EP1379547A2 - Cyclosporine modifiee utilisable en tant que pro-drogue et son utilisation - Google Patents
Cyclosporine modifiee utilisable en tant que pro-drogue et son utilisationInfo
- Publication number
- EP1379547A2 EP1379547A2 EP02713992A EP02713992A EP1379547A2 EP 1379547 A2 EP1379547 A2 EP 1379547A2 EP 02713992 A EP02713992 A EP 02713992A EP 02713992 A EP02713992 A EP 02713992A EP 1379547 A2 EP1379547 A2 EP 1379547A2
- Authority
- EP
- European Patent Office
- Prior art keywords
- meleu
- group
- ala
- val
- substituents
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 title claims abstract description 54
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 title claims abstract description 54
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 19
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims abstract description 56
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims abstract description 44
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 43
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 36
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 32
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 23
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 22
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 16
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 15
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims abstract description 15
- 125000004404 heteroalkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 11
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims abstract description 7
- 125000005343 heterocyclic alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 37
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 27
- -1 alkyl-heterocyclic Chemical group 0.000 claims description 14
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 claims description 10
- 230000007170 pathology Effects 0.000 claims description 10
- 241001102832 Meseres Species 0.000 claims description 7
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 claims description 6
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 201000010666 keratoconjunctivitis Diseases 0.000 claims description 4
- 206010057380 Allergic keratitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 claims description 3
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 claims description 3
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 claims description 3
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 230000002197 limbic effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 claims description 3
- 208000025889 stromal keratitis Diseases 0.000 claims description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 3
- XJODGRWDFZVTKW-LURJTMIESA-N (2s)-4-methyl-2-(methylamino)pentanoic acid Chemical compound CN[C@H](C(O)=O)CC(C)C XJODGRWDFZVTKW-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000008397 ocular pathology Effects 0.000 claims description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 abstract 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 76
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 73
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 66
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 47
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 42
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 30
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 25
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 20
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 16
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 108010036941 Cyclosporins Proteins 0.000 description 13
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 13
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 12
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 12
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 10
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 10
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 9
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 9
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 8
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- VQHCKGLUMOJBEX-GKAPJAKFSA-N (2s)-2-(1-acetyloxyethoxycarbonylamino)-6-aminohexanoic acid Chemical compound CC(=O)OC(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN VQHCKGLUMOJBEX-GKAPJAKFSA-N 0.000 description 5
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 5
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- LFEXOELIXLYJFK-GDVGLLTNSA-N (2s)-2-(1-acetyloxyethoxycarbonylamino)-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound CC(=O)OC(C)OC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LFEXOELIXLYJFK-GDVGLLTNSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- ZNVBEWJRWHNZMK-SYOLRUPNSA-N (3s,6s,9s,12r,15s,18s,21s,24s,30s,33s)-33-[(e,1r,2r)-1-hydroxy-2-methylhex-4-enyl]-1,4,7,10,12,15,19,25,28-nonamethyl-6,9,18,24-tetrakis(2-methylpropyl)-3,21,30-tri(propan-2-yl)-1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-undecazacyclotritriacontane-2,5,8,11,14,17,20,2 Chemical compound C\C=C\C[C@@H](C)[C@@H](O)[C@@H]1N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC1=O ZNVBEWJRWHNZMK-SYOLRUPNSA-N 0.000 description 3
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 231100000635 Draize test Toxicity 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 3
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 3
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 3
- 238000006257 total synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- CCAIIPMIAFGKSI-DMTCNVIQSA-N (2s,3r)-3-hydroxy-2-(methylazaniumyl)butanoate Chemical compound CN[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CCAIIPMIAFGKSI-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 2
- ZMKGDQSIRSGUDJ-VSROPUKISA-N (3s,6s,9s,12r,15s,18s,21s,24s,30s,33s)-33-[(e,1r,2r)-1-hydroxy-2-methylhex-4-enyl]-1,4,7,10,12,15,19,25,28-nonamethyl-6,9,18,24-tetrakis(2-methylpropyl)-3,21-di(propan-2-yl)-30-propyl-1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-undecazacyclotritriacontane-2,5,8,11,14,1 Chemical compound CCC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O ZMKGDQSIRSGUDJ-VSROPUKISA-N 0.000 description 2
- KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-N 1H-tetrazole Chemical compound C=1N=NNN=1 KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000003556 Dry Eye Syndromes Diseases 0.000 description 2
- 206010013774 Dry eye Diseases 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- ZMKGDQSIRSGUDJ-UHFFFAOYSA-N NVa2 cyclosporine Natural products CCCC1NC(=O)C(C(O)C(C)CC=CC)N(C)C(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)C(CC(C)C)N(C)C(=O)C(CC(C)C)N(C)C(=O)C(C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CC(C)C)N(C)C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O ZMKGDQSIRSGUDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRYNUJYAXVDTCB-UHFFFAOYSA-M acetyloxymercury Chemical compound CC(=O)O[Hg] WRYNUJYAXVDTCB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 2
- 108010019249 cyclosporin G Proteins 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- NQMRYBIKMRVZLB-UHFFFAOYSA-N methylamine hydrochloride Chemical compound [Cl-].[NH3+]C NQMRYBIKMRVZLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 2
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSTRKXWIZZZYAS-UHFFFAOYSA-N 2-bromoacetyl bromide Chemical compound BrCC(Br)=O LSTRKXWIZZZYAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 4-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C1C(C(O)=O)N(C(=O)OC(C)(C)C)CC1NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XVMSFILGAMDHEY-UHFFFAOYSA-N 6-(4-aminophenyl)sulfonylpyridin-3-amine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=N1 XVMSFILGAMDHEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010051625 Conjunctival hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010010726 Conjunctival oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010011026 Corneal lesion Diseases 0.000 description 1
- 108010002156 Depsipeptides Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PQNASZJZHFPQLE-UHFFFAOYSA-N N(6)-methyllysine Chemical compound CNCCCCC(N)C(O)=O PQNASZJZHFPQLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSFABYLDRXJYID-VKHMYHEASA-N N-Methylserine Chemical compound CN[C@@H](CO)C(O)=O PSFABYLDRXJYID-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- PSFABYLDRXJYID-UHFFFAOYSA-N N-methyl-DL-serine Natural products CNC(CO)C(O)=O PSFABYLDRXJYID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002141 anti-parasite Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003096 antiparasitic agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical class N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 125000004369 butenyl group Chemical group C(=CCC)* 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N chloro formate Chemical compound ClOC=O FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl ether Chemical compound CC(C)(C)OC(C)(C)C AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- NJDNXYGOVLYJHP-UHFFFAOYSA-L disodium;2-(3-oxido-6-oxoxanthen-9-yl)benzoate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=CC(=O)C=C2OC2=CC([O-])=CC=C21 NJDNXYGOVLYJHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000004955 epithelial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003885 eye ointment Substances 0.000 description 1
- SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N flurbiprofen Chemical compound FC1=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002390 flurbiprofen Drugs 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000000879 imine group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 229960004184 ketamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000036651 mood Effects 0.000 description 1
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 231100001180 nonmyelotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 238000002577 ophthalmoscopy Methods 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 231100000456 subacute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
- C07K7/645—Cyclosporins; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Definitions
- the present invention relates to a pro-drug consisting of a cyclic undecapeptide and its use as a medicament, intended, in particular, for the treatment of ocular pathologies.
- Cyclosporins constitute a structurally distinct class of cyclic peptides which have in common to be made up of a chain of eleven amino acids, some being atypical, either because of their configuration
- cyclosporin is meant both cyclic undeca-peptides obtained from natural sources and their analogs obtained by hemisynthesis or by total synthesis, including peptolides obtained from natural sources or their analogues obtained by hemisynthesis or by total synthesis.
- this cyclic undecapeptide comprises, there is in particular that which is in position 1, namely N-methyl- (4R) -4 - ((E) -2-butenyl) -4- methyl-L-threonine, noted MeBmt.
- This amino acid is specific to cyclosporins, the ethylenic group possibly being reduced. It has an amino group which is methylated.
- the hydroxyl group which it carries is very remarkable in the sense that it is the only group of all this cyclic undeca peptide capable of leading to chemical modifications. We can also see that it is already in a steric environment highly congested making any approach to reagent extremely delicate.
- cyclic undeca-peptides whether of natural origin or obtained by synthesis, exhibit a wide spectrum of biological activities, of which the best known are immunosuppressive, anti-inflammatory, anti-parasitic, or activities allowing counteract or decrease the resistance of cancerous tumors to other medications.
- Some of these cyclic undecapeptides have been shown to have promising anti-viral activities, in particular in the treatment of AIDS by inhibiting the replication of the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1).
- HIV-1 human immunodeficiency virus type 1
- dry keratoconjunctivitis also called dry eye syndrome, Sj ⁇ gren's syndrome, allergic keratoconjunctivitis, in particular, those resistant to corticosteroids, mucosynechective conjunctivitis, herpetic stromal keratitis , immune limbic keratitis, Thygeson keratitis, prevention of rejection of corneal transplants, and as an adjuvant treatment for filtering surgery.
- the cyclic undecapeptides of the cyclosporin family have a highly hydrophobic character, thereby reducing their solubility in water. This characteristic is linked to the nature of the side chain of most of their amino acids, but also to the fact that some of these amino acids have their methyl amino group, thus limiting the possible number of intermolecular hydrogen bond formation between undeca- cyclic peptide and, for example, an aqueous solubilization medium.
- one of the IV infusion preparations of Cyclosporine A commercially available under the trademark Sandimmun, consists of a microemulsion using as an excipient a polyoxyethylenated castor oil known under the name of trademark Salamophor. This preparation is stored in the form of a concentrate and must be diluted just before its administration.
- this chemical modification may consist in preparing a precursor, if possible inactive, of this pharmacologically active molecule which, once administered and under the effect of physiological conditions prevailing locally within the organism, will be chemically or enzymatically modified so that the pharmacologically active molecule is released, if possible, either at the site where its pharmacological action must occur, or in the blood which will transport this pharmacologically active molecule thus released on its site of action, this corresponding to the concept of "pro-drug".
- the precursor in question of said pharmacologically active molecule is called "pro-drug”.
- Rothbard et al. have described in patent application WO 01/13957 a method for improving the administration of pharmacologically active molecules and for allowing them to cross the dermis and the epithelial membranes consisting in grafting on these molecules, reversibly, a side chain consisting of fragments of a polyarginine chain.
- these pharmacologically active molecules there are hydrophobic molecules such as Cyclosporine A.
- Crooks et al. describe in patent application WO 00/67801 the preparation of pro-drugs of anti-inflammatory agents such as flurbiprofen in order to be able to administer them locally in contact with the eye, while this time avoiding any local irritation. They have achieved this, for a number of drugs, by introducing oxygen or poly-oxygen chains.
- Cyclosporin A to the same chemical modifications, they were only able to obtain products which they describe as being stable, in other words which do not cleave to release Cyclosporin A, whether at contact with human serum or in a phosphate buffer at pH 7.4.
- the present invention therefore aims to provide the clinician with pro-drugs of cyclic undecapeptides from the cyclosporin family, on the one hand, which can be administered within the physiological environment without having to develop galenical formulations developed, on the other hand, which can be stored, then handled and administered without having to worry in particular about the pH conditions of the surrounding medium.
