KR20100092922A

KR20100092922A - 나노 리포좀으로 안정화된 생약 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20100092922A
Application number: KR1020100074876A
Authority: KR
Inventors: 조서환; 조연; 오윤택; 박충현; 이현정
Original assignee: 주식회사 세라젬헬스앤뷰티
Priority date: 2010-08-03
Filing date: 2010-08-03
Publication date: 2010-08-23

Abstract

본 발명은 생약 추출물을 안정화한 나노 리포좀을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 추출물을 안정화한 나노 리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
상기 화장료 조성물의 미백 효과는 멜라닌 생성의 저해, 티로시나아제 활성의 억제, 항산화능력 향상에 의한 것을 특징으로 한다. 본 발명의 화장료 조성물에서, 상기 생약 추출물은 나노 리포좀에 의해 내포되어 있기 때문에 피부침투 효과가 크게 증가하고, 제형의 안정성도 크게 개선된다.

Description

나노 리포좀으로 안정화된 생약 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물{A Skin whintening cosmetic composition containing a oriental herb extracts mixture stabilized by nanoliposome}

본 발명은 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 생약 추출물을 안정화한 나노 리포좀을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부 환경과 직접 접해 있으면서, 물리적, 화학적 및 생물학적 자극원으로부터 인체를 보호하는 중요한 보호막 역할을 담당한다. 그러나 자외선의 과다노출에 의한 세포내 멜라닌 생성효과, 티로시나아제 활성 억제, 항산화 능력 저해 등으로 인하여 피부는 본래의 기능을 상실하고, 미용상으로도 피부를 검게 만든다거나 하는 등의 다양한 피부 착색 현상을 나타낸다.

따라서, 화장품 개발에 있어서 피부의 미백을 향상시키는 연구는 대단히 중요한 위치를 차지하고 있다. 최근에는 천연 식물성분들에 대한 다양한 피부 생리 활성을 검색하여 피부미용 효과가 우수한 물질들을 개발하여 피부 미백 등과 같은 기능성 화장품에 이용하는 사례가 급증하고 있다. 그러나 대부분의 생약 성분들은 그 자체가 불안정할 뿐 아니라 화장료 적용시, 내용물의 침전, 색깔의 변화 등과 같은 화장료의 안정성에 큰 문제점이 있다.

이러한 문제를 해결하고자 제약, 화장품 및 식품 분야에서는 생리활성 성분을 파괴되지 않고 안정하게 전달할 수 있으며, 생리활성 성분이 지용성이든 수용성이든 모두 내포시킬 수 있는 리포좀을 이용하고 있다. 최근에는 나노 기술의 발달과 함께 피부 미백작용을 극대화할 수 있는 나노 리포좀에 대한 연구 개발도 활발히 진행되고 있다.

단삼(Salvia miltiorrhiza BUNGE)은 중국 동북 산야에서 자생 또는 재배되는 다년생 초본이다. 단삼에는 페난트라퀴논(phenanthraquinone)계 색소:탄시논(tanshinone)I 자갈색(I), 탄시닌(tanshinine)II 적색(II), 크립토탄시논(cryptotanshinone) 둥색(III), 그밖에 탄시놀(tanshinol) I, II가 알려져 있다. 그러나 이 성분들의 약리작용에 대해서는 아직 알려진 바 없고, 단삼의 수침액은 각종 피부진균에 대하여 약간의 억제작용이 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 한방에서 월경불순, 월경통, 폐경기 또는 산후복통에 사용된다. 이와 관련하여 페난트라퀴논(phenanthraquinone)계 색소물질들이 화학 구조적으로 내분비계에 관여할 가능성이 높으며, 특히 응혈인자(clotting factors)로 인한 혈액 순환 장해의 개선에도 관련이 있다. 한편, 중국특허 제1097133-A호에 천마(gastrodia tuber), 일반 인삼, 삼칠근 및 호박으로부터 제조되는 고혈압 치료용 중국 약제가 알려져 있고, 중국특허 제1099995-A호에 천연 벌꿀, 돼지 쓸개, 멍콩풀(mung bean starch), 사프란(saffron), 삼칠근 및 가루화된 천마(gastrodia tuber)로 부터 제조되는 고혈압 치료용 중국 약제로 알약 및 연고제가 알려져 있다. 그러나 이러한 약제들은 100 고혈압 치료효과가 있다고 기재되어 있지만, 유효성분만을 추출한 약제가 아닌 일종의 전통적인 혼합제제로서 주사약 제제 등 다양한 형태로 제조할 수 없고, 유효성분의 일일 투여량을 확인할 수 없으며, 그 효능도 투입되는 약초 및 제제가 재배 또는 사육되는 지역에 따라서 달라질 수 있으며, 부작용도 확인할 수 없어서 일반적으로 사용할 수 있는 유용한 약제가 아닌 문제점이 있다. 단삼(丹蔘, Salviae Miltiorrhizae BGE)은 꿀풀과(Labiatae)에 속한 다년생 본초인 단삼의 뿌리를 건조한 것으로서, 이에 대한 성분으로는 탄시논 (Tanshinone I, IIA, IIB), 15,16-디히드로탄시논 Ⅰ(15,16-DihydrotanshinoneⅠ), 크립토탄시논(Cryptotanshinone)등이 함유되어 있는 것으로 알려져 있다(정보섭, 신민교; 향약대사전, 영림사, pp860-862, 1998). 단삼에 대하여 지금까지 밝혀진 약리작용으로는 심실혈관계 질환의 예방 및 개선 (Akira Yagi et al.; Planta medica, 55, pp51-54, 1989), 항암효과 (Yoon Y.S. et al.; Journal of Ethnopharmacology, 68, pp121-127, 1999; Jin Liu et al.; Cancer Letters, 153, pp85-93, 2000), 항산화 효과 (Kang H.S. et al.; Arch. Pharm. Res., 20, pp496-500, 1997), 항염증 효과 (Kang B.Y. et al.; Immunopharmacology, 49, pp355-361, 2000) 등이 알려져 있다.

단삼은 다년생 초본으로 식물 전체에 복모가 있으며, 뿌리에 페난트라키논계 색소인 탄쉬논 화합물이 있어 붉은 밤색을 띠므로 단삼이라고 한다. 단삼의 효능에 대해서는, 본초강목에 丹蔘味苦生新能破積調經除帶崩(단삼은 미고하다. 생신에 능하며 적체를 파하고 경도를 순조롭게 하며, 붕루 대하를 없앤다)라고 기재되어 있으며, 심락과 포락이 혈분으로 들어가며, 함수(鹹水)를 외하고, 여로를 반하고, 오래 복용하면 안적이 많아지며, 단삼 한가지의 효력이 사물탕의 약효와 맞먹는다고 기재되어 있다.

