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KR20140084232A - Gccr 발현의 안티센스 조절 - Google Patents

Gccr 발현의 안티센스 조절 Download PDF

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KR20140084232A
KR20140084232A KR1020147013594A KR20147013594A KR20140084232A KR 20140084232 A KR20140084232 A KR 20140084232A KR 1020147013594 A KR1020147013594 A KR 1020147013594A KR 20147013594 A KR20147013594 A KR 20147013594A KR 20140084232 A KR20140084232 A KR 20140084232A
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KR
South Korea
Prior art keywords
compound
modified
seq
gccr
linked nucleosides
Prior art date
Application number
KR1020147013594A
Other languages
English (en)
Inventor
수잔 엠. 프라이어
Sanjay Bhanot
Original Assignee
아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드 filed Critical 아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드
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Abstract

동물에서 GCCR mRNA 및 단백질의 발현을 감소시키기 위한 방법, 화합물, 및 조성물이 본원에서 제공된다. 그와 같은 방법, 화합물, 및 조성물은 대사 질환, 예를 들면, 당뇨병, 또는 그의 증상을 치료, 예방, 지연, 또는 개선하는데 유용하다.

Description

GCCR 발현의 안티센스 조절 {ANTISENSE MODULATION OF GCCR EXPRESSION}
서열목록
본원은 전자 형태로 서열목록과 함께 제출되어 있다. 서열목록은 그 크기가393 Kb이고 2012년 9월 19일에 만들어진 파일명 BIOL0159WOSEQ.txt로서 제공되고. 전자 형태의 서열목록 내의 정보는 그 전체가 참고로 본원에 포함되어 있다.
분야
동물에서 GCCR mRNA 및 단백질의 발현을 감소시키는 방법, 화합물, 및 조성물이 본원에 제공된다. 그와 같은 방법, 화합물, 및 조성물은, 예를 들면, 대사 장애와 연관된 장애, 특히 당뇨병과 연관된 장애를 치료, 예방, 지연 또는 개선하는데 유용하다.
당뇨병은 손상된 인슐린 분비 및/또는 작용을 특징으로 하는 만성 대사성 장애이다. 제2형 당뇨병 (T2DM)에서, 인슐린 저항성은 글루코네오게닉 효소 (gluconeogenic enzyme)의 활성을 조절하는 인슐린의 무능력을 초래하고, 다수의 대상체는 또한 단식 및 식후 상태에서 순환 글루카곤 (GC)의 부적절한 레벨을 나타낸다. 글루카곤은 췌장 소도의 α-세포로부터 분비되고, 간 글루코스 생산의 조절을 통해서 글루코스 항상성을 조절한다 (Quesada 등, J. Endocrinol. 2008. 199: 5-19).
글루카곤은 글루코코르티코이드 수용체 (GCCR)의 활성화를 통해서 표적 조직에 대한 그의 작용을 나타낸다. 글루코코르티코이드 수용체는 수용체의 클래스 B G-단백질 커플링된 패밀리의 멤버인 62 kDa 단백질이다 (Brubaker 등, Recept. Channels. 2002. 8: 179-88). GCCR 활성화는 G 단백질 (Gsα 및 Gq)에 의한 신호 변환을 유도하며, 이에 의해서 Gsα는 cAMP 생산을 야기하는 아데닐레이트 사이클라제를 활성화시켜 단백질 키나제 A의 수준의 증가를 야기한다. 간에서의 GCCR 신호전달은 글리코겐 생성과 함께 글리코겐 분해 및 당신생의 유도에 의해서 증가된 간 글루코스 생산을 야기한다 (Jiang and Zhang. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2003. 284: E671-E678). GCCR은 또한 심장, 장 평활근, 신장, 뇌 및 지방 조직을 포함한 간외 조직에서 발현된다 (Hansen 등, Peptides. 1995. 16: 1163-1166).
GCCR 억제제의 개발은 시상하부-뇌하수체 부신 (HPA) 축의 활성화를 포함한 전신적 GCCR 억제와 연관된 바람직하지 않은 부작용에 의해서 방해를 받고 있다. 뇌에서 GCCR 활성의 억제는 피드백 조절 및 부신 스테로이드의 분비의 결과적인 증가에 기인하여 순환 부신피질자극 호르몬의 증가를 초래할 수 있다 (Philibert et al., Front. Horm. Res. 1991. 19: 1-17). 이것은 다시 수많은 부정적인 만성 스테로이드-관련 부작용을 제공할 수 있다. 그 밖의 다른 연구는 GCCR의 특정한 불활성화가 장시간 단식에 의해 저혈당을 야기하였음을 입증하였다 (Opherk et al., Mol. Endocrinol. 2004. 18: 1346-1353).
GCCR 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 투여가 CNS 또는 부신 내의 GCCR mRNA 레벨에 영향을 미침이 없이 간 및 지방 조직에서 조직-특이적 축적 및 감소된 GCCR 발현을 야기한다는 것은 전-임상 모델에서 이전에 입증되었다 (PCT 공개 제 WO2005/071080 호; PCT 공개 제 WO2007/035759 호). 따라서, GCCR mRNA 발현의 안티센스 억제는 HPA 축을 활성화시키지 않으면서 고혈당 및 고지혈증을 개선시키는 것으로 나타났다. 본 발명은 GCCR 발현을 변조시키는 조성물 및 방법을 제공한다. GCCR의 발현을 변조시키는 안티센스 화합물은 상기 언급한 공개된 특허출원에 기술되어 있다. 그러나, 추가의 개선된 화합물에 대한 필요성이 여전히 남아있다. 본 발명에 기술된 화합물 및 치료방법은 GCCR 관련된 장애에 대해 현재 이용할 수 있는 치료 옵션에 비해서 상당한 이점을 제공한다.
특허, 특허출원, 기사, 책 및 논문을 포함하여 (단, 이들로 제한되지는 않는다) 본 출원에서 인용된 모든 문서, 또는 문서의 일부분은 이에 의해서 온전하게 뿐만 아니라 여기에서 거론된 문서의 일부분에 대한 참고로 분명하게 포함된다.
요약
본 발명에서는 GCCR의 발현을 조절하고, 대사 장애, 특히 당뇨병 및/또는 그의 증상과 연관된 장애와 연관된 질환을 치료, 예방, 지연 또는 개선하는 방법, 화합물, 및 조성물이 제공된다.
상세한 설명
상기의 일반적인 설명 및 하기의 상세한 설명은 둘 다 단지 예시적이고 설명을 위한 것이며, 특허청구된 바와 같이 본 명세서에 제한적으로 기재되지 않은 것으로 이해되어야 한다. 여기에서, 단수의 사용은 구체적으로 다른 식으로 명시되지 않는 한, 복수를 포함한다. 본 명세서에서 사용된 것으로서, "또는"의 사용은 다른 식으로 명시되지 않는 한, "및/또는"을 의미한다. 더욱이, 용어 "포함하는" 및 "포함한다" 및 "포함하였다"와 같은 다른 형태의 사용은 비제한적이다. 또한, "요소" 또는 "성분"은 다른 식으로 구체적으로 명시되지 않는 한, 하나의 유니트를 포함하는 요소 및 성분들 및 하나를 초과하는 서브유니트를 포함하는 요소 및 성분들 둘 다를 포함한다.
본 명세서에서 사용된 섹션 제목들은 단지 조직적 목적을 위한 것이며, 기술된 요지를 제한하는 것으로 해석되지는 않는다. 특허, 특허출원, 기사, 책 및 논문을 포함하여 (단, 이들로 제한되지는 않는다) 본 출원에서 인용된 모든 문서, 또는 문서의 일부분은 이에 의해서 온전하게 뿐만 아니라 여기에서 거론된 문서의 일부분에 대한 참고로 분명하게 포함된다.
정의
구체적인 정의가 제공되지 않는 한, 본 명세서에 기술된 분석 화학, 합성 유기 화학, 및 의학 및 약제학적 화학과 관련하여 이용된 명명법, 및 그의 절차 및 기술은 본 기술분야에서 잘 알려지고 통상적으로 사용되는 것들이다. 화학적 합성 및 화학적 분석을 위해서는 표준 기술이 사용될 수 있다. 허용되는 경우에, 모든 특허, 특허출원, 공개된 특허출원 및 다른 저널 출판물을 포함하여 (단, 이들로 제한되지는 않는다) 본 출원에서 인용된 모든 문서, 또는 문서의 일부분, 진뱅크 (GENBANK) 수탁 번호 및 National Center for Biotechnology Information (NCBI) 및 본 명세서에서 전체적으로 언급된 다른 데이터와 같은 데이터베이스를 통해 수득될 수 있는 관련된 서열 정보는 온전하게 뿐만 아니라 여기에서 거론된 문서의 일부분에 대한 참고로 포함된다.
다른 식으로 지적되지 않는 한, 하기 용어들은 하기의 의미를 갖는다:
"2'-O-메톡시에틸" (또한 2'-MOE 및 2'-O(CH2)2-OCH3)은 푸로실 환의 2' 위치의 O-메톡시-에틸 변형을 나타낸다. 2'-O-메톡시에틸 변형된 당은 변형된 당이다.
"2'-O-메톡시에틸 뉴클레오타이드"는 2'-O-메톡시에틸 변형된 당 모이어티를 포함하는 뉴클레오타이드를 의미한다.
"3' 표적 부위"는 특정한 안티센스 화합물의 3'-모스트 (most) 뉴클레오타이드에 대해서 상보적인 표적 핵산의 뉴클레오타이드를 나타낸다.
"5' 표적 부위"는 특정한 안티센스 화합물의 5'-모스트 뉴클레오타이드에 대해서 상보적인 표적 핵산의 뉴클레오타이드를 나타낸다.
"5-메틸시토신"은 5' 위치에 부착된 메틸 그룹에 의해서 변형된 시토신을 의미한다. 5-메틸시토신은 변형된 핵염기이다.
"약"은 값의 ±10% 이내인 것을 의미한다. 예를 들어, "마커는 약 50%만큼 증가될 수 있다"라고 언급된 경우에, 이것은 마커가 45%-55% 사이로 증가할 수 있음을 시사한다.
"활성 약제학적 작용제"는 개체에게 투여하였을 때 치료학적 이점을 제공하는 약제학적 조성물의 물질 또는 물질들을 의미한다. 예를 들어, 어떤 구현예에서는 GCCR에 대해 표적화된 안티센스 올리고뉴클레오타이드가 활성 약제학적 작용제이다.
"활성 표적 영역" 또는 "표적 영역"은 하나 또는 그 이상의 활성 안티센스 화합물이 표적화된 영역을 의미한다. "활성 안티센스 화합물"은 표적 핵산 수준 또는 단백질 수준을 감소시키는 안티센스 화합물을 의미한다.
"지방과다" 또는 "비만"은 비만인 상태, 또는 무지방 체질량 (lean body mass)과 관련하여 과도하게 많은 양의 체지방 또는 지방 조직을 나타낸다. 체지방의 양은 신체 전체에 걸친 지방의 분포 및 지방 조직 침착물의 크기 및 질량 둘 다에 대한 관심을 포함한다. 체지방 분포는 피부-접힘 (skin-fold) 척도, 허리 엉덩이 둘레율, 또는 초음파, 전산화 단층촬영법, 또는 자기 공명 영상과 같은 기술에 의해서 추정될 수 있다. Center for Disease Control and Prevention에 따르면, 30 또는 그 이상의 체질량 지수 (BMI)를 갖는 개체는 비만인 것으로 간주된다. 본 명세서에서 사용된 것으로서 용어 "비만"은 신체 내에서 지방 조직의 과도한 축적의 결과로 물리적 필요성을 초과하는 체지방의 증가가 있는 상태를 포함한다. 용어 "비만"은 하기의 상태를 포함하나, 이들로 제한되지는 않는다: 성년-발병 비만; 식이성 비만; 내인성 또는 염증성 비만; 내분비성 비만; 가족성 비만; 고인슐린성 비만; 증식성-비대성 비만; 성선기능 감퇴성 비만; 갑상선기능 저하성 비만; 평생 비만; 병적 비만 및 외인성 비만.
"수반하여 투여된다"는 둘 다의 약물학적 효과가 환자에게서 동시에 나타나도록 하는 어떤 방식으로의 두 가지 작용제의 공동-투여를 나타낸다. 수반되는 투여는 두 가지 작용제를 단일 약제학적 조성물로, 단일 투약형으로, 또는 동일한 투여 경로에 의해서 투여할 것을 필요로 하지 않는다. 두 가지 작용제의 효과는 그들 자체가 동시에 나타날 필요는 없다. 효과는 단지 기간의 중복이 필요할 뿐이며, 동일한 시간에 걸칠 필요는 없다.
"투여하는"은 작용제를 동물에게 제공하는 것을 의미하며, 의료 전문가에 의한 투여 및 자가-투여를 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다.
"작용제 (agent)"는 동물에게 투여하였을 때 치료학적 이점을 제공할 수 있는 활성 물질을 의미한다. "제1 작용제"는 본 발명에서 제공된 치료학적 화합물을 의미한다. 예를 들어, 제1 작용제는 GCCR을 표적으로 한 안티센스 올리고뉴클레오타이드일 수 있다. "제2 작용제"는 본 발명에 기술된 제2 치료학적 화합물 (예를 들어, GCCR을 표적으로 하는 제2 안티센스 올리고뉴클레오타이드) 및/또는 비- GCCR 치료학적 화합물을 의미한다.
"개선"은 연관된 질환, 장애 또는 상태의 적어도 하나의 지표, 징후 또는 증상을 약화시키는 것을 나타낸다. 지표의 중증도는 본 기술분야에서 숙련된 전문가에게 공지되어 있는 주관적 또는 객관적 척도에 의해서 결정될 수 있다.
"동물"은 마우스, 랫트, 토끼, 개, 고양이, 돼지, 및 원숭이 및 침팬지를 포함한 (단, 이들로 제한되지는 않는다) 비-인간 영장류를 포함하는 (단, 이들로 제한되지는 않는다) 인간 또는 비-인간 동물을 나타낸다.
"안티센스 활성"은 안티센스 화합물의 그의 표적 핵산에 대한 하이브리드화에 기인할 수 있는 어떤 검출 가능하거나 측정 가능한 활성을 의미한다. 어떤 구현예에서, 안티센스 활성은 표적 핵산 또는 이러한 표적 핵산에 의해서 코드화된 단백질의 양 또는 발현의 감소이다.
"안티센스 화합물"은 수소 결합을 통해서 표적 핵산에 대한 하이브리드화를 겪을 수 있는 올리고머 화합물을 의미한다.
"안티센스 억제"는 안티센스 화합물의 부재 하에서의 표적 핵산 수준 또는 표적 단백질 수준에 비해, 표적 핵산에 대해 상보적인 안티센스 화합물의 존재 하에서의 표적 핵산 수준 또는 표적 단백질 수준의 감소를 의미한다.
"안티센스 올리고뉴클레오타이드"는 표적 핵산의 상응하는 영역 또는 분절에 대한 하이브리드화를 허용하는 핵염기 서열을 갖는 단일-가닥 올리고뉴클레오타이드를 의미한다.
"바이사이클릭 당"은 두 개의 비-제미널 (geminal) 환 원자의 가교화 (bridging)에 의해서 변형된 푸로실 환을 의미한다. 바이사이클릭 당은 변형된 당이다.
"바이사이클릭 핵산" 또는 "BNA"는 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드를 나타내며, 여기에서 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드의 푸라노즈 부분은 푸라노즈 환 상의 두 개의 탄소 원자를 연결하는 브릿지를 포함하여 바이사이클릭 환 시스템을 형성한다.
"캡 (cap) 구조" 또는 "말단 캡 모이어티"는 안티센스 화합물의 어느 하나의 말단에 포함된 화학적 변형을 의미한다.
"화학적으로 구분되는 영역"은 어떤 점에서 동일한 안티센스 화합물의 또 다른 영역과 화학적으로 상이한 안티센스 화합물의 영역을 나타낸다. 예를 들어, 2'-O-메톡시에틸 뉴클레오타이드를 갖는 영역은 2'-O-메톡시에틸 변형이 없는 뉴클레오타이드를 갖는 영역과 화학적으로 구분된다.
"키메릭 안티센스 화합물"은 적어도 두 개의 화학적으로 구분되는 영역을 갖는 안티센스 화합물을 의미한다.
"공동-투여"는 개체에게 두 개 또는 그 이상의 작용제를 투여하는 것을 의미한다. 두 개 또는 그 이상의 작용제는 단일 약제학적 조성물 내에 존재할 수 있거나, 별개의 약제학적 조성물 내에 존재할 수 있다. 두 개 또는 그 이상의 작용제 각각은 동일하거나 상이한 투여 경로를 통해서 투여될 수 있다. 공동-투여는 병행 또는 순차적 투여를 포함한다.
"콜레스테롤"은 모든 동물 조직의 세포막에서 발견되는 스테롤 분자이다. 콜레스테롤은 반드시 초저밀도 지방단백질 (VLDL), 중간 밀도 지방단백질 (IDL), 저밀도 지방단백질 (LDL), 및 고밀도 지방단백질 (HDL)을 포함한 지방단백질에 의해서 동물의 혈장 내로 수송되어야 한다. "혈장 콜레스테롤"은 혈장 또는 혈청 내에 존재하는 모든 지방단백질 (VDL, IDL, LDL, HDL) 에스테르화 및/또는 비-에스테르화된 콜레스테롤의 합계를 나타낸다.
"상보성"은 제1 핵산과 제2 핵산의 핵염기 사이의 짝짓기 능력을 의미한다.
"인접 핵염기"는 서로에 대해 바로 인접한 핵염기를 의미한다.
"데옥시리보뉴클레오타이드"는 뉴클레오타이드의 당 부분의 2' 위치에 수소를 갖는 뉴클레오타이드를 의미한다. 데옥시리보뉴클레오타이드는 다양한 치환체 중의 어떤 것에 의해서나 변형될 수 있다.
"진성 당뇨병" 또는 "당뇨병"은 불충분한 수준의 인슐린 또는 감소된 인슐린 민감성으로 인한 장애가 있는 대사 및 비정상적으로 높은 혈당 (고혈당증)을 특징으로 하는 증후군이다. 특징적인 증상은 고혈당 수준에 기인한 과도한 소변 생산 (다뇨증), 과도한 갈증 및 증가된 배뇨를 보상하기 위한 시도로 증가된 유체 섭취 (조갈증), 눈의 광학에 대한 고혈당 효과에 기인한 흐릿한 시야, 설명되지 않는 체중 감소, 및 무기력이다.
"당뇨병성 이상지질혈증" 또는 "이상지질혈증이 있는 제2형 당뇨병"은 제2형 당뇨병, 및 전형적으로, 상승된 지질 예컨대 콜레스테롤 및 트리글리세라이드, 뿐만 아니라 지단백질, 예컨대 저밀도 지단백질 (LDL) 및 상승된 작고 밀집된 LDL 입자를 특징으로 하는 상태를 의미한다. 그와 같은 상태는 또한 감소된 HDL-C를 특징으로 할 수 있다.
"희석제"는 약물학적 활성을 결여하고 있지만, 약제학적으로 필요하거나 바람직한 조성물 내의 성분을 의미한다. 예를 들어, 주사용 조성물 내의 희석제는 액체, 예를 들어, 식염수일 수 있다.
"이상지질혈증"은 지질 및/또는 지방단백질 과잉생산 또는 결핍을 포함한 지질 및/또는 지방단백질 대사의 장애를 나타낸다. 이상지질혈증은 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 뿐만 아니라 저-밀도 지방단백질 (LDL) 콜레스테롤과 같은 지방단백질의 상승으로 나타날 수 있다.
"복용 단위"는 약제학적 작용제가 제공된 형태, 예를 들어, 환제, 정제, 또는 본 기술분야에서 공지된 다른 복용 단위를 의미한다. 어떤 구현예에서, 복용 단위는 동결건조된 안티센스 올리고뉴클레오타이드를 함유하는 바이알이다. 어떤 구현예에서, 복용 단위는 재구성된 안티센스 올리고뉴클레오타이드를 함유하는 바이알이다.
"용량"은 단일 투여에서, 또는 명시된 기간 동안에 제공된 약제학적 작용제의 명시된 양을 의미한다. 어떤 구현예에서, 용량은 하나, 둘 또는 그 이상의 볼러스 (boluses), 정제, 또는 주사제로 투여될 수 있다. 예를 들어, 피하 투여를 원하는 어떤 구현예에서, 원하는 용량은 단일 주사에 의해서 쉽게 수용되지 않는 용적을 필요로 하며, 따라서 두 개 또는 그 이상의 주사제를 사용하여 원하는 용량을 달성할 수 있다. 어떤 구현예에서, 약제학적 작용제는 장시간에 걸쳐서, 또는 연속적으로 주입함으로써 투여된다. 용량은 시간, 일, 주, 또는 개월 당 약제학적 작용제의 양으로 언급될 수 있다.
"유효량" 또는 "치료학적 유효량"은 작용제를 필요로 하는 개체에게서 원하는 생리적 결과를 유발하는데 충분한 활성 약제학적 작용제의 양을 의미한다. 유효량은 치료될 개체의 건강 및 신체 조건, 치료될 개체의 분류군, 조성물의 제형, 개체의 의학적 상태의 평가, 및 그 밖의 다른 관련된 인자에 따라 개체들 사이에서 달라질 수 있다.
"완전히 상보적" 또는 "100% 상보적"은 제1 핵산의 핵염기 서열의 각각의 핵염기가 제2 핵산의 제2 핵염기 서열 내에 상보적인 핵염기를 갖는 것을 의미한다. 어떤 구현예에서, 제1 핵산은 안티센스 화합물이고, 표적 핵산은 제2 핵산이다.
"갭머 (gapmer)"는 RNase H 분해를 지지하는 다수의 뉴클레오사이드를 갖는 내부 영역이 하나 또는 그 이상의 뉴클레오사이드를 갖는 외부 영역들 사이에 배치된 키메릭 안티센스 화합물을 의미하며, 여기에서 내부 영역을 구성하는 뉴클레오사이드는 외부 영역을 구성하는 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오사이드들과 화학적으로 구분된다. 내부 영역은 "갭 분절"로 불릴 수 있으며, 외부 영역은 "윙 (wing) 분절"로 불릴 수 있다.
"갭-확장된 (gap-widened)"은 1 내지 6 개의 뉴클레오사이드를 갖는 5' 및 3' 윙 분절들 사이에, 및 이들에 바로 인접하여 배치된 12 개 또는 그 이상의 인접 2'-데옥시리보뉴클레오사이드의 갭 분절을 갖는 키메릭 안티센스 화합물을 의미한다.
"글루코코르티코이드 수용체" 또는 "GCCR"은 GCCR의 어떤 핵산 또는 단백질을 의미한다.
"GCCR 발현"은 GCCR을 코드화한 유전자로부터 전사된 mRNA의 수준 또는 mRNA로부터 해독된 단백질의 수준을 의미한다. GCCR 발현은 노던 또는 웨스턴 블럿과 같은 본 기술분야에서 공지된 방법에 의해서 결정될 수 있다.
"GCCR 핵산"은 GCCR을 코드화한 어떤 핵산을 의미한다. 예를 들어, 어떤 구현예에서, GCCR 핵산은 GCCR을 코드화한 DNA 서열, GCCR을 코드화한 DNA (인트론 및 엑손을 포함하는 게놈 DNA를 포함)로부터 전사된 RNA 서열, 및 GCCR을 코드화한 mRNA 서열을 포함한다. "GCCR mRNA"는 GCCR 단백질을 코드화한 mRNA를 의미한다.
"글루코스"는 에너지의 공급원 및 염증성 중간체로서 세포에 의해서 사용되는 모노사카라이드이다. "혈장 글로코즈"는 혈장 내에 존재하는 글루코스를 나타낸다.
"하이브리드화"는 상보적 핵산 분자의 어닐링 (annealing)을 의미한다. 어떤 구현예에서, 상보적 핵산 분자는 안티센스 화합물 및 표적 핵산을 포함한다.
"고지혈증" 또는 "고지방혈증"은 상승된 혈청 지질 또는 순환 (혈장) 지질을 특징으로 하는 상태이다. 이 상태는 지방의 비정상적으로 높은 농도를 나타낸다. 순환 혈액 내의 지질 분획은 콜레스테롤, 저밀도 지방단백질, 초저밀도 지방단백질 및 트리글리세라이드이다.
"고트리글리세라이드혈증"은 상승된 트리글리세라이드 수준을 특징으로 하는 상태를 의미한다.
"확인하는" 또는 "대사를 갖는 동물을 선택하는"은 대사 질환 또는 대사 장애로 진단된 대상체를 확인 또는 선택하거나, 대사 증후군, 고혈당증, 고트리글리세라이드혈증, 고혈압, 증가된 인슐린 내성, 감소된 인슐린 민감성, 정상 체중 초과, 및/또는 정상 체지방 초과 또는 이들의 어떤 조합을 포함하는 (단, 이들로 제한되지는 않는다) 대사 질환의 어떤 증상을 갖는 대상체를 확인 또는 선택하는 것을 의미한다. 이러한 확인은 혈청 또는 순환 (혈장) 혈액-글루코스의 측정, 혈청 또는 순환 (혈장) 트리글리세라이드의 측정, 혈압의 측정, 체지방의 측정, 체중의 측정 등과 같은 표준 임상 시험 또는 평가를 포함하는 (단, 이들로 제한되지는 않는다) 어떤 방법에 의해서라도 달성될 수 있다.
"바로 인접한"은 바로 인접한 요소들 사이에 개입성 요소가 없는 것을 의미한다.
"개체" 또는 "대상체" 또는 "동물"은 치료 또는 치료법을 위해서 선택된 인간 또는 비-인간 동물을 의미한다.
"발현 또는 활성을 억제하는"은 RNA 또는 단백질의 발현 또는 활성의 감소 또는 차단을 나타내며, 반드시 발현 또는 활성의 전체 제거를 나타내지는 않는다.
"인슐린 내성"은 인슐린의 정상적인 양이 지방, 근육 및 간 세포로부터 정상적인 인슐린 반응을 초래하는데 부적합한 상태로 정의된다. 지방 세포에서의 인슐린 내성은 혈장 내의 유리 지방산을 상승시키는 저장된 트리글리세라이드의 가수분해를 야기한다. 근육에서의 인슐린 내성은 글루코스 흡수를 감소시키는 반면에, 간에서의 인슐린 내성은 글루코스 저장을 감소시키며, 두 가지 효과는 모두 혈당을 상승시키는 작용을 한다. 인슐린 내성에 기인한 인슐린 및 글루코스의 높은 혈장 수준은 종종 대사 증후군 및 제2형 당뇨병을 초래한다.
"인슐린 민감성"은 개체가 어떻게 효과적으로 글루코스를 처리하는지에 대한 척도이다. 높은 인슐린 민감성을 갖는 개체는 효과적으로 글루코스를 처리하는 반면에 낮은 인슐린 민감성을 갖는 개체는 글루코스를 효과적으로 처리하지 못한다.
"뉴클레오사이드간 결합"은 뉴클레오사이드들 사이의 화학적 결합을 나타낸다.
"정맥내 투여"는 정맥 내로의 투여를 의미한다.
"연결된 뉴클레오사이드"는 함께 결합된 인접한 뉴클레오사이드를 의미한다.
"지질-저하 요법" 또는 "지질 저하제"는 대상체에서 하나 또는 그 이상의 지질을 감소시키기 위해서 대상체에게 제공된 치료학적 레지멘을 의미한다. 어떤 구현예에서, 지질-저하 요법은 대상체에서 ApoB, 총 콜레스테롤, LDL-C, VLDL-C, IDL-C, 비-HDL-C, 트리글리세라이드, 소형의 밀집된 LDL 입자, 및 Lp(a) 중의 하나 또는 그 이상을 감소시키기 위해서 제공된다. 지질-저하 요법의 예로는 스타틴, 피브레이트, 및 MTP 억제제가 포함된다.
"주요 위험 인자"는 특정한 질환 또는 병태에 대한 큰 위험의 원인이 되는 인자를 의미한다. 어떤 구현예에서, 관상동맥 심장 질환에 대한 주요 위험 인자에는 비제한적으로, 담배 흡연, 고혈압, 낮은 HDL-C, 관상동맥 심장 질환의 가족력, 연령, 및 본 명세서에 개시된 다른 인자가 포함된다.
"대사 질환" 또는 "대사 장애"는 대사 기능에 있어서의 변화 또는 장애를 특징으로 하는 상태를 나타낸다. "대사성" 및 "대사"는 본 기술분야에서 잘 공지된 용어이며, 일반적으로 살아있는 유기체 내에서 일어나는 생화학적 과정의 전체 범위를 포함한다. 대사 질환 또는 장애에는 비만, 당뇨병, 고혈당증, 전당뇨병, 비-알코올성 지방간 질환 (NAFLD), 대사 증후군, 인슐린 내성, 당뇨병 이상지질혈증, 또는 고트리글리세라이드혈증 또는 이들의 조합이 포함되나, 이들로 제한되지는 않는다.
"대사 증후군"은 대사 기원의 지질 및 비-지질 심혈관 위험 인자들의 클러스터링 (clustering)을 특징으로 하는 상태를 의미한다. 어떤 구현예에서, 대사 증후군은 하기 인자들 중의 어떤 3 가지의 존재에 의해서 확인된다: 남성에게서 102 ㎝를 초과하거나 여성에게서 88 ㎝를 초과하는 허리 둘레; 적어도 150 ㎎/㎗의 혈청 트리글리세라이드; 남성에게서 40 ㎎/㎗ 미만 또는 여성에게서 50 ㎎/㎗ 미만의 HDL-C; 적어도 130/85 ㎜Hg의 혈압; 및 적어도 110 ㎎/㎗의 공복시 글루코스. 이들 결정인자는 임상 실무에서 쉽게 측정될 수 있다 (JAMA, 2001, 285: 2486-2497).
"미스매치 (mismatch)" 또는 "비-상보적 핵염기"는 제1 핵산의 핵염기가 제2 또는 표적 핵산의 상응하는 핵염기와 짝짓기 할 수 없는 경우를 나타낸다.
"혼합된 이상지질혈증"은 상승된 콜레스테롤 및 상승된 트리글리세라이드를 특징으로 하는 상태를 의미한다.
"변형된 뉴클레오사이드간 결합"은 천연적으로 존재하는 뉴클레오사이드간 결합 (즉, 포스포디에스테르 뉴클레오사이드간 결합)으로부터의 치환 또는 어떤 변화를 나타낸다.
"변형된 핵염기"는 아데닌, 시토신, 구아닌, 티미딘, 또는 우라실이 아닌 어떤 핵염기를 나타낸다. "비변형된 핵염기"는 퓨린 염기인 아데닌 (A) 및 구아닌 (G), 및 피리미딘 염기인 티민 (T), 시토신 (C), 및 우라실 (U)을 의미한다.
"변형된 뉴클레오사이드"는 독립적으로, 변형된 당 모이어티 또는 변형된 핵염기를 갖는 뉴클레오사이드를 의미한다.
"변형된 뉴클레오타이드"는 독립적으로, 변형된 당 모이어티, 변형된 뉴클레오사이드간 결합, 또는 변형된 핵염기를 갖는 뉴클레오타이드를 의미한다. "변형된 뉴클레오사이드"는 독립적으로, 변형된 당 모이어티 또는 변형된 핵염기를 갖는 뉴클레오사이드를 의미한다.
"변형된 올리고뉴클레오타이드"는 적어도 하나의 변형된 뉴클레오타이드를 포함하는 올리고뉴클레오타이드를 의미한다.
"변형된 당"은 천연 당으로부터의 치환 또는 변화를 나타낸다.
"모티프"는 안티센스 화합물 내의 화학적으로 구분되는 영역들의 패턴을 의미한다.
"천연적으로 존재하는 뉴클레오사이드간 결합"은 3' 내지 5' 포스포디에스테르 결합을 의미한다.
"천연 당 모이어티"는 DNA (2'-H) 또는 RNA (2'-OH)에서 발견되는 당을 의미한다.
"비-알코올성 지방간 질환" 또는 "NAFLD"는 과도한 알코올 사용 (예를 들어, 20 g/일 이상의 알코올 소비)에 기인하지 않는 간의 지방성 염증을 특징으로 하는 상태를 의미한다. 어떤 구현예에서, NAFLD는 인슐린 내성 및 대사 증후군과 관련된다. NAFLD는 간세포에서의 단순 트리글리세라이드 축적 (간 지방증)으로부터 염증 (지방간염), 섬유증, 및 경화증이 있는 간 지방증까지의 범위의 질환 스펙트럼을 포함한다.
