JP2019527678A - ＣＤ３８に特異的に結合する抗体によるＩｇＥ媒介疾患の治療 - Google Patents

Abstract

本発明は、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体によるＩｇＥ媒介疾患の治療に関する。

Description

（配列表）
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して提出される配列表を含み、その全内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれている。２０１７年６月２０日に作成されたＡＳＣＩＩテキストファイルは、ファイル名がＪＢＩ５０９１ＷＯＰＣＴ＿ＳＴ２５．ｔｘｔであり、サイズは２６キロバイトである。

（発明の分野）
本発明は、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体によるＩｇＥ媒介疾患の治療に関する。

先進国の人口のかなりの割合がアレルギーを患っており、その数は益々増加している。この衰弱した状態にあると現在推定されるのは３人に１人であり、特筆すべきは、この個体群のうちの大部分が小児だということである。アレルギーの病態は、環境抗原に繰り返し曝された後にＩｇＥ媒介免疫応答の誘発の調節が不全になることによってもたらされる。ＩｇＥ媒介アレルギーは、エフェクター細胞であるマスト細胞、好塩基球、及び活性化好酸球上に発現する高親和性ＩｇＥ受容体（ＦｃεＲＩ）にＩｇＥが結合することによって引き起こされる。これらの高親和性相互作用の結果として、安定したＦｃεＲＩ：ＩｇＥ複合体がエフェクター細胞の表面上に提示される。アレルゲンに曝露されることによってＩｇＥ：ＦｃεＲＩ複合体の架橋が起こり、最終的にはクラスターが形成され、このため、エフェクター細胞の活性化、脱顆粒、及び蓄積されたアレルギー促進性媒介物質の放出が誘導され、これがアレルギー反応の開始につながる。

アナフィラキシー型過敏症を誘発する一般的な環境アレルゲンは、花粉、食物、イエダニ、動物の鱗屑、真菌胞子及び昆虫毒に見られる。アトピー性アレルギーは、アナフィラキシー型過敏症と関連があり、様々な疾患、例えば、喘息、アレルギー性鼻炎及び結膜炎（枯草熱）、湿疹、蕁麻疹及び食物アレルギーを包含する。更に、アレルギー反応は、昆虫刺傷によって引き起こされ得るアナフィラキシーショックのように、命に関わる危険な状態につながる可能性がある。

例えば、食事性アレルギーは、何百万人もの人々に影響を及ぼし、実質的な病的状態及び生活の質の悪化の原因となり、個体、家族及び社会に与える負担となる（Ｍｉｌｌｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｌｌｅｒｇｙ ２００７；６２：７１７〜２２．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊ．１３９８−９９９５．２００７．０１４２５．ｘ．）。最近の研究では、一般集団における食事性アレルギーの有病率は、成人で約５％、小児で８％と推定されている（Ｓｉｃｈｅｒｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１４；１３３：２９１〜３０７．ｅ５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊａｃｉ．２０１３．１１．０２０．）。米国内のアレルギー患児における食事性アレルギーの経済的負担は、児童一人当たり年間４１８４ドルであると推定されている（Ｇｕｐｔａ Ｒ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＭＡ Ｐｅｄｉａｔｒ ２０１３；１６７：１０２６．ｄｏｉ：１０．１００１／ｊａｍａｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ．２０１３．２３７６）。アレルギー反応は、口腔及び皮膚に限定される軽度の症状から、命に関わる可能性のあり得る重篤な呼吸器症状及び心血管症状まで様々であり得る。食物アレルギー反応の緊急対応としては、エピネフリン、コルチコステロイド及び抗ヒスタミン剤の投与が挙げられる。根治的治療がないため、惹起アレルゲンを厳格に避けることがしばしば必要である。それでもなお、偶発的な摂取が起こることにより、入院や集中治療室での治療につながる場合が多い。

ＩｇＥは、アレルギーに加えて、自己免疫疾患に関与し、その病因に寄与する（Ｅｔｔｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ ５０：２５〜３５，２０１７；Ｈｏｌｇａｔｅ，Ｗｏｒｌｄ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ７：１７，２０１４）。

アレルギー及び自己免疫疾患などのＩｇＥ媒介疾患の治療選択肢に対するニーズが存在する。

本発明は、ＩｇＥ媒介疾患を治療する方法であって、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体を、ＩｇＥ媒介疾患の治療を必要とする対象に、ＩｇＥ媒介疾患を治療するのに十分な時間にわたって投与することを含む方法を提供する。

ＤＡＲＺＡＬＥＸ（商標）（ダラツムマブ）によって治療された多発性骨髄腫の患者において、総ＩｇＥ並びにオオアワガエリ特異的ＩｇＥ及びイエダニ特異的ＩｇＥが経時的に低下することを示す。

「ＣＤ３８」は、ヒトＣＤ３８タンパク質（同義語：ＡＤＰリボシルシクラーゼ１、ｃＡＤＰｒヒドロラーゼ１、環状ＡＤＰリボースヒドロラーゼ１）を指す。ヒトＣＤ３８は、ＧｅｎＢａｎｋ受入れ番号ＮＰ ００１７６６に、及び配列番号１に示されているアミノ酸配列を有する。ＣＤ３８が、細胞質ドメインを表すアミノ酸残基１〜２１と、膜貫通ドメインを表すアミノ酸残基２２〜４２と、ＣＤ３８の細胞外ドメインを表す残基４３〜３００と、を有する単一パスタイプＩＩ膜タンパク質であることは周知である。

配列番号１
ＭＡＮＣＥＦＳＰＶＳＧＤＫＰＣＣＲＬＳＲＲＡＱＬＣＬＧＶＳＩＬＶＬＩＬＶＶＶＬＡＶＶＶＰＲＷＲＱＱＷＳＧＰＧＴＴＫＲＦＰＥＴＶＬＡＲＣＶＫＹＴＥＩＨＰＥＭＲＨＶＤＣＱＳＶＷＤＡＦＫＧＡＦＩＳＫＨＰＣＮＩＴＥＥＤＹＱＰＬＭＫＬＧＴＱＴＶＰＣＮＫＩＬＬＷＳＲＩＫＤＬＡＨＱＦＴＱＶＱＲＤＭＦＴＬＥＤＴＬＬＧＹＬＡＤＤＬＴＷＣＧＥＦＮＴＳＫＩＮＹＱＳＣＰＤＷＲＫＤＣＳＮＮＰＶＳＶＦＷＫＴＶＳＲＲＦＡＥＡＡＣＤＶＶＨＶＭＬＮＧＳＲＳＫＩＦＤＫＮＳＴＦＧＳＶＥＶＨＮＬＱＰＥＫＶＱＴＬＥＡＷＶＩＨＧＧＲＥＤＳＲＤＬＣＱＤＰＴＩＫＥＬＥＳＩＩＳＫＲＮＩＱＦＳＣＫＮＩＹＲＰＤＫＦＬＱＣＶＫＮＰＥＤＳＳＣＴＳＥＩ

本明細書で使用される「抗体」は、広義を意味し、マウス、ヒト、ヒト化及びキメラ化モノクローナル抗体を含むモノクローナル抗体、抗体フラグメント、二重特異性抗体又は多重特異性抗体、二量体の、四量体の若しくは多量体の抗体、一本鎖抗体、抗体ドメイン、及び必要とされる特異性の抗原結合部位を含む免疫グロブリン分子の任意のその他の修飾された構造を含む、免疫グロブリン分子を包含する。

免疫グロブリンは、重鎖定常ドメインアミノ酸配列に応じて、５つの主要なクラス、すなわちＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭに割り当てられ得る。ＩｇＡ及びＩｇＧは、アイソタイプのＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４へと更に細分類される。いずれの脊椎動物種の抗体軽鎖も、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて２つの明確に異なるタイプ、すなわちカッパ（κ）及びラムダ（λ）のうちの一方に割り当てることができる。

「抗体フラグメント」とは、重鎖及び／又は軽鎖抗原結合部位、例えば、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、２、及び３、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、２、及び３、重鎖可変領域（ＶＨ）、又は軽鎖可変領域（ＶＬ）を保持する免疫グロブリン分子の一部を指す。抗体フラグメントは、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価のフラグメントであるＦａｂフラグメントと、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂフラグメントを含む二価のフラグメントであるＦ（ａｂ）_２フラグメントと、ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメントと、抗体の１本のアームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖフラグメントと、ＶＨドメイン又はＶＬドメインからなる、ドメイン抗体（ｄＡｂ）断片（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４〜６，１９８９）と、を含む。ＶＨドメイン及びＶＬドメインは、操作され、合成リンカーを介して結合して様々な種類の一本鎖抗体設計を形成することができ、その場合、ＶＨ／ＶＬドメインは、分子内で対合するか、又はＶＨドメイン及びＶＬドメインが別々の一本鎖抗体構築物によって発現される場合には分子間で対合して、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）又はダイアボディなどの一価の抗原結合部位を形成する。これらは、例えば、国際公開第１９９８／４４００１号、同第１９８８／０１６４９号、同第１９９４／１３８０４号、及び同第１９９２／０１０４７号に記載されている。これらの抗体フラグメントは、当業者に周知の技術を使用して得られ、これらのフラグメントは完全長抗体の場合と同一の方法で、有用性に関してスクリーニングされる。

「単離された抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体又は抗体フラグメントを指す（例えば、ＣＤ３８に特異的に結合する単離された抗体は、ヒトＣＤ３８以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかし、ＣＤ３８に特異的に結合する単離された抗体は、Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ（カニクイザル）ＣＤ３８など、ヒトＣＤ３８のオルソログなどの他の抗原に対して交差反応性を有する可能性がある。二重特異性抗体の場合、二重特異性抗体は、対象の２つの抗原に特異的に結合し、対象のその２つの抗原以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない。更に、単離された抗体は、他の細胞物質及び／又は化学物質を実質的に含まない場合がある。「単離された抗体」は、純度が８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の抗体など、高純度に単離された抗体を包含する。

抗体可変領域は、３つの「抗原結合部位」で隔てられた「フレームワーク」領域からなる。抗原結合部位は、様々な用語を用いて定義される：ＶＨ内に３つ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）及びＶＬ内に３つ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）ある、相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列可変性に基づく（Ｗｕ及びＫａｂａｔ、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １３２：２１１〜５０、１９７０年、Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．，１９９１）、ＶＨ内に３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）及びＶＬ内に３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）ある、「超可変領域」、「ＨＶＲ」、又は「ＨＶ」は、Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ １９６：９０１〜１７，１９８７）によって定義されるような構造的に超可変である抗体可変ドメインの領域を指す。他の用語には、「ＩＭＧＴ−ＣＤＲ」（Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐａｒａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７：５５〜７７、２００３年）及び「特異性決定残基使用」（ＳＤＲＵ）（Ａｌｍａｇｒｏ、Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔ、１７：１３２〜４３、２００４）が含まれる。Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）データベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ＿ｉｍｇｔ＿ｏｒｇ）は、抗原結合部位についての標準化付番及び定義を提供する。ＣＤＲ、ＨＶ、及びＩＭＧＴの表記間の対応関係については、Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ Ｃｏｍｐａｒａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２７：５５〜７７，２００３に記載されている。

本明細書で使用するところの「Ｃｈｏｔｈｉａ残基」とは、Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ（Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２７３：９２７〜４８、１９９７）に準じて番号付けされた抗体ＶＬ残基及びＶＨ残基である。

