JPS63253013A - メラニン生成抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔イ〕発明の目的 本発明は、メラニン生成抑制剤に関する。

（産業上の利用分野） 本発明は、例えば、化粧品や医薬品、医薬部外品などの
外用塗布料の処方中に配合すれ＋４　　皮膚（肌）のシ
ミとり、又はシミ防止効果が得られる。

（従来の技術） メラニン生成抑制剤としては、例えば、システィン、グ
ルタチオンなどのＳＨ基製剤、アスコルビン酸、プラセ
ンター抽出エキスなどが知られてい　る。

本発明に用いられる主役物質ミ　バイカレイン又は、バ
イカリンである。これらの物質棗　コガネバナの機中に
含まれていることが知られている。

コガネバナの根Ｉｔ、　　漢方又は日周では「オウゴン
」と呼ばれている生薬の一つである。バイカレインやバ
イカリン、あるいＩＬ　　オウゴンからの抽出物の応用
に関する研究は古くから行われているが。

技術文献から、外用塗布剤への利用について調査してみ
ると１例えば、次表（第１表）に示すととくの刊行物が
ある。第１表中に（＊）を附したものは１本発明者らに
係る発明である。

第１表　　オウゴンに関する公知刊行物（発明が解決し
ようとする問題点） メラニン生成抑制剤として、外用塗布を主体となし、肌
（皮膚）化粧料中に用いられる薬剤としては１例えば、
グルタチオン、システィンなどのチオール系化合物の応
用が知られている。しかし、異臭が強い上、酸化されや
すく化粧料への製剤化上に問題があった。また、アスコ
ルビン酸及びその誘導体も用いられてきたが、水溶液中
では不安定である欠点があった。

一方、本発明が出発原料となすオウゴンに係る刊行物を
調査してみると１例え＋ｆ−特開昭５９−７３５０９号
、特開昭６０−２１４７２１号、特開昭６０−２５８１
０４号、特開昭６１−１２２２０９号には、その抽出物
を用いて、保湿性及びシミ防止効果があることが示され
ており、化粧料として用いることが開示されている。

また、特開昭６２−１００６号には、美白的作泪につい
て、示されているが、いかなる成分によるかは開示され
てはおらず、これまで、全く不明であった。

一方１本発明者らは、すでに、特開昭６１−５０９１８
号、特開昭６１−５０９２１号、特開昭６１−１７０５
５１号などにおいて、バイカレイン又はバイカリンなど
に関する応用について研究を行ってきた。

そして、今回さらに研究を続けた結果、バイカレインや
バイカリンが、メラニン生成抑制作用を有する主役物質
であることを見い出すと共に、さらに生成されたメラニ
ン色素に対し、還元脱色作用を有することを突き止める
ことが出来たのである。

すなわち１本発明による物質棗　生化学的なメラニンの
生成機構の一つとして知られる。チロシナーゼの活性化
を抑制することにより有色メラニンの生成量を防ぐと共
に、出来てしまった有色メラニンに対して、これを無色
化する両作用があることがわかったのである。

〔口〕発明の構成 （１）バイカレイン、又は、バイカリンの単独、（２）
バイカレインとバイカリンの併用、　（３）パイカレイ
ン含有エキス、又は、バイカリン含有エキスの単独、（
４）バイカレイン含有エキスとバイカリン含有エキスの
併用、上記（１）〜（４）のいずれかを配合すること登
特徴とする、メラニン生成抑制剤にある。

具体的には、以下に実験例等をもって詳記する。

ｒ実験例１」 ３７℃の恒温槽中で、チロシンに、検体又は標準液を加
え、さらに−チロシナーゼを２０分間作用させ、生成さ
れたドーパクロムを４７５ｎｍの吸光度計により測定す
る方法を採用した。

反応組成は１次に示すごとくである。

（反応組成） Ｌ−チロシン　（０，３ｍｇ／ｍｌ）　・−＝＝４．０
ｍｌマツクルパイン・バッフｙ　−（ｐ［，５）・１．
０ｍ１ａ準液又は検体・・・・・・・・・・・・・・・
・・・・・・・Ｌ、　Ｇｍ　ｌチロシナーゼ（２５００
ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）　・・・・・・・０．１ｍ１（実験
に用いる検体） バイカレイン（−丸ファルコス製） 第２表中の検体Ａは、バイカレイン０．３％含有７０％
エタノール溶液と１，３−ブチレングリコールの混合液
とした。

