KR20040043255A

KR20040043255A - 옻나무로부터 분리된 추출물 및 플라보노이드 화합물들을함유한 간질환 치료제

Info

Publication number: KR20040043255A
Application number: KR1020020071464A
Authority: KR
Inventors: 박희준; 이경태; 최종원; 정현주
Original assignee: 학교법인 상지학원
Priority date: 2002-11-18
Filing date: 2002-11-18
Publication date: 2004-05-24

Abstract

본 발명은 옻나무(Rhus vernicifluaStokes)의 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물 및 그 분획물로부터 분리된 푸스틴 및 설퍼레틴 화합물을 함유하는 간기능 개선, 간세포 섬유화에 따른 간경화 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것으로서, 담도결찰하여 간섬유화를 유도한 군에서 발생하는 AST, ALT, SDH, γ-GT 활성을 저해할 뿐만 아니라 총 빌리루빈, 히드록시프롤린 및 MDA 농도량을 유의성있게 억제하여 간 질환의 예방 및 치료에 효과적이고 안전한 의약품 및 건강보조식품을 제공한다.

Description

옻나무로부터 분리된 추출물 및 플라보노이드 화합물들을 함유한 간질환 치료제{Liver disease treating agent containing the extract and flavonoid compounds isolated from Rhus verniciflua Stokes}

본 발명은 옻나무의 극성용매 가용 추출물, 비극성 용매 가용 추출물 및 그 분획물로부터 분리된 푸스틴 및 설퍼레틴 화합물을 함유하는 간기능 개선 및 간세포 섬유화에 따른 간경화 예방 및 치료에 효과적인 치료제 또는 건강식품으로 활용하고자 하는 것이다.

활성산소는 내·외인성 요인에 의한 친전자성 물질로 탐식된 세포내 미생물을 사멸시키는 숙주의 방어기능을 담당하기도 하지만, 과다하게 생성된 활성산소는 주위조직에 유리되어 세포막의 불포화 지방산을 과산화시켜 투과성을 항진시키고 파괴를 초래하여 세포독성을 유발시키게 되고, 이로 인해 생체내 독작용, 노화, 발암 및 면역억제작용 등이 유발되며, 염증 반응시 관찰되는 조직파괴의 가장 중요한 원인이 되기도 한다(Lee, K. S. et al.,J. Clin, Invest.,96,pp2461-2468, 1995 : Milan, L. et al., Free Radicals in Chemistry and Biology, pp29-31, 283-284, CRC press. 1989).

산화성 스트레스에 의한 간손상의 유도는 동물의 혈청에서 지질과산화물의 합성을 촉진시킬 뿐만 아니라 조직중 콜라겐 축적을 자극하여 콜라겐 생성도 증가시킨다는 상호연관관계가 보고된 바 있고(French, S. W. et al.,Exp. Mol. Pathol., 58,pp61-75, 1993), 최근 지질과산화와 간섬유화사이의 연관성은 실험실적으로 많이 연구되어지고 있으므로(Nordman, R., C. et al.,Free Radic. Biol.Med., 12. pp219-240, 1992; Parola, M., G. et al., Leonarduzzi, G. et al.,Free Radic. Biol. Med.,20,pp351-359, 1996; Sokol, R. J. et al.,Gastroenterology,99, pp1061-1071, 1990), 지질과산화물의 정량적인 측정과 간섬유화의 지표의 측정은 항산화 및 항섬유화 효과를 동시에 검색할 수 있다는 점에서 큰 의미를 두고 있다(Parola, M., G. et al.,Hepatology,16,pp1014-1021, 1992).

간섬유화 실험동물에서 MDA의 생성은 간섬유화(hepatic fibrosis)의 진행과정에서 일어나며(Muriel, P. and O.R. Suarez.;J. Appl. Toxicol., 14,pp423-426, 1995), 지질과산화물인 MDA가 콜라겐 합성과 간성상세포(hepatic stellate cell)의 활성을 자극한다는 연구 결과도 보고된 바 있다(Freeman, B.A. and J. D. Crapo.,Lab. Invest.,47,pp412-426, 1982).

활성산소에 의한 세포독성은 체내 해독 기구의 작용에 의하여 무독화되는 것으로 알려져 있는데, 일반적으로 간장의 해독기전은 간세포의 망상내형질(smooth endoplasmic reticulum)에 존재하는 대사 효소계에 의하여 해독 또는 불활성화되어 체외로 배출되는 Ⅰ상 단계 및 Ⅱ 상 단계로 나눌 수 있다(Routledge, P, A. and D.G. Shand.,Res. Pharmacol. Toxicol.,19,pp447-468, 1979). Ⅰ상 단계에 관여하는 씨토크롬(cytochrome) P-450은 혼합기능 옥시다제(mixed function oxidase)로서 약물이 결합하는 형태 및 존재조직에 따라 서로 다른 스펙트럼(spectrum)을 나타내는데, 아미노피린(aminopyrine)을 기질로 하여 포름알데히드를 생성하는 Ⅰ형과 아닐린(aniline)을 기질로 하여p-아미노페놀을 생성하는 Ⅱ형으로 분류하고있으며, 이는 마이크로좀(microsomal)계의 활성산소 생성에 관여한다고 알려져있다(Leonard, V. and J. B. Schenkman.Biochem. Biophys. Res. Commun.,142,pp623-630, 1987 : Past, M. R. and D. E. Cook.Biochem, Pharmacol., 31,pp3329-3334, 1982).