「フレームワーク」又は「フレームワーク配列」は、抗原結合部位として定義されたものを除く、可変領域の残りの配列である。抗原結合部位は上記のような様々な用語によって定義され得るため、フレームワークの正確なアミノ酸配列は抗原結合部位がどのように定義されたかによって決まる。

「ヒト化抗体」とは、抗原結合部位が非ヒト種に由来し、可変領域フレームワークがヒト免疫グロブリン配列に由来する、抗体を指す。ヒト化抗体はフレームワーク領域内に置換を含む可能性があることから、かかるフレームワークは、発現したヒト免疫グロブリン又は生殖細胞系列遺伝子配列の完全な複製物でなくてもよい。

「ヒト抗体」とは、フレームワーク及び抗原結合部位の両方がヒト起源の配列に由来する重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を有する抗体を指し、ヒト対象に投与されたときに免疫応答が最小限に抑えられるように最適化される。抗体が定常領域を含む場合、定常領域もヒト起源の配列に由来する。

ヒト抗体は、抗体の可変領域がヒト生殖系列免疫グロブリン又は再編成された免疫グロブリン遺伝子を使用する系から得られる場合のヒト起源の配列に「由来する」重鎖可変領域又は軽鎖可変領域を含む。そのような系は、ファージ上に提示されたヒト免疫グロブリン遺伝子ライブラリ、及び本明細書に記載されるヒト免疫グロブリン遺伝子座を保有するマウスなど、トランスジェニックの非ヒト動物を含む。「ヒト抗体」は、抗体及びヒト免疫グロブリン遺伝子座を得るために用いられる系間の違い、体細胞突然変異の導入、又はフレームワーク若しくは抗原結合部位、又はこれらの両方への意図的な置換の導入により、ヒト生殖系列免疫グロブリン又は再編成された免疫グロブリン遺伝子と比較したときにアミノ酸の相違を含み得る。典型的には、「ヒト抗体」は、ヒト生殖系列免疫グロブリン又は再編成された免疫グロブリン遺伝子によってコード化されているアミノ酸配列と、アミノ酸配列において少なくとも約８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％同一である。場合によっては、「ヒト抗体」は、例えばＫｎａｐｐｉｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２９６：５７〜８６，２０００に記載されるヒトフレームワーク配列分析から得られたコンセンサスフレームワーク配列、又は、例えば、Ｓｈｉ ｅｔ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ３９７：３８５〜９６，２０１０及び国際公開第２００９／０８５４６２号に記載される、ファージ上に提示されるヒト免疫グロブリン遺伝子ライブラリに組み込まれた合成ＨＣＤＲ３を含有し得る。

ヒト免疫グロブリン配列に由来するヒト抗体は、合成ＣＤＲ及び／若しくは合成フレームワークを組み込んだファージディスプレイなどの系を用いて生成するか、又はインビトロ突然変異誘発を行って抗体の特性を向上させることによって、インビボのヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在しない抗体を得ることができる。

抗原結合部位が非ヒト種に由来する抗体は、ヒト抗体の定義には含まれない。

「組換え抗体」は、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニック若しくはトランスクロモソーマルである動物（例えば、マウス又はラット）又はそれから調製されたハイブリドーマ（以下で更に説明する）から単離された抗体、当該抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から単離された抗体、組換えコンビナトリアル抗体ライブラリから単離された抗体、並びにヒト免疫グロブリン遺伝子配列を他のＤＮＡ配列にスプライスすることを伴う任意の他の手段により調製、発現、作製、又は単離された抗体、あるいは二重特異的抗体などのＦａｂアーム交換を用いてインビトロで生成される抗体などの、組換え手段により調製、発現、作製、又は単離されるすべての抗体を含む。

「モノクローナル抗体」とは、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性及び親和性を示し、又は二重特異性モノクローナル抗体の場合には、２つの別個のエピトープに対する二重結合特異性を示す。したがって、「モノクローナル抗体」とは、抗体重鎖からのＣ末端リシンの除去などの可能な周知の変化、又はメチオニン酸化又はアスパラギン若しくはグルタミン脱アミドなどのアミノ酸の翻訳後修飾による変化を除き、各重鎖及び各軽鎖のアミノ酸組成が単一である抗体集団のことを指す。モノクローナル抗体は、抗体集団中に不均一なグリコシル化を有し得る。モノクローナル抗体は、単一特異性若しくは多重特異性、又は一価、二価、若しくは多価であり得る。二価抗体は、モノクローナル抗体という用語に含まれる。

「エピトープ」は、抗体が特異的に結合する抗原の一部を意味する。エピトープは通常、アミノ酸又は多糖類側鎖のような部分の化学的に活性な（極性、非極性又は疎水性など）表面基からなり、特定の三次元構造特性及び特定の電荷特性を有し得る。エピトープは、立体配座空間単位を形成する隣接した及び／又は隣接していないアミノ酸からなり得る。隣接していないエピトープについて、抗原の直鎖配列の異なる部分からのアミノ酸は、タンパク質分子の折り畳みによって、三次元空間において近接する。

「変異体」とは、例えば、置換、挿入、又は欠失のような１つ以上の改変によって参照ポリペプチド又は参照ポリヌクレオチドと異なるポリペプチド又はポリヌクレオチドを指す。

「〜と組み合わせて」とは、２つ以上の治療薬を、混合物の状態で一緒に、単剤として同時に、又は単剤として任意の順序で逐次、対象に投与することを意味する。一般に、各剤は、当該剤に対して決定された所定の用量及び／又はタイムスケジュールで投与されることになる。

「治療する」又は「治療」は、その目的が、望ましくない生理学的変化又は疾患の進行を遅らせる（減らす）ことであったり、あるいは、治療中に有益な又は所望の臨床的結果を提供することであったりする、治療的処置を指す。有益な又は所望の臨床結果としては、症状の緩和、疾患の程度の軽減、安定した（すなわち、悪化しない）疾患状態、疾患の進行の遅延又は鈍化、疾患状態の改善又は緩和が挙げられる。治療を必要とする対象としては、望まない生理的変化又は疾患をすでに有している対象、並びに生理的変化又は疾患を有しやすい傾向がある対象が含まれる。

「治療有効量」は、必要な投薬量及び期間で所望の治療結果を得るための有効量を指す。治療有効量は、個体の疾患重症度、年齢、性別、及び体重、並びに治療薬又は治療薬の組み合わせがその個体において所望の応答を引き出す能力などの因子によって様々であり得る。有効な治療薬又は治療薬の組み合わせの代表的な指標としては、例えば、対象の健全性の改善、疾患の症状低減（例えば、くしゃみ、せき、鼻詰まり、鼻腔（鼻炎）又は肺（ぜんそく）の粘液産生、掻痒、腫脹の低減）、及び／又は対象におけるＩｇＥレベルの減少などが挙げられる。

「患者」は、あらゆるヒト又は非ヒト動物を含む。「非ヒト動物」は、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、爬虫類などの哺乳動物及び非哺乳動物などのすべての脊椎動物を包含する。「患者」及び「対象」という用語は、互換的に使用される。

「特異的結合」又は「特異的に結合する」又は「結合する」とは、抗体が抗原又はかかる抗原内部のエピトープに、他の抗原に対するより高い親和性で結合することを指す。典型的には、抗体は、約１×１０^−８Ｍ以下、例えば約１×１０^−９Ｍ以下、約１×１０^−１０Ｍ以下、約１×１０^−１１Ｍ以下、又は約１×１０^−１２Ｍ以下の平衡解離定数（Ｋ_Ｄ）で抗原又はかかる抗原内部のエピトープに結合し、非特異的抗原（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）への結合に関しては、典型的には、そのＫ_Ｄより少なくとも１００倍小さいＫ_Ｄで結合する。解離定数は標準的手法を用いて測定することができる。しかし、抗原又は抗原内部のエピトープに特異的に結合する抗体は、他の関連抗原、例えば、ヒト又はサル、例えば、Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ（カニクイザル、ｃｙｎｏ）、Ｐａｎ ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓ（チンパンジー、ｃｈｉｍｐ）、又はＣａｌｌｉｔｈｒｉｘ ｊａｃｃｈｕｓ（コモンマーモセット、ｍａｒｍｏｓｅｔ）などの他の種由来の同じ抗原（ホモログ）に対して交差反応性を有する場合がある。単一特異性抗体は、１つの抗原又は１つのエピトープに特異的に結合するのに対し、二重特異性抗体は、２つの異なる抗原又は２つの異なるエピトープに特異的に結合する。

「ＩｇＥ媒介疾患」とは、少なくとも部分的に、対象におけるＩｇＥレベルの増加によって媒介される疾患を指す。「ＩｇＥレベルの増加」とは、本明細書に記載の方法論を用いて及び製造業者の指示に従ってＩｍｍｕｎｏＣＡＰアッセイ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して、総ＩｇＥレベルが＞２ｋＵ／Ｌである及び／又はアレルゲン特異的ＩｇＥのレベルが≧０．３５ｋＵ／Ｌであることを指す。ｇＥ媒介疾患は、たとえＩｇＥの閾値＞２ｋＵ／Ｌが全身的に達成されていないとしても、体内の局所的及び／又は全身的なＩｇＥレベルに起因して非定型症状が現れる場合がある、ＩｇＥレベル又は活性の増加に伴う疾患を包含する。

本発明は、少なくとも部分的に、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体で対象を治療することによって、対象の総ＩｇＥ及びアレルゲン特異的ＩｇＥが経時的に減少することが確認されたことに基づいている。特定の理論に束縛されることを望まないが、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＩｇＥを発現及び／又は分泌するＢ細胞の死滅を媒介すると考えられている。

アレルギー性疾患は従来より、ＩｇＥ媒介疾患として説明されている。アレルギー性疾患の臨床症状としては、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、及び昆虫刺傷又は薬物に対するアナフィラキシー反応が挙げられる。アレルギー性疾患は、特定のアレルゲン（花粉、虫刺傷、薬物、又は食物など）に対する免疫システムの過敏性反応によって引き起こされる。アレルギー性疾患の最も重篤な形態は、アナフィラキシーショックである。

アレルギーを定義する特異的免疫反応は、アレルゲンを対象とする（感作）免疫グロブリンＥ型（ＩｇＥ）が存在することを特徴とする。感作後にアレルゲンに曝露されると、マスト細胞及び好塩基球に結合したＩｇＥの架橋が引き起こされて、ヒスタミンなどの血管作用物質が多く放出される。したがって、ＩｇＥを対象とする療法が、ここ数年の研究課題となっている。ＩｇＥに対するモノクローナル抗体（Ｘｏｌａｉｒ（登録商標）（オマリズマブ））を用いる療法は、アレルギー性喘息［４］において有効であることが証明されており、有効性は、他の（アトピー性）疾患（例えば、アレルギー性鼻炎）及びアトピー性皮膚炎においても研究されている（Ｂａｅｎａ−Ｃａｇｎａｎｉ ＣＥ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１４；１４：１４９〜５４．ｄｏｉ：１０．１０９７／ＡＣＩ．００００００００００００００４４）。更に、食事性アレルギーに対する（経口）免疫療法（ＩＴ）におけるＸｏｌａｉｒ（登録商標）（オマリズマブ）の役割が活発に研究されており、最初の結果は、空気アレルゲンに対するＩＴに関する先行研究と同様に、治療中の副作用が減少することを実証している（Ｗｏｏｄ ＲＡ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊａｃｉ．２０１５．１０．００５）。現在研究段階にある別のモノクローナル抗体はｑｕｉｌｉｚｕｍａｂであり、これは、ＩｇＥを発現する膜細胞を標的にすることによって、ＩｇＥ産生を妨害する（Ｇａｕｖｒｅａｕ ＧＭ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ２０１４；６：２４３ｒａ８５．ｄｏｉ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．３００８９６１）。

