KR20230115787A - 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 인삼 유래 조사포닌; 및 비이온성 계면활성제를 포함하는 코클리에이트좀;을 포함하는 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따르면 용매, 천연 유화제, 유연제, 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 방부제, 인삼 유래 조사포닌 및 2가 양이온 염을 포함하는 조성물을 유화시켜 제조되는 코클리에이트좀은 안정성이 우수할 뿐만 아니라, 인삼 유래 조사포닌이 코클리에이트좀 안에 포집됨으로써 외부 환경으로부터 차단되거나 보호되는 효과가 있어 조사포닌의 피부 투과성이 크게 개선되고 피부 내로 더 깊이 침투될 수 있다. 이처럼 본 발명의 화장료 조성물은 인삼 유래 조사포닌을 안정적으로 피부 안으로 깊이 침투시킴으로써 조사포닌을 통한 피부손상 방지 및 주름 개선 효과를 극대화할 수 있는 이점이 있다.
본 발명에 따르면 용매, 천연 유화제, 유연제, 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 방부제, 인삼 유래 조사포닌 및 2가 양이온 염을 포함하는 조성물을 유화시켜 제조되는 코클리에이트좀은 안정성이 우수할 뿐만 아니라, 인삼 유래 조사포닌이 코클리에이트좀 안에 포집됨으로써 외부 환경으로부터 차단되거나 보호되는 효과가 있어 조사포닌의 피부 투과성이 크게 개선되고 피부 내로 더 깊이 침투될 수 있다. 이처럼 본 발명의 화장료 조성물은 인삼 유래 조사포닌을 안정적으로 피부 안으로 깊이 침투시킴으로써 조사포닌을 통한 피부손상 방지 및 주름 개선 효과를 극대화할 수 있는 이점이 있다.
Description
본 발명은 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물, 및 자외선에 의한 피부질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
피부는 체내의 기관을 기온 및 습도의 변화와 자외선(UV) 등 외부 환경의 자극으로부터 보호해 주는 기능을 하고 있다. 특히 자외선으로 인한 자극은 피부 기능을 저하시키고 피부의 광노화 현상을 촉진시키며, 피부 광노화는 피부 구성성분의 전체적인 악화를 수반하게 된다. 섬유아세포의 감소 및 이 세포의 활성도 손상은 피부 광노화 프로세스 중에 중요한 부분을 차지한다.
피부는 표피, 진피, 피하지방층의 세 층으로 구성되고, 표피는 다시 각질층, 과립층, 유극층, 기저층으로 분류된다. 최외각인 피부 각질층은 피부 보습작용, 피지분비 조절작용, pH 조절작용, 유수분 밸런스 유지 등을 통해 사람의 몸을 외부 환경으로부터 보호하는 중요한 역할을 하지만, 유효 성분의 피부 전달에 대해 투과 장벽으로 작용하기도 한다. 따라서, 의약품 및 화장품 분야에서는 유효 성분을 효과적으로 피부 내에 침투시키기 위한 피부 전달 시스템에 대한 연구가 지속적으로 이루어지고 있다.
이러한 피부 전달 시스템 중 리포좀은 지질 이중층으로 구성되어 있는 소포체로서 생체 친화성 및 생분해성이 높고, 내부에 친수성 및 소수성 물질을 모두 담지할 수 있어 의약품 및 화장품 분야에 다양하게 이용되어 왔다. 하지만, 리포좀은 포집 효율이 매우 낮고, 리포좀 제조에 사용되는 용매, 방부제 등이 피부 자극을 유발하며, 리포좀의 원료로 사용되는 콜레스테롤은 리포좀의 지질막을 견고하게 형성하여 포집 물질의 방출을 저해할 뿐만 아니라 포집 물질의 세포막 투과율을 낮춘다는 문제점이 있었다(특허문헌 1).
인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 오갈피나무과(Araliaceae) 인삼속(Panax)에 속하는 다년생 초본으로 한방에서 사용되는 한약재 중의 하나로 달면서 쓴맛이 있고, 따뜻한 기운을 가지고 있으며, 원기를 보하고 비장을 보호하며, 폐를 튼튼하게 해주는 등 본초학적 효능을 가지고 있다.
인삼의 주요 생리활성 물질은 진세노사이드라고도 불리는 사포닌과 정유성분, 폴리아세틸렌, 페놀성분, 배당체 및 산성펩타이드 등이 있으며, 그 밖에도 비타민, 당류, 무기질과 같은 다양한 성분들이 함유되어 있다. 일반적인 인삼의 생리활성 효능은 중추신경계의 작용, 면역기능 강화 작용, 항암 작용 등이 보고되어 있다. 특히 진세노사이드는 지금까지 약 40여 종이 발견되고 있으며 중추신계를 비롯하여 내분비계, 면역계, 대사계 등에 광범위한 영향을 미쳐 신체기능 조절, 즉 생리기능 정상화에 탁월한 효과를 나타내는 것으로 확인되고 있다. 이들 진세노사이드는 서로 비슷한 작용을 하거나 또는 서로 반대되는 작용을 나타내기도 하는데, 특정 성분이 단독으로 또는 여러 종류가 상호작용을 통해서 다양한 효능을 발휘하는 것으로 알려지고 있다.
이에, 본 발명자들은 인삼 유래 조사포닌을 피부 안으로 효과적으로 침투시킬 수 있는 생체 전달 시스템에 대해 연구를 하던 중에, 친수성 비이온성 계면활성제를 포함하여 제조된 코클리에이트좀(cochleatesome) 안에 인삼 유래 조사포닌을 포집하면 코클리에이트좀의 안정성이 개선되고, 조사포닌의 피부 투과성이 개선될 뿐만 아니라 조사포닌이 피부 내로 더 깊이 침투되며, 이로써 조사포닌에 의한 피부손상 방지 효과 및 주름 개선 효과를 극대화할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 코클리에이트좀의 안정성 및 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 모두 개선된 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 일 양태는 인삼 유래 조사포닌; 및 비이온성 계면활성제를 포함하는 코클리에이트좀;을 포함하는 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태는 인삼 유래 조사포닌; 및 비이온성 계면활성제를 포함하는 코클리에이트좀;을 포함하는 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 자외선에 의한 피부질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따르면 용매, 천연 유화제, 유연제, 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 방부제, 인삼 유래 조사포닌 및 2가 양이온 염을 포함하는 조성물을 유화시켜 코클리에이트좀 제조시 안정성이 우수할 뿐만 아니라, 인삼 유래 조사포닌이 코클리에이트좀 안에 포집됨으로써 외부 환경으로부터 차단되거나 보호되는 효과가 있어서 조사포닌의 피부 투과성이 크게 개선되고 피부 내로 더 깊이 침투될 수 있다.
