JP3484161B2

JP3484161B2 - スルホ−ｎ−ヒドロキシスクシンイミドおよびその製造方法

Info

Publication number: JP3484161B2
Application number: JP2000511743A
Authority: JP
Inventors: リーブレマー，マーティン; キャリーウィルクス，マーティ
Original assignee: ピアースバイオテクノロジー，インク．
Priority date: 1997-09-18
Filing date: 1998-09-17
Publication date: 2004-01-06
Anticipated expiration: 2018-09-17
Also published as: DE69814110T2; JP2001516741A; CA2303929A1; WO1999014192A1; EP1015428B1; AU9318498A; EP1015428A1; DE69814110D1

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】発明の背景１．発明の分野本発明は、スルホ−Ｎ−スクシンイミド塩であって、新
規の不純物が低減されているかまたは不純物を含まない
塩、および、新規の中間体のヒドロキサム酸スルホネー
ト塩の合成方法に関する。

【０００２】２．技術の背景酸およびその塩を含むスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシン
イミド（しばしばスルホ−ＮＨＳまたはＳ−ＮＨＳとも
呼ばれる）は多くの広い商業分野において広い範囲の有
用性を有し、それは、制限するわけではないが、ビオチ
ン化試薬の製造のための試薬、油井ドリル剤、化学およ
び生物学アッセイ試薬、有機生物学系もしくはポリマー
系の架橋剤、側鎖改質剤、可溶化剤、反応体、マーカー
等を含む。このクラスは、一般に、下記式、

【０００３】

【化１９】（式中、Ｘ⁺はカチオンであり、そしてＲはＨまたは有
機基であり、または、特に、化合物Ｒ−ＯＨから生成さ
れる有機基であり、Ｒ−ＯＨは酸であり、ＯＨ（ヒドロ
キシル）の記号の抜き取りにより、基Ｒ−の残基とな
り、中心核の残りとエステルを形成している）の中心核
を示す式により示すことができる。好ましいＲ−ＯＨ化
合物の例は酢酸、ＬＣ−ビオチンスベリン酸、ビオチ
ン、スベリン酸、４−〔Ｎ−マレイミドメチル〕シクロ
ヘキサン−１−カルボン酸等である。中心核の２−およ
び３−位は置換されていてもよい。カチオンは、Ｈ⁺、
一価のカチオン（例えば、Ｈ⁺、Ｎａ⁺、Ｌｉ⁺、
Ｋ⁺、ＮＨ₄ ⁺、Ｃｓ⁺、他の無機カチオン、有機カチ
オン等）、または、多価のカチオン（二価のカチオンを
含む）であって、残りの電荷は他のアニオン（例えば、
ハリド、ニトレート、スルフェート、ホスフェート等）
で満たされているか、もしくは、他のスルホ−ＮＨＳア
ニオンとビスもしくはトリスコンフィグレーションを形
成しているものであってよい。化合物のこのクラスは比
較的に高価である。これは、主として、生成物を得るた
めに取られなければならない合成手順が高価であること
によるものである。既存の合成手順は、多種の試薬を使
用しかつ多数の合成工程を含まなければならないばかり
でなく、種々の工程の後および合成手順の最後にストリ
ッピングされなければならない多量の溶剤および多種の
溶剤の使用を伴う。溶剤の再回収およびストリッピング
に伴うプロセスコストは非常に有意であり、そして環境
に対する懸念を増大させ、溶剤の大気中への散逸を回避
することの要求が厳しくなってきており、それ故、より
コストが高くなっている。

【０００４】スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド塩
の合成のための典型的な合成方法は次の手順に従うこと
が知られている。

【０００５】無水マレイン酸

【化２０】

【０００６】はフラン

【化２１】

【０００７】と反応して、ディールスアルダー反応生成
物

【化２２】

【０００８】を生成する。

【０００９】この中間体生成物は極端に危険であり、そ
して特別の用心が取扱のために必要である。作業者は保
護衣服を着用しなければならず、そして自己包囲ヘルメ
ットおよび少なくともフィルターを含み、さもなけれ
ば、自己包囲エアサプライヤーを含む全包囲保護装備
（例えば、フルボディースーツ）を着用することが必要
であることもある。形成される結晶は目に対して危険で
あり、そして容易に噴射されてそして空気流により輸送
される。付着性結晶製品であって、衣服の移動により空
気中に入りうるものであるから、保護衣服を脱ぐことさ
えも危険であることがある。ディールスアルダー生成物
は、その後、ヒドロキシルアミン（例えば、ヒドロキシ
ルアミンヒドロクロリド）と反応する。

【００１０】

【化２３】

【００１１】この工程は水酸化カリウムおよびメタノー
ルを用いて行われ（カリウムが塩化カリウムとして沈
殿）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド付加物

【化２４】を生じる。

【００１２】この生成物は、通常、トルエンおよびヘキ
サン中において洗浄される。Ｎ−ヒドロキシスクシンイ
ミド付加物は、その後、ヒドロキシル基において反応さ
れる。この反応は、トリエチルアミン、ジクロロメタ
ン、トルエンおよびヘキサン、および、時々、ジメチル
ホルムアミドの種々の組み合わせ中において、上記付加
物とフェニルクロロホルメートＣ₆Ｈ₅Ｏ₂ＣＣｌ（強
い催涙ガス）とを化合させることにより行われ、次の中
間体生成物

【化２５】を製造する。

【００１３】この中間体生成物は、次に、炭化水素溶
剤、例えば、無極性炭化水素溶剤（例えば、デカン）中
に溶解され、そして昇温に加熱されて、保護基の除去に
より次の中間体を生成する。

【００１４】

【化２６】

【００１５】温度をデカンの引火点（４６℃）を超える
約１７０℃に上げる。文献はこの工程において溶剤とし
てニトロベンゼンを使用することを示している。この反
応生成物は、この商業上困難な工程を使用する結果とし
て、黒色のタール状の生成物である傾向がある。ｔ−ブ
チルカテコールはこの工程において酸化防止剤として使
用されてよい。