ＩｇＥを標的にする異なる方法は、（特異的）ＩｇＥを産生するプラズマ細胞を枯渇させることによることができる。Ｂ細胞の枯渇がＩｇＥレベル及びアトピー性疾患の臨床症状に与える影響は、以前にも調査されたことがある。例えば、Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）（リツキシマブ）は、３ヶ月又は６月の時点で、プラシーボと比較して、特発性血小板減少性紫斑病の患者の血清ＩｇＥレベルを有意に減少させなかった（Ｄａｓｇｕｐｔａ Ａ ｅｔ ａｌ．，Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１３；９：３９．ｄｏｉ：１０．１１８６／１７１０−１４９２−９−３９）。プロテアソーム阻害により（悪性）プラズマ細胞を標的にするＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）（ボルテゾミブ）もまた、（自己）抗体媒介疾患の治療選択肢として研究されている（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＡＳ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１６．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｌｉｍ．２０１６．０２．００９）。慢性喘息のマウスモデルでは、ボルテゾミブによる治療により特異的ＩｇＥレベルが低下した（Ｗｅｇｍａｎｎ Ｍ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ａｒｃｈ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１２；１５８：４３〜５３．ｄｏｉ：１０．１１５９／０００３３０１０３）。

本発明は、治療効果のある量の、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体を、ＩｇＥ媒介疾患の治療を必要とする対象に、ＩｇＥ媒介疾患を治療するのに十分な時間にわたって投与することを含む、ＩｇＥ媒介疾患の治療方法を提供する。

本発明はまた、ＩｇＥ媒介疾患を有する対象の治療用途のための、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体を提供する。

本発明はまた、ＩｇＥ媒介疾患の治療のための薬剤の製造における、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体の使用を提供する。

本発明はまた、ＩｇＥ媒介疾患の治療のための医薬組成物の調製における、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体の使用を提供する。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、アレルゲンに対するアレルギー反応である。

代表的なアレルゲンとしては、イエダニ、ペット及び花粉などのアレルゲンのような空中アレルゲン、例えばヒョウヒダニ（Dermatophagoides spp）又はヤケヒョウヒダニ（D. pteronyssinus）、コナヒョウヒダニ（D. farinae）及びササラダニ（D. microceras）、シワダニ（Euroglyphus maynei）又はタマニクダニ（Blomia sp．）から得られるイエダニアレルゲンと、ゴキブリ又は膜翅目に存在する昆虫からのアレルゲンと、花粉、例えば、木、草、雑草の花粉からのアレルゲンと、動物、特にネコ、イヌ、ウマ、及びげっ歯類からのアレルゲンと、菌類、例えば、アスペルギルス、アルテルナリア（Altemaria）又はクラドスポリウムからのアレルゲンと、動物及び植物抗原、並びに薬物、洗剤、金属、及びイソシアネートなどの免疫促進物質を含む職業性アレルゲンと、ラテックス又はアミラーゼなどの生産物に存在するアレルゲンと、が挙げられる。

代表的なアレルゲンとしては、果物、野菜及び乳などの、食物過敏症の原因である経口摂取アレルゲン、例えば、ピーナッツ、魚（例えば、タラ）、卵白、甲殻類（例えば、エビ）、乳（例えば、牛乳）、小麦、穀物、バラ科果物（リンゴ、プラム、イチゴ）、ユリ科、アブラナ科、ナス科及びセリ科の野菜、木本性ナッツ、ゴマ、ピーナッツ、ダイズ、及びその他のマメ科アレルゲン、スパイス、メロン、アボカド、マンゴ、イチジク、バナナなどに存在する食物アレルゲンも挙げられる。

ＩｇＥ媒介反応をもたらし得る非抗原特異的刺激には、感染、刺激物、例えば煙、燃焼煙霧、ディーゼル排気微粒子及び二酸化硫黄、運動、寒さ並びに情動ストレスが含まれる。

特定の遺伝的背景を持つアトピー個体及び非アトピー個体における特異的過敏性反応は、食物（例えば、マメ科植物、ピーナッツ）中のたんぱく質、毒（例えば、昆虫、ヘビ）、ワクチン、ホルモン、抗血清、酵素、ラテックス、抗生物質、筋弛緩薬、ビタミン、細胞毒素、鎮静剤、及びデキストリンなどの多糖類、デキストラン鉄、並びにポリゲリンに曝露されることによって生じる場合がある。

いくつかの実施形態では、アレルゲンは、花粉、チリダニ、食物アレルゲン、植物アレルゲン、動物の鱗屑、虫刺され、真菌、胞子、かび、ラテックス、又は薬物である。

ＩｇＥは、炎症及び自己免疫の発症機序にも関連している。ＳＬＥ及びＲＡに加えて、ＩｇＥ自己抗体が、水疱性類天疱瘡（ＢＰ）及び慢性特発性蕁麻疹（ＣＳＵ）などの皮膚自己免疫疾患、全身性硬化症、甲状腺炎、多発性硬化症及びアトピー性皮膚炎において検出されている。ＩｇＥ自己抗体と自己抗原の免疫複合体は、マスト細胞及び好塩基球の脱顆粒を引き起こし得、樹枝状細胞（ＤＣ）によるＩＦＮα、ＴＮＦ及びＩＬ−６の産生を誘導し得る。ＩｇＥは、交差抗原提示を促進して、ＣＤ４及びＣＤ８Ｔ細胞の両方の反応を誘導し、かつ、ＤＣ活性化によりＢ細胞増殖及びプラズマ細胞分化を活発にし得る（Ｅｔｔｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ ５０：２５〜３５，２０１７；Ｈｏｌｇａｔｅ，Ｗｏｒｌｄ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ７：１７，２０１４に掲載）。抗ＩｇＥ抗体であるＸｏｌａｉｒ（登録商標）（オマリズマブ）は、有効性を示すことが報告されているか、又は少なくとも非アレルギー性喘息、チャーグ・ストラウス症候群、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、鼻ポリープ、食事性アレルギー、慢性蕁麻疹及び血管性水腫、木村病、肥満細胞症、アナフィラキシー、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群において研究が進められている（Ｈｏｌｇａｔｅ，Ｗｏｒｌｄ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ７：１７，２０１４；ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ ｒｅｇｉｓｔｒｙ）。したがって、ＩｇＥ産生細胞を枯渇させる抗ＣＤ３８抗体がこれらの疾患に有効であることが期待できる。

ＩｇＥ媒介疾患としては、喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、線維症（例えば、ＩＰＦなどの肺線維症）、アレルギー性喘息、食事性アレルギー、アナフィラキシー、接触皮膚炎、アレルギー性胃腸疾患、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性紫斑病（ヘノッホ・シェーンライン）、毛細血管拡張性運動失調症、チャーグ・ストラウス症候群、湿疹、腸炎、胃腸疾患、移植片対宿主反応、高ＩｇＥ（ヨブ）症候群、過敏症（例えば、アナフィラキシー型過敏症、カンジダ症、脈管炎）、ＩｇＥ骨髄腫、炎症性腸疾患（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎、不確定大腸炎及び感染性大腸炎）、粘膜炎（例えば、口腔粘膜炎、胃腸粘膜炎、鼻粘膜炎及び直腸炎）、壊死性腸炎及び食道炎、寄生虫病（例えば、トリパノソーマ症）、過敏症脈管炎、蕁麻疹、コリン性蕁麻疹、ウィスコット・アルドリッチ症候群、狼瘡、１型糖尿病、木村病、鼻ポリープ、好酸球性胃腸炎、好酸球性中耳炎、ラテックスアレルギー、シェーグレン症候群及び関節リウマチ、肥満細胞症、皮膚肥満細胞症、慢性又は再発性突発性血管性浮腫が挙げられる。

いくつかの実施形態では、狼瘡は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、円板状紅斑性狼瘡、亜急性皮膚エリテマトーデス、新生児ループス又は薬剤誘発性ループスであり得る。

加えて、ＩｇＥレベルを低下させることによって治療可能であり得る疾患は、疾患自体がＩｇＥの上昇に関連しているか否かにかかわらず、ＩｇＥ媒介疾患の範囲内である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、アレルギー性喘息である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、蕁麻疹である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、血管性水腫である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、食事性アレルギーである。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、アトピー性皮膚炎である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、アナフィラキシーである。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、皮膚肥満細胞症である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、アレルギー性鼻炎である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、鼻ポリープである。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、木村病である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、好酸球性中耳炎である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、好酸球性胃腸炎である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、ラテックスアレルギーである。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、水疱性類天疱瘡（ＢＰ）である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、関節リウマチ（ＲＡ）である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、急性又は慢性である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、急性疾患である。

いくつかの実施形態では、ＩｇＥ媒介疾患は、慢性疾患である。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、配列番号４の重鎖可変領域（ＶＨ）及び配列番号５の軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗体と、ＣＤ３８への結合に関して競合する。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＣＤ３８（配列番号１）の領域ＳＫＲＮＩＱＦＳＣＫＮＩＹＲ（配列番号２）及び領域ＥＫＶＱＴＬＥＡＷＶＩＨＧＧ（配列番号３）に少なくとも結合する。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、配列番号６、７、及び８のそれぞれ重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、配列番号９、１０、及び１１のそれぞれ軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、配列番号６、７、８、９、１０及び１１のそれぞれＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、配列番号４のアミノ酸配列と９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一であるＶＨと、配列番号５のアミノ酸配列と９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一であるＶＬと、を含む。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、配列番号４のＶＨと、配列番号５のＶＬと、を含む。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、配列番号１２のアミノ酸配列と９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列と９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖と、を含む。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、配列番号１２の重鎖と、配列番号１３の軽鎖と、を含む。

本発明の方法で使用され得る例示的なＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＤＡＲＺＡＬＥＸ（商標）（ダラツムマブ）である。ＤＡＲＺＡＬＥＸ（商標）（ダラツムマブ）は、それぞれ配列番号４及び５に示される重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）のアミノ酸配列、配列番号６、７及び８のそれぞれ重鎖ＣＤＲ ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びに配列番号９、１０及び１１のそれぞれ軽鎖ＣＤＲ ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＩｇＧ１／κサブタイプのものであり、米国特許第７，８２９，６７３号に記載されている。ＤＡＲＺＡＬＥＸ（商標）（ダラツムマブ）の重鎖のアミノ酸配列を配列番号１２に示し、軽鎖のアミノ酸配列を配列番号１３に示す。