이처럼 본 발명의 화장료 조성물은 인삼 유래 조사포닌을 안정적으로 피부 안으로 깊이 침투시킴으로써 조사포닌을 통한 피부손상 방지 및 주름 개선 효과를 극대화할 수 있는 이점이 있다.
도 1은 실시예 1 및 조사포닌 대조군에 따른 자외선으로부터의 피부손상 보호 효과를 평가한 결과를 나타낸다.
도 2는 실시예 1 및 조사포닌 대조군에 따른 프로-콜라겐 합성량 증진 효과를 평가한 결과를 나타낸다.
도 3은 실시예 및 비교예의 각 시료에 대해 안정성 실험을 위해 고온(50℃)에서 1개월간 정치한 후에 시료를 촬영한 사진을 나타낸다.
도 2는 실시예 1 및 조사포닌 대조군에 따른 프로-콜라겐 합성량 증진 효과를 평가한 결과를 나타낸다.
도 3은 실시예 및 비교예의 각 시료에 대해 안정성 실험을 위해 고온(50℃)에서 1개월간 정치한 후에 시료를 촬영한 사진을 나타낸다.
이하, 본 발명에 대한 이해를 돕기 위하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 명세서 및 청구범위에서 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
1. 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물
본 발명의 일 양태는 인삼 유래 조사포닌; 및 비이온성 계면활성제를 포함하는 코클리에이트좀;을 포함하는 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 "투과성 개선"은 상기 조성물이 투여되는 개체에서 피부를 투과하여 피부 내부로 침투되는 유효 성분의 비율이 증가하거나, 피부 내부로 더 깊이 침투되는 것을 포함하는 의미로 사용될 수 있다. 예를 들어, 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과율이 코클리에이트좀에 포집되지 않은 조사포닌 대조군 대비 40~80배, 또는 45~75배, 또는 50~70배 정도 개선되는 것을 의미하거나, 또는 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과깊이가 코클리에이트좀에 포집되지 않은 조사포닌 대조군 대비 1.2배 이상, 또는 1.3배 이상, 또는 1.4배 이상, 또는 1.5배 이상 개선되는 것을 의미할 수 있다.
이처럼 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선됨에 따라 조사포닌을 통해 피부에 기대할 수 있는 효과로서, 피부손상 방지 및 주름 개선 효과가 더욱 효과적으로 달성될 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀은 자외선으로부터 유도된 피부 손상을 방지 효과를 나타낼 수 있다. 자외선의 작용으로 활성산소종(ROS)이 생성되고 피부 노화의 주된 원인 물질로 작용하는데 본 발명의 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀은 이러한 활성산소종을 제거함으로써 항산화 작용을 나타내고 자외선으로 인한 피부 손상 방지 효과를 나타낼 수 있다.
또한, 피부 섬유아세포의 콜라겐 합성능은 피부 재생, 피부 탄력, 피부 주름 형성 및 피부 손상시 조직의 수복 또는 재생과 직접적인 관련이 있다고 볼 수 있다. 즉, 피부 섬유아세포의 프로콜라겐의 합성이 촉진되면, 콜라겐 합성량이 증가하고, 피부 주름 개선, 피부 탄력 증진, 손상된 피부 조직의 수복 및 재생, 및 피부 노화 방지 등의 효과를 얻을 수 있다. 본 발명의 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀은 피부 섬유아세포의 프로-콜라겐 합성을 촉진하므로 피부 주름 개선, 피부 탄력 증진, 손상된 피부 조직의 수복 및 재생, 및 피부 노화 방지 등의 효과를 가질 수 있다.
본 발명에서 코클리에이트좀은 인지질(phospholipid) 이중층과 양이온의 이온 상호작용에 의해 형성되는 것으로, 이들 인지질 이중층들 사이의 상호 작용을 최소화하기 위해 나선형의 실린더와 같은 길쭉한 모양으로 형성된다. 본 발명의 인삼 유래 조사포닌은 인지질 이중층들 사이에 위치하여 코클리에이트좀 안에 포집되거나 일부는 인지질 이중층 안에 끼여있는 형태로 코클리에이트좀을 구성함으로써 외부 환경으로부터 안정적으로 보호되며, 이로써 인삼 유래 조사포닌이 피부 장벽을 통과하여 피부 내로 침투할 수 있는 가능성이 높아진다.
본 발명의 코클리에이트좀은 용매, 천연 유화제, 유연제, 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 방부제 및 2가 양이온 염으로 구성된다. 특히, 본 발명의 코클리에이트좀은 친수성의 비이온성 계면활성제를 포함하여 균일한 코클리에이트좀을 형성함으로써 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선되고 피부 내로 더 깊이 침투될 수 있는 것을 특징으로 한다.
본 발명에서 사용되는 비이온성 계면활성제는 HLB 8~20, 또는 HLB 8~16, 또는 HLB 13~16, 또는 HLB 16~20, 또는 HLB 16~18의 친수성 비이온성 계면활성제일 수 있다. 이와 같은 HLB 값을 충족하는 경우 친수성 용매에 대한 분산력이 우수하고 균일한 유화 입자를 형성함으로써 코클리에이트좀의 크기 또는 형상 등을 균일하게 형성하는 데에 유리할 수 있다.
예를 들어, 상기 비이온성 계면활성제는 폴리글리세릴-10 라우레이트, 폴리글리세릴-10 올리에이트, 폴리글리세릴-10 스테아레이트, 및 폴리글리세릴-10 다이이소스테아레이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있으며, 우수한 분산력, 광범위한 pH 및 온도에서의 높은 안정성의 측면에서 폴리글리세릴-10 라우레이트가 가장 바람직하다.
