PT97329A

PT97329A - Processo para a preparacao de 2-isoxazolinas e isoxazois substutuidos nas posicoes 3,5, e de composicoes farmaceuticas que so contem

Info

Publication number: PT97329A
Application number: PT97329A
Authority: PT
Inventors: Wilfried Schwab; Hiristo Anagnostopulos; Elena Porsche-Wiebking; John Grome
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1990-04-12
Filing date: 1991-04-11
Publication date: 1992-01-31
Also published as: ZA912701B; FI911718A0; JPH04234857A; IE911235A1; HU911183D0; NO911432L; AU7428591A; BR9101475A; KR910018363A; CA2040219A1; CN1055537A; CS101391A2; NO911432D0; EP0451790A1; IL97821A0; US5273989A; FI911718A

Description

Descrição da patente de invenção de HOECHST AKTIENGESELLS-CHAFT, alemã, industrial e comercial, com sede em D-6230 Frankfurt am Main 80, República Federal Alemã, (inventores: Dr. Wilfried SCHWAB, Hiristo ANAGNOSTOPULOS, Dr. Elena PORSCHE-WIEBRING, e Dr. John GROME, residentes na República Federal Alemã), para «PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE 2-IS0XA20LINAS E ISOXAZOIS SUBSTITUÍDOS NAS POSIÇÕES 3,5, E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTEM"

Descrição A presente invenção refere-se a novas 2-isoxazolinas e isoxazóis 3,5-dissubstituidos, assim como a novos medicamentos que são especialmente adequados para a profilaxia e/ou o tratamento de distúrbios patológicos neuro-degenerativos no ser humano e em animais.

Do pedido alemão de patente aberto á ins· pecção pública 37 36 113 (HOE 87/F 316) são conhecidas 2--isoxazolinas e isoxazóis 3,5-dissubstituidos, contendo fósforo, muscimol, assim como os seus análogos são descritos, 1 -%

por exemplo, em J. Med. Chem. 27 (1984), 584-591 e J. Med. Chem. 28 (1985), 668-679.

Um grande numero de situações neuropato-lógicas ê caracterizado por uma degeneração, assim como a perda. de neurónios. Isto é válido especialmente para quadros patológicos neurodegenerativos, como derrames, isquêmia cerebral temporária (TIA), infarto cerebral com sintomas somente parcialmente reveseíveis (PRIND), paralisia cerebral, hipoglicemia cerebral, fenómenos isquémicos durante paragens cardíacas ou intervenções cirúrgicas no âmbito coração-pulmão, estados anóxicos, por exemplo, após afogamento, intoxicação ou ferimento da medula, asfixia perinatal, altera ções neurodegenerativas condicionadas à idade, doença de Alzheimer (SDAT), dor, hipersecção da hormona do crescimento e da hormona luteotráfica, esquizofrenia, epilepsia, corea de Huntington assim como outras doenças neurodegenerativas crónicas.

Além disso, é conhecido que existem no cérebro de mamíferos numerosos receptores sinápticos ex-citatórios, que são activados por L-glutamina e ácido L--aspártico de procedência natural. No termo de uma excitação de neurónios estes aminoácidos são absorvidos nas vesículas pressinápticas através de um sistema de transporte altamente sensível. Este mecanismo de transporte é dependente de Na . Necessariamente a absorção dos aminoácidos L-Gln e L-Asp nas vesículas pressinápticas para a manutenção da concentração de Na+ intercelular, é, entre outros, também dependente de ATP. (Erecinaska, Biochem, Pharma - col., 36 (1987), 3547-3555). Um acúmulo de aminoácidos excitatórios na fenda sináptica como, por exemplo, após estados hipoxi-cos isquémicos, pode conduzir a impulsos nervosos permanentes, a alterações patológicas e finalmente à destruição irreversível dos neurónios. Na literatura existem indicações de que preparados que melhoram directamente a absorção de aminoácidos nas vesículas sinápticas, reduzem a liberta- - 2 -

tação ou favorecem indirectamente o retorno, assim como também substâncias que antagonizam a activação do receptor, agem de maneira neuroprotectora (Gill et al., Neuroscience, 25 (1988), 847-855; Jarvis et al., Synapse, 2 (1988), 577-584; Kaneko et al., Arzneimittel-Forschung, 39 (1989) 445-450; Silverstein et al., J. Neurochem., 47 (1986) 1614-1619; Weiss et al., Brain Res., 380 (1986) 186-190).

Também outros aminoácidos como, por exemplo, ácido N-metil-D-aspártico (NMDA), ácido de Kain e quisqualínico são conhecidos como neurotransmissores exci-tatórios potentes. Eles foram usados para a caracterização dos subtipos de receptor de glutamato. Estes receptores excitatórios, localizados nos denominados neurónios glutama-térgicos, são classificados em dois grupos: receptores de NMDA e os que não são re ceptores de NMDA. De acordo com o estado actual de conhecimentos os receptores de NMDA contribuem em larga escala para a destruição de neurónios após ocorrências isquémicas , como, por exemplo, derrames. (Rothman et al., TINS, 10 (1987) 299-302). A invenção, portanto, é baseada no problema de encontrar novas “substâncias antagónicas do gluta-maton, que possam reduzir a destruição de células, causadas por hipoxia e/ou isquemia, isentas de efeitos secundários indesejáveis.

No entanto, não foram obtidos sucessos clínicos consideráveis com antagonistas de receptores de NMDA, eficazes de maneira cérebro-protectora devido a efeitos secundários indesejados, como, por exemplo, a discoor denação motora em parte pronunciada, efeitos psicóticos, assim como outros efeitos secundários, em parte tóxicos (Handelmann et al., Eur. J. Fharmacol., 140 (1987) 69-73; Morris et al., Nature, 319 (1986) 774-776). Actualmente não existe nenhuma substância no comercio, testada clinica-mente e que, com boa tolerância, tenha comprovado efeito em 3

caso de doenças neurodegenerativas. Desta forma# existe uma necessidade premente de substâncias novas# quimicamente definidas e bem toleradas# com eficácia protectora do cérebro# adequadas para a profilaxia e/ou tratamento posterior dos estados patológicos acima citados# especialmente do derrame.

Descobriu-se# surpreendentemente# que pela introduçSo de determinados grupos que derivam especialmente de ácidos alquilcarboxílicos, em posição 3 ou 5, assim como de grupos básicos# eventualmsnte substituidos# em posição 5 ou 3 de 2-isoxazolinas e isoxazóis são obtidos compostos que# devido às suas propriedades bioquímicas e farmacológicas# preenchem as exigências acima citadas e que# portanto# são adequados para a profilaxia e/ou terapia de doenças acompanhadas de alterações cerebrais neurodegenerativas. Os compostos# em relação a substâncias conhecidas na literatura como, por exemplo# muscimol /”5-(aminometil)--3(2H)-isoxazolona_7# MK-801 Γ (+)-5-metil-10#11-dihidro--5H-dibenzo Z""a#d_J7 ciclohepteno-5-10-imina_7 e CPP #/"ácido 3- (+)-2-carboxipiperazina-4-il-propil-l-fósfónico—7 (Lust et al.# Metabolic Brain Disease# 3 (1988) 287-292# Rod et al.# "Pharmacology of Cerebral Ischaemia" ed. J. Krig-Istein# CRC Press, 1989# 157-163 possuem excelente tolerância# assim como um forte efeito em amostras animais bioquímicas "in vitro11 e patológicas# que pode ser comprovada no exemplo do* estímulo da absorção altamente sensível de 3H-aspartado em preparações de vesículas sinápticas de cérebros de ratos# inibição da ligação de 3H-MK801 em membranas de cérebros de ratos# inibição das convulsões induzidas por NMDA no rato, 4

efeito neuroprotector após oclusão bilateral da Artéria Carotis em gerbil mongólico, e redução do volume de infarto após is-quemia focal, induzida fotoquimicamente no rato. O objecto desta invenção são, portanto, novas 2-isoxazolinas e isoxazóis 3,5-dissubstituidos, das fórmulas gerais Ia, Ib e Ics

(lc) nas quais R representa 2-, 3-, 4-piridilo ou um radical da

fórmula II R3 1 R5 | 1 - c - N+ - R7 1 (II) i4 1 R6 onde 3 4 r e R representam, mdependentemente um do outro, hidro génio ou C^-C^-ailquilo; 5 , R representa um par de electrões livres ou hidrogé nio; 6 7 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio; C^-Cg-alquilo; G^-Cg-cicloalquilo; Cg-C^- - 5 - Β Γτ-'..' !j.‘?'t?T7(Tn’: ·»»..

-----...... - ... . uL^uUSL -aril-C^-C^-alquilo; carbamimidoilo; C-^-Cg-alquil-carbonilo, C^-C^-alcenilcarbonilo, C^-Cg-alquiloxi-carbonilo, Cg-C^ 2-aril-C^-C4-alquilcarbonilo, C6-Cio-a3ril“Ci“G4-alguil°xicarboriilo/ C6-C10-arilcarbonilo# o radical de um alfa-aminoácido de origem natural# ou um ácido gama-aminobutíráco (Gaba)# que podem estar súbstituidos por C^-Cg-alquilo# hidroxi# halogénio# amino ou nitro; ou 6 7 R e R representam em conjunto com o átomo de azoto que os liga# um heterociclo de cinco até sete membros# podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre# oxigénio ou azoto; ou R5. R6, R' representam# mdependent emente um do outro# 5

Cj-C -alquilo ou C^-Cg-cicloalquilo# ou R representa C^-C^-alquilo e R6 e R7 formam# em conjunto com o átomo de azoto que os liga# um heterociclo de cinco 5 6 7 até sete membros# ou R # R # R/ formam em conjunto com o átomo de azoto que os liga. um heterociclo biciclico# de seis até doze membros; repffisenta nm radical de fórmula III:

" (CH2 V

•X (III) onde n representa o ou um numero inteiro de 1 até 4; representa hidroxi; C^-C^-alquiloxi; carboxi; halogenoformilo; formilo; oxilimino; C^-Cl2-alquilo-xicarbonilo# benziloxicarbonilo ou C-j-Cg-cicloalqui-loxicarbonilo que podem estar substituídos uma ou várias vezes por C-|_-Cg-alquilo? ou representa car-bonilo, que está ligado de maneira peptídica com um 6 -

X

alfa-aminoácidos, de origem natural# ácido gama-arainobutírico ou um dipéptido, ou representa amino-carbonilo, podendo amino estar mono- ou dissubstitui-do por Cj^-Cg-alquilo ou monossubstituido por fenil--C^-C^-alquilo, ou ambos os radicais amino formam, em conjunto com o átomo de azoto, que os liga, beterociclo de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de oxigénáo ou um átomo de azoto; ou

X representa um grupo da fórmula XV 0 (IV)

- P - Y

Z onde Y e Z representam, independentemente um do outro, hidro-xi, c^-C4-alquilo ou C^-C^-alquiloxi? e A representa uma ligação C, G simples ou uma ligação C, C dupla; com a condição de R"*" não representar 2-, 2 3- ou 4-piridilo, quando R representa um grupo da fórmula IV e n 0, quando X representa hidroxi ou metiloxi, assim como as suas formas eventualmente estereoisómeras e os seus sais fisiologicamente aceitáveis,

Quando, em casos isolados, não há outra especificação alquilo pode ter a cadeia linear ou ser ramificado. - 7 - ' Η

Ο mesmo é válido para radicais derivados do mesmo, como alquiloxi, alquilcarbonilo, alquiloxicarbonilo ou arialquilo.

Cg-C^-arilo representa, de preferência, fenilo, naftilo ou bifenilo, especialmente, fenilo. Radicais derivados do mesmo devem ser formulados de maneira correspondente, como arilcarbonilo ou arilalquilo.

Halogénio representa fluor, cloro, bromo ou iodo, de preferência, cloro.

Heterociclos de cinco ate sete membros são, no sentido da invenção, por exemplo, pirrol, piridina, azepina. tiazol, isotiazol, oxazol, isoxazol, pirazol, imi-dazol, tiazina, 1, 2-oxazina, 1,3-oxazina, morfolina, piri-dazina. pirimidina, pirazina, 1,2-tiazepina, 1,3-tiazepina, 1,4-tlazepina, 1,2-oxazepina, 1,3-oxazepina, 1,4-oxazepina, 1,2-diazepina, 1,3-diazepina, 1,4-diazepina, assim como as suas variantes parcialmente ou totalmente saturadas. Especialmente são citadas pirrolidina, piperidina, morfolina, piperazina ou piridina.

Os alfa-aminoácidos de origem natural como, por exemplo, Ala, Arg, Cys, His, Ile, Leu, Lys, Met,

Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, Vai, Asp, Asn, Glu e Gls são descritos, por exemplo, em Ann. Rev. Biochem. 38 (1969) 137-158 e FEBS Letters 64 (1976) 29-35. Os dipeptidos, no sentido da presente invenção, contem como constituintes de estrutura, alfa-aminoácidos de origem natural assim como ácido gama-aminobutírico. São preferidos compostos das fórmulas Ia e Ib nas quais R"^ representa 2-, 3-, 4-piridilo ou um radical da fórmula II: - 8 - Η

onde 3 4 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou C^-C^-alquilo; 5 , r representa um par de electrões livres, ou hidrogé nio? 6 7 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio? C^-C^-alguilo? fenil-C^-C2-alquilo? R e R formam em conjunto com o átomo de azoto que os liga um heterociclo de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto? 6 7 R representa hidrogénio e r' carbamimidoilo? C-^-Cg- -alquilcarbonilo, c1-C4-alcenilcarbonilo, C^-Cg--alquiloxicarbonilo, fenil-Cj-C^-alquilcarbonilo, benziloxicarbonilo, benzoílo, o radical de um alfa -aminoácido de origem natural ou ácido gama-amino-butírico, que podem estar substituídos por -alquilo, hidroxi, halogéneo, amino ou nitro? 5 6 7 r , R , R representam, independentemente um do outro,

Ct-C.-alquilo ou C-C -cicloalquilo? X 4 3 6 2 , R representa um radical da formula IIIí -(αΐ2>η - x (III) 9 τ

X

onde η

representa O ou um ndmero inteiro de 1 ate 3? representa hidróxi? C^-C^-alquiloxi; carboxi? Gj--C^-alquiloxicarbonilo? bensiloxicarbonilo ou C^--Cg-cicloalquiloxicarbonilo, que podem estar subs-tituidos uma ou várias vezes por C^-Cg-alquilo? ou representa carbonilo, que está ligado de maneira peptidica com um alfa-aminoácido de origem natural, ácido gama-aminobutírico ou um dipeptido? amino-carbonilo, onde amino pode estar mono- ou dissubs-tiduido por C^-C^-alquilo ou monossubstituido por fenil-C^-C^-alquilo, ou ambos os radicais amino formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo de cinco ate sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de oxigénio ou um átomo de azoto? ou representa um grupo da fórmula IVí 0

II P - Y (IV) z onde Y e Z representam, independentemente um do outro, hidróxi, Cj-C^-alquilo ou C^-C4-alquiloxi; e A representa uma ligação C,C simples ou uma ligação C,C dupla; com a condição de R^ não representar 2-, 3- ou 4--piridilo quando R representa um grupo da fórmula IV. 10

S3o especialmente citados os compostos da fórmula Ia nos quais representa 2-piridilo ou um radical da fórmula II* R*

N (II) 4 '6

R R onde 3 4 , R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou C^-C^-alquilo; 5 , r representa um par de electrões livres ou hidrogénio; 6 7 R e R representam, independentemente um do outro, .hidrogénio, C^-C^-alquilo; fenil-C^-C^-alquilo; R e R formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo saturado, de cinco ate sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre, oxigénio ou azoto? R representa hidrogénio e R representa carbamimidoílo,

Cj-Cg-alquilcarbonilo ou o radical de um alfaamlno-ácido de origem natural ou ácido gama-aminobutirico; 5 6 7 r , R e R representam, independentemente, um do outro, C1-C4-alquilo; 2 / r representa um radical da fórmula III s -(αϊ2)η-χ (III) onde; 11 n representa Ο, 1 ou 2; X representa hidroxi? C^-C^-alquiloxi; carboxiy halo- genoformilo? C-^-^-alquiloxicarbonilo; benziloxi-carbonilo ou C^-Cg-cicloalquiloxicarbonilo, que podem estar substituídos uma ou várias vezes por -alquilo; ou representa carbonilo, que está ligado de maneira peptídica com um alfa-aminoácido de origem natural ou ácido gama-aminobutirico; aminocarbonilo, onde amino pode estar mono ou dissubstituido por Ci-C^-alquilo, ou ambos os radicais amino formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo de cinco ate sete membros, onde o um átomo de carbono pode estar substituído por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou X representa um grupo da fórmula IVs - p - y

I z onde Y e Z representa, independentemente um do outro, hidroxi, Cl-C4“alguil° ou ci“C4“alSuilo:s;i·» e A representa uma ligação C,C simples ou uma ligação C, C dupla; com a condição, de R1 não representar 2-piridilo, •y quando R representa um grupo da fórmula IV e A é diferente de uma dupla ligação C,C, quando X=OH e n=0; assim como os compostos da fórmula Ia onde

R1 representa 2-piridilo ou um radical da fórmula II 12 -

onde r e R representam# independentemente um do outro, hidrogénio ou C^-C^-alquilo? r representa um par de electrQes livres ou hidrogé nio? R e R1 representam, independentemente um do outro, hidrogénio, C1-C4-alquilo, benzilo?

6 7 R e R formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo saturado de cinco até seis membros# podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre# oxigénio ou de azoto? R representa hidrogénio e R representa carbamimidoí- lo; C^~C -alquilcarbonilo, o radical de um alfa--aminoácido de origem natural?