配列番号２
ＳＫＲＮＩＱＦＳＣＫＮＩＹＲ
配列番号３
ＥＫＶＱＴＬＥＡＷＶＩＨＧＧ
配列番号４
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＶＳＧＦＴＦＮＳＦＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡ
ＩＳＧＳＧＧＧＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＦＣＡＫＤＫ
ＩＬＷＦＧＥＰＶＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号５
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤ
ＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＰＴＦＧＱ
ＧＴＫＶＥＩＫ
配列番号６
ＳＦＡＭＳ
配列番号７
ＡＩＳＧＳＧＧＧＴＹＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号８
ＤＫＩＬＷＦＧＥＰＶＦＤＹ
配列番号９
ＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡ
配列番号１０
ＤＡＳＮＲＡＴ
配列番号１１
ＱＱＲＳＮＷＰＰＴＦ
配列番号１２
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＶＳＧＦＴＦＮＳＦＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＧＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＦＣＡＫＤＫＩＬＷＦＧＥＰＶＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号１３
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

本発明の方法で使用され得る他の例示的なＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、
米国特許第７，８２９，６７３号に記載される、それぞれ配列番号１４及び１５のＶＨ配列及びＶＬ配列を含むｍＡｂ００３である。ｍＡｂ００３のＶＨ及びＶＬは、ＩｇＧ１／κとして表現され得る。
配列番号１４
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＦＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＶＩＰＦＬＧＩＡＮＳＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＤＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＤＩＡＡＬＧＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳ
配列番号１５
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＱＫＰＥＫＡＰＫＳＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ

米国特許第７，８２９，６７３号に記載される、それぞれ配列番号１６及び１７のＶＨ配列及びＶＬ配列を含むｍＡｂ０２４。ｍＡｂ０２４のＶＨ及びＶＬは、ＩｇＧ１／κとして表現され得る。
配列番号１６
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＫＩＳＣＫＧＳＧＹＳＦＳＮＹＷＩＧＷＶＲＱＭＰＧＫＧＬＥＷＭＧＩＩＹＰＨＤＳＤＡＲＹＳＰＳＦＱＧＱＶＴＦＳＡＤＫＳＩＳＴＡＹＬＱＷＳＳＬＫＡＳＤＴＡＭＹＹＣＡＲＨＶＧＷＧＳＲＹＷＹＦＤＬＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号１７
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＧＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ

米国特許第８，０８８，８９６号に記載される、それぞれ配列番号１８及び１９のＶＨ配列及びＶＬ配列を含むＭＯＲ−２０２（ＭＯＲ−０３０８７）。ＭＯＲ−２０２のＶＨ及びＶＬは、ＩｇＧ１／κとして表現され得る。
配列番号１８
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＹＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＧＤＰＳＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＰＬＶＹＴＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号１９
ＤＩＥＬＴＱＰＰＳＶＳＶＡＰＧＱＴＡＲＩＳＣＳＧＤＮＬＲＨＹＹＶＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＤＳＫＲＰＳＧＩＰＥＲＦＳＧＳＮＳＧＮＴＡＴＬＴＩＳＧＴＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＱＴＹＴＧＧＡＳＬＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧＱ

米国特許第８，１５３，７６５号に記載される、それぞれ配列番号２０及び２１のＶＨ配列及びＶＬ配列を含むイサツキシマブ。イサツキシマブのＶＨ及びＶＬは、ＩｇＧ１／κとして表現され得る。
配列番号２０
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＡＫＰＧＴＳＶＫＬＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＷＭＱＷＶＫＱＲＰＧＱＧＬＥＷＩＧＴ
ＩＹＰＧＤＧＤＴＧＹＡＱＫＦＱＧＫＡＴＬＴＡＤＫＳＳＫＴＶＹＭＨＬＳＳＬＡＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＧＤ
ＹＹＧＳＮＳＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
配列番号２１
ＤＩＶＭＴＱＳＨＬＳＭＳＴＳＬＧＤＰＶＳＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＴＶＶＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＳ
ＡＳＹＲＹＩＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＡＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＶＱＡＥＤＬＡＶＹＹＣＱＱＨＹＳＰＰＹＴＦＧＧ
ＧＴＫＬＥＩＫ

本発明の方法において使用することができる他の例示的な抗ＣＤ３８抗体としては、国際公開第０５／１０３０８３号、同第０６／１２５６４０号、同第０７／０４２３０９号、同第０８／０４７２４２号、又は同第１４／１７８８２０号に記載されているものが挙げられる。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ダラツムマブ又はそのバイオ後続品である。

（認可済み標準製剤／生物学的薬剤の）「バイオ後続品」とは、臨床的に不活性な成分にわずかな相違があるものの、次の（ａ）〜（ｃ）から得たデータに基づいて、安全性、純度、及び作用強度の点でバイオ後続品と標準製剤との間に臨床的に重要な違いがない、標準製剤に極めて類似した生物学的製剤を指す：（ａ）生物学的製剤は、臨床的に不活性な成分にわずかな相違があるものの、標準製剤に極めて類似していることを実証する分析的研究、（ｂ）動物実験（毒性の評価を含む）、並びに／あるいは（ｃ）標準製剤が認可される使用条件及び標準製剤の使用が意図される条件、並びにバイオ後続品に対する認可付与のための条件などの１つ以上の適切な使用条件の下での安全性、純度、及び作用強度を証明するのに十分である臨床試験（複数可）（免疫原性及び薬物動態学又は薬力学の評価を含む）。バイオ後続品は、処方する医療従事者の介入なしに薬局で標準製剤の代替品となり得る、互換可能な製品であり得る。「互換性」の更なる基準を遵守すべく、バイオ後続品は、いずれの所与の患者においても標準製剤と同じ臨床結果を生じさせることが求められ、バイオ後続品が個体に複数回投与される場合には、バイオ後続品の使用と標準製剤の使用を交互にする又は切り替えることによる安全性又は効果の低下に関するリスクは、そのように使用を交互にする又は切り替えることなく標準製剤を使用した場合のリスクを上回らない。標準製剤の機序が既知である範囲で、バイオ後続品は、提案された使用条件に関して同じ作用機序を利用する。バイオ後続品に関して提案されるラベル表示において定められた、推奨された、又は提示された使用条件（複数可）は、標準製剤に関してすでに認可されている。バイオ後続品の投与経路、剤形、及び／又は強度は、標準製剤のものと同じであり、バイオ後続品は、バイオ後続品が安全性、純度及び強度を確実に維持し続けるように設計された基準を満たす設備で製造、加工、包装又は保持される。バイオ後続品は、標準製剤と比較した場合に、バイオ後続品の性能を変化させないと予想されるアミノ酸配列の若干の改変（例えば、Ｎ末端又はＣ末端短縮）を含んでもよい。標準製剤は、米国、欧州、又は日本のうちの少なくとも１つにおいて認可されていればよい。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、非アゴニスト抗体である。

ＣＤ３８に特異的に結合する非アゴニスト抗体とは、ＣＤ３８に結合すると、アイソタイプ対照抗体又は培地のみによって誘導される増殖と比較した場合に、インビトロでＣＤ３８への結合によって末梢血単核細胞の試料の顕著な増殖を誘導しない抗体を指す。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する非アゴニスト抗体は、統計学的に非有意的に末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の増殖を誘導する。ＰＢＭＣ増殖は、健常ドナーからＰＢＭＣを単離し、当該細胞を、２００μＬのＲＰＭＩ中、試験抗体の存在下又は不存在下で、平底９６ウェルプレート内で１×１０^５細胞／ウェルで培養することによって評価することができる。３７℃で４日間インキュベートした後、３０μＬの^３Ｈ−チミジン（１６．７μＣｉ／ｍＬ）を添加することができ、培養を一晩継続することができる。^３Ｈ−チミジンの取り込みは、Ｐａｃｋａｒｄ Ｃｏｂｒａガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＤＴ，ＵＳＡ）を用いて、製造業者の指示に従って評価することができる。データは、数人のドナーから得たＰＢＭＣの平均ｃｐｍ（±ＳＥＭ）として計算することができる。試験抗体の存在下で培養された試料と不存在下で培養された試料との間の統計的有意性又は非有意性を、常法を用いて算出する。

本発明の方法で使用され得るＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、例えば、ファージ提示ライブラリから新たに選択されてもよく、このファージは、ヒト免疫グロブリン又はその一部（例えば、Ｆａｂ、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、又は対をなさない若しくは対をなす抗体可変領域）を発現するよう遺伝子操作を受けている（Ｋｎａｐｐｉｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２９６：５７〜８６，２０００；Ｋｒｅｂｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈ２５４：６７〜８４，２００１；Ｖａｕｇｈａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１４：３０９〜３１４，１９９６；Ｓｈｅｅｔｓ ｅｔ ａｌ．，ＰＩＴＡＳ（ＵＳＡ）９５：６１５７〜６１６２，１９９８；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ２２７：３８１，１９９１；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ２２２：５８１，１９９１）。ＣＤ３８結合可変ドメインは、例えば、Ｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．３９７：３８５〜９６，２０１０及び国際公開第０９／０８５４６２号）に記載されるバクテリオファージｐＩＸ被覆タンパク質との融合タンパク質として抗体の重鎖及び軽鎖可変領域を発現するファージ提示ライブラリから単離され得る。抗体ライブラリをＣＤ３８細胞外ドメインへの結合についてスクリーニングし、得られた陽性クローンの特徴付けを更に行い、Ｆａｂはクローン溶解物から単離され、その後全長抗体としてクローニングすることができる。ヒト抗体を単離するためのそのようなファージ提示法は、当技術分野にて確立されている。例えば、米国特許第５，２２３，４０９号、同第５，４０３，４８４号、同第５，５７１，６９８号、同第５，４２７，９０８号、同第５，５８０，７１７号、同第５，９６９，１０８号、同第６，１７２，１９７号、同第５，８８５，７９３号、同第６，５２１，４０４号、同第６，５４４，７３１号、同第６，５５５，３１３号、同第６，５８２，９１５号及び同第６，５９３，０８１号を参照のこと。

抗体は、周知のインビトロ法を用いて、ＣＤ３８への結合に関して、参照抗体、例えば配列番号４のＶＨ及び配列番号５のＶＬを有するＤＡＲＺＡＬＥＸ（商標）（ダラツムマブ）との競合について評価することができる。例示的な方法において、ＣＤ３８を組換え的に発現するＣＨＯ細胞が、非標識参照抗体と４℃にて１５分間インキュベートされ、その後、過剰の蛍光標識された試験抗体と、４℃にて４５分間インキュベートされ得る。ＰＢＳ／ＢＳＡ中での洗浄後、常法を用いてフローサイトメトリーにより蛍光を測定することができる。別の例示的な方法においては、ＣＤ３８の細胞外ドメインが、ＥＬＩＳＡプレートの表面に被覆され得る。過剰の非標識参照抗体を、約１５分間かけて添加することができ、その後ビオチン化試験抗体を添加することができる。ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ中で洗浄後、ビオチン化試験抗体の結合を、西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）結合ストレプトアビジンと、標準的な方法を用いて検出されたシグナルと、を用いて検出することができる。競合アッセイにおいて、参照抗体が標識され、試験抗体が標識されない場合があるということは、容易に明らかである。参照抗体が試験抗体の結合を阻害する、又は試験抗体が、ＣＤ３８への参照抗体の結合を少なくとも８０％、例えば、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％阻害するときに、試験抗体は参照抗体と競合する。試験抗体のエピトープは、例えば、ペプチドマッピングにより、又は既知の方法を用いる水素／重水素保護アッセイにより、又は結晶構造判定により、更に定義され得る。

