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Reconocimiento

De Proteínas

Ensayo xantoproteico Reacción de Reacción de los Precipitación por sales Reacciones de


(amarillo) biuret: aminoácidos azufrados neutras precipitación de las
proteínas.
1.Tomar un tubo de 1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3
1. Tome 2 ml de caseína en
En diferentes tubos de ensayo se ensayo y poner unos 3 ml ml de albúmina de huevo.
un vaso precipitado.
vierten 2 mL de las disoluciones de de albúmina de huevo. 2. Añadir 2 ml de solución de
2. Agregue 30 ml de la
Fenol, fenilalanina, albúmina, clara hidróxido sódico al 20%.
solución saturada de sulfato
de huevo, gelatina. de sodio.
2 .Añadir 2ml de
3. Espere de 10 a 15 minutos
solución de hidróxido 3. Añadir 10 gotas de solución de
para que la precipitación sea
sódico al 20%. acetato de plomo al 5%.
completa. Filtre o centrifugue.
Se añade 1 mL de HNO3 concentrado. Se 4. Calentar el tubo hasta ebullición
calienta en baño maría hasta la aparición de
un color amarillo. Los tubos con las proteínas 3. A continuación 4 o 5 gotas 1. Precipitación con sulfato de amonio.
y la fenilalanina se dejan enfriar y se de solución de sulfato cúprico 5. Si se forma un precipitado de color
En dos tubos de ensayo se vierte 1 mL
neutralizan con una disolución saturada de diluida al 1%. Debe aparecer negruzco nos indica que se ha formado
de la disolución de clara de huevo. Al
NaOH , esto hace que la coloración amarilla una coloración violeta-rosácea sulfuro de plomo, utilizándose el azufre de
primer tubo se le agregan de 1 a 2 mL
se convierta en anaranjada. característica. los aminoácidos, lo que nos sirve para
de la disolución de sulfato de amonio
identificar proteínas que tienen en su
saturada, hasta observar la
composición aminoácidos con azufre.
precipitación de la proteína, en ese
momento se detiene la adición y se
añade de 1 a 2 mL de agua destilada
2 Precipitación con ácido mineral. En hasta la desaparición paulatina del
tres tubos de ensaye se colocan 1 mL precipitado.
3 Precipitación con disolventes de HCl, H2SO4 y HNO3
orgánicos. En tres tubos de ensayo concentrados. A cada tubo se le
se vierte 1 mL de la disolución de añade 1 mL de la disolución de clara
clara de huevo y se añade 200 mg de huevo, resbalando por pared y sin
de NaCl. Al primer tubo se le añaden agitar, de tal manera que se formen
dos fases. Al segundo tubo, se le añade 1 mL de la
2-3 mL de acetona, al segundo 2-3
disolución saturada de sulfato de amonio hasta
mL de etanol y al tercero 2-3 mL de
observar la precipitación de las globulinas. Dejar
etilénglicol, los tubos se agitan y se
reposar durante 5-10 minutos, las disoluciones se
dejan en reposo en un baño de
decantan o filtran a otros tubos de ensayo y se
hielo-agua. Hacer las observaciones
les añade (NH4)2SO4 cristalino poco a poco
pertinentes después de 5 min.
hasta la precipitación de las albúminas.

Fin

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