"비-알코올성 지방간염" (NASH)은 트리글리세라이드의 침착을 넘어서는 NAFLD의 진행으로부터 일어난다. 괴사, 염증 및 섬유증을 유도할 수 있는 "제2 히트 (second hit)"가 NASH의 진화에 필요하다. 제2-히트의 후보는 광범한 카테고리로 그룹화될 수 있다: 산화적 스트레스를 야기하는 인자 및 전염증성 사이토킨의 발현을 촉진시키는 인자.
"핵산"은 모노머 뉴클레오타이드로 구성된 분자를 나타낸다. 핵산에는 리보핵산 (RNA), 데옥시리보핵산 (DNA), 단일-가닥 핵산, 이중-가닥 핵산, 소형 개입성 리보핵산 (siRNA), 및 마이크로RNAs (miRNA)가 포함된다. 핵산은 또한 단일 분자 내에 이들 요소의 조합을 포함할 수도 있다.
"핵염기"는 또 다른 핵산의 염기와 짝짓기 할 수 있는 헤테로사이클릭 모이어티를 의미한다.
"핵염기 서열"은 어떤 당, 결합 또는 핵염기 변형과도 무관한 인접 핵염기의 순서를 의미한다.
"뉴클레오사이드"는 당에 결합된 핵염기를 의미한다.
"뉴클레오사이드 모방체"는 당 또는 당 및 염기, 및 반드시는 아니지만 예를 들어, 모폴리노, 사이클로헥세닐, 사이클로헥실, 테트라하이드로피라닐, 바이사이클로 또는 트리사이클로 당 모방체, 예를 들어, 비-푸라노즈 당 유니트를 갖는 뉴클레오사이드 모방체와 같은 올리고머 화합물의 하나 또는 그 이상의 위치에서의 결합을 대체시키기 위해서 사용된 이들 구조를 포함한다.
"뉴클레오타이드"는 뉴클레오사이드의 당 부분에 공유적으로 결합된 포스페이트 그룹을 갖는 뉴클레오사이드를 의미한다.
"뉴클레오타이드 모방체"는 예를 들어, 펩타이드 핵산 또는 모르폴리노 (-N(H)-C(=O)-O- 또는 다른 비-포스포디에스테르 결합에 의해서 결합된 모르폴리노)과 같은 올리고머 화합물의 하나 또는 그 이상의 위치에서 뉴클레오사이드 및 결합을 대체시키기 위해서 사용된 이들 구조를 포함한다.
"올리고머 화합물" 또는 "올리고머"는 두 개 또는 그 이상의 하부-구조를 포함하며, 핵산 분자의 영역에 하이브리드화할 수 있는 폴리머 구조를 나타낸다. 어떤 구현예에서, 올리고머 화합물은 올리고뉴클레오사이드이다. 어떤 구현예에서, 올리고머 화합물은 올리고뉴클레오타이드이다. 어떤 구현예에서, 올리고머 화합물은 안티센스 화합물이다. 어떤 구현예에서, 올리고머 화합물은 안티센스 올리고뉴클레오타이드이다. 어떤 구현예에서, 올리고머 화합물은 키메릭 올리고뉴클레오타이드이다.
"올리고뉴클레오타이드"는 각각 서로 독립적으로 변형되거나 비변형될 수 있는 연결된 뉴클레오사이드의 폴리머를 의미한다.
"비경구 투여"는 주사 또는 주입에 의한 투여를 의미한다. 비경구 투여에는 피하 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 동맥내 투여, 복강내 투여, 또는 두개내 투여, 예를 들어, 척추강내 또는 뇌실내 투여가 포함된다. 투여는 연속적이거나, 만성적이거나, 단기간이거나 간헐적일 수 있다.
"펩타이드"는 아미드 결합에 의해 적어도 두 개의 아미노산을 결합시킴으로써 형성된 분자를 의미한다. 펩타이드는 폴리펩타이드 및 단백질을 나타낸다.
"약제학적 작용제"는 개체에게 투여하였을 때 치료학적 이점을 제공하는 물질을 의미한다. 예를 들어, 어떤 구현예에서, GCCR에 대해서 표적화된 안티센스 올리고뉴클레오타이드가 약제학적 작용제이다.
"약제학적 조성물"은 개체에게 투여하는데 적합한 물질의 혼합물을 의미한다. 예를 들어, 약제학적 조성물은 하나 또는 그 이상의 활성 작용제 및 멸균 수용액을 포함할 수 있다.
"약제학적으로 허용가능한 담체"는 올리고뉴클레오타이드의 구조를 저해하지 않는 매질 또는 희석제를 의미한다. 이러한 담체 중의 어떤 것은 약제학적 조성물을 예를 들어, 대상체에 의한 경구 섭취를 위한 정제, 환제, 당의정, 캅셀제, 액체, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁제 및 로젠지로 제제화되도록 할 수 있다. 예를 들어, 약제학적으로 허용가능한 담체는 멸균 수용액일 수 있다.
"약제학적으로 허용가능한 유도체"는 본 명세서에 기술된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 컨쥬게이트, 프로드럭 (prodrug) 또는 이성체를 포함한다.
"약제학적으로 허용가능한 염"은 안티센스 화합물의 생리적으로 및 약제학적으로 허용가능한 염, 즉, 모 올리고뉴클레오타이드의 원하는 생물학적 활성을 유지하며, 원치 않는 독물학적 효과를 그에 부여하지 않는 염을 의미한다.
"포스포로티오에이트 결합"은 포스포디에스테르 결합이 비-가교화 산소 원자들 중의 하나를 황 원자로 대체시킴으로써 변형된 뉴클레오사이드들 사이의 결합을 의미한다. 포스포로티오에이트 결합은 변형된 뉴클레오사이드간 결합이다.
"부분"은 핵산의 인접 (즉, 결합된) 핵염기의 규정된 수를 의미한다. 어떤 구현예에서, 부분은 표적 핵산의 인접 핵염기의 규정된 수이다. 어떤 구현예에서, 부분은 안티센스 화합물의 인접 핵염기의 규정된 수이다.
"예방하다"는 질환, 장애 또는 상태의 시작 또는 발생을 몇 분으로부터 무한대까지의 기간 동안 지연시키거나 미연에 방지하는 것을 나타낸다. 예방하는 것은 또한 질환, 장애 또는 상태가 발생할 위험을 감소시키는 것을 의미한다.
"프로드럭"은 내인성 효소 또는 다른 화학물질 또는 조건의 작용에 의해 신체 또는 그의 세포 내에서 활성 형태로 전환되는 불활성 형태로 제조된 치료제를 의미한다.
"부작용"은 원하는 효과 이외에 치료에 기인하는 생리적 반응을 의미한다. 어떤 구현예에서, 부작용은 주사 부위 반응, 간 기능 시험 이상, 신장 기능 이상, 간독성, 신장 독성, 중추신경계 이상, 근병증, 및 권태감을 포함한다. 예를 들어, 혈청 내의 증가된 아미노트랜스페라제 수준은 간독성 또는 간 기능 이상을 나타낼 수 있다. 예를 들어, 증가된 빌리루빈은 간독성 또는 간 기능 이상을 나타낼 수 있다.
"단일-가닥 올리고뉴클레오타이드"는 상보적 가닥에 하이브리드화되지 않은 올리고뉴클레오타이드를 의미한다.
"특이적으로 하이브리드할 수 있는"은 특이적 결합이 바람직한 조건 하에서, 즉 생체내 검정 및 치료학적 치료의 경우에는 생리적 조건 하에서, 비-표적 핵산에 대해서는 최소의 효과를 나타내거나 효과를 나타내지 않으면서, 안티센스 올리고뉴클레오타이드와 표적 핵산 사이에 원하는 효과를 유도하기에 충분한 정도의 상보성을 갖는 안티센스 화합물을 나타낸다.
"스타틴"은 HMG-CoA 환원효소의 활성을 억제하는 작용제를 의미한다.
"피하 투여"는 피부의 바로 아래에 투여하는 것을 의미한다.
"표적화" 또는 "표적화된"은 표적 핵산에 특이적으로 하이브리드화하여 원하는 효과를 유도할 안티센스 화합물의 설계 및 선택의 과정을 의미한다.
"표적 핵산", "표적 RNA", 및 "표적 RNA 전사체"는 모두 안티센스 화합물에 의해서 표적화될 수 있는 핵산을 나타낸다.
"표적 분절"은 안티센스 화합물이 표적화되는 표적 핵산의 뉴클레오타이드의 서열을 의미한다. "5' 표적 부위"는 표적 분절의 5'-모스트 뉴클레오타이드를 나타낸다. "3' 표적 부위"는 표적 분절의 3'-모스트 뉴클레오타이드를 나타낸다.
"치료학적 유효량"은 개체에게 치료학적 이점을 제공하는 작용제의 양을 의미한다.
"치료학적 생활방식 변화"는 지방/지방 조직 질량 및/또는 콜레스테롤을 저하시키도록 의도된 식이 및 생활방식 변화를 의미한다. 이러한 변화는 심장 질환이 발생할 위험을 감소시킬 수 있으며, 총 1일 칼로리, 총 지방, 포화 지방, 다중불포화 지방, 모노불포화 지방, 탄수화물, 단백질, 콜레스테롤, 불용성 섬유의 식이성 섭취에 대한 추천뿐만 아니라 신체 활동에 대한 추천을 포함할 수 있다.
"트리글리세라이드" 또는 "TG"는 3 개의 지방산 분자와 조합된 글리세롤로 구성된 지질 또는 중성 지방을 의미한다.
"제2형 당뇨병" (또한, "제2형 진성 당뇨병" 또는 "진성 당뇨병, 제2형"으로 공지되며, 이전에는 "진성 당뇨병 제2형", "비-인슐린-의존성 당뇨병 (NIDDM)", "비만 관련된 당뇨병", 또는 "성년-발병 당뇨병"으로 불림)은 주로 인슐린 내성, 상대적 인슐린 결핍, 및 고혈당증을 특징으로 하는 대사 장애이다.
"치료하다"는 질환, 장애 또는 상태의 변경 또는 개선을 달성하기 위해서 동물에게 약제학적 조성물을 투여하는 것을 나타낸다.
"비변형 뉴클레오타이드"는 천연적으로 존재하는 핵염기, 당 모이어티, 및 뉴클레오사이드간 결합으로 구성된 뉴클레오타이드 화합물을 의미한다. 어떤 구현예에서, 비변형 뉴클레오타이드는 RNA 뉴클레오타이드 (즉, β-D-리보뉴클레오사이드) 또는 DNA 뉴클레오타이드 (즉, β-D-데옥시리보뉴클레오사이드)이다.
어떤 구현예
어떤 구현예는 GCCR 발현을 억제하는 방법, 화합물, 및 조성물을 제공한다.
어떤 구현예는 GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물을 제공한다. 어떤 구현예에서, GCCR 핵산 서열은 인간 서열이다. 어떤 구현예에서, GCCR 핵산은 뉴클레오타이드 3818000 내지 3980000 (서열번호: 1로서 본원에서 포함됨)로부터 끝이 잘린 유전자은행 승인 번호 NT_029289.10의 보체이다. 어떤 구현예에서, GCCR 핵산은 붉은털원숭이 서열. 어떤 구현예에서, GCCR 핵산 서열은 뉴클레오타이드 1334000 내지 1491000 (서열번호: 2로서 본원에서 포함됨)로부터 끝이 잘린 유전자은행 승인 번호: NW_001120987.1의 보체이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 12 내지 30 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 임의의 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 임의의 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 ISIS 번호: 420470, 420476, 426130, 426183, 426261, 426262, 426115, 426168, 426246, 426172, 426325, 및 426267이거나, 그것을 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본 화합물 또는 조성물은 ISIS NO: 426115이거나 그것을 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 15 내지 30 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 15 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 임의의 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 15 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 임의의 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 ISIS 번호: 420470, 420476, 426130, 426183, 426261, 426262, 426115, 426168, 426246, 426172, 426325, 및 426267이거나 그것을 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 15 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 ISIS NO: 426115이거나 그것을 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 16 내지 21 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 16 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 임의의 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 16 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 임의의 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 16 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 임의의 서열번호: 1 및 2의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 17 내지 35 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어질 수 있고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 17 내지 30 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 30 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 30 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 30 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 17 내지 25 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 25 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 25 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 25 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 기재된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 17 내지 24 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 24 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 24 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 24 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 17 내지 23 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 23 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 23 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 23 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 17 내지 22 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 22 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 22 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 22 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 17 내지 21 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 17 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 20 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1 또는 2 또는 둘 모두의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 핵염기 서열을 갖는 20 개의 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 4-56의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 서열번호: 36의 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 변형된 올리고뉴클레오타이드의 염을 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 추가로 포함한다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드의 핵염기 서열은 변형된 올리고뉴클레오타이드의 전체에 걸쳐 측정된 바와 같이 서열번호: 1 및 2의 임의의 하나에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 상보적이다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드의 핵염기 서열은 변형된 올리고뉴클레오타이드의 전체에 걸쳐 측정된 바와 같이 서열번호: 4-56의 임의의 하나에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 동일성을 갖는다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드의 핵염기 서열은 변형된 올리고뉴클레오타이드의 전체에 걸쳐 측정된 바와 같이 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 임의의 하나에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 동일성을 갖는다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드의 핵염기 서열은 변형된 올리고뉴클레오타이드의 전체에 걸쳐 측정된 바와 같이 서열번호: 36에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 동일성을 갖는다.
어떤 구현예에서, 안티센스 화합물 또는 변형된 올리고뉴클레오타이드는 GCCR 핵산의 영역을 표적으로 한다. 어떤 구현예에서, GCCR 핵산의 영역에 표적화된 그와 같은 화합물 또는 올리고뉴클레오타이드는 영역의 동등 길이 핵염기 부분에 대해 상보적인 인접 핵염기 부분을 갖는다. 예를 들면, 상기 부분은 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 개의 인접 핵염기일 수 있다. 그와 같은 부분은 본원에서 인용된 영역의 동등 길이 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 그와 같은 화합물 또는 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1의 하기 뉴클레오타이드 영역을 표적으로 한다: 33116-33135, 33296-33315, 33673-33692, 33716-33755, 33716-33751, 33716-33735, 33732-33755, 33732-33755, 33736-33755, 37217-37236, 51878-51898, 51878-51897, 51879-51898, 57825-57846, 57825-57844, 57827-57846, 59951-59978, 59951-59975, 59951-59974, 59951-59971, 59951-59970, 59952-59978, 59952-59975, 59952-59974, 59952-59971, 59955-59978, 59955-59975, 59955-59974, 59956-59978, 59956-59975, 59959-59978, 60935-60958, 60935-60956, 60935-60955, 60935-60954, 60936-60958, 60936-60956, 60936-60955, 60937-60958, 60937-60956, 60939-60958, 63677-63698, 63677-63697, 63677-63696, 63678-63698, 63678-63697, 63679-63698, 65938-65961, 65938-65960, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65961, 65939-65960, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65961, 65940-65960, 65940-65959, 65941-65961, 65941-65960, 65942-65961, 76224-76248, 76224-76247, 76224-76246, 76224-76244, 76224-76243, 76225-76248, 76225-76247, 76225-76246, 76225-76244, 76227-76248, 76227-76247, 76227-76246, 76228-76248, 76228-76247, 76229-76248, 95513-95538, 95513-95537, 95513-95532, 95518-95538, 95518-95537, 95519-95538, 104247-104266, 109346-109368, 109346-109366, 109346-109365, 109347-109368, 109347-109366, 109349-109368, 109473-109492, 112218-112242, 112218-112241, 112218-122240, 112218-112239, 112218-112238, 112218-112237, 112219-112242, 112219-112241, 112219-112240, 112219-112239, 112219-112238, 112220-112242, 112220-112241, 112220-112240, 112220-112239, 112221-112242, 112221-112241, 112221-112240, 112222-112242, 112222-112241, 112223-112242, 114154-114178, 114154-114177, 114154-114176, 114154-114175, 114154-114174, 114154-114173, 114155-114178, 114155-114177, 114155-114176, 114155-114175, 114155-114174, 114156-114178, 114156-114177, 114156-114176, 114156-114175, 114157-114178, 114157-114177, 114157-114176, 114158-114178, 114158-114177, 114159-114178, 114587-114610, 114587-114609, 114587-114608, 114587-114606, 114589-114610, 114589-114609, 114589-114608, 114590-114610, 114590-114609, 114591-114610, 139287-139306, 143259-143280, 143259-143279, 143259-143278, 143260-143280, 143260-143279, 143261-143280, 143737-143757, 143737-143756, 및 143738-143757.
어떤 구현예에서, 안티센스 화합물 또는 변형된 올리고뉴클레오타이드는 GCCR 핵산의 영역을 표적으로 한다. 어떤 구현예에서, GCCR 핵산의 영역에 표적화된 그와 같은 화합물 또는 올리고뉴클레오타이드는 영역의 동등 길이 핵염기 부분에 대해 상보적인 인접 핵염기 부분을 갖는다. 예를 들면, 상기 부분은 본원에서 인용된 영역의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 개의 인접 핵염기 부분일 수 있다. 어떤 구현예에서, 그와 같은 화합물 또는 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1의 하기 뉴클레오타이드 영역을 표적으로 한다: 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예에서, 안티센스 화합물 또는 변형된 올리고뉴클레오타이드는 GCCR 핵산의 영역을 표적으로 한다. 어떤 구현예에서, GCCR 핵산의 영역에 표적화된 그와 같은 화합물 또는 올리고뉴클레오타이드는 영역의 동등 길이 핵염기 부분에 대해 상보적인 인접 핵염기 부분을 갖는다. 예를 들면, 상기 부분은 본원에서 인용된 영역의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 개의 인접 핵염기 부분일 수 있다. 어떤 구현예에서, 그와 같은 화합물 또는 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1의 하기 뉴클레오타이드 영역을 표적으로 한다: 65940-65959.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 55% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 361137, 361141, 361151, 361155, 361156, 377131, 414641, 414648, 414681, 420450, 420470, 420476, 420479, 420488, 420493, 420522, 420599, 420634, 420644, 420764, 426110, 426115, 426116, 426117, 426128, 426136, 426142, 426143, 426161, 426172, 426177, 426183, 426187, 426189, 426246, 426255, 426261, 426262, 426263, 426264, 426325, 및 426345.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 60% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 361137, 361141, 361151, 361155, 361156, 377131, 414641, 414648, 414681, 420450, 420470, 420476, 420479, 420488, 420493, 420522, 420599, 420634, 420644, 420764, 426110, 426115, 426116, 426117, 426128, 426143, 426177, 426183, 426187, 426246, 426255, 426261, 및 426262.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 65% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 361137, 361141, 361151, 361155, 361156, 377131, 414641, 414648, 414681, 420450, 420470, 420476, 420479, 420488, 420493, 420522, 420599, 420634, 420644, 420764, 426110, 426115, 426117, 426128, 426143, 426177, 426183, 426187, 426246, 426255, 및 426261.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 70% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 361137, 361155, 361156, 377131, 414641, 414648, 414681, 420450, 420470, 420476, 420479, 420488, 420493, 420522, 420599, 420634, 420644, 420764, 426115, 426117, 426128, 426183, 및 426261.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 75% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 361137, 361155, 377131, 414641, 414681, 420450, 420470, 420476, 420488, 420493, 420522, 420599, 420634, 420644, 및 420764.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 80% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 377131, 414641, 414681, 420450, 420476, 및 420634.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 85% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 414681, 420450, 420476, 및 420634.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 전달감염을 위한 전기천공을 사용하여 3 μM 미만의 IC50 값을 실증한다: ISIS 번호: 377131, 414641, 414681, 420450, 420470, 420476, 420493, 420522, 420599, 420644, 426110, 426115, 426116, 426117, 426119, 426124, 426128, 426130, 426131, 426136, 426137, 426142, 426143, 426144, 426150, 426157, 426161, 426168, 426171, 426172, 426177, 426183, 426185, 426187, 426189, 426199, 426203, 426229, 426246, 426255, 426261, 426262, 426263, 426264, 426267, 426281, 426301, 426302, 426306, 426323, 426324, 426325, 426343, 426345, 426346, 426347, 426401, 426403, 426404, 및 426405.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 전달감염을 위한 전기천공을 사용하여 2 μM 미만의 IC50 값을 실증한다: ISIS 번호: 377131, 414641, 414681, 420450, 420470, 420476, 420493, 420522, 420599, 420644, 426110, 426115, 426116, 426117, 426119, 426128, 426130, 426136, 426137, 426142, 426143, 426144, 426150, 426157, 426168, 426171, 426172, 426183, 426185, 426189, 426203, 426246, 426261, 426262, 426263, 426264, 426267, 426281, 426301, 426324, 426325, 426345, 및 426347.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 전달감염을 위한 전기천공을 사용하여 1 μM 미만의 IC50 값을 실증한다: ISIS 번호: 426115, 426128, 426172, 426261, 및 426325.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 전달감염제로서 리포펙신을 사용하여 50 nM 미만의 IC50 값을 실증한다: ISIS 번호: 377131, 414641, 414648, 414681, 420450, 420470, 420488, 420493, 420522, 420599, 420644, 426110, 426115, 426116, 426117, 426119, 426124, 426128, 426130, 426131, 426136, 426137, 426142, 426143, 426144, 426150, 426157, 426161, 426168, 426171, 426172, 426177, 426183, 426185, 426187, 426189, 426199, 426203, 426216, 426229, 426246, 426255, 426261, 426262, 426263, 426264, 426267, 426276, 426281, 426293, 426301, 426302, 426306, 426323, 426324, 426325, 426331, 426334, 426336, 426337, 426343, 426344, 426345, 426347, 426390, 426401, 426402, 426403, 426404, 및 426405.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 전달감염제로서 리포펙신을 사용하여 40 nM 미만의 IC50 값을 실증한다: ISIS 번호: 377131, 414641, 414681, 420450, 420493, 420522, 420599, 420644, 426110, 426115, 426116, 426117, 426119, 426124, 426128, 426130, 426131, 426142, 426143, 426157, 426168, 426171, 426172, 426177, 426183, 426185, 426187, 426189, 426199, 426203, 426216, 426246, 426255, 426261, 426262, 426263, 426264, 426267, 426276, 426281, 426293, 426301, 426302, 426306, 426324, 426331, 426336, 426337, 426343, 426344, 426345, 426347, 426401, 426402, 426403, 426404, 및 426405.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 전달감염제로서 리포펙신을 사용하여 30 nM 미만의 IC50 값을 실증한다: ISIS 번호: 414641, 420493, 420599, 426110, 426115, 426116, 426117, 426130, 426131, 426168, 426171, 426172, 426177, 426183, 426185, 426187, 426189, 426246, 426255, 426261, 426262, 426263, 426264, 426324, 426344, 426345, 및 426402.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 전달감염제로서 리포펙신을 사용하여 20 nM 미만의 IC50 값을 실증한다: ISIS 번호: 414641, 426110, 426115, 426116, 426117, 426172, 426177, 426183, 426187, 426255, 426262, 및 426263.
어떤 구현예는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공하고 여기서 상기 연결된 뉴클레오사이드는 하기로부터 선택된 영역 내에 동등 길이 핵염기 부분에 대해 상보적인 적어도 8 개의 인접 핵염기 부분을 포함한다: 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532. 어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기로부터 선택된 영역 내에 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 9, 적어도 10, 적어도 11, 적어도 12, 적어도 13, 적어도 14, 적어도 15, 적어도 16, 적어도 17, 적어도 18, 또는 적어도 19 개의 인접 핵염기 부분을 갖는다: 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532. 어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산 예를 들면 서열번호: 1에 대해 90%, 95%, 99%, 또는 100% 상보적이다.
어떤 구현예는 하기로부터 선택된 영역 내에 60% 상보적인 적어도 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다: 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예는 하기로부터 선택된 영역 내에 70% 상보적인 적어도 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다: 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예는 하기로부터 선택된 영역 내에 80% 상보적인 적어도 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다: 서열번호: 1의 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예는 하기로부터 선택된 영역 내에 90% 상보적인 적어도 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다: 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예는 하기로부터 선택된 영역 내에 95% 상보적인 적어도 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다: 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예는 하기로부터 선택된 영역 내에 99% 상보적인 적어도 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다: 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예는 하기로부터 선택된 영역 내에 100% 상보적인 적어도 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다: 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 65940-65959 내에 60% 상보적인 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다.
어떤 구현예는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 65940-65959 내에 70% 상보적인 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다.
어떤 구현예는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 65940-65959 내에 80% 상보적인 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다.
어떤 구현예는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 65940-65959 내에 90% 상보적인 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다.
어떤 구현예는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 65940-65959 내에 95% 상보적인 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다.
어떤 구현예는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 65940-65959 내에 99% 상보적인 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다.
어떤 구현예는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 65940-65959 내에 100% 상보적인 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 제공한다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산의 영역에 표적화된 그와 같은 화합물 또는 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1의 영역 65940-65959의 동등 길이 핵염기 부분에 대해 상보적인 인접 핵염기 부분을 갖는다.
어떤 구현예에서, 서열번호: 1의 하기 뉴클레오타이드 영역은, 안티센스 화합물 또는 올리고뉴클레오타이드에 의해 표적화될 때, 적어도 65% 억제를 나타낸다: 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65959, 65938-65958, 65938-65957, 65939-65959, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 55% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 30, 31, 35, 36, 37, 38, 42, 43, 45, 48, 54, 및 56.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 60% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 31, 35, 36, 37, 38, 및 45.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 65% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 31, 36, 38, 및 45.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 70% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 20, 21, 22, 23, 24, 36, 및 38.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 75% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 4, 5, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 20, 및 22.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 80% 억제를 실증한다: ISIS 번호: 4, 5, 7, 13, 16, 및 22.
어떤 구현예에서, 하기 안티센스 화합물은 서열번호: 1의 영역, 인간 GCCR을 인코딩하는 핵산을 표적으로 하고 GCCR 발현의 적어도 85% 억제를 실증한다: 5, 7, 13, 및 16.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물은 ISIS 번호: 361137, 361141, 361151, 361156, 377131, 361143, 및 361155보다 더 큰 치료 잠재성을 갖는다 (참고로 본원에 포함도히어 있는 PCT 공개 번호 WO 2007/035759에서 개시됨). 어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물은 하기보다 더 나은 시험관내 억제를 갖는다: ISIS 번호: 361137, 361141, 361151, 361156, 377131, 361143, 및 361155. 어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물은 하기보다 더 나은 생체내 억제를 갖는다: ISIS 번호: 361137, 361141, 361151, 361156, 377131, 361143, 및 361155. 어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물은 하기보다 더 나은 내성 프로파일을 갖는다: ISIS 번호: 361137, 361141, 361151, 361156, 377131, 361143, 및 361155.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물은 단일가닥 변형된 올리고뉴클레오타이드로 이루어진다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34 또는 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진다. 어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진다. 어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진다. 어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 19 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진다. 어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 18 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진다. 어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진다. 어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 16 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드의 적어도 하나의 뉴클레오사이드간 결합은 변형된 뉴클레오사이드간 결합이다. 어떤 구현예에서, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 뉴클레오사이드간 결합이다.
어떤 구현예에서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 적어도 하나의 뉴클레오사이드는 변형된 핵염기를 포함한다. 어떤 구현예에서, 변형된 핵염기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에서 배치되고 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드는 변형된 당을 포함한다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드, 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절, 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절, 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절로 이루어지고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신은 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드, 14 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절, 3 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절, 3 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절로 이루어지고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신은 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 변형된 올리고뉴클레오타이드는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드, 13 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절, 2 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절, 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절로 이루어지고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신은 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 임의의 서열번호: 1 및 2의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 8 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에서 배치되고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 임의의 서열번호: 1의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 8 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에서 배치되고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43의 적어도 19 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에서 배치되고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 36의 적어도 19 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에서 배치되고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 36의 적어도 19 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 4 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 4 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에서 배치되고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호 1 및 2의 임의 것의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 8 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 14 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 3 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 3 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에서 배치되고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 1의 임의의 것의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 8 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 13 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 2 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에 배치되고, 각각의 윙 분절의 각 뉴클레오사이드는 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각 뉴클레오사이드간 열결은 포스포로티오에이트 연결이고 각 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43 의 적어도 19 개의 인접 핵염기 를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에 배치되고, 각각의 윙 분절의 각 뉴클레오사이드는 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각 뉴클레오사이드간 열결은 포스포로티오에이트 연결이고 각 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 36의 적어도 19 개의 인접 핵염기 를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에 배치되고, 각각의 윙 분절의 각 뉴클레오사이드는 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각 뉴클레오사이드간 열결은 포스포로티오에이트 연결이고 각 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 서열번호: 36의 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하고 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 하기를 포함한다: a) 10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절; b) 5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및 c) 6 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절. 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에서 배치되고, 각각의 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이고 각각의 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다.
어떤 구현예는 GCCR 발현을 억제하는 방법, 화합물, 및 조성물을 제공한다.
어떤 구현예는 동물에서 GCCR 발현을 감소시키는 방법을 제공하고, 이 방법은 상기 동물에게 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 15 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 18 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 17 내지 25 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 17 내지 24 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 17 내지 23 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 17 내지 22 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 17 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 20 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 20 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다.
어떤 구현예는 동물에서 대사 질환을 예방, 개선 또는 치료하는 방법을 제공하고 상기 방법은 상기 동물에게 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 20 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 대사 질환 또는 장애의 예는, 비제한적으로 당뇨병, 고혈당증, 준당뇨병, 비만, 비-알코올성 지방간 질환 (NAFLD), 대사 증후군, 인슐린 내성, 당뇨병 이상지질혈증, 또는 초고트리글리세라이드혈증 또는 이들의 조합을 포함한다.
어떤 구현예는 동물에서 비만을 예방, 개선 또는 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 상기 동물에게 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 20 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 20 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물 또는 조성물은 ISIS 번호: 420470, 420476, 426130, 426183, 426261, 426262, 426115, 426168, 426246, 426172, 426325, 및 426267의 화합물을 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물 또는 조성물은 ISIS 번호: 426115의 화합물을 포함한다.
어떤 구현예는 동물에서 체중을 감소시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 상기 동물에게 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 20 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 동물의 체중 감소는 대사 질환을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물의 체중 감소는 당뇨병을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물의 체중 감소는 비만을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물의 체중 감소는 대사 증후군을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물의 체중 감소는 인슐린 내성을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물의 체중 감소는 고혈당증을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물의 체중 감소는 NAFLD을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물의 체중 감소는 당뇨병 이상지질혈증을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 글루코스 수준은 적어도 5%, 10%, 20%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%까지 감소된다.
어떤 구현예는 동물에서 글루코스 수준을 감소시키는 방법을 제공하고 상기 방법은 상기 동물에게 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 GCCR에 대해 표적화된 길이에서 변형된 올리고뉴클레오타이드 20 개의 연결된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 동물에서의 글루코스 수준의 감소는 대사 질환을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물에서의 글루코스 수준의 감소는 당뇨병을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물에서의 글루코스 수준의 감소는 비만을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물에서의 글루코스 수준의 감소는 대사 증후군을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물에서의 글루코스 수준의 감소는 인슐린 내성을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물에서의 글루코스 수준의 감소는 고혈당증을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물에서의 글루코스 수준의 감소는 NAFLD을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 동물에서의 글루코스 수준의 감소는 당뇨병 이상지질혈증을 예방, 개선 또는 치료한다. 어떤 구현예에서, 글루코스 수준은 적어도 5%, 10%, 20%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%까지 감소된다.
어떤 구현예에서, GCCR은 유전자은행 승인 번호의 임의의 것에서 제시된 인간 서열을 갖는다: 뉴클레오타이드 3818000 내지 3980000 (서열번호: 1로서 본원에서 포함됨)로부터 끝이 잘린 유전자은행 승인 번호 NT_029289.10의 보체. 어떤 구현예에서, GCCR은 뉴클레오타이드 1334000 내지 1491000 (서열번호: 2로서 본원에서 포함됨)로부터 끝이 잘린 유전자은행 승인 번호 NW_001120987.1의 보체에서 제시된 붉은털원숭이 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 그의 염, 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 조성물은 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43에서 인용된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 변형된 올리고뉴클레오타이드 또는 그의 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 조성물은 20 내지 25 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43에서 인용된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기을 포함하는 핵염기 서열을 포함하는 변형된 올리고뉴클레오타이드 또는 그의 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 조성물은 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43에서 인용된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는변형된 올리고뉴클레오타이드 또는 그의 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물 또는 조성물은 그의 염, 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 조성물은 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 36에서 인용된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 변형된 올리고뉴클레오타이드 또는 그의 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 조성물은 17 내지 25 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 36에서 인용된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 변형된 올리고뉴클레오타이드 또는 그의 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 조성물은 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 36에서 인용된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 변형된 올리고뉴클레오타이드 또는 그의 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다.