상기 비이온성 계면활성제는 코클리에이트좀 총 중량 대비 0.01 내지 15 중량%, 또는 0.05 내지 12 중량%, 또는 0.1 내지 10 중량%, 또는 3 내지 10 중량%, 또는 3 내지 7 중량%로 포함될 수 있다.
상기 용매는 정제수, 글리세린, 에탄올, 부틸렌 글리콜, 및 프로판디올로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있다.
상기 코클리에이트좀은 코클리에이트좀 총 중량을 기준으로 용매를 55 내지 99 중량%, 또는 65 내지 95 중량%, 또는 80 내지 90 중량% 포함할 수 있다.
상기 천연 유화제는 인지질 및 포화지방산을 포함할 수 있다. 상기 인지질은 포스파티딜콜린, 리소포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민, 하이드로지네이티드 포스파티딜콜린, 포스파티딜산, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤, 포스파티딜이노시톨 및 이들의 수소첨가 생성물로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하고, 바람직하게는 포스파티딜세린이다. 상기 포스파티딜세린은 다양한 방법으로 추출 가능하며, 예를 들어 대두(콩)으로부터 추출한 레시틴으로부터 제조될 수 있다.
상기 코클리에이트좀은 코클리에이트좀 총 중량을 기준으로 인지질을 0.1 내지 10 중량%, 또는 0.5 내지 7 중량%, 또는 2 내지 5 중량% 포함할 수 있다.
또한, 상기 포화지방산은 팔미트산, 스테아르산, 올레산, 리놀레산 및 리놀렌산으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있다.
상기 코클리에이트좀은 코클리에이트좀 총 중량을 기준으로 포화지방산을 0.0001 내지 2 중량%, 또는 0.001 내지 3 중량%, 또는 0.001 내지 1 중량% 포함할 수 있다.
상기 유연제는 카프릴릭카프릭트라이글리세라이드, 세틸에칠헥사노에이트, 다이카프릴릴에터, 세라마이드, 및 세라마이드 엔피로 이루어진 군에서 선택되는 1종을 포함할 수 있다.
상기 코클리에이트좀은 코클리에이트좀 총 중량을 기준으로 유연제를 0.1 내지 10 중량%, 또는 0.3 내지 9 중량%, 또는 3 내지 7 중량% 포함할 수 있다.
상기 음이온성 계면활성제는 소듐 스테아로일 글루타메이트, 디소듐 스테아로일 글루타메이트, 소듐 라우로일 글루타메이트, 소듐 라우릴 글루코오스 카르복시레이트 및 소듐 메틸 코코일 타우레이트로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 코클리에이트좀은 코클리에이트좀 총 중량을 기준으로 음이온성 계면활성제를 0.01 내지 7 중량%, 또는 0.1 내지 3 중량%, 또는 0.1 내지 1.5 중량% 포함할 수 있다.
상기 방부제는 펜틸렌글라이콜, 1,2-헥산디올, 카프릴릴글라이콜, 페녹시에탄올 및 에틸헥실글리세린으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있다.
상기 코클리에이트좀은 코클리에이트좀 총 중량을 기준으로 방부제를 0.1 내지 10 중량%, 또는 0.5 내지 7 중량%, 또는 1 내지 3 중량% 포함할 수 있다.
2가 양이온 염의 양이온은 인지질 이중층과의 이온 상호 작용에 의하여 코클리에이트좀을 형성하여 이를 침전시키는 데 사용된다. 이때 2가 양이온 염의 양이온은 인지질 이중층 사이의 가교 역할을 한다. 상기 2가 양이온 염은 칼슘, 아연, 바륨 또는 마그네슘의 클로라이드 염일 수 있으며, 바람직하게는 염화칼슘이다.
상기 코클리에이트좀은 코클리에이트좀 총 중량을 기준으로 2가 양이온 염을 0.0001 내지 2 중량%, 또는 0.001 내지 3 중량%, 또는 0.001 내지 1 중량% 포함할 수 있다.
본 발명에서 코클리에이트좀은 용매, 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 방부제 및 2가 양이온 염을 포함하는 수상과 천연 유화제로서의 인지질 및 포화지방산, 및 유연제를 포함하는 오일상을 혼합하고 유화시킴으로써 형성하되, 이때 인삼 유래 조사포닌도 상기 수상에 첨가함으로써, 인삼 유래 조사포닌이 안에 포집된 코클리에이트좀을 제조할 수 있다. 상기 인삼 유래 조사포닌은 인지질 이중층들 사이에 주로 위치하게 되고 일부는 인지질 이중층 안에 끼여있는 형태로 코클리에이트좀을 구성하기도 한다.
상기 유화는 고압 미세 유화기 등의 기기를 이용하여 600~1500bar, 또는 700~1400bar, 또는 800~1200bar 조건에서, 1200~2400rpm, 또는 1300~2200rpm, 또는 1500~2000rpm으로, 30~70℃, 또는 40~65℃, 또는 50~60℃에서, 3~12분, 또는 5~10분 동안 교반하여, 상기 수상 및 오일상의 혼합물을 고압 균질화함으로써 수행될 수 있다. 이로써 코클리에이트좀 내에 인삼 유래 조사포닌을 안정적으로 포집할 수 있다.
본 발명의 인삼 유래 조사포닌은 인삼 추출물 또는 증삼액으로부터 통상의 분획 공정을 통해 수득된 것일 수 있다.
본 발명에서 인삼은 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다. 상기 인삼은 다양하게 가공된 것을 포함하며, 예를 들면 수삼, 미삼, 흑삼, 산삼, 장뇌삼, 산양삼, 호정화 인삼, 효소 처리된 미삼, 발효 인삼, 홍삼 및 발효 홍삼으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 어느 하나일 수 있으며, 이에 한정되지 않는다. 수삼은 원형을 유지한 생인삼을 말하고, 미삼은 인삼의 가는 뿌리를 말하며, 홍삼은 생인삼을 쪄서 익혀 건조한 것으로 건조 과정에서 갈변 반응이 일어나 담황갈색 내지 적갈색을 띄는 것이다.