【００１６】この最後の中間体は、その後、エタノール
中においてナトリウムメタビスルフィットと反応して、
スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドのナトリウム塩
を生成し、それは水性メタノール、イソプロパノールか
ら再結晶化され、そしてアセトンにより洗浄される。

【００１７】

【化２７】

【００１８】この生成物は、繰り返しの精製の後にも、
スクシンイミド類似体（スクシンイイミドまたはヒドロ
キシスクシンイミドの水素類似体）

【化２８】

【００１９】が最終生成物中に存在していることを明ら
かに示して、非晶性固体として約９５〜９８％の純度で
製造される。

【００２０】最初の無水マレイン酸からのプロセスの全
体としての収率は約２５〜２８％理論値であり、そして
プロセスの完了時間は約５０日間である。多数の溶剤ス
トリッピングを行わねばならず、そして生成物１ｋｇ
は、通常、５０リットル以上の反応容器において製造さ
れる。

【００２１】それ故、全体の合成ルートは複雑であり、
毒性があり、全体を通して環境上の懸念および危険に関
する懸念があり、出費が嵩み、そして時間がかかること
が判る。合成の改良法が明らかに望まれている。

【００２２】発明の要約スルホン化コハク酸の塩は環化され（例えば、ブランク
反応による）、その後、ヒドロキシルアミンとの反応に
より新規のスルホン化ヒドロキサム酸に転化され、そし
てこの新規のヒドロキサム酸は、その後、スルホ−Ｎ−
ヒドロキシスクシンイミド塩へと環化される（例えば、
脱水による）。スルホヒドロキサム酸を環化させること
により、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを生成
する方法も記載される。別に、本発明は、水性媒体中の
市販のスルホコハク酸塩をアルコールの存在下に加熱し
て、コハク酸スルホネートのジエステルを生成させる、
スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド塩の新規の合成
方法を記載する。このジエステルは、その後、ヒドロキ
シルアミン（例えば、塩酸塩）と反応して（例えば、ア
ルカリ緩衝水性環境中、例えば、室温で）、スルホ−Ｎ
−ヒドロキシスクシンイミドを生成する。これは、有意
な量の除去されえない不純物を生じない、極端に単純で
かつ直接的な方法である。

【００２３】発明の詳細な説明本発明の合成手順は、より少ない工程を含み、バッチプ
ロセスで行うことができ、より少ない種類の溶剤を必要
とし、そして新規の中間体を生成し、そして以前の商業
使用されている方法と比較して、類似の不純物を含まな
い生成物を生成する。より少ない種類の危険な材料が合
成されそして使用され、また、この方法は別法の手順に
使用されていた約５０日間と比較して、少ない日数（例
えば、２〜５日間）で行うことができる。さらに、１ｋ
ｇの生成物の量は５リットルのバッチプロセスにおいて
製造することができる。

【００２４】本発明の１つの方法は、ａ）スルホコハク
酸化合物を環化して、単環式第一生成物を生成させるこ
と、および、ｂ）ヒドロキシルアミン（例えば、酸錯
体）の存在下に前記単環式第一生成物を開環させて、ス
ルホヒドロキサム酸を生成させること、の工程を含む合
成方法として記載できる。

【００２５】この方法は、より特定的には、

【００２６】

【化２９】

【００２７】の中心核を有するスルホコハク酸を環化さ
せて、単環式第一生成物を生成させること、および、
ｂ）ヒドロキシルアミン酸錯体の存在下に前記単環式第
一生成物を開環させて、スルホヒドロキサム酸を生成さ
せることを含む。この方法は、例えば、スルホヒドロキ
サム酸が、

【００２８】

【化３０】の中心核を有する化合物を含むときに行うことができ
る。

【００２９】この方法は、その後、スルホ−Ｎ−ヒドロ
キシスクシンイミドに向けて続けることができ、ここ
で、スルホヒドロキサム酸は、その後、例えば、脱水に
より環化され、単環式スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシン
イミドを生成し、ここで、このスルホ−Ｎ−ヒドロキシ
スクシンイミドは下記式

【００３０】

【化３１】の中心核を含む。

【００３１】スルホヒドロキサム酸の環化（例えば、脱
水による）はそれ自体が新規の方法であり、この環化
は、メタノール、水、酢酸、無水酢酸、ジシクロヘキシ
ルカルボジイミドおよび／またはカルボニルジイミダゾ
ール、並びに、ヒドロキサム酸の脱水において補助しま
たは作用する他の媒体の存在下に行うことができる。脱
水は、室温の水中または若干昇温の水中の追加の材料の
溶液中にヒドロキサム酸を単に放置することにより行え
る。このプロセスは、スルホヒドロキサム酸を生成する
ためのヒドロキシルアミン酸錯体の存在下における前記
単環式第一生成物の開環が、過剰のアルコールの存在下
に行われ、スルホヒドロキサム酸エステル（過剰の度合
いによって、モノエステルまたはジエステル）を部分生
成物として製造するときに行われることができる。次
に、このエステルはスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイ
ミドへの転化において酸と本質的に同様に機能する。ア
ルコールは好ましくはメタノールであるが、どのアルコ
ールまたはグリコールさえもこの工程において使用され
てよい。というのは、エステル化部分は、次に、ヒドロ
キサム酸の環化または脱水の間に除去されるからであ
る。工程数が比較的に少なく、そして、廃棄材料である
残留物の量および溶剤数が低減されているので、アルコ
ールまたはグリコールは脱水の間に再生成され、そして
これは容易に回収できる。これは、アルコールまたはグ
リコールをリサイクルしそして環境中への散逸を回避す
ることによりコストをさらに低減する。

【００３２】本発明の別の方法は、ａ）スルホコハク酸
化合物をジエステル化して、ジエステル第一生成物（例
えば、スルホコハク酸ジエステル）を生成させること、
および、ｂ）このジエステルをヒドロキシルアミンヒド
ロクロリド（添加されるか、または、ＮａＮＯ₂および
Ｎａ₂ＳＯ₃の組み合わせにより、その場で生成され
る）と反応させて、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイ
ミドを生成させること、の工程を含む合成方法として記
載できる。

