Nothing Special   »   [go: up one dir, main page]

PL175557B1 - Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20 - Google Patents

Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20

Info

Publication number
PL175557B1
PL175557B1 PL93320526A PL32052693A PL175557B1 PL 175557 B1 PL175557 B1 PL 175557B1 PL 93320526 A PL93320526 A PL 93320526A PL 32052693 A PL32052693 A PL 32052693A PL 175557 B1 PL175557 B1 PL 175557B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
antibody
antibodies
cells
human
cell
Prior art date
Application number
PL93320526A
Other languages
English (en)
Inventor
Darrell R. Anderson
Nabil Hanna
John E. Leonard
Roland A. Newman
Mitchell E. Reff
Original Assignee
Idec Pharma Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=25526490&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL175557(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Idec Pharma Corp filed Critical Idec Pharma Corp
Priority claimed from PCT/US1993/010953 external-priority patent/WO1994011026A2/en
Publication of PL175557B1 publication Critical patent/PL175557B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/80—Antibody or fragment thereof whose amino acid sequence is disclosed in whole or in part
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/801—Drug, bio-affecting and body treating compositions involving antibody or fragment thereof produced by recombinant dna technology
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/867—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof involving immunoglobulin or antibody produced via recombinant dna technology

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Aktywne immunologicznie, chimeryczne przeciwcialo anty-CD20 produko- wane przez transfektome zawierajaca anty-CD20 w TCAE 8 (w depozycie ATCC o numerze 69119). P L 175557 B 1 PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20.
Układ odpornościowy kręgowców (np. naczelnych, co obejmuje ludzi, oraz człekokształtne itp.) składa się z wielu narządów i rodzajów komórek które ewoluowały do: ' dokładnie i specyficznie rozpoznających obce mikroorganizmy (antygen) dokonujące inwazji na gospodarza-kręgowca; specyficznie wiążących się ze wspomnianym obcym mikroorganizmem; i eliminujących/niszczących ów mikroorganizm.
Limfocyty, między innymi stanowią ogniwo kluczowe układu odpornościowego. Limfocyty powstają w grasicy, śledzionie i szpiku (u dorosłych) i stanowią około 30% całkowitej liczby białych krwinek obecnych w układzie krążenia ludzi (dorosłych). Wyróżniamy dwie główne subpopulacje limfocytów: limfocyty T i limfocyty B. Limfocyty T odpowiedzialne są za odporność komórkową, podczas gdy limfocyty B odpowiadają za produkcję przeciwciał (odporność humoralna). Jakkolwiek, limfocyty T i B mogą być rozważane jako niezależne w typowej odpowiedzi odpornościowej, limfocyty T aktywowane są, gdy receptor limfocyta T zwiąże się z fragmentem antygenu związanym z glikoproteiną głównego układu zgodności tkankowej (MHC) na powierzchni komórki prezentującej antygen; aktywacja ta powoduje uwolnienie mediatorów (interleukiny), które, pokrótce, pobudzają limfocyty B do różnicowania i produkcji przeciwciał (Immunoglobuliny) skierowanych przeciwko antygenowi.
Każdy z limfocytów B gospodarza ekspresjonuje odrębne przeciwciało na swej powierzchni, stąd, jeden limfocyt B ekspresjonuje przeciwciało specyficzne dla jednego antygenu, podczas gdy, inny limfocyt B ekspresjonuje przeciwciało specyficzne dla innego antygenu. Oznacza ’to, że limfocyty B są różnorodne, zaś ta różnorodność jest kluczowa dla układu odpornościowego. U ludzi/ każdy limfocyt B może produkować olbrzymią liczbę cząsteczek przeciwciał (tzn. od około 107 do 108). Ta produkcja przeciwciał na ogół ustaje (lub istotnie się zmniejsza), gdy obcy antygen zostaje zneutralizowany. Czasami, jednakże, proliferacja szczególnego limfocyta B utrzymuje się nadmiernie; proliferacja taka może spowodować nowotwór określany jako chłoniak wywodzący się z limfocyta B.
Limfocyty T i limfocyty B posiadają białka powierzchniowe, które mogą być używane jako znaczniki (markery) różnicowania i identyfikacji. Jednym z markerów ludzkich limfocytów B jest ludzki antygen różnicowania ograniczony do limfocytów B Bp35, oznaczony jako CD20. CD20 ekspresjonowany jest podczas wczesnego rozwoju limfocytów pre-B i utrzymuje się do momentu różnicowania się w komórkę plazmatyczną. W szczególności, cząsteczka CD20 może regulować etap w procesie aktywacji, niezbędny dla zapoczątkowania cyklu pobudzenia i różnicowania i jest zwykle ekspresjonowana w znacznym stopniu na nowotworowych limfocytach B. CD20, z definicji, obecny jest na, zarówno normalnych limfocytach B, jak i złośliwych limfocytach B, tzn. tych limfocytach B, których niekontrolowana proliferacja może prowadzić do chłoniaka z limfocytów B. Stąd, antygen powierzchniowy CD20 jest potencjalnym kandydatem na cel u chłoniaka z limfocytów B.
175 557
Pokrótce, celowanie takie może być określone następująco: przeciwciała specyficznie rozpoznające antygen powierzchniowy CD20 limfocytu B, są wstrzykiwane pacjentowi. Przeciwciała te, anty-CD20, wiążą się specyficznie z antygenem CD20 na powierzchni zarówno, normalnych jak i nowotworowych limfocytów B; przeciwciało anty CD20 związane z antygenem powierzchniowym CD20 może prowadzić do zniszczenia i usunięcia nowotworowych limfocytów B.
Dodatkowo, z przeciwciałem anty-CD20 sprzężone mogą zostać czynniki chemiczne lub znaczniki radioaktywne zdolne zniszczyć nowotwór, mogą być wiązane z przeciwciałem anty CD20 tak, że czynnik może być specyficznie dostarczony do np. nowotworowych limfocytów B. Niezależnie od podejścia, celem pierwszorzędnym jest zniszczenie nowotworu: konkretne wykonanie może być określone przez użyte przeciwciało anty-CD20, a stąd dostępne możliwości kierowania na antygen CD20 mogą się bardzo różnić.
Przykładowo, opisano próby wykorzystujące kierowanie na antygen CD20. Mysie przeciwciało monoklonalne 1F5 (przeciwciało anty-CD20) podawano w ciągłym wlewie dożylnym pacjentom z chłoniakiem z limfocytów B. Opisywano, że aby usunąć krążące komórki nowotworowe wymagane są niezwykle duże ilości (>2 gramy) przeciwciała lF5, zaś wynik określono jako przejściowy. Press i in. Monoclonal Antibody 1F5 (Anti-CD20) Serotherapy of Human B-Celł Lymphomas. Blood 69:584-591 (1987). Potencjalnym problemem przy tym podejściu jest fakt, że przeciwciała monoklonalne nie pochodzące od człowieka (np. mysie przeciwciała monoklonalne) zwykle pozbawione są funkcjonalności efektorowej, tzn. nie są -zdolne do, m.in. zapoczątkowania lizy zależnej od dopełniacza czy lizy ludzkich komórek docelowych poprzez cytotoksyczność komórkową zależną od przeciwciał czy fagocytozy - z udziałem receptora Fc. Ponadto, przeciwciała monoklonalne nie pochodzące od człowieka mogą być rozpoznawane przez organizm gospodarza jako obce białko; stąd, powtórne iniekcje obcych przeciwciał mogą prowadzić do powstania odpowiedzi odpornościowej prowadzącej do ciężkich reakcji nadwrażliwości. Dla przeciwciał monoklonalnych pochodzących od myszy, określa się to jako odpowiedź na przeciwciała mysie lub HAMA (Human Anti-Mouse Antibody response). Dodatkowo, takie obce przeciwciała mogą być atakowane przez układ odpornościowy gospodarza tak, że w efekcie są neutralizowane zanim osiągną cel. Limfocyty i komórki chłoniaka są wrażliwe na radioterapię z kilku powodów: miejscowa misja promieniowania jonizującego z przeciwciała ze znacznikiem radioaktywnym może niszczyć komórki - z i bez antygenu stanowiącego cel (np. CD20) z powodu niewielkiej odległości od przeciwciała związanego z antygenem; przenikające promieniowanie może zlikwidować problem ograniczonego dostępu przeciwciała w przypadku guzów o znacznej wielkości lub słabo unaczynionych; oraz całkowita ilość potrzebnego przeciwciała może być zmniejszona. Radioizotop emituje cząsteczki radioaktywne które są zdolne zniszczyć komórkowe DNA w stopniu uniemożliwiającym komórkowym mechnizmom naprawczym utrzymanie komórki przy życiu; stąd, gdy komórkami docelowymi są komórki guza, znacznik radioaktywny w sposób dobroczynny zabija komórki nowotworowe. Przeciwciała ze znacznikiem radioaktywnym, z definicji, są przeciwciałami zawierającymi substancje radioaktywne, które mogą wymagać podjęcia środków ostrożności zarówno w stosunku do pacjenta (np. możliwy przeszczep szpiku) jak i pracownika służby zdrowia (np. konieczność zachowania szczególnej ostrożności podczas pracy z radioaktywnością).
Stąd, celem polepszenia efektywności stosowania mysich przeciwciał monoklonalnych w leczeniu chorób limfocytów B, staje się sprzęganie znacznika radioaktywnego lub toksyny z przeciwciałem, tak by wspomniany znacznik lub toksyna koncentrowały się w guzie. Przykładowo wspomniane powyżej przeciwciało IF5 znakowano jodem131 (1311) i opisano badanie ich rozmieszczenia u dwóch pacjentów. Patrz Eary. J. F. i in., Imaging and Treatment of B-Cell Lymphoma J. Nuc. Med. 31/8:1257-1268 (1990); Patrz również, Press, O. W. -i in., 'Treatment of Refraktory Non-Hodgkin's Lymphoma with radiolabeled MB-1 (Anti CD37) Antibody J. Clin. One. 7/8:1027-1038 (1989) (podkreśla się, że jeden z pacjentów leczony IF-5 znakownanym 1311 osiągnął częściową poprawę); Goldenberg, D. M. i in., 'Targeting, Dosimetry and Radioimmunotherapy of B-Cell Lympho4
175 557 mas with lodine-131-Labeled LL2 Monoclonal Antibody: J. Clin. One. 9/4; 548-564 )1991) (trzech spośród ośmiu pacjentów otrzymujących wielokrotne iniekcje rozwinęło odpowiedź HAMA); Appelbaum, F. R. RadiolabeledMonoclonal Antibodies in the Treatment of Non-Hodgkin's Lymphoma Hem./Onc. Clinics of N.A. 5/5: 1013-1025 (1991) (artykuł przeglądowy); Press, O. W. i in., Radiolabeled-Antibody Therapy of B-Cell Lymphoma with Autologous Bonę Marrow Support. New England Journal of Medicine 329/17: 1219-12223 (1993) (przeciwciała IF5 i BI anty CD20 znakowane jodem 131); i Kamiński, M. G. i in., Radioimmunotherapy of B-Cell Lymphoma with [1311] Anti-Bl (Anti-CD20) Antibody. NEJM 329/7 (1993) (przeciwciało BI anty CD20 znakowane jodem 131, za Kamiński'm).
Toksyny (np. leki chemioterapeutyczne jak doksorubicyna czy mitomycyna C) również łączono z przeciwciałami. Patrz, przykładowo, opublikowane zgłoszenie patentowe PCT WO 92/07466 (z dnia 14 maja 1992 roku).
Przeciwciała chimeryczne tzn. przeciwciała zawierające części od dwóch lub więcej różnych gatunków (np. myszy i człowieka) opracowano jako alternatywę dla przeciwciał skoniugowanych. przykładowo, Liu, A. Y. i in., Production of a Mouse-Human Chimeric Monoclonal Antibody to CD20 with Potent Fc-Dependent Biologie Activity J. Immun. 139/10:3521-3526 (1987). opisuje przeciwciało chimeryczne mysio-ludzkie skierowane przeciwko antygenowi CD20. Patrz również, publikację PCT Nr. WO 88/04936. Jednakże, nie dostarczono informacji co do zdolności, efektywności i strony praktycznej użycia takich przeciwciał chimerycznych do leczenia chorób limfocytów B. Podkreśla się, że testy in vitro (np. ADCC) nie potrafią przewidzieć zdolności in vivo przeciwciał chimerycznych do zniszczenia i usunięcia komórek docelowych ekspresjonujących określony antygen. Patrz, przykładowo, Robinson, R. D. i in., Chimeric mouse-human anti-carcinoma antibodies that mechate different anti-tumor cell biological activities, Hum. Antibod. Hybridomas 2:8493(1991) (przeciwciała chimeryczne mysio-ludzkie nie posiadały wykrywalnej aktywności ADCC), stąd potencjalna efektywność leczenia przeciwciał chimerycznych może być prawdziwie oceniona wyłącznie przez doświadczenie in vivo.
Istnieje potrzeba, której zaspokojenie stanowiłoby istotny postęp w stanie wiedzy, podejścia terapeutycznego wykorzystującego kierowanie na antygen CD20 w leczeniu chłoniaków z limfocytów B u naczelnych, w tej liczbie, choć nie wyłącznie, człowieka.
Wynalazek zaspakaja tę potrzebę przez dostarczenie aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20. Przeciwciało według wynalazku produkowane jest przez transfektomę zawierającą anty-CD20 w TCAE8 (w depozycie ATCC o numerze 69119).
Figura 1. jest diagramem przedstawiającym wektor ekspresjonujący przeciwciało chimeryczne, służący do wytwarzania aktywnych immunologicznie przeciwciał chimerycznych anty-CD20 (TCAE 8).
Figury od 2A do 2E przedstawiają sekwencję kwasu nukleinowego wektora z figury 1;
Figury od 3A do 3F przedstawiają sekwencje kwasu nukleinowego wektora z figury 1, zawierającego mysie regiony zmienne łańcucha lekkiego i ciężkiego (anty-CD20 w TCAE 8);
Figura 4 przedstawia sekwencję kwasu nukleinowego i sekwencję amino-kwasową (włączywszy CDR i regiony zrębowe) mysiego fragmentu zmiennego łańcucha lekkiego otrzymanego z mysiego przeciwciała monoklonalnego 2B8 anty-CD20.
Figura 5 przedstawia sekwencję kwasu nukleinowego i sekwencję aminokwasową (włączywszy CDR i regiony zrębowe) mysiego regionu zmiennego łańcucha ciężkiego uzyskanego z mysiego przeciwciała monoklonalnego 2B8 anty-CD20;
Figura 6 przedstawia wyniki badania metodą cytometrii przepływowej pokazujące wiązanie znakowanego fluorescencyjnie ludzkiego Clq z chimerycznym przeciwciałem anty-CD20, zawierającym, jako kontrola znakowane Clq; znakowane Clq mysie przeciwciało monoklonalne 2B8 anty-CD20; i znakowane Clq i ludzkie IgGl,k;
Figura 7 przedstawia wyniki badania lizy opartej na dopełniaczu, porównującego przeciwciało chimeryczne anty-CD20 i mysie przeciwciało monoklonalne 2B8 anty-CD20;
175 557
Figura 8 przedstawia wyniki badania cytotoksyczności komórkowej zależnej od przeciwciał z użyciem ludzkich komórek efektorowych in vivo, porównującego chimeryczne przeciwciało anty-CD20 i 2B8;
Figura 9A, 9B i 9C przedstawia wyniki usuwania limfocytów B krwi obwodowej naczelnego nie będącego człowiekiem po podaniu 0,4 mg/kg (A); 1.6 mg/kg (B); i 6,4 mg/kg (C) immunologicznie aktywnego przeciwciała chimerycznego anty-CD20;’
Figura 10 przedstawia wyniki, m. in. usuwania limfocytów B krwi obwodowej u naczelnego nie będącego człowiekiem po podaniu 0.01 mg/kg immunologicznie aktywnego chimerycznego przeciwciała anty-CD20;
Figura 11 przedstawia wyniki wpływu przeciwnowotworowego Y 2B8 w mysim modelu xenogenicznym wykorzystującym guz z limfoblastów B;
Figura 12 przedstawia wyniki wpływu przeciwnowotworowego C2B8 w mysim modelu ksenogenicznym wykorzystującym guz z limfoblastów B;
Figura 13 przedstawia wyniki wpływu przeciwnowotworowego połączenia Y2B8 i C2B8 w mysim modelu ksenogenicznym wykorzystującym guz z limfoblastów B; i
Figury 14A i 14B przedstawiają wyniki badania klinicznego Fazy I/II C2B8, pokazujące usuwanie populacji limfocytów B w czasie u pacjentów przejawiających częściową remisję choroby (14A) i małą remisję choroby (14B).
Ogólnie, przeciwciała zbudowane są z dwóch łańcuchów lekkich i dwóch łańcuchów ciężkich,; łańcuchy te tworzą Y, łańcuchy lekkie i ciężkie tworząc ramiona Y, zaś same łańcuchy ciężkie tworzą podstawę Y. Łańcuchy lekkie i ciężkie tworzą domeny homologii struktury i funkcji. Domeny zmienne zarówno łańcuchów lekkich (VL) jak i ciężkich (VH) odpowiadają za rozpoznawanie i specyficzność. Regiony stale łańcuchów lekkich (CL) i ciężkich )CH) zapewniają ważne właściwości biologiczne, np. łącznie się przeciwciał, wydzielanie, zdolność do przenikania bariery łożyskowej, wiązanie z receptorem Fc, wiązanie dopełniacza itp. Seria zdarzeń prowadzących do ekspresji genu immunoglobuliny w komórce produkującej przeciwciała jest złożona. Sekwencje genu regionu zmiennego położone są w oddzielnych segmentach genu określonych jako VH, D i JH, lub VL i JL. Segmenty te są łączone przez rearanżację DNA co powoduje ekspresję kompletnego regionu V łańcuchów lekkich i ciężkich. Poddane rearanżacji, połączone fragmenty V (VL-JL i VH-D-JH) kodują kompletne regiony lub domeny wiążące antygen łańcuchów lekkich i ciężkich.
Seroterapię ludzkich chłoniaków z limfocytów B przy użyciu mysich przeciwciał monoklonalnych anty-CD20 (1F5) opisał Press i in., (69 Blood 584,1987, patrz powyżej); opisane jednak wyniki lecznicze były niestety przejściowe. Dodatkowo, 25% badanych pacjentów rozwinęło odpowiedź na mysie przeciwciała (HAMA) w wyniku seroterapii. Press i in., sugeruje, że przeciwciała te skoniugowane z toksyną lub radioizotopem, zapewnić mogłyby dłużej działającą poprawę kliniczną w porównaniu z samym przeciwciałem.
Będąc pod wrażeniem wyniszczającego efektu chłoniaka z limfocytów B i istotnej potrzeby zapewnienia adekwatnego leczenia tej choroby, postanowiono wypróbować różnych podejść posiadając szczególne przeciwciało, 2B8, jako ogniwo łączące różne podejścia. Jedno z podejść korzystnie wykorzystuje zdolność ssaczego układu do szybkiego i efektywnego odnawiania limfocytów B krwi obwodowej; przy pomocy tego podejścia próbuje się, najogólniej, oczyszczać i usuwać limfocyty B z krwi obwodowej i tkanek iimfatycznych i w ten sposób usuwać chłoniaka z limfocytów B. Postanowiono uzyskać to przez użycie, m. in., immunologicznie aktywnych chimerycznych przeciwciał anty-CD20. W innym podejściu, próbowano ukierunkować znaczniki radioaktywne na komórki nowotworowe w celu ich zniszczenia.
W znaczeniu tu użytym, przeciwciało anty-CD20 określa przeciwciało, które rozpoznaje specyficznie nieglikozylowane białko powierzchniowe o masie 35000 Da, zwykle określane jako antygen różnicowania ograniczony do limfocytów B tzw. Bp35, określany powszechnie jako CD20. W znaczeniu tu użytym, chimeryczne użyte w stosunku do przeciwciał anty CD20, oznacza przeciwciała uzyskane w najkorzystniejszym wykonaniu drogą techniki rekombinacji DNA, i które zawierają zarówno ludzkie ( w ' tym gatunków
175 557 pokrewnych immunologicznie np. szympansie) i nie pochodzące od człowieka składowe: region stały przeciwciała chimerycznego jest w najkorzystniejszym wykonaniu praktycznie identyczny z regionem stałym natywnego przeciwciała ludzkiego; region zmienny przeciwciała chimerycznego w najkorzystniejszym wykonaniu pochodzi ze źródła innego niż ludzkie i posiada pożądaną specyficzność antygenową w stosunku do antygenu powierzchniowego CD20. Źródłem innym niż ludzkie może być każdy kręgowiec, którego można użyć do wytworzenia przeciwciał przeciwko ludzkiemu antygenowi powierzchniowemu CD20 lub materiałowi zawierającemu ludzki antygen powierzchniowy CD20. Takim źródłem mogą być, choć nie wyłącznie, gryzonie (np. królik, szczur, mysz itp.) i naczelne nie będące ludźmi (np. małpy Starego Świata, itp.). W najkorzystniejszym wykonaniu składowa nie pochodząca od człowieka (region zmienny) uzyskana jest od myszy. W znaczeniu tu użytym, określenie aktywne immunologicznie w odniesieniu do przeciwciał chimerycznych antyCD20, oznacza przeciwciało chimeryczne wiążące się z ludzkim C1q, pośredniczące w lizie zależnej od dopełniacza (CDC) ludzkich linii limfoidalnych B i powodujące lizę ludzkich komórek docelowych przez cytotoksyczność komórkową zależną od przeciwciał (ADCC). W znaczeniu tu użytym, określenia znakowanie pośrednie i podejście polegające na znakowaniu pośrednim oznaczają, że do przeciwciała przyłączony jest kowalencyjnie czynnik chelatujący i co najmniej jeden radioizotop przyłączony jest do czynnika chelatującego. Najkorzystniejsze czynniki chelatujące i radioizotopy wyszczególnione są przez Srivagtava, S. C. i Mease, R. C. Progress in Research on Ligands, Nuclides and Techniques for Labeling Monoclonal Antibodies Nucl. Med. Bio. 18/6:589-603 (1991) )Srivagtava) umieszczone tu jako odnośnik. Szczególnie korzystnym czynnikiem chelatującym jest związek zwany l-isothiocycmatobenzyl-3-methyldiothelene triaminepent acetic acid (MX-DTPA); szczególnie korzystnymi radioizotopami do znakowania pośredniego są ind [111] i ytr [90]. W znaczeniu tu użytym określenia znakowanie bezpośrednie i podejście polegające na znakowaniu bezpośrednim oznaczają, że radioizotop związany jest bezpośrednio z przeciwciałem kowalencyjnie (zwykle przez resztę aminokwasową). Najkorzystniejsze radioizotopy dostarczone są przez Srivagtava; szczególnie korzystnym radioizotopem do znakowania bezpośredniego jest jod [131] związany kowalencyjnie z resztą tyrozyny. Podejście polegające na znakowaniu pośrednim jest szczególnie korzystne.
Ujawnione tu podejścia lecznicze opierają się na zdolności układu odpornościowego naczelnych do szybkiej odnowy lub odmłodzenia limfocytów B we krwi obwodowej. Dodatkowo, ponieważ główna odpowiedź odpornościowa u naczelnych realizowana jest przez limfocyty T, gdy układ odpornościowy cierpi na niedobór limfocytów B we krwi obwodowej, nie ma potrzeby użycia nadzwyczajnych środków ostrożności (np. izolacji pacjenta itp.). Z powodu tych i innych szczególnych cech układu odpornościowego naczelnych, zaprezentowane tu podejście terapeutyczne leczenia zaburzeń limfocytów B pozwala na oczyszczenie krwi obwodowej z limfocytów B przy użyciu aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20. Ponieważ choroby limfocytów B krwi obwodowej, z definicji, wymagają dostępu do krwi w celu leczenia, droga podania aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 i znakowanych radioaktywnie przeciwciał antyCD20 jest najkorzystniej pozajelitowa; co w znaczeniu tu użytym oznacza podanie dożylne, domięśniowe, podskórne, doodbytnicze, dopochwowe czy dootrzewnowe. Spośród wymienionych najkorzystniejsze jest podanie dożylne.
Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciała anty-CD20 i znakowane radioaktywnie przeciwciała anty-CD20 dostarczane są techniką standardową w farmaceutycznie dopuszczalnym buforze, przykładowo, sterylnym roztworze fizjologicznym soli, sterylnej buforowanej wodzie, glikolu polipropylenowym, połączeniu wyżej wymienionych itp. Sposoby przygotowania środków do podania pozajelitowego opisane są w Pharmacutical Carriers & Formulations Martin, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed. (Mack Pub. Co., Easton, PA 1975). Odpowiednia, efektywna terapeutycznie ilość aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20 koniecznego do wywarcia efektu leczniczego u danego pacjenta może być określona standardowymi technikami dobrze znanymi specjalistom.
175 557
Efektywne dawkowanie (tzn. ilość efektywna terapeutycznie) aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20 zawiera się od około 0.001 do około 30 mg/kg masy ciała, korzystniej od około 0.01 do około 25 mg/kg masy ciała, zaś najkorzystniej od około 0.4 do około 20.0 mg/kg masy ciała. Dopuszczalne są również inne dawki; czynnikami wpływającymi na dawkę są choć nie tylko, ciężkość choroby; poprzednie podejścia lecznicze; stan ogólny pacjenta; choroby współistniejące itp. Oceny konkretnego pacjenta i określenia odpowiedniej dawki w obrębie podanych wartości lub poza nimi może dokonać specjalista w tym zakresie.
Wprowadzenie aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20 w podanym zakresie dawek, może być przeprowadzone jako pojedyncze leczenie lub jako seria. W odniesieniu do przeciwciał chimerycznych, korzystnym jest by podawanie nastąpiło w serii; to najkorzystniejsze podejście przewidziane zostało na podstawie metodologii leczenia niniejszej choroby. Nie pragnąc wiązać się z żadną szczególną teorią, ponieważ aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciała anty-CD20 są zarówno aktywne immunologicznie jak i wiążą się z CD20, po pierwszym podaniu pacjentowi aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 rozpoczyna się usuwanie limfocytów B z krwi obwodowej; obserwowano niemal całkowite usunięcie w ciągu około 24 godzin po podaniu. W związku z tym oczekuje się, że ponowne podanie(a) aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 (lub znakowanych radioaktywnie przeciwciał anty-CD20) pacjentowi: a) usunie pozostałe limfocyty B krwi obwodowej; b) rozpocznie oczyszczanie węzłów chłonnych z limfocytów B; c) rozpocznie oczyszczanie innych tkanek z limfocytów B, na szpiku, guza itp. jak to już wcześniej wspomniano, przez zastosowanie kilkakrotnych podań aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20, ma miejsce seria wydarzeń z których każde wydaje się być ważne dla efektywnego leczenia choroby. Za pierwsze wydarzenie więc, może być uważane nadrzędnie ukierunkowane gruntowne oczyszczenie krwi obwodowej pacjenta z limfocytów B; następujące po tym wydarzenia’ mogą być uważane zarówno za nadrzędnie ukierunkowane do równoczesnego lub następowego usuwania limfocytów B z układu, oczyszczającego węzły chłonne z limfocytów B lub oczyszczającego inne tkanki.
W efekcie, mimo iż pojedyncza dawka zapewnia korzyść i może być używana do leczenia/kontrolowania choroby, najkorzystniejszy kurs leczenia składa się z kilku etapów: w najkorzystniejszym wykonaniu dawka około 0.4 do około 20 mg/kg masy ciała aktywnych immunologicznie przeciwciał chimerycznych anty-CD20 podawana jest pacjentowi raz w tygodniu przez 2 do 10 tygodni, najkorzystniej przez 4 tygodnie.
Stwierdzono, że przeciwciała chimeryczne mają znacznie dłuższy okres półtrwania w stosunku do mysich przeciwciał, zatem korzystne byłoby stosowanie chimerycznych przeciwciał anty CD20 nieznakowanych radioaktywnie, bowiem z powodu dłuższego okresu półtrwania radioizotop jest dłużej obecny w organizmie pacjenta). Jednakże, znakowane radioaktywnie przeciwciała chimeryczne mogą być korzystnie używane z mniejszymi dawkami mili Curie (mCi) sprzęganymi z przeciwciałami chimerycznymi w stosunku do mysich przeciwciał. Scenariusz ten pozwala zmiejszyć toksyczność wywieraną na szpik do dopuszczalnych poziomów, przy zachowaniu użyteczności terapeutycznej.
Do znakowania przeciwciał stosować można różne radioizotopy, przy czym specjalista może dobrać radioizotop najużyteczniejszy przy uwzględnieniu różnych czynników. Przykładowo, jod [131] jest dobrze znanym radioizotopem używanym w immunoterapii kierowanej, jednakże, użyteczność kliniczna jodu [131] może być ograniczona przez kilka czynników, w tym: fizyczny okres półtrwania wynoszący osiem dni, dehalogenację jodowanego przeciwciała we krwi i w guzie, charakterystyka emisji (tzn. olbrzymia składowa gamma) która może być suboptymalna dla umiejscowionej w guzie dawki. Wraz z wprowadzeniem doskonalszych czynników chelatujących, możliwość przyłączenia grup chelatujących metale do białek zwiększyła możliwość stosowania innych radioizotopów jak ind [111] i itr [90]. Stosowanie itru [90] w radioimmunoterapii dostarcza wielu korzyści: 64 godzinny okres półtrwania itru [90] jest wystarczająco długi by umożliwić akumulację przeciwciała w guzie; w przeciwieństwie do jodu [131] itr [90] jest czystym emiterem beta o wysokiej energii,
175 557 bez towarzyszącego rozkładowi promieniowania gamma, o zasięg rzędu 100 do 1000 średnic komórkowych. Ponadto, minimalna -ilość przenikliwego promieniowania pozwala podawać przeciwciała znakowane itrem [90] w trybie ambulatoryjnym. Ponadto do zabicia komórki nie jest konieczna internalizacja przeciwciała, zaś miejscowa emisja promieniowania powinna być śmiercionośna dla otaczających komórek nowotworowych nie posiadających antygenu docelowego.
Jednym z ograniczeń nie leczniczych itru [90] jest brak znaczącego promieniowania gamma co czyni obrazowanie trudnym. W celu uniknięcia tego problemu, do określania położenia i względnej wielkości guza przed podaniem dawek leczniczych przeciwciała anty-CD20 znakowanego itrem [90], można używać radioizotopu do obrazowania diagnostycznego jak np. ind [111]. Ind [111] jest szczególnie korzystny jako radioizotop diagnostyczny ponieważ: od 1 do około 10 mCi może być bezpiecznie podane bez zauważalnej toksyczności; a uzyskane obrazy są zwykle zgodne z rozmieszczeniem podanego następnie przeciwciała znakowanego itrem [90]. W większości badań wykorzystuje się przeciwciała znakowane 5 mCi indu [111] ponieważ ta dawka jest zarówno bezpieczna jak i posiada zwiększoną wydajność obrazowania w porównaniu z dawkami mniejszymi, z optymalnym obrazowaniem występującym w trzy do sześciu dni po podaniu przeciwciał. Patrz, przykładowo, Murray, J. L. 26 J. Nuc. Med. 3328 (1985) i Carraguillo, J. A. 26 J. Nuc. med. 67 (1985).
Efektywne dawki jednorazowe (tzn. dawki efektywne terapeutycznie) przeciwciał anty-CD20 znakowanych itrem [90] zawierają się pomiędzy około 5 do około 75 mCi, korzystniej pomiędzy około 10 a około 40 mCi. Efektywna pojedyncza dawka przeciwciała anty-CD20 znakowanego jodem [131], nie powodująca ablacji szpiku, zawiera się pomiędzy 5 a około 70 mCi, korzystniej pomiędzy 5 a około 40 mCi. Efektywna pojedyncza dawka ablacyjna (tzn. która może wymagać autologicznego przeszczepienia szpiku) przeciwciała anty-CD20 znakowanego jodem [131] zawiera się pomiędzy 30 a około 600 mCi, korzystniej pomiędzy 50 a około 500 mCi. W połączeniu z chimerycznym przeciwciałem anty-CD20, dzięki dłuższemu okresowi półtrwania w stosunku do mysich przeciwciał, efektywna pojedyncza dawka chimerycznych przeciwciał anty-CD20 znakowanych jodem [131] nie powodująca ablacji szpiku, zawiera się pomiędzy około 5 a około 40 mCi, korzystniej zaś mniej niż 30 mCi. Dawka obrazująca dla np. znacznika jakim jest ind [111], wynosi zwykle mniej niż 5 mCi.
W przypadku stosowania przeciwciał anty-CD20 znakowanych radioaktywnie, terapię można prowadzić przy użyciu pojedynczej dawki jak i dawek wielokrotnych. Z powodu składowej radioaktywnej, korzystnie od pacjent, który będzie narażony na potencjalnie śmiertelne w skutkach uszkodzenie szpiku wynikające z napromieniowania, pobiera się krążące komórki macierzyste )PSC) lub szpik (BM) przed zastosowaniem leczenia. BM i/lub PSC zbierane są przy użyciu standardowych technik, po czym oczyszczane i zamrażane do czasu ewentualnej reinfuzji. Dodatkowo, niezwykle korzystnym jest, by przed leczeniem wykonać u pacjenta badanie dozymetryczne przy użyciu przeciwciał znakowanych znacznikiem diagnostycznym (np. indem [111] w celu upewnienia się, że przeciwciało znaczone terapeutycznie (np. ytrem [90] nie zostanie zgromadzone niepotrzebnie w innym normalnym narządzie czy tkance.
Opisano przeciwciała chimeryczne mysio-ludzkie. patrz, przykładowo, Morrison, S. L. i in., PNAS 11:6851-6854 (Nov 1984); European Patent Publication No. 173494; Boulianne, G. L. i in., Nature 312:642 (Dec 1984); Neubeiger, M. S. i in., Nature 314:268 (mar 1985); European Patent Publication No. 125023; Tan i in., J. Immunol. 135:8564 (Nov 1985); Sun, L. K. i in., Hybridoma 5/1:517 (1986); Sahagan i in., J. Immunol. 137:1066-1074 (1986). Patrz ogólnie, Muron, Nature 312:597 (Dec 1984); Dickson, Genetic Ingineering News 5/3 (Mar 1985); Marx, Science 229, 455 (Aug 1985); i Morrison, Science 229:1202-1207 (Sep 1985). Robinson i in., w PCT Publicatation Number WO 88/04936 opisuje chimeryczne przeciwciało z ludzkim regionem stałym i mysim regionem zmiennym, posiadające specyficzność w stosunku do epitopu CD20; mysia część przeciwciała chimerycznego Robinsona uzyskana została z mysiego przeciwciała monoklonalnego 2H7 (gamma 2b, kappa). Aczkolwiek w cytowanej publikacji podkreśla się, że przeciwciało chimeryczne jest
175 557 pierwszym kandydatem do leczenia zaburzeń limfocytów B. stwierdzenie to może być odbierane jedynie jako sugestia dla osoby kompetentnej by stwierdzić czy ta sugestia jest trafna czy nie dla poszczególnego przeciwciała, zwłaszcza że w publikacji brakj akichkolwiek danych podpierających stwierdzenie o efektywności trapeutycznej, i, co ważne, danych pochodzących od wyższych ssaków jak naczelne czy ludzie.
Metodologie dla wytworzenia przeciwciał chimerycznych są dostępne specjalistom. Przykładowo, łańcuchy lekkie i ciężkie mogą być ekspresjonowane osobno, przy użyciu, przykładowo, osobnych plazmidów. Mogą one być oczyszczane i łączone in vitro w kompletne przeciwciała: metodologie dla wykonania takiego łączenia opisano. Patrz, przykładowo, Scharff. M., Harvey Lectures 69:125 (1974). Parametry reakcji in vitro tworzenia przeciwciał IgG ze zredukowanych, izolowanych łańcuchów lekkich i ciężkich również zostały opisane. Patrz, przykładowo, Beychok, S. Cells of Immunoglobulin Synthesis, Academic Press, New York, str. 69,1979. Możliwa jest również koekspresj a łańcuchów ciężkich i lekkich w tej samej komórce w celu wewnątrzkomórkowego łączenia łańcuchów ciężkich i lekkich w kompletne przeciwciała H2L2 IgG. Koekspresja taka może być uzyskana przy użyciu jednego lub rożnych plazmidów w tej samej komórce gospodarza.