ＣＤ３８（配列番号１）の領域ＳＫＲＮＩＱＦＳＣＫＮＩＹＲ（配列番号２）及び領域ＥＫＶＱＴＬＥＡＷＶＩＨＧＧ（配列番号３）に結合する抗体は、例えば、標準的な方法及び本明細書に記載される方法を用いて、マウスを、配列番号２及び３に示したアミノ酸配列を有するペプチドで免疫化し、得られた抗体をこれらのペプチドとの結合に関して、例えば公知のＥＬＩＳＡ又は突然変異誘発実験を用いて特徴付けることによって、生成することができる。

配列番号４のＶＨ及び配列番号５のＶＬを含む抗体と実質的に同一である抗体は、本発明の方法において用いられ得る。本明細書で使用するところの「実質的に同一の」という用語は、比較される抗体ＶＨ又はＶＬのアミノ酸配列が同一であるか又は「ごくわずかな相違」しか有さないということを意味する。ごくわずかな相違とは、抗体の特性に悪影響を及ぼさない抗体ＶＬ及び／又はＶＬにおける１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５個のアミノ酸の置換である。同一性パーセントは、例えば、Ｖｅｃｔｏｒ ＮＴＩ ｖ．９．０．０（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ））のＡｌｉｇｎＸモジュールの初期設定を使用するペアワイズアライメントによって決定することができる。本発明のタンパク質配列を問い合わせ配列として用いて、公共又は特許データベースに対する検索を実行して、例えば、関連配列を特定してもよい。かかる検索を実行するために使用される例示的なプログラムは、初期設定を使用する、ＸＢＬＡＳＴ若しくはＢＬＡＳＴＰプログラム（ｈｔｔｐ＿／／ｗｗｗ＿ｎｃｂｉ＿ｎｌｍ／ｎｉｈ＿ｇｏｖ）、又はＧｅｎｏｍｅＱｕｅｓｔ（商標）（ＧｅｎｏｍｅＱｕｅｓｔ（Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ））スイートである。本発明の方法において用いられるＣＤ３８に特異的に結合する抗体に対して行われ得る例示的な置換は、例えば、同様な電荷、疎水性、立体化学特性を有するアミノ酸を用いる保存的置換である。保存的置換はまた、例えば安定性若しくは親和性といった抗体の特性を向上させるために、又は抗体エフェクターの機能を改善するためにも行われ得る。１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５個のアミノ酸置換が、例えば、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体の重鎖又は軽鎖に対して行われ得る。更に、アラニンスキャニング突然変異誘発についてこれまでに述べられているように（ＭａｃＬｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｓｃａｎｄ．Ｓｕｐｐｌ．６４３、５５〜６７，１９９８；Ｓａｓａｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．３５：１〜２４，１９９８）、重鎖又は軽鎖内の任意の天然残基をアラニンで置換することもできる。所望のアミノ酸置換は、そのような置換が望まれる時点で当業者が決定することができる。アミノ酸置換は、例えば、ＰＣＲ突然変異誘発（米国特許第４，６８３，１９５号）によって行うことができる。変異体のライブラリは、周知の方法を用いて、例えば、ランダムコドン（ＮＮＫ）又は非ランダムコドン、例えば１１個のアミノ酸（Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）をコード化するＤＶＫコドンを用い、所望の特性を有する変異体を求めてライブラリをスクリーニングすることで生成されてもよい。生成された変異体は、インビトロでのＣＤ３８へのそれらの結合、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、若しくはアポトーシスを誘発する又はＣＤ３８酵素活性を調節するそれらの能力に関して、本明細書に記載される方法を用いて試験することができる。

「保存的改変」とは、アミノ酸配列を含有する抗体の結合特性に大きく影響する又はこれを変えることのないアミノ酸の改変のことを指す。保存的改変は、アミノ酸の置換、付加、及び欠失を含む。保存的置換は、アミノ酸が、類似の側鎖を有するアミノ酸残基に置き換えられる置換である。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、明確に定義されており、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、スレオニン、チロシン、トリプトファン）、芳香族側鎖（例えば、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン、チロシン）、脂肪族側鎖（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン）、アミド（例えば、アスパラギン、グルタミン）、β分岐側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）、及び含硫黄側鎖（システイン、メチオニン）を有するアミノ酸を含む。更に、アラニンスキャニング突然変異誘発についてすでに記載されているように（ＭａｃＬｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，（１９８８）Ａｃｔａ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｓｃａｎｄ Ｓｕｐｐｌ ６４３：５５〜６７；Ｓａｓａｋｉ ｅｔ ａｌ．，（１９８８）Ａｄｖ Ｂｉｏｐｈｙｓ ３５：１〜２４）、ポリペプチド中の任意の天然残基をアラニンで置換することもできる。本発明の抗体に対するアミノ酸置換は、例えばＰＣＲ突然変異誘発（米国特許第４，６８３，１９５号）などの既知の方法によって行うことができる。あるいは、変異体のライブラリは、例えば、ランダムコドン（ＮＮＫ）又は非ランダムコドン（例えば１１個のアミノ酸（Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）をコード化するＤＶＫコドン）を用いて生成することもできる。結果として生じる抗体変異体は、それらの特性に関して、本明細書に記載のアッセイを用いて試験することができる。

いくつかの実施形態では、抗体は、当業者によって実施される表面プラズモン共鳴又はＫｉｎｅｘａ法によって測定された際に、約１×１０^−７Ｍ、１×１０^−８Ｍ、１×１０^−９Ｍ、１×１０^−１０Ｍ、１×１０^−１１Ｍ、１×１０^−１２Ｍ、１×１０^−１３Ｍ、１×１０^−１４Ｍ、又は１×１０^−１５未満の解離定数（Ｋ_Ｄ）を有するＣＤ３８に結合し得る。いくつかの実施形態では、抗体は、約１×１０^−８Ｍ未満のＫ_Ｄを有するヒトＣＤ３８に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、約１×１０^−９Ｍ未満のＫ_Ｄを有するヒトＣＤ３８に結合する。

ＫｉｎＥｘＡ装置、ＥＬＩＳＡ又は競合的結合アッセイは、当業者には既知のものである。特定の抗体／ＣＤ３８相互作用について測定される親和性は、異なる条件下（例えば、浸透圧、ｐＨ）で測定した場合には異なり得る。したがって、親和性及びその他の結合パラメータ（例えば、Ｋ_Ｄ、Ｋ_ｏｎ、Ｋ_ｏｆｆ）の測定は、典型的には、標準的な条件及び本明細書に記載される緩衝液などの標準化緩衝液を用いて行われる。例えばＢｉａｃｏｒｅ ３０００又はＰｒｏｔｅＯｎを用いた親和性測定での内部誤差（標準偏差（ＳＤ）として測定されるもの）は通常、典型的な検出範囲内で測定した場合、５〜３３％の範囲内であり得ることが当業者には分かるであろう。したがって、Ｋ_Ｄに関して用語「約」は、アッセイにおける一般的な標準偏差を反映する。例えば、Ｋ_Ｄが１×１０^−９Ｍの場合の典型的なＳＤは、±０．３３×１０^−９Ｍ以下である。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４アイソタイプである。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプである。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＩｇＧ２アイソタイプである。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＩｇＧ３アイソタイプである。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＩｇＧ４アイソタイプである。

抗体のＦｃ部分は、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞貪食作用（ＡＤＣＰ）、又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）などの抗体のエフェクター機能を媒介することができる。このような機能は、ＦＣエフェクタードメイン（複数可）の貪食活性若しくは溶解活性を有する免疫細胞上のＦｃ受容体への結合によって又はＦｃエフェクタードメイン（複数可）の補体系の成分への結合によって、媒介され得る。通常、Ｆｃ結合細胞又は補体成分によって媒介される作用（複数可）は、標的細胞、例えばＣＤ３８発現細胞の阻害及び／又は枯渇をもたらす。ヒトＩｇＧアイソタイプである、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４は、エフェクター機能に関して特異的な能力を呈する。ＡＤＣＣは、ＩｇＧ１及びＩｇＧ３によって媒介され得、ＡＤＣＰは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４によって媒介され得、ＣＤＣは、ＩｇＧ１及びＩｇＧ３によって媒介され得る。

「抗体依存性細胞傷害」、「抗体依存性細胞媒介細胞傷害」、すなわち「ＡＤＣＣ」は、エフェクター細胞で発現されるＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）によって、抗体被覆標的細胞の、ナチュラルキラー細胞、単球、マクロファージ、及び好中球などの溶解活性を有するエフェクター細胞との相互作用に依存して、細胞死を誘導する機序である。例えば、ＮＫ細胞はＦｃγＲＩＩＩａを発現し、一方、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩａを発現する。ＣＤ３８発現細胞などの抗体被覆標的細胞の死滅は、膜孔形成タンパク質及びプロテアーゼの分泌を通してのエフェクター細胞活性の結果として生じる。ＣＤ３８に特異的に結合する抗体のＡＤＣＣ活性を評価するために、抗体を、免疫エフェクター細胞と組み合わせてＣＤ３８発現細胞に添加することができるが、これらが抗原抗体複合体によって活性化されると、標的細胞の細胞溶解をもたらし得る。細胞溶解は、通常、溶解した細胞からの標識（例えば、放射性基質、蛍光染料、又は天然の細胞内タンパク質）の放出によって検出される。そのようなアッセイの代表的なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びＮＫ細胞が挙げられる。例示的な標的細胞は、ＣＤ３８を発現するＢ細胞を含む。例示的なアッセイにおいて、標的細胞は、２０μキュリーの^５１Ｃｒによって２時間にわたり標識化され、広範囲で洗浄される。標的細胞の細胞濃度は、１×１０^６細胞／ｍＬに調整され得るが、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は様々な濃度で添加される。アッセイは、エフェクター対標的細胞の比４０：１で標的細胞を添加することにより開始される。３７℃で３時間にわたるインキュベーションの後、アッセイは遠心分離により停止され、溶解した細胞からの^５１Ｃｒの放出を、シンチレーション計数管内で測定する。細胞傷害性の割合は、３％の過塩素酸を標的細胞に添加することにより誘発され得る最大溶解率として計算され得る。

「抗体依存性細胞貪食作用」（「ＡＤＣＰ」）とは、例えばマクロファージ又は樹状細胞などの貪食細胞による取り込みにより、抗体被覆標的細胞を排除する機序を指す。ＡＤＣＰは、ＧＦＰ又は他の標識化分子を発現するように遺伝子操作されたＣＤ３８陽性細胞を標的細胞として使用して、評価することができる。エフェクター：標的細胞比は、例えば４：１とすることができる。エフェクター細胞を、標的細胞とともに、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体を添加して又は添加せずに４時間インキュベートすることができる。インキュベーション後、細胞は、アクターゼを用いて剥離できる。マクロファージは、蛍光標識に結合した抗ＣＤ１１ｂ抗体及び抗ＣＤ１４抗体により識別され得るが、貪食作用の割合は、標準的な方法を用いて、ＣＤ１１^＋及びＣＤ１４^＋マクロファージにおけるＧＦＰ蛍光の割合（％）に基づいて決定され得る。