상기 인삼으로부터 추출물을 수득할 때, 물, 유기용매, 초임계 유체 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 추출용매로 사용할 수 있다. 상기 유기용매는 알코올, 바람직하게는 C1-C4의 저급 알코올, 헥산(n-헥산), 에테르, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 메틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸아세테이트, 벤젠 및 이들의 혼합용매로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있고, 바람직하게는 물 또는 에탄올일 수 있다.
상기 증삼액은 인삼을 증숙할 때 표면에 맺히는 부산물로서, 인삼의 표면에 존재하는 유효성분 또는 진세노사이드가 포함된다. 증삼액은 인삼의 잎, 어린 새싹, 줄기, 줄기 껍질, 뿌리, 뿌리 껍질, 종자, 열매, 미숙과, 완숙과, 과육, 과피, 꽃, 수술군(androecium), 암술군(gynoecium), 꽃받침, 수술, 꽃잎, 꽃받침 조각, 심피 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나를 증숙시에 수득할 수 있다.
상기 인삼 추출물 또는 증삼액은, 인삼 추출물 또는 증삼액 그 자체, 이로부터 얻을 수 있는 농축액, 상기 농축액의 건조물 및 분말을 제한없이 모두 포함하는 의미로 사용된다.
또한, 상기 인삼 추출물 또는 증삼액으로부터 원하는 조사포닌을 얻기 위해서 추가로 통상의 분획 공정을 수행하여 수득된 분획물을 사용할 수 있다. 예를 들면, 상기 인삼 추출물 또는 증삼액을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획물, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등으로 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획물도 본 발명의 인삼 유래 조사포닌에 포함된다. 여러 성분이 혼합되어 있는 인삼 추출물 또는 증삼액을 농도 구배 컬럼 크로마토그래피 등을 통하여 활성 성분의 성질에 따라 분리해서 원하는 특정 활성 분획물을 수득할 수 있다.
상기 크로마토그래피는 예를 들어 컬럼 크로마토그래피, 고성능액체 크로마토그래피(HPLC), 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피 및 크기배제 크로마토그래피로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다.
상기 컬럼 크로마토그래피는 실리카겔, 세파덱스, LH-20, ODS 겔, RP-18, 폴리아미드, 도요펄(Toyopearl) 및 XAD 수지로 이루어진 군으로부터 선택된 충진제를 이용하는 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 활성 분획물을 분리 및 정제할 수 있고, 컬럼 크로마토그래피는 필요에 따라 적절한 충진제를 선택하여 수차례 실시할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 크로마토그래피를 사용함에 있어 용출 용매, 용출 속도 및 용출 시간은 본 기술분야에서 일반적으로 사용하는 용매, 속도 또는 시간을 적용할 수 있다.
또한, 상기 인삼 추출물 또는 증삼액으로부터 원하는 조사포닌을 얻기 위해서 상기 인삼 추출물 또는 증삼액을 유기 용매로 분획한 분획물을 사용할 수 있다. 상기 유기 용매는 알코올 예컨대 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 헥산(n-헥산), 에테르, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 메틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸아세테이트, 벤젠, 아세톤, 아세토니트릴 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있으나, 이에 한정되지 아니한다.
상기 코클리에이트좀 대 인삼 유래 조사포닌의 비율은 중량으로 100:0.5 내지 100:10, 또는 100:1 내지 100:7, 또는 100:3 내지 100:7일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제를 사용하여 액체 또는 고체 형태로 제조될 수 있다. 액체 또는 고체 형태의 화장품으로는, 예를 들면 이에 한정되지는 않으나 화장수, 크림제, 로션제, 입욕제 등의 형태를 포함할 수 있다.
화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제는 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면 물, 알코올, 프로필렌글리콜, 스테아르산, 글리세롤, 세틸알코올, 유동 파라핀 등이 있다.
본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 조성물은 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀 뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 본 기술분야에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이, 파우더, 헤어토닉, 헤어로션, 헤어크림, 헤어스프레이, 헤어무스, 헤어젤, 헤어컨디셔너, 헤어샴푸, 헤어 린스, 헤어팩, 헤어트리트먼트, 애완동물용 샴푸, 애완동물용 린스, 핸드크림, 손 세정제, 세제, 비누, 소독청결제, 물티슈, 마스크, 연고제, 패치 또는 필터 충진제의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명의 화장료 조성물은 통상적인 사용 방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.
2. 인삼 유래 조사포닌의 투과성이 개선된 자외선에 의한 피부질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
본 발명의 다른 양태는 인삼 유래 조사포닌; 및 비이온성 계면활성제를 포함하는 코클리에이트좀;을 포함하는 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 자외선에 의한 피부질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 피부질환은 자외선의 단기적, 장기적, 일시적, 또는 지속적 조사에 의해 유도되는 것일 수 있고, 예를 들어 광 과민성 피부염, 자외선 각화증, 또는 피부암일 수 있다.
본 발명에서 "예방"은 상기 조성물의 투여로 자외선으로 인해 유도되는 피부질환을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 말하며, "치료"는 상기 조성물에 의해 자외선으로 인한 피부질환이 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 말한다.
본 발명의 약학적 조성물은 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀 외에 본 발명이 목적으로 하는 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 상기 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀의 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 추가로 함유할 수 있다. 예를 들어 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 또는 담체를 포함할 수 있다.
상기 약학적 조성물의 투여 경로는 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함되고, 예컨대 도포에 의한 국부투여(topical application) 방식으로 적용될 수 있다. 상기 비경구는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 병소내 주사 또는 주입기술을 포함한다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다.
본 발명에서 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 본 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 자외선에 의한 피부질환의 예방 또는 치료를 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 것이든 적용가능하다. 예를 들면, 본 발명의 약학적 조성물은 인간뿐만 아니라 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 인간이 아닌 동물, 조류 및 어류 등 어느 것에 사용가능하다.
상기 약학적 조성물은 상기 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 상기 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 연질 캅셀제, 환 등이 포함된다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 멸균된 수용액, 액제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용 약학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 조성물은 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제형화할 수 있다.