Inne podejście, i jedno z najkorzystniejszych podejść w opracowaniu chimerycznych ludzkich-nie ludzkich przeciwciał anty-CD20, oparte j est na wykorzystaniu wektora ekspresyjnego zawierającego, ab initio, DNA kodujące regiony stałe łańcuchów ciężkich i lekkich pochodzących od człowieka. Wektor taki umożliwia wprowadzanie DNA kodującego regiony zmienne pochodzące nie od człowieka, tak, że mogą być wytworzone, wybrane i badane na różne charakterystyki (np. typ specyfiki wiązania, regiony wiązania epitopu itp.) różnorodne nie ludzkie przeciwciała anty-CD20, a następnie cDNA kodujące regiony zmienne łańcuchów ciężkich i lekkich z najkorzystniejszego i pożądanego przeciwciała anty-CD20 może być wprowadzone do wektora. Określa się taki typ wektora jako Tandem Chimeric Antibody Expression vector (TCAE). Najkorzystniejszym wektorem TCAE użytym do wytworzenia immunologicznie aktywnych przeciwciał chimerycznych anty-CD20 do zastosowań leczniczych w chłoniakach, jest TCAE 8. TCAE 8 jest pochodną wektora, będącego w posiadaniu osób podpisanych pod niniejszym wnioskiem patentowym, oznaczonego jako TCAE 5.2 tym jednak się różniącą od TCAE 5.2, że w tym ostatnim miejsce zapoczątkowania translacji znacznika umożliwiającego selekcję (fosfotransferazy neomycynowej, NEO) stanowi konsensus sekwencji Kozaka, podczas gdy w TCAE 8 w miejscu tym jest częściowo zmieniona sekwencja Kozaka. Szczegóły dotyczące wpływu miejsca zapoczątkowania translacji markera umożliwiającego selekcję wektorów TCAE (określanych również jako wektory ANEX) w stosunku do ekspresji białka ujawnione są szczegółowo w równolegle zgłoszonym zgłoszeniu. TCAE 8 zawiera cztery (4) kasety transkrypcyjne, w układzie tandemowym, tzn. ludzki łańcuch ciężki immunoglobuliny pozbawiony części zmiennej; ludzki łańcuch ciężki immunoglobuliny pozbawiony części zmiennej; DHFR i NEO. Każda z kaset zawiera własny promotor eukariotyczny i region poliadenylacji (patrz Figura 1, będąca schematyczną reprezentacją wektora TCAE 8). Szczegółowo:
1) promotor-wzmacniacz CMV z przodu łańcucha ciężkiego immunoglobuliny jest okrojoną wersją promotora-wzmacniacza z przodu łańcucha lekkiego, od miejsca Nhel w pozycji -350 do miejsca Sstl w pozycji -16 (patrz, 41 Cell 521,1985).
2) część stałą ludzkiego łańcucha lekkiego immunoglobuliny uzyskano drogą amplifikacji cDNA w reakcji PCR. W TCAE 8 był to region stały ludzkiego łańcucha lekkiego kappa immunoglobuliny (numeracja Kabata, aminokwasy od 108 do 214, allotyp Km 3 (patrz, Kabat, E. A. Seąuences of proteins of immunological interest, NIH Publication, Fifth Ed. No. 91-3242,1991)), i region stały ludzkiego łańcucha ciężkiego gamma 1 immunoglobuliny (numeracja Kabata aminokwasy od 114 do 478, allotyp Gmila, Gmlz). Łańcuch lekki wyizolowano z normalnej ludzkiej krwi (IDEC Pharmaceutical Corporation, La Jolla, CA); RNA zeń użyto do syntezy cDNA, które następnie amplifikowano przy użyciu PR. (startery otrzymano w oparciu o sekwencje z Kabata). Łańcuch ciężki wyizolowano (przy użyciu techniki PR.) z cDNA przygotowanego z RNA uzyskanego z komórek transfekownych
175 557 wektorem ludzkiej IgG (patrz, 3 Prot. Eng. 531, 1990; wektor pNgamma 162). Dwa aminokwasy zmieniono w izolowanej ludzkiej IgG w celu dopasowani do consensusu sekwencji aminokwasowej z Kabata, jak następuje: aminokwas 225 zmieniono z waliny na alaninę (GTT na GCA) i aminokwas 287 zmieniono z metioniny na lizynę (ATG na AAG);
3) kasety ludzkich łańcuchów lekkich i ciężkich immunoglobuliny zawierają syntetyczne sekwencje sygnałowe do wydzielania przeciwciał;
4) kasety ludzkich łańcuchów lekkich i ciężkich immunoglobulin zawierają specyficzne miejsca restrykcyjne umożliwiające wprowadzanie regionów zmiennych łańcuchów ciężkich i lekkich immunoglobulin zapewniające translacyjną ramkę odczytu i nie zmieniające sekwencji aminokwasów normalnie spotykanych w łańcuchach immunoglobuliny;
5) Kaseta DHFR zawiera własny eukariotyczny promotor (mysi promotor większy beta globiny BETA) i region poliadenylacji (miejsce poliadenylacji wołowego hormonu wzrostu bGh); i
6) Kaseta NEO zawiera jej własny promotor eukariotyczny (BETA) i region poliadenylacji (SV40 wczesny sygnał poliadenylacji, ''SV).
W przypadku wektora TCAE 8 i kasety NEO, region Kozaka stanowiła częściowo zmieniona sekwencja Kozaka (zawierająca powyżej miejsce Clal):
Clal -3+1
GGGAGCTTGG ATCGAT ccTct ATG Gtt (W wektorze TCAE 5.2, zmiana jest pomiędzy Clal i regionu ATG i brzmi ccAcc)
Kompletna lista sekwencji TCAE 8 (zawierająca specyficzne składniki czterech kaset ekspresyjnych) wyszczególniona jest na figurze 2 (Identyfikator Sekw. Nr. 1:0)
Specjaliści doceniają fakt, że wektory TCAE pozwalają zmniejszyć ilość czasu wymaganego do wytworzenia aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20. Wytworzenie i izolacja nie pochodzących od człowieka regionów zmiennych łańcucha lekkiego i ciężkiego, po czym wprowadzenie ich do kasety transkrypcyjnej części stałej ludzkiego łańcucha lekkiego i kasety transkrypcyjnej części stałej ludzkiego łańcucha ciężkiego, pozwoliło wyprodukować aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciała anty-CD20.
Przy użyciu technologii hybrydomy i mysiego źródła uzyskano najkorzystniejszy region zmienny, nie pochodzący od człowieka, ze specyficznością do antygenu CD20. Przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR.), mysie regiony zmienne łańcucha lekkiego i ciężkiego wklonowano bezpośrednio do wektora TCAE 8 - jest to najkorzystniejsza droga wbudowywania regionu zmiennego nie pochodzącego od człowieka, do wektora TCAE. Preferencja ta jest głównie spowodowana wydajnością reakcji PCR. i dokładnością wprowadzania. Jednakże, możliwe i dostępne są inne procedury zamienne do wykonania tego zadania. Przykładowo, używając TCAE 8 (lub zamiennego wektora) sekwencja regionu zmiennego przeciwciała anty-CD20 nie pochodząca od człowieka, może być uzyskana, w następstwie syntezy oligonukleotydów części sekwencji lub jeżli to konieczne, całej sekwencji; a następnie, części lub cała sekwencja może zostać wprowadzona w odpowiednie miejsce w obrębie wektora. Osobom kompetentnym powierza się wykonanie tego zadania.
Najkorzystniejsze aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciała anty-CD20 uzyskano przez użycie wektora TCAE 8, zawierającego mysie regiony zmienne uzyskane z przeciwciała monoklonalnego przeciwko CD20; przeciwciało to (dyskutowane szczegółowo, poniżej) oznaczono 2B8. Kompletna sekwencja regionu zmiennego uzyskanego z 2B8 w TCAE 8 )anty-CD20 w TCAE 8) podana jest w Figurze 3)Identyfikator Sekw. Nr. 2).
Komórka gospodarcza użyta do ekspresji białka jest najkorzystniej pochodzenia ssaczego; osobom kompetentnym powierza się określenie szczególnej linii komórkowej najlepiej odpowiadającej pożądanemu produktowi genu, który ma być w niej ekspresjonowany. Przykładowe linie komórkowe obejmują, choć nie są do nich ograniczone: DG44 i DUXBII (linie jajnika chomika, DHFR negatywne), HeLa (ludzki rak szyjki macicy), CVI (linia małpiej nerki), COS (pochodna CVI z antygenem T SV40), R1610 (fibroblasty chomika), BALB/3T3 (mysie fibroblasty),HAK (linia nerki chomika), Sp2/0 (mysi szpiczak), P3x63Ag3.653 (szpiczak mysi), BFAIcIBPT (wołowe komórki śródbłonka), RAJI
175 557 (limfocyty ludzkie) i 293 (ludzka nerka), linie gospodarza dostępne są zwykle ze źródeł handlowych, ATCC lub z publikowanej literatury.
Korzystnie linią gospodarza jest DG44 (CHO) lub SP2/0. patrz Urland, G. i in., Effect of gamma rays and the dihydrofolate reductase locus: deletions and inversions’'. Som.Cell&Mol. Gen 12/6:555-556 (1986), i Shulman, M. i in., A better cell line for making hybridomas secreting specific antibodies. Nature 276:269 (1987). Najkorzystniej linią gospodarza jest DG44. Transfekcja plazmidu do komórki gospodarza może być wykonana dowolną techniką dostępną osobom kompetentnym. Techniki te obejmują, choć nie są ograniczone do: trasfekcji (w tym elektroforezę i elektroporację), fuzję komórek z opłaszczonym DNA, mikroiniekcję i zakażenie wirusem. Patrz, Ridgway, A. A. G. Mammalian Expression Vectors, rozdział 24. 2, str. 470-472 Vectors, Rodriguez i Denhardt, Eds. (Butterworths, Boston, MA 1988). Najkorzystniejsze jest wprowadzanie plazmidu do komórki gospodarza drogą elektroporacji.
PRZYKŁADY
Celem poniższych przykładów nie jest ograniczanie zakresu wynalazku. Przykłady podano w celu zilustrowania aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał antyCD20 (C2B8) uzyskanych przy użyciu specyficznego wektora (TCAE 8) i regionów zmiennych uzyskanych z mysiego przeciwciała monoklonalnego anty-CD20 (2B8).
I. WYTWORZENIE CHIMERYCZNYCH PRZECIWCIAŁ ANTY-CD20 (C2B8)
A. Konstruowanie wektora ekspresjonującego DNA chimerycznej Immunoglobuliny anty-CD20.
RNA wyizolowano z komórek hybrydomy mysiej 2B8 (tak jak to opisano Chomczynski. P. i in., 1 Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenolchloroform extraction. Anal. Biochem. 162: 156-159 (1987)). i przygotowano z niego cDNA. Z cDNA Wyizolowano DNA regionu zmiennego łańcucha lekkiego mysiej immunoglobuliny przez reakcję łańcuchową polimerazy z użyciem zestawu starterów DNA o homologii z sekwencjami sygnałowymi mysiego łańcuch lekkiego na końcu 5' i regionu J łańcucha lekkiego na końcu 3'. Sekwencje starterów przedstawiono poniżej:
1. VL Sensowny (Identyfikator Sekw. Nr. 3)
5' ATC AC AGATCCTC ACC ATG GAT TTT CAG GTG CAG ATT ATC AGC
TTC 3'
Podkreślona część stanowi miejsce restrykcyjne BgI II, zaznaczono start kodon.
VL Antysensowny (Identyfikator Sekw. Nr. 4)
5' TGC AGC ATC CGTACG TTT GAT TTC CAG CTT 3'
Podkreślone miejsce stanowi miejsce Bsi WI.
Patrz, Figura 1 i 2 odpowiednie miejsce BgI II i Bsi WI w TCAE 8, i Figura 3 odpowiednie miejsce w anty-CD20 w TCAE 8.
Powstałe w wyniku fragmenty DNA wklonowano bezpośrednio do wektora z przodu domeny stałej ludzkiego łańcucha lekkiego kappa i sekwencjonowano. Określona sekwencja DNA dla regionu zmiennego mysiego łańcucha lekkiego podana jest w Figurze 4. (Identyfikator Sekw. Nr 5); patrz również Figura 3, nukleotydy od 978 do 1362. Figura 4 dostarcza dalej sekwencję aminokwasową z mysiego regionu zmiennego i regionów CDR i zrębowych. Region zmienny mysiego łańcuch lekkiego z 2B8 należy do rodziny VI kappa. Patrz, Kabat, powyżej.
Region zmienny mysiego łańcucha ciężkiego wyizolowano w podobny sposób i wklonowano z przodu domen stałych ludzkiej IgG1. Startery były jak następuje:
1. VH Sensowny (Identyfikator Sekw. Nr. 6)
5' GCG GCT CCC ACGCGT GTC CTG TCC CAG 3' (Podkreślona część stanowi miejsce restrykcyjne MIu I).
2. VH Antysensowny (Identyfikator Sekw. Nr. 7)
5' GG(G/C) TGT TGT GCTAGC TG(A/C) (A/G)GA GAC (G/A)GT GA 3
Podkreślona część stanowi miejsce Nhe I).
Patrz, Figura 1 i 2 odpowiednie miejsca MIu I i Nhe I w TCAE 8, i Figur 3 odpowiednie miejsca w anty-CD20 w TCAE 8.
175 557
Sekwencja mysiego łańcucha ciężkiego pokazana jest w figurze 5 (Identyfikator Sekw. Nr. 8); patrz również figura 3, nukleotydy od 2401 do 2820. Figura 5 dostarcza również sekwencji aminokwasowej mysiego regionu zmiennego, oraz regionów CDR i zrębowych. Region zmienny mysiego łańcucha ciężkiego z 2B8 należy do mysiej rodziny VH 2B. Patrz, Kabat, powyżej. B. Tworzenie Transfektom CHO i SP2/0 Produkujących chimeryczne Anty-CD20.
Komórki DG44 jajnika chomika (CHO) hodowano w pożywce SSFM II bez hipoksantyny i tymidyny (Gibco, Grand Island, NY, Nr 91-0456PK); komórki SP2/0 mysiego szpiczaka hodowano w pożywce Dulbecco's Modified Eagles Medium (DMEM) (Irvine Scientific, Santa ANA, Ca., Cat. Nr. 9024) z 5% wołową surowicą płodową i dodatkiem 20 ml/l glutaminy. Cztery miliony komórek poddano elektroporacji, z 25 mig CHO bądź 50 mig SP2/0 plazmidowego DNA przeciętego przy użyciu Not I, za pomocą zestawu do elektroporacji BTX 600 (BTX, San Diego, CA) w 0.4 ml kuwetach jednorazowych. Warunki były następujące 210 wolt dla CHO bądź 180 wolt dla SP2/0,400 mikrofaradów, 13 omów. Każdą z reakcji wysiewano na płytki 96 studzienkowe (około 7000 komórek/studzienkę). Płytki odżywiano pożywką zwierającą G418 (GENETICIN, Gibco, Cat. Nr. 860-1811) w stężeniu 400 mig/ml dla CHO (pożywka ponadto zawierała 50 miM hipoksantyny i 8 miM tymidyny) lub 800 mig/ml dla SP2/0, dwa dni po elektroporacji a następnie co 2-3 dni dopóki nie pojawiły się kolonie. Nadsącza z kolonii badano na obecność immunoglobulin chimerycznych metodą ELISA specyficznego dla ludzkich przeciwciał. Kolonie produkujące największe ilości immunoglobuliny rozpropagowano i wysiano na płytki 96 studzienkowe zawierające pożywkę z metotreksatem (25 nM dla SP2/0 i 5 nM dla CHO) i odżywiano co dwa lub trzy dni. Supernatanty badano jak powyżej i badano kolonie produkujące największe ilości immunoglobuliny. Chimeryczne przeciwciało anty-CD20 oczyszczano z nadsączy przy użyciu chromatografii opartej na powinowactwie białka A.
Oczyszczone chimeryczne przeciwciało anty-CD20 badano przez elektroforezę na żelu poliakrylamidowym i oceniono, że jest w ponad 95% czyste. Powinowactwo i specyficzność przeciwciała chimerycznego oznaczano w odniesieniu do 2B8. Chimeryczne przeciwciało anty-CD20 badane w teście bezpośrednim i współzawodnictwie o miejsce wiązania, w porównaniu z mysim przeciwciałem monoklonalnym 2B8 anty-CD20, wykazywało porównywalne powinowactwo i specyficzność w stosunku do licznych komórek posiadających CD20 (dane nie pokazane). Stałą powinowactwa (Kap) określono przez bezpośrednie wiązanie znakowanego 1125 chimerycznego przeciwciała anty-CD20 i porównano ze znakowanym radioaktywnie 2B8 wykresem Scatchard'a; obliczona Kap dla chimerycznego przeciwciała anty-CD20 produkowanego przez CHO wynosiła 5.2x10-9 M i dla przeciwciała produkowanego przez SP2/0 7.4x10-9 M. Obliczona Kap dla 2B8 wynosiła 3.5x10-9 M. Bezpośrednie współzawodnictwo w teście radioimmunologicznym wykonano w celu potwierdzenia zarówno specyficzności jak i zachowania immunoreaklywności chimerycznego przeciwciała przez porównanie jego zdolności do efektywnego współzawodnictwa z 2B8. Mniej więcej równe ilości chimerycznego przeciwciała anty-CD20 i 2B8 potrzebne były do 50% zahamowania wiązania z antygenem CD20 na limfocytach B (wyniki nie pokazane), tzn przeciwciała w minimalnym stopniu utraciły zdolność do zahamowania, prawdopodobnie na skutek chimeryzacji.
Wyniki uzyskane w Przykładzie I. B wskazują, m. in., że wytworzono przy pomocy transfektom CHO i SP2/0 z użyciem wektorów TCAE 8, chimeryczne przeciwciała antyCD20, i że przeciwciała te posiadają praktycznie tą samą specyficzność i zdolność wiązania jak mysie przeciwciało monoklonalne 2B8 anty-CD20.
C. Oznaczenie Aktywności Immunologicznej chimerycznych przeciwciał Anty-CD20
i. Badanie z użyciem Ludzkiego C1q
Chimeryczne przeciwciała anty-CD20 produkowane przez CHO i SP2/0 badane były na zdolność wiązania ludzkiego C1q w badaniu cytofluorymetrią przepływową przy użyciu C1q znakowanego fluoresceiną (C1q otrzymano z Quidel, Mira Mesa, CA, Nr. prod. A400 zaś znacznik FITC z Sigmy, St. Louis, Mo, nr. prod. F-7250; FITC). Znakowanie C1q wykonano zgodnie z protokołem opisanym w Selected Methods in Cellular Immunology
175 557
Michell & Shigii, Ed. (W. H. Freeman & Co., San Francisco, CA, 1980, str. 292). Wyniki uzyskano przy użyciu fluorymetru przepływowego Becton Dickinson FACScan (fluoresceinę mierzono w zakresie 515-545 nm). Porównywalne ilości chimerycznego przeciwciała anty-CD20, białka ludzkiego szpiczaka IgG1, K (Binding Site, Dan Diego, CA, Nr. prod. BP078), i 2B8 inkubowano z podobną liczbą komórek SB posiadających antygen CD20, a następnie przepłukano buforem FACs (0,2% BSA w PBS, pH 7.4, 0.025 azydku sodu) w celu usunięcia niezwiązanego przeciwciała, a następnie inkubowano z C1q znakowanym FITC. Po 30-60 minutach inkubacji komórki ponownie przepłukiwano. Zawiesiny komórek analizowano na FACScanie zgodnie z instrukcją producenta, używając C1q znakowanego FITC jako kontroli. Wyniki przedstawiono w figurze 6.
Jak wskazują wyniki w figurze 6, istotny wzrost fluorescencji obserwowano wyłącznie stosując chimeryczne przeciwciało anty-CD20; tzn tylko komórki SB ze związanymi chimerycznymi przeciwciałami anty-CD20 wiązały C1q, podczas gdy inne warunki powodowały wzorzec podobny do kontroli.
ii. Liza Komórkowa Zależna od Dopełniacza
Chimeryczne przeciwciało anty-CD20 badano na zdolność do lizy komórek linii chłoniaka w obecności ludzkiej surowicy (jako źródła dopełniacza). Komórki SB posiadające antygen CD20 znakowane były Cr51 przez dodanie 100 miCi 51 Cr do 1x106 komórek SB przez 1 godzinę w temp. 37°C; znakowane komórki SB inkubowano w obecności porównywalnych ilości ludzkiego dopełniacza i porównywalnych iloś<^i_(0-50 mig/ml) chimerycznego przeciwciała anty-CD20 bądź 2B8 przez 4 godziny w temp. 37°C (patrz, Brunner, K.T. i in., Quantitative assay of the lytic action of immune lymphoid cells on Cr51-labeled allogeneic target cells in vitro Immunology 14:181-189 (1968). Wyniki umieszczono w figurze 7.
Wyniki zamieszczone w figurze 7 wskazują, że m.in., chimeryczne przeciwciało antyCD20 powoduje znaczną lizę (49%) w użytych warunkach.
iii. Test Cytotoksyczności Komórek Efektorowych Zależnej od Przeciwciał
Do badania tego używano komórek z antygenem CD20 (SB) i nie posiadających CD20 (linia białaczki HSB z limfocytów T; patrz Adams, R. Formal Discussion Can. Res. 27:2479-2482 (1967); depozyt ATCC CCL 120. 1); znakowanych Cr51. Badanie przeprowadzono w sposób opisany w Brunner, K.T. i in., Quantitative assay of the lytic action of immune lymphoid cells on Cr51-labeled allogeneic target cells in vitro Immunology 14:181189 (1968); obserwując znaczącą lizę komórek SB (znakowanych Cr51) w której pośredniczyły chimeryczne przeciwciała anty-CD20 pod koniec 4 godziny inkubacji w temp. 37°C, zarówno dla przeciwciał produkowanych przez CHO jak i SP2/0 (komórkami efektorowymi były ludzkie limfocyty obwodowe; stosunek komórek efektorowych do docelowych wynosił 100:1). Wydajną lizę komórek docelowych uzyskano przy 3.9 mig/ml. W przeciwieństwie, w tych samych warunkach mysie przeciwciało monoklonalne 2B8 anty-CD20 nie wywierało znaczącego efektu, zaś komórki HSB nie posiadające antygenu CD20 nie uległy lizie. Wyniki przedstawiono w figurze 8.
Wyniki uzyskane w Przykładzie I wskazują, m.in., że chimeryczne przeciwciała antyCD20 z Przykładu I były aktywne immunologicznie.
II. USUWANE UMFOCYTÓW B IN VI VO PRZYUŻYCIU CHIMERYCZNYCH ANTY-CD20
A. Badanie z Użyciem Naczelnych Nie Będących Ludźmi.
Przeprowadzono trzy osobne badania z użyciem naczelnych. Dla wygody określane one są tu jako: Chimeryczne anty-CD20: CHO i SP2/0; Chimeryczne anty-CD20: CHO i 'Duża Dawka Chimerycznych Anty CD20. Warunki badania były następujące: Chimeryczne anty-CD20: CHO i SP/20
Sześć małp cynomolgus o wadze od 4.5 do 7 kilogramów (White Sands Research Center, Alamogordo, NM) podzielono na trzy grupy po dwie małpy w każdej. Oba zwierzęta w każdej grupie otrzymały tę samą dawkę immunologicznie aktywnych chimerycznych przeciwciał anty-CD20. Jedno ze zwierząt w każdej grupie otrzymało oczyszczone przeciwciało wyprodukowane przez transfektomę CHO; drugie otrzymało przeciwciało wyprodukowane przez SP2/0. Trzy grupy otrzymały dawki przeciwciał odpowiadające 0.1 mg/kg,
175 557
0,4 mg/kg i 1.6 mg/kg dziennie przez cztery kolejne dni. Immunologicznie aktywne chimeryczne przeciwciało anty-DC20 podawano w roztworze fizjologicznym soli drogą infuzji dożylnej; pobierając próbki krwi przed podaniem. Dodatkowe próbki pobrano począwszy od 24 godziny po ostatnim podaniu (T=0) a potem dnia 1,3,7 i 28; próbki krwi pobierano również później w odstępach dwutygodniowych do zakończenia badania dnia 90. Około 5 ml krwi pełnej od każdego zwierzęcia odwirowano przy 200 RPM przez 5 minut. Osocze pobrano do badania na rozpuszczone chimeryczne przeciwciała anty-CD20. Peletkę (zawierającą leukocyty krwi obwodowej i czerwone krwinki) zawieszono w wołowej surowicy płodowej do badania przy użyciu przeciwciał znakowanych fluoresceiną (patrz, Fluorescent Antibody Labeling of Lymphoid Celi Population, poniżej).
Chimeryczne Anty-CD20; CHO
Sześć małp cynomolgus ważących od 4 do 6 kilogramów (White Sands) podzielono na trzy grupy po dwie w każdej. Wszystkim zwierzętom podano immunologicznie aktywne chimeryczne przeciwciała anty-CD20 produkowane przez CHO (w sterylnym roztworze soli), trzy grupy podzielono następująco: podgrupa 1 otrzymywała codziennie iniekcje dożylne przeciwciała 0.01 mg/kg przez cztery dni, podgrupa 2. otrzymywała codziennie iniekcje dożylne przeciwciała 0,4 mg/kg przez cztery dni, podgrupa 3 otrzymała pojedynczą iniekcję przeciwciała 6.4 mg/kg. Od wszystkich trzech grup pobierano próbki krwi przed rozpoczęciem podawania; dodatkowo próbki krwi pobierano dnia 0, 1, 3, 7, 14 i 28 po ostatnim wstrzyknięciu, tak jak to opisano powyżej, i próbki te poddawano badaniu z użyciem przeciwciał znakowanych fluoresceiną (patrz Fluorescent Antibody Labeling of Lymphoid Celi Population, poniżej). Dodatkowo, oprócz lic:z^nia limfocytów B krwi obwodowej, pobierano biopsje węzłów chłonnych dnia 7, 14 i 28 po ostatniej iniekcji, i zawiesiny jednokomórkowe barwiono do liczenia populacji limfocytów metodą cytometrii przepływowej.
Duża Dawka Chimerycznych anty-CD20
Dwóm małpom cynomolgus (White Sands) przetoczono po 16.8 mg/kg immunologicznie aktywnego chimerycznego przeciwciała anty-CD20 pochodzącego z transfektomy CHO (w sterylnym roztworze soli) cotygodniowo, w ciągu czterech kolejnych tygodni. Na zakończenie podawania oba zwierzęta znieczulono do pobrania szpiku; pobrano również biopsje węzłów chłonnych. Oba zestawy tkanek barwiono na obecność limfocytów B przy użyciu Leu 16 i analizowano cytometrią przepływową w oparciu o protokół opisany przez Ling, N. R. i in., B-cell and plasma celi antigens Leucocyte Typing III White Celi Differentation Antigens, A. J. McMichael, ed. (Oxford University Press, Oxford UK, 1987), str. 302.
Znakowanie Fluorescencyjne Przeciwciałami Populacji komórek Limfoidalnych.
Po usunięciu osocza, leukocyty przemywano dwukrotnie HBSS i zawieszano w wołowej surowicy płodowej (inaktywowanej ciepłem przy 56°C przez 30 min), o objętości równej usuniętemu osoczu. 0.1 ml objętości zawiesiny komórek dodano do każdej z sześciu 15 ml stożkowych probówek wirowniczych. Znakowane fluorescencyjnie przeciwciała monoklonalne specyficzne w stosunku do markerów powierzchniowych ludzkich limfocytów CD2 (AMAC, Westbrook, ME), CD20 (Becton Dickinson) i ludzkich IgM (Binding Site, San Diego, CA) dodano do trzech z probówek w celu identyfikacji populacji limfocytów T i B. Uprzednio, wszystkie odczynniki z powodzeniem sprawdzono w stosunku do odpowiednich antygenów małpich. Chimeryczne przeciwciało anty-CD20 związane z CD20 na powierzchni małpich limfocytów B mierzono w czwartej probówce przy użyciu poliklonalnych przeciwciał kozich przeciwko ludzkim IgG sprzężonych z fikoerytryną (AMAC). Odczynnik ten preadsorbowano na kolumnie z sefarozy sprzężonej z małpimi Ig w celu uniknięcia reakcji krzyżowej z małpią Ig, co umożliwiło specyficzne wykrycie i zmierzenie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 związanych z komórkami. Piąta· probówka zawierała odczynniki anty-IgM i Anty-ludzkie IgG do oznaczenia podwójnie dodatnich populacji limfocytów' B. Szósta probówka nie zawierała żadnych przeciwciał i służyła do określenia autofluorescencji. Komórki inkubowano z przeciwciałami znakowanymi fluorescencyjnie przez 30 minut, odpłukano i utrwalono 0,5 ml buforu do utrwalania (0,15 M NaCl, 1% paraformaldehydu, pH 7.4) i analizowano na urządzeniu Becton Dickinson FACScan. Populacje limfocytów identyfikowano przez porównanie obrazów, przy rozproszeniu światła ' 1 na
175 557 wprost w stosunku do rozproszenia światła z boku, jako standardu używając nie znakowanych leukocytów. Wyizolowano całkowitą populację limfocytów przez wybramkowanie pozostałych komórek. Stąd pomiar fluorescencji uwzględniał wyłącznie zjawiska charakterystyczne dla limfocytów.
Usunięcie Limfocytów B Krwi Obwodowej
Nie było żadnej zauważalnej różnicy pomiędzy przeciwciałami produkowanymi przez CHO i SP2/, w efektywności usuwania limfocytów B in vivo, jednakże obserwowano lekki wzrost w odnowie limfocytów B, począwszy od siódmego dnia u małp którym podano chimeryczne przeciwciała uzyskane od transfektomy CHO przy poziomie dawki 1.6 mg/kg i 6.4 mg/kg, oraz u małp którym podano przeciwciało od SP2/0 w dawce 0.4 mg/kg. figury 9A, B i C przedstawiają wyniki uzyskane z badania anty-CD20: CHO i SP2/0, z figurą 9A odnoszącą się do poziomu dawki 0.4 mg/kg., figurą 9B odnoszącą się do poziomu dawki 1.6 mg/kg i figurą 9C odnoszącą się do poziomu dawki 6.4 mg/kg.
Jak to w sposób oczywisty wynika z figury 9, obserwowano dramatyczne zmniejszenie (>95%) poziomu limofcytów B krwi obwodowej po leczeniu, we wszystkich zakresach dawek, i poziomy te utrzymywały się przez siedem dni po przetoczeniu, po którym to czasie rozpoczynała się odnowa limfocytów B, i że czas rozpoczęcia odnowy był zależny od poziomu dawki.
W badaniu Chimeryczne anty-CD20: CHO, używano dziesięciokrotnie niższego dawkowania (0.01 mg/kg) w trakcie czterech codziennych iniekcji (dawka całkowita 0.04 mg/kg). Figura 10 przedstawia wyniki tego badania. Dawkowanie to usuwało populację limfocytów krwi obwodowej w 50% normalnych poziomów co określano bądź przeciwciałem przeciwko powierzchniowym IgM lub Leu 16. Wyniki wskazują, że wysycenie antygenu CD20 na powierzchni populacji limfocytów B nie zostało osiągnięte użyciem aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 w stosowanej dawce w okresie stosowania, u naczelnych nie będących ludźmi; limfocyty B opłaszczone przeciwciałami wykrywane były w próbkach krwi podczas pierwszych trzech dni po rozpoczęciu leczenia. Jednakże siódmego dnia komórki opłaszczone przeciwciałami były nie wykrywalne. Tabela I podsumowuje wyniki wpływu pojedynczej i licznych dawek immunologicznie aktywnych chimerycznych przeciwciał anty-CD20 na populacje krwi obwodowej; warunkiem dla pojedynczej dawki było 6.4 mg/kg; dla dawki wielokrotnej było 0.4 mg/kg przez cztery kolejne dni (wyniki te uzyskano na małpach opisanych powyżej).
Tabela 1
POPULACJA KRWI OBWODOWEJ Z BADANIA C2B8 NA NACZELNYCH
Małpa Dawka Dzień CD2 Anty-Ludzkie
IgG
A 0.4 mg/kg przed podaniem 81.5 -
(4 dawki) 0 86.5 0.2
7 85.5 0.2
21 93.3 -
28 85.5 -
B 0.4 mg/kg przed podaniem 81.7 -
(4 dawki) 0 94.6 0.1
7 92.2 0.1-
21 84.9 -
28 84.1 -
C 6.4 mg/kg przed podaniem 77.7 0.0
(1 dawka) 7 85.7 0.1
21 86.7 -
28 76.7 -
D 6.4 mg/kg przed podaniem 85.7 0.1
(1 dawka) 7 94.7 0.1
21 85.2 -
28 85.9 -
175 557
Anty ludzkie IgG+
Małpa Anty Ludzkie IgM Leu-6 % Usunięcia Limfocytów B
A - 9.4 0
0.3 0.0 97
0.1 1.2 99
- 2.1 78
- 4.1 66
B - 14.8 0
0.2 0.1 99
0.1 0.1 99
- 6.9 53
- 87 41
C 0.2 17.0 0
0.1 0.0 99
- 14.7 15
- 8.1 62
D 0.1 14.4 0
0.2 0.0 99
- 9.2 46
- 6.7 53
* Populaq'a wybarwiona podwójnie co wskazuje na nadmiar limfocytów B opłaszczonych chimerycznym anty-CD20.
Dane zebrane w tabeli 1 wskazują, że usunięcie limfocytów B z krwi obwodowej w warunkach nadmiaru przeciwciała zachodzi szybko i efektywnie, niezależnie od pojedynczego czy wielokrotnego dawkowania. Dodatkowo, usunięcie obserwowano przez co najmniej siedem dni po ostatniej iniekcji, z częściową odnową limfocytów B obserwowaną dnia 21.
Tabela 2 podsumowuje efekt aktywnych immunologicznie chimerycznych przeciwciał anty-CD20 na populacje węzłów chłonnych przy zastosowaniu schematu podawania według tabeli 1 (4 dawki codzienne 0.4 mg/kg; jedna dawka rzędu 6.4 mg/kg); umieszczone są również wartości porównawcze dla normalnych węzłów chłonnych (małpa kontrolna, węzły pachowe lub pachwinowe) i normalnego szpiku (dwie małpy).
Tabela 2
POPULACJE KOMÓREK WĘZŁA CHŁONNEGO
Małpa Dawka Dzień CD2 Anty-Ludzkie
IGM
A 0,4 mg/kg 7 66.9 -
(4 dawki) 21 76.9 19.6
28 61.6 19.7
B 0.4 mg/kg 7 59.4 -
(4 dawki) 21 83.2 9.9
28 84.1 15.7
C 6.4 mg/kg 7 75.5 -
(4 dawki) 21 74.1 17.9
28 66.9 23.1
D 6.4 mg/kg 7 83.8 -
4 dawki) 21 74.1 17.9
28 84.1 12.8
175 557
Anty ludzkie IgG+
Małpa Anty Ludzkie IgM Leu-6 % Usunięcia Limfocytów B
A. 7.4 40.1 1
0,8 22.6 44
- 26.0 36
B 29.9 52.2 0
0.7 14.5 64
- 14.6 64
C 22.3 35.2 13
1.1 23.9 41
- 21.4 47
D 12.5 19.7 51
0.2 8.7 78
- 12.9 68
Tabela II (ciąg dalszy)
Anty-ludzkie IgG+ % usunięcia limfocytów
CD2 Anty-ludzkie IgM Anty-ludzkie IgM Leu-16
Normalne Węzły Chłonne
Kontrola 1
Pachowe 55.4 25.0 - 41.4 N.B.
Pachwinowe 52.1 31.2 - 39.5 N.B.
Normalny Szpik
Kontrola 1 65.3 19.0 - 11.4 N.B.
Kontrola 2 29.8 28.0 - 16.6 N.B.
Wyniki umieszczone w Tabeli II dowodzą efektywnego usuwania limfocytów B dla obu schematów dawkowania. Tabela II pokazuje dalej, że dla naczelnych nie będących ludźmi całkowite wysycenie limfocytów B w tkankach limfatycznych używając aktywnego immunologicznie chimerycznego przeciwciała anty-CD20 nie zostało osiągnięte; dodatkowo, komórki opłaszczone przeciwciałem obserwowane były przez siedem dni po podaniu, po czym następowało znaczne usuwanie limfocytów B z węzłów chłonnych, obserwowane dnia 14.
W oparciu o te dane, przeprowadzono badania pojedynczej Dużej Dawki Chimerycznego anty-CD20, przedewszystkim w celu określenia farmakologii/toksykologii. Inaczej, badanie przeprowadzono w celu zbadania jakiejkolwiek toksyczności związanej z podawaniem przeciwciała chimerycznego, jak również efektywności usuwania limfocytów B ze krwi obwodowej, węzłów chłonnych i szpiku. Dodatkowo, ponieważ dane w Tabeli II wskazują, że dla tego badania większość limfocytów B węzłów chłonnych usuwana była między 7 a 14 dniem po podaniu, cotygodniowy schemat dawkowania może dostarczyć bardziej przekonywujących wyników. Tabela III podsumowuje wyniki badania Dużej Dawki Chimerycznego anty-CD20.
175 557
Tabela 3
POPULACJE KOMÓREK WĘZŁÓW CHŁONNYCH I SZPIKU Populacje Limfocytów (%)
Małpa CD2 CD20a mIgM+anty-C2B8b C2B8c Dzieńd
Węzeł Chłonny Pachwinowy E 90.0 5.3 4.8 6.5 22
F 91.0 6.3 5.6 6.3 22
G 89.9 5.0 3.7 5.8 36
H 85.4 12.3 1.7 1.8 36
Szpik E 46.7 4.3 2.6 2.8 22
F 41.8 3.0 2.1 2.2 22
G 35.3 0.8 1.4 1.4 36
H 25.6 4.4 4.3 4.4 36
pod względem powierzchniowych IgM Dni po iniekcji całkowitej dawki 16,8 a Oznacza populację wyznakowaną Leu-16 b Oznacza populację wyznakowaną podwójnie, pozytywnie na IgM powierzchniowe i opłaszczone chimerycznymi przeciwciałami anty-CD20 c Oznacza całkowitą populaq'ę wyznakowaną na chimeryczne przeciwciała obejmujące komórki pozytywne i pojedynczo wyznakowane (IgM-powierzchniowe negatywne) mg/kg
Oba zwierzęta badane dnia 22 po zakończeniu podawania posiadały mniej niż 5% limfocytów B, w porównaniu z 40% w kontrolnych węzłach chłonnych (patrz, Tabela II, powyżej). Podobnie, w szpiku zwierząt poddanych działaniu chimerycznych przeciwciał anty-CD20 komórki pozytywne stanowiły mniej niż 3% w porównaniu z 11-15% u normalnych zwierząt, (patrz Tabela II, powyżej). U zwierząt badanych 36 dnia po zakończeniu podawania, jedno ze zwierząt (H) posiadało około 12% limfocytów B w węźle chłonnym i 4.4% limfocytów B w szpiku, podczas gdy drugie (G) posiadało około 5% limfocytów B w węźle chłonnym i 0,8% w szpiku- co stanowi wynik wskazujący na znaczne usunięcie limfocytów B.
Wyniki uzyskane w Przykładzie III. A. wskazują, m.in., że małe - dawki immunologicznie aktywnego chimerycznego przeciwciała anty-CD20 prowadzą do długotrwałego usunięcia limfocytów B z krwi obwodowej naczelnych. Dane wskazują również, że znaczące usunięcie populacji limfocytów B w węzłach chłonnych i szpiku uzyskano stosując powtarzane duże dawki przeciwciała. Długoczasowa obserwacja poczyniona na badanych zwierzętach -wskazuje, że nawet przy tak ciężkim usunięciu obwodowych limfocytów B podczas pierwszego tygodnia podawania, nie obserwowano żadnych negatywnych dla zdrowia skutków. Ponadto, obserwowano odnowę populacji limfocytów B, z czego wyciągnięto wniosek, że komórki macierzyste badanych naczelnych nie zostały uszkodzone.B. Badanie kliniczne C2B8
i. Próba kliniczna C2B8 CaB8 Uli: Badanie LeczeniaPojedynczą Dawką
Piętnastu pacjentów z histologicznie udokumentowanym nawrotem chłoniaka z limfocytów B poddano leczeniu C2B8 w badaniu klinicznym Fazy I/II. każdy z pacjentów otrzymał pojedynczą dawkę C2B8 w badaniu zwiększania dawki; Było trzech pacjentów na dawkę: 10 mg/m2, 50 mg/m2; 100 mg/m2; 250 mg/m2 i 500 mg/m2. Leczenie polegało na podaniu i. v. przez filtr 0.22 mikrona, C2B8 rozcieńczonego do objętości końcowej 250 ml lub maksymalnego stężenia 1mg/ml w normalnym roztworze fizjologicznym soli. Początkowe tempo podawania wynosiło 50 ml/h przez pierwszą godzinę; jeżeli nie obserwowano toksyczności tempo podawania zwiększano do maksimum 200 ml/h.
Toksyczność (określana przez lekarza) zawierała się od żadnej do gorączki, ponadto dwóch z pacjentów wykazywało toksyczność umiarkowaną a jeden poważną; wszyscy pacjenci ukończyli badanie. Limfocyty krwi obwodowej badano w celu zbadania wpływu C2B8 na limfocyty T i B. Podobnie, dla wszystkich pacjentów Limfocyty Krwi Obwodowej usunięto po infuzji C2B8 i usunięcie to utrzymywano przez dwa tygodnie.
175 557