- the present invention also aims to make available to the clinician pro-drugs of cyclic undecapeptides of the cyclosporin family which can be administered locally in general, and in particular on the ocular surface or on the mucous membranes. , and which can then release the pharmacologically active cyclic undeca peptide within an appropriate half-life without local irritation.
- the present invention relates to a prodrug consisting of a cyclic undeca-peptide, the peptide chain of which comprises at least one amino acid residue of general formula (I) below:
- R 5 and R 6 represent, independently of one another, a hydrogen atom, an aralkyl group, an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, linear or branched;
- said amino acid residue of general formula (I) derives from a residue of N-methyl- (4R) -4 - ((E) -2-butenyl) -4 -methyl-L-threonine in which the hydroxyl group of the threonine has been suitably esterified and the pharmacologically active molecule which will be released when the prodrug is cleaved within the body will consist of a cyclic undeca peptide, the peptide chain of which comprises at least one N- residue methyl- (4R) -4 - ((E) - 2-butenyl) -4-methyl-L-threonine (MeBmt).
- said amino acid residue of general formula (I) derives from a residue of N-methyl- (4R) -4-butyl-4-methyl -L-threonine in which the hydroxyl group of threonine has been suitably esterified and the pharmacologically active molecule which will be released when the prodrug is cleaved within the body will consist of a cyclic undeca-peptide, the l the peptide chain comprises at least one N-methyl- (4R) -4-butyl) -4-methyl-L-threonine residue (Dh-MeBmt).
- said aralkyl, alkaryl, heteroalkyl, heterocyclic, alkyl-heterocyclic, heterocyclic-alkyl or preceding alkyl groups are substituted with at least one of the groups chosen from -NR 8 2) -N + R 8 3 ,
- substituents R 1 and R 3 represent a linear alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms substituted by at least one of the groups chosen from -NR 8 2 , -N + R 8 3 , -OPO (OH) 2 or the different salified forms of these groups, each of the substituents R 8 having the above definition.
- substituents R 1 and R 3 represent a linear alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms substituted by at least one of the groups chosen from -NR 8 2 , -N + R 8 3 , -OPO (OH) 2 or its different salified forms of these groups, each of the substituents R 8 having the above definition, the corresponding amino acid residues preferably derive:
- R 1 , R 2 and / or R 3 , R 4 forming the pairs (R 1 , R 2 ) and / or (R 3 , R 4 ) are alkyl groups having from 1 to 6 carbon atoms, they can form within each couple an alkylene chain forming with the carbon atom and the nitrogen atom which carry them a cycle. Preferably, they constitute the side chain of a proline residue.
- the substituents R 5 and R 6 cannot simultaneously represent a hydrogen atom.
- at least one of said substituents R 5 and R 6 represents an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, linear or branched
- the substituent R 7 represents an aralkyl group or an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms, linear or branched.
- said substituents R 5 and R 6 represent, independently of one another, a hydrogen atom or a methyl group.
- said pro-drug consists of a cyclic undeca-peptide, the peptide chain of which comprises a single amino acid residue of general formula (I) and thus forms an undeca-peptide cycle with a linear sequence of ten acids.
- - T is chosen from the amino acids Ala, Abu, Nval, Val and Thr;
- R 9 representing a hydrogen atom, an alkaryl group, or an alkyl group having from 1 with 6 carbon atoms, linear or branched;
- - V represents an amino acid of general formula (NR 10 ) aa, aa being chosen from the amino acids Val, Leu, Ile, Thr, Phe, Tyr, Thr and R 10 being a linear or branched alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms;
- - W is chosen from the amino acids Val, NVal and Leu;
- - X is chosen from the amino acids (D) Ala, (D) Ser, (D) Hiv, (D) Val and (D) Thr, with (D) Hiv representing a residue of D-2-hydroxy acid -isovalérique; and
- - Z is chosen from the amino acids Leu and MeLeu.
- the two substituents Y each represent a hydrogen atom
- the pharmacologically active molecule which will be released, during the cleavage of the pro-drug within the organism will consist of a cyclic undecapeptide from the cyclosporin family, the peptide chain of which contains an N-methyl- (4R) -4-butyl) -4-methyl-L-threonine (Dh-MeBmt) residue ).
- the pharmacologically active molecule which will be released, during the cleavage of the prodrug within the organism will be consisting of a cyclic undeca peptide from the cyclosporin family, the peptide chain of which comprises an N-methyl- (4R) -4 - ((E) -2-butenyl) -4-methyl-L-threonine (MeBmt) residue ).
- these cyclic undeca-peptides correspond to the cyclosporins already described in the literature in order to have pharmacological properties and all having in their peptide sequence, ie a N-methyl- (4R) -4 - ((E) -2-butenyl) -4-methyl-L-threonine (MeBmt) residue, i.e. an N-methyl- (4R) -4-butyl) -4- residue methyl-L-threonine (Dh-MeBmt).
- a N-methyl- (4R) -4 - ((E) -2-butenyl) -4-methyl-L-threonine (MeBmt) residue i.e. an N-methyl- (4R) -4-butyl) -4- residue methyl-L-threonine (Dh-MeBmt).
- the linear sequence of the ten remaining amino acid residues constituting, with said amino acid residue of general formula (I), said cyclic undeca peptides is chosen from the following sequences of formulas (III) to (XIV ):
- the pharmacologically active molecule which will be released during the cleavage of the pro-drug within the organism will then be respectively one of the following cyclosporins with, as the case may be, a residue derived from threonine with a butenyl chain (MeBmt) or butyl (Dh-MeBmt): Cyclosporine A (CsA); (D) MeAla 3 EtVal 4 CsA (WO 00/01715); Cyclosporine C (CsC); Cyclosporine D (CsD); Cyclosporine G (CsG); (D) MeAla 3 CsD; (D) Val 8 Csl; (D) Thr 8 Csl; (D) MeSer (OAc) 3 CsT; (D) Ser 8 CsA (Progress in Medicinal Chemistry, Vol 25, ed Ellis and West, Elsevier Science PubI., Biomedical Division, 1998, pp 1-33); Thr 2 Leu 5 (D
- the pro-drugs of the present invention have the following formulas (XV) and (XVI) respectively:
- the pro-drug according to the present invention can be prepared by applying chemical synthesis methods well known to the specialist. peptide chemistry, especially cyclosporin chemistry.
- the pro-drugs according to the present invention have been found to have, remarkably, a hydrophilic character greatly improved compared to the pharmacologically active molecule generated during the cleavage of said pro-drug.
- the solubility of certain pro-drugs of the present invention generating after cleavage Cyclosporine A is at least 3000 times greater than that of Cyclosporine A.
- the pro-drugs of the present invention can be readily incorporated into aqueous dosage formulations.
- the pro-drugs of the present invention prove not to be sensitive to the pH conditions usually encountered for this kind of application when they are in aqueous solution.
- the pro-drugs of the present invention play their full role in releasing, with a half-life time quite suitable for therapeutic application, the pharmacologically active molecule when they are in contact with the enzymes present in the biological moods.
- the present invention also relates to the use of a pro-drug as described above as a medicament.
- Such a medicament is preferably used for the treatment of pathologies or physiological conditions previously requiring the use of a cyclosporine, in particular of all pathologies requiring the use of Cyclosporine A locally or by intravenous systemic route.
- a medicament is in particular intended to allow the prolongation of survival of allografts of organs such as the kidney, the heart, the liver, the pancreas, the lung, the small intestine, or of the bone marrow. It may also be intended to inhibit the replication of the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1).
- HAV-1 human immunodeficiency virus type 1
- the dosage of the prodrug of the present invention for systemic intravenous administration is such that the concentration of cyclosporin generated during cleavage, for example in
- Cyclosporine A corresponding to the therapeutic concentrations usually recommended.
- such a drug is used in the ophthalmic field and is intended, in particular, for the treatment of pathologies of the eye and its annexes.
- dry keratoconjunctivitis also called dry eye syndrome, Sjôgren syndrome, allergic keratoconjunctivitis, in particular, those resistant to corticosteroids, mucosynechective conjunctivitis, herpetic stromal keratitis , immune limbic keratitis, Thygeson keratitis, pathologies linked to corneal transplants, and as an adjuvant treatment for filtering surgery.
- the medicament of the present invention is used for the treatment of dry keratoconjunctivitis.
- the dosage of the prodrug of the present invention is such that the lacrimal concentration of cyclosporine generated during cleavage of the prodrug, for example Cyclosporine A, must be greater than 0.5 ⁇ g / l in local administration.
- the medicament of the present invention can be administered, topically, in particular for the local treatment of mucosal disorders or skin conditions, or parenterally, especially intravenously. It can also be administered orally in order to improve the bioavailability of cyclosporine, for example Cyclosporine A.
- the appropriate galenical preparations can be concentrated and sterile aqueous solutions, or powders for injections.
- the medicament of the present invention is administered intravenously.
- the galenical preparations suitable for such administration are aqueous solutions for injection or for infusion well known to the specialist.
- the medicament of the present invention is administered topically.
- the galenical preparations suitable for such administration are eye drops, in the form of aqueous sterile solutions, ophthalmic ointments, ophthalmic gels, ophthalmic inserts
- - Figure 1 represents a kinetics curve of in vitro conversion d 'a pro-drug according to the invention by hydrolysis using esterases and a kinetics curve of appearance of Cyclosporine A
- - Figure 2a shows the blood level of Cyclosporin A after iv administration of Cyclosporin A in an oily form in rats
- - Figures 2b and 2c show the blood level of Cyclosporin A after iv administration respectively of an aqueous solution of two of the prodrugs according to the invention in rats
- - Figure 3 shows respectively the concentration over time of Cyclosporin A and a pro-drug according to the invention in rabbit tears.
- Cyclosporin A the residue of Cyclosporin A will be designated by the abbreviation - CsA, the residue of the opposite fragment being linked to the only functionalizable group of this cyclic undeca peptide, namely the hydroxyl group.
- the chemical formulas developed of the intermediate products derived from Cyclosporin A will only represent the amino acid residue in position 1 with the respective side chain.
- RMN- 1 H 400 MHz, CDCI 3 ): ⁇ : 7.34-7.41 (m, 5H), 6.79-6.85 (m, 1H), 5.72-5.82 (m, 1 H), 5.24 (s, 2H), 4.47 (m, 1H), 3.94-4.05 (m, 2H), 2.06 and 2.08 (s, 3H), 1.49 and 1.50 (d, 3H).
- solubilities in water were evaluated by a visual examination at room temperature of the laboratory by direct dissolution of a weighed amount of the cyclic undeca-peptide in 67 mM phosphate buffers of Sorensen type. The values are collated in Table 1.
- Cyclosporine A is described to have a maximum solubility in water of 33 ⁇ g / ml at a temperature of 20 ° C and at pH 7, which corresponds to a maximum concentration of 0.027 mM.
- the cyclic peptide turns out to be stable to respond for at least 90 days.
- cyclic undecapeptides (XV) and (XVI) were subjected to incubation in bovine serum at 37 ° C.
- the half-lives for conversion of cyclic undecapeptides to Cyclosporin A have been evaluated and are respectively 3.66 and 3.50 hours.
- prodrugs of the present invention in the form of simple aqueous solutions, were evaluated for intravenous application.
- Vss volume of distribution at steady state ("Volume of distribution at steady state");
- the pro-drugs of the present invention in the form of simple solutions were evaluated.
- Eye tolerance was determined using two methods, the modified Draize test and a confocal laser scanning ophthalmoscope.