X 1 R representam, independentemente um do outro, cl“C4“alguilo; representa um radical da fórmula III: -(CH2)n - X (III) onde n representa O, 1 ou 2? representa hidroxi, carboxi, C^-C^-alquiloxicarboni-lo? benziloxicarbonilo? ciclohexilcarbonilo# que - 13 -

pode estar substituido uma ou várias vezes por C^-Cg-alquilo; carbonilo, que está ligado de maneira pep-tídica com um alfa-aminoácido de origem natural; amino-carbonilo, onde ambos os radicais amino formam em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heteroci-clo de cinco até seis membros podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou representa um grupo da fórmula IV:

O — p - Y (IV) 2 onde Y representa hidroxi ou C-^-C^-alquilóxi; e z representa C^-C^-alquilo; e A representa uma ligação C,C simples ou uma ligação C,C dupla; com a condição de R1 não representar 2-piridilo, ty guando Rz representa um grupo de fórmula IV e A / de uma dupla ligação, guando X=OH e n=0«

Entre os compostos da fórmula Ib citam-se especialmente aqueles nos quais: 1 / R representa um radical da formula II: R3 I R5 I 1 - Ο 1 7 - N+ — R I (II) 1 R4 R6 14 -

onde 3 4 , r e R representam hidrogénio; c r representa um par de electrões livres, ou hidro génio; 6 7 / R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio; C^-C^-alquilo; fenil-C^-C^-alquilo; 6 7 R e R formam em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo saturado de cinco até seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de enxofre* de oxigénio ou de azoto; R representa hidrogénio e R/ C^-C^-acilo; C^-Cg-alquil- carbonilo, benzoílo ou o radical de um alfa-amino-áciêo de origem natural ou ácido gama-aminobutírsco; 5 6 7 r , R , R representam, independentemente um do outro, Ci-C^-alquilo ou Cg-Cg-cicloalquilo; 2 r representa um radical da fórmula IIIs ~(CH2>n “ X (III) onde n representa O, 1 ou 2; X representa carbóxi; halogenoformilo, C^-C^-alquiloxi- carbonilo; benziloxicarbonilo ou Cg-Cg-cicloalquil-carbonilo, que podem estar uma ou várias vezes substituídos por C-^-Cg-alquilo; ou representa carboni-lo; que e ligado de maneira peptídica com um alfa--aminoácido de origem natural ou um ácido gama--aminobutírico; aminocarbonilo, onde amino pode estar mono- ou dissubstituido por C-j-C^-alquilo ou ambos os 15 - *

\ y radicais amino formam# em conjunto ctnm o átomo de azoto que os liga# um heterociclo de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substitui do por um átomo de oxigénio ou de azoto* e A representa uma ligação C#C simples ou dupla, assim como compostos da fórmula Ib, onde 1 , R representa um radical da formula II: R' R~ N+ R ‘ (II)

4 R

R 6 onde 3 4 / R e R representam hidrogénio; 5 R representa um par de electrões livres; 6 7 # r e R representam# independentemente um do outro# hidrogénio ou C-L-Cj-alquilo; R e R' representam em conjunto com o átomo de azoto que os liga# um heterociclo saturado de cinco até seis membros# podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre# de oxigénio ou de azoto; 6 /7 R representa hidrogénio e R representa C^-Cg-alquil- carbonilo; R 5

R 7 R representam, independentemente um do outro# C1--C4-alquilo; representa um radical da fórmula III: 16 - 2

onde n representa 2? e X representa carbóxi, C^C^-alguiloxicarbonilo; ben- ziloxicarbonilo? ciclohexilcarbonilo, que pode estar substituído uma ou vários vezes por C^-C^-alquilo? carbonilo, que está ligado de maneira peptídica com um alfa-aminoácido de origem natural? aminocarboni-lo, onde ambos os radicais amino formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo de cinco até seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de oxigénio ou de azoto? e A representa uma ligação C,C simples ou dupla*

Em geral, são preferidos compostos da fórmula Ia, nos quais A representa uma ligação C,C dupla.

Além disso, dtam-se especialmentes

Cloridrato de éster etílico de ácido 5-~aminometil-isoxazol-3-propiónico? T0lueno-4-sulfonato de éster (+)-men-tílico de ácido 5-aminometil-isoxazol-3-propiónico?

Tolueno-4-sulfonato de éster (-)-men-tílico de ácido 5-aminometil-isoxazol-3-propiónico?

Tolueno-4-sulfonato de éster cis-(3,3, 5)---trimetilciclohexílico de ácido 5-aminometil-isoxazol-3--propiónico; 17

Cloridrato de éster etílico de ácido 2--(5-aminometil-isoxazol-3-il)-etil-2-(p-metil)-£os£Ínicoí

Cloridrato de éster metílico de ácido 5--aminometil-isoxazol-3-propiónico* Ácido 5-aminometil-isoxazol-3-propiónicof

Sal de diciclohexilamónio de éster (-)--mentílico de ácido 3-carboxi-2-isoxazolino-5~il-carboxílico; 3,5-dicarboxi-2-isoxazolina?

Sal de sódio de ácido 5-hidroximetil-iso- xazol-3-propiónico; lodeto de éster cis(3/3, 5)-trimetilciclo-hexílico de ácido 5-trimetilamónio-raetil-isoxazol-3-propió-nico; Éster metílico de ácido 3-hidroxiiminome-til-isoxazol-5-propiónico; Ácido 5-(1-amino-l-metil-etil)-isoxazol- -3-propiónico; Ácido 5“benzilaminometil~isoxazol-3-pro-piónico; Ácido-5-dimetilaminometil-isoxazol-3-pro-piónico;

Cloridrato de ácido 2-(5-aminometil-isoxa-zol-3-il)-etil-2-(P-metil)-fosfínico; Ácido 5-acetamidometil-isoxazol-3-propió~ nico;

Iodeto de éster (-)-mentilico de ácido 5-trimetilamónio-metil-isoxazol-3-propiónico?

Iodeto de éster (+)-mentílico de ácido 5-trimetilamónio-isoxazol-3-propiónico;

Cioridrato de éster (+)-mentilico de ácido 5-(L-£enilanil-amino)-metil-isoxazol-3-propiónico?

Cioridrato de éster (-)-mentílico de ácido 5-(L-£enilanil-amino)-metil-isoxazol-3-propiónico?

Cioridrato de éster metilico de ácido 5-(L-£enilanil-amino)-metil-isoxazol-3-propiónicoí Ácido 5-guanidinometil-isoxazol-3--propiónico; N-(5-aminometil-isoxazol-3-il)-pro-pionil-glicina?

Sal de diamónio de bis (3- (2-carboxi)--etil-isoxazol-5-il-metil)-amina;

To1ueno-4-sulfonato de éster (+)-men-tílico de ácido 5-aminometil-2-isoxazolina-3-propiónico;

Tolueno-4-sulfonato de éster (-)-men-tílico de ácido 5-aminometil-2-isoxazolino-3-propiónico; 3-(2-carboxietil)-5-(2-piridil)-2--isoxazolina? Éster de ácido 5-trimetilaminometil- isoxazol-3-propiónico?

Cioridrato de ácido 5-piperidinometil--isoxasol-3-propiónico? - 19 -

Cioridrato de araida de ácido 5-aminome-til-isoxazol-3-propiónico; Trifluoroacetato de 5-(L-fenilalanil-ami no)-metil-isoxazol-3-il-propionil-glicina. São objecto da invenção além disso# processos para a obtenção de compostos da fórmula Ia# Ib# ou Ic# da sua forma efrent uai mente estereoisomérica e# eventualmente# dos seus sais estereoisoméricos# que são caracteriza-dos pelo facto de fazer-se reagir um óxido de nitrilo da fórmula Ví

0-N=C-R (V) a) no caso de A representar# na fórmula Ia# uma ligação C#C simples, com uma olefina da fórmulr VI, ou

R" I

CH2=CH-C-W (VI) 4 b) no caso de A representar# na fórmula Ia# uma ligação C#C dupla# com um derivado de propargilo da fórmula VII no sentido de uma ciclo-adição 1,3-dipolar#

R i CH=C-C-W • 4 R (VII) onde 2 3 4 R , R e R possuem os significados aci- / 5 6 7 ma citados e W representa um grupo da fórmula NR R R com os 5 6 7 significados acima citados para R # R e R # ou representa 20 -

um su.bstitui.nte permutável por uma amina da formula 5 6 7 NR RR/ eventualmente substituída/ como, por exemplo, alquil-sulfonilo ou arilsulfonilo ou halogénio, neste caso, de preferência cloro ou bromo, ou

converter-se um composto obtido de acordo com a) ou b) da fórmula geral VIII

c) 2 3 4

com os significados acima citados para R , R , R e A num composto da fórmula geral Ia, pela substituição do 5 6 7 grupo W por uma amina da fórmula NR R R eventualmente substituida, ou d) fazer-se reagir, para a obtenção de uma substância da fórmula geral Ib ou Ic, um derivado de ácido alcê-noico ou alcinoico da fórmula geral IX, X, XII ou XIII? 0 (IX) 8

OR

O CH«C- (CHJ -C ώ n

OR 21 (X) (XII) GH «GH- (CHJ -0-R10 2 2 n CH=C~ (CH2)n“0-R10 (XIII) onde R ° representa hidrogénio, um grupo alquilo, um grupo de bloqueio qualquer para uma função álcool ou um grupo carboxi esterificado, n 3 possui o significado acima citado e R representa um radical alquilo ou aralquilo qualquer, com um óxido de nitrilo da fórmula geral Xis O f-N=C-R2 (XI) 2 onde R possui o significado acima citado, com a con- o dição de R não poder ser alfa-aminoácido ou um di-péptido, no sentido de uma ciclo-adição 1,3-dipolar, eliminar-se, eventualmente o grupo de bloqueio R10 existente por meio de processos conhecidos pela literatura, converter-se a função álcool em um derivado activado para a permuta com aminas como, por exemplo, halogeneto on tosilato, e fazer-se reagir, em segui- da, com uma amina da fórmula geral NR R R com o si- 5 7 gnificado acima citado para R -R , ou e) saponificar-se um éster de ácido carboxílico da fórmula Ia ou Ib, obtido de acordo com a)-d) ao ácido carboxílico, ou dissociar-se hidrogenoliticamente um éster benzilico eventualmente existente, ou f) converter-se um éster alquilico de ácido carboxílico, obtido por processos a)-d), com uma amina primária ou secundária, correspondentemente substituiça, na amida, ou g) saponificar-se um éster monoalquilico de ácido fosfí-nico ou éster dialquilico de ácido fosfónico, obtidos de acordo com a) ou b) da fórmula geral Ia, por pro- 22 -

cessos em si conhecidos na literatura/ ao hemi-ester de ácido fosfónico, a ácido fosfónico ou a ácido fosfínico, ou h) converte-se inicialmente um ácido carboxílico obtido de acordo com e) em um derivado de ácido acti-vado, esterificar-se, este, em seguida, com álcoois, converter-se com aminas primárias e secundárias nas amidas, ou com aminoácidos, eventualmente carboxi--protegidos ou péptidos inferiores em péptidos acila-dos no azoto e eliminiados, em seguida, eventualmen-te, o grupo de bloqueio de carboxi na parte peptíti-ca ou transformar-se, por exemplo, por meio de trans-esterificação em um outro grupo, ou i) elixinar-se em um composto da fórmula geral Ia, obtido de acordo com processos a)-h), um radical 7 R , eventualmente usado como grupo de bloqueio, do átomo de azoto, por meio de processos conhecidos na literatura, ou j) c©nverter-se um composto, obtido de acordo com o processo i), cujo grupo carboxi se apresenta em forma esterificada ou como amida, por meio de reac-ç3o com um derivado de ácido carboxílico activado, ou eventualmente, um aminoácido protegido no azoto ou um péptido inferior, sob utilização dos reagentes usuais na química dos péptidos, em um derivado acilado no azoto, ou k) converter-se um composto.obtido de acordo com o processo j) por meio de dissociação do éster de ácido carboxílico, eventualmente presente, em um ácido carboxílico livre, ou 1) converter-se um composto, obtido pelo processo j) ou k), por meio de dissociação de um grupo de bloqueio de N, eventualmente introduzido com a parte de aminoácido, em um composto amino livre ou numa betaí- 23 -

na, ou m) converter-se um composto, obtido pelos processos c)-i), da fórmula geral Ia ou Ib, por meio de reac-ção com um éster monoalquiíico de ácido fosfínico, ou um éster dialquilico de ácido fosfónico dos agentes de alquilação, de preferência, um halogeneto de alquilo, em um composto de amónio quaternário, ou n) aeparar-se um composto, das fórmulas gerais la ou e Ib, obtido de acordo com os processos a)-m), que devido à sua estrutura química se apresenta em forma diastereoisómeras ou enantiómeras, de maneira em si conhecida nos estereoisómeros puros, isolando o) os compostos das fórmulas gerais Ia e Ib, obtidos de acordo com os processos a)-n) quer em forma livre, quer convertendo-os, no caso da existência de grupos ácidos ou básicos, eventualmente, em sais cristalinos fisiologicamente aceitáveis. A obtenção de sais fisiologicamente aceitáveis de eompostos das fórpulas ia e Ib, capazes de formação de sais, inclusive das suas formas estereoisómeras, é realizada de maneira em si conhecida. Desta forma os ácidos carboxilicos, ácidos fosfónicos e fosfinicos assim como os hemi-ésteres de ácido fsfónico, formam com reagentes básicos como hidróxidos, carbonatos, hidrogenocarbonatos, alcoolatos assim como amóniaco ou bases orgânicas, por exemplo, trime-til- ou trietilamina, etanolamina ou também aminoácidos básicos, por exemplo, lisina, ornitina ou arginina, sais de metais alcalinos, alcalinoterrosos ou, eventualmente de amónio substituido, estáveis, podendo também no caso dos ácidos fosfónicos, ser obtidos hidrogenofosfonatos estáveis pela transformação de somente um dos dois grupos OH ácidos. Desde que os compostos das fórmulas la e Ib apresentam grupos básicos no radical R^, também podem ser obtidos sais de adiçãc 24

de ácido estáveis, não tóxicos, com ácidos fortes. Para esfc finalidade são adequados tanto ácidos inorgânicos como também orgânicos, como ácido clorídrico, bromídrico, sulfuri-co, fosfórico, metanossulfónico, benzenossulfónico, p-tolue-nossulfónico, 4-bromobenzenossulfónico, ciclohexilamidossul-fónico, trifluorometilsulfónico, acético, oxálico, tartá-rico ou trifluoracético.

No caso dos sais de amónio quaternários, obtidos por peralquilação de compostos amino de acordo com o processo m), são adequados como ides contrários, de preferência os anides que deixam o agente de alquilação com©, por exemplo, alquil- ou arilsulfonato assim como brometo e iode-to, podendo estes também ser substituídos por outros anides fisiologicamente aceitáveis por meio de permutadores de ides adequados. A obtenção e a conversão dos óxidos de nitrilo usados como substâncias de partida para ciclo--adiçdes 1,3-dipolares são descritas em uma monografia (K.P.G. Torsellí Nitrile Oxides, Nitrones e Nitronates em Organic Synthesis, VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim 1988). Os halogenetos de hidroxiamoílo, que servem como estágios prévios, podem ser obtidos por processos conhecidos na literatura, por meio de halogenação de aldoximas correspondentes ou, em caso de ésteres de ácido clorooxiiminoacético, por meio de uma reacção de diazotaçâo, partindo de ésteres gli-cinoalquílicos (G. S. Skinner, J. Am. Chem. Soc. 46 (1924), 731 e seguintes), No caso do óxido de formoxiiminonitrilo, a cloroglioxima, obtida de acordo com a literatura (A. P, Kozikowski, J. Org. Chem. 48 (1983), 366) foi desidrohalo-genada com trietilamina. Os compostos nitro, igualmente usados, são particialmente conhecidos da literatura ou podem ser obtidos, em principio, por processos conhecidos da li-tératura, assim, por exemplo, o éster de ácido 4-nitrobu-tírico por meio de adição, catalisada com fluoreto ou base, de nitrometano em derivados de ácido acrílico (S. Kanbe et 25

al., Scient. Pap. Inst. Ehys. Chem. Res. (Jap.) 58 (1964) 118-121? D. W. Chasar, Synthesis 1982, 841 - 42; N. Ono, Synthesis 1984, 226-227).

Pela utilização de 1,8-diazabiciclo (5.4.0)undeca-7-eno (DBU) como base e uma condução especial da realização, isto é adição dos esteres de ácido acrílico a um excesso de 5 até 50 vezes em nitrometano, contendo quantidades catalíticas de DBU numa gama de temperaturas de cerca de 60 até 100°C, de preferência, cerca de 70 até 90°c, os rendimentos conhecidos pela literatura podem ser consideravelmente melhorados, assim como a formação das substâncias de bis-adição, que normalmente se formam como produtos secundários dificilmente separáveis, pode ser extensamente evitada. Também a adição, descrita como remdimentos de cerca de 30%, de nitrometano em ésteres de ácido vinilfosfónico (T. A. Mastryukova, Izv. Akada. Nau&. SSSR, Ser. khim., 6 (1971), 1353-1354) pode ser consideravelmente aperfeiçoada com esta variação e até pode ser transferida aos ésteres de ácido alquil-vinilfosfínicos correspondentes, o que corresponde a um processo até então não conhecido na literatura.

Por meio de reacção prévia de cloreto de acrilo com álcoois correspondentes substituidos, sob utilização de um receptor de ácido como, por exemplo, trie-tilamina, podem ser obtidos os ésteres de álcoois superiores, cíclicos assim como quirais, isento de racemização, aqui igualmente usados, parcialmente não conhecidos na literatura, que vantajosamente podem ser levados conjuntamente aos passos de síntese subsequentes. Os derivados de alil- e propargi-lamina, eventualmente substituidos, das fórmulas gerais VI e VII são, em geral, conhecidos na literatura como substâncias básicas ou até são comercializados. No caso de aminas primárias ou secundárias são introduzidos grupos de 151o-queio conhecidos na literatura antes da cicloadição, de preferência, grupos de bloqueio de acilo ou de uretano com©, por exemplo, acétilo, benzoílo t-butoxicarbonilo, butilo 26 -

ou benziloxicarbonilo, que após a cicloadição podem ser even·· tualmente eliminados novamente por meio de processos conhecidos na literatura. Estes grupos de bloqueio são introduzidos, de preferência, por processos conhecidos da química dos péptidos como, por exemplo, o grupo N-butoxicarbonilo por meio de reacção da amina correspondente com dicarbo-nato de di-butilo em éteres alifáticos sob utilização de uma amina, como por exemplo, trietilamina. A obtenção dos óxidos de nitrilo, que facilmente tendem à oligomerização, é realizada vantajosamente "in situ", em presença dos compostos VI ou VII como participantes da reacção, sem isolamento intermediário. No caso da obtenção de compostos nitro de acordo com Mukaiyama são usados para a desidratação, de preferência, isocianatos aromáticos, como, por exemplo, isocianato de fenilo ou, de preferência 2 de 1,4-fenilenodiisocianato ou 2,4-diisocia-nato. Recomenda-se, neste caso, trabalhar num solvente de tolueno ou diluente aprótico, inerte em relação aos participantes na reacção como, por exemplo, acetato de etilo, dimetii. formamida, dimetilacetamida, éter dialquilico, tetrahidro-furano, hidrocarbonetos halogenedos, por exemplo, diclorome-tano, clorofórmio ou dicloroetano, hidrocarbonetos como hexano, ciclohexano, benzeno, tolueno ou outras substâncias aromáticas substituidas, sendo também adequadas misturas dos dissolventes acima citados. Para a obtenção dos óxidos de nitrilo são usadas bases orgânicas ou inorgânicas como, por exemplo, apinas terciárias, carbonatos ou hidróxidos de metais alcalinos.

Neste caso, trabalha-se com utilização de bases orgânicas, de preferência, nos hidrocarbonetos alifáticos ou aromáticos, eventualmente clorados, ou éteres alifáticos, também cíclicos acima citados, enquanto que na utilização de bases inorgânicas pode trabalhar-se adicionalmente, também em misturas de dissolventes bifásicos como, por exettplo, acetato de etilo/água ou diclorometano/água. A 27

obtenção dos óxidos de nitrilo e a cicloadição são realizadas,, em geral, a temperaturas entre cerca de -20°C e + 80°C, de preferência, porém, entre 0°C e +40°C.