U jednego z pacjentów (otrzymującego 100 mg/m C2B8) stwierdzono częściową poprawę po leczeniu C2B8 (redukcję większą niż 50% sumy wszystkich średnic utrzymująca się dłużej niż cztery tygodnie, podczas których nie powstają nowe guzy, jak również stare się nie powiększają) wszystkich zdolnych do mierzenia ubytków nowotworowych, przynajmniej jeden z pacjentów (otrzymujący 500 mg/m2) wykazywał poprawę mniejszą po leczeniu C2B8 (redukcja mniej niż 50% ale nie mniejsza niż 25% sumy dwóch dłuższych wymiarów wszystkich mierzalnych ognisk. Dla wygody prezentacji wyniki PBL pokazano na figurze 14; dane pacjenta wykazującego poprawę częściową (PR) pokazano na figurze 14 A; dane pacjenta wykazującego poprawę mniejszą (MR) pokazano na figurze 14B. Na figurze 14 pokazano następujące dane:Q= Limfocyty; O = limfocyty CD3+ (limfocyty T); = komórki CD20+;O= komórki CD19+;O = Kappa; = lambda i-0-= C2B8. Jak to wykazano, markery limfocytów B CD20 i CD19, Kappa i Lambda, zostały usunięte na okres dwóch tygodni; po czym następowała powolna redukcja liczby limfocytów T; powracający do poziomu podstawowego we względnie krótkim czasie.
ii. Próba kliniczna C2B8 Fazy I/II: Badanie Leczenia Dawką Wielokrotną
Do badania włączani są pacjenci z histologicznie potwierdzonym chłoniakiem z limfocytów B z mierzalną, postępującą chorobą; badanie podzielone jest na dwie części; w pierwszej w Fazie I składającej się z badania zwiększania dawki w celu scharakteryzowania toksyczności ograniczającej dawkę i oznaczenie poziomu tolerowanej aktywnej biologicznie dawki, grupy po trzech pacjentów otrzymają cotygodniowo infuzję i. v. z C2B8 w liczbie czterech. Dawka kumulatywna na każdym z trzech poziomów dawki wynosi: 500 mg/m2 (125 mg/m2/ podanie); 1000 mg/m2 (250 mg/m2/podanie; 1500 mg/m2 (375 mg/m2/podanie). Tolerowana biologicznie aktywna dawka jest zdefiniowana i będzie określona, jako najniższa dawka o tolerowanej toksyczności i odpowiedniej aktywności; w Fazie II, dodatkowi pacjenci otrzymają tolerowaną biologicznie aktywną dawkę z naciskiem położonym na oznaczenie aktywności czterech dawek C2B8.
TERAPIA POŁĄCZONA: C2B8 i Y2B8
Podejście terapeutyczne łączące C2B8 i Y2B8 badane było na mysim modelu xenogenicznym (myszy nu/nu, samice, w wieku około 10 tygodni) z użyciem guza limfoblastycznego z limfocytów B (guz Ramos'a). W celu porównania dodatkowe myszy otrzymały C2B2 i Y2B8.
Komórki guza Ramos'a (ATCC CRL 1596) hodowane były w pożywce RPMI1640 z dodatkiem 10% wołowej surowicy płodowej i glutaminy w temperaturze 37°C i 5% CO2. Guzy wywołano u dziewięciu myszy nagich około 7-10 tygodniowych, przez wstrzyknięcie podskórne 1,7x106 komórek Ramos w objętości 0.1 ml (HBSS) przy użyciu 1 ml strzykawki zaopatrzonej w igłę 25G. Wszystkie zabiegi na zwierzętach wykonywano w boksie laminarnym zaś klatki, podściółka, pasza i woda były autoklawowane. Komórki guza pasażowano przez wycinanie guza i przepuszczenie go przez sito 40; po czym komórki płukano dwukrotnie w lxHBSS (50 ml) i odwirowywanie przy 1300 RPM, zawieszanie komórek w lxHBSS. Komórki zostały zawieszone w lxHBSS w gęstości 10x106 komórek ml i zamrożone w -70°C.
Do doświadczenia komórki z kilku partii rozmrażano, odwirowywano (1300RPM) i przepłukiwano dwukrotnie lxHBSS. Komórki zawieszono w gęstości 2.0x106 komórek/ml. Około 9 do 12 myszom wstrzyknięto 0.1 ml zawiesiny komórek (s.c.) przy użyciu strzykawki 1 ml wyposażonej w igłę 25G; wstrzyknięcia wykonywano w lewy bok zwierzęcia, w środek tułowia. Guzy tworzyły się po około dwóch tygodniach. Guzy wycinano i poddawano obróbce jak to opisano powyżej. Badane myszy nastrzyknięto jak to opisano powyżej przy użyciu 1.67x106 komórek w 0.1 ml HBSS.
W oparciu o wstępne wyniki, określono, że użyte zostanie do tego badania 200 mg C2B8 i 100 miCi Y2B8. Dziewięćdziesiąt samic myszy nu/nu (około dziesięciotygodniowe) nastrzyknięto komórkami guza. W około dziesięć dni później 24 myszy wybrano do czterech grup badanych (po sześć w każdej) próbując zachować podobne wielkości guza w każdej z grup (średnia wielkość guza, wyrażona jako iloczyn długości i szerokości guza; wynosiła około 80 mm2. Poniższe grupy leczone były jak opisano drogą zastrzyków do żyły ogonowej przy użyciu strzykawki Hamiltona wyposażonej w igłę 25G:
175 557
A Roztwór fizjologiczny soli
B Y2B8 (100 miCi)
C C2B8 (200 mig) i
D Y2B8 (100 miCi) + C2B8 (200 mig)
Grupy otrzymujące C2B8 otrzymywały drugą iniekcję C2B8 (200 mig/mysz) siedem dni po pierwszej iniekcji. Pomiary guza wykonywano co dwa lub trzy dni.
Materiał do leczenia przygotowano w oparciu o poniższy protokół:
A. Przygotowanie Y2B8
Chlorek itru [90] (6 mCi) przeniesiono do polipropylenowej probówki i doprowadzono do pH 4.1-4.4 przy użyciu 2M octanu sodu wolnego od metali. 2B8-M.X-DtPa (0.3 mg w roztworze fizjologicznym soli: patrz powyżej przygotowanie 2B8-MX-DTPA) dodano i delikatnie mieszano przez wirowanie. Po 15 minutach inkubacji, reakcja była przerywana przez dodanie 0.05 objętości 20 mM EDTA i 0,05 objętości 2 M octanu sodu. Stężenie radioaktywności oznaczano przez rozcieńczenie 5 mil mieszaniny reakcyjnej w 2.5 ml lxPBS zawierającego 75 mg/ml HSA i 1 mM DTPA (bufor do przygotowywania); pomiar wykonywano przez oddanie 10 mil do 20 ml koktajlu scyntylacyjnego Ecolume. Pozostałą mieszaninę reakcyjną dodawano do 3.0 ml buforu do przygotowywania, filtrowano sterylnie, i przechowywano w temperaturze 2-8°C do momentu użycia. Aktywność właściwą obliczano (14 mCi/mg w momencie wstrzyknięcia) obliczona została przy użyciu stężenia radiaktywności i obliczonego stężenia białka, w oparciu o ilość przeciwciała dodanego do mieszaniny reakcyjnej. Radioaktywność związaną z białkiem oznaczono przy pomocy szybkiej chromtografii cienkowarstwowej. Wbudowywanie radioaktywności wynosiło 95%. Y2B8 rozcieńczano buforem do przygotowywania bezpośrednio przed użyciem, sterylnie filtrowano (końcowe stężenie radioaktywności wynosiło 1.0 mCi/mg).
B. Przygotowanie C2B8
C2B8 przygotowano tak jak to opisano powyżej. C2B8 dostarczono jako sterylny odczynnik w roztworze fizjologicznym soli w stężeniu 5 mg/ml. Bezpośrednio przed użyciem C2B8 rozcieńczano roztworem fizjologicznym soli do 2 mg/ml i filtrowano sterylnie.
C. Wyniki
W następstwie leczenia, wielkości guza wyrażona jak iloczyn długości i szerokości, pomiarów dokonywano w dni oznaczona na Figurze 1 (Y2B8 w stosunku do soli fizjologicznej); Figurze 2 (C2B8 w stosunku do soli fizjologicznej) i Figurze 3 (Y2B8 + C2B8 w stosunku do soli fizjologicznej).
Jak to zaznaczono na Figurze 3, połączenie Y2B8 z C2B8 wykazywało efekt niszczący na guza porównywalny z efektem wywieranym przez zarówno Y2B8 jak i C2B8.
III. ALTERNATYWNE STRATEGIE LECZNICZE
Alternatywne strategie lecznicze dostrzegalne w świetle opisanych przykładów są oczywiste. Jedna ze strategii wykorzystuje użycie dawki terapeutycznej C2B8 a następnie w ciągu tygodnia podanie połączenia 2B8 ze znakowanym radioaktywnie 2B8 (tzn. Y2B8); 2B8, C2B8 i np. Y2B8; czy C2B8 i np. Y2B8. Dodatkową strategią jest wykorzystanie znakowanego radioaktywnie C2B8 - strategia taka umożliwia wykorzystanie zalet aktywnej immunologicznie części C2B8 i korzyści płynących ze znacznika radioaktywnego. Najkorzystniejszym znacznikiem jest itr[90] o przedłużonym, dzięki C2B8, okresie półtrwania w krążeniu w stosunku do mysiego 2B8. Z powodu zdolności C2B8 do usuwania limfocytów B oraz korzyści płynących ze znacznika radioaktywnego. Najkorzystniejszą strategią alternatywną jest leczenie pacjenta przy pomocy C2B8 (w dawce pojedynczej bądź wielokrotnej) do momentu usunięcia prawie wszystkich lub wszystkich limfocytów B z obwodu. W następstwie tego powinno się użyć znakowanego radioaktywnie przeciwciała 2B8; z powodu usunięcia limfocytów B znakowane radioaktywnie 2B8 zwiększa szansę nakierowania na komórkę nowotworową. Najkorzystniejszym znacznikiem jest tu jod [131], na podstawie wyników opisanych w literaturze z użyciem tego znacznika (patrz, Kamiński). Wybór alternatywny uwzględnia użycie znakowanego radioaktywnie 2B8 (lub C2B8) w celu zwiększenia przepuszczalności guza, a następnie pojedyncze lub wielokrotne podanie C2B8; celem tej strategii jest zwiększyć szansę C2B8 na
175 557 osiągnięcie zarówno z zewnątrz jak i wnętrza masy guza. Dalsza strategia wymaga użycia leku chemioterapeutycznego w połączeniu z C2B8. Strategie takie obejmują leczenie tzw. wstrząsowe tzn. leczenie lekiem chemioterapeutycznym, następnie leczenie C2B8 i powtórzenie całego protokołu. Możliwe jest również, wstępne leczenie jedną lub wieloma dawkami C2B8, po czym leczenie chemioterapeutyczne. Najkorzystniejsze leki chemioterapeutyczne obejmują, choć nie są ograniczone do: cyklofosfamidu, doksorubicyny, winkrystyny i prednizonu, patrz, Armitage, J. O., i in., Cancer 50:1695 (1982), zamieszczone tu jako odnośnik.
Opisane alternatywne strategie terapeutyczne przedstawiono nie w celu ograniczenia wynalazku ale z powodu ich reprezenaatywności.
175 557
G. LISTA SEKWENCJI
INFORMACJE PODSTAWOWE (i) ZGŁASZAJCY: Darell Anderson, Nabil Hanna, John Leonard, Roland Newman And Mitchell Reff And William H. Rastetter (ii) TYTUŁ WYNALAZKU: ZASTOSOWANIE TERAPEUTYCZNE CHIMERYCZNYCH I ZNAKOWANYCH RADIOAKTYWNIE PRZECIWCIAŁ SKIEROWANYCH PRZECIWKO LUDZKIEMU ANTYGENOWI RÓŻNICOWANIA OGRANICZONEMU DO LUDZKICH LIMFOCYTÓW B, DO LECZENIA CHŁONIAKA Z LIMFOCYTÓW B.
(iii) LICZBA SEKWENCJI: 8 (iv) ADRES DO KORESPONDENCJI:
(A) ADRES: IDEO Pharmaceuticals Corporaoion
(B) ULICA: 1101 1 Torreanaa Radd
(C) MIASTO: Sa: Dieoo
(D) KRJJ: Saanj Zjednocooej Ameekki Półocnnej
(E) : 92101
(v) POSTAĆ AKCEPTOWANA PRZEZ KOMPUTER (A) RODZAJ NOŚNIKA : dyskietki, 3,,5 cala, 1.44 Mb (B) KOMPUTER : Macintosh (C) SYSTEM OPERAYYJNY: MS.DOS (D) OPROGRAMOWANIE: Microsoft WorS 5 0 (vi) DANE DOTYCZĄCE AKTUALNEGO ZGŁOSZENIA (A) NUMER APLIKACJL (B) DATA ZGŁOSZENIA (C) KLASYFIKACJA:
(viii) INFORMACJA O RZECZNIKU/PEŁNOMOCNIKU (A) NAZWISKO: Burgoon, Richard P.Jr.
(B) NUMER REJESTRACYJNY: 34,787 (C) NUMER SPRAWY (ix) INFORMACJA TELEKOMUNIKACYJNA.
(A) TELEFON: (619) 550-8500 (B) TELEFAX: (619) 550-8750
175 557 (2) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 1.
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 8540 (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: kolista (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: tak (vi) ANTYSENS: nie (ix) OPIS SEKWENCJI: IDENTYFIKATOR SEKW. NR 1
GACGTCGCGG CCGCTCTAGG CCTCCAAAAA AGCCTCCTCA CTACTTCTGG AATAGCTCAG eo
AGGCCGAGGC GGCCTCGGCC TCTGCATAAA TAAAAAAAAT TAGTCAGCCA TGGATGGGGC 420
GGAGAATGGG CGGAACTGGG CGGAGTTAGG GGCGGGATGG GCGGAGTTAG GGGCGGGACT 430
ATGGTTGCTG ACTAATTGAG ATGCATGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTGG GGAGCCTGGG 240
GACTTTCCAC ACCTGGTTGC TGACTAATTG AGATGCATGC TTTGCATACT TCTGCCTGCT 300
GGGGAGCCTG GGGACTTTCC ACACCCTAAC TGACACACAT TCCACAGAAT TAATTCCCCT 300
AGTTATTAAT AGTAATCAAT TACGGGGTCA TTAGTTCATA GCCCATATAT GGAGTTCCGC 42Ó
GTTACATAAC TTACGGTAAA TGGCCCGCCT GGCTGACCGC CCAACGACCC CCGCCCATTG W
ACGTCAATAA TGACGTATGT TCCCATAGTA ACGCCAATAG GGACTTTCCA TTGACGTCAA 540
TGGGTGGACT ATTTACGGTA AACTGCCCAC TTGGCAGTAC ATCAAGTGTA TCATATGCCA 600
AGTACGCCCC CTATTGACGT CAATGACGGT AAATGGCCCG CCTGGCATTA TGCCCAGTAC
ATGACCTTAT GGGACTTTCC TACTTGGCAG TACATCTACG TATTAGTCAT CGCTATTACC 720
ATGGTGATGC GGTTTTGGCA GTACATCAAT GGGCGTGGAT AGCGGTTTGA CTCACGGGG^ no
TTTCCAAGTC TCCACCCCAT TGACGTCAAT GGGAGTTTGT TTTGGCACCA AAATCAACGG
GACTTTCCAA AATGTCGTAA CAACTCCGCC CCATTGACGC AAATGGGCGG TAGGCGTGTA
CGGTGGGAGG TCTATATAAG CAGAGCTGGG TACGTGAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC <360
CATCACAGAT CTCTCACCAT GAGGGTCCCC GCTCAGCTCC TGGGGCTCCT GCTGCTCTGG 402&
CTCCCAGGTG CACGATGTGA TGGTACCAAG GTGGAAATCA AACGTACGGT GGCTGCACCA 40$O
TCTGTCTTCA TCTTCCCGCC ATCTGATGAG CAGTTGAAAT CTGGAACTGC CTCTGTTGTG
TCCCTGCTGA ATAACTTCTA TCCCAGAGAG GCCAAAGTAC AGTGGAAGGT GGATAACGCC 4200
CTCCAATCGG GTAACTCCCA GGAGAGTGTC ACAGAGCAGG ACAGCAAGGA CAGCACCTAC 4260
175 557
AGCCTCAGCA GCACCCTGAC GCTGAGCAAA GCAGACTACG AGAAACACAA AGTCTACGCC 1320
TGCGAAGTCA CCCATCAGGG CCTGAGCTCG CCCGTCACAA AGAGCTTCAA CAGGGGAGAG 1380
TGTTGAATTC AGATCCGTTA ACGGTTACCA ACTACCTAGA CTGGATTCGT GACAACATGC 1440
GGCCGTGATA TCTACGTATG ATCAGCCTCG ACTGTGCCTT CTAGTTGCCA GCCATCTGTT 1500
GTTTGCCCCT CCCCCGTGCC TTCCTTGACC CTGGAAGGTG CCACTCCCAC TGTCCTTTCC 1560
TAATAAAATG AGGAAATTGC ATCGCATTGT CTGAGTAGGT GTCATTCTAT TCTGGGGGGT 1620
GGGGTGGGGC AGGACAGCAA GGGGGAGGAT TGGGAAGACA ATAGCAGGCA TGCTGGGGAT 1680
GCGGTGGGCT CTATGGAACC AGCTGGGGCT CGACAGCTAT GCCAAGTACG CCCCCTATTG 1740
ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTATGGGACT 1800
TTCCTACTTG GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT 1660
GGCAGTACAT CAATGGGCGT GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA agtctccacc 1920
CCATTGACGT CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC 1980
GTAACAACTC CGCCCCATTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG GAGGTCTATA 2C4:
TAAGCAGAGC TGGGTACGTC CTCACATTCA GTGATCAGCA CTGAACACAG ACCCGTCGAC 2100
ATGGGTTGGA GCCTCATCTT GCTCTTCCTT GTCGCTGTTG CTACGCGTGT CGCTAGCACC 2163
AAGGGCCCAT cggtcttccc CCTGGCACCC TCCTCCAAGA GCACCTCTGG GGGCACAGCG 2220
GCCCTGGGCT GCCTGGTCAA GGACTACTTC CCCGAACCGG TGACGGTGTC GTGGAACTCA 22 8 0
GGCGCCCTGA CCAGCGGCGT GCACACCTTC CCGGCTGTCC TACAGTCCTC AGGACTCTAC 22 4 3
TCCCTCAGCA GCGTGGTGAC CGTGCCCTCC AGCAGCTTGG GCACCCAGAC CTACATCTGC 2402
AACGTGAATC ACAAGCCCAG CAACACCAAG GTGGACAAGA AAGCAGAGCC CAAATCTTGT 246 2-
GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCACCTGAAC TCCTGGGGGG ACCGTCAGTC 2Ξ20
TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA 2580
TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC
GGCGTGGAGG TGCATAATGC CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC 2700
CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG 27 60·
TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA 252 0
GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG 288 0
AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG 2 5 4 0
TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GCTGGACTCC 3 0' o
GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTGGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG 2060
AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG gctctgcaca ACCACTACAC GCAGAAGAGC 3120
CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA ATGAGGATCC GTTAĄCGGTT ACCAACTACC TAGACTGGAT 2180
175 557
TCGTGACAAC ATGCGGCCGT ' GATATCTACG 1 TATGATCAGC ' CTCGACTGTG , CCTTCTAGTT 3240
GCCAGCCATC • TGTTGTTTGC CCCTCCCCCG TGCCTTCCTT ' GACCCTGGAA GGTGCCACTC 3300
CCACTGTCCT TTCCTAATAA . AATGAGGAAA TTGCATCGCA TTGTCTGAGT AGGTGTCATT 3360
CTATTCTGGG GGGTGGGGTG GGGCAGGACA GCAAGGGGGA GGATTGGGAA GACAATACCA 3420
GGCATGCTGG GGATGCGGTG GGCTCTATGG AACCAGCTGG GGCTCGACAG CGCTGGATCT 3480
CCCGATCCCC agctttgctt CTCAATTTCT TATTTGCATA ATGAGAAAAA AAGGAAAATT 3540
AATTTTAACA CCAATTCAGT AGTTGATTGA GCAAATGCGT TGCCAAAAAG gatgctttag 3600
AGACAGTGTT CTCTGCACAG ATAAGGACAA ACATTATTCA GAGGGAGTAC CCAGAGCTGA 3660
GACTCCTAAG CCAGTGAGTG GCACAGCATT CTAGGGAGAA ATATGCTTGT CATCACCGAA 3720
GCCTGATTCC GTAGAGCCAC ACCTTGGTAA GGGCCAATCT GCTCACACAG GATAGAGAGG 3780
GCAGGAGCCA GGGCAGAGCA TATAAGGTGA GGTAGGATCA GTTGCTCCTC ACATTTGCTT 3840
CTGACATAGT TGTGTTGGGA GCTTGGATAG CTTGGACAGC TCAGGGCTGC GATTTCGCGC 3900
CAAACTTGAC GGCAATCCTA GCGTGAAGGC TGGTAGGATT TTATCCCCGC TGCCATCATG 3 9 6 C
GTTCGACCAT TGAACTGCAT CGTCGCCGTG TCCCAAAATA TGGGGATTGG CAAGAACGGA 4020
GACCTACCCT GGCCTCCGCT CAGGAACGAG TTCAAGTACT TCCAAAGAAT GACCACAACC 4080
TCTTCAGTGG AAGGTAAACA GAATCTGGTG ATTATGGGTA GGAAAACCTG gttctccatt 414 0
CCTGAGAAGA ATCGACCTTT AAAGGACAGA ATTAATATAG TTCTCAGTAG AGAACTCAAA 4 2 00
GAACCACCAC GAGGAGCTCA TTTTCTTGCC AAAAGTTTGG ATGATGCCTT AAGACTTATT 4 2 6 0
GAACAACCGG AATTGGCAAG TAAAGTAGAC ATGGTTTGGA TAGTCGGAGG CAGTTCTGTT 432C
TACCAGGAAG CCATGAATCA ACCAGGCCAC CTTAGACTCT TTGTGACAAG GATCATGCAG 4 3 80
GAATTTGAAA GTGACACGTT TTTCCCAGAA ATTGATTTGG GGAAATATAA ACTTCTCCCA 4 4 40
GAATACCCAG GCGTCCTCTC TGAGGTCCAG GAGGAAAAAG GCATCAAGTA TAAGTTTGAA 4 5 00
GTCTACGAGA AGAAAGACTA ACAGGAAGAT gctttcaagt TCTCTGCTCC CCTCCTAAAG 4 5601
CTATGCATTT TTATAAGACC ATGGGACTTT TGCTGGCTTT AGATCAGCCT CGACTGTGCC 4620
TTCTAGTTGC CAGCCATCTG TTGTTTGCCC CTCCCCCGTG CCTTCCTTGA CCCTGGAAGG 4680
TGCCACTCCC ACTGTCCTTT CCTAATAAAA TGAGGAAATT GCATCGCATT GTCTGAGTAG 4 7 4 0
GTGTCATTCT ATTCTGGGGG GTGGGGTGGG GCAGGACAGC AAGGGGGAGG ATTGGGAAGA 4800
CAATAGCAGG CATGCTGGGG ATGCGGTGGG CTCTATGGAA ccagctgggg CTCGAGCTAC 4860
TAGCTTTGCT TCTCAATTTC TTATTTGCAT AATGAGAAAA AAAGGAAAAT TAATTTTAAC 492C
ACCAATTCAG TAGTTGATTG AGCAAATGCG TTGCCAAAAA GGATGCTTTA GAGACAGTGT 4980
TCTCTGCACA ' GATAAGGACA AACATTATTC AGAGGGAGTA CCCAGAGCTG AGACTCCTAA 5040
175 557
GCCAGTGAGT GGCACAGCAT TCTAGGGAGA AATATGCTTG TCATCACCGA AGCCTGATTC 5100
CGTAGAGCCA CACCTTGGTA AGGGCCAATC TGCTCACACA GGATAGAGAG GGCAGGAGCC 5160
AGGGCAGAGC ATATAAGGTG AGGTAGGATC AGTTGCTCCT CACATTTGCT TCTGACATAG 5220
TTGTGTTGGC AGCTTGGATC GATCCTCTAT GGTTGAACAA GATGGATTGC ACGCAGGTTC 5280
TCCOGCCGCT TCOCTGGAGA GCCTATTCGG CTATGACTGG GCACAACACA CAATCGGCTG 5340
CTCTGATGCC GCCGTGTTCC GGCTGTCAGC GCAGGGGCGC CCGGTTCTTT TTGTCAAGAC 5400
CGACCTGTCC GGTGCCCTGA ATGAACTGCA GGACGAGGCA GCGCGGCT-AT CGTGGCTGGC 5460
CACGACGGGC gttccttgcg CAGCTGTGCT CGACCTTGTC ACTGAAGCGG GAAGGGACTG 5520
GCTOCTATTG GGCGAAGTGC CGGGGCAGGA TCTCCTGTCA TCTCACCTTG CTCCTGCCGA 5580
GAAAGTATCC ATCATGGCTG atgcaatgcg GCOGCTGCAT ACGCTTGATC CGGCTACCTG 564G
CCCATTCGAC CACCAAGCGA AACATCGCAT CGAGCGAGCA CGTACTCGGA 7GGAAGCCGG 57CC
TCTTGTCGAT CAGGATGATC TGGACGAAGA GCATCAGGGG CTCGCGCCAG CCGAACTGTT 5760
CGCCAGGCTC AAGGCGCGCA TGCCCGACGG CGAGGATCTC GTCGTGACCC ATGGCGATGC 5820
CTGCTTGCCG AATATCATGG TGGAAAATGG CCGCITTTCT GGATTCATCG ACTGTGGCCG 5880
GCTOOGTGTG GCGGACCGCT ATCAGGACAT AGCGTTGGCT ACCCGTGATA TTGCTGAAGA 5940
GCTTGGCGGC GAATGGGCTG accgcttcct CGTOCTTTAC GGTATCGCCG CTCCCGATTC 6000
GCAOCGCATC GCCTTCTATC GCCTTCTTGA CGAGTTCTTC tgagcgggac TCTGGGGTTC 6080
GAAATGACCG ACCAAGCGAC GCCCAACCTG ccatcacgag ATTTCGATTC CACCGCCGCC 6120
TTCTATaAAA GGTTGCGCTT CGGAATCGTT TTCCGGOACG CCGGCTGGAT GATCCTCCAG 6180
CGCGGOGATC TCATGCTGGA gttcttcgcc CACCCCAACT TGTTTATTGC AGCTTATAAT 6240
GGTTACAAAT AAAGCAATAG CATCACAAAT TTCACAAATA AAGCATTTTT TTCACTGCAT 6300
TCTAGTTGTG GTTTGTCCAA ACTCATCAAT CTATCTTATC ATGTCTGGAT CGCGGCCGCG 6360
ATCCCGTCGA GAGCTTGGCG TAATCATGGT CATAGCTGTT TCCTGTGTGA AATTGTTATC 6420
CGCTCACAAT TCCACACAAC ATACGAGCCG GAAGCATAAA GTGTAAAGCC TGGGGTGCCT 6480
AATGAGTGAG CTAACTCACA TTAATTGCGT TGCGCTCACT GCCCGCTTTC CAGTCGGGAA 6540
ACCTGTCGTG CCAGCTGCAT TAATGAATCG GCCAACGCGC GGGGAGAGGC GGTTTGCGTA 6630
TTGGGCGCTC TTCCGCTTCC TCGCTCACTG ACTCGCTGCG CTCGGTCGTT CGGCTGCGGC 6660
GACCCGTATC AGCTCACTCA AAGaCGGTAA TACGGTTATC CACAGAATCA GGGGATAACG 6720
CAGaAAAGAA CATCTGAGCA aaaggccagc AAAACCCCAG GAACCGTAAA AAGGCCGCGT 6780
TGCTOGCGTT TTTCCATAGG CTCCGCCCCC CTGACGAGCA TCACAAAAAT CGACGCTCAA 6840
CTCAGAGGTG GCGAAACCCG ACAGGACTAT AAAGATACCA GOCGTTTCCC CCTGGAAGCT 6560
CCCTCGTGCG CTCTCCTGTT CCGACCCTGC CGCTTACCGG ATACCTGTCC GCCTTTCTCC 6560
175 557
CBBCGGGLAG CCTOGCCCTT TCTCAATGCT CLGCCTCTLG OTATCTCAGT ΤΩΟΟΤΟΊΆΟΟ 7020
TCGTTCOCTC C^O^^GOJGC TOTOTOCACO ALCCCCCCGT TCAGGGCGLC COCTOCOCCT 7080
TAT^O^AA CTATCOTCTT GAOTCCALGC CGGTLAGLCA CGACTTATCO CCACTOGCAG 7140
CAGCCACTaa BLACAGGATB AOCAOLGGOL OOTATOTAOG CGOI^^GA O^OTTCTTGA 7200
AGTOOTOGCC TLACTLCGOC TACACTLOLA TOOTATCTOC Od^OdGA 7260
LOCCLO1TLC CTTCGOALLA AGAGTTGOTA GCTCTTGATC COOCALLCLA ACCLGCGC1G 7320
OTAOCOOTOO tttttttott TGCAAGCAGC AGATTACOCG CLGALLLLAL OGA^^AKO 7 36 C
aagatccttt OATCTITTCT ACOGGOTCTO ACOCTCAGTO OLLCOLALLC TCLGGTTLAG 7 4 4 0
OOATTTTGOT CATOAGATTA TCLAALAOOA TCTTCACCTA OATCCTTTTA AATTLAALAT 7500
GLLG,BBBBLA LTCLATGTAL AOTATATATO LOTALLCTTG TLCCLATOCT 7560
TLATCLOTOL GGCACCTATC TCAGCGATCT OTCTATTTCG TTCLTCCATL OTTOCCTOAC 7620
TCCCCGTCCB GTAGATAACT LCOLTACGGO A0OOCTTLCC LTC10GCGCG AOTGCTGCLA 7660
TGATACCGCG LGLCCCLCGC TOLCCGGCTC CA^ATITATC LOCLLTLLAC CLGGCLOGCG 7740
0.AL00CCCCL OCGCLGALOT GCTCCTGCLA CITTATCCGC GTCCLTGCLG TCTAT1ALTT 7600
GTTGCCGOGA LOGTAGAOTL AOTAGTTCGC GAGTTLA1LG TTTGCGCAAC ottgttgcca 7860
TTOCTLGLCO CATCGTOGTO TCACGCTCGT COITTOOTAT OO^^TTCATTC LGCTCGG0T1 7920
CCCLACGLBC AAGGCGAGTT LCLTOATGGC CCATOTTOTO GAALALLOCG OTTAOCTCCT 79S0
TCCCTCCTCC OATCOTTOTC LGAAGTALCT TOOCCGCAOT GTTATCACTC λT0GT1L10C 8040
GAGO^^TO^A. TA^TTCTCTT ACTOTCATGC CATCCGTLAG ATGCTTITCT OTGACTOGTG 6100
LGBLCBCLAC ^tAGrCATTC TOAOALTLGT OTATOCOOCG ACCG^GTTOC TCTTOCCCOO 8160
CGTCALTLCG GGArAATACC GGOCCACATL Ο^Ο^^ΤΙ ,LAALGTGCTC λTCLTTOGLL 8220
ALCaTTCBBC GGGGCGAALL GTCTGLLGOL TCTTACCCCT OTTO^A^C LCTTCGLTGT 8260
ALCCCLCBGG TGGLGGCLAC TOATCTTCAG TTTCACCLOC OTTTCTGGGT 8340
OLOCLAAAAC A00AL0GCAL ^TGCCGCAA LALLOOOLLT ^ΟΟΟ^ΟΜ^ COGAA^TOTT 8400
OAATLCTCAT ACTCTTCCTT TTIC^lATATT LTTGLLOCLT Τ^Ι^ΟΟ-Οΐ TATTOTCTCA 8460
BGAGCGGATA GATATTTGLA TGTLTTTLOL LALLTALLCL .^^000011 CCOCOCLCLT 8520
BBCGCGGLAL. L0ToCGLGCT 8540
(3) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 2.
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI (A) DŁUGOŚĆ: 9209 casad
175 557 (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: kolista (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: tak (vi) ANTYSENS : nie (ix) OPIS EKKWNCCJ liIDNNYYFIAATOREKKW. NR 2
GACGTCGCGG CCGCTCTAGG CCTCCAAAAA AGCCTCCTCA CTACTTCTGG AATAGCTCAG 60
AGGCCGAGGC GGCCTCGGCC TCTGCATAAA TAAAAAAAAT TAGTCAGCCA TGCATGGGGC 120
GGAGAATGGG CGGAACTGGG CGGAGTTAGG GGCGGGATGG GCGGAGTTAG GGGCGGGACT 180
ATGGTTGCTG ACTAATTGAG ATGCATGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTGG GGAGCCTGGG 240
GACTTTCCAC ACCTGGTTGC TGACTAATTG AGATGCATGC TTTGCATACT TCTGCCTGCT 300
GGGGAGCCTG GGGACTTTCC ACACCCTAAC TGACACACAT TCCACAGAAT TAATTCCCCT 360
AGTTATTAAT AGTAATCAAT TACGGGGTCA TTAGTTCATA GCCCATATAT GGAGTTCCGC 420
GTTACATAAC TTACGGTAAA TGGCCCGCCT GGCTGACCGC CCAACGACCC CCGCCCATTG 480
ACGTCAATAA TGACGTATGT TCCCATAGTA ACGCCAATAG GGACTTTCCA TTGACGTCAA 540
TGGGTGGACT ATTTACGGTA AACTGCCCAC TTGGCAGTAC ATCAAGTGTA TCATATGCCA 600
AGTACGCCCC CTATTGACGT CAATGACGGT AAATGGCCCG CCTGGCATTA TGCCCAGTAC 660
ATGACCTTAT GGGACTTTCC TACTTGGCAG TACATCTACG TATTAGTCAT CGCTATTACC 720
ATGGTGATGC ggttttggca GTACATCAAT GGGCGTGGAT AGCGGTTTGA CTCACGGGGA 780
TTTCCAAGTC TCCACCCCAT TGACGTCAAT GGGAGTTTGT TTTGGCACCA AAATCAACGG 840
GACTTTCCAA AATGTCGTAA CAACTCCGCC CCATTGACGC AAATGGGCGG TAGGCGTGTA 900
CGGTGGGAGG TCTAiTATAAG CAGAGCTGGG TACGTGAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC 960
CATCACAGAT CTCTCACTAT GGATTTTCAG GTGCAGATTA TCAGCTTCCT GCTAATCAGT 1020
GCTTCAGTCA TAATGTCCAG AGGACAAATT GTTCTCTCCC AGTCTCCAGC AATCCTGTCT 1080
GCATCTCCAG GGGAGAAGGT CACAATGACT TGCAGGGCCA GCTCAAGTGT AAGTTACATC 1140
CACTGGTTCC AGCAGAAGCC AGGATCCTCC CCCAAACCCT GGATTTATGC CACATCCAAC 1200
CTGGCTTCTG GAGTCCCTGT TCGCTTCAGT GGCAGTGGGT CTGGGACTTC TTACTCTCTC 12 60
ACAATCAGCA GAGTGGAGGC TGAAGATGCT GCCACTTATT ACTGCCAGCA GTGGACTAGT 1320
AACCCACCCA CGTTCGGAGG GGGGACCAAG CTGGAAATCA AACGTACGGT GGCTGCACCA 1380
TCTGTCTTCA TCTTCCCGCC ATCTGATGAG CAGTTGAAAT CTGGAACTGC CTCTGTTGTG 14 4 0
175 557
TGCCTGCTGA ATAACTTCTA TCCCAGAGAG GCCAAAGTAC AGTGGAAGGT 1 GGATAACGCC 1500
CTCCAATCGG GTAACTCCCA GGAGAGTGTC ACAGAGCAGG ACAGCAAGGA CAGCACCTAC 1560
AGCCTCAGCA GCACCCTGAC GCTGAGCAAA GCAGACTACG AGAAACACAA AGTCTACGCC 1620
TGCGAAGTCA CCCATCAGGG CCTGAGCTCG CCCGTCACAA AGAGCTTCAA CAGGGGAGAG 1680
TGTTGAATTC AGATCCGTTA ACGGTTACCA ACTACCTAGA CTGGATTCGT GACAACATGC 1740
GGCCGTGATA TCTACGTATG ATCAGCCTCG ACTGTGCCTT CTAGTTGCCA GCCATCTGTT 1800
GTTTGCCCCT CCCCCGTGCC TTCCTTGACC CTGGAAGGTG CCACTCCCAC TGTCCTTTCC 1860
TAATAAAATG AGGAAATTGC ATCGCATTGT CTGAGTAGGT GTCATTCTAT TCTGGGGGGT 1920
GGGGTGGGGC AGGACAGCAA GGGGGAGGAT TGGGAAGACA ATAGCAGGCA TGCTGGGGAT 1980
GCGGTGGGCT CTATGGAACC AGCTGGGGCT CGACAGCTAT GCCAAGTACG CCCCCTATTG 2040
ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTATGGGACT 2100
TTCCTACTTG GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT 2160
GGCAGTACAT CAATGGGCGT GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA AGTCTCCACC 2220
CCATTGACGT CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC 2280
GTAACAACTC CGCCCCATTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG GAGGTCTATA 2340
TAAGCAGAGC TGGGTACGTC CTCACATTCA GTGATCAGCA CTGAACACAG ACCCGTCGAC 2 4 00
ATGGGTTGGA GCCTCATCTT GCTCTTCCTT GTCGCTGTTG CTACGCGTGT CCTGTCCCAG 2460
gtacaactGc AGCAGCCTGG GGCTGAGCTG GTGAaAGCCTG GGGCCTCAGT GAAGATGTCC 2520
TGCAAGGCTT CTGGCTACAC ATTTACCAGT TACAATATGC ACTGGGTAAA ACAGACACCT 2580
GGTCGGGGCC TGGAATGGAT TGGAGCTATT TATCCCGGAA ATGGTGATAC TTCCTACAAT 2 64 0
CAGAAGTTCA AAGGCAAGGC CACATTGACT GCAGACAAAT CCTCCAGCAC AGCCTACATG 2 7 00
CAGCTCAGCA GCCTGACATC TGAGGACTCT GCGGTCTATT ACTGTGCAAG ATCGACTTAC 276C
TACGGCGGTG ACTGGTACTT CAATGTCTGG GGCGCAGGGA CCACGGTCAC CGTCTCTGCA 2820
GCTAGCACCA AGGGCCCATC GGTCTTCCCC CTGGCACCCT CCTCCAAGAG CACCTCTGGG 2880
GGCACAGCGG CCCTGGGCTG CCTGGTCAAG GACTACTTCC CCGAACCGGT GACGGTGTCG 2940
TGGAACTCAG GCGCCCTGAC CAGCGGCGTG CACACCTTCC CGGCTGTCCT ACAGTCCTCA 3000
GGACTCTACT CCCTCAGCAG CGTGGTGACC GTGCCCTCCA GCAGCTTGGG CACCCAGACC 3060
TACATCTGCA ACGTGAATCA CAAGCCCAGC AACACCAAGG TGGACAAGAA AGCAGAGCCC 312C
aaatcttgtg ACAAAACTCA CACATGCCCA CCGTGCCCAG CACCTGAACT CCTGGGGGGA 318 0
CCGTCAGTCT TCCTCTTCCC CCCAAAACCC AAGGACACCC TCATGATCTC CCGGACCCCT 3240
GAGGTCACAT GCGTGGTGGT GGACGTGAGC CACGAAGACC CTGAGGTCAA GGrTCAACTGG 3300
TACGTGGACG GCGTGGAGGT GCATAATGCC AAGACAAAGC CGCGGGAGGA GCAGTACAAC 3360
175 557
AGCACGTACC GTGTGGTCAG CGTCCTCACC GTCCTGCACC AGGACTGGCT GAATGGCAAG 3420
GAGTACAACT GCAAGGTCTC caacaaagcc CTCCCAGCCC CCATCGAGAA AACCATCTCC 3480
AAAGCCAAAG GGCAGCCCCG agaaccagag GTOTACACCC TGCCCCCATC CCGGGATGAG 3540
CTGACCAACA ACCAGCTCAG CCTGACCTGC CTGGTCAAAG GGTTCTATCC CAGCGACATC 3600
GCCGTGGAGT GCGAGAGCAA TGGGCAGCCG GAGAACAACT ACAAGACCAC GCCTCCCGTG 3660
CTGGACTCCG ACGGCTCCTT CTTCCTCTAC AGCAAGCTCA CCGTGGACAA GAGCAGGTGG 3720
CAGCACGGGA ACGTCTTCTC ATGCTCCGTG ATGCATGAGG CTCTGCACAA CCACTACACG 3780
CAGAAGAGCC TCTCCCTGTC TCCGGGTAAA TGAGGATCCG TTAACGGTTA CCAACTACCT 3840
agactggatt CGTGACAACA TGCGGCCGTG ATATCTACGT ATCATCAGCC TCGACTGTGC 3900
CTTCTACTTG CCAGCCATCT GTTGTTTGCC CCTCCCCCGT gccttccttg ACCCTGGAAG 3960
GTGCCACTCC CACTGTCCTT TCCTAATAAA ATGAGGAAAT TGCATCGCAT TGTCTGAGTA 4020
GGTGTCATTC TATTCTGGGG GGTGGGGTGG GGCAOGACAG CWGGGGGAG GATTGGGAAG 4080
ACAATAGCAG GCATGCTGGG GATGCGGTGG GCTCTATGGA ACCAGCTGGG GCTCGACAGC 4140
GCTGGATCTC CCGATCCCCA GCTTTGCTTC TCAATTTCTT ATTTGCATAA TGAGAAAAAA 4200
AGGAAAATTA attttaacac CAATTCAGTA GTTGATTCAG CAAATGCGTT GCCAAAAAGG 4260
ATGCTTTAGA GACAGTGTTC TCTGCACAGA TAAGGACAAA CATTATTCAG AGGGAGTACC 4320
CAGAGCTGAG ACTCCTAAGC CAGTGAGTGG CACAGCATTC TAGGGAGAAA TATGCTTGTC 4380
ATCACCGAAG CCTGATTCCG TAGAGCCACA CCTTGGTAAG GGCCAATCTG CTCACACAGG 4440
atagagaggg CAGGAGCCAG aaCAGAGCAT ATAAGGTGAG GTAGGATCAG TTGCTCCTCA 4500
CATTTCCTTC TGACATAGTT GTGTTGGGAG CTTGGATAGC TTGGACAGCT CAGGGCTGCG 4560
ATTTCGCGCC AAACTTGACG GCAATCCTAG CGTGAAGGCT GGTAGCATTT TATCCCCGCT 4620
GCCATCATGG TTCGACCATT GAACTGCATC GTCGCCCTCT CCCAAAATAT GOGGATTGGC 4600
AAGAACGGAG ACCTACCCTG gcctccgctc AGGAACGAGT TCAAGTACTT CCAAAGAATG 474C
ACCACAACCT CTTCAGTGGA ACGTAAACAG AATCTGGTGA TTATGGGTAG GAAAACCTGG 4800
TTCTCCATTC CTGAGAAGAA TCGACCTTTA AAGGACAGAA TTAATATAGT TCTCACTAGA 4860
GAACTCAAAG AACCACCACG AGGAGCTCAT TTTCTTGCCA AAAGTTTGGA TGATGCCTTA 4920
AGACTTATTG AACAACCGGA attggcaagt AAACTAGACA TGGTTTGGAT ACTCGGAGGC 4980
AGTTCTGTTT ACCAGGAAGC CATGAATCAA CCAGGCCACC TTAGACTGTT TGTGACAAGG 5040
ATCATGCAGG aatttgaaag TGACACGTTT TTCCCAGAAA TTGATTTGGG GAAATATAAA 510C
CTTCTCCCAG AATACCCAGG CGTCCTCTCT GAGGTCCAGG AGGAAAAAGG CATCAAGTAT 516C
AAGTTTGAAG TCTACGAGAA GAAA3ACTAA CAGGAAGATG CTTTCAAGTT CTCTGCTCCC 5220
175 557
CTCCTAAAGC TATGCATTTT TATAAGACCA TGGGACTTTT GCTGGCTTTA GATGAGGGTC 5280
GACTGTGCCT TCTAGTTGCC AGCCATCTGT TGTTTGCCCC TCCCCCGTGC CTTCCTTGAC 5340
CCTGGAAGGT GCCACTCCCA CTGTCCTTTC CTAATAAAAT GAGGAAATTG CATCGCATTG 5400
TCTGAGTAGG TGTCATTCTA TTCTGGGGGG TGGGGTGGGG CAGGACAGCA AGGGGGAGGA 5460
TTGGGAAGAC AATAGCAGGG ATGCTGGGGA TGCGGTGGGC TCTATGGAAC CAGCTGGGGC 5520
TCGAGCTACT AGCTTTGCTT CTCAATTTCT TATTTGCATA ATGAGAAAAA AAGGAAAATT 5580
aattttaaca CCAATTCAGT AGTTGATTGA GCAAATGCGT TGCCAAAAAG GATGCTTTAG 5640
AGACAGTGTT CTCTGCACAG ATAAGGACAA ACATTATTGA GAGGGAGTAC CCAGAGCTGA 5700
GACTCCTAAG CCAGTGAGTG GGACAGCATT CTAGGGAGAA ATATGCTTGT CATCACGGAA 5760
GCCTGATTCC GTAGAGCCAC ACCTTGGTAA GGGCCAATGT GCTGACACAG GATAGAGAGG 5820
GCAGGAGCCA GGGCAGAGCA TATAAGGTGA GGTAGGATCA GTTGCTCCTC acatttgctt 5880
CTGACATAGT TGTGTTGGGA GCTTGGATCG ATCCTCTATG GTTGAACAAG ATGGATTGCA 5940
CGCAGGTTCT CCGGCCGCTT GGGTGGAGAG gctattcggc TATGAGTGGG CACAACAGAG 6000
AATCGGCTGC TCTGATGCCG CCGTGTTCCG GCTGTCAGGG CAGGGGCGCC CGGTTCTTTT 6060
TGTCAAGACC GACCTGTCCG GTGCCCTGAA TGAACTGCAG GACGAGGCAG CGCGGGTATG 6120
GTGGCTGGCC ACGACGGGCG TTCCTTGCGC AGCTGTGCTC GACGTTGTCA CTGAAGGGGG 6180
AAGGGACTGG CTGCTATTGG GCGAAGTGCC GGGGCAGGAT CTGGTGTGAT CTCACCTTGG 6240
TCCTGCCGAG AAAGTATCCA TCATGGCTGA TGCAATGCGG CGGGTGCATA CGCTTGATGC 6300
GGCTACCTGC CCATTCGACC ACCAAGCGAA ACATCGCATC GAGGGAGCAC GTACTCGGAT 6360
GGAAGCCGGT CTTGTCGATC AGGATGATGT GGACGAAGAG GATGAGGGGC TCGCGGCAGG 6420
CGAACTGTTC GCCAGGCTCA AGGCGCGCAT GCCCGACGGC GAGGATCTCG TCGTGACCGA 6480
TGGCGATGCC TGCTTGCCGA ATATCATGGT GGAAAATGGC CGGTTTTCTG GATTCATCGA 6540
CTGTGGCCGG CTGGGTGTGG CGGACCGCTA TCAGGACATA GCGTTGGCTA CCCGTGATAT 6600
TGCTGAAGAG CTTGGCGGCG AATGGGCTGA CCGCTTCGTG gtggtttacg GTATGGGCGC 6660
TCCCGATTCG CAGCGCATCG CCTTCTATCG CCTTCTTGAC GAGTTCTTCT GAGCGGGACT 6720
CTGGGGTTCG AAATGACCGA CCAAGGGACG CCGAACCTGG GATGACGAGA TTTCGATTCG 6780
ACCGCCGCCT TCTATGAAAG GTTGGGCTTG GGAATCGTTT TCCGGGACGC CGGGTGGATG 6840
ATCCTCCAGC GCGGGGATCT CATGCTGGAG TTGTTCGCGG ACGGGAACTT gtttattgca 6900
gcttataatg GTTACAAATA AAGCAATAGC ATGAGAAATT TCAGAAATAA AGCATTTTTT 6960
TCACTGCATT CTAGTTGTGG TTTGTCCAAA CTCATCAATG TATCTTATCA TGTCTGGATC 7020
GCGGCCGCGA TCCCGTCGAG AGCTTGGCGT AATCATGGTG ATAGCTGTTT CCTGTGTGAA 7080
ATTGTTATCC GCTCACAATT CCACACAACA TACGAGCCGG AAGCATAAAG TGTAAAGCCT 7140
175 557
GGGGTGCCTA ATGAGTGAGC TAACTCACAT TAATTGCGTT GCGCTCACTG CCCGCTTTCC 7200
AGTCGGGAAA CCTGTCGTGC CAGCTGCATT AATGAATCGG CCAACGCGCG GGGAGAGGCO 7260
GTTTCCCTAT TGGGCGCTCT TCCGCTTCCT CGCTCACTGA CTCGCTGCGC TCGGTCGTTC 7320
GGCTGCGGCG AGCGGTATCA GCTCACTCAA AGGCGGTAAT ACGGTTATCC ACAGAATCAG 7300
GGGATAACGC AGGAAAGAAC ATGTGAGCAA AAGCCCAGCA AAAGGCCAGG aaccgtaaaa 7440
AGGCCGCGTT GCTGGCGTTT TTCCATAGGC TCCGCCCCCC TOACGAGCAT CACAAAAATC 7500
GACGCTCAAG TCAGAGGTGG CGAAACCCGA CAGGACTATA AAGATACCAG GCGTTTCCCC 7560
CTGGAAGCTC CCTCGTGCGC TCTCCTGTTC CGACCCTGCC GCTTACCGGA TACCTGTCCG 7620
CCTTTCTCCC TTCGGGAAGC GTGGCGCTTT CTCAATGCTC ACGCTGTAGG TATCTCAGTT 7680
CGGTOTACGT CGTTCGCTCC aagctgggct GTCTGCACGA ACCCCCCGTT CAGCCCGACC 7740
GCTGCGCCTT ATCCGGTAAC TATCGTCTTG AGTCCAACCC GGTAAGACAC GACTTATCGC 7800
CACTCGCAGC AGCCACTGGT AACAGGATTA GCAGAGCGAC GTATGTAGCC GGTGCTACAG 7860
AGTTCTTGAA GTGGTGGCCT AACTACOGCT ACACTAGAAG GACAGTATTT GGTATCTGCG 7920
CTCTGCTGAA GCCAGTTACC TTCGGAAAAA GAGTTGGTAG CTCTTGATCC GGCAAACAAA 7980
CCACCGCTGC TAGCGGTGGT TTTTTTGTTT GCAAGCAGCA GATTACGCGC AGAAAAAAAG 8040
GATCTCAAGA AGATCCTTTG ATCTTTTCTA CGGGGTCTGA CGCTCAGTGG AACGAAAACT 8100
CACCTTAAGG gattttggtc ATGAGATTAT CAAAAAGGAT CTTCACCTAG atccttttaa 8160
ATTAAAAATG AAGTTTTAAA TCAATCTAAA GTATATATGA GTAAACTTOG TCTGACAGTT 8220
ACCAATGCTT AATCAGTGAG GCACCTATCT CAGCGATCTG TCTATTTCGT TCATCCATAG 8280
TTGCCTGACT CCCCGTCOTG TAGATAACTA CGATACGGGA ggocttacca TCTGGCCCCA 8340
GTGCTGCAAT GATACCGCGA GACCCACGCT CACCCCCTCC AGATTTATCA GCAATAAACC 8400
AGCCAGCCGG AAGGGCCGAG CGCAGAAGTG GTCCTGCAAC TTTATCCGCC TCCATCCAGT 8460
CTATTAATTG TTGCCGGGAA GCTAGAGTAA GTAGTTCGCC AGTTAATAGT TTGCGCAACC 8520
TTGTTGCCAT TGCTACAGGC ATCGTGGTGT CACGCTCGTC GTTTGGTATG GCTTCATTCA 8580
GCTCCGGTTC CCAACGATCA AGGCOAGTTA CATGATCCCC CATGTTGTGC AAAAAAGCGG 8640
TTAGCTCCTT CGGTCCTGCG ATCGTTGTCA GAAGTAAGTT GGCCGCAGTG TTATCACTCA 8700
TGGTTATGGC AGCACTCCAT AATTCTCTTA CTGTCATOCC ATCCGTAAGA TGCTTTTCTG 8760
TGACTGGTCA GTACTCAACC AAGTCATTCT GAGAATAGTG TATGCGGCGA CCGAGTTGCT 8820
CTTGCCCGGC GTCAATACGG GATAATACCG CGCCACATAG CAGAACTTTA AAACTGCTCA 8880
TCATTGGAAA ACGTTCTTCG GGGCGAAAAC TCTCAAGGAT CTTACCGCTG TTGAGATCCA 8940
GTTCGATGTA ACCCACTCGT GCACCCAACT GATCTTCAGC ATCTTTTACT TTCACCAGCG 9000
175 557
TTTCTGGGTG AGCAAAAACA GGAAGGCAAA ATGCCGCAAA AAAGGGAATA AGGGCGACAC 9060
GGAAATGTTG AATACTCATA CTCTTCCTTT TTCAATATTA TTGAAGCATT TATCAGGGTT 9120
attgtctcat GAGCGGATAC atatttgaat gtatttagaa AAATAAACAA ATAGGGGTTC 9180
CGCGCACATT TCCCCGAAAA GTGCCACCT 9209
(4) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NO 3:
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 54 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: tak (vi) ANTYSENS: nie (ix) OP^ SEKWENCJ l: IDENTFFIKTTOR SEKW. NR 3
5' ATC ACA GAT CTC TCA CCA TGG ATT TTC AGG TBC AGA TTA TCA GCT TC 3' (5) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 4:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 30 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE:
(vi) ANTYSENS: nie (ix) OPIS ^^K^V^^r^<JIj:: IDENTFFIATTOR SEKW. NR 4
5' TGC AGC ATC CGT ACG TTT GAT TTC CAG CTT 3’ 3 o (6) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 5:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
175 557 (A) DŁUGOŚĆ: 384 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: ak (vi) ANTYSENS : me (ix) OPIS SEKWENCJI: IDENTYFIKATOR SEKW. NR 5
ATG GAT TTT CAG GTG CAG ATT ATC AGC TTC CTG CTA ATC AGT GCT TCA GTC 51
