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Laboratorio (Resumen)

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MICROSCOPIO OPTICO COMPUESTO PERMITE VER LO QUE EL OJO HUMANO NO

PUEDE(MEDIDA OJO HUMANO MIN 0,1MM)


IMPORTANCIA DE APRENDER EL USO DEL MICROSCOPIO:
-Diagnostico,aprendizaje,investigación científica,monitoreo de
tratamientos,desarrollo de farmacos
COMPETENCIAS : Identificar las partes del microscopio óptico y reconoce los
diferentes componentes y sus funciones.
Parte mecánico y sus componentes:
• Pie o base: Estabilidad
• Columna o brazo: estructura metálica, sostiene.
• Platina: placa horizontal, coloca el portaobjetos con la muestra, sujetada por un
sistema de pinzas(desliza el portaobjetos en dos sentidos perpendiculares) Posee un
agujero centra(paso de la luz)
• Diafragma: entre la fuente de luz y el condensador. Membrana metálica que se abre
o cierra regula la intensidad de luz y elimina rayos periféricos que distorsionan.
• Tornillos macro y micrométrico desplazan la platina en un sentido vertical (posibilita
el enfoque). El tornillo macrométrico (ajuste grueso-mancha)(cm, mm). El
micrométrico (ajuste fino-nitidez)(μm)
• Revolver: carga lentes y posición de estos
• Cabezal: soporta el revólver y los oculares(mono,binocular,trinocular-possen
adaptador para cámara fotográfica)
 Perilla coaxial: Al moverlo se desplaza la muestra para centrarlo
Parte óptico y sus componentes:
• Condensador: Lente o sistema de lentes de forma cónica que posee un sistema de
dos lentes convergentes que utilizan (EFICIENTE/centra/condensa los rayos de luz)
. • Ocular: lente o lentes más cercana al ojo del observador, en un tubo monocular o
dos tubos binocular. Las lentes llevan impreso el número de aumentos: 6X, 10X y 15X;
El más común es el de 10X. (“X” se lee “por”).
• Objetivo: lente más cercana al objeto. En el revólver existen cuatro o cinco objetivos
Estos llevan escrito el aumento que puede alcanzarse, usualmente son de 4X, 10X, 40X,
y 100X. Los cuatro primeros se denominan lentes secos y la última, lente húmedo o de
inmersión, ya que debe sumergirse en aceite de origen sintético cuyo índice de
refracción sea próximo al del vidrio.
 Fuente de luz o lámpara. Haces natural o artificial, cuando es natural (solar) un
espejo situado en la base del microscopio recoge la luz del medio y la refleja a través
del objeto y del sistema de lentes. La luz artificial la constituye generalmente un foco
de luz halógena ubicado en el microscopio y conectado a un circuito eléctrico de bajo
voltaje (6 a 12V).
CONCEPTOS BÁSICOS:
1. Aumento total (AT): es la imagen obtenida que se obtiene al multiplicar el
aumento del lente objetivo X lente ocular. (4x, 10x, 40x y 100x) X (10X). =_x
2. Poder de resolución (PR): es la capacidad de poder distinguir dos puntos
muy próximos como separados.
ENFOQUE
1. Asegúrese primero de que el microscopio se encuentre sobre una base y
conectado
2. Utilice siempre el objetivo de menor aumento (4X)
3. Encienda la fuente de luz, lleve el condensador a una distancia de 1 a 2 mm
de la platina
4. diafragma esté abierto y el objetivo perpendicular a la platina.
5. Coloque una de las láminas preparadas sobre la platina y asegúrela con las
pinzas
6. Procure que la muestra que va a ser observada se encuentre en el centro
7. Gire el tornillo macrométrico hasta obtener una distancia de 1 a 2 cm entre
el objetivo y la lámina. ESTA OPERACIÓN DEBE HACERLA SIN COLOCAR SUS
OJOS SOBRE EL OCULAR.
8. Ahora coloque los ojos sobre los oculares, ajuste el sistema de binoculares a
su distancia , de modo que observe un solo y gran campo de luz.
9. Siga moviendo la platina hacia arriba utilizando el tornillo macrométrico
hasta que visualice la muestra ENFOQUE GRUESO.
10. Gire con los dedos pulgar e índice de ambas manos el tornillo micrométrico
NITIDEZ
11. Rote el revólver para cambiar de objetivo.
12. Manipule el tornillo micrométrico y enfoque la nueva muestra
13. En el caso de que use el objetivo de inmersión, al enfocar con40X, previo al
cambio con el objetivo de 100X, se enfoca usando el tornillo micrométrico
con mucho cuidado y el aceite de inmersion
PROCEDIMIENTO Preparación de muestras:
• Tomar una lámina portaobjeto limpia, la lámina portaobjeto y cubreobjeto siempre
debe tomarlos por los bordes usando los dedos pulgar e índice.
• Con una navaja cortar una lámina delgada de corcho, colocar una lámina
cubreobjeto sobre el corcho. Enfocar a 40X Esquematizar a 400X.
• Colocar esta vez la letra “e” minúscula recortada de un diario cualquiera,volviendo
hacer todos los pasos. Asegurarse de colocar la letra como usted la lee (e). Enfocar a
40X, 100X y 400X. Esquematizar a 40 y 100X.
TIPOS DE MICROSCOPÍA (continuación)
COMPETENCIAS 1. Reconocer la importancia de los diferentes tipos de microscopio.
2. Conocer las características del microscopio de campo oscuro, contraste de fases,
fluorescencia y microscopios electrónicos, en el estudio de los sistemas biológicos.
3. Reconocer el impacto que produjo en el estudio de los sistemas biológicos el
desarrollo de la microscopia electrónica.
MARCO TEÓRICO El uso de determinados componentes colocados en el condensador
o en los objetivos se interponen al haz luminoso emitidos por la lámpara, filtrando u
obstaculizando la luz y dan lugar a los distintos tipos de microscopía óptica.