다른 I 상 반응에 관여하는 크산틴 옥시다제(xanthine oxidase)와 알데히드 옥시다제(aldehyde oxidase)는 비미생물성 산화(non-microsomal oxidation)를 하는 것이며, 특히 크산틴 옥시다제는 실험동물에서 바이러스, 세균 및 기생충 등에 감염되었을 때 활성이 증가된다(Tubaro, E. et al.,Arzneim. Forsch. (Drug Res.).,26, pp2185-2186, 1976; Tubaro, E. et al.,Biochem. Pharmacol.,29, pp1939-1942, 1980). 크산틴 옥시다제 및 알데히드 옥시다제는 활성산소를 생성하는 효소이자 시토졸 분획에 존재하는 몰리브덴(Molybden) 함유 산화 효소로서, 생화학적 반응을 촉매하는 과정에서 반응액중의 산소분자를 전자 수용체로 활용하고, 수퍼옥시드 음이온(superoxide anion), 과산화수소(hydrogen peroxide) 및 최종적으로 히드록시 라디칼(hydroxyl radical)을 생성한다(Granger, D.N. and D.A. Parks.,The Pharmacologist, 26, pp159-164. 1983). 간섬유화의 유도로 상기의 효소 활성이 현저히 증가된 것으로 보아 생체 활성산소의 생성증가는 비미생물성 산화(non-microsomal oxidation)에 관여하는 효소계를 활성시킴을 알 수 있게 되었고, 옻나무 성분은 본 효소계를 조절하여 지질과산화의 생성을 억제하는 것으로 생각된다.

활성산소는 대부분이 산화물질로서 수퍼옥시드 음이온(superoxide anion),히드록시 라디칼(·OH) 및 과산화수소(H₂O₂) 등이 있으며, 이들 중 히드록시 라디칼이 가장 강력한 활성을 지닌 것으로 알려져 있다.수퍼옥시드 디스무타제 (Superoxide dismutase)는 생체 이물질로 인하여 생성된 O₂를 H₂O₂로 변환시키며 (Free, J.A.Superoxide, superoxide dismutase and oxygen toxicity in "metal ion activation of dioxygen",J. G. Spiro ed., John Willy & Sons, Inc., p209, 1980), 카탈라제(catalse)는 H₂O₂를 H₂O와 O₂로 분해하며, 글루타치온 퍼옥시드 (glutathione peroxidase) 역시 생성된 활성산소를 H₂O로 변환시켜 체외로 배설시키는 해독계 효소들이다(Lawrence, R.A. and R.F. Burk.,Biochem. Biophys. Res. Commun.,71,pp952-958, 1976).

세포질에서 자유라디칼-매개(free radical-mediated) 과정은 산화-환원 균형의 변화로서 산화성 스트레스(oxidative stress)로 알려진 산화반응과 연관성이 있으며, 간질환 환자의 혈장에서 지질과산화물의 증가가 나타났으며, 이렇게 혈장에서 증가된 지질과산화물은 간조직(hepatic tissue)뿐만 아니라 신장, 심장, 기타 다른 조직에서도 매우 유해하게 작용할 수 있다는 보고가 있다(Kose, K., C. Yazici and O. Assioglu.,Clin. Biochem., 34(2),pp125-129, 2001 : Pancewicz, S. A. et al.,Med. Sci. Monit., 7(6), pp1230-1235, 2001). 최근에 와서 담즙울체성 간질환에서 산화성 스트레스(oxidative stress) 노출에 의한 지질과산화물의 증가가 나타났고, 실험적 담즙울체 래트에서 산화성 스트레스 방어효과가 감소되었을 뿐만 아니라 간조직에서 분리한 미토콘드리아에서 지질과산화물이 검출된다고 보고하고 있다(Oetting-Deems, R. et al.,J. Nutr., 123,pp1414-1420, 1993; Ono, M., C. et al.,J. Lab. Clin. Med., 118,pp476-483, 1991; Tubaro, E., B. et al.,Biochem. Pharmacol.,29, pp1939-1942, 1980). 최근 지질과산화를 억제 또는 방지할 수 있는 기능인 항산화 효과가 간보호 효과 및 항염증 작용이 있다고 보고되고 있으며(Das, D. et al.,Biochem. Biophys. Acta., 1502(3),pp351-362, 2000; Lin, C. C., et al.,Am. J. Clin. Med., 28(1), pp87-96, 2000), 항산화 물질은 반응성 산소의 중간생성물에 의한 공격에 대항해서 간과 간세포 보호의 목적으로 사용되고 있고, 간질환에서의 응용 가능성에 대해서 연구되고 있다. 지금까지 천연물에서 추출된 플라보노이드, 실리마린 또는 비타민 E와 같은 항산화제 (antioxidant agent)는 지질과산화와 간섬유화에 효과가 있는 물질로 보고되고 있다(Mourelle, M. P. et al.,Clin. Pharmacol.,3,pp183-187, 1989; Past, M.R. and D.E. Cook.,Biochem, Pharmacol., 31,pp3329-3334, 1982).