- the eye was observed by a confocal laser scanning ophthalmoscope according to the method described by Furrer et al., J. Ocular Pharmacol., 1997, 13, 559.
- the ophthalmoscope was coupled to a treatment system. image in order to be able to reconstruct a three-dimensional image and allow an evaluation of the damaged areas.
- the degree of tolerance is evaluated according to the percentage of corneal lesions and according to the following rule:
- This conversion kinetics test was carried out by incubating 25 ⁇ l of a sample of the solution described above at 37 ° C. with gentle agitation with 8 ⁇ l of fresh rabbit tears. At intervals of 1, 2, 3 and 30 minutes, samples of 2 ⁇ l were taken and then analyzed by HPLC.
- the pro-drugs of the present invention offer, for topical ocular administration, the following advantages: - ease of preparation of a galenical formulation such as an eye drop by simple dissolution in an aqueous solution without the need to have recourse to oily adjuvants;
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Virology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
La présente invention concerne une pro-drogue constitué d'un undéca-peptide cyclique dont l'enchaînement peptidique comprend au moins un résidu d'acide aminé de formule générale (I), dans laquelle: -l'atome de carbone Ca constitue l'un des maillons du cycle undéca-peptidique; -les substituants Y représentent chacun un atome d'hydrogène ou constituent ensemble une liaison; -les substituants R1 et R3 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl-hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, et éventuellement substitué par au moins un des groupements choisis parmi -COOH, -CONHR8, -NHC0=NH(NH¿2?), -NHC=NR?8(NH¿2), -NH2, -NHR8, -NR82, -N+R83, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)¿2?, -OSO(OR?8)¿2, -OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)¿2?, et les différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R?8¿ représentant indépendamment l'un de l'autre un groupe alkyle, linéaire ou ramifié, ayant de 1 à 6 atomes de carbone; -les substituants R2 et R4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe alkaryle, ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié; -les substituants R5 et R6 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe aralkyle, un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié; et le substituant R7 représente un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl-hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié.
Description
Pro-droαue et son utilisation en tant que médicament
La présente invention concerne une pro-drogue constituée d'un undéca- peptide cyclique et son utilisation en tant que médicament, destiné, en particulier, au traitement de pathologies oculaires.
Les cyclosporines constituent une classe structurellement distincte de peptides cycliques qui ont en commun d'être constitués d'un enchaînement de onze acides aminés, certains étant atypiques, soit du fait de leur configuration
D, soit du fait de la structure chimique élaborée de leur chaîne latérale, soit encore par le fait de l'alkylation du groupe aminé.
A ce jour, une trentaine de cyclosporines ont été isolées à partir de source fongique et de nombreux undéca-peptides cycliques analogues à ces produits naturels ont été obtenus par hémisynthèse ou par synthèse totale. Parmi ces analogues de undéca-peptides cycliques, on trouve également des peptolides ou depsipeptides, c'est-à-dire des polypeptides cycliques contenant également dans leur enchaînement des liens ester.
Dans la suite de cette description et à moins qu'il n'en soit précisé autrement, par "cyclosporine", on entendra aussi bien les undéca-peptides cycliques obtenus de source naturelle que leurs analogues obtenus par hémisynthèse ou par synthèse totale, y compris les peptolides obtenus de source naturelle ou leurs analogues obtenus par hémisynthèse ou par synthèse totale.
Le premier membre de cette famille des cyclosporines à avoir été isolé puis identifié a été la Cyclosporine A. L'enchaînement peptidique constituant son cycle undéca-peptidique est le suivant:
-MeBmt-Abu-Sar-MeLeu-\ al-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-lvleVal-
sa structure chimique développée étant la suivante:
Cyclosporine A
Parmi les acides aminés atypiques que comprend cet undéca-peptide cyclique, on note en particulier celui qui se trouve en position 1 , à savoir la N-méthyl-(4R)-4-((E)-2-butényl)-4-méthyl-L-thréonine, noté MeBmt.
Cet acide aminé est spécifique aux cyclosporines, le groupe éthylénique pouvant éventuellement être réduit. Il possède un groupe aminé qui est méthylé. En outre, le groupe hydroxyle qu'il porte est très remarquable en ce sens qu'il est le seul groupe de tout cet undéca-peptide cyclique susceptible de conduire à des modifications chimiques. On peut en outre constater d'ores et déjà qu'il se trouve dans un environnement stérique fortement encombré rendant toute approche de réactif extrêmement délicate.
Ces undéca-peptides cycliques, qu'ils soient d'origine naturelle ou obtenus par synthèse, présentent un large spectre d'activités biologiques parmi lesquelles les plus connues sont les activités immunosuppressives, anti- inflammatoires, anti-parasitaires, ou des activités permettant de contrecarrer ou de diminuer la résistance de tumeurs cancéreuses à d'autres médications. Certains de ces undéca-peptides cycliques se sont avérés posséder des activités anti-virales prometteuses, en particulier, dans le traitement du SIDA en inhibant la réplication du virus de l'immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1 ).
A ce titre, un certain nombre d'undéca-peptides cycliques, obtenus par hémisynthèse et ayant une structure analogue à celle de la Cyclosporine A, mais dont la nature des acides aminés se trouvant en position 4, ou en position 3 et 4, par rapport à l'acide aminé MeBmt a été modifiée, ont été décrits dans la demande de brevet WO 00/01715 déposée par la présente demanderesse.
De récents développements pharmacologiques ont permis d'espérer que l'effet immuno-modérateur des cyclosporines, en particulier celui de la Cyclosporine A, effet qui est réversible, non myélotoxique et pour lequel peu d'effets secondaires ont été répertoriés, puisse être mis à profit en particulier dans le domaine ophtalmique, pour un traitement local, en particulier, de pathologies superficielles de l'œil et de ses annexes.
Parmi ces pathologies, on trouve, entre autres, les kératoconjonctivites sèches, appelées également syndrome de l'œil sec, le syndrome de Sjόgren, les kératoconjonctivites allergiques, en particulier, celles résistantes aux corticostéroïdes, les conjonctivites muco-synéchiantes, les kératites stromales herpétiques, les kératites limbiques immunitaires, la kératite de Thygeson, la prévention du rejet des greffes de cornée, et comme traitement adjuvant d'une chirurgie filtrante.
Les undéca-peptides cycliques de la famille des cyclosporines possèdent un caractère fortement hydrophobe réduisant d'autant leur solubilité dans l'eau. Ce caractère est lié à la nature de la chaîne latérale de la plupart de leurs acides aminés, mais également au fait que certain de ces acides aminés ont leur groupe aminé méthylé, limitant ainsi le nombre possible de formation de liaison hydrogène intermoléculaire entre le undéca-peptide cyclique et, par exemple, un milieu de solubilisation aqueux.
De ce fait, l'administration par voie intra-veineuse (i.v.) de ces cyclosporines nécessite des mises au point de formulations galéniques très complexes, principalement sous la forme d'émulsions, parfois de stabilité
précaire et de manipulations délicates, et sources d'effets secondaires délétères.
A titre d'exemple, l'une des préparations pour perfusion i.v. de Cyclosporine A, disponible dans le commerce sous la marque de commerce Sandimmun, est constituée d'une micro-émulsion utilisant comme excipient une huile de ricin polyoxyéthylénée connue sous le nom de marque de commerce Crémophor. Cette préparation est conservée sous la forme d'un concentré et doit être diluée juste avant son administration.
Du fait de l'emploi de cette huile de ricin qui est connue pour mettre en solution certain des composants de matières synthétiques, le fabricant recommande de n'utiliser lors de la manipulation de cette préparation que du matériel en verre ou, à défaut, en un matériau synthétique conforme aux "normes de la Pharmacopée Européenne pour les récipients destinés à contenir du sang", tous ces matériaux devant être exempts d'huile de silicone et de matière grasses.
De plus, il met en garde le clinicien du fait que cette huile de ricin est susceptible d'entraîner des réactions anaphylactoïdes et, de ce fait, recommande que l'administration par voie intraveineuse soit réservée aux cas où l'administration orale est impossible.
Le développement des applications prometteuses des cyclosporines par administration locale en ophtalmologie reste ralenti du fait également des difficultés à mettre au point des formulations galéniques appropriées, présentant en particulier une bonne tolérance locale et ne troublant pas la vision par la présence d'agents visqueux.
Ainsi, et à titre d'exemple, Robert et al. ont récemment passé en revue, dans J. Fr. Ophtalmol., 2001 , 24(5), 527, toutes les difficultés techniques qu'il y a à mettre au point, du fait du caractère lipophile, des formulations galéniques
permettant d'administrer la Cyclosporine A par voie locale en ophtalmologie et tous les problèmes de tolérance locale qu'entraînent ces formulations.
L'une des conclusions que l'on peut tirer de cette revue est que, à ce jour, il n'existe aucune formulation sous forme d'un collyre qui soit apte à être administrée localement pour le traitement d'affections de l'œil et de ces annexes. Cette conclusion peut être élargie pour l'usage de la cyclosporine pour le traitement local d'affections des muqueuses ou d'affections cutanées.
II existe par conséquent toujours un besoin de mettre à disposition du clinicien des cyclosporines, qu'elles soient d'origine naturelle ou synthétique, ou des dérivés de ces cyclosporines qui puissent être rendues facilement administrables à un patient, en particulier par voie locale ou intra-veineuse, ceci en évitant l'emploi de formulations galéniques complexes, à stabilité précaire et à manipulation délicate, et sources d'effets secondaires délétères.
Ce besoin existe d'autant plus si ces cyclosporines, d'origines naturelle ou synthétique, doivent être appliquées localement au niveau de l'œil ou de ses annexes.
L'une des possibilités qui s'offre au spécialiste lorsque qu'il est confronté au problème de rendre assimilable dans un milieu physiologique une molécule pharmacologiquement active hydrophobe est de la modifier chimiquement afin de lui conférer un caractère hydrophile.
Afin d'éviter de d'altérer les propriétés pharmacologiques d'une telle molécule pharmacologiquement active, cette modification chimique peut consister à préparer un précurseur si possible inactif, de cette molécule pharmacologiquement active qui, une fois administré et sous l'effet des conditions physiologiques régnantes localement au sein de l'organisme, sera modifié chimiquement ou enzymatiquement de telle sorte que la molécule pharmacologiquement active soit libérée, si possible, soit sur le site où son action pharmacologique doit se produire, soit dans le sang qui transportera
cette molécule pharmacologiquement active ainsi libérée sur son site d'action, ceci correspondant au concept de "pro-drogue". Dans la suite de cette description, le précurseur en question de ladite molécule pharmacologiquement active est appelé "pro-drogue".
Il est déjà connu de modifier chimiquement la structure de la Cyclosporine A en vue de conférer au produit obtenu un caractère hydrophile.
Ainsi, Rothbard et al. ont décrit dans la demande de brevet WO 01/13957 une méthode pour améliorer l'administration de molécules pharmacologiquement actives et pour leur permettre de traverser le derme et les membranes épithéliales consistant à greffer sur ces molécules, de façon réversible, une chaîne latérale constituée de fragments d'une chaîne poly- arginine. Parmi ces molécules pharmacologiquement actives, on trouve des molécules à caractère hydrophobe comme la Cyclosporine A.