어떤 구현예는 하기를 포함하는, GCCR 관련된 질환 또는 병태가 있는 동물을 치료하는 방법을 제공한다: a) GCCR 관련된 질환 또는 병태가 있는 상기 동물을 확인하는 단계, 및 b) 상기 동물에게 치료적으로 유효량의 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 단계로서, 상기 올리고뉴클레오타이드는 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 전체에 걸쳐 측정된 바와 같이 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 임의의 서열번호: 1 및 2에 대해 적어도 90% 상보적 핵염기 서열을 갖는 단계. 어떤 구현예에서, 동물에게 투여된 치료적으로 유효량의 화합물은 동물에서 GCCR 관련된 질환 또는 병태, 또는 그의 증상을 치료 또는 감소시킨다. 어떤 구현예에서, GCCR 관련된 질환 또는 병태는 비만이다. 어떤 구현예에서, GCCR 관련된 질환 또는 병태는 당뇨병이다.
어떤 구현예는 하기를 포함하는, GCCR 관련된 질환 또는 병태가 있는 동물을 치료하는 방법을 제공한다: a) GCCR 관련된 질환 또는 병태가 있는 상기 동물을 확인하는 단계, 및 b) 상기 동물에게 치료적으로 유효량의 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 단계로서, 상기올리고뉴클레오타이드는 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 전체에 걸쳐 측정된 바와 같이 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 임의의 서열번호: 1 및 2에 대해 100% 상보적인 핵염기 서열을 갖는 단계. 어떤 구현예에서, 동물에게 투여된 치료적으로 유효량의 화합물은 동물에서 GCCR 관련된 질환 또는 병태, 또는 그의 증상을 치료 또는 감소시킨다. 어떤 구현예에서, GCCR 관련된 질환 또는 병태는 비만이다. 어떤 구현예에서, GCCR 관련된 질환 또는 병태는 당뇨병이다.
어떤 구현예는 대사 질환을 치료, 예방, 또는 개선하는 방법을 제공한다. 어떤 구현예에서 대사 질환은 비만, 당뇨병, 고혈당증, 준당뇨병, 비-알코올성 지방간 질환 (NAFLD), 대사 증후군, 인슐린 내성, 당뇨병 이상지질혈증, 또는 초고트리글리세라이드혈증 또는 이들의 조합이다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 동물에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 어떤 구현예에서, 본 방법은 동물에게, 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43에서 인용된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 변형된 올리고뉴클레오타이드를 투여하는 것을 포함한다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 동물에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 어떤 구현예에서, 본 방법은 동물에게, 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42, 및 43에서 인용된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 변형된 올리고뉴클레오타이드를 투여하는 것을 포함한다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 동물에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 어떤 구현예에서, 본 방법은 동물에게, 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어지고 서열번호: 36에서 인용된 핵염기 서열 중으로부터 선택된 핵염기 서열의 적어도 20 개의 인접 핵염기를 포함하는 핵염기 서열을 갖는 변형된 올리고뉴클레오타이드를 투여하는 것을 포함한다.
어떤 구현예에서, 동물은 인간이다.
어떤 구현예에서, 상기 투여는 본원에 기재된 바와 같이 대사 질환의 진행을 예방, 치료, 개선, 또는 느리게 한다.
어떤 구현예에서, 상기 투여는 본원에 기재된 바와 같이 비만의 진행을 예방, 치료, 개선, 또는 느리게 한다.
어떤 구현예에서, 상기 투여는 본원에 기재된 바와 같이 당뇨병의 진행을 예방, 치료, 개선, 또는 느리게 한다.
어떤 구현예에서, 화합물은 제 2 제제와 함께 공투여된다.
어떤 구현예에서, 화합물 및 제 2 제제는 수반하여 투여된다.
어떤 구현예에서, 투여는 비경구 투여이다.
어떤 구현예는 또한, 동물에서 GCCR mRNA 또는 단백질 발현을 감소시키기 위한 방법을 제공하고, 상기 방법은 상기 동물에게 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하여 동물에서 GCCR mRNA 또는 단백질 발현을 감소시키는 것을 포함한다. 어떤 구현예에서, 동물은 인간이다. 어떤 구현예에서, GCCR mRNA 또는 단백질 발현의 감소는 대사 질환의 진행을 예방, 치료, 개선 또는 느리게 한다. 어떤 구현예에서, 대사 질환 또는 병태는 당뇨병이다. 어떤 구현예에서, 대사 질환 또는 병태는 비만이다.
어떤 구현예는 대사 질환이 있는 인간을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 질환에 있는 상기 인간을 확인하는 단계 및 인간에게 치료적으로 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 어떤 구현예에서, 치료는 대사 증후군, 고혈당증, 초고트리글리세라이드혈증, 고혈압, 증가된 글루코스 수준, 증가된 인슐린 내성, 감소된 인슐린 민감도, 정상 체중 초과, 및/또는 정상 체지방 초과 또는 이들의 임의 조합으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 증상을 감소시킨다.
어떤 구현예는 비만인 인간을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 질환에 있는 상기 인간을 확인하는 단계 및 인간에게 치료적으로 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 어떤 구현예에서, 치료는 대사 증후군, 고혈당증, 초고트리글리세라이드혈증, 고혈압, 증가된 글루코스 수준, 증가된 인슐린 내성, 감소된 인슐린 민감도, 정상 체중 초과, 및/또는 정상 체지방 초과 또는 이들의 임의 조합으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 증상을 감소시킨다.
어떤 구현예는 당뇨병이 있는 인간을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 질환에 있는 상기 인간을 확인하는 단계 및 인간에게 치료적으로 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 어떤 구현예에서, 치료는 대사 증후군, 고혈당증, 초고트리글리세라이드혈증, 고혈압, 증가된 글루코스 수준, 증가된 인슐린 내성, 감소된 인슐린 민감도, 정상 체중 초과, 및/또는 정상 체지방 초과 또는 이들의 임의 조합으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 증상을 감소시킨다.
인간에게 치료적으로 효과적인 양의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하고, 그렇게 함으로써 대사 질환을 감소 또는 예방하는 것을 포함하는, 대사 질환을 감소 또는 예방하는 방법이 추가로 제공된다.
인간에게 치료적으로 효과적인 양의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하고, 그렇게 함으로써 단백질을 감소 또는 예방하는 방법을 포함하는, 비만을 감소 또는 예방하는 방법이 추가로 제공된다.
인간에게 치료적으로 효과적인 양의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하고, 그렇게 함으로써 당뇨병 감소 또는 예방하는 방법을 포함하는, 당요병을 감소 또는 예방하는 방법이 추가로 제공된다.
대사 질환의 증상을 개선하는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 인간의 대사 질환의 증상을 개선하는 것을 포함한다.
당뇨병의 증상을 개선하는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 인간의 당뇨병의 증상을 개선하는 것을 포함한다.
대사 질환의 증상을 개선하는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로서, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 인간의 대사 질환의 증상을 개선하는 것을 포함한다.
당뇨병의 증상을 개선하는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로서, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 인간의 당뇨병의 증상을 개선하는 것을 포함한다.
대사 질환의 증상을 개선하는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로서, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 인간의 대사 질환의 증상을 개선하는 것을 포함한다.
당뇨병의 증상을 개선하는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로서, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 인간의 당뇨병의 증상을 개선하는 것을 포함한다.
대사 질환과 연관된 증상의 진행 속도를 감소시키는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 20 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 진행 속도 인간의 대사 질환의 증상을 감소시키는 것을 포함한다.
당뇨병과 연관된 증상의 진행 속도를 감소시키는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 17 내지 35 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 인간의 당뇨병의 증상의 진행 속도를 감소시키는 것을 포함한다.
대사 질환과 연관된 증상의 진행 속도를 감소시키는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로서, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 진행 속도 인간의 대사 질환의 증상을 감소시키는 것을 포함한다.
당뇨병과 연관된 증상의 진행 속도를 감소시키는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로서, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 진행 속도 인간의 당뇨병의 증상을 감소시키는 것을 포함한다.
대사 질환과 연관된 증상의 진행 속도를 감소시키는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로서, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 진행 속도 인간의 대사 질환의 증상을 감소시키는 것을 포함한다.
당뇨병과 연관된 증상의 진행 속도를 감소시키는 방법이 추가로 제공되고, 상기 방법은 필요한 인간에게, 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것으로서, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1 또는 2와 특이적으로 하이브리드화되고, 그렇게 함으로써 진행 속도 인간의 당뇨병의 증상을 감소시키는 것을 포함한다.
대사 질환의 치료, 예방, 또는 개선용 약제의 제조를 위한 방법 및 화합물이 또한 제공된다.
비만의 치료, 예방, 또는 개선용 약제의 제조를 위한 방법 및 화합물이 또한 제공된다.
당뇨병의 치료, 예방, 또는 개선용 약제의 제조를 위한 방법 및 화합물이 또한 제공된다.
대사 증후군의 치료, 예방, 또는 개선용 약제의 제조를 위한 방법 및 화합물이 또한 제공된다.
어떤 구현예는 대사 질환을 치료, 개선, 또는 예방을 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
어떤 구현예는 비만을 치료, 개선, 또는 예방을 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
어떤 구현예는 당뇨병을 치료, 개선, 또는 예방을 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
어떤 구현예는 대사 증후군을 치료, 개선, 또는 예방을 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법과의 병용 요법으로 본원에 기재된 바와 같은 대사 질환을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 제공한다. 제제 또는 요법은 공투여되거나 수반하여 투여될 수 있다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법과의 병용 요법으로 본원에 기재된 바와 같은 당뇨병을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 제공한다. 제제 또는 요법은 공투여되거나 수반하여 투여될 수 있다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법과의 병용 요법으로 본원에 기재된 바와 같은 대사 질환을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다. 제제 또는 요법은 공투여되거나 수반하여 투여될 수 있다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법과의 병용 요법으로 본원에 기재된 바와 같은 비만을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다. 제제 또는 요법은 공투여되거나 수반하여 투여될 수 있다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법과의 병용 요법으로 본원에 기재된 바와 같은 당뇨병을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다. 제제 또는 요법은 공투여되거나 수반하여 투여될 수 있다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법과의 병용 요법으로 본원에 기재된 바와 같은 당뇨병을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다. 제제 또는 요법은 공투여되거나 수반하여 투여될 수 있다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법이 차후에 투여되는 환자에서 본원에 기재된 바와 같은 대사 질환을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법이 차후에 투여되는 환자에서 본원에 기재된 바와 같은 비만을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법이 차후에 투여되는 환자에서 본원에 기재된 바와 같은 당뇨병을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법이 차후에 투여되는 환자에서 본원에 기재된 바와 같은 대사 증후군을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 약제의 제조에서의 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 용도를 제공한다.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 대사 질환을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 키트를 제공하고, 상기 키트는 하기를 포함한다:
(i) 본원에 기재된 바와 같은 화합물; 및 대안적으로
(ii) 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 비만을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 키트를 제공하고, 상기 키트는 하기를 포함한다:
(i) 본원에 기재된 바와 같은 화합물; 및 대안적으로
(ii) 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 당뇨병을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 키트를 제공하고, 상기 키트는 하기를 포함한다:
(i) 본원에 기재된 바와 같은 화합물; 및 대안적으로
(ii) 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법.
어떤 구현예는 본원에 기재된 바와 같은 대사 증후군을 치료, 예방, 또는 개선하기 위한 키트를 제공하고, 상기 키트는 하기를 포함한다:
(i) 본원에 기재된 바와 같은 화합물; 및 대안적으로
(ii) 본원에 기재된 바와 같은 추가 제제 또는 요법.
본원에 기재된 바와 같은 키트는 본원에 기재된 바와 같은 병용 요법으로 본원에 기재된 바와 같은 대사 질을 치료, 예방, 또는 개선하기 위해 키트를 사용하기 위한 지침을 추가로 포함할 수 있다. 어떤 구현예에서, 대사 질환은 비만은. 어떤 구현예에서, 대사 질환은 당뇨병이다.
안티센스 화합물
올리고머 화합물은, 비제한적으로, 올리고뉴클레오타이드, 올리고뉴클레오사이드, 올리고뉴클레오타이드 유사체, 올리고뉴클레오타이드 모방체, 안티센스 화합물, 안티센스 올리고뉴클레오타이드, 및 siRNAs를 포함한다. 올리고머 화합물은 표적 핵산에 대한 "안티센스"일 수 있고, 이것은 수소 결합을 통해 표적 핵산에 대한 하이드리드화를 경험할 수 있다는 것을 의미한다.
어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은, 5'에서 3' 방향으로 쓰여질 때, 그것이 표적화된 표적 핵산의 표적 세그먼트의 역보체를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다. 어떤 그와 같은 구현예에서, 안티센스 올리고뉴클레오타이드는, 5'에서 3' 방향으로 쓰여질 때, 그것이 표적화된 표적 핵산의 표적 세그먼트의 역보체를 포함하는 핵염기 서열을 갖는다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 그 길이가 10 내지 30 개의 뉴클레오타이드이다. 환언하면, 안티센스 화합물은 10 내지 30 결합된 핵염기이다. 다른 구현예에서, 안티센스 화합물은 하기로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다: 8 내지 80, 10 내지 50, 15 내지 30, 18 내지 21, 20 내지 80, 20 내지 35, 20 내지 30, 20 내지 29, 20 내지 28, 20 내지 27, 20 내지 26, 20 내지 25, 20 내지 24, 20 내지 23, 20 내지 22, 20 내지 21 또는 20 개의 결합된 핵염기. 어떤 그와 같은 구현예에서, 안티센스 화합물은 하기로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다: 길이 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 또는 80 결합된 핵염기, 또는 상기 값의 임의의 2개에 의해 규정된 범위.
어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 단축된 또는 끝이 잘린 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함한다. 단축된 또는 끝이 잘린 변형된 올리고뉴클레오타이드는 5' 말단 (5' 절단), 또는 대안적으로 3' 말단 (3' 절단)로부터 결실된 단일 뉴클레오시드를 가질 수 있다. 단축된 또는 끝이 잘린 올리고뉴클레오타이드는 5' 말단으로부터 결실된 2 개의 뉴클레오사이드를 가질 수 있고, 또는 대안적으로 3' 말단으로부터 결실된 2개의 서브유닛을 가질 수 있다. 대안적으로, 결실된 뉴클레오사이드는, 예를 들면, 5' 말단으로부터 결실된 하나의 뉴클레오사이드 및 3' 말단로부터 결실된 하나의 뉴클레오사이드을 갖는 안티센스 화합물에서 변형된 올리고뉴클레오타이드를 통해 분산될 수 있다.
단일 부가적 뉴클레오사이드가 늘어난 올리고뉴클레오타이드에서 존재할 때, 부가적 뉴클레오사이드는 올리고뉴클레오타이드의 5' 또는 3' 말단에서 위치할 수 있다. 2 개 이상의 부가적 뉴클레오사이드가 존재할 때, 부가된 뉴클레오사이드는, 예를 들면, 올리고뉴클레오타이드의 5' 말단 (5' 부가), 또는 대안적으로 3' 말단 (3' 부가)에 부가된 2개의 뉴클레오사이드를 갖는 올리고뉴클레오타이드에서 서로 인접할 수 있다. 대안적으로, 부가된 뉴클레오사이드는, 예를 들면, 5' 말단에 부가된 하나의 뉴클레오사이드 및 3' 말단에 부가된 하나의 서브유닛을 갖는 올리고뉴클레오타이드에서 안티센스 화합물을 통해 분산될 수 있다.
안티센스 화합물, 예컨대 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 길이를 증가 또는 감소시키고/거나 활성을 제거하지 않으면서 미스매치 염기를 도입할 수 있다. 예를 들면, Woolf 등 (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:7305-7309, 1992)에서, 길이가 13-25 핵염기인 일련의 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 그것의 능력에 대해 시험되어 난모세포 주입 모델에서 표적 RNA의 절단을 유도했다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 말단 근처의 8 또는 11 미스매치 염기를 가지며 그 길이가25 핵염기인 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 미스매치를 함유하지 않는 안티센스 올리고뉴클레오타이드보다 더 적을지라도 표적 mRNA의 직접적인 특이적 절단이 가능했다. 마찬가지로, 표적 특이적 절단은 1 또는 3 미스매치를 갖는 것을 포함하는 13 핵염기 안티센스 올리고뉴클레오타이드를 사용하여 달성되었다.
Gautschi 등 (J. Natl. Cancer Inst. 93:463-471, March 2001)는 bcl-2 및 bcl-xL모두의 시험관내 및 생체내 발현을 감소시키기 위해 bcl-2 mRNA에 대해100% 상보성을 가지며 bcl-xL mRNA에 대한 3 개의 미스매치를 갖는 올리고뉴클레오타이드의 능력을 실증했다. 더욱이, 이러한 올리고뉴클레오타이드는 생체내 강력한 항종양 활성을 실증했다.
Maher 및 Dolnick (Nuc. Acid. Res. 16:3341-3358,1988) 는 일련의 탠덤 14 핵염기 안티센스 올리고뉴클레오타이드를 시험했고, 28 및 42 핵염기 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 토끼 망상적혈구 검정에서 인간 DHFR의 번역을 저지하는 그것의 능력을 위해 탠덤 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 2 또는 3 각각의 서열을 포함한다. 각각의 3 개의 14 핵염기 안티센스 올리고뉴클레오타이드 단독은 28 또는 42 핵염기 안티센스 올리고뉴클레오타이드보다 더 보통의 수준일지라로 번역을 억제할 수 있었다.
안티센스 화합물 모티프
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 안티센스 화합물에 특성 예컨대 증대된 억제 활성, 표적 핵산의 증간된 결합 친화도, 또는 생체내 뉴클레아제에 의한 분해에 대한 내성을 부여하기 위해 패턴, 또는 모티프에서 배열된 화학적으로 변형된 서브유닛을 갖는다.
키메라 안티센스 화합물은 전형적으로 뉴클레아제 분해에 대한 증가된 내성, 증가된 세포 흡수, 표적 핵산의 증가된 결합 친화도, 및/또는 증가된 억제 활성을 부여하기위해 변형된 적어도 하나의 영역을 함유한다. 키메라 안티센스 화합물의 제 2 영역은 RNA:DNA 듀플렉스의 RNA 가닥을 절단하는 세포 엔도뉴클레아제 RNase H의 기질로서 임의로 쓰일 수 있다.
갭머 모티프를 갖는 안티센스 화합물은 키메라 안티센스 화합물로 간주된다. 갭머에서 RNaseH 절단을 지지하는 복수의 뉴클레오타이드를 갖는 내부 영역은 내부 영역의 뉴클레오사이드로부터 화학적으로 뚜렷한 복수의 뉴클레오타이드를 갖는 외부 영역 사이에 배치된다. 갭머 모티프를 갖는 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 경우에, 갭 분절은 일반적으로 엔도뉴클레아제 절단의 기질로서 쓰이지만, 윙 분절은 변형된 뉴클레오사이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 캡머의 영역은 각각의 뚜렷한 영역을 포함하는 당 모이어티의 유형에 의해 분화된다. 캡머의 영역을 분화시키기 위해 사용된 당 모이어티의 유형은 일부 구현예에서 하기를 포함할 수 있다: β-D-리보뉴클레오사이드, β-D-데옥시리보뉴클레오사이드, 2'-변형된 뉴클레오사이드 (그와 같은 2'-변형된 뉴클레오사이드는 기타 중에서 2'-MOE 및 2'-O-CH3를 포함할 수 있다), 및 바이사이클릭 당 변형된 뉴클레오사이드 (그와 같은 바이사이클릭 당 변형된 뉴클레오사이드는 제한된 에틸을 갖는 것을 포함할 수 있다). 어떤 구현예에서, 윙은, 예를 들면 2'-MOE 및 제한된 에틸을 포함하는 몇 개의 변형된 당 모이어티를 포함할 수 있다. 어떤 구현예에서, 윙은 몇 개의 변형된 및 비변형된 당 모이어티를 포함할 수 있다. 어떤 구현예에서, 윙은 2'-MOE 뉴클레오사이드, 제한된 에틸 뉴클레오사이드, 및 2'-데옥시뉴클레오사이드의 다양한 조합을 포함할 수 있다.
각각의 뚜렷한 영역은 균일한 당 모이어티, 변종, 또는 교차 당 모이어티를 포함할 수 있다. 윙-캡-윙 모티프는 "X-Y-Z"로서 빈번히 기재되고, 여기서 "X"는 5'-윙의 길이를 나타내고, "Y"는 캡의 길이를 나타내고, "Z"는 3'-윙. "X"의 길이를 나타내고 "Z"는 균일한, 변종, 또는 교대 당 모이어티를 포함할 수 있다. 어떤 구현예에서, "X" 및 "Y"는 하나 이상의 2'-데옥시뉴클레오사이드를 포함할 수 있다. "Y"는 2'-데옥시뉴클레오사이드를 포함할 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, "X-Y-Z"로서 기재된 갭머는, 캡이 각각의 5'-윙 및 3' 윙에 바로 인접하여 배치되는 정도의 배치를 갖는다. 따라서, 개재 뉴클레오타이드는 5'-윙 및 캡, 또는 캡 및 3'-윙 사이에 존재하지 않는다. 본원에 기재된 안티센스 화합물의 임의의 것은 갭머 모티프를 가질 수 있다. 어떤 구현예에서, "X" 및 "Z"는 동일하고, 다른 구현예에서y는 상이하다. 어떤 구현예에서, "Y"는 8 내지 15 뉴클레오사이드이다. X, Y, 또는 Z는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30 또는 그 초과의 뉴클레오사이드 중 임의의 것일 수 있다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 3-14-3 갭머 모티프를 보유한다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 5-10-5 갭머 모티프를 보유한다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 5-10-6 갭머 모티프를 보유한다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 3-10-3 갭머 모티프를 보유한다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 4-12-4 갭머 모티프를 보유한다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 42-13-5 갭머 모티프를 보유한다.
표적 핵산, 표적 영역 및 뉴클레오타이드 서열
어떤 구현예에서, GCCR은 유전자은행 승인 번호의 임의의 것에서 제시된 인간 서열을 갖는다: 뉴클레오타이드 3818000 내지 3980000 (서열번호: 1로서 본원에서 포함됨)로부터 끝이 잘린 유전자은행 승인 번호 NT_029289.10의 보체. 어떤 구현예에서, GCCR은 뉴클레오타이드 1334000 내지 1491000 (서열번호: 2로서 본원에서 포함됨)로부터 끝이 잘린 유전자은행 승인 번호 NW_001120987.1의 보체에서 제시된 붉은털원숭이 서열을 갖는다.
본원에 함유된 실시예에서 각각의 서열 번호로 제시된 서열은 당 모이어티, 뉴클레오사이드간 결합, 또는 핵염기에 대한 임의의 변형에 독립적인 것으로 이해된다. 그것으로서, 서열번호에 의해 규정된 안티센스 화합물은 당 모이어티, 뉴클레오사이드간 결합, 또는 핵염기에 대한 하나 이상의 변형을 독립적으로 포함할 수 있다. Isis 번호 (Isis No)에 의해 기재된 안티센스 화합물은 핵염기 서열 및 모티프의 조합을 나타낸다.
어떤 구현예에서, 표적 영역은 표적 핵산의 구조적으로 규정된 영역이다. 예를 들면, 표적 영역은 3' UTR, 5' UTR, 엑손, 인트론, 엑손/인트론 접합, 코딩 영역, 번역 개시 영역, 번역 종료 영역, 또는 다른 규정된 핵산 영역을 포함할 수 있다. GCCR의 구조적으로 규정된 영역은 서열 데이타베이스 예컨대 NCBI로부터의 승인 번호에 의해 수득될 수 있고 그와 같은 정보는 본원에 참고로 포함되어 있다. 어떤 구현예에서, 표적 영역은 표적 영역내의 하나의 표적 세그먼트의 5' 표적 부위에서 동일한 표적 영역 내의 또 하나의 표적 세그먼트의 3' 표적 부위로의 서열을 포함할 수 있다.
표적화는 안티센스 화합물이 하이브리드화하는 적어도 하나의 표적 세그먼트의 결정을 포함하고, 이로써 원하는 효과가 생긴다. 어떤 구현예에서, 원하는 효과는 mRNA표적 핵산 수준의 감소이다. 어떤 구현예에서, 원하는 효과는 표적 핵산 또는 표적 핵산과 연관된 표현형 변화에 의해 인코딩된 단백질의 수준의 감소이다.
표적 영역은 하나 이상의 표적 세그먼트를 함유할 수 있다. 표적 영역 내의 다중 표적 세그먼트는 중복일 수 있다. 대안적으로, 비-중복일 수 있다. 어떤 구현예에서, 표적 영역 내의 표적 세그먼트는 약 300 이하의 뉴클레오타이드에 의해 분리된다. 어떤 구현예에서, 표적 영역 내의 표적 세그먼트는 표적 핵산 상의 약 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 또는 10 또는 그 이하의 뉴클레오타이드이고, 이전의 값의 임의의 2개에 의해 규정된 범위인 수많은 뉴클레오타이드에 의해 분리된다. 어떤 구현예에서, 표적 영역 내의 표적 세그먼트는 표적 핵산 상의 약 5 또는 그 이하의 뉴클레오타이드에 의해 분리된다. 어떤 구현예에서, 표적 세그먼트는 인접한다. 본원에서 열거된5' 표적 부위 또는 3' 표적 부위의 임의의 것인 개시 핵산을 갖는 범위에 의해 규정된 표적 영역이 고려된다.
적당한 표적 세그먼트는 5' UTR, 코딩 영역, 3' UTR, 인트론, 엑손, 또는 엑손/인트론 접합 내에서 발견될 수 있다. 시작 코돈 또는 정지 코돈을 함유하는 표적 세그먼트는 또한 적당한 표적 세그먼트이다. 적당한 표적 세그먼트는 어떤 구조적으로 규정된 영역 예컨대 시작 코돈 또는 정지 코돈을 구체적으로 제외할 수 있다.
적당한 표적 세그먼트의 결정은 게놈 도처의 다른 서열에 대한 표적 핵산의 서열의 비교를 포함할 수 있다. 예를 들면, BLAST 알고리즘은 상이한 핵산 중에서 유사성의 영역을 확인하기 위해 사용될 수 있다. 이러한 비교는 선택된 표적 핵산 이외의 서열 (즉, 비-표적 또는 부정확한 서열)과 비특이적 방식으로 하이브리드화할 수 있는 안티센스 화합물의 서열의 선택을 방지할 수 있다.
(예를 들면, 표적 핵산 수준의 퍼센트 감소에 의해 규정된 바와 같이) 활성 표적 영역 내의 안티센스 화합물의 활성이 변할 수 있다. 어떤 구현예에서, GCCR mRNA 수준의 감소는 GCCR 발현의 억제를 가리킨다. GCCR 단백질의 수분 감소는 또한 표적 mRNA 발현의 억제를 가리킨다. 게다가, 표현형 변화은 GCCR 발현의 억제를 가리킨다. 어떤 구현예에서, 감소된 글루코스 수준, 감소된 지질 수준, 및 감소된 체중 는 GCCR 발현의 억제를 가리킬 수 있다. 어떤 구현예에서, 대사 질환과 연관된 증상의 개선은 GCCR 발현의 억제를 가리킬 수 있다. 어떤 구현예에서, 당뇨병과 연관된 증상의 개선은 GCCR 발현의 억제를 가리킬 수 있다. 어떤 구현예에서, 인슐린 내성의 감소는 GCCR 발현의 억제를 가리킨다. 어떤 구현예에서, 당뇨병 바이오마커의 감소는 GCCR 발현의 억제를 가리킬 수 있다.
하이브리드화
일부 구현예에서, 하이브리드화은 본원에 개시된 안티센스 화합물 및 GCCR 핵산 사이에서 일어난다. 하이브리드화의 가장 일반적인 기전은 핵산 분자의 상보적 핵염기 사이의 수소 결합 (예를 들면, Watson-Crick, Hoogsteen 또는 역전된 Hoogsteen 수소 결합)을 수반한다.
하이브리드화는 가변 조건 하에서 일어날 수 있다. 엄격한 조건은 서열-의존적이고 하이브리드화될 핵산 분자의 본성 및 조성에 의해 결정된다.
서열이 표적 핵산과 특이적으로 하이브리드화할 수 있는 지를 결정하는 방법은 당해기술에 공지되어 있다. 어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 안티센스 화합물은 GCCR 핵산과 특이적으로 하이브리드화할 수 있다.
상보성
안티센스 화합물 및 표적 핵산은, 표적 핵산의 상응하는 핵염기와 수소결합할 수 있을 때 서로 상보적이고, 이로써 원하는 효과가 생길 수 있다 (예를 들면, 표적 핵산, 예컨대 GCCR 핵산의 안티센스 억제).
안티센스 화합물은 GCCR 핵산의 하나 이상의 세그먼트 상에서 혼성될 수 있고 이로써 개재 또는 인접한 세그먼트는 하이브리드화 사건 (예를 들면, 루프 구조, 미스매치 또는 머리핀 구조)에 관여되지 않는다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 안티센스 화합물, 또는 명시된 그의 부분은 GCCR 핵산, 표적 영역, 표적 세그먼트, 또는 명시된 그의 부분에 대해 적어도, 70%, 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 상보적이다. 표적 핵산을 갖는 안티센스 화합물의 퍼센트 상보성은 일상적인 방법을 사용하여 결정될 수 있다.
예를 들면, 20 안티센스 화합물의 핵염기 중 18개가는 표적 영역에 대해 상보적이고 따라서 특이적으로 하이브리드화하는 안티센스 화합물은 90 퍼센트 상보성을 나타낸다. 이 예에서, 잔류 비-상보적 핵염기는 무리를 이루거나 상보적 핵염기와 함께 사이에 배치되고 서로 또는 상보적 핵염기에 인접하지 않는다. 그것으로서, 표적 핵산과 함께 완전한 상보성의 2 개의 영역에 의해 플랭킹된4 개의 비-상보적 핵염기를 갖는 18 길이의 핵염기인 안티센스 화합물은 표적 핵산과 함께 77.8% 전체 상보성을 가지며 따라서 본 발명의 범위 내에 있다. 표적 핵산의 영역을 갖는 안티센스 화합물의 퍼센트 상보성은 당해기술에서 공지된 BLAST 프로그램 (기본적 국소 정렬 연구 도구) 및 PowerBLAST 프로그램을 사용하여 일상적으로 결정될 수 있다 (Altschul 등, J. Mol. Biol., 1990, 215, 403 410; Zhang 및 Madden, Genome Res., 1997, 7, 649 656). 퍼센트 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 Smith 및 Waterman(Adv. Appl. Math., 1981, 2, 482 489)의 알고리즘을 사용하는 디폴트 세팅을 사용하여, 예를 들면, Gap 프로그램 (Wisconsin Sequence Analysis Package, Version 8 for Unix, Genetics Computer Group, University Research Park, Madison Wis.)에 의해 결정될 수 있다.
어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 안티센스 화합물, 또는 그의 명시된 부분은 표적 핵산, 또는 명시된 그의 부분에 대해 완전 상보적 (즉 100% 상보적)이다. 예를 들면, 안티센스 화합물은 GCCR 핵산, 또는 그의 표적 영역, 또는 표적 세그먼트 또는 표적 서열에 대해 완전 상보적일 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, "완전 상보적"는, 안티센스 화합물의 각각의 핵염기가 표적 핵산의 상응하는 핵염기와 정확한 염기 짝짓시를 할수 있다는 것을 의미한다. 예를 들면, 20 핵염기 안티센스 화합물은, 안티센스 화합물에 대해 완전 상보적인 표적 핵산의 상응하는 20 핵염기 부분이 있는 한, 400 핵염기 길이인 표적 서열에 대해 완전 상보적이다. 완전 상보성은 제 1 및/또는 제 2 핵산의 명시된 부분을 참조하여 또한 사용될 수 있다. 예를 들면, 30 핵염기 안티센스 화합물의 20 핵염기 부분은 400 핵염기 길이인 표적 서열에 대해 "완전 상보적"일 수 있다. 30 핵염기 올리고뉴클레오타이드의 20 핵염기 부분은, 각각의 핵염기가 안티센스 화합물의 20 핵염기 부분에 대해 상보적인 상응하는 20 핵염기 부분을 갖는다면 표적 서열에 대해 완전 상보적이다. 동시에, 전체 30 핵염기 안티센스 화합물은, 안티센스 화합물의 잔류 10 핵염기가 표적 서열에 대해 상보적인지에 따라 표적 서열에 대해 또한 완전 상보적이거나 그렇지 않을 수 있다.