検体Ｂは、検体Ａと精製水の混合液とした。

検体Ｃは、検体Ａと精製水の混合液とした。

標準液Ａは、　７０％エタノール溶液と１．３−ブチレ
ングリコールの混合液とした。

標準液Ｂは、標準液Ａと精製水の混合液とした。

標準液Ｃは、標準液Ａと精製水の混合液とした第２表　
チロシナーゼ活性抑制作用 「実験例２」 前記の実験例１と同様な方法で行う。

第３表中の検体として、ノ（イカレイン５０％含有エキ
スを（エタノール＝１．３−ブチレングリコール：水＝
５Ｈ３ニア混合液）で溶解した。

標準液は、エタノール＝１．３−ブチレングリコール　
：水＝＝　５　：３　：’ｌの混合液とした。

第３表　チロシナーゼ活性抑制作用 ［実験例３Ｊ 前記の実験例１と同様な方法で行う。

（反応組成） Ｌ−チロシン　（０，３Ｉｌ１ｇ／ｍｌ）・・・・・・
・・−・１．０ｍｌマツクルパイン・バクファー（ＰＨ
６，５）・１．０ｗｌ標準液又は検体　・・・・・・・
・・・・・・・・・・・・・・０．５ｍｌチロシナーゼ
（２５００ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）　・・・・・＝０．２ｍ
ｌ第４表中の検体として、バイカレインをメタノール４
≠に溶解して用いた。

標準液は、　メタノール溶液とした。

第４表　チロシナーゼ活性抑制作用 実験例１〜３のチロシナーゼ活性抑制作用の成績結果を
見ると、パイ力しイン量として、約０．５ｍｇのパイ力
しイン量を有していれば、抑制率として、約７０％を示
す値となった。

ｒ実験Ｎ４Ｊ ３７℃の恒温槽中で、チロシンに、チロシナーゼを２０
分間作用させることによりドーパクロムが生成される。

そこで１次に、検体又は標準液を加え、１分後、４７５
ｎｍの吸光度計により測定する方法を採用した。

（反応組成） Ｌ−チロジ：／　　（０，３ｔＨ／ｗｒｌ）　・・・・
・、・・・・・Ａ、０ｔａＬマツクルパイン・バッファ
ー（ｐｉ（Ｇ、　Ｓ）　・１．０１ａｌ標準液又は検体
　・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１．０
ｍｌチロシナーゼ（２５００ｕｎＨｓ／ｍｌ）　＝＝・
・・Ｏ，１ｍｌ第５表中の検体として、バイカシイン５
０％含有エキスを（エタノール＝１，３−ブチレングリ
ゴール：水＝５：３ニア混合液）で溶解した。

標準液は、エタノール　：　１．３−ブチレングリコー
ル：水＝　５　：３　ニアの混合液とした。

第５表　還元脱色作用 ［実験例５」 前記に記載した実験例４と同様な方法で行う。

尚、第６表中の検体Ａとは、バイカレインをメタノール
＃捲に溶解して用いた。

検体Ｂとは、バイカシ４２５０％含有エキスをメタノー
ル量量に溶解して用いた。

標準液Ａは、　メタノール溶液とした。

標準液Ｂは、　メタノール溶液とした。

第６表　還元脱色作用 実験例４〜５の還元脱色作用は、いわゆる、チロシンが
チロシナーゼにより、メラニン重合体となる反応途中で
あるドーパクロム（赤色〜褐色を呈する）を生成した後
、このドーパクロムを還元脱色する比率を求めたもので
ある。

還元脱色率としては、それほど、高い値ではないが、　
ドーパ−クロムが、さらに、進行してメラニン重合体と
なった時点でも、メラニン重合体を脱色することがうか
がえた。

「実験例６」 ３７°Ｃの恒温槽中で、チロシンに、チロシナーゼを、
１０時間以上反応させることによって、メラニンの沈殿
物が生成されてくる。ところが、この反応組成液中に、
バイカレインを添加すると。

沈殿物（メラニン重合体）を生成しないことが確認され
た。第１図は１両溶液を、ｌ　Ｏｍ　１容器のビーカー
に入れ、その状悪な示すものであるが。

これは、直接的に肉眼でも確認出来る。尚、反応組成は
１次に示すごとくである。

Ｌ−チロシン　（０，３ｍｇ／ｍｌ）　・−・−・−＝
−・１．ｏｎｌマツクルパイン・バッファー（ＰＨ６，
５）・１．　Ｏ＋ａｌ検体又は標準液（メタノール溶液
）・・・・０．５腸１を使用。

「実験例７」 健康な男子を対象として選び、その背部の皮膚の左右に
、大きな厚みのある黒色布を用いて、背部の左右対称の
位置に光線が直接当るように、直径３ｃｍの円形の穴を
２カ所設置し、あらかじめ被覆しておく。

次に、紫外線（東芝製蛍光ランプ：　　ＦＬ−２０ＳＥ
及びＦＬ−２０ＢＬＢ）を、それぞれ３燈並列に接続し
、背部皮膚上から、約１５ｃｍの距離から、一定時間照
射して、これに対する塗布効果を見ることにした。

つまり、人工的に黒化形成のステップである。

紅斑を作り、これによって形成される皮膚の基底層にあ
るメラノサイトによって生成されるメラニンの色素の表
皮層への移行に伴う皮膚の色調変化を、無照射区の皮膚
の色と、肉眼的観察によって対比し、評価する方法を採
用した。