Os participantes na reacção da cicloadi-ção são usados, de preferência, em quantidades eguimolar, porém, no caso de um óxido de nitrilo, que tende à oligomeri-zação, a olefina necessária para a recepção também pode ser usada num excesso de uma até dez vezes. Também a base usada para a libertação dos óxidos de nitrilo dos halogenetos de hidroxiamoílo pode ser usada em proporção eguimolar ou num excesso de várias vezes. A fim de obter os óxidos de nitrilo em uma concentração estacionária baixa, recomenda-se realizar a libertação por base ou isocianato continuamente durante um período de tempo prolongado que, de preferência, corresponde a 2 até 24 horas. Isto pode ser realizado, vantajosamente, por meio de adição lenta, gota a gota, de um dos participantes necessários em uma solução contendo os restantes reagentes. A dissociação dos grupos de bloqueio de acilo ou uretano, contidos no substituinte da fórmula geral Ia, é realizada, em geral, de acordo com processos conhecidos da quiímca dos péptidos, devendo ser preferida, em caso do grupo t-butoxicarbonilo, usado de preferencia, uma dissociação ácida, por exemplo, com ácido clorídrico alcoólico ou ácido trifluororacético, enquanto que o grupo de bloqueio de benziloxicarbonilo pode ser eliminado tanto hidro-genoliticamente como também por meio dev/saponificação alcalina. 0 ácido usado para a dissociação protonolítica de grupos de bloqueio é usado, neste caso, vantajosamente num excesso maior, e no caso do uso de ácido trifluoracético recomenda--se, mesmo para o aceleramento da reacção, o uso de ácido puro como dissolvente ou de uma mistura com um hidrocarboneto halogenado como, por exemplo, diclorometano. Na utilização de hidrácidos de halogéneos, usa-se, de preferência, uma solução alcoólica, de preferência, metanólica ou etanólica dos 28 mesmos. A dissociação ácida de grupos de bloqueio pode ser realizada em uma gama de temperatura de cerca de O ate +80°C, depreferência, porém, a cerca de 20 até 40°C. Para a dissociação hidrogenolítica do grupo de bloqueio de benziloxi carbonilo são adequados os dissolventes conhecidos da literatura como, por exemplo, álcoois inferiores ou ácido acético glacial, de preferência, metanol. Como catalisadores são lsados, de preferência, catalisadores heterogéneos, como por exemplo paládio sobre carvão. A hidroârenação pode ser realizada à pressão normal ou mediante sobrepressão de hidrogénio em uma autoclave de hidrogenação a temperaturas de cerca de O até +80°C, de preferencia, â temperatura ambiente. Os grupos esteres, contidos no radical í< das fórmulas la e Ib, podem ser dissociadas tanto em meio ácido como também alcalina, assim como, no caso de ésteres benzilicos, também hidrogenolíticamente. No caso de ésteres cíclicos substituídos como, por exemplo, ésteres (+)- e (-)-mentílicos, mostrou-se especialmente adequada uma mistura de ácido tri-fluoracético e ácido trifluormetanossulfónico em conjunto com tioanisol (s.H. Yajima et al., Chem. Pharm. Buli. 34 (1986), 4356 - 4361). No caso dos esteres t-butílicos usados, as condições acima descritas para a dissociação do grupo de bloqueio de N-butoxicarbonilo podem ser igualmente usadas vantajosamente, de maneira, que no uso de constituintes de estrutura correspondentes os grupos de bloqueio em ambos os substituintes de heterociclo podem ser dissociados simultaneamente. Os ésteres alquilicos, igualmente usados, são submetidos, de preferência, a hidrólise alcalina com um excesso equimolar de até cinco vezes de hidróxido alcalino em solução aquosa ou aquo-alcóolica. No caso das 3-alcoxicarbonil--isoxazolinas e -isoxazóis bastam quantidades equimolares de hidróxido de metal alcalino e temperaturas de cerca de O até +20°C devido ao grupo éster activado, enquanto que os grupos de ésteres ligados ao heterociclo através de um ou vários grupos metileno, necessitam de condições mais intensas na forma de temperaturas mais elevadas e/ou maiores excessos em hidróxido de metal alcalino. Para a dissociação dos radicais de t-butilo ou tetrahidropiranilo, usados de prefeên- - 29 -

oia como grupo de bloqueio de álcool, são usados, de preferência, ácidos como, por exemplo, ácido trifluoracético ou ácido clorídrico alcoólico, de preferência, metanólico.

Um excesso de ácido ou, no caso de ácido trifluoracético a utilização do ácido puro, exerce, igualmente, uma influência positiva sobre a velocidade da reacção. Como temperatura de reacção é adequada uma gama de cerca de O até +80°C, de preferência, porém, de cerca de 20 até 40°c. A conversão dos ésteres de ácidos fosfónicos e fosfínico no ácido livre correspondente deve ser realizada, vantajosamente, sob condições ácidas, de preferência, em meio anidro, por vezes, por exemplo, pela utilização de um excesso de 2 até 100 vezes de ácido bromídrico em ácidos orgânicos, como, por exemplo, ácido acético, numa concentração de 0,5 até 4 N, de preferencia, 2 até 4 N, sendo escolhida como temperatura de reacção para uma dissociação cuidadosa, de preferência, uma gama de cerca de +20 até +50°C. Para a obtenção dos hemi-êsteres de ácido fosfínico a partir de diésteres de ácido fosfónico, assim como também de ácidos fosfínicos a partir de ésteres de ácido fosfínico, os ésteres correspondentes são submetidos, em geral, a uma hidrólise alcalina, de preferência, em um meio aquoso. Neste caso é usado para a dissolução do diéster, vantajosamente, um álcool inferior miscível com água e, em seguida, é adicionada uma base aquosa 1 até 5 N, por exemplo, hidróxido de sódio. A base pode ser usada em quantidades es-tequiométricas ou em excesso de até 10 vezes, de preferência, em um excesso de cerca de 2 até 4 vezes em uma gama de temperaturas de cerca de 0 até +40°C, especialmente, cerca de 20 até 40°C.

Por meio de combinação vantajosa dos ésteres para a parte de óxido de nitrilo e grupos de bloqueio de uretano ou acilo para a parte de amina, podem ser obtidos heterociclos das fórmulas Ia e Ib, cujo grupo de ácido ou de base funcional pode ser libertado conjuntamente 30

ou separadamente pelo uso de processos alcalinos# ácidos ou hidrogenolíticos, parcialmente descritos acima. Para a substituição de um substituinte permutável W da fórmula geral VIII, que aqui representa vantajosamente um átomo de halogénio, £az-se reagir com uma amina secundária, usada em um excesso de cerca de 2 até 50 vezes. Como dissolventes são adequados os acima citados para a execução da cicloadi-ção, assim como no caso de aminas presentes em forma líquida, também a própria amina. A temperatura da reacção pode corresponder de 0°C até a temperaturas de ebulição do dissolvente usado, de preferência, a cerca de 0°C até +50°C. Na utilização de aminas voláteis ou gasosas a reacção é realizada, vantajosamente, numa autoclave mediante sobre-pressão. No uso de compostos da fórmula geral VIII, que contém no radical R um éster primário como, por exemplo, éster metílico ou etílico, pode ser conseguido, com um excesso correspondente de amina e eventualmente aumento da temperatura de reacção, também a simultânea conversão da função de éster na função de amida correspondente.

Os compostos da fórmula la com uma função de ácido carboxílico livre em R podem ser convertidos nas amidas correspondentes, após activação do grupo carboxi, com aminas primárias e secundárias assim como também com aminoácidos de carboxi protegido ou péptidos inferiores como participantes reactivos. Para a activação usam--se, vatajosamente, processos conhecidos da química dos péptidos como, por exemplo, o processo de hidroxibenzotriazol/ /diciclohexilcarbodiimida (W. Koenig, R. Geiger, Chem. Ber. 103 (1970), 788-798 e 2034-2040; Z. Naturforsch. 216 (1966) 426), a activação por meio de anidridos de ácido propanofos-fónico (PPA) (Angew. Chem. Int. Ed. 19 (1980) 133) ou por meio de anidrido de ácido metiletilfoifínico (ΜΕΡΑ) (patente US 4.426.325), sendo usado como dissolvente, além de éteres alifáticos e cíclicos, também hidrocarbonetos clorados, assim como formamida e dimetilformamida, como bases auxiliares, de preferência, aminas terciárias como, por 31 -

exemplo, trietilamina, N-etilmorfolina ou piridina, e tra-babalbando-se na gama de temperaturas de cerca de -10°C até +50°C, de preferência, a cerca de 0°C até +20°C. Os compostos da fórmula Ia com grupos amino livres no radical e, de preferencia, grupo carbóxi bloqueado em R , podem ser convertidos com aminoácidos protegidos no azoto péptidos inferiores e outros derivados de ácido carboxílico, capazes de acilação, em principio da mesma maneira, raas amidas ou péptidos. Neste caso entende-se naturalmente, que no uso de uma técnica de grupos de bloqueio correspondentemente escalonada, em principio conhecida da química dos péptidos, podem ser condensados quaisquer outros aminoácidos na cadeia lateral R como também R dos coppostos Ia.

Desde que sejam desejados os derivados de péptidos ou outros derivados de acilo na forma das funções de aminoácidos ou de ácido carboxílico livres, os grupos de bloqueio correspondentes podem ser eliminados isoladamente ou também conjuntamente da maneira acima já descrita. Neste caso é possível, por exemplo, pela utilização de ácidos fortes como, por exemplo, ácido clorídrico ou bromídrico, tanto dissociar em álcoois primários alifáticos os grupos de bloqueio de N-uretano, eventualmente presentes, como transesterificar também simultaneamente, os grupos ester existentes em R como, por exemplo, um éster alquíli-co, t-butílico ou benzílico nos ésteres correspondentes do álcool usado.

Para a síntese de compostos da fórmula geral Ib, partindo de derivados de ácido penténico ou pen-tínico assim como os derivados de nitroetanol, correspondentemente protegidos no oxigénio, pode ser usada, em principio, a cieloadição 1,3-dipolar, descrita para Ia, de acordo com Mukaiyama. Após a dissociação do grupo de bloqueio do oxigénio, como acima descrito, a função hidróxi é convertida em um derivado activado, o que é conseguido, por exemplo, por meio de reacção com cloreto de tionilo ou oxicloreto 32 - Λ V.v

de fósforo, obtendo-se 3-clorometil-isoxazol ou -isoxazolina. 0 reagente respettivo é usado, neste caso, em proporção equimolar ou, de preferência, em um excesso de até cinco vezes. Como dissolvente são adequados hidrocarbonetos halo-genados ou, de preferência, éteres alifáticos como, por exemplo, éter dietílico ou tetrahidrofurano, e a temperaturas de reacção pode corresponder a cerca de 0 até +60°C, de preferência, porém, a cerca de 20 até 40°C.

Em seguida, faz-se reagir com amoníaco ou uma amina correspondentemente substituida a fim de obter um derivado de 3-aminometilo, eventualmente substituído, o que e realizado, de preferência, pelo uso de um excesso 2 até 100 vezes de amina em um álcool inferior, por exemplo, metanol ou etanol numa gama de temperaturas de 0°C até ao ponto de ebulição, do dissolvente usado. Para evitar, na utilização de beterociclos, substituidos com ester alquílico, a formação simultânea de amida, mostraram-se adequadas temperaturas de cerca de 0 até 20°C e a adição de quantidades catalíticas de iodeto de tetrabutilamónio. Desde que se deseja uma função de ácido carboxílico livre no substituinte 5, o grupo de ester introduzido conjuntamente pode ser saponifi-cado de acordo com os processos acima descritos ou conhecidos da literatura. Desde que se pretenda realizar, em seguida, outras reacções no substituinte carboxi, recomenda-se a prévia protecção de um grupo amino primário ou secundário com um dos grupos de bloqueio de N acima descritos. Pela escolha correspondente dos grupos de bloqueio podem ser usadas todas 1 2 as variações dos radicais R e R , acima descritos, igualmente para corepostos da fórmula geral Ib.

Para a conversão em derivados de amónio quarternário fazem-se reagir, de preferência, compostos da fórmula geral Ia ou Ib, que apresentam em R^ um grupo amino primário, secundário ou terciário, com um excesso de um agente de alquilação, por exemplo, um halogeneto de alquilo, um mesilato ou um tosilato, neste caso, de preferência, um io- 33

deto de alquilo assim como uma base como, por exemplo, carbonato ou hidróxido de metal alcalino, em dissolventes apróticos dipolares, como, por exemplo, acetona, sulfóxido de dimetilo ou dimetilformamida ou misturas de álcoois inferiores como, por exemplo, metanol ou etanol com água, a temperaturas de cerca de 0°C até +50°C. No caso do uso preferido de iodetos de alquilo o iodeto de tetraalquilamónio, que se forma, pode ser levado directamente para a sua utilização farmacológica.

Desde que os compostos das fórmulas gerais Ia e Ib se apresentem em formas diastereoisómeras ou enantiómeras e se formem na síntese escolhida como as suas misturas, a separação nos estereoisómeros puros pode ser conseguida quer por cromatografia em um material de suporte, eventualmente, quiral quer, desde que os compostos racémicos das fórmulas Ia e Ib sejam capazes de formação de sal, por meio de cristalização fraccionada dos sais diastereómeros, formados com uma base ou ácido opticamente activos como substâncias auxiliar. No caso de péptidos ou ésteres de álcoois quirais da fórmula Ia, a quiralidade do radical de aminoácido ou álcool, introduzido na forma isenta de enantiómeros, pode ser usada para a separação dos diastereómeros. Como fases estacionárias quirais para a separação em fina camada ou por meio de cromatografia de coluna de enantiómeros das 2--isoxazolinas, que, em geral, se formam de maneira racémica, com um átomo de carbono assimétrico em posição 5, são adequados, por exemplo, suportes de gel de sílica modificados (denominados fases de Pirkle) assim como hidrocarbonetos macro-moleculares como, por exemplo, triacetilcelulose. Para finalidades analíticas também podem ser usados, após derivatização correspondente, coihecida do técnico, processos de cromatografia gasosa em fases estacionárias quirais. Para a separação de enantiómeros dos ácidos carboxílicos, fosfónicos e fosfínicos racémicos são formados os sais diastereómeros, de diferente solubilidade, com uma base opticamente activa, em geral obtida no comércio, como por exemplo, (-)-nicotina, ] (+)- e (-)-feniletilamina, bases de quinina, L-lisina ou L- í e D-arginina, o componente mais dificilmente solúvel é isolado 34 -

como substância sólida, o diastereómero mais facilmente solúvel é separado das águas mães, a parte dos sais diastereó-meros assim obtidos são obtidos os enantiómeros puros por processos usuais. De maneira em principio igual os compostos de amino racémicos das fórmulas Ia e Ib podem ser convertidos nos enantiómeros puros com ácidos opticamente acti-vos como, por exemplo, ácido (+)-cânforo-10-sulfónico, ácidos D- e L-tartáricos, eventualmente substituídos com hidroxi, ácido D- e L-lactico assim como ácido (+) e (-)-mandélico. A utilização de ésteres guirais dos compostos amino, aqui usados, favorece, frequentemente, a separação dos sais dias-tereómeros por meio de cristalização fraccionada.

Os medicamentos de acordo com a invenção que contém como substâncias activas os compostos das fórmulas gerais Ia, Ib e Ic:

(Ib)

(lc) R^ representa 2-, 3-. 4-piridilo ou um radical da fórmula lis R R 1 1 c - N+ 1 1 4 R R6 - R7 (II) onde 35 - •^'fflncwaaxtt

3 4 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou C-j-C^ alquilo; R representa um par de electrões livres ou hidrogénio? 6 7 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio? C^-Cg-alquilo? C^-Cg-cicloalquilo? Cg-G^-aril-C^-C^-alquilo; carbamitnidoílo? G^-Cg-alquilcarbo-nilo, C^-C^-alcenilcarbonilo, C^-Cg-alquiloxicarbonilO/ Cg-C^-aril-C-^-C^-alquilcarbonilo, Cg-C^-aril-C^-C^-alqui-loxicarbonilo, o radical de um alfa-aminoácido de origem natural ou ácido gama-aminobutírico, que podem estar substitui-dos por C^-Cg-alquilo, hidroxi, halogénio, amino ou nitro? ou R° e R formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto? ou 5 6 7 R , R , R representam, independentemente 6 7 um do outro, C^-C^-alquilo ou C^-Cg-cicloalquilo ou R e R formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo de cinco ate sete membros? r representa um radical de fórmula III: - <®2Jn

X (III) onde n representa O ou um numero inteiro de 1 até 4? X representa hidróxi? C^-C^-alquiloxi? carboxi? halogenoformilo? formilo? oxiimino? C -C -alquiloxi- X X u 36 -

carbonilo; benziloxicarbonilo ou C--C -cicloalquiloxicarboni· o 6 lo, que podem estar substituídos uma ou várias vezes por C^-Cg-alquilo; ou representa carbonilo, que está ligado de maneira peptídica com um alfa-aminoácido de origem natural ou ácido gama-aminobutírico ou um dipéptido, ou representa aminocarbonilo, podendo amino estar mono- ou disssubstituído por C^-Cg-alquilo ou monossubstituido por fenilo C^-Cg-al-quilo, ou ambos os radicais amino formam em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterocíclo de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou X representa um grupo da fórmula IV: 0

VI - P - Y (IV)

I z na qual Y e Z representam, independentemente um do outro, hidróxi, C^-C4-alguilo ou C^-C^-alquiloxi; e A representa uma ligação C,C simples ou uma ligação C,C dupla, eventualmente em forma de estereoisó-mro puro e/ou como sais fisiologicamente aceitáveis, quer isoladamente, por exemplo, em microcápsulas, uma mistura entre si ou, de preferência, em combinação com excepientes farmacêuticos adequados, diluentes e/ou outras substâncias auxiliares, podem ser administradas de modo parenteral, rectal ou oral. As formas de preparação galénica sólidas ou líquidas adequadas são, por exemplo, granulados, pós, drageias, compri 37 -

J midos, (micro)cápsulas, supositórios, xaropes, sucos, suspensões, emulsões, gotas ou soluções injectáveis, assim como preparados com libertação retardada das substâncias ac-tivas, em cuja preparação são utilizados, geral mente, agentes auxiliares como excipientes, agentes desintegrantes, aglutinantes, agentes de revestimento, de intumescimento, deslizantes ou lubrificantes, aromatizantes, adoçantes, ou promotores da dissolução. Como substâncias auxiliares fre-guentemente usadas citam-se por exemplo, carbonato de magnésio, dióxido de titânio, lactose, manitol e outros açúcares, talco, albumina do leite, gelatina, amido, celulose e seus derivados, óleos animais e vegetais como óleo de fígado de bacalhau, óleo de girassol, de amendoim ou sésamo, polietileno-glicóis e dissolventes como, por exemplo, água esterilizada, soro fisiológico e álcoois mono- e polivalentes, pomaxem-plo, glicerina. No caso da obtenção de soluções aquosas dos ácidos carboxilicos, fosfónicos e fosfínicos, de reacção fortementè ácida, de acordo com as fórmulas Ia e Ib, a substância activa é convenientemente formulada de tal maneira, que se apresenta em forma de sal com valores de pH fisiologicamente aceitáveis.

Os preparados farmacêuticos são obtidos e administrados, de preferência, em unidades de dosagem, contendo cada unidade, como constituinte activo, uma dose determinada de pelo menos um composto de acordo com as formulas Ia e Ib, eventualmente em forma estereoisomérica pura e/ou de sal. No caso de unidades de dosagem sólidas como comprimidos, cápsulas, drageias ou supositórios, esta dose pode corresponder até a cerca de 1000 mg, de preferência, porém, a cerca õe 50 até 300 mg, e, no caso de soluções injectáveis em forma de ampolas, até cerca de 300 mg, de preferência, porém, a cerca de 10 até 100 mg.

Para o tratamento de um paciente adulto, de cerca de 70 kg, são indicados - conforme a eficácia dos conpostos de acordo com as fórmulas Ia e Ib - para o 38 -

ser humano e animal, doses diárias de cerca de 50 até 3000 mg de substância activa, de preferencia, cerca de 150 até 1000 mg, no caso de administração oral e de cerca de 50 até 1000 mg, de preferência, cerca de 100 até 300 mg no caso de aplicação intravenosa. Em certas circunstâncias, porém, também podem ser adequadas doses diárias maiores ou menores. A administração da dose diária pode ser realizada tanto de uma só vez em forma de uma unidade de dosagem isolada ou, então, várias unidades de dosagem menores, como também pode ser administrada em várias vezes em doses subdivididas, em intervalos determinados. Finalmente, os compostos das fórmulas Ia e Ib, as suas formas eventualmente estereoisoméricas e/ou eventualmente seus sais fisiologicamente aceitáveis também podem ser combinadas, na obtenção das formas de preparação galénicas acima citadas, com outras substâncias actiivas adequadas, por exemplo, substâncias que favorecem a circulação de sangue, inibidores de agregação de plaquetas, inibidores de agregação de trombócitos e antagonistas de cálcio.