【００３３】本発明の別の方法は、ａ）スルホコハク酸
ジエステルをヒドロキシルアミン（例えば、ヒドロキシ
ルアミンヒドロクロリドであって、添加されるか、また
は、ＮａＮＯ₂およびＮａ₂ＳＯ₃の組み合わせによ
り、その場で生成される）と反応させて、対応するスル
ホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを生成させること、
の工程を含む合成方法として記載できる。

【００３４】どの反応機構で、ジエステルがスルホ−Ｎ
−ヒドロキシスクシンイミドに転化されるかは明らかで
ないが、スルホヒドロキサム酸が生成され、そしてこの
スルホヒドロキサム酸が脱水／環化されて（例えば、エ
ステル加水分解による）、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスク
シンイミドを生成するものと推測される。

【００３５】本方法における反応スキームのこの部分は
その機構に関して理論的ではないが、ジエステルからス
ルホＮ−ヒドロキシスクシンイミドへ向けてプロセスが
続くことができる。ここで、スルホヒドロキサム酸は、
例えば、エステル加水分解および／または脱水により環
化され、単環式のスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ドを生成させ、ここで、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシ
ンイミドは

【００３６】

【化３２】（式中、Ｒは上記に規定した通りである）の一般核を含
む。

【００３７】スルホヒドロキサム酸の環化、例えば、脱
水による環化はメタノール、水、酢酸、無水酢酸、ジシ
クロヘキシルカルボジイミドおよび／またはカルボニル
ジイミダゾール、並びに、ヒドロキサム酸の脱水におい
て補助しまたは作用する他の媒体の存在下に行うことが
できる。脱水は室温で水中または若干の昇温で水中の追
加の材料の溶液中にヒドロキサム酸を単に放置すること
により行える。

【００３８】本発明の方法の間に生成されるジエステル
は、一般に、

【化３３】（式中、Ｘ⁺はカチオン（上記に記載の通り）であり、
Ｒ¹およびＲ²は独立に、脂肪族基および芳香族基から
なる群より選ばれ、特に、アルキルおよびアリール基で
あり、最も特には１〜８個の炭素原子を有するアルキル
基およびフェニル基である）のコア構造または中心核を
有する化合物として記載できる。

【００３９】本発明の実施において、ジエステルを生成
するために使用されるアルコールは好ましくはメタノー
ルであるが、アルコール（例えば、Ｃ₁〜Ｃ₃₀、好まし
くはＣ₁〜Ｃ₈であり、より好ましくはＣ₁〜Ｃ₄）ま
たはグリコール（例えば、２〜３０個の炭素原子のも
の）さえもこの工程で使用できる。というのは、エステ
ル部分は、次の環化または脱水（例えば、もし生成され
ていれば、ヒドロキサム酸の環化または脱水）の間に除
去されるからである。工程数が比較的に少なく、そし
て、廃棄材料である残留物の量および溶剤数が低減され
ているので、アルコールまたはグリコールは脱水の間に
再生成され、そしてこれは容易に回収できる。これは、
アルコールまたはグリコールをリサイクルしそして環境
中への散逸を回避することによりコストをさらに低減す
る。

【００４０】本明細書のいずれかの場所に示されている
スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドは、対応すスル
ホスクシンイミド（ＮＨまたは水素化合物）類似体の非
存在下に存在する。鏡像異性成分のさらなる分離および
制御により、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
は、例えば、１００〜５５％または１００〜５０％（ま
たは５０％を超える、例えば、５１％以上）のＲ−もし
くはＳ−鏡像異性体として存在するスルホ−Ｎ−ヒドロ
キシスクシンイミドのＲ−およびＳ−鏡像異性体の割合
を有することができ、そしてそれは白色の結晶性粉末と
して存在することができる。これらのいずれかの形態の
スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドはスルホスクシ
ンイミド（水素）類似体の非存在下に存在することがで
きる。

【００４１】本方法は、市販購入されたかまたは三酸化
硫黄による無水コハク酸のスルホン化により生成され
た、適切なスルホコハク酸を用いて開始できる。第一の
試薬は基本コア構造、

【化３４】

【００４２】（式中、Ｘ⁺はカチオンであり、好ましく
はＨ⁺、Ｎａ⁺、Ｌｉ⁺、Ｋ⁺、ＮＨ₄ ⁺等のような一
価のカチオンである）を有する化合物である。用語「コ
ア構造」または「基」が使用されるときに、式は示され
ている実際の原子および結合構造を変更しない置換基を
含む。即ち、例えば、スクシンイミドおよびヒドロキサ
ム酸で、スルホネート基の結合点とカルボニル基との間
にあるまたはそれらを仲介している未置換部分に、置換
基が存在することができる。それ故、式Ｉの「コアを有
する」または「中心核」とは、

【００４３】

【化３５】を含む。式中、ＲはＨまたは他の所望の置換基である。
例えば、Ｒはアルキル、アルコキシ、ハロ（Ｉ、Ｃｌ、
Ｂｒ、Ｆ）、シアノ、アルケニル、アリール（例えば、
フェニル）等であることができる。同様には、Ｒ¹で
は、Ｒ¹は水素、アルキル、アルコキシ、ハロ（Ｉ、Ｃ
ｌ、Ｂｒ、Ｆ）、シアノ、アルケニル、アリール（例え
ば、フェニル）等であることができる。用語「式の化合
物」を使用するときに、その用語は説明に特定的に含ま
れていない置換基を排除し、例えば、スルホネート基の
結合点とカルボキシル基との間の位置に、元来的に理解
されるＲ¹のみがあってよい。同様に、用語「コア式」
または「中心核」は化合物の炭化水素鎖の骨格中に二重
結合が挿入されているときには置換基が排除される。

【００４４】下記式のコア構造、

【化３６】

【００４５】を有する初期試薬は環化される。この環化
反応は、例えば、水酸化ナトリウムおよび無水酢酸中で
一般的なブランク反応により行われてよい。得られる第
一中間体は下記式