비-상보적 핵염기의 위치는 안티센스 화합물의 5' 말단 또는 3' 말단에 있을 수 있다. 대안적으로, 비-상보적 핵염기 또는 핵염기들은 안티센스 화합물의 내부 위치에 있을 수 있다. 2 개 이상의 비-상보적 핵염기가 존재할 때, 인접 (즉 결합된) 또는 비-인접일 수 있다. 일 구현예에서, 비-상보적 핵염기는 갭머 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 윙 분절에서 위치한다.
어떤 구현예에서, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 길이의 핵염기이거나 그 최대인 안티센스 화합물은 표적 핵산, 예컨대 GCCR 핵산, 또는 명시된 그의 부분에 대해 4 이하, 3 이하, 2 이하, 또는 1 이하의 비-상보적 핵염기(들)을 포함한다.
어떤 구현예에서, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 또는 30 길이의 핵염기이거나 그 최대인 안티센스 화합물은 표적 핵산, 예컨대 GCCR 핵산, 또는 명시된 그의 부분에 대해 6 이하, 5 이하, 4 이하, 3 이하, 2 이하, 또는 1 이하의 비-상보적 핵염기(들)을 포함한다.
본원에서 제공된 안티센스 화합물은 또한 표적 핵산의 부분에 대해 상보적인 것을 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같이, "부분"은 표적 핵산의 영역 또는 세그먼트 내의 규정된 수의 인접 (즉 결합된) 핵염기를 의미한다. "부분"은 또한 규정된 수의 안티센스 화합물의 인접 핵염기를 의미할 수 있다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 8 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 12 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 13 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 14 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 15 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 16 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 17 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 18 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 19 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 표적 세그먼트의 적어도 20 핵염기 부분에 대해 상보적이다. 표적 세그먼트의 적어도 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 그 초과, 또는 이들 값의 임의의 2 개에 의해 규정된 범위의 핵염기 부분에 대해 상보적인 안티센스 화합물이 또한 고려된다.
동일성
본원에서 제공된 안티센스 화합물은 특정한 뉴클레오타이드 서열, 서열번호, 또는 특정 Isis 번호로 나타내는 화합물, 또는 그의 부분에 대한 규정된 퍼센트 동일성을 또한 가질 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 안티센스 화합물은, 동일한 핵염기 짝짓기 능력을 갖는다면, 본원에 개시된 서열과 동일하다. 예를 들면, 개시된 DNA 서열에서 티미딘 대신에 우라실을 함유하는 RNA가 DNA 서열과 동일한 것으로 간주되는 것은 아데닌을 갖는 우라실 및 티미딘 모두의 쌍 때문이다. 본원에 기재된 안티센스 화합물 뿐만 아니라 본원에서 제공된 안티센스 화합물에 대해 비-동일한 염기를 갖는 화합물의 단축된 및 늘어난 버전이 또한 고려된다. 비-동일한 염기는 안티센스 화합물 도처에 서로 인접하거나 분산될 수 있다. 안티센스 화합물의 퍼센트 동일성은 비교되는 서열에 대해 동일한 염기 짝짓기를 갖는 염기의 수에 따라 계산된다.
어떤 구현예에서, 안티센스 화합물, 또는 그의 일부는, 본원에 개시된 안티센스 화합물 또는 서열번호, 또는 그의 부분의 하나 이상과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 동일하다.
변형
뉴클레오사이드는 염기-당 조합이다. 뉴클레오사이드의 핵염기 (또한 염기로서 공지됨) 부분은 정상적으로 헤테로사이클릭 염기 모이어티이다. 뉴클레오타이드는 뉴클레오사이드의 당 부분에 공유 결합된 포스페이트 그룹을 추가로 포함하는 뉴클레오사이드이다. 펜토푸라노실 당을 포함하는 뉴클레오사이드에 대해, 포스페이트 그룹은 당의 2', 3' 또는 5' 하이드록실 모이어티에 결합될 수 있다. 올리고뉴클레오타이드는 서로에 대한 인접한 뉴클레오사이드의 공유결합을 통해 형성되어, 선형 폴리머 올리고뉴클레오타이드를 형성한다. 올리고뉴클레오타이드 구조 내에, 포스페이트 그룹은 통상적으로 올리고뉴클레오타이드의 뉴클레오사이드간 결합을 형성하는 것으로 간주된다.
안티센스 화합물에 대한 변형은 뉴클레오사이드간 결합, 당 모이어티, 또는 핵염기에 대한 치환 또는 변화를 포함한다. 변형된 안티센스 화합물은 바람직한 특성 예컨대, 예를 들면, 증대된 세포 흡수, 핵산 표적의 증대된 친화도, 뉴클레아제의 존재에서의 증가된 안정성, 또는 증가된 억제 활성 때문에 원상태 형태에 대해 종종 바람직하다.
화학적으로 변형된 뉴클레오사이드는 그것의 표적 핵산에 대해, 단축된 또는 끝이 잘린 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 결합 친화도를 증가시키기 위해 또한 이용될 수 있다. 결과적으로, 비교할만한 결과는 그와 같은 화학적으로 변형된 뉴클레오사이드를 갖는 더 짧은 안티센스 화합물로 종종 수득될 수 있다.
변형된 뉴클레오사이드간 결합
RNA 및 DNA의 자연 발생 뉴클레오사이드간 결합은 3' 내지 5' 포스포디에스테르 결합이다. 하나 이상의 변형된, 즉 비-자연 발생, 뉴클레오사이드간 결합을 갖는 안티센스 화합물은 바람직한 특성 예컨대, 예를 들면, 증대된 세포 흡수, 표적 핵산의 증대된 친화도, 및 뉴클레아제의 존재에서 증가된 안정성 때문에 자연 발생 뉴클레오사이드간 결합을 갖는 안티센스 화합물에 대해 종종 선택된다.
변형된 뉴클레오사이드간 결합을 갖는 올리고뉴클레오타이드는 인 원자를 보유하는 뉴클레오사이드간 결합 뿐만 아니라 인 원자를 갖지 않는 뉴클레오사이드간 결합을 포함한다. 대표적인 인을 함유하는 뉴클레오사이드간 결합은, 비제한적으로, 포스포디에스테르, 포스포트리에스테르, 메틸포스포네이트, 포스포르아미데이트, 및 포스포로티오에이트를 포함한다. 인-함유 및 비-인-함유 결합의 제조 방법은 공지되어 있다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 하나 이상의 변형된 뉴클레오사이드간 결합을 포함한다. 어떤 구현예에서, 변형된 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 결합이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물의 각각의 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 뉴클레오사이드간 결합이다.
변형된 당 모이어티
본원에서 제공된 안티센스 화합물은 하나 이상의 뉴클레오사이드를 임의로 함유할 수 있고, 여기서 당 그룹은 변형되었다. 그와 같은 당 변형된 뉴클레오사이드는 안티센스 화합물에 대한 증대된 뉴클레아제 안정성, 증가된 결합 친화도, 또는 일부 다른 유익한 생물학적 특성을 부여할 수 있다. 어떤 구현예에서, 뉴클레오사이드는 화학적으로 변형된 리보푸라노스 고리 모이어티를 포함한다. 화학적으로 변형된 리보푸라노스 고리의 예는 비제한적으로 하기를 포함한다: (5' 및 2' 치환체 그룹을 포함하는) 치환체 그룹의 부가; 바이사이클릭 핵산 (BNA)를 형성하기 위한 비-제미널(geminal) 고리 원자의 브릿징; S, N(R), 또는 C(R1)(R)2 (R = H, C1-C12 알킬 또는 보호 그룹)에 의한 리보실 고리 산소 원자의 교체; 및 이들의 조합. 화학적으로 변형된 당류의 예는 하기를 포함한다: 2'-F-5'-메틸 치환된 뉴클레오사이드 (참고, PCT 국제 출원 WO 2008/101157, 다른 개시된 5', 2'-비스 치환된 뉴클레오사이드에 대해 8/21/08에 공개됨), 2'-위치에서 추가 치환에 의해 S에 의한 리보실 고리 산소 원자의 교체 (참고, 공개된 미국 특허 출원 US2005/0130923, 2005년 6월 16일에 공개됨), 또는 대안적으로, BNA의 5'-치환 (참고, PCT 국제 출원 WO 2007/134181, 11/22/07에 공개됨, LNA는, 예를 들면, 5'-메틸 또는 5'-비닐 그룹으로 치환됨).
변형된 당 모이어티를 갖는 뉴클레오사이드의 예는 5'-비닐, 5'-메틸 (R 또는 S), 4'-S, 2'-F, 2'-OCH3, 및 2'-O(CH2)2OCH3 치환체 그룹을 포함하는 뉴클레오사이드를 비제한적으로 포함한다. 2' 위치에서의 치환체는 알릴, 아미노, 아지도, 티오, O-알릴, O-C1-C10 알킬, OCF3, O(CH2)2SCH3, O(CH2)2-O-N(Rm)(Rn), 및 O-CH2-C(=O)-N(Rm)(Rn)로부터 또한 선택될 수 있고, 여기서 각각의 Rm 및 Rn는, 독립적으로, H 또는 치환된 또는 비치환된 C1-C10 알킬이다.
본원에서 사용된 바와 같이, "바이사이클릭 뉴클레오사이드"는 바이사이클릭 당 모이어티를 포함하는 변형된 뉴클레오사이드를 의미한다. 바이사이클릭 뉴클레오사이드의 예는 4' 및 2' 리보실 고리 원자 사이의 브릿지를 포함하는 뉴클레오사이드를 비제한적으로 포함한다. 어떤 구현예에서, 본원에서 제공된 안티센스 화합물은 하나 이상의 바이사이클릭 뉴클레오사이드를 포함하고, 여기서 브릿지는 4' 내지 2' 바이사이클릭 뉴클레오사이드를 포함한다. 그와 같은 4' 내지 2' 바이사이클릭 뉴클레오사이드의 하기 식 중의 하나를 비제한적으로 포함한다: 4'-(CH2)-O-2' (LNA); 4'-(CH2)-S-2'; 4'-(CH2)2-O-2' (ENA); 4'-CH(CH3)-O-2' 및 4'-C-H(CH2OCH3)-O-2', 및 그의 유사체 (참고, 미국 특허 7,399,845, 2008년 7월 15일 발표); 4'-C(CH3)(CH3)-O-2', 및 그의 유사체 (참고, 공개된 PCT 국제 출원 WO2009/006478, 2009년 1월 8일 공개); 4'-CH2-N(OCH3)-2', 및 그의 유사체 (참고, 공개된 PCT 국제 출원 WO2008/150729, 2008년 12월 11일 공개); 4'-CH2-O-N(CH3)-2' (참고, 공개된 미국 특허 출원 US2004/0171570, 2004년 9월 2일 공개); 4'-CH2-N(R)-O-2' (여기서 R은 H, C1-C12 알킬, 또는 보호 그룹이다) (참고, 미국 특허 7,427,672, 2008년 12월 23일 발표); 4'-CH2-C-(H)(CH3)-2' (참고, Chattopadhyaya, 등, J. Org . Chem .,2009, 74, 118-134); 및 4'-CH2-C-(=CH2)-2', 및 그의 유사체 (참고, 공개된 PCT 국제 출원 WO 2008/154401, 2008년 12월 8일 공개). 또는 참고, 예를 들면: Singh 등, Chem . Commun ., 1998, 4, 455-456; Koshkin 등, Tetrahedron, 1998, 54, 3607-3630; Wahlestedt 등, Proc . Natl . Acad . Sci . U. S. A., 2000, 97, 5633-5638; Kumar 등, Bioorg . Med . Chem . Lett., 1998, 8, 2219-2222; Singh 등, J. Org . Chem., 1998, 63, 10035-10039; Srivastava 등, J. Am . Chem . Soc., 129(26) 8362-8379 (Jul. 4, 2007); Elayadi 등, Curr . Opinion Invens . Drugs , 2001, 2, 558-561; Braasch 등, Chem . Biol ., 2001, 8, 1-7; Orum 등, Curr . Opinion Mol . Ther ., 2001, 3, 239-243; 미국 특허 번호 미국 6,670,461, 7,053,207, 6,268,490, 6,770,748, 6,794,499, 7,034,133, 6,525,191, 7,399,845; 공개된 PCT 국제 출원 WO 2004/106356, WO 94/14226, WO 2005/021570, 및 WO 2007/134181; 미국 특허 공보 번호 US2004/0171570, US2007/0287831, 및 US2008/0039618; 및 미국 특허 시리즈 번호 12/129,154, 60/989,574, 61/026,995, 61/026,998, 61/056,564, 61/086,231, 61/097,787, 및 61/099,844; 및 PCT 국제 출원 번호 PCT/US2008/064591, PCT/US2008/066154, 및 PCT/US2008/068922. 각각의 상기 바이사이클릭 뉴클레오사이드는 예를 들면 α-L-리보푸라노스 및 β-D-리보푸라노스를 포함하는 하나 이상의 입체화학적 당 배치를 갖도록 제조될 수 있다 (참고 PCT 국제 출원 PCT/DK98/00393, WO 99/14226로서 1999년 3월 25일 공개).
어떤 구현예에서, BNA 뉴클레오사이드의 바이사이클릭 당 모이어티는, 비제한적으로, 펜토푸라노실 당 모이어티의 4' 및 2' 위치 사이의 적어도 하나의 브릿지를 갖는 화합물을 포함하고, 여기서 그와 같은 브릿지는 -[C(Ra)(Rb)]n-, -C(Ra)=C(Rb)-, -C(Ra)=N-, -C(=NRa)-, -C(=O)-, -C(=S)-, -O-, -Si(Ra)2-, -S(=O)x-, 및 -N(Ra)-로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2 내지 4 결합된 그룹을 포함한다;
여기서:
x는 0, 1, 또는 2이고;
n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
각각의 Ra 및 Rb는, 독립적으로, H, 보호 그룹, 하이드록실, C1-C12 알킬, 치환된 C1-C12 알킬, C2-C12 알케닐, 치환된 C2-C12 알케닐, C2-C12 알키닐, 치환된 C2-C12 알키닐, C5-C20 아릴, 치환된 C5-C20 아릴, 헤테로사이클 라디칼, 치환된 헤테로사이클 라디칼, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, C5-C7 지환족 라디칼, 치환된 C5-C7 지환족 라디칼, 할로겐, OJ1, NJ1J2, SJ1, N3, COOJ1, 아실 (C(=O)-H), 치환된 아실, CN, 설포닐 (S(=O)2-J1), 또는 설폭실 (S(=O)-J1)이고;
각각의 J1 및 J2는, 독립적으로, H, C1-C12 알킬, 치환된 C1-C12 알킬, C2-C12 알케닐, 치환된 C2-C12 알케닐, C2-C12 알키닐, 치환된 C2-C12 알키닐, C5-C20 아릴, 치환된 C5-C20 아릴, 아실 (C(=O)-H), 치환된 아실, 헤테로사이클 라디칼, 치환된 헤테로사이클 라디칼, C1-C12 아미노알킬, 치환된 C1-C12 아미노알킬, 또는 보호 그룹이다.
어떤 구현예에서, 바이사이클릭 당 모이어티의 브릿지는, -[C(Ra)(Rb)]n-, -[C(Ra)(Rb)]n-O-, -C(RaRb)-N(R)-O-, 또는 -C(RaRb)-O-N(R)-이다. 어떤 구현예에서, 브릿지는 4'-CH2-2', 4'-(CH2)2-2', 4'-(CH2)3-2', 4'-CH2-O-2', 4'-(CH2)2-O-2', 4'-CH2-O-N(R)-2', 및 4'-CH2-N(R)-O-2'-이고, 여기서 각각의 R은, 독립적으로, H, 보호 그룹, 또는 C1-C12 알킬이다.
어떤 구현예에서, 바이사이클릭 뉴클레오사이드는 이성질체 배치에 의해 추가로 규정된다. 예를 들면, 4'-2' 메틸렌-옥시 브릿지를 포함하는 뉴클레오사이드는, α-L 배치 또는 β-D 배치로 존재한다. 이전에, α-L-메틸렌옥시 (4'-CH2-O-2') BNA'는 안티센스 활성을 보여준 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 통합되었다 (Frieden 등, Nucleic Acids Research , 2003, 21, 6365-6372).
어떤 구현예에서, 바이사이클릭 뉴클레오사이드는, 비제한적으로, (A) α-L-메틸렌옥시 (4'-CH2-O-2') BNA, (B) β-D-메틸렌옥시 (4'-CH2-O-2') BNA, (C) 에틸렌옥시 (4'-(CH2)2-O-2') BNA, (D) 아미노옥시 (4'-CH2-O-N(R)-2') BNA, (E) 옥시아미노 (4'-CH2-N(R)-O-2') BNA, (F) 메틸(메틸렌옥시) (4'-CH(CH3)-O-2') BNA, (G) 메틸렌-티오 (4'-CH2-S-2') BNA, (H) 메틸렌-아미노 (4'-CH2-N(R)-2') BNA, (I) 메틸 카보사이클릭 (4'-CH2-CH(CH3)-2') BNA, 및 (J) 프로필렌 카보사이클릭 (4'-(CH2)3-2') BNA를, 이하에서 묘사된 바와 같이 포함한다.
Figure pct00001
여기서 Bx는 염기 모이어티이고 R은, 독립적으로, H, 보호 그룹 또는 C1-C12 알킬이다.
어떤 구현예에서, 식 I로 표시되는 바이사이클릭 뉴클레오사이드:
Figure pct00002
여기서:
Bx는 헤테로사이클릭 염기 모이어티이고;
-Qa-Qb-Qc-는 -CH2-N(Rc)-CH2-, -C(=O)-N(Rc)-CH2-, -CH2-O-N(Rc)-, -CH2-N(Rc)-O-, 또는 -N(Rc)-O-CH2이고;
Rc는 C1-C12 알킬 또는 아미노 보호 그룹이고;
Ta 및 Tb 각각은, 독립적으로, H, 하이드록실 보호 그룹, 콘주게이트 그룹, 반응성 인 그룹, 인 모이어티, 또는 지지 매질에 대한 공유결합이다.
어떤 구현예에서, 식 II로 표시되는 바이사이클릭 뉴클레오사이드:
Figure pct00003
여기서:
Bx는 헤테로사이클릭 염기 모이어티이고;
Ta 및 Tb 각각은, 독립적으로, H, 하이드록실 보호 그룹, 콘주게이트 그룹, 반응성 인 그룹, 인 모이어티, 또는 지지 매질에 대한 공유 결합이고;
Za는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 치환된 C1-C6 알킬, 치환된 C2-C6 알케닐, 치환된 C2-C6 알키닐, 아실, 치환된 아실, 치환된 아미드, 티올, 또는 치환된 티오이다.
일 구현예에서, 각각의 치환된 그룹은, 독립적으로, 할로겐, 옥소, 하이드록실, OJc, NJcJd, SJc, N3, OC(=X)Jc, 및 NJeC(=X)NJcJd로부터 독립적으로 선택된 치환체 그룹으로 모노 또는 폴리 치환되고, 여기서 각각의 Jc, Jd, 및 Je는, 독립적으로, H, C1-C6 알킬, 또는 치환된 C1-C6 알킬이고 X는 O 또는 NJc이다.
어떤 구현예에서, 식 III로 표시되는 바이사이클릭 뉴클레오사이드:
Figure pct00004
여기서:
Bx는 헤테로사이클릭 염기 모이어티이고;
Ta 및 Tb 각각은, 독립적으로, H, 하이드록실 보호 그룹, 콘주게이트 그룹, 반응성 인 그룹, 인 모이어티, 또는 지지 매질에 대한 공유 결합이고;
Zb는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 치환된 C1-C6 알킬, 치환된 C2-C6 알케닐, 치환된 C2-C6 알키닐, 또는 치환된 아실 (C(=O)-)이다.
어떤 구현예에서, 식 IV로 표시되는 바이사이클릭 뉴클레오사이드:
Figure pct00005
여기서:
Bx는 헤테로사이클릭 염기 모이어티이고;
Ta 및 Tb 각각은, 독립적으로 H, 하이드록실 보호 그룹, 콘주게이트 그룹, 반응성 인 그룹, 인 모이어티, 또는 지지 매질에 대한 공유 결합이고;
Rd는 C1-C6 알킬, 치환된 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 치환된 C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 치환된 C2-C6 알키닐이고;
각각의 qa, qb, qc 및 qd는, 독립적으로, H, 할로겐, C1-C6 알킬, 치환된 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 치환된 C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 치환된 C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, 치환된 C1-C6 알콕실, 아실, 치환된 아실, C1-C6 아미노알킬, 또는 치환된 C1-C6 아미노알킬이고;
어떤 구현예에서, 식 V로 표시되는 바이사이클릭 뉴클레오사이드:
Figure pct00006
여기서:
Bx는 헤테로사이클릭 염기 모이어티이고;
Ta 및 Tb 각각은, 독립적으로, H, 하이드록실 보호 그룹, 콘주게이트 그룹, 반응성 인 그룹, 인 모이어티, 또는 지지 매질에 대한 공유 결합이고;
qa, qb , qe 및 qf 각각은, 독립적으로, 수소, 할로겐, C1-C12 알킬, 치환된 C1-C12 알킬, C2-C12 알케닐, 치환된 C2-C12 알케닐, C2-C12 알키닐, 치환된 C2-C12 알키닐, C1-C12 알콕시, 치환된 C1-C12 알콕시, OJj, SJj, SOJj, SO2Jj, NJjJk, N3, CN, C(=O)OJj, C(=O)NJjJk, C(=O)Jj, O-C(=O)-NJjJk, N(H)C(=NH)NJjJk, N(H)C(=O)-NJjJk 또는 N(H)C(=S)NJjJk이고;
qe 및 qf는 함께 =C(qg)(qh)이고;
qg 및 qh 각각은, 독립적으로, H, 할로겐, C1-C12 알킬, 또는 치환된 C1-C12 알킬이다.
메틸렌옥시 (4'-CH2-O-2') BNA 모노머 아데닌, 시토신, 구아닌, 5-메틸-시토신, 티민, 및 우라실의 합성 및 제조는, 그것의 올리고머화, 및 핵산 인식 특성과 함께 기재되었다 (참고, 예를 들면, Koshkin 등, Tetrahedron, 1998, 54, 3607-3630). BNAs 및 그의 제조는 또한 WO 98/39352 및 WO 99/14226에서 기재되어 있다.
메틸렌옥시 (4'-CH2-O-2') BNA, 메틸렌옥시 (4'-CH2-O-2') BNA, 및 2'-티오-BNAs의 유사체가 또한 제조되었다 (참고, 예를 들면, Kumar 등, Bioorg . Med . Chem . Lett ., 1998, 8, 2219-2222). 올리고데옥시리보뉴클레오타이드 듀플렉스를 핵산 폴리머라제의 기질로서 포함하는 락킹된(locked) 뉴클레오사이드 유사체의 제조가 또한 기재되었다 (참고, 예를 들면, Wengel 등, WO 99/14226). 더욱이, 2'-아미노-BNA, 신규 형태적으로 제한된 고-친화도 올리고뉴클레오타이드 유사체의 합성은 당해기술에 기재되었다 (참고, 예를 들면, Singh 등, J. Org . Chem ., 1998, 63, 10035-10039). 또한, 2'-아미노- 및 2'-메틸아미노-BNA'가 제조되었고 상보적 RNA 및 DNA 가닥을 갖는 그것의 듀플렉스의 열 안정성은 이전에 보고되었다.
어떤 구현예에서, 식 VI로 표시디는 바이사이클릭 뉴클레오사이드:
Figure pct00007
여기서:
Bx는 헤테로사이클릭 염기 모이어티이고;
Ta 및 Tb 각각은, 독립적으로, H, 하이드록실 보호 그룹, 콘주게이트 그룹, 반응성 인 그룹, 인 모이어티, 또는 지지 매질에 대한 공유 결합이고;
각각의 qi, qj, qk 및 ql는, 독립적으로, H, 할로겐, C1-C12 알킬, 치환된 C1-C12 알킬, C2-C12 알케닐, 치환된 C2-C12 알케닐, C2-C12 알키닐, 치환된 C2-C12 알키닐, C1-C12 알콕실, 치환된 C1-C12 알콕실, OJj, SJj, SOJj, SO2Jj, NJjJk, N3, CN, C(=O)OJj, C(=O)NJjJk, C(=O)Jj, O-C(=O)-NJjJk, N(H)C(=NH)NJjJk, N(H)C(=O)-NJjJk, 또는 N(H)C(=S)NJjJk이고;
qi 및 qj 또는 ql 및 qk는 함께 =C(qg)(qh)이고, 여기서 qg 및 qh 각각은, 독립적으로, H, 할로겐, C1-C12 알킬, 또는 치환된 C1-C12 알킬이다.
4'-(CH2)3-2' 브릿지를 갖는 하나의 카보사이클릭 바이사이클릭 뉴클레오사이드 및 알케닐 유사체, 브릿지 4'-CH=CH-CH2-2'가 기재되었다 (참고, 예를 들면, Freier 등, Nucleic Acids Research, 1997, 25(22), 4429-4443 및 Albaek 등, J. Org. Chem., 2006, 71, 7731-7740). 카보사이클릭 바이사이클릭 뉴클레오사이드의 합성 및 제조는 그것의 올리고머화 및 생화학적 연구와 함께 또한 기재되었다 (참고, 예를 들면, Srivastava 등, J. Am . Chem . Soc . 2007, 129(26), 8362-8379).
본원에서 사용된 바와 같이, "4'-2' 바이사이클릭 뉴클레오사이드" 또는 "4' 내지 2' 바이사이클릭 뉴클레오사이드"는 2' 탄소 원자 및 4' 탄소 원자를 연결하는 브릿지를 포함하는 푸라노스 고리를 포함하는 바이사이클릭 뉴클레오사이드를 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "모노사이클릭 뉴클레오사이드"는 바이사이클릭 당 모이어티가 아닌 변형된 당 모이어티를 포함하는 뉴클레오사이드를 의미한다. 어떤 구현예에서, 뉴클레오사이드의 당 모이어티, 또는 당 모이어티 유사체는 임의의 위치에서 변형 또는 치환될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "2'-변형된 당"는 2' 위치에서 변형된 푸라노실 당을 의미한다. 어떤 구현예에서, 그와 같은 변형은 하기로부터 선택된 치환체를 포함한다: 치환된 및 비치환된 알콕시, 치환된 및 비치환된 티오알킬, 치환된 및 비치환된 아미노 알킬, 치환된 및 비치환된 알킬, 치환된 및 비치환된 알릴, 및 치환된 및 비치환된 알키닐을 비제한적으로 포함하는 할라이드. 어떤 구현예에서, 2' 변형은 하기를 비제한적으로 포함하는 치환체로부터 선택된다: O[(CH2)nO]mCH3, O(CH2)nNH2, O(CH2)nCH3, O(CH2)nONH2, OCH2C(=O)N(H)CH3, 및 O(CH2)nON[(CH2)nCH3]2, 여기서 n 및 m은 1 내지 약 10이다. 다른 2'- 치환체 그룹은 하기로부터 또한 선택될 수 있다: C1-C12 알킬; 치환된 알킬; 알케닐; 알키닐; 알카릴; 아랄킬; O-알카릴 또는 O-아랄킬; SH; SCH3; OCN; Cl; Br; CN; CF3; OCF3; SOCH3; SO2CH3; ONO2; NO2; N3; NH2; 헤테로사이클로알킬; 헤테로사이클로알카릴; 아미노알킬아미노; 폴리알킬아미노; 치환된 실릴; RNA 절단 그룹; 리포터 그룹; 삽입제; 약력학적 특성을 개선하는 그룹; 및 안티센스 화합물의 약동학적 특성을 개선하는 그룹, 및 유사한 특성을 갖는 다른 치환체. 어떤 구현예에서, 변형된 뉴클레오사이드는 2'-MOE 측쇄를 포함한다 (참고, 예를 들면, Baker 등, J. Biol. Chem., 1997, 272, 11944-12000). 그와 같은 2'-MOE 치환은 비변형된 뉴클레오사이드 및 다른 변형된 뉴클레오사이드, 예컨대 2'- O-메틸, O-프로필, 및 O-아미노프로필과 비교하여 개선된 결합 친화도를 갖는 것으로 기재되었다. 2'-MOE 치환체를 갖는 올리고뉴클레오타이드는 또한 생체내 사용을 위해 유망한 특징을 갖는 유전자 발현의 안티센스 억제제인 것으로 보여졌다 (참고, 예를 들면, Martin, P., Helv . Chim . Acta, 1995, 78, 486-504; Altmann 등, Chimia, 1996, 50, 168-176; Altmann 등, Biochem . Soc . Trans., 1996, 24, 630-637; 및 Altmann 등, Nucleosides Nucleotides, 1997, 16, 917-926).
본원에서 사용된 바와 같이, "변형된 테트라하이드로피란 뉴클레오사이드" 또는 "변형된 THP 뉴클레오사이드"는 노말 뉴클레오사이드 (당 대용물)에서 펜토푸라노실 잔기를 대체하기 위해 치환된 6-원 테트라하이드로피란 "당"을 갖는 뉴클레오사이드를 의미한다. 변형된 THP 뉴클레오사이드는, 비제한적으로, 헥시톨 핵산 (HNA), 아니톨 핵산 (ANA), 만니톨 핵산 (MNA)로서 당해분에서 불리는 것들 (참고 Leumann, CJ. Bioorg . & Med . Chem . (2002) 10:841-854), 플루오로 HNA (F-HNA), 또는 식 X로 표시되는 화합물을 포함한다:
식 X:
Figure pct00008
여기서 독립적으로 식 X의 각각의 상기 적어도 1 테트라하이드로피란 뉴클레오사이드 유사체에 대해:
Bx는 헤테로사이클릭 염기 모이어티이고;
T3 및 T4 각각은, 독립적으로, 테트라하이드로피란 뉴클레오사이드 유사체를 안티센스 화합물에 연결하는 뉴클레오사이드간 연결 그룹이거나 T3 및 T4 중 하나는 테트라하이드로피란 뉴클레오사이드 유사체를 안티센스 화합물에 연결하는 뉴클레오사이드간 연결 그룹이고, T3 및 T4 중 다른 것은 H, 하이드록실 보호 그룹, 결합된 콘주게이트 그룹, 또는 5' 또는 3'-말단기이고;
q1, q2, q3, q4, q5, q6 및 q7 각각은, 독립적으로, H, C1-C6 알킬, 치환된 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 치환된 C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 또는 치환된 C2-C6 알키닐이고;
R1 및 R2 중 하나는 수소이고 다른 것은 할로겐, 치환된 또는 비치환된 알콕시, NJ1J2, SJ1, N3, OC(=X)J1, OC(=X)NJ1J2, NJ3C(=X)NJ1J2, 및 CN로부터 선택되고, 여기서 X는 O, S, 또는 NJ1이고, 각각의 J1, J2, 및 J3는, 독립적으로, H 또는 C1-C6 알킬이다.
어떤 구현예에서, 식 X의 변형된 THP 뉴클레오사이드가 제공되고, qm, qn, qp, qr, qs, qt , 및 qu 각각은 H이다. 어떤 구현예에서, qm, qn, qp, qr, qs, qt , 및 qu 중 적어도 하나는 H 이외의 것이다. 어떤 구현예에서, qm, qn, qp, qr, qs, qt 및 qu 중 적어도 하나는 메틸이다. 어떤 구현예에서, 식 X의 THP 뉴클레오사이드가 제공되고, 여기서 R1 및 R2 중 하나는 F이다. 어떤 구현예에서, R1은 플루오로이고 R2는 H이고, R1은 메톡시이고 R2는 H이고, R1은 메톡시에톡시이고 R2는 H이다.
본원에서 사용된 바와 같이, "2'-변형된" 또는 "2'-치환된"는 H 또는 OH 이외의 2' 위치에서 치환체를 포함하는 당을 포함하는 뉴클레오사이드를 의미한다. 2'-변형된 뉴클레오사이드는, 비제한적으로, 바이사이클릭 뉴클레오사이드를 포함하고, 여기서 당 고리의 2 개의 탄소 원자를 연결하는 브릿지는 2' 탄소 및 당 고리 및 비-브릿징 2'치환체, 예컨대 알릴, 아미노, 아지도, 티오, O-알릴, O-C1-C10 알킬, -OCF3, O-(CH2)2-O-CH3, 2'-O(CH2)2SCH3, O-(CH2)2-O-N(Rm)(Rn), 또는 O-CH2-C(=O)-N(Rm)(Rn)를 갖는 뉴클레오사이드의 또 하나의 탄소를 연결하고, 여기서 각각의 Rm 및 Rn는, 독립적으로, H 또는 치환된 또는 비치환된 C1-C10 알킬이다. 2'-변형된 뉴클레오사이드는 예를 들면, 당의 다른 위치에서 및/또는 핵염기에서 다른 변형을 추가로 포함할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "2'-F"는 2' 위치에서 플루오로 그룹을 포함하는 당을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "2'-OMe" 또는 "2'-OCH3 " 또는 "2'-O-메틸" 각각은 당 고리의 2' 위치에서-OCH3 그룹을 포함하는 당을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "올리고뉴클레오타이드"는 복수의 연결된 뉴클레오사이드를 포함하는 화합물을 의미한다. 어떤 구현예에서, 복수의 뉴클레오사이드 중 하나 이상이 변형된다. 어떤 구현예에서, 올리고뉴클레오타이드는 하나 이상의 리보뉴클레오사이드 (RNA) 및/또는 데옥시리보뉴클레오사이드 (DNA)를 포함한다.
