ved 37ºC i en fuktet atmosfære inneholdende 5% CO2, hvoretter 50 µl 40% Alamar Blue-reagens (Biosource DAL1100), fortynnet i RHBP (10% sluttverdi) ble satt til hver brønn for å måle cellenes levedyktighet. Alamar Blue følger reduksjonsevnen for de levedyktige celler. Platen ble inkubert i 5-18 timer ved 37ºC før måling av fluorescensen (i relative fluorescensenheter, RFU) ved 540/590 nm. Prosentandelen til spesifikk cellelevedyktighet for hver prøve ble bestemt ved først å korrigere forsøksverdiene for bakgrunns fluorescens ved å subtrahere bakgrunns RFU-verdien (brønner med kun medium, uten noen celler) fra RFU-verdiene for hver prøve, og så å dividere de korrigerte RFU-verdier med den korrigerte RFU-verdien for ikke-behandlede celleprøver. ;;Når CDC-aktiviteten for de kimere anti-CD38-antistoffprøver ble testet med Raji-IMG-celler ved bruk av human komplement med en sluttfortynning på 5%, viste kimere anti-CD38-antistoffer meget potente CDC-aktiviteter (Fig.9). Raji-IMG er celler som er avledet fra Raji-celler (ATCC CCL-86) og uttykker lavere nivåer av membrankomplement inhibitorene CD55 og CD59. EC50-verdiene ble estimert ved ikke-lineær regresjon fra den sigmoide doseresponskurve som vist i fig.8 og er som følger: 0,005 µg/ml ch38SB13, 0,0101 μg/ml for ch38SB18, 0,028 μg/m, for ch38SB19, 0,020 μg/ml for ch38SB30, 0,010 μg/ml for ch38SB31 og 0,400 μg/ml for ch38SB39. Kimere anti-CD38-antistoffer viste også potent CDC-aktivitet mot LP-1 multiple myleomceller (EC50-verdi: 0,032 μg/ml for ch38SB18, 0,030 μg/ml for ch38SB19, 0,043 μg/ml for ch38SB31), mens en ikke-bindende, kimer kontroll IgG1 (rituximab, BiogenIdec) ikke hadde noen CDC-aktivitet (Fig.10). Når kimere CD38-antistoffer ble testet på Daudilymfomceller, skilte ved forskjellige anti-CD38-antistoffer seg fra hverandre når det gjelder deres respektive CDC-aktivieteter (Fig.11). Mens den spesifikke levedyktighet for Daudi-celler var mindre enn 15% etter deres inkubering med 1,25 µg/ml ch38SB19 i nærvær av komplement, var det kun en marginal reduksjon i den spesifikke levedyktighet for disse celler etter deres inkubering med ch38SB18 og ch38SB39 (1,25 µg/ml eller høyere konsentrasjon) i nærvær av komplement (den spesifikke levedyktighet var 85% henholdsvis 91%). Videre ble kun en moderat reduksjon av spesifikk levedyktighet observert når Daudi-cellene ble inkubert med 1,25 µg/ml eller høyere konsentrasjon av ch38SB13, ch38SB30 og ch38SB31 i nærvær av komplement (den spesifikke levedyktighet var 65%, 45% henholdsvis 53%). ;;Eksempel 8 ;Bindingsaffinitet og apoptotisk, ADCC- og CDC-aktiviteter for humanisert anti-CD38-antistoffer ;De to versjoner av humanisert 38SB19 (hu38SB19 v1.00 og v1.20) og den kimere 38SB19 viste tilsvarende bindingsaffinitet ved testing med Ramos-celler med KD-verdier på 0,23 nM, 0,25 nM henholdsvis 0,18 nM (Fig.12A). Bindingsaffiniteten for kimere og humaniserte 38SB19-antistoffer ble også samlet i en kompetisjonsbindingsanalyse der deres evne til å konkurrere med bindingen til biotinylert, murin 28SB19-antistoff, måles. Biotinmerket murin 38SB19-antistoff (3 x 10<-10 >M) ble blandet med forskjellige konsentrasjoner av ch38SB10, hu29SB19 v1.00 eller hu38SB19 v1.20. Antistoffblandingen ble inkubert med Ramos-celler og mengden av biotinylert, muring 38SB29 som var bundet til cellene, ble målt med FITC-konjugert straptavidin ved FACS-analyse. Hu38SB19 v1.00, hu38SB19 v1.29 og ch38SB19 konkurrerte like godt med bindingen av biotinylert, muring 38SB19 (Fig.12B), noe som nok en gang indikerer at bindingsaffiniteten er upåvirket av humanisering. Når ch38SB19, hu38SB19 v1.00 og hu38SB19 v1.20 (10<-8 >til 10<-11 >M) ble sammenlignet med henblikk på evnen til å indusere apoptose av Daudi-celler, viste de tilsvarende apototiske aktiviteter (Fig.139. Videre viste hu38SB10 v1.00 og v1.20 også tilsvarende ADCC som ch38SB19 i LP-1-celler (Fig.14) og tilsvarende CDC-potenser som ch38SB19 i Raji-IMG og LP-1-celler (Fig.15). Hu38SB19 v1.00 viste også tilsvarende CDC-aktivitet som ch28SB19 i den T-celleakutte lymfoblastiske leukemicellelinje DND-41 (DSMZ 525) (Fig.15). Hu38SB19 v1.00 ble videre testet med henblikk på evnen til å indusere apoptose i et diverse sett av cellelinjer (Fig.16). Behandling med hu38SB10 v1.00 (10<-8 >M) resulterte i en dramatisk økning av Anneksin V-positive celler i B-celle lymfomcellelinjene SU-DHL-8 )DSMZ ACC 583) (fra 7% i ubehandlet kontroll til 97% i hu38SB10-behandlede celler) og NU-DUL-1 (DSMZ ACC 589) (fra 10% i ubehandlet kontroll til 37% i hu38SB19-behandlede celler) og T-ALL cellelinjen DND-41 (fra 7% i ubehandlet kontroll til 69% i hu38SB19-behandlede celler). I tillegg øker behandling med hu38SB10 v1.00 (10<-8 >M) andelen av Anneksin V-positive celler i den B-celle lymfocytiske leukemicellelinje JVM-13 (DSMZ ACC 19) (fra 8% i ubehandlet kontroll til 17% i hu38SB19-behandlede celler) og i hårcelleleukemicellelinjen HX-1 (DSMZ ACC 301) (fra 6% i ubehandlet kontroll til 10% i hu38SB19-behandlede celler). ;;Tilsvarende viste to versjoner av humanisert 38SB31 (hu38SB31 v1.1 og v1.2) og den kimere 38SB31 like bindingsaffiniteter når de ble testet med Ramos-celler med KD-verdier på 0,13 nM, 0,11 nM og henholdsvis 0,12 nM. Bindingsaffinitetene for kimere og humaniserte 38SB31-antistoffer ble også sammenlignet med i en kompetisjons bindingsanalyse som beskrevet ovenfor, og ytet like godt. Hu38SB31 v1.1 ble ytterligere testet med henblikk på evnen til å indusere apoptose i ytterligere celleinjer. Det humaniserte antistoff viste tilsvarende apoptotiske aktiviteter som ch38SB31 mot Ramos-, Daudi-, Molp-8- og SUÆ-DHL-8-celler. Videre viste hu38SB31 v1.1 også tilsvarende ADCC- og CDC-aktiviteter som ch38SB31 i disse cellelinjer. ;;Eksempel 9 ;In vivo-effektivitet for 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 In vivo anti-tumoraktivitetene for 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 ble undersøkt inn i en overlevelses human xenograft tumormodell i immunodefekte mus (hunn CB.17 SCID), etablert med Ramos lymfomceller. Hunn CB.17 SCID-mus ble inokulert med 2 x 10<6 >Ramos-celler i 0,1 ml serumfritt medium gjennom en latteral halevene. 7 dager etter tumorcelleinokkulering ble musene randomisert i 7 grupper basert på kroppsvekt. Det var 10 mus per gruppe, bortsett fra den 38SB31-behandlede gruppen som hadde 6 mus, og den 38SB39-behandlede gruppen som hadde 8 mus. Antistoffer ble gitt musene intravenøst i en dose på 40 mg/kg, to ganger per uke, i tre påhverandre følgende uker, med start 7 dager etter celleinokkulering. Musene ble avlivet hvis en eller begge baklemmer var paralysert, tap av kroppsvekt var mer enn 20% fra verdien før behandling, eller dyret var for sykt til å komme frem til næring og vann. Behandlingen med 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 og 38SB39 forlenger signifikant musenes overlevelse, sammenlignet med den PBS-behandlede mus (Fig.17). Midlere overlevelse for PBS-behandlede mus var 22 dager og den til antistoffbehandlede grupper lå fra 28 til 33 dager. ;;In vivo anti-tumor aktivitetene for mu38SB19 og hu38SB19 ble undersøkt videre i ytterligere human xenograft tumormodeller i immunodefektive mus. For en Daudi lymfom overlevelsesmodell ble SCID-mus inokulert med 5 x 10<6 >Daudi-celler i 0,1 ml serumfritt medium gjennom en latteral halevene. Studien ble gjennomført som beskrevet ovenfor. Behandlingen med enten mu38SB19 eller hu38SB19 forlenget signifikant overlevelsen for mus sammenlignet med den til PBS-behandlede mus (Fig. 18). En midlere overlevelse for PBS-behandlede mus var 22 dager, mens den midlere overlevelse for antistoffbehandlede mus var 47 dager. ;;For en NCI-H929 multippel myelom tumormodell, ble SCID-mus innokulert subkutant med 10<7 >celler. Når tumorene var palpable på dag 6, ble dyrene randomisert i grupper på 10 i henhold til kroppsvekt og antistoffbehandlingen startet. Hu38SB19-antistoffet eller et ikke-bindende, kimert IgG1-kontrollantistoff (rituximab, BiogenIdec) ble gitt musene intravenøst i en dose på 40 mg/kg, to ganger per uke, i tre på hverandre følgende uker. Tumorvolumet ble fulgt og dyrene avlivet hvis tumoren nådde 2000 mm<3 >i størrelse eller ble nekrotisk. PBS-behandlet gruppe nådde et midlere tumorvolum på 1000 mm<3 >på dag 89, den kimeriske IgG1 kontrollantistoffgruppe på dag 84 (Fig. 19). Behandling med hu38SB19 forhindret fullstendig tumorvekst i alle 10 dyrene. I motsetning til dette, viste kun to dyr i PBS-behandlet gruppe og tre dyr i den kimere IgG1-kontrollantistoffgruppe tumorregresjon. ;;For en MOL-8 multippel myelom tumormodell ble SCID-mus innokulert subkutant med 10<7 >celler. Når tumorene var palpable på dag 4, ble dyrene randomisert i grupper på 10 i henhold til kroppsvekt og antistoffbehandling ble startet. Hu38SB19- og mu38SB19-antistoffene eller et kimerisk IgG1 kontrollantistoff ble gitt musene intravenøst i en dose på 40 mg/kg, to ganger per uke, i tre på hverandre følgende uker. Tumorvolumet ble fulgt og dyrene avlivet hvis tumorene nådde 2000 mm<3 >i størrelse, eller ble nekrotiske. Den PBS-behandlede gruppe nådde et midlere tumorvolum på 500 mm<3>på dag 22, den kimeriske IgG1 kontrollantistoffgruppe på dag 23 (Fig.20). Ingen av tumorene i disse grupper viste regress. I motsetning til dette førte behandling med hu38SB19 eller mu38SB19 til tumorregresjon i 8 av 10, henholdsvis 6 av 10 dyr. ;;Tabeller ;Tabell 1: ;Mu38SB19-lettkjedet rammeverks overflaterester og tilsvarende rester på den samme Kabat-posisjon i human 1.69-antistoff. Restene som er forskjellige og derfor forandret i hu38SB19-antistoffet er i de gråtonede bokser. De merkede (*) rester er tilbakemutert til mu38SB19-resten i en eller flere hu38SB19-varianter.
Tabell 1B:
Mu38SB19 tungkjede rammeverks overflaterester og tilsvarende rester på samme Kabat-posisjon i det humane 1.69-antistoff. Rester som er forskjellige og derfor forandret i hu38SB19-antistoff er gråtonet.
Tabell 2
Primere benyttet for de degenerate PCR-reaksjoner er basert på de hos Wang et al., 2000, bortsett fra HindKL som er basert på Co et al., 1992. Blandede baser er definert som følger: H=A+T+C, S=g+C, Y=C+T, K= G+T, M=A+C, R=A+g, W=A+T, V = A+C+G.
Tabell 3
Lett- og tungkjede PCR-reaksjonsblandinger for kloning av de 38SB19-variabelt område cDNA-sekvenser.
Tabell 4
5’ ende murin ledersekvens primere som ble benyttet for 38SB19 andre runde PCR-reaksjoner. 3’ endeprimerne er identiske med de som ble benyttet i førsterunde reaksjonene fordi de primet til de respektive konstantområdesekvenser.
Tabell 5
cDNA beregnede og LC/MS målte molekylvekter for de murine 38SB19-antistoff letteog tunge kjeder.
Patentkrav
1.
Antistoff som spesifikt binder CD38, der:
i. nevnte antistoff er i stand til drepe en CD38<+>-celle ved apoptose, antistoffavhengig cellemediert cytotoksisitet (ADCC) og komplementavhengig cytotoksisitet (CDC);
ii. nevnte antistoff omfatter minst en tungkjede, minst en lettkjede og minst et humant konstantområde;
iii. nevnte et tungkjede omfattter et variabelt område som har en aminosyresekvens ifølge SEQ ID NO: 66.
iv. nevnte et lettkjede omfatter et variabelt område som har en aminosyresekvens ifølge SEQ ID NO: 62.