월귤나무 추출물에는 5∼15%의 알부틴이 함유되어 있으며, 이는 티로시나제의 작용을 억제하고, 메틸 알부틴도 함유되어 있으나 이는 쉽게 가수분해되어 D-글루코오즈와 하이드로퀴논을 형성하여 미백 효과가 저해되지만 10% 정도 함유되어 있는 탄닌이 알부틴과 메틸 알부틴의 분해를 방지함으로써 미백 효과가 상승되고, 플라보노이드는 멜라닌 중합체의 형성을 방지하고 약간의 티로시나제 억제작용을 하며, 0.5% 정도 함유되어 있는 트리터펜스(triterpenes)는 코티손과 같은 작용으로 멜라닌 세포의 증식을 저해하여 미백 효과를 발현한다.

월귤나무는 백두산 등 추운 곳에서 주로 자생하고 있으며 남한에서는 강원도 홍천군 등 일부 북부지방의 높은 산의 바위나 습지에서 드물게 발견되는 약용식물이다.

진달래과의 상록 목본식물인 월귤나무는 키가 20~30㎝ 정도 자라며 흰색 또는 연분홍색 꽃이 6~7월에 핀다. 둥근 열매는 수분이 많고 9~10월에 익는데 신맛이 강하다. 잎의 침출액은 신장결석 치료용 이뇨제, 류머티즘, 통풍 등 치료에, 열매는 통증 완화와 전염성 설사 치료제로 각각 사용된다.

황금은 동아시아 대륙 원산으로, 한국 각처의 산지에 나고, 흔히 밭에 재배하며 높이 60센티미터 가량이다. 전체에 털이 나 있고, 줄기는 밀생하며 네모지고, 가지가 많이 갈라진다. 잎은 마주나며, 잎자루는 거의 없고, 길이 4.5센티미터, 폭 8밀리미터, 가장자리에 톱니가 없다. 꽃은 총상 꽃차례, 자주색, 원줄기 끝과 가지 끝에 붙는다. 꽃받침은 종 모양, 꽃이 핀 후에 닫히고, 화관은 입술 모양이며, 화관의 길이는 2.5센티미터 정도이다. 열매는 꽃받침 안에 들어 있고, 둥근 모양이다.

황련은 미나리아재비과에 속하는 여러해살이 초본식물인 황련(Coptis Chinensis FRANCH)의 뿌리. 약효성분은 베르베린(Berberine)·콥티신(Coptisine)·워레닌(Worenine)·팔마틴(Palmatine) 등이 알려져 있다. 맛은 쓰고 차다. 효능은 사화(瀉火) 작용이 있어서 일체의 열로 인한 질환에 탁월한 치료반응을 나타낸다.

이를테면 전염성 열병·장티프스 등에 해열효과가 현저하고, 열이 많아서 가슴이 타오르고 갈증이 나면서 번민이 심한 증상을 해소시킨다. 탕화상이나 화상에 효력을 보이는 것은 열을 내리면서 살균작용을 하므로 상처가 쉽게 치유되기 때문이다. 체내에 열이 쌓여서 안구층열이 되거나 혈압이 상승되는 증상을 치료한다. 뿐만 아니라 결막염 등에 다린 물로 세척하면 살균·해열 효과를 얻게 된다. 소량을 복용하면 소화촉진 효과가 높고, 위장에 염증이 있어서 가슴이 답답하고 배가 부르면서 머리가 아픈 증상을 치료하고, 또한 신경과민으로 인한 가슴 두근거림 증상을 해소시키는 데도 탁월한 효과가 있다. 역시 열로 인한 구내염·설염(舌炎)·구각염(口角炎)에도 치유율이 높다. 여름에 유행하는 이질과 설사에도 이질균을 억제시키면서 설사를 그치게 하고, 폐결핵이나 토혈, 코피·대변 출혈을 그치게 하고 당뇨병에도 열을 띤 증상에 유효하며, 백일해와 인후염에도 효력이 있다. 살균작용이 현저하여 피부 감염증에 널리 활용된다. 동물실험에서는 항균, 소염, 해열, 담즙분비촉진, 혈압 하강작용 등이 나타났다.

율무는 벼과에 속하는 1년생 초본식물. 학명은 Coix lachryma-jobi var. mayuen (ROMAN STAPF)이다. 원산지는 동남아시아 또는 중국으로 알려져 있으며 재배되고 있다. 높이는 1∼1.5m이고 곧추 자라며 여러 대로 갈라진다. 잎은 어긋나고 피침형이며 가장자리가 거칠고 녹색이다. 꽃은 7월에 피며 열매는 식용한다.

우리나라에는 1078년(문종 32)에 송나라에서 들어온 기록이 있으며, 임진왜란 때 가토(加藤淸正)가 우리나라로 부터 일본으로 가져갔다는 일본의 기록이 있는 것으로 미루어 보아 일찍부터 재배되었고, 조선 중기에는 많이 재배되었던 것으로 추측된다. 재배기술은 육묘재배와 직파재배가 있는데, 육묘재배는 생육일수가 짧은 중부 이북지방에서 실시된다. 4월 중순에서 하순경, 묘상에 10㎝ 사이로 줄뿌림하고 5㎝ 간격으로 한 포기씩 육묘한다. 육묘일수는 25∼30일이며 잎이 4·5매 된 것을 5월 상순에서 중순에 걸쳐 본포에 정식한다.

거름은 10a당 두엄 1,000㎏, 인산 10㎏, 칼리 10㎏을 밑거름으로 하고 재식거리 60×30㎝ 사이에 두 포기씩 심는다. 직파재배는 4월 하순∼5월 상순에 60×10∼20㎝의 재식 밀도로 점파하거나 줄뿌림한다. 출수 직전과 2주 후에 덧거름을 주고 메마른 곳은 질소를, 개간지는 인산을 더 준다. 수확은 9∼11월 열매가 흑갈색을 띠게 될 때 한다.

과거에는 곡물로 이용되었으며, 죽으로 많이 먹었다. 최근 성인병에 대한 효과 및 강장효과가 주목되어 율무차 등 가공식품으로 이용되고 있다. 한방에서는 의이인(薏苡仁)이라고 하며 약으로도 쓴다. 건비(健脾)·보폐(補肺)·청열(淸熱)·이수(利水) 작용이 있어 설사·전신부종·근육경련·굴신불리(屈伸不利)·각기 등의 증상에 유효하다. 잎과 뿌리도 약으로 쓴다.