많은 다른 바이사이클로 및 트리사이클로 당 대용물 고리계는 또한 당해기술에 공지되어 있고 안티센스 화합물에 통합시키기 위한 뉴클레오사이드를 변형하기 위해 사용될 수 있다 (참고, 예를 들면, 검토 논문: Leumann, J. C, Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2002, 10, 841-854).
그와 같은 고리계는 활성을 향상시키기 위해 다양한 부가적 치환을 경험할 수 있다.
변형된 당류의 제조 방법은 당해분야의 숙련가에게 잘 공지되어 있다.
변형된 당 모이어티를 갖는 뉴클레오타이드에서, 핵염기 모이어티 (천연, 변형된, 또는 이들의 조합)은 적절한 핵산 표적과의 하이브리드화를 위해 유지된다.
어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 하나 이상의 변형된 당 모이어티를 갖는 뉴클레오타이드를 포함한다. 어떤 구현예에서, 변형된 당 모이어티는 2'-MOE이다. 어떤 구현예에서, 2'-MOE 변형된 뉴클레오타이드는 갭머 모티프에서 배열된다. 어떤 구현예에서, 변형된 당 모이어티는 cEt이다. 어떤 구현예에서, cEt 변형된 뉴클레오타이드는 갭머 모티프의 윙 도처에 배열된다.
변형된 핵염기
핵염기 (또는 염기) 변형 또는 치환은, 자연 발생 또는 합성 비변형된 핵염기와 구조적으로 구별할 수 있고 기능적으로 교환가능하다. 천연 및 변형된 핵염기 모두는 수소 결합에 참여할 수 있다. 그와 같은 핵염기 변형은 뉴클레아제 안정성, 결합 친화도 또는 일부 다른 유익한 생물학적 특성을 안티센스 화합물에 부여할 수 있다. 변형된 핵염기는 합성 및 천연 핵염기 예컨대, 예를 들면, 5-메틸시토신 (5-me-C)를 포함한다. 5-메틸시토신 치환를 포함하는 어떤 핵염기 치환은, 표적 핵산에 대한 인티센스 화합물의 결합 친화도를 증가시키는데 특히 유용하다. 예를 들면, 5-메틸시토신 치환은 0.6-1.2 ℃까지 핵산 이중 안정성을 증가시키는 것으로 보였다 (Sanghvi, Y.S., Crooke, S.T. 및 Lebleu, B., eds., Antisense Research and Applications, CRC Press, Boca Raton, 1993, 페이지 276-278).
부가적 비변형된 핵염기는 하기를 포함한다: 5-하이드록시메틸 시토신, 잔틴, 하이포잔틴, 2-아미노아데닌, 아데닌 및 구아닌의 6-메틸 및 다른 알킬 유도체, 아데닌 및 구아닌의 2-프로필 및 다른 알킬 유도체, 2-티오우라실, 2-티오티민 및 2-티오시토신, 5-할로우라실 및 시토신, 5-프로피닐 (-C≡C-CH3) 우라실 및 시토신 및 피리미딘 염기의 다른 알키닐 유도체, 6-아조 우라실, 시토신 및 티민, 5-우라실 (슈도우라실), 4-티오우라실, 8-할로, 8-아미노, 8-티올, 8-티오알킬, 8-하이드록실 및 다른 8-치환된 아데닌 및 구아닌, 5-할로 특히 5-브로모, 5-트리플루오로메틸 및 다른 5-치환된 우라실 및 시토신, 7-메틸구아닌 및 7-메틸아데닌, 2-F-아데닌, 2-아미노-아데닌, 8-아자구아닌 및 8-아자아데닌, 7-데아자구아닌 및 7-데아자아데닌 및 3-데아자구아닌 및 3-데아자아데닌.
헤테로사이클릭 염기 모이어티는, 퓨린 또는 피리미딘 염기가 다른 헤테로사이클, 예를 들면 7-데아자-아데닌, 7-데아자구아노신, 2-아미노피리딘 및 2-피리돈로 치환된 것들을 또한 포함할 수 있다. 안티센스 화합물의 결합 친화도를 증가시키는데 특히 유용한 핵염기는 5-치환된 피리미딘, 6-아자피리미딘 및 N-2, N-6 및 O-6 치환된 퓨린을 포함하고, 이것은 2 아미노프로필아데닌, 5-프로피닐우라실 및 5-프로피닐시토신을 포함한다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 하나 이상의 변형된 핵염기를 포함한다. 어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 캡-넓어진 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 하나 이상의 변형된 핵염기를 포함한다. 어떤 구현예에서, 변형된 핵염기는 5-메틸시토신이다. 어떤 구현예에서, 각각의 시토신은 5-메틸시토신이다.
조성물 및 약제학적 조성물을 제형하는 방법
안티센스 올리고뉴클레오타이드는 약제학적 조성물 또는 제형의 제조를 위한 약제학적으로 허용가능한 활성 또는 불활성 물질과 혼합될 수 있다. 조성물 및 약제학적 조성물의 제형 방법은 수많은 기준에 의존하고, 이 기준은, 비제한적으로, 투여 경로, 질환 정도, 또는 투여될 복용량을 포함한다.
GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물은 안티센스 화합물을 적당한 약제학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 조합하여 약제학적 조성물에서 이용될 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 희석제는 포스페이트-완충 식염수 (PBS)를 포함한다. PBS는 비경구로 전달될 조성물에서 사용하기에 적당한 희석제이다. 따라서, 일 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 희석제를 포함하는 약제학적 조성물이 본원에 기재된 방법에서 이용된다. 어떤 구현예에서, 약제학적으로 허용가능한 희석제는 PBS이다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 안티센스 올리고뉴클레오타이드이다.
안티센스 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 임의의 약제학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 또는 그와 같은 에스테르의 염, 또는 인간을 포함하는 동물에게 투여시, (직접적으로 또는 간접적으로) 생물학적 활성 대사물 또는 그의 잔류물을 제공할 수 있는 임의의 다른 올리고뉴클레오타이드을 포함한다. 따라서, 예를 들면, 본 개시내용은 또한 안티센스 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 그와 같은 전구약물의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 다른 생물동등성에 관한 것이다. 적당한 약제학적으로 허용가능한 염은, 비제한적으로, 나트륨 및 칼륨 염을 포함한다.
본원에 기재된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 당해기술에서 잘 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 염의 검토에 대해 하기를 참조한다: Stahl 및 Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002). 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 나트륨 염은 유용하고 인간에게 치료 투여용으로 또한 허용된다. 따라서, 일 구현예에서 본원에 기재된 화합물은 나트륨 염의 형태이다.
전구약물은 활성 안티센스 화합물을 형성하도록 내인성 뉴클레아제에 의해 절단된 안티센스 화합물의 하나 또는 둘 모두의 말단에서 부가적 뉴클레오사이드의 통합을 포함한다.
콘주게이트된 안티센스 화합물
안티센스 화합물은 수득한 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 활성, 세포 분포 또는 세포 흡수를 향상시키는 하나 이상의 모이어티 또는 콘주게이트에 공유결합될 수 있다. 전형적인 콘주게이트 그룹은 콜레스테롤 모이어티 및 지질 모이어티를 포함한다. 부가적 콘주게이트 그룹은 탄수화물, 인지질, 바이오틴, 펜아진, 폴레이트, 펜안트리딘, 안트라퀴논, 아크리딘, 플루오레신, 로다민, 쿠마린, 및 염료를 포함한다.
안티센스 화합물은 특성 예컨대, 예를 들면, 뉴클레아제 안정성을 향상시키기 위해 안티센스 화합물의 하나 또는 둘 모두 말단에 일반적으로 부착된 하나 이상의 안정화 그룹을 갖도록 또한 변형될 수 있다. 안정화 그룹에 캡 구조가 포함된다. 이들 말단 변형은 엑소뉴클레아제 분해로부터 말단 핵산을 갖는 안티센스 화합물을 보호하고, 세포 내에서 전달 및/또는 국재화를 도울 수 있다. 캡은 5'-말단 (5'-캡), 또는 3'-말단 (3'-캡)에서 존재할 수 있고, 또는 말단 둘에서 존재할 수 있다. 캡 구조는 당해기술에서 잘 공지되어 있고, 예를 들면, 반전된 데옥시 무염기성 캡을 포함한다. 뉴클레아제 안정성을 부여하기 위해 캡 안티센스 화합물의 하나 또는 둘 모두의 말단을 캡핑하기 위해 사용될 수 있는 추가의 3' 및 5'-안정화 그룹은 WO 03/004602 (2003년 1월 16일 공개)에서 개시된 것을 포함한다.
세포 배양물 및 안티센스 화합물 치료
GCCR 핵산의 수준, 활성 또는 발현에 대한 안티센스 화합물의 효과는 다양한 세포 유형에서 시험관내에서 시험될 수 있다. 그와 같은 분석을 위해 사용된 세포 유형은 상업적 판매인 (예를 들면 American Type Culture Collection, Manassus, VA; Zen-Bio, Inc., Research Triangle Park, NC; Clonetics Corporation, Walkersville, MD)으로부터 이용가능하고 세포는 상업적으로 이용가능한 시약을 사용하여 판매인의 지침에 따라 배양된다 (예를 들면 Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA). 설명적인 세포 유형은, 비제한적으로, HepG2 세포 및 일차 간세포를 포함한다.
안티센스 올리고뉴클레오타이드의 시험관내 시험
다른 안티센스 화합물에 의한 치료를 위해 적절하게 변형될 수 있는 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 의한 세포의 치료 방법이 본원에 기재되어 있다.
일반적으로, 세포는, 세포가 배양물에서 대략 60-80% 밀집도에 도달할 때 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 처리된다.
안티센스 올리고뉴클레오타이드를 배양 세포에 도입하기 위해 통상적으로 사용된 하나의 시약은 양이온성 지질 전달감염 시약 LIPOFECTIN® (Invitrogen, Carlsbad, CA)을 포함한다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 원하는 최종 농도 및 2 내지 12 ug/mL / 100 nM 안티센스 올리고뉴클레오타이드 범위인 LIPOFECTIN® 농도를 달성하기 위해 OPTI-MEM® 1 (Invitrogen, Carlsbad, CA) 중에서 LIPOFECTIN®와 혼합된다.
안티센스 올리고뉴클레오타이드를 배양 세포에 도입하기 위해 사용된 또 하나의 시약은 LIPOFECTAMINE 2000® (Invitrogen, Carlsbad, CA)을 포함한다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 원하는 농도 및 2 내지 12 ug/mL / 100 nM 안티센스 올리고뉴클레오타이드 범위인 LIPOFECTAMINE® 농도를 달성하기 위해 OPTI-MEM® 1 감소된 혈청 배지 (Invitrogen, Carlsbad, CA)에서 LIPOFECTAMINE 2000®와 혼합된다.
안티센스 올리고뉴클레오타이드를 배양 세포에 도입하기 위해 사용된 또 하나의 시약은 Cytofectin® (Invitrogen, Carlsbad, CA)를 포함한다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 원하는 농도 및 2 내지 12 ug/mL / 100 nM 안티센스 올리고뉴클레오타이드 범위인 Cytofectin® 농도를 달성하기 위해 OPTI-MEM® 1 감소된 혈청 배치 (Invitrogen, Carlsbad, CA)에서 Cytofectin®와 혼합된다.
안티센스 올리고뉴클레오타이드를 배양 세포에 도입하기 위해 사용된 또 하나의 기술은 전기천공을 포함한다.
세포는 일상적인 방법에 의해 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 처리된다. 세포는 전형적으로 안티센스 올리고뉴클레오타이드 처리 16-24 시간 후에 수확되고, 그 시간에 표적 핵산의 RNA 또는 단백질 수준은 당해분야에서 공지되고 본원에 기재된 방법으로 측정된다. 일반적으로, 처리가 다중 복제물에서 수행될 때, 데이타는 복제물 처리의 평균으로서 제공된다.
사용된 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 농도는 세포주에서 세포주로 변한다. 특정한 세포주에 대한 최적의 안티센스 올리고뉴클레오타이드 농도를 측정하는 방법은 당해기술에 공지되어 있다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 LIPOFECTAMINE2000®, 리포펙틴 또는 사이토펙틴으로 전달감염될 때 1 nM 내지 300 nM 범위의 농도에서 전형적으로 사용된다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 전기천공을 사용하여 전달감염될 때625 내지 20,000 nM 범위의 고농도에서 사용된다.
RNA 단리
RNA 분석은 총 세포 RNA 또는 폴리(A)+ mRNA에 대해 수행될 수 있다. RNA 단리의 방법은 당해기술에 공지되어 있다. RNA는 제조자의 추천된 프로토콜에 따라 당해기술에서 공지된 방법, 예를 들면, TRIZOL® 시약 (Invitrogen, Carlsbad, CA)을 사용하여 제조된다.
표적 수준 또는 발현의 억제의 분석
GCCR핵산의 수준 또는 발현의 억제는 당해기술에서 공지된 다양한 방식으로 검정될 수 있다. 예를 들면, 표적 핵산 수준은, 예를 들면, 노던 블랏 분석, 경쟁적 폴리머라제 연쇄 반응 (PCR), 또는 정량적 실시간 PCR에 의해 정량화될 수 있다. RNA 분석은 총 세포 RNA 또는 폴리(A)+ mRNA에 대해 수행될 수 있다. RNA 단리의 방법은 당해기술에 공지되어 있다. 노던 블랏 분석은 당해기술에서 또한 일상적이다. 정량적 실시간 PCR은 상업적으로 이용가능한 ABI PRISM® 7600, 7700, 또는 7900 서열 검출 시스템 (PE-Applied Biosystems, Foster City, CA로부터 이용가능)을 사용하여 편리하게 달성될 수 있고 제조자의 지침에 따라 사용된다.
표적 RNA 수준의 정량적 실시간 PCR 분석
표적 RNA 수준의 정량화는 제조자의 지침에 따라 ABI PRISM® 7600, 7700, 또는 7900 서열 검출 시스템 (PE-Applied Biosystems, Foster City, CA)을 사용하여 정량적 실시간 PCR에 의해 달성될 수 있다. 정량적 실시간 PCR의 방법은 당해기술에 공지되어 있다.
실시간 PCR 전에, 단리된 RNA에 대해 역전사효소 (RT) 반응이 수행되고, 이 반응은 상보적 DNA (cDNA)을 생산하고 그 다음 실시간 PCR 증폭에 대한 기질로서 사용된다. RT 및 실시간 PCR 반응은 동일한 샘플 웰에서 순차적으로 수행된다. RT 및 실시간 PCR 시약은 Invitrogen (Carlsbad, CA)로부터 수득된다. RT, 실시간-PCR 반응은 당해분야의 숙련가에게 공지된 방법에 의해 수행된다.
실시간 PCR에 의해 수득된 유전자 (또는 RNA) 양은, 발현이 일정한 유전자, 예컨대 사이클로필린 A의 발현 수준을 사용하거나, RIBOGREEN® (Invitrogen, Inc. Carlsbad, CA)을 사용하여 총 RNA를 정량화하여 정규화된다. 사이클로필린 A 발현은 실시간 PCR에 의해, 표적과 동시에, 다중화, 또는 별도로 시행하여 정량화된다. 총 RNA는 RIBOGREEN® RNA 정량화 시약 (Invitrogen, Inc. Eugene, OR)를 사용하여 정량화된다. RIBOGREEN®에 의한 RNA 정량화의 방법은 하기에서 교시된다: Jones, L.J., 등, (Analytical Biochemistry, 1998, 265, 368-374). CYTOFLUOR® 4000 기기 (PE Applied Biosystems)는 RIBOGREEN® 형광을 측정하기위해 사용된다.
프로브 및 프라이머는 GCCR 핵산에 대한 하이브리드화를 위해 설계된다. 실시간 PCR 프로브 및 프라이머를 설계하는 방법은 당해기술에 공지되어 있고 소프트웨어 예컨대 PRIMER EXPRESS® 소프트웨어 (Applied Biosystems, Foster City, CA)의 사용을 포함할 수 있다.
단백질 수준의 분석
GCCR 핵산의 안티센스 억제는 GCCR 단백질 수준을 측정하여 평가될 수 있다. GCCR의 단백질 수준은 당해기술에 공지된 다양한 방식, 예컨대 면역침전, 웨스턴 블랏 분석 (면역블로팅), 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA), 정량적 단백질 검정, 단백질 활성 검정 (예를 들면, 카스파제 활성 검정), 면역조직화학, 면역세포화학 또는 형광-활성화된 세포 분류 (FACS)으로 평가 또는 정량화될 수 있다. 표적에 대해 지향된 항체는 다양한 공급원, 예컨대 항체의 MSRS 카탈로그 (Aerie Corporation, Birmingham, MI)으로부터 확인 및 수득될 수 있고, 또는 당해기술에 잘 공지된 종래의 모노클로날 또는 폴리클로날 항체 생성 방법을 통해 제조될 수 있다. 인간 및 랫트 GCCR의 검출에 유용한 항체는 상업적으로 이용가능하다.
안티센스 화합물의 생체내 시험
안티센스 화합물, 예를 들면, 안티센스 올리고뉴클레오타이드는, GCCR의 발현을 억제하고 표현형 변화를 생성하기 위해 그것의 능력을 평가하기 위해 동물에서 시험된다. 시험은 정상동물, 또는 실험 질환 모델에서 수행될 수 있다. 동물에의 투여에 대해, 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 약제학적으로 허용가능한 희석제, 예컨대 포스페이트-완충 식염수에서 제형된다. 투여는 비경구 투여 경로를 포함한다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 의한 치료 기간 다음에, RNA는 조직으로부터 단리되고 GCCR 핵산 발현의 변화가 측정된다. GCCR 단백질 수준의 변화가 또한 측정된다.
어떤 징후
어떤 구현예에서, 개체를 치료하는 방법이 본원에서 제공되고, 이 방법은 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 어떤 구현예에서, 개체는 대사 관련된 질환을 갖는다.
아래의 실시예에서 보여진 바와 같이, GCCR에 대해 표적화된 화합물은, 본원에 기재된 바와 같이, 대사 관련된 질환의 생리적 증상의 중증도를 감소시키는 것으로 보여졌고, 그 질환은 대사 증후군, 진성 당뇨병, 인슐린 내성, 당뇨병 이상지질혈증, 초고트리글리세라이드혈증, 비만 및 체중 증가를 포함하고, 예를 들면, 동물은 증상을 계속 경험하지만 증상은 미치료된 동물과 비교하여 덜 심각하다. 어떤 실험에서, 본 화합물은 혈당 수준을 감소시켰다. 다른 실험에서, 화합물은 당뇨병의 증상을 감소시킨다. 다른 실험에서, 본 화합물은 체중 증가를 억제한다. 다른 실험에서, 본 화합물은 초고트리글리세라이드혈증을 억제한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 기능을 회복하고 따라서 본원에 기재된 바와 같은 화합물에 의한 치료로 질환의 반전을 회복한다. 어떤 구현예에서, 장기간 동안 치료된 동물은 단기간 동안 투여된 화합물보다 덜 심각한 증상을 경험한다.
진성 당뇨병은 수많은 신체적 및 생리적 징후 및/또는 증상을 특징으로 한다. 제 2형 당뇨병과 연관될 당해분야의 숙련가에게 공지된 임의의 증상은 개선되거나 그렇지 않으면 상기에 기재된 방법에서 상기에서 제시된 바와 같이 조절된다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 신체적 징후 예컨대 증가된 글루코스 수준, 증가된 체중 증가, 빈번한 배뇨, 특이한 갈증, 극단적인 배고픔, 극단적인 피로, 흐릿한 시력, 빈번한 감염, 사지에서 따끔거림 또는 저림, 건조 및 가려운 피부, 체중 감소, 저-치유 상처, 및 팽윤된 잇몸이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 증가된 인슐린 내성, 증가된 글루코스 수준, 증가된 지방량, 감소된 대사율, 감소된 글루코오스 소거, 감소된 글루코오스 내성, 감소된 인슐린 민감도, 감소된 간 인슐린 민감도, 증가된 지방 조직 크기 및 중량, 증가된 체지방, 및 증가된 체중과 같은 생리적 증상이다.
어떤 구현예에서, 신체적 징후 또는 증상은 증가된 글루코스 수준이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 체중 증가이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 빈번한 배뇨이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 특이한 갈증이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 극단적인 배고픔. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 극단적인 피로이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 흐릿한 시력이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 빈번한 감염이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 사지에서 따끔거림 또는 저림이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 건조 및 가려운 피부이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 체중 감소이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 저-치유 상처이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 팽윤된 잇몸이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 증가된 인슐린 내성이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 증가된 글루코스 수준이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 증가된 지방량이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 감소된 대사율이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 감소된 글루코오스 소거이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 감소된 글루코오스 내성이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 감소된 인슐린 민감도이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 감소된 간 인슐린 민감도이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 증가된 지방 조직 크기 및 중량이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 증가된 체지방이다. 어떤 구현예에서, 징후 또는 증상은 증가된 체중이다.
어떤 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함하는 개체의 치료 방법이 제공된다. 어떤 구현예에서, 개체는 대사 관련된 질환을 갖는다.
어떤 구현예에서, GCCR 핵산에 표적화된 안티센스 화합물의 투여로 적어도 약 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 또는 99%, 또는 이들 값의 임의의 2 개에 의해 규정된 범위 까지 GCCR 발현이 감소된다.
어떤 구현예에서, GCCR에 대해 표적화된 안티센스 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 대사 관련된 질환을 앓고 있거나 그것에 민감한 환자를 치료하기 위한 약제의 제조를 위해 사용된다.
어떤 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 서열번호: 36에서 인용된 서열의 본원에 기재된 바와 같은 인접 핵염기 부분을 갖는 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 ISIS 426115이다.
어떤 병용 요법
어떤 구현예에서, 하나 이상의 본원에 기재된 약제학적 조성물은 하나 이상의 다른 약제학적 제제와 함께 투여된다. 어떤 구현예에서, 그와 같은 하나 이상의 다른 약제학적 제제는 하나 이상의 본원에 기재된 약제학적 조성물로서 동일한 질환, 장애, 또는 상태를 치료하기 위해 설계된다. 어떤 구현예에서, 그와 같은 하나 이상의 다른 약제학적 제제는 하나 이상의 본원에 기재된 약제학적 조성물로서 상이한 질환, 장애, 또는 상태를 치료하기 위해 설계된다. 어떤 구현예에서, 그와 같은 하나 이상의 다른 약제학적 제제는 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 약제학적 조성물의 원하지 않는 부작용을 치료하기 위해 설계된다. 어떤 구현예에서, 하나 이상의 약제학적 조성물은 다른 약제학적 제제의 원하지 않는 효과를 치료하기 위해 또 하나의 약제학적 제제와 공투여된다. 어떤 구현예에서, 하나 이상의 약제학적 조성물은 조합 효과를 얻기 위해 또 하나의 약제학적 제제와 공투여된다. 어떤 구현예에서, 하나 이상의 약제학적 조성물은 상승작용 효과를 얻기 위해 또 하나의 약제학적 제제와 공투여된다.
어떤 구현예에서, 제 1 제제 및 하나 이상의 제 2 제제는 동시에 투여된다. 어떤 구현예에서, 제 1 제제 및 하나 이상의 제 2 제제는 상이한 시간에 투여된다. 어떤 구현예에서, 제 1 제제 및 하나 이상의 제 2 제제는 단일 약제학적 제형으로 함께 제조된다. 어떤 구현예에서, 제 1 제제 및 하나 이상의 제 2 제제는 별도로 제조된다.
어떤 구현예에서, 제 2 화합물은 본원에 기재된 약제학적 조성물의 투여 전에 투여된다. 어떤 구현예에서, 제 2 화합물은 본원에 기재된 약제학적 조성물의 투여 다음에 투여된다. 어떤 구현예에서, 제 2 화합물은 본원에 기재된 약제학적 조성물로서 동시에 투여된다. 어떤 구현예에서, 공투여된 제 2 화합물의 복용량은 제 2 화합물이 단독 투여된다면 투여되는 복용량과 동일하다. 어떤 구현예에서, 공투여된 제 2 화합물의 복용량은 제 2 화합물이 단독 투여된다면 투여되는 복용량보다 더 낮다. 어떤 구현예에서, 공투여된 제 2 화합물의 복용량은 제 2 화합물이 단독 투여된다면 투여되는 복용량보다 더 크다.
어떤 구현예에서, 제 2 화합물의 공투여는 제 1 화합물의 효과를 향상시키고, 이로써 화합물의 공투여로 제 1 화합물 단독을 투여하는 효과보다 더 큰 효과가 생긴다. 어떤 구현예에서, 공투여로 단독으로 투여될 때 화합물의 효과의 부가적인 효과가 생긴다. 어떤 구현예에서, 공투여로 단독으로 투여될 때 화합물의 효과의 초부가적인 효과가 생긴다. 어떤 구현예에서, 제 1 화합물은 안티센스 화합물이다. 어떤 구현예에서, 제 2 화합물은 안티센스 화합물이다.
어떤 구현예에서, 제 2 제제는, 비제한적으로, 글루코오스-저하제를 포함한다. 글루코오스 저하제는, 비제한적으로, 치료 생활방식 변화, PPAR 작용제, 디펩티딜 펩티다아제 (IV) 억제제, GLP-1 유사체, 인슐린 또는 인슐린 유사체, 인슐린 분비촉진제, SGLT2 억제제, 인간 아밀린 유사체, 바이구아나이드, 알파-글루코시다제 억제제, 또는 이들의 조합을 포함할 수 있자. 글루코오스-저하제는, 비제한적으로 메트포르민, 설포닐우레아, 로시글리타존, 메글리티나이드, 티아졸리딘디온, 알파-글루코시다제 억제제 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 설포닐우레아 can be 아세토헥사마이드, 클로르프로파마이드, 톨부타마이드, 톨라자마이드, 글리메피라이드, 글리피자이드, 글리부라이드, 또는 글리클라자이드일 수 있다. 메글리티나이드는 can be 나테글리나이드 또는 레파글리나이드일 수 있다. 티아졸리딘디온 can be 피오글리타존 또는 로시글리타존일 수 있다. 알파-글루코시다제는 can be 아카르보스 또는 미글리톨일 수 있다.
일부 구현예에서, 글루코오스-저하 치료제는 GLP-1 유사체이다. 일부 구현예에서, GLP-1 유사체는 엑센딘-4 또는 리라글루타이드이다.
다른 구현예에서, 글루코오스-저하 치료제는 설포닐우레아. 일부 구현예에서, 설포닐우레아는 아세토헥사마이드, 클로르프로파마이드, 톨부타마이드, 톨라자마이드, 글리메피라이드, 글리피자이드, 글리부라이드, 또는 글리클라자이드이다.
일부 구현예에서, 글루코오스-저하 약물은 바이구아나이드이다. 일부 구현예에서, 바이구아나이드는 메트포르민이고, 일부 구현예에서, 혈당 수준은 메트포르민 단독에 의한 치료 후에 관찰된 락트산증과 비교하여 증가된 락트산증 없이 감소된다.
일부 구현예에서, 글루코오스-저하 약물은 메글리티나이드이다. 일부 구현예에서, 메글리티나이드는 나테글리나이드 또는 레파글리나이드이다.
일부 구현예에서, 글루코오스-저하 약물은 티아졸리딘디온이다. 일부 구현예에서, 티아졸리딘디온은 피오글리타존, 로시글리타존, 또는 트로글리타존이다. 일부 구현예에서, 혈당 수준은 로시글리타존 치료 단독으로 관찰된 것보다 더 큰 체중 증가없이 감소된다.
일부 구현예에서, 글루코오스-저하 약물은 알파-글루코시다제 억제제이다. 일부 구현예에서, 알파-글루코시다제 억제제는 아카르보스 또는 미글리톨이다.
어떤 구현예에서, 공투여된 글루코오스-저하제는 ISIS 113715이다.
어떤 구현예에서, 글루코오스-저하 요법은 치료 생활방식 변화이다.
어떤 구현예에서, 제 2 제제는, 비제한적으로, 지질-저하제를 포함한다. 지질-저하제는, 비제한적으로 아토르바스타틴, 심바스타틴, 로수바스타틴, 및 에제티마이브를 포함할 수 있다. 어떤 그와 같은 구현예에서, 지질-저하제는 본원에 기재된 약제학적 조성물의 투여 전에 투여된다. 어떤 그와 같은 구현예에서, 지질-저하제는 본원에 기재된 약제학적 조성물의 투여 다음에 투여된다. 어떤 그와 같은 구현예에서 지질-저하제는 본원에 기재된 약제학적 조성물로서 동시에 투여된다. 어떤 그와 같은 구현예에서 공투여된 지질-저하제 복용량은, 지질-저하제가 단독으로 투여되었다면 투여된 복용량과 동일하다. 어떤 그와 같은 구현예에서 공투여된 지질-저하제의 복용량은, 지질-저하제가 단독으로 투여되었다면 투여된 복용량보다 더 적다. 어떤 그와 같은 구현예에서 공투여된 지질-저하제의 복용량은, 지질-저하제가 단독으로 투여되었다면 투여된 복용량보다 더 크다.
어떤 구현예에서, 공투여된 지질-저하제는 HMG-CoA 환원효소 억제제이다. 어떤 그와 같은 구현예에서 HMG-CoA 환원효소 억제제는 스타틴이다. 어떤 그와 같은 구현예에서 스타틴은 아토르바스타틴, 심바스타틴, 프라바스타틴, 플루바스타틴, 및 로수바스타틴로부터 선택된다.
어떤 구현예에서, 공투여된 지질-저하제는 콜레스테롤 흡수 억제제이다. 어떤 그와 같은 구현예에서, 콜레스테롤 흡수 억제제는 에제티마이브이다.
어떤 구현예에서, 공투여된 지질-저하제는 공-제형된 HMG-CoA 환원효소 억제제 및 콜레스테롤 흡수 억제제이다. 어떤 그와 같은 구현예에서 공-제형된 지질-저하제는 에제티마이브/심바스타틴이다.
어떤 구현예에서, 공투여된 지질-저하제는 마이크로솜 트리글리세라이드 전이 단백질 억제제 (MTP 억제제)이다.
어떤 구현예에서, 공투여된 지질-저하제는 ApoB에 대해 표적화된 올리고뉴클레오타이드이다.
어떤 구현예에서, 제 2 제제는, 비제한적으로 항비만 약물 또는 제제를 포함한다. 그와 같은 안티-항비만제는 비제한적으로 오를리스타트, 또는 리모나반트을 포함하고, 지방질 또는 체중 저하제로서 상기에서 기재된 바와 같이 투여될 수 있다. 어떤 구현예에서, 안티센스 화합물은 식욕 억제제와 함께 공투여될 수 있다. 그와 같은 식욕 억제제는 비제한적으로 디에틸프로피온 테누에이트, 마진돌, 오를리스타트, 펜디메트라진, 및 펜테르민을 포함하고 본원에 기재된 바와 같이 투여될 수 있다. 어떤 구현예에서, 안티-항비만제는 CNS 기반 또는 GLP-1 기반 예컨대, 비제한적으로, 리라글루타이드이다.
제형
본원에서 제공된 화합물은 또한, 흡수, 분포 및/또는 흡수의 보조를 위해 예를 들면, 리포좀, 수용체-표적화된 분자, 또는 다른 제형으로서 화합물의 다른 분자, 분자 구조 또는 혼합물과 혼합된, 콘주게이트된 또는 그렇지 않으면 연관될 수 있다. 그와 같은 흡수, 분포 및/또는 흡수-보조 제형의 제조를 교시하는 대표적인 미국 특허는, 비제한적으로 하기를 포함한다: 5,108,921; 5,354,844; 5,416,016; 5,459,127; 5,521,291; 5,543,158; 5,547,932; 5,583,020; 5,591,721; 4,426,330; 4,534,899; 5,013,556; 5,108,921; 5,213,804; 5,227,170; 5,264,221; 5,356,633; 5,395,619; 5,416,016; 5,417,978; 5,462,854; 5,469,854; 5,512,295; 5,527,528; 5,534,259; 5,543,152; 5,556,948; 5,580,575; 및 5,595,756, 이들 각각은 참고로 본원에 포함되어 있다.