【００４６】

【化３７】

【００４７】の中心核のものであった。これは既知の化
合物であり、そしてＣＡＳ登録番号を有する。この第一
の生成物を、その後、メタノール中で、ヒドロキシルア
ミン（例えば、塩酸（ヒドロクロリド）との付加物のよ
うな酸付加物）との環化反応に付し、新規のヒドロキサ
ム酸の塩を製造する。

【００４８】

【化３８】

【００４９】これらは文献に報告されていない新規化合
物である。これらの化合物は多くの互変異性体および鏡
像異性体で存在する。ＲおよびＳ鏡像異性位置（キラル
中心）はスルホネート基の結合点にある。互変異性体
は、例えば、

【化３９】を含む。

【００５０】エノール化も下記のように起こることがで
きる。

【化４０】

【００５１】スルホ−Ｎ−ヒドロキサム酸前駆体化合物
の構造のこれらの構造種の全ては、勿論、注目の主要な
スルホ−ＮＨＳ化合物を含む組成物の一部として統計的
または潜在的に存在することが期待され、これらの構造
種の存在は少なくとも部分的に、環境、ｐＨ条件または
組成物に対する他の系に対する影響によるものである。

【００５２】本発明の少なくとも３つの他の区別される
面は、また、本発明の化合物中に存在するようである。
これらの面は本発明の組成物中に個々にまたは関連して
存在することができる。上記の通り、スルホ−ＮＨＳを
製造するために使用される従来技術の方法はスルホ−Ｎ
ＨＳ化合物のイミド類似体を副生成物として製造し、ス
クシンイミド（水素類似体）化合物は下記式により示さ
れる。

【００５３】

【化４１】

【００５４】通常、従来技術の方法において純粋なスル
ホ−ＮＨＳ組成物を製造しようとする試みでは、繰り返
しの精製の後にも、１．０重量％より多量の量のスルホ
−ＮＨＳ化合物が存在する。市販のスルホ−ＮＨＳでさ
えもこの不純物を含み、そして市販のスルホ−ＮＨＳ組
成物中の不純物は２〜５％であり、このスクシンイミド
化合物は最も大きな汚染物であることができる。本発明
の方法は、スルホ−ＮＨＳ化合物およびこのクラスの化
合物を製造するための経路を与え、そしてこの方法はス
クシンイミド汚染物を製造しない。それ故、スクシンイ
ミド類似体を含まないスルホ−ＮＨＳ組成物は新規であ
り、そして今日まで、本発明に記載される方法によって
のみ製造されたものである。本発明のスルホ−ＮＨＳ化
合物は、新規なものとして、１重量％未満のスクシンイ
ミド類似体の存在を特徴とし、好ましくは０．５重量％
未満または０．２５重量％未満、そして最も好ましくは
０．１重量％未満〜０重量％のスクシンイミドが存在す
ることを特徴とする。

【００５５】第二に、スルホ−ＮＨＳを製造する従来技
術の方法から得られる生成物および市販のスルホ−ＮＨ
Ｓ材料は非晶性固体である。このことは、従来技術の方
法の最終工程において使用される特定の沈殿工程による
ものと考えられる。本発明の連続バッチ法は明らかな白
色結晶を製造する。本方法により製造されるスルホ−Ｎ
ＨＳの明らかに結晶性である形態も、従来法により製造
される非晶性固体のスルホ−ＮＨＳ化合物とは区別され
る。

【００５６】さらに、本発明のスルホ−ＮＨＳ化合物は
キラルセパレータにより別個の鏡像異性体に分離されう
る。Ｒ−およびＳ−鏡像異性体はより高度に精製された
異性体に分離されうる。このことは非常に重要である。
というのは、Ｒ−およびＳ−鏡像異性体は、通常、アッ
セイ、例えば、ブロッティングまたはエリサベーストイ
ミュノアッセイ等における使用のための結合体を製造す
るために使用されるからである。鏡像異性体の未精製混
合物は、特にＲ−およびＳ−鏡像異性体の片方のみがサ
イトに対して反応性であるならば、５０％活性しか有し
ない材料を提供することがある。より高い割合のＲ−ま
たはＳ−鏡像異性体を選択的に含み、鏡像異性体のいず
れかを１００％までの割合で選択的に含むスルホ−ＮＨ
Ｓ組成物を提供することにより、得られる結合体は向上
した官能性系を形成するように形成されうる。このこと
により、組成物の残りの部分を変更する必要なく、活性
の度合いに合わせた系を可能にする。例えば、Ｒ−およ
びＳ−鏡像異性体の５０／５０混合物を使用して、公称
活性が１０であるアッセイ系が提供されるならば、特定
のアッセイに活性であるＲ−またはＳ−鏡像異性体の濃
度を適切に選択することによって活性を０〜２０に調節
することができる。上記の通り、このキラル分離は従来
の様式で行うことができる（例えば、キラルカラムに対
するＨＰＬＣクロマトグラフィー）。

【００５７】実施例次の実施例は、既知の商業利用性を有する化学活性種の
製造における本発明のスルホコハク酸およびスルホスク
シンイミド化合物の合成およびその使用を示す。製造さ
れる化合物の多くは他の合成経路により市販されている
が、上記のＮ−ヒドロキシスクシンイミドの水素類似体
のような、従来の合成手順の多くの不純物を含む。

【００５８】例１テトラヒドロ−２，５−ジオキソ−３−フランスルホン
酸ナトリウム塩の製造テトラヒドロ−２，５−ジオキソ−３−フランスルホン
酸ナトリウム塩を、ミルク状の懸濁液が形成されるまで
１．７１モルのスルホコハク酸を１．８７モルの水酸化
ナトリウムとともに５０℃において攪拌し、その後、１
ｋｇの無水酢酸を６時間にわたって添加することにより
製造した。冷却後に、１Ｌの酢酸エチルを添加し、そし
て混合物をろ過した。フィルターケークを５００ｍＬの
酢酸エチルで洗浄した。乾燥時に、３４４．３２ｇの白
色の結晶性生成物を得た。¹³Ｃ−ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳ
Ｏ）１７１．３、１６７．２、６０．４、３４．０ｐｐ
ｍ。

