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    de 43

    UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

    Facultad de Ciencias de la Salud


    Escuela Profesional de Tecnología Médica
    Laboratorio Clínico y Anatomía Patológica

    Pruebas
    inmunológicas de
    Interacción primaria
    Lic. Congona Roberts
    AGOSTO - 20233

    AGOSTO - 20233
    paratopo

    epitopo

    Reacción reversible
    Reacción de enlace bimolecular en la que el antígeno no es modificado por el anticuerpo
    PRUEBAS INMUNOLÓGICAS

    PRIMARIA SECUNDARIA TERCIARIA

    I-enzimo ensayo de adsorción Aglutinación Anafilaxia

    I-quimio luminiscencia Precipitación Fenómeno de Arthus

    I-electro transferencia
    Fijación del complemento

    I-Fluorescencia

    I-radio ensayo

    I-cromatografía
    I-enzimo ensayo de adsorción

    0.0005
    ug/mL
    (Ac)
    A leer!!!
    Este artículo fue el primero que hice como estudiante de posgrado de Profesor Peter Perlmann en la Universidad de
    Estocolmo. En ese momento, los RIA estaban en pleno apogeo, pero eran demasiado sofisticado para muchas áreas de
    investigación y diagnóstico porque requerían equipos costosos y usaban antígenos y anticuerpos marcados con isótopos
    radiactivos de vida media corta. Queríamos algo más simple con la misma sensibilidad. Técnicas de etiquetado se habían
    descrito anticuerpos con enzimas para inmunohistoquímica, y pensamos que podrían ser útil para ensayos serológicos
    también.
    Primero, le dimos la inmunoensayo enzimático prospectivo un nombre: ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas, o
    ELISA (un importante decisión). En segundo lugar, elegimos usar una enzima para la cual había, en ese momento, un
    sustrato soluble y sensible– sistema de producto, a saber, fosfatasa alcalina. Tercero, utilizamos el procedimiento de un RIA
    estándar, es decir, un ensayo competitivo en el que el antígeno marcado competía con antígeno en la muestra para unirse
    a anticuerpos acoplados covalentemente a partículas de celulosa. Separación de El antígeno unido al anticuerpo del
    antígeno libre se realizó mediante centrifugación y lavado repetidos. Tuvimos la primera Curva de calibración ELISA a
    principios de 1970.
    Como de costumbre, tomó un tiempo para encontrar una revista dispuesta a publicar el resultado. Continuamente nos
    preguntaban ¡por qué alguien querría medir igG de conejo!. Por supuesto, el ELISA estaba destinado a ser un ensayo de
    prueba de concepto. Sin embargo, la mayoría de los rechazos indicaron que el documento no contenía nada nuevo.

    Engvall, E. (2009). The ELISA, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. Clinical Chemistry, 56(2), 319–320. doi:10.1373/clinchem.2009.127803
    “Después de todo este tiempo, sorprende que
    ELISA haya no ha sido reemplazado por algo
    más moderno, como la PCR, la
    quimioluminiscencia, o algo más. El ¿razón?
    Pocos sistemas de ensayo son tan simples
    como ELISA y requieren tan poco en términos
    Eva Engvall de automatización y equipamiento. Hay
    belleza en la simplicidad.”
    Eva Engvall 2009

    I-enzimo ensayo de adsorción

    0.0005
    ug/mL
    (Ac)
    Email: eengvall@sbpdiscovery.org

    Engvall, E. (2009). The ELISA, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. Clinical Chemistry, 56(2), 319–320. doi:10.1373/clinchem.2009.127803
    “La afirmación hecha en ese artículo, que EIA/ELISA fue introducido por primera vez, de forma independiente
    y simultánea, por 2 investigaciones científicas grupos, es correcta pero incompleta. En hecho, un tercer grupo,
    nuestro equipo en el Instituto Pasteur, también desarrolló y publicó en 1971 un método enzimoinmunológico,
    éste para la medición de IgG sérica, con la ayuda de inmunoadsorbentes y antígenos marcados con enzimas .
    Por cierto, también publicamos en 1971 un método inmunoenzimático para la medición de inmunoglobulinas
    celulares, aunque esto método no era un clásico (en el sentido más estricto), inmunoensayo cuantitativo en
    fase sólida. “

    Avrameas, S. (2006). Historical Background of the Invention of EIA and ELISA. Clinical Chemistry, 52(7), 1430a–1431. doi:10.1373/clinchem.2006.069724
    ELISA
    “Enzyme-Linked Inmuno Sorbent Assay”
    . Estructura tridimensional del ALP (isoenzima placentaria).
    Conjugados enzimáticos
    Lavado es crítico

    Volumen dispensado. Vacío.


    Tiempo de aspiración
    Ensayos inmunoenzimáticos cuantitativos
    TIPOS
    No competitivos con Ag inmovilizado en fase sólida

    métodos directos métodos indirectos métodos por puenteo


    No competitivos con Ag inmovilizado en fase sólida

    métodos directos métodos indirectos métodos por puenteo

    disponer de un conjugado El mismo conjugado se usa para la detección emplean conjugados inmunológicos
    enzimático para cada Ag de Ac contra un número alto de Ag
    No competitivos con Ag inmovilizado en fase sólida

    métodos por puenteo

    biotina
    avidina
    biotina

    emplean conjugados inmunológicos


    ELISA sándwich
    No competitivos con Ac inmovilizado en fase sólida

    biotina
    avidina

    biotina
    biotina
    avidina

    biotina
    A

    ELISA sándwich
    COMPONENTES
    INFECTOLOGÍA SÉRICOS

    ENZIMAS
    FÁRMACOS
    CARDIACAS

    ENDOCRINOLOGÍA DROGAS
    REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

    Margni,R. 1996. Inmunologia e inmunoquímica. 5ta Ed.

    Turgeon ML. 2022. Immunology & Serology in Laboratory Medicine. 7a. ed. Mosby-Year Book, Inc. St.
    Louis.

    Abbas AK. Lichtman AH, Pillai S. Inmunología Celular y Molecular. 9na ed. España: Elsevier España;
    2018.
    LINKS

    https://www.redalyc.org/pdf/4577/457745504001.pdf
    https://www.infona.pl/resource/bwmeta1.element.elsevier-798ccc1f-39ad-3f11-b898-cec08fe66cc5
    https://www.medigraphic.com/pdfs/patol/pt-2010/pt102c.pdf
    https://www.redalyc.org/pdf/4577/457745504001.pdf
    https://core.ac.uk/download/pdf/188192698.pdf
    https://es.moleculardevices.com/lab-notes/microplate-readers/the-history-of-elisa
    https://www.sbpdiscovery.org/our-scientists/eva-engvall-phd-md-hc
    https://www.bosterbio.com/media/pdf/ELISA_Handbook.pdf
    http://biolore.com.co/wp-content/uploads/2019/08/INSERTO_I231-1021_HBsAg_EIA.pdf
    https://labymed.com.gt/wp-content/uploads/2020/06/Monobind.pdf
    GRACIAS

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