본원에서 제공된 안티센스 화합물은 약제학적 조성물 또는 제형 내에 포함될 수 있다. 약제학적 조성물은 임의의 약제학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 또는 그와 같은 에스테르의 염, 또는인간을 포함하는 동물에게 투여시, (직접적으로 또는 간접적으로) 생물학적 활성 대사물 또는 그의 잔류물을 제공할 수 있는 임의의 다른 화합물을 포함할 수 있다.
용어 "약제학적으로 허용가능한 염"는 본원에서 제공된 화합물의 생리적으로 및 약제학적으로 허용가능한 염: 즉, 모 화합물의 원하는 생물학적 활성을 유지하고 원하지 않는 독물학적 효과를 그것에 부여하는 않는 염을 의미한다. 용어 "약제학적으로 허용가능한 염"는 무기 또는 유기 산 및 염기을 포함하는약제학적으로 허용가능한 비-독성 산 또는 염으로부터 제조된 염을 포함한다. 올리고뉴클레오타이드에 대해, 약제학적으로 허용가능한 염 및 그의 용도의 바람직한 예는 미국 특허 6,287,860에서 추가로 기재되어 있고, 이것은 그 전체가 본원에 포함되어 있다. 나트륨 염은 적당한 형태의 올리고뉴클레오타이드 약물인 것으로 보여졌다.
용어 "약제학적으로 허용가능한 유도체"는, 비제한적으로, 본원에 기재된 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 히드레이트, 에스테르, 전구약물, 다형체, 이성질체, 동원원소로 표지된 변종을 포함한다.
본원에 기재된 약제학적 조성물은 국소 또는 전신 치료가 필요한지 여부 및 치료될 부분에 따라 수많은 방식으로 투여될 수 있다. 투여는 비경구일 수 있다. 비경구 투여는, 비제한적으로 피하, 정맥내 또는 근육내 주사 또는 주입을 포함한다.
비경구 투여는 간 및 혈장에서 GCCR 발현을 표적으로 하는 것이 바람직하다. 적어도 하나의 2'-O-메톡시에틸 변형이 있는 올리고뉴클레오타이드는 비경구 투여에 특히 유용한 것으로 믿어진다.
단위 복용 형태로 편리하게 제공될 수 있는 본원에 기재된 약제학적 제형은 약제학적 산업에서 잘 공지된 종래의 기술에 따라 제조될 수 있다. 그와 같은 기술은 활성 성분을 약제학적 담체(들) 또는 부형제(들)과 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제형은 활성 성분을 액체 담체 또는 미분된 고형 담체 또는 둘 모두와 균일하게 및 친밀하게 회합하여 제조된다.
본원에 기재된 조성물은 수성, 비-수성 또는 혼합된 매질에서 서스펜션으로서 또한 제형될 수 있다. 서스펜션은 안정제를 또한 함유할 수 있다.
본원에 기재된 약제학적 조성물은, 비제한적으로, 용액, 에멀젼, 및 리포좀-함유 제형을 포함한다. 본원에 기재된 약제학적 조성물 및 제형은 1 이상 침투 향상제, 담체, 부형제 또는 다른 활성 또는 불활성 성분을 포함할 수 있다.
제형은 리포좀 제형을 포함한다. 본 발명에서 사용된 바와 같이, 용어 "리포좀"는 구형 이중층 또는 이중층으로 배연된 양침내성 지질로 구성된 소포를 의미한다. 리포좀은 전달될 조성물을 함유하는 친지질성 물질 및 수성 내부로부터 형성된 막을 갖는 단일라멜라 또는 다중라멜라 소포이다. 양이온성 리포좀은 안정한 복합체를 형성하기 위해 음으로 하전된 DNA 분자와 상호작용하는 것으로 믿어지는 양으로 하전된 리포좀이다. pH-민감성 또는 음으로 하전된 리포좀은 그것과의 복합하기 보다는 DNA를 포획하는 것으로 믿어진다. 양이온성 및 비양이온성 리포좀 모두는 DNA를 세포로 전달하기 위해 사용되었다.
리포좀은 또한 "입체적으로 안정된" 리포좀을 포함하고, 이 용어는, 본원에서 사용된 바와 같이, 리포좀에 통합될 때, 이로써 그와 같은 특화된 지질이 없는 리포좀에 대해 순환 수명이 증대되는 하나 이상의 특화된 지질을 포함하는 리포좀을 의미한다. 리포좀 및 그의 용도는 미국 특허 6,287,860에서 추가로 기재되어 있고, 이것은 그 전체가 본원에 포함되어 있다.
또 하나의 구현예에서, 제형은 염수 제형을 포함한다. 어떤 구현예에서, 제형은 본원에 기재된 화합물 및 염수로 이루어진다. 어떤 구현예에서, 제형은 본원에 기재된 화합물 및 염수로 본질적으로 이루어진다. 어떤 구현예에서, 염수는 약제학적으로 허용가능한 등급 염수이다. 어떤 구현예에서, 염수는 완충 식염수이다. 어떤 구현예에서, 염수는 포스페이트 완충 식염수 (PBS)이다.
어떤 구현예에서, 제형은 리포좀을 제외한다. 어떤 구현예에서, 제형은 입체적으로 안정된 리포좀을 제외한다. 어떤 구현예에서, 제형은 인지질을 제외한다. 어떤 구현예에서, 제형은 본원에 기재된 화합물 및 염수로 본질적으로 이루어지고, 리포좀을 제외한다.
약제학적 제형 및 조성물은 계면활성제를 또한 포함할 수 있다. 계면활성제 및 그의 용도는 미국 특허 6,287,860에서 추가로 기재되어 있고, 이것은 그 전체가 본원에 포함되어 있다.
일 구현예에서, 본 발명은 핵산, 특히 올리고뉴클레오타이드의 효율적인 전달에 영향을 주도록 다양한 침투 향상제를 이용한다. 침투 향상제 및 그의 용도는 미국 특허 6,287,860에서 추가로 기재되어 있고, 이것은 그 전체가 본원에 포함되어 있다.
정맥내, 피하 및 근육내 주사 또는 주입을 포함하는 비경구 투여용 조성물 및 제형은 완충액, 희석제 및 다른 적당한 첨가물 예컨대, 비제한적으로, 침투 향상제, 담체 화합물 및 다른 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 또한 함유할 수 있는 멸균 수용액을 포함할 수 있다.
또 하나의 관련된 구현예에서, 본원에서 제공된 조성물은 제 1 핵산에 표적화된 하나 이상의 안티센스 화합물, 특히 올리고뉴클레오타이드 및 제 2 핵산 표적에 표적화된 하나 이상의 부가적 안티센스 화합물을 함유할 수 있다. 대안적으로, 본원에서 제공된 조성물은 동일한 핵산 표적의 상이한 영역에 표적화된 2 개 이상의 안티센스 화합물을 함유할 수 있다. 안티센스 화합물의 수많은 예는 당해 기술에 공지되어 있다. 2 개 이상의 조합된 화합물은 함께 또는 순차적으로 사용될 수 있다.
복용
복용은 며칠 내지 몇 개월 지속하건, 치료가 영향을 받거나 질환 상태가 축소될 때까지 치료 과정과 함께 치료될 질환 상태의 중증도 및 반응성에 의존한다. 최적의 투여 계획은 환자의 신체에서 약물의 축적으로부터 계산될 수 있다. 최적의 복용량은 개별적인 올리고뉴클레오타이드의 상대 효능에 따라 변할 수 있고, 시험관내 및 생체내 동물 모형에서 효과적인 것으로 발견된 EC50s을 기반으로 하여 일반적으로 추정될 수 있다. 일반적으로, 복용량은 0.01 μg 내지 100 g / kg의 체중이고, 매일, 매주, 매달 또는 매년, 또는 원하는 간격으로 1회 이상 주어질 수 있다. 성공적인 치료 다음에, 질환 상태의 재발을 방지하기 위해 환자가 유지 요법을 경험하도록 하는 것이 바람직할 수 있고, 여기서 올리고뉴클레오타이드는 0.01 μg 내지 100 g / kg의 체중 범위의 유지 용량으로, 매일 1회 이상으로 투여된다.
본 발명은 그것의 바람직한 구현예의 어떤 것에 따라 특이성과 함께 기재되었지만, 하기 실시예는 본 발명을 단지 설명하기 위한 것이고 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 본원에서 인용된 각각의 참조, 유전자은행 승인 번호, 등은 그 전체가 참고로 본원에 포함되어 있다.
어떤 화합물
다양한 길이의 약 760 개의 새로 설계되고 이전에 개시된 안티센스 화합물, 모티프 및 뼈대 조성물은 몇 개의 세포 유형으로 시험관 내에서 인간 GCGR mRNA에 대한 그것의 효과에 대해 시험되었다 (실시예 1 및 2). 신규 화합물은 시험관내에서 가장 강력한 안티센스 화합물의 일부인 것으로 이전에 결정되었던 ISIS 377131, ISIS 361137, ISIS 361141, ISIS 361151, ISIS 361155, 및 ISIS 361156을 포함하는 이전에 설계된 화합물과 비교되었다 (참고 예를 들면, PCT 공보 번호 WO 2007/035759). 약 760 개의 새로 설계되고 이전에 설계된 안티센스 화합물 중에서, 시험관내 활성을 기준으로 한 추가 연구를 위해 선택된 화합물만이 제공된다.
이들 화합물 중 15 개가 선택되었고 부가적 신규 화합물이 이들 화합물을 기반으로 설계되었다. 317 개의 신규 화합물은 최초 화합물의 화합물 이동된 약간 업스트림 및 다운스트림 (즉 마이크로워크)를 만들어서 설계되었다. 신규 및 최초 화합물은 전달감염을 위해 전기천공을 사용하고 전달감염 시약으로서 리포펙틴을 별도로 사용하여 시험되었다 (실시예 3). 시험된 332 개의 화합물 중에서, 시험관내 활성을 기반으로 한 추가 연구를 위해 선택된 화합물만이 제공된다. 용량 반응 검정을 위해 선택된 72 개의 화합물은 전기천공 및 리포펙틴을 전달감염 시약으로서 개별적으로 사용하여 시험되었다 (실시예 4). 실시예 4 및 5에서 기재된 용량 반응 검정에서, 몇 개의 예시적인 화합물은 기준 화합물, ISIS 377131보다 더 강한 것으로 발견되었다. 29 개의 화합물은 전달감염 시약으로서 전기천공을 사용하여 용량 반응 검정을 위해 선택되었고 (실시예 5), 이것으로부터 12 개의 올리고뉴클레오타이드가 생체내 설치류 내성 연구를 위해 선택되었다.
12 개의 화합물, ISIS 420470 (서열번호: 6), ISIS 420476 (서열번호: 7), ISIS 426115 (서열번호: 36), ISIS 426130 (서열번호: 33), ISIS 426168 (서열번호: 39), ISIS 426172 (서열번호: 42), ISIS 426183 (서열번호: 10), ISIS 426246 (서열번호: 11), ISIS 426261 (서열번호: 10), ISIS 426262 (서열번호: 35), ISIS 426267 (서열번호: 43), 및 ISIS 426325 (서열번호: 42)은, CD1 마우스 모델, 뿐만 아니라 스프래그-다우리 랫트 모델에서 내성에 대해 시험되었다. 본 화합물 ISIS 377131 (서열번호: 4)는 기준으로서 이월되었다. 본 화합물은 서열번호: 1의 영역 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65957, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76229-76248, 76255-76274, 및 95513-95532에 대해 상보적이다.
간 기능 마커, 예컨대 알라닌 트랜스아미나제, 아스파르테이트 트랜스아미나제 및 빌리루빈, 및 신장 기능 마커, 예컨대 BUN 및 크레아티닌, 뿐만 아니라 염증의 마커가 측정되었다 (실시예 6 및 7). 13 개의 화합물은 12 주 동안 CD/1GS 랫트 모델에서 내성에 대한 장기간 효과에 대해 또한 검증되었다 (실시예 8). 크레아티닌에 대한 간 기능 마커, 예컨대 알라닌 트랜스아미나제 및 아스파르테이트 트랜스아미나제, 및 신장 기능 마커, 예컨대 소변 단백질이 측정되었다.
이들 설치류 내성 연구의 최종 평가 (실시예 6-8)로 부가적 연구에 대한 본 화합물의 모두 12개를 선택하게 된다.
시험관내 효능 및 생체내 내성을 포함하는 유리한 특성을 갖기 때문에, 어떤 구현예에서 본원에서 제공된 화합물은 하기의 부분을 함유하는 핵염기 서열을 갖는다: 서열번호: 6, 7, 36, 33, 39, 42, 10, 11, 35 및 43 중의 하나의 적어도 8, 적어도 9, 적어도 10, 적어도 11, 적어도 12, 적어도 14, 적어도 15, 적어도 16, 적어도 17, 적어도 18, 적어도 19 또는 적어도 20 개의 인접 핵염기. 어떤 구현예에서, 본 화합물은 서열번호: 1의 영역 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65957, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76225-76244, 76229-76248, 및 95513-95532의 하나의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 8, 적어도 9, 적어도 10, 적어도 11, 적어도 12, 적어도 14, 적어도 15, 적어도 16, 적어도 17, 적어도 18, 적어도 19 또는 적어도 20 개의 인접 핵염기의 부분을 함유하는 핵염기 서열을 갖는다. 어떤 구현예에서, 열거된 영역을 표적으로 하거나 열거된 서열번호에서 인용된 서열의 핵염기 부분을 갖는 본 화합물은 본원에서 추가로 기재된 바와 같이 다양한 길이일 수 있거나 본원에서 추가로 기재된 바와 같이 다양한 모티프 중 하나를 가질 수 있다. 어떤 구현예에서, 화합물은 하기에 의해 표시되는 바와 같이 특정 길이 및 모티프를 갖는다: ISIS 번호: 420470, 426476, 426115, 426130, 426168, 426172, 426183, 426246, 426261, 426262, 426267, 및 426325.
이들 12 개의 화합물은 사이노몰구스 원숭이에서 활성, 약력학적 프로파일 및 내성에 대해 시험되었다 (실시예 9). 본 화합물의 일부에 의한 처리는 간 조직에서 GCCR mRNA 발현의 감소를 야기했다. 구체적으로, ISIS 420476, ISIS 426115, 및 ISIS 426325에 의한 처리는 PBS 대조군과 비교하여 간 조직에서 GCCR mRNA 발현의 유의미한 감소를 야기했다.
사이노몰구스 원숭이의 내성 연구 (실시예 9)는, 몸체 및 장기 중량의 측정; 간 기능을 평가하기 위한 ALT, AST, 알칼리성 인산분해효소, 및 빌리루빈 수준의 측정; 신장 기능을 평가하기 위한 BUN 및 크레아티닌 수준의 측정; 염증 상태를 평가하기 위한 CRP 및 면역 세포수의 측정; 및 화합물의 약동학을 평하기 위한 간 및 신장에서의 올리고뉴클레오타이드 농도의 측정과 함께 또한 수행되었다. ISIS 426115에 의한 처리는 상기 열거된 모든 파라미터의 기준선 값에 의해 표시된 바와 같이 우수하게 내성이 있었다.
ISIS 420476, ISIS 426115 및 ISIS 426325의 점도가 또한 측정되고 (실시예 10) 모두 3가지 경우에 최저인 것으로 발견된다.
따라서, 개선된 특성 중 임의의 하나 이상을 갖는 안티센스 화합물이 본원에 제공된다. 어떤 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물은, 실시예 4 및 5에서 기재된 바와 같이 전기천공을 사용하여 HepG2 세포주로 전달될 때, 3 μM 미만, 2.5 μM 미만, 2 μM 미만, 1.5 μM 미만, 1 μM 미만의 인간 세포에서 시험관내 IC50의 적어도 하나를 갖는 것에 유효하다. 어떤 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물은, 실시예 4에서 기재된 바와 같이 리포펙틴 사약을 사용하여 HepG2 세포주로 전달될 때, 50 nM 미만, 45 nM 미만 40 nM 미만, 35 nM 미만 30 nM 미만, 25 nM, 20 nM 미만의 인간 세포에서 시험관내 IC50의 적어도 하나를 갖는 것에 유효하다. 어떤 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물은 염수 처리된 동물보다 50 배 이하, 40 배 이하, 30 배 이하, 20 배 이하, 10 배 이하, 5 배 이하, 4 배 이하, 3 배 이하, 또는 2 배 이하의 ALT 또는 AST 값의 증가; 또는 30% 이하, 20% 이하, 15% 이하, 12% 이하, 10%, 5 % 이하 또는 2% 이하의 간, 비장 또는 신장 중량 증가 중 적어도 하나를 갖는 것에 의해 실증된 바와 같이 크게 내성이 있다.
실시예
참조를 위한 비제한적 개시 및 포함
본 명세서에 기술된 어떤 화합물, 조성물 및 방법은 어떤 구현예에 따라 구체성을 갖고 기술되어 있지만, 하기 실시예는 단지 본 명세서에 기술된 화합물들을 설명하는데 도움이 되며, 이들을 제한하고자 의도되는 것은 아니다. 본 출원에서 열거된 각각의 참조문헌은 본 발명에 온전히 참고로 포함된다.
실시예 1: HepG2 세포에서 인간 글루코코티코이드 수용체 ( GCCR )의 안티센스 억제
안티센스 올리고뉴클레오타이드는 인간 GCCR 핵산을 표적화하도록 디자인되었으며, 시험관내에서 GCCR mRNA에 대한 그들의 효과에 대해서 시험하였다. PCT 공개 제 WO2005/071080 호에 이전에 기술된 ISIS 377131이 또한 본 검정에 포함되었다. 웰당 10,000 세포의 밀도로 배양된 HepG2 세포를 120 nM 안티센스 올리고뉴클레오타이드와 리포펙틴 시약을 사용하여 형질감염시켰다. 대략 24 시간의 처리 기간 후에, RNA를 세포로부터 분리시키고, GCCR mRNA 레벨을 인간 프라이머 프로브 세트 RTS1408 (정방향 서열 GGAGATCATATAGACAATCAAGTGCAA, 본 발명에서는 SEQ ID NO: 58로 지정됨; 역방향 서열 GGGTAGAGTCATTCTCTGCTCATTAA, 본 발명에서는 SEQ ID NO: 29로 지정됨; 프로브 서열 CTGTGTTTTGCTCCTGATCTGAT, 본 발명에서는 SEQ ID NO: 60으로 지정됨)을 사용한 정량적 실시간 PCR에 의해서 측정하였다. GCCR mRNA 레벨은 리보그린 (RIBOGREEN®)에 의해서 측정되는 바와 같은 총 RNA 함량에 따라 조정되었다. 결과는 비처리 대조 세포에 대비한 GCCR의 억제율로서 표현된다. 시험한 460 개의 올리고뉴클레오타이드 중에서, 추가의 시험을 위해서 선택된 것들만이 제시된다.
표 1에서 새롭게 디자인된 키메릭 안티센스 올리고뉴클레오타이드들은 5-10-5 MOE 갭머 (gapmer)들로서 디자인되었다. 갭머들은 길이가 20 뉴클레오사이드이고, 여기에서 중앙 갭 분절은 10 개의 2'-데옥시뉴클레오사이드로 이루어지며, 각각 5 개의 뉴클레오사이드를 포함하는 윙 (wing)들이 양 측면 (5' 및 3' 방향으로) 상에 존재한다. 5' 윙 분절 내의 각각의 뉴클레오사이드 및 3' 윙 분절 내의 각각의 뉴클레오사이드는 2'-MOE 변형을 갖는다. 각각의 갭머 전체적인 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 (P=S) 결합이다. 각각의 갭머 전체적인 모든 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다. "인간 표적 출발 부위"는 인간 유전자 서열 내에서 갭머가 표적으로 하는 5'-모스트 (most) 뉴클레오사이드를 나타낸다. 갭머들은 본 발명에서 SEQ ID NO: 1 (뉴클레오타이드 3818000으로부터 3980000까지가 절단된 GENBANK 수탁번호 NT_029289.10의 보체)로 지정된 인간 GCCR 게놈 서열의 인트론 서열 또는 인트론-엑손 접합부 (junction)들에 대해서 표적화되었다. 데이터는 SEQ ID NO: 1의 인트론 영역에 대해서 표적화된 안티센스 올리고뉴클레오타이드가 GCCR mRNA 레벨을 상당히 감소시킴을 나타낸다.
[표 1]
5-10-5 MOE 윙들 및 SEQ ID NO: 1에 대해서 표적화된 데옥시 갭을 갖는 키메릭 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 의한 인간 GCCR mRNA 레벨의 억제
Figure pct00009
실시예 2: HepG2 세포에서 인간 GCCR 의 안티센스 억제
GCCR 핵산을 표적으로 하는 추가의 안티센스 올리고뉴클레오타이드가 디자인되었으며, 시험관내에서 GCCR mRNA에 대한 그들의 효과에 대해 시험하였다. PCT 공개 제 WO2005/071080 호에 이전에 기술된 ISIS 361137, ISIS 361141, ISIS 361151, ISIS 361156, ISIS 377131, ISIS 361143, 및 ISIS 361155가 또한 검정에 포함되었다. 웰당 10,000 세포의 밀도로 배양된 HepG2 세포를 120 nM 안티센스 올리고뉴클레오타이드와 리포펙틴 시약을 사용하여 형질감염시켰다. 대략 24 시간의 처리 기간 후에, RNA를 세포로부터 분리시키고, GCCR mRNA 레벨을 인간 프라이머 프로브 세트 RTS1408을 사용한 정량적 실시간 PCR에 의해서 측정하였다. GCCR mRNA 레벨은 리보그린 (RIBOGREEN®)에 의해서 측정되는 바와 같은 총 RNA 함량에 따라 조정되었다. 결과는 비처리 대조 세포에 대비한 GCCR의 억제율로서 표현된다. 시험한 298 개의 새로운 올리고뉴클레오타이드 중에서, 추가의 시험을 위해서 선택된 것들만이 제시된다.
표 2에서 새롭게 디자인된 키메릭 안티센스 올리고뉴클레오타이드들은 5-10-5 MOE 갭머들로서 디자인되었다. 갭머들은 길이가 20 뉴클레오사이드이고, 여기에서 중앙 갭 분절은 10 개의 2'-데옥시뉴클레오사이드로 이루어지며, 각각 5 개의 뉴클레오사이드를 포함하는 윙들이 양 측면 (5' 및 3' 방향으로) 상에 존재한다. 5' 윙 분절 내의 각각의 뉴클레오사이드 및 3' 윙 분절 내의 각각의 뉴클레오사이드는 2'-MOE 변형을 갖는다. 각각의 갭머 전체적인 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 (P=S) 결합이다. 각각의 갭머 전체적인 모든 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다. "인간 표적 출발 부위"는 인간 유전자 서열 내에서 갭머가 표적으로 하는 5'-모스트 뉴클레오사이드를 나타낸다. 갭머들은 SEQ ID NO: 1의 엑손 서열, 인트론 서열 또는 인트론-엑손 접합부에 대해서 표적화되었다.
[표 2]
5-10-5 MOE 윙들 및 SEQ ID NO: 1에 대해서 표적화된 데옥시 갭을 갖는 키메릭 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 의한 인간 GCCR mRNA 레벨의 억제
Figure pct00010
실시예 3: 마이크로워크 ( microwalk )에 의해서 디자인된 올리고뉴클레오타이드에 의한 HepG2 세포 내의 인간 GCCR 의 안티센스 억제
추가의 갭머들은 표 1 및 2에 제시된 갭머들을 기초로 하여 디자인되었다. 이들 갭머는 표 1 및 2로부터의 원래의 갭머들의 약간 상류 및 하류 (즉, "마이크로워크")로 이동된 갭머들을 생성시킴으로써 디자인되었다. 갭머들을 또한 다양한 모티프들, 예를 들어, 5-10-5 MOE, 3-14-3 MOE, 및 2-13-5 MOE 모티프들을 갖도록 생성되었다. 이들 갭머는 시험관내에서 시험하였다. 웰당 20,000 세포의 밀도로 배양된 HepG2 세포를 전기천공을 사용하여 2,000 nM 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 형질감염시켰다. 대략 24 시간의 처리 기간 후에, RNA를 세포로부터 분리시키고, GCCR mRNA 레벨을 정량적 실시간 PCR에 의해서 측정하였다. 인간 프라이머 프로브 세트 RTS1408을 사용하여 GCCR mRNA 레벨을 측정하였다. GCCR mRNA 레벨은 리보그린 (RIBOGREEN®)에 의해서 측정되는 바와 같은 총 RNA 함량에 따라 조정되었다. 결과는 비처리 대조 세포에 대비한 GCCR의 억제율로서 표현된다. 결과는 표 3에 제시된다.
갭머들은 또한 형질감염 시약으로서 리포펙틴을 사용하여 그들의 활성에 대해서 시험하였다. 웰당 10,000 세포의 밀도로 배양된 HepG2 세포를 리포펙틴을 사용하여 50 nM 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 형질감염시켰다. 대략 24 시간의 처리 기간 후에, RNA를 세포로부터 분리시키고, GCCR mRNA 레벨을 정량적 실시간 PCR에 의해서 측정하였다. 인간 프라이머 프로브 세트 RTS1408을 사용하여 GCCR mRNA 레벨을 측정하였다. GCCR mRNA 레벨은 리보그린 (RIBOGREEN®)에 의해서 측정되는 바와 같은 총 RNA 함량에 따라 조정되었다. 결과는 비처리 대조 세포에 대비한 GCCR의 억제율로서 표현된다. 결과는 또한 표 3에 제시된다.
표 3에서의 키메릭 안티센스 올리고뉴클레오타이드들은 5-10-5 MOE, 3-14-3 MOE, 또는 2-13-5 MOE 갭머들로서 디자인되었다. 표 3에서 별표 (*)로 지정된 갭머들은 그들로부터 마이크로워크에 의해서 갭머 ISIS 426106-426405가 디자인된 원래의 갭머들이다. ISIS 377131이 본 검정에 포함되었으며, 새롭게 디자인된 갭머들의 활성을 ISIS 377131의 활성과 비교하였다. 5-10-5 갭머들은 길이가 20 뉴클레오사이드이고, 여기에서 중앙 갭 분절은 10 개의 2'-데옥시뉴클레오사이드로 이루어지며, 각각 5 개의 뉴클레오사이드를 포함하는 윙들이 양 측면 (5' 및 3' 방향으로) 상에 존재한다. 3-14-3 갭머들은 길이가 20 뉴클레오사이드이고, 여기에서 중앙 갭 분절은 14 개의 2'-데옥시뉴클레오사이드로 이루어지며, 각각 3 개의 뉴클레오사이드를 포함하는 윙들이 양 측면 (5' 및 3' 방향으로) 상에 존재한다. 2-13-5 갭머들은 길이가 20 뉴클레오사이드이고, 여기에서 중앙 갭 분절은 13 개의 2'-데옥시뉴클레오사이드로 이루어지며, 각각 2 및 5 개의 뉴클레오사이드를 포함하는 윙들이 5' 및 3' 방향의 측면 상에 존재한다. 각각의 모티프들 (5-10-5, 3-14-3, 및 2-113-5)에서, 5' 윙 분절 내의 각각의 뉴클레오사이드 및 3' 윙 분절 내의 각각의 뉴클레오사이드는 2'-MOE 변형을 갖는다. 각각의 갭머 전체적인 뉴클레오사이드간 결합은 포스포로티오에이트 (P=S) 결합이다. 각각의 갭머 전체적인 모든 시토신 잔기는 5-메틸시토신이다. "표적 출발 부위"는 갭머가 표적으로 하는 5'-모스트 뉴클레오사이드를 나타낸다. 표 3에 열거된 각각의 갭머는 SEQ ID NO: 1 (뉴클레오타이드 3818000으로부터 3980000까지가 절단된 GENBANK 수탁번호 NT_029289.10의 보체)에 대해서 표적화된다. 추가의 연구들을 위해서 선택된 갭머들 만이 제시된다.
[표 3]
키메릭 안티센스 올리고뉴클레오타이드들에 의한 인간 GCCR mRNA 레벨의 억제
Figure pct00011

Figure pct00012
Figure pct00013
실시예 4: HepG2 세포에서 인간 GCCR 의 용량-의존적 안티센스 억제
인간 GCCR의 상당한 시험관내 억제를 나타내는 실시예 3으로부터의 갭머들을 HepG2 세포 내에서 다양한 조건 하에 시험하였다. 세포를 웰당 20,000 세포의 밀도로 플레이팅하고, 표 4에 명시된 바와 같이 전기천공을 사용하여 0.8 μM, 1.5 μM, 3.0 μM, 또는 6.0 μM 농도의 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 형질감염시켰다. 대략 16 시간의 처리 기간 후에, RNA를 세포로부터 분리시키고, GCCR mRNA 레벨을 정량적 실시간 PCR에 의해서 측정하였다. 인간 GCCR 프라이머 프로브 세트 RTS1408을 사용하여 mRNA 레벨을 측정하였다. GCCR mRNA 레벨은 리보그린 (RIBOGREEN®)에 의해서 측정되는 바와 같은 총 RNA 함량에 따라 조정되었다. 결과는 비처리 대조 세포에 대비한 GCCR의 억제율로서 표현된다.
갭머들은 또한 형질감염 시약인 리포펙틴을 사용하여 HepG2 세포에서 다양한 농도로 시험하였다. 세포를 웰당 10,000 세포의 밀도로 플레이팅하고, 리포펙틴 시약을 사용하여 표 5에 명시된 바와 같이 17.5 nM, 35 nM, 70 nM 또는 140 nM 농도의 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 형질감염시켰다. 대략 16 시간의 처리 기간 후에, RNA를 세포로부터 분리시키고, GCCR mRNA 레벨을 정량적 실시간 PCR에 의해서 측정하였다. 인간 GCCR 프라이머 프로브 세트 RTS1408을 사용하여 mRNA 레벨을 측정하였다. GCCR mRNA 레벨은 리보그린 (RIBOGREEN®)에 의해서 측정되는 바와 같은 총 RNA 함량에 따라 조정되었다. 결과는 비처리 대조 세포에 대비한 GCCR의 억제율로서 표현된다.
각각의 올리고뉴클레오타이드의 절반 최대 억제 농도 (IC50)는 표 4 및 5에 또한 제시되며, 사용된 올리고뉴클레오타이드의 농도를 각각의 농도에서 달성된 GCCR mRNA 발현의 억제율에 대비하여 플로팅하고, 대조군과 비교하여 GCCR mRNA 발현의 50% 억제가 달성된 올리고뉴클레오타이드의 농도를 표시함으로써 계산되었다. 표 4 및 5에 예시된 바와 같이, GCCR mRNA 레벨은 안티센스 올리고뉴클레오타이드 처리된 세포에서 용량-의존적 방식으로 상당히 감소되었다. 특정의 예시된 화합물들은 벤치마크 (benchmark) ISIS 377131보다 더 큰 효력을 입증하였다.
[표 4]
전기천공을 사용하는 HepG2 세포에서 인간 GCCR 발현의 용량-의존적 안티센스 억제
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
[표 5]
리포펙타민 시약을 사용하는 HepG2 세포에서 인간 GCCR 발현의 용량-의존적 안티센스 억제
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
실시예 5: HepG2 세포에서 인간 GCCR 의 용량-의존적 안티센스 억제
실시예 4로부터 선택된 갭머를 HepG2 세포에서 다양한 용량으로 시험하였다. 세포를 웰당 20,000 세포의 밀도로 플레이팅하고, 전기천공을 사용하여 표 6에 명시된 바와 같이 0.5 μM, 1.0 μM, 2.0 μM, 4.0 μM 또는 8.0 μM 농도의 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 형질감염시켰다. 대략 16 시간의 처리 기간 후에, RNA를 세포로부터 분리시키고, GCCR mRNA 레벨을 정량적 실시간 PCR에 의해서 측정하였다. 인간 GCCR 프라이머 프로브 세트 RTS1408을 사용하여 mRNA 레벨을 측정하였다. GCCR mRNA 레벨은 리보그린 (RIBOGREEN®)에 의해서 측정되는 바와 같은 총 RNA 함량에 따라 조정되었다. 결과는 비처리 대조 세포에 대비한 GCCR의 억제율로서 표현된다. 표 6에 예시된 바와 같이, GCCR mRNA 레벨은 안티센스 올리고뉴클레오타이드 처리된 세포에서 용량-의존적 방식으로 감소되었다. 특정의 예시된 화합물들은 벤치마크 ISIS 377131보다 더 큰 효력을 입증하였다.