ATA ATG TCC AGA GGG CAA ATT GTT CTC TCC CAG TCT CCA GCA ATC CTG TCT 102
GCA TCT CCA GGG GAG AAG GTC ACA ATG ACT TGC AGG GCC AGC TCA AGT GTA 153
AGT TAC ATC CAC TGG TTC CAG CAG AAG CCA GGA TCC TCC CCC AAA CCC TGG 204
ATT TAT GCC ACA TCC AAC CTG GCT TCT GGA GTC CCT GTT CGC TTC AGT GGC 255
AGT GGG TCT GGG ACT TCT TAC TCT CTC ACA ATC AGC AGA GTG GAG GCT GAA 306
GAT GCT GCC ACT TAT TAC TGC CAG CAG TGG ACT AGT AAC CCA CCC ACG TTC 357
GGA GGG GGG ACC AAG CTG GAA ATC AAA 384
(7) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 6:
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 27 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) ΗΙΡΟΤΕΤΎΟΖΝΙΕ: tak (vi) ANPSSENS : nie (ix) OPI S EEWEENJIJ IiIDETTYFIKATO R EEKW. NR 6
5' GCG GCT CCC ACG CGA GAC CTG ACC CAG 3'
175 557 (8) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW. NR 7:
(I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 29 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: aak (vi) ANTYSENS: tak (ix) OPIS SEKWENCJ S: IDENTYFIKATOR SEKW. NR 7 5' GCS TGT TGT GCT AGC TGM GRA GAC RGT GA 3' 29 (9) INFORMACJA DLA IDENTYFIKATORA SEKW NR 8' (I) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 420 zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (n) NICIOWOŚĆ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP- CZĄSTECZKI: DNA ( genomowy) (iii) HIPOTETYCZNIE: tak (vi) ANTYSENS: nie (ix) OPiS SERWNCJ S: IDENTYFIKATOR NR N
ATG GGT TGG AGC CTC ATC TTG CTC TTC CTT GTC GCT GTT GCT ACG CGT GTC 51
CTG TCC CAG GTA CAA CTG CAG CAG CCT GGG GCT GAG CTG GTG AAG CCT GGG 102
GCC TCA GTG AAG ATG TCC TGC AAG GCT TCT GGC TAC ACA ttt ACC AG? TAC 153
AAT ATG CAC TGG GTA AAA CAG ACA CCT GGT CGG GGC CTG GAA TGG A TT t~. - . GGA .2 0 4
GCT ATT TAT CCC GGA AAT GGT GAT ACT TCC TAC AAT CAG AAG TTC AAA GGC 255
AAG GCC ACA TTG ACT GCA GAC AAA TCC TCC AGC ACA GCC TAC ATG CAG CTC 3 06
AGC AGC CTG ACA TCT GAG GAC TCT GCG GTC TAT TAC TGT GCA AGA TCG ACT '5Ύ
TAC TAC GGC GGT GAC TGG TAC TTC AAT GTC TCG GGC GCA CCG ACC ACG GTC 4 0K
ACC GTC TCT GCA 420
175 557
OT
-Ί
C5 >
O V) __ l Cn cn CO cn O
Q — 1 Ό s. I to cn
I cn K. 04 to
1 cn A +*·
1 cn \
cn 04 CD \
ΓΟ o
04
CD
1 a. ΐ ro ' L. CD W 3 CT o
-r^ co w\> CD CT z: z ω -i >
z
175 557
TŁUMACZENIE HASEŁ WYSTĘPUJĄCYCH NAD SEKWENCJAMI PRZEDSTAWIONYMI NA ZAŁĄCZONYCH FIGURACH :
H
Z co
U
o
Z
!O Z
o >< CO
z Q
Z O Z
z Z Z
o CJ 01
•śT <- Q Z
2 1—1 O
>3 K' co Z <
CO z z
1 < z
z z Z Q
01 o O O
Eh Eh z z
< o ω
to 2 Z z
O o z 01
O z 01 o
Oj z co
(X oi o
%
A ω
z o
Q o
o
Q I—I O
O z,
H
Z
Z
Z co z
o o
Oj < O Z Z co w ό z
CO O OT Q to o O 84
Z &
Z z
t-t
CQ
o o
O o z
o 01 o
o Ol z z
o t-ł o z
01 *·» z z z z
Z z •co o 01 Q
z o OT 2 00
-tO z Z CJ
OT co CJ 1—I z ω
Z 2 o I—I
CJ Z O z z
O z o o
Q o Z 2 z
z O z Z - o
CJ Z o z z z z
oi z
Q O u 'Z
z z t—1
o z z
co o o
z z Q z
o ω o
z z z z z
01 < o o
z z z z 1—i
z o Z o o
01 o z z z
co z p? co z
ω z q co Z O Z tO 2 Z
Oj Z
Z 2 to o co z Z CO OT z
Z
H
CO 01 Z Z
Z
z o o z
z 01 < z 2
1—1 Eh Cu z > Q z O
o o Cu z t-t > z
1—1 2 o 01 o o
z o 1—1 z 01
z c z z Z z z z
ω z 01 01 z o 2
z O Q 2 Z Q z z Oj z
z O z O >
1—i > 2 01 r> Z 01 z 2 Z o
z co o z ή CO z co Ξς CO oo
Z
CJ
REGION__
2
O
t—t
Z
z z
z ω
T7 z
01 o
Q 2
O
Z z
1 1-[ z
o
z z z
o o
Q ω o
O z
O o
2
Z Z
O z o 1—1 z
Z 1—1 ZUj Z z
co < O
Z Z Q
O
Q < 01
Pj Eh Ol 00
CO co z
o
START DHFR - START KODON DHFR
175 557
Ο
> Ο Ω Ο
ω Ο Ο Ο
ω Ζ Ω
1—I ο Ω ω Ω
Ω ο ζ s Ζ
Ο ω Σδ ζ ζ -οα
ο 1-1 ο ω Μ Ω
ζ Ω Ω ζ Ω Ω Ω 1—1
Ω Ω Ω ζ ω Ο
Ο Ζ Ω ω Ω
Ω Ω 2 Ω Μ Ζ Ζ
2 ο Ω Ω Ω Ο Ω Ζ
Ο Ω Ω Ω ρ£ Ο
Ω H ι—ι H Ζ Ζ < Ο (X Ω
Ζ Ζ Ω Ω Ο Ω '2 Ω Ο
Ο Ο Ο Ω Ω Ο P? Ω 'Ζ
Ζ Ω (Ζ Ο Ζ Ω
Ω Ω ζ Ω Ω ω Ζ Ω
Ω Ω ο Ω Ω H Ω ίΞπ Ω Ω
Ω Ω Ω 2 Ο Ω ω Ω 5 Ζ 1—1
Ω ω Ζ Ω Ζ Ω ω Ζ V. Ζ
Ω 12 Ο Ω ζ Ζ ω Ω ζ < Ζ
Ζ ω Ζ Ο Ω Ω ο Ο Μ -ο Ζ Ω
Ο 2 ο Ω ω Ω Ω 2 ω Ω Μ
Ω ;τ Ω ω Ζ Ο Ο ζ Ω Ο 2
Ο (X Ο Ζ Ω ω Ζ Ζ Ω Σ2 Ω 5 Ω
Ζ Ω Ζ Ζ Ω Ω Ζ Ζ Ω ο
Ο Ω ω < Ω Ω Ω ο Ο ω Ω Ό
Ω Ω Ω ω Ω Ω Ω Ω Ω Ζ Ω Ω Ώ
Ο ω Ο Ω Ω Ο Ω ο 1—1 ζ Ω Ω
Ω Ο Ω Μ ο Ο Ω Ω < Ω 2 Ω u Ω
ω Ω ω Ζ S Ω ω ω Ζ Ω Ω ω Ω υ
ω
Z
Ο ι—ι Η < Ο ι—ι Ω Oj ω
Ω
Ω
Ω !—I
Ο <
Ο ζ
ο
1—1
Ο ω
Ω ω
ω ω
Ω Ω ο Ζ
Ο ο Ω 1—1 ι—ι
ζ ω Ω ζ Ω < Ω
Ω Ζζ Ω—< 1—1 ο,· Ζ Ω Ζ
Ω Ω Ο ο Ω Σχί
Ο Ω 1—I Ω Ω
Ζ Ω Ω Ω Ζ
Ω Ω Ο Ζ Ω I—I
Ω Ω Ω ο Ω
Ω Ζ Ο Ω Ω Ω 1—1 Ζ
Ζ Ω ω ω Ο 1—1 ω Ω Ω Ο
Ω Ο 2 ζ Ω Ω
Ω Ω Ω Ω Ω Ω Ω
Ω 2 Ω ρ? Ο Ω Ω Ω Ω Ζ
Ο Ο Ο Ω ^r Ο < Ω Ο
Ω Ω Ω Ζ > Ω Ω < 1—1
03 Ζ ω Ω ω m Μ ω Ζ Ω
ω ω
Ω <
ω
Ω
Ω
Ś
Ο
Ω
Ω ω
Ζ
Ω ζ
><
Ω
Ω ω
i—1
Ω ζ
ί—ί <
Ω
U
Ω
ΩΖ
175 557 łącznik #1=15pz początek SV40=332pz
GACGTCGCGG CCGCTCTAGG CCTCCAAAAA AGCCTCCTCA CTACTTCTGG AATAGCTCAG AGGCCGAGGC GGCCTCGGCC TCTGCATAAA TAAAAAAAAT TAGTCAGCCA TGCATGGGGC
GGAGAATGGG CGGAACTGGG CGGAGTTAGG GGCGGGATGG GCGGAGTTAG GGGCGGGACT
ATGGTTGCTG ACTAATTGAG ATGCATGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTGG GGAGCCTGGG
GACTTTCCAC ACCTGGTTGC TGACTAATTG AGATGCATGC TTTGCATACT TCTGCCTGCT ; łącznik #2= 13pz
GGGGAGCCTG GGGACTTTCC ACACCCTAAC TGACACACAT TCCACAGAAT TAATTCCCCT 347 8 360
AGTTATTAAT AGTAATCAAT TACGGGGTCA TTAGTTCATA GCCCATATAT GGAGTTCCGC
GTTACATAAC TTACGGTAAA TGGCCCGCCT GGCTGACCGC CCAACGACCC CCGCCCATTG promotor-wzmacniacz CMV=567pz
ACGTCAATAA TGACGTATGT tcccatagta acgccaatag ggactttcca ttgacgtcaa tgggtggact atttacggta aactgcccac ttggcagtac atćaagtgta tcatatgcca AGTACGCCCC CTATTGACGT CAATGACGGT AAATGGCCCG CCTGGCATTA TGCCCAGTAC
ATGACCTTAT GGGACTTTCC TACTTGGCAG TACATCTACG TATTAGTCAT CGCTATTACC
ATGGTGATGC GGTTTTGGCA GTACATCAAT GGGCGTGGAT AGCGGTTTGA CTCACGGGGA
TTTCCAAGTC TCCACCCCAT TGACGTCAAT GGGAGTTTGT TTTGGCACCA AAATCAACGG
GACTTTCCAA AATGTCGTAA CAACTCCGCC CCATTGACGC AAATGGGCGG TAGGCGTGTA , łącznik #3=76pz[
CGGTGGGAGG TCTATATAAG CAGAGCTlGGG TACGjTĆAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC Bgl π 727 ® lider 60pz
CATCACAGAT CTCTCACC^T GAGGGTCCCC GCTCAGCTCC TGGGGCTCCT GCTGCTCTGG 978 ‘+1J101102 Ą0Ą108 □A tggJaccaag gtggaaatca^aacgTacggt ggctgcacca 9~“ 1062’3 Bsi WI
CTCCCAGGTG CACGATGT 1038
TCTGTCTTCA TCTTCCCGCC ATCTGATGAG CAGTTGAAAT CTGGAACTGC CTCTGTTGTG
TGCCTGCTGA ATAACTTCTA TCCCAGAGAG GCCAAAGTAC AGTGGAAGGT GGATAACGCC część stała .ludzkiego łańcucha κ 324 pz 107 aminokwasów i kodon stop
CTCCAATCGG GTAACTCCCA GGAGAGTGTC ACAGAGCAGG ACAGCAAGGA CAGCACCTAC
AGCCTCAGCA GCACCCTGAC GCTGAGCAAA GCAGACTACG AGAAACACAA AGTCTACGCC
TGCGAAGTCA CCCATCAGGG CCTGAGCTCG CCCGTCACAA AGAGCTTCAA CAGGGGAGAG kodon stop łańcucha lekkiego łącznik #4=85pz
Eco RI
TGT|TGA^TTC AGATCCGTTA acggttacca actacctaga CTGGATTCGT gacaacatgc 1386 ggccgtgata tctacgtatg atcagcctcg aJctgtgcctt ctagttgcca gccatctgtt 1471
120
180
240
300
360
420
480
540
600
660
720
780
840
900
960
1020 <080
140
1200
1260
132C
1380
4-4C
1500
FIG. 2A
175 557
GTTTGCCCCT
TAATAAAATG
GGGGTGGGGC
GCGGTGGGCT
CCCCCGTGCC TTCCTTGACC CTGGAAGGTG CCACTCCCAC TGTCCTTTCC poliadenylacja BGH=23 lpz
AGGAAATTGC ATCGCATTGT CTGAGTAGGT GTCATTCTAT TCTGGGGGGT
AGGACAGCAA GGGGGAGGAT TGGGAAGACA ATAGCAGGCA TGCTGGGGAT łącznik #5=15 pz j
CTATGGAACC AGJĆTGGGGCT CGACAGuTAT GCCAAGTACG CCCCCTATTG
I fl
1702
1717'8
ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTATGGGACT
TTCCTACTTG gcagtacatc TACGTATTAG TCATCGCTAT taccatggtg atgcggtttt promotor-wzmacniacz CMV=334pz ggcagtacat caatgggcgt ggatagcggt ttgactcacg gggatttcca agtctccacc ccattgacgt caatgggagt ttgttttggc accaaaatca acgggacttt ccaaaatgtc gtaacaactc cgccccattg acgcaaatgg gcggtaggcg tgtacggtgg gaggtctata . łącznik #6=7pz .
TAAGCAGAGC^GGTACGffC STCACATTCA GTGATCAGCA 2051*2 2058*9 lider=51pz
TGlGGTTGGA GCCTCATCTT GCTCTTCCTT GTCGCTGTTG
Sal I
CTGAACACAG ACCCGTCGAC
Mlu I 2151 CTACgCGJGT
początek łańcucha ciężkiego AAGGGCCCAT CGGTCTTCCC CCTGGCACCC TCCTCCAAGA GCACCTCTGG GGGCACAGCG
GCCCTGGGCT GCCTGGTCAA GGACTACTTC CCCGAACCGG TGACGGTGTC GTGGAACTCA
GGCGCCCTGA CCAGCGGCGT GCACACCTTC CCGGCTGTCC TACAGTCCIC AGGACTCiAC część stała ludzkiego łańcucha yl
TCCCTCAGCA GCGTGGTGAC CGTGCĆCTCC AGCAGCTTGG GCACCCAGAC CTACATCTGC
-5 -4 -3 114 115
AACGTGAATC
GACAAAACTC
TTCCTCTTCC
TGCGTGGTGG
GGCGTGGAGG
CGTGTGGTCA
TGCAAGGTCT
GGGCAGCCCC
AACCAGGTCA
TGGGAGAGCA
ACAAGCCCAG
ACACATGCCC
CCCCAAAACC
TGGACGTGAG
TGCATAATGC
GCGTCCTCAC
CCAACAAAGC
GAGAACCACA
GCCTGACCTG
ATGGGCAGCC
993pz=330 aminokwasów i kodon stop
CAACACCAAG
ACCGTGCCCA
CAAGGACACC
CCACGAAGAC
CAAGACAAAG
CGTCCTGCAC
CCTCCCAGCC
GGTGTACACC
CCTGGTCAAA
GGAGAACAAC
GTGGACAAGA
GCACCTGAAC
CTCATGATCT
CCT6AGGTCA
CCGCGGGAGG
CAGGACTGGC
CCCATCGAGA
CTGCCCCCAT
AAGCAGAGCC
TCCTGGGGGG
CCCGGACCCC
AGTTCAACTG
AGCAGT ACAA
TGAATGGCAA
AAACCATCTC
CCCGGGATGA
GGCTTCTATC CCAGCGACAT
TACAAGACĆA CGCCTCCCGT
CAAATCTTGT
ACCGTCAGTC
TGAGGTCACA
GTACGTGGAC
CAGCACGTAC
GGACTACAAG
CAAAGCCAAA
GCTGACCAGC
CGCCGTGGAG
GCTGGACTCC
1560
1620
1680
1740
1800
1860
1920
1980
2U40
2100
2160
2220
2280
2340
2400
2460
2520
2580
2640
2700
2760
2820
2880
2940
3000
FIG. 2B
175 557
GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTGGACA
AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA koniec łańcucha ciężkiego
Barn HI
AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG
ACCACTACAC GCAGAAGAGC łącznik #7=8 lpz
CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA AfTGAGGATCC GTTAACGGTT 3144i5
TCGTGACAAC ATGCGGCCGT GATATCTACG TATGATCAGC
GCCAGCCATC TGTTGTTTGC CCCTCCCCCG TGCCTTCCTT
ACCAACTACC
CTCGACTGTG
322516
GACCCTGGAA
TAGACTGGAT
CCTTCTAGTT
GGTGCCACTC region poliadenylaęji wołowego hormonu wzrostu - 23 lpz CCACTGTCCT TTCCTAATAA AATGAGGAAA TTGCATCGCA TTGTCTGAGT AGGTGTCATT
CTATTCTGGG GGGTGGGGTG GGGCAGGACA GCAAGGGGGA GGATTGGGAA GACAATAGCA
GGCATGCTGG
CCCGATCCCC
3490
AATTTTAACA
GGATGCGGTG
AGCTTTGCTT
CCAATTCAGT
GGCTCTATGG
CTCAATTTCT
AGTTGATTGA
AACCAGCTGG 3456* 7 TATTTGCATA
GCAAATGCGT łącznik #8=3 4pz GGCTCGACAG CGCTGGA7CT
ATGAGAAAAA AAGGAAAATT
TGCCAAAAAG GATGCTTTAG mysi większy promotor P~globiny=366pz
AGACAGTGTT CTCTGCACAG ATAAGGACAA ACATTATTCA GAGGGAGTAC CCAGAGCTGA
GACTCCTAAG CCAGTGAGTG GCACAGCATT CTAGGGAGAA ATATGCTTGT CATCACCGAA
GCCTGATTCC GTAGAGCCAC ACCTTGGTAA GGGCCAATCT GCTCACACAG GATAGAGAGG
GCAGGAGCCA GGGCAGAGCA TATAAGGTGA GGTAGGATCA GTTGCTCCTC ACATTTGCTT
CTGACATAGT
CAAACTTGAC łącznik #9= 19pz
TGTGTTjGGGA GCTTGGATAG 3856*7
GGCAATCĆTA GCGTGAAGGC
5’ nietranslowany DHFR—82pz
CTTGGjACAGC - TCAGGGCTGC GATTTCGCGĆ 3875 6 iSTART DHFR
TGGTAGGATT TTATCCCCGC TGCCATCJąTUI
3957^6
GTTCGACCAT
GACCTACCCT
TCTTCAGTGG
CCTGAGAAGA
GAACCACCAC
GAACAACCGG
TACCAGGAAG
GAATTTGAAA
GAAT ACCCAG
TGAACTGCAT CGTCGCCGTG TCCCAAAATA TGGGGATTGG
GGCCTCCGCT CAGGAACGAG TTCAAGTACT TCCAAAGAAT
AAGGTAAACA GAATCTGGTG ATTATGGGTA GGAAAACCTG mysi DHFR=564pz=187 aminokwasów i kodon stop
ATCGACCTTT
GAGGAGCTCA
AATTGGCAAG
CCATGAATCA
GTGACACGTT
GCGTCCTCTC
AAAGGACAGA
TTTTCTTGCC
TAAAGTAGAC
ACCAGGCCAC
TTTCCCAGAA
TGAGGTCCAG
ATTAATATAG
AAAAGTTTGG
ATGGTTTGGA
CTTAGACTCT
ATTGATTTGG
GAGGAAAAAG
TTCTCAGTAG
ATGATGCCTT
TAGTCGGAGG
TTGIGACAAG
GGAAATATAA
GCATCAAGTA
CAAGAACGGA
GACCACAACC
GTTCTCCATT
AGAACTCAAA
AAGACTTATT
CAGTTCTGTT
GATCATGCAG
ACTTCTCCCA
TAAGTTTGAA
3060
3120
3180
3240
3300
3360
3420
3480
3540
3600
3660
3720
3780
3840
3900
3960
4020
4080
40
4200
4260
4320
4380
444G
4500
FIG. 2C
175 557
STOP DHFRi
GTCTACGAGA AGAAAGAClTA ACAGGAAGAT 452Ϊ1 2
3’ nietranslowany DHFR=82pz TCaiGCATTT ttataagacc atgggacttt
GCTTTCAAGT TCTCTGCTCC CCTCCTAAAG łącznik #10=10pz
TGCTGGCTTT AGaItCAGĆCT CGAETGTGCr. 4603*4 4613*4
TTCTAGTTGC CAGCCATCTG TTGTTTGCCC
CTCCCCCGTG CCTTCCTTGA CCCTGGAAGG region poliadenylacji wołowego hormonu wzrostu = 23 lpz TGCCACTCCC ACTGTCCTTT CCTAATAAAA TGAGGAAATT GCATCGCATT GTĆTGAGTAG
GTGTCATTCT ATTCTGGGGG GTGGGGTGGG GCAGGACAGC AAGGGGGAGG ATTGGGAAGA łącznik #ll=17pz
CAATAGCAGG CATGCTGGGG ATGCGGTGGG CTCTATGGAA CCAGCTGGGG CTCGAGCTAC 4844*5
11AGCTTTGCT TCTCAATTTC TTATTTGCAT AATGAGAAAA AAAGGAAAAT TAATTTTAAC
4560
4620
4680
4740
4800
4860
4920
ACCAATTCAG
TCTCTGCACA
GCCAGTGAGT
CGTAGAGCCA
AGGGCAGAGC
TTGTGTTCGG
5227*8
TCCGGCCGCT
CTCTGATGCC
CGACCTGTCC
CACGACGGGC
GCTGCTATTG
GAAAGTATCC
CCCATTCGAC
TCTTGTCGAT
CGCCAGGCTC
CTGCTTGCCG
GCTGGGTGTG
GCTTGGCGGC
TAGTTGATTG AGCAAATGCG TTGCCAAAAA GGATGCTTTA mysi większy promotor 3-globiny=366pz
GATAAGGACA AACATTATTC AGAGGGAGTA CCCAGAGCTG
GGCACAGCAT TCTAGGGAGA AATATGCTTG TCATCACCGA
CACCTTGGTA AGGGCCAATC TGCTCACACA GGATAGAGAG
ATATAAGGTG AGGTAGGATC AGTTGCTCCT CACATTTGCT łącznik #12=2lpz
AGCTTGGATC GATCCTCTEt-GjGTTGAACAA GATGGATTGC 5248 *9
TGGGTGGAGA GGCTATTCGG CTATGACTGG GCACAACAGA
GCCGTGTTCC GGCTGTCAGC GCAGGGGCGC CCGGTTCTTT
START NEO _ fosfotransferaza neomycynowa _ ggtgccctga'atgaactgćaggacgaggca gcgcggctat
795pz=264 aminokwasy i kodon stop
GTTCCTTGCG
GGCGAAGTGC
ATCATGGCTG
CACCAAGCGA
CAGGATGATC
AAGGCGCGCA
AATATCATGG
GCGGACCGCT
GAAT GGGC TG
CAGCTGTGCT
CGGGGCAGGA
ATGGAATGCG
AACATCGCAT
T GGACGAAGA
TGCCCGACGG tggaaaatgg
AT CAGGACAT
ACCGCTTCCT
CGACGTTGTC
TCTCCTGTCA
GCGGCTGCAT
CGAGCGAGCA
GCATCAGGGG
CGAGGATCTC
CCGCTTTTCT
AGCGTTGGCT
CGTGCTTTAC
ACTGAAGCGG
TCTCACCTTG
ACGCTTGATC
CGTACTCGGA
CTCGCGCCAG
GTCGTGACCC
GGATTCATCG
ACCCGTGATA
GGTATCGCCG
GAGACAGTGT 4980
AGACTCCTAA 5040
AGCCTGATTC 5100
GGCAGGAGCC 5160
TCTGACATAG 5220
ACGCAGGTTC 5280
CAATCGGCTG 5540
TTGTCAAGAC 5400
CGTGGCTGGC 5460
GAAGGGACTG 5520
C-TCCTGCCGA 5580
CGGCTACCTG 5640
TGGAAGCCGG 5700
CCGAACTGTT 5760
ATGGCGATGC 5820
ACTGTGGCCG 5880
TTGCTGAAGA 5940
CTTCCCGATTC6000
FIG. 2D
175 557
GCAGCGCATC
GAAATGACCG
TTCTATGAAA
CGCGGGGATC
GGTTACAAAT
TCTAGTTGTG
ATCCCGTuGA 6368* 9
CGCTCACAAT
AATGAGTGAG
ACCTGTCGTG
TTGGGCGCTC
GAGCGGTATC
CAGGAAAGAA
TGCTGGCGTT
GTCAGAGuTG
CCCTCGTGCG
CTTCGGGAAG
TCGTTCGCTC
TATCCGGTAA
CAGCCACTGG
AGTGGTGGCC
AGCCAGTTAC
GTAGCGGTGG
AAGATCCTTT
GGATTTTGGT
STOP ΝΕΟΙ
GCCTTCTATC GCCTTCTTGA CGAGTTCTTC [TGAjCGGGAC TCTGGGGTTC 604314
ACCAAGCGAC GCCCAACCTG CCATCACGAG ATTTCGATTC CACCGCCGCC 3’ metranslowany NEO=173pz
GGTTGGGCTT CGGAATCGTT TTCCGGGACG CCGGCTGGAT GATCCTCCAG
TCATGCTGGA GTTCTTCGCC CACCCC^ACT TGTTTATTGC AGCTTATAAT 6216'7
AAAGCAATAG CATCACAAAT TTCACAAATA AAGCATTTTT TTCACTGCAT wczesny sygnał poliadenylacji SV40=133pz t łącznik #13=19pz
GTTTGTCCAA ACTCATCAAT CTATCTTATC’ ATGTCTGGćJt CGCGGCCGCG 6349'50
GAGCTTGGCG TAATCATGGT CATAGCTGTT TCCTGTGTGA AATTGTTATC
TCCACACAAC ATACGAGCCG GAAGCATAAA GTGTAAAGCC TGGGGTGCCT
CTAACTCACA TTAATTGCGT TGCGCTCACT GCCCGCTTTC CAGTCGGGAA
CCAGCTGCAT TAATGAATCG GCCAACGCGC GGGGAGAGGC GGTTTGCGTA
PVC 19
TTCCGCTTCC TCGCTCACTG ACTCGCTGCG CTCGGTCGTT CGGCTGCGGC
AGCTCACTCA AAGGCGGTAA TACGGTTATC CACAGAATCA GGGGATAACG
CATGTGAGCA AAAGGCCAGC AAAAGGCCAG GAACCGTAAA AAGGCCGCGT bakteryjny początek replikaęji=6792
T0TCCATAGG CTCCGCCCCC CTGACGAGCA TCACAAAAAT CGACGCTCAA GCGAAACCCG ACAGGACTAT AAAGATACCA GGCGTTTCCC CCTGGAAGCT
CTCTCCTGTT CCGACCCTGC CGCTTACCGG ATACCTGTCC GCCTTTCTCC
CGTGGCGCTT TCTCAATGCT CACGCTGTAG GTATCTCAGT TCGGTGTAGG
CAAGCTGGGC TGTGTGCACG AACCCCCCGT TCAGCCCGAC CGCTGCGCCT
CTATCGTCTT GAGTCCAACC CGGTAAGACA CGACTTATCG CCACTGGCAG
TAACAGGATT AGCAGAGCGA GGTATGTAGG CGGTGCTACA GAGTTCTTGA
TAACTACGGC TACACTAGAA GGACAGTATT TGGTATCTGC GCTCTGCTGA
CTTCGGAAAA AGAGTTGGTA GCTCTTGATC CGGCAAACAA ACCACCGCTG
TTTTTTTGTT TGCAAGCAGC AGATTACGCG CAGAAAAAAA GGATCTCAAG
GATCTTTTCT ACGGGGTCTG ACGCTCAGTG GAACGAAAAC TCACGTTAA&
CATGAGATTA TCAAAAAGGA TCTTCACCTA GATCCTTTTA AATTAAAAAT
6060
6120
6180
6240
6300
6360
6420
6480
6340
6600
6660
6720
6780
6840
6900
6960
7020
7080
7140
7200
7260
7320
7380
7440
7500
FIG. 2E
175 557 kodon stop β-laktamazy
GAAGTTTTAA ATCAATCTAA agtatatatg AGTAAACTTG GTCTGACAGfT '7 taJccaatgct 550 7560
TAATCAGTGA GGCACCTATC TCAGCGATCT GTCTATTTCG TTCATCCATA gttgcctgac 7620
TCCCCGTCGT GTAGATAACT ACGATACGGG AGGGCTTACC ATCTGGCCCC agtgctgcaa 7680
TGATACCGCG AGACCCACGC TCACCGGCTC CAGATTTATC ^-bktamaT-a-Rń lpz AGCAATAAAC cagccagccg 7740
GAAGGGCCGA GCGCAGAAGT GGTCCTGCAA CTTTATCCGC CTCCATCCAG 286 aminokwasów i kodon stop tctat-taatt 7800
GTTGCCGGGA AGCTAGAGTA AGTAGTTCGC CAGTTAATAG TTTGCGCAAC gttgttgcca 7860
TTGCTACAGG CATCGTGGTG TCACGCTCGT CGTTTGGTAT GGCTTCATTC agctccggtt 7920
CCCAACGATC AAGGCGAGTT ACATGATCCC CCATGTTGTG CAAAAAAGCG gttagctcct 7980
TCGGTCCTCC GATCGTTGTC AGAAGTAAGT TGGCCGCAGT GTTATCACTC atggttatgg 8040
CAGCACTGCA TAATTCTCTT ACTGTCATGC CATCCGTAAG ATGCTTTTCT GTGACTGGTG 8100
AGTACTCAAC CAAGTCATTC TGAGAATAGT GTATGCGGCG ACCGAGTTGC TCTTGCCCGG 8160
CGT CAATACG GGATAATACC GCGCCACATA GCAGAACTTT AAAAGTGCTC atcattggaa 8220
AACGTTCTTC GGGGCGAAAA CTCTCAAGGA TCTTACCGCT GTTGAGATCC AGTTCGATGT 8280
AACCCACTCG TGCACCCAAC TGATCTTCAG GATCTTTTAC TTTCACCAGC GTTTCTGGGT 8340
GAGCAAAAAC AGGAAGGCAA AATGCCGCAA kodon start β-laktamazy AAAAGGGAAT AAGGGCGACA CGGAAATGTT 8400
GAATACTCAT| ACTCTTCCTT 8410 TTTCAATATT ATTGAAGCAT TTATCAGGGT TATTGTCTCĄ 8460
TGAGCGGATA CATATTTGAA TGTATTTAGA AAAATAAACA AATAGGGGTT CCGCGCACAT 8520
TTCCCCGAAA AGTGCCACCT
FIG. 2F
175 557 łącznik #l=15pz
GACGTCGCGG CCGCłlCTAGG CCTCCAAAAA AGCCTCCTCA CTACTTCTGG AATAGCTCAG 15 6
AGGCCGAGGC GGCCTCGGCC TCTGCATAAA TAAAAAAAAT TAGTCAC-CCA TGCATGGGGC początek SV40=332pz
GGAGAATGGG CGGAACTGGG CGGAGTTAGG GGCGGGATGG GCGGAGTTAG GGGCGGGACT
ATGGTTGCTG ACTAATTGAG ATGCATGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTGG GGAGCCTGGG
GACTTTCCAC ACCTGGTTGC TGACTAATTG AGATGCATGC TTTGCATACT TCTGCCTGCT , łącznik #2=13pz
GGGGAGCCTG GGGACTTTCC ACACCCTAAC TGACACACAT TCCACAGlAAT TAATTCCCCT 347:8 1
AGTTATTAAT AGTAATCAAT TACGGGGTCA TTAGTTCATA GCCCATATAT GGAGTTCCGC
GTTACATAAC TTACGGTAAA .TGGCCCGCCT GGCTGACCGC CCAACGACCC CCGCCCATTG
ACGTCAATAA TGACGTATGT TCCCATAGTA ACGCCAATAG GGACTTTCCA TTGACGTCAA promotor-wzmacniacz CMV=567pz
TGGGTGGACT ATTTACGGTA AACTGCCCAC TTGGCAGTAC ATCAAGTGTA TCATATGCCA
AGTACGCCCC CTATTGACGT CAATGACGGT AAATGGCCCG CCTGGCATTA TGCCCAGTAC
ATGACCTTAT GGGACTTTCC TACTTGGCAG TACATCTACG TATTAGTCAT CGCTATTACC
ATGGTGATGC GGTTTTGGCA GTACATCAAT GGGCGTGGAT AGCGGTTTGA CTCACGGGGA
TTTCCAAGTC TCCACCCCAT TGACGTCAAT GGGAGTTTGT TTTGGCACCA AAATCAACGG
GACTTTCCAA AATGTCGTAA CAACTCCGCC CCATTGĄCGCAAATGGGCGG TAGGCGTGTA t łącznik #3=7pz_ [
CGGTGGGAGG TCTATATAAG CAGAGCllGGG TACGFrGAACC GTCAGATCGC CTGGAGACGC 927*8 934*5
Bgl 2 początek łańcucha lekkiego naturalny lider=66pz
AT GpATTTTCAG GTGCAGATTA TCAGCTTCCT GCTAATCAGT
CATCACAGAT CTCTCACT)
978
GCTTCAGTCA TAATGTCCAG AGGĄpAAATT GTTCTCTCCC AGTCTCCAGC AATCCTGTCT
1044+7
GCATCTCCAG GGGAGAAGGT CACAATGACT TGCAGGGCCA GCTGAAGTGT AAGTTACATC
CACTGGTTCC AGCAGAAGCC AGGATCCTCC CCCAAACCCT GGATTTATGC CACATCCAAC region zmienny łańcucha lekkiego 318pz 106 aminokwasów
CTGGCTTCTG GAGTCCCTGT TCGCTTCAGT GGCAGTGGGT CTGGGACTTC TTACTCTCTC
ACCATCAGCA GAGTGGAGGC TGAAGATGCT GCCACTTATT ACTGCCAGCA GTGGACTAGT iBsiWI
AACCCACCCA CGTTCGGAGG GGGGACCAAG CTGGAAATCA AACGTACGGT GGCTGCACCA 1362*3
TCTGTCTTCA TCTTCCCGCC ATCTGATGAG CAGTTGAAAT CTGGAACTGC CTCTGTTGTG
TGCCTGCTGA ATAACTTCTA TCCCAGAGAG GCCAAAGTAC AGTGGAAGGT GGATAACGCC
120
180
240
300
360
120
480
540
600
660
720
780
840
900
960
1020
1080
1140
1200
1260
1320
1380
440
1500
FIG. 3A
175 557 część stała ludzkiego łańcucha κ 324pz 107 aminokwasów i kodon stop
GGAGAGTGTC ACAGAGCAGG ACAGCAAGGA CAGCACCTAC
GCTGAGCAAA GCAGACTACG AGAAACACAA AGTCTACGCC
CCTGAGCTCG CCCGTCACAA AGAGCTTCAA CAGGGGAGAG łącznik #4=8 lpz
ACGGTTACCAACTACCTAGA CTGGATTCGT GACAACATGC
ATCAGCCTCG ACTGTGCCTT CTAGTTGCCA GCCATCTGTT 177112
TTCCTTGACC CTGGAAGGTG CCACTCCCAC TGTCCTTTCC
ATCGCATTGT CTGAGTAGGT GTCATTCTAT TCTGGGGGGT region poliadenylacji wołowego hormonu wzrostu = 23 lpz GGGGTGGGGC AGGACAGCAA GGGGGAGGAT TGGGAAGACA ATAGCAGGCA TGĆTGGGGAT łącznik #5=15pz
GCGGTGGGCT CTATGGAACC AGCTGGGGCT CGACAGCITAT GCCAAGTACG CCCCCTATTG 2002^3 2017 8
ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTATGGGACT
TTCCTACTTG GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT
CTCCAATCGG GTAACTCCCA
AGCCTCAGCA GCACCCTGAC
TGCGAAGTCA CCCATCAGGG koniec łańcucha lekkiego
Eco RI
TGTpGAATTC AGATCCGTTA 1646*7
GGCCGTGATA TCTACGTATG
GTTTGCCCCT CCCCCGTGCC
TAATAAAATG AGGAAATTGC
GGCAGTACAT
CCATTGACGT
GTAACAACTC
CAATGGGCGT
CAATGGGAGT
CGCCCCATTG promotor-wzmacniacz CMV=334pz
GGATAGCGGT
TTGTTTTGGC
ACGCAAATGG
TTGACTCACG
ACCAAAATCA
GCGGTAGGCG łącznik #6=7pz
TAAGCAGAGCĄtaGGTACGffC CTCACATTCA GTGATCAGCA początek 2351'2 2358*9 .
łańcucha ciężkiego syntetyczny i naturalny lider
GGGATTTCCA AGTCTCCACC
ACGGGACTTT CCAAAATGTC
TGTACGGTGG GAGGTCTATA Sal I
CTGAACACAG ACCCGTC&AĆ
Mlu I
IATGIGGTTGGA GCCTCATCTT GCTCTTCCTT GTCGCTGTTG W401
GTACAACTGC AGCAGCCTGG GGCTGAGCTG GTGAAGCCTG
TGCAAGGCTT CTGGCTACAC ATTTACCAGT TACAATATGC
2457
CTflCŁCGTGT ŁCTGTCC CAG -5 -4 -3 -2 τηττί
GGGCCTCAGT GAAGATGTCC
ACTGGGTAAA ACAGACACCT
GGTCGGGGCC
CAGAAGTTCA
CAGCTCAGCA
TACGGCGGTG Nhe I
GCT AGCACCA
GGCACAGCGG
TGGAACTCAG część zmienna łańcucha ciężkiego=363pz=121 aminokwasów
TGGAATGGAT
AAGGCAAGGC
GCCTGACATC
ACTGGTACTT
AGGGCCCATC
CCCTGGGCTG
TGGAGCTATT
CACATTGACT
TGAGGACTCT
CAATGTCTGG
GGTCTTCCCC
CCTGGTCAAG
TATCCCGGAA
GCAGACAAAT
GCGGTCTATT
GGCGCAGGGA
CTGGCACCCT
GACTACTTCC
ATGGTGATAC
CCTCCAGCAC
ACTGTGCAAG
CCACGGTCAC
CCTCCAAGAG
CCGAACCGuT część stała ludzkiego łańcucha yl GCGCCCTGAC CAGCGGCGTG CACACCTTCC CGGCTGTCCT
TTCCTACAAT
AGCCTACATG
ATCGACTTAC cgtctctgca)
CACCTCTGGG
GACGGTGiCG
ACAGTCCTCA
1560 1620
1680
1740 1800
1860
1920
1980
2040
2100
2160
2220
2280
2340
2400
2460
2520
2580
2640
2700
2760
2820
2280
2940
3000
FIG. 3B
175 557
GGACTCTACT
TACATCTGCA
AAATCTTGTG
CCGTCAGTCT
GAGGTCACAT
TACGTGGACG
AGCACGTACC
GAGTACAACT
AAAGCCAAAG
CTGACCAAGA
GCCGTGGAGT
CTGGACTCCG
CAGCAGGGGA
CAGAAGAGCC
AGACTGGATT
CTTCTAGTTG
GTGCCACTCC
GGTGTCATTC
ACAATAGCAG
GCTGGATCTC
AGGAAAATTA
ATGCTTTAGA
CAGAGCTGAG
ATCACCGAAG
ATAGAGAGGG
330 aminokwasów i kodon stop CCCTCAGCAG CGTGGTGACC GTGCCCTCCA
ACGTGAATCA CAAGCCCAGC AACACCAAGG
ACAAAACTCA CACATGCCCA CCGTGCCCAG
TCCTCTTCCC CCCAAAACCC AAGGACACCC
GCGTGGTGGT GGACGTGAGC CACGAAGACC
GCGTGGAGGT GCATAATGCC AAGACAAAGC
GTGTGGTCAG CGTCCTCACC GTCCTGCACC
GCAAGGTCTC CAACAAAGCC CTCCCAGCCC
GGCAGCCCCG AGAACCACAG GTGTACACCC
ACCAGCTCAG CCTGACCTGC CTGGTCAAAG
GGGAGAGCAA TGGGCAGCCG GAGAACAACT
ACGGCTCCTT CTTCCTCTAC AGCAAGCTCA
ACGTCTTCTC ATGCTCCGTG ATGCATGAGG kodon stop łańcucha ciężkiego [Bam m
TCTCCCTGTC TCCGGGTAAA ITGA3GATCCG
3813
CGTGACAACA TGCGGCCGTG ATATCTACGT
CCAGCCATCT GTTGTTTGCC CCTCCCCCGT
CACTGTCCTT TCCTAATAAA ATGAGGAAAT
TATTCTGGGG GGTGGGGTGG
GGCAGGACAG region poliadenylaęji wołowego hormonu wzrostu = 23 lpz
GCATGCTGGG ccgatccccJa
ATTTTAACAC
GACAGTGGTC
ACTCCTAAGC
CCTGATTCCG
CAGGAGCCAG
GATGCGGTGG GCTCTATGGA
GCTTTGCTTC TCAATTTCTT
CAATTCAGTA GTTGATTCAG łącznik #7=8 lpz TTAACGGTTA CCAACTACCT
ATGATCAGCC TCGACTGTGC 3894 5
GCCTTCCTTG ACCCTGGAAG
TGCATCGCAT TGTCTGAGTA
CAAGGGGGAG GATTGGGAAG ,! łącznik #8=3 4pz
ACCAGCTGGG GCTCGACAGC 4125*6
ATTTGCATAA TGAGAAAAAA
CAAATGCGTT GCCAAAAAGG mysi większy promotor P-globiny=366pz
TCTGCACAGA
CAGTGAGTGG
T AGAGCCACA
GGCAGAGCAT
TAAGGACAAA
CACAGCATTC
CCTTGGTAAG
ATAAGGTGAG
GCAGCTTGGG tggacaagaa
CACCTGAACT
TCATGATCTC
CTGAGGTCAA
CGCGGGAGGA
AGGACTGGCT
CCATCGAGAA
TGCCCCCATC
GCTTCTATCC
ACAAGACCAC
CCGTGGACAA
CTCTGCACAA
CATTATTCAG
TAGGGAGAAA
GGCCAATCTG
GTAGGATCAG
CACCCAGACC
AGCAGAGCCC
CCTGGGGGGA
CCGGACCCCT
GTTCAACTGG
GCAGTACAAC
GAATGGCAAG
AACCATCTCC
CCGGGATGAG
CAGCGACATC
GCCTCCCGTG
GAGCAGGTGG
CCACTACACG
AGGGAGT ACC
TATGCTTGTC
CTCACACAGG
TTGCTCCTCA
3060
3120
3:80
3240
3300
3360
3420
3480
3540
3600
3660
3720
3780
3840
3900
3960
4020
4080
40
4200
4260
4220
4380
z.440
4500
FIG. 3C
175 557 [ łącznik #9=19pz 5’ nietranslowany DHFR=82pz
CATTTGCTTC TGACATAGTT GTGTTlGGGAG CTTGGATAGĆ TTGGAĆAGCT CAGGGCTGCG 4525*6 4544*5
ATTTCGCGCC AAACTTGACG GCAATCCTAG CGTGAAGGC7 GGTAGGATTT TATCCCCGCT i START DHFR
GCCATCgT^G TTCGACCATT GAACTGCATC GTCGCCGTGT CCCAAAATAT GGGGATTGGC 4626 *7
AAGAACGGAG ACCTACCCTG GCCTCCGCTC AGGAACGAGT TCAAGTACTT CCAAAGAATG
ACCACAACCT CTTCAGTGGA AGGTAAACAG AATCTGGTGA TTATGGGTAG GAAAACCTGG mysi DHFR=564pz=187 aminokwasów i kodon stop
TTCTCCATTC CTGAGAAGAA fCGACCTTTA AAGGACAGAA TTAATATAGT TCTCAGTAGA GAACTCAAAG AACCACCACG AGGAGCTCAT TTTCTTGCCA AAAGTTTGGA TGATGCCTTA
AGACTTATTG AACAACCGGA.ATTGGCAAGT AAAGTAGACA TGGTTTGGAT AGTCGGAGGC
AGTTCTGTTT ACCAGGAAGC CATGAATCAA CCAGGCCACC TTAGACTCTT TGTGACAAGG
ATCATGCAGG AATTTGAAAG TGACACGTTT TTCCCAGAAA TTGATTTGGG GAAATATAAA
CTTCTCCCAG AATACCCAGG CGTCCTCTCT GAGGTCCAGG AGGAAAAAGG CATCAAGTAT STOP DHFR i 3’ nietranslowany DHFR=82pz
AAGTTTGAAG TCTACGAGAA GAAAGACfTAAl| CAGGAAGATG CTTTCAAGTT CTCTGĆTCCC 5140 1 f łącznik #10
CTCCTAAAGC TATGCATTTT TATAAGACCA TGGGACTTTT GCTGGCTTTA G^TCAGCCTC =10pz 527213
GAprŚTGCCT tctagttgcc agccatctgt tgtttgcccc tcccccgtgc cttccttgac region poliadenylacji wołowego hormonu wzrostu = 23 lpz cctggaaggt gccactccca ctgtcctttc ctaataaaat gaggaaattg* catcgcattg tctgagtagg tgtcattcta ttctgggggg tggggtgggg caggacagca agggggagga łącznik #11
TTGGGAAGAC AATAGCAGGC ATGCTGGGGA TGCGGTGGGC TCTATGGAAC CAOCTGGGGC = 17pz . 5513 4
TCGAGCTACT AGCTTTGCTT CTCAATTTCT TATTTGCATA ATGAGAAAAA AAGGAAAATT 5530 11
AATTTTAACA CCAATTCAGT AGTTGATTGA GCAAATGCGT TGCCAAAAAG GATGCTTTAG mysi większy promotor 3-głobiny=366pz agacagtgtt ctctgcacag ataaggacaa ctagggagaa atatgcttgt catcaccgaa
GACTCCTAAG CCAGTGAGTG GCACAGCATT CTAGGGAGAA ATATGCTTGT CATCACCGAA
GCCTGATTCC GTAGAGCCAC ACCTTGGTAA GGGCCAATCT GCTCACACAG GATAGAGAGG
GCAGGAGCCA GGGCAGAGCA TATAAGGTGA GGTAGGATCA GTTGCTCCTC ACATTTGCTT , łącznik #12=2 lpz iSTART NEO
CTGACATAGT TGTGTTGGGA GCTTGGATCG ATCCTCT^TGl GTTGAACAAG ATGGATTGCA 5896*7 5917*8
CGCAGGTTCT CCGGCCGCTT GGGTGGAGAG GCTATTCGGC TATGACTGGG CACAACAGAC
4560
4620
4680
4740
4800
4860
4920
4380
5040
5100
5160
5220
5280
5340
5400
5460
5520
5580
5640
5700
5760
5820
5880
5940
6000
FIG. 3D
175 557
AATCGGCTGC TCTGATGCCG CCGTGTTCCG GCTGTCAGCG CAGGGGCGCC CGGTTCTTTT fosfotransferaza neomycynowa=795pzF:264 aminokwasów i kodon stop
TGTCAAGACC GACCTGTCCG GTGCCCTGAA
GTGGCTGGCC ACGACGGGCG TTCCTTGCGC
AAGGGACTGG CTGCTATTGG GCGAAGTGCC
TCCTGCCGAG AAAGTATCCA TCATGGCTGA
GGCTACCTGC CCATTCGACC ACCAAGCGAA
GGAAGCCGGT CTTGTCGATC AGGATGATCT
CGAACTGTTC GCCAGGCTCA AGGCGCGCAT
TGGCGATGCC TGCTTGCCGA ATATCATGGT
CTGTGGCCGG CTGGGTGTGG CGGACCGCTA
TGCTGAAGAG CTTGGCGGCG AATGGGCTGA
TCCCGATTCG CAGCGCATCG CCTTCTATCG
CTGGGGTTCG AAATGACCGA CCAAGCGACG
3’ nietranslowany DHFR=173pz
ACCGCCGCCT TCTATGAAAG GTTGGGCTTC GGAATCGTTT TCCGGGACGC
ATCCTCCAGC GCGGGGATCT CATGCTGGAG TTCTTCGCCC ACCCOAACTT 6805 *6
GCTTATAATG GTTACAAATA AAGCAATAGC ATCACAAATT TCACAAATAA wczesny sygnał poliadenylacji SV40=133pz
TCACTGCATT CTAGTTGTGG TTTGTCCAAA CTCATCAATC TATCTTATCA łącznik #13=19pz
GCGGCCGCGA TCCCGTCGAG AGCTTGGCGT AATCATGGTC ATAGCTGTTT 7037 *8
PUC 19
ATTGTTATCC GCTCACAATT CCACACAACA TACGAGCCGG AAGCATAAAG
GGGGTGCCTA ATGAGTGAGC TAACTCACAT TAATTGCGTT GCGCTCACTG
AGTCGGGAAA CCTGTCGTGC CAGCTGCATT AATGAATCGG CCAACGCGCG
GTTTGCGTAT TGGGCGCTCT TCCGCTTCCT CGCTCACTGA CTCGCTGCGC
GGCTGCGGCG AGCGGTATCA GCTCACTCAA AGGCGGTAAT ACGGTTATCC
GGGATAACGC AGGAAAGAAC ATGTGAGCAA AAGGCCAGCA AAAGGCCAGG bakteryjny początek replikacji=7461
AGGCCGCGTT GCTGGCGTTT 0TCCATAGGC TCCGCCCCCC TGACGAGCAT
TGAACTGCAG GACGAGGCAG CGCGGCTATC
AGCTGTGCTC GACGTTGTCA CTGAAGCGCG
GGGGCAGGAT CTCCTGTCAT CTCACCTTGC
TGCAATGCGG CGGCTGCATA CGCTTGATCC
ACATCGCATC GAGCGAGCAC GTACTCGGAT
GGACGAAGAG CATCAGGGGC TCGCGCCAGC
GCCCGACGGC GAGGATCTCG TCGTGACCCA
GGAAAATGGC CGCTTTTCTG GATTCATCGA
TCAGGACATA GCGTTGGCTA CCCGTGATAT
CCGCTTCCTC GTGCTTTACG GTATCGCCGC STOP ΝΕΟΙ ccttcttgac gagttcttcOągcgggact 6712*3
CCCAACCTGC CATCACGAGA TTTCGATTCC
CGGCTGGATG
GTTTATTGCA
AGCATTTTTT
TGTCTGGAITC
7018*9
CCTGTGTGAA
TGTAAAGCCT
CCCGCTTTCC gggagaggcg
TCGGTCGTTC
ACAGAATCAG
AACCGTAAAA
CACAAAAATC
6060
6120
6180
6240
6300
6360
6420
6480
6540
6600
6560
6720
6780
6840
6900
6360
7020
7080
7140
7200
7260
7320
7380
7440
7500
FIG. 3E
175 557
GACGCTCAAG TCAGAGGTGG CGAAACCCGA CAGGACTATA AAGATACCAG GCGTTTCCCC 7560
CTGGAAGCTC CCTCGTGCGC TCTCCTGTTC CGACCCTGCC GCTTACCGGA TACCTGTCCG 7620
CCTTTCTCCC TTCGGGAAGC GTGGCGCTTT CTCAATGCTC ACGCTGTAGG TATCTCAGTT 7650
CGGTGTAGGT CGTTCGCTCC AAGCTGGGCT GTGTGCACGA ACCCCCCGTT CAGCCCGACC 7740
GCTGCGCCTT ATCCGGTAAC TATCGTCTTG AGTCCAACCC GGTAAGACAC GACTTATCGC 7800
CACTGGCAGC AGCCACTGGT AACAGGATTA GCAGAGCGAG GTATGTAGGC GGTGCTACAG 7860
AGTTCTTGAA GTGGTGGCCT AACTACGGCT ACACTAGAAG GACAGTATTT ggtatctgcg 7920
CTCTGCTGAA GCCAGTTACC TTCGGAAAAA GAGTTGGTAG CTCTTGATCC GGCAAACAAA 7980
CCACCGCTGG TAGCGGTGGT TTTTTTGTTT GCAAGCAGCA GATTACGCGC agaaaaaaag 8040
GATCTCAĄGA AGATCCTTTG ATCTTTTCTA CGGGGTCTGA CGCTCAGTGG aacgaaaact 8100
CACGTTAAGG GATTTTGGTC ATGAGATTAT CAAAAAGGAT CTTCACCTAG ATCCTTTTAA 8160
kodon stop
ATTAAAAATG β-laktamazy AAGTTTTAAA -----I 'TCAATCTAAA GTATATATGA GTAAACTTGG TCTGACAGnT 8220
TJccaatgctt AATCAGTGAG GCACCTATCT CAGCGATCTG TCTATTTCGT TCATCCATAG 8280
TTGCCTGACT CCCCGTCGTG TAGATAACTA CGATACGGGA GGGCTTACCA TCTGGCCCCA 8340
GTGCTGCAAT GATACCGCGA GACCCACGCT CACCGGCTCC AGATTTATCA GCAATAAACC S400
3-laktamaza=86 lpz=286 aminokwasów i kodon stop
AGCCAGCCGG AAGGGCCGAG CGCAGAAGTG GTCCTGCAAC TTTATCCGCC TCCATCCAGT 8460
CTATTAATTG TTGCCGGGAA GCTAGAGTAA GTAGTTCGCC AGTTAATAGi TTGCGCAACG 8520
TTGTTGCCAT TGCTACAGGC ATCGTGGTGT CACGCTCGTC GTTTGGTATG GCTTCATTCA 8580
GCTCCGGTTC CCAACGATCA AGGCGAGTTA CATGATCCCC CATGTTGTGC AAAAAAGCGG 8640
TTAGCTCCTT CGGTCCTCCG ATCGTTGTCA GAAGTAAGTT GGCCGCAGTG TTATCACTCA 8700
TGGTTATGGC AGCACTGCAT AATTCTCTTA CTGTCATGCC ATCC G TAAGA TGCTTTTCTG 8760
TGACTGGTGA GTACTCAACC AAGTCATTCT GAGAATAGTG TATGCGGCGA CCGAGTTGCT 8820
CTTGCCCGGC .GTCAAT ACGG GATAATACCG CGCCACATAG CAGAACTTTA AAAGTGCTCA 8880
TCATTGGAAA ACGTTCTTCG GGGCGAAAAC TCTCAAGGAT CTTACCGCTG TTGAGATCCA 8940
GGTCGATGTA ACCCACTCGT GCACCCAACT GATCTTCAGC ATCTTTTACT TTCACCAGCG 9000
TTTCTGGGTG AGCAAAAACA aatact|cat)a GGAAGGCAAA ATGCCGCAAA kodon start β-laktamazy AAAGGGAATA AGGGCGACAC 9060
GGAAATGTTG CTCTTCCTTT TTCAATATTA TTGAAGCATT TATCAGGGTT 9120
ATTGTCTCAT GAGCGGATAC ATATTTGAAT GTATTTAGAA AAATAAACAA ataggggttc 9180
CGCGCACATT TCCCCGAAAA GTGCCACCT
UIG. 3U
175 557
LIDER
RAMKA i Met ATG -20 Asp Phe Gln CAG Val GTG Gln CAG 996 Ile ATT -15 Ile ATC Ser Phe Leu Leu CTA 1014 -10 Ile ATC Ser AGT Ala GCT 1023 Ser TCA Val GTC
GAT TTT 987 AGC 1005 TTC CTG
-5 -1 +1 FR1 10
Ile Met Ser Arg Gly Gln Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser
ATA ATG TCC AGA GGA CAA ATT GTT CTC TCC CAG TCT CCA GCA ATC CTG TCT GCA TCT
1038 1047 1056 1065 1074 1083
20 23 24 CDR1 27/ 29 30 34
Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser T yr Ile His
CCA GGG GAG AAG GTC ACA ATG ACT TGC AGG GCC AGC TCA AGT GTA AGT TAC ATC CAC
1095 1104 1113 1122 1131 1140
35 FR2 40 45 49 50 CDR2
T rp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile T yr Ala Thr Ser Asn
TGG TTC CAG CAG AAG CCA GGA TCC TCC CCC AAA CCC TGG ATT TAT GCC ACA TCC AAC
1152 1161 1170 1179 1188 1197
55 56 57 60 FR3 65 70
Leo Ala Ser Gly Val Pro Val Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly T hr Ser Tyr Ser
CTG GCT TCT GGA GTC CCT GTT CGC TTC AGT GGC AGI GGG TCT GGG ACT TCT TAC TCT
1209 1218 1227 1236 1245 I25a
75 80 85 88 80 90
Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr T yr I yr Cys Gln Glp Trp
CTC ACC ATC AGC AGA GTG GAG GCT GAA GAT GCT GCC ACT TAT TAC TGC CAG CAG TGG
1266 1275 1284 1293 1302 131!
CDR3 95 97 98 100 FR4 105 107
Thr Ser Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
ACT AGT AAC CCA CCC ACG TTC GGA GGG GGG ACC AAG CTG GAA ATC AAA
1323 1332 1341 1350 1359
FIG. 4
175 557
LIDER
-19 -15 -10 -5
RAMKA : l Met Gly Trp Ser Leu Ile Leu Leu Phe Leu Val Ala Val Ala Thr Arg Val
ATG GGT TGG AGC CTC ATC TTG CTC TTC CTT GTC GCT GTT GCT ACG CGT GTC
2409 2418 2427 2436 2445
-1 +1 FR1 10 15
Leu Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Ala Gly Ala Ser
CTG TCC CAG GTA CAA CTG CAG CAG CCT GGG GCT GAG CTG GTG AAG CCT GGG GCC TCA
2460 2469 2478 2487 2496 2505
20 25 30 31 CDR1 35 36
Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp
GTG AAG ATG TCC TGC AAG GCT TCT GGC TAC ACA TTT ACC AGT TAC AAT ATG CAC TGG
2517 2526 2536 2544 2553 2562
40 FR2 45 49 50 52 52A 53 54
Val Lys Gln Thr Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Tyr PrG Gly Asn
GTA AAA CAG ACA CCT GGT CGG GGC CTG GAA TGG ATT GGA GCT ATT TAT CCC GGA AAT
2574 2583 2592 2601 2610 2619
55 CDR2 60 65 66 FR3 70
Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys
GGT GAT ACT TCC TAC AAT CAG AAG TTC AAA GGC AAG GCC ACA TTG ACT GCA GAC AAA
2631 2640 2649 2658 2667 2676
75 80 82 82A 82B 82C 83 85
Ser Ser Ser Thr Ala T yr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala \zal
TCC TCC AGC ACA GCC TAC ATG CAG CTC AGC AGC CTG ACA TCT GAG GAC TCT GCG GTC
2688 2697 2706 2715 2724 2733
90 94 95 CDR3 100 100A 100B 100C 100D 101 102 103
Tyr T yr Cys Ala Arg Ser Thr Tyr Tyr Gly Gly Asp Trp Tyr Phe Asn Val Trp Gly
TAT TAC TGT GCA AGA TCG ACT TAC TAC GGC GGT GAC TGG TAC TTC AAT GTC TGG GGC
2745 2754 2763 2772 2781 Ξ^9Γ
105 FR4 110 113
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ala
GCA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCT GCA
2802 2811 2820
FIG. 5
175 557
FIG. 6 <-> i
PRZECIWCIAŁO (ug/ml) FIG. 7
175 557 Γ~~''ι
UJ
Μ
UJ
Μ o
60—i
(Z) 1“
(Z) 50-
>-
_l 40-
o 30-
Ll. -
O 20-
Ul -
CL ω 10-
o- -••o-
< ι ii K,rnvr-7Mr CHIMERIC ANTI CHIMERIC ΑΝΤΙ 2B8
CHIMERYCZNE CD20 antibody CD20 antibodyqΗIIMERYCZNE <CH°) (SP2/2)\ PRZECIWCIAŁO
C3>
ANTY-CD20 ANTIBODY ANTY-CD2
PRZECIWCIAŁO
FIG. 8
175 557
DN\ PO INFUZJI
FIG. 9C
175 557
O
I—
ΤΟ
O
CHIMERYCZNE ANTYtCD20
O
M
O
Cc ero
O >^4
CA 120-t
LiJ 100-^
O
CD 80-
O
22 60-
22 -
< 40-
-
LJ 02 20-
o--
TIME (DAYS)
CZAS (DNIJ
FIG. 10
FIG. 1 1 o
175 557
WIELKOŚĆ GUZAfmrrś) W I E LKO ŚĆ GUZA(mm2)
ROZTWOR
FIG. 12
ROZTWÓR
FIG. 13
175 557
(8/12/93)
OWI OD RX
FIG. 14A
(8/12/93)
DNI OD R/
FIG. 14B
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz. Cena 6,00 zł