본원에서 사용한 옻나무(Rhus vernicifluaStokes)는 옻나무과 (Anacardiaceae)에 속하는 낙엽 활엽 소교목으로 중앙아시아 고원지대 및 히말라야 지방이 원산지로 알려져 있으며, 현재 전세계적으로 열대지방을 중심으로 한 아열대지방과 온대지방에 널리 분포하고 있고, 낙엽 또는 상록성으로 대부분이 교목 또는 관목성이나 일부는 덩굴성으로 자라는 것으로 알려져 있다(Barkley Fred Alexander.,Ann. of the Missouri Bot. Garden., 24(3), pp265-500, 1937)

옻나무의 수액을 옻이라 하며, 한방에서는 예로부터 건칠(乾漆)이 어혈(瘀血)을 없애고 혈액순환을 촉진시키며, 구충, 복통, 위산과다, 진해, 폐결핵, 통경, 변비, 당뇨, 학질, 소염, 관절염, 방부, 건위, 여인경맥 불통 등에 효과가 있다고 알려져 있으며, 최근에는 항암 효과에 대해서도 보고되고 있다(Namba, T., Colored Illusteations of Wakan Yaku. p215, Hoikusha Publishing Co. Ltd., Osaka, 1980). 또한 민간의학에서는 옻이 산삼과 비교할 만큼 효과가 있다고 하여 소화제, 간에서의 어혈, 심장에서는 청혈제로 심장병을 다스리고 폐에서는 결핵균을 없애며 그 외 신경통, 관절염, 피부병 등에도 훌륭한 약이 된다고 적혀있다.이러한 옻나무의 성분으로는 우루시올과 플라보노이드 계통 및 페놀 화합물 계통인 갈릭산 (Gallic acid) 등이 밝혀져 있다.

또한, 한국특허공개공보 2002-2096호(2002. 1. 9)에는 옻나무로부터 알레르겐을 제거하는 방법 및 옻나무 추출물의 항산화 효과 및 숙취해소 효과가 개시된 바 있고, 한국특허공개공보 2001-111159호(2001. 12. 17)에는 옻나무로부터 알러지 유발물질인 우루시올계 화합물을 제거한 추출물 및 헥산 분획, 에틸아세테이트 분획, 부탄올 및 물분획의 항암, 항미생물, 항산화, 항지질 과산화활성, 간염바이러스 억제활성, 간기능 개선 및 숙취효과에 기술내용이 개시된 바 있으며, 한국특허등록 제251526호(2000. 1.12)에는 우루시올계 화합물 및 이를 포함한 옻나무 추출물의 항암, 항바이러스, 항곰팡이 및 항산화제의 효능이 개시된 바 있으며, 또한 한국특허공개공보 제1996-7000738(1996. 2. 24)에는 옻나무 어린 잎 및 당느릅나무꽃부분 추출물의 항바이러스 효능에 관한 기술내용이 개시된 바 있다.

그러나 상기 문헌 어디에도 옻나무로부터 분리된 플라보노이드 화합물군들의 효능 효과에 대한 교시 또는 언급된 바는 없다.

이에 본 연구에서는 옻나무로부터 생리활성물질의 검색 일환으로 플라보노이드계열 화합물인 푸스틴과 설퍼레틴을 분리하였으며, 이 화합물들의 항섬유화 효과와 항산화 효과를 검색하기 위해 혈청 생화학적 검사, 간조직중 히드록시 프롤린과 지질과산화물의 농도를 측정하고 지질과산화의 생성계에 미치는 효과를 검색하고 그 간경화증에 대한 효과를 확인하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 간 질환의 예방 및 치료에 유용한 옻나무 극성용매 가용추출물, 비극성용매 가용 추출물 및 그로부터 분리된 푸스틴 및 설퍼레틴 화합물을 함유한 약학조성물을 제공하는 것이다.

도 1 은 옻나무의 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물 및 그로부터 분리된 푸스틴 및 설퍼레틴 화합물의 간섬유화 지표인 간 조직중의 히드록시프롤린 (hydroxyproline) 생성에 대한 영향을 나타낸 도이며,

도 2 는 옻나무의 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물, 푸스틴 및 설퍼레틴 화합물의 간섬유화 유도로 생성되는 간 조직중의 지질과산화의 함량에 대한 영향을 나타낸 도이며,

도 3 은 옻나무의 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물, 푸스틴 및 설퍼레틴 화합물의 간 시토졸성 자유 라디칼 형성 효소인 크산틴 옥시다제 및 알데히드 옥시다제 양에 대한 영향을 나타낸 도이다.

상기 목적에 따라, 본 발명은 옻나무 비극성 용매 가용추출물 또는 극성 용매 가용 추출물을 유효성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 함유하는 간경화증의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물을 제공한다.

상기 비극성 용매 가용추출물은 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 등의 비극성 용매에 추출 가능한 추출물을 의미하고, 극성 용매 가용추출물은 아세톤, 에탄올, 메탄올 등과 같은 극성 용매에 추출 가능한 추출물을 의미한다.

본 발명은 푸스틴 또는 설퍼레틴 화합물을 유효성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 함유하는 간 질환의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물을 제공한다.

상기 간질환은 간염, 간섬유화, 지방간, 간기능 부전증, 간경화 등의 간질환을 포함한다.