2.
Antistoff ifølge krav 1, der antistoffet er i stand til å drepe nevnte CD38<+>-celle ved apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner.
3.
Antistoff ifølge krav 1 eller 2, der nevnte CD38<+>-celle er en lymfomcelle, en leukemicelle eller en multippel myelomcelle.
4.
Antistoff ifølge krav 3, der nevnte CD38<+>-celle er en non-Hodgkins lymfom (NHL)-celle, en Burkitts lymfom (BL)-celle, en multippel myelom (MM)-celle, en B-kronisk lymfocytisk leukemi (B-CLL)-celle, en B- og T-akutt lymfocytisk leukemi (ALL)-celle, en T-cellelymfom (TCL)-celle, en akutt myeloid leukemi (AML)-celle, en hårcelleleukemi (HCL)-celle, en Hodgkins lymfom (HL)-celle eller en kronisk myeloid leukemi (CML)-celle.
5.
Antistoff ifølge krav 1, der:
● nevnte antistoff i stand til drepe minst 24% av Daudi-lymfoaceller ved apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner; og/eller
● nevnte antistoff er i stand til å drepe mer enn 7% av Ramos lymfomaceller ved apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner, og/eller
● nevnte antistoff er i stand til drepe mer enn 11% av MOLP-8-multiple myelomaceller ved apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner og/eller
● nevnte antistoff er i stand til drepe mer enn 36% av SU-DHL-8 lymfomaceller ved apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner og/eller
● nevnte antistoff er i stand til drepe mer enn 62% av DND-41 leukemiceller ved apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner og/eller
● nevnte antistoff er i stand til drepe mer enn 27% av NU-DUL-1 lymfomaceller ved apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner og/eller
● nevnte antistoff er i stand til drepe mer enn 9% av JMV-13 leukemiceller apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner og/eller
● nevnte antistoff er i stand til drepe mer enn 4% av HC-1 leukemiceller ved apoptose i fravær av stromaceller eller stromaavledede cytokiner.
6.
Antistoff ifølge et hvilket som helst av de foregående krav, der antistoffet binder CD38 med en kD-verdi på 3 x 10<-9 >M eller lavere.
7.
Antistoff ifølge krav 1 - 6, der nevnte antistoff er et humanisert eller resurfaced antistoff.
8.
Antistoff ifølge krav 1 – 7, der nevnte humane konstante område er det humane IgG1/Ig Kappa-konstante område.
9.
Konjugat, omfattende antistoffet ifølge krav 1 -8 koblet til et cytotoksisk middel.
10.
Konjugat ifølge krav 9, der nevnte cytotoksiske middel er valgt fra gruppen bestående av et maytansinoid, et lite medikament, et tomaymycinderivat, et leptomycinderivat, en prodrug, et taksoid, CC-1065 og en CC-1065-analog.
11.
Konjugat ifølge krav 10, der:
● nevnte cytotoksiske middel er maytansin DM1 med formelen:
eller
● nevnte cytotoksiske middel er maytansin DM4 med formelen:
eller
NH O OH
MeO
● nevnte cytotoksiske middel er et tomaymycinderivat valgt fra gruppen bestående av:
o 8,8’-[1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[5-metoksy-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[1,5-pentandiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[1,4-butandiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[3-metyl-1,5-pentandiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[2,6-pyridindiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[4-(3-tert-butoksykarbonylaminopropyloksy)-2,6-pyridindiylbis-(metylenoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzo-diazepin-5-on];
o 8,8’-[5-(3-aminopropyloksy)-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[5-(N-metyl-3-tert-butoksykarbonylaminopropyl)-1,3-benzendiylbis-(metylen-oksy)]-bis[(S)-2-eth-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-{5-[3-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)propyloksy]-1,3-benzendiylbis-(metyleneoksy)}-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo-[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; o 8,8’-[5-acetyltiometyl-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[(S)-2-metylen-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o bis-{2-[(S)-2-metylen-7-metoksy-5-okso-1,3,,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-8-yloksy]-etyl}-karbaminsyre-tertbutylester;
o 8,8’-[3-(2-acetyltioetyl)-1,5-pentandiylbis(oksy)]-bis[(S)-2-metylen-7-metoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[5-(N-4-merkapto-4,4-dimetylbutanoyl)amino-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[7-metoksy-2-metylen-1,2,3,11atetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[5-(N-4-metylditio-4,4-dimetylbutanoyl)-amino-1,3-benzendiylbis(metylenoksy)]-bis[7-metoksy-2-metylen-1,2,3,11atetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[5-(N-metyl-N-(2-merkapto-2,2-dimetyletyl)amino-1,3-benzendiyl(metylenoksy)]-bis[7-metoksy-2-metylen-1,2,3,11atetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[5-(N-metyl-N-(2-metylditio-2,2-dimetyletyl)amino-1,3-benzendiyl(metylen-oksy)]-bis[7-metoksy-2-metylen-1,2,3,11atetrahydro-5H-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzo-diazepin-5-on];
o 8,8’-[(4-(2-(4-merkapto-4-metyl)-pentanamidoetoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11atetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzo-diazepin-5-on];
o 8,8’-[(1-(2-(4-metyl-4-metyldisulfanyl)-pentanamidoetoksy)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11atetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(4-(3-(4-metyl-4-metyldisulfanyl)-pentanamido-propoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11atetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(4-(4-(4-metyl-4-metyldisulfanyl)-pentanamidobutoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11atetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(4-(3-[4-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoyl)-piperazin-1-yl]-propyl)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(1-(3-[4-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoyl)-piperazin-1-yl]-propyl)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]; o 8,8’-[(4-(2-{2-[2-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(1-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11atetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(1-(2-{2-[2-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydro-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(4-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoylamino)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-etoksy]-etoksy}-etoksy)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(1-(2-[metyl-(2-metyl-2-metyldisulfanyl-propyl)-amino]-etoksy)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(4-(3-[metyl-(4-metyl-4-metyldisulfanylpentanoyl)-amino]-propyl)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(4-(3-[metyl-(2-metyl-2-metyldisulfanylpropyl)-amino]-propyl)-pyridin-2,6-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11a-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on];
o 8,8’-[(1-(4-metyl-4-metyldisulfanyl)-pentanamido)-benzen-3,5-dimetyl)-dioksy]-bis[(S)-2-et-(E)-yliden-7-dimetoksy-1,2,3,11atetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzo-diazepin-5-on], eller
● nevnte cytotoksiske middel er et leptomycinderivat valgt fra gruppen bestående av:
o (2-Metylsulfanyletyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5, 7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre-(2-metylsulfanyletyl)-amid;
o Bis-[(2-merkaptoetyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5,7,9, 11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre];
o (2-Merkaptoetyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5,7,9,11, 15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre;
o (2-Metyldisulfanyletyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5,7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre;
o (2-Metyl-2-metyldisulfanylpropyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5,7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaensyre;
o (2-Merkapto-2-metylpropyl)-amid av (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hydroksy-3,5,7,9,11,15,17-heptametyl-19-((2S,3S)-3-metyl-6-okso-3,6-dihydro-2H-pyran-2-yl)-8-okso-nonadela-2,10,12,16,18-pentaensyre.
12.
Antistoff ifølge et hvilket som helst av kravene 1 – 8, eller et konjugat ifølge et hvilket som helst av kravene 9 – 11, til bruk som et medikament.
13.
Farmasøytisk preparatinneholdende et antistoff ifølge et hvilket som helst av kravene 1 -8, eller et konjugat ifølge et hvilket som helst av kravene 9 -11, og en farmasøytisk akseptabel bærer eller eksipienser.
14.
Farmasøytisk preparat ifølge krav 13, der preparatet inneholder et ytterligere terapeutisk middel.
15.
Farmasøytisk preparat ifølge krav 14, der det ytterligere terapeutiske middel er en antagonist av epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vekstfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MPS) eller vaskulær endeltial vekstfaktor (VEGF), eller en antagonist av en reseptor for epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vekstfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MSP) eller vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF), inkludert HER2-reseptor, HER3-reseptor, c-MET og andre reseptortyrosinkinaser; eller nevnte ytterligere terapeutiske middel er et antistoff rettet mot en cluster av differensieringsantigen valgt fra en gruppe omfattende CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138 og CD152.
16.
Antistoff ifølge et hvilket som helst av kravene 1-8, eller et konjugat ifølge et hvilket som helst av kravene 9-11, til bruk for behandling av cancer eller autoimmun sykdom.
17.
Antistoff eller et konjugat til bruk for ifølge krav 16, der canceren er multipelt myelom.
18.
Antistoff eller et konjugat til bruk for ifølge krav 16, der canceren er B-celle lymfom.
19.
Antistoff eller et konjugat til bruk for ifølge et hvilket som helst av kravene 16-18, der behandlingen videre omfatter anvendelse av et ytterligere terapeutisk middel i det samme eller et annet preparat.
20.
Antistoff eller et konjugat til bruk for ifølge krav 19, der det ytterligere terapeutiske middel er en antagonist av fibroblast vekstfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MPS) eller vaskulær endeltial vekstfaktor (VEGF), eller en antagonist av en reseptor for epidermal vekstfaktor (EGF), fibroblast vekstfaktor (FGF), hepatocytt vekstfaktor (HGF), vevsfaktor (TF), protein C, protein S, plateavledet vekstfaktor (PDGF), heregulin, makrofagstimulerende protein (MSP) eller vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF), inkludert HER2-reseptor, HER3-reseptor, c-MET og andre reseptortyrosinkinaser, eller nevnte ytterligere terapeutiske middel er et antistoff rettet mot en cluster av differensieringsantigener valgt fra en gruppe omfattende CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138 og CD152.
21.
Polynukleotid der:
● nevnte polynukleotid koder for et antistoff som definert i et hvilket som helst av kravne 1 – 8; eller
● nevnte polynukleotid koder for en tungkjede og en lettkjede av et antistoff som definert i et hvilket som helst av kravene 1 – 8.
22.
Rekombinant vektor, omfattende et polynukleotid ifølge krav 21.
23.
Vertscelle, omfattende vektoren ifølge krav 22.