Toutefois, de tels conjugués sont de manipulation et de conservation extrêmement délicates du fait, comme il est indiqué dans cette demande citée, que la molécule pharmacologiquement active se trouve libérée dès que le pH du milieu dépasse 7. De plus, lors de la libération de cette molécule pharmacologiquement active, les fragments de chaîne poly-arginine se trouvent relargués au sein de l'organisme. Ces poly-arginines, étant connues pour leur toxicité et leur pouvoir irritant, provoqueraient des irritations telles qu'un usage dans le domaine ophtalmique de tels conjugués de cyclosporine n'est pas envisageable.
Crooks et al. décrivent dans la demande de brevet WO 00/67801 la préparation de pro-drogues d'agents anti-inflammatoires tels que le flurbiprofen afin de pouvoir les administrer localement au contact de l'œil, tout en évitant cette fois toute irritation locale. Ils y sont parvenus, pour un certain nombre de médicaments, en introduisant des chaînes oxygénées ou poly-oxygénées.
En revanche, en voulant faire subir à la Cyclosporine A des mêmes modifications chimiques, ils ne sont parvenus à obtenir que des produits qu'ils décrivent comme étant stables, autrement dit qui ne se clivent pas pour libérer la Cyclosporine A, que se soit au contact du sérum humain ou dans un tampon phosphate se trouvant à pH 7,4.
La présente invention a par conséquent pour but de mettre à la disposition du clinicien des pro-drogues de undéca-peptides cycliques de la famille des cyclosporines, d'une part, qui puissent être administrables au sein du milieu physiologique sans avoir à mettre au point des formulations galéniques élaborées, d'autre part, qui puissent être conservés, puis manipulée et administrée sans avoir à se préoccuper en particulier des conditions de pH du milieu environnant.
La présente invention a également pour but de mettre à la disposition du clinicien des pro-drogues de undéca-peptides cycliques de la famille des cyclosporines qui puissent être administrées localement d'une façon générale, et en particulier sur la surface oculaire ou sur les muqueuses, et qui puissent ensuite libérer dans un temps de demi-vie approprié le undéca-peptide cyclique pharmacologiquement actif et ceci sans irritation locale.
A cet effet, la présente invention concerne une pro-drogue constituée d'un undéca-peptide cyclique dont l'enchaînement peptidique comprend au moins un résidu d'acide aminé de formule générale (I) suivante:
(l)
dans laquelle:
- l'atome de carbone Ca constitue l'un des maillons du cycle undéca-peptidique;
- les substituants Y représentent chacun un atome d'hydrogène ou constituent ensemble une liaison;
- les substituants R1 et R3 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl-hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, lesdits groupes étant éventuellement substitués par au moins un des groupements choisis parmi -COOH, -CONHR8, -NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR8 2, -N+R8 3, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, -OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)2, et les différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 représentant indépendamment l'un de l'autre un groupe alkyle, linéaire ou ramifié, ayant de 1 à 6 atomes de carbone; - les substituants R2 et R4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe alkaryle, ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié;
- les substituants R5 et R6 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe aralkyle, un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié; et
- le substituant R7 représente un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl- hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, lesdits groupes étant éventuellement substitués par au moins un des groupements choisis parmi -COOH, -CONHR8, -NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR8 2, -N+R8 3, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, -OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)2, et les différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 ayant la définition précédente.
Lorsque les deux substituants Y constituent ensemble une liaison, ledit résidu d'acide aminé de formule générale (I) dérive d'un résidu de la N-méthyl- (4R)-4-((E)-2-butényl)-4-méthyl-L-thréonine dans lequel le groupe hydroxyle de
la thréonine a été estérifié de façon appropriée et la molécule pharmacologiquement active qui sera libérée lorsque la pro-drogue sera clivée au sein de l'organisme sera constituée d'un undéca-peptide cyclique dont l'enchaînement peptidique comprend au moins un résidu N-méthyl-(4R)-4-((E)- 2-butényl)-4-méthyl-L-thréonine (MeBmt).
De même, lorsque les deux substituants Y représentent chacun un atome d'hydrogène, ledit résidu d'acide aminé de formule générale (I) dérive d'un résidu de la N-méthyl-(4R)-4-butyl-4-méthyl-L-thréonine dans lequel le groupe hydroxyle de la thréonine a été estérifié de façon appropriée et la molécule pharmacologiquement active qui sera libérée lorsque la pro-drogue sera clivée au sein de l'organisme sera constitué d'un undéca-peptide cyclique dont l'enchaînement peptidique comprend au moins un résidu N-méthyl-(4R)-4- butyl)-4-méthyl-L-thréonine (Dh-MeBmt).
De préférence, dans la formule générale (I) définissant ledit résidu d'acide aminé, au moins l'un des substituants R1 et R3 représente un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl-hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, chacun desdits groupes étant substitué par au moins un des groupements choisis parmi -COOH, -CONHR8, -NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR8 2, -N+R8 3, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, -OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)2, et les différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 ayant la définition précédente. Ces groupements, reconnus pour leur caractère polaire, améliorent grandement le caractère hydrophile conféré à ladite pro-drogue.
De préférence encore, lesdits groupes aralkyle, alkaryle, hétéroalkyle, hétérocyclique, alkyl-hétérocyclique, hétérocyclique-alkyle ou alkyle précédents sont substitués par au moins un des groupements choisis parmi -NR8 2) -N+R8 3,
-OPO(OH)2 ou les différentes formes salifiées de ces groupes, chacun des substituants R8 ayant la définition, précédente.
De préférence encore, au moins l'un desdits substituants R1 et R3 représentent un groupe alkyle linéaire ayant de 1 à 6 atomes de carbone substitués par au moins un des groupements choisis parmi -NR8 2, -N+R8 3, -OPO(OH)2 ou les différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 ayant la définition précédente.
Lorsque lesdits substituants R1 et R3 représentent un groupe alkyle linéaire ayant de 1 à 6 atomes de carbone substitués par au moins un des groupements choisis parmi -NR8 2, -N+R8 3, -OPO(OH)2 ou ses différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 ayant la définition précédente, les résidus d'acides aminés correspondants dérivent de préférence:
- soit de résidus de serine, de homo-sérine, de thréonine, de allo-thréonine, de N-méthyl-sérine, de N-méthyl-thréonine, de N-méthyl-homo-sérine, sous l'une quelconque des configurations (Q) ou (L), de préférence (L), et dans lesquels le groupe hydroxyle a été fonctionnalisé de façon appropriée telle que la chaîne latérale des ces résidus d'acides aminés porte les groupements polaires et/ou solubilisants; ou
- soit de résidus de lysine, d'omithine, d'arginine, de N-delta-méthyl-arginine, de N-alpha-méthyl-arginine, de N-méthyl-lysine, sous l'une quelconque des configurations (D) ou (L), de préférence (L), et dans lesquels le groupe respectivement aminé ou imine a été fonctionnalisé de façon appropriée telle que la chaîne latérale des ces résidus d'acides aminés porte les groupements polaires et/ou solubilisants.
Lorsque les substituants R1, R2 et/ou R3, R4 formant les couples (R1, R2) et/ou (R3, R4) sont des groupes alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, ils peuvent former au sein de chaque couple une chaîne alkylène formant avec l'atome de carbone et l'atome d'azote qui les portent un cycle. De préférence, ils constituent la chaîne latérale d'un résidu de proline.
Lorsque les substituants R1 et R3 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl-hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, mais que lesdits groupes ne sont pas substitués par au moins un des groupements choisis parmi -COOH, -CONHR8, -NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR8 2, -N+R8 3, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, -OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)2, et les différentes formes salifiées de ces groupements, alors ils représentent de préférence les chaînes latérales de résidus d'acides aminés, sous des configurations (D) ou (L), de préférence (L), ou de résidus desdits acides aminés sous des formes protégées et/ou activées et ayant éventuellement leur groupe aminé alkyle habituellement disponibles dans le commerce. De préférence encore, lesdits résidus d'acides aminés sont choisis parmi les vingt acides aminés habituellement appelés acides aminés naturels.
De préférence également, dans la formule générale (I), les substituants R5 et R6 ne peuvent représenter simultanément un atome d'hydrogène. De préférence également, au moins l'un desdits substituants R5 et R6 représente un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, et le substituant R7 représente un groupe aralkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié.
De préférence encore, lesdits substituants R5 et R6 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle.
De préférence, ladite pro-drogue est constituée d'un undéca-peptide cyclique dont l'enchaînement peptidique comprend un seul résidu d'acide aminé de formule générale (I) et forme ainsi un cycle undéca-peptidique avec une séquence linéaire de dix acides aminés de formule générale (II) suivante:
-T-U-V-W- eLeu-Ala-X-MeLeu-Z-MeVal- (II)
dans laquelle:
- T est choisi parmi les acides aminés Ala, Abu, Nval, Val et Thr;
- U est choisi parmi les acides aminés Sar, (D)MeSer, (D)MeAla et (D)MeSer(OCOR9), avec R9 représentant un atome d'hydrogène, un groupe alkaryle, ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié;
- V représente un acide aminé de formule générale (N-R10)aa, aa étant choisi parmi les acides aminés Val, Leu, Ile, Thr, Phe, Tyr, Thr et R10 étant un groupe akyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone;
- W est choisi parmi les acides aminés Val, NVal et Leu;
- X est choisi parmi les acides aminés (D)Ala, (D)Ser, (D)Hiv, (D)Val et (D)Thr, avec (D)Hiv représentant un résidu de l'acide D-2-hydroxy-isovalérique; et
- Z est choisi parmi les acides aminés Leu et MeLeu.
Ainsi, lorsque, dans ledit résidu d'acide aminé de formule générale (I), les deux substituants Y représentent chacun un atome d'hydrogène, la molécule pharmacologiquement active qui sera libérée, au cours du clivage de la pro-drogue au sein de l'organisme, sera constitué d'un undéca-peptide cyclique de la famille des cyclosporines dont l'enchaînement peptidique contient un résidu N-méthyl-(4R)-4-butyl)-4-méthyl-L-thréonine (Dh-MeBmt).
De même, lorsque, dans ledit résidu d'acide aminé de formule générale (I), les deux substituants Y constituent ensemble une liaison, la molécule pharmacologiquement active qui sera libérée, au cours du clivage de la prodrogue au sein de l'organisme sera constitué d'un undéca-peptide cyclique de la famille des cyclosporines dont l'enchaînement peptidique comprend un résidu N-méthyl-(4R)-4-((E)-2-butényl)-4-méthyl-L-thréonine (MeBmt).
De préférence, ces undéca-peptides cycliques correspondent aux cyclosporines déjà décrites dans la littérature pour posséder des propriétés pharmacologiques et ayant toutes dans leur enchaînement peptidique, soit un
résidu N-méthyl-(4R)-4-((E)-2-butényl)-4-méthyl-L-thréonine (MeBmt), soit un résidu N-méthyl-(4R)-4-butyl)-4-méthyl-L-thréonine (Dh-MeBmt).
De préférence encore, la séquence linéaire des dix résidus d'acides aminés restants constituant, avec ledit résidu d'acide aminé de formule générale (I), lesdits undéca-peptides cycliques est choisie parmi les séquences suivantes de formules (III) à (XIV):
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (III); -Abu-(D)MeAla-EtVal-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (IV);
-Thr-Sar-MeLeu-Va MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (V);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (VI);
-NVal-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (VII);
-Val-(D)MeAla-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (VIII); -Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Val-MeLeu-Leu-MeVal- (IX);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Thr-MeLeu-Leu-MeVal- (X);
-Abu-(D)MeSer(OAc)-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-Leu-MeVal- (XI);
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ser-MeLeu-MeLeu-MeVal- (XII);
-Thr-Sar-MeLeu-Leu-MeLeu-Ala-(D)Hiv-MeLeu-Leu-MeVal- (XIII); et
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Val-MeLeu-Leu-MeVal- (XIV).
