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MICROSCOPIO OPTICO COMPUESTO PERMITE VER LO QUE EL OJO HUMANO NO
PUEDE(MEDIDA OJO HUMANO MIN 0,1MM)
IMPORTANCIA DE APRENDER EL USO DEL MICROSCOPIO: -Diagnostico,aprendizaje,investigación científica,monitoreo de tratamientos,desarrollo de farmacos COMPETENCIAS : Identificar las partes del microscopio óptico y reconoce los diferentes componentes y sus funciones. Parte mecánico y sus componentes: • Pie o base: Estabilidad • Columna o brazo: estructura metálica, sostiene. • Platina: placa horizontal, coloca el portaobjetos con la muestra, sujetada por un sistema de pinzas(desliza el portaobjetos en dos sentidos perpendiculares) Posee un agujero centra(paso de la luz) • Diafragma: entre la fuente de luz y el condensador. Membrana metálica que se abre o cierra regula la intensidad de luz y elimina rayos periféricos que distorsionan. • Tornillos macro y micrométrico desplazan la platina en un sentido vertical (posibilita el enfoque). El tornillo macrométrico (ajuste grueso-mancha)(cm, mm). El micrométrico (ajuste fino-nitidez)(μm) • Revolver: carga lentes y posición de estos • Cabezal: soporta el revólver y los oculares(mono,binocular,trinocular-possen adaptador para cámara fotográfica) Perilla coaxial: Al moverlo se desplaza la muestra para centrarlo Parte óptico y sus componentes: • Condensador: Lente o sistema de lentes de forma cónica que posee un sistema de dos lentes convergentes que utilizan (EFICIENTE/centra/condensa los rayos de luz) . • Ocular: lente o lentes más cercana al ojo del observador, en un tubo monocular o dos tubos binocular. Las lentes llevan impreso el número de aumentos: 6X, 10X y 15X; El más común es el de 10X. (“X” se lee “por”). • Objetivo: lente más cercana al objeto. En el revólver existen cuatro o cinco objetivos Estos llevan escrito el aumento que puede alcanzarse, usualmente son de 4X, 10X, 40X, y 100X. Los cuatro primeros se denominan lentes secos y la última, lente húmedo o de inmersión, ya que debe sumergirse en aceite de origen sintético cuyo índice de refracción sea próximo al del vidrio. Fuente de luz o lámpara. Haces natural o artificial, cuando es natural (solar) un espejo situado en la base del microscopio recoge la luz del medio y la refleja a través del objeto y del sistema de lentes. La luz artificial la constituye generalmente un foco de luz halógena ubicado en el microscopio y conectado a un circuito eléctrico de bajo voltaje (6 a 12V). CONCEPTOS BÁSICOS: 1. Aumento total (AT): es la imagen obtenida que se obtiene al multiplicar el aumento del lente objetivo X lente ocular. (4x, 10x, 40x y 100x) X (10X). =_x 2. Poder de resolución (PR): es la capacidad de poder distinguir dos puntos muy próximos como separados. ENFOQUE 1. Asegúrese primero de que el microscopio se encuentre sobre una base y conectado 2. Utilice siempre el objetivo de menor aumento (4X) 3. Encienda la fuente de luz, lleve el condensador a una distancia de 1 a 2 mm de la platina 4. diafragma esté abierto y el objetivo perpendicular a la platina. 5. Coloque una de las láminas preparadas sobre la platina y asegúrela con las pinzas 6. Procure que la muestra que va a ser observada se encuentre en el centro 7. Gire el tornillo macrométrico hasta obtener una distancia de 1 a 2 cm entre el objetivo y la lámina. ESTA OPERACIÓN DEBE HACERLA SIN COLOCAR SUS OJOS SOBRE EL OCULAR. 8. Ahora coloque los ojos sobre los oculares, ajuste el sistema de binoculares a su distancia , de modo que observe un solo y gran campo de luz. 9. Siga moviendo la platina hacia arriba utilizando el tornillo macrométrico hasta que visualice la muestra ENFOQUE GRUESO. 