Claims (1)

  1. Fig. 1A Kun geite-a-muse-IgG-FITC
    Fig. 1B 38SB30 38SB31 38SB39
    Konsentrasjon (M) Konsentrasjon (M) %Annekisn V psotive celler %Anneksin V positive celler %A
    Konsentrasjon (µg/ml) %Spesifikk lysering Konsentrasjon (µg/ml) %Spesifikk lysering Konsentrasjon (µg/ml) %Spesifikk levedyktighet Konsentrasjon (µg/ml)
    Konsentrasjon (µg/ml) Konsentrasjon (mg/ml) %Spesifikk levedyktighet Konsentrasjon (mg/ml) Konsentrasjon (M) %Anneksin V positive celler Konsentrasjon (µg/ml) Konsentrasjon (µg/ml)
    ubehandlet hu38SB19 ubehandlet hu38SB19 %Anneksin V positive celler ubehandlet hu38SB19 ubehandlet hu38SB19 ubehandlet hu38SB19 Dager etter iv-tumorcelleinokulering Dager etter iv-tumorcelleinoluklering Dager (etter inokulering)
NO20091712A 2006-10-19 2007-10-16 konjugater omfattende disse og farmasøytiske preparater for behandling av cancer, samt polynukleotider som koder for antistoffene, rekombinant vektor og vertscelle. NO345911B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06291628A EP1914242A1 (en) 2006-10-19 2006-10-19 Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
PCT/IB2007/004172 WO2008047242A2 (en) 2006-10-19 2007-10-16 Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20091712L NO20091712L (no) 2009-05-13
NO345911B1 true NO345911B1 (no) 2021-10-11

Family

ID=37831721

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20091712A NO345911B1 (no) 2006-10-19 2007-10-16 konjugater omfattende disse og farmasøytiske preparater for behandling av cancer, samt polynukleotider som koder for antistoffene, rekombinant vektor og vertscelle.
NO20211026A NO20211026A1 (no) 2006-10-19 2007-10-16 Nye anti-CD38 antistoffer for behandling av cancer
NO2021044C NO2021044I1 (no) 2006-10-19 2021-10-13 isatuksimab

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20211026A NO20211026A1 (no) 2006-10-19 2007-10-16 Nye anti-CD38 antistoffer for behandling av cancer
NO2021044C NO2021044I1 (no) 2006-10-19 2021-10-13 isatuksimab

Country Status (43)

Country Link
US (5) US8153765B2 (no)
EP (4) EP1914242A1 (no)
JP (2) JP5607364B2 (no)
KR (5) KR101800328B1 (no)
CN (1) CN101616933B (no)
AR (1) AR063488A1 (no)
AU (1) AU2007311511C1 (no)
BR (1) BRPI0718130B1 (no)
CA (2) CA2663209C (no)
CL (3) CL2007002995A1 (no)
CO (1) CO6190555A2 (no)
CR (1) CR10679A (no)
CY (2) CY1122302T1 (no)
DK (1) DK2076540T3 (no)
DO (1) DOP2017000177A (no)
EA (1) EA025215B1 (no)
ES (1) ES2726754T3 (no)
GT (1) GT200900079A (no)
HK (1) HK1139956A1 (no)
HR (1) HRP20190742T1 (no)
HU (2) HUE043351T2 (no)
IL (1) IL197217B (no)
LT (2) LT2076540T (no)
MA (1) MA30895B1 (no)
ME (1) MEP10609A (no)
MX (1) MX2009004050A (no)
MY (1) MY159374A (no)
NL (1) NL301077I2 (no)
NO (3) NO345911B1 (no)
NZ (1) NZ575188A (no)
PE (1) PE20081171A1 (no)
PL (1) PL2076540T3 (no)
PT (1) PT2076540T (no)
RS (1) RS58716B1 (no)
SG (4) SG174777A1 (no)
SI (1) SI2076540T1 (no)
SV (1) SV2009003203A (no)
TN (1) TN2009000058A1 (no)
TW (4) TWI609885B (no)
UA (1) UA114879C2 (no)
UY (1) UY30655A1 (no)
WO (1) WO2008047242A2 (no)
ZA (1) ZA200901395B (no)