Exemplos

Os exemplos seguintes elucidam a invenção sem, no entanto limitála na sua extensão.

As estruturas dos compostos, descritos a seguir, foram asseguradas por meio de análise elementar, 1 13 espectros IR, H-NMR e C-NMR. Os valore s delta dos espectros NMR citados a seguir são dados em ppm, as constantes de copu-lação J em Hz. As formulas estruturais dos exemplos de obtenção descritos a seguir, são reunidas na Tabela 1. 39 -

Trifluor- acetato 41

Ta~bela 1 (continuação)

Formule.

Exemp.n2 Exemp.n2 Fórmula

I 43

Exemplo a)

J b) J 1 * 3~carboxi-5-aminometil-isoxazol N-t-butoxicarbonil-propargilamina

Colocam*-se 24 g (0,44 mol) de propargilamina e 44,5 g (0,44 mol) de trietilamina previamente em 350 ml de éter dietílico, adiciona-se, sob refrigeração com gelo, gota a gota, uma solução de 96 g (0,44 mol) de dicarbonato de di-t-butilo em 150 ml de éter dietílico e agita-se, então, durante cerca de 2 horas à temperatura ambiente. Lava-se com solução saturada de cloreto de amónio até pH 6 e, em seguida, com água. Após secagem e concentração, o produto pode ser cristalizado em éter de petróleo em um dispositivo de baixa temperatura.

Rendimento s 62 g, ponto de fusão * 41°C.

Cicloadição com óxido de etoxicarbonilnitrilo

Obtem-se éster etílico de ácido cloroxiiminoacético partindo-se do cloridrato de éster etílico de glici-na, de acordo com um processo da literatura (G.S. Skinner, J. Am. Chem. Soc. 46 (1924), 731). Adicionam-se 14,55 g (0,096 mol) deste produto, dissolvido em 100 ml de tetrahidrofurano, gota a gota, à temperatura ambiente, no decorrer de cerca de 5 horâs, a uma solução de 17,07 g (o,11 mol) da propargilamina bloqueada de passo a) e 11,14 g (0,11 mol) de trie-tilamina em 400 ml de éter dietílico. Agita-se durante a noite, lava-se com solução de cloreto de amónio diluído e água, seca-se e concentra-se sob vácuo.

Rendimentoí 25 g. 0 produto éster etílico de ácido 5--t-butoxi-carbonilaminometil-isoxazol-3-carboxílico pode ser purificado ainda mais por meio de cristalização em acetato de etilo/éter de petróleo, resultando um ponto de fusão de 72 C. 44 c) Saponificação do éster de ácido carboxílico

Dissolvem-se 9,75 g (0,036 mol) do produto de b) em 80 ml de etanol, adicionam-se 75 ml de NaOH IN e agita-se â temperatura ambiente sob controlo por cromatografia de camada fina até ao termo da saponificação. Após a eliminação do etanol sob vácuo, acidifi-ca-se com ácido clorídrico diluído até pH 2-3, extrai--se várias vezes com diclorometano e acetato de etilo, lava-se com pouca água, seca-se e concentra-se. A cristalização em éter dietílico/éter de petróleo fornece 7,18 g de produto analiticamente puro, de ponto de fusão 120 - 121°C. d) Dissociação do grupo de bloqueio de t-butoxicarboni-lo

Dissolvem-se 6,9 g do produto de c) em 125 ml de diclorometano, adicionam-se, sob refrigeração com gelo, cerca de 25 ml de ácido trifluoracético e agita-se, em seguida, â temperatura ambiente sob controlo por cromatografia de camada fina até ao termo da reacção. Após concentração sob vácuo, elimina-se o excesso de ácido trifluoracético várias vezes com diclorometano e agita-se o resíduo sólido, remanescente, com éter dietílico. Ofotem-se 7,16 g do trifluoracetato de 5--aminometil-3-carboxi-isoxazol analiticamente puro, Para a conversão na betaína dissolve-se o sal em água, ajusta-se com solução de amoníaco diluída a pH 7 e precipita-se a betaína pela adição lenta de acetona.

Ponto de fusão s 153°C ^H-NMR (trifluoracetato em DMSO-dg): delta = 4,5 (s, 2H, CH2-N), 7,1 (s, 1H, 4-H), 9,4 (sb, 5H ácidos). - 45 -

Exemplo 2 í 5-benzilaminometil~3-carboxi-isoxazol

Protege~se a N-benzil-propargilamina, como descrito no exemplo la), por meio de dicarbonato de di-t-butilo. A cicloadição com óxido de etoxicarbonilnitrilo, saponificação do grupo éster, dissociação éo grupo de bloqueio de N e precipitação da betaína do trifluoroacetato inicialmente formado, são realizadas como é descrito no exemplo ld)-~ld). 0 produto analiticamente puro obtido apresenta um ponto de fusão de 128°C. ^H-NMR (betaína em DgO/KfaOD): delta « 3, 6 e 3,7 (2s, res- pectivamente 2H, 2 GH2) 6,3 (s, 1H, 4-H), 7,0 - 7,3 (m, 5 H de arilo).

Exemplo 3 : Cloridrato de 5-pirrolidinometil-3-pirrolidino-carbonil-2-isoxazolina. a) Cicloadição com brometo de alilo

Colocam-se 48,39 g (0,4 mol) de brometo de alilo e 45,47 g (0,3 mol) de éster etílico de ácido cloroxi-imino-acético em 700 ml de éter dietílico previamen-te em um recipiente e adiciona-se, no decorrer de 6 horas, gota a gota, uma solução de 35,44 g (0,35 mol) de trietilamina em 200 ml de éter. Agita-se durante a noite, separa-se do sal precipitado por meio de filtração, lava-se com solução de cloreto de amónio diluída e com água até à neutralidade. Após secagem e concentração, remanescem 65 g de 5-bromo-metil-3-etoxicarbonil-2-isoxazolina, que podem ser recristalizados em éter dietílico/éter de petróleo. Ponto de fusão i 54°C. b) Reacção de substituição com pirrolidina

Dissolvem-se 11,8 g (0,05 mol) do produto de a) em 200 ml de etanol e 82 ml de pirrolidina e aquece- - 46 -

-se durante 2,5 horas ao refluxo. Após concentração sob vácuo, retoma-se em ácido clorídrico 2 N, lava--se com éter dietílico, neutraliza-se a fase aquosa, extrai-se várias vezes com diclorometano, seca-se a fase orgânica e concentra-se, e precipita-se, finalmente, o produto desejado em éter dietílico pela adição de ácido clorídrico etanólico. Remanescem 10,7 g de cloricrato analiticamente puro de ponto de fusão 207°C. 1H-NKR (cloridrato em CDC13): delta = 1,8 - 2,4 (m, 8H, 4 CH2) 2,8-4,0 (m, 12 Η, 4-H e 4 CH2-N), 5,3 - 5,9 (mc, 1H, 5-K).

Exemplo 4 : Ácido 5-aminometil-isoxazol-3-acético a) Éster etílico de ácido 3-hidroxiiminopropiónico A síntese é realizada analogamente a um processo da literatura (Pat. TJS 4 499 278), partindo de éster etílico de ácido fórmico e acetato de etilo. b) CicloadiçSo com N-t-butoxicarbonil-propargilamina.

Colocam-se 6, 6 g (0,05 mol) do produto de a), dissolvidos em 100 ml de diclorometano, a 0°C, previamente em um recipiente e adiciona-se, no decorrer de 30 minutos, gota a gota, uma solução de 6 g (0,055 mol) de hipoclorito de t-butilo em 20 ml de diclorometano. Agita-se, após a retirada do banho de refrigeração, durante 1 hora, adiciona-se uma solução de 7,8 g (0.05 mol) de N-t-butoxicarbonilpropargilamina em 50 ml de diclorometano, adiciona-se, então, no decorrer de 6 horas, gota a gota, uma solução de 8,3 ml (o,06 mol) de trietilamina em 100 ml de diclorometano e agita-se durante a noite. Lava-se a solução reactiva com água, ácido cítrico diluído e novamente com água, seca-se e concentra-se. Obtem-se 14,2 g - 47

de um óleo# que pode ser purificado ainda mais por meio de cromatografia em gel de sílica sob utilização de éter t-butilmetílico e éter de petróleo (1s1) como eluente. c)

Saponificação do éster etílico e dissociação do grupo de bloqueio de N.

Estes dois passos são realizados analogamente aos exemplos lc) e ld). Dissolve-se o trifluoracetato# remanescente como óleo# em acetona# ajusta-se a um valor de pH de 5 até 6 com solução alcoólica de amoni^i co, separa-se a betaína precipitada por meio de sucção e seca-se sob vácuo. Fartindo de 8 g do passo b) são obtidos 3# 5 g de betaína analiticamente pura de ponto de fusão 216°C. ^H-NHR (betaína em D20): delta = 3#6 (s# 2H, CH2)# 4# 3 (s, 2H# CH2-N), 6# 5 (s# 1H# 4-H) .

Para o passo de cicloadição dos exemplos 5 até 11 seguintes são desidratados constituintes de estrutura de ácido nitrobutirico# em uma variação do processo de Mukaiyama (J. Am. Chem. Soc. 82 (1960), 5339 - 5342)# por meio de isocianatos. 0 decurso de síntese# partindo de derivados de ácido acrílico e nitrometano# é descrito a seguir de maneira representativa para os derivados que não podem ser obtidos no comércio, de modo exemplificativo para o éster benzilico de ácido nitrobutirico. Pelo uso de ésteres de ácido vinilfosfónico e de ácido vinilfosfínico correspondentemente substituídos, estes processos também pode ser usado para derivados de ácido 4-nitropropilfosfínico e -fosfónico.

Colocam-se 286 g (2,65 mol) de álcool foenzílico e 366 ml (2,65 mol) de trietilamina# sob refrigeração com gelo# previamente em um recipiente de 3 1 de éter t-butilmetílico. A<3icionam-se# gota a gota# 240 g (2# 65 mol) de cloreto de ácido acrílico# agita-se durante 2 horas â temperatura ambiente# lava-se a fase orgânica várias vezes 48

com água# seca-se e concentra-se sob vácuo.

Adiciona-se o éster benzilico de ácido acrílico, obtido com rendimento quantitativo, gota a gota, a uma temperatura de banho de 70°C a uma solução de 2,5 1 de nitrometano e 10 ml de l,8-diazabiciclo-^/“5,4,0_J7 unde-aa-7-eno (dbu), previamente colocado em um recipiente, mantendo-se o valor de pH, que possivelmente diminui por meio de vestígios de ácido acrílico, constante pela adição de quantidades correspondentes de DBU. Após o termo da reacçlo exotérmica (elevação da temperatura até 90°C), deixa-se arrefecer durante 60 minutos, lava-se várias vezes com ácido clorídrico aquoso diluído e água, seca-se e concentra-se sob vácuo, ramanescente 464 g de um óleo castanho avermelhado que pode ser usado para a cicloadição sem outra purificação.

Da mesma maneira podem ser obtidos, por exemplo, os seguintes compostos de nitro usados adiantei éster metílico e etílico de ácido 4-nitro butírico Éster t-butílico de ácido 4-nitrobutíri-co Éster (+) e (-)-mentílico de ácido 4--nitrobutírico Éster cis-(3,3, 5)-trimetil-ciclohexílico de ácido 4-nitrobutírico

Ester dimetílico e dietílico de ácido 3--nitropropil-fosfónico (partindo de ésteres de ácido vinil-fosfónico)

Ester etílico de ácido 3-nitropropil-P--metil-fosfínico (partindo de éster etílico de ácido vinil--P-met il-fos fíni co) 49

5 : Cloridrato de éster benzílico de ácido 5-amino-metil-isoxazol-3-propiónico

Cicloadição

ColocamSse 78 g (0,5 mol) de N-t-butoxicarbonil--propargilamina em conjunto com 2,5 ml de trietila-mina e 96 g (o,6 mol) de fenilenodiisocianato em 2 1

J

Exemplo a) de tolueno, previamente, em um recipiente a 70°C, Adicionam-se 112 g (0,5 mol) do éster benzílico de ácido 4-nitro-butírico, acima descrito, ao qual foram adicionados 2,5 ml de trietilamina, gota a gota, no decorrer de 5 horas. Agita-se durante a noite à temperatura ambiente, separa-se da ureia precipitada por meio de sucção e lava-se cora diclorometano. Apés concentração, ramanescem 200 g de um preduto bruto oleoso gue pode ser purificada ainda mais por meio de cromatografia em gel de sílica (eluentes misturas de éter de petróleo/éter t-butilmetílico).

b) I

Dissociação do grupo de bloqueio de N

Tratam-se 25 g (0,064 mol) do produto obtido em a), â temperatura ambiente, com uma solução de 75 ml de ácido trifluoracético em 375 ml de diclorometano até ao termo da formação de gás (cerca de 1 hora!1. Retoma-se o trifluoracético, remanescente após concentração# em metanol e precipita-se, por meio de adição de ácido clorídrico etéreo, o cloridrato, gue pode ser convertido em uma forma analiticamente pura por meio de recristalização em metanol/éter t-butilmetílico.

Rendimentos 15 g;

Ponto de fusãot 172°C. "ba-NtlR (cloridoato em DMSO-dg) í delta = 2,8 - 3,0 (m4 4H, 2 CH2), 4,2 (s, 2H, CH2 N), 5,1 (s, 2H, CH2 0), 50 6,6 (s, 1H, 4-H), 7,25 - 7,45 (m, 5H, de arilo)

Os exemplos 6 até 11 da fórmula geral Ia, citados a seguir na tabela 2a, nos quais A representa uma ligação C,C dupla, são sintetizados analogamente ao exemplo 5 por meio de cicloadiçHo de compostos de nitro correspondentemente substituídos em N-t-buto-xicarbonil-propargilamina e dissociação do grupo de bloqueio de N. 51 -

52

Exemplo 12 : Ácido 5-aminometil-isoxazol-3-propiónico. A cicloadição é realizada, como é descri-crito no exemplo 5# partindo do éster t-butílico de ácido 4-nitrobutírico e de N-t-butoxicarbonil-propargilamina. 0 produto bruto obtido é tratado# analogamente ao exemplo 5b# com um excesso em ácido trifluoracético em diclorometano# ocorrendo simultaneamente tanto a dissociação do grupo éster como também do grupo de bloqueio de uretano. Retoma-se o resáduo remanescente em acetono, trata-se com carvão activado# filtra-se e ajusta-se o valor de pH para 6 com solução de amoníaco. Separa-se o produto# que cristaliza como betaína# após cerca de 24 horas# lava-se com acetona e seca-se. Quando necessário pode ser recris-talizado em água/acetona. P0nto de fusão: 218°C (sob decomposição) ^H-NMR (betaína em NaOD IN): delta = 2#5 e 2#9 (resp. t, 2H# J=7, 5# -CH2-CH2~), 3,9 (s, 2H, CH2-N), 6,3 (s# 1H# 4-H).

Exempcbo 13 * Ácido 5-(l-amino-l-metil-etil)-isoxazol-3--propiónico A 3,3-dimetilpropargilamina é dotada, como é descrito no exemplo la), com o um grupo de bloqueio de t-butoxicarbonilo. A ciclo-adição é realizada com éster t-butílico de ácido 4-nitrobutírico como é descrito no exemplo 5a). A dissociação dos grupos de bloqueio e conversão do trifluoracetato em betaína analogamente ao exemplo 12# fornece um produto analiticamente puro com ponto de fusão 219°C. 1H-NMR (betaína em D20): âelta = 1#7 (s# 6H, 2CH2)? 2,5 e 2,9 (resp# t# 2H# J=7,5-CH9-CH -), 6,4 (s, 1H, 4-H). 53

Exerrplo 14 t Ácido 5-benzilaminometil-isoxazol-3-propiónico

Faz-se reagir a N-benzil-N-t-butoxicar-bonil-propargilamina, do lado analogamente ao exemplo 2 com o grupo de bloqueio BOC, como é descrito no exemplo 5a) com éster t-butílico de ácido 4-nitrobutírico, elimina--se, então, os grupos de bloqueio analogamente ao exemplo 12 e precipita-se o produto como betaina.

Ponto de fusão $ 153°C. ^H-NMR (betaina em MeOH-d^): delta = 2,7 e 3,0 (resp. t, 2H, J=7,5, -GH2-CH2-), 3,85 e 3,93 (resp. s, 2H, 2CH2~n), 6.2 (s, 1H, 4-H), 1,2 - 7,4 (m, 5H, de arilo).

Exemplo 15 : Ácido 5-dimetilaminometil-iso3cazol-3-propiónico A cicloadição é realizada, como é descrito no exemplo 5a), partindo de N,N-âimetilpropargilamina e éster t-butílico de ácido 4-nitrobutírico, A dissociação do grupo de éster t-butílico é realizada analogamente por meio de cromatografia em gel de sílica (eluente* misturas de éter t-butilmetílico/metanol sob adição de amoníaco aquoso a 1%) e, em seguida, a betaina é precipitada em acetona, pelo aj uste do valor de pH para 6, 5 por meio de ácido trifluoracético.

Ponto de fusão: 85°C. 1H-NMR (betaina em DMS0-dg)í delta =2,2 (s, 6H, 2N-Me), 2,6 e 2,76 (resp. mc, 2H, -CH2-CH2-), 3,6 (s, 2H, CH2-N), 6.3 (s, 1H, 4-H).

Exemplo 16 t Cloridrato de acido 2-(5-aminometil-isoxazol--3-il)-etil-2-(P-metil)-fosfínico

Tratam-se 5 g (o,019 mol) do produto do exemplo 10 durante cerca de 70 horas, à temperatura ambiente, com uma solução de HBr em ácido acético glacial a 33%. Após concentração sob vácuo, agita-se com acetona e recris-taliza-se, em seguida em acetona/á@ua^. 54

Rendimento: 3 g de bromidrato?

Ponto de fusão : 198°C ^H-NMR (bromidrato em DMSO-dg) : delta »1,3 (d, J=14·, 3H, P-Me), 1,95 e 2,85 (resp. mc, 2H, -CH2-CH2), 4,3 (s, 2H, 6/ 6 (s, 1H, 4-H), 8,55 (4 H ácidos).

Exemplo 17 : Ácido 5-acetamidometil-isoxazol-3-propiónico PSe-se em suspensão 7 g (0,0413) do produto do exemplo 12, sob intensa agitação, em uma solução de 70 ml ds acetanidrido era 140 ml de pirjdina, dissolvendo-se lentamente o eduta. Após o termo da reacção (control por DC) concentra-se sob vácuo e cristaliza-se o produto em acetona.

Rendimento: 5,5 g;

Ponto de fusão : 134°C k*i-NMR (em DMSO-dg) : delta »1,9 (s, 3H, Ac), 2,8 - 3,05 (m, 4H, -CH2-CíI,-), 4,3 (d, J»6, 2 H, CH2-N), 6,3 (s, 1H, 4—H), 8,5 (t, iJ»6, 1H, 7>Tli).

Exemplo 18 : Iodeto de éster (-)-mentílico de ácido 5-tri-metilaminometil-isoxazol-3-propiónico.

