SEMINARIO INVESTIGATIVO MEDIOS DE CULTIVO MICROBIOLGICOS

SEMINARISTAS: YINA PAOLA DOMINGUEZ ANAYA FABIAN ANDRS HERAZO CENTANARO

PRESENTADO A: ING. MSc. YENIS IBETH PASTRANA PUCHE

UNIVERSIDAD DE CRDOBA FACULTAD DE INGENIERAS DEPARTAMENTO DE INGENIERA DE ALIMENTOS PROGRAMA DE INGENIERA DE ALIMENTOS MONTERIA -CORDBA 2011

MEDIOS DE CULTIVO Los medios de cultivo son uno de los sistemas ms utilizados e importantes en la microbiologa para la identificacin de microorganismos y observacin del crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio, las cuales poseen las condiciones fisicoqumicas adecuadas para el crecimiento de estos.

HISTORIA Y EVOLUCIN Desde el descubrimiento, modificacin y evolucin del microscopio a travs del tiempo, y al presentarse las primeras observaciones de microorganismos, surgen ciertas necesidades sobre el crecimiento y aislamiento de una forma rpida y adecuada para el estudio de estos microorganismos, en ese instante se empieza a dar el nacimiento y desarrollo de los medios de cultivo. Entre los primeros en hacer sus estudios y descubrimientos estn: Julio Brefeld: Primero en utilizar medios de aislamiento, cultivando esporas de hongos en medios slidos a base de gelatina. Joseph Lister: populariz un mtodo enfocado al cultivo puro basado en diluciones seriadas en un medio lquido. Robert Koch: Utiliz rodajas de patata como soporte nutritivo slido. Friedrich Loeffler: Luego, de los adelantos de Koch, este aadi gelatina, logrando un medio slido transparente ideal para la observacin de la morfologa macroscpica de las colonias microbianas. Walter Hesse: En 1882 introduce el agar-agar como solidificante. Julius Petri: En 1887 invento las llamadas cajas o placas de Petri. Beijerinck y Winogradsky: Disearon los medios de cultivo selectivos y de enriquecimiento con el fin de favorecer el crecimiento de ciertos tipos de microorganismos capaces de utilizar para su desarrollo ciertos nutrientes del medio. Wrtz: Impuls el uso de los medios diferenciales. GENERALIDADES PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS Los microorganismos tienen una serie de condiciones por las cuales se da su crecimiento, multiplicacin o reproduccin, lo cual tambin esta relacionado con inhibicin de la flora acompaante lo cual es muy til para el aislamiento de una especie determinada de microorganismo. Estas condiciones son: Condiciones absolutas Disponibilidad de nutrientes Consistencia adecuada del medio Esterilidad del medio Oxigeno (presencia o ausencia)

Condiciones ambientales Humedad Luz ambiental pH Temperatura

 CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

Segn su estado fsico Medios lquidos: Se presentan en este estado, denominndose por esta razn caldos. Medios slidos: Se preparan a partir de los medios lquidos, agregndoles un agente gelificante como por ejemplo el agar o gelatina. Medios semislidos: Se preparan a partir de los medios lquidos, agregando a stos un agente solidificante en una proporcin menor que para preparar medios slidos.

Segn su utilizacin. Medios comunes: Son aquellos que poseen los componentes mnimos para que pueda producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten requerimientos especiales. Medios de enriquecimiento: Son aquellos que, adems de las sustancias nutritivas normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos exigentes. Medios selectivos: Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en una poblacin polimicrobiana. Medios inhibidores: Cuando las sustancias aadidas a un medio selectivo impiden totalmente el crecimiento de una poblacin microbiana, se denomina inhibidor. Medios diferenciales: Se utilizan para poner en evidencia caractersticas bioqumicas que ayuden a diferenciar gneros o especies. Medios de identificacin: Son los destinados a comprobar alguna cualidad especfica que puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo. Medios de multiplicacin: Sirven para obtener una gran cantidad de clulas a partir de un microorganismo ya aislado. Medios de conservacin: Se utilizan para conservar una cepa que, por diversas razones nos interese mantener. En el laboratorio se pueden conservar las cepas de tres formas: a) haciendo pases peridicos de placa a placa b) mediante liofilizacin de una suspensin bacteriana c) congelando las cepas en leche descremada estril al 0,1%. Medios de transporte: Se usan para el transporte de muestras clnicas que no pueden sembrarse inmediatamente.