Families Citing this family (320)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SI2511297T1 (sl) 2004-02-06 2015-07-31 Morphosys Ag Proti -CD38 humana protitelesa in njihova uporaba
US9200061B2 (en) * 2004-02-06 2015-12-01 Morpho Sys AG Generation and profiling of fully human HuCAL gold®-derived therapeutic antibodies specific for human CD3i
US7999541B2 (en) * 2005-05-16 2011-08-16 Rapiscan Security Products, Inc. System and method for improving the analysis of polymorphic chemical substance forms and concentrations using NQR
EP1933857A2 (en) 2005-09-07 2008-06-25 Jennerex Biotherapeutics ULC Systemic treatment of metastatic and/or systemically-disseminated cancers using gm-csf-expressing poxviruses
KR101574920B1 (ko) 2005-10-12 2015-12-04 모르포시스 아게 인간 ｃｄ38에 특이적인 완전 인간 ｈｕｃａｌ ｇｏｌｄ-유도 치료 항체들의 생성 및 프로파일링
EP1914242A1 (en) * 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
US7259237B1 (en) 2006-12-29 2007-08-21 Miller Kent D Pan-antiviral peptides
ES2435779T3 (es) 2007-07-19 2013-12-23 Sanofi Agentes citotóxicos que comprenden nuevos derivados de tomaimicina y su uso terapéutico
PA8849001A1 (es) * 2008-11-21 2010-06-28 Lilly Co Eli Anticuerpos de c-met
EP2191840A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and melphalan
EP2191842A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cytarabine
EP2191843A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cyclophosphamide
EP2191841A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and vincristine
FR2947269B1 (fr) 2009-06-29 2013-01-18 Sanofi Aventis Nouveaux composes anticancereux
FR2949469A1 (fr) * 2009-08-25 2011-03-04 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application en therapeutique
CN107303302A (zh) 2009-09-14 2017-10-31 希拉金股份有限公司 溶瘤牛痘病毒组合癌症疗法
AR078471A1 (es) 2009-10-02 2011-11-09 Sanofi Aventis COMPUESTOS MAITANSINOIDES Y EL USO DE ESTOS PARA PREPARAR CONJUGADOS CON UN ANTICUERPO LOS CUALES SE UTILIZAN COMO AGENTES ANTICANCERIGENOS Y EL PROCEDIMIENTO DE PREPARACIoN DE ESTOS CONJUGADOS
UA107821C2 (en) 2009-12-22 2015-02-25 Roche Glycart Ag Antibody her3 and its application
ES2585350T3 (es) 2009-12-23 2016-10-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Anticuerpos anti Bv8 y usos de los mismos
US9220743B2 (en) 2010-01-22 2015-12-29 Nuovo Biologics, Llc Pan-antiviral peptides for protein kinase inhibition
CN103068405A (zh) 2010-04-15 2013-04-24 西雅图基因公司 靶向吡咯并苯并二氮杂卓结合物
MX368648B (es) 2010-04-15 2019-10-09 Seattle Genetics Inc Pirrolobenzodiazepinas usadas para tratar enfermedades proliferativas.
LT2580243T (lt) * 2010-06-09 2020-01-27 Genmab A/S Antikūnai prieš žmogaus cd38
FR2963007B1 (fr) 2010-07-26 2013-04-05 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application therapeutique
SG188345A1 (en) 2010-09-27 2013-04-30 Morphosys Ag Anti-cd38 antibody and lenalidomide or bortezomib for the treatment of multiple myeloma and nhl
UA112170C2 (uk) * 2010-12-10 2016-08-10 Санофі Протипухлинна комбінація, що містить антитіло, яке специфічно розпізнає cd38, і бортезоміб
JOP20210044A1 (ar) * 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
CA2824277C (en) * 2011-01-04 2021-08-31 Jennerex, Inc. Generation of antibodies to tumor antigens and generation of tumor specific complement dependent cytotoxicity by administration of oncolytic vaccinia virus
KR102351886B1 (ko) 2011-03-29 2022-01-17 이뮤노젠 아이엔씨 일-단계 방법에 의한 메이탄시노이드 항체 접합체의 제조
WO2012135517A2 (en) 2011-03-29 2012-10-04 Immunogen, Inc. Preparation of maytansinoid antibody conjugates by a one-step process
US20130066055A1 (en) 2011-04-21 2013-03-14 Bayer Intellectual Property Gmbh New binder-drug conjugates (adcs) and use thereof
JP6125489B2 (ja) * 2011-04-29 2017-05-10 アペクシジェン， インコーポレイテッド 抗ｃｄ４０抗体および使用方法
PT2707030T (pt) 2011-05-09 2020-05-22 Mayo Found Medical Education & Res Tratamentos de cancro
CN107936121B (zh) 2011-05-16 2022-01-14 埃泰美德(香港)有限公司 多特异性fab融合蛋白及其使用方法
SG11201400770SA (en) 2011-09-20 2014-04-28 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines as unsymmetrical dimeric pbd compounds for inclusion in targeted conjugates
BR112014009055B1 (pt) 2011-10-14 2021-12-14 Seattle Genetics, Inc. Compostos pirrolobenzodiazepinas, conjugados alvos, ligante de fármaco e uso dos ditos conjugados para tratar uma doença proliferativa
EP2751110B1 (en) 2011-10-14 2017-04-19 MedImmune Limited Asymmetrical bis-(5H-Pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-one) derivatives for the treatment of proliferative and autoimmune diseases
CN108164551A (zh) 2011-10-14 2018-06-15 西雅图基因公司 吡咯并苯并二氮杂卓和靶向结合物
US9399073B2 (en) 2011-10-14 2016-07-26 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines
BR112014009925B1 (pt) 2011-10-28 2022-09-20 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Construtores de polipeptídeos e seus usos
WO2013075740A1 (en) * 2011-11-23 2013-05-30 Sanofi Antibody purification method
JP6602012B2 (ja) * 2012-02-10 2019-11-06 シアトル ジェネティクス インコーポレーテッド Ｃｄ３０＋癌の検出と治療
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
RU2014148162A (ru) 2012-05-01 2016-06-20 Дженентек, Инк. Анти-pmel17 антитела и их иммуноконъюгаты
MX2015000359A (es) 2012-07-09 2015-04-14 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd79b.
SG11201500087VA (en) 2012-07-09 2015-02-27 Genentech Inc Immunoconjugates comprising anti-cd22 antibodies
WO2014022679A2 (en) 2012-08-02 2014-02-06 Genentech, Inc. Anti-etbr antibodies and immunoconjugates
EP2900232B1 (en) 2012-09-25 2017-11-15 MorphoSys AG Combinations and uses thereof
WO2014055415A1 (en) 2012-10-01 2014-04-10 Mayo Foundation For Medical Education And Research Cancer treatments
EP2904089A4 (en) 2012-10-04 2016-05-25 Immunogen Inc USE OF A PVDF MEMBRANE FOR PURIFYING CELL BINDING AGENT-CYTOTOXIC AGENT CONJUGATES
ES2680153T3 (es) 2012-10-12 2018-09-04 Adc Therapeutics Sa Conjugados de anticuerpos anti-PSMA-pirrolobenzodiazepinas
NZ707490A (en) 2012-10-12 2018-09-28 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-anti-cd22 antibody conjugates
RS57694B1 (sr) 2012-10-12 2018-11-30 Adc Therapeutics Sa Pirolobenzodiazepin - anti-psma konjugati antitela
KR101995620B1 (ko) 2012-10-12 2019-07-03 에이디씨 테라퓨틱스 에스에이 피롤로벤조디아제핀-항체 컨주게이트
US10695433B2 (en) 2012-10-12 2020-06-30 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
KR20150083994A (ko) 2012-10-12 2015-07-21 스피로즌 살 피롤로벤조디아제핀 및 그의 컨주게이트
KR101645905B1 (ko) 2012-10-12 2016-08-04 스피로즌 살 피롤로벤조디아제핀 및 그의 컨주게이트
US9745303B2 (en) 2012-10-12 2017-08-29 Medimmune Limited Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
MX364329B (es) 2012-10-12 2019-04-23 Medimmune Ltd Conjugados del anticuerpo pirrolobenzodiazepina.
WO2014068114A1 (en) 2012-11-05 2014-05-08 Morphosys Ag Radiolabelled antibody and uses thereof
EP2914630B1 (en) 2012-11-05 2021-03-03 Pierre Fabre Medicament Novel antigen binding proteins and their use as addressing product for the treatment of cancer
US10342869B2 (en) 2012-12-07 2019-07-09 The Regents Of The University Of California Compositions comprising anti-CD38 antibodies and lenalidomide
UA118255C2 (uk) * 2012-12-07 2018-12-26 Санофі Композиція, яка містить антитіло до cd38 і леналідомід
EP2968596B1 (en) 2013-03-13 2019-03-06 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
PT2968555T (pt) * 2013-03-13 2020-07-14 Univ California Composições compreendendo anticorpos anti-cd38 e carfilzomib
CA2904044C (en) 2013-03-13 2020-03-31 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
CN105189552B (zh) 2013-03-14 2019-08-02 基因泰克公司 抗b7-h4抗体和免疫缀合物
US11117975B2 (en) 2013-04-29 2021-09-14 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Anti-CD38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2B
MX370377B (es) * 2013-04-29 2019-12-11 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Anticuerpos anti-cd38 y fusiones con interferón alfa-2b atenuado.
ES2905675T3 (es) * 2013-05-06 2022-04-11 Sanofi Sa Proceso multietapa continuo para purificar anticuerpos
CA2918139A1 (en) 2013-08-12 2015-02-19 Genentech, Inc. 1-(chloromethyl)-2,3-dihydro-1h-benzo[e]indole dimer antibody-drug conjugate compounds, and methods of use and treatment
EP3046940B1 (en) 2013-09-17 2019-07-03 F.Hoffmann-La Roche Ag Methods of using anti-lgr5 antibodies
WO2015052535A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
US10010624B2 (en) 2013-10-11 2018-07-03 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP3054985B1 (en) 2013-10-11 2018-12-26 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
CN103513040B (zh) * 2013-10-16 2015-03-11 常晓天 蛋白cd38在制备类风湿性关节炎诊断标记物中的应用
PL3063173T3 (pl) 2013-10-31 2021-01-11 Sanofi Swoiste przeciwciała anty-cd38 do leczenia nowotworów u ludzi
US9493563B2 (en) 2013-11-04 2016-11-15 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Production of T cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins
JP6502942B2 (ja) 2013-12-13 2019-04-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｄ３３抗体とイムノコンジュゲート
WO2015095212A1 (en) 2013-12-16 2015-06-25 Genentech, Inc. 1-(chloromethyl)-2,3-dihydro-1h-benzo[e]indole dimer antibody-drug conjugate compounds, and methods of use and treatment
RU2698697C2 (ru) 2013-12-23 2019-08-29 Байер Фарма Акциенгезельшафт Конъюгаты связующего (ADC) с ингибиторами KSP
CN106029875A (zh) 2014-02-14 2016-10-12 塞勒克提斯公司 为了靶向存在于免疫细胞和病理细胞两者上的抗原而工程化的免疫治疗细胞
US10675352B2 (en) * 2014-02-14 2020-06-09 Centrose, Llc Extracellular targeted drug conjugates
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
US9732154B2 (en) 2014-02-28 2017-08-15 Janssen Biotech, Inc. Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
EP3122781B1 (en) * 2014-03-28 2020-01-01 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind to cd38 and cd3
UA119352C2 (uk) 2014-05-01 2019-06-10 Тева Фармасьютикалз Острейліа Пті Лтд Комбінація леналідоміду або помалідоміду і конструкції анти-cd38 антитіло-атенуйований інтерферон альфа-2b та спосіб лікування суб'єкта, який має cd38-експресуючу пухлину
WO2015179658A2 (en) 2014-05-22 2015-11-26 Genentech, Inc. Anti-gpc3 antibodies and immunoconjugates
WO2015195555A1 (en) 2014-06-16 2015-12-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Blocking cd38 using anti-cd38 antibody conjugated to protein g to protect nk cells
US10213513B2 (en) 2014-06-16 2019-02-26 Mayo Foundation For Medical Education And Research Treating myelomas
US10106620B2 (en) 2014-06-16 2018-10-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Blocking CD38 using anti-CD38 F(ab′)2 to protect NK cells
US9212225B1 (en) * 2014-07-01 2015-12-15 Amphivena Therapeutics, Inc. Bispecific CD33 and CD3 binding proteins
EP3169773B1 (en) 2014-07-15 2023-07-12 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells for adoptive cell therapy
US10617757B2 (en) 2014-08-08 2020-04-14 The Regents Of The University Of California Methods for treating multiple myeloma
KR102615681B1 (ko) 2014-08-28 2023-12-18 바이오아트라, 인코퍼레이티드 변형된 t 세포에 대한 조건부 활성 키메라 항원 수용체
ES2890669T3 (es) * 2014-09-09 2022-01-21 Janssen Biotech Inc Terapias de combinación con anticuerpos anti-CD38
MA40579A (fr) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech Inc Anticorps anti-cll-1 et immunoconjugués
SG11201701128YA (en) 2014-09-12 2017-03-30 Genentech Inc Cysteine engineered antibodies and conjugates
WO2016040723A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech, Inc. Anti-her2 antibodies and immunoconjugates
GB201416112D0 (en) 2014-09-12 2014-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
AR101848A1 (es) 2014-09-12 2017-01-18 Genentech Inc Anticuerpos de anti-b7-h4 e inmunoconjugados
RS60935B1 (sr) * 2014-09-16 2020-11-30 Innate Pharma Neutralizacija inhibitornih puteva u limfocitima
WO2016044396A1 (en) * 2014-09-17 2016-03-24 Genentech, Inc. Immunoconjugates comprising anti-her2 antibodies and pyrrolobenzodiazepines
US9446148B2 (en) 2014-10-06 2016-09-20 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-antibody compositions and methods of making and using the same
AU2015337858B2 (en) 2014-10-29 2020-09-24 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd. Interferon alpha2b variants
US11773166B2 (en) 2014-11-04 2023-10-03 Ichnos Sciences SA CD3/CD38 T cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins and methods of their production
MA40894A (fr) * 2014-11-04 2017-09-12 Glenmark Pharmaceuticals Sa Immunoglobulines hétéro-dimères reciblant des lymphocytes t cd3/cd38 et leurs procédés de production
EP3220959A1 (en) 2014-11-19 2017-09-27 ImmunoGen, Inc. Process for preparing cell-binding agent-cytotoxic agent conjugates
US10780096B2 (en) 2014-11-25 2020-09-22 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