La molécule pharmacologiquement active qui sera libérée lors du clivage de la pro-drogue au sein de l'organisme sera alors respectivement l'une des cyclosporines suivantes avec, selon les cas, un résidu dérivé de la thréonine avec une chaîne butényle (MeBmt) ou butyle (Dh-MeBmt): Cyclosporine A (CsA); (D)MeAla3EtVal4CsA (WO 00/01715); Cyclosporine C (CsC); Cyclosporine D (CsD); Cyclosporine G (CsG); (D)MeAla3CsD; (D)Val8Csl; (D)Thr8Csl; (D)MeSer(OAc)3CsT; (D)Ser8CsA (Progress in Médicinal Chemistry, Vol 25, ed Ellis and West, Elsevier Science PubI., Biomédical Division, 1998, pp 1-33); Thr2Leu5(D)Hiv8Leu10CsC (The Journal of Biological Chemistry, 1991 , 266(24), 15570); (D)Val8Leu10CsA; les cyclosporines A, C, D, G, I et T étant décrites dans Progress in the Chemistry
of Organic Natural Products, 1986, 50, 124, les cyclosporines restantes étant préparées par analogie au procédé décrit dans Helvetica Chimica Acta, 1984, 67, 502.
De préférence encore, les pro-drogues de la présente invention ont respectivement les formules (XV) et (XVI) suivantes:
(XV); et
(XVI).
La pro-drogue selon la présente invention peut être préparée en appliquant des méthodes de synthèses chimiques bien connues du spécialiste
de la chimie des peptides, et tout particulièrement de la chimie des cyclosporines.
Par le choix approprié des différents substituants définissant le résidu d'acide aminé de formule générale (I), les pro-drogues selon la présente invention se sont avérées posséder, de façon remarquable, un caractère hydrophile grandement amélioré par rapport à la molécule pharmacologiquement active générée lors du clivage de ladite pro-drogue. A titre d'exemple, la solubilité de certaines pro-drogues de la présente invention générant après clivage la Cyclosporine A est d'au moins 3000 fois supérieure à celle de la Cyclosporine A.
En conséquence, les pro-drogues de la présente invention peuvent être facilement incorporées à des formulations galéniques aqueuses.
Egalement de façon remarquable, les pro-drogues de la présente invention s'avèrent ne pas être sensibles aux conditions de pH habituellement rencontrées pour ce genre d'application lorsqu'elles se trouvent en solution aqueuse.
De plus, les pro-drogues de la présente invention jouent pleinement leur rôle en libérant, avec un temps de demi-vie tout à fait approprié pour une application thérapeutique, la molécule pharmacologiquement active lorsqu'elles se trouvent au contact des enzymes présents dans les humeurs biologiques.
La présente invention concerne également l'utilisation d'une pro-drogue telle que décrite précédemment en tant que médicament.
Un tel médicament est de préférence utilisé pour le traitement des pathologies ou des conditions physiologiques nécessitant précédemment l'emploi d'une cyclosporine, en particulier de toutes les pathologies nécessitant l'emploi de la Cyclosporine A par voie locale ou par voie systémique intraveineuse.
Un tel médicament est en particulier destiné à permettre la prolongation de survie des allogreffes d'organes tels que le rein, le cœur, le foie, le pancréas, le poumon, l'intestin grêle, ou de la moelle osseuse. Il peut être destiné également à inhiber la réplication du virus de l'immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1 ).
Dans de telles applications, la posologie de la pro-drogue de la présente invention en administration systémique intra-veineuse est telle que la concentration en cyclosporine générée lors du clivage, par exemple en
Cyclosporine A, correspondant aux concentrations thérapeutiques habituellement préconisée.
De préférence encore, un tel médicament est utilisé dans le domaine ophtalmique et est destiné, en particulier, pour le traitement de pathologies de l'œil et de ses annexes.
Parmi ces pathologies, on trouve, entre autres, les kératoconjonctivites sèches, appelées également syndrome de l'œil sec, le syndrome de Sjôgren, les kératoconjonctivites allergiques, en particulier, celles résistantes aux corticostéroïdes, les conjonctivites muco-synéchiantes, les kératites stromales herpétiques, les kératites limbiques immunitaires, la kératite de Thygeson, les pathologies liées aux greffes de cornée, et comme traitement adjuvant d'une chirurgie filtrante. De préférence encore, le médicament de la présente invention est utilisé pour le traitement des kératoconjonctivites sèches.
Dans de telles applications, la posologie de la pro-drogue de la présente invention est telle que la concentration lacrymale en cyclosporine générée lors du clivage de la pro-drogue, par exemple en Cyclosporine A, doit être supérieure à 0,5 μg/l en administration par voie locale.
Le médicament de la présente invention peut être administré, par voie topique, en particulier pour le traitement local d'affections des muqueuses ou
d'affections cutanées, ou par voie parentérale, en particulier par voie intraveineuse. Il peut également être administré par voie orale dans le but d'améliorer la bio-disponibilité de la cyclosporine, par exemple de la Cyclosporine A.
)
Lorsque le médicament de la présente invention est administré par voie parentérale, les préparations galéniques appropriées peuvent être des solutions aqueuses concentrées et stériles, ou des poudres pour préparations injectables.
De préférence, le médicament de la présente invention est administré par voie intra-veineuse. Les préparations galéniques appropriées pour une telle administration sont des solutions aqueuses pour injection ou pour perfusion bien connues du spécialiste.
De préférence encore, le médicament de la présente invention est administré par voie locale. Les préparations galéniques appropriées pour une telle administration, en particulier pour une application ophtalmique, sont les collyres, sous la forme de solutions stériles aqueuses, les pommades ophtalmiques, les gels ophtalmiques, les inserts ophtalmiques
La présente invention, ainsi que ses propriétés avantageuses, sont présentées de façon détaillée, sans pour autant être limitative, dans les Exemples et avec l'aide du dessin dans lequel, - la Figure 1 représente une courbe de cinétique de conversion in-vitro d'une pro-drogue selon l'invention par hydrolyse à l'aide d'estérases et une courbe de cinétique d'apparition de la Cyclosporine A; - la Figure 2a représente le taux sanguin de Cyclosporine A après administration i.v. de la Cyclosporine A sous une forme huileuse chez le rat; - les Figures 2b et 2c représentent le taux sanguin de Cyclosporine A après administration i.v. respectivement d'une solution aqueuse de deux des prodrogues selon l'invention chez le rat; et
- la Figure 3 représente respectivement les concentration au cours du temps de la Cyclosporine A et d'une pro-drogue selon l'invention dans les larmes de lapin.
Dans la nomenclature utilisée dans les Exemples pour décrire les produits obtenus, le résidu de Cyclosporine A sera désigné par l'abréviation - CsA, le résidu du fragment opposé étant lié au seul groupe fonctionnalisable de ce undéca-peptide cyclique, à savoir le groupe hydroxyle de l'acide aminé ayant la position 1 , la N-méthyl-(4R)-4-((E)-2-butényl)-4-méthyl-L-thréonine (MeBmt). Les formules chimiques développées des produits intermédiaires dérivés de la Cyclosporine A ne représenteront que le résidu d'acide aminé en position 1 avec la chaîne latérale respective.
Exemple 1 Préparation du undéca-peptide cyclique de formule (XV)
(XV)
1. Préparation de MeBmt(0-Sar-Lvs(N£ +Me^-COOCH(CHrj)OCOCH3))1-CsA (XV)
1.1. Préparation du carbonate d'α-acétoxyéthyle d'oxycarbonyl-paranitro- phénolate (2)
1.1.1. Préparation du carbonate d'α-chloroéthyle d'oxycarbonyl-paranitro- phénolate (1)
A une solution de 3 g (21.6 mmol, 1eq) de p-nitrophénol et 1.7 ml (21.7 mmol, 1eq) de pyridine dans 108 ml de chloroforme sont ajoutés à 0°C, 2.6 ml (23.7 mmol, 1.1 eq) de chloroformiate d'α -chloroéthyle. Le mélange réactionnel est agité 30 min à 0°C puis 16h à température ambiante. Le mélange réactionnel est extrait à l'eau, avec une solution à 0.5% de NaOH puis à l'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO , filtrée et évaporée sous vide réduit pour donner une huile jaune qui donne un solide blanc pur (5.8 g) après cristallisation dans l'hexane.
RMN-1H (400 MHz, CDCI3): δ: 8.32 (d, 2H), 7.44 (d, 2H), 6.52 (q, 1 H), 1.95 (s, 3H).
1.1.2. Préparation du carbonate d'α-acétoxyéthyle d'oxycarbonyl-paranitro- phénolate (2)
A une solution de 4 g (16.3 mmol, 1 eq) de (1 ) dissous dans 100 ml d'acide acétique sont ajoutés 7.8 g (24.4 mmol, 1.5 eq) d'acétate de mercure. Le mélange réactionnel est agité pendant 1 jour à température ambiante puis 1 g (3.13 mmol, 0.2 eq) supplémentaire d'acétate de mercure est ajouté. Après 1 jour supplémentaire d'agitation à température ambiante, la réaction est complète. L'acide acétique est évaporé sous haut vide et le résidu repris dans l'éther. La phase organique est extraite avec une solution saline puis séchée sur Na2SO , filtrée et évaporée sous vide réduit pour donner une huile jaune. Le produit brut est chromatographié sur gel de silice pour donner une huile incolore (4.4 g).
RMN-1H (400 MHz, CDCI3): δ: 8.31 (d, 2H), 7.43 (d, 2H), 6.87 (q, 1 H), 2.16 (s, 3H), 1.64 (s, 3H).
1.2. Préparation de I' α-acétoxyéthoxycarbonyl-lvsine(Ns(Fmoc)) (5)
1.2.1 Préparation de l'ester benzylique de l'α-acétoxyéthoxycarbonyl- lysine(Nε(Z)) (3)
500 mg (1.23 mmol, 1 eq) de H-Lys(Z)OBn.HCI sont mis en suspension dans 2.5 ml de dioxane. A température ambiante sont ajoutés 231 μl (1.35 mmol, 1.1 eq.) de N,N-diisopropyléthylamine (DIPEA) et 396 mg (1.47 mmol, 1.2 eq) de (2). Après 1 jour d'agitation à température ambiante, la réaction est complète. Le dioxane est évaporé sous vide réduit et le résidu repris dans 20 ml d'acétate d'éthyle. La phase organique est extraite trois fois avec une solution d'acide citrique à 6% (20 ml), une solution saturée de NaHC03 (20 ml) et une solution saturée en NaCI (20 ml), séchée sur Na2SO4 anhydre, filtré et le solvant est évaporé sous vide réduit. Le produit brut obtenu est chromatographié sur gel de silice pour donner une huile claire, transparent (576 mg). ESI-MS: m/z: 501.34 [M+H+]; 518.28 [M+H20+H+].
