Lipasa Pancreatica

HIDRÓLISIS DE LAS GRASAS POR LA LIPASA PANCREATICA
I. INTRODUCCIÓN
En el organismo de los animales casi todos los lípidos se encuentran en complejo

con las proteínas, los carbohidratos y otras sustancias, en realidad los lípidos rara
vez se encuentran en estado libre. Los mamíferos los acumulan en forma de grasa,
los peces en forma de ceras y en las plantas se almacenan en forma de aceites que
adicionalmente tienen funciones de protección y proveen aromas y sabores
característicos.
Los acilgliceroles (constituido por una molécula de glicerol y ácidos

grasos) pueden existir como monos acilglicéridos, diacilgliceroles y
triacilglicéridos (TAG) En los alimentos los más comunes son los TAG, los otros
son usados como aditivo por sus propiedades emulgentes.
La presencia de ácidos grasos en la estructura de los lípidos determina sus

propiedades. Aunque se considera que no todos los lípidos tienen ácidos grasos,
sí tienen por lo menos alguno de sus derivados.
Los términos grasas y lípidos no pueden ser usados indistintamente, ya

que al hablar de grasas se refieren a un tipo especial de lípidos: Los
triacilgliceroles, que generalmente son sólidos a temperatura ambiente y
constituyen la principal reserva energética en algunos organismos.
Los ácidos grasos naturales poseen un número par de átomos de carbono,

producto del mecanismo de biosíntesis, iniciada a partir AcetilCoA. Su número
de átomos de C varia de 4 (ácido butírico de lípido de la leche) a 38 (ceras)
Los acilgliceroles se hidrolizan para formar glicerol libre y los ácidos

grasos que los constituyen; en las células, las enzimas llamadas Lipasas
realizan la hidrólisis; ésta hidrólisis catalizada por lipasas se caracteriza por
cierto grado de especificidad, de modo que las distintas lipasas actúan de modo
preferencial sobre diferentes enlaces éster.
La enzima principal de la hidrólisis de los TAG es la lipasa pancreática,

que prefiere ácidos grasos de cadena larga de más de 10 átomos de carbono;
hidroliza a los TAG en diacilgliceroles, liberando el Ácido graso de la posición 1
ó 3 del glicerol. Los diacilgliceroles son hidrolizados rápidamente hasta glicerol
y ácidos grasos libres. Los productos son ácidos grasos libres (AGL) o
2-monoacilglicero (2-MAG). Este último puede ser hidrolizado por medio de la
transferencia del grupo acilo en posición 2 hacia la posición 1 o 3 por medio de
las isómeras lipasas y ser finalmente hidrolizado a glicerol y AGL
La lipasa pancreática es un polipéptido de 449 aminoácidos y PM de
50,000 daltons que hidroliza los enlaces éster en posición 1 y 3 de los
triacilglicéridos.
La acción conjunta de las enzimas pancreáticas y de las sales biliares lleva

a la formación de micelas, que progresivamente se enriquecen en productos
hidrolíticos más polares que sus precursores. La velocidad de absorción de los
ácidos grasos depende de la longitud de su cadena (número de átomos de carbono)
y de su grado de saturación. Así, los insaturados de cadena larga son absorbidos
más eficazmente que los saturados.
Fundamento
La actividad de la enzima se evalúa midiendo los ácidos grasos libres que se
liberaron en el curso de la hidrólisis de la grasa por acción de la lipasa pancreática.
La concentración de los ácidos grasos libres se determina mediante la titulación
con NaOH 0,05N.
La acción de lipasa se ve potenciada por las sales biliares que al emulsificar las
grasa las transforma en pequeñas micelas.
II. OBJETIVOS
a) Evaluar la actividad de la lipasa pancreática por titulación ácido base.

b) Evidenciar el efecto de las sales biliares.
c) Determinar los meqa-acido grasos liberados por acción de la pancreática.
d) Observar cómo es que actúa y que efectos trae las sales biliares sobre el aceite.
e) Observar la actividad de la enzima lipasa indirectamente por titulación de los
ácidos grasos liberados utilizando en la titulación usando la base de hidróxido de
sodio
III. EQUIPOS Y MATERIALES
 Solución al 0.1% de pancreatina (extracto de enzimas pancreáticas)

 Buffer fosfato 0.2M de pH 8
 Aceite vegetal neutralizado
 Sales biliares en buffer fosfato al 0.5%
 matraces de 100 ml de capacidad.
 NaOH 0.1 N y 0.01N
 fenolftaleína
 Baño María a 37°C y estufa
 Fruto enzima
 Fenolftaleína 0.5%
 Agua destilada
 Tubos de ensayo
 Pipetas de 5 y 10 ml
 Vasos de precipitación
 Buretas de 25 ml

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HIDRÓLISIS DE LAS GRASAS POR LA LIPASA PANCREATICA

En el organismo de los animales casi todos los lípidos se encuentran en complejo

Los acilgliceroles (constituido por una molécula de glicerol y ácidos

La presencia de ácidos grasos en la estructura de los lípidos determina sus

Los términos grasas y lípidos no pueden ser usados indistintamente, ya

Los ácidos grasos naturales poseen un número par de átomos de carbono,

Los acilgliceroles se hidrolizan para formar glicerol libre y los ácidos

La enzima principal de la hidrólisis de los TAG es la lipasa pancreática,

La acción conjunta de las enzimas pancreáticas y de las sales biliares lleva

a) Evaluar la actividad de la lipasa pancreática por titulación ácido base.

III. EQUIPOS Y MATERIALES

 Solución al 0.1% de pancreatina (extracto de enzimas pancreáticas)

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