MICROSCOPIO UTILIDAD COMO? TIPO


OPTICO CAMPO Para observar Contraste,fon OPTICA O LUMINOSA
CLARO muestras d blanco (COSAS MAS GRANDES
(muertos) teñidas(colores MAYOR A 100NM)
) Se basa en la luz
OPTICO CAMPO Observar Fondo negro espectro de luz
OSCURO materia viva y visible(fotones)
(vivos) no se tiñe( 2
colores)porque
se distorsiona
su
visualización.
OPTICO DE Para facilitar la manipulan
CONTRASTE DE visualización físicamente
FASES de estructuras los haces
(brillante internas de luminosos
alrededor) muestras vivas seleccionando
no teñidas parte de las
(fondo ondas de las
plateado que se
verde) compone
dicho haz,
provoca
imagen
contrastada
de la muestra
sin teñirla
OPTICO DE Observar Lampara que
FLUORECENCIA(bril estructuras emite haz
lan-muertas) internas luminoso
específicas fuera del
mediante la rango de la luz
utilización de visible filtra
fluorocromos o los haces
anticuerpos poder
marcados. manejar la
longitud de
onda muestra
determinada
mediante
filtros. el
microscopio
de
fluorescencia
más utilizado
epifluorescen
cia,
OPTICO DE Examinar virus Los haces de microscopio
TRANSMICION(cort o la electrones se electronico(a traves de
e fino histologicos- ultraestructura dirigen hacia electrones)
muerta.blanco y interna de la muestra (atomo,bioelemento)
negro) cortes que se desea 1A
delgados de aumentar y
células uno de estos
(aumento de electrones
10000 - que es
100000X)millo emitido por la
nes de veces lámpara
rebota o es
absorbido por
el objeto y
otros la
atraviesan
formando una
imagen
aumentada
ELECTRONICO DE Estudiar las las imágenes
BARIDO(ve características que se crean
relieves,3 de las es una imagen
dimensiones,muert superficies ampliada de
a) externas de la superficie
organismos, no necesario
células y virus. realizar un
Su corte del
funcionamient objeto en
o se basa en capas, sino
recorrer la que se puede
muestra con colocar un
un haz muy fragmento o
concentrado la muestra
de electrones completa
pueden provee una
ampliar los imagen punto
objetos por punto
200.000 veces.

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