【００５９】例２スルホコハク酸モノヒドロキサム酸ナトリウム塩の製造スルホコハク酸モノヒドロキサム酸ナトリウム塩を、テ
トラヒドロ−２，５−ジオキソ−３−フランスルホン酸
ナトリウム塩とヒドロキシルアミンと反応させることに
より製造した。３８．２ｇのヒドロキシルアミンヒドロ
クロリドおよび３５．５ｇの水酸化カリウムを５℃で３
００ｍＬのメタノール中で攪拌した。白色の沈殿物が形
成され、そしてろ過して除去した。上記のヒドロキシル
アミンのメタノール溶液を、１００ｍＬのメタノール中
の９０ｇのテトラヒドロ−２，５−ジオキソ−３−フラ
ンスルホン酸ナトリウム塩に５℃においてゆっくりと添
加した。この混合物を一晩攪拌し、そしてストリッピン
グして、１１１．７７ｇの白色固体生成物を提供した。
¹Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）３．８０〜４．０８ｐｐｍ
ｍ、２．６３〜２．９４ｐｐｍｍ。

【００６０】例３スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドナトリウム塩の
製造７００ｇの氷酢酸中の２３７．３ｇのスルホコハク酸モ
ノヒロドキサム酸ナトリウム塩の懸濁液をゆっくりと加
熱した。７０℃でのＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー、
１０％水／アセトンで展開されたシリカゲル）はスルホ
−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドナトリウム塩の形成を
示した。スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドナトリ
ウム塩の沈殿物は８０℃で２時間後に形成し、それを室
温に冷却し、そしてろ過により単離して、６８ｇのスル
ホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを白色固体として提
供した。濾液を１Ｌのアセトンで希釈し、そして混合物
を再びろ過して、さらに７０ｇのスルホ−Ｎ−ヒドロキ
シスクシンイミドを回収した。合わせた生成物を２０％
酢酸水溶液からの結晶化により精製した。この生成物を
真空下に４０〜５５℃で乾燥した（マレイン酸内部標準
を用いたＤ₂Ｏ中の定量¹ＨＮＭＲにより９８．４
％）。この生成物は、Ｃ−１８イオン対ＨＰＬＣにより
０．１％未満のスルホスクシンイミド不純物を含んだ。

【００６１】例４１−ヒドロキシ−２，５−ジオキソ−３−ピロリジンス
ルホン酸の製造１−ヒドロキシ−２，５−ジオキソ−３−ピロリジンス
ルホン酸を次の通りに製造した。１７ｇのスルホ−Ｎ−
ヒドロキシスクシンイミドナトリウム塩を５０ｍＬの水
中に溶解させ、そしてＡｇ１×８（ＯＨ^-）アニオン交
換樹脂の予備形成された５０ｇカラムに入れた。カラム
を７６０ｍＬの脱イオン水でリンスし、そして、２１０
ｎｍのＵＶにより画分をモニタリングしながら１−ヒド
ロキシ−２，５−ジオキソ−３−ピロリジンスルホン酸
を２００ｍＬの２５％塩酸により溶離した。スルホ−Ｎ
−ヒドロキシスクシンイミドを含む画分を高真空下にス
トリッピングして、２．１１ｇの粘性オイルを得た。

【００６２】例５スルホコハク酸モノヒドロキサム酸ナトリウム塩のジシ
クロヘキシルカルボジイミドによる閉環（脱水）１５０ｍＬのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中の２ｇ
のスルホコハク酸モノヒドロキサム酸ナトリウム塩を
１．７５ｇのジシクロヘキシルカルボジイミドとともに
２５℃で１８時間攪拌した。この混合物はオレンジ色に
変色した。ジシクロヘキシルウレア沈殿物をろ過により
除去し、ＤＭＦ溶液を高真空下にストリッピングした。
イオン対ＨＰＬＣはスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイ
ミドが生成したことを示した。

【００６３】例６スルホコハク酸モノヒドロキサム酸ナトリウム塩のＮ，
Ｎ−カルボニルジイミダゾールによる閉環５０ｍＬのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１ｇ
のスルホコハク酸モノヒドロキサム酸ナトリウム塩を
０．６８ｇのＮ，Ｎ−カルボニルジイミダゾールととも
に攪拌した。二酸化炭素ガスが３０分間にわたって発生
した。ＤＭＳＯ溶液を高真空下にストリッピングし、そ
して２０ｍＬのイソプロパノールを添加した。白色沈殿
物をろ過して除去しそして乾燥して、０．３ｇのスルホ
−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを¹Ｈ−ＮＭＲにより
示される通りに提供した。

【００６４】例７スルホコハク酸モノヒドロキサム酸ナトリウム塩の無水
酢酸との反応３００ｇのテトラヒドロ−２，５−ジオキソ−３−フラ
ンスルホン酸ナトリウム塩から製造したスルホコハク酸
モノヒドロキサム酸ナトリウム塩（例２の通り）を６５
０ｍＬの無水酢酸により５５℃で４時間処理し、その
間、水および酢酸を真空下に留去した。１．５Ｌの酢酸
エチルを添加し、そして白色の粉末をろ過して除去し、
そして５０℃で真空下に乾燥して、３０５．５３ｇの生
成物を提供した。この生成物は真正標準を用いたＴＬＣ
比較およびＮＭＲにより、殆どがスルホ−Ｎ−アセトキ
シスクシンイミドナトリウム塩であった。

【００６５】例８スルホスクシンイミドナトリウム塩の製造１．２４ｇのマレイミド、１．２２ｇのナトリウムメタ
ビスルフィットおよび３０ｍＬの水を３０分間攪拌し
た。水中のＵＶスペクトルは１９７ｎｍでピークの形成
を示した。溶液をストリッピングして１．９９ｇの白色
結晶を得た。イオン対ＨＰＬＣは５．５７分で単一のピ
ークを示す（スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
６．１７分）。