상기 약학적 조성물의 투여량은 개체의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 투여시간, 투여 경로, 배출률, 약물 배합 및 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 다양하게 변할 수 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다. 또한 상기 약학적 조성물은 성인 기준으로 0.001 내지 200 ㎎/㎏ 범위 내의 투여량으로 투여될 수 있고, 상기 약학적 조성물이 외용제인 경우에는 성인기준으로 1.0 내지 3.0㎖의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속하는 것이 좋으나, 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
이하, 본 발명을 제조예 및 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 제조예, 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
제조예 1 - 인삼 유래 조사포닌의 제조
인삼을 수세하고 건조한 후 증삼 과정에서 생성된 증삼액을 한국인삼공사 고려인삼창으로부터 제공받았다. 증삼액을 농축액 당도가 56 브릭스에 도달할 때까지 50℃에서 농축하였다. 이때 수득된 증삼농축액의 고형분 함량은 52% 내외였다. 상기 증삼농축액을 동량의 부탄올과 혼합한 후 분획하여 부탄올 층만을 획득하였다. 이 과정을 3회 반복한 후, 여과, 농축, 및 건조하여 분말형의 인삼 유래 조사포닌을 제조하였다.
실시예 1 - 코클리에이트좀에 포집된 인삼 유래 조사포닌
하기 표 1의 수상과 오일상을 가온하고 혼합한 후 고압 미세 유화기로 1~3회, 1000bar 처리함으로써, 인삼 유래 조사포닌을 포집하고 있는 코클리에이트좀을 포함하는 조성물을 제조하였다.
| 원료 | 함량(중량부) | |
| 수상 | 정제수 | To 100 |
| 글리세린 | 40.00 | |
| 폴리글리세릴-10라우레이트 | 3.00 | |
| 1,2-헥산다이올 | 2.00 | |
| 소듐스테아로일글루타메이트 | 0.50 | |
| 칼슘클로라이드 | 0.01 | |
| 조사포닌 | 5.00 | |
| 오일상 | 스테아릭애씨드 | 0.01 |
| 카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드 | 5.00 | |
| 포스파티딜세린 | 3.00 | |
| 세라마이드엔피 | 0.50 | |
비교예 1 내지 5
수상과 오일상을 하기 표 2 내지 6과 같이 각각 달리한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법에 의해, 친수성 비이온성 계면활성제를 포함하지 않는 코클리에이트좀(비교예 1, 표 2), NLC(비교예 2, 표 3), 리포좀(비교예 3, 표 4), 니오좀(비교예 4, 표 5), 및 엘라스토좀(비교예 5, 표 6)을 포함하는 조성물을 각각 제조하였다.
| 원료 | 함량(중량부) | |
| 수상 | 정제수 | To 100 |
| 글리세린 | 40.00 | |
| 1,2-헥산다이올 | 2.00 | |
| 소듐스테아로일글루타메이트 | 0.50 | |
| 칼슘클로라이드 | 0.01 | |
| 조사포닌 | 5.00 | |
| 오일상 | 스테아릭애씨드 | 0.01 |
| 카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드 | 5.00 | |
| 포스파티딜세린 | 0.50 | |
| 세라마이드엔피 | 0.50 | |
| 원료 | 함량(중량부) | |
| 수상 | 정제수 | To 100 |
| 폴리솔베이트20 | 3.00 | |
| 조사포닌 | 5.00 | |
| 오일상 | 세틸팔미테이트 | 20.00 |
| 마카다미아씨오일 | 5.00 | |
| 폴리글리세릴-3메틸글루코오스다이스테아레이트 | 3.00 | |
| 원료 | 함량(중량부) | |
| 수상 | 정제수 | To 100 |
| 조사포닌 | 5.00 | |
| 오일상 | 레시틴 | 5.00 |
| 에탄올 | 20.00 | |
| 원료 | 함량(중량부) | |
| 수상 | 정제수 | To 100 |
| 1,2-헥산다이올 | 2.00 | |
| 글리세린 | 7.00 | |
| 소듐아스코빌포스페이트 | 0.20 | |
| 다이소듐이디티에이 | 0.01 | |
| 포타슘세틸포스페이트 | 0.60 | |
| 오일상 | 유채스테롤 | 3.00 |
| 콜레스테롤 | 3.00 | |
| 하이드로제네이티드레시틴 | 3.00 | |
| 다이메티콘 | 7.00 | |
| 사이클로메티콘 | 5.00 | |
| 원료 | 함량(중량부) | |
| 수상 | 정제수 | To 100 |
| 알코올 | 2.00 | |
| 다이소듐이디티에이 | 0.01 | |
| 슈크로오스라우레이트 | 2.00 | |
| 소듐아스코빌포스페이트 | 0.30 | |
| 조사포닌 | 5.00 | |
| 오일상 | 하이드로제네이티드레시틴 | 5.00 |
| 카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드 | 10.00 | |
| 리솔레시틴 | 0.50 | |
| 세라마이드엔피 | 0.50 | |
실험예 1 - 생체외 피부흡수시험에 따른 피부 투과율 평가
식약처의 "생체 외 피부흡수시험 가이드라인" 시험법에 따라 프란츠 확산 세포 방법에 의해, 피부투과장치(Difussion cell)의 수용칸에 증류수를, 공여칸에는 시료 1.4㎖를 넣고, 두 칸 사이는 인공피부막(Strat-m membrane, Merck)을 넣었다. 수용칸은 항온순환수조를 이용하여 32℃로 유지하였다. 24시간 동안 수동 확산시킨 후 수용칸의 시료를 획득하였다. 회전진공농축기를 이용하여 시료의 증류수를 모두 증발시킨 후 메탄올로 용해하고 HPLC를 이용해 개별 진세노사이드 함량을 측정하였다.