「補体依存性細胞傷害」すなわち「ＣＤＣ」は、標的結合抗体のＦｃエフェクタードメインが補体成分Ｃ１ｑに結合してこれを活性化し、かかる補体成分Ｃ１ｑが次に補体カスケードを活性化して標的細胞の細胞死をもたらす、細胞死を誘導するための機序を指す。補体の活性化はまた、標的細胞表面に対する補体成分の沈着を生じさせて、白血球への補体受容体（例えば、ＣＲ３）の結合によって、ＡＤＣＣを容易にする。

ＡＤＣＣを誘発するためにモノクローナル抗体が有する能力は、それらのオリゴ糖成分を遺伝子操作することによって増強させることができる。ヒトＩｇＧ１又はＩｇＧ３は、Ａｓｎ２９７においてＮ−グリコシル化される。ここで、グリカンの大部分は、周知の二分岐Ｇ０、Ｇ０Ｆ、Ｇ１、Ｇ１Ｆ、Ｇ２、又はＧ２Ｆの形態にある。遺伝子操作されていないＣＨＯ細胞により生成される抗体は、典型的には、少なくとも約８５％のグリカンフコース含量を有する。Ｆｃ領域に結合した二分岐の複合体型オリゴ糖からのコアフコースの除去は、抗原結合又はＣＤＣ活性を変更することなく、改善されたＦｃγＲＩＩＩａ結合によって抗体のＡＤＣＣを増強する。このようなｍＡｂｓは、培地のオスモル濃度の制御（Ｋｏｎｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃｙｔｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６４：２４９〜６５，２０１２）、変異体ＣＨＯ系Ｌｅｃ１３の宿主細胞系としての適用（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ２７７：２６７３３〜２６７４０，２００２）、変異体ＣＨＯ系ＥＢ６６の宿主細胞系としての適用（Ｏｌｉｖｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＭＡｂｓ；２（４），２０１０、印刷に先立つ電子公開、ＰＭＩＤ：２０５６２５８２）、ラットハイブリドーマ細胞株ＹＢ２／０の宿主細胞株としての適用（Ｓｈｉｎｋａｗａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７８：３４６６〜３４７３，２００３）、α１，６−フコシルトランスフェラーゼ（ＦＵＴ８）遺伝子に対して特異的な低分子干渉ＲＮＡの導入（Ｍｏｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｅｎｇ ８８：９０１〜９０８，２００４）、あるいはβ−１，４−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ及びゴルジα−マンノシダーゼＩＩ又は強力なα−マンノシダーゼＩ阻害物質のキフネンシンの共発現（Ｆｅｒｒａｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ２８１：５０３２〜５０３６，２００６、Ｆｅｒｒａｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｅｎｇ９３：８５１〜８６１，２００６、Ｘｈｏｕ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｅｎｇ ９９；６５２〜６５，２００８）などの、二分岐複合型のＦｃオリゴ糖を有する比較的高度に脱フコシル化された抗体の効果的な発現につながることが報告されている様々な方法を用いて得ることができる。本発明の方法で使用される抗ＣＤ３８抗体によって引き出されるＡＤＣＣは、抗体Ｆｃ内の特定の置換によっても高めることができる。例示的な置換は、例えば、米国特許第６，７３７，０５６号に記載されるように、アミノ酸位置２５６、２９０、２９８、３１２、３５６、３３０、３３３、３３４、３６０、３７８、又は４３０（ＥＵインデックスに従った残基番号付け）における置換である。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、抗体Ｆｃにおける置換を含む。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、抗体Ｆｃにおいて、アミノ酸位置２５６、２９０、２９８、３１２、３５６、３３０、３３３、３３４、３６０、３７８、又は４３０（ＥＵインデックスに従った残基番号付け）での置換を含む。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、約０％〜約１５％の、例えば、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、又は０％のフコース含量を有する二分岐グリカン構造を有する。

いくつかの実施形態では、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、約５０％、４０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、又は０％のフコース含量を有する二分岐グリカン構造を有する。

Ｆｃ中の置換及び減少したフコース含量は、ＣＤ３８と特異的に結合する抗体のＡＤＣＣ活性を増強することができる。

「フコース含量」とは、Ａｓｎ２９７における糖鎖内のフコース単糖類の量を意味する。フコースの相対量は、全糖構造に関するフコース含有構造の割合である。これらは、複数の方法、例えば、１）国際公開第２００８／０７７５４６号に記載されるように、Ｎ−グリコシダーゼＦ処理試料のＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（例えば、複合体、ハイブリッド、並びにオリゴ構造及び高マンノース構造）の使用、２）Ａｓｎ２９７グリカンの酵素放出、その後の誘導体化、並びに蛍光検出を備えたＨＰＬＣ（ＵＰＬＣ）及び／又はＨＰＬＣ−ＭＳ（ＵＰＬＣ−ＭＳ）による検出／定量化、３）第１のＧｌｃＮＡｃ単糖類と第２のＧｌｃＮＡｃ単糖類との間を切断し、フコースを第１のＧｌｃＮＡｃに結合したままにさせる、Ｅｎｄｏ Ｓ又は他の酵素によるＡｓｎ２９７グリカンの処理を伴うか又はこの処理なしでの、天然又は還元ｍＡｂのインタクトプロテイン分析、４）酵素を用いた消化（例えば、トリプシン又はエンドペプチダーゼＬｙｓ−Ｃ）による、ｍＡｂの成分ペプチドへの消化、並びにそれに続くＨＰＬＣ−ＭＳ（ＵＰＬＣ−ＭＣ）による分離、検出、及び定量化、あるいは５）Ａｓｎ２９７でＰＮＧａｓｅ Ｆを用いた酵素による特異的脱グリコシル化による、ｍＡｂオリゴ糖のｍＡｂタンパク質からの分離、により特徴付けられ、定量化され得る。放出されるオリゴ糖は、フルオロフォアで標識され、グリカン構造の細かな特徴付けを可能にする様々な補足的技術によって分離かつ特定することが可能であり、これらは、実験的質量の理論的質量との比較によるマトリックス支援レーザ脱離イオン化（ＭＡＬＤＩ）質量分析、イオン交換ＨＰＬＣ（ＧｌｙｃｏＳｅｐ Ｃ）によるシアル化の程度の決定、順相ＨＰＬＣ（ＧｌｙｃｏＳｅｐ Ｎ）による親水性基準に準拠するオリゴ糖型の分離及び定量化、並びに高性能キャピラリー電気泳動−レーザ誘起蛍光（ＨＰＣＥ−ＬＩＦ）によるオリゴ糖の分離及び定量化による。

本明細書で使用する場合、「低フコース」又は「低フコース含量」は、抗体が約０％〜１５％のフコース含量を有することを指す。

本明細書で使用する場合、「正常なフコース」又は「正常なフコース含量」とは、抗体が約５０％を超える、通常約６０％、７０％、８０％を超える、又は８５％を超えるフコース含量を有することを指す。

本発明の方法で使用するＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、アポトーシスによってＣＤ３８発現性ＩｇＥ産生細胞の死滅を誘導し得る。アポトーシスを評価するための方法は周知であり、例えば、標準的な方法を用いたアネキシンＩＶによる染色が挙げられる。ヒトＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、細胞の約２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は１００％にアポトーシスを誘導し得る。

いくつかの実施形態では、ヒトＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、二重特異性抗体である。既存のＣＤ３８に特異的に結合する抗体のＶＬ及び／若しくはＶＨ領域、又は本明細書に記載されるように新たに特定されたＶＬ及びＶＨ領域は、遺伝子操作を受けて二重特異性の全長抗体にされてもよい。このような二重特異性抗体は、以下の特許文献に記載の技術などの技術を用いて、単一特異的な抗体重鎖間のＣＨ３相互作用を、二重特異性抗体を形成するように調節することにより製造され得る：米国特許第７，６９５，９３６号、国際公開第０４／１１１２３３号、米国特許公開第２０１０／００１５１３３号、同第２００７／０２８７１７０号、国際公開第２００８／１１９３５３号、米国特許公開第２００９／０１８２１２７号、同第２０１０／０２８６３７４号、同第２０１１／０１２３５３２号、国際公開第２０１１／１３１７４６号、同第２０１１／１４３５４５号、又は米国公開第２０１２／０１４９８７６号。本発明の抗体のＶＬ領域及び／又はＶＨ領域を組み込むことができる追加の二重特異性構造は、例えば、デュアル可変ドメイン免疫グロブリン（国際公開第２００９／１３４７７６号）、又は２つの抗体アームを異なる特異性と接続する、ロイシンジッパー又はコラーゲン二量体化ドメインのような様々な二量体化ドメインを含む構造（国際公開第２０１２／０２２８１１号、米国特許第５，９３２，４４８号、米国特許第６，８３３，４４１号）である。

例えば、二重特異性抗体は、国際公開第２０１１／１３１７４６号に記載の方法に従って、無細胞環境下、インビトロで、２つの単一特異性ホモ二量体抗体のＣＨ３領域中に異なる（asymmetrical）変異を導入し、ジスルフィド結合を異性化させる還元条件下において、２つの親単一特異性ホモ二量体抗体から二重特異性ヘテロ二量体抗体を形成することにより、生成され得る。この方法において、第１の単一特異性二価抗体（例えば、抗ＣＤ３８抗体）及び第２の単一特異性二価抗体は、ヘテロ二量体の安定性を促進するＣＨ３ドメインにおける特定の置換を有するように遺伝子操作されるが、これらの抗体は、ヒンジ領域におけるシステインがジスルフィド結合の異性化を受けるのに十分な還元条件下において共にインキュベートされ、それにより、Ｆａｂアーム交換によって二重特異性抗体が生成される。インキュベート条件は、最適には、非還元条件に戻され得る。使用され得る代表的な還元剤は、２−メルカプトエチルアミン（２−ＭＥＡ）、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、ジチオエリスリトール（ＤＴＥ）、グルタチオン、トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）、Ｌ−システイン、及びβ−メルカプトエタノールであり、好ましくは、２−メルカプトエチルアミン、ジチオスレイトール、及びトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンからなる群から選択される還元剤である。例えば、少なくとも２０℃の温度で、少なくとも２５ｍＭの２−ＭＥＡの存在下又は少なくとも０．５ｍＭのジチオスレイトールの存在下で、ｐＨ５〜８、例えばｐＨ７．０又はｐＨ７．４で、少なくとも９０分間のインキュベートを用いることができる。

二重特異性抗体の第１の重鎖及び第２の重鎖に使用され得る代表的なＣＨ３の変異は、Ｋ４０９Ｒ及び／又はＦ４０５Ｌである。

本発明の方法を用いて、任意の分類に属する動物被験体を治療することができる。このような動物の例としては、ヒト、齧歯類、イヌ、ネコ、及び家畜などの哺乳動物が挙げられる。