NZ732144A (en) 2014-11-26 2020-04-24 Xencor Inc Heterodimeric antibodies that bind cd3 and tumor antigens
BR112017011166A2 (pt) 2014-11-26 2018-02-27 Xencor, Inc. anticorpos heterodiméricos que se ligam a cd3 e cd38
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
EA202092609A1 (ru) * 2014-12-04 2021-10-29 Янссен Байотек, Инк. Антитела к cd38 для лечения острого миелолейкоза
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
GB201506389D0 (en) * 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506402D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
KR20180015650A (ko) 2015-05-07 2018-02-13 아게누스 인코포레이티드 항-ox40 항체 및 이의 사용 방법
PL3294769T3 (pl) 2015-05-13 2021-07-05 Morphosys Ag Leczenie szpiczaka mnogiego (mm)
JP6827426B2 (ja) 2015-05-20 2021-02-10 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 軽鎖アミロイドーシス及びその他のｃｄ３８陽性血液悪性疾患の治療のための抗ｃｄ３８抗体
ES2936317T3 (es) 2015-05-29 2023-03-16 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos contra OX40 y usos de los mismos
CA2984635A1 (en) 2015-05-30 2016-12-08 Molecular Templates, Inc. De-immunized, shiga toxin a subunit scaffolds and cell-targeting molecules comprising the same
EP3310386B1 (en) 2015-06-22 2021-07-21 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies for heme malignancies with anti-cd38 antibodies and survivin inhibitors
CA2990076A1 (en) 2015-06-22 2016-12-29 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Antibody drug conjugates (adcs) and antibody prodrug conjugates (apdcs) with enzymatically cleavable groups
US20170044265A1 (en) 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
LT3313441T (lt) 2015-06-24 2024-05-27 Janssen Biotech, Inc. Imuniteto moduliavimas ir solidinių navikų gydymas antikūnais, kurie specifiškai suriša cd38
MA42895A (fr) 2015-07-15 2018-05-23 Juno Therapeutics Inc Cellules modifiées pour thérapie cellulaire adoptive
TW201707725A (zh) 2015-08-18 2017-03-01 美國馬友醫藥教育研究基金會 載體－抗體組合物及其製造及使用方法
CA2998611A1 (en) * 2015-09-14 2017-03-23 Leukemia Therapeutics, LLC Identification of novel diagnostics and therapeutics by modulating rhoh
TW201713360A (en) 2015-10-06 2017-04-16 Mayo Foundation Methods of treating cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
WO2017060322A2 (en) 2015-10-10 2017-04-13 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Ptefb-inhibitor-adc
MA43354A (fr) 2015-10-16 2018-08-22 Genentech Inc Conjugués médicamenteux à pont disulfure encombré
PT3827845T (pt) 2015-11-03 2022-07-08 Janssen Biotech Inc Formulações subcutâneas de anticorpos anti-cd38 e suas utilizações
US10781261B2 (en) 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
CN105837688B (zh) * 2015-11-20 2019-02-26 北京大学深圳研究生院 单域抗体及其编码基因，免疫毒素及其编码基因、制备方法、表达载体、应用，及宿主细胞
EP3383430A4 (en) 2015-12-02 2019-12-18 Agenus Inc. ANTIBODIES AND METHOD FOR USE THEREOF
EP3399861A4 (en) 2016-01-07 2019-08-07 Mayo Foundation for Medical Education and Research INTERFERON CANCER TREATMENT METHODS
WO2017120557A1 (en) * 2016-01-09 2017-07-13 Arbele Limited Cadherin-17 specific antibodies and cytotoxic cells for cancer treatment
GB201601431D0 (en) 2016-01-26 2016-03-09 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
TW201731532A (zh) 2016-02-05 2017-09-16 伊繆諾金公司 用於製備細胞結合劑-細胞毒性劑結合物之有效方法
GB201602359D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201602356D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
CA3014531A1 (en) 2016-02-12 2017-08-17 Mayo Foundation For Medical Education And Research Hematologic cancer treatments
WO2017149122A1 (en) 2016-03-04 2017-09-08 Morphosys Ag Clinical assessment of m-protein response in multiple myeloma
JP7034489B2 (ja) 2016-03-15 2022-03-14 アイタブメッド （エイチケイ） リミテッド 多重特異性Ｆａｂ融合タンパクおよびその使用
WO2017165439A1 (en) 2016-03-21 2017-09-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for improving the therapeutic index for a chemotherapeutic drug
CA3018341A1 (en) 2016-03-21 2017-09-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for reducing toxicity of a chemotherapeutic drug
SG10202008909VA (en) 2016-03-24 2020-10-29 Bayer Pharma AG Prodrugs of cytotoxic active agents having enzymatically cleavable groups
US10618969B2 (en) 2016-04-06 2020-04-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-binding agent compositions and methods of making and using the same
CA3021086C (en) 2016-04-15 2023-10-17 Bioatla, Llc Anti-axl antibodies, antibody fragments and their immunoconjugates and uses thereof
GB201607478D0 (en) 2016-04-29 2016-06-15 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
WO2017196847A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Variable new antigen receptor (vnar) antibodies and antibody conjugates targeting tumor and viral antigens
WO2017197234A1 (en) 2016-05-13 2017-11-16 Bioatla, Llc Anti-ror2 antibodies, antibody fragments, their immunoconjugates and uses thereof
JP7022080B2 (ja) 2016-05-27 2022-02-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 部位特異的抗体－薬物複合体の特徴付けのための生化学分析的方法
WO2017214182A1 (en) 2016-06-07 2017-12-14 The United States Of America. As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Fully human antibody targeting pdi for cancer immunotherapy
US11001636B2 (en) 2016-06-15 2021-05-11 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Specific antibody-drug-conjugates (ADCs) with KSP inhibitors and anti-CD123-antibodies
RU2019102008A (ru) 2016-06-28 2020-07-28 Ксенкор, Инк. Гетеродимерные антитела, которые связывают рецептор соматостатина 2-го типа
JP2019527678A (ja) * 2016-06-28 2019-10-03 ユーエムセー・ユトレヒト・ホールディング・ベー・フェー ＣＤ３８に特異的に結合する抗体によるＩｇＥ媒介疾患の治療
US11613586B2 (en) 2016-07-15 2023-03-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Methods and materials for assessing response to plasmablast- and plasma cell-depleting therapies
JP7241677B2 (ja) 2016-07-19 2023-03-17 テバ・ファーマシューティカルズ・オーストラリア・ピーティワイ・リミテッド 抗ｃｄ４７併用療法
US10478497B2 (en) * 2016-07-20 2019-11-19 Hybrigenics S.A. Combinations of inecalcitol with an anti-CD38 agent and their uses for treating cancer
CA3031559A1 (en) 2016-08-02 2018-02-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies targeting glypican-2 (gpc2) and use thereof
JP7093767B2 (ja) 2016-08-11 2022-06-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド ピロロベンゾジアゼピンプロドラッグ及びその抗体コンジュゲート
KR20190053203A (ko) 2016-09-01 2019-05-17 메이오 파운데이션 포 메디칼 에쥬케이션 앤드 리써치 Ｔ－세포 암을 표적화하는 방법 및 조성물
JP7525999B2 (ja) 2016-09-01 2024-07-31 マヨ ファウンデーション フォー メディカル エデュケーション アンド リサーチ キャリアー－ｐｄ－ｌ１結合剤組成物及び癌を処置する為にそれを使用する方法
KR20230010817A (ko) 2016-09-06 2023-01-19 메이오 파운데이션 포 메디칼 에쥬케이션 앤드 리써치 파클리탁셀-알부민-결합제 조성물 및 그의 사용 및 제조 방법
EP3509635A1 (en) 2016-09-06 2019-07-17 Vavotar Life Sciences LLC Methods of treating triple-negative breast cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
KR20230011473A (ko) 2016-09-06 2023-01-20 메이오 파운데이션 포 메디칼 에쥬케이션 앤드 리써치 Ｐｄ－ｌ１ 발현 암의 치료 방법
GB201617466D0 (en) 2016-10-14 2016-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
TWI788307B (zh) * 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
AU2017359467A1 (en) 2016-11-09 2019-05-02 Agenus Inc. Anti-OX40 antibodies, anti-GITR antibodies, and methods of use thereof
NZ750948A (en) 2016-11-21 2020-06-26 Cureab Gmbh Anti-gp73 antibodies and immunoconjugates
EP3558386A1 (de) 2016-12-21 2019-10-30 Bayer Aktiengesellschaft Prodrugs von cytotoxischen wirkstoffen mit enzymatisch spaltbaren gruppen
CA3045902A1 (en) 2016-12-21 2018-06-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies specific for flt3 and uses thereof
EP3558387B1 (de) 2016-12-21 2021-10-20 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Spezifische antikörper-wirkstoff-konjugate (adcs) mit ksp-inhibitoren
PE20191235A1 (es) 2016-12-21 2019-09-11 Bayer Pharma AG Conjugados de ligando-farmaco (adcs) con grupos escindibles enzimaticamente
CN109963570A (zh) 2017-01-21 2019-07-02 宁波知明生物科技有限公司 芍药苷-6’-o-苯磺酸酯在治疗干燥综合征的应用
ES2871001T3 (es) 2017-02-08 2021-10-28 Adc Therapeutics Sa Conjugados de pirrolobenzodiazepinas y anticuerpos
GB201702031D0 (en) 2017-02-08 2017-03-22 Medlmmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
JP2020517609A (ja) 2017-04-18 2020-06-18 メディミューン リミテッド ピロロベンゾジアゼピン複合体
BR112019021880A2 (pt) 2017-04-20 2020-06-02 Adc Therapeutics Sa Terapia de combinação com conjugado anticorpo anti-axl-droga
EP3625256A1 (en) 2017-05-19 2020-03-25 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Human monoclonal antibody targeting tnfr2 for cancer immunotherapy
CN110997723B (zh) * 2017-06-08 2023-09-26 黑带医疗有限公司 Cd38调节抗体
UA127900C2 (uk) 2017-06-14 2024-02-07 Ейдісі Терапьютікс Са Схема дозування для введення adc до cd19
MX2019015841A (es) 2017-06-20 2020-08-03 Inst Curie Celulas inmunes defectuosas para suv39h1.
KR20200017519A (ko) * 2017-06-20 2020-02-18 소렌토 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 Cd38 항체 약물 접합체
WO2019006280A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Lentigen Technology, Inc. HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES SPECIFIC TO CD33 AND METHODS OF USE
WO2019005208A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services ANTIBODIES TO HUMAN MESOTHELIN AND USES IN ANTICANCER THERAPY
EP3434692A1 (en) * 2017-07-24 2019-01-30 Encefa Compounds which specifically binds to cd38 for use in the treatment of neurodegenerative diseases
ES2911243T3 (es) * 2017-08-10 2022-05-18 Grifols Diagnostic Solutions Inc Composiciones, procedimientos y/o kits que comprenden un dominio extracelular recombinante de cd38 humano
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
SG11202000484TA (en) * 2017-08-16 2020-02-27 Black Belt Therapeutics Ltd Cd38 antibody
KR20200036860A (ko) * 2017-08-16 2020-04-07 블랙 벨트 테라퓨틱스 리미티드 Cd38 조정 항체
RS62928B1 (sr) 2017-08-18 2022-03-31 Medimmune Ltd Konjugati pirolobenzodiazepina
EP3681908A1 (en) 2017-09-13 2020-07-22 Teneobio, Inc. Heavy chain antibodies binding to ectoenzymes
BR112020005028A2 (pt) * 2017-09-14 2020-09-15 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited tratamento em combinação para câncer
CA3126646A1 (en) 2017-09-29 2019-04-04 Daiichi Sankyo Company, Limited Antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate
EP3692069A1 (en) * 2017-10-02 2020-08-12 Visterra, Inc. Antibody molecules to cd138 and uses thereof
CA3078800A1 (en) * 2017-10-10 2019-04-18 Sanofi Anti-cd38 antibodies and methods of use
EP3703749A1 (en) 2017-10-31 2020-09-09 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating high risk multiple myeloma
TW201932482A (zh) 2017-11-01 2019-08-16 美商奇諾治療有限公司 對b細胞成熟抗原具特異性之嵌合抗原受體及編碼聚核苷酸
CA3080509A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Process for producing a t cell composition
WO2019089848A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods associated with tumor burden for assessing response to a cell therapy
JP7357626B2 (ja) 2017-11-01 2023-10-06 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 操作された細胞の治療用組成物を生成するためのプロセス
MA49911A (fr) 2017-11-01 2020-06-24 Juno Therapeutics Inc Anticorps et récepteurs antigéniques chimériques spécifiques de l'antigene de maturation des lymphocytes b
US12031975B2 (en) 2017-11-01 2024-07-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
EP3706785A4 (en) * 2017-11-10 2021-08-04 Actinium Pharmaceuticals, Inc. COMBINATION THERAPY FOR TREATMENT OF A HEMATOLOGICAL DISEASE
EP3720480A2 (en) 2017-12-08 2020-10-14 Juno Therapeutics, Inc. Phenotypic markers for cell therapy and related methods
EP3720949A1 (en) 2017-12-08 2020-10-14 Juno Therapeutics, Inc. Serum-free media formulation for culturing cells and methods of use thereof
US20200384025A1 (en) 2017-12-08 2020-12-10 Juno Therapeutics, Inc. Process for producing a composition of engineered t cells
EP3694546A1 (en) 2018-01-30 2020-08-19 Cellectis Combination comprising allogeneic immune cells deficient for an antigen present on both t-cells and pathological cells and therapeutic antibody against said antigen
CN110144008B (zh) 2018-02-12 2021-03-19 杭州尚健生物技术有限公司 Cd38蛋白抗体及其应用
GB201803342D0 (en) 2018-03-01 2018-04-18 Medimmune Ltd Methods
AU2019232762B2 (en) * 2018-03-08 2023-11-16 Phanes Therapeutics, Inc. Anti-claudin 18.2 antibodies and uses thereof
GB201806022D0 (en) 2018-04-12 2018-05-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US12048745B2 (en) 2018-05-01 2024-07-30 Augusta University Research Institute, Inc. Methods for detecting and reversing immune therapy resistance
SG11202011306TA (en) 2018-05-16 2020-12-30 Janssen Biotech Inc Bcma/cd3 and gprdc5d/cd3 bispecific antibodies for use in cancer therapy
CN108752475B (zh) * 2018-06-14 2021-07-30 北京智仁美博生物科技有限公司 抗人cd38抗体及其用途