백복령 복령(Poria cocos)은 소나무 뿌리에서 자라난 균핵으로, 지름 5 내지 7㎝의 공모양 혹은 타원형을 띄며, 땅 위에서는 나무껍질 조각과 함께 밤색 또는 더러운 흑색을 띤다. 코르크화 되어 단단하고 0.2 내지 0.5㎜의 두께로 덮여 있다. 내용물은 하얗거나 분홍색이고, 방사상으로 균열이 생긴다. 거의 맛과 냄새가 없으나, 때로는 연한 점액과 함께 펴지며 요오드에 양성 반응을 나타낸다. 복령은 예로부터, 지라를 건강하게 하고, 안정제로 쓰이며, 태열 안정의 효과가 있을 뿐만 아니라 몸을 따뜻하게 한다고 전해지고 있다. 소화성 궤양, 근육 경련, 갈증, 현훈, 정신불안, 실면증에 효과적이며, 한약재로 강장, 이뇨, 진정 등에 효능이 있어, 신장병, 방광염, 요도염에 이용되었다. 또한, 접촉성 피부염 억제작용 효과가 밝혀져 있다. 복령(Poria cocos)에 관한 연구는 황람 등의 복령의 품질표준화를 위한 지표성분 탐색 및 정량법 개발[한국생약학회지, Vol. 36, No.3, 177p, 2005], 지재형 등의 건조방법에 따른 복령의 색도 및 화학성분의 변화[한국식품과학회, 1999], 최옥범 등의 인공재배 복령 (茯笭)의 성분조성　[한국식품영양학회지, Vol.9, No.4, 438p,1996]등 복령의 성분 등에 관한 연구는 보고되었으나, 복령(Poria cocos)의 생리활성에 관한 연구는 미비한 실정이다.

백복령(poria cocos wolf)은 소나무과의 식물로 소나무, 중국 적송 등의 뿌리에 기생하는 버섯과 같은 것으로서, 동의보감에 기재된 바에 의하면 복령은 성분이 고르고 맛이 달며 독이 없고 위를 열어주고 구역을 멎게 하며 심신을 편하게 하고 폐위와 담응(痰應)을 치료하며 신사(腎邪)를 치고 이소변(利小便)하고 수종(水腫)과 임결(淋結)을 내리며 소갈(消渴)과 건망(健忘)을 낫게 하는 효능이 있는 것으로 기재되어 있고, "향약(생약) 대사전" 및 "한약의 약리, 성분, 임상응용"에는 백복령이 이뇨작용, 항균작용, 혈당 강하 작용, 위산 감소, 심장수축 강화 작용 등 인체에 유용한 각종 작용을 하는 것으로 기재되어 있다.

감잎(Diospyros Kaki Leaf)은 쌍떡잎식물 감나무목 감나무과인 감의 잎이다. 감나무는 6-14m 정도 높이로 자라고, 줄기의 겉껍질은 비늘 모양으로 갈라지며, 작은 가지에 갈색 털이 있다. 잎은 어긋나고 가죽 질이며 타원형의 달걀 모양이다. 잎은 길이 7-17cm, 너비 4-10cm로서 톱니는 없고, 잎자루는 길이 5-15mm로서 털이 있다. 잎의 뒷면은 녹색이고 광택이 난다. 감잎의 성분으로는 탄닌 (Tannin), 비타민 C, P, B1 및 B2, 카로틴 (Carotin),정유, 유기산 및 섬유질 등이 있다. 감잎은 민간요법으로 많이 사용하고 있다. 감잎을 달인 액은 비타민 C 및 P가 많이 들어 있어 혈압이 높아지는 것을 미리 막아주고 핏속의 콜레스테롤 양을 줄인다. 또한, 알칼리 성분이 많아 피를 맑게 하고, 림프구의 면역력을 높이며 백혈구의 탐식(Phagocytosis) 기능을 높여줌으로써 유기체의 저항성을 높인다. 감잎을 오래 먹으면 당뇨병, 고혈압, 변비 및 위병 치료에 도움을 주고, 머리아픔, 뾰두라지, 습진 및 알레르기성 여드름 등에 효과가 있는 것으로 전해지고 있다.

살구씨 살구나무는 쌍떡잎식물로서 장미목 장미과의 낙엽소교목이다. 열매는 핵과이고 둥글며 털이 많고 지름이 3cm이며, 7월에 황색 또는 황색을 띤 붉은 색으로 익는다. 열매는 한방에서 행인(杏仁)이라고 하는데, 여기에는 기름이 35~50중량% 있고, 그 밖에는 아미그달린(일명 아미그달로시드, 색이 없는 결정성 배당체, C₂₀H₂₇O₁₁N), 에물신(효소), 단백질 등이 있다. 기름의 주성분은 올레인이다. 살구는 한방에서 기침 및 천식 등을 다스리는데 쓰인다. 살구 씨에서 뽑아낸 기름 속의 아미그달린이라고 하는 성분은 천식에 좋은 효과를 낸다고 알려져 있다. 동의보감에는 '살구씨는 기침이 북받쳐서 호흡곤란을 일으킬 때, 숨이 가쁘고 가래가 끓을 때 사용한다. 살구씨는 진해거담제 역할을 한다'고 나와 있다. 씨의 끝 부분을 잘라내고 약간 볶은 후 가루로 만들어 꿀에 섞어서 사용하기도 한다. 지방이 많아 변비 치료제로도 쓰인다. 노인 또는 허약자의 진액이 말라서 오는 변비와 산후 변비를 치료한다. 미국에서는 살구씨가 암을 억제하는 효과가 있는 것으로 알려져 항암제로도 사용된다. 그러나 상기 아미그달린은 독성물질이기 때문에 한꺼번에 많이 먹을 경우 위험에 빠질 수 있다. 아미그달린은 몸 안에서 글루크로니다제란 효소에 의하여 분해되어 청산을 만들기 때문에 다량 섭취한 경우 인체에 유해하다. 아미그달린의 함량은 품종과 재배조건에 따라 심히 다르지만(단살구씨 0.11%~쓴 살구씨 6%), 흔히 3%이고 복숭아씨보다 높다. 또한, 아미그달린은 에물린, 아미그달라제, 프루나제, 옥시니트릴라제에 의하여 가수분해된다. 처음에는 아미그달라제에 의하여 프루나신(d-만델로니트릴배당체, C₁₄H₁₇O₆N)과 포도당으로 되고, 프루나신은 프루나제에 의하여 만델로니트릴(C₈H₇ON)과 포도당으로 된다. 만델로니트릴은 옥시니트릴라제 또는 달팽이 소화효소에 의하여 벤즈알데히드(C₆H₅CHO)와 시안화수소(HCN)가 된다. 시안화수소는 호흡중추에 대한 진정작용이 있으나 많은 양에서는 중독을 일으키기 때문에 사용량 조절에 주의해야 하는 물질이다. 따라서, 한번에 살구씨 열 개 이하를 먹는 게 안전하다. 많이 먹을 경우 어지럼증, 졸도, 두통, 오한, 구토 또는 호흡곤란 등의 증상이 나타난다. 심하면 사망에 이르기도 한다. 어린이의 경우 더 민감하다. 살구씨에 중독됐을 때는 살구나무의 껍질이나 뿌리를 달여서 해독제로 쓴다.