본 발명의 옻나무 추출물 및 푸스틴 또는 설퍼레틴 화합물을 분리하는 방법은 하기와 같다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명의 옻나무 추출물은 건조된 옻나무 무게(㎏)의 약 5배 내지 20배, 바람직하게는 약 10배 내지 15배의 물, 저급 알콜 또는 약 1:0.1 내지 1:10, 바람직하게는 1:0.2 내지 1:5의 혼합비(㎏/ℓ)를 갖는 이들의 혼합용매로 10 내지 50℃, 바람직하게는 20 내지 30℃ 추출온도에서 약 1시간 내지 1일 동안 초음파 추출환류 추출 등의 추출방법에 의하여 물, 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매에 따른 가용추출물인 조추출물을 얻고; 상기 조추출물을 물 또는 메탄올 등과 같은 극성 용매에 현탁한 후, 이를 현탁액의 약 1 내지 100배, 바람직하게는 약 1 내지 5배 부피의 헥산, 에틸아세테이트, 클로로포름 등의 비극성 용매를 가하여 극성 용매 가용층에 비극성용매 가용층을 1회 내지 10회, 바람직하게는 2회 내지 5회 분획하여 비극성 용매 가용부 및 극성 용매 가용부를 수득하고; 이 비극성용매 가용층을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 및 박층 컬럼 크로마토그래피(TLC)를 이용하여 원하는목적물질을 분리할 수 있다.

이하 구체적으로 옻나무로부터 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물, 푸스틴 또는 설퍼레틴 화합물을 분리하는 공정을 설명하면,

예를 들어 건조상태의 옻나무를 분쇄하고 물, 메탄올 또는 부탄올과 같은 극성용매로 환류 추출한 후에 여과하고, 감압농축 및 동결건조하여 극성용매에 가용한 조추출물을 얻는 제 1 단계;

상기의 조추출물을 물에 현탁하여 순차적으로 클로로포름, 에틸아세테이트와 같은 비극성용매로 녹여 현탁시킨 후, 분액깔대기로 분획 및 여과하여 비극성용매 가용추출물을 얻는 제 2 단계;

이어서 순차적으로 수층을 부탄올, 물 등과 같은 극성 용매를 사용하여 분획 및 여과하고, 극성용매 가용추출물을 얻는 제 3 단계;

이어서, 2 단계의 비극성용매 가용추출물을 컬럼 크로마토그래피 및 TLC를 수행하는데, 상기 실리카겔 컬럼에 바람직하게는 클로로포름-메탄올-물 (73:27:10, 하층; v/v)의 비를 갖는 전개용매를 컬럼에 전개시켜 분획 후, TLC상에서 R_f수치가 각각 0.53 및 0.65 (전개용매: 클로로포름-메탄올-물 (73:27:10, 하층; v/v)인 푸스틴 및 설퍼레틴 화합물을 얻는 제 4 단계로 구성된다.

본 발명의 간질환 예방 및 치료용 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 화합물을 0.1 ~ 20 중량%로 포함한다.

본 발명의 화합물을 포함하는 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 화합물을 포함하는 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate ), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있으며, 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 추출물 또는 화합물의 사용량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로 5 내지 500mg/㎏의 양, 바람직하게는 100 내지 250 mg/㎏의 양을 일일 1회 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 또한 그 추출물의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명은 간경화증 질환의 예방효과를 나타내는 옻나무의 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 건강보조식품을 제공한다.

본 발명의 추출물들을 포함하는 조성물은 염증 질환의 예방을 위한 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 옻나무의 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.

본 발명의 옻나무의 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물 자체는 독성 및 부작용은 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.

본 발명의 상기 추출물은 염증 질환의 예방을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은 일반적으로 본 발명의 건강 식품 조성물은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.

본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명은 다음의 실시예 및 실험예에 의거하여 더욱 상세히 설명되나, 본 발명이 이에 의해 제한되지는 않는다.

참조예 1. 실험기기 및 시약

¹H-NMR 및¹³C-NMR 기기는 600㎒ (Bruker, Advance-600, 6630-205)를 사용하였으며, 질량분석기(MS 스펙트럼)은 FAB-MS (HP, JEOL, JMS-AX505WA)를 사용하였으며, 사용 용매는 모두 A급 시약을 사용하였다.

실시예 1. 옻나무 조추출물의 제조

본 발명에서 사용된 옻나무는 1998년도 가을 한국 강원도에서 채집하여 상지대학교 식물자원학과 윤세영 교수에서 검증을 받았으며, 검증받은 표본(#NATCHEM-18)을 상지대학교 생명자연과학대학의 식물표본실에서 기탁하였다.

상기의 건조된 옻나무 2kg을 정선하여 세절한 후, 용매로 메탄올 6ℓ를 가하여 3차례 환류추출하고 여과지로 여과한 후, 감압증류하여 점성의 옻나무 조추출물(280g)을 수득하였다.

실시예 2. 옻나무 극성 용매 및 비극성용매 가용추출물의 제조방법

상기 실시예 1의 옻나무 조추출물을 3ℓ의 물에 현탁한 후, 클로로포름 3ℓ를 가하여 함께 분액깔대기에 넣고 클로로포름층과 물층으로 5회 반복하여 분획하였다. 물층과 동일한 부피의 에틸아세테이트 용매를 상기한 방법과 동일한 방법으로 5회 반복하여 용액의 색이 옅어질 때까지 최대한 에틸아세테이트층에 용해가 가능한 물질을 얻어내었다. 클로로포름층과 에틸아세테이트층을 각각 진공농축기에서 건조하여 클로로포름 가용추출물(69g)과 에틸아세테이트 가용추출물(95g)을 수득하여 시료로 사용하였다.