JP2021530461A (ja) 2018-07-10 2021-11-11 サノフイSanofi Ｃｄ３８およびｔｇｆ−ベータを標的とする、がんに対する組合せ療法
EP3820903A1 (en) 2018-07-12 2021-05-19 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Affinity matured cd22-specific monoclonal antibody and uses thereof
JP7526717B2 (ja) 2018-07-13 2024-08-01 ジェンマブ エー／エス Ｃｄ３８抗体のバリアントおよびその使用
US20240254252A1 (en) 2018-07-13 2024-08-01 Genmab A/S Trogocytosis-mediated therapy using cd38 antibodies
EP3833684A1 (en) 2018-08-08 2021-06-16 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services High affinity monoclonal antibodies targeting glypican-2 and uses thereof
EP3833759A1 (en) 2018-08-09 2021-06-16 Juno Therapeutics, Inc. Methods for assessing integrated nucleic acids
AU2019338999A1 (en) 2018-09-11 2021-03-18 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Anti-CD38 antibody, antigen-binding fragment thereof, and pharmaceutical use
CN109265551B (zh) * 2018-09-25 2020-09-15 华东师范大学 Cd38抗体、嵌合抗原受体和药物
CN109293773B (zh) * 2018-09-25 2020-09-04 上海邦耀生物科技有限公司 靶向cd38蛋白的抗体、嵌合抗原受体和药物
MX2021004465A (es) 2018-10-17 2021-08-24 Janssen Biotech Inc Método para proporcionar la administración subcutánea de anticuerpos anti-cd38.
WO2020087065A1 (en) 2018-10-26 2020-04-30 Teneobio, Inc. Heavy chain antibodies binding to cd38
AU2019372331A1 (en) 2018-11-01 2021-05-27 Juno Therapeutics, Inc. Methods for treatment using chimeric antigen receptors specific for B-cell maturation antigen
BR112021007626A2 (pt) 2018-11-01 2021-10-13 Juno Therapeutics, Inc. Receptores antigênicos quiméricos específicos pa-ra receptor acoplado à proteína g receptor de classe c, grupo 5, membro d (gprc5d)
US11634499B2 (en) 2018-11-13 2023-04-25 Janssen Biotech, Inc. Control of trace metals during production of anti-CD38 antibodies
EP3893841A1 (en) * 2018-12-14 2021-10-20 MorphoSys AG Antibody formulations
AU2020206308A1 (en) 2019-01-08 2021-07-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Cross-species single domain antibodies targeting mesothelin for treating solid tumors
US12122843B2 (en) 2019-01-22 2024-10-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services High affinity monoclonal antibodies targeting glypican-1 and methods of use
JP2022523710A (ja) * 2019-01-28 2022-04-26 マルチチュード インコーポレーテッド Ｃｄ４４に特異的な抗体
KR20210120048A (ko) 2019-01-28 2021-10-06 사노피 다발성 골수종의 치료 방법
KR20210133237A (ko) 2019-02-27 2021-11-05 제넨테크, 인크. 항-tigit 및 항-cd20 또는 항-cd38 항체로 치료를 위한 투약
MX2021011181A (es) 2019-03-15 2022-01-19 Morphosys Ag Anticuerpos anti-cd38 y sus composiciones farmacéuticas para el tratamiento de la enfermedad autoinmune mediada por autoanticuerpos.
EP3958898A1 (en) * 2019-04-23 2022-03-02 Sanofi Anti-cd38 antibodies and formulations
EP3962519A1 (en) 2019-05-01 2022-03-09 Juno Therapeutics, Inc. Cells expressing a chimeric receptor from a modified cd247 locus, related polynucleotides and methods
EP3962520A1 (en) 2019-05-01 2022-03-09 Juno Therapeutics, Inc. Cells expressing a recombinant receptor from a modified tgfbr2 locus, related polynucleotides and methods
MX2021013910A (es) 2019-05-14 2022-03-11 Sanofi Sa Metodos para administrar un anticuerpo anti-cd38 para tratar el mieloma multiple.
US11655302B2 (en) 2019-06-10 2023-05-23 Sanofi Anti-CD38 antibodies and formulations
BR112021026382A2 (pt) 2019-06-27 2022-02-08 Crispr Therapeutics Ag Uso de células t de receptor de antígenos quimérico e inibidores de células nk para tratamento de câncer
EP3994270A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 Fred Hutchinson Cancer Research Center Recombinant ad35 vectors and related gene therapy improvements
AU2020318781A1 (en) 2019-07-23 2022-02-10 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Immune cells defective for SUV39H1
CN112538114A (zh) * 2019-09-20 2021-03-23 上海普铭生物科技有限公司 抗人cd38抗体及其应用
JP2022553292A (ja) * 2019-10-21 2022-12-22 パーデュー・リサーチ・ファウンデーション 操作されたナチュラルキラー細胞、ならびに免疫療法およびオートファジー阻害技法においてそれを使用するための方法
EP4031250A1 (en) 2019-10-22 2022-07-27 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services High affinity nanobodies targeting b7h3 (cd276) for treating multiple solid tumors
US20220389103A1 (en) 2019-11-06 2022-12-08 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for treatment of hematologic cancers
GB201916150D0 (en) 2019-11-06 2019-12-18 Univ Of Ireland Galway Treatment of multiple myeloma
CN112876563B (zh) * 2019-11-29 2022-08-16 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 药物组合物及其制备方法和应用
AU2020397170A1 (en) 2019-12-05 2022-07-21 Sanofi-Aventis U.S. Llc Formulations of anti-CD38 antibodies for subcutaneous administration
MX2022006883A (es) 2019-12-06 2022-11-08 Sanofi Aventis Us Llc Uso de isatuximab para el tratamiento del mieloma multiple recidivante y/o refractario.
US20230032465A1 (en) 2019-12-12 2023-02-02 The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibody-drug conjugates specific for cd276 and uses thereof
JP2023507120A (ja) 2019-12-18 2023-02-21 テネオフォー， インコーポレイテッド Ｃｄ３８に結合する重鎖抗体
EP4090366A1 (en) 2020-01-16 2022-11-23 Genmab A/S Formulations of cd38 antibodies and uses thereof
US20230149462A1 (en) 2020-04-10 2023-05-18 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to cell therapy engineered with a chimeric antigen receptor targeting b-cell maturation antigen
KR20230005268A (ko) * 2020-04-24 2023-01-09 밀레니엄 파머슈티컬스 인코퍼레이티드 항-cd19 항체 및 이의 용도
CN115803824A (zh) 2020-05-13 2023-03-14 朱诺治疗学股份有限公司 鉴定与临床反应相关的特征的方法及其用途
US20240216508A1 (en) 2020-06-26 2024-07-04 Juno Therapeutics Gmbh Engineered t cells conditionally expressing a recombinant receptor, related polynucleotides and methods
US20220023344A1 (en) 2020-06-26 2022-01-27 Crispr Therapeutics Ag Allogeneic cell therapy of acute lymphoblastic leukemia using genetically engineered t cells targeting cd19
CN111808193B (zh) * 2020-06-30 2022-04-05 源道隆（苏州）医学科技有限公司 可结合人cd38的纳米抗体及其应用
AU2021316727A1 (en) 2020-07-30 2023-03-02 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Immune cells defective for SOCS1
CN114075285B (zh) * 2020-08-20 2023-05-30 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 抗人cd38人源化单克隆抗体及其应用
JP2023541457A (ja) 2020-09-14 2023-10-02 ブイオーアール バイオファーマ インコーポレーテッド Ｃｄ３８修飾のための化合物および方法
WO2022093745A1 (en) 2020-10-26 2022-05-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Single domain antibodies targeting sars coronavirus spike protein and uses thereof
CN112300281B (zh) * 2020-10-29 2021-06-11 杭州爱唯生命科技有限公司 含有nk细胞的药物组合物及其治疗癌症的用途
AU2021376374A1 (en) 2020-11-03 2023-06-29 Sanofi-Aventis U.S. Llc Use of isatuximab for the treatment of multiple myeloma
EP4240756A1 (en) 2020-11-04 2023-09-13 Juno Therapeutics, Inc. Cells expressing a chimeric receptor from a modified invariant cd3 immunoglobulin superfamily chain locus and related polynucleotides and methods
WO2022112469A1 (en) 2020-11-27 2022-06-02 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for diagnosis and monitoring of toxic epidermal necrolysis
WO2022117572A2 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Oncurious Nv An ltbr agonist in combination therapy against cancer
US20220202859A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Crispr Therapeutics Ag Cancer treatment using cd38 inhibitor and/or lenalidomide and t-cells expressing a chimeric antigen receptor
US20240109977A1 (en) 2021-01-14 2024-04-04 Morphosys Ag Anti-cd38 antibodies and their uses
JP2024505600A (ja) 2021-02-03 2024-02-06 モーツァルト セラピューティクス， インコーポレイテッド 結合剤およびそれを使用する方法
US20220275090A1 (en) 2021-02-22 2022-09-01 Janssen Biotech, Inc. Combination Therapies with Anti-CD38 Antibodies and PARP or Adenosine Receptor Inhibitors
TW202302642A (zh) 2021-03-01 2023-01-16 德商莫菲西斯公司 用於治療抗體介導移植物排斥用途之抗ｃｄ３８抗體
KR20230165771A (ko) 2021-03-03 2023-12-05 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 T 세포 요법 및 dgk 억제제의 조합
WO2022232612A1 (en) 2021-04-29 2022-11-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Lassa virus-specific nanobodies and methods of their use
KR20240018454A (ko) 2021-05-06 2024-02-13 주노 테라퓨틱스 게엠베하 T 세포의 자극 및 형질도입 방법
EP4337763A1 (en) 2021-05-10 2024-03-20 Institut Curie Methods for the treatment of cancer, inflammatory diseases and autoimmune diseases
WO2022238962A1 (en) 2021-05-12 2022-11-17 Crispr Therapeutics Ag Genetically engineered immune cells targeting cd70 for use in treating hematopoietic malignancies
TW202309077A (zh) 2021-05-12 2023-03-01 瑞士商Ｃｒｉｓｐｒ治療公司 用於治療實性瘤的靶向ｃｄ７０的基因工程化免疫細胞
CN113244175B (zh) * 2021-05-22 2022-11-04 苏州大学 一种免疫囊泡美登素偶联物及其制备方法与应用
WO2022248602A1 (en) 2021-05-25 2022-12-01 Institut Curie Myeloid cells overexpressing bcl2
CA3216228A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Cross species single domain antibodies targeting pd-l1 for treating solid tumors
CN113278075B (zh) * 2021-06-18 2021-12-14 芜湖森爱驰生物科技有限公司 一种炎症检测试剂盒
WO2022271987A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 TeneoFour, Inc. Anti-cd38 antibodies and epitopes of same
TW202321303A (zh) 2021-07-19 2023-06-01 德商莫菲西斯公司 抗pla2r自體抗體媒介膜性腎病變之治療
CA3225405A1 (en) 2021-07-28 2023-02-02 Alexander Joachim Paul Ungewickell Il15/il15r alpha heterodimeric fc-fusion proteins for the treatment of blood cancers
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
CN113896802A (zh) * 2021-10-09 2022-01-07 宜明昂科生物医药技术（上海）有限公司 靶向cd47和cd38的重组融合蛋白及其制备和用途
WO2023076876A1 (en) 2021-10-26 2023-05-04 Mozart Therapeutics, Inc. Modulation of immune responses to viral vectors
WO2023079494A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Janssen Biotech, Inc. Corticosteriod reduction in treatment with anti-cd38 antibodies
CA3237357A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating cancers and enhancing efficacy of bcmaxcd3 bispecific antibodies
CN113912727B (zh) * 2021-11-16 2023-05-02 福州迈新生物技术开发有限公司 抗cd38蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用
WO2023126458A1 (en) 2021-12-28 2023-07-06 Mnemo Therapeutics Immune cells with inactivated suv39h1 and modified tcr
CN114457017B (zh) * 2022-01-19 2023-10-17 四川大学华西第二医院 一种小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株HXLyAF-KBM及其应用
KR20240137075A (ko) 2022-01-28 2024-09-19 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 세포 조성물의 제조 방법
WO2023144303A1 (en) 2022-01-31 2023-08-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Cd38 as a biomarker and biotarget in t-cell lymphomas
WO2023159182A1 (en) 2022-02-18 2023-08-24 Rakuten Medical, Inc. Anti-programmed death-ligand 1 (pd-l1) antibody molecules, encoding polynucleotides, and methods of use
WO2023172917A1 (en) 2022-03-07 2023-09-14 Sanofi-Aventis U.S. Llc Use of isatuximab in combination with other agents for the treatment of multiple myeloma
WO2023187024A1 (en) 2022-03-31 2023-10-05 Institut Curie Modified rela protein for inducing interferon expression and engineered immune cells with improved interferon expression
WO2023215737A1 (en) 2022-05-03 2023-11-09 Genentech, Inc. Anti-ly6e antibodies, immunoconjugates, and uses thereof
WO2023213969A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Juno Therapeutics Gmbh Viral-binding protein and related reagents, articles, and methods of use
WO2023220655A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Celgene Corporation Methods to overcome drug resistance by re-sensitizing cancer cells to treatment with a prior therapy via treatment with a t cell therapy
WO2023230581A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Methods of manufacturing t cell therapies
WO2023230548A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Method for predicting response to a t cell therapy
WO2023240135A2 (en) 2022-06-07 2023-12-14 Actinium Pharmaceuticals, Inc. Bifunctional chelators and conjugates
WO2024040151A1 (en) 2022-08-18 2024-02-22 Pfizer Inc. Sirp alpha fusion protein and anti-cd38 antibody combination therapies
WO2024054944A1 (en) 2022-09-08 2024-03-14 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a t cell therapy and continuous or intermittent dgk inhibitor dosing
TW202423970A (zh) 2022-10-10 2024-06-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 Ｇｐｒｃ５ｄ ｔｃｂ及ｃｄ３８抗體之組合療法
TW202432177A (zh) 2022-10-31 2024-08-16 丹麥商珍美寶股份有限公司 Ｃｄ３８抗體及其用途
WO2024095173A1 (en) 2022-11-02 2024-05-10 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating cancers
WO2024100604A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Juno Therapeutics Gmbh Methods for manufacturing engineered immune cells
WO2024124132A1 (en) 2022-12-09 2024-06-13 Juno Therapeutics, Inc. Machine learning methods for predicting cell phenotype using holographic imaging
WO2024161021A1 (en) 2023-02-03 2024-08-08 Juno Therapeutics Gmbh Methods for non-viral manufacturing of engineered immune cells