살구씨는 지금까지 화장품이나 비누와 같은 다양한 제품의 원료로 사용되거나 민간요법으로 천식과 같이 폐가 좋지 않은 사람들에게 약용되어 왔다. 그러나 상기한 바와 같이 살구씨의 껍질, 내피 및 눈에 들어있는 아미그달린과 같은 물질은 다량 섭취할 경우 인체에 바람직하지 않은 영향을 미치므로 살구씨를 식품으로 가공하는 데는 한계가 있었다.

식품의약품안전청은 상기와 같은 이유로 살구씨를 식품 품목에서 제외시키고 있는 실정이다.

살구씨 오일은, 장미과의 살구나무 (Prunus armeniaca) 혹은 개살구나무 (Prunus mandshurica) 의 씨로부터 추출한 오일이다. 대표적인 주성분으로는 지방유, 아미그달린(Amygdalin), 단백질 및 각종 아미노산, 아미그달로즈 (Amygdalose), 푸르네즈(Prunase), 푸루안신(Pruansin) 등을 함유한다. 본 발명에 사용된 살구씨 오일은 살구씨를 정제하고 압착하여 얻은 지방유로 엷은 황색을 보이며, 알킬기의 탄소조성은 올레익산(oleic acid)이나 리올레익산 (Linoleic acid)이었다.

살구씨(Prunus armeniaca L.)는 장미과 식물에 속하며, <본초경집주>에 나온다. 기침, 가래, 천식을 그치게 하고, 기름기가 많아 장을 원활하게 해주어 통변이 잘되게 한다. 주성분으로 아미그달린 약 3%, 지방유 약 50%, 단백질 및 각종 유리산, Citric acid, Malic acid 등이며, 그 외에 칼륨과 인이 특히 많이 들어있고, 당질, 칼슘, 나트륨, 섬유질, 비타민 A, B, C등을 함유하고 있다.

마황은 다년생 관목양 초본식물로서 초마황, 목적마황, 중마황이라고 부르며, 학명으로는 Ephedrae Herba로서 채취시기는 추분 전후에 녹색의 가는 가지를 베어, 그늘에 말린 후 썰어서 사용하거나 찧어서 사용한다. 마황(Ephedra sinica)은 마황과(Ephedraceae)에 속하는 식물로 전 세계에서 교감신경 흥분물질로 수천 년간 사용되어 온 약재이다. 특히 마황은 교감신경계 흥분 작용이 있어 식욕억제, 열 생산 및 대사량 증가, 운동수행능력 향상 등의 효과를 기대하여 비만치료에 많이 사용되어 왔다. 많은 문헌에서 마황의 체중감량 효과가 인정이 되고 있으며 식품으로서 사용이 금지되기까지 미국에서도 체중조절 건강보조식품의 주성분으로 인기를 얻고 있었다. 한의학계에서도 비만치료시 가장 많이 활용된 처방은 사상처방으로 태음조위탕과 조위승청탕 등이었으며 단미로는 마황이 빈도가 가장 높다고 보고되고 있다. 마황에는 알칼로이드가 0.3~1% 정도 함유되어있으며 알칼로이드의 주성분은 L-에페드린으로 노르에페드린(norephedrine), (+)-슈도에페드린((+)-pseudoephedrine), 노르슈도에페드린(norpseudoephedrine) 등 여러 에페드린 화합물이 있다. 그밖에 휘발성의 벤질 메틸아민과 적은 량의 정유가 있으며 추출액 상태로는 칼륨과 칼슘이 함유되어 있다. 마황의 주요 성분인 L-에페드린은 1885년 처음으로 추출되었으며 아시아, 유럽, 미국 등지에서 서식하는 40여 종의 마황 중 우리나라에서 사용하는 마황(Ephedra sinica)를 비롯한 아시아 종에서 알칼로이드 성분이 가장 높은 것으로 알려졌다.

한편, 한의학에서 보약은 몸의 전체적 기능을 조절하고 저항능력을 키워주며 기력을 보충하는 치료법의 일종으로 몸속의 영양과 관련된 물질, 즉 혈(血)과 기(氣)를 북돋워주는 역할을 하는 천연물의 추출물이다.

마황(Ephedra sinica STAPF)은 다년생 초본으로서 마황의 주요 성분은 에페드린 (ephedrine), 슈도-에페드린 (pseudo-ephedrine), 1-N-메틸에페드린, 1-노르에페드린, d-N-슈도메틸에페 드린, d-데메틸-슈도-에페드린, 에페딘 (ephedine) 등과 노나코사놀 (nonacosanol), 노나코산 (nonacosane), 트리아콘타올 (triacontaol) 등이다. 마황의 정유는 시험관 내 (in vitro)실험에서 독감 바이러스 (Influenza virus)에 대하여 억제작용이 있고, A형 또는 PR₈형 독감 바이러스에 감염된 마우스에 피하주사를 하면 치료작용이 있는 것으로 보고되어 있다 (정보섭 등, 도해향약 대사전(식물편), 영림사, 1998). 또한 마황 알칼로이드(alkaloid)의 대표적인 물질인 에페드린은 심혈관계 뿐만 아니라 해열 작용, 항염증 작용, 담즙분비 촉진 작용 등이 있음이 알려져 있으며, 발한, 천식, 감기 등에 사용되어 왔다.

종래의 화장품 분야에서는 미백 성분으로서, 코지산(Kojic acid), 알부틴(Arbutin) 등과 같은 티로시나제 효소활성을 억제하는 물질, 하이드로퀴논(Hydroquinone), 비타민-C(L-Ascorbic acid) 및 이들의 유도체와 각종 식물추출물이 사용되어 왔다.