Claims (1)

  1. Zastrzeżenie patentowe
    Aktywne immunologicznie, chimeryczne przeciwciało anty-CD20 produkowane przez transfektomę zawierającą anty-CD20 w TCAE 8 (w depozycie ATCC o numerze 69119).
    * * *
PL93320526A 1992-11-13 1993-11-12 Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20 PL175557B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US97889192A 1992-11-13 1992-11-13
PCT/US1993/010953 WO1994011026A2 (en) 1992-11-13 1993-11-12 Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human b lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of b cell lymphoma

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL175557B1 true PL175557B1 (pl) 1999-01-29

Family

ID=25526490

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93320526A PL175557B1 (pl) 1992-11-13 1993-11-12 Aktywne immunologicznie chimeryczne przeciwciało anty-CD20

Country Status (24)

Country Link
US (2) US5736137A (pl)
EP (1) EP2000149B1 (pl)
KR (1) KR100365632B1 (pl)
CN (5) CN101007851B (pl)
AT (2) ATE421335T1 (pl)
BR (1) BR1100622A (pl)
CA (1) CA2626445A1 (pl)
DE (3) DE69334259D1 (pl)
DK (2) DK1005870T3 (pl)
ES (2) ES2326144T3 (pl)
FR (1) FR04C0018I2 (pl)
GE (3) GEP20074162B (pl)
HK (3) HK1109633A1 (pl)
HU (1) HU219264B (pl)
IL (1) IL107591A (pl)
LU (1) LU91620I2 (pl)
MY (1) MY111196A (pl)
NL (1) NL300424I1 (pl)
PL (1) PL175557B1 (pl)
PT (2) PT2000149E (pl)
SG (1) SG45294A1 (pl)
TW (1) TW376320B (pl)
UA (1) UA27946C2 (pl)
ZA (1) ZA938466B (pl)