1.2.2. Préparation de I' α-acétoxyéthoxycarbonyl-lysine (4)
A une solution de 509 mg (1.02 mmol) de (3) dans 10 ml d'éthanol sont ajoutés 50 mg de palladium sur charbon actif. Après 3 h d'agitation à température ambiante sous flux d'hydrogène, la réaction est complète. Le mélange réactionnel est filtré sur célite et le filtrat évaporé sous vide réduit pour donner le brut sous forme de cristaux brunâtres qui est engagé directement dans l'étape suivante (254 mg). ES-MS m/z: 276.87 [M+H+].
1.2.3 Préparation de I' α-acétoxyéthoxycarbonyl-lysine(Nε(Fmoc)) (5)
A une solution de 1.062 (3.84 mmol, 1 eq) de (4) dissous dans 38 ml de dioxane sont ajoutés 1.11 ml de DIPEA (6.53 mmol, 1.7 eq) et 1.555 g
(4.61 mmol, 1.2 eq) de Fmoc-O-Suc. Après 1 h d'agitation à température ambiante, la réaction est complète, le dioxane est évaporé sous vide réduit et le résidu repris dans 20 ml d'AcOEt. La phase organique est lavée une fois
avec une solution d'acide citrique 6% (20 ml) et une solution saturée en NaCl (20 ml), séchée sur Na2S0 anhydre, filtrée et le solvant est évaporé sous vide réduit. Le produit brut obtenu est chromatographié sur gel de silice pour donner une mousse blanche (1.026 g). ES-MS m/z: 499.37 [M+H+], 516.29 [M+H2O+H+].
1.3. Préparation de MeBmt(O-Sar-Lvs(N,+Me3)-COOCH(CH3)OCOCH ))1- CsA.I' (XV)
1.3.1 Préparation de MeBmt(O-COCH2Br)1-CsA (6)
(6)
4 g (3.33 mmol, 1 eq) de CsA sèche sont dissous sous argon dans 66 ml
(0.76 mol) de bromure de bromoacétyle. Par petites portions, sont ajoutés 2g (16.64 mmol, 5 eq) de diméthylaminopyridine et le mélange réactionnel est agité à température ambiante pendant 40 min. La réaction est alors complète. Le mélange réactionnel est versé, avec précaution et sous agitation vigoureuse, dans un mélange d'hydrogénocarbonate (77 g, 0.91 mol), d'eau (500 ml) et de glace pillée. L'addition éventuelle de quelques portions supplémentaires de NaHCO3 permet d'amener le pH de la solution à 7-8. La phase aqueuse séparée est extraite deux fois au dichlorométhane et les phases organiques réunies sont extraites trois fois avec une solution saturée de NaHCO3 et avec une solution saturée de NaCl, séchées sur Na2SO4 anhydre, filtrées et le solvant est évaporé sous vide réduit. Le produit brut obtenu est chromatographié sur gel de silice pour donner une mousse blanche (3.2 g). ESI-MS : m/z : 622.6 [M+2H+], 673.9 [M+Na++H+].
1.3.2. Préparation de MeBmt(O-Sar-H)1-CsA (7)
(7)
300 mg (0.23 mmol, 1 eq) de (6) sont dissous dans 2.3 ml d'éthanol. Sont ajoutés à température ambiante, 95 μl (0.68 mmol, 3 eq) de triéthylamine (TEA) et 31 mg (0.45 mmol, 2 eq) du chlorure de méthylammonium supplémentaire. Après 3 jours d'agitation à température ambiante, ajustement du pH à 12 par ajout de TEA et addition de 15 mg (0.23 mmol, 1 eq) de chlorure de méthylammonium, la réaction est complète après 1 heure. L'éthanol est évaporé sous vide réduit et le résidu est repris dans de l'acétate d'éthyle. La phase organique est extraite à l'eau et avec une solution saturée en NaCl., séchées sur Na2SO anhydre, filtrées et le solvant est évaporé sous vide réduit. Le produit brut obtenu est chromatographié sur gel de silice pour donner une mousse blanche (200 mg). ESI-MS : m/z : 1273.7 [M+H+].
1.3.3 Préparation de MeBmt(0-Sar-Lys(Nε(FMOC)-COOCH(CH3)OCOCH3))1 -CsA (8)
(8)
79 mg (0.06 mmol, 1 eq) de (7) sont dissous dans 0.5 ml de dichlorométhane (DCM) sous argon. Sont ajoutés successivement sous argon 31.6 μl (0.18 mmol, 3 eq) de DIPEA, 35 mg (0.09 mmol, 1.5 eq) de hexafluorophosphate de O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-1 ,1 ,3,3-tétraméthyluronium (HATU) et 40 mg (0.08 mmol, 1.3 eq) de (5) dissous dans 0.8 ml DCM. Après 3 h d'agitation à température ambiante, la réaction est complète. Le DCM est évaporé sous vide réduit et le résidu repris dans 20 ml d'AcOEt. La phase organique est lavée une fois avec une solution d'acide citrique à 6% (20 ml), une solution saturée de NaHC03 (20 ml) et une solution saturée de NaCl (20 ml), séchée sur Na2SO4 anhydre, filtrée et le solvant évaporé sous vide réduit. Le produit brut est chromatographié sur gel de silice pour donner une mousse blanche (59 mg). ES-MS m/z: 1754.36 [M+H+]; 877.86 [M+2H+].
1.3.4 Préparation de MeBmt(O-Sar-Lys(Nα-COOCH(CH3)OCOCH3)) -CsA (9)
(9)
A une solution de 150 mg (0.09 mmol, 1 eq) de (8) dissous dans 900 μl d'acétonitrile sont ajoutés 90 μl (0.86 mmol, 10 eq) de diéthylamine. Après 3 h d'agitation à température ambiante, la réaction est complète. Le solvant est évaporé sous vide réduit et le produit brut est chromatographié sur gel de silice pour donner une mousse blanche (52 mg). ES-MS m/z: 1532.79 [M+H+j; 766.79 [M+2H+].
1.3.4. Préparation de MeBmt(O-Sar-Lys(Nε +Me3)-COOCH(CH3)OCOCH3))1
(XV)
49 mg (0.03 mmol, 1 eq) de (9) sont dissous dans 640 μl de DCM anhydre, puis 30 μl (0.48 mmol, 15 eq) de Mel suivis de 14 μl (0.08 mmol, 2.5 eq) de DIPEA sont additionnés. Après 1 jour d'agitation à température ambiante la réaction est complète. Le DCM est évaporé sous vide réduit et le produit brut est purifié par HPLC semi-préparative pour isoler le composé pur sous forme de lyophilisât (30 mg). ES-MS m/z: 1574.37 [M+H+], 787.83 [M+2H+].
Exemple 2
Préparation du undéca-peptide cyclique de formule (XVI)
(XVI)
1. Préparation de MeBmt(0-Sar-Ser(OPO(OH)9)-COOCH(CH3)OCOCH?)1 -CsA. (XVI)
1.1. Préparation de I' α-acétoxyéthoxycarbonyl-séhne (11 )
1.1.1. Préparation de l'ester benzylique de l'α-acétoxyéthoxycarbonyl-sérine (10)
1.4 g (6.04 mmol, 1 eq) de H-Ser-OBn.HCI sont mis en suspension dans 12 ml de dioxane. A température ambiante, sont ajoutés 1.14 ml (6.64 mmol, 1.1 eq) de DIEA et 2.1 g (7.85 mmol, 1.3 eq) de (2) obtenu selon l'Exemple 1. Après une nuit d'agitation à température ambiante, la réaction est complète. Le dioxane est évaporé sous vide réduit et le résidu repris dans de l'acétate d'éthyle. La phase organique est extraite trois fois avec une solution d'acide citrique à 6%, une solution saturée de NaHCO3 et une solution saturée en NaCl, séchée sur Na2SO anhydre, filtrée et le solvant est évaporé sous vide réduit. Le produit brut obtenu est chromatographié sur gel de silice pour donner une mousse blanche (1.7 g).
RMN-1H (400 MHz, CDCI3): δ: 7.34-7.41 (m, 5H), 6.79-6.85 (m, 1H), 5.72-5.82 (m, 1 H), 5.24 (s, 2H), 4.47 (m, 1H), 3.94-4.05 (m, 2H), 2.06 et 2.08 (s, 3H), 1.49 et 1.50 (d, 3H).
1.1.2. Préparation de I' α-acétoxyéthoxycarbonyl-sérine (11)
A une solution de 400 mg (1.23 mmol) de (10) dans 13 ml d'éthanol sont ajoutés 40 mg de palladium sur charbon actif. Après 4h d'agitation à température ambiante sous flux d'hydrogène, la réaction est complète. Le mélange réactionnel est filtré sur célite et le filtrat évaporé sous vide réduit pour donner le brut sous forme de dépôt translucide qui est engagé directement dans l'étape suivante (328 mg).
RMN-1H (400 MHz, CDCI3): δ:. 6.3-6.8 (m, 1 H), 5.8-6.3 (m, 1 H), 4.3-4.4 (m, 1 H), 3.7-4.1 (m, 2H), 2.08 (s), 1.49 et 1.50 (d, 3H).
1.2. Préparation de MeBmt(O-Sar-Ser(OPO(OHW.-COOCH(CH3)OCOCH3)1 -CsA. (XVI)
1.2.1 Préparation de MeBmt(0-Sar-Ser-COOCH(CH3)OCOCH3)1-CsA (12)
(12)
170 mg (0.13 mmol) de (7) obtenu selon l'Exemple 1 sont dissous dans 3 ml de dichlorométhane sous argon. Sont ajoutés successivement sous argon, 92 μl (0.53 mmol, 4 eq) de DIEA, 51 mg (0.26 mmol, 2 eq) de HATU et 60 mg de (11 ) (0.26 mmol, 2 eq). Après 5 heures d'agitation à température ambiante, la réaction est complète. Le dichlorométhane est évaporé sous vide réduit et le résidu repris dans de l'acétate d'éthyle. La phase organique est extraite trois fois avec une solution d'acide citrique à 6%, une solution saturée de NaHC03 et une solution saturée en NaCl, séchée sur Na2SO4 anhydre, filtrée et le solvant est évaporé sous vide réduit. Le produit brut obtenu est chromatographié sur gel de silice pour donner une mousse blanche (143 mg). ESI-MS : m/z : 1513.32 [M+Na+], 1508.34 [M+H2O+H+], 1491.36 [M+H+], 746.36 [M+2H+].
1.2.2. Préparation de MeBmt(O-Sar-Ser(OPO(OAIl)2)-COOCH(CH3)OCOCH3)1- CsA (13)
(13)
130 mg (0.09 mmol, 1 eq) de (12) sont dissous dans 880 μl de CH2CI2 anhydre. Puis 20 mg (0.27 mmol, 3 eq) de 1H-tetrazole suivis de 52 μl (0.17 mmol, 2 eq) de (AIIO)2PN(iPr)2 sont additionnés. Après 4 h d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est refroidi à -60°C, 44 mg (0.17 mmol, 2 eq) d'acide m-chloroperbenzoïque sont ajoutés et l'agitation est poursuivie 30 min à -60°C, 15 min à 0°C et 45 min à température ambiante. A 0°C, 0.5 ml d'une solution à 10% de Na2S2Os sont ajoutés au milieu réactionnel, afin de détruire l'excès d'oxydant puis on extrait au dichlorométhane. La phase organique est lavée avec une solution à 10% de Na2S2θ5 puis le dichlorométhane est évaporé sous vide réduit. Le résidu est repris dans l'éther de méthyle et tertiobutyle et cette phase organique extraite avec une solution d'acide citrique à 6%, une solution saturée en NaCl, séchée sur Na2SO anhydre, filtrée et le solvant est évaporé sous vide réduit. Le produit brut obtenu est chromatographié sur gel de silice pour donner une mousse blanche (98 mg). ESI-MS : m/z : 1651.38 [M+H+], 826.35 [M+2H+].