그러나, 상기의 미백 성분들은 처방계 중에서의 안정성이 나빠 분해되어 착색되거나, 이취의 발생, 생체 레벨에서의 효능, 효과의 불분명 및 안전성 문제 등으로 그 사용이 제한되고 있는 실정이다. 예를 들어, 코지산은 티로시나제의 활성부위에 존재하는 구리 이온을 흡착시켜 효소활성을 저해하지만, 화장품에 배합할 경우 불안정성, 피부 부작용의 문제 및 최근 동물실험 결과 간암유발이 밝혀져 화장품 원료로 사용이 중지되었다. 비타민-C 및 그 유도체는 산화가 잘되는 불안정성 때문에 화장품 원료로서 사용이 어려우며, 하이드로퀴논은 피부에 대한 미백효과는 탁월하지만 알레르기를 유발하는 성질, 멜라닌 생성 세포에 대한 독성, 피부에의 영구 탈색화등 피부에 대한 자극성이 높으며, 최근 발암성 물질로 규정되어 사용이 금지되어 각 나라별로 제한적인 농도만 허가하고 있다. 또한, 알부틴은 하이드로퀴논에 글루코피라노사이드(Glucopyranoside)가 결합된 유도체로 하이드로퀴논 사용 시 나타나는 부작용이 적으면서 인체에 대한 독성은 없이 멜라닌 색소의 합성을 억제하는 작용이 있어, 멜라닌 색소 침착이 증가되는 피부질환의 치료제로서 이용 가능성이 제시되었으나, 피부 효소에 의해 일부 분해되는 단점이 있다.

이들 미백 물질들 외에 천연물 특히 식물 중에서 미백 활성 성분을 찾기 위한 연구도 계속 이루어져 왔고, 그 중 반하(일본공개특허 평 2-207028호, 대한민국 공개특허 제96-033442호), 알로에(일본공개특허 소52-44375호, 평 2-207030호, 평 5-139950호), 작약(일본공개 특허 소 61-246109호 및 대한민국 공개특허 제92-002111호), 계피(일본공개특허 소 63-30403호, 평5-139954호), 감초(일본공개특허 소 60-214721호, 소 60-214728호, 소 63-23809호, 소 64-63506호, 평 1-149706호 및 대한민국 공개특허 제92-002109호, 제97-025601호), 상백피(일본공개특허 소 55-44375호, 소 64-26507호, 소 64-83009호, 평 1-25687호, 평 5-139950호 및 대한민국 공개특허 제92-002109호, 제97-021273호),고삼(일본공개특허 소 64-26507호 및 대한민국 공개특허 제92-002110호), 갈근(일본공개특허 소60-214727호, 소 64-16709호), 당귀(일본공개특허 소 56-92211호, 평 4-26610호), 목단피(일본공개특허 소 60-214721호, 소 61-50915호, 소 61-246109호)등 다수의 식물추출물 및 생약재 추출물 등이 티로시나아제에 작용하여 멜라닌 생성을 억제한다는 사실이 밝혀졌으나, 이들 역시 안전성, 변색 가능성 등의 측면에서 화장품이나 의약품에 유효농도 이상으로 사용하는 데는 많은 문제점을 갖고 있으며, 아직 뛰어난 효과를 나타내지도 못하고 있는 실정이다.

본 발명자들은 민간 및 한방에서 생약재를 이용한 피부 미백 증진, 즉 피부 보호용 화장료 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황의 추출물이 미백에 우수한 생리 활성 효과를 갖고 있다는 것을 발견하였다. 또한, 상기 생약 조성물로 이루어진 화장료를 사용하면 멜라닌 생성의 저해, 티로시나아제 활성의 억제, 항산화 능력 향상에 효과가 있으며, 상기 추출물을 나노 리포좀화 하여 활성성분들이 화장료 조성물 내에서 안정하게 유지되며, 또한, 생리활성 효과를 극대화됨을 확인하였다. 따라서, 본 발명의 목적은 생약 추출물을 안정화한 나노 리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명에 의한 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물은 다음과 같이 제조할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 유효성분으로 사용되는 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 얻기 위해, 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황을 서늘한 곳에서 건조한 후 물리적으로 분쇄한 다음, 이 분쇄물에 추출용매를 가하여 추출한다. 추출 용매로서는 증류수, 탄소수 1~4의 무수 알콜 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올), 그 밖에 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 글리세린, 부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 디클로로메탄, 헥산, 벤젠으로 구성된 그룹으로부터 선택된 적어도 1종을 단독으로 사용하거나, 2종 이상의 용매를 혼합하여 사용할 수도 있다. 분쇄물과 용매의 비율은 1:10 내지 1:30으로 하고, 바람직하게는 1:20으로 하는 것이 가장 우수하다. 이를 추출기에서 추출하고, 동결 건조한다.

한편, 상기 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 ~ 30.0중량%, 바람직하게는 0.1 ~ 10.0중량% 함유되는 것이 효과적이다. 상기 단삼, 귤나무추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물의 함량이 0.001중량% 미만일 경우에는 그 효과를 기대하기 어렵고, 30.0중량% 초과할 경우에는 함량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않는다.

본 발명에 의한 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물은 멜라닌 생성 세포에 의한 멜라닌 생성을 감소시키고(표 5), 티로시나아제 활성을 억제하는(표 6) 미백효과가 있다. 또한, 자유 라디칼을 소거하는 항산화 효과(표 8, 표 9)가 있으며, 세포 독성이 적다(표 7).

따라서, 본 발명의 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물은 과다한 멜라닌 생성을 억제하는 미백용 조성물로 효과적으로 사용될 수 있다. 또한, 다양한 제품에 항산화용으로 유용하게 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 상기 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수도 있다.

본 발명의 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물로 제조되는 화장품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스, 팩 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 본 발명의 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 함유하는 화장품 이외에도 피부 과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.

적합한 화장품의 제형으로는 예를 들면, 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실스틱 (conceal stick)의 형태로 제공될 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고 상기의 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예 는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

[제조예 1] : 피부 미백용 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물의 제조

본 실시예의 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황은 우리나라에서 채취한 것을 사용하였다.

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황의 잎과 열매를, 서늘한 그늘에서 건조시킨다. 그 후 분쇄기를 이용하여 건조한 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황를 곱게 분쇄한 후, 분쇄물 200g을 환류 추출기에 넣고, 여기에 분쇄한 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 중량의 20배의 70% 에탄올을 넣어 75℃에서 10시간 가열하여 추출한다. 상기의 추출물을 400메쉬 여과포로 여과한 후 여액을 모아 동결 건조하였다.