【００６６】例９スルホ−Ｎ−アセトキシスクシンイミドナトリウム塩の
加水分解によるスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
ナトリウム塩の製造３０ｇのスルホ−Ｎ−アセトキシスクシンイミドナトリ
ウム塩を２００ｍＬの酢酸および０．８ｍＬの水中に溶
解させた。混合物を３０分間加熱還流し、冷却しそして
２００ｍＬの酢酸エチルを添加した。白色結晶をろ過
し、真空下に乾燥して２６．４５ｇの生成物を提供し、
それは¹Ｈ−ＮＭＲにより殆どがスルホ−Ｎ−ヒドロキ
シスクシンイミドであった。

【００６７】例１０３−メチル−２−スルホコハク酸ナトリウム塩（シス−
およびトランスジアステレオマー）の製造３−メチル−２−スルホコハク酸ナトリウム塩を次の通
りに製造した。２０ｇのメチルコハク酸無水物を４０ｇ
の１，２−ジクロロエタン中に溶解させた。１５．４ｇ
の固体の三酸化硫黄を溶融し、そして滴下漏斗に１４０
ｇの１，２−ジクロロエタンに小分けにして添加した。
この三酸化硫黄溶液を酸無水物溶液にゆっくりと添加
し、そして一晩攪拌した。その後、５０ｍＬの水を添加
し、次いで、５０ｍＬ中に溶解した７ｇの水酸化ナトリ
ウムを添加した。層が分離し、１，２−ジクロロエタン
層を５０ｍＬの水で再び抽出した。合わせた水層をスト
リッピングし、４２．２ｇの黄色がかった固体を提供し
た。¹Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）２．６５〜２．８０ｐｐｍ
ｍ、２．４７〜２．５８ｐｐｍｍ、１．０４ｐｐｍ
ｄＪ＝７．０７Ｈｚ。

【００６８】例１１テトラヒドロ−２，５−ジオキソ−４−メチル−３−フ
ランスルホン酸ナトリウム塩（シスおよびトランスジア
ステレオマー）の製造４０ｇの３−メチル−２−スルホコハク酸ナトリウム塩
（シスおよびトランスジアステレオマー）を５０ｇの無
水酢酸とともに攪拌し、その後、８６℃で加熱し、その
間に、１．５時間、酢酸を蒸留した。１００ｍＬの酢酸
エチルを添加し、そして混合物をろ過した。沈殿物を１
００ｍＬの酢酸エチルにより洗浄した。沈殿物を乾燥
し、１６．０ｇの黄色がかった白色固体を生じた。¹Ｈ
−ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）３．４０ｐｐｍｄＪ＝
１０．５２Ｈｚ、２．９２〜２．９８ｐｐｍｍ、１．
２８〜１．３１ｐｐｍｍＪ＝７．１２Ｈｚ。

【００６９】例１２３−メチル−２−スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ドナトリウム塩（シスおよびトランスジアステレオマ
ー）の製造５℃に冷却した５０ｍＬのメタノール中の２．８６ｇの
水酸化カリウムに、３．５３ｇのヒドロキシルアミンヒ
ドロクロリドを添加した。白色沈殿物をろ過して除去し
た。５℃の１０ｇのテトラヒドロ−２，５−ジオキソ−
４−メチル−３−フランスルホン酸ナトリウム塩（シス
およびトランスジアステレオマー）および５０ｍＬのメ
タノールに、上記のヒドロキシルアミン溶液を添加し
た。この混合物を一晩攪拌し、混合物を室温に温めた。
この懸濁液をストリッピングし、１０．９７ｇの生成物
を提供した。シリカゲル上で１０％の水／アセトンを用
いたＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）は過マンガン酸
カリウムと０．０５ｒ．ｆ．スポット反応を与えた（黄
色がかった白色に変色）。未精製の生成物を１００ｍＬ
の温かい酢酸から再結晶して、１５０ｍＬの酢酸エチル
で洗浄した後に９．２７ｇの白色結晶を提供した。¹Ｈ
−ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）−４．０２ｐｐｍｄ、３．８８ｐ
ｐｍｄ、３．００〜３．１４ｐｐｍｍ、１．３５ｐ
ｐｍ（シス）ｄＪ＝７．５Ｈｚ、１．１９ｐｐｍ（ト
ランス）ｄＪ＝７．０Ｈｚ。トランスジアステレオマ
ーのシスジアステレオマーに対する比率はプロトンＮＭ
Ｒ積分により６０：４０であった。

【００７０】スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドフ
リー類似体（水素類似体を含まない）から製造したとき
に、当業界において使用されるスルホ−Ｎ−ヒドロキシ
スクシンイミドの誘導体は、類似体が存在しないことに
より、さもなければ化学的に同一である誘導体と区別さ
れる。エステル化誘導体、例えば、

【００７１】

【化４２】

【００７２】（式中、Ｘ⁺はカチオンであり、そしてＲ
はＨまたは有機基であり、または、特に、化合物Ｒ−Ｏ
Ｈから形成された有機基であり、ここで、Ｒ−ＯＨは酸
であり、そしてヒドロキシル形態の記号抜き取りにより
中心核の残基とともに（ＯＲを除く）エステル基を形成
する）である。

【００７３】好ましいＲ−ＯＨ化合物の例は酢酸、ＬＣ
−ビオチンスベリン酸、ビオチン、スベリン酸、４−
〔Ｎ−マレイミドメチル〕シクロヘキサン−１−カルボ
ン酸等であり、水素類似体を含まず（スルホ−Ｎ−ヒド
ロキシスクシンイミドと対照的なスルホスクシンイミ
ド）、一方、従来技術のエステル誘導体はある量のその
汚染物を含む。それ故、スルホスクシンイミド類似体を
含まないエステル誘導体も新規の組成物である。

【００７４】例１３ＳＮＨＳの製造スルホコハク酸無水物ナトリウム塩（２．５６ｇ）およ
びヒドロキシルアミンヒドロクロリド（２．１３ｇ）を
ＤＭＡＣ（３０ｍｌ）中で８０℃に加熱する。３０分後
のＴＬＣは既知のＵＶ活性スルホ−ＮＨＳの生成を示
す。ＴＬＣシステム：アセトン中３５〜４０％メタノー
ル、メタノール中５％水、アセトン中６％水；シリカゲ
ルプレート。生成物はこの反応から単離されなかった。