塗布試料は１日本薬局法に定める親木軟膏の処方に準拠
して、バイカレイン（−丸ファルコス１り０．３％を配
合したものを用いた。塗布は１日２〜３回となし、塗布
時間帯は特に指定せず、おおむね朝と晩を必須条件とし
て、４０日間の連続塗布により行なった。

塗布部は、背部照射部位の左側に、バイカレインを添加
した軟膏を、右側に無添加軟膏を用いて実施した。

その成績結果Ｌ　　第７表に示すごとく肌に対する黒化
形成を抑制することがわかる。

尚、紫外線の波長域！　　使用光源から、２７０〜３２
０　ｎ　ｍ、　　及び３２０〜４００ｎｍの間にある。

つまり、紫外線照射後に形成される紅斑の状態に対し、
ただちに塗布を続けることによって、背部の左右の黒化
（黒色メラニン色素）が、いかに抑制できるか、無添加
軟膏と対比して経過を観察したのが第７表である。

第７表　皮膚黒色メラニン色素生成抑制効果前記の実験
例１〜７において国　バイカレインを用いて行ったが、
糖が結合した状態にあるノ（イカリンについても、同様
の作用を示す、又、）くイカレインやバイカリンを高含
有するところの抽出物にあっても、同様な作用が認めら
れる。

但し、バイカリンで！瓢　その作用はバイカレインに較
べ、遅効性である。つまり、糖が切断されたアグリコン
となって、はじめてメラニン生成の抑制作用を発揮する
ことが特長である。したがって、速効性を得るには、バ
イカレインが有利であり、遅効性とするには、そのアグ
リコンであるバイカリンを用い、又１両機能を保持させ
るには。

併用することが良い、バイカレインに結合した糖は、生
体内中のグルクロニダーゼ、あるいは、熱処理などによ
りて切断され、あるいは苛酷な紫外線等に長時間暴露さ
れることなどによっても、バイカリンへと反応が進む、
したがって、例えば。

肌用のクリームや乳液など、加熱処理が加わるような化
粧料などでは、バイカリンを処方中に用いることも良い
。

（ハ）発明の効果 本発明は、バイカレイン又は、バイカリンをメラニン生
成抑制剤として用いる。新規な利用方法に関するもので
あるが、とくに純品を用いる必要はなく、オウゴンから
抽出されたエキスの内、バイカレイン又は、バイカリン
を含有する抽出エキスを用いても良い。

次に、本発明による効果について、その作用機序を説明
すれば、第２図に示すととくの生化学的反応機構からは
、　（Ａ）とＣＢ）に係わるチロシナーゼの活性化を抑
制する一方、同時に、生成された。有色物質（メラニン
前駆物質）〔３］〜〔５］さらに、　〔６〕で示される
有色メラニン色素については、これを還元することによ
って、ｊＡ色の物質となす１両作用があることである。

すなわち、実験例１〜３で示したチロシナーゼ活性抑制
作用機序について、考案を加えてみると。

チロシナーゼ酵素タンパクへの結合（拮抗阻害、非拮抗
阻害を含む）による抑制作用と、酵素の活性化に必要な
金属（鉄と銅）とキレート化合物を作り一＊素反応に必
要な鉄イオン、銅イオンを取り、除き、酵素反応を抑制
させる作用（チロシナーゼ活性抑制作用）があると考え
られる。

又、実験例４〜７で示した還元脱色作用は、すでに、生
成されてしま９たドーパクロム（赤色〜褐色を呈する）
を、還元脱色することであり、このために、＊色メラニ
ンの生成は抑制される。

そして、ドーパクロムより、さらに反応が進行し、メラ
ニンを生成しても、第１図に示すととくの還元脱色作用
を発揮することとなる。

実験例１〜７で示した成績結果より１本発明は、チロシ
ナーゼ活性抑制作用な墳するばかりでするところのメラ
ニン生成抑制剤である。

このように、メラニン、ドーパクロム、ドーパキノンな
どの生成する前段階と、生成された後の段階を抑えるこ
との出来る物質は、きわめて限られたものしか知られて
おらず１本発明は化粧料等への利用に当って望ましいも
のと考えられる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、メラニン沈澱状態を示す、Ａは、標準液、Ｂ
は、バイカレインを添加したときの状態て有色メラニン
が確認できないことを示す。 尚、Ｂに示す、バイカレイン量は、０．１ｍｇを添加し
たときの状態である。 第２図は、メラニンが生成する化学的反応機構である。 式である。 第４図は、バイカレイン（ＣＩ％Ｈ１゜ＯＳ）の構造式
である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 〔１〕 （１）バイカレイン又は、バイカリンの単独、（２）バ
   イカレインとバイカリンの併用、（３）バイカレイン含
   有エキス、又は、バイカリン含有エキスの単独、（４）
   バイカレイン含有エキスとバイカリン含有エキスの併用
   、上記（１）〜（４）の内、そのいずれかの成分を配合
   することを特徴とする、メラニン生成抑制剤。