Families Citing this family (715)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US7744877B2 (en) * 1992-11-13 2010-06-29 Biogen Idec Inc. Expression and use of anti-CD20 Antibodies
PL174721B1 (pl) 1992-11-13 1998-09-30 Idec Pharma Corp Przeciwciało monoklonalne anty-CD20
US5736137A (en) * 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5595721A (en) * 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US5885574A (en) * 1994-07-26 1999-03-23 Amgen Inc. Antibodies which activate an erythropoietin receptor
IL114909A (en) * 1994-08-12 1999-10-28 Immunomedics Inc Immunoconjugates and humanized antibodies specific for b-cell lymphoma and leukemia cells
US8771694B2 (en) * 1994-08-12 2014-07-08 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates and humanized antibodies specific for B-cell lymphoma and leukemia cells
US20030180290A1 (en) * 1995-06-07 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Corporation Anti-CD80 antibody having ADCC activity for ADCC mediated killing of B cell lymphoma cells alone or in combination with other therapies
US6373497B1 (en) 1999-05-14 2002-04-16 Zight Corporation Time sequential lookup table arrangement for a display
US7033589B1 (en) * 1997-02-20 2006-04-25 Biogen Idec Ma Inc. γ-1 anti-human CD23 monoclonal antibodies and use thereof as therapeutics
US6893636B2 (en) * 1997-02-20 2005-05-17 Biogen Idec Ma Inc. Gamma-1 and gamma-3 anti-human CD23 monoclonal antibodies and use thereof as therapeutics
US6171586B1 (en) * 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6991790B1 (en) 1997-06-13 2006-01-31 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6177545B1 (en) * 1997-09-02 2001-01-23 Insight Strategy & Marketing Ltd. Heparanase specific molecular probes and their use in research and medical applications
US20030161823A1 (en) * 1998-08-31 2003-08-28 Neta Ilan Therapeutic and cosmetic uses of heparanases
US20010006630A1 (en) * 1997-09-02 2001-07-05 Oron Yacoby-Zeevi Introducing a biological material into a patient
US20040213789A1 (en) * 1997-09-02 2004-10-28 Oron Yacoby-Zeevi Heparanase activity neutralizing anti-heparanase monoclonal antibody and other anti-heparanase antibodies
US6562950B2 (en) * 1997-09-02 2003-05-13 Insight Strategy & Marketing Ltd. Heparanase activity neutralizing anti-heparanase monoclonal antibody
US6699672B1 (en) 1997-09-02 2004-03-02 Insight Biopharmaceuticals Ltd. Heparanase specific molecular probes and their use research and medical applications
US20020088019A1 (en) * 1997-09-02 2002-07-04 Oron Yacoby-Zeevi Methods of and pharmaceutical compositions for improving implantation of embryos
US6528624B1 (en) * 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
ES2434961T5 (es) * 1998-04-20 2018-01-18 Roche Glycart Ag Ingeniería de glicosilación de anticuerpos para mejorar la citotoxicidad celular dependiente del anticuerpo
CZ303898B6 (cs) 1998-08-11 2013-06-19 Biogen Idec Inc. Rituximab jako lécivo pro udrzovací terapii
US20030217375A1 (en) * 1998-08-31 2003-11-20 Eyal Zcharia Transgenic animals expressing heparanase and uses thereof
US20010033839A1 (en) * 1999-10-04 2001-10-25 Emilio Barbera-Guillem Vaccine and immunotherapy for solid nonlymphoid tumor and related immune dysregulation
US6224866B1 (en) 1998-10-07 2001-05-01 Biocrystal Ltd. Immunotherapy of B cell involvement in progression of solid, nonlymphoid tumors
EP1131093A4 (en) * 1998-11-09 2002-05-02 Idec Pharma Corp TREATMENT OF HEMATOLOGICAL VILTIES ASSOCIATED WITH CIRCULATING TUMOR CELLS USING CHIMERIC ANTI-CD20 ANTIBODIES
TR200101302T2 (tr) * 1998-11-09 2001-10-22 Idec Pharmaceuticals Corporation BMT yada PBSC transplantı alan hastalarda in vitro ya da in vivo temizleyici madde olarak kimerik anti-CD20 antikorunun kullanımı.
WO2000029431A1 (en) * 1998-11-17 2000-05-25 Tanox, Inc. Bispecific molecules cross-linking itim and itam for therapy
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
KR100940380B1 (ko) 1999-01-15 2010-02-02 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
AU2878600A (en) * 1999-03-01 2000-09-21 Hadasit Medical Research Services & Development Company Ltd Polynucleotide encoding a polypeptide having heparanase activity and expression of same in genetically modified cells
US20020102208A1 (en) 1999-03-01 2002-08-01 Paul Chinn Radiolabeling kit and binding assay
MY133346A (en) * 1999-03-01 2007-11-30 Biogen Inc Kit for radiolabeling ligands with yttrium-90
EP1645291A1 (en) 1999-05-07 2006-04-12 Genentech, Inc. Treatment of autoimmune diseases with antagonists which bind to B cell surface markers
CN100358577C (zh) * 1999-05-07 2008-01-02 杰南技术公司 抗体在制备治疗哺乳动物自身免疫病的试剂中的用途
JP4286483B2 (ja) * 1999-06-09 2009-07-01 イムノメディクス， インコーポレイテッド Ｂ細胞をターゲットとする抗体を使用する自己免疫疾患に対する免疫療法
ITMI991299A1 (it) * 1999-06-11 2000-12-11 Consiglio Nazionale Ricerche Uso di anticorpi contro antigeni di superficie per il trattamento della malattia trapianto contro ospite
DE60033658T2 (de) * 1999-06-25 2007-11-22 Genentech, Inc., South San Francisco Behandlung von prostata-krebs mit anti-erbb2 antikörpern
US20030086924A1 (en) * 1999-06-25 2003-05-08 Genentech, Inc. Treatment with anti-ErbB2 antibodies
US20040013667A1 (en) * 1999-06-25 2004-01-22 Genentech, Inc. Treatment with anti-ErbB2 antibodies
US6949245B1 (en) * 1999-06-25 2005-09-27 Genentech, Inc. Humanized anti-ErbB2 antibodies and treatment with anti-ErbB2 antibodies
US7041292B1 (en) 1999-06-25 2006-05-09 Genentech, Inc. Treating prostate cancer with anti-ErbB2 antibodies
CN101264324A (zh) * 1999-07-12 2008-09-17 杰南技术公司 应用结合cd20的拮抗剂阻断对外来抗原的免疫应答
US6451284B1 (en) * 1999-08-11 2002-09-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Clinical parameters for determining hematologic toxicity prior to radioimmunotheraphy
US8557244B1 (en) 1999-08-11 2013-10-15 Biogen Idec Inc. Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody
WO2001013945A1 (en) * 1999-08-23 2001-03-01 Biocrystal Ltd. Methods and compositions for immunotherapy of b cell involvement in promotion of a disease condition comprising multiple sclerosis
US20020028178A1 (en) * 2000-07-12 2002-03-07 Nabil Hanna Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
RU2305561C2 (ru) * 1999-11-08 2007-09-10 Байоджен Айдек Инк. Лечение в-клеточных злокачественных опухолей с использованием антител против cd40l в комбинации с антителами против cd20 и/или химиотерапией и лучевой терапией
DK1255558T3 (da) * 2000-02-16 2006-10-23 Genentech Inc Anti-april antistoffer og hybridomaceller
US20030185796A1 (en) * 2000-03-24 2003-10-02 Chiron Corporation Methods of therapy for non-hodgkin's lymphoma
KR20020091170A (ko) * 2000-03-31 2002-12-05 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 Ｂ 세포 림프종의 치료를 위한 항-사이토카인 항체 또는길항제 및 항-ｃｄ２０의 조합된 사용
CA2403425C (en) * 2000-04-11 2013-08-27 Genentech, Inc. Multivalent antibodies and uses therefor
IL151348A0 (en) 2000-04-13 2003-04-10 Univ Rockefeller Enhancement of antibody-mediated immune responses
CN1437478A (zh) * 2000-04-25 2003-08-20 Idec药物公司 瑞图希单抗的鞘内施用,用于中枢神经系统淋巴瘤的治疗
EP1280923A2 (en) * 2000-04-28 2003-02-05 Millennium Pharmaceuticals, Inc. 14094, a human trypsin family member and uses thereof
KR20150032891A (ko) 2000-05-19 2015-03-30 제넨테크, 인크. ＥｒｂＢ 길항제에 의한 암 치료요법에 대한 효과적인 반응의 가능성을 개선시키기 위한 유전자 검출 분석
EP2052742A1 (en) 2000-06-20 2009-04-29 Biogen Idec Inc. Treatment of B-cell associated diseases such as malignancies and autoimmune diseases using a cold anti-CD20 antibody/radiolabeled anti-CD22 antibody combination
EP1292334A4 (en) * 2000-06-22 2003-11-19 Idec Pharma Corp BISPECIFIC FUSION PROTEIN AND METHOD FOR USE TO ENHANCE THE KILLING OF TARGET CELLS BY EFFECTOR CELLS
US20060029604A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20060024304A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Man5GlcNAc2 glycoform
US20060034830A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GalGlcNAcMan5GLcNAc2 glycoform
US20060034828A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAcMAN5GLCNAC2 glycoform
MXPA03000306A (es) * 2000-07-12 2004-04-05 Idec Pharma Corp Tratamiento de malignidades de celulas b que usan una combinacion de anticuerpos supresores de celulas b y aplicaciones relacionadas con anticuerpos moduladores inmunes.
MXPA03002262A (es) * 2000-09-18 2003-10-15 Idec Pharma Corp Terapia de combinacion para tratamiento de enfermedades autoinmunes usando una combinacion de anticuerpos inmunorreguladores/supresores de celulas b.
AU2002213357A1 (en) * 2000-10-20 2002-05-06 Idec Pharmaceuticals Corporation Variant igg3 rituxan r and therapeutic use thereof
US7507724B2 (en) 2001-01-16 2009-03-24 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
US7906492B2 (en) * 2001-01-16 2011-03-15 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
AU2008200400B2 (en) * 2001-01-17 2012-06-07 Aptevo Research And Development Llc Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
PL364623A1 (pl) * 2001-01-17 2004-12-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Białka fuzyjne domena wiążąca-immunologlobulina
US7829084B2 (en) * 2001-01-17 2010-11-09 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding constructs and methods for use thereof
US7754208B2 (en) * 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US20030133939A1 (en) * 2001-01-17 2003-07-17 Genecraft, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US20030211107A1 (en) * 2002-01-31 2003-11-13 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
CA2436180C (en) 2001-01-31 2011-11-08 Idec Pharmaceutical Corporation Immunoregulatory antibodies and uses thereof
US20030103971A1 (en) * 2001-11-09 2003-06-05 Kandasamy Hariharan Immunoregulatory antibodies and uses thereof
US20020159996A1 (en) * 2001-01-31 2002-10-31 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
PL373835A1 (pl) 2001-01-31 2005-09-19 Biogen Idec Inc. Zastosowanie antagonistów CD23 do leczenia choróbnowotworowych
US20070065436A1 (en) * 2001-01-31 2007-03-22 Biogen Idec Inc. Anti-cd80 antibody having adcc activity for adcc mediated killing of b cell lymphoma cells alone or in combination with other therapies
EP1383800A4 (en) * 2001-04-02 2004-09-22 Idec Pharma Corp RECOMBINANT ANTIBODIES CO-EXPRESSED WITH GNTIII
ATE507839T1 (de) * 2001-04-02 2011-05-15 Genentech Inc Kombinationstherapie
WO2002080987A1 (en) * 2001-04-09 2002-10-17 Progenics Pharmaceuticals, Inc. Anti-cd19 immunotoxins
US20020193569A1 (en) * 2001-06-04 2002-12-19 Idec Pharmaceuticals Corporation Bispecific fusion protein and method of use for enhancing effector cell killing of target cells
CA2447791A1 (en) * 2001-06-13 2002-12-19 Neslihan Delacruz Methods of culturing animal cells and polypeptide production in animal cells
EP2180044A1 (en) 2001-08-03 2010-04-28 GlycArt Biotechnology AG Antibody glycosylation variants having increased anti-body-dependent cellular cytotoxicity
US20050070689A1 (en) * 2001-08-03 2005-03-31 Genentech, Inc. Taci and br3 polypeptides and uses thereof
AU2002326581A1 (en) * 2001-08-10 2003-03-03 University Of Virginia Patent Foundation Enhancing the efficacy of immunotherapies by supplementing with complement
US7214428B2 (en) * 2001-09-17 2007-05-08 Invitrogen Corporation Highly luminescent functionalized semiconductor nanocrystals for biological and physical applications
JP2005513471A (ja) * 2001-09-17 2005-05-12 バイオクリスタル・リミテッド ナノ結晶
US7205048B2 (en) 2001-09-17 2007-04-17 Invitrogen Corporation Functionalized fluorescent nanocrystal compositions and methods of making
WO2003024993A2 (en) 2001-09-20 2003-03-27 Board Of Regents, The University Of Texas System Measuring circulating therapeutic antibody, antigen and antigen/antibody complexes using elisa assays
DK2279753T3 (en) 2001-10-10 2015-11-23 Novo Nordisk As The conversion of peptides and glycokonjugering
US8323903B2 (en) * 2001-10-12 2012-12-04 Life Technologies Corporation Antibody complexes and methods for immunolabeling
US20050069962A1 (en) 2001-10-12 2005-03-31 Archer Robert M Antibody complexes and methods for immunolabeling
AU2002346999B2 (en) * 2001-10-19 2007-11-08 Centre Hospitalier Regional Et Universitaire De Tours Methods and compositions to evaluate antibody treatment response
PL213948B1 (pl) * 2001-10-25 2013-05-31 Genentech Inc Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje
US6671189B2 (en) * 2001-11-09 2003-12-30 Minebea Co., Ltd. Power converter having primary and secondary side switches
HUP0402164A3 (en) 2001-11-16 2010-01-28 Biogen Idec Inc Polycistronic expression of antibodies
US20060024292A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
CA2473144C (en) 2002-02-05 2013-05-28 Genentech, Inc. Protein purification
EP2034009B1 (en) 2002-02-08 2014-01-15 Life Technologies Corporation Compositions and methods for restoring immune responsiveness in patients with immunological defects basing on cd3/cd28 costimulation
CN101914158A (zh) * 2002-02-14 2010-12-15 免疫医疗公司 抗cd 20抗体及其融合蛋白和使用方法
US8287864B2 (en) * 2002-02-14 2012-10-16 Immunomedics, Inc. Structural variants of antibodies for improved therapeutic characteristics
US20040002587A1 (en) * 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
US20090042291A1 (en) * 2002-03-01 2009-02-12 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US7662925B2 (en) * 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US8361464B2 (en) 2002-03-01 2013-01-29 Immunomedics, Inc. Anthracycline-Antibody Conjugates for Cancer Therapy
US20160279239A1 (en) 2011-05-02 2016-09-29 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of anti-cd74 antibody for systemic lupus erythematosus and autoimmune disease
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
CN102174108B (zh) * 2002-03-01 2016-06-29 免疫医疗公司 内在化抗-cd74抗体和使用方法
US20030180292A1 (en) * 2002-03-14 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Treatment of B cell malignancies using anti-CD40L antibodies in combination with anti-CD20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy
US7323553B2 (en) 2002-04-26 2008-01-29 Genentech, Inc. Non-affinity purification of proteins
MXPA05000940A (es) * 2002-07-25 2005-05-16 Genentech Inc Anticuerpos taci y su uso.
US8187593B2 (en) * 2002-08-14 2012-05-29 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8044180B2 (en) * 2002-08-14 2011-10-25 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8968730B2 (en) 2002-08-14 2015-03-03 Macrogenics Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8193318B2 (en) * 2002-08-14 2012-06-05 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8946387B2 (en) * 2002-08-14 2015-02-03 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
CA2499816C (en) 2002-09-27 2013-07-30 Xencor, Inc. Optimized fc variants and methods for their generation
EP2316856B1 (en) * 2002-10-17 2017-08-09 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against CD20
JP4033390B2 (ja) * 2002-10-30 2008-01-16 独立行政法人科学技術振興機構 不死化ナチュラルキラー細胞株
EP1572972A4 (en) * 2002-11-21 2007-11-21 Genentech Inc THERAPY OF NON-MALIGNER DISEASES OR DISORDER WITH ANTI-ERBB2 ANTIBODIES
SE0203731D0 (sv) * 2002-12-13 2002-12-13 Mitra Medical Technology Ab Reagent
EP3263596A1 (en) * 2002-12-16 2018-01-03 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants and uses thereof
US7355008B2 (en) 2003-01-09 2008-04-08 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
JP4177123B2 (ja) * 2003-01-10 2008-11-05 富士通株式会社 配線図形検証方法、プログラム及び装置
US20040202666A1 (en) * 2003-01-24 2004-10-14 Immunomedics, Inc. Anti-cancer anthracycline drug-antibody conjugates
JP2006520194A (ja) * 2003-01-27 2006-09-07 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド Ｉｇｓｆ９およびｌｉｖ−１を使用して癌を処置するための組成物および方法
US8388955B2 (en) 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
US20090010920A1 (en) * 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
EP1613350B1 (en) 2003-04-09 2009-03-18 Genentech, Inc. Therapy of autoimmune disease in a patient with an inadequate response to a tnf-alpha inhibitor
TWI353991B (en) 2003-05-06 2011-12-11 Syntonix Pharmaceuticals Inc Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
KR101351122B1 (ko) * 2003-05-09 2014-01-14 듀크 유니버시티 Ｃｄ２０-특이적 항체 및 이를 이용한 방법
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
PL1631313T3 (pl) 2003-06-05 2015-08-31 Genentech Inc Terapia skojarzona zaburzeń z komórek B
US20060269552A1 (en) * 2003-06-09 2006-11-30 Oron Yacoby-Zeevi Heparanase activity neutralizing anti-heparanase monclonal antibody and other anti-heparanase antibodies
US7754209B2 (en) 2003-07-26 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals Binding constructs and methods for use thereof
EP1648940B1 (en) 2003-07-28 2016-04-27 Genentech, Inc. Reducing protein a leaching during protein a affinity chromatography
US20050032130A1 (en) * 2003-07-29 2005-02-10 Genentech, Inc. Neutralizing antibody assay and uses therefor
EP1660129A2 (en) * 2003-08-29 2006-05-31 Genentech, Inc. Anti-cd20 therapy of ocular disorders
US8101720B2 (en) * 2004-10-21 2012-01-24 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions
US8883147B2 (en) 2004-10-21 2014-11-11 Xencor, Inc. Immunoglobulins insertions, deletions, and substitutions
US20060134105A1 (en) * 2004-10-21 2006-06-22 Xencor, Inc. IgG immunoglobulin variants with optimized effector function
US8399618B2 (en) 2004-10-21 2013-03-19 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions, and substitutions
US9714282B2 (en) 2003-09-26 2017-07-25 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
JP4948174B2 (ja) 2003-10-16 2012-06-06 マイクロメット アクツィエン ゲゼルシャフト 多重特異的脱免疫ｃｄ３−結合物質
DK1684869T3 (da) 2003-11-04 2011-10-31 Novartis Vaccines & Diagnostic Fremgangsmåde til terapi af B-celle-relaterede cancersygdomme
SI2380911T1 (en) 2003-11-05 2018-07-31 Roche Glycart Ag ANTIGEN-RELATED PATIENTS WITH INCREASED ATTENTION ON THE RECEPTOR FC AND EFFECTORAL FUNCTION
BRPI0416243A (pt) 2003-11-05 2007-01-09 Palingen Inc método de tratamento de um paciente humano que sofre de uma condição que inclui uma hiper-proliferação de células b; formulação farmacêutica para injeção parenteral; kit para o tratamento de um paciente que sofre de uma condição que inclui uma hiper-proliferação de células b; e método para purgar a medula óssea de um paciente que sofre de cáncer linfóide de células b malignas antes do reimplante da medula óssea no paciente após a terapia mieloablativa
EP1697415A1 (en) 2003-11-12 2006-09-06 Biogen Idec MA Inc. NEONATAL Fc RECEPTOR (FcRn)-BINDING POLYPEPTIDE VARIANTS, DIMERIC Fc BINDING PROTEINS AND METHODS RELATED THERETO
WO2005060520A2 (en) * 2003-11-25 2005-07-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. ANTIBODIES AGAINST SARS-CoV AND METHODS OF USE THEREOF
MXPA06006864A (es) * 2003-12-19 2006-08-23 Genentech Inc Deteccion de cd20 en la terapia de enfermedades autoinmunes.
WO2005061542A2 (en) * 2003-12-19 2005-07-07 Genentech, Inc. Detection of cd20 in transplant rejection
FR2867982B1 (fr) * 2004-03-26 2007-07-20 Jean Marie Andrieu Procede pour amplifier l'activite de vaccins therapeutiques
CA2562243A1 (en) * 2004-04-16 2005-12-08 Genetech, Inc. Treatment of polychondritis and mononeuritis multiplex with anti-cd20 antibodies
MXPA06011805A (es) * 2004-04-16 2006-12-15 Genentech Inc Metodo para aumentar agotamiento de celulas b.
CN1997893A (zh) * 2004-04-16 2007-07-11 健泰科生物技术公司 抗体测定法
US7850962B2 (en) * 2004-04-20 2010-12-14 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against CD20
WO2005117972A2 (en) * 2004-05-05 2005-12-15 Genentech, Inc. Preventing autoimmune disease by using an anti-cd20 antibody
JP4982373B2 (ja) 2004-05-20 2012-07-25 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド Ｉｌ−２１およびモノクローナル抗体治療を用いる癌を処置する方法
US20060024295A1 (en) * 2004-06-04 2006-02-02 Genentech, Inc. Method for treating lupus
CN106075435A (zh) * 2004-06-04 2016-11-09 健泰科生物技术公司 用于治疗多发性硬化的方法
US9109255B2 (en) * 2004-06-18 2015-08-18 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for determining responsiveness to antibody therapy
JP2008505174A (ja) 2004-07-15 2008-02-21 ゼンコー・インコーポレイテッド 最適化Ｆｃ変異体
JP2008507555A (ja) * 2004-07-22 2008-03-13 ジェネンテック・インコーポレーテッド シェーグレン症候群の治療方法
CA2574828C (en) 2004-07-23 2018-11-13 Genentech, Inc. Crystallization of antibodies or fragments thereof
PL2213683T3 (pl) 2004-08-04 2013-10-31 Mentrik Biotech Llc WARIANTY REGIONÓW Fc
EP1797224B1 (en) * 2004-08-17 2012-10-03 Life Technologies Corporation Synthesis of highly luminescent colloidal particles
ZA200701715B (en) * 2004-08-19 2008-07-30 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
NZ553118A (en) * 2004-09-02 2009-12-24 Genentech Inc Anti-FC-gamma RIIB receptor antibody and uses therefor
US7655229B2 (en) * 2004-09-02 2010-02-02 Chan Andrew C Anti-FC-gamma RIIB receptor antibody and uses therefor
US7662926B2 (en) * 2004-09-02 2010-02-16 Genentech, Inc. Anti-Fc-gamma receptor antibodies, bispecific variants and uses therefor
MX2007002855A (es) * 2004-09-08 2007-04-27 Genentech Inc Metodos para usar ligandos de receptor de muerte y anticuerpos cd20.
WO2006029275A2 (en) * 2004-09-08 2006-03-16 Genentech, Inc. Methods of using death receptor ligands and cd20 antibodies
SG165344A1 (en) * 2004-10-05 2010-10-28 Genentech Inc Method for treating vasculitis
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
EP1809720B1 (en) 2004-10-29 2012-05-02 Life Technologies Corporation Functionalized fluorescent nanocrystals, and methods for their preparation and use
WO2007024249A2 (en) * 2004-11-10 2007-03-01 Macrogenics, Inc. Engineering fc antibody regions to confer effector function
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8546543B2 (en) 2004-11-12 2013-10-01 Xencor, Inc. Fc variants that extend antibody half-life
US20070135620A1 (en) * 2004-11-12 2007-06-14 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
DK2325207T3 (en) 2004-11-12 2017-06-06 Xencor Inc Fc variants with altered binding to FcRn
GB2420976B (en) * 2004-11-19 2006-12-20 Zvi Finkelstein Therapeutic implant
TW200634026A (en) * 2004-12-17 2006-10-01 Genentech Inc Antiangiogenesis therapy of autoimmune disease in patients who have failed prior therapy
NZ588430A (en) 2004-12-22 2012-10-26 Genentech Inc Methods for producing soluble multi-membrane-spanning proteins
EP1674479A1 (en) * 2004-12-22 2006-06-28 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Modulation of Fc Gamma receptors for optimizing immunotherapy
CA2589054C (en) * 2004-12-23 2010-11-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Detection of a therapeutic antibody in an experimental animal
ES2327840T3 (es) 2004-12-23 2009-11-04 Gpc Biotech Ag Derivados de acido escuarico con actividad antiproliferativa.
CA2593212A1 (en) 2005-01-05 2006-07-13 Biogen Idec Ma Inc. Cripto binding molecules
AU2006204757A1 (en) * 2005-01-13 2006-07-20 Genentech, Inc. Treatment method
DOP2006000029A (es) * 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
TW200714289A (en) * 2005-02-28 2007-04-16 Genentech Inc Treatment of bone disorders
US20160355591A1 (en) 2011-05-02 2016-12-08 Immunomedics, Inc. Subcutaneous anti-hla-dr monoclonal antibody for treatment of hematologic malignancies
US8349332B2 (en) 2005-04-06 2013-01-08 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Multiple signaling pathways induced by hexavalent, monospecific and bispecific antibodies for enhanced toxicity to B-cell lymphomas and other diseases
US8475794B2 (en) 2005-04-06 2013-07-02 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy with anti-CD74 antibodies provides enhanced toxicity to malignancies, Autoimmune disease and other diseases
ES2971647T3 (es) * 2005-04-15 2024-06-06 Macrogenics Inc Diacuerpos covalentes y usos de los mismos
US9284375B2 (en) 2005-04-15 2016-03-15 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
US9963510B2 (en) 2005-04-15 2018-05-08 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
AR053579A1 (es) * 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
US11254748B2 (en) 2005-04-15 2022-02-22 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
CN101203242A (zh) * 2005-04-22 2008-06-18 健泰科生物技术公司 用cd20抗体治疗痴呆或阿耳茨海默氏病的方法
US8034902B2 (en) * 2005-05-04 2011-10-11 Quark Pharmaceuticals, Inc. Recombinant antibodies against CD55 and CD59 and uses thereof
CA2605781A1 (en) * 2005-05-09 2007-04-12 Glycart Biotechnology Ag Antigen binding molecules having modified fc regions and altered binding to fc receptors
EP1902320B1 (en) * 2005-05-20 2010-03-10 Genentech, Inc. Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
EP1885757A2 (en) * 2005-05-24 2008-02-13 Avestha Gengraine Technologies Pvt. Ltd. A method for the production of a monoclonal antibody to cd20 for the treatment of b-cell lymphoma
CA2902070A1 (en) 2005-07-08 2007-01-18 Biogen Idec Ma Inc. Sp35 antibodies and uses thereof
US20080279850A1 (en) * 2005-07-25 2008-11-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. B-Cell Reduction Using CD37-Specific and CD20-Specific Binding Molecules
AU2006272597A1 (en) 2005-07-25 2007-02-01 Emergent Product Development Seattle Llc Single dose use of CD20-specific binding molecules
JP5740076B2 (ja) 2005-07-25 2015-06-24 エマージェント・プロダクト・ディベロップメント・シアトル・エルエルシー Ｃｄ３７特異的及びｃｄ２０特異的結合分子を用いたｂ細胞の減少
JP5105485B2 (ja) 2005-08-10 2012-12-26 マクロジェニクス，インコーポレーテッド 変異型Ｆｃ領域を有する抗体の同定および工学的改変およびその使用方法
US7612181B2 (en) * 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
KR20140053410A (ko) 2005-08-19 2014-05-07 아보트 러보러터리즈 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
US20090215992A1 (en) * 2005-08-19 2009-08-27 Chengbin Wu Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EP2500356A3 (en) 2005-08-19 2012-10-24 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
WO2007028144A2 (en) * 2005-09-02 2007-03-08 Glycofi, Inc Immunoglobulins comprising predominantly a glcnacman3glcnac2 glycoform
AU2006299429B2 (en) 2005-10-03 2012-02-23 Xencor, Inc. Fc variants with optimized Fc receptor binding properties
WO2007056411A2 (en) * 2005-11-08 2007-05-18 Genentech, Inc. Method of producing pan-specific antibodies
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
CA2629306A1 (en) * 2005-11-23 2007-05-31 Genentech, Inc. Methods and compositions related to b cell assays
US20070136826A1 (en) * 2005-12-02 2007-06-14 Biogen Idec Inc. Anti-mouse CD20 antibodies and uses thereof
US8323644B2 (en) * 2006-01-17 2012-12-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
WO2007102200A1 (ja) 2006-03-07 2007-09-13 Osaka University 抗ｃｄ２０モノクローナル抗体
SG170110A1 (en) * 2006-03-10 2011-04-29 Macrogenics Inc Identification and engineering of antibodies with variant heavy chains and methods of using same
EP2004221A2 (en) 2006-03-23 2008-12-24 Novartis Pharma AG Anti-tumor cell antigen antibody therapeutics
EP3026123A1 (en) 2006-04-27 2016-06-01 Klaritos, Inc. Method and kit for predicting antibody therapy
US20080118978A1 (en) 2006-04-28 2008-05-22 Takashi Sato Anti-tumor agent
US7727525B2 (en) * 2006-05-11 2010-06-01 City Of Hope Engineered anti-CD20 antibody fragments for in vivo targeting and therapeutics
WO2008105886A2 (en) 2006-05-26 2008-09-04 Macrogenics, Inc. HUMANIZED FCγRIIB-SPECIFIC ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF
NZ612319A (en) * 2006-06-12 2015-04-24 Emergent Product Dev Seattle Single-chain multivalent binding proteins with effector function
PT2029173T (pt) 2006-06-26 2016-11-02 Macrogenics Inc Anticorpos específicos fc rib e seus métodos de uso
EP2032159B1 (en) 2006-06-26 2015-01-07 MacroGenics, Inc. Combination of fcgammariib antibodies and cd20-specific antibodies and methods of use thereof
FR2902799B1 (fr) 2006-06-27 2012-10-26 Millipore Corp Procede et unite de preparation d'un echantillon pour l'analyse microbiologique d'un liquide
US20080058922A1 (en) * 2006-08-31 2008-03-06 Cardiac Pacemakers, Inc. Methods and devices employing vap-1 inhibitors
US8372399B2 (en) * 2006-08-31 2013-02-12 Cardiac Pacemakers, Inc. Bispecific antibodies and agents to enhance stem cell homing
US8636995B2 (en) * 2006-08-31 2014-01-28 Cardiac Pacemakers, Inc. Methods and devices to regulate stem cell homing
US20080112961A1 (en) * 2006-10-09 2008-05-15 Macrogenics, Inc. Identification and Engineering of Antibodies with Variant Fc Regions and Methods of Using Same
US9382327B2 (en) * 2006-10-10 2016-07-05 Vaccinex, Inc. Anti-CD20 antibodies and methods of use
WO2008140603A2 (en) 2006-12-08 2008-11-20 Macrogenics, Inc. METHODS FOR THE TREATMENT OF DISEASE USING IMMUNOGLOBULINS HAVING FC REGIONS WITH ALTERED AFFINITIES FOR FCγR ACTIVATING AND FCγR INHIBITING
US8362217B2 (en) * 2006-12-21 2013-01-29 Emd Millipore Corporation Purification of proteins
US8569464B2 (en) 2006-12-21 2013-10-29 Emd Millipore Corporation Purification of proteins
US20100267933A1 (en) 2006-12-21 2010-10-21 Moya Wilson Purification of proteins
PT2436696T (pt) 2007-01-05 2017-08-21 Univ Zuerich Anticorpo anti-beta-amiloide e usos do mesmo
DE102007001370A1 (de) * 2007-01-09 2008-07-10 Curevac Gmbh RNA-kodierte Antikörper
PL2068887T3 (pl) 2007-01-09 2014-09-30 Biogen Ma Inc Przeciwciała przeciw sp35 i ich zastosowanie
ES2426158T3 (es) 2007-01-22 2013-10-21 Genentech, Inc. Precipitación con polielectrolito y purificación de anticuerpos
US8450348B2 (en) * 2007-02-21 2013-05-28 Forma Tm, Llc Derivatives of squaric acid with anti-proliferative activity
IN2009DN05758A (pl) 2007-03-12 2015-07-24 Esbatech Ag
US7960139B2 (en) 2007-03-23 2011-06-14 Academia Sinica Alkynyl sugar analogs for the labeling and visualization of glycoconjugates in cells
WO2008122039A2 (en) * 2007-04-02 2008-10-09 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Selenocysteine mediated hybrid antibody molecules
FR2915398B1 (fr) * 2007-04-25 2012-12-28 Lab Francais Du Fractionnement "ensemble de moyens pour le traitement d'une pathologie maligne, d'une maladie auto-immune ou d'une maladie infectieuse"
EP1995309A1 (en) * 2007-05-21 2008-11-26 Vivalis Recombinant protein production in avian EBx® cells
EP2019101A1 (en) * 2007-07-26 2009-01-28 GPC Biotech AG Pyrazol[3,4-d]pyrimidin-4-one useful as Kinase Inhibitor
US9908945B2 (en) * 2007-06-25 2018-03-06 Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc Sequence based engineering and optimization of single chain antibodies
EP2158315B1 (en) * 2007-06-25 2016-03-23 ESBATech, an Alcon Biomedical Research Unit LLC Methods of modifying antibodies, and modified antibodies with improved functional properties
US20090324596A1 (en) * 2008-06-30 2009-12-31 The Trustees Of Princeton University Methods of identifying and treating poor-prognosis cancers
US10745701B2 (en) 2007-06-28 2020-08-18 The Trustees Of Princeton University Methods of identifying and treating poor-prognosis cancers
CA3113365A1 (en) 2007-07-09 2009-01-15 Genentech, Inc. Prevention of disulfide bond reduction during recombinant production of polypeptides
US7879984B2 (en) 2007-07-31 2011-02-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Human antibodies to human CD20 and method of using thereof
WO2009030368A1 (en) 2007-09-05 2009-03-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies
KR101666228B1 (ko) 2007-09-28 2016-10-13 인트렉손 코포레이션 생물치료학적 분자를 발현시키기 위한 치료학적 유전자-스위치 작제물 및 생물반응기, 및 이의 용도
US20090098118A1 (en) 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
EP2233149B1 (en) 2007-10-16 2016-02-10 ZymoGenetics, Inc. Combination of transmembrane activator and calcium modulator and cyclophilin ligand interactor (TACI) and anti-CD20 agents for treatment of autoimmune disease
WO2009052617A1 (en) * 2007-10-22 2009-04-30 Oncolytics Biotech Inc. Treatment regime for proliferative disorders
US20090110688A1 (en) * 2007-10-24 2009-04-30 Georg Fertig Combination therapy of type ii anti-cd20 antibody with a proteasome inhibitor
CN105315323A (zh) 2007-10-30 2016-02-10 健泰科生物技术公司 通过阳离子交换层析进行的抗体纯化
US8795667B2 (en) * 2007-12-19 2014-08-05 Macrogenics, Inc. Compositions for the prevention and treatment of smallpox
BRPI0819593A2 (pt) * 2007-12-21 2015-05-05 Genentech Inc "método para tratamento de um paciente com artrite reumatóide (ra)"
ES2532461T3 (es) 2007-12-26 2015-03-27 Xencor, Inc. Variantes de FC con enlazamiento alterado a FCRN
US7914785B2 (en) 2008-01-02 2011-03-29 Bergen Teknologieverforing As B-cell depleting agents, like anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
EP2077281A1 (en) 2008-01-02 2009-07-08 Bergen Teknologioverforing AS Anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
EP2085095B1 (en) 2008-01-17 2012-03-07 Philogen S.p.A. Combination of an anti-EDb fibronectin antibody-IL-2 fusion protein, and a molecule binding to B cells, B cell progenitors and/or their cancerous counterpart
BRPI0907046A2 (pt) 2008-01-18 2015-07-28 Medimmune Llc Anticorpo de cisteína engenheirada, ácido nucleico isolado, vetor, célula hospedeira, conjugado de anticorpo, composição farmacêutica, métodos de detecção de câncer, doenças ou distúrbios autoimunes, inflamatórios ou infecciosos em um indivíduo e de inibição de proliferação de uma célula alvo
WO2009097095A2 (en) * 2008-01-28 2009-08-06 The Regents Of The University Of California Methods for treating hematopoietic malignancies
KR101280716B1 (ko) * 2008-03-25 2013-07-01 로슈 글리카트 아게 비-호지킨 림프종의 치료를 위한, 시클로포스파미드, 빈크리스틴 및 독소루비신과 조합으로의 증가된 항체 의존성 세포 세포독성 (ａｄｃｃ) 을 갖는 유형 ⅱ 항-ｃｄ20 항체의 용도
EP3045475B1 (en) 2008-04-02 2017-10-04 MacroGenics, Inc. Bcr-complex-specific antibodies and methods of using same
AU2009231991B2 (en) 2008-04-02 2014-09-25 Macrogenics, Inc. HER2/neu-specific antibodies and methods of using same
MX2010011057A (es) 2008-04-11 2010-11-12 Trubion Pharmaceuticals Inc Inmunoterapeutico de cd37 y combinacion con quimioterapeutico bifuncional del mismo.
EP2112150B1 (en) 2008-04-22 2013-10-16 Forma Therapeutics, Inc. Improved raf inhibitors
EP2112152A1 (en) 2008-04-22 2009-10-28 GPC Biotech AG Dihydropteridinones as Plk Inhibitors
WO2009134776A2 (en) 2008-04-29 2009-11-05 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US20100260668A1 (en) * 2008-04-29 2010-10-14 Abbott Laboratories Dual Variable Domain Immunoglobulins and Uses Thereof
WO2009134738A1 (en) * 2008-04-29 2009-11-05 Genentech, Inc. Responses to immunizations in rheumatoid arthritis patients treated with a cd20 antibody
SG191625A1 (en) * 2008-06-03 2013-07-31 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
EP2297209A4 (en) 2008-06-03 2012-08-01 Abbott Lab IMMUNOGLOBULINS WITH TWO VARIABLE DOMAINS AND USES THEREOF
CA2726845C (en) * 2008-06-04 2017-09-26 Macrogenics, Inc. Antibodies with altered binding to fcrn and methods of using same
US8999702B2 (en) * 2008-06-11 2015-04-07 Emd Millipore Corporation Stirred tank bioreactor
LT2307455T (lt) 2008-06-25 2017-06-26 Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc Imuninių rišiklių tirpumo optimizavimas
EP3266453A1 (en) 2008-07-03 2018-01-10 Mayo Foundation for Medical Education and Research Treating cancer
KR101054362B1 (ko) 2008-07-03 2011-08-05 재단법인 목암생명공학연구소 재조합 단백질의 푸코스 함량을 감소시키는 방법
MX2010014574A (es) * 2008-07-08 2011-04-27 Abbott Lab Inmunoglobulinas de dominio variable dual para prostaglandina e2 y usos de las mismas.
AU2009269099B2 (en) 2008-07-09 2016-03-10 Biogen Ma Inc. Compositions comprising antibodies to LINGO or fragments thereof
KR101030978B1 (ko) * 2008-07-10 2011-04-28 (주) 에이프로젠 동물세포용 재조합 발현벡터
TW201016233A (en) * 2008-07-15 2010-05-01 Genentech Inc Methods of treating autoimmune diseases using CD4 antibodies
DK2318832T3 (da) 2008-07-15 2014-01-20 Academia Sinica Glycan-arrays på PTFE-lignende aluminiumcoatede objektglas og relaterede fremgangsmåder
CA2731255C (en) * 2008-07-21 2018-06-05 David M. Goldenberg Structural variants of antibodies for improved therapeutic characteristics
US8900851B2 (en) * 2008-07-22 2014-12-02 The Research Foundation For The State University Of New York Multi-well platform
LT3604324T (lt) 2008-08-14 2024-05-10 Genentech, Inc. Metodai, skirti priemaišų pašalinimui panaudojant jonų mainų chromatografiją su vietiniu išstūmimu
KR20110076918A (ko) 2008-09-10 2011-07-06 제넨테크, 인크. 단백질의 산화성 분해를 방지하기 위한 조성물 및 방법
AR073295A1 (es) 2008-09-16 2010-10-28 Genentech Inc Metodos para tratar la esclerosis multiple progresiva. articulo de fabricacion.
WO2010049777A1 (en) * 2008-10-28 2010-05-06 Avesthagen Limited An expression vector and processes thereof
US20100233079A1 (en) * 2008-12-04 2010-09-16 Abbott Laboratories Dual Variable Domain Immunoglobulins and Uses Thereof
GB2466025A (en) 2008-12-08 2010-06-09 Univ Francois Rabelais De Tour C3/ITGAM polymorphisms and cancer prognosis
EP2373689A1 (en) 2008-12-12 2011-10-12 MedImmune, LLC Crystals and structure of a human igg fc variant with enhanced fcrn binding
EP2370561B1 (en) 2008-12-16 2019-08-07 EMD Millipore Corporation Stirred tank reactor and method
EP2358734A1 (en) * 2008-12-16 2011-08-24 Millipore Corporation Purification of proteins
PL2370466T3 (pl) 2008-12-19 2015-12-31 Biogen Int Neuroscience Gmbh Ludzkie autoprzeciwciała anty-alfa-synukleina
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
CN102264368B (zh) 2008-12-22 2014-09-10 米伦纽姆医药公司 极光激酶抑制剂与抗cd20抗体的组合
US20120003235A1 (en) 2008-12-31 2012-01-05 Biogen Idec Ma Inc. Anti-lymphotoxin antibodies
US20110142836A1 (en) * 2009-01-02 2011-06-16 Olav Mella B-cell depleting agents for the treatment of chronic fatigue syndrome
WO2010079161A1 (en) 2009-01-06 2010-07-15 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A b cell depleting agent for the treatment of atherosclerosis
SG173812A1 (en) 2009-02-27 2011-09-29 Genentech Inc Methods and compositions for protein labelling
CN102781470B (zh) 2009-03-05 2016-01-20 Abbvie公司 Il-17结合蛋白
HUE029619T4 (en) 2009-03-10 2017-07-28 Biogen Ma Inc Anti-bcma antibodies
KR101781654B1 (ko) 2009-03-12 2017-09-25 제넨테크, 인크. 조혈 악성종양의 치료를 위한 포스포이노시티드 ３-키나제 억제제 화합물 및 화학요법제의 조합물
EP2233500A1 (en) 2009-03-20 2010-09-29 LFB Biotechnologies Optimized Fc variants
JP2012521216A (ja) 2009-03-24 2012-09-13 テバ バイオファーマスーティカルズ ユーエスエー，インコーポレーテッド Ｌｉｇｈｔに対するヒト化抗体およびその使用
AR075982A1 (es) 2009-03-31 2011-05-11 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo afucosilado y una o mas de las citoquinas seleccionadas de gm- csf humano, m -csf humano y/o il-3 humano y composicion
US8815242B2 (en) * 2009-05-27 2014-08-26 Synageva Biopharma Corp. Avian derived antibodies
WO2010145846A1 (en) 2009-06-15 2010-12-23 Bayer Bioscience N.V. Nicotiana benthamiana plants deficient in xylosyltransferase activity
CN102802661B (zh) 2009-06-22 2016-01-13 米迪缪尼有限公司 用于位点特异性偶联的工程改造的Fc区
WO2011000543A1 (en) * 2009-06-30 2011-01-06 Philochem Ag Murine antibody display library
UY32808A (es) * 2009-07-29 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas como dominio variable dual y usos de las mismas
MX2012001742A (es) 2009-08-11 2012-03-21 Genentech Inc Produccion de proteinas en medios de cultivo de celulas libres de glutamina.
AR077867A1 (es) 2009-08-14 2011-09-28 Roche Glycart Ag Terapia combinatoria de un anticuerpo cd20 afucosilado con fludarabina y/o mitoxantrona
TWI409079B (zh) 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
EP3736338A1 (en) 2009-09-01 2020-11-11 F. Hoffmann-La Roche AG Enhanced protein purification through a modified protein a elution
CA2772628A1 (en) 2009-09-01 2011-03-10 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US9493578B2 (en) 2009-09-02 2016-11-15 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
MX2012002766A (es) 2009-09-03 2012-04-02 Genentech Inc Metodos para el tratamiento, diagnosis y monitoreo de artritis reumatoide.
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
PT2486141T (pt) 2009-10-07 2018-05-09 Macrogenics Inc Polipéptidos contendo uma região fc que apresenta uma função efectora melhorada, devido a modificações do grau de fucosilação, e métodos para a sua utilização
AU2010306677B2 (en) 2009-10-15 2013-05-23 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
BR112012005668A2 (pt) * 2009-10-19 2020-10-13 F. Hoffmann La Roche Ag '' linhagem celular, anticorpo, uso de um anticorpo, kit, método de detecção de um anticorpo terapêutico, método de determinação imunológica de um anticorpo terapêutico, composição de anticorpo, uso de uma composição de anticorpo''
EP2325185A1 (en) 2009-10-28 2011-05-25 GPC Biotech AG Plk inhibitor
UY32979A (es) * 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
US11377485B2 (en) 2009-12-02 2022-07-05 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
US10087236B2 (en) 2009-12-02 2018-10-02 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
EP2531592A1 (en) 2010-02-04 2012-12-12 Vivalis Fed-batch process using concentrated cell culture medium for the efficient production of biologics in eb66 cells
US20110189178A1 (en) * 2010-02-04 2011-08-04 Xencor, Inc. Immunoprotection of Therapeutic Moieties Using Enhanced Fc Regions
WO2011097527A2 (en) 2010-02-04 2011-08-11 Xencor, Inc. Immunoprotection of therapeutic moieties using enhanced fc regions
WO2011100403A1 (en) * 2010-02-10 2011-08-18 Immunogen, Inc Cd20 antibodies and uses thereof
TW201129383A (en) * 2010-02-10 2011-09-01 Immunogen Inc CD20 antibodies and uses thereof
CN102782131B (zh) 2010-03-02 2015-08-05 协和发酵麒麟株式会社 修饰抗体组合物
US8802091B2 (en) 2010-03-04 2014-08-12 Macrogenics, Inc. Antibodies reactive with B7-H3 and uses thereof
ME03447B (me) 2010-03-04 2020-01-20 Macrogenics Inc Anтitela reakтivna sa b7-нз, njihovi imunološki akтivni fragmenтi i upotreba
CN103124564B (zh) 2010-03-22 2016-11-09 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 对于稳定含有蛋白质的制剂有用的组合物和方法
HUE032519T2 (en) 2010-03-26 2017-09-28 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antibodies to MUC16 and a procedure for its use
