Este documento describe varias pruebas para identificar proteínas, incluyendo la reacción de biuret, precipitación con sales neutras como sulfato de sodio, y precipitación selectiva de albúminas y globulinas usando sulfato de amonio.
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Este documento describe varias pruebas para identificar proteínas, incluyendo la reacción de biuret, precipitación con sales neutras como sulfato de sodio, y precipitación selectiva de albúminas y globulinas usando sulfato de amonio.
Este documento describe varias pruebas para identificar proteínas, incluyendo la reacción de biuret, precipitación con sales neutras como sulfato de sodio, y precipitación selectiva de albúminas y globulinas usando sulfato de amonio.
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Reconocimiento
De Proteínas
Ensayo xantoproteico Reacción de Reacción de los Precipitación por sales Reacciones de
(amarillo) biuret: aminoácidos azufrados neutras precipitación de las proteínas. 1.Tomar un tubo de 1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 1. Tome 2 ml de caseína en En diferentes tubos de ensayo se ensayo y poner unos 3 ml ml de albúmina de huevo. un vaso precipitado. vierten 2 mL de las disoluciones de de albúmina de huevo. 2. Añadir 2 ml de solución de 2. Agregue 30 ml de la Fenol, fenilalanina, albúmina, clara hidróxido sódico al 20%. solución saturada de sulfato de huevo, gelatina. de sodio. 2 .Añadir 2ml de 3. Espere de 10 a 15 minutos solución de hidróxido 3. Añadir 10 gotas de solución de para que la precipitación sea sódico al 20%. acetato de plomo al 5%. completa. Filtre o centrifugue. Se añade 1 mL de HNO3 concentrado. Se 4. Calentar el tubo hasta ebullición calienta en baño maría hasta la aparición de un color amarillo. Los tubos con las proteínas 3. A continuación 4 o 5 gotas 1. Precipitación con sulfato de amonio. y la fenilalanina se dejan enfriar y se de solución de sulfato cúprico 5. Si se forma un precipitado de color En dos tubos de ensayo se vierte 1 mL neutralizan con una disolución saturada de diluida al 1%. Debe aparecer negruzco nos indica que se ha formado de la disolución de clara de huevo. Al NaOH , esto hace que la coloración amarilla una coloración violeta-rosácea sulfuro de plomo, utilizándose el azufre de primer tubo se le agregan de 1 a 2 mL se convierta en anaranjada. característica. los aminoácidos, lo que nos sirve para de la disolución de sulfato de amonio identificar proteínas que tienen en su saturada, hasta observar la composición aminoácidos con azufre. precipitación de la proteína, en ese momento se detiene la adición y se añade de 1 a 2 mL de agua destilada 2 Precipitación con ácido mineral. En hasta la desaparición paulatina del tres tubos de ensaye se colocan 1 mL precipitado. 3 Precipitación con disolventes de HCl, H2SO4 y HNO3 orgánicos. En tres tubos de ensayo concentrados. A cada tubo se le se vierte 1 mL de la disolución de añade 1 mL de la disolución de clara clara de huevo y se añade 200 mg de huevo, resbalando por pared y sin de NaCl. Al primer tubo se le añaden agitar, de tal manera que se formen dos fases. Al segundo tubo, se le añade 1 mL de la 2-3 mL de acetona, al segundo 2-3 disolución saturada de sulfato de amonio hasta mL de etanol y al tercero 2-3 mL de observar la precipitación de las globulinas. Dejar etilénglicol, los tubos se agitan y se reposar durante 5-10 minutos, las disoluciones se dejan en reposo en un baño de decantan o filtran a otros tubos de ensayo y se hielo-agua. Hacer las observaciones les añade (NH4)2SO4 cristalino poco a poco pertinentes después de 5 min. hasta la precipitación de las albúminas.