[표 6]
전기천공을 사용하는 HepG2 세포에서 인간 GCCR 발현의 용량-의존적 안티센스 억제
Figure pct00020
실시예 6: CD1 마우스에서 인간 GCCR 을 표적으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 내성
CD1® 마우스 (Charles River, MA)는 안전성 및 효능 시험을 위해서 빈번하게 이용되는 마우스의 다목적 모델이다. 마우스를 실시예 5에 기술된 연구로부터 선택된 ISIS 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 처리하고, 다양한 마커의 레벨에서의 변화에 대해 평가하였다.
처리
8-주령의 수컷 CD1 마우스의 그룹을 12-시간 명/암 사이클로 유지시키고, 퓨리나 (Purina) 마우스 먹이 5001을 마음대로 먹도록 하였다. 마우스를 실험을 개시하기 전에 연구 시설에서 적어도 7일 동안 순응시켰다. 4 마리 CD1 마우스의 그룹 각각에게 50 ㎎/㎏의 ISIS 377131, ISIS 420470, ISIS 420476, ISIS 426115, ISIS 426130, ISIS 426168, ISIS 426172, ISIS 426183, ISIS 426246, ISIS 426261, ISIS 426262, ISIS 426267, 또는 ISIS 426325를 4 주일 동안, 주당 2 회 피하로 주사하였다. 혈액 샘플은 투약 전에 및 투약 후 2, 3 및 4 주일에 꼬리 스닙 (tail snip)을 통해서 수집하였다. 최종 용량을 투여한지 3일 후의 각각의 시점에서 마우스를 안락사시키고, 기관들 및 혈장을 추가의 분석을 위해서 수확하였다. ISIS 426267로 처리된 마우스는 연구의 종료 전에 사망하였다. 따라서, ISIS 426267로 처리된 마우스로부터의 샘플은 어떤 검정에도 포함되지 않았다.
혈장 화학
간 및 신장 기능에 대한 ISIS 올리고뉴클레오타이드들의 영향을 평가하기 위해서, 트랜스아미나제, 콜레스테롤, 글루코즈, 및 트리글리세라이드의 혈장 레벨을 자동 임상 화학 분석기 (Hitachi Olympus AU400e, Melville, NY)를 사용하여 측정하였다. ALT (알라닌 트랜스아미나제) 및 AST (아스파르테이트 트랜스아미나제)의 혈장 레벨을 측정하였으며, 결과는 IU/L로 표현하여 표 7 및 8에 제시된다. 콜레스테롤, 글루코즈 및 트리글리세라이드의 혈장 레벨을 또한 동일한 임상 화학 분석기를 사용하여 측정하였으며, 결과는 또한 표 9, 10, 및 11에 제시된다.
[표 7]
4 주일째에 CD1 마우스의 ALT 레벨 (IU/L)
Figure pct00021
[표 8]
4 주일째에 CD1 마우스의 AST 레벨 (IU/L)
Figure pct00022
[표 9]
4 주일째에 CD1 마우스의 콜레스테롤 레벨 (㎎/dL)
Figure pct00023
[표 10]
4 주일째에 CD1 마우스의 글루코즈 레벨 (㎎/dL)
Figure pct00024
[표 11]
4 주일째에 CD1 마우스의 트리글리세라이드 레벨 (㎎/dL)
Figure pct00025
실시예 7: 스프라그 - 도울리 ( Sprague - Dawley ) 랫트에서 인간 GCCR 을 표적으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 내성
스프라그-도울리 랫트를 실시예 6에 기술된 연구로부터의 ISIS 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 처리하고, 다양한 마커의 레벨에서의 변화에 대해 평가하였다.
처리
8-주령의 수컷 랫트를 12-시간 명/암 사이클로 유지시키고, 퓨리나 표준 랫트 먹이를 마음대로 먹도록 하였다. 동물을 실험을 개시하기 전에 연구 시설에서 적어도 7일 동안 순응시켰다. 4 마리 스프라그-도울리 랫트의 그룹 각각에게 50 ㎎/㎏의 ISIS 377131, ISIS 420470, ISIS 420476, ISIS 426115, ISIS 426130, ISIS 426168, ISIS 426172, ISIS 426183, ISIS 426246, ISIS 426261, ISIS 426262, ISIS 426267, 또는 ISIS 426325를 주당 2 회 피하로 주사하였다. 혈액 샘플은 투약 전에 및 투약 후 2, 3 및 4 주일에 꼬리 스닙을 통해서 수집하였다. 최종 용량을 투여한지 3일 후의 각각의 시점에서 랫트를 안락사시키고, 기관들 및 혈장을 추가의 분석을 위해서 수확하였다.
혈장 화학
간 및 신장 기능에 대한 ISIS 올리고뉴클레오타이드들의 영향을 평가하기 위해서, 트랜스아미나제, 콜레스테롤, 글루코즈, 및 트리글리세라이드의 혈장 레벨을 자동 임상 화학 분석기 (Hitachi Olympus AU400e, Melville, NY)를 사용하여 측정하였다. ALT (알라닌 트랜스아미나제) 및 AST (아스파르테이트 트랜스아미나제)의 혈장 레벨을 측정하였으며, 결과는 IU/L로 표현하여 표 12 및 13에 제시된다. 콜레스테롤, 글루코즈 및 트리글리세라이드의 혈장 레벨을 또한 동일한 임상 화학 분석기를 사용하여 측정하였으며, 결과는 또한 ㎎/dL로 표현하여 표 14-16에 제시된다. 'n/a'는 해당하는 특정 시점에 대한 혈장 화학 마커가 측정되지 않았음을 나타낸다.
[표 12]
스프라그-도울리 랫트의 ALT 레벨 (IU/L)
Figure pct00026
[표 13]
스프라그-도울리 랫트의 AST 레벨 (IU/L)
Figure pct00027
[표 14]
스프라그-도울리 랫트의 콜레스테롤 레벨 (㎎/dL)
Figure pct00028
[표 15]
스프라그-도울리 랫트의 글루코즈 레벨 (㎎/dL)
Figure pct00029
[표 16]
스프라그-도울리 랫트의 트리글리세라이드 레벨 (㎎/dL)
Figure pct00030
실시예 8: CD /1 GS 랫트에서 인간 GCCR 을 표적으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 장기간 내성
CD/1GS 랫트를 실시예 6 및 7에 기술된 연구로부터 선택된 ISIS 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 12 주일 동안 처리하고, 다양한 마커의 레벨에서의 변화에 대해서 평가하였다.
처리
8-주령의 수컷 랫트를 대사 케이지 내에 배치하고, 12-시간 명/암 사이클로 유지시키고, 퓨리나 표준 랫트 먹이를 마음대로 먹도록 하였다. 동물을 실험을 개시하기 전에 연구 시설에서 적어도 7일 동안 순응시켰다. 4 마리 랫트의 그룹 각각에게 30 ㎎/㎏의 ISIS 377131, ISIS 420470, ISIS 420476, ISIS 426115, ISIS 426130, ISIS 426168, ISIS 426172, ISIS 426183, ISIS 426246, ISIS 426261, ISIS 426262, ISIS 426267, 또는 ISIS 426325를 12 주일 동안, 주당 2 회 피하로 주사하였다. 혈액 샘플은 투약 전에 및 투약 후 2, 4, 6, 8, 10 및 12 주일에 꼬리 스닙을 통해서 수집하였다. 최종 용량을 투여한지 3일 후의 각각의 시점에서 랫트를 안락사시키고, 기관들 및 혈장을 추가의 분석을 위해서 수확하였다. ISIS 426267로 처리된 랫트는 연구의 종료 전에 사망하였다. 따라서, ISIS 426267은 어떤 추가의 연구에도 포함되지 않았다.
간 기능
간 기능에 대한 ISIS 올리고뉴클레오타이드들의 영향을 평가하기 위해서, 트랜스아미나제, 콜레스테롤, 글루코즈, 및 트리글리세라이드의 혈장 레벨을 자동 임상 화학 분석기 (Hitachi Olympus AU400e, Melville, NY)를 사용하여 측정하였다. 12 주일째에 측정된 ALT 및 AST의 혈장 레벨은 PBS 대조군의 값에 비한 증가 배수로 표현하여 표 17에 제시된다. 어떤 안티센스 올리고뉴클레오타이드도 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 대해서 예상된 범위를 벗어나는 어떤 혈장 화학 마커에서의 어떤 변화를 야기하지 않았다.
[표 17]
PBS 대조군과 비교한 스프라그-도울리 랫트의 혈장 화학 마커의 증가-배수
Figure pct00031
신장 기능
신장 기능에 대한 ISIS 올리고뉴클레오타이드들의 영향을 평가하기 위해서, 총 뇨 단백질 및 크레아티닌의 뇨 농도를 자동 임상 화학 분석기 (Hitachi Olympus AU400e, Melville, NY)를 사용하여 측정하였다. 결과는 비율뿐만 아니라 12 주일째에 측정된 비율에서의 증가 배수로 표 18에 제시된다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 대해서 예상된 범위를 벗어나는 어떤 신장 대사 마커에서의 어떤 변화도 야기하지 않은 이들 안티센스 올리고뉴클레오타이드가 추가의 연구를 위해서 선택되었다.
[표 18]
스프라그-도울리 랫트의 신장 대사 마커에 대한 안티센스 올리고뉴클레오타이드 처리의 효과
Figure pct00032
마우스 및 랫트 연구 둘 다의 결과는 ISIS 426115가 GCCR을 표적으로 하는 가장 내성이 우수한 안티센스 올리고뉴클레오타이드였음을 나타내었다.
실시예 9: 시노몰구스 원숭이에서 인간 GCCR 을 표적으로 하는 ISIS 안티센스 올리 고뉴클레오타이드의 내성
시노몰구스 원숭이를 실시예 6, 7 및 8에 기술된 연구로부터의 ISIS 안티센스 올리고뉴클레오타이드들로 처리하였다. 안티센스 올리고뉴클레오타이드 활성 및 내성을 평가하였다.
선택된 인간 올리고뉴클레오타이드들은 레수스 원숭이 유전자 서열들과 완전히 교차-반응성이다. 인간 올리고뉴클레오타이드와 레수스 원숭이 서열 사이의 상보성이 클수록 인간 올리고뉴클레오타이드는 레수스 원숭이 서열과 교차-반응할 수 있는 가능성이 더 크다. 인간 올리고뉴클레오타이드들을 인간 엑손에 대한 유사성을 기초로 하여 레수스 원숭이 게놈 서열 (SEQ ID NO: 2; 뉴클레오타이드 1334000으로부터 1491000까지가 절단된 GENBANK Accession No. NW_001120987.1의 보체)과 비교하였으며, 결과는 표 19에 제시된다. "레수스 출발 부위"는 레수스 원숭이 유전자 서열 내에서 갭머가 표적으로 하는 5'-모스트 뉴클레오사이드를 나타낸다.
[표 19]
SEQ ID NO: 2에 대한 인간 GCCR을 표적으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드들의 상보성
Figure pct00033
처리
연구는 중국의 WuXi PharmaTech 시험 시설에서 수행되었다. 2-5 년령의 수컷 시노몰구스 원숭이들은 연구에 사용하기 전에 결핵에 대해서 2 회 시험하였으며, 투약을 개시하기 전에 적어도 14일 동안 격리시켰다. 각각 5 마리씩 무작위로 배정된 수컷 시노몰구스 원숭이의 24 그룹에게 8 ㎎/㎏ 또는 20 ㎎/㎏의 ISIS 420470, ISIS 420476, ISIS 426115, ISIS 426130, ISIS 426168, ISIS 426172, ISIS 426183, ISIS 426246, ISIS 426261, ISIS 426262, ISIS 426267, 또는 ISIS 426325를 제1 주일 동안에는 주당 3 회, 이어서 다음 11 주일 동안에는 주당 1 회 피하로 주사하였다. 16 마리의 시노몰구스 원숭이의 대조군에게는 PBS를 제1 주일 동안에는 주당 3 회, 이어서 다음 11 주일 동안에는 주당 1 회 피하로 주사하였다.
연구 기간 중에, 원숭이들은 병 또는 고통의 징후에 대해서 매일 관찰하였다. 처리에 대한 부작용을 나타내는 어떤 동물이라도 분리하여 수의사 및 연구 지도자에게 보내었다. 임상적 관찰 및 사망률 체크는 투약-전 및 투약 레지멘 중에 1일 적어도 1 회 수행되었다. 체중은 주당 1 회 측정되었다. 혈액 샘플은 처리하기 5일 전뿐만 아니라 연구 기간 중의 다양한 날에 수집하고, 분석하였다. 동물은 혈액 수집하기 전에 적어도 13 시간 (밤새) 동안 단식시켰다. 혈액은 속박된 의식 있는 동물로부터의 말초 정맥으로부터 정맥천자에 의해서 수집하였다. 모든 그룹의 말기 희생은 마지막 용량을 투약한 지 48 시간 후인 86일에 수행되었다.
억제 연구
RNA 분석
연구의 종료 시에, RNA는 프라이머 프로브 세트 mkGCCR_1 (정방향 서열 TTAGGAGGGCGGCAAGTG, 본 발명에서 SEQ ID NO: 61로 지정됨; 역방향 서열 AGGTGTAAGTTCCTGAAACCTGGTA, 본 발명에서 SEQ ID NO: 62로 지정됨; 프로브 서열 TGCAGCAGTGAAATGGGCAAAGGC; 본 발명에서 SEQ ID NO: 63으로 지정됨)를 사용하여 GCCR의 실시간 PCR 분석을 위해서 간 조직으로부터 추출하였다. 데이터는 또한, 프라이머 프로브 세트 mkGCCR_5 (정방향 서열 GGAGATCATATAGACAATCAAGTGCAA, 본 발명에서 SEQ ID NO: 64로 지정됨; 역방향 서열 GGGTAGAGTCATTCTCTGCTCATTAA, 본 발명에서 SEQ ID NO: 65로 지정됨; 프로브 서열 CTGTGTTTTGCTCCTGATCTGAT, 본 발명에서 SEQ ID NO: 66으로 지정됨)를 사용하여 분석되었다. 결과는 PBS 대조군에 대비하고, 하우스-키핑 (house-keeping) 유전자 사이클로필린에 대해서 표준화된 GCCR의 억제율로 제시된다. 표 20에 나타낸 바와 같이, ISIS 426325, ISIS 420476, 및 ISIS 426115에 의한 처리는 GCCR mRNA 레벨을 상당히 감소시켰다.
[표 20]
PBS 대조군에 대비한 시노몰구스 원숭이 간에서의 GCCR mRNA의 억제
Figure pct00034
단백질 분석
대략 1 ㎖의 혈액을 모든 이용 가능한 동물들로부터 11 주일째에 수집하고, EDTA의 칼륨 염을 함유하는 튜브 내에 배치하였다. 튜브를 원심분리 (실온에서 10 분 동안 3000 rpm)하여 혈장을 수득하였다. GCCR 단백질 레벨은 산타 크루즈 (Santa Cruz) sc-1003 토끼 폴리클로날 항체를 사용한 웨스턴 분석에 의해 혈장 내에서 측정되었다. 결과는 PBS 대조군 레벨과 비교한 억제 백분율로 표현하여 표 21에 제시된다. 결과는 ISIS 426325, ISIS 420476, 및 ISIS 426115가 GCCR 단백질 레벨을 상당히 감소시켰음을 나타낸다.
[표 21]
대조군 레벨과 비교한 시노몰구스 원숭이 혈장 내에서의 GCCR 단백질 레벨 감소
Figure pct00035
내성 연구
체중 및 기관 중량 측정
동물의 전반적인 건강에 대한 ISIS 올리고뉴클레오타이드의 영향을 평가하기 위해서, 체중 및 기관 중량들을 12 주일째에 측정하였다. 데이터는 표 22에 제시된다. ISIS 420476에 의한 처리는 비장 중량의 증가를 야기하였다. 나머지 ISIS 올리고뉴클레오타이드들에 의한 처리는 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 대해 예상된 범위 밖의 상당한 변화를 야기하지 않았다.
[표 22]
12 주일째에 시노몰구스 원숭이에서 최종 체중 및 기관 중량
Figure pct00036
간 기능
간 기능에 대한 ISIS 올리고뉴클레오타이드들의 영향을 평가하기 위해서, 혈액 샘플을 11 주일째의 모든 연구 그룹들로부터 수집하였다. 대략 3 ㎖의 혈액을 단식 동물들로부터 수집하고, 혈청 분리를 위해서 튜브 내에 배치하였다. 혈청은 튜브를 실온에서 30-80 분 동안 안정화시키고, 이어서 원심분리 (실온에서 2,000 g x 15 분)함으로써 수득하였다. 트랜스아미나제들의 레벨은 Hitachi-917/911 화학 분석기를 사용하여 측정하였다. ALT 및 AST의 혈장 레벨을 측정하고, 결과는 IU/L로 표현하여 표 23에 제시된다. 손상된 간 세포에 의해서 증가된 양으로 합성되며, 또한 간 질환의 마커인 알칼리성 포스파타제 (ALP)를 유사하게 측정하였다. 데이터는 또한 표 23에 제시된다. 빌리루빈은 또한 간 대사 마커이며, 유사하게 측정되고, 데이터는 또한 ㎎/dL로 표현하여 표 23에 제시된다. ISIS 올리고뉴클레오타이드들 중의 어떤 것도 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 대해 예상된 범위를 벗어나는 이들 간 기능 마커에서의 어떤 변화도 야기하지 않았다.
[표 23]
시노몰구스 원숭이 혈장 내의 간 기능 마커의 레벨
Figure pct00037
신장 기능
신장 기능에 대한 ISIS 올리고뉴클레오타이드들의 영향을 평가하기 위해서, 혈액 샘플을 11 주일째의 모든 연구 그룹들로부터 수집하였다. 대략 3 mL의 혈액을 단식 동물들로부터 수집하고, 혈청 분리를 위해서 튜브 내에 배치하였다. 혈청은 튜브를 실온에서 30-80 분 동안 안정화시키고, 이어서 원심분리 (실온에서 2,000 g x 15 분)함으로써 수득하였다. BUN 및 크레아티닌의 농도는 11 주일째에 Hitachi-917/911 화학 분석기를 사용하여 측정하였다. 결과는 ㎎/dL로 표현하여 표 24에 제시된다. ISIS 올리고뉴클레오타이드들 중의 어떤 것도 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 대해 예상된 범위를 벗어나는 이들 신장 기능 마커에서의 어떤 변화도 야기하지 않았다.
[표 24]
시노몰구스 원숭이에서 혈장 BUN 및 크레아티닌 레벨 (㎎/dL)
Figure pct00038
염증의 마커
시노몰구스 원숭이에서 ISIS 올리고뉴클레오타이드들의 어떤 염증성 영향을 평가하기 위해서, 혈액 샘플을 11 주일째에 채취하였다. 간에서 합성되며, 염증의 마커로서 작용하는 C-반응성 단백질 (CRP)은 11 주일째에 Hitachi-917/911 화학 분석기를 사용하여 유사하게 측정하였다. 결과는 표 25에 제시된다. ISIS 426172 및 ISIS 420470에 의한 처리는 CRP 레벨에서의 증가를 야기하였다. 나머지 ISIS 올리고뉴클레오타이드들에 의한 처리는 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 대해 예상된 범위를 벗어나는 어떤 변화도 야기하지 않았다.
대략 1.3 mL 혈액을 EDTA로 처리된 튜브 내에 수집하고, 혈액학 파라메터의 측정에 사용하였다. 샘플은 ADVIA120 혈액학 분석기 (Bayer, USA)를 사용하여 적혈구 (RBC) 수, 백혈구 (WBC) 수, 단핵구, 호중구, 림프구의 백분율과 같은 개별적인 백혈구 백분율뿐만 아니라 혈소판 수 및 헤마토크릿 (%)에 대해 분석하였다. 데이터는 표 26에 제시된다. ISIS 426168 및 ISIS 420476에 의한 처리는 림프구 수의 증가를 야기하였다. ISSI 426325, ISIS 426172, ISIS 426262, 및 ISIS 420470에 의한 처리는 호중구 수의 증가를 야기하였다. 나머지 ISIS 올리고뉴클레오타이드들에 의한 처리는 안티센스 올리고뉴클레오타이드에 대해 예상된 범위를 벗어나는 어떤 상당한 전-염증성 반응도 야기하지 않았다.
[표 25]
시노몰구스 원숭이에서 CRP 레벨
Figure pct00039
[표 26]
시노몰구스 원숭이에서 혈구 수
Figure pct00040
약력학적 연구
올리고뉴클레오타이드 농도의 측정
전체-길이 올리고뉴클레오타이드의 농도뿐만 아니라 총 올리고뉴클레오타이드 농도 (분해된 형태를 포함)를 12 주일째에 측정하였다. 사용된 방법은 페놀-클로로포름 (액체-액체) 추출에 이은 고체상 추출로 구성되는 이전에 공개된 방법 (Leeds et al., 1996; Geary et al., 1999)의 변형법이다. 추출하기 전에 내부 표준물 (ISIS 355868, 27-mer 2'-O-메톡시에틸 변형된 포스포로티오에이트 올리고뉴클레오타이드, GCGTTTGCTCTTCTTCTTGCGTTTTTT, 본 발명에서 SEQ ID NO: 57로 지정됨)을 첨가하였다. 조직 샘플 농도는 약 1.14 ㎍/g의 정량 하한선 (LLOQ)을 갖는 검정곡선을 사용하여 계산하였다. 신장 대 간에서의 농도의 비를 계산하였다. 결과는 ㎍/조직의 g으로 표현하여 표 27 및 28에 제시된다.
[표 27]
시노몰구스 원숭이의 간에서 전체-길이 올리고뉴클레오타이드 농도 (㎍/g)
Figure pct00041
[표 28]
시노몰구스 원숭이의 간에서 총 올리고뉴클레오타이드 농도 (㎍/g)
Figure pct00042
실시예 10: 인간 GCCR 을 표적으로 하는 ISIS 안티센스 올리고뉴클레오타이드들의 점도의 측정
실시예 9에 기술된 원숭이 연구에서 시험한 안티센스 올리고뉴클레오타이드들 중의 3 개의 점도를 40 cP보다 큰 점도를 갖는 안티센스 올리고뉴클레오타이드들을 스크리닝할 목적으로 측정하였다. 40 cP보다 큰 점도를 갖는 올리고뉴클레오타이드들은 너무 점성이어서 어떤 대상체에게도 투여할 수 없을 것이다.
ISIS 올리고뉴클레오타이드 (32-35 ㎎)를 유리 바이알 내에 평량하고, 120 ㎕의 물을 첨가하고, 바이알을 50℃에서 가열함으로써 안티센스 올리고뉴클레오타이드를 용액 내에 용해시켰다. 전-가열된 샘플의 일부분 (75 ㎕)을 마이크로-점도계 (Cambridge)에 피펫팅하였다. 마이크로-점도계의 온도를 25℃로 설정하고, 샘플의 점도를 측정하였다. 전-가열된 샘플의 또 다른 부분 (20 ㎕)을 85℃에서 260 nM로 UV 판독하기 위해서 10 ㎖의 물에 피펫팅하였다 (Cary UV instrument). 결과는 표 29에 제시되며, 모든 안티센스 올리고뉴클레오타이드 용액이 상기 언급된 기준 하에서 그들의 점도에 있어서 최적임을 나타낸다.
[표 29]
인간 GCCR을 표적으로 하는 ISIS 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 점도 및 농도
Figure pct00043
실시예 11: 레수스 원숭이 LLC - MK2 세포에서 인간 GCCR 을 표적으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드의 용량 반응 확인
실시예 9에 기술된 원숭이 연구로부터 선택된 갭머들을 LLC-MK2 세포에서 다양한 용량으로 시험하였다. 시험한 ISIS 올리고뉴클레오타이드들은 레수스 원숭이 GCCR 유전자 (SEQ ID NO: 2; 뉴클레오타이드 1334000으로부터 1491000까지가 절단된 GENBANK Accession No. NW_001120987.1의 보체)와 교차-반응성이다.
세포를 웰당 25,000 세포의 밀도로 플레이팅하고, 전기천공을 사용하여 표 32에 명시된 바와 같이 0.09 μM, 0.19 μM, 0.38 μM, 0.75 μM, 1.50 μM, 3.00 μM, 6.00 μM 또는 12.00 μM 농도의 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 형질감염시켰다. 대략 16 시간의 처리 기간 후에, RNA를 세포로부터 분리시키고, GCCR mRNA 레벨을 정량적 실시간 PCR에 의해서 측정하였다. 인간 GCCR 프라이머 프로브 세트 RTS1408을 사용하여 mRNA 레벨을 측정하였다. GCCR mRNA 레벨은 리보그린 (RIBOGREEN®)에 의해서 측정되는 바와 같은 총 RNA 함량에 따라 조정되었다. 결과는 비처리 대조 세포에 대비한 GCCR의 억제율로서 제시된다. 표 30에 예시된 바와 같이, GCCR mRNA 레벨은 시험한 ISIS 올리고뉴클레오타이드들로 처리된 LLC-MK2 세포에서 용량-의존적 방식으로 감소되었다.
[표 30]
전기천공을 사용하는 LLC-MK2에서 인간 GCCR의 용량-의존적 안티센스 억제
Figure pct00044
실시예 12: 시노몰구스 원숭이에서 인간/ 레수스 GCCR 을 표적으로 하는 ISIS 426115의 효과
ISIS 426115가 상기의 연구에 의해서 매우 강력하면서도 내성이 우수한 안티센스 올리고뉴클레오타이드인 것으로 입증되었기 때문에, 이것이 제2의 시노몰구스 원숭이 연구를 위해서 선택되었다.
처리
연구 전에, 원숭이를 5-주일 기간 동안 격리 상태로 유지시켰으며, 이 기간 중에 동물들은 일반적인 건강에 대해서 매일 관찰하였다. 원숭이들은 2-3 년생이었으며, 2 내지 5 ㎏의 체중이었다. 5 마리의 무작위로 배정된 수컷 시노몰구스 원숭이의 하나의 그룹에게 적절한 크기의 스테인레스 스틸 투약 니들 및 시린지를 사용하여 원숭이의 피막내 영역 및 바깥 허벅지 내로 ISIS 426115 피하 주사하였다. 원숭이에게 40 ㎎/㎏의 ISIS 426115를 부하 용량으로 처음 1 주일 동안은 주당 4 회 (1, 3, 5, 및 7일), 및 이어서 2-13 주일 동안은 주당 1 회 투여하였다. 8 마리의 시노몰구스 원숭이의 대조군에게는 PBS를 처음 1 주일 동안은 주당 3, 4 회 (1, 3, 5, 및 7일), 및 이어서 2-13 주일 동안은 주당 1 회 피하로 주사하였다.
연구 기간 중에, 원숭이는 병 또는 고통의 징후에 대해서 1일 2 회 관찰하였다. 처리, 손상 또는 병에 기인하여 일시적이거나 미약한 통증 또는 고통 이상을 경험하는 어떤 동물은 연구 지도자와의 협의 후에 수의과 스태프에 의해서 승인된 진통제 또는 작용제로 치료되었다. 건강이 허약하거나 가능한 빈사 상태인 어떤 동물을 추가의 모니터링 및 가능한 안락사를 위해서 확인하였다. 동물의 예정된 안락사는 케타민/크실라진-유도된 마취 및 나트륨 펜토바르비탈의 투여 후에 방혈에 의해서 93일째에 수행되었다. 실시예에 기술된 프로토콜은 IACUC (Institutional Animal Care and Use Committee)에 의해서 승인되었다.
내성 연구
간 기능
간 기능에 대한 ISIS 올리고뉴클레오타이드의 영향을 평가하기 위해서, 혈액 샘플을 모든 그룹으로부터 수집하였다. 혈액 샘플은 95일째 투약-후 48 시간에 대퇴 정맥 천자에 의해서 수집하였다. 원숭이는 혈액 수집 전에 밤새 단식시켰다. 혈액은 K2-EDTA 항응고제를 함유하는 튜브 내에 수집하고, 이것을 원심분리시켜 혈장을 수득하였다. 다양한 간 기능 마커의 레벨은 Toshiba 200FR NEO 화학 분석기 (Toshiba Co., Japan)를 사용하여 측정하였다. ALT 및 AST의 혈장 레벨을 측정하고, 결과는 IU/L로 표현하여 표 31에 제시된다. 간 기능 마커인 빌리루빈을 마찬가지로 측정하고, ㎎/dL로 표현하여 표 31에 제시한다. ISIS 426115에 의한 처리는 원숭이에서 간 기능의 관점에서 내성이 좋았다.
[표 31]
시노몰구스 원숭이 혈장에서 간 기능 마커의 레벨
Figure pct00045
신장 기능
신장 기능에 대한 ISIS 426115의 영향을 평가하기 위해서, 혈액 샘플을 모든 그룹으로부터 수집하였다. 혈액 샘플은 95일째 투약-후 48 시간에 대퇴 정맥 천자에 의해서 수집하였다. 원숭이는 혈액 수집 전에 밤새 단식시켰다. 혈액은 K2-EDTA 항응고제를 함유하는 튜브 내에 수집하고, 이것을 원심분리시켜 혈장을 수득하였다. BUN 및 크레아티닌의 농도는 Toshiba 200FR NEO 화학 분석기 (Toshiba Co., Japan)를 사용하여 측정하였다. 결과는 ㎎/dL로 표현하여 표 32에 제시된다.
혈장 데이터는 ISIS 426115에 의한 처리가 원숭이의 신장 기능의 관점에서 내성이 좋았음을 나타낸다.
[표 32]
시노몰구스 원숭이에서 혈장 BUN 및 크레아티닌 레벨 (㎎/dL)에 대한 영향
Figure pct00046
실시예 9에 기술된 연구를 고려하여 수행된 본 연구는 ISIS 426115가 GCCR을 표적으로 하는 내성이 우수한 안티센스 올리고뉴클레오타이드임을 더 입증한다.