공여칸, 수용칸 시료의 진세노사이드 11종(Rg1, Re, Rf, Rh1, Rg2s, Rb1, Rc, Rb2, Rd, Rg3s, Rg3r) 함량의 총합을 각각 측정하였고, 공여칸의 진세노사이드 함량을 100으로 하여 피부 투과율을 계산하여, 그 결과를 표 7에 나타냈다. 여기서 코클리에이트좀에 포집되지 않은 제조예 1의 인삼 유래 조사포닌을 조사포닌 대조군으로 하고, 이를 기준으로 각 시료의 피부 투과율의 배수를 계산하였다.
| 시료명 | Rg1 | Re | Rf | Rh1 | Rg2s | Rb1 | Rc | Rb2 | Rd | Rg3s | Rg3r | 11종 총합 | 배수 |
| 실시예 1 | 2681.20 | 1977.20 | 185.15 | 90.52 | 131.87 | 801.85 | 258.41 | 200.51 | 90.14 | 0.00 | 0.00 | 6416.85 | 58.70 |
| 비교예 1 | 1823.24 | 1444.14 | 108.91 | 70.46 | 95.19 | 440.77 | 175.57 | 147.02 | 42.89 | 0.00 | 0.00 | 4348.20 | 39.78 |
| 비교예 2(NLC) | 1615.80 | 1051.50 | 58.91 | 50.16 | 85.21 | 435.87 | 152.87 | 97.89 | 38.52 | 0.00 | 0.00 | 3586.73 | 32.81 |
| 비교예 3(리포좀) | 414.83 | 756.53 | 83.22 | 55.23 | 71.45 | 662.74 | 302.69 | 259.47 | 128.74 | 52.12 | 26.11 | 2813.13 | 25.73 |
| 비교예 4(니오좀) | 239.43 | 402.72 | 36.75 | 34.80 | 33.22 | 138.06 | 54.53 | 46.45 | 15.02 | 0.00 | 0.00 | 1000.97 | 9.16 |
| 비교예 5(엘라스토좀) | 189.45 | 384.42 | 25.84 | 29.51 | 30.52 | 115.00 | 50.79 | 40.15 | 7.15 | 0.00 | 0.00 | 872.83 | 7.98 |
| 조사포닌 대조군 | 55.03 | 54.29 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 109.32 | 1.00 |
상기 결과에서, 실시예 1의 코클리에이트좀은 조사포닌 대조군 대비 58.7배 우수한 피부 투과율을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
한편, 조사포닌 대조군 대비 비교예 1의 코클리에이트좀은 39.78배, 비교예 2의 NLC는 32.81배, 비교예 3의 리포좀은 25.73배, 비교예 4의 니오좀은 9.16배의 비교예 5의 엘라스토좀은 7.98배의 피부 투과율을 나타냈다.
따라서, 프란츠 확산 세포 방법에 의해 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과율을 측정한 결과, 실시예 1에서, 비교예 1 내지 5의 순서대로 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과율이 감소하는 것을 확인할 수 있다.
실험예 2 - 자외선으로부터의 피부손상 보호 효과
인간 피부섬유아세포(ATCC로부터 분양)를 1×104 세포/웰로 2개의 96-웰 플레이트에 접종한 후 24시간 동안 배양하였다. 배지를 무혈청 배지로 교체하고 계열희석한 조사포닌 대조군 및 실시예 1의 시료를 6, 3, 1.5 ㎍/㎖ 농도로, 그리고 EGCG(양성 대조군)를 20 ㎍/㎖ 농도로 처리한 후 24시간 동안 배양하였다.
배지를 DPBS로 교체하고 1개의 플레이트에만 UVA를 10 mJ/cm2 조사하였다. 2개의 플레이트를 모두 새로운 무혈청 배지로 교체하고 24시간 동안 추가로 배양하였다. 이후 5 ㎎/㎖ MTT를 처리한 후 3시간 동안 배양하여 OD540 흡광도를 측정하였다.
배지만 처리한 군을 대조군, 자외선만 처리한 군을 음성 대조군, 자외선+EGCG 처리군을 양성 대조군, 자외선+시료(조사포닌 대조군, 실시예 1)를 농도별로 처리한 군을 실험군으로 하고, 대조군의 흡광도를 100으로, 음성 대조군의 흡광도를 0으로 하여 자외선 조사에 따른 실험군의 세포 생존율(%)을 계산하였고, 그 결과를 도 1에 나타냈다.
도 1의 결과로부터, 실시예 1에 따라 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀은 세포 생존율이 6 ㎍/ml에서 92.29%, 3 ㎍/ml에서 86.45%, 1.5 ㎍/ml에서 85.86%로서 우수한 피부손상 방지 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있다. 이는 조사포닌 대조군(각각 37.45%, 27.95%, 4.19%)에 비해 각각 54.84%, 58.50%, 81.67%만큼 더 향상된 효과이므로, 조사포닌이 코클리에이트좀에 의해 포집됨으로써 섬유아세포에 더 효과적으로 전달되어 우수한 피부손상 보호 효과를 나타내는 것임을 확인할 수 있다.
실험예 3 - 프로-콜라겐 합성량 증진 효과
섬유아세포(Human dermal fibroblast)를 24-웰 플레이트에 각 5×105 세포/웰로 접종하였다. 접종 24시간 후 무혈청 배지로 교체하고, 계열희석한 조사포닌 대조군 및 실시예 1의 시료를 50, 25, 12.5 ㎍/㎖ 농도로, 그리고 아스코르브산(양성 대조군)을 20 ㎍/㎖ 농도로 처리하였다. 처리 24시간 후 배양액을 취하여 프로-콜라겐 분석 키트(pro-collagen assay kit)를 이용하여 프로-콜라겐(pro-collagen)의 양을 검출하였다. 배지만 처리한 군을 대조군으로 하고, 대조군, 실험군(조사포닌 대조군, 실시예 1), 양성 대조군(아스코르브산)의 흡광도(OD450)를 측정하고 대조군의 프로-콜라겐 생성량을 100으로 하여 각 군의 프로-콜라겐 양을 비교하였으며, 그 결과를 도 2에 나타낸다.