[제조예 2]: 생약 추출물을 함유하는 나노 리포좀의 제조

나노 리포좀은 하기 표 1의 조성으로 A상에 B상을 첨가하고, 균일하게 습윤한 후 C 상을 첨가하고 70-80℃까지 가열 혼합하였다. 이 용액을 600-1000 bar의 조건으로 고압 호모게나이저에 2-4회 통과시킨 후 냉각하여 지름 30-70nm 입자 크기의 생약 추출물을 안정화시킨 나노 리포좀을 얻었다.

상	성 분	함량 (중량%)
A	프로필렌 글리콜	40
B	세라마이드	2.5
	콜레스테롤	2.5
	폴리솔베이트-80	0.5
	소듐스테아로일 락테이트	0.5
	스테아린산	0.5
	레시틴	5.0
C	수산화 칼륨	적량
	생약 추출물 (고형분)	10.0
	정제수	To 100.0

실시예 및 비교 실시예

본 발명의 생약 추출물을 안정화한 나노리포좀을 포함하는 조성물 (실시예) 및 나노 리포좀을 함유하지 않은 조성물(비교예)을 다음의 조성으로 제조하였다

성 분		실시예	비교예
성 분		함량 (중량%)	함량(중량%)
나노리포좀 (표 1)		10	-
생약 추출물 (고형분)		-	10
A	스쿠알란	5.0	5.0
	유동파라핀	3.0	3.0
	폴리솔베이트	1.2	1.2
	솔비탄스테아레이트	0.5	0.5
	토코페롤아세테이트	0.2	0.2
	BHT	0.05	0.05
	마이크로메치콘	3.0	3.0
	트리옥타노인	5.0	5.0
	마이크로크리스탈린왁스	0.7	0.7
	글리세릴스테아레이트	1.5	1.5
	세토스테아릴알콜	2.0	2.0
B	1,3-부틸렌글리콜	2.0	2.0
	글리세린	4.0	4.0
	EDTA-2Na	0.05	0.05
	정제수	To 100	To 100
향, 방부제 적량 적량

상술한 바와 같이, 본 발명은 생약 추출물이 내포된 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 화장료 조성물은 멜라닌 생성의 저해, 티로시나아제 활성의 억제를 통하여 피부 미백을 향상시킨다. 더욱이, 본 발명의 화장료 조성물에서, 생약 추출물은 나노 리포좀에 의해 내포되어 있기 때문에 피부침투 효과가 크게 증가하고, 제형의 안정성도 크게 개선된다.

실험예 1: 피부침투효과

본 발명의 생약추출물을 안정화한 나노리포좀을 함유한 화장료에 대한 피부침투 효과를 측정하였다. Dermal Equivalent (DE)-인체 정상 섬유아세포 1 X 10 5 cell/㎖를 인체의 결합조직을 이루는 섬유조직과 유사한 겔 구조에 콜라겐 수용액 3mg/㎖:5 X DEM : 2:2 소듐바이카보네이트와 200 mM Hepes 완충액이 포함된 0.05 N 수산화나트륨이 7:2:1로 혼합된 배지에 접종하여 5CO₂, 37℃에서 7일 동안 배양하였다. 이를 3㎛ 다공성폴리카보네이트 (porous polycarbonate) 재질로 된 막 (membrane)에 의해 안쪽과 바깥쪽이 구분된 플레이트의 안쪽에 넣고 섬유아세포가 배양된 Derma Equivalent(DE) 표면 위에 표피각질형성세포 (Epidermal Keratinocyte) 1 X 10 5 cell/㎖ 세포를 접종하여 EGF와 BPE가 함유된 K-SFM 배지를 안쪽과 바깥쪽에 넣고 7일 동안 배양하였다. 그 후 플레이트 안쪽의 배지를 버려 공기가 배양세포의 표면에 접촉되도록 하고 바깥쪽에 10FBS가 함유된 K-SFM과 EGF가 들어있지 않은 DMEM이 동량으로 혼합된 배지를 넣고 2주간 배양하여 다층의 표피와 진피가 형성된 인공피부를 얻었다. 여기에 본 발명의 실험예 및 비교예를 맨 위층의 인공피부 조직에 적용하여 4시간 배양 후 10FBS가 함유된 K-S FM과 물의 양을 HPLC로 분석하였다. 시험결과는 하기 표 3에 나타나 있다.

배지 중의 생약 추출물의 양 (㎍/㎖)
실시예	비교예
41.5	3.0

실험결과 표 3에서와 같이, 본 발명의 생약추출물을 안정화한 나노 리포좀을 함유한 화장료는 생약추출물을 그대로 사용한 비교예에 비해 13배 이상의 피부 침투 효과가 우수함을 알 수 있다. 이는 본 발명의 나노 리포좀의 평균입자 크기가 30-70 nm로 아주 작아 피부침투가 용이하기 때문이다.

실험예 2: 제형의 안정성 시험

상기 본 발명의 생약추출물을 안정화한 나노 리포좀을 함유한 화장료에 대한 안정성 시험을 하기의 방법으로 실시하였다. 화장료의 안정성을 시험하기 위해 상기 실시예 및 비교예를 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관하고 또한 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관한 후, 분리 정도 및 변색 정도를 비교 측정하였다. 그 결과는 하기 표 4에 정리되어 있다. 이때 제품분리 및 변색 정도를 다음의 6등급으로 분류하여 평가하였다.

0 : 변화없음; 1 : 극히 조금 분리(변색); 2 : 조금 분리(변색); 3 : 조금 심하게 분리(변색);

4 : 심하게 분리(변색); 및 5 : 극히 심하게 분리(변색).

온도	분리 및 변색정도
온도	실시예	비교예
45℃	0	5.2
4℃	0	0

표 4에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예는 45℃에서 변색이나 분리 현상이 없이 안정하였으나, 생약추출물을 안정화하지 않고 직접 제형에 사용한 비교예는 45℃에서 심한 분리 및 변색이 일어나 추출물이 불안정할 뿐만 아니라, 생약추출물이 제형에 들어가 제형 자체가 불안정해 졌음을 알 수 있다. 이하 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여 본 발명의 생약추출물을 안정화한 나노 리포좀을 함유하는 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물을 하기의 제형예들로 한정하고자 하는 것은 아니다.