실시예 3. 푸스틴 및 설퍼레틴 화합물의 분리

상기 실시예 2의 옻나무 에틸아세테이트 가용추출물은 용출액(클로로포름:메탄올:물=73:27:10)을 이용하여 실리카겔(600g, 7x70cm, 머크사, Art 7734, 독일) 컬럼 크로마토그래피로 분리하여, 4개의 분획물 즉, A(560-640㎖), B(720-880㎖), C(1040-1200㎖) 및 D(1280-1600㎖)를 수득하였다. 상기 4개 분획물 중, B와 D를 메탄올로 재결정하여 박층 크로마토그래피(TLC)상(전개용매; 클로로포름: 메탄올: 물= 73:27:10)에서 각각 R_f값이 0.65인 설퍼레틴(sulfuretin) 1.1g, 0.53인 푸스틴(fustin) 1.5g을 수득하여 분석하였으며, 문헌(Yoon, B. J., Pharmacological Evaluation on Anti-inflammatory Effects of the Flavonoids Isolated from the Heartwood ofRhus vernicifluaStokes. Ph. D. Thesis,Kyungsung University, Busan, 2001)에 기재된 물리화학적 성상과 비교한 바 일치하여 각각 푸스틴 및 설퍼레틴으로 동정하여 이를 시료로 사용하였다.

푸스틴(C ₁₅ H ₁₂ O ₆ )

백색 침상결정체

녹는점: 228 - 229℃

[α]_D: +28.3°(c, 0.9 in 50% 아세톤)

EI-MS (70 eV)m/z: 288.3(M⁺, [C₁₅H₁₂O₆]⁺) (Harborne, J. B. et al., Dictionary of Natural Products Vol. 9, p5455, Chapman & Hall, New York, 1994)

¹H-NMR(500MHz, DMSO-d₆) δ: 4.97 (1H, d, J=11.5 Hz, H-2), 4.41 (1H, dd, J=5.5, 11.3 Hz, H-3), 5.47 (1H, d, J=5.5 Hz, 3-OH), 7.64 (1H, d, J=8.7 Hz), 6.53 (1H, dd, J=8.7, 2.2 Hz), 6.30 (1H, d, J=2.1 Hz, H-8), 6.89 (1H, d, J=1.8 Hz), 6.75 (1H, d, J=7.0 Hz), 6.76 (1H, dd, J=1.8, 7.0 Hz)

¹³C-NMR(125 MHz, DMSO-d₆) δ: 83.5 (C-2), 72.6 (C-3), 192.4 (C-4), 128.7 (C-5), 110.1 (C-6), 162.8 (C-7), 112.1 (C-8), 164.7 (C-9), 102.4 (C-10), 128.3 (C-1'), 115.1 (C-2'), 144.9 (C-3'), 145.6 (C-4'), 115.3 (C-5'), 119.4 (C-6')

설퍼레틴(C ₁₅ H ₁₀ O ₅ )

오렌지 판상 결정체

녹는점: >300℃

EI-MS (70 eV) m/z: 270.3(M⁺, [C₁₅H₁₀O₅]⁺) (Harborne, J. B. et al., Dictionary of Natural Products Vol. 10, p5716, Chapman & Hall, New York, 1994)

¹H-NMR(500MHz, DMSO-d₆) δ: 6.64 (1H, s, H-2), 7.72 (1H, d, J=8.5 Hz), 6.71 (1H, dd, J=1.7, 8.5 Hz, H-5), 6.75 (1H, d, J=1.7 Hz, H-8), 6.84 (1H, d, J=8.2 Hz, H-2), 7.45 (1H, d, J=1.9 Hz), 7.25 (1H, dd, J=2./0, 8.2 Hz)

¹³C-NMR(125 MHz, DMSO-d₆) δ: 111.9(C-2), 147.9(C-3), 181.7(C-4), 124.5(C-5), 111.9(C-6), 166.1(C-7), 98.3(C-8), 167.4(C-9), 113.2(C-10), 123.4(C-1'), 116.0(C-2'), 145.6(C-3'), 148.0(C-4'), 117.0 C-5'), 125.7(C-6')

실험예 1. 재료 및 방법

동물 및 처치

실험동물로는 (주)대한바이오링크(충북 음성)로부터 분양 받은 무게 200±10g의 웅성 스프라우그 도울리(Sprague - Dawley)계 흰쥐를 본 대학 동물사에서 1주일동안 적응시킨 후, 일정한 조건(온도: 20±2^oC, 습도: 50%, 명암: 12시간 명암주기 사이클)에서 사육한 후 사용하였으며, 옻나무의 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물 및 그로부터 분리된 푸시틴 및 설퍼레틴의 투여는 2주간 전처리하였고, 실험동물은 실험전 24시간 물만 주고 절식시켰다. 간섬유화 유도는 정상군을 제외한 군에 카운트라스(Kountras) 등의 방법(Kountras, J. et al.,Bri. J. Exp. Path., 65,pp305-312, 1984)에 따라 담도결찰을 하여 간섬유화를 유도하였으며, 대조약물로서는 우루소데옥시산(ursodeoxycholic acid(UCDA), 50mg/kg)을 사용하였다.