投与／医薬組成物
本発明の方法において、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、抗体と医薬的に許容される担体とを含む好適な医薬組成物中で提供され得る。担体は、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体と一緒に投与される希釈剤、アジュバント、添加剤、又はビヒクルであり得る。このようなビヒクルは、水、及び石油、動物、植物、又は合成物由来のものを含む油、例えば、落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油などの液体であってよい。例えば、０．４％生理食塩水及び０．３％グリシンを用いてよい。これらの溶液は滅菌されており、一般には粒子状物質を含まない。これらは、従来の周知の滅菌法（例えば、濾過）によって滅菌することができる。この組成物には、生理学的条件に近づけるために必要とされる医薬的に許容される補助物質、例えばｐＨ調整剤及び緩衝剤、安定化剤、増粘剤、潤滑剤及び着色剤などを含有させることができる。そのような医薬製剤中の本発明の分子又は抗体の濃度は幅広く異なってよく、すなわち約０．５重量％未満から、通常は少なくとも約１重量％まで、最大で１５重量％又は２０重量％、２５重量％、３０重量％、３５重量％、４０重量％、４５重量％又は５０重量％までであってよく、また、選択される具体的な投与方法に従って、必要とされる用量、流体体積、粘度などに主に基づいて選択される。好適なビヒクル及び製剤（他のヒトタンパク質、例えばヒト血清アルブミンを含む）は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１^ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｔｒｏｙ，Ｄ．Ｂ．ｅｄ．，Ｌｉｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ ２００６，Ｐａｒｔ ５，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ ｐｐ６９１〜１０９２に記載されており、特にｐｐ．９５８〜９８９を参照されたい。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体の投与方法は、当該技術分野において周知であるように、非経口投与、例えば、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内又は皮下、肺内、経粘膜（経口、鼻腔内、膣内、直腸）若しくは当業者に理解されるその他の手段などの任意の好適な経路であり得る。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体を、例えば、静脈内（ＩＶ）注入又はボーラス注射により非経口的に、筋肉内又は皮下又は腹腔内になど任意の適当な経路によって対象に投与することができる。静脈内注入は、例えば、１５、３０、６０、９０、１２０、１８０、若しくは２４０分間にわたって、又は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、若しくは１２時間にわたって行ってよい。

対象に投与される用量は、治療されている疾患を緩和する又は少なくとも部分的に停止させるのに十分（「治療的に有効な量」）なものであり、時に、０．００５ｍｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．０５ｍｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ若しくは約５ｍｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ、又は約４ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約１６ｍｇ／ｋｇ若しくは約２４ｍｇ／ｋｇ、又は例えば約１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０ｍｇ／ｋｇであり得るが、更に多量、例えば、約１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０若しくは１００ｍｇ／ｋｇであってもよい。

例えば、５０、１００、２００、５００、若しくは１０００ｍｇの固定単位用量を与えてもよく、又は患者の表面積に基づいて、例えば、５００、４００、３００、２５０、２００、若しくは１００ｍｇ／ｍ^２の用量を与えてもよい。通常、１〜８回の用量（例えば、１、２、３、４、５、６、７、又は８回）が投与され得るが、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０回、又はそれよりも多い用量を投与してもよい。

本発明の方法におけるＣＤ３８に特異的に結合する抗体の投与は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、２週間、３週間、１か月、５週間、６週間、７週間、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月又はそれよりも長い期間の後に繰り返すことができる。治療コースの繰り返しも可能であり、長期にわたる投与も同様に可能である。繰り返し投与は、同一用量であってもよいし、又は異なる用量であってもよい。例えばＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、静脈内注入により、８週間にわたって１週間ごとに８ｍｇ／ｋｇ又は１６ｍｇ／ｋｇで投与し、その後、更に１６週間にわたって２週間ごとに８ｍｇ／ｋｇ又は１６ｍｇ／ｋｇで投与し、その後、４週間ごとに８ｍｇ／ｋｇ又は１６ｍｇ／ｋｇで投与することができる。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、例えば、６ケ月以上の期間に週１回など、維持療法として投与されてもよい。

例えば、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、２４、１２、８、６、４、又は２時間ごとの単回投与又は分割投与を用いて、若しくはこれらの任意の組み合わせを用いて、約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの量の１日用量として、例えば、１日当たり０．５、０．９、１．０、１．１、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０又は１００ｍｇ／ｋｇで、治療開始後、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０日目のうちの少なくとも１日に、あるいは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０週目のうちの少なくとも１週に、あるいはこれらの任意の組み合わせで提供されてもよい。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、保存のために凍結乾燥させ、使用前に好適な担体でもどすことができる。この技術は、従来のタンパク質調製物に関して有効であることが示されており、周知の凍結乾燥及び再構成技術を用いることができる。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＩｇＥ媒介疾患を発症する危険性を低減するために、予防的に投与されてもよい。

また、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、対象がアレルゲンに曝露された後数秒、数分、又は数時間以内に、あるいはＩｇＥ媒介疾患の少なくとも１つの症状が対象に存在するときに、投与されてもよい。よって、本明細書で用いられる方法は、アレルゲンへの急性曝露及びアレルゲンへの慢性（例えば、季節的な）曝露の両方の治療に有用である。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、第２の治療薬と併用して投与されてもよい。

第２の治療薬は、アレルギー、アレルギー性喘息、蕁麻疹、血管性水腫、自己免疫疾患及び炎症性疾患などのＩｇＥ媒介疾患のための標準治療であってもよい。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体及びヒアルロニダーゼを含む医薬組成物の皮下投与
ＣＤ３８に特異的に結合する抗体は、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体とヒアルロニダーゼとを含む医薬組成物として皮下投与されてもよい。

皮下投与される医薬組成物中のＣＤ３８に特異的に結合する抗体の濃度は、約２０ｍｇ／ｍＬとすることができる。

皮下投与される医薬組成物は、約１，２００ｍｇ〜１，８００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体を含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、約１，２００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体を含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、約１，６００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体を含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、約１，８００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体を含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、約３０，０００Ｕ〜４５，０００Ｕのヒアルロニダーゼを含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、約１，２００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体と約３０，０００Ｕのヒアルロニダーゼとを含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、約１，８００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体と約４５，０００Ｕのヒアルロニダーゼとを含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、約１，６００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体と約３０，０００Ｕのヒアルロニダーゼとを含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、約１，６００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体と約４５，０００Ｕのヒアルロニダーゼとを含むことができる。

皮下投与される医薬組成物は、配列番号２２のアミノ酸配列を有するヒアルロニダーゼｒＨｕＰＨ２０を含むことができる。

ｒＨｕＰＨ２０は、組換えヒアルロニダーゼ（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）組換え体）であり、国際公開第２００４／０７８１４０号に記載されている。

ヒアルロニダーゼは、ヒアルロン酸（ＥＣ３．２．１．３５）を分解し、細胞外マトリクス中のヒアルロナンの粘性を低下させることにより組織の透過性を高める酵素である。

配列番号２２
ＭＧＶＬＫＦＫＨＩＦＦＲＳＦＶＫＳＳＧＶＳＱＩＶＦＴＦＬＬＩＰＣＣＬＴＬＮＦＲＡＰＰＶＩＰＮＶＰＦＬＷＡＷＮＡＰＳＥＦＣＬＧＫＦＤＥＰＬＤＭＳＬＦＳＦＩＧＳＰＲＩＮＡＴＧＱＧＶＴＩＦＹＶＤＲＬＧＹＹＰＹＩＤＳＩＴＧＶＴＶＮＧＧＩＰＱＫＩＳＬＱＤＨＬＤＫＡＫＫＤＩＴＦＹＭＰＶＤＮＬＧＭＡＶＩＤＷＥＥＷＲＰＴＷＡＲＮＷＫＰＫＤＶＹＫＮＲＳＩＥＬＶＱＱＱＮＶＱＬＳＬＴＥＡＴＥＫＡＫＱＥＦＥＫＡＧＫＤＦＬＶＥＴＩＫＬＧＫＬＬＲＰＮＨＬＷＧＹＹＬＦＰＤＣＹＮＨＨＹＫＫＰＧＹＮＧＳＣＦＮＶＥＩＫＲＮＤＤＬＳＷＬＷＮＥＳＴＡＬＹＰＳＩＹＬＮＴＱＱＳＰＶＡＡＴＬＹＶＲＮＲＶＲＥＡＩＲＶＳＫＩＰＤＡＫＳＰＬＰＶＦＡＹＴＲＩＶＦＴＤＱＶＬＫＦＬＳＱＤＥＬＶＹＴＦＧＥＴＶＡＬＧＡＳＧＩＶＩＷＧＴＬＳＩＭＲＳＭＫＳＣＬＬＬＤＮＹＭＥＴＩＬＮＰＹＩＩＮＶＴＬＡＡＫＭＣＳＱＶＬＣＱＥＱＧＶＣＩＲＫＮＷＮＳＳＤＹＬＨＬＮＰＤＮＦＡＩＱＬＥＫＧＧＫＦＴＶＲＧＫＰＴＬＥＤＬＥＱＦＳＥＫＦＹＣＳＣＹＳＴＬＳＣＫＥＫＡＤＶＫＤＴＤＡＶＤＶＣＩＡＤＧＶＣＩＤＡＦＬＫＰＰＭＥＴＥＥＰＱＩＦＹＮＡＳＰＳＴＬＳＡＴＭＦＩＶＳＩＬＦＬＩＩＳＳＶＡＳＬ
ＣＤ３８に特異的に結合する抗体とヒアルロニダーゼとを含む医薬組成物の投与は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、又はそれよりも長い期間の後に繰り返すことができる。治療コースの繰り返しも可能であり、長期にわたる投与も同様に可能である。繰り返し投与は、同一用量であってもよいし、又は異なる用量であってもよい。例えば、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体とヒアルロニダーゼとを含む医薬組成物は、週１回を８週間、その後に２週に１回を１６週間、その後に４週に１回投与することができる。投与される医薬組成物は、約１，２００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体と約３０，０００Ｕのヒアルロニダーゼとを含むことができ、その際、医薬組成物中のＣＤ３８に特異的に結合する抗体の濃度は約２０ｍｇ／ｍＬである。投与される医薬組成物は、約１，８００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体と約４５，０００Ｕのヒアルロニダーゼとを含むことができる。投与される医薬組成物は、約１，６００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体と約３０，０００Ｕのヒアルロニダーゼとを含むことができる。投与される医薬組成物は、約１，６００ｍｇのＣＤ３８に特異的に結合する抗体と約４５，０００Ｕのヒアルロニダーゼとを含むことができる。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体及びヒアルロニダーゼを含む医薬組成物は、腹部に皮下投与することができる。

ＣＤ３８に特異的に結合する抗体及びヒアルロニダーゼを含む医薬組成物は、約８０ｍＬ、９０ｍＬ、１００ｍＬ、１１０ｍＬ、又は１２０ｍＬの全体積で投与することができる。

投与を行うには、２０ｍｇ／ｍＬのＣＤ３８に特異的に結合する抗体を２５ｍＭの酢酸ナトリウム、６０ｍＭの塩化ナトリウム、１４０ｍＭのＤ−マンニトール、０．０４％のポリソルベート２０（ｐＨ５．５）に加えたものを、ｒＨｕＰＨ２０（１．０ｍｇ／ｍＬ）（７５〜１５０ｋＵ／ｍＬ）を１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、１３０ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＬ−メチオニン、０．０２％ポリソルベート８０（ｐＨ６．５）に加えたものと混合した後で、当該混合物を対象に投与することができる。

以上、本発明を一般論として説明したが、本発明の各実施形態を、特許請求の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない以下の実施例において更に開示する。