【００７５】例１４ＳＮＨＳの製造氷酢酸（７００ｇ）中のヒドロキサム酸（２３７ｇ）を
窒素下に８０℃に２時間加熱する。反応混合物を室温に
冷却しそしてろ過して６８ｇのＳＮＨＳを白色固体とし
て提供する。ろ液を１リットルのアセトンで希釈し、そ
して生成物を酢酸中の２０％水から結晶化することによ
り精製する。

【００７６】例１５ジエステルによるＳＮＨＳの製造スルホコハク酸（水中７０％、２１１ｇ、０．７５モ
ル）およびメタノール（２５６ｇ、１０．７当量）を１
リットルフラスコ中に混合する。メチルエステルの生成
が開始すると、反応体が発熱する。この溶液を室温で一
晩攪拌する。ヒドロキシルアミンヒドロクロリド（５
４．７ｇ、０．７９モル、１．０５当量）を添加し、次
いで、水酸化ナトリウムペレット（３４ｇ）を添加す
る。反応体はこの塩基の添加時に４０℃に発熱する。３
日間の攪拌の後のＴＬＣ分析（アセトン中６％の水、シ
リカゲルプレート）はＵＶ活性スルホ−ＮＨＳの生成を
示す。４週間後のＴＬＣは、過マンガン酸塩活性ヒドロ
キサム酸／エステルとともに、ＵＶ活性スルホ−ＮＨＳ
を明らかに示す。２回の溶離の後のＴＬＣＲｆ値：Ｓ−
ＮＨＳ＝０．６〜０．７ストリーク、ＵＶ活性；ヒロド
キサム酸／エステル：Ｒｆ＝０．２、非ＵＶ活性、過マ
ンガン酸カリウム活性。

【００７７】例１６ジエステルによるＳＮＨＳの製造スルホコハク酸（水中７０％、５６ｇ、０．２モル）お
よびメタノール（１００ｍｌ、１２．３当量）を２５０
ｍｌフラスコ中に混合する：メチルエステルの生成が開
始すると、反応体は発熱する。溶液を２時間還流し、そ
の後、ロータリーエバポレータで蒸発させて、水および
メタノールを除去する。生成物のエステルは適度な粘度
の透明で無色の液体である。メタノール中のヒドロキシ
ルアミンの５．５ｗｔ％溶液１６０ｇで処理する。この
反応体はヒドロキシルアミンを添加するとすぐに発熱す
る。一晩攪拌した後のＴＬＣ分析（アセトン中６％の
水、シリカゲルプレート）はＵＶ活性スルホ−ＮＨＳの
生成を示す。３日後のＴＬＣはＵＶ活性スルホ−ＮＨＳ
を明らかに示す。ＴＬＣＲｆ値：ＳＮＨＳ＝０．６〜
０．７ストリーク、ＵＶ活性。

