Estudio de Los Acidos Nucleicos de La Levadura.

Universidad de la Sierra
División de ciencias biológicas
Lic. Biología
Bio 3-1
Bioquímica descriptiva
Estudio de los ácidos nucleicos de la levadura.
Cañez Ochoa Jazmín Zamara
Domínguez Juárez María de los Ángeles
Martínez Gómez Aldo César
Moctezuma, Sonora
14 de noviembre del 2022.

Introducción
Los ácidos nucleicos son grandes polímeros formados por la repetición de

monómeros denominados nucleótidos, unidos mediante enlaces fosfodiéster. Se
clasifican en Ácidos Desoxirribonucleicos (ADN) que se encuentran residiendo en
el núcleo celular y algunos organelos, y en Ácidos Ribonucleicos (ARN) que
actúan en el citoplasma. Una función importante de los ácidos nucleicos implica el
almacenamiento y la expresión de información genómica.
Las células de levadura son ricas en ribonucleoproteínas, mientras que las células
del timo del ternero son ricas en desoxinucleoproteínas. El material genético de
organismos unicelulares puede ser extraído con relativa facilidad.
Objetivos
● Extraer nucleoproteínas a partir de células de levadura.

● Realizar la hidrólisis ácida de los ácidos nucleicos.
● Determinar cualitativamente y de manera indirecta el ADN y el ARN
presente en la levadura por los métodos de Dische y Bial, respectivamente.
● Relacionar el contenido de las pentosas analizadas, con la presencia del
ADN o ARN en el material biológico analizado.
Materiales
● Baño de agua hirviente.

● Centrífuga.
● Tubos de ensayo.
● Cilindro graduado 25 mL.
● Pipetas graduadas 10, 5, 2, y 1 mL.
● Beakers 100 mL.
● Tubos de Centrífuga.
● Varilla de vidrio.
● Fiola de 50 mL.
1
Metodología
Extracción de las nucleoproteínas.
1. En un vaso de precipitado, se diluyó 2.5 ml de NaOH 1% en 12.5 ml de

agua destilada para después sumarle 4 g de levadura.
2. Después calentamos en baño María a 90ºC por 15 minutos y agitamos
ocasionalmente, para facilitar la extracción de las nucleoproteínas. Lo
dejamos enfriar.
3. Repartimos la preparación en dos tubos de centrífuga y centrifugamos
durante 10 minutos a 3500 rpm.
4. Trasvasamos el líquido sobrenadante (contiene ribonucleoproteínas) a un
vaso de precipitado y añadimos una gota de ácido acético hasta que
neutralizamos el medio. Se midió el pH.
5. Evaporamos en una plancha de calentamiento hasta que quedó
aproximadamente la mitad del volumen inicial. Dejamos enfriar.
6. Agregamos 5 ml de alcohol acidulado y agitamos con una varilla de vidrio
vigorosamente para favorecer la precipitación de las nucleoproteínas.
7. Repartimos en dos tubos de centrífuga y centrifugamos de nuevo bajo las
mismas condiciones. Desechamos el sobrenadante obtenido.
8. En el mismo tubo de centrífuga, y con ayuda de una varilla de vidrio,
resuspendimos cada precipitado en 1.25 ml de agua destilada. Después
juntamos las dos preparaciones de nucleoproteínas.
Hidrólisis de las nucleoproteínas.
1. Vertimos la suspensión de ribonucleoproteínas en un vaso de precipitado y

añadimos 0.5 ml de ácido sulfúrico caliente en baño María a 100ºC durante
10 minutos.
2
Determinación cualitativa de ARN y ADN.
1. Rotulamos dos tubos de ensayo: B (Bial) y D (Dische) y agregamos en cada

uno, un mililitro del hidrolizado de nucleoproteínas.
2. Al tubo B, agregamos 2 ml de reactivo de Bial y al tubo D 2 ml del reactivo
de difenilamina.
3. Calentamos el tubo B durante 5 minutos y el tubo D durante 10 minutos en
un baño de agua a 100ºC.
4. Retiramos los tubos del baño de maría.
Resultados y discusiones
Una vez que los reactivos fueron agregados a los tubos correspondientes se
observaron un color inicial debido al reactivo, pasando por el calentamiento, estos
colores cambiaron, permaneciendo después de revolver cuidadosamente el tubo y
pasar por un reposo de 5 min.
Tabla 1. Resultados de la prueba y fundamento de los reactivos usados en la

práctica.
Reactivo Fundamento de la prueba Observación ¿Por qué sucede?

Bial El ensayo de Bial se usa El color al Al estar la pentosa
para detectar la presencia principio fue presente, se
de pentosas. El reactivo de turbio, pasando de deshidrata para
Bial está compuesto por un color café a formar furfural que
orcinol, ácido clorhídrico y uno gris, después reaccionará con el
cloruro férrico. específica de pasar por la orcinol para general
para pentosas y ciertos placa, el color final un compuesto
ácidos urónicos que se fue un verde muy coloreado
descomponen al calentarse oscuro.
con ácidos fuertes
formando pentosas.
3
Dische Desoxirribosa reacciona en El color presente Las desoxirribosas,
presencia de ácido acético permanecía en debido a la hidrólisis
y sulfúrico con difenilamina azul, conforme ácida sufren
(DPA), dando como pasó el tiempo deshidratación
resultado un color azul. bajo calor, se dando aldehídos δ-
Esta prueba se usa para la aumentaba la hidroxi-levulínicos.
estimación de intensidad del Estos reaccionan
desoxirribosa. color, obteniendo con difenilamina
un azul fuerte y (componente del
oscuro. reactivo de Dische)
dando un producto
de color azul.
En la prueba de Dische, la espera fue de 10 min, siendo en el minuto 6 donde se
empezó a ver una tonalidad más fuerte del color azul.
Fotografía 1. Colores obtenidos. Se observa el color final de cada tubo una vez pasado su tiempo
de reposo.
4
Se explica en la metodología, que después de la primera centrifugación, se
transverso el líquido y se añadió ác. acético, dado el resultado del pH, siendo 8 de
pH, se añadió 10 gotas de hidróxido de sodio, teniendo en cuenta que el pH no era
neutro, la derivación de gotas añadidas fueron de 34 en total para llegar al medio
deseado.
Cuestionario
1. ¿Por qué la determinación de ribosa y 2-desoxirribosa representa una