[실험예 3] : 세포내 멜라닌 저해효과

B16F1 멜라노마 세포는 한국 세포주 은행에서 제공받아 배양시켰다. B16F1 멜라노마 세포는 멜라닌을 생성하는 세포주로서 일반적으로 미백 물질 스크리닝에 사용된다.

상기 세포를 배양하기 위한 배지는 DMEM, 10% FBS, 1% 페니실린/스트렙토마이신을 넣어 무균상태로 만들었다.

세포배양은 37℃, 5% CO₂의 인큐베이터에서 배양하였다. 멜라노마 세포를 배양하여 100mm 패트리 디쉬가 90% 정도 찼을 때 계대하였다.

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물의 미백효과 측정을 위하여 B16F1 멜라노마 세포에 처리하여 생성된 멜라닌 양의 변화를 측정하였다. 6 웰 플래이트에 세포를 접종(seeding)하고 제조예 1에서 제조한 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 200㎍/㎖농도로 처리한 후, 이틀간 배양하여 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 10% DMSO를 포함하는 1N NaOH를 가해 90℃에서 1시간 반응시켜 멜라닌에 충분히 녹아나오도록 한 후, ELISA 리더(reader)를 이용하여 파장 405nm에서 흡광도를 측정하였다.

실험 결과는 하기식을 이용하여 저해도를 계산하였으며, 표 5에 나타내었다. 일반적인 미백 물질로 알려진 알부틴의 경우 미처리구와 비교했을 때, 200 ㎍/㎖의 농도에서 멜라닌 양이 59.6%인 것에 반해, 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물은 68.2%로 알부틴과 비슷한 정도의 멜라닌 생성 저해효과를 가짐을 확인할 수 있었다.

시료명	미처리구	알부틴	단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물
멜라닌 생성도(%)	100	69.6	68.2

[실험예 4] : 티로시나아제 활성 저해 측정

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물이 멜라닌을 생성하는데 중요한 역할을 하는 티로시나아제 효소 활성에 영향을 끼치는지 측정하였다.

96웰 플래이트에 0.1M 포스페이트 완충용액(phosphate buffer : pH6.8)을 20ul 첨가하고, 200㎍/㎖의 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황추출물 또는 증류수 50ul를 첨가한 후 10ul의 버섯유래 티로시나아제를 첨가한다. 기질로서 5mM의 L-DOPA 20ul를 첨가한 후 37℃에서 2분간 반응시킨 다음, ELISA 리더(reader)를 이용하여 파장 475nm에서 흡광도를 측정하였다.

티로시나아제 활성도는 하기 식을 이용하여 계산하였으며, 미백제로서 널리 사용되었던 코지산과 상기 추출물의 멜라닌 억제 효과를 표 6에 나타내었다. 코지산을 처리하였을 때 전체 활성의 3.1% 만이 활성을 가진 반면, 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 처리하였을 때에는 51.4% 정도의 활성을 보였다. 코지산에 비해서는 저해 효과가 미약하나 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황추출물도 미처리구에 비해 티로시나아제 효소 활성 51.4% 이상으로 저해하는 것을 알 수 있었다.

시 료 명	미처리구	코지산	단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물
티로시나아제 활성(%)	100	3.1	51.4

[실험예 5] : 독성 실험

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 미백 화장료로 사용하기 위하여, 세포 독성 여부를 확인하기 위한 실험을 하였다. 96 웰 플래이트에 세포를 접종하고 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물 200㎍/㎖을 처리하고 이틀 후 배지를 제거하고, MTT 용액을 100ul 첨가하여 30℃에서 4시간 반응 후, 용액을 제거하고 DMSO 100ul를 첨가하여 염색된 세포를 용해한 다음, ELISA 리더(reader)를 이용하여 파장 540nm에서 흡광도를 측정하였다

세포 생존율은 하기식을 이용하여 계산하였으며, 결과를 표 7에 나타내었다. 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 처리하지 않은 세포와 비교하였을 때, 200 ㎍/㎖의 높은 농도임에도 불구하고 생존 세포율이 99.⁹%로 세포독성이 거의 없음을 알 수 있다.

시료명	미처리구	알부틴	단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물
세포 생존율(%)	100	97.³	99.⁹

[실험예 6] : 항산화 활성 실험 I

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물의 항산화 활성을 갖는지 확인하기 위하여 일반적으로 항산화 활성을 측정하는 방법인 DPPH 용액을 이용하여 측정하였다.

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물 25㎍/㎖과 항산화 측정 용액인 DPPH 용액을 100ul씩 혼합하여 37℃에서 30분간 반응시킨 후, ELISA 리더(reader)를 이용하여 파장 570nm에서 흡광도를 측정하였다.

항산화제로 알려진 비타민C와 함께 실험하여 추출물이 어느 정도의 활성을 갖는지를 상대적으로 비교해 보았다. 실험 결과 표 8로 부터 알 수 있는 바와 같이 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물의 항산화 활성이 79.7%로 나타났으므로 강력한 항 산화력을 갖는다는 것을 알 수 있었다. 특이할 만한 점은 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물은 비타민C 보다 4.5배 우수한 항산화 활성을 보였다는 점이다.

시료명	비타민 C	단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물
항산화 활성(%)	17.⁹%	79.⁷%

[실험예 7] : 항산화 활성 실험 II

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황의 항산화 활성을 측정하는 또다른 방법으로 슈퍼옥사이드 디뮤타제 라이크 액티비티 (Superoxide dimutase like activity (Superoxide scavenging activity))를 NBT 시험법으로 측정하였다.

96웰 플레이트에 NBT 용액을 10ul씩 넣고 기질인 크산틴(Xanthine)을 40ul씩 넣는다. 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물 25㎍/㎖ 와 포스페이트 완충용액(phosphate buffer)를 넣고, 효소인 크산틴 옥시다제(Xanthine oxidase)를 20ul 넣는다. 25℃에서 20분간 반응시킨 후, LISA 리더(reader)를 이용하여 560nm 파장에서 흡광도를 측정하였다.

시험 결과, 표 9로부터 알 수 있는 바와 같이 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물의 NBT 활성이 40.⁵%로 매우 높게 나타났다.

시 료 명	단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물
Superoxide 소거효과(%)	40.⁵%

하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.

[제조예 3] : 실시예 및 비교예

제조예 3의 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 함유하는 화장료를 제조하고, 이와 비교하기 위하여 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물이 결여된 화장료 조성물을 하기 표 10의 조성비로 제조하였다.