【００７８】別の利点は、従来技術のスルホ−Ｎ−ヒド
ロキシスクシンイミド材料の使用と比較したときに、本
発明の実施において容易に評価されうる。従来技術の材
料は制御されずそして変化した量でスルホ−Ｎ−ヒドロ
キシスクシンイミド不純物を含んでいたので、異なるロ
ットのスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを用いて
臨界的な定量的および／または臨界的な定性的比較は決
して行うことができなかった。結果は、スルホ−Ｎ−ヒ
ドロキシスクシンイミドの濃度の変化のために、検知で
きるが、予測できない量で変化する。スルホ−Ｎ−ヒド
ロキシスクシンイミドのロット毎のバッチが均一であ
り、そして、スルホ−Ｎ−スクシンイミド不純物が含ま
れないために、本発明のスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシ
ンイミド材料は異なるロットからの材料を用いて臨界的
な定量的および臨界的な定性的分析において使用するこ
とができる。このことは、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスク
シンイミド化合物に新たな用途を与える。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ウィルクス，マーティキャリーアメリカ合衆国，イリノイ 61072，ロックトン，フォックスファイアープレイス 124 (56)参考文献特開平８−198911（ＪＰ，Ａ) 特開平６−40953（ＪＰ，Ａ) 特開昭63−1972（ＪＰ，Ａ) 特表平６−505975（ＪＰ，Ａ) 米国特許4794189（ＵＳ，Ａ) 国際公開89／012624（ＷＯ，Ａ１) Ｐｌａｎｔ，Ｐｈｙｓｉｏｌ．, （1993），103，ｐ501−508 ＣｈｍｉｃａｌＡｂｓｔｒａｃｔｓ 108：222062 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07D 207/416 C07C 303/22 C07C 309/17 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】ａ）スルホコハク酸化合物を環化して、
スルホコハク酸無水物化合物を生成させること、およ
び、ｂ）ヒドロキシルアミンの存在下に前記スルホコハク酸
無水物化合物を開環して、スルホコハク酸モノヒドロキ
サム酸化合物を生成させること、を含む、スルホコハク酸モノヒドロキサム酸化合物の合
成方法。
【請求項２】ａ）下記式【化１】の中心核を有するスルホコハク酸を環化して、スルホコ
ハク酸無水物化合物を生成させること、ｂ）ヒドロキシルアミンの存在下に前記スルホコハク酸
無水物化合物を開環して、スルホコハク酸モノヒドロキ
サム酸化合物を生成させること、を含む、請求項１記載の合成方法。
【請求項３】Ａ−ａ）スルホコハク酸をエステル化し
てジエステル第一生成物を生成させること、および、ｂ）前記ジエステル第一生成物をヒドロキシルアミンと
反応させて、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを
生成させること、の組み合わせ工程および、Ｂ−ａ）スルホコハク酸化合物を環化して、スルホコハ
ク酸無水物化合物を生成させること、ｂ）ヒドロキシルアミンの存在下に前記スルホコハク酸
無水物化合物を開環して、スルホコハク酸モノヒドロキ
サム酸化合物を生成させること、および、ｃ）前記スルホコハク酸モノヒドロキサム酸化合物を、
その後、脱水して、単環式スルホ−Ｎ−ヒドロキシスク
シンイミドを生成させること、の組み合わせ工程からな
る群より選ばれる組み合わせ工程を含む方法を含む、ス
ルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドの合成方法。
【請求項４】前記スルホコハク酸モノヒドロキサム酸
化合物は、下記一般式【化２】（式中、Ｘ⁺ はカチオンである）の化合物を含む、請求
項２または３記載の方法。
【請求項５】前記スルホコハク酸モノヒドロキサム酸
化合物は、その後、脱水されて、単環式スルホ−Ｎ−ヒ
ドロキシスクシンイミドを生成する、請求項３記載の方
法。
【請求項６】前記スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイ
ミドは、下記式【化３】（式中、Ｘはカチオンである）を含む、請求項５記載の
方法。
【請求項７】前記スルホコハク酸モノヒドロキサム酸
化合物の脱水はメタノール、水、酢酸、無水酢酸、ジシ
クロヘキシルカルボジイミドおよび／またはカルボニル
ジイミダゾールの存在下で行われる、請求項５記載の方
法。
【請求項８】前記スルホコハク酸モノヒドロキサム酸
化合物の脱水はメタノール、水、酢酸、無水酢酸、ジシ
クロヘキシルカルボジイミドおよび／またはカルボニル
ジイミダゾールの存在下に行われる、請求項７記載の方
法。
【請求項９】スルホコハク酸モノヒドロキサム酸化合
物を生成するための、ヒドロキシルアミン酸錯体の存在
下での前記スルホコハク酸無水物化合物の前記開環は、
過剰のアルコールの存在下に行われ、部分生成物として
スルホヒドロキサム酸エステルを生成する、請求項１記
載の方法。
【請求項１０】下記式【化４】（式中、Ｘはカチオンである）を有するスルホコハク酸
モノヒドロキサム酸化合物。
【請求項１１】下記一般式【化５】を有する、請求項１０記載のスルホコハク酸モノヒドロ
キサム酸化合物。
【請求項１２】前記スルホコハク酸モノヒドロキサム
酸化合物は同一の工程ａ）において、環化されかつエス
テル化される、請求項２記載の方法。
【請求項１３】ａ）スルホコハク酸をエステル化し
て、ジエステル第一生成物を生成させること、および、ｂ）前記ジエステル第一生成物をヒドロキシルアミンと
反応させて、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを
生成させること、の工程を含む、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
の合成方法。
【請求項１４】下記式【化６】（式中、Ｘ⁺ はカチオンである）の中心核を有するスル
ホコハク酸をエステル化して、ジエステル第一生成物を
生成させること、を含む、スルホスクシンイミドをエス
テル化して、ジエステル第一生成物を生成させる、請求
項１３記載の合成方法。
【請求項１５】前記ヒドロキシルアミンは前記ジエス
テル第一生成物に添加される、請求項１３記載の方法。
【請求項１６】前記ヒドロキシルアミンは前記ジエス
テル第一生成物の存在下で生成される、請求項１３記載
の方法。
【請求項１７】スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ドを生成するための前記ジエステル第一生成物とヒドロ
キシルアミンの反応においてスルホコハク酸モノヒドロ
キサム酸化合物が生成される、請求項１３記載の方法。
【請求項１８】前記スルホコハク酸モノヒドロキサム
酸化合物は、一般式【化７】（式中、Ｘ⁺ はカチオンであり、そしてＲは水素または
アルキル基である）の化合物を含む、請求項１７記載の
方法。
【請求項１９】前記スルホコハク酸モノヒドロキサム
酸化合物は環化されて、単環式スルホ−Ｎ−ヒドロキシ
スクシンイミドを生成させる、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】前記スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシン
イミドは、下記式【化８】（式中、Ｒ−ＯＨは酸であり、ＯＨ（ヒドロキシル）
は、記号を抜き取ったときに、化合物中にエステルを生
成するような基Ｒ−を残基とし、そしてＸ⁺ はカチオン
である）の中心核を含む、請求項１３記載の方法。
【請求項２１】前記スルホコハク酸モノヒドロキサム
酸化合物の環化はメタノール、水、酢酸、ジシクロヘキ
シルカルボジイミドおよび／またはカルボニルジイミダ
ゾールの存在下に行われる、請求項１９記載の方法。
【請求項２２】前記スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシン
イミドは、下記式【化９】（式中、Ｘ⁺ はカチオンである）のスルホスクシンイミ
ドの非存在下に製造される、請求項１３記載の方法。
【請求項２３】前記ジエステル第一生成物は、下記式【化１０】（式中、Ｘ⁺ はカチオンであり、Ｒ¹ およびＲ² は独立
にアルキルおよびアリール基からなる群より選ばれる）
を有する化合物を含む、請求項１３記載の方法。
【請求項２４】前記ジエステル第一生成物は下記式【化１１】（式中、Ｘ⁺ はカチオンであり、そしてＲ¹ およびＲ²
は独立にアルキルおよびフェニル基からなる群より選ば
れる）を有する化合物を含む、請求項１４または１７記
載の方法。
【請求項２５】スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ドはスルホスクシンイミドの非存在下に存在する、請求
項１３または１４記載の方法。
【請求項２６】スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ドは１００〜５０％のＲ−もしくはＳ−鏡像異性体とし
て存在するスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドのＲ
−およびＳ−鏡像異性体の割合を有する、請求項１３、
１４または１６記載の方法。
【請求項２７】スルホコハク酸ジエステルをヒドロキ
シルアミンと反応させてスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシ
ンイミドを生成させること、の工程を含む、スルホ−Ｎ
−ヒドロキシスクシンイミドの合成方法。
【請求項２８】前記ヒドロキシルアミンは、前記スル
ホコハク酸ジエステルに添加された、または、その場で
生成された、ヒドロキシルアミンヒドロクロリドを含
む、請求項１３記載の方法。
【請求項２９】スルホコハク酸ジエステルを環化し
て、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドを生成させ
ることの工程を含む、スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシン
イミドの合成方法。
【請求項３０】前記環化はヒドロキシルアミンの存在
下に行われる、請求項２９記載の方法。
【請求項３１】前記ヒドロキシルアミンはヒドロキシ
ルアミンヒドロクロリドである、請求項３０記載の方
法。