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996016990A1 (en) * 1994-12-02 1996-06-06 The Wellcome Foundation Limited Humanized antibodies to cd38
WO2005103083A2 (en) * 2004-02-06 2005-11-03 Morphosys Ag Anti-cd38 human antibodies and uses therefor

Family Cites Families (126)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2429001A (en) 1946-12-28 1947-10-14 Axel H Stone Artificial hand
US2429004A (en) 1947-02-20 1947-10-14 Wachsman Michael Fabric contacting circuit closer for knitting machines
FR1516743A (fr) 1966-04-01 1968-02-05 Rhone Poulenc Sa Nouvel antibiotique et son procédé de préparation par culture de streptomyces croceus
US4307016A (en) 1978-03-24 1981-12-22 Takeda Chemical Industries, Ltd. Demethyl maytansinoids
US4256746A (en) 1978-11-14 1981-03-17 Takeda Chemical Industries Dechloromaytansinoids, their pharmaceutical compositions and method of use
JPS55102583A (en) 1979-01-31 1980-08-05 Takeda Chem Ind Ltd 20-acyloxy-20-demethylmaytansinoid compound
JPS55162791A (en) 1979-06-05 1980-12-18 Takeda Chem Ind Ltd Antibiotic c-15003pnd and its preparation
JPS5645483A (en) 1979-09-19 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd C-15003phm and its preparation
JPS5645485A (en) 1979-09-21 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd Production of c-15003pnd
EP0028683A1 (en) 1979-09-21 1981-05-20 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibiotic C-15003 PHO and production thereof
US4444887A (en) 1979-12-10 1984-04-24 Sloan-Kettering Institute Process for making human antibody producing B-lymphocytes
WO1982001188A1 (en) 1980-10-08 1982-04-15 Takeda Chemical Industries Ltd 4,5-deoxymaytansinoide compounds and process for preparing same
US4450254A (en) 1980-11-03 1984-05-22 Standard Oil Company Impact improvement of high nitrile resins
US4313946A (en) 1981-01-27 1982-02-02 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Chemotherapeutically active maytansinoids from Trewia nudiflora
US4315929A (en) 1981-01-27 1982-02-16 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Method of controlling the European corn borer with trewiasine
JPS57192389A (en) 1981-05-20 1982-11-26 Takeda Chem Ind Ltd Novel maytansinoid
US4716111A (en) 1982-08-11 1987-12-29 Trustees Of Boston University Process for producing human antibodies
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US5258498A (en) 1987-05-21 1993-11-02 Creative Biomolecules, Inc. Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins
IL89489A0 (en) 1988-03-09 1989-09-10 Hybritech Inc Chimeric antibodies directed against human carcinoembryonic antigen
KR900700134A (ko) 1988-04-15 1990-08-11 원본미기재 Il-2 수용체-특이적 키메릭 항체
CA1341411C (en) 1988-04-16 2002-12-17 Lutz Riechmann Method for producing fv fragments in eukaryotic cells
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
EP0768377A1 (en) 1988-09-02 1997-04-16 Protein Engineering Corporation Generation and selection of recombinant varied binding proteins
US5750373A (en) 1990-12-03 1998-05-12 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins having altered binding properties, M13 phagemids, and growth hormone variants
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5780225A (en) 1990-01-12 1998-07-14 Stratagene Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules
WO1991010737A1 (en) 1990-01-11 1991-07-25 Molecular Affinities Corporation Production of antibodies using gene libraries
DK0463151T3 (da) 1990-01-12 1996-07-01 Cell Genesys Inc Frembringelse af xenogene antistoffer
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5698426A (en) 1990-09-28 1997-12-16 Ixsys, Incorporated Surface expression libraries of heteromeric receptors
WO1992018619A1 (en) 1991-04-10 1992-10-29 The Scripps Research Institute Heterodimeric receptor libraries using phagemids
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
JPH07503124A (ja) 1991-06-14 1995-04-06 ゾーマ・コーポレーション 微生物によって生産される抗体断片とそれらの複合体
EP0940468A1 (en) 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
US5565332A (en) 1991-09-23 1996-10-15 Medical Research Council Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
ES2227512T3 (es) 1991-12-02 2005-04-01 Medical Research Council Produccion de anticuerpos contra auto-antigenos a partir de repertorios de segmentos de anticuerpos fijados en un fago.
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
ES2149768T3 (es) 1992-03-25 2000-11-16 Immunogen Inc Conjugados de agentes enlazantes de celulas derivados de cc-1065.
AU4025193A (en) 1992-04-08 1993-11-18 Cetus Oncology Corporation Humanized C-erbB-2 specific antibodies
WO1994002175A1 (en) * 1992-07-16 1994-02-03 Icos Corporation Alleviation of symptoms associated with inflammatory disease states
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
JPH09506262A (ja) 1993-12-08 1997-06-24 ジェンザイム・コーポレイション 特異的抗体の製造方法
DK0744958T3 (da) 1994-01-31 2003-10-20 Univ Boston Polyklonale antistofbiblioteker
US5516637A (en) 1994-06-10 1996-05-14 Dade International Inc. Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage
CA2761116A1 (en) 1995-04-27 1996-10-31 Amgen Fremont Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
CA2219486A1 (en) 1995-04-28 1996-10-31 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
JP2978435B2 (ja) 1996-01-24 1999-11-15 チッソ株式会社 アクリロキシプロピルシランの製造方法
US5916771A (en) 1996-10-11 1999-06-29 Abgenix, Inc. Production of a multimeric protein by cell fusion method
DK0942968T3 (da) 1996-12-03 2008-06-23 Amgen Fremont Inc Fuldt humane antistoffer, der binder EGFR
EP0970126B1 (en) 1997-04-14 2001-04-18 Micromet AG Novel method for the production of antihuman antigen receptors and uses thereof
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
WO1999054342A1 (en) 1998-04-20 1999-10-28 Pablo Umana Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
ES2199200T3 (es) 1998-08-27 2004-02-16 Spirogen Limited Pirrolobenzodiacepinas.
GB9818731D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Compounds
US7223397B1 (en) 1999-01-07 2007-05-29 Research Development Foundation Potentiation of anti-CD38-Immunotoxin cytotoxicity
NZ517772A (en) 1999-11-24 2004-03-26 Immunogen Inc Cytotoxic agents comprising taxanes and their therapeutic use
ES2274823T3 (es) 1999-12-29 2007-06-01 Immunogen, Inc. Agentes cototoxicos que comprenden doxorrubicinas y daunorrubicinas y su utilizacion terapeutica.
WO2001091793A1 (en) * 2000-05-26 2001-12-06 Smithkline Beecham Corporation Anti-rank ligand monoclonal antibodies useful in treatment of rank ligand mediated disorders
GB0013810D0 (en) * 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
US6333410B1 (en) 2000-08-18 2001-12-25 Immunogen, Inc. Process for the preparation and purification of thiol-containing maytansinoids
WO2002031140A1 (fr) 2000-10-06 2002-04-18 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cellules produisant des compositions d'anticorps
US6441163B1 (en) 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents
US6716821B2 (en) 2001-12-21 2004-04-06 Immunogen Inc. Cytotoxic agents bearing a reactive polyethylene glycol moiety, cytotoxic conjugates comprising polyethylene glycol linking groups, and methods of making and using the same
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
AU2003217912A1 (en) 2002-03-01 2003-09-16 Xencor Antibody optimization
US6534660B1 (en) 2002-04-05 2003-03-18 Immunogen, Inc. CC-1065 analog synthesis
US6756397B2 (en) 2002-04-05 2004-06-29 Immunogen, Inc. Prodrugs of CC-1065 analogs
AU2003236015A1 (en) 2002-04-09 2003-10-20 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Process for producing antibody composition
WO2003085119A1 (fr) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Procede d'amelioration de l'activite d'une composition d'anticorps de liaison avec le recepteur fc$g(g) iiia
US6596757B1 (en) 2002-05-14 2003-07-22 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising polyethylene glycol-containing taxanes and their therapeutic use
US7538195B2 (en) 2002-06-14 2009-05-26 Immunogen Inc. Anti-IGF-I receptor antibody
EP2364996B1 (en) 2002-09-27 2016-11-09 Xencor Inc. Optimized FC variants and methods for their generation
US7541440B2 (en) * 2002-09-30 2009-06-02 Immunomedics, Inc. Chimeric, human and humanized anti-granulocyte antibodies and methods of use
WO2004043989A2 (en) * 2002-11-07 2004-05-27 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to heparanase
EP1578446B1 (en) 2002-11-07 2015-04-08 ImmunoGen, Inc. Anti-cd33 antibodies and method for treatment of acute myeloid leukemia using the same
US7276497B2 (en) 2003-05-20 2007-10-02 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising new maytansinoids
WO2005014649A2 (en) * 2003-08-08 2005-02-17 Pharmacia Corporation Method for the preparation of molecules having antibody activity
US20050208627A1 (en) * 2003-09-18 2005-09-22 Bowdish Katherine S Elicitation of antibodies to self peptides in mice by immunization with dendritic cells
WO2005035741A1 (ja) 2003-10-09 2005-04-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. ゲノムが改変された細胞
AU2004284075A1 (en) 2003-10-22 2005-05-06 Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Pyrrolobenzodiazepine derivatives, compositions comprising the same and methods related thereto
WO2005056766A2 (en) * 2003-12-04 2005-06-23 Medimmune, Inc. TARGETED DRUG DELIVERY USING EphA2 OR Eph4 BINDING MOIETIES
JP5166861B2 (ja) 2004-03-09 2013-03-21 スピロゲン リミティッド ピロロベンゾジアゼピン
EP2357201B1 (en) * 2004-04-13 2017-08-30 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-P-selectin antibodies
US7850962B2 (en) * 2004-04-20 2010-12-14 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against CD20
AR049390A1 (es) * 2004-06-09 2006-07-26 Wyeth Corp Anticuerpos contra la interleuquina-13 humana y usos de los mismos
JP2008504029A (ja) * 2004-06-21 2008-02-14 ワシントン・ユニバーシティ 西ナイルウイルスに対する抗体ならびにその治療的および予防的使用
SI2471813T1 (sl) 2004-07-15 2015-03-31 Xencor, Inc. Optimirane Fc variante
JP5130044B2 (ja) * 2004-08-03 2013-01-30 イナート・ファルマ ４ｉｇ−ｂ７−ｈ３およびその対応するｎｋ細胞受容体を標的化する治療および診断方法ならびに組成物
US20060223147A1 (en) 2004-08-05 2006-10-05 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd., Process for producing glycoprotein composition
WO2006047350A2 (en) 2004-10-21 2006-05-04 Xencor, Inc. IgG IMMUNOGLOBULIN VARIANTS WITH OPTIMIZED EFFECTOR FUNCTION
US20060257396A1 (en) * 2004-12-15 2006-11-16 Jacobsen Jack S Abeta antibodies for use in improving cognition
EP1853718B1 (en) * 2005-02-15 2015-08-05 Duke University Anti-cd19 antibodies and uses in oncology
PL2567976T3 (pl) * 2005-03-23 2018-01-31 Genmab As Przeciwciała przeciw-cd38 przeznaczone do leczenia szpiczaka mnogiego
WO2006105338A2 (en) 2005-03-31 2006-10-05 Xencor, Inc. Fc VARIANTS WITH OPTIMIZED PROPERTIES
US20090123950A1 (en) * 2005-05-24 2009-05-14 Morphosys Ag Generation And Profiling Of Fully Human Hucal Gold®-Derived Therapeutic Antibodies Specific For Human CD38
DE102005030112A1 (de) 2005-06-28 2007-01-18 Patent-Treuhand-Gesellschaft für elektrische Glühlampen mbH Lötzusatzwerkstoff
AU2006299429B2 (en) 2005-10-03 2012-02-23 Xencor, Inc. Fc variants with optimized Fc receptor binding properties
PL1813614T3 (pl) 2006-01-25 2012-03-30 Sanofi Sa Środki cytotoksyczne zawierające nowe pochodne tomaymycyny
EP1864682A1 (en) * 2006-06-09 2007-12-12 Sanofi-Aventis Leptomycin derivatives
EP1914242A1 (en) * 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
EP2318048B1 (en) 2008-07-21 2019-05-29 Immunomedics, Inc. Structural variants of antibodies for improved therapeutic characteristics
SG188345A1 (en) * 2010-09-27 2013-04-30 Morphosys Ag Anti-cd38 antibody and lenalidomide or bortezomib for the treatment of multiple myeloma and nhl
JOP20210044A1 (ar) * 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
BR112014009925B1 (pt) * 2011-10-28 2022-09-20 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Construtores de polipeptídeos e seus usos
US20140065590A1 (en) 2012-02-20 2014-03-06 Knowre Korea Inc Method, system, and computer-readable recording medium for providing education service based on knowledge units
US10342869B2 (en) * 2012-12-07 2019-07-09 The Regents Of The University Of California Compositions comprising anti-CD38 antibodies and lenalidomide
ES2890669T3 (es) * 2014-09-09 2022-01-21 Janssen Biotech Inc Terapias de combinación con anticuerpos anti-CD38
EA202092609A1 (ru) * 2014-12-04 2021-10-29 Янссен Байотек, Инк. Антитела к cd38 для лечения острого миелолейкоза
WO2016111677A1 (en) * 2015-01-06 2016-07-14 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Adapter to concatenate connectors
JP6827426B2 (ja) * 2015-05-20 2021-02-10 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 軽鎖アミロイドーシス及びその他のｃｄ３８陽性血液悪性疾患の治療のための抗ｃｄ３８抗体
EP3310386B1 (en) * 2015-06-22 2021-07-21 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies for heme malignancies with anti-cd38 antibodies and survivin inhibitors
US20170044265A1 (en) * 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
US10781261B2 (en) * 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
PT3827845T (pt) * 2015-11-03 2022-07-08 Janssen Biotech Inc Formulações subcutâneas de anticorpos anti-cd38 e suas utilizações
CA3078800A1 (en) * 2017-10-10 2019-04-18 Sanofi Anti-cd38 antibodies and methods of use
US11605302B2 (en) 2020-11-10 2023-03-14 Rockwell Collins, Inc. Time-critical obstacle avoidance path planning in uncertain environments