Segn su composicin Segn las sustancias que entren a formar parte en su composicin, los medios de cultivo pueden ser clasificados en: Medios complejos: Fueron los primeros utilizados, y los ms empleados se preparan a partir de tejidos animales, y ms raramente de vegetales. Medios sintticos: Son aquellos que contienen en su composicin exclusivamente sustancias qumicas conocidas y disueltas en agua destilada. Medios semisintticos: son los sintticos a los que se les aaden factores de crecimiento bajo una forma de un extracto orgnico complejo.

PREPARACIN Y ALMACENAMIENTO El componente principal de los medios de cultivo es el agar- agar (excepto en medios lquidos) sustancia derivada de algas marinas. Los medios de cultivo se pueden preparar en el laboratorio a partir de cada uno de sus constituyentes bsicos o por simple rehidratacin de productos asequibles comercialmente. Los medios de cultivo deshidratados se deben almacenar en envases sellados bajo las condiciones que seale el fabricante. Generalmente se almacenan en un lugar fresco (entre 15 y 20 C) con poca humedad y protegidos de la luz solar directa. Una vez que el medio de cultivo ha sido preparado y esterilizado se debe almacenar entre 2 y 8 C, a menos que el medio requiera alguna condicin diferente. Se deben mantener en recipientes bien cerrados para evitar su deshidratacin. CEPARIOS El cepario es el lugar donde se albergan las colecciones de microalgas, cianobacterias, dinoflagelados marinos y levaduras marinas, del CIBNOR, S.C. (centro de investigaciones biolgicas del noroeste) Otorga facilidades para el aislamiento, limpieza, mantenimiento, escalamiento de la experimentacin requerida en las reas de Acuicultura, Ecologa, Biotecnologa, Sistemtica, Docencia, entre otras.

DIFERENTES TIPOS DE CEPA UTILIZADOS EN EL ANLISIS MICROBIOLGICO Cepas de coleccin: Microorganismos definidos por lo menos a nivel de gnero y especie, depositados y mantenidos en una Coleccin de Cultivos (CC) o Centro de Recursos Biolgicos (BRC) y catalogados con el acrnimo de la coleccin/BRC seguido de un nmero identificativo. En dicho catlogo se resea el origen de la cepa, sus condiciones de cultivo y, en muchas ocasiones, algunas de sus caractersticas, as como la equivalencia, si la hay, con otras colecciones. Es equivalente a cepas de referencia. Cepas de reserva: cepas idnticas obtenidas mediante un nico subcultivo de una cepa de referencia suministrada por el proveedor, o que proceden directamente del proveedor como tales. Cepas de trabajo: subcultivos primarios obtenidos de una cepa de reserva. Cepas comerciales: cepas suministradas por casas comerciales diferentes de las colecciones de cultivo o Centros de Recursos Biolgicos, y que pueden o no proceder de una coleccin de cultivos.

Cepas salvajes: No proceden de CC ni de BRC.

MEDIOS DE CULTIVO MS UTILIZADOS EN LA INGENIERA DE ALIMENTOS E.M.B. (eosina azul de metileno): Utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rpido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. A.S.M. (Agar salado de manitol): Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de estafilococos. Agar de sangre: Se utiliza para el aislamiento de numerosos microorganismos aerobios y anaerobios. Agar nutritivo: Se utiliza para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos Agar salmonella-shigella (s.s): Se utiliza para el aislamiento de salmonella spp y de algunas especies de shigella spp a partir de heces. Agar coliforme: Utilizado para el cultivo y enumeracin de cultivos coliformes fecales. Lo cual es muy importante para el anlisis de alimentos y agua. Agar baird-parker: Medio de alta especificidad selectivo y diferencial para el aislamiento y recuento, de staphilococcus coagulasa positiva en alimentos. Agar McConkey: Medio primario selectivo y diferencial para el aislamiento y diferenciacin de bacilos entricos Gram negativos fermentadores positivos y negativos de lactosa. Agar sabouraud: Utilizado para el aislamiento identificacin y conservacin de hongos patgenos y saprofitos, tambin es til para el cultivo de levaduras. BIBLIOGRAFA Manual bsico de microbiologa 2002 http://perso.wanadoo.es/sergioram1/medios_de_cultivo.htm http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm http://danival.org/600%20microbio/5000micro_dvf/micro_dvf_221a.html http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm http://www.scribd.com/doc/14173118/4-Esterilizacion-y-Preparacion-de-Mediosde-Cultivo