도 2의 결과로부터, 실시예 1에 따라 인삼 유래 조사포닌을 포집한 코클리에이트좀은 프로-콜라겐 생성량이 50 ㎍/ml에서 141.35%, 25 ㎍/ml에서 140.18%, 12.5 ㎍/ml에서 133.28%로서 우수한 콜라겐 생합성 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있다. 이는 조사포닌 대조군(각각 125.01%, 118.51%, 111.49%)에 비해 각각 16.34%, 21.67%, 21.79%만큼 더 향상된 효과이므로, 조사포닌이 코클리에이트좀에 의해 포집됨으로써 섬유아세포에 더 효과적으로 전달되어 우수한 프로-콜라겐 합성 효과를 나타내는 것임을 확인할 수 있다.
실험예 4 - 인체 피부에 대한 투과성 평가
상기 실시예 1의 코클리에이트좀에 포집된 인삼 유래 조사포닌이 조사포닌 대조군 시료에 비해 인체 피부 투과성이 개선되는 것을 확인하기 위해 라만 공초점 현미경(Raman confocal microspectrocopy)을 이용해 피부 투과량 및 피부 투과깊이를 측정하였다.
구체적으로, 피험자의 전완부에 실시예 1 및 조사포닌 대조군의 시료를 도포하고, 라만 공초점 현미경(River D International BV, Netherlands)을 이용해 시료 도포 전 및 도포 30분 후 피험자 피부의 2㎛ 깊이마다 시료의 라만 스펙트럼을 측정하였다. 피부 투과량 및 피부 투과깊이는 다음을 기준으로 평가했으며, 그 결과를 표 8에 나타낸다.
1) 피부 투과량(A.U.): 시료의 라만 스펙트럼이 검출되는 피부의 가장 깊은 지점까지의 정량값
2) 피부 투과깊이(㎛): 피부 표면에서부터 시료의 라만 스펙트럼이 검출되는 피부의 가장 깊은 지점까지의 거리
| 실시예 1 | 조사포닌 대조군 | |||
| 적용 전 | 적용 30분 후 | 적용 전 | 적용 30분 후 | |
| 피부 투과량(A.U.) | 0.002±0.009 | 0.124±0.047 | 0.002±0.001 | 0.004±0.003 |
| 변화량 (△) | 0.122±0.045 | 0.002±0.002 | ||
| 배수(fold) | 조사포닌 대조군 대비 실시예 1의 피부 투과량이 61배 향상됨 | |||
| 피부 투과깊이(㎛) | 25.200±6.261 | 16.000±12.083 | ||
| 배수(fold) | 조사포닌 대조군 대비 실시예 1의 피부 투과깊이가 1.57배 향상됨 | |||
상기 결과로부터, 실시예 1의 코클리에이트좀에 포집된 인삼 유래 조사포닌이 조사포닌 대조군 시료에 비해 피부 투과량(A.U.)은 61배 향상되고, 피부 투과깊이(㎛)는 1.86배 향상된 것을 확인할 수 있다. 따라서, 본 발명의 실시예 1에 따라 코클리에이트좀에 포집된 인삼 유래 조사포닌은 실제 인체 피부에서도 피부 투과성이 크게 향상되는 것을 알 수 있다.
실험예 5 - 안정성 평가
상기 실시예 및 비교예의 각 시료를 고온(50℃)에서 1개월간 정치하면서 침전물, 색상 및 취의 변화 여부를 관찰하였고, 1개월 경과 후의 외관을 촬영한 결과를 도 3에 나타낸다.
조사포닌 대조군은 고온에서 불용성 침전물이 다량 생성되었고, 비이온성 계면활성제를 함유하지 않은 비교예 1의 코클리에이트좀은 안정성 실험 결과 고온에서 3개 층으로 분리되었으며, 비교예 2의 NLC 및 비교예 4의 니오좀도 색상이 혼탁하고 층 분리를 나타내므로 안정성에 문제가 있었다.
한편, 비교예 3의 리포좀 및 비교예 5의 엘라스토좀은 침전물 없이 투명하여 우수한 안정성을 나타냈지만, 앞서 실험예 1에서 살펴본 바와 같이 낮은 피부 투과율을 나타냈다.
이에 반해, 실시예 1의 코클리에이트좀은 피부 투과율이 우수하고 피부 안으로 깊이 침투할 수 있을 뿐만 아니라, 변취/변색이 없고 층 분리 현상 없이 투명한 성상을 나타내는 등 안정성도 우수하다. 따라서, 본 발명의 코클리에이트좀을 이용하면 조사포닌을 피부에 효과적일 뿐만 아니라 안정적으로 전달할 수 있다.
제조예 2 - 화장료 조성물의 제조
2-1. 에센스의 제조
실시예 1의 조성물을 이용하여 하기 표 9에 기재된 함량(중량부)에 따라 에센스를 제조하였다.
| 원료 | 함량(중량부) |
| 트리에탄올아민 | 0.25 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.22 |
| 글리세린 | 4 |
| 부틸렌글리콜 | 2 |
| 실시예 1의 조성물 | 1.5 |
| 밀납 | 0.5 |
| 세토스테아릴알코올 | 1 |
| 글리세릴모노스테아레이트 | 1 |
| 스쿠알렌 | 4 |
| 정제수 | 적량 |
2-2. 유연화장수의 제조
실시예 1의 조성물을 유효성분으로 함유하는 유연화장수는 하기 표 10과 같이 제조하였다.
| 원료 | 함량(중량부) |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 1.00 |
| 디소듐이디티에이 | 0.05 |
| 알란토인 | 0.10 |
| 디포타슘글리시리제이트 | 0.05 |
| 시트릭애씨드 | 0.01 |
| 소듐시트레이트 | 0.02 |
| 글리세레스-26 | 1.00 |
| 알부틴 | 2.00 |
| PEG-40 수소화 캐스터오일 | 1.00 |
| 에탄올 | 30.00 |
| 실시예 1의 조성물 | 0.5 |
| 착색제 | 미량 |
| 착향제 | 미량 |
| 정제수 | 잔량 |
2-3. 영양 크림의 제조
실시예 1의 조성물을 유효성분으로 함유하는 영양크림은 하기 표 11의 조성과 같이 제조하였다.