実施例１．ダラツムマブはアレルギー患者のＩｇＥレベルを低下させる
ＤＡＲＺＡＬＥＸ（商標）（ダラツムマブ（dratumumab））を用いた、ＩｇＥ産生プラズマ細胞の枯渇による治療が、総ＩｇＥレベル及び特異的ＩｇＥレベルに与える効果を評価した。このパイロット試験は、重いＩｇＥ媒介疾患を有する患者の管理におけるダラツムマブの潜在的価値を実証することができた。

ダラツムマブ単剤療法又はダラツムマブに加えてレナリドミド−デキサメタゾンで治療した、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する患者から、残余血液試料を収集した。定期的な血液分析を、ベースラインで、及びダラツムマブによる治療後に４週間ごとに行った。

ベースライン試料において、総ＩｇＥを測定し、一般的な吸入性アレルゲンに対する感作を示すために、ＩｍｍｕｎｏＣＡＰ Ｐｈａｄｉａｔｏｐ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）試験を製造業者の指示に従って行った。Ｐｈａｄｉａｔｏｐが陽性の場合、ＩｍｍｕｎｏＣＡＰ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を用いて、カバノキ花粉、オオアワガエリ花粉及びイエダニに対して特異的なＩｇＥ（ｓＩｇＥ）を測定した。これらは、オランダにおいて最も頻繁に認識される吸入性アレルゲンの中に入る。

ｓＩｇＥの測定は、製造業者（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｕｐｐｓａｌａ Ｓｗｅｄｅｎ）の指示に従って、ＩｍｍｕｎｏＣＡＰ法により、Ｐｈａｄｉａｔｏｐ及び（as）特異的／総ＩｇＥの両方に関して実施された。この方法は、カプセルに封入されたセルロース誘導体からなる固相マトリックスに共有結合したアレルゲンを使用する。コーティングされたアレルゲンに対するｓＩｇＥの結合の分析は、蛍光を用いて酵素標識抗ＩｇＥによって読取値として定量化する。０．３５ｋＵ／Ｌ以上のｓＩｇＥレベルを陽性試験結果と定義した。

カタログ番号：
−総ＩｇＥ：１４−４５０９−０１
−Ｐｈａｄｉａｔｏｐ：１４−４４０５−３５
−カバノキｓＩｇＥ：１４−４１０２−０１（ｔ３）
−オオアワガエリ花粉ｓＩｇＥ：１４−４１００−０１（ｇ６）
−イエダニｓＩｇＥ：１４−４１０７−０１（ｄ１）

合計８人の患者が含まれ、患者のうち５人をダラツムマブ単剤療法で治療し、３人をダラツムマブに加えてレナリドミド−デキサメタゾンで治療した。４人の患者はベースラインにおいて検出可能なＩｇＥ（≧２ｋＵ／Ｌ）を有し、表１に列記されている。第１の患者（患者１）に関してのみ、特異的ＩｇＥレベルは基準レベルを超えて上昇し、吸入性アレルゲンに対する特異的ＩｇＥが検出された。４、８、１２、１６及び２０週目における患者１からの更なる試料を分析したところ、オオアワガエリ花粉及びイエダニに対する総ＩｇＥ及び特異的ＩｇＥレベルが、２０週目に８０％超低下したことが示された（表２及び図１）。検出可能なＩｇＥレベルを有する他の３人の患者もまた、８週間の処置後に総ＩｇＥの低下を示した。患者２では、総ＩｇＥレベルは８８％低下した（４１ｋＵ／Ｌから５ｋＵ／Ｌ）。他の２人の患者に関し、ベースラインＩｇＥレベルは非常に低く、８週間後に検出限界未満に低下した。良性プラズマ細胞と悪性プラズマ細胞の割合は、ダラツムマブによる治療によってすべての患者で低下した（表３）。患者１のＭタンパク質レベル及び遊離κ鎖レベルは、経時的に低下した（表４）。

結論として、この概念実証は、２つの一般的な吸入性アレルゲンに感作される単一患者において、ダラツムマブによる治療中に総ＩｇＥ及び特異的ＩｇＥのレベルが徐々に低下することを示している。この患者をレナリドミドとデキサメタゾンとで併用治療した。（Ｈｅｍａｄｙ Ｚ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９８５；７５：３０４〜１２．ｄｏｉ：１０．１０１６／００９１−６７４９（８５）９００６２−４；Ｗｕ ＣＹ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １９９１；８７：８７０〜７．ｄｏｉ：１０．１１７２／ＪＣＩ１１５０９２）．オマリズマブ治療によってＩｇＥを枯渇させることにより、臨床治験並びに日常の実践研究の両方において、疾患の臨床的改善がもたらされただけでなく、生活の質が向上し、疾患の社会経済的負担も軽減した（Ａｂｒａｈａｍ Ｉ ｅｔ ａｌ．，Ａｌｌｅｒｇｙ ２０１５：ｎ／ａ −ｎ／ａ．ｄｏｉ：１０．１１１１／ａｌｌ．１２８１５）。ダラツムマブによるプラズマ細胞枯渇がアレルギーの臨床的指標に及ぼす影響は、まだ研究されていない。

Claims (36)

1. 治療効果のある量の、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体を、ＩｇＥ媒介疾患の治療を必要とする対象に、ＩｇＥ媒介疾患を治療するのに十分な時間にわたって投与することを含む、ＩｇＥ媒介疾患の治療方法。
2. 前記ＩｇＥ媒介疾患が、アレルゲンに対するアレルギー反応である、請求項１に記載の方法。
3. 前記アレルゲンが、花粉、チリダニ、食物アレルゲン、植物アレルゲン、動物の鱗屑、虫刺され、真菌、胞子、かび、ラテックス、又は薬物である、請求項２に記載の方法。
4. 前記ＩｇＥ媒介疾患が、アレルギー性喘息、蕁麻疹、血管性水腫、食事性アレルギー、アレルギー反応、アトピー性皮膚炎、アナフィラキシー、皮膚肥満細胞症（cutaneous mastocystosis）、アレルギー性鼻炎、鼻ポリープ、木村病、好酸球性中耳炎、好酸球性胃腸炎、ラテックスアレルギー、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、水疱性類天疱瘡、全身性エリテマトーデス、狼瘡、関節リウマチ、又は自己免疫疾患である、請求項１に記載の方法。
5. 前記ＩｇＥ媒介疾患が、自己免疫疾患である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記ＩｇＥ媒介疾患が、狼瘡である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
7. 狼瘡が、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、円板状紅斑性狼瘡、亜急性皮膚エリテマトーデス、新生児ループス又は薬剤誘発性ループスである、請求項６に記載の方法。
8. 前記ＩｇＥ媒介疾患が、関節リウマチである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
9. 前記ＩｇＥ媒介疾患が、急性又は慢性である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、アレルゲンに曝露された後に前記対象に投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
11. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、配列番号４の重鎖可変領域（ＶＨ）及び配列番号５の軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む抗体と、ＣＤ３８への結合に関して競合する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
12. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、配列番号６、７、及び８のそれぞれ重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３のアミノ酸配列と、配列番号９、１０、及び１１のそれぞれ軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列と、を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
13. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、配列番号４のアミノ酸配列と９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％同一であるアミノ酸配列を有するＶＨと、配列番号５のアミノ酸配列と９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％同一であるアミノ酸配列を有するＶＬと、を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、ダラツムマブ又はそのバイオ後続品である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
15. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、非アゴニスト抗体である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
16. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、配列番号４のＶＨ及び配列番号５のＶＬを含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
17. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、配列番号１２のアミノ酸配列と９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列と９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
18. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、配列番号１２の重鎖と、配列番号１３の軽鎖と、を含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
19. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、
    ａ．配列番号１４のＶＨ及び配列番号１５のＶＬ、
    ｂ．配列番号１６のＶＨ及び配列番号１７のＶＬ、
    ｃ．配列番号１８のＶＨ及び配列番号１９のＶＬ、又は
    ｄ．配列番号２０のＶＨ及び配列番号２１のＶＬ、を含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４アイソタイプである、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、ＩｇＥ産生ＣＤ３８^＋細胞の死滅を誘導する、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞貧食作用（ＡＤＣＰ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、アポトーシス、又はＣＤ３８酵素活性の調節により、ＩｇＥ産生ＣＤ３８^＋細胞の死滅を誘導する、請求項２１に記載の方法。
23. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、ＡＤＣＣにより、ＩｇＥ産生ＣＤ３８^＋細胞の死滅を誘導する、請求項２２に記載の方法。
24. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、前記対象に予防的に投与される、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、静脈内投与される、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
26. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体とヒアルロニダーゼとを含む医薬組成物で皮下注射される、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
27. 前記ヒアルロニダーゼが、配列番号２２のｒＨｕＰＨ２０である、請求項２６に記載の方法。
28. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体が、第２の治療薬とともに投与される、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
29. 前記第２の治療薬が、前記ＩｇＥ媒介疾患のための標準治療である、請求項２８に記載の方法。
30. 前記ＣＤ３８に特異的に結合する抗体及び前記第２の治療薬が、同時に、順次、又は別々に投与される、請求項２８又は２９に記載の方法。
31. ＩｇＥ媒介疾患の治療において使用するための、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体。
32. 前記抗体が、
    ａ．配列番号６、７、８、９、１０、及び１１のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３、
    ｂ．それぞれ配列番号４及び５のＶＨ及びＶＬ、
    ｃ．それぞれ配列番号１２及び１３のＨＣ及びＬＣ、並びに／又は
    ｄ．ダラツムマブ若しくはそのバイオ後続品、を含む、ＩｇＥ媒介疾患の治療において使用するための請求項３１に記載の抗体。
33. 前記ＩｇＥ媒介疾患が、アレルギー性喘息、蕁麻疹、血管性水腫、食事性アレルギー、アレルギー反応、アトピー性皮膚炎、アナフィラキシー、皮膚肥満細胞症（cutaneous mastocystosis）、アレルギー性鼻炎、鼻ポリープ、木村病、好酸球性中耳炎、好酸球性胃腸炎、ラテックスアレルギー、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、水疱性類天疱瘡、全身性エリテマトーデス、狼瘡、関節リウマチ、又は自己免疫疾患である、ＩｇＥ媒介疾患の治療において使用するための請求項３１又は３２に記載の抗体。
34. ＩｇＥ媒介疾患の治療のための薬剤の製造における、ＣＤ３８に特異的に結合する抗体の使用。
35. 前記抗体が、
    ａ．配列番号６、７、８、９、１０、及び１１のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３、
    ｂ．それぞれ配列番号４及び５のＶＨ及びＶＬ、
    ｃ．それぞれ配列番号１２及び１３のＨＣ及びＬＣ、並びに／又は
    ｄ．ダラツムマブ若しくはそのバイオ後続品、を含む、請求項３４に記載の使用。
36. 前記ＩｇＥ媒介疾患が、アレルギー性喘息、蕁麻疹、血管性水腫、食事性アレルギー、アレルギー反応、アトピー性皮膚炎、アナフィラキシー、皮膚肥満細胞症（cutaneous mastocystosis）、アレルギー性鼻炎、鼻ポリープ、木村病、好酸球性中耳炎、好酸球性胃腸炎、ラテックスアレルギー、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、水疱性類天疱瘡、全身性エリテマトーデス、狼瘡、関節リウマチ、又は自己免疫疾患である、請求項３４又は３５に記載の使用。

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