Colocam-se 9,6 g (0,02 mol) do produto do exemplo 8 previamente em um recipiente em conjunto com 16,6 g (0,12 mol) de carbonato de potássio em 250 ml de acetona. Após adição, gota a gota. de 6,25 ml (0,1 mol) de iodeto de metilo, agita-se durante 3 dias â temperatura ambiente. Separa-se o sal precipitado por meio de filtração, concentra-se e cristaliza-se em agua.

Rendimento: 6#5 g; P0nto de fusão : 131°C (decomp.). ^”alfaJ7^° -40,0° (c = 1 em etanol) ^H-NMR (iodeto em MeOH-d^); delta = 0,7 (d, J=7, 3H, Me), 0,85 - 2,05 (m, 15H, 2 Me, 3CH2, 3CH), 2,77 e 3,05 (resp. mc, 2H, -CH2~CH2-), 3,2 (s, 9H, NMe3+), 4,7 (tnc, 1H, 55 -

CHO), 4,9 (s, 2H, CH2-N), 6,85 (s, 1H, 4-H).

Exemplo 19 : I0deto de éster (+)-mentílico do ácido 5-tri-met i1aminomet il-i soxaz ol-3-propióni co.

Faz-se reagir o produto do exemplo 7 como é descrito no exemplo 18, com iodeto de metilo e cristaliza-se em água.

Ponto de fusão : 130°C. alfa__7Q0 =* + 39,3° (c = 1 em etanol) "4-I-NMR s como no exemplo 18. i

Exemplo 20 s Cloridrato de éster (+)-mentílico de ácido j ! 5- (li-fenilalanil-amino)-metil-isoxazol-3-propiónico ; i a) Ligação de péptido

Colocam-se 12,8 g (0,042 mol) da forma básica do exemplo 7 em 200 ml de tdtrahidrofurano, previamente em um recipiente. Após adição de 11,05 g (0,042 mol) de M-t-butmxicarbonil-L-fenilalanina e 26,7 ml (0,21 mol) de N-etilmorfolina, adicionam-se, a 0°C, gota a gota. 26,9 ml (*0,042 mol) de uma solução a 50% de anidri-do do ácido propanofosfónico em diclorometano, e agita-se, em seguida, durante 4 horas mediante aquecimento até a temperatura ambiente. Diluiu-se com acetato de etilo e lava-se a fase orgânica com ácido cítrico e água, seca-se e concentra-se. 0 produto pode ser cristalizado em éter t-butil-metí-lico/éter de petróleo.

Rendimento: 17,5 g? ponto de fusão: 122°C. 56 - b)

Dissociação do grupo de bloqueio A dissociação do grupo de bloqueio de N é realizada como é descrito no exemplo 5b). Retoma-se o resíduo remanescente em acetato de etilo e converte-se na base por meio de agitação com hidróxido de sódio IN, a qual pode ser cristalizada em éter de petróèeo. 0 cloridrato analiticamente puro pode ser precipitado em metanol por meio de ácido clorídrico etéreo. 0 ponto de fusão corresponde a 148°C. / alfa__7^° - + 16, 9o (c = 1 em água) ^H-NMR (cloridrato em MeOH-d^): delta *0,7 (d, 3H, J*7, iie), 0,75 - 2,0 (m, 15H, 2Ke, 3CH2, 3CH), 2,7 e 2,95 (resp. mc, 2H, -CE^-CI^)/ 3,0 - 3,3 (mc, 2H, Ph~CH2), 4,1 (mc. 1H, CHN), 4,35 - 4,8 (mc, 3H, CHO e CH2 N), 6,1 (s, 1H, 4-H), 7, 2 - 7,45 (m, 5 H de arilo).

Sxemplo 21 s Cloridrato de éster (-)-mentílico do ácido 5--(L-fenilalanil-amino)-metil-isoxazol-3-p0opiónico

Partindo-se do produto do exemplo 8 realiza-se a ligação de péptido e a dissociação de grupos de bloqueio analogamente ao exemplo 20. 0 produto, precipitado como cloridrato, possui um ponto de fusão de 135°C / alfa__7p° = 43,5° (c * 1 em água). ^H-NMR i como no exemplo 20.

Sxemplo 22 í Cloridrato de éster metílico de ácido 5-(L--fenilalanil-amino)-metil-isoxazol-3-propiónico.

Partindo-se do produto do exemplo 11 realiza-se a ligação de péptido e a dissociação de grupos de bloqueio analogamente ao exemplo 20. 0 produto, precipitado como cloridrato, possui um ponto de fusão de 133°C. / alfa_7^° * +3,5° (c * 1 em água). - 57 -

1H-NMR (cloridrato em ΜθΟΗ-ά4): delta « 2,55 e 2,9 (resp. mc, 2H, -CHj-CHg-), 3,1 (mc, 2H, pH-CH2), 3,63 (s, 3H, OMe), 4,03 (t, J = 7,5, 1H, CHN), 4,3 - 4,55 (AB, J - 16, 2H, GH2-N), 6,0 (s, 1H, 4-H), 7,1-7,4 (m, 5 H de arilo).

Exemplo 23 t Ácido 5-guanidinometil-isoxazol-3~propiónico

Dissolvem-se 6,8 g (0,04 mol) do produto do exemplo 12 em 40 ml de hidróxido de sódio IN e adicionam-se 5,56 g de sulfato de S-metil-isotioureia (=0,04 mol de ureia) em forma sólida. Agita-se durante 24 horas à temperatura ambiente, cristaliza-se o produto lentamente, separa-se por meio de sucção e lava-se intensamente com água. Rendimento* 2,8 g; ponto de fusão > 297°C. ^H-NMR (betaína em TFA-d^) : delta = 2,95 e 3,22 (resp. mc, 2H, -CH2-CH2-), 4,7 (s, 2H, CHg-N), 6,5 (s, 1H, 4-H).

Exemplo 24 s N-(5-aminometil-isoxazol-3-il)-propionil-glicina a) Dissociação selectiva do éster

Dissolvem-se 100 g do produto de cicloadição do exemplo 5a) (produto bruto) em 500 ml de isopropaaol e 500 ml de hidróxido de sódio IN para a saponifica-ção do éster benzílico após o termo da reacção (controle DC) extrai-se após o termo da reacção (controle DC), extrai-se a solução aquosa duas vezes com éter t-butilmetilico. acidifica-se com ácido clorídrico aquoso, sob arrefecimento com gelo e extrai-se o produto da fase aquosa várias vezes com acetato de etilo Após secagem e concentração, cristaliza-se em éter t-butilmetílico.

Rendimento: 32 g; ponto de fusão; 80°C. 58

b) Ligação de péptido

Dissolveu-se 11,6 g (0,043 mol) do produto de a) em conjunto com 7,1 g (0,043 mol) de ester benzílico de glicina e 27,23 ml (0,215 mol) de N-etilmor£olina, em 210 ml de tetrahidrofurano e 210 ml de N,N-dimetilfòr-mamida, e adicionou-se gota a gota, sob arrefecimento <poz gelo, 27,23 ml (=0,043 mol) de uma solução a 50% de anidrido de ácido propanofosfónico em diclorometano. Agita-se, sob controle de DC, durante cerca de 5 horas à temperatura ambiente, diluiu-se com acetato de etilo e lava-se com ácido cítrico e água. Após secagem e concentração, ramanescem 17 § de um produto oleoso. c) Saponificação do grupo ester

Dissolvenwse 12 g de produto de b) em 390 ml de iso-propanol e adicionam-se 150 ml de hidróxido de sódio IN. Após o termo da reacção, acidifica-se com ácido clorídrico sob arrefecimento com gelo e extrai-se o produto várias vezes com acetato de etilo, seca-se a fase organica e concentra-se, ramanescendo 5,9 g de um óleo. d) Dissociação do grupo de bloqueio N-t-butoxicarbonilo

Retomam-se 5g do produto de c) em uma mistura de 15 ml de ácido trifluoracético e 75 ml de diclorometano, concentra-se, após cerca de 1 hora, sob vácuo, retoma--se em acetona e ajusta-se a um valor de pH de 6,5 com amoníaco aquoso concentrado. Separa-se a betaína por meio de filtração sob sucção e seca-se.

Rend imento: 2,5; ponto de fusão: 204°C ^H-NMR (em d2o) : delta = 2,65 e 3,0 (resp. t, 2H, J= 7,6, -CH2-CH2-), 3,6 (s, 2H, Gly-CH2), 4,3 (s, 2H, CH2-N), 6,5 (s, 1H, 4-H). 59

Exemplo 25 s Cloridrato de 5-aminometil-3-(2-hidroxi)-etil-isoxazol. a) Ciclchadição A cicloadição é realizada, analogamente ao exemplo 5a), partindo de 38,8 g (0,25 mol) de N-t-butoxicarbonil-propargilamina e 39,56 g (0,25 mol) de éter t-butíli-co de 3-nitropropanol (vide R. Ohrlein et al., Syn-thesis 1986, 535 - 538). 0 produto S-t-butoxicarbonil-· aminometil-3-(2-hidroxi)-etil-isoxazol é isolado em forma oleosa com um rendimento de 61,6 g. b) Dissociação dos grupos de bloqueio

Dissociam-se os grupos de bloqueio de N e O por meio de ácido trifluoracético, copo é descrito no exemplo 5b) e concentra-se a solução. Para a purificação introduz-se o produto bruto em metanol em uma coluna com permutador de catiSes fortemente ácido (forma "t" H ), lava-se com metanol, elui-se o produto com solução de amoníaco metanólico 4N e concentra-se as fracções de produto. Em seguida, pode ser precipitado, em metanol, com ácido clorídrico etéreo, o cloridrato analiticamente puro com um ponto de fusão de 163°C. ^H-NMR (cloridrato em D20) s dâlta » 2,85 e 3,8 (resp, t, 2H, J=*6, -CH2-CH2-), 4,3 (s, 2H, CH2»N), 6,5 (s, 1H, 4-11).

Exemplo 26 : sal de diamónio de bis- (3-/ 2-carboxi__7-etil-isoxazol-5-il-metil)-amina. a) Cicloadição

Dipropargilamina é dotada, como é descrito no exemplo la) do com o grupo de bloqueio N-terc.-butoxicarbo- 60 -

ro nilo,Submetem-se 30 g (0/16 mol) deste composto â ciclo-adição 1,3-dipolar, analogamente ao exemplo 5a) com 60 g (0/32 mol) de éster t-butílico de ácido 4-nit -butírico sob utilização de 60 g (0/36 mol) de diiso-cianato de fenileno. Os 100 g de produto bruto podem ser purificados por meio de cromatografia em gel de sílica sob utilização de misturas de éter t-butilme-tílico/éter de petróleo. b) Dissociação do grupo de bloqueio A dissociação do grupo de bloqueio BOC e do éter t-butílico é realizada analogamente ao exemplo 5b) com ácido trifluoracético. Retoma-se o resíduo, remanescente, a pós a concentração, em acetona e precipita-se o sal de amónia pela adição âe amoníaco aquoso concentrado.

Rendimento: 15 g; ponto de fusão: 146°c de 30 g de passo prévio. ^H-NMR (sal de amónio em DMSO-dg): delta =* 2,36 e 2,74 (resp. t, 2H, J=6, 5, -CH2-CH ) , 3,8 (s, 2H, CH2-N), 5,4 (sb, NH4+), 6,2 (s, 1H, 4-H).

Exemplo 27 : T0lueno-4-sulfonato de éster (+)-mentilico do ácido 5-aminometil-2-isoxazolino-3-propiónico a) Cicloadição

Alilamina é dotada, como é descrito no exemplo la) com o grupo de bloqueio N-terc.-butoxicarbonilo. 0 produto é isolado, após a coatentração, em forma sólida com um ponto de fusão de 38°C, 41,1 g (R,26 mol) do mesmo são submetidos à cicloadição com 72 g (O,26 mol) de éster (+)-mentilico de ácido 4-nitrobu-tírico e 50,1 g (0,3 mol) de diisocianato de fenileno, analogamente ao exemplo 5a). Obtem-se 95 g de um produto bruto oleoso, que pode ser purificado ainda mais 61

analogamente ao exemplo 26a) b)

Dissociação do grupo de bloqueio BOC A dissociação do grupo de bloqueio é realizada analogamente ao exemplo 5b). Isola-se o produto como base por meio da extracção de hidroxido de sodio diluída com éter t-butilmetílico e precipita-se como tosilato de éter t-butilmetílico pela adição de um equivalente de ácido tolueno-4-sulfónico. De acordo com a análise de CG existe uma mistura dos dois C-5-epímeros na proporção de cerca de 1:1.

Ponto de fusão: 144 - 145°C. ^H-NMR (tosilato em DMSO-dg): delta =0,7 (d/ Js6,7, 3H, Me), 0,8 - 1,95 (m, 15H, 2Xe, 3CH2, 3CH), 2,3 (s, Tos-OH), 2,55 - 3,3 (m, 8H, -CH2-CH2-, CH2-N, 4-H), 4,5 - 4,8 (m, 2H, 5-H e CHO), 7,1 e 7,66 (AA‘ BB·, Tos-OH), 8,0 (H, ácido).

Exertqdo 2o : Tolueno-4-sulfonato de éster (-)-mentílico do ácido 5-aminometil-2-isoxazolino-3-propiónico. A obtenção é realizada analogamente ao exemplo27, partindo de éster (-)-mentílico do ácido 4--nitrobutírico. O produto precipitado como tosilato possui um ponto de fusão de 142 - 144°C e apresenta-se igualmente como mistura de epímeros. como no exemplo 27.

Exemplo 29 : Ácido 5-aminometil-2-isoxazolino-3-propiónico, racemato. 0 produto racémico é obtido analogamente ao exemplo 12, partindo de éster t-butílico de ácido 4-nitro-butírico e N-t-butoxicarbonil-alilamina. Após a dissociação dos grupos de bloqueio retoma-se em acetona e precipita-se a betaína por meio do ajuste do valor de pH para 6 pela 62

adição de amoníaco aquoso concentrado. 0 ponto de fusão corresponde a 201°C (sob decomposição). 1H-NMR (betaína em D20) s delta 2,48 e 2,65 (resp. mc, 2H. -GH2-CH2), 2,85 - 3,45 (m, 4H, 4-H) e CI^-N), 4,8 (sb, H ácido), 4,9 (mc, 1H, 5-H).

Exemplo 30 : Ácido 5-aminometil-2-isoxazolino-3-propionico, (-)-enantiómero a) b)

Dissolvem-se 80 g (O,26 mol) da base libertada do produto do exemplo 27, em 2 1 de metiletilcetona e adicic -na-se 93 g (0,26 mol) de ácido (-)-0,0'-dibenzoil--L-tartarico, precipitado lentamente cristais. Apos separação por meio de sucção, recristaliza-se no mesmo dissolvente, remanescendo 30 g do sal isento de enantiómero em y 98%, de acordo com análise de 06, de ponto de fusão 162°C.

Dissociação do éster mentílico

Convertem-se 20 g (0,03 mol) do produto obtido em (a) na base por meio de extracção de hidróxido de sódio IN com éter t-butilmetílico. 0 resíduo remanescente após concentração é retomado, a 0°C, em 270 ml de ácido trifluoracético, adicionam-se 3,5 ml de tionisol e 26,5 ml de ácido trifluormetanossul-fónico, agita-se durante 1 hora em banho de gelo, e adicionam-se, lentamente, cerca de 300 ml de éter dietílico. Após completa cristalização, separa-se por meio de sucção, retoma-se o resíduo em etanol e ajusta-se ao valor de pH de 6,0 com amoníaco aquoso concentrado. Recristaliza-se a betaína assim isolada em água/etanol, resultando 2, 5 g de betaína, isenta em ^ 99% de enantiómero, de acordo com a CG, de ponto de fusão 176°C (decomposição). l_ alfa_7Q0 =* -123,5° (c * 1 em água) 63

H-NMR (betaína em D20): como racemato

Exemplo 31 í Ácido 5-aminometil~2-isoxazolino-3-propiónico -enantiómero (+) a) Separação dos enantiómeros

Converter-se as águas mães, remanescentes da cristalização fraccionada do exemplo 30a), com base livre como ê acima descrito. Dissolvem-se 66 g (0,21 mol) da mesma em etanol, e precipita-se o tartarato, após adição de 31,5 g (0,21 mol) de ácido D(-/~tartárico e recristaliza-se em etanol. Ofotem-se 30 g do sal isento de enantiómero em J 98%, de acordo com a análise CG, de ponto de fusão 163°C. b) Dissociação do éster mentílico. A dissociação do éster mentílico é realizada, após libertação da base, como é descrito em 30b). De 20 g de tartarato são obtidos, após recristalização, 2,9 g da betaína, de acordo com CG, isenta de enantió meros em > 99%, de ponto de fusão 183°C (decomposição) . /""alfa= + 121° (c = 1 em água).

Exemplo 32 t Sal de sódio de ácido 5-acetamidometil-2-iso-xazo 1 ina- 3 - carbox iÍLco. 2,5 g (0,015 mol) do racetaato do exemplo 29 são acetilados analogamente ao exemplo 17, obtendo-se 2,8 g de um produto amorfo. Após retomada em acetona, pode ser precipitada o sal de sódio analiticamente puro pela adição da quantidade equivalente de uma solução acetónica a 10% de 2-etil-hexanoato de sódio.

Ponto de fusão 238°C. 64

Hí-NtlR (sal de Na em D2°) * âelta * 1,94 (s, 3H, Ac), 2,37 e 2,54 (resp. mc, 2H, -CH -CH -), 2,75 e 3,1 (AB v. ABX), 2H, 4-H), 3,3 (d, J=*5, 2H, CH2-N), 4,7 (mc, 1H, 5-H).

Exemplo 33: 3- (2-carboxietil) -5-:f2-piridil)-2-isoxazolina

Promoveu-se a cicloadição de 59 g (0,38 tnol) de éster t-butilico de ácido 4-nitropropiónico com 80 g (0,76 mol) de 2-vinilpiridina e 69,5 g (0,42 mol) de diisocianato de fenileno analogamente aoexemplo 5a). Retoma-se o resíduo remanescente, após processamento, em diclorometano e filtra-se através de uma coluna curta, cheia de celite. Obtem-se 77 g êe um óleo, que é submetido, analogamente ao exemplo 12, à dissolução de éster. Uma maior purificação é realizada por meio de cromatografia em gel de sílica com utilização de misturas de metanol/éter t-bu-tilmetílico sob adição de amoníaco aquoso a 1%. Após concentração das fracções de produto, obtem-se produto cristalino, com ponto de fusão 93°G, como betaína, por meio de acidifi-cação de uma solução acetónica com ácido trifluoracético até pH 4.

^H-NMR (betaína em DMSO-dg) ; delta = 2,5 (mc, 4H, -Ct^--GH2-) 3,2 e 3,4 (AB, v. ABX, 2H. 4-H), 5,5 (mc, 1H, 5-H), 7,2-7,5, 7,8 e 8,55 (resp, m, 5 piridilo-H).

Exemplo 34 s Tolueno-4-sulfonato de éster metílico de ácido 3-aminometil-2-isoxazolino-5-propiónico a) Ciclização

Para a obtenção do componente olefínico esfcerifica--se ácido 4-pentenocarboxílico de acordo com processos conhecidos da literatura, por meio de cloreto de tionilo e metanol. A cicloadição é realizada, analogamente ao exemplo 5a), por meio de éter 2-nitro-etanol-2-tetrahidropiranilico (vide V. Jager d: al., Angew. Chem. 93 (1981), 576-578). 0 produto bruto podei 65 - ser processado sem outra purificação. b) Dissociação do grupo de bloqueio tetrahidropiranilo

Tratam-se 200 g do produto de a) com 500 ml de um ácido clorídrico metanólico IN durante a noite# à temperatura ambiente. Após concentração cromatografa--se em gel de sílica por meio de éter de petróleo/ /éter t-butilmetílico c) éster metílico de ácido 3-clorometil-2-isoxazolino--5-propiónico.