JP5767207B2 (ja) 2010-03-26 2015-08-19 協和発酵キリン株式会社 新規修飾部位導入抗体および抗体フラグメント
CN102971340A (zh) 2010-03-29 2013-03-13 酵活有限公司 具有增强的或抑制的效应子功能的抗体
EP2552967A4 (en) 2010-04-02 2014-10-08 Amunix Operating Inc BINDING FUSION PROTEINS, BINDING FUSION PROTEIN MEDICINAL CONJUGATES, XTEN MEDICAMENT CONJUGATES, AND METHOD FOR THEIR PREPARATION AND USE
US10338069B2 (en) 2010-04-12 2019-07-02 Academia Sinica Glycan arrays for high throughput screening of viruses
CN102844049B (zh) 2010-04-27 2016-06-01 罗切格利卡特公司 无岩藻糖基化CD20抗体与mTOR抑制剂的联合疗法
WO2011139718A1 (en) 2010-05-03 2011-11-10 Genentech, Inc. Compositions and methods useful for reducing the viscosity of protein-containing formulations
CN103068378B (zh) 2010-05-10 2016-07-06 中央研究院 具有抗流感活性的扎那米韦膦酸酯同类物及其制备方法
BR122014011544A2 (pt) 2010-05-14 2019-08-13 Abbvie Inc proteínas de ligação à il-1
SG10201804385YA (en) 2010-05-17 2018-06-28 Emd Millipore Corp Stimulus responsive polymers for the purification of biomolecules
MX344248B (es) 2010-05-25 2016-12-09 Genentech Inc * Metodos de purificacion de polipeptidos.
DK2576580T3 (en) 2010-05-28 2016-10-17 Hoffmann La Roche LOWERING THE lactate AND INCREASE polypeptide production by downregulation of the expression of lactate dehydrogenase, and PYRUVATDEHYDROGENASEKINASE
KR101924653B1 (ko) 2010-06-24 2018-12-03 제넨테크, 인크. 단백질-함유 제제를 안정화시키기 위한 알킬글리코시드 함유 조성물 및 방법
WO2012006500A2 (en) 2010-07-08 2012-01-12 Abbott Laboratories Monoclonal antibodies against hepatitis c virus core protein
UY33492A (es) 2010-07-09 2012-01-31 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
SG186875A1 (en) 2010-07-09 2013-02-28 Biogen Idec Hemophilia Inc Chimeric clotting factors
EP2409993A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Anti-CD19 antibody having ADCC function with improved glycosylation profile
EP2409712A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Anti-CD19 antibody having ADCC and CDC functions and improved glycosylation profile
EP2598530A2 (en) 2010-07-29 2013-06-05 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
WO2012017925A1 (ja) 2010-08-02 2012-02-09 協和発酵キリン株式会社 物質の製造方法
EP2601216B1 (en) 2010-08-02 2018-01-03 MacroGenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
AU2011285852B2 (en) 2010-08-03 2014-12-11 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
JP2013541501A (ja) 2010-08-03 2013-11-14 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 慢性リンパ性白血病（ｃｌｌ）のバイオマーカー
EP3578205A1 (en) 2010-08-06 2019-12-11 ModernaTX, Inc. A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof
WO2012021773A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 Genentech, Inc. Antibodies to il-1beta and il-18, for treatment of disease
AR082693A1 (es) 2010-08-17 2012-12-26 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con un anticuerpo anti-vegf
BR112012033163A2 (pt) * 2010-08-17 2016-10-11 Hoffmann La Roche ''anticorpos monoclonais, linhagens celulares, usos de um anticorpo, kit, métodos para detectar um anticorpo, composição de anticorpo e uso de uma composição de anticorpo''
BR112013004581A2 (pt) 2010-08-26 2017-06-27 Abbvie Inc imunoglobulinas de domínio variável dual e seus usos
WO2012030512A1 (en) 2010-09-03 2012-03-08 Percivia Llc. Flow-through protein purification process
BR112013007862A2 (pt) 2010-10-01 2019-09-24 Moderna Therapeutics Inc ácidos nucleicos manipulados e métodos de uso dos mesmos.
JP2014503178A (ja) 2010-10-11 2014-02-13 バイオジェン アイデック インターナショナル ニューロサイエンス ゲーエムベーハー ヒト抗タウ抗体
KR101933197B1 (ko) 2010-11-08 2018-12-27 제넨테크, 인크. 피하 투여용 항―ｉｌ―6 수용체 항체
JP6087148B2 (ja) 2010-12-15 2017-03-01 大学共同利用機関法人情報・システム研究機構 タンパク質の生産方法
CN103261229A (zh) 2010-12-16 2013-08-21 罗切格利卡特公司 无岩藻糖基化cd20抗体与mdm2抑制剂的联合疗法
AU2011343161B2 (en) 2010-12-17 2017-02-02 Neurimmune Holding Ag Human anti-SOD1 antibodies
EP2655417A2 (en) 2010-12-21 2013-10-30 AbbVie Inc. Il-1 -alpha and -beta bispecific dual variable domain immunoglobulins and their use
EP3147355B1 (en) 2010-12-27 2020-07-22 Kyowa Kirin Co., Ltd. Method for preparing aqueous solution containing culture medium and chelating agent
WO2012095514A1 (en) 2011-01-14 2012-07-19 Vivalis Recombinant protein production system
WO2012106368A2 (en) 2011-01-31 2012-08-09 The Regents Of The University Of California Methods for inhibiting prostate cancer
RU2013140975A (ru) 2011-02-28 2015-04-10 Дженентек, Инк. Биологические маркеры и способы прогнозирования восприимчивости к антагонистам в-клеток
TWI671315B (zh) 2011-03-28 2019-09-11 法商賽諾菲公司 具有交叉結合區定向之雙重可變區類抗體結合蛋白
LT2691417T (lt) 2011-03-29 2018-10-25 Roche Glycart Ag Antikūno fc variantai
JP2014511687A (ja) 2011-03-31 2014-05-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッド 工学操作された核酸の送達および製剤
EP2506015A1 (en) 2011-04-01 2012-10-03 Universität Regensburg A prognostic and therapeutic signature for malignant melanoma
WO2012145183A2 (en) 2011-04-19 2012-10-26 Pfizer Inc. Combinations of anti-4-1bb antibodies and adcc-inducing antibodies for the treatment of cancer
ES2792062T3 (es) 2011-05-09 2020-11-06 Mayo Found Medical Education & Res Tratamientos contra el cáncer
EP2707723B1 (en) 2011-05-12 2016-02-10 Genentech, Inc. Multiple reaction monitoring lc-ms/ms method to detect therapeutic antibodies in animal samples using framework signature pepides
CN107903325B (zh) 2011-05-16 2021-10-29 埃泰美德(香港)有限公司 多特异性fab融合蛋白及其使用方法
WO2012162067A2 (en) 2011-05-21 2012-11-29 Macrogenics, Inc. Cd3-binding molecules capable of binding to human and non-human cd3
EP2714079B2 (en) 2011-05-21 2019-08-28 MacroGenics, Inc. Deimmunized serum-binding domains and their use for extending serum half-life
RU2011122942A (ru) 2011-06-08 2012-12-20 Общество С Ограниченной Ответственностью "Асинэкс Медхим" Новые ингибиторы киназ
EP2723379B1 (en) 2011-06-23 2018-09-12 Biogen International Neuroscience GmbH Anti-alpha synuclein binding molecules
EP2537933A1 (en) 2011-06-24 2012-12-26 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) An IL-15 and IL-15Ralpha sushi domain based immunocytokines
US20140234298A1 (en) 2011-07-06 2014-08-21 Morphosys Ag Therapeutic combinations of anti-cd20 and anti-gm-csf antibodies and uses thereof
KR102157227B1 (ko) 2011-07-08 2020-09-17 이엠디 밀리포어 코포레이션 일회용 생명공학적 공정용의 개선된 심층 필터
US9464288B2 (en) 2011-07-11 2016-10-11 Yale University Compositions and methods for making selenocysteine containing polypeptides
WO2019071023A1 (en) 2017-10-04 2019-04-11 Yale University COMPOSITIONS AND METHODS FOR MAKING POLYPEPTIDES CONTAINING SELENOCYSTEINE
WO2013012733A1 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Biogen Idec Ma Inc. Heterodimeric fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto
EP2551348B1 (en) 2011-07-29 2014-09-24 Icon Genetics GmbH Production of galactosylated N-glycans in plants
EP2550975A1 (en) 2011-07-29 2013-01-30 Sanofi Combination therapy for the treatment of CD19+ B-cell malignancies symptoms comprising an anti-CD19 maytansinoid immunoconjugate and rituximab
WO2013022855A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
US20140234307A1 (en) 2011-09-27 2014-08-21 The United States Of America,As Represented By The Secretary,Department Of Health And Human Services Method of treating multiple sclerosis by intrathecal depletion of b cells and biomarkers to select patients with progressive multiple sclerosis
CA2850624A1 (en) 2011-10-03 2013-04-11 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
JP6104252B2 (ja) 2011-10-04 2017-03-29 アイコン・ジェネティクス・ゲーエムベーハー フコシルトランスフェラーゼ活性が欠損したニコチアナ・ベンサミアナ植物
EP2766392B1 (en) 2011-10-10 2019-07-17 Xencor, Inc. A method for purifying antibodies
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
RU2014120981A (ru) 2011-10-24 2015-12-10 Эббви Инк. Иммунные связывающие агенты против склеростина
RU2623122C2 (ru) 2011-10-26 2017-06-22 Новартис Тиргезундхайт АГ Моноклональные антитела и способы их применения
US20130302274A1 (en) 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
US20130156849A1 (en) 2011-12-16 2013-06-20 modeRNA Therapeutics Modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
PL2794635T3 (pl) 2011-12-22 2019-02-28 F.Hoffmann-La Roche Ag Membranowa chromatografia jonowymienna
WO2013102042A2 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Abbvie Inc. Dual specific binding proteins directed against il-13 and/or il-17
WO2013116287A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Genentech, Inc. Anti-ig-e m1' antibodies and methods using same
DK2814514T3 (en) 2012-02-16 2017-12-18 Atyr Pharma Inc Histidyl tRNA synthetases for the treatment of autoimmune and inflammatory diseases
AR090340A1 (es) 2012-03-27 2014-11-05 Genentech Inc Operaciones de cosecha mejoradas para proteinas recombinadas
US10501512B2 (en) 2012-04-02 2019-12-10 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides
US9192651B2 (en) 2012-04-02 2015-11-24 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of secreted proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US10130714B2 (en) 2012-04-14 2018-11-20 Academia Sinica Enhanced anti-influenza agents conjugated with anti-inflammatory activity
EA030716B1 (ru) 2012-05-14 2018-09-28 Байоджен Ма Инк. Антагонисты lingo-2 для лечения заболеваний, в которых участвуют двигательные нейроны
EP2863940A4 (en) 2012-06-08 2016-08-10 Biogen Ma Inc CHIMERIC COAGULATION FACTORS
WO2013185115A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
WO2014011955A2 (en) 2012-07-12 2014-01-16 Abbvie, Inc. Il-1 binding proteins
HRP20211641T1 (hr) 2012-07-13 2022-02-04 Roche Glycart Ag Bispecifična protutijela anti-vegf/anti-ang-2 i njihova primjena u liječenju vaskularnih očnih bolesti
AU2013306098A1 (en) 2012-08-18 2015-02-12 Academia Sinica Cell-permeable probes for identification and imaging of sialidases
US9547009B2 (en) 2012-08-21 2017-01-17 Academia Sinica Benzocyclooctyne compounds and uses thereof
HUE045227T2 (hu) 2012-08-31 2019-12-30 Sutro Biopharma Inc Azido csoportot tartalmazó módosított aminosavak
JOP20200236A1 (ar) 2012-09-21 2017-06-16 Regeneron Pharma الأجسام المضادة لمضاد cd3 وجزيئات ربط الأنتيجين ثنائية التحديد التي تربط cd3 وcd20 واستخداماتها
WO2014052713A2 (en) 2012-09-27 2014-04-03 Massachusetts Institute Of Technology Her2-and vegf-a-binding proteins with enhanced stability
ES2899643T3 (es) 2012-10-01 2022-03-14 Mayo Found Medical Education & Res Tratamientos para el cáncer
MX2015004436A (es) 2012-10-09 2015-06-24 Biogen Idec Inc Tratamientos conjuntos y usos para tratar trastornos desmielinizantes.
ES2530968T3 (es) 2012-10-12 2015-03-09 Spirogen Sarl Pirrolobenzodiazepinas y conjugados de las mismas
KR20210111353A (ko) 2012-11-01 2021-09-10 애브비 인코포레이티드 항-ｖｅｇｆ／ｄｌｌ4 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
EP3466973A1 (en) 2012-11-01 2019-04-10 AbbVie Inc. Stable dual variable domain immunoglobulin protein formulations
SI3150256T1 (sl) 2012-11-02 2021-03-31 Tg Therapeutics Inc. Kombinacija anti-CD20 protitelesa in selektivnega inhibitorja PI3 kinaze
PT2922554T (pt) 2012-11-26 2022-06-28 Modernatx Inc Arn modificado nas porções terminais
WO2014100095A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Genentech, Inc. Methods and compositions for radiohalogen protein labeling
AU2013361107B2 (en) 2012-12-21 2018-08-23 Biogen International Neuroscience Gmbh Human anti-tau antibodies
CN104936980B (zh) 2012-12-31 2019-06-07 生物控股有限公司 用于治疗和预防多瘤病毒相关的疾病的重组人抗体
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
CN110981964B (zh) 2013-01-14 2023-09-15 Xencor股份有限公司 新型异二聚体蛋白
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
WO2014113510A1 (en) 2013-01-15 2014-07-24 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
MX2015009340A (es) 2013-01-24 2016-07-18 Scripps Korea Antibody Inst Biblioteca fv basada en la combinacion de proteinas y metodo de preparacion de la misma.
CA2895284A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Immunomedics, Inc. Pro-drug form (p2pdox) of the highly potent 2-pyrrolinodoxorubicin conjugated to antibodies for targeted therapy of cancer
LT3889173T (lt) 2013-02-15 2023-10-10 Bioverativ Therapeutics Inc. Optimizuotas viii faktoriaus genas
US9487587B2 (en) 2013-03-05 2016-11-08 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof
RU2694055C2 (ru) 2013-03-13 2019-07-09 Дженентек, Инк. Составы антител
US20160031887A1 (en) 2013-03-13 2016-02-04 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US9908938B2 (en) 2013-03-14 2018-03-06 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells that express an activating receptor and an antigen expressed by a cell infected by a virus and uses thereof
JP6449229B2 (ja) 2013-03-15 2019-01-09 アッヴィ・バイオセラピューティクス・インコーポレイテッド Ｆｃ変異体
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
WO2014144280A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Abbvie Inc. DUAL SPECIFIC BINDING PROTEINS DIRECTED AGAINST IL-1β AND / OR IL-17
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
WO2014144549A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Biogen Idec Ma Inc. Factor ix polypeptide formulations
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
WO2014145907A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Xencor, Inc. Targeting t cells with heterodimeric proteins
CA2908380A1 (en) 2013-04-09 2014-10-16 Boston Biomedical, Inc. Methods for treating cancer
HUE058364T2 (hu) 2013-04-19 2022-07-28 Cytune Pharma Citokinbõl származó kezelés redukált vaszkuláris permeabilitási szindrómával
EP2805730A1 (en) 2013-05-21 2014-11-26 Bergen Teknologioverforing AS Nitric oxide donor for the treatment of chronic fatigue syndrome
AU2014273817B2 (en) 2013-05-31 2019-03-14 Zymeworks Bc Inc. Heteromultimers with reduced or silenced effector function
EP3013365B1 (en) 2013-06-26 2019-06-05 Academia Sinica Rm2 antigens and use thereof
US9981030B2 (en) 2013-06-27 2018-05-29 Academia Sinica Glycan conjugates and use thereof
WO2015006555A2 (en) 2013-07-10 2015-01-15 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
UA116479C2 (uk) 2013-08-09 2018-03-26 Макродженікс, Інк. БІСПЕЦИФІЧНЕ МОНОВАЛЕНТНЕ Fc-ДІАТІЛО, ЯКЕ ОДНОЧАСНО ЗВ'ЯЗУЄ CD32B I CD79b, ТА ЙОГО ЗАСТОСУВАННЯ
US11384149B2 (en) 2013-08-09 2022-07-12 Macrogenics, Inc. Bi-specific monovalent Fc diabodies that are capable of binding CD32B and CD79b and uses thereof
EP2840091A1 (en) 2013-08-23 2015-02-25 MacroGenics, Inc. Bi-specific diabodies that are capable of binding gpA33 and CD3 and uses thereof
EP2839842A1 (en) 2013-08-23 2015-02-25 MacroGenics, Inc. Bi-specific monovalent diabodies that are capable of binding CD123 and CD3 and uses thereof
WO2015035044A2 (en) 2013-09-04 2015-03-12 Abbvie Biotherapeutics Inc. Fc VARIANTS WITH IMPROVED ANTIBODY-DEPENDENT CELL-MEDIATED CYTOTOXICITY
US9782476B2 (en) 2013-09-06 2017-10-10 Academia Sinica Human iNKT cell activation using glycolipids with altered glycosyl groups
SG10201913952TA (en) 2013-09-11 2020-03-30 Eagle Biologics Inc Liquid protein formulations containing viscosity-lowering agents
EP3052106A4 (en) 2013-09-30 2017-07-19 ModernaTX, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
CA2926218A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
EP3055298B1 (en) 2013-10-11 2020-04-29 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
EP3062780A1 (en) 2013-11-01 2016-09-07 Bergen Teknologioverføring AS Activators or stimulators of soluble guanylate cyclase for use in treating chronic fatigue syndrome
CA2963178C (en) 2013-11-12 2023-01-24 Ogd2 Pharma Human igg1 derived antibody with pro-apoptotic activity
JP2017501157A (ja) 2013-12-17 2017-01-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｐｄ−１軸結合アンタゴニスト及び抗ｃｄ２０抗体を使用してがんを治療する方法
TW201620939A (zh) 2014-01-16 2016-06-16 中央研究院 治療及檢測癌症之組合物及方法
US10150818B2 (en) 2014-01-16 2018-12-11 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
US9139649B2 (en) 2014-02-25 2015-09-22 Immunomedics, Inc. Humanized anti-CD22 antibody
EP2915569A1 (en) 2014-03-03 2015-09-09 Cytune Pharma IL-15/IL-15Ralpha based conjugates purification method
TWI754319B (zh) 2014-03-19 2022-02-01 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
WO2015148915A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 Academia Sinica Reactive labelling compounds and uses thereof
WO2015149077A1 (en) 2014-03-28 2015-10-01 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind to cd38 and cd3
WO2015164758A1 (en) 2014-04-25 2015-10-29 University Of Florida Research Foundation, Inc. Methods of permitting a subject to receive multiple doses of recombinant adeno-associated virus
EP4116329A1 (en) 2014-05-27 2023-01-11 Academia Sinica Anti-her2 glycoantibodies and uses thereof
CN106661562A (zh) 2014-05-27 2017-05-10 中央研究院 得自类杆菌属的岩藻糖苷酶及其用途
US10118969B2 (en) 2014-05-27 2018-11-06 Academia Sinica Compositions and methods relating to universal glycoforms for enhanced antibody efficacy
CA2950415A1 (en) 2014-05-27 2015-12-03 Academia Sinica Anti-cd20 glycoantibodies and uses thereof
JP7063538B2 (ja) 2014-05-28 2022-05-09 アカデミア シニカ 抗ＴＮＦα糖操作抗体群およびその使用
MX2016016369A (es) 2014-06-13 2017-10-12 Mayo Found Medical Education & Res Tratamiento de linfomas.
EA201692502A1 (ru) 2014-06-16 2017-09-29 Мэйо Фаундейшн Фор Медикал Эдьюкейшн Энд Рисерч Лечение миелом
EP3160478A4 (en) 2014-06-30 2018-05-16 Bioverativ Therapeutics Inc. Optimized factor ix gene
SG11201700097WA (en) 2014-07-09 2017-02-27 Genentech Inc Ph adjustment to improve thaw recovery of cell banks
CN107074937B (zh) 2014-07-29 2021-07-27 神经免疫控股公司 人源抗亨廷顿蛋白(htt)抗体及其用途
US9879042B2 (en) 2014-09-08 2018-01-30 Academia Sinica Human iNKT cell activation using glycolipids
CN114181312A (zh) 2014-09-10 2022-03-15 豪夫迈·罗氏有限公司 半乳糖改造的免疫球蛋白1抗体
CN106687141A (zh) 2014-09-10 2017-05-17 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓及其缀合物
SG11201701821QA (en) 2014-09-15 2017-04-27 Genentech Inc Antibody formulations
US20160082120A1 (en) 2014-09-23 2016-03-24 Genentech, Inc. METHODS OF USING ANTI-CD79b IMMUNOCONJUGATES
CA2963991A1 (en) 2014-09-29 2016-04-07 Duke University Bispecific molecules comprising an hiv-1 envelope targeting arm
BR112017006598A2 (pt) 2014-09-30 2018-04-17 Neurimmune Holding Ag anticorpo de repetições antidipeptídeo derivado de ser humano (dprs)
SG11201702614SA (en) 2014-10-01 2017-04-27 Eagle Biolog Inc Polysaccharide and nucleic acid formulations containing viscosity-lowering agents
US9446148B2 (en) 2014-10-06 2016-09-20 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-antibody compositions and methods of making and using the same
MA40835A (fr) 2014-10-23 2017-08-29 Biogen Ma Inc Anticorps anti-gpiib/iiia et leurs utilisations
MA40861A (fr) 2014-10-31 2017-09-05 Biogen Ma Inc Anticorps anti-glycoprotéines iib/iiia
DK3221359T3 (da) 2014-11-17 2020-06-22 Regeneron Pharma Fremgangsmåder til tumorbehandling ved anvendelse af CD3XCD20-bispecifikt antistof
CU24597B1 (es) 2014-11-26 2022-05-11 Xencor Inc Anticuerpos biespecíficos heterodiméricos que se unen a cd3 y cd20
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
KR20170084327A (ko) 2014-11-26 2017-07-19 젠코어 인코포레이티드 Cd3 및 cd38에 결합하는 이형이량체 항체
US10093733B2 (en) 2014-12-11 2018-10-09 Abbvie Inc. LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins
EP3237449A2 (en) 2014-12-22 2017-11-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
MX2017009038A (es) 2015-01-08 2017-10-25 Biogen Ma Inc Antagonistas de proteina 1 de interacción con el receptor de nogo que contiene el dominio de inmunoglobulina y repeticiones ricas en leucina (lingo-1) y usos para el tratamiento de trastornos desmielinizantes.
US10495645B2 (en) 2015-01-16 2019-12-03 Academia Sinica Cancer markers and methods of use thereof
US9975965B2 (en) 2015-01-16 2018-05-22 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
AU2015378564A1 (en) 2015-01-24 2017-07-13 Academia Sinica Novel glycan conjugates and methods of use thereof
US10227411B2 (en) 2015-03-05 2019-03-12 Xencor, Inc. Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions
RU2758113C2 (ru) 2015-03-17 2021-10-26 Мемориал Слоан-Кеттеринг Кэнсер Сентер Антитела к muc16 и их применение
WO2016149485A1 (en) 2015-03-17 2016-09-22 The Regents Of The University Of California Novel chemoimmunotherapy for epithelial cancer
CN116196414A (zh) 2015-05-11 2023-06-02 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法
RS60441B1 (sr) 2015-05-30 2020-07-31 Molecular Templates Inc De-imunizovane, strukture shiga toksin a podjedinice i ciljani ćelijski molekuli koji sadrže isti
EP3302462A1 (en) 2015-06-03 2018-04-11 Boston Biomedical, Inc. Compositions comprising a cancer stemness inhibitor and an immunotherapeutic agent for use in treating cancer
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
HUE057952T2 (hu) 2015-06-24 2022-06-28 Hoffmann La Roche Anti-transzferrin receptor antitestek testreszabott affinitással
EP3108897A1 (en) 2015-06-24 2016-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies against human csf-1r for use in inducing lymphocytosis in lymphomas or leukemias
EP3313885A1 (en) 2015-06-29 2018-05-02 H. Hoffnabb-La Roche Ag Type ii anti-cd20 antibody for use in organ transplantation
IL257231B (en) 2015-08-03 2022-09-01 Bioverativ Therapeutics Inc Factor ix fusion proteins and methods for their preparation and use
EP4209499B1 (en) 2015-08-13 2024-08-07 Amgen Inc. Charged depth filtration of antigen-binding proteins
TW201707725A (zh) 2015-08-18 2017-03-01 美國馬友醫藥教育研究基金會 載體－抗體組合物及其製造及使用方法
IL256785B2 (en) 2015-08-28 2024-03-01 Amunix Operating Inc Chimeric polypeptide composition and methods for its preparation and use
CN108367004B (zh) 2015-09-21 2022-09-13 阿帕特夫研究和发展有限公司 Cd3结合多肽
RU2753390C1 (ru) 2015-10-02 2021-08-13 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Биспецифические антитела к человеческому cd20/человеческому рецептору трансферрина и способы их применения
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
TW201713360A (en) 2015-10-06 2017-04-16 Mayo Foundation Methods of treating cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
RU2735023C9 (ru) 2015-11-02 2021-06-18 Биоатла, Ллс Условно активные полипептиды
US11623957B2 (en) 2015-12-07 2023-04-11 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and PSMA
WO2017117311A1 (en) 2015-12-30 2017-07-06 Genentech, Inc. Formulations with reduced degradation of polysorbate
US11571469B2 (en) 2016-01-07 2023-02-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of treating cancer with interferon wherein the cancer cells are HLA negative or have reduced HLA expression
JP7217630B2 (ja) 2016-02-01 2023-02-03 バイオベラティブ セラピューティクス インコーポレイテッド 最適化第ｖｉｉｉ因子遺伝子
CA3014531A1 (en) 2016-02-12 2017-08-17 Mayo Foundation For Medical Education And Research Hematologic cancer treatments
WO2017148879A1 (en) 2016-03-01 2017-09-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Obinutuzumab and rituximab variants having reduced adcp
WO2017149018A1 (en) 2016-03-02 2017-09-08 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and kits for predicting the risk of relapse in patients suffering from idiopathic nephrotic syndrome
KR20180114210A (ko) 2016-03-08 2018-10-17 아카데미아 시니카 N-글리칸의 모듈 합성 방법 및 그의 어레이
CA3011887A1 (en) 2016-03-14 2017-09-21 Stian FOSS Engineered immunoglobulins with altered fcrn binding
CA3017776A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 Generon (Shanghai) Corporation Ltd. Multispecific fab fusion proteins and use thereof
CA3018340A1 (en) 2016-03-21 2017-09-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for improving the therapeutic index for a chemotherapeutic drug
EP3432926A4 (en) 2016-03-21 2019-11-20 Mayo Foundation for Medical Education and Research METHODS OF REDUCING THE TOXICITY OF A CHEMOTHERAPEUTIC MEDICAMENT
WO2017172994A1 (en) 2016-03-29 2017-10-05 Geltor, Inc. Expression of proteins in gram-negative bacteria wherein the ratio of periplasmic volume to cytoplasmic volume is between 0.5:1 and 10:1
US10618969B2 (en) 2016-04-06 2020-04-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-binding agent compositions and methods of making and using the same
US10961311B2 (en) 2016-04-15 2021-03-30 Macrogenics, Inc. B7-H3 binding molecules, antibody drug conjugates thereof and methods of use thereof
WO2017182608A1 (en) 2016-04-22 2017-10-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and vaccine compositions for the treatment of b-cell malignancies
US10966977B2 (en) 2016-05-27 2021-04-06 Tg Therapeutics, Inc. Combination of anti-CD20 antibody, P13 kinase-delta selective inhibitor, and BTK inhibitor to treat b-cell proliferative disorders
RU2022104399A (ru) 2016-06-14 2022-05-05 Ксенкор, Инк. Биспецифические антитела-ингибиторы контрольных точек
WO2017218698A1 (en) 2016-06-15 2017-12-21 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies with engineered ch2 domains, compositions thereof and methods of using the same
CN116063545A (zh) 2016-06-28 2023-05-05 Xencor股份有限公司 结合生长抑素受体2的异源二聚抗体
JP2018035137A (ja) 2016-07-13 2018-03-08 マブイミューン ダイアグノスティックス エイジーＭａｂｉｍｍｕｎｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ａｇ 新規な抗線維芽細胞活性化タンパク質（ｆａｐ）結合薬剤およびその使用
KR20190039134A (ko) 2016-07-13 2019-04-10 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 Lingo-1 길항제의 투약 섭생 및 탈수초성 질환의 치료를 위한 용도
GB201613167D0 (en) 2016-07-29 2016-09-14 Univ Southampton Cancer and b-cell related disease therapy
TWI764917B (zh) 2016-08-22 2022-05-21 醣基生醫股份有限公司 抗體、結合片段及使用方法
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN107384932B (zh) 2016-08-31 2020-10-20 北京天广实生物技术股份有限公司 抗人cd20人源化单克隆抗体mil62、其制备方法及用途
EP3506942B1 (en) 2016-09-01 2022-11-16 Mayo Foundation for Medical Education and Research Carrier-pd-l1 binding agent compositions for treating cancers
RU2019109209A (ru) 2016-09-01 2020-10-05 Мэйо Фаундейшн Фор Медикал Эдьюкейшн Энд Рисерч Способ и композиции для направленного на мишень воздействия при лечении т-клеточных видов рака
WO2018048815A1 (en) 2016-09-06 2018-03-15 Nantibodyfc, Llc Methods of treating triple-negative breast cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
CN109843924A (zh) 2016-09-06 2019-06-04 梅约医学教育与研究基金会 治疗表达pd-l1的癌症的方法
RU2756892C2 (ru) 2016-09-06 2021-10-06 Мэйо Фаундейшн Фор Медикал Эдьюкейшн Энд Рисерч Композиции с паклитакселом, альбумином и связывающим средством и способы их применения и получения
MX2019002728A (es) 2016-09-09 2019-08-16 Tg Therapeutics Inc Combinacion de un anticuerpo anti-cd20, inhibidor de quinasa pi3-delta, y anticuerpo anti-pd-1 o anti-pd-l1 para el tratamiento hematologico de los canceres.
CN108421048B (zh) * 2016-09-28 2021-04-20 首都医科大学附属北京世纪坛医院 纳米活性碳靶向药物递送系统、制备方法及其用途
CN109862919A (zh) 2016-10-11 2019-06-07 免疫医疗有限公司 抗体-药物缀合物联合免疫介导的治疗剂
BR112019007281A2 (pt) 2016-10-14 2019-07-09 Xencor Inc proteína heterodimérica, composições de ácido nucleico e de vetor de expressão, vetor de expressão, célula hospedeira, e, métodos para produzir proteína heterodimérica e para tratar câncer em um paciente
WO2018102427A1 (en) 2016-11-29 2018-06-07 Boston Biomedical, Inc. Naphthofuran derivatives, preparation, and methods of use thereof
US20200003785A1 (en) 2016-12-01 2020-01-02 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Use of anti-uchl1 igg plasma concentration for diagnosing idiopathic steroid sensitive nephrotic syndrome
CA3044838A1 (en) 2016-12-02 2018-06-07 Bioverativ Therapeutics Inc. Methods of inducing immune tolerance to clotting factors
US20190381149A1 (en) 2016-12-02 2019-12-19 Bioverativ Therapeutics Inc. Methods of treating hemophilic arthropathy using chimeric clotting factors
CA3051862A1 (en) 2017-01-31 2018-08-09 Bioverativ Therapeutics Inc. Factor ix fusion proteins and methods of making and using same
GB201703876D0 (en) 2017-03-10 2017-04-26 Berlin-Chemie Ag Pharmaceutical combinations
CA3044082A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of antibody-drug conjugates for cancer therapy
SG11202003754YA (en) 2017-05-16 2020-05-28 Bhamis Research Laboratory Pvt Ltd High concentration protein formulations with reduced viscosity
CA3062656A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Boston Biomedical, Inc. Methods for treating cancer
MA49517A (fr) 2017-06-30 2020-05-06 Xencor Inc Protéines de fusion fc hétérodimères ciblées contenant il-15/il-15ra et domaines de liaison à l'antigène
US11634488B2 (en) 2017-07-10 2023-04-25 International—Drug—Development—Biotech Treatment of B cell malignancies using afucosylated pro-apoptotic anti-CD19 antibodies in combination with anti CD20 antibodies or chemotherapeutics
WO2019020606A1 (en) 2017-07-26 2019-01-31 F. Hoffmann-La Roche Ag POLYTHERAPY WITH BET INHIBITOR, BCL-2 INHIBITOR AND ANTI-CD20 ANTIBODY
US10759865B2 (en) 2017-08-22 2020-09-01 Eyal Levit Treatment of diabetes mellitus
US11180541B2 (en) 2017-09-28 2021-11-23 Geltor, Inc. Recombinant collagen and elastin molecules and uses thereof
WO2019077123A1 (en) 2017-10-20 2019-04-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) METHODS AND KITS FOR IDENTIFYING WHETHER A SUBJECT IS REACHED OR RISK OF BEING WITH AUTOIMMUNE MYOPATHY
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
KR20200085828A (ko) 2017-11-08 2020-07-15 젠코어 인코포레이티드 신규의 항-pd-1 서열을 사용한 이중특이적 및 단일특이적 항체
EP3728302A1 (en) 2017-12-19 2020-10-28 Xencor, Inc. Engineered il-2 fc fusion proteins
CN111683961A (zh) 2018-03-13 2020-09-18 豪夫迈·罗氏有限公司 4-1bb激动剂与抗cd20抗体的治疗剂组合
EA202092316A1 (ru) 2018-03-28 2021-05-25 Бристол-Маерс Сквибб Компани Слитые белки интерлейкина-2/альфа-рецептора интерлейкина-2 и способы применения
US10982006B2 (en) 2018-04-04 2021-04-20 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
US11524991B2 (en) 2018-04-18 2022-12-13 Xencor, Inc. PD-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15Ra Fc-fusion proteins and PD-1 antigen binding domains and uses thereof
JP7436383B2 (ja) 2018-04-18 2024-02-21 ユーシーエル ビジネス リミテッド 操作された調節性ｔ細胞
JP2021520829A (ja) 2018-04-18 2021-08-26 ゼンコア インコーポレイテッド ＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲＡ Ｆｃ融合タンパク質およびＴＩＭ−３抗原結合ドメインを含む、ＴＩＭ−３標的化ヘテロ二量体融合タンパク質
MX2020012418A (es) 2018-05-23 2021-04-28 Adc Therapeutics Sa Adyuvante molecular.
MX2020013633A (es) 2018-07-03 2021-03-25 Bristol Myers Squibb Co Metodos para producir proteinas recombinantes.
WO2020014139A1 (en) 2018-07-09 2020-01-16 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Administration of sumo-activating enzyme inhibitor and anti-cd20 antibodies
US20210186880A1 (en) 2018-08-03 2021-06-24 Brown University Oral formulations with increased uptake
CN109273050B (zh) * 2018-08-03 2021-07-13 五邑大学 一种用于解析复杂多聚体蛋白受体的脉冲电子顺磁共振数据的系统及方法与应用
EP3844189A1 (en) 2018-08-31 2021-07-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/c20 bispecific antibodies
WO2020061048A1 (en) 2018-09-17 2020-03-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bicistronic chimeric antigen receptors targeting cd19 and cd20 and their uses
US11358999B2 (en) 2018-10-03 2022-06-14 Xencor, Inc. IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins
GB201816553D0 (en) 2018-10-10 2018-11-28 Centauri Therapeutics Ltd Novel compounds and therapeutic uses thereof
GB201816554D0 (en) 2018-10-10 2018-11-28 Centauri Therapeutics Ltd Novel compounds and therapeutic uses thereof
EP3864127A1 (en) 2018-10-10 2021-08-18 Boehringer Ingelheim International GmbH Method for membrane gas transfer in high density bioreactor culture
CN113329769A (zh) 2018-10-11 2021-08-31 斯克里普斯研究学院 具有反应性精氨酸的抗体化合物及相关的抗体药物缀合物
WO2020080715A1 (ko) 2018-10-15 2020-04-23 연세대학교 산학협력단 생산성이 향상된 항체 및 이의 제조방법
RU2724469C2 (ru) 2018-10-31 2020-06-23 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Моноклональное антитело, которое специфически связывается с cd20
JP7453151B2 (ja) 2018-11-02 2024-03-19 協和キリン株式会社 液体培地の調製方法
SG11202104900SA (en) 2018-11-20 2021-06-29 Univ Cornell Macrocyclic complexes of radionuclides and their use in radiotherapy of cancer
BR112021010908A2 (pt) 2018-12-06 2021-08-31 Genentech, Inc. Método para tratamento de linfoma difuso de grandes células b, kit e imunoconjugado
EP3891270A1 (en) 2018-12-07 2021-10-13 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Use of cd26 and cd39 as new phenotypic markers for assessing maturation of foxp3+ t cells and uses thereof for diagnostic purposes
WO2020160323A2 (en) 2019-01-31 2020-08-06 Elektrofi, Inc. Particle formation and morphology
WO2020167912A1 (en) 2019-02-13 2020-08-20 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Anti-peripheral lymph node addressin antibodies and uses thereof
CA3128793C (en) 2019-02-18 2023-02-28 Atb Therapeutics Method of producing a binder-toxin fusion protein in a plant cell or a whole plant
CN113710706A (zh) 2019-02-27 2021-11-26 豪夫迈·罗氏有限公司 用于抗tigit抗体和抗cd20抗体或抗cd38抗体治疗的给药
CN114173875A (zh) 2019-03-01 2022-03-11 Xencor股份有限公司 结合enpp3和cd3的异二聚抗体
MX2021012032A (es) 2019-04-01 2021-11-03 Genentech Inc Composiciones y metodos para estabilizar formulaciones que contienen proteinas.
CA3136691A1 (en) 2019-04-12 2020-10-15 Geltor, Inc. Recombinant elastin and production thereof
TW202108178A (zh) 2019-05-14 2021-03-01 美商建南德克公司 使用抗CD79b免疫結合物治療濾泡性淋巴瘤之方法
WO2020252043A1 (en) 2019-06-10 2020-12-17 Sutro Biopharma, Inc. 5H-PYRROLO[3,2-d]PYRIMIDINE-2,4-DIAMINO COMPOUNDS AND ANTIBODY CONJUGATES THEREOF
CN114746420A (zh) 2019-06-17 2022-07-12 苏特罗生物制药公司 用于癌症治疗和诊断的作为Toll样受体（TLR）7/8激动剂的1-(4-(氨基甲基)苄基)-2-丁基-2H-吡唑并[3,4-c]喹啉-4-胺衍生物及相关化合物以及其抗体药物偶联物
EP4007808A1 (en) 2019-08-01 2022-06-08 Bristol-Myers Squibb Company Methods of improving protein productivity in fed-batch cell cultures
JP2022546686A (ja) 2019-08-30 2022-11-07 ベストランデツ イノバシオンセルスカップ アーエス 形質細胞に対する抑制剤または細胞傷害剤を使用する慢性疲労症候群の処置のための方法
WO2021050645A1 (en) 2019-09-12 2021-03-18 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2021050953A1 (en) 2019-09-13 2021-03-18 Elektrofi, Inc. Compositions and methods for the delivery of therapeutic biologics for treatment of disease
BR112022007216A2 (pt) 2019-10-18 2022-08-23 Genentech Inc Métodos para tratamento de linfoma difuso, kit e imunoconjugado
IL293148A (en) 2019-11-19 2024-07-01 Protalix Ltd Removal of constructs from transduced cells
CN115697400A (zh) 2020-01-31 2023-02-03 思进股份有限公司 抗cd30抗体-药物缀合物及其用于治疗非霍奇金淋巴瘤的用途
WO2021168271A1 (en) 2020-02-19 2021-08-26 Elektrofi, Inc. Droplet formation and particle morphology
WO2021178597A1 (en) 2020-03-03 2021-09-10 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific glutamine tags, methods of their preparation and methods of their use
JP2023522627A (ja) 2020-04-17 2023-05-31 エレクトロフィ，インコーポレイテッド 連続的な液滴形成及び脱水によって粒子を形成する方法
WO2021217051A1 (en) 2020-04-24 2021-10-28 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates
EP4143234A4 (en) 2020-04-26 2024-07-17 Biocytogen Pharmaceuticals Beijing Co Ltd MODIFIED IMMUNOGLOBULINS
CN115485304A (zh) 2020-05-03 2022-12-16 上海美雅珂生物技术有限责任公司 抗体药物偶联物及其制剂
US11919956B2 (en) 2020-05-14 2024-03-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3
GB202007842D0 (en) 2020-05-26 2020-07-08 Quell Therapeutics Ltd Polypeptide useful in adoptive cell therapy
EP4189121A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for lymphoma
GB202012331D0 (en) 2020-08-07 2020-09-23 Petmedix Ltd Therapeutic antibodies
EP4200332A1 (en) 2020-08-19 2023-06-28 Xencor, Inc. Anti-cd28 and/or anti-b7h3 compositions
CN112062855B (zh) 2020-08-26 2024-08-30 北京天诺健成医药科技有限公司 一种含有衔接器的药物治疗剂的开发和应用
GB202013477D0 (en) 2020-08-27 2020-10-14 Quell Therapeutics Ltd Nucleic acid constructs for expressing polypeptides in cells
WO2022043415A1 (en) 2020-08-27 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for detecting the presence of pemphigus-specific autoantibodies in a sample
US20230312758A1 (en) 2020-09-10 2023-10-05 Genmab A/S Bispecific antibody against cd3 and cd20 in combination therapy for treating follicular lymphoma
CA3192251A1 (en) 2020-09-10 2022-03-17 Genmab A/S Bispecific antibody against cd3 and cd20 in combination therapy for treating diffuse large b-cell lymphoma
BR112023004296A2 (pt) 2020-09-10 2023-04-04 Genmab As Método para tratar linfoma de célula b grande difusa em um indivíduo humano
CN116406293A (zh) 2020-09-10 2023-07-07 健玛保 用于治疗滤泡性淋巴瘤的联合疗法中的针对cd3和cd20的双特异性抗体
CA3190349A1 (en) 2020-09-10 2022-03-17 Brian Elliott Bispecific antibodies against cd3 and cd20 for treating chronic lymphocytic leukemia
US20230357815A1 (en) 2020-09-22 2023-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Methods for increasing productivity of therapeutic proteins
KR20230113283A (ko) 2020-10-05 2023-07-28 프로탈릭스 리미티드 다이서-유사 넉아웃 식물 세포
WO2022079211A1 (en) 2020-10-16 2022-04-21 Adc Therapeutics Sa Glycoconjugates
WO2022103983A2 (en) 2020-11-11 2022-05-19 Sutro Biopharma, Inc. Fluorenylmethyloxycarbonyl and fluorenylmethylaminocarbonyl compounds, protein conjugates thereof, and methods for their use
WO2022104150A1 (en) 2020-11-12 2022-05-19 Tg Therapeutics, Inc. Triple combination to treat b-cell malignancies
GB202102396D0 (en) 2021-02-19 2021-04-07 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
KR20230156079A (ko) 2021-03-09 2023-11-13 젠코어 인코포레이티드 Cd3과 cldn6에 결합하는 이종이량체 항체
JP2024509274A (ja) 2021-03-10 2024-02-29 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｇｐｃ３に結合するヘテロ二量体抗体
TW202300521A (zh) 2021-03-15 2023-01-01 美商建南德克公司 治療狼瘡性腎炎的組成物及方法
CN117529505A (zh) 2021-03-24 2024-02-06 美国卫生和人力服务部 设计为减少逆转录病毒重组的双顺反子嵌合抗原受体及其用途
US20240207464A1 (en) 2021-04-20 2024-06-27 Nihon Medi-Physics Co., Ltd. Radioactive complex of anti-cd20 antibody, and radiopharmaceutical
EP4334354A1 (en) 2021-05-06 2024-03-13 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against alk and methods of use thereof
CN118593725A (zh) 2021-05-12 2024-09-06 基因泰克公司 使用抗cd79b免疫缀合物治疗弥漫性大b细胞淋巴瘤的方法
WO2022253756A1 (en) 2021-06-01 2022-12-08 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of b cell depleting agents for the treatment of rheumatic heart disease
EP4352096A1 (en) 2021-06-08 2024-04-17 Xyphos Biosciences Inc. Antibody-nkg2d ligand domain fusion protein
KR20240018434A (ko) 2021-06-08 2024-02-13 사이포스 바이오사이언시스 인코포레이티드 항체-nkg2d 리간드 도메인 융합 단백질
EP4355782A1 (en) 2021-06-17 2024-04-24 Petmedix Ltd. Anti canine cd20 antibodies
WO2022263551A1 (en) 2021-06-17 2022-12-22 Glaxosmithkline Intellectual Property Limited Anti-baff antibodies for use in a method of treatment of long covid and/or post-acute sequelae sars-cov-2 infection (pasc)
JP2024527977A (ja) 2021-07-27 2024-07-26 ノヴァブ， インコーポレイテッド 免疫エフェクター機能を有する操作されたｖｌｒｂ抗体
WO2023015234A1 (en) 2021-08-05 2023-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Cell culture methods for producing therapeutic proteins
WO2023012486A1 (en) 2021-08-06 2023-02-09 Petmedix Ltd Antibody fc variants
US20240336697A1 (en) 2021-08-07 2024-10-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
AR126846A1 (es) 2021-08-23 2023-11-22 Bioverativ Therapeutics Inc Genes del factor viii optimizados
KR20240049825A (ko) 2021-08-23 2024-04-17 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 역위 말단 반복부 서열을 사용한 닫힌 말단 dna 제조
WO2023049687A1 (en) 2021-09-21 2023-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of controlling the level of dissolved oxygen (do) in a solution comprising a recombinant protein in a storage container
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
WO2023056331A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Bioverativ Therapeutics Inc. Nucleic acids encoding factor viii polypeptides with reduced immunogenicity
CA3238936A1 (en) 2021-11-24 2023-06-01 Wayne A. Marasco Antibodies against ctla-4 and methods of use thereof
WO2023114544A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies and uses thereof
WO2023114543A2 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Platform for antibody discovery
KR20240144239A (ko) 2022-01-28 2024-10-02 젠맵 에이/에스 미만성 대 b-세포 림프종을 치료하기 위한 조합 요법에서의 cd3 및 cd20에 대한 이중특이적 항체
WO2023150552A1 (en) 2022-02-04 2023-08-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for treatment of neurological disorders
AU2023219227A1 (en) 2022-02-09 2024-08-01 Petmedix Ltd Therapeutic antibodies
WO2023164487A1 (en) 2022-02-22 2023-08-31 Brown University Compositions and methods to achieve systemic uptake of particles following oral or mucosal administration
WO2023198635A1 (en) 2022-04-11 2023-10-19 Astrazeneca Ab T cell binding proteins
WO2023212721A1 (en) 2022-04-29 2023-11-02 Elektrofi, Inc. Injectable suspensions
US11884740B1 (en) 2022-06-01 2024-01-30 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11814439B1 (en) 2022-06-01 2023-11-14 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11807689B1 (en) 2022-06-01 2023-11-07 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11965032B1 (en) 2022-06-01 2024-04-23 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US20240091365A1 (en) 2022-06-27 2024-03-21 Sutro Biopharma, Inc. Beta-glucuronide linker-payloads, protein conjugates thereof, and methods thereof
WO2024015229A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Sutro Biopharma, Inc. Protease/enzyme cleavable linker-payloads and protein conjugates
WO2024039670A1 (en) 2022-08-15 2024-02-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against cldn4 and methods of use thereof
WO2024039672A2 (en) 2022-08-15 2024-02-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against msln and methods of use thereof
WO2024102734A1 (en) 2022-11-08 2024-05-16 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating childhood onset idiopathic nephrotic syndrome
WO2024153636A1 (en) 2023-01-17 2024-07-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Vasorin as a biomarker and biotarget in nephrology
US20240285762A1 (en) 2023-02-28 2024-08-29 Juno Therapeutics, Inc. Cell therapy for treating systemic autoimmune diseases