1.2.3. Préparation de MeBmt(0-Sar-Ser(OPO(OH)2)-COOCH(CH3)OCOCH3)1 -CsA (XVI)
(XVI)
A une solution de 184 mg (0.58 mmol, 3 eq) de Bu N+-F'-H2O dans 2 ml de CH2CI2 sont ajoutés sous argon et à température ambiante 206 μl (1.55 mmol, 8 eq) de Me3SiN3 et 1.12 g (0.97 mmol, 5 eq) de (PPh3)4Pd°. Après agitation à température ambiante pendant dix minutes, 320 mg (0.19 mmol, 1 eq) de (13) sont ajoutés et le mélange réactionnel laissé agiter à température
ambiante pendant trente minutes. La réaction est alors complète. Le mélange réactionnel est hydrolyse par addition d'une solution d'acide citrique à 6% et le dichlorométhane est évaporé sous vide réduit. Le résidu est repris dans de l'acétate d'éthyle et la phase organique obtenue est extraite trois fois avec une solution d'acide citrique à 6% et une solution saturée en NaCl, séchée sur Na2S04 anhydre, filtrée et le solvant est évaporé sous vide réduit. Le produit brut obtenu est chromatographié sur cartouche Sep-Pack® puis sur HPLC préparative pour isoler le composé pur sous forme de lyophilisât (342 mg). ESI-MS : m/z : 1593.32 [M+Na+], 1571.81 [M+H+].
Exemple 3
Propriétés physico-chimiques des undéca-peptides cycliques de formules (XV) et (XVI)
1. Hvdrosolubilité des undéca-peptides cycliques de formules (XV) et (XVI)
Les solubilités dans l'eau ont été évaluées par un examen visuel à température ambiante du laboratoire par dissolution directe d'une quantité pesée du undéca-peptide cyclique dans des tampons phosphates 67 mM de type Sorensen. Les valeurs sont rassemblées dans le Tableau 1.
Tableau 1
A titre indicatif, la Cyclosporine A est décrite pour avoir une solubilité maximale dans l'eau de 33 μg/ml à une température de 20°C et à pH 7, ce qui correspond à une concentration maximale de 0,027 mM.
2. Stabilité chimique et enzvmatiαue des undéca-peptides cycliques de formules (XV) et (XVI)
Une première évaluation de la stabilité chimique au cours du temps du undéca-peptide cyclique de formule (XV) a été effectuée, d'une part dans une solution isotonique constituée de mannitol, d'autre part dans un tampon phosphate (PBS) à un pH de 7 et à des températures de 4, 20 et 37°C.
Les pourcentages de Cylosporine A détectée sont rassemblés dans le Tableau 2 suivant:
Tableau 2
Comme ont peut le constater, à la température de 4°C dans une solution de mannitol, le peptide cyclique s'avère être stable répondre pendant au moins 90 jours.
Une deuxième étude de stabilités, à la fois chimique et enzymatique, a été effectuée avec les deux undéca-peptides cycliques de formule (XV) et (XVI) mis en solution dans un tampon HEPES 50 mM de pH 7,4 à 37°C, en absence et en présence d'estérases. Durant l'incubation à 37°C, des aliquotes de 40 μl sont prélevés à des intervalles de temps appropriés et analysés par HPLC et ESI-MS.
En absence d'enzyme, une stabilité chimique supérieure à 3 jours est observée pour les deux undéca-peptides cycliques.
Les résultats obtenus lors de l'hydrolyse en présence d'estérases ont été rassemblés dans la Figure 1. La courbe de cinétique de conversion du undéca- peptide cyclique (XVI) est représentée par des losanges alors que la courbe de cinétique d'apparition de la Cyclosporine A est représentée par de carrés. Comme on peut le constater selon cette figure, en présence d'estérases, le
undéca-peptide cyclique (XVI) se dégrade rapidement pour libérer la Cyclosporine A. Une observation similaire a été faite pour le undéca-peptide cyclique (XV).
Les undéca-peptides cycliques (XV) et (XVI) ont été soumis à une incubation dans du sérum bovin à 37°C. Les temps de demi-vie de conversion des undéca-peptides cycliques en Cyclosporine A ont été évalués et sont respectivement de 3,66 et 3,50 heures.
Exemple 4
Application pour administration intra-veineuse sous forme de solution aqueuse Etude de pharmacocinéti ue des undéca-peptides cycliques de formules (XV) et (XVI)
Afin de mettre à disposition du clinicien un outil alternatif aux formulations galéniques de la Cyclosporine A couramment utilisé sous la forme de micro-émulsion dans de l'huile de ricin polyoxyéthylénée de stabilité délicate, peu facile à manipuler et induisant des effets délétères, des prodrogues de la présente invention, sous la forme de simples solutions aqueuses, ont été évaluées en vue d'une application intra-veineuse.
Ainsi, les deux undéca-peptides cycliques (XV) et (XVI), en solution dans du tampon phosphate, ont été administrés par voie intraveineuse chez le rat à raison d'une dose équivalente à 10 mg/kg de Cyclosporine A.
En référence, un échantillon d'une solution injectable de Cyclosporine, disponible dans le commerce sous la marque de commerce Sandimmun a été utilisé après dilution appropriée.
Des prélèvements de sang ont été effectués à intervalles réguliers puis soumis à analyse en vue d'effectuer un dosage de la Cyclosporine A.
Les taux sanguin de Cyclosporine A après administration i.v. de la Cyclosporine A ont été rassemblés sur la Figure 2a. Ceux obtenus après administration i.v. respectivement d'une solution aqueuse des deux prodrogues (XV) et (XVI) sont rassemblés respectivement sur les Figures 2b et 2c. Les résultats interprétés des courbes des Figures 2a, 2b et 2c ont été rassemblés dans le Tableau 3 suivant.
Tableau 3
Dans ce tableau, la signification des abréviations est la suivante:
- AUC: aire sous la courbe ("Area under the curve");
- CL: clairance ("Clearance");
- MRT: ("Mean résidence time");
- Vss: volume de distribution à l'état d'équilibre ("Volume of distribution at steady state");
- T1/2 1: temps de demi-vie initiale; et
- T1/2 2: temps de demi-vie terminale.
Comme on peut le constater de la Figure 2 et du Tableau 3, les paramètres pharmacocinétiques de l'expérience contrôle avec la Cyclosporine A sont comparables à ceux rapportés dans la littérature. L'aire sous la courbe de la Cyclosporine A générée lors du clivage du undéca-peptide cyclique (XV) est comparable à celle de la Cyclosporine A de l'expérience contrôle alors que celle de la Cyclosporine A générée lors du clivage du undéca-peptide cyclique (XVI) est réduite de 25% par rapport à celle de la Cyclosporine A de l'expérience contrôle.
Les deux undéca-peptides cycliques (XV) et (XVI) montre chacun un profil de libération sanguine de la Cyclosporine A similaire. Ces profils sont similaires à celui de la Cyclosporine A sous la forme galénique à base d'huile de ricin polyoxyéthylénée.
De ces résultats, il en résulte que les pro-drogues de la présente invention offre, pour un profil de libération de Cyclosporine A équivalent, les grands avantages suivants par rapport aux formulations galéniques existantes de Cyclosporine A:
- facilité de mise en œuvre par simple dissolution dans l'eau; et
- pas d'obligation d'utiliser des excipients s'avérant être toxiques; et
- pas d'obligation pour utiliser des matériaux particulier pour les manipuler.
Exemple 5
Application pour administration topique oculaire sous forme de solution aqueuse Etude de pharmacocinétique du undéca-peptide cyclique de formule (XV)
Afin de mettre à disposition du clinicien un outil permettant une administration topique oculaire de Cyclosporine A sans que des irritations ou des sensation désagréable soient ressenties ou que la vision ne se trouble, des pro-drogues de la présente invention, sous la forme de simples solutions aqueuses, ont été évaluées.
1. Préparation des solutions
Des solutions aqueuses isotoniques à 5% de mannitol et à pH 7,0 du undéca-peptide cyclique (XV) ont été préparées. La concentration en équivalent en Cyclosporine A est de 1 % (poids/volume). Les solutions ont été stérilisées par passage au travers de filtres de nitrocellulose à 0,22 μm. Une
formulation de référence de Cyclosporine A a été préparée sous la forme d'une solution à 1 % dans de l'huile d'olive.
2. Détermination de la tolérance du undéca-peptide cyclique de formule (XV)
La tolérance oculaire a été déterminée selon deux méthodes, à savoir selon le test modifié de Draize et par un ophtalmoscope à balayage laser confocal.
2.1. Test modifié de Draize (test de tolérance aiguë)
Cette évaluation a été opérée sur six lapins mâles albinos. Pour chaque animal, un oeil a reçu une instillation de 50 μl de la solution telle que décrite précédemment, l'autre oeil, non traité, jouant le rôle de contrôle.
L'évaluation clinique d'une éventuelle irritation a été effectuée visuellement par évaluation de l'écoulement oculaire, du chemosis conjonctival et de la rougeur conjonctivale selon la classification décrite dans le Tableau 4 suivant:
Tableau 4
L'éventuelle irritation a été observée, sur chaque animal, selon les règles précédentes, à intervalles déterminés s'échelonnant sur 48 heures après l'instillation et un indice d'irritation total (lirr) a été calculé en procédant à la somme totale des indices estimés. Les résultats obtenus sont rassemblés dans le Tableau 4 au point 2.3 ci-dessous.
2.2. Ophtalmoscopie à balayage laser confocal ("Confocal laser scanning opthalmoscope, CLSO") (test d'évaluation d'une toxicité sub-aiguë sur 4 jours d'administration)
Ce test a été effectué sur le même type d'animal que précédemment. 25 μl d'une solution telle que décrite précédemment ont été instillés sur la cornée de l'œil droit trois fois par jour pendant quatre jours puis une fois au quatrième jour juste avant l'observation. Après la dernière instillation, les lapins ont été mis sous sedation par administration de chlorhydrate de ketamine et de xylazine. Un total de 25 μl d'une solution de fluorescéine de sodium à 0,5% en poids/volume ont été instillés sur l'œil afin de permettre un marquage sélectif des surfaces éventuellement endommagées. L'œil a ensuite été rincé pendant une minute par une solution saline à 37°C.
Enfin, l'œil a été observé par un ophtalmoscope à balayage laser confocal selon la méthode décrite par Furrer et al., J. Ocular Pharmacol., 1997, 13, 559. L'ophtalmoscope a été couplé à un système de traitement d'image afin de pouvoir reconstituer une image en trois dimensions et permettre une évaluation des zones endommagées.
Le degré de tolérance est évalué en fonction du pourcentage de lésions de cornée et selon la règle suivante:
- de 0% à 25%: bonne tolérance; - de 25% à 40%: tolérance acceptable;
- de 40% à 60%: faible tolérance; et
- au dessus de 60%: tolérance inacceptable.
On note qu'il est généralement reconnu qu'un pourcentage de lésions inférieur ou égal à 5% correspond à un taux de mortalité cellulaire habituel chez un corps sain non soumis à un quelconque traitement.