시료의 채취 및 효소원의 분리

실험동물을 이산화탄소 가스로 마취시킨 후, 복부정중선을 따라 절개하고 복부대동맥에서 혈액을 채취하였으며, 이 혈액을 3000rpm에서 10분간 원심분리하여 생화학적 검사에 사용하였다. 간조직은 생리식염수로 관류하여 혈액을 제거한 간을 적출하여 여지로 혈액 및 기타 부착물질을 제거하고 간의 일부는 히드록시프롤린 측정 및 지질과산화의 측정을 위하여 -70℃에서 보관하였으며, 나머지 간은 평량한 다음 조직 1g당 4배량의 0.1M 칼륨인산완충액(potassium phosphate buffer, pH 7.5)을 가하여 글래스 테프론 호모게나이저(glass teflon homogenizer)로 마쇄하였다. 이 마쇄액을 계통분리법에 따라 초원심분리하여 얻어진 시토졸 (cytosolic) 분획 및 마크로좀(microsomal) 분획을 효소원으로 사용하였으며, 상기의 모든 조작은 4℃ 이하에서 행하였다.

혈청생화학적 검사

아미노 트랜스페라제(AST, ALT, Cat. No 505-OP), 소르비톨 디히드로게나제 (SDH, Cat. No 50-UV), 총 빌리루빈(total bilirubin, 550-50P) 및 γ-글루타밀트랜스페라제(γ-GT, 545-A)의 측정은 시중에서 구입한 시그마사 제품(Sigma제 키트)을 사용하였다.

단백질 정량 및 통계처리

단백질의 정량은 로우리(Lowry) 등의 방법(Lowry, O. H., et al.,J. Biol.Chem.,193, pp265-275, 1951)에 준하여 소혈청 알부민(bovine serum albumin, Siger, Fr. V)을 표준품으로 측정하였다. 본 실험에서 얻어진 결과는 평균±표준편차로 표시하였고, 통계적 유의성 검증은 던칸의 다중범위시험법(Duncan's multiple range test)을 이용하였다.

실험예 2. 조직중의 총 콜라겐양 측정

간 조직내 히드록시 프롤린양은 자말(Jamall) 등의 방법(Jamall, I. S. and V.N. Finelli.,Anal. Biochem.,112,pp70-75, 1981)에 따라 간조직을 염산으로 가수분해시켜 이소프로필알콜을 넣고 클로라민(chloramine)-T로 산화시킨 후, 에르리히(Ehrlich) 반응용액(p-dimethylaminobenzaldehyde)으로 발색시켜 558nm에서 흡광도를 측정하였다.

담도를 결찰하여 간섬유화를 유도한 실험군에 옻나무의 분획 및 성분을 투여하고 간조직중 콜라겐의 함량을 실험한 결과, 정상군과 비교할 때 간섬유화를 유도하여 약 4.5배정도 증가하던 간섬유화의 지표인 간 조직중의 히드록시 프롤린의 양이 옻나무의 극성용매 가용추출물, 비극성용매 가용추출물 및 그로부터 분리된 푸시틴과 설퍼레틴을 2주간 투여함으로서 간섬유화의 유도로 억제되었으며, 특히, 옻나무의 성분인 설퍼레틴과 푸스틴이 각각 48% 및 34% 정도 현저하게 감소시킴을 확인할 수 있었다(도 1 참조).

실험예 3. 지질과산화 함량에 미치는 영향 측정

오카와(Ohkawa) 등의 방법(Ohkawa, H., N. Ohishi et al.,Anal. Biochem., 95, pp351-358, 1979)을 변경하여 지질과산화 함량에 미치는 옻나무 추출물 및 푸시틴, 설퍼레틴의 영향을 측정하였다.

간 조직 1g당 4배량의 0.1M 칼륨인산완충액(pH 7.4)을 가해 마쇄하였으며, 이 마쇄액에 동일한 완충액을 동량 가하여 3시간 전배양(preincubation)시키고, 8.1% SDS(sodium dodecyl sulfate)와 20% 아세테이트 완충액(acetate buffer, pH 3.5) 및 발색의 목적으로 0.8% 티오바르비튜릭산(thiobarbituric acid)을 가한 후 95℃에서 1시간 동안 반응시켜 실온에서 냉각하고,n-부탄올:피리딘(15:1)을 첨가하여 15분간 원심 분리하여 생성된 홍색의n-부탄올:피리딘층을 취하여 파장 532㎚에서 그 흡광도를 측정하여 표준곡선에서 그 함량을 간 조직 1g당 말론디알데히드 (malondialdehyde nmole)로 표시하였다.

담도를 결찰하여 간섬유화를 유도한 실험군에 옻나무의 추출물 및 푸시틴과 설퍼레틴을 투여하고 간조직중 지질과산화의 함량을 관찰한 결과, 약 5배 정도로 증가된 간 조직중의 지질과산화의 함량이 억제되었으며, 특히, 그 분리성분인 설퍼레틴 및 푸스틴이 각각 약 60% 및 47% 정도로 현저하게 지질과산화 함량을 감소시킴을 확인할 수 있었다(도 2 참조).

실험예 4. 각종 효소측정 실험

크산틴 옥시다제(Xanthine oxidase)의 활성 측정은 스트라이프(Stripe) 및 델라(Della)의 방법(Stirpe, F. and C. E. Della.,J. Biol. Chem., 244,pp3855-3863, 1969)을 사용하였으며, 알데히드 옥시다제(Aldehyde oxidase)의 활성 측정은 라자고팔란(Rajagopalan) 등의 방법(Rajagopalan, K. V., et al.,J. Biol. Chem., 237, pp922-928, 1962)에 준하여 실험하였다.