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996016990A1 (en) * 1994-12-02 1996-06-06 The Wellcome Foundation Limited Humanized antibodies to cd38
WO2005103083A2 (en) * 2004-02-06 2005-11-03 Morphosys Ag Anti-cd38 human antibodies and uses therefor

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Ellis J.H. ET AL. Engineered anti-CD38 monoclonal antibodies for immunotherapy of multiple myeloma. J Immunol. 1995, vol. 155, no. 2, side 925-937. , Dated: 01.01.0001 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN101616933B (zh) 2015-06-10
SG174777A1 (en) 2011-10-28
CL2007002995A1 (es) 2008-05-16
TWI538917B (zh) 2016-06-21
KR20090078330A (ko) 2009-07-17
TWI609884B (zh) 2018-01-01
IL197217B (en) 2019-12-31
NO20211026A1 (no) 2009-05-13
CA2663209A1 (en) 2008-04-24
LTPA2020536I1 (lt) 2020-12-28
AU2007311511C1 (en) 2021-11-04
JP5607364B2 (ja) 2014-10-15
AU2007311511A1 (en) 2008-04-24
PE20081171A1 (es) 2008-09-26
NL301077I1 (no) 2020-12-02
EP2076540A2 (en) 2009-07-08
HRP20190742T1 (hr) 2019-06-14
PT2076540T (pt) 2019-06-06
TN2009000058A1 (en) 2010-08-19
MY159374A (en) 2016-12-30
US20110262454A1 (en) 2011-10-27
IL197217A0 (en) 2011-08-01
EA025215B1 (ru) 2016-12-30
EP2076540B1 (en) 2019-02-27
KR20150023010A (ko) 2015-03-04
ES2726754T3 (es) 2019-10-09
WO2008047242A8 (en) 2009-08-06
NO2021044I1 (no) 2021-10-13
RS58716B1 (sr) 2019-06-28
ME00614B (me) 2011-12-20
JP2010506582A (ja) 2010-03-04
CY1122302T1 (el) 2021-01-27
DOP2017000177A (es) 2017-09-15
KR101852317B1 (ko) 2018-04-25
CA2989609A1 (en) 2008-04-24
UY30655A1 (es) 2008-05-31
TW201518322A (zh) 2015-05-16
AU2007311511B9 (en) 2020-11-12
UA114879C2 (uk) 2017-08-28
KR101534452B1 (ko) 2015-07-06
US8153765B2 (en) 2012-04-10
TW200823236A (en) 2008-06-01
CL2017001580A1 (es) 2018-03-02
US20090304710A1 (en) 2009-12-10
WO2008047242A3 (en) 2008-06-26
WO2008047242A9 (en) 2009-02-05
DK2076540T3 (da) 2019-05-13
NO20091712L (no) 2009-05-13
JP2014221761A (ja) 2014-11-27
SV2009003203A (es) 2009-10-27
CL2012002012A1 (es) 2012-11-05
HUS2000048I1 (hu) 2020-12-28
CO6190555A2 (es) 2010-08-19
US20170343550A1 (en) 2017-11-30
EP3498735A1 (en) 2019-06-19
MEP10609A (en) 2011-12-20
KR20150119976A (ko) 2015-10-26
ZA200901395B (en) 2010-06-30
MA30895B1 (fr) 2009-11-02
SG173345A1 (en) 2011-08-29
SI2076540T1 (sl) 2019-06-28
TW201630938A (zh) 2016-09-01
US20200408765A1 (en) 2020-12-31
PL2076540T3 (pl) 2019-08-30
SG10201501733QA (en) 2015-04-29
SG10202012950TA (en) 2021-02-25
NL301077I2 (nl) 2021-02-03
MX2009004050A (es) 2009-04-28
AR063488A1 (es) 2009-01-28
EA200970393A1 (ru) 2009-12-30
WO2008047242A2 (en) 2008-04-24
GT200900079A (es) 2010-07-09
CN101616933A (zh) 2009-12-30
US20120156218A1 (en) 2012-06-21
CY2020039I2 (el) 2021-05-05
BRPI0718130A2 (pt) 2013-11-05
LT2076540T (lt) 2019-06-10
TW201734053A (zh) 2017-10-01
TWI609885B (zh) 2018-01-01
KR20140105035A (ko) 2014-08-29
CA2663209C (en) 2018-02-13
KR20170129960A (ko) 2017-11-27
AU2007311511B2 (en) 2013-08-22
EP1914242A1 (en) 2008-04-23
EP3909980A1 (en) 2021-11-17
JP6121366B2 (ja) 2017-04-26
NZ575188A (en) 2012-07-27
HUE043351T2 (hu) 2019-08-28
KR101800328B1 (ko) 2017-11-22
BRPI0718130B1 (pt) 2022-05-03
CY2020039I1 (el) 2021-03-12
HK1139956A1 (en) 2010-09-30
CR10679A (es) 2009-06-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20200408765A1 (en) Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer
AU2020264364B2 (en) Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer

Legal Events

Date Code Title Description
SPCF Filing of supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: ISATUKSIMAB; REG. NO/DATE: EU/1/20/1435 20200612

Spc suppl protection certif: 2021044

Filing date: 20211013

SPCG Granted supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: ISATUKSIMAB; REG. NO/DATE: EU/1/20/1435 20200612

Spc suppl protection certif: 2021044

Filing date: 20211013

Extension date: 20321016