10. Gire con los dedos pulgar e índice de ambas manos el tornillo micrométrico NITIDEZ 11. Rote el revólver para cambiar de objetivo. 12. Manipule el tornillo micrométrico y enfoque la nueva muestra 13. En el caso de que use el objetivo de inmersión, al enfocar con40X, previo al cambio con el objetivo de 100X, se enfoca usando el tornillo micrométrico con mucho cuidado y el aceite de inmersion PROCEDIMIENTO Preparación de muestras: • Tomar una lámina portaobjeto limpia, la lámina portaobjeto y cubreobjeto siempre debe tomarlos por los bordes usando los dedos pulgar e índice. • Con una navaja cortar una lámina delgada de corcho, colocar una lámina cubreobjeto sobre el corcho. Enfocar a 40X Esquematizar a 400X. • Colocar esta vez la letra “e” minúscula recortada de un diario cualquiera,volviendo hacer todos los pasos. Asegurarse de colocar la letra como usted la lee (e). Enfocar a 40X, 100X y 400X. Esquematizar a 40 y 100X. TIPOS DE MICROSCOPÍA (continuación) COMPETENCIAS 1. Reconocer la importancia de los diferentes tipos de microscopio. 2. Conocer las características del microscopio de campo oscuro, contraste de fases, fluorescencia y microscopios electrónicos, en el estudio de los sistemas biológicos. 3. Reconocer el impacto que produjo en el estudio de los sistemas biológicos el desarrollo de la microscopia electrónica. MARCO TEÓRICO El uso de determinados componentes colocados en el condensador o en los objetivos se interponen al haz luminoso emitidos por la lámpara, filtrando u obstaculizando la luz y dan lugar a los distintos tipos de microscopía óptica.
MICROSCOPIO UTILIDAD COMO? TIPO
OPTICO CAMPO Para observar Contraste,fon OPTICA O LUMINOSA CLARO muestras d blanco (COSAS MAS GRANDES (muertos) teñidas(colores MAYOR A 100NM) ) Se basa en la luz OPTICO CAMPO Observar Fondo negro espectro de luz OSCURO materia viva y visible(fotones) (vivos) no se tiñe( 2 colores)porque se distorsiona su visualización. OPTICO DE Para facilitar la manipulan CONTRASTE DE visualización físicamente FASES de estructuras los haces (brillante internas de luminosos alrededor) muestras vivas seleccionando no teñidas parte de las (fondo ondas de las plateado que se verde) compone dicho haz, provoca imagen contrastada de la muestra sin teñirla OPTICO DE Observar Lampara que FLUORECENCIA(bril estructuras emite haz lan-muertas) internas luminoso específicas fuera del mediante la rango de la luz utilización de visible filtra fluorocromos o los haces anticuerpos poder marcados. manejar la longitud de onda muestra determinada mediante filtros. el microscopio de fluorescencia más utilizado epifluorescen cia, OPTICO DE Examinar virus Los haces de microscopio TRANSMICION(cort o la electrones se electronico(a traves de e fino histologicos- ultraestructura dirigen hacia electrones) muerta.blanco y interna de la muestra (atomo,bioelemento) negro) cortes que se desea 1A delgados de aumentar y células uno de estos (aumento de electrones 10000 - que es 100000X)millo emitido por la nes de veces lámpara rebota o es absorbido por el objeto y otros la atraviesan formando una imagen aumentada ELECTRONICO DE Estudiar las las imágenes BARIDO(ve características que se crean relieves,3 de las es una imagen dimensiones,muert superficies ampliada de a) externas de la superficie organismos, no necesario células y virus. realizar un Su corte del funcionamient objeto en o se basa en capas, sino recorrer la que se puede muestra con colocar un un haz muy fragmento o concentrado la muestra de electrones completa pueden provee una ampliar los imagen punto objetos por punto 200.000 veces.