구분	함량(중량%)
성분	실시예	비교예
단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물	4.0	-
세테아릴 옥타노에이트	5.0	5.0
이소프로필 팔미테이트	5.0	5.0
폴리아크릴아마이드/C13-14이소파라핀/라우레스-7	2.0	2.0
폴리소르베이트60	1.7	1.7
솔비탄 세스퀴올리에이트	1.3	1.3
향료,	정량	정량
방부제	정량	정량
정제수	잔량	잔량
합계	100	100

[실험예 8]

본 발명 화장료의 임상 미백 효능을 시험하기 위하여, 기미, 주근깨 및 색소침착증을 갖고 있는 건강한 성인 남녀 40명을 무작위로 20명씩 2개 그룹(A 및 B)으로 나눈 후, A그룹을 대상으로는 실시예를, B그룹을 대상으로는 비교예를 각각 1일 2회씩 12주간 도포한 후 피부색의 변화를 크로마메타(Minolta CR300)를 이용하여 색의 밝기 변화(△ L)를 측정하고, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안관찰과 피검자에 의한 주관적 육안 관찰을 실시하여 미백효과를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 11에 나타내었다. 이때 미백 효능 정도를 다음의 7등급으로 분류하여 평가하였다.

* 미백 효능 평가 기준 :

-3 : 매우악화, -2 : 악화, -1 : 약간악화, 0 : 변화없음, 1 : 약간개선, 2 : 개선, 3 : 매우개선,

피검자	피검자 피부색의 밝기 변화(△ L)		숙련자의 객관적 평가		피검자의 주관적 평가
피검자	A그룹	B그룹	A그룹	B그룹	A그룹	B그룹
1	5.6	2.6	3	0	0	1
2	4.6	2.8	3	0	3	0
3	4.5	2.3	2	0	2	1
4	4.3	1.9	2	0	3	1
5	4.8	2.2	2	0	1	-1
6	5.1	2.5	3	1	2	-1
7	4.5	0.8	2	1	2	1
8	4.1	0.2	3	1	2	1
9	4.7	2.6	2	1	1	1
10	4.9	2.8	2	0	2	0
11	4.3	3.5	2	1	1	1
12	3.8	3.8	2	0	1	0
13	4.2	2.5	3	0	2	1
14	4.8	2.6	2	1	2	1
15	4.2	2.3	2	1	2	1
16	5.6	3.4	3	1	0	0
17	5.7	2.8	3	0	2	0
18	5.3	2.3	2	1	2	1
19	5.3	3.1	1	0	1	-1
20	5.2	2.8	3	2	1	1
평균	4.78	2.49	2.35	0.55	1.6	0.45

상기 표 11에 나타난 결과를 보면, 피부 밝기 변화는 비교예에 비하여 실시예 적용시 2배의 효과를 보였고, 숙련자의 객관적 평가와 피검자의 주관적 평가 역시 실시예를 적용한 것이 비교예를 적용하였을 때와 비교하였을 때 각각 4.78배와 2.49배 개선 효과가 높은 것으로 확인되었다.

결과적으로 상기 표 11에 나타난 결과를 통해 확인할 수 있는 사실은 본 발명에 따른 제조예에 의해 준비된 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 함유하는 화장료는 피부미백효과를 증진시키는 것으로서 우수한 효과를 발휘하고 있음을 알 수 있다.

[제형예 1] : 유연 화장수

선 실험예의 결과를 근거로 하여 본 발명의 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 조성하여 제시한다.

그러나, 본 발명의 조성물을 하기의 제형예들로 한정하고자 하는 것은 아니다. 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 함유한 유연 화장수의 제제예는 다음 표 12의 조성과 같이 제조하였다.

원료	함량(중량%)
단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물	2.00
알란토인	0.10
하이드로제네이티드캐스터오일	1.00
에탄올	30.00
소듐시트레이트	0.02
글리세레스-26	1.00
알부틴	2.00
1,3-부틸렌글리콜	1.00
디포타슘글리시리제이트	0.05
시트릭애씨드	0.01
보존제	미량
착색제	미량
착향제	미량
정제수	잔량

[제형예 2] : 영양 크림

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 함유한 영양크림의 제제예는 다음 표 13의 조성과 같이 제조하였다.

원료	함량(중량%)
단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물	10.0
디메치콘	0.4
디포타슘글리시리제이트	미량
알란토인	미량
세테아릴알코올	3.0
미네랄오일	4.0
스쿠알란	3.8
식물 추출물	3.2
마그네슘알루미늄실리케이트	0.3
PEG-40 스테아레이트	1.2
스테아릭애씨드	2.0
폴리소르베이트 60	1.5
소듐 히아루로네이트	미량
소르비탄세스퀴올리에이트	1.5
카르릴릭/카프릭트리글리세라이드	2.8
식물성 오일	1.8
1,3-부틸렌 글리콜	7.0
글리세린	1.0
D-판테놀	0.1
친유형글리세릴스테아레이트	2.0
토코페릴아세테이트	적량
트리에탄올아민	적량
보존제	적량
착향제	적량
정제수	잔량

[제형예 3] 마사지크림

하기 표14에 나타난 바와 같이 마사지 크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
나노리포좀	1.0
트리에탄올아민	0.5
폴리솔베이트 60	3.0
프로필렌글리콜	6.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5
밀납	2.0
글리세린	4.0
토코페릴아세테이트	0.1
세테아릴알코올	2.0
유동파라핀	30.0
향, 방부제	미량
카르복시비닐폴리머	0.5
정제수	to 100

[제형예 4] 팩

하기 표 15에 나타난 바와 같이 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
나노리포좀	2.0
에탄올	7.0
카르복시비닐 폴리머	0.3
글리세린	4.0
프로필렌글리콜	2.0
피이지-40 히드로게네이티드 캐스터 오일	0.8
트리에탄올아민	0.3
비에치티이	0.01
EDTA-2Na	0.01
향, 방부제	미량
정제수	to 100

Claims

단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물
청구항 1에 있어서, 상기 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 적어도 1종 이상의 극성용매를 첨가하여 추출한 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 ~ 30.0 중량% 함유되는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 조성물의 피부 미백 효과가 멜라닌 생성 저해에 의한 것임을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 조성물의 피부 미백 효과가 티로시나아제 활성 억제에 의한 것임을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
청구항 1 내지 청구항 5 중 어느 한 항에 있어서, 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크 로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징 폼, 클렌징 로션, 클렌징 크림, 바디 로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 구성된 그룹에서 선택된 어느 하나의 제형을 취하는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
.
항산화용 단삼, 월귤나무 추출물, 황금, 황련, 율무, 백복령, 감잎, 살구씨, 마황 추출물을 사용한 화장료 조성물.