Colocam-se 7,4 ml (0,081 mol) de oxicloreto de fósforo e 33,8 ml (0,243 mol) de trietilamina em 200 ml de tetrahidrofurano previamente em um recipiente e adicionam-se, gota a gota. 5 g (0,027 mol) do produto de b), dissolvido em 50 ml de tetrahidrofurano, à temperatura ambiente. Após 20 h hidrolisa-se com metanol e depois com água, extrai-se o produto com diclorometano, seca-se, concentra-se e purifica-se cromatograficamente como em b). d) Substituição por meio de

Dissolvem-se 2 g do produto de c) em conjunto com 100 mg de iodeto de tetrabutilamónio em 50 ml de solução de amoníaco metanólico 2N e d eixa-se durante 3-5 dias, à temperatura ambiente, sob controlo por DC.

Após o termo da reacção, concentra-se e cromatografa--se em gel de sílica (eluenteí metanol/éter t-butilmetílico sob adição de 1% de aquoso). Em seguida, pode ser obtido o tosilato a partir de metanol/éter t-butilmetílico por meio de ácido 4-toluenossulfónico, em forma cristalina, com um ponto de fusão de 168°c. ^H-NMR (tosilato em CDC1 ^/MeOPI-d^ lsl) : delta -1,9 e 2,4 (resp. m, 2H, GH2-CH2), 2,33 (s, Tos-OH), - 66 -

2, 7 e 3,13 (AB v. ABX, 2H, 4-H), 3,62 (s, 3H, COO Me) , 3,85 (sb, 2H, CíH2-N)# 4,7 (mc, 1H, 4-H), 7,2 e 7,7 (AA1 BB1, Tos-OH),

Exemplos 35 - 58í

Os exemplos 35 - 58 citados na tabela 2b foram smntetizados analogamente aos exemplos acima descritos, respectivamente citados na tabela e caracteriza· dos por meio dos dados espectroscópicos.

J 67 -

68 E αc.

8 éi 5 I +J — o w c

o X MT ^ —£ X* =Ç c3 w ‘X x CD < φ Ό .. CD o 04Λ Q P P Si o < ô & >' _T*<r2So E ο I «Õ *9 w. Φ n m w n. <D P5 rs ac i r-i «. Ή

H 83, o3 af1 fg U. ^ 7Γ o w £g ω *rf o n ™ 8 x-Q—5g » líí·-"'

TJ 0 Cn f—1 J2 t0 cc > LO •c)h 8 cg ° υ s=\ £ O r-1 V-' ΐ w D^\ W 1 cn V 0 0 (0 2 tn to (0 •Η Ό Sh -h d) +> 4J UáS.

i \J Π3Ι

Tabela 2b (continuação)

O <<Γ

CM 69

Tabela 2b: (continuação) 70

(i :i (s.ill/l II)

Tabela 2b (continuação) Pontq,de fusão 72

Tabela 2b (continuação)

d) Ό O tta O O O -H dN D l

05 O esico n CM to 03

71

2.72. e 3.05 (cada

73

Exemplo 59 : Sal de sódio de ácido 5-hidroximetil~isoxazol--3-propiónico a) Eter t-butílico de álcool propargilico

Dissolvem-se 101 ml (1,9 mol) de álcool propargilico num frasco de pressão, a 0°C, em cerca de 1 1 de diclorometano, adicionam-se 20 ml de óxido sulfurico concentrado e introduzem-se, por meio de condensação, 450 g (8 moles) de isobuteno. Após 5 horas a 0°C, elimina-se o excesso de isobuteno, lava--se com solução de carbonato de sódio, seca-ae, concentra-se e destila-se o produto. b) Cicloadição com éster benzílico de ácido nitrobu-tírico ·

Promoveu-se a cicloadição de 33,7 g (0,3 mol) do produto de a), 6 6,9 g (0,3 mol) de éster benzílico de ácido nitrobutírico, 0,35 mol de diisocianato de fenileno e trietilamina analogamente ao exemplo 5. 0 produto bruto pode ser purificado por meio de cro-matografia em gel de sílica (acetato de etilo/éter de petróleo). c) Dissociação do grupo de bloqueio éter t-butilico.

Dissolvem-se 100 g do produto bruto de b) em 1, 5 1 de diclorometano e 300 ml de ácido trifluoracético e controla-se o decurso da reacção por DC. Após concentração, cromatografa-se em gel de sílica (fase móvel: acetato de etilo/éter de petróleo 1:1). Remanesce um produto oleoso. d) Saponificação do éster benzílico

Dissolvem-se 2 g (0,0077 mol) do produto de c) em 10 ml de etanol, adicionam-se 10 ml de hidróxido de - 74 -

sódio IN e agita-se, à temperatura ambiente, até ao termo da saponificação (controle por DC). Precipita--se o produto por meio de adição de acetona e recris-taliza-se várias vezes em metanol/éter t-butilmetíli-co.

Ponto de fusão: 168°C. ^H-NMR (D20) * delta =» 2,45 e 2,85 (resp. t, 2H, -GH -CH -) 4,6 (s, 2H, CH -0), 6,26 (s, 1H, 4-H) .

Para a caracterização das suas propriedades neutro-protectoras valiosas e boa tolerância, os compostos da fórmula I foram submetidos às seguintes montagens experimentais de ensaio, que reconhecidamente são especialmente adequadas para a avaliação da qualidade de efeito de tais compostos activos no SCN. 1. Absorção "High affinity" de 3H-aspartato em uma preparação de vesícula do cérebro de ratos.

Principio do ensaio: Incubam-se vesículas sinápticas recentes (sinaptossomas) de córtex de ratos 3 3 com solução tampão e H-D-aspartato e mede-se o H-D-aspar- tato nas vesículas. Preparados, que em coirparação a sinap- 3 tossomas de controle aumentam a absorção de -H-D-aspartato altamente sensível, assim como os que evitam a perda de 3 H-D-aspartato por renovada libertação, são considerados especialmente interessantes.

Protocolo de ensaio : Os ensaios sobre a 3 absorção de H-D-aspartato foram execiitados pelo processo de Anand et al, (Biochem, Pbarmacol., 35 (1986), 1055-1057).

As vesículas sinápticas foram preparadas a partir de córtex cerebral de ratos machos (Sprague-Dawley). Os preparados foram testados em quatro concentrações como amostras duplas paralelamente a preparações de controlo com tampão.

0 meio de incubação (pH 7,4) contém: 1,2 mM KH2P04, 5 mM KC1, 5 mM piruvato, 1, 2 mM glicose, 1,2 mM MgCl2, 114 mM 75 -

NaCl, 25 mM NaHG03· Para a absorção não específica de ^H-D-aspartato o NaCl foi substitaido por 114 mM de cloreto de colina e NaHCO por 25 mM KHC0-. Utna parte alíquota da

j O suspensão de vesícula (cerca de 25 ug/ml de preparado do ensaio) foi adicionada à preparação de teste, ajustada para 37°C, gaseificada com carbogénio (5% CO , 95% 0 ) e incubada previamente durante 2 minutos. A incubação de três minutos da absorção de aminoácido foi iniciada pela adição de 50 ,ul de 3 - H-D-aspartato (actividade específica 25 Ci/mmol, 10 pmol/mi de preparado do teste). A separação das vesículas do meio de incubação foi realizada por meio de filtração e lavagem adicional dos aminoácidos marcados aderentes com o "Cell-“Hgrvester Titertek" (firma Flow Laboratories, Meckenheim). 3 A absorção de H-aspartato foi medida por meio de um contador de cintilação de líquido (Canberra-Pakard, Modell 1500, Frankfurt). 0 efeito da preparação é citada na tabe-la 3 em percentagem da absorção específica de H-aspartato, referida a valores de controle (100%). Como comparação serviu trifosfato de adenosina (ATP) como substância padrão (vide tabela 3), que a 1 mM provoca um aumento de 35% da absorção de H-aspartato. 0 ATP é ineficaz a uma concentração menor do que 500 yum, apresenta, porém, um efeito dependente de concentração no caso de uma concentração mais elevada. 76 -

Tateia 3 Estimulação da atsorção de 3 "Ή-aspartato Exemp. n9 Concentração da prepara- Estimulação ção .. .. W (%) 1. 500 15 2. 500 12 3. 500 20 5. 10 26 6. 10 17 8. 10 13 9. · 100 19 10 . 500 23 12. 500 17 13. 500 33 14. 500 19 16. 1000 19 18. 100 46 19 . 100 25 22. 100 23 24. 500 28 25. 500 20 31. 500 21 32. 10 0 19 39. 1000 14 50. 500 15 56. 500 17 58. 10 35 ATP 500 31 ATP 1000 35 •'n-asnarta 77

Tabela 3 (continuação) Exemplo N2

Concentração da prepara- Egtimulação ção μΜ (%)_ ATP 2000 57 ATP 5000 121 o 2. Inibição da libertação de H-acetilcolina de cortes de esfcriato do cérebro de ratos

Principio do ensaios Para o ensaio foram enxaguados cortes recentes de estriato do cérebro de ratos em uma câmara especial com solução tampão e foi medida a libertação da acetilcolina marcada com tricio após estimule· ção com NMDA.

Os preparados com efeito antagónico a NMDA inibem a libertação de acetilcolina.

Protocolo do ensaios Os ensaios de hiper-fusão foram executados pelo processo de Wichman et al., (Naunyn-Schmied. Arch. Pharmacol., 338 (1988), 623-631).

Cortes de cérebro de ratos, com uma espessura de 0,5 mm, foram incubados previamente durante 30 minutos em 2 ml de meio de incubação, que continha O,1 ^umol/l de ^H-colina com uma actividade específica de 80 Ci/mmol. Colocou-se um corte em cada uma das 6 câmaras de hiperfusão e hi-perfundiu-se durante 90 minutos com uma velocidade de 1,5 ml/min. Os hiperfusado foram recolhidos constantemente fracçães de 2 minutos. Cada corte foi hiperfundido duas vezes respectivamente durante 2 minutos com 25 umol/1 NMDA, a fim de estimular a libertação de acetilcolina. O primeiro estímulo (S^) ocorreu entre o 54° e o 56° minuto e o 2o estímulo (S2) entre o 76° e 78° minuto. O meio de incubação . continha em mmol/1 s NaCl 118, KC1 4,8, CaCl2 1,2, MgSO^, 1,2, 78

NaHC03 25, ΚΗ2ΕΌ4 1, 2, glicose 10. 0 meio foi saturado com carbogénio a 37°C. O valor de pH foi ajustado para 7,4. 0 NMDA e os novos preparados a serem examinados foram dis solvidos em meio de hiperfusão. A hiperfusão foi realizada com «|a 2 meio isento de Mg .0 tricio dos cortes dissolvidos e do hiperfusado foi determinado por meio de contagem de cintila- (r) ção de líquido sob utilização de um Packard 1900 CA (Frankfurt) a uma eficácia de 50%. Cálculo dos resultados:

A libertação de base e a libertação estilada com NMDA para e S2 foram expressas em %/min de cada fracção (lájmberger et al., Naunyn Schmied. Arcb Pharmacol. 339 (1988), 53-61). 0 valor da libertação estimulada foi calculada para o controle como sendo 0,69 + 0,09. 0 valor diminui quando uma substância como, por exemplo, o antagonista de recepção de NMDA conhecida da literatura CPP (ácido/3-(+)-2-carboxipiperazino-4-il-propil-l-fosfónico) inibe a libertação estimulada com NMDA. A inibição da libertação, estimulada por meio de preparados, foi calculada em percentagem referida ao valor de controle e e citada na tabela 4.

79 -

Tabela 4 : Inibição âa libertação de ^H-acetilcolina de cortes de esfcriato

Exemplo NQ Concentração da preparação Inibição (%) 1. 10 13 7. 10 28 8. 10 30 18. 10 22 19. 10 16 20. 10 18 21. 10 20 22. 10 15 33. 10 26 34. 10 9 56, 10 11 59. 10 26 CPP 10 30 3. wlnibição da ligação de de ratos. *2 JH-MtC-80l em membranas de clrebr

Principio do ensaio : MK-801 e um antagonista não competitivo que liga canais de ides, acoplados em receptores de NMDA (Yoneda et al., Brain Res. 499 (1989), 305). No ensaio são incubadas membranas do cérebro total com 3 3 preparado e H-Mrv-801. A ligação de H-MR-801 ou o seu deslocamento par preparados (antagonistas) e determinada por via radioquímica. 80 -

J

Protocolo de ensaio ; Os ensaios de ligação são executados de acordo com o processo de Reynolds et al- (Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 84 (1987) 7744). Inicial-mente é realizada a preparação da membrana de acordo com Reynolds. Em seguida são pipetadas preparações de ensaio, sendo colocados previamente em recipientes a substância tampão assim como os preparados de exame, em seguida são inaubados previamente durante 2 minutos com proteína e é iniciado com JH-MK801. As membranas são descongeladas a 37°G, incubadas durante 10 minutos a 37°C e homogeneizadas durante 15 segundos a velocidade semi-máxima por meio de "politron",, em seguida usadas novamente arrefecidas. O meio de incubação contem: -TampSo Hepes 20 mtí pH 7,4, preparados em três concentrações 5 uM. 10 ,uM e 50 juM, Membranas 500 ug/ml de teste. H-MK3G1 1 nH· A incubaç&o ê realizada durante 60 mi-nutos â temperatura ambiente (23°C), em seguida é interrompida por meio de filtração. Para esta finalidade coloca-se papel de fibra de vidro N2 32 da firma Sdhleidber e Schull, cjue no dia anterior ao ensaio é colocado durante 30 minutos em polietilenoimina a 0.03% e é seco, em seguida. Os filtros recortados por punção são contados em 4 ml de líquido de cintilação "Packard 199TM" (Frankfurt). 0 trício é determinado por meio de contagem de cintilação de líquido sob utilização de um Packard 1500.

Calculo dos resultados : O cálculo da ligação em femfomol/mg de proteína é realizado com uma calculadora pequena (HP-97). Quando uma substância antagoniza é ligação o valor diminui. Os efeitos das substâncias são citados na tabela 5 percentualmente, isto é em % de ligação em relação ao controle. Para a revisão do ensaio e determinado sempre o efeito do preparado de comparação CPP (ácido 3--(+)-2-carboxipiperazino-4-il-propil-l-fosfónico) a 5 jM. 10 ,uM, 50 /μΜ. 81

Tabela 5 : Inibição da ligação ^H-MK-801 no complexo de ca

nal de receptor de NMDA

Exemplo N2 Concentração do preparado Inibição ,uM (%) λ 2. 50 lCk 5. 50 78 19. 50 16 21. 50 45 57. 50 43 CPP 50 81 4. Inibição das convulsões induzidas com NMDA no rato

Os exemplos .ccitados a seguir apresentam efeito neuroprotetor, antagonizando as convulsões induzidas por NMDA (N-metil-(D)-aspartato). Para esta finalidade realizara-se injecções intravenosas de 20-30 mg/kg de NMDA em ratos macbos NMRI (Naval Medicai Research Institute) pesando 22-24 g, o que conduz a estereóticos, convulsões clónicas e, na maioria dos casos, à letalidade. Para examinar um efeito antagónico de NMDA das substancias de ensaio, administram-se estes oralmente uma hora antes do NMDA. Em seguida, os animais são observados, durante 60 minutos, em relação aos sintomas acima citados. Como critério de avaliação é ©nsiderado o número dos animais com convulsões clónicas e a incidência da letalidade, expresso em percentagem de alteração em relação ao grupo de controle. Como preparados de comparação são usados o antagonista GABA muscimol, conhecido da literatura, assim como a substância MK 801 descrita como antagonista de NMDA, que igualmente são descritos como sendo activos em • relação a alterações neurodegenerativas. - 82 -

Como os exemplos examinados apresentam consideráveis diferenças na toxicidade em relação às substâncias padrão, são igualmente citados na tabela 6 os valore s LD^q·

J - 83

Exera.

Dose

/mg/kg/ N9 /mg/kg/ das con- mortalidade vulsões

Muscimo1 0,3 PO. 40 %· 60 % 3-10 iv MK 801 0,3 po. 60 % 60 % 30-60 iv. 1 63 po. 50 %- 50 % > 200 iv. 6 50 po. 20 % 40 % > 100 iv. 8 50 po. 70 % 100 % 50-100 iv. 10 50 po. 10 % 70 % >100 iv. 12 50 PO· .' 45 % 60 % >100 iv. 14 50 po. 40 % 40 % >300 ip- 15 50 po. 40 % 100 % >100 iv. 16 50 po. 30 % 30 % - 17 30 po. 30 % 100 % >300 ip. 20 50 po. 10 % 100 % 25-50 iv. 21 50 po. 30 % 40 %· 25-50 iv. 23 50 po. 40 % 40 %_ >300 , ip. 26 50 po. 40 % +/—0 % >100 . iv. 27 50 po. 20 % 20 % 50-100 . iv. 28 50 po. 20 % 20 % - 29 50 po. 20 % 20 % > 200 . iv. 32 50 po. 30 %% 50 % > 100 . Iv. 53 50 po. 33 % 33 % - 55 50 po. 33 % 100 % - 84

5. Neuroprotecção após isquémia na parte frontal do cérebro no gerbil.

Baseado na execução de ensaio descrita a seguir, publicada em outro lugar (k. Rudolphi et al., J. Cereb. Blood Flow Metab., 7:74, 1987) chega-se â conclusão, gue os exemplos contra graves danos isquémicos.

Em 20 gerbis mongólicos machos é provocada/ sob anestesia de Halothan/ por meio de fechamento bilateral da artéria carótida com pinça de aneurisma, uma isquémia de 5 minutos na parte frontal do cérebro com subsequente reciculação. 7 dias depois os animais são decapitados sob anestesia de Halothan, os cérebros são fixados em imersão em solução Carnoy e a extensão dos danos ars neurónios na região CA^ do hipocamp é determinada com auxílio de um "score" "blind" histopatologico de 5 graus. A substância examinada é administrada a respectivamente um grupo de 10 gerbils dé maneira intraperitonial ou oralmente, 15 minutos antes da isquémia. Por cada substancia de ensaio é tratado um grupo de controle isquémico de igualmente 10 animais com o respectivo dissolvente. Os resultados estão reunidos na tabela 7 como alteração percentual do "score" de procedimento neurológico médio ou do "score" histopatologico (soma dos ^scores" individuais/número de animais) do grupo tratado em relação ao grupo de controle.

Tabela 7 s Necroses das células CA^-piramidais após isquémia na parte frontal do cérebro de 3 minutos em gerbil mongólico 85

(mg/kg) (alterações %) mento (alterações %)

Muscimol 5 ip.. -74 +41 MK 801 5 ip. -23 +24 8 50 po. -46 0 12 10 ip. -32 0 12 50 po. -14 0 16 50 po. -27 0 18 50 po. -23 +15 19 50 po. -25 0

Verifica-se da tabela# que as substâncias padrão Muscimol e MK 801, apesar de conduzirem igualmente a uma redução das células mortas, apresentam, no entanto, no "score" de procedimento, sintomas negativos pós-isquémi-cos nitidamente mais intensos, enquanto que as substâncias de ensaio não influenciam de maneira negativa os sintomas neurológicos. 6. 0 infarto na parte frontal do cérebro do rato, indu zido fotoquimicamente, pode ser comprovado da seguinte maneiras A base teórica e a aplicação prática deste processo já foram descritos anteriormente (Grome et al., J. Cereb. Blood Flow Metabol, 8 (1988) 89-95). Anestesiaram--se ratos "Sprague-Dawley" (300-350 g) com 1% de Halothan em oxigénio. Realiza-se um pequeno corte no couro cabeludo e aplica-se 1 ml do corante Bengal Rose (5 mg/ml em solução de cloreto de sódio) fotoquimicamente activo. Em seguida, ilumina-se uma parte do crânio (diâmetro de 3 mm) com luz verde (570 nm) de uma lampada de xennon (75 W) durante 15 86

minutos. Neste momento termina-se a anestesia e divide-se os ratos aleatoricamente em grupos tratados com medicamentos e com placebo (n=*6). Nas experiências, nas guais somente foi administrada uma dose, a aplicação é realizada 30 minutos após a indução da isquémia. Após 24 horas estes animais são mortos por decapitação. Retiram-se rapidamente os cérebros e congelam-se. Cortes criostáticos em série através de toda a extensão da lesão são tingidos com violeta de de mesilo. Para a determinação do volume de destruição causada pela isquémia 90 destes cortes são medidos por meio de um sistema de análise de imagem. 0 volume é calculado em mi-crolitros e expresso como alteração percentual em relação ao controle tratado com placebo. Nas duas horas que se seguem ao fenómeno isquémico os animais são intensamente observados e é realizado um "score" de procedimento com uma escala de 0 (sem sintomas até 4 (sintomas motores graves, inclusive dificuldade de aceitação de ração). 87

Claims

P·' REIVIISIOAQÕES - 1& - Processo para obtenção de um composto da fórmula Ia, Ib e Ic

nas quais R^ representa 2-, 3-, 4-piridilo ou um radical da £ór- mula II Έ? R1 t 1 -Ο E+ ι 1 R* R2 (II) na qual 3 4 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou O-^-O^-alguilo, 88 - 1 R representa um par de electrSes livres ou hidrogé nio; 2 7 R e R‘ representam, independentemente um do outro, hidrogénio; C^-Cg-alquilo; C^-Cg-cicloalquilo; -aril-C^-C -alquilo; oarbamimidoilo; O-L-Cg-alquil- i ,φ'" carbonilo, O^C^aleeniioarfconilo, 0^-Cg-alq.uilo-xicarbonilo, Og-O^g-aril-C^C^-alGLUilcarlsonilo, Cô-Oio-aril-O-^-O^-alquiloxiGarTDOBilo, 0]_-°io“· -arilcarbonilo, o radical de um alfa-aminoácido de origem natural, ou ácido gama-aminobutírico, que pode estar substituido por C^-Og-alquilo, hi-droxi, halogénio, amino ou nitro ; e 6 7 R e R em conjunto oom o átomo de azoto que os liga, formam, um heterooiclo de c inoo até sete membros, podendd um átomo de oarbono estar substituido por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto; ou R5, R R e R representam, independentemente um grupo do outro, 0η-C„-alquilo ou C~-C,:-oicloalquilo, ou 5 ± 4 ? 0 g 7 R representa C^-C^-alquilo e R e R formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um hete- R 7 reciclo de cinco até sete membros ou r, R e R' formam em conjunto oom o átomo de azoto, que os liga, um heterooiclo de seis até doze membros; representa um radical da fórmula III (III) - (CH2)R-X na qual representa 0 ou um número inteiro de 1 até 4; X representa hidroxi; G-^-C^-alquiloxi; carboxi; halo-genoformilo, formilo, oxiimino; Q^-C^-al^uiloixj.-carbonilo; benziloxicarbonilo ou C^-Og-cioloalquilo-xiearbonilo, que podem estar substituidos uma ou várias vezes por C-^-Cg-alquilo; ou representa car-bonilo, que está ligado por ligação peptídica com um alfa-aminoácido de origem natural, um ácido gama-aminobutírico ou um dipéptido, ou representa 89

aminooarbonilo, podendo o grupo amino estar mono-ou dis substituído para -alquilo ou monos subs tituído por fenilo-C^-Cg-alquilo, ou os dois radicais amino, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, formam um heteroeiclo de cinco até sete membros, podendo'um átomo de carbono estar substituído por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou X representa um grupo da fórmula IV

0 II - P - Y (IV) I z na qual Y e Z representam, independentemente um do outro, hiró-xi, 0j_-0^-alquilo ou O^-C^-alquiloxii e A representa uma ligação 0,0 simples ou uma ligação C,C dupla; com a condição de R não representar 2-, 3- ou 4-piridilo, quando R representa um grupo da fórmula IV e η Φ 0 quando X representa Mdroxi ou metiloxi, assim oomo das suas eventuais formas estereoisómeras e dos seus sais fisiologicamen-te aoeitáveis, oaracterizado por se fazer reagir um óxido de nitrilo da fórmula V - + (V) O-E-C-R* a) no caso de A representar na fórmula Ia uma ligação 0,0 simples, com uma olefina da fórmula VI, ou 90 - Xb) e) R" t CH2=GH-C-¥ (VI) R 4 no oaso de A representar na fórmula Ia uma ligação 0,0 dupla, com um derivado de propargilo da fórmula VII nos sentido de uma ciclo-adição 1,2--dipolar I CH=C-C-¥ I R4 (VII) , J2 „4 na qual E , R e R possuem os significados acima citados, ¥ representa um grupo da fórmula RR^fi R' c £ com os significados acima citados para R , R e 7 R , ou um substituinte permutável por uma amina da c c *7 fórmula RRPR R , eventualmente substituida, como, por exemplo, alquilsulfonilo ou arilsulfonilo ou halogénio, aqui, de preferência, cloro ou bromo, ou converter-se um composto obtido de acordo com a) ou b), de fórmula geral VIII J2 R ¥

91 (VIII)

2 3 4 com os significados acima citados para R , R , R e A, por meio da substituição do grupo W por uma 5 6 7 amina eventualmente substituida da fórmula UR R R , num composto da fórmula geral Ia, ou d) para a obtenção de uma substância da fórmula geral Ib eu Io, fazer-se reagir um derivado de ácido al-oenoioo ou aloinoilo de fórmulas gerais IX, X, XII ou XIII 0 (IX) 0H2»CH-(CH2)n-C 8 OR 0 CHsC-(CH2)n-0

(X) ' OR ,8 0H2=*0H-(0H2)n-0-R 10 0H=C-(CH2)n-0-Rj 10 (XII) (XIII) nas quais R^ representa hidroglnio, um grupo alquilo, um grupo de bloqueio qualquer para uma função álcool ou um grupo carbóxi esterificado, n possui o o significado acima citado e R representa qia lquer radical alquilo ou aralquilo, com um óxido de nitrilo da fórmula geral XI 0 i- N=C-R2 92

2 onde E possui o significado acima citado, coai a 2 condição de E não poder ser um alfa-aminoácido ou um dipéptido, no sentido de uma ciclo-adição 1,3--dipolar, por se eliminar, eventualmente, o grupo de bloqueio E^® presente por processos conhecidos da literatura, por se converter a função álcool num derivado activado para a permuta com aminas como, por exemplo, halogeneto ou tosilato, e fazer--se reagir, em seguida, oom uma amina da fórmula geral NEPE E' com o significado acima citado para E5-E7, ou e) saponificar-se um éster de ácido oarboxílico da fórmula Ia ou Ib, obtido de aoordokoom a)-d), ou respec-* tivamente, dissociar-se hidrogenoliticamente um áster benzílieo eventualmente presente, ou f) converter-se na amido um áster alquilioo de ácido oarboxílico, obtido de acordo com os processos a)--d), com uma amina primária ou secundária, correspondentemente substituído, ou g) saponificar-se um éster monoalquilico de ácido fosfínico ou éster dialquilioo de ácido fosfónico da fórmula geral Ia, obtido de acordo oom a) ou b), por processos em si conhecidos na literatura, no hemi-éster de ácido fosfónico, em ácido fosfónico ou ácido fosfínico, ou h.) fcç>nverter-se um ácido oarboxílico, obtido de acor do com e), inicialmente num derivado de ácido activado, em seguida, esterificar-se este com álcoois, Gonverter-se com aminas primárias e secundárias nas amidas, ou transformar-se com aminoácidos eventualmente protegidos no oarboxi, ou com péptidos in feriores, em péptidos acilados no azoto e elimina-. nar-se, em seguida, eventualmente, o grupo de bloqueio de oarboxi, na parte de péptido, ou transfor- 93

mar-se num grupo, por exemplo, por transesterifica-ção, ou eliminar-se num composto da fórmula geral Ia, obtido η de acordo com os processos a)-h), um radical R , eventualmente usado como grupo de bloqueio, do átomo de azoto de acordo com processos conhecidos da literatura, ou converter-se um composto, obtido de acordo com o processo i), cujo grupo carboxi está presente em forma esterificada ou como amida, por meio de reac-ção com um derivado de ácido carboxílico activado, ou eventualmente, um aminoácido protegido no azoto ou com um péptido inferior, mediante a utilização de reagentes usaais na química dos péptidos, num derivado acilado no azoto, ou converter-se um composto obtido de acordo com o processo j) num ácido carboxílico livre, por meio de dissociação do éster de ácido carboxílico eventual mente presente, ou converter-se um composto, obtido de acordo com os processos j) e k), num composto de amino livre ou numa bataina, por meio da dissociação de um grupo de bloqueio de H, eventualmente introduzido com a parte de aminoácido, ou converter-se um composto, obtido de acordo com os processos c) - i), da fórmula geral Ia ou Ib, num composto de amónio quaternário por meio da reac-ção com um agente de alquilação, de preferência, um halogeneto de alquilo, ou separar-se um composto da fórmula geral Ia e Ib, obtido de acordo com os processos a)-m), que devido 94 à sua estrutura quimica, se apresenta em formas diastereoisdmeras ou enantidmeras, de maneira em si conh.eoida, nos estereoiedmeros puros, o) quer isolando os compostos da fdrmula geral Ia e Ib, obtidos de acordo com os processos a)-n)» em forma livre, quer eventualmente transformando-os, no caso da presente de grupos ácidos ou básicos nos sais cristalinos fisiologioamente aceitáveis. - 2& - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterlaado por se obter um composto da fdrmula Ia ou Ib, na qual E 1 representa 2-, 3-, 4-piridilo ou um radical da fdrmula II R5 R5 t 1 1 o 1 1 R4 R1 (II) 3 4 na qual R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou C^-C^-alquilo; R' representa um par de electrães livres ou hidrogénio; 6 7 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio; C^-G^-alquilo; fenil-C^-O^-alquilo; 95 1 7 R e R' formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heteroeielo de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um

átomo de enxofre, oxigénio ou de azoto$ 6 7 R representa hidrogénio, e R carbamididoílo; Gi-Cõ-âlquiloarbonilo, G^-O^-alcenilcalhonilo,

nilo, benzil-oxicarbonilo, benzoílo, o radical de um alfa-amino-áoido de origem natural ou um ácido gama- aminobutírico, que podem estar substituídos por G^-G^-alquilo, hidroxi, halogénio, amino ou nitroj 5 6 7 R , R , R representam, independentemente um do outro, Ci-G^-alquilo ou C^-Cg-oicloalquiloj 2 representa um radical da férmula III -(CH2)n - X (III) na qual n representa 0 ou um número inteiro de 1 até 3; X representa hidroxi5 C^-C^-alquiloxi, carboxi;

O^-Có-ciclo-alquiloxicarbonilo, que podem estar substituídos uma ou várias vezes por C^-Cg-alquilo; ou representa oarbonilo, que está ligado por ligação peptídica oom um alfa-aminoácido de origem natural um ácido gama-aminobutírico ou um dipéptido representado aminooarbonilo, podendo amino estar mono- ou dissubstituido por C-^-O^-alquilo ou monossubstituido por fenil-C^-O^-alquilo, ou os dois radioais amino formam, em conjunto com o áto^ mo de azoto que os liga, um heterociclo de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de oxigénio ou azoto, ou X representa um grupo de férmula IV - 96 -

ο η (IV) Ρ - Υ I na qual Υ e Ζ representam, independentemente um do outro, hidro-xi, G-^-O^-alquilo ou C^-C^-alquiloxi; e A representa uma ligação 0,0 simples ou uma ligação 0,0 dupla} com a condição de R1 não representar 2-, 3-, ou 4-piridilo, 2 quando R representa um grupo da fórmula IV. - 3» - Processo de acordo com as reivindioa-çdes 1 ou 2, caraoterizado por se obter um composto da fórmula Ia, na qual R representa 2-piridilo ou um radical da fórmula II R5 R5 1 t -C - 1 1 R4 R6 (II) 3 4. na qual R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou O^-O^-alquilo} 5 R^ representa um par de electróes livres, ou hidrogé nio} 6 7 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogé nio; C-L-C^-alquilo, fenil-01-C2-alquilo; - 97 -

6 7 R e R' formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo saturado de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto; 6 7 R representa hidrogénio e R carbamimidoílo, O^-Cg- alquilcarbonilo ou o radical de um alfa-aminoácido de origem natural ou um áoido gama-aminobutírico; 5 6 7 R , R , R' representam, independentemente um do outro, C^-O^-alquilo; 2 R representa um radical da fórmula III

-(0¾)n - X (III) na qual n representa 0, 1 ou 2; X representa hidroxi; O^-O^-alquiloxi; earboxi; halo- genoformilo; O^-G^-alquilcarbonilo; benziloxicarbo-nilo ou C^-Og-oicloalquiloxicarbonilo, que podem estar substituídos uma ou várias vezes por -alquilo; ou representa carbonilo, que está ligado por ligação peptídica com um alfa-aminoácido de origem natural ou um ácido gama-aminobutírico; represen· ta aminooarbonilo, podendo amino estar mono- ou dissubstituido por O-L-C^-alquilo, ou os dois radicais amino formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociclo de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou X representa um grupo da fdrmula IV - 98 -

ο Η (IV) - Ρ - Υ ζ na qual Υ e Ζ representam, independentemente um do outro, hidroxi, Oi-O^-alquilo ou O^-G^-alquiloxi; e A representa uma ligação C,C simples ou uma ligação 0,0 dupla; 1 2 com a condição de R não representar 2-piridilo, quando R representa um grupo da fdrmula IV e A / de uma ligação 0, C dupla quando I = OH e n = 0. - 4& - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto da fórmula Ia, na qual R1 representa 2-piridilo ou um radical da fórmula II

(II) - C - N+ - E7

na qual % A R e R representam, independentemente um do outro, hidro génio ou G^-C^-alquilo;

- 99 -

0i-0^-alquil°j benzilo; 6 7 R e R em conjunto com o átomo de azoto que os liga formam, um heterociolo saturado de cinco até seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto; 6 7 R representa hidrogénio e R^ carbamimidoílo; Ci-Cô-al^uiloarbonilo, o radical de um alfa-amino--ácido de origem natural; 5 6 7 R , R , R representam, independentemente um do outro, C-j-C^-alquilo; 2 R representa um radical da fórmula III -(CH2)n-X (III) na qual n representa 0, 1 ou 2; X representa hidroxi, oarboxi; C^-C^-alquiloxicarbo- nilo; benziloxicarbonilo; ciclohexilcarbonilo, que pode estar substituido uma ou várias vezes por Ci-Cg-alquilo; ou representa carbono, que está ligado por ligação peptídioa com um alfa-aminoácido de origem natural; representa aminooarbonilo, onde os dois radicais amino formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociolo de cinco até seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou representa um grupo da fórmula IV 0 II - P - Ί (IV) i Z - 100 -

na qual Y representa hidròxi ou G^-O^-alquiloxi e Z representa Cj-C^alauilo; e A representa uma ligação 0,0 simples ou uma ligação C,C dupla; eom uma oondição de R não representar 2-piridilo, quando R2 representa um grupo da fórmula IV e A / de uma ligação 0,0 dupla, quando X = OH e n = 0.

- 5â - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um oomposto da fórmula Ib, na qual R4 representa um radical da fórmula II R 3 R' I ! (II) - 0 - R* - R1 2 3 i l4

J na qual 3 4 R e R representam hidrogénio, — 101 — 1 R representa um par de electrães livres ou hidrogé nio; 2 7 R e R' representam, independentemente um do outro, hidrogénio; Gi“C^-alquilo; fenil-O-j^-Og-alquilo; 3 6 7 R e R' formam, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociolo saturado oom oinoo até seis membros podendo um átomo de carbono estar substi-tuido por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto;

6 7 R representa hidrogénio e R' C^-G^-acilo; C^-Cg-al- quiloarbonilo, benzoilo ou o radioal de um alfa--aminoácido de origem natural ou ácido gama-amino-butírieoj 5 6 7 R , R , R' representam, independentemente um do outro, Ci-C^-alquilo ou G^-Og-cicloalquiloj 2 R representa um radioal da fórmula III -(CH2)n-X (III) na qual n representa 0, 1 ou 2; X representa oarboxi; halogenoformiloj Cj^-G^-alquilo- xicarbonilo; benzoiloxioarbonilo, ou C^-Cg-ciclo-alquilearbonilo, que podem estar substituidos uma ou várias vezes por G-^-Cg-alquilo; ou representa oarbonilo, que está ligado por ligação peptídica oom um alfa-aminoáoido de origem natural ou um ácido gama-amino-butírico$ representa aminooarbonilo, onde amino pode estar mono- ou dissubstituido por Gi-O^-alquilo, ou os dois radicais amino, em conjunto com o átomo de azoto que os liga, formam um heterooiclo de cinoo até seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por Um átomo de oxigénio ou de azotoj e A representa uma ligação 0,0 simples ou uma ligação 0,0 dupla. — 6a — Prooesso de acordo oom a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto da fórmula Ib, 1 na qual R representa um radical da fórmula II - 102 - (II) t cr:'

R3 R3 1 t 1 o t 1 R4- R1 2 na qual 3 4 R e R representam hidrogénio; 5 R representa um par àe eleotrães livres; 6 7

Re R' representam, independentemente, um do outro, hidrogé nio ou C^-C^-alquilo; 6 7 E° e E em conjunto com o átomo de azoto que os liga formam um heterociolo saturado de cinco até seis membros, podèndo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto; 6 7 R representa hidrogénio e R' O-^-Cg-alquilcarbonilo;

(III) 1 6 7 R , R , R representam, independentemente um do outro, Oi-O^-alquilo; 2 2 R representa um radioal da fórmula III -(0H2)n-X na qual n representa 2 e X representa oarboxi, O-^-O^-alquiloxioarbonilo; benzi- loxioarbonilo; cielohexilcarbonilo, que pode estar substituído uma um várias vezes por O^-Og-alquilo; carbonilo, que está ligado por ligação peptídica com um alfa-aminoácido de origem natural; representa aminooarbonilo, formando os dois radicais amino em conjunto com o átomo de azoto que os liga, um heterociolo de áinoo até seis membros, podendo um átomo - 103 - <0? '»’4.«<fa32gU]e&2 4 de carbono estar substituído por um átomo de oxigénio ou de azoto; e A representa uma ligação C,G simples ou uma ligação 0,0 dupla. - 7* - Processo de acordo oom a reivindicação 1, caraoterizado por se obter um composto da fórmula Ia, na qual Â representa uma ligação 0,0 dupla. - 8â - Processo de a cordo oom a reivindicação 1, caraoterizado por se obter um composto da fdrmula Ia ou Ib da série cloridrato de éster benzílico de ácido 5-aminometil-iso-xazol-3-propidnioo, cloridrato de éster etílico de ácido 5-aminometil-isoxa-zol-3-propidnico, Tolueno-4-sulfonato de éster (+)-mentílico de ácido 5-ami-nometil-isoxazol-3-propidnico, iUolueno-4-sulfonato de éster (-)-mentílioo de ácido 5--aminometil-isoxazol-3-propidnico, Iolueno-4-sulfonato de éster cis-(3,3,5)-trimetilciclolie-xilioo de áoido 5-aminometil-isoxazol-3-propiónico, Cloridrato de éster etílico de ácido 2-(5-aminometil-iso-xazol-3-il)-etil-2-(P-metil)-fosfínico, Sal de diciololiexilaménio de éster (-)-mentílico de ácido 3-carboxi-2-isoxazolino-5-il-earboxílico, Iodeto de éster cis-(3,3,5)-trimetilciolohexílico de ácido 5-trimetilaménio-metil-isoxazol-3-propiénico, - 104 -