| 원료 | 함량(중량부) |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 7.0 |
| 글리세린 | 1.0 |
| D-판테놀 | 0.1 |
| 마그네슘알루미늄실리케이트 | 0.3 |
| PEG-40 스테아레이트 | 1.2 |
| 스테아릭애씨드 | 2.0 |
| 폴리소르베이트 60 | 1.5 |
| 친유형글리세릴스테아레이트 | 2.0 |
| 소르비탄세스퀴올리에이트 | 1.5 |
| 세테아릴알코올 | 3.0 |
| 미네랄오일 | 4.0 |
| 스쿠알렌 | 3.8 |
| 실시예 1의 조성물 | 1.5 |
| 식물성 오일 | 1.8 |
| 디메치콘 | 0.4 |
| 디포타슘글리시리제이트 | 미량 |
| 알란토인 | 미량 |
| 소듐히아루로네이트 | 미량 |
| 토코페릴아세테이트 | 적량 |
| 트리에탄올아민 | 적량 |
| 착향제 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
2-4. 로션의 제조
실시예 1의 조성물을 유효성분으로 함유한 로션을 하기 표 12의 조성과 같이 제조하였다.
| 원료 | 함량(중량부) |
| 세토스테아릴알코올 | 1.6 |
| 스테아린산 | 1.4 |
| 친유형모노스테아린산글리세린 | 1.8 |
| PEG-100 스테아레이트 | 2.6 |
| 세스퀴올레인산소르비탈 | 0.6 |
| 스쿠알렌 | 4.8 |
| 마카다이아오일 | 2 |
| 호호바오일 | 2 |
| 초산토코페롤 | 0.4 |
| 메틸폴리실록산 | 0.2 |
| 초산토코페롤 | 0.4 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 4 |
| 산탄검 | 0.1 |
| 글리세린 | 4 |
| d-판데놀 | 0.15 |
| 실시예 1의 조성물 | 1.0 |
| 알란토인 | 0.1 |
| 카르보머(2% aq. Sol) | 4 |
| 트리에탄올아민 | 0.15 |
| 에탄올 | 3 |
| 정제수 | 적량 |
Claims (12)
- 인삼 유래 조사포닌; 및
비이온성 계면활성제를 포함하는 코클리에이트좀;을 포함하는 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물. - 청구항 1에 있어서,
상기 비이온성 계면활성제는 HLB 값이 8~20인 것인 조성물. - 청구항 1에 있어서,
상기 코클리에이트좀 대 인삼 유래 조사포닌의 비율은 중량으로 100:1 내지 100:7인 조성물. - 청구항 1에 있어서,
상기 코클리에이트좀은 용매, 인지질, 포화지방산, 유연제, 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 방부제 및 2가 양이온 염을 포함하고,
상기 인삼 유래 조사포닌은 코클리에이트좀의 인지질 이중층 사이에 위치하여 코클리에이트좀 안에 포집되는 조성물. - 청구항 4에 있어서,
상기 코클리에이트좀은 코클리에이트좀 총 중량을 기준으로
용매 55 내지 99 중량%;
인지질 0.1 내지 10 중량%;
포화지방산 0.0001 내지 2 중량%;
유연제 0.1 내지 10 중량%;
비이온성 계면활성제 0.1 내지 10 중량%;
음이온성 계면활성제 0.01 내지 7 중량%;
방부제 0.1 내지 10 중량%; 및
2가 양이온 염 0.0001 내지 2 중량%;를 포함하는 조성물. - 청구항 4에 있어서,
상기 용매는 증류수, 글리세린, 에탄올, 부틸렌 글리콜, 및 프로판디올로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 조성물. - 청구항 4에 있어서,
상기 인지질은 포스파티딜콜린, 리소포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민, 하이드로지네이티드 포스파티딜콜린, 포스파티딜산, 포스파티딜세린, 포스파티딜글리세롤, 포스파티딜이노시톨 및 이들의 수소첨가 생성물로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하고,
상기 포화지방산은 팔미트산, 스테아르산, 올레산, 리놀레산 및 리놀렌산으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하는 조성물. - 청구항 4에 있어서,
상기 유연제는 카프릴릭카프릭트라이글리세라이드, 세틸에칠헥사노에이트, 다이카프릴릴에터, 세라마이드, 및 세라마이드 엔피로 이루어진 군에서 선택되는 1종을 포함하는 조성물. - 청구항 1에 있어서,
상기 비이온성 계면활성제는 폴리글리세릴-10 라우레이트, 폴리글리세릴-10 올리에이트, 폴리글리세릴-10 스테아레이트, 및 폴리글리세릴-10 다이이소스테아레이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 조성물. - 청구항 4에 있어서,
상기 음이온성 계면활성제는 소듐 스테아로일 글루타메이트, 디소듐 스테아로일 글루타메이트, 소듐 라우로일 글루타메이트, 소듐 라우릴 글루코오스 카르복시레이트 및 소듐 메틸 코코일 타우레이트로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함하는 조성물. - 청구항 4에 있어서,
상기 2가 양이온 염은 염화칼슘을 포함하는 조성물. - 인삼 유래 조사포닌; 및
비이온성 계면활성제를 포함하는 코클리에이트좀;을 포함하는 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 자외선에 의한 피부질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220012667A KR102763352B1 (ko) | 2022-01-27 | 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220012667A KR102763352B1 (ko) | 2022-01-27 | 인삼 유래 조사포닌의 피부 투과성이 개선된 피부손상 방지 및 주름 개선용 화장료 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20230115787A true KR20230115787A (ko) | 2023-08-03 |
| KR102763352B1 KR102763352B1 (ko) | 2025-02-07 |
Family
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Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101740136B1 (ko) | 2015-08-28 | 2017-05-25 | (주)엠앤씨생명과학 | 혈행 개선용 홍삼 함유 천연 리포좀, 그 제조방법 및 이를 포함하는 식품 또는 약학 조성물 |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| KR101740136B1 (ko) | 2015-08-28 | 2017-05-25 | (주)엠앤씨생명과학 | 혈행 개선용 홍삼 함유 천연 리포좀, 그 제조방법 및 이를 포함하는 식품 또는 약학 조성물 |
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