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US95963A (en) * 1869-10-19 Improvement in fence
US9444A (en) * 1852-12-07 Hot-air furnace
US186205A (en) * 1877-01-16 Improvement in buffing-rolls for thesoles of boots andshoes
US213784A (en) * 1879-04-01 Improvement in inlaying metallic scroll-ornaments in hard rubber and allied gums
US206903A (en) * 1878-08-13 Improvement in cultivators
US21781A (en) * 1858-10-12 Improved method o f lighting street-lamps by electricity
US163708A (en) * 1875-05-25 Improvement in harvester-rakes
US26804A (en) * 1860-01-10 Bridle-bit
US197255A (en) * 1877-11-20 Improvement in receivers and stench-traps for street-sewers
US147885A (en) * 1874-02-24 Improvement in the manufacture of halters and bridles
US4816567A (en) * 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
EP0173494A3 (en) * 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
USRE38008E1 (en) * 1986-10-09 2003-02-25 Neorx Corporation Methods for improved targeting of antibody, antibody fragments, hormones and other targeting agents, and conjugates thereof
US6893625B1 (en) * 1986-10-27 2005-05-17 Royalty Pharma Finance Trust Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen
IL85035A0 (en) * 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
US4975278A (en) * 1988-02-26 1990-12-04 Bristol-Myers Company Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells
US5204244A (en) * 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5439665A (en) * 1988-07-29 1995-08-08 Immunomedics Detection and treatment of infectious and inflammatory lesions
IL162181A (en) * 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
WO1992007466A1 (en) * 1990-11-05 1992-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Synergistic therapy with combinations of anti-tumor antibodies and biologically active agents
IE922437A1 (en) * 1991-07-25 1993-01-27 Idec Pharma Corp Recombinant antibodies for human therapy
US5686072A (en) * 1992-06-17 1997-11-11 Board Of Regents, The University Of Texas Epitope-specific monoclonal antibodies and immunotoxins and uses thereof
US5648267A (en) * 1992-11-13 1997-07-15 Idec Pharmaceuticals Corporation Impaired dominant selectable marker sequence and intronic insertion strategies for enhancement of expression of gene product and expression vector systems comprising same
US5736137A (en) * 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
PL174721B1 (pl) * 1992-11-13 1998-09-30 Idec Pharma Corp Przeciwciało monoklonalne anty-CD20
US5595721A (en) * 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US5678180A (en) * 1995-06-07 1997-10-14 Hughes Electronics Communication system and method providing dispatch and cellular interconnect communications
US6183744B1 (en) * 1997-03-24 2001-02-06 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
US6306393B1 (en) * 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies

Also Published As

Publication number Publication date
ATE421335T1 (de) 2009-02-15
DE69334285D1 (de) 2009-06-25
DE122009000070I1 (de) 2010-02-11
IL107591A (en) 2000-02-17
CN1094965A (zh) 1994-11-16
NL300424I1 (nl) 2010-01-04
ES2321567T3 (es) 2009-06-08
UA27946C2 (uk) 2000-10-16
US20030082172A1 (en) 2003-05-01
CN1607006B (zh) 2012-09-19
LU91620I2 (fr) 2010-01-11
GEP20074162B (en) 2007-07-10
HUT72914A (en) 1996-06-28
HK1109634A1 (en) 2008-06-13
EP2000149B1 (en) 2009-05-13
GEP20105119B (en) 2010-11-25
TW376320B (en) 1999-12-11
HK1125574A1 (en) 2009-08-14
BR1100622A (pt) 2000-04-18
CN101007850B (zh) 2012-05-30
PT2000149E (pt) 2009-07-14
MY111196A (en) 1999-09-30
ZA938466B (en) 1994-06-20
ATE431158T1 (de) 2009-05-15
CN101007851B (zh) 2012-09-12
CN1912111B (zh) 2010-05-26
FR04C0018I1 (pl) 2008-09-26
CN1912111A (zh) 2007-02-14
CN101007851A (zh) 2007-08-01
SG45294A1 (en) 1998-01-16
DK1005870T3 (da) 2009-05-18
PT1005870E (pt) 2009-04-28
DE69334259D1 (de) 2009-03-12
DK2000149T3 (da) 2009-08-03
IL107591A0 (en) 1994-02-27
GEPI20105119B (en) 2010-11-25
CN101007850A (zh) 2007-08-01
ES2326144T3 (es) 2009-10-01
CN1270774C (zh) 2006-08-23
CN1607006A (zh) 2005-04-20
FR04C0018I2 (pl) 2009-11-20
US5736137A (en) 1998-04-07
HU219264B (en) 2001-03-28
EP2000149A1 (en) 2008-12-10
CA2626445A1 (en) 1994-05-26
HK1109633A1 (en) 2008-06-13
KR100365632B1 (ko) 2003-08-02
HU9501410D0 (en) 1995-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU688743B2 (en) Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
CN101007851B (zh) 抗人类b淋巴细胞限制分化抗原的嵌合及放射标记抗体
US20030147885A1 (en) Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma