JPWO2010109588A1

JPWO2010109588A1 - 医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料並びにその製造方法

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Publication number: JPWO2010109588A1
Application number: JP2011505700A
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Inventors: 央青木; 石原　雅之; 雅之石原; 伸吾中村; 宮崎　俊一; 俊一宮崎
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Priority date: 2009-03-23
Filing date: 2009-03-24
Publication date: 2012-09-20
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Abstract

【課題】本発明は、酸性高分子と塩基性高分子が同じ溶液に同時に溶解しない場合であっても、これらの溶解特性の異なる高分子の複合化を実現することにより、高分子複合体が種々多様な機能を兼ね備えることを特徴とする医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料を提供することを課題とする。【解決手段】酸性高分子及び塩基性高分子を含む混合粉末を支持シートに粉末塗布した後、金属イオン溶液に含浸させてイオン性架橋反応処理を表面に施し、穿孔処理とｐＨの変更によって粉末材料の複合化をおこない、イオン性架橋反応を平衡完了させて後、化学架橋反応処理を施すことを特徴とする医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法。酸性高分子及び塩基性高分子を含む架橋複合体の表層部にイオン性架橋構造と化学架橋構造を備えることを特徴とする医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料。【選択図】図１

Description

本発明は、創傷被覆保護材や化粧用品などに応用利用される医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料及びその製造方法に関する。特に、アルギン酸を基材とした酸性高分子材料と塩基性高分子材料の複合化に関する技術である。

創傷被覆材に代表される医療品には、例えば、アルギン酸カルシウムを用いた製品が既に承認され、流通している。アルギン酸がカルシウムイオンと結合すると、ゲル状化して、不溶解性の性質を有することが知られている。そして、この性質は可逆的であるため、化学平衡作用によりカルシウムを分離して、再びゲル状態を脱して、溶解することも知られている。
酸性高分子材料としては、前記のアルギン酸カルシウム塩を繊維状にした、商品名：「カルトスタット」（コンバテック社製）が流通している。

一方、塩基性高分子材料には、キチン・キトサンがある。キトサンは抗菌作用のある高分子材料であり、既知の材料である。このキチン（ポリ−Ｎ−アセチルグルコサミン）は、繊維芽細胞の増殖、血管新生、傷組織修復などの作用によって、創傷治癒効果があることが知られている。また、滲出液の吸水性、鎮痛効果、止血効果に優れ、正常な肉芽、表皮形成も促進する。さらに、抗原性もないため炎症を引きおこすこともないという特徴を有している。そして、これらの性質を利用したキチン系の商品が、承認され商品名「ベスキチン」として市販されている。

高分子材料を複合化して、それぞれの材料の特徴を兼ね備えた利用方法が研究されている。例えば、アルギン酸を代表とする酸性高分子材料とキトサンを代表とする塩基性高分子材料を複合体として、繊維や膜とする方法が知られている（特許文献１参照）。
また、複合材について、溶液に分散させた既製の繊維成分をろ過して回収、脱水してシート状に加工する積層化方法が知られている（特許文献２参照）。
さらに、シートの製造方法として、アニオン性高分子とこれに架橋しうる多価カチオン系化合物を水性媒体で混合し、特定の粘度をもつゲル状物質とした後、型枠中でシート状に成形して、生体貼付ゲルシートを得る方法が開示されている（特許文献３参照）。

アニオン性高分子であるアルギン酸は、カルシウム塩などの多価イオンとの共存により、不溶性ゲルとなる。この性質を利用した創傷被覆保護材を製作した場合には、止血効果、鎮痛効果（疼痛低減効果）、粘膜保護効果があるものの、このカルシウムには毒性があるとして、化学的に架橋したアルギン酸の利用が開示されている（特許文献４参照）。

また、アルギン酸カルシウムを用いた創傷被覆保護材のもつ止血効果は、カルシウムイオンと生体組織内のナトリウムイオンとの平衡作用により、一定量の交換がおこることが原因であり、そのため、カルシウムイオンの持つ細胞毒性だけを課題とするのは適当でないとし、カルシウムを所定の範囲に制限することが開示されている（特許文献５参照）。
また、この開示により、カルシウムゲルのイオン放出ならびにアルギン酸の溶解を避け、不溶性のゲル状態を安定化させることを提案した共有結合架橋アルギン酸ゲル、商品名：「クラビオＡＧ」が承認され、実用化されている。

細胞毒性に関し、原料となるアルギン酸に含まれるエンドトキシンが問題であるとして、低減化処理されたアルギン酸を用いることが知られている（特許文献６参照）。また、アルギン酸を代表とする酸性高分子材料とキトサンを代表とする塩基性高分子材料を複合体として、繊維や膜とする方法について上述に述べたが、この複合化に関して、へパリンを利用することが知られている（特許文献７参照）。
このヘパリンは構成単糖イズロン酸という糖を含み、イズロン酸はアミノ基を含むため、カチオン性生体高分子ともいえる。そして、ヘパリンを含有させた架橋型アルギン酸は、成長因子の徐放性を有するので、創傷治療剤や組織工学上有用であることについて記述されている。

へパリンの替わりにフコイダンを用いて、キトサンと混合して形成される複合体は、同様にへパリン結合性因子であるＦＧＦ（繊維芽細胞成長因子）などを除放化できることが報告されている（非特許文献１参照）。
また、複合化において、酸性高分子と塩基性分子の溶解性はｐＨにより異なることが問題となっている。そして、塩基性分子のキトサンは酸性溶液でしか溶解しない。そのため、中性領域での溶解性を改善し、用途の多様性を確保したキトサン誘導体が開示されている（特許文献８参照）。

特開２００２−１２８９５８号公報特開平８−２２４２９３号公報ＷＯ２００２/０３２４０５号公報特開２００１−２１２２２７号公報特開２００５−７５８１５号公報特開２００７−７５４２５号公報特開２００１−２３３７８６号公報ＷＯ２０００／２７８８９号公報

Shingo Nakamura他：Journal of Biomedical Materials Research PartA,Vol.85A,(3), P.619 - 627, (2008) 青木央：日本味と匂学会誌14巻、2号、145-152頁（2007）

本発明は、酸性高分子及び塩基性高分子が共存するような複数の高分子からなる、いわゆる複合化（ハイブリット化）において、それぞれの高分子の溶解特性が異なる場合であっても、均一に複合化を可能にする医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料を提供するものである。特に、任意の濃度で複合化を可能とし、各高分子の配合濃度の設計を容易にするとともに、高分子粉末を水溶液等に溶解してから、シート化するものではなく、高濃度のときの高分子溶液がもつ粘性が原因となる成形の困難性、脱気の困難性を解消できる医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料を提供することを課題とする。

以上の課題に鑑み、本願発明は、
１）酸性高分子及び塩基性高分子を含む混合粉末を支持シートに粉末塗布した後、金属イオン溶液に含浸させてイオン性架橋反応処理することを特徴とする医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法、
２）イオン性架橋反応処理した後、支持シート上に形成された皮膜を穿孔処理し、再度イオン性架橋反応処理することを特徴とする上記１に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法、
３）イオン性架橋反応処理した後、高分子可溶条件を変更して、再度イオン性架橋反応処理することを特徴とする上記１又は２に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法、
４）全てのイオン性架橋反応が平衡完了した後、高分子可溶条件をｐＨ中性領域にすることを特徴とする上記１〜３のいずれか一項に記載の創傷被覆シートの製造方法、
５）全てのイオン性架橋反応が平衡完了した後、化学架橋反応処理することを特徴とする上記１〜４のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法、を提供する。
６）前記イオン性架橋反応処理と化学架橋処理を併用することを特徴とする上記１〜５のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法。

また、本願発明は、
７）酸性高分子及び塩基性高分子を含む粉末のシート状可溶化複合体の表層部にイオン性架橋構造を備えることを特徴とする医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料、
８）酸性高分子及び塩基性高分子を含む粉末のシート状可溶化複合体の内部に、穿孔処理によって作られるイオン性架橋の縦構造を備えることを特徴とする請求項７に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料、
９）可溶条件が異なる酸性高分子及び塩基性高分子を含むことを特徴とする上記７又は８に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料、
１０）酸性高分子及び塩基性高分子を含む架橋複合体であって、イオン性架橋構造及び化学架橋構造を備えることを特徴とする上記７〜９のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料、
１１）上記７〜１０に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料を備えることを特徴とする創傷被覆用ゲル状シート
１２）イオン性架橋構造に、さらに化学架橋構造を備えることを特徴とする上記７〜１１のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法、を提供する。

本発明は、粉末状の高分子材料を出発原料とすることにより、混合する材料の濃度に限定されることはないので、それぞれの材料の機能、特性を兼ね備えた医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料を実現することが可能である。また、高分子粉末を水溶液等に溶解してからシート化するものではないので、高濃度のときの高分子溶液がもつ粘性が原因による成形の困難性、脱気の困難性を解消した医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料を実現することができるという効果を有する。このため、例えば素材がもつ機能性を発揮した難治性創傷部位に治癒促進効果をもつシート材の設計、製造が可能になるという優れた効果を有する。

医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造工程を説明する概念図（断面図）である。医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造工程に関するフローチャートである。生体適合性を培養細胞で判定した試験結果である。医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の創傷治癒効果を、難治性ラットモデルの治癒部の肉芽組織の厚みによって評価した観察結果である。医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の創傷治癒効果を、難治性ラットモデルの治癒部の新生血管数により評価した観察結果である。

医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料は、酸性高分子及び塩基性高分子を含む混合粉末を支持シートに粉末塗布した後、金属イオン溶液に含浸させてイオン性架橋反応処理することで製造する。
ここで、前記支持シートはイオン性のないものであればよく、例えば、セルロースで製造した濾紙等を利用できる。そして、この濾紙は円形状、角状のものでもよく、また、貼り付け場所に合わせて型抜きした形状、さらに、ロール紙のように巻き取りされた形状のものでもよい。

前記酸性高分子として、例えば、アルギン酸、フコイダン、カラゲナン、フノランなどの天然多糖類がある。他に、ポリ乳酸などの合成高分子もある。塩基性高分子は、たとえば、キチン、キトサンなどの天然多糖類やその一部加工された多糖類が利用できる。
本発明のシート材の基材としては、多価イオンによる架橋作用のある高分子を使用することができる。例えば、基材として酸性高分子であるアルギン酸を用いることができる。このアルギン酸は特に望ましい基材であるが、他の架橋作用のある高分子も、同様に使用することができる。
本願発明において特徴的なのは、これらの高分子を乾燥粉末で混合し、それを複合化することである。なお、水溶液になって提供されている高分子は、凍結真空乾燥によって粉末化し、この粉末を使用することもできる。

本願発明は粉末混合を使用することから、混合する高分子の溶解度が妨げとならないため、任意の高分子を選択することができる。但し、多価金属イオンとのイオン架橋性の高い高分子材料を用いることが好ましい。例えば、アルギン酸ナトリウムを用いることができる。
アルギン酸ナトリウムを混合する場合には、その混合する割合は任意に選定することができる。具体的には、１００％程度から数％程度とすることができる。ここで、１００％程度とは、アルギン酸ナトリウムの粉末に対して、わずかに他の多糖類をドーピングさせることを意味する。

（粉末塗布、仮押さえ）
まず、支持シートに粉末を塗布するが、このとき支持シートは、水若しくは殺菌する場合には過酸化水素水に浸して、湿潤な状態を作り出す。次に、この表面に混合粉末を一定量、均一に塗布する。具体的には、支持シートをステンレスパットに敷いて、混合粉末を振りかけることができる。また、薄層クロマトグラフィで用いられるような粉引き道具を用いることができる。

粉末を塗布した後に、再び、水などを上面に噴霧する。これにより、粉末体表面にアルギン酸ナトリウムの薄い皮膜を形成することができる。
この際、この支持シート持ち上げて、粉末がこぼれ落ちない程度に湿気を与えることが必要である。アルギン酸ナトリウムは、水の吸水性が高い性質を有するが、一方で水を加え過ぎると溶解し難い固形物が形成されることがある。そのため、噴霧する水の量は粉体の仮押さえが達成し得る程度に抑え、過剰な噴霧を避ける必要がある。

（膨潤処理）
次に、表面に皮膜が形成された粉末体にアルコールを含浸させる。アルコールは、メタノール、エタノール、イソプロパノールなどが利用できる。また、アルコール濃度は４０％〜９９％のものを用いることができる。この濃度は、高分子の多くが水溶性である場合にはそれらが不溶性となって沈降する濃度である。アルコールを含浸させると、仮押さえされた粉末体の内部に気泡を巻き込まずにアルコールを含浸する。

以上の工程を経て、この粉末体を純水に浸して膨潤させる。このとき、含浸させたアルコールの作用により水は粉末面まで浸透する。また、膨潤時間は目付け量にもよるが、数分程度で十分な状態が得られる。過剰な時間行うと粉末面が崩れるおそれがある。その場合には、例えば、シャーレのような淵の浅い容器を用いて、支持シートを静かに平行に移動させ粉末面が崩れないようにすることで対処することができる。なお、この方法は、写真の手焼き現像処理を参考にできる。

（イオン性架橋反応と酸性処理）
次に、この粉末体を高濃度の多価金属イオン溶液に浸ける。これによって、イオン性架橋反応を生じせしめることができる。具体的には、アルギン酸ナトリウムを利用する場合は、塩化カルシウム溶液に浸けておくことで可能である。
この場合、塩化カルシウムの濃度は１Ｍ〜３Ｍ程度とし、好ましくは２Ｍ程度とする。また、浸漬時間は、１秒から３０秒程度であることが好ましい。
これは、アルギン酸ナトリウムがアルギン酸カルシウムとなって皮膜を形成することができる時間である。

その後、アルギン酸カルシウムの皮膜を形成した粉末体を有機酸酸性溶液に浸す。これは、アルギン酸カルシウム皮膜の内部が酸性になることで、他の酸性高分子と塩基性高分子が可溶化され、相補的なイオン関係になるためである。
ここで、酸性高分子のアルギン酸は、中性、アルカリ性溶液で溶解するが、酸性では不溶性の沈殿となる性質がある。また、酸性高分子のフコイダンは、中性、酸性溶液で可溶化する。さらに、キチンは脱アセチル化の程度によってキトサンとなる高分子であるが、ｐＨによらず通常は不溶性である。

このように、酸性高分子と塩基性分子の複合化は可溶性条件が一致する場合にのみ、可溶化溶液としての扱いが可能である。但し、それでも、一般的にはこれらが同時に可溶化するとき、生体高分子の荷電の相互作用により凝集作用が現れて、不溶化する現象が認められる場合がある。
したがって、例えばキトサンとフコイダンが共存する場合において、相補的なイオン関係にあるキトサンとフコイダンは相互に荷電を打ち消し合って複合化し不溶化現象を誘導する。また、カルシウム塩により架橋されなかったアルギン酸も不溶性となっているので、キトサンとフコイダンの複合化には関与しなくなる。
ここで、有機酸としては、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸などを使用することが好ましい。但し、平衡定数ｐＫａが４程度を示す酸であれば全て利用可能である。浸漬時間は、３０秒〜３分であることが好ましい。

（スパイキング）
このアルギン酸カルシウム皮膜を形成した有機酸性複合体に、スパイキング処理を施し、細かい穿孔を開ける。
このスパイキングによって、再イオン架橋時に架橋構造の縦構造を構築することができる。また、ｐＨシフト処理におけるアルカリ性可溶化分子の溶解を促進することができる。

スパイキングは、例えば、華道で用いられる剣山のように、頑丈な鋭い針が一定の密度で設置された器具を用いて行うことができる。また、オルゴールの内部に組み込まれた部品のように、円筒形の丈夫な支持体に針を固定したローラー状のものであってもよい。このスパイキング用器具によって、複合体の表面皮膜に針部を押し当て、支持シート面まで突き刺して行うことができる。
スパイキングは、1ｃｍ^２当たり、太さ０．３ｍｍ〜１．５ｍｍ程度のもので、１８本〜５本程度が好ましい。

（アルカリ性溶液によるｐＨシフト処理）
スパイキング終了後に、強アルカリ溶液に浸す。これにより、有機酸酸性からアルカリ性にｐＨをシフトすることができる。
具体的には、水酸化ナトリウム０．３％〜３％の溶液を用いることができる。また、浸漬時間は１分〜６０分程度好ましい。

（再イオン性架橋処理と中性化）
ｐＨシフト処理後、純水で水酸化ナトリウムを洗浄した後、中性である純水若しくはイオン交換水で膨潤をおこなう。このとき、膨潤時間は１分〜２０分程度が好ましい。
その後、再び塩化カルシウム溶液に浸し、イオン性架橋の再処理を行う。
さらにその後、例えばダルベッコの生理リン酸緩衝液に浸して、ｐＨを中性に固定化する。

（脱水）
次に、これをアルコール溶液に浸ける。アルコール濃度は５０％〜７０％が好ましい。次に行う化学架橋を実施するのに使用するアルコール濃度と同程度である。なお、これはアルコールと水が置換するので、脱水処理とも言える。

（化学架橋処理）
次に、エポキシ系架橋剤を用いて化学架橋処理を行う。なお、最終的に殺菌して利用される材料のため、エタノール中で架橋反応するのが好ましい。

以下、本発明の特徴を具体的に説明する。以下の説明は本願発明の理解を容易にするためのものであり，これに制限されるものではない。すなわち，本願発明の技術思想に基づく変形、他の実施態様、他の例等は、いずれも本願発明に含まれるものである。

アルギン酸ナトリウム(試薬)が、６０重量部に対して、キチン(試薬)が２０重量部、フコイダン（ガゴメ由来、非特許文献１、２参照）が４重量部、キトサン（試薬）が２重量部からなる混合粉末を用意した。
支持シートに７０ｍｍ径の円形濾紙（東洋濾紙Ｎｏ.２）を用いた場合、混合粉末の量は目付け量２００ｇ/ｍ^２に対して０．７７０ｇとなる。
支持シートを過酸化水素水（試薬級）の十倍希釈したものに浸して殺菌し、９０ｍｍ径シャーレの蓋に貼りつけ固定した。あらかじめ乳鉢で混合し、高速ミキサーでブレンドした複合化粉末を０．７７０ｇ計量し、これを支持シートの中心から外側に向けて引き伸ばし、均一に盛りつけた。その上からプッシュスプレー式の容器の純水を噴霧し、表面にある粉末を溶解させてその粘性により仮止めした。

その後は、以下の手順により処理を行った。図１に、医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造工程のイメージ概要を、図２に、製造工程のフローチャートを示す。
１．濾紙の端を平型ピンセットで摘んで、９０ｍｍ径シャーレに張った５０％
エタノール溶液に数秒浸けた。
２．別のシャーレに純水を張って、これに約１分間浸け粉末を膨潤させた。
３．２Ｍの塩化カルシウム溶液に２０秒間浸した。
４．５％酢酸溶液に１分間浸した。

５．スパイキングを剣山（華道用）の針面を押し当てて行った。なお、剣山は、
過酸化水素水に浸けて殺菌・衛生状態を維持している。
６．別のシャーレに張った純水に浸し、洗浄した。
７．１％水酸化ナトリウム溶液に１分間浸した。
８．純水で予備洗浄した後、４００ｍｌのイオン交換水に３分間浸した。
９．再び新しいシャーレに２Ｍの塩化カルシウム溶液を用意し２０秒間浸した。
１０．ダルベッコのリン酸緩衝液に１分程度ひたし、１５００ｍｌ程度のイオ
ン交換水を入れた容器に１０分程度浸した。
以上、ステップ1〜１０の処理時間は２５分程度であった。

１１．次に、５０％エタノール溶液に浸した。
１２．５０％エタノールに浸漬された上記シート１０枚に対して、８００ｍｌの架橋剤入りエタノール溶液を加え、５０℃で５時間架橋反応を行った。架橋剤は４００ｍｌエタノールに０．１Ｍ酢酸/酢酸Ｎａ緩衝液加え、塩酸でｐＨ＝５．８に調製し、Ｑｕｅｔｏｌ６５１（エチレングリコールジグリシジルエーテルMW１７４．１、WAKO、０５６−０３８４１）を２２ｍｌ加えて、全体量を８００ｍｌとして調製した。
１３．架橋終了時にはｐＨが６．８程度になった。また、架橋終了時は６．７〜７．５ｇ/枚に仕上がった。
１４．架橋剤を除去する目的で１５００ｍｌ程度のイオン交換水に膨潤させた。イオン交換水は２時間で４回交換し、滅菌を兼ねて８００ｍｌの７０％エタノール溶液にオーバーナイトで浸した。

１５．電気泳動で用いられるゲル乾燥器を利用して、創傷面にはアルコールで消毒したシリコンシートを、支持体面には消毒したテフロンシートで挟む形で真空乾燥させ、重量を４ｇ近傍に仕上げた。
１６．最後に、真空パックに包装し、熱湯中に２０秒間ブランチングし、加熱殺菌した。膨れがでると一度引き上げ再びブランチした。なお、これは「しゃぶしゃぶ」滅菌法とでも形容すべき方法である。

（微生物検査）
以上の工程を経てた後、これを微生物検査した。食品衛生法の規定により、生菌数測定用の標準寒天平板にゲルパット材の裏と表をそれぞれ寒天に転写して３５℃で培養した。その結果、２日後経過した後もコロニー出現のないことを確認した。

（残留架橋剤の検査）
残留架橋剤は、ステップ１４の７０％エタノールをキャピラリーＧＣ（ＧＣ本体ＨＰ５８９０）、カラムＤＢ−５(３０ｍ×０．２５ｍｍ、０．２５μｍ、カラム温度１１０°Ｃ、注入口２００°Ｃ、水素炎イオン化検出器２１０°Ｃ、スプリット分析)で分析した。その結果、1ｍｇ未満／枚であることを確認した。

（連続生産する場合）
また、商業的に続生産する場合には、以下の手法を採用することができる。例えば、支持体シートとしてロール巻きの濾紙を利用し、単位時間当たりの濾紙の送り（流れ）に合わせて、各工程の処理時間に対応した大きさの反応槽を用いることで達成できる。
スパイキングは、ローラタイプで連続的に行うか、又は一定間隔で上下運動によりスタンピングで行うことができる。また、適当なローラーを設定して適当に曲がりを入れることにより、反応槽の長さを短縮できる。さらに、再イオン架橋を行った後、裁断してから時間のかかる化学架橋を行う方法も可能である。

（生体適合性の予備試験）
次に、実施例の方法で製造した医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料が、生体適合性を備えるかどうか、以下の方法で予備試験を行った。
図３に示す培養容器（ＢＤＦａｌｃｏｎ社製カルチャースライド２区画型（図３中左側））を利用して、正常ヒト表皮角化細胞（成人由来、三光純薬販売品ＣＣ２５０１）を３５００Ｃｅｌｌｓ／ｃｍ^２の推奨密度で培養した。培養培地は指定の培養培地（ブレットキットＫＧＭ−２、品番ＣＣ３１０７）を用いた。

培養細胞がコンフルエント（過密な状態）になる前に、実施例により製造した試験片と、すでに「医療機器承認番号を取得した医療用品」の比較片を、それぞれの培養容器のウエルに細胞と接触する面を下にして、膨潤させた。
その後、液体培地を除去し、改めて培養培地を含む軟寒天（濃度０．７５％）を６０°Ｃ前後に保温しておき、試験片を密着させておいた培養スライドに流し込み、放冷して試験片と比較片の回りを軟寒天で固定した。
図３中、左上段は試験片の寒天固定像、左下段は比較片の寒天固定像である。

２日後、寒天と試験片を除去し、スライドグラスを２．５％のグルタルアルデヒドを含むダルベッコＰＢＳ（−）に３０分浸し固定化した。その後、ＨＥ染色（ヘマトキシリン・マイヤー染色）で細胞を染色したところ、試験片の張り合わせが行われた場所には、培養細胞の存在を示す染色班が観察された（図３中右側上段枠）。したがって、この実施例に基づき製造された医療用高分子材料は、生体に対して適合性を示すと判断された。
図3中、右上段は試験片の染色班を示す図、右下段は比較片の染色班を示す図である。

（創傷被覆材としての適用と効果）
実施例により製造された医療用高分子材料が持つ創傷治癒促進効果を、マイトマイシンＣ（ＣＡＳＮｏ．５０−０７−７)を利用したラット難治性創傷モデルを用いて検討した。マイトマイシンＣは抗腫瘍性抗生物質であるが、皮膚の変性作用があり、創傷面に塗布すると難治性の症状を呈する。
ラット背部に創られた直径１５ｍｍの皮膚全創傷部に、１ｍｇ／ｍｌのマイトマイシンＣ溶液を塗布、１０分間放置後、創部を滅菌水で洗浄した。マイトマイシンＣを塗布しない場合は完全上皮化までの治癒期間が１週間程度である。
他方、この塗布処理により、同等の治癒に要する期間は３週間以上を必要とする難治性創傷モデルが作成できた。

実施例により製造した試験片と、すでに「医療機器承認番号を取得した医療用品」の比較片２を創傷部（ラット、オス、８週齢）に１週間被覆し、その後の治癒経過を観察した。その結果、本発明の試験片１は２週間以内に完全に上皮化することが観察された。被覆片を処置しなかった対象群３と比較すると１週間程度治癒が早かった。

図４は、２週間後の創傷治療部の肉芽層の厚さを比較した観察結果である。試験片１は、対象群３と比較して肉芽組織に厚みのある回復が認められ、治癒効果の差が有意に認められた。また、比較片２と比べても、本発明の試験片１は肉芽組織により厚みのある回復が認められた。

図５は、２週間後の治療部肉芽層にできた毛細血管の数を計測した結果である。試験片１は、比較片２や対象群３と比較して新生血管の数が多く、血流の改善が期待できる有意な差が観察された。特に、比較片２と比べて、２倍以上の新生血管数の増加が認められた。以上の創傷部の治癒経過の観察結果から、本発明のシート材は、ラット難治性創傷に対して治癒促進効果を有することが確認された。
以上については、高度な生体適合性材料を必要とする医療用の治癒促進効果を中心に説明したが、基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料として使用できることは容易に理解されるであろう。本願発明は、これらを全て包含するものである。

本発明は、数種類の酸性高分子と塩基性高分子を複合化する技術であって、これにより、それぞれの高分子材料がもつ特性を兼ね備えた生体適合性材料を提供することができるため、医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料として、組織再生機能を付加した新規の創傷被覆保護材や化粧用ゲルパットなどの民生商品に有用である。

Claims

酸性高分子及び塩基性高分子を含む混合粉末を支持シートに粉末塗布した後、金属イオン溶液に含浸させてイオン性架橋反応処理することを特徴とする医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法。
イオン性架橋反応処理した後、支持シート上に形成された皮膜を穿孔処理し、再度イオン性架橋反応処理することを特徴とする請求項１に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法。
イオン性架橋反応処理した後、高分子可溶条件を変更して、再度イオン性架橋反応処理することを特徴とする請求項１又は２に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法。
全てのイオン性架橋反応が平衡完了した後、高分子可溶条件をｐＨ中性領域にすることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法。
全てのイオン性架橋反応が平衡完了した後、化学架橋反応処理することを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法。
前記イオン性架橋反応処理と化学架橋処理を併用することを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料の製造方法。
酸性高分子及び塩基性高分子を含む粉末のシート状可溶化複合体の表層部にイオン性架橋構造を備えることを特徴とする医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料。
酸性高分子及び塩基性高分子を含む粉末のシート状可溶化複合体の内部に、穿孔処理によって作られるイオン性架橋の縦構造を備えることを特徴とする請求項７に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料。
可溶条件が異なる酸性高分子及び塩基性高分子を含むことを特徴とする請求項７又は８に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料。
酸性高分子及び塩基性高分子を含む架橋複合体であって、イオン性架橋構造及び化学架橋構造を備えることを特徴とする請求項７〜９に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料。
イオン性架橋構造に、さらに化学架橋構造を備えることを特徴とする請求項７〜１０のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料。
アルギン酸、キチン、フコイダン、キトサンを含む架橋複合体であって、イオン性架橋構造及び化学架橋構造を備えることを特徴とする請求項７〜１０のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料。
請求項７〜１１に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料を備えることを特徴とするゲル状シート。
アルギン酸、キチン、フコイダン、キトサンを原材料として含む請求項７〜１１のいずれか一項に記載の医療用及び基礎化粧用（スキンケア用）高分子材料を備えることを特徴とするゲル状シート。