시료는 담도 간경화증 동물모델에게 매일 경구투여로 처치하였으며, 이 래트는 최종 시료투여 4시간 후에 두부절개하여 실험에 사용하였으며, 시험값은 8회 실험 평균치(±S.D)를 나타낸 것이다.

담도를 결찰하여 간섬유화를 유도한 실험군에 옻나무의 추출물과 그 분리성분인 푸시틴 및 설퍼레틴을 투여하고 혈중 생화학적 변동을 관찰한 실험 결과, 담도를 결찰하여 간섬유화를 유도한 군에서는 AST, ALT, SDH, γ-GT 활성 및 총빌리루빈의 양이 현저히 증가됨을 확인할 수 있었으며, 증가하던 혈중 생화학적 변동이 설퍼레틴, 푸스틴, 비극성용매 가용추출물 및 극성용매 가용추출물의 순으로 통계적으로 유의성있게 억제됨을 확인할 수 있었다(표 1 참조).

처치군	용량(mg/kg)	ALT	AST	SDH	γ-GT	t-빌리루빈
처치군	용량(mg/kg)	Karmen IU/ℓ	mU/㎖	㎎/㎗
정상군		21.9±2.98^d	59.3±7.31^e	17.4±3.11^d	29.6±2.90^d	0.53±0.08^d
대조군		40.6±3.29^a	280.7±21.5^a	34.9±4.14^a	65.9±3.18^a	7.27±0.98^a
UCM	250	35.2±2.98^b,c	220.4±18.6^b	29.6±2.99^b	55.5±2.97^b,c	6.18±1.17^a,b
UCE	250	33.7±3.11^c	190.8±20.1^c	25.3±3.27^b,c	48.3±2.25^b	5.58±0.67^b
푸스틴	10	30.6±2.54^c	181.3±16.2^c	24.7±2.55^b,c	40.8±3.12^b,c,d	5.14±0.49^b
설퍼레틴	10	24.1±2.16^d	100.4±13.8^d	20.5±1.98^c,d	36.9±3.03^b,c,d	3.89±0.47^c
UDCA	50	25.3±2.06^d	110.5±15.6^d	18.5±1.74^d	34.5±2.45^c,d	3.31±0.37^c
서로 상이한 데이터 윗첨자는 던칸의 새로운 다중 범위시험법에 의한 정상군으로부터(p<0.05) 중요한 수치를 의미함.

실험예 5. 관련 효소측정 실험

수퍼옥시드 디스무타제(Superoxide dismutase)의 활성 측정은 마크룬트(Marklund) 등의 방법(Marklund, S. and G. Marklund.,Eur. J. Biochem., 47, pp469-474, 1974)을 사용하였으며_,카탈라제(Catalase)의 활성 측정은 아에비(Aebi)의 방법(Aebi, H., Catalase in "Method of enzymatic analysis" (H. U. vergmeter, ed.), pp673, Academic press, New York, 1974)및 글루타치온 퍼옥시다제(Glutathione peroxidase)의 활성 측정은 파그리아(Paglia) 및 발렌타인 (Valentine)의 방법(Paglia, E. D. and W. N. Valentine, W. N.J. Lab. Clin. Med., 70,pp158-169, 1967)에 준하여 실험하였다.

시료는 담도간경화증 동물모델에게 매일 경구투여로 처치하였으며, 이 래트는 최종 시료투여 4시간 후에 두부 절개하여 실험에 사용하였으며, 시험값은 8회실험 평균치(±S.D)를 나타낸 것이다.

담도성 간 섬유화에 대한 간세포 자유 라디칼 소거제 효소의 영향을 확인한 실험 결과, 도 3 및 표 2에 나타난 바와 같이 정상군의 함량에 비하여 간섬유화를 유발하므로서 현저히 감소되던 수퍼옥시드 디스무타제의 활성이 옻나무의 추출물 및 그로부터 분리된 푸시틴과 설퍼레틴의 전처리로 증가되었으며, 이러한 결과는 글루타치온 퍼옥시다제 및 카탈라제의 활성에도 유사한 결과를 관찰할 수 있었다(도 3 및 표 2 참조).

군	용량(mg/kg)	활성
군	용량(mg/kg)	SOD^*	GP^**	Catalase^***
정상군		10.2 ± 0.78^a	256.3 ± 18.21^a	2.93 ± 0.45^a
대조군		5.67 ± 0.39^d	155.6 ± 21.20^d	1.62 ± 0.15^d
UCM	250	6.49 ± 0.54^c,d	183.7 ± 19.39^c,d	1.89 ± 0.21^c,d
UCE	250	6.82 ± 0.37^c	197.1 ± 15.28^b,c	2.18 ± 0.25^b,c
푸스틴	10	7.28 ± 0.33^c	205.4 ± 10.42^b,c	2.24 ± 0.36^b,c
설퍼레틴	10	8.26 ± 0.43^b	210.6 ± 15.99^b,c	2.59 ± 0.27^a,b
UDCA	50	8.87 ± 0.58^b	220.2 ± 13.27^b	2.64 ± 0.20^a,b
^; 수퍼옥시드디스무타제 활성: 유니트^#/㎎ 단백질 /분^#; 1 단위는 3.0 ㎖ 반응 용량에서 pH 7.8, 25℃ 크산틴과 크산틴 옥시다제와의 결합계에서 시토크롬 C를 환원하는 속도를 50% 저해.^; 글루타치온퍼옥시다제: 산화된 NADPH nmole / mg 단백질/분^**; 감소된 H₂O₂nmole / mg 단백질/분

