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    PCR y Electroforesis

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    DELGADO ZEVALLOS ANGIE MELISSA
    La PCR y la electroforesis son técnicas utilizadas para amplificar y separar fragmentos de ADN. La PCR permite duplicar grandes cantidades de pequeños fragmentos de ADN utilizando enzimas y ciclos de calentamiento y enfriamiento. La electroforesis usa un gel y una corriente eléctrica para separar los fragmentos de ADN cortados por enzimas de restricción de acuerdo con su tamaño, produciendo un patrón de bandas único que puede usarse para identificar muestras de ADN.

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    PCR y Electroforesis

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    La PCR y la electroforesis son técnicas utilizadas para amplificar y separar fragmentos de ADN. La PCR permite duplicar grandes cantidades de pequeños fragmentos de ADN utilizando enzimas y ciclos de calentamiento y enfriamiento. La electroforesis usa un gel y una corriente eléctrica para separar los fragmentos de ADN cortados por enzimas de restricción de acuerdo con su tamaño, produciendo un patrón de bandas único que puede usarse para identificar muestras de ADN.

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    La PCR y la electroforesis son técnicas utilizadas para amplificar y separar fragmentos de ADN. La PCR permite duplicar grandes cantidades de pequeños fragmentos de ADN utilizando enzimas y ciclos de calentamiento y enfriamiento. La electroforesis usa un gel y una corriente eléctrica para separar los fragmentos de ADN cortados por enzimas de restricción de acuerdo con su tamaño, produciendo un patrón de bandas único que puede usarse para identificar muestras de ADN.

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    La PCR y la electroforesis son técnicas utilizadas para amplificar y separar fragmentos de ADN. La PCR permite duplicar grandes cantidades de pequeños fragmentos de ADN utilizando enzimas y ciclos de calentamiento y enfriamiento. La electroforesis usa un gel y una corriente eléctrica para separar los fragmentos de ADN cortados por enzimas de restricción de acuerdo con su tamaño, produciendo un patrón de bandas único que puede usarse para identificar muestras de ADN.

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    PCR Y ELECTROFORESIS

    - La electroforesis se usa para separar moléculas de ADN, ARN o proteínas en función


    de su tamaño y carga eléctrica. 
    Como su nombre lo indica, en la electroforesis en gel participa un gel: un bloque de
    material similar a la gelatina. Los geles para separar ADN suelen estar hechos de un
    polisacárido llamado agarosa, que se consigue como hojuelas secas pulverizadas.
    Cuando la agarosa se calienta en una solución amortiguadora (agua mezclada con
    algunas sales) y deja enfriar, se forma un gel sólido ligeramente blando. A nivel
    molecular, el gel es una matriz de moléculas de agarosa que se mantienen unidas por
    puentes de hidrógeno y que forman pequeños poros.

    -Se toman muestras de ADN y se amplifican con PCR.


    -Enzimas de restricción (endonucleasas)cortan el ADN en fragmentos pequeños en
    puntos específicos de su secuencia.
    -Un marcador fluorescente se une a un triplete de los fragmentos de ADN, de modo
    que puedan visualizarse.
    -Las muestras se agregan a una cuba o cámara de electroforesis en gel. La corriente
    eléctrica mueve los fragmentos a lo largo del gel (el ADN tiene carga eléctrica
    negativa).
    -Los fragmentos más pesados permanecen más cerca del origen y los más pequeños
    se alejan más.
    -Cada muestra de ADN produce un patrón de bandas distinto pudiéndose comparar
    entre sí.

    - La reacción en cadena de la polimerasa (PCR, “polymerase chain reaction”) o


    reacción de amplificación del ADN es una técnica básica en biología molecular que
    permite duplicar en grandes cantidades pequeños fragmentos aislados de ADN y
    obtener multitud de copias, con diversos fines.

    -Identificación de virus o bacterias en una persona enferma.


    -Diagnóstico de enfermedades hereditarias y mutaciones.
    -Pruebas de paternidad.
    -Pruebas forenses.
    -Análisis de pruebas paleontológicas y evolutivas.
    -Investigación científica y recombinación de ADN de distintas especies
    Los ingredientes clave para una reacción de PCR son Taq polimerasa, cebadores,
    ADN molde y nucleótidos (los bloques básicos del ADN). Los ingredientes se colocan
    en un tubo, junto con los cofactores que necesite la enzima, y se someten a ciclos
    repetidos de calentamiento y enfriamiento que permiten la síntesis del ADN.
    Los pasos básicos son:
    1. Desnaturalización (96°C96°C96, °, start text, C, end text): la reacción se
    calienta bastante para separar, o desnaturalizar, las cadenas de ADN. Esto
    proporciona los moldes de cadena sencilla para el siguiente paso.
    2. Templado (555555 - 656565°C°C°, start text, C, end text): la reacción se enfría
    para que los cebadores puedan unirse a sus secuencias complementarias en el
    molde de ADN de cadena sencilla.
    3. Extensión (72°C72°C72, °, start text, C, end text): la temperatura de la
    reacción se eleva para que la Taq polimerasa extienda los cebadores y
    sintetice así nuevas cadenas de ADN.

    -Análisis del ADN, prueba del ADN o huella genética


    El análisis de ADN implica las siguientes etapas:
    Se obtiene una muestra de ADN de un individuo (conocido, de un fósil o de una
    escena de un crimen).
    Se seleccionan aquellas secuencias del genoma que varíen mucho de unos individuos
    a otros y se amplifican en la PCR.
    El ADN copiado se rompe en fragmentos más pequeños utilizando enzimas de
    restricción.
    Los fragmentos se separan mediante electroforesis.
    Esto produce un patrón de bandas que es siempre el mismo en el ADN del mismo
    individuo: su perfil de ADN o huella genética.
    Perfiles de distintos individuos dan lugar a distintas bandas que se pueden comparar
    para buscar coincidencias o diferencias.

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