SEQUENCE LISTING <110> Isis Pharmaceuticals, Inc. Susan M. Freier Sanjay Bhanot <120> ANTISENSE MODULATION OF GCCR EXPRESSION <130> BIOL0159WO <150> 61/551,378 <151> 2011-10-25 <160> 69 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 162001 <212> DNA <213> Homo sapien <400> 1 aggctgttgc gtatgtgagt ctggagttcg gaagagacat ccaagttgct gacataaatt 60 tcggtcttca gtgtagaaat ttgatttaaa gccattgggt taaacaaacc aaccaaggta 120 agagtatttg caggtaagag aagagaccca aggacttagc cctaaggcac tccagcatta 180 tgatgtaggg gagatgagga accagcaaag gaggctgaat ggaaacagag aaggaatggc 240 gagttctgtg caagagacag gaagaaagag aatgcaaaat ggtcaaacaa taaataatta 300 agttgaatta gatggtaaag aaataaatgc aaggaaatgc aaggccatag tcactgggca 360 gacagagtaa aagaacatga tgaatcaggt gagattaatc acccctcctg gaactatcag 420 aaaaagatac tcactgacag tgaggcagtc atgttagtcc ccaagttgat gactaatgga 480 aactaaggtc acagtgcaca ttaatttctt ttgaagcaaa ggataaaaac aaacaaaata 540 taaaagatta agatgtaaac gttagtgtac actaattcag agaagaatta aatgattttt 600 aaaacttcaa gaaggaggac agcattctaa atgcattgtt ctaaaacgat agtaagatgg 660 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agtcttcagc agatcagtat ttcagctttc actcaccata 9060 tgaaccattg atcccatttt gttacttctt ccatagaatc tcctcttaag gaaatttaaa 9120 gcaagcttct gactgagatg gcattttcag ggaaagacca ggaggcagac cccaaggggc 9180 ttcacaagat ggcatttttg tggccttggt ggatttgcca tgaccgtggc ttggcaggat 9240 cagaaacctg aatctgtcag cccaccttcc gtcttttccg tctttacact ttatagtgta 9300 tacagtgtaa agacgtctta cactttatag aattacacta agtaattctt tataggaaat 9360 tacactaagt gtaggtgatt aacgtattaa gaattacact aagaattaca ctaagtttag 9420 gtgattaatg tattaagtca aaatgcccaa tttagtaatt tttaatgaaa aacataattg 9480 ccacatgtga gaagcccatt ctattttcat agacatacta atattagaat aacaatgacc 9540 ataatggtta gcatttatta acaataacat cgtgccaggc acggtgtcaa gcattttcca 9600 tgatgacctc acaagtctat cggtaggaat tgtggttaaa accctcttat agataaagtc 9660 agaggtttta aacttgtaag atcacaatgc tagtgaatgg tagagatgag agttgaaccc 9720 acataatgta aactagagtg tggataccta accactaaga cagtgtctca tagaagacgt 9780 gttcagaggt tgccagtgaa cattgaatcc atgggggaaa ggaaggcagg caaatctgct 9840 tttaatgtta tcaggttaat 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atatggtggg catttaaatg 155280 tcggtgtggc aatgttcaca tgctaatatg gcataaattc aaaataagct tagccctggt 155340 gccaaagacc tgaagattat cccatccatg cctcaaatgg ttgtgtgcca attactgcaa 155400 agggtactaa gggaaggaga aactcctgag gctgcctcaa atgtatgtct ttatcacaaa 155460 agatatttta tttaagcaaa cattatctag tcaaaattct tagcttattt tgaaatcaac 155520 tcttcaagaa aaaggaataa acatttaata taaatatcat ggcaatattg cacatagaat 155580 agaaaggtgg ggcagtgtag tggcaagtca gctattctat acaattcatt cagtattttc 155640 caaaacattt gatattgagg ccatatccag gaactggatg acctaacaaa cttcttggag 155700 tacttttttt tttcacaaga gagctccatc actaagaaaa aaagaattgt gatttaaaag 155760 ccaaatttgc cttatccatc attatgtgca ccaagtattt gctacctgcc tactatataa 155820 tattgaagat acaacatgaa taagaaaaat actattgcta ccctcagtca cttagagtat 155880 gtgattggaa aagtgtgtaa cacacctttc ccagtgtctt caggtataat gcagagatac 155940 agatatggca tcaatatgta tacacattat ggctctacca ttcactttta gtagtaacct 156000 tacatttctg tagaacacct tcacacacat ttttaataag cctcaccgaa tgaataaatg 156060 acatgaaaat aacgaggcag attattctcg tttccatttt ataagtaaac tctataagaa 156120 agtaaacagg ctcagaattt aaggaactga ttcatagccc ctagctccca tgttattgaa 156180 gtttgaatgg aaagccttta atgaggccat tcatctatca gatgtcaaag agcatgtctc 156240 tggcctatga gcctctcagg gaactggtta tgtttttctg ttttaaatta atgctttact 156300 gagcacttac tatgtgccag gcacaatgat cattcaacat atctcatttt atcttagtac 156360 ccctctaaag tactactgca aagcagtgat attatatcct cattatattt atatcaggaa 156420 actggcttaa agaattgagt cacttgccta gagtcaccaa gctccagaat ccatagtttt 156480 aaccacttga gaaattatta atatgagcta actagggcga gtgagcccaa gttgatcatt 156540 atgtgtctcg tcttctgaca tgtcctcgtt taatcccttt tgctaccata tcaattttga 156600 cttagaaatt taacaatgat acattagtcc ctgcttatct atggaggata tgttccaaga 156660 ctcccaatgg atgcctgaaa cagatagtac tgaactgtat attttttcct atattacata 156720 cctatgataa agttaattta caaactagat gcagcaagag attaacaata actcaattac 156780 aacaatatac tgtaataaaa gctatgtgaa tgtgatctct cgaaaaatcg tactacactg 156840 agggtaaatg aaaccacaga aagtgaaact gcagataagg aggggactat tgtatttcct 156900 tctcttaaaa acatgtgtct tgtaccctag ggtggttgat ggtggacaat agtagttgcc 156960 cacagattac agaatgccct ctggtttgtc taatacacaa c 157001 <210> 3 <400> 3 000 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 4 gtcaaaggtg ctttggtctg 20 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 5 tccacagatc tctagggcag 20 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 6 ggtagaaata tagttgttcc 20 <210> 7 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 7 ttcatgtgtc tgcatcatgt 20 <210> 8 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 8 atttggctat tgtgggattc 20 <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 9 ggcatccagc gagcaccaaa 20 <210> 10 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 10 agccatggtg atcaggaggc 20 <210> 11 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 11 ggtctggatt acagcataaa 20 <210> 12 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 12 tactggtgct tgtccaggat 20 <210> 13 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 13 tctgcgcacc tgcaggccca 20 <210> 14 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 14 acttcttaca tggtggtggc 20 <210> 15 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 15 gcaactatga aaccacagtt 20 <210> 16 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 16 ggtatatatt tccatcctta 20 <210> 17 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 17 cgacctattg aggtttgcaa 20 <210> 18 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 18 gcagacattt tattaccaat 20 <210> 19 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 19 gtacatctgt cctccagagg 20 <210> 20 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 20 tattcatgtc atagtggtac 20 <210> 21 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 21 gctgtattca tgtcatagtg 20 <210> 22 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 22 gcgcacctgc aggcccaaca 20 <210> 23 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 23 ccctcaggtt ttgatgctgc 20 <210> 24 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 24 ccacagatct ctagggcagg 20 <210> 25 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 25 gtggtagaaa tatagttgtt 20 <210> 26 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 26 gtgtctgcat catgtctctc 20 <210> 27 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 27 tgtgtctgca tcatgtctct 20 <210> 28 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 28 tcatgtgtct gcatcatgtc 20 <210> 29 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 29 tatttcatgt gtctgcatca 20 <210> 30 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 30 ggctattgtg ggattctcct 20 <210> 31 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 31 tggctattgt gggattctcc 20 <210> 32 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 32 ttggctattg tgggattctc 20 <210> 33 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 33 gcatccagcg agcaccaaag 20 <210> 34 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 34 gggcatccag cgagcaccaa 20 <210> 35 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 35 cagccatggt gatcaggagg 20 <210> 36 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 36 gcagccatgg tgatcaggag 20 <210> 37 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 37 tgcagccatg gtgatcagga 20 <210> 38 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 38 ctgcagccat ggtgatcagg 20 <210> 39 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 39 gtctggatta cagcataaac 20 <210> 40 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 40 ttggtctgga ttacagcata 20 <210> 41 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 41 cttggtctgg attacagcat 20 <210> 42 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 42 ccttggtctg gattacagca 20 <210> 43 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 43 gtgcttgtcc aggatgatgc 20 <210> 44 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 44 ctactggtgc ttgtccagga 20 <210> 45 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 45 tgcgcacctg caggcccaac 20 <210> 46 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 46 cttcttacat ggtggtggca 20 <210> 47 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 47 tacttcttac atggtggtgg 20 <210> 48 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 48 gtacttctta catggtggtg 20 <210> 49 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 49 ggtacttctt acatggtggt 20 <210> 50 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 50 aggtacttct tacatggtgg 20 <210> 51 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 51 caggttttga tgctgctgct 20 <210> 52 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 52 ctcaggtttt gatgctgctg 20 <210> 53 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 53 cctcaggttt tgatgctgct 20 <210> 54 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 54 ggcaactatg aaaccacagt 20 <210> 55 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 55 tggcaactat gaaaccacag 20 <210> 56 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 56 aggtatatat ttccatcctt 20 <210> 57 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 57 gcgtttgctc ttcttcttgc gtttttt 27 <210> 58 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 58 ggagatcata tagacaatca agtgcaa 27 <210> 59 <211> 26 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 59 gggtagagtc attctctgct cattaa 26 <210> 60 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Probe <400> 60 ctgtgttttg ctcctgatct gat 23 <210> 61 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 61 ttaggagggc ggcaagtg 18 <210> 62 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 62 aggtgtaagt tcctgaaacc tggta 25 <210> 63 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Probe <400> 63 tgcagcagtg aaatgggcaa aggc 24 <210> 64 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 64 ggagatcata tagacaatca agtgcaa 27 <210> 65 <211> 26 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 65 gggtagagtc attctctgct cattaa 26 <210> 66 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Probe <400> 66 ctgtgttttg ctcctgatct gat 23 <210> 67 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 67 gcgcagcagc cagatctc 18 <210> 68 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 68 tctcccatat acagtcccat tgag 24 <210> 69 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Probe <400> 69 ccaaagcagt ttcac 15

Claims (52)

  1. 서열번호: 4-56의 임의의 것의 적어도 8 개의 인접 핵염기의 부분을 포함하는 핵염기 서열을 갖는 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물로서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 핵염기 서열은 서열번호: 1에 대해 적어도 90% 상보적인 화합물.
  2. 서열번호: 36, 6, 7, 10, 11, 33, 35, 39, 42, 또는 43의 임의의 것의 적어도 8 개의 인접 핵염기의 부분을 포함하는 핵염기 서열을 갖는 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물로서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 핵염기 서열은 서열번호: 1에 대해 적어도 90% 상보적인 화합물.
  3. 서열번호: 1의 핵염기 57825-57844, 59956-59975, 63677-63696, 65938-65957, 65939-65958, 65940-65959, 76224-76243, 76229-76248, 76255-76274 또는 95513-95532의 동등 길이 부분에 대해 상보적인 적어도 8 개의 인접 핵염기의 부분을 포함하는 핵염기 서열을 갖는 12 내지 30 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물로서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 핵염기 서열은 서열번호: 1에 대해 적어도 90% 상보적인 화합물.
  4. 청구항 1, 2 또는 3 중 어느 하나의 항에 있어서, 단일가닥 변형된 올리고뉴클레오타이드로 이루어진 화합물.
  5. 청구항 1 또는 2에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1에 대해 적어도 95% 상보적인 화합물.
  6. 청구항 1, 2 또는 3 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1에 대해 적어도 96% 상보적인 화합물.
  7. 청구항 1, 2 또는 3 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1에 대해 적어도 97% 상보적인 화합물.
  8. 청구항 1, 2 또는 3 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1에 대해 적어도 98% 상보적 화합물.
  9. 청구항 1, 2 또는 3 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1에 대해 적어도 99% 상보적인 화합물.
  10. 청구항 1, 2 또는 3 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 1에 대해 100% 상보적인 화합물.
  11. 청구항 1 내지 10 중 어느 하나의 항에 있어서, 적어도 하나의 뉴클레오사이드간 열결은 변형된 뉴클레오사이드간 연결인 화합물.
  12. 청구항 11에 있어서, 각각의 뉴클레오사이드간 열결은 포스포로티오에이트 뉴클레오사이드간 연결인 화합물.
  13. 청구항 1 내지 12 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 적어도 하나의 뉴클레오사이드는 변형된 당을 포함하는 화합물.
  14. 청구항 13에 있어서, 상기 적어도 하나의 변형된 당은 바이사이클릭 당인 화합물.
  15. 청구항 14에 있어서, 상기 적어도 하나의 바이사이클릭 당의 각각은 4'-(CH2)-O-2', 4'-(CH2)2-O-2', 또는 4'-CH(CH3)-O-2' 그룹을 포함하는 화합물.
  16. 청구항 14에 있어서, 상기 적어도 하나의 바이사이클릭 당의 각각은 4'-CH(CH3)-O-2' 브릿지를 포함하는 화합물.
  17. 청구항 13에 있어서, 적어도 하나의 변형된 당은 2'-O-메톡시에틸 그룹을 포함하는 화합물.
  18. 청구항 1 내지 17 중 어느 하나의 항에 있어서, 적어도 하나의 뉴클레오사이드는 변형된 핵염기를 포함하는 화합물.
  19. 청구항 18에 있어서, 상기 변형된 핵염기는 5-메틸시토신인 화합물.
  20. 청구항 1 내지 19 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는,
    연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절;
    연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및
    연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절을 포함하고;
    여기서 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에 배치되고, 여기서 각 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드는 변형된 당을 포함하는 화합물.
  21. 청구항 20에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는,
    10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절;
    5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및
    5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절을 포함하고;
    여기서 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에 배치되고, 여기서 각 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드는 변형된 당을 포함하는 화합물.
  22. 청구항 20에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는,
    13 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절;
    2 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및
    5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절을 포함하고;
    여기서 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에 배치되고, 여기서 각 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드는 변형된 당을 포함하는 화합물.
  23. 청구항 20에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는,
    14 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절;
    3 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절; 및
    3 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절을 포함하고;
    여기서 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에 배치되고, 여기서 각 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드는 변형된 당을 포함하는 화합물.
  24. 청구항 20 내지 23 중 어느 하나의 항에 있어서, 각각의 윙 분절은 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고; 여기서 각각의 뉴클레오사이드간 열결은 포스포로티오에이트 연결인 화합물.
  25. 청구항 1 내지 24 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 14 내지 25 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 화합물.
  26. 청구항 1 내지 25 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 17 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 화합물.
  27. 청구항 1 내지 26 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 18 내지 21 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 화합물.
  28. 청구항 1 내지 27 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 화합물.
  29. 청구항 1 내지 28 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는 서열번호: 6, 7, 10, 11, 33, 35, 36, 39, 42 또는 43의 임의의 것의 핵염기 서열로 이루어진 화합물.
  30. 서열번호: 36의 핵염기 서열을 갖는 20 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 변형된 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 화합물로서, 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드는,
    10 개의 연결된 데옥시뉴클레오사이드로 이루어진 갭 분절;
    5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 5' 윙 분절;
    5 개의 연결된 뉴클레오사이드로 이루어진 3' 윙 분절을 포함하고;
    여기서 상기 갭 분절은 5' 윙 분절과 3' 윙 분절 사이에 배치되고, 여기서 각 윙 분절의 각각의 뉴클레오사이드는 2'-O-메톡시에틸 변형된 당을 포함하고, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 각각의 뉴클레오사이드간 연결은 포스포로티오에이트 연결이고, 여기서 상기 변형된 올리고뉴클레오타이드의 각각의 시토신은 5-메틸시토신인 화합물.
  31. 청구항 1 내지 30 중 어느 하나의 항의 화합물 또는 그의 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제 중 적어도 하나를 포함하는 조성물.
  32. 동물에게 청구항 1 내지 31 중 어느 하나의 항의 화합물 또는 조성물의 임의의 것을 투여하는 것을 포함하는 방법.
  33. 청구항 32에 있어서, 상기 동물은 인간인 방법.
  34. 청구항 32에 있어서, 상기 화합물의 투여는 대사 질환 또는 병태를 예방, 치료, 개선 또는 그 진행을 느리게 하는 방법.
  35. 청구항 34에 있어서, 상기 질환 또는 병태는 당뇨병인 방법.
  36. 청구항 34에 있어서, 상기 질환 또는 병태는 제 2형 당뇨병인 방법.
  37. 동물에게 청구항 1의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 동물에서 혈당 수준을 감소시키는 방법.
  38. 청구항 37에 있어서, 상기 동물은 인간인 방법.
  39. 청구항 37에 있어서, 상기 혈당 수준은 혈장 글루코스 수준 또는 혈청 글루코스 수준인 방법.
  40. 청구항 37에 있어서, 상기 동물은 당뇨병 동물인 방법.
  41. 동물에서 GCCR과 연관된 질환 또는 병태를 예방, 개선 또는 그 개시를 지연시키는 방법으로서, 상기 방법은 상기 동물에게 치료적 또는 예방적 유효량의 청구항 1 내지 31 중 어느 하나의 항의 화합물 또는 조성물의 임의의 것을 투여하는 것을 포함하는 방법.
  42. 청구항 41에 있어서, 상기 동물은 인간인 방법.
  43. 청구항 41에 있어서, 상기 질환은 대사 질환인 방법.
  44. 청구항 41에 있어서, 상기 질환 또는 병태는 당뇨병인 방법.
  45. 청구항 41에 있어서, 상기 질환 또는 병태는 제 2형 당뇨병인 방법.
  46. 동물에게 치료적 또는 예방적 유효량의 청구항 1 내지 31 중 어느 하나의 항의 화합물 또는 조성물의 임의의 것을 투여하는 것을 포함하는, 상기 동물에서 혈당 수준을 저하시키는 방법.
  47. 청구항 46에 있어서, 상기 동물은 인간인 방법.
  48. 청구항 46에 있어서, 상기 혈당 수준은 혈장 글루코스 수준 또는 혈청 글루코스 수준인 방법.
  49. 청구항 46에 있어서, 상기 동물은 당뇨병 동물인 방법.
  50. 청구항 46에 있어서, 화합물 또는 조성물 및 제 2 제제를 함께 투여하는 것을 포함하는 방법.
  51. 청구항 50에 있어서, 상기 제 2 제제는 글루코오스 저하제인 방법.
  52. 청구항 51에 있어서, 상기 화합물 또는 조성물 및 제 2 제제는 수반하여 투여되는 방법.
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Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6387084B2 (ja) 2013-05-01 2018-09-05 アイオーニス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッドＩｏｎｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ． アポリポタンパク質ｃ−ｉｉｉの発現を調節するための組成物および方法
MX2016014013A (es) 2014-05-01 2016-11-15 Ionis Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodos para modular la expresion del receptor de la hormona del crecimiento.
WO2015179693A1 (en) 2014-05-22 2015-11-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugated antisense compounds and their use
BR112017016068A2 (pt) * 2015-04-16 2018-04-03 Ionis Pharmaceuticals, Inc. composições para modulação de expressão de c9orf72
CN108026529A (zh) * 2015-09-30 2018-05-11 Ionis制药公司 组合疗法
US10083668B2 (en) 2016-03-09 2018-09-25 Semiconductor Energy Laboratory Co., Ltd. Semiconductor device, display device, and electronic device
CN110177544A (zh) 2016-11-29 2019-08-27 普尔泰克健康有限公司 用于递送治疗剂的外泌体
FI3684377T3 (fi) 2017-10-20 2023-01-31 Menetelmiä hepatiitti b -infektion hoitamiseksi
EP3710588A4 (en) 2018-01-16 2021-08-18 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS TO INHIBIT ALDH2 EXPRESSION
KR20210132661A (ko) 2019-02-12 2021-11-04 다이서나 파마수이티컬, 인크. Cyp27a1의 발현을 억제하기 위한 방법 및 조성물
CN109680095A (zh) * 2019-02-25 2019-04-26 广西中医药大学 一种鉴定苦玄参品种的ssr引物组合物及其品种鉴定方法
CA3135402A1 (en) 2019-04-04 2020-10-08 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting gene expression in the central nervous system
IL296549A (en) 2020-03-18 2022-11-01 Dicerna Pharmaceuticals Inc Compositions and methods for inhibiting angptl3 expression
TW202221120A (zh) 2020-08-04 2022-06-01 美商黛瑟納製藥公司 用於治療代謝症候群之組成物及方法
EP4192505A1 (en) 2020-08-04 2023-06-14 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Systemic delivery of oligonucleotides
TW202221121A (zh) 2020-08-04 2022-06-01 美商黛瑟納製藥公司 抑制ｐｌｐ１表現之組成物及方法
TW202220673A (zh) 2020-08-05 2022-06-01 美商戴瑟納製藥股份有限公司 抑制ｌｐａ表現之組合物及方法
AU2021356639A1 (en) 2020-10-08 2023-05-18 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Selective delivery of oligonucleotides to glial cells
KR20230170732A (ko) 2021-04-12 2023-12-19 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 케토헥소키나제 (khk)를 억제하기 위한 조성물 및 방법
BR112023021109A2 (pt) 2021-04-14 2023-12-12 Dicerna Pharmaceuticals Inc Composições e métodos para modular a expressão de pnpla3
BR112023021614A2 (pt) 2021-04-19 2024-01-16 Dicerna Pharmaceuticals Inc Composições e métodos para inibir a expressão da subfamília 1 de receptores nucleares, grupo h, membro 3 (nr1h3)
IL308418A (en) 2021-05-28 2024-01-01 Novo Nordisk As Compositions and methods for inhibiting expression of mitochondrial amidoxime reducing component 1 (MARC1)
KR20240046843A (ko) 2021-08-25 2024-04-11 노보 노르디스크 에이/에스 알파-1 항트립신 발현을 억제하기 위한 조성물 및 방법
AU2022402155A1 (en) 2021-12-01 2024-05-09 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating apoc3 expression
US20230374522A1 (en) 2022-04-15 2023-11-23 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating scap activity
KR20250011918A (ko) 2022-05-12 2025-01-22 다이서나 파마수이티컬, 인크. Mapt 발현을 억제하기 위한 조성물 및 방법
AR129312A1 (es) 2022-05-13 2024-08-14 Dicerna Pharmaceuticals Inc Composiciones y métodos para inhibir la expresión de snca
US11952574B2 (en) 2022-06-24 2024-04-09 Novo Nordisk A/S Compositions and methods for inhibiting transmembrane serine protease 6 (TMPRSS6) expression
TW202430637A (zh) 2022-11-16 2024-08-01 美商戴瑟納製藥股份有限公司 Stat3靶向性寡核苷酸及其用途
WO2025029625A1 (en) 2023-07-28 2025-02-06 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for programmed death ligand receptor (pd-l1) expression

Family Cites Families (98)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4426330A (en) 1981-07-20 1984-01-17 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
US4534899A (en) 1981-07-20 1985-08-13 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
WO1988000975A1 (en) 1986-08-01 1988-02-11 Genetics Institute, Inc. High level inducible expression of heterologous genes
US5354844A (en) 1989-03-16 1994-10-11 Boehringer Ingelheim International Gmbh Protein-polycation conjugates
US5108921A (en) 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5227170A (en) 1989-06-22 1993-07-13 Vestar, Inc. Encapsulation process
US5356633A (en) 1989-10-20 1994-10-18 Liposome Technology, Inc. Method of treatment of inflamed tissues
US5527528A (en) 1989-10-20 1996-06-18 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Solid-tumor treatment method
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5580575A (en) 1989-12-22 1996-12-03 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic drug delivery systems
US5469854A (en) 1989-12-22 1995-11-28 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods of preparing gas-filled liposomes
US5264618A (en) 1990-04-19 1993-11-23 Vical, Inc. Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules
US6582908B2 (en) 1990-12-06 2003-06-24 Affymetrix, Inc. Oligonucleotides
JP3220180B2 (ja) 1991-05-23 2001-10-22 三菱化学株式会社 薬剤含有タンパク質結合リポソーム
NZ244306A (en) 1991-09-30 1995-07-26 Boehringer Ingelheim Int Composition for introducing nucleic acid complexes into eucaryotic cells, complex containing nucleic acid and endosomolytic agent, peptide with endosomolytic domain and nucleic acid binding domain and preparation
US5521291A (en) 1991-09-30 1996-05-28 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Conjugates for introducing nucleic acid into higher eucaryotic cells
US5985558A (en) 1997-04-14 1999-11-16 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense oligonucleotide compositions and methods for the inibition of c-Jun and c-Fos
US5872242A (en) 1992-10-05 1999-02-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide inhibition of ras
US5583020A (en) 1992-11-24 1996-12-10 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Permeability enhancers for negatively charged polynucleotides
WO1994014226A1 (en) 1992-12-14 1994-06-23 Honeywell Inc. Motor system with individually controlled redundant windings
JP3351476B2 (ja) 1993-01-22 2002-11-25 三菱化学株式会社 リン脂質誘導体及びそれを含有するリポソーム
US5395619A (en) 1993-03-03 1995-03-07 Liposome Technology, Inc. Lipid-polymer conjugates and liposomes
US5462854A (en) 1993-04-19 1995-10-31 Beckman Instruments, Inc. Inverse linkage oligonucleotides for chemical and enzymatic processes
US5534259A (en) 1993-07-08 1996-07-09 Liposome Technology, Inc. Polymer compound and coated particle composition
US5543158A (en) 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
US5417978A (en) 1993-07-29 1995-05-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Liposomal antisense methyl phosphonate oligonucleotides and methods for their preparation and use
US5801154A (en) 1993-10-18 1998-09-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of multidrug resistance-associated protein
US5595756A (en) 1993-12-22 1997-01-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents
US5543152A (en) 1994-06-20 1996-08-06 Inex Pharmaceuticals Corporation Sphingosomes for enhanced drug delivery
US5591721A (en) 1994-10-25 1997-01-07 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
US5512295A (en) 1994-11-10 1996-04-30 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Synthetic liposomes for enhanced uptake and delivery
US6770748B2 (en) 1997-03-07 2004-08-03 Takeshi Imanishi Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue
JP3756313B2 (ja) 1997-03-07 2006-03-15 武 今西 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体
US6133246A (en) 1997-08-13 2000-10-17 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense oligonucleotide compositions and methods for the modulation of JNK proteins
US5877309A (en) 1997-08-13 1999-03-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotides against JNK
ATE293123T1 (de) 1997-09-12 2005-04-15 Exiqon As Bi- und tri-zyklische - nukleosid, nukleotid und oligonukleotid-analoga
US6794499B2 (en) 1997-09-12 2004-09-21 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
WO1999015643A2 (en) 1997-09-25 1999-04-01 University Of Florida ANTISENSE OLIGONUCLEOTIDE COMPOSITIONS TARGETED TO ANGIOTENSI N CONVERTING ENZYME mRNA AND METHODS OF USE
US20030203862A1 (en) 1998-03-26 2003-10-30 Miraglia Loren J. Antisense modulation of MDM2 expression
US6238921B1 (en) 1998-03-26 2001-05-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of human mdm2 expression
US20030228597A1 (en) 1998-04-13 2003-12-11 Cowsert Lex M. Identification of genetic targets for modulation by oligonucleotides and generation of oligonucleotides for gene modulation
US6821724B1 (en) 1998-09-17 2004-11-23 Affymetrix, Inc. Methods of genetic analysis using nucleic acid arrays
US6228642B1 (en) 1998-10-05 2001-05-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of tumor necrosis factor-(α) (TNF-α) expression
US6900187B2 (en) 1999-02-26 2005-05-31 The University Of British Columbia TRPM-2 antisense therapy using an oligonucleotide having 2′-O-(2-methoxy)ethyl modifications
ATE385237T1 (de) 1999-02-26 2008-02-15 Univ British Columbia Antisense-therapie für trpm-2
GB9907048D0 (en) 1999-03-27 1999-05-19 Karobio Ab Novel glucocorticoid receptor ligands for the treatment of meta bolic disorders
NZ514348A (en) 1999-05-04 2004-05-28 Exiqon As L-ribo-LNA analogues
US6525191B1 (en) 1999-05-11 2003-02-25 Kanda S. Ramasamy Conformationally constrained L-nucleosides
JP4742483B2 (ja) 1999-12-07 2011-08-10 住友化学株式会社 変異ＥＲαおよび転写活性化の試験系
US6287860B1 (en) 2000-01-20 2001-09-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of MEKK2 expression
GB0008936D0 (en) 2000-04-11 2000-05-31 Glaxo Group Ltd Vectors
US6649341B1 (en) 2000-04-19 2003-11-18 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Human glucocorticoid receptor 1A promoter and splice variants
US6656700B2 (en) 2000-05-26 2003-12-02 Amersham Plc Isoforms of human pregnancy-associated protein-E
US7227007B2 (en) 2000-12-28 2007-06-05 Asahi Kasei Pharma Corporation NF-κB activating gene
WO2003008583A2 (en) 2001-03-02 2003-01-30 Sagres Discovery Novel compositions and methods for cancer
US20030092616A1 (en) 2001-05-25 2003-05-15 Akio Matsuda STAT6 activation gene
WO2002096943A1 (en) 2001-05-25 2002-12-05 Asahi Kasei Kabushiki Kaisha Stat6-activating genes
CA2452458A1 (en) 2001-07-03 2003-01-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Nuclease resistant chimeric oligonucleotides
JP2005516586A (ja) 2001-07-20 2005-06-09 ボード オブ トラスティーズ オブ ザ ユニヴァースティ オブ イリノイ 癌の処置に対する遺伝子標的を同定するための試薬および方法
US7425545B2 (en) 2001-07-25 2008-09-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of C-reactive protein expression
US20060088828A1 (en) 2002-01-23 2006-04-27 Harris Peter C Polycystic kidney disease nucleic acids and proteins
EP1472265A4 (en) 2002-02-20 2005-06-15 Sirna Therapeutics Inc RNA INTERFERENCE MEDIA INHIBITION OF THE EXPRESSION OF THE POLYCOMB GROUP EZH2 PROTEIN GENE USING A SHORT INTERFERING NUCLEIC ACID (SINA)
EP1465910A4 (en) 2002-02-20 2005-03-16 Sirna Therapeutics Inc INHIBITION OF GENE EXPRESSION OF CHECKPOINT KINASE-1 (CHK-1) IMPROVED BY RNA INTERFERENCE USING SHORT INTERFERING NUCLEIC ACIDS
JP2003265184A (ja) 2002-03-18 2003-09-24 Kokuritsu Iyakuhin Shokuhin Eisei Kenkyusho 被検者におけるグルココルチコイド製剤の有効性の検査方法
EP1490490B1 (en) 2002-03-27 2009-05-13 Aegera Therapeutics Inc. Antisense iap nucleobase oligomers and uses thereof
ES2649817T3 (es) 2002-04-05 2018-01-15 Roche Innovation Center Copenhagen A/S Compuestos oligom¿¿ricos para la modulaci¿®n de la expresi¿®n de HIF-1¿Á
AU2003233634A1 (en) 2002-05-20 2003-12-12 Pharmacia Corporation Antisense modulation of glucocorticoid receptor expression
US7148342B2 (en) 2002-07-24 2006-12-12 The Trustees Of The University Of Pennyslvania Compositions and methods for sirna inhibition of angiogenesis
WO2004016215A2 (en) 2002-08-16 2004-02-26 Rexahn Corporation Use of antisense oligonucleotides to inhibit the expression of akt-1
WO2004034969A2 (en) 2002-08-19 2004-04-29 Regulome Corporation Functional sites
DK1530636T3 (da) 2002-08-21 2010-11-29 Univ British Columbia Behandling af melanomer ved reduktion af clusterinniveauet
AU2003290596B2 (en) 2002-11-05 2011-05-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
EP1562971B1 (en) 2002-11-05 2014-02-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
EP2305812A3 (en) 2002-11-14 2012-06-06 Dharmacon, Inc. Fuctional and hyperfunctional sirna
EP1565572B1 (en) 2002-11-25 2011-05-11 University of Copenhagen Porcine polymorphisms associated with resistance to enterotoxigenic e. coli and methods for detecting them
AU2003224132A1 (en) 2003-04-24 2004-11-19 Galapagos Genomics N.V. Effective sirna knock-down constructs
WO2004106356A1 (en) 2003-05-27 2004-12-09 Syddansk Universitet Functionalized nucleotide derivatives
US7825235B2 (en) 2003-08-18 2010-11-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 2 expression
ATE555118T1 (de) 2003-08-28 2012-05-15 Takeshi Imanishi Neue synthetische nukleidsäuren vom typ mit quervernetzter n-o-bindung
US20050142581A1 (en) 2003-09-04 2005-06-30 Griffey Richard H. Microrna as ligands and target molecules
US20050074801A1 (en) 2003-09-09 2005-04-07 Monia Brett P. Chimeric oligomeric compounds comprising alternating regions of northern and southern conformational geometry
US20050053981A1 (en) 2003-09-09 2005-03-10 Swayze Eric E. Gapped oligomeric compounds having linked bicyclic sugar moieties at the termini
WO2005027962A1 (en) 2003-09-18 2005-03-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. 4’-thionucleosides and oligomeric compounds
US20070009899A1 (en) 2003-10-02 2007-01-11 Mounts William M Nucleic acid arrays for detecting gene expression in animal models of inflammatory diseases
US8012944B2 (en) 2003-10-30 2011-09-06 Pharmascience Inc. Method for treating cancer using IAP antisense oligomer and chemotherapeutic agent
JP4642775B2 (ja) 2003-12-23 2011-03-02 サンタリス ファーマ アー／エス Ｂｃｌ−２のモデュレーションのためのオリゴマー化合物
EP2363480A3 (en) 2004-01-20 2015-10-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of glucocorticoid receptor expression
US7919472B2 (en) 2004-09-17 2011-04-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Enhanced antisense oligonucleotides
US20060263798A1 (en) 2005-02-11 2006-11-23 International Business Machines Corporation System and method for identification of MicroRNA precursor sequences and corresponding mature MicroRNA sequences from genomic sequences
JP2006320271A (ja) * 2005-05-20 2006-11-30 Tokyo Institute Of Technology 低分子化合物とタンパク質の結合評価方法
CA2623772A1 (en) * 2005-09-19 2007-03-29 Johnson & Johnson Pharmaceutical Research & Development, L.L.C. Modulation of glucocorticoid receptor expression
DK1984381T3 (da) 2006-01-27 2010-11-01 Isis Pharmaceuticals Inc 6-modificerede bicycliske nukleinsyreanaloger
EP2023939B1 (en) 2006-05-05 2012-06-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating expression of pcsk9
US7547684B2 (en) 2006-05-11 2009-06-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5′-modified bicyclic nucleic acid analogs
WO2008101157A1 (en) 2007-02-15 2008-08-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-substituted-2'-f modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US8278425B2 (en) 2007-05-30 2012-10-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs
WO2008154401A2 (en) 2007-06-08 2008-12-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs
ES2376507T5 (es) 2007-07-05 2015-08-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Análogos de ácidos nucleicos bicíclicos 6-disustituidos

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