Ester metílioo de ácido 3-Mdroxiiminotnetil-isoxazol-5--prepidnico, 3,5-dicarboxi-2-isoxazolina, Sal de sddio de ácido 5-h-idroximetil-isoxazol-3-propidnito, Oloridrato de éster metílioo de ácido 5-aminometil-isoxa-zol-3-propidnico, Ácido 5-aminometil-isoxazol-3-propidnico, Ácido 5-(l-amino-l-metil-etil)-isoxazol-3-propidnicoy Ácido 5-benzilaDiinoittetil-isoxazol-3--propidnioo, Ácido 5-dimetilaminometil-isoxazol-3-propidnico, Oloridrato de ácido 2-(5-aminometil-isoxazol-3--il)-etil-2--(P-metil)-fosffnico, Ácido 5-acetamidometil-isoxazol-3*-propidnioo, lodeto de áster (-)-mentílico de ácido 5-trimetilamdnio--metil-isoxazol-3-propidnioo, lodeto de éster (+)-mentílico de ácido 5-trimetilamdnio--taetil-isoxazol-3-propióttioo, Oloridrato de éster (+)-iaentílico de áoido 5-(Ii-fenilalanil-· -amino)-metil-isoxazol-3-propidnico, Oloridrato de éster (-)-mentílico de ácido 5-(Ii-fenilalanil-· “amino)metil-isoxazol-3-propidnico, Oloridrato de éster metílioo de ácido 5-(L-£enilalanil--amino)-metil-isoxazol--3-propidnico, Ácido S^guanidinometil-isoxazol-^-propidnico, U-(5-aminometil-isoxa'zol-3-il)-propiottil-gliciiQa, Sal de diamdnio de bis-(3-Z""2“Garl;)oxi-7-e'til-isoxaZÍ0l“5--il-meti1)-amina, 3?olueno-4-sulf onato de éster (+)-mentílico de ácido 5-ami-nometil-2-isoxazolino-3-propidnioo, $olueno-4-sulfonato de éster (-)-mentílico de ácido 5--amitiometil-2-isoxazolino-3-propidnico, - 105 -

3-(2-carboxietil)-5-(2-piridil)-2-isoxazolina, Ester de ácido 5-trimetilamdniometil-isoxazol-3-propidnioo, Oloridrato de ácido 5-piperidinometil-isoxazol-3-propidnieo, Oloridrato de amida de ácido 5-aminometil-isoxazol-3-pro-pidnico, írifluoracetato de 5-(Ii-fenilalanil-amino)-metil-isoxazol--3-il-propidnioo-glicina. - 9S - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por se incorporar como ingrediente activo numa forma apropriada para administração, numa quantidade até 1000 mg por unidade de dosagem no caso de composiçães sólidas e até 300 mg por unidade de dosagem para composiçães líquidas, pelo menos um composto da fórmula Ia, Ib ou Ic ou, eventualmente, um dos seus sais fisiologioamente aceitáveis, ou em forma estereoisdmera pura

nas quais R4 representa mula II 2-, 3-, 4-piridilo ou um radical da fdr- R5 1 1 1 o E+ t t R4 R6 na qual - 106 - (II)

ζ 4. R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou C^-C^-alquilo, c R3 representa um par de electrdes livres ou hidrogénio; 6 7 R e R' representam, independentemente um do outro, hidrogénio; C-^-(3g-alquilo; C^-Og-cicloalquilo; C6-Oi2-aril-Gi-C^-alquil°5 carbaraimidoílo; C^-Cg--alquilearbonilo, C^-C^-alcenilcarbonilo, C-^-Cg--alquiloxioarbonilo, °6”°12 -aril-0^-O^-alquilo ar-honilo, Cg-C1Q-aril-C1-C^-alq.uiloxicar'bonilo, Og-OiQ-arilcarhonilo, o radical de um alfa-amino-áciâo de origem natural ou ácido gama-aminobutírico, que podem estar substituidos por C-^-Cg-alquilo, hidroxi, halogénio, amino ou nitro; ou 6 7 R e R' formam, em conjunto como o átomo de azoto, que os liga, um heterooiolo de oinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto; ou

átomo de azoto, que os liga, um heterociclo de seis até doze membros; R 2 representa um radical da fórmula III (III) na qual n representa 0 ou um número inteiro de 1 até 5; » ul“°12 representa hidroxi; 0^-0^-alquiloxi; carboxi; halo-genoformilo; formilo; oxiimino; C-.-O-.p-alquiloxi- carbonilo; benziloxicarbonilo ou O^-Gg-cicloalquilo-xicarbonilo, que podem estar substituidos uma ou várias vezes por C-j-Cg-alquilo; ou representa car- - 107 - X

bonilo, que está ligado nas ligaçães pe$tídicas com um alfa-aminoácido de origem natural, ácido gama-aminobutírico ou um dipéptido, ou representa aminocarbonilo, em que o grupo amino pode estar mono- ou dissubstituido por C^-Cg-alquilo ou monos-substituido por fenil-O^-Og-alquilo, ou os dois radicais amino com o átomo de azoto, qoe os liga, formam um heterociclo de cinco até sete membros podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou X representa um grupo da fórmula IV 0 I! - 0 - Y (IV) I z na qual Y e Z representam, independentemente um do outro, Mdrdxi, Ci-C^-alquilo ou C-^-C^-alquiloxi; e A representa uma ligação 0,0, simples ou uma ligação 0,0 dupla; era combinação cora os exoipientes usuais assim como, eventualmente, substâncias aditivas e auxiliares. - 10fi - Processo de acordo com a reivindicação 9, oaracterizado por se incorporar um composto da fórmula Ia ou Ib, na qual R1 representa 2-, 3-, 4-piridilo ou um radical da fórmula II 108 -

ζ 4. na qual 1 e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou 0^-0^-alquilo; R“* representa um par de eleotrSes livres ou hidrogénio; 6 7 R e R representam, independentemente um do outro, hidrd-génio; C^-C^-alquilo; fenil-C^^-alquilo; R^ e R^ com o átomo de azoto, que os liga, formam um hete-roiclo de einoo até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto; R η representa hidrogénio e R carbamimidoílo; -alquilcarbonilo, C^-C^-alcenilcarbonilo, C^-Cg-alquiloxicarbonilo, fenil-O^-C^-alquilcarbonilo, benziloxioarbonilo, benzoílo, o radical de um alfa -aminoáciâo de origem natural ou ácido gama-amino-butírico, que podem estar substituidos por C^-Cg--alquilo, hidrdxi, halogénio, agino ou nitro; 5 6 7 R , R , R representam, independentemente um do outro, R -alquilo ou C^-Cg-cicloalquilo; representa um radical de fdrmula III (III) -(GH2)a - X na qual n representa 0 ou um número inteiro de 1 até 3; X representa hidroxi; C^-O^-alquiloxi; carboxi; -alquiloxicarbonilo; benziloxioarbonilo ou C^?Cg--cicloalquiloxicarbonilo, que podem estar substitui- - 109 -

dos uma ou várias vezes por 0^-Cg-alq.uiloj ou representa carbonilo, que está ligado por ligação peptídica com um alfa-aminoáoido de origem natural, um áoido gama-aminobutírico ou um dipéptido; representa aminocarbonilo, podendo amino estar mono-ou dissubstituido por O^-C^-alquilo ou monossubsti-tuido por fenil-C-pC^-alquilo ou os dois radicais amino, oom o átomo de azoto, que os liga, formam um heterooiclo de cinoo até sete membros, podendo um átomo de oarbono estar substituido por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou X representa um grupo da fórmula IY 0 - P - Y (IY) t z na qual

Y e Z representam, independentemente um do outro, bidroxi, Oi-G^-alquilo ou G^C^-alquiloxi; e A representa uma ligação G,C simples ou uma ligação 0,0 dupla. - llft - Processo de a cordo com a reivindicação 9, caracterizado por incorporar um composto da fórmula Ia, na qual R·*· representa 2-piridilo ou um radical da fórmula II - 110 -

na qual R^ e R^ representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou C^-C^-alguilo; Έ? representa um par de electrdes livres ou hidrogé nio; 6 7 R e R' representam, independentemente um do outro, hidrogénio C^-C^-alquilo; fenil-C^-^-alQuilo; 6 7 R e R' com o átomo de azoto que os liga formam um hete- rociclo saturado de cinco até sete membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto; 6 7 R representa hidrogénio e R' oarbamimidoílo, O-^-Cg- -alquilcarbonilo ou o radical de um alfa-aminoácido de origem natural ou ácido gama-aminobutírico; 5 6 7 R , R , R representam, independentemente um do outro, Oi-G^-alquilo; 2 R representa um radical da fórmula III -(0H2)fl - X (III) na qual n representa 0, 1 ou 2; X representa hidroxi; Gi-C^-alquiloxi; carbóxi; halo- genoformilo; C^-G^-alquiloxicarbonilo; benziloxicar-bonilo ou O^-Gg-oioloalquiloxicarbonilo, que podem - 111 - ,.y

,'····- estar substituídos uma ou várias vezes por G^-G^--alquilo; ou representa carbonilo, que está ligado por ligação peptídioa com um alfa-aminoácido de origem natural ou ácido gama-aminobutírico; representa aminooarbonilo, podendo amino estar mono-ou dissubstituido por 0^-0^-alq.uilo, ou os dois radicais amino com o átomo de azoto que os liga formam um iieterociclo de cinco até sete membros, podendo um átomo de earbono estar substituido por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou X representa um grupo da fórmula IV 0 II - P - Y (IV) I z na qual Y e Z representam, independentemente um do outro, hidro-xi, G]_-0^-alquilo ou C^-C^-alquiloxi; e A representa uma ligação 0,0 simples ou uma ligação 0,0 dupla. - 12S - Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado por se incorporar um composto da fórmula Ia, na qual R1 representa 2-piridilo ou um radical da fórmula II - 112 - k

na qual <7 < R"5 e R4 representam, inddependentfe um do outro, hidrogénio ou C-^-C^-alquiloj 5 R representa um par de eleetr5es livres ou hidrogé nio? R6 e R7 representam, independentemente um do outro, hidrogénio? 0^-C^-alq.uilo? benzilo; R6 e R7 oom o átomo de azoto que os liga formam um hetero-oiclo saturado, de cinco até seis membros podendo um átomo de oarbono estar substituído por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto? 6 *7 R representa hidrogénio e R' carbamimidoílo? C-j-Cg- -alquilcarbonilo ou o radioal de um alfa-aminoáci-cido de origem natural? 7 R representam, independentemente um do outro, C-j_-C^-alquilo? R representa um radical da fórmula III -(CH2)n - X (III) na qual n representa 0, 1 ou i 2? X representa hidroxi? carboxi? 0-i^-O^-alq.uiloxicarbo-nilo? benziloxicarbonilo?' ciclohexiloxicarbonilo, - 113 - »~— •^.οϊν^Α'Τ--»^ " ’* —-~- J> que pode estar substituído uma ou várias vezes por Ci-Cg-alquiloj representa carbonilo, que está ligado por ligação peptídioa com um alfa-aminoácido de origem naturaih; representa aminocarbonilo, podendo os dois radicais amino com o átomo de azoto que os liga, formar um heterooiolo de cinco até seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituído por um átomo de oxigénio ou de azoto; ou X representa um grupo da fórmula IV 0 II - P - Y (IV) Z na qual Y representa Mdroxi ou C^-G^-alq.uiloxi e Z representa uma ligação G,C simples ou uma ligação 0,C dupla. - 13 & - Processo èe acordo oom a reivindicação 9, oaraeterizado por se incorporar um composto da fórmula Ib, na qual R1 representa um radical da fórmula II R5 R5 I I - C - - R7 (II) I I R4 R6 — 114

na qual 3 4 R e R representa hidrogénio? 5 R representa um par de eleetróes livres ou hidrogé nio? 6 7 R e R representam, independentemente um do outro, hidrogénio? C-j-C^-alquilo? fenil-Cj-Cg-alquilo; 6 7 R e R' oom o átomo de azoto que os liga, formam um hetero-ciclo saturado de cinco até seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de enxofre, oxigénio ou de azoto; 6 7 R representa hidrogénio e R' representa O-^-C^-acilo? Gi-Og-alquilcarbonilo, benzollo ou o radical de um alfa-aminoáeido de origem natural ou ácido gama--aminobutírico; 5 6 7 R , R , R' representam, inâependentemente um do outro C^-C^--alquilo ou Cj-Cg-cicloalquilo? 2 R representa um radical da fórmula III -(CH2)n-X (III) na qual n representa 0, 1 ou 2? X representa carboxi; halogenoformilo? C^-O^-alquil- oxicarbonilo? benziloxiearbonilo ou C^-Cg-ciclo-alquilcarbonilo , que podem estar substituidos uma ou várias vezes por C^-Cg-alquilo? ou oarbonilo, que está ligado por ligação peptídica com um alfa--amino-ácido de origem natural ou ácido gama-ami-nobutírico, representa aminooarbonilo, podendo amino estar mono- ou dissubstituido por Gj^-C^-al-quilo, ou os dois radicais amino com o átomo de azoto que os liga, formam um heterociclo de cinco até - 115 -

seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de oxigénio ou de azoto; e A representa uma ligação C,0 simples ou uma ligação C,C dupla. - 14 â _ Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado por se incorporar um composto da fórmula Ib, na qual representa um radical da fórmula II R 1 R" t R- 1 .+ C - U - R (II) R R na qual 3 4 , R e R representam hidrogénio; ΈΤ representa um par de electrães livres; 6 7 R e R' representam, independentemente um do outro, hidrogénio ou C-^-C^-alquilo; 6 7 R e Rf com 0 átomo de azoto que os liga formam um heteroci-clo saturado de cinco até seis membros, podendo um átomo de c arbono estar substituido por um átomo de enxofre, de oxigénio ou de azoto; 6 7 R representa hidrogénio e R' C^-Cg-alquilcarbonilo; 5 6 7 R , R , R‘ representam, independentemente um do outro, Cj-O^-alquilo; R representa um radical da fórmula III - 116 - (III)

-(0¾)η - X na qual n representa 2 e X representa carboxi, C^C^-alquiloxicarbonilo; ben- ziloxicarbonilo; cicloliexilcarbonilo, que pode estar substituído uma ou várias vezes por C^-Cg-al-quilo; oarbonilo, que está ligado por ligação pep-tídioa oom um alfa-aminoácido de origem natural; aminooarbonilo, podendo os dois radicais amino, com o átomo de azoto que os liga, formar um heterooiclo de cinco ate seis membros, podendo um átomo de carbono estar substituido por um átomo de oxigénio ou de azoto; e A representa uma ligação 0,0 simples ou uma ligação 0,0 dupla. - 15 a - Processo de acordo com as reivindicação 9, caracterizado por se incorporar um composto da fórmula Ia, na qual A representa uma ligação 0,C dupla. - 16a _ Processo de acordo Gom a reivindicação 9, caracterizado por se incorporar um composto da fórmula Ia, Ib ou Ic, da série Cloridrato de éster benzílico de ácido 5-aminometil-isoxa-xol-3-propiónico, Oloridrato de éster etílico de áoido 5-aminometil-isoxazol· -3-propiónico, Iolueno-4-sulfonato de éster (+)-mentilico de ácido 5-ami- - 117 - nometil-isoxazol-3-propidnico, !Dolueno-4-sul£onato de éster (-)-mentílico de ácido 5--aminometil-isoxazol-3-propidnico, Iolueno-4-sulfonato de éster ois-(3»3,5)-trimetilciclohexi-lico de ácido 5-aminometil-isoxazol-3-propidnico, Oloridrato de éster etílico de áoido 2-(5-aminometilisoxa-zol-3-il) -etil-2-etil-2-(P-metil) -f osf ínico, Sal de dicicloliexilamdnio de éster (-)-mentílico de ácido 3-car'boxi-2-isoxazoline-5-il-car)Doxílico, Iodeto de éster c is-(3,3, 5)-trimetilcieloliexílico de ácido 5-trimetilamdnio-metil-isoxazol-3-propiónieo, Ester metílico de ácido 3-hidrQxiiminometil-isoxazol-5-pro-piónioo, 3»5-dicarboxi-2-isoxazolina, Sal de sódio de ácido 5-Mdroximetil-isoxazol-3-propidnico, Oloridrato de éster metílico de ácido 5-aminometil-isoxa-zol-3-propidnioo, Ácido 5-aminometil-isoxazol-3-propidnico, Ácido 5-(l-atnino-l-metil-etil)-isoxazol-3-propidnico, Ácido 5-benzilaminometil-isoxazol-3-propidnico, Ácido 5-dimetilaminometil-isoxazol-3-propidnico, Oloridrato de ácido 2-(5-aminometil-isoxazol-$-il)-etil-2(P -metil)-fosfínico, Ácido 5-acetamidometil-isoxazol-3-propidnico, Iodeto de éster (-)-mentílioo de ácido 5-trimetilaminometil -isoxazol-3-propidnioo, Iodeto de éster (+)-mentilico de ácido 5-trimetilaminometil -isoxazol-3-propidnico, Oloridrato de éster (+)-mentílioo de ácido 5?(L-fenilalanil -amino)-metil-isoxazol-3-propidnico, Oloridrato de éster (-)-mentílioo de ácido 5-(IkCenilalanil -amino)-metil-isoxazol-3-propidnico, - 118 - η * Cloridrato de éster metílico de ácido 5-(L-fenilalanilamino)~ -meèil-isoxazol-3-propidnioo, Áoido 5-guanidinometil-isoxazol-3-propidnico, I-(5-ami)aoinetil-isoxazol-3-il)-propionil-glioina, Sal de diamdnio de TDie-(3-^_2-carTDoxiiJ7'-etil-isoxazol-5-il--metil)-amina, Tolueno-4-sulfonato de éster (+)-mentilioo de áoido 5-amino-metil-2-isoxazolino-3-propidnioo, Tolueno-4-sulfonato de éster (-)-mentílico de ácido 5-amino-oietil-2-isoxazolino-3“propidriico, 3-(2-oarboxietil)-5-(2-piridil)-2-isoxazolina, Ester de áoido 5-tritnetilatninoaietil-isoxazol-3-propiénioo, Cloridrato de ácido 5-piperidinometil-isoxazol-3-propidnico, Cloridrato de amida de áoido 5-aminoiaelÍÍl-lsoxazol-3-pro-pidnioo, Irifluoroacético de 5-(L-fenilalanil-amino)-metil-isoxazol--3-il-propionil-glioina. A requerente reivindica a prioridade do pedido de patente alemão apresentado em 12 de Abril de 1990, sob o NS p 40 11 880.0. i Lisboa, 11 de Abril de 1991

- 119 -