forma indirecta de reconocer la presencia y cantidad de ácidos
nucleicos?
Porque estos son los azúcares que contienen los ácidos nucleicos, la ribosa
del ARN y la 2-desoxirribosa del ADN (ÁCIDOS NUCLEICOS, 2012).
2. Mencione otras muestras biológicas a partir de las cuales podamos

cuantificar ácidos nucleicos.
Leucocitos, suero, plasma, orina, heces, semen, folículo capilar, etc.
3. Mencione otros componentes químicos que podamos cuantificar para

medir indirectamente la concentración de ADN y ARN.
Mediante espectrofotometría se puede determinar la concentración y la

pureza de una muestra de ADN basándose en la capacidad de absorbancia
de un compuesto presente en una solución a una longitud de onda
determinada.
5
Conclusión
Aprendimos y logramos extraer nucleoproteínas a partir de células de la levadura

formada para la práctica, llegamos a determinar la presencia del ADN y ARN por
la forma en que se presentó de manera exitosa la coloración en cada tubo pasado
por los reactivos. Tomando en cuenta que hay más material genético y pruebas
para este proceso, obtuvimos de manera indirecta los resultados.
6
Bibliografía
● Ácidos nucleicos. (s. f.). Genome.gov.

https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/acido-nucleico
● Funciones/Ácidos Nucleicos. (2013, 27 junio). Portal Académico del CCH.

https://e1.portalacademico.cch.unam.mx/alumno/biologia1/unidad1/biomole
culas/funcionesacidosnucleicos
● McKee Trudy. (1996). Bioquímica: la base molecular de la vida. 4ta edición.

MCGRAW-HILL/ Interamerican de España, red de bibliotecas universitarias
(REBIUN).
● Nucleótidos yácidos nucleicos: La estructura de losácidos nucleicos. (s. f.).

https://www.juntadeandalucia.es/averroes/centros-tic/14002996/helvia/aula/
archivos/repositorio/250/282/html/genetica/contenidos/curso03/curso03_01.
htm
● ÁCIDOS NUCLEICOS. (2012). En Introducción a la Química Orgánica (pp.

175–182). Programa Editorial Universidad del Valle.
● Banco, E. (s/f). PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD DE MUESTRAS

DE ADN Y ARN. Bancoadn.org. Recuperado el 14 de noviembre de 2022,
de https://www.bancoadn.org/docs/formulario-control-calidad-muestras.pdf

Estudio de Los Acidos Nucleicos de La Levadura.

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Estudio de Los Acidos Nucleicos de La Levadura.

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Estudio de Los Acidos Nucleicos de La Levadura.

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Universidad de la Sierra

División de ciencias biológicas

Estudio de los ácidos nucleicos de la levadura.

Cañez Ochoa Jazmín Zamara

Domínguez Juárez María de los Ángeles

Martínez Gómez Aldo César

14 de noviembre del 2022.

Los ácidos nucleicos son grandes polímeros formados por la repetición de

● Extraer nucleoproteínas a partir de células de levadura.

● Baño de agua hirviente.

Extracción de las nucleoproteínas.

1. En un vaso de precipitado, se diluyó 2.5 ml de NaOH 1% en 12.5 ml de

Hidrólisis de las nucleoproteínas.

1. Vertimos la suspensión de ribonucleoproteínas en un vaso de precipitado y

1. Rotulamos dos tubos de ensayo: B (Bial) y D (Dische) y agregamos en cada

Tabla 1. Resultados de la prueba y fundamento de los reactivos usados en la

Reactivo Fundamento de la prueba Observación ¿Por qué sucede?

1. ¿Por qué la determinación de ribosa y 2-desoxirribosa representa una

2. Mencione otras muestras biológicas a partir de las cuales podamos

Leucocitos, suero, plasma, orina, heces, semen, folículo capilar, etc.

3. Mencione otros componentes químicos que podamos cuantificar para

Mediante espectrofotometría se puede determinar la concentración y la

Aprendimos y logramos extraer nucleoproteínas a partir de células de la levadura

● Ácidos nucleicos. (s. f.). Genome.gov.

● Funciones/Ácidos Nucleicos. (2013, 27 junio). Portal Académico del CCH.

● McKee Trudy. (1996). Bioquímica: la base molecular de la vida. 4ta edición.

● Nucleótidos yácidos nucleicos: La estructura de losácidos nucleicos. (s. f.).

● ÁCIDOS NUCLEICOS. (2012). En Introducción a la Química Orgánica (pp.

● Banco, E. (s/f). PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD DE MUESTRAS

También podría gustarte