실험예 6. 독성 실험

독성 정도를 알아보기 위해, 150±5g의 ICR계 마우스(중앙실험동물)와 235±10g의 특정병원부재(SPF) 스프라그-도올리(Sprague Dawley, Biogenomics사)래트를 각각 3마리씩 3군으로 나누어 본 발명의 실시예 2 및 실시예 3의 화합물들을 각각 20mg/㎏, 10mg/㎏, 1mg/㎏의 용량으로 복강투여한 후 24시간동안 독성여부를 관찰하였다.

실험 결과, 3군 모두에서 사망한 예를 전혀 관찰할 수 없었고, 체중 증가, 사료 섭취량 등에서 외견상 대조군과 별다른 증상을 찾아볼 수 없었다.

본 발명의 화합물들은 아래와 같은 제형으로 투여할 수 있으며, 아래의 제제 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 이에 의해 본 발명의 내용이 제한되는 것은 아니다.

제제예 1. 주사제제의 제조

실시예 3의 푸스틴 100 ㎎

소디움 메타비설파이트3.0 ㎎

메틸파라벤0.8 ㎎

프로필파라벤0.1 ㎎

주사용 멸균증류수적량

상기의 성분을 혼합하고 통상의 방법으로 최종 부피가 2㎖이 되도록 제조한 후, 2㎖ 용량의 앰플에 충전하고 멸균하여 주사제를 제조한다.

제제예 2. 정제의 제조

실시예 3의 푸스틴 200 ㎎

유당100 ㎎

전분100 ㎎

스테아린산 마그네슘 적량

통상의 정제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 타정하여 정제를 제조한다.

제제예 3. 캡슐제의 제조

실시예 3의 푸스틴100 ㎎

유당50 ㎎

전분50 ㎎

탈크2 ㎎

스테아린산 마그네슘적량

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.

제제예 4. 액제의 제조

실시예 3의 설퍼레틴1000 ㎎

설탕20 g

이성화당20 g

레몬향적량

정제수를 가하여 전체 1000㎖로 맞추었다. 통상의 액제의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 갈색병에 충전하고 멸균시켜 액제를 제조한다.

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

제조예 5. 혼합 액제의 제조

실시예 2의 추출물 1000 ㎎

구연산1000 ㎎

올리고당100 g

매실농축액2 g

타우린1 g

레몬향적량

정제수를 가하여 전체 100 ㎖

통상의 액제의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 갈색병에 충전하고 멸균시켜 액제를 제조한다.

제제예 6. 건강 식품의 제조

실시예 2의 추출물 1000 ㎎

비타민 혼합물적량

비타민 A 아세테이트70 ㎍

비타민 E1.0 ㎎

비타민 B₁0.13 ㎎

비타민 B₂0.15 ㎎

비타민 B₆0.5 ㎎

비타민 B₁₂0.2 ㎍

비타민 C10 ㎎

비오틴10 ㎍

니코틴산아미드1.7 ㎎

엽산50 ㎍

판토텐산 칼슘0.5 ㎎

무기질 혼합물적량

황산제1철1.75 ㎎

산화아연0.82 ㎎

탄산마그네슘25.3 ㎎

제1인산칼륨15 ㎎

제2인산칼슘55 ㎎

구연산칼륨90 ㎎

탄산칼슘100 ㎎

염화마그네슘24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

제제예 7. 건강 음료의 제조

실시예 2의 추출물 1000 ㎎

구연산1000 ㎎

올리고당100 g

매실농축액2 g

타우린1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.

본 발명의 옻나무의 비극성용매 가용추출물, 극성용매 가용추출물 및 그로부터 분리된 푸스틴 및 설퍼레틴은 간섬유화 발생하는 지표인 간 조직중의 히드록시 프롤린의 양, 지질과산화의 함량, AST, ALT, SDH, γ-GT 활성 및 총빌리루빈의 양을 유의성있게 감소시킴으로써 각종 간질환의 치료 및 예방에 유용하게 사용될 수 있다.

Claims

옻나무 비극성용매 가용추출물 또는 극성용매 가용추출물을 유효성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 함유하는 간경화증의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물.
제 1항에 있어서, 상기 비극성용매는 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트로부터 선택된 비극성 용매인 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 극성용매는 아세톤, 에탄올, 메탄올로부터 선택된 극성 용매인 조성물.
푸스틴(fustin)을 유효성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체를 함유하는 간질환 치료용 약학 조성물.
설퍼레틴(sulfuretin)을 유효성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체를 함유하는 간질환 치료용 약학 조성물.
제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물의 1일 투여량이 체중 1 kg당 5 mg 내지 500 mg인 약학 조성물.
제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 조성물 총 중량에 대하여 0.1 ~ 20 중량%로 포함하는 조성물.
간경화증 예방효과를 나타내는 옻나무 극성용매 또는 비극성용매 가용추출물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 건강보조식품.
제 8항에 있어서, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 건강보조식품.