Les résultats obtenus sont rassemblés dans le Tableau 5 au point 2.3. ci-dessous.
2.3. Résultats de la tolérance oculaire du undéca-peptide cyclique de formule (XV)
Tableau 5
Du Tableau 5, il apparaît qu'un indice d'irritation total de 1 ,8 a été obtenu au test de Draize pour le undéca-peptide cyclique de formule (XV) et que 7% de la cornée ont été lésées par administration de ce produit. Ces deux résultats démontrent une très bonne tolérance à ce undéca-peptide cyclique, cette tolérance étant nettement améliorée par rapport à celle obtenue lorsque la Cyclosporine A est administrée dans de l'huile d'olive.
Pour des raisons évidentes, l'amélioration subjective du confort de la vision par l'utilisation d'une solution aqueuse plutôt que huileuse n'a pas été évaluée sur l'animal.
3. Stabilité du undéca-peptide cyclique de formule (XV)
Des échantillons des solutions décrites précédemment ont été conservés respectivement à 4°C et 20°C. Des analyses par HPLC ont été effectuées régulièrement pendant 3 mois. Ces échantillons se sont avérés posséder une bonne stabilité dans de telles conditions.
4. Cinétique de conversion ex-vivo du undéca-peptide cyclique de formule (XV)
Ce test de cinétique de conversion a été effectué en incubant à 37°C 25 μl d'un échantillon de la solution décrite précédemment sous légère agitation avec 8 μl de larme fraîche de lapin. A intervalles de 1 , 2, 3 et 30 minutes, des prélèvements de 2 μl ont été effectués puis analysés par HPLC.
Les résultats obtenus ont montré que le undéca-peptide cyclique de formule (XV) joue son rôle de pro-drogue dès la première minute de contact avec la larme de lapin en libérant la Cyclosporine A. A 3 minutes, 3% de la prodrogue se trouvent convertis, puis 4,7% au bout de 30 minutes.
5. Cinétique de conversion in-vivo du undéca-peptide cyclique de formule (XV)
Ce test de cinétique de conversion in-vivo a été effectué en instillant un échantillon de 25 μl de la solution précédemment décrite dans l'œil droit de lapins mâles albinos (4 kg). Des échantillons de larmes ont été prélevés à intervalles de 1 , 2, 3, 4 et 20 minutes puis analysés par HPLC.
Les résultats obtenus ont été rassemblés sur la Figure 3. Comme on peut le constater, ce test vient confirmer les résultats déjà obtenus lors de l'expérience ex-vivo. Le undéca-peptide cyclique de formule (XV) (carrés) joue bien son rôle de pro-drogue dès la première minute de contact avec la larme de lapin en libérant la Cyclosporine A (ronds) et cette libération se poursuit au cours des 20 minutes qui suivent. A 1 minute, la concentration en Cyclosporine A dans la larme est de 0,025 mg/ml.
6. Conclusions
De ces résultats, il en résulte que les pro-drogues de la présente invention offre, pour une administration topique oculaire, les avantages suivants:
- facilité de préparation d'une formulation galenique telle qu'un collyre par simple dissolution dans une solution aqueuse sans nécessité d'avoir recours à des adjuvants huileux;
- bonne tolérance aiguë et très bonne tolérance sub-aiguë supérieures à celles obtenue avec une formulation galenique de cyclosporine sous forme huileuse;
- bonne stabilité; et
- temps de demi-vie approprié pour une application ophtalmique.
Claims
1. Pro-drogue constitué d'un undéca-peptide cyclique dont l'enchaînement peptidique comprend au moins un résidu d'acide aminé de formule générale (I) suivante:
(I) dans laquelle: - l'atome de carbone Ca constitue l'un des maillons du cycle undéca-peptidique;
- les substituants Y représentent chacun un atome d'hydrogène ou constituent ensemble une liaison;
- les substituants R1 et R3 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl-hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, et éventuellement substitués par au moins un des groupements choisis parmi -COOH, -CONHR8, -NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR8 2, -N+R8 3, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, -OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)2, et les différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 représentant indépendamment l'un de l'autre un groupe alkyle, linéaire ou ramifié, ayant de 1 à 6 atomes de carbone;
- les substituants R2 et R4 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe alkaryle, ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié; - les substituants R5 et R6 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un groupe aralkyle, un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié; et
- le substituant R7 représente un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl- hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié lesdits groupes étant éventuellement substitués par au moins un des groupements choisis parmi -COOH, -CONHR8, -NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR8 2, -N+R8 3, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, -OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)2, et les différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 ayant la définition précédente.
2. Pro-drogue selon la revendication 1 , caractérisée en ce que, dans formule générale (I) définissant ledit résidu d'acide aminé, au moins l'un des substituants R1 et R3 représente un groupe aralkyle, un groupe alkaryle, un groupe hétéroalkyle, un groupe hétérocyclique, un groupe alkyl-hétérocyclique, un groupe hétérocyclique-alkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, chacun desdits groupes étant substitué par au moins un des groupements choisis parmi -COOH, -CONHR8, -NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR8 2, -N+R8 3, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, -OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)2, et les différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 ayant la définition précédente.
3. Pro-drogue selon la revendication 2, caractérisée en ce que lesdits groupes aralkyle, alkaryle, hétéroalkyle, hétérocyclique, alkyl-hétérocyclique, hétérocyclique-alkyle ou alkyle sont substitués par au moins un des groupements choisis parmi -NR8 2, -N+R8 3, -OPO(OH)2 ou ses différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 ayant la définition précédente.
4. Pro-drogue selon la revendication 3, caractérisée en ce que au moins l'un desdits substituants R1 et R3 représentent un groupe alkyle linéaire ayant de 1 à 6 atomes de carbone substitués par au moins un des groupements choisis parmi -NR8 2, -N+R8 3, -OPO(OH)2 ou ses différentes formes salifiées de ces groupements, chacun des substituants R8 ayant la définition précédente.
5. Pro-drogue selon la revendication 1 , caractérisée en ce que, dans formule générale (I) définissant ledit résidu d'acide aminé, les substituants R5 et R6 ne peuvent représenter simultanément un atome d'hydrogène.
6. Pro-drogue selon la revendication 1 , caractérisée en ce que, dans formule générale (I) définissant ledit résidu d'acide aminé, au moins l'un desdits substituants R5 et R6 représente un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié, et le substituant R7 représente un groupe aralkyle ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié.
7. Pro-drogue selon la revendication 6, caractérisée en ce que lesdits substituants R5 et R6 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle.
8. Pro-drogue selon la revendication 1 , caractérisée en ce que ledit enchaînement peptidique comprend un seul résidu d'acide aminé de formule générale (I) formant un cycle undéca-peptidique avec une séquence linéaire de dix acides aminés de formule générale (II) suivante:
-T-U-V-W-MeLeu-Ala-X-MeLeu-Z-MeVal- (II)
dans laquelle:
- T est choisi parmi les acides aminés Ala, Abu, Nval, Val et Thr; - U est choisi parmi les acides aminés Sar, (D)MeSer, (D)MeAla et (D)MeSer(OCOR9), avec R9 représentant un atome d'hydrogène, un groupe alkaryle, ou un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire ou ramifié; - V représente un acide aminé de formule générale (N-R10)aa, aa étant choisi parmi les acides aminés Val, Leu, Ile, Thr, Phe, Tyr, Thr et R10 étant un groupe akyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone;
- W est choisi parmi les acides aminés Val, NVal et Leu; - X est choisi parmi les acides aminés (D)Ala, (D)Ser, (D)Hiv, (D)Val et (D)Thr; et
- Z est choisi parmi les acides aminés Leu et MeLeu.
9. Pro-drogue selon la revendication 8, caractérisée en ce que ladite séquence linéaire de dix acides aminés est choisie parmi les séquences suivantes de formules (III) à (XV):
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (III);
-Abu-(D)MeAla-EtVal-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (IV); -Thr-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (V);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (VI);
-NVal-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (VII);
-Val-(D)MeAla-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal- (VIII);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Val-MeLeu-Leu-MeVal- (IX); -Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Thr-MeLeu-Leu-MeVal- (X);
-Abu-(D)MeSer(OAc)-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-Leu-MeVal- (XI);
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ser-MeLeu-MeLeu-MeVa (XII);
-Thr-Sar-MeLeu-Leu-MeLeu-Ala-(D)Hiv-MeLeu-Leu-MeVal- (XIII); et -Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Val-MeLeu-Leu-MeVal- (XIV).
10. Pro-drogue selon l'une quelconque des revendications précédentes ayant respectivement les formules (XV) et (XVI) suivantes:
(XV); et
(XVI).
11. Utilisation d'une pro-drogue selon la revendication 1 en tant que médicament.
12. Utilisation d'une pro-drogue selon la revendication 1 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de pathologies des muqueuses.
13. Utilisation d'une pro-drogue selon la revendication 1 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement local de pathologies oculaires.
14. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que lesdites pathologies sont choisies parmi les kératoconjonctivites sèches, le syndrome de Sjôgren, les kératoconjonctivites allergiques, en particulier, celles résistantes aux corticosteroïdes, les conjonctivites muco-synéchiantes, les kératites stromales herpétiques, les kératites limbiques immunitaires, la kératite de Thygeson, les pathologies liées aux greffes de cornée, comme traitement adjuvant d'une chirurgie filtrante.
15. Utilisation d'une pro-drogue selon la revendication 1 pour la préparation d'un médicament destiné à permettre la prolongation de survie des allogreffes d'organes.
16. Utilisation selon la revendication 15, caractérisée en ce que lesdits organes portant une greffe sont choisis parmi le rein, le cœur, le foie, le pancréas, le poumon, l'intestin grêle, la moelle osseuse.
17. Utilisation d'une pro-drogue selon la revendication 1 pour la préparation d'un médicament destiné à inhiber la réplication du virus de l'immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1 ).
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH7202001 | 2001-04-20 | ||
| CH72001 | 2001-04-20 | ||
| PCT/CH2002/000222 WO2002085928A2 (fr) | 2001-04-20 | 2002-04-22 | Cyclosporine modifiee utilisable en tant que pro-drogue et son utilisation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EP1379547A2 true EP1379547A2 (fr) | 2004-01-14 |
| EP1379547B1 EP1379547B1 (fr) | 2005-12-21 |
Family
ID=4531478
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EP02713992A Expired - Lifetime EP1379547B1 (fr) | 2001-04-20 | 2002-04-22 | Cyclosporine modifiee utilisable en tant que pro-drogue et son utilisation |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6995139B2 (fr) |
| EP (1) | EP1379547B1 (fr) |
| JP (1) | JP4588979B2 (fr) |
| KR (1) | KR100932859B1 (fr) |
| CN (1) | CN1507451A (fr) |
| AT (1) | ATE313557T1 (fr) |
| AU (1) | AU2002245996B8 (fr) |
| BR (1) | BR0208923A (fr) |
| CA (1) | CA2444278C (fr) |
| DE (1) | DE60208180T2 (fr) |
| ES (1) | ES2256450T3 (fr) |
| IL (1) | IL158385A0 (fr) |
| MX (1) | MXPA03009586A (fr) |
| RU (1) | RU2290196C2 (fr) |
| UA (1) | UA75136C2 (fr) |
| WO (1) | WO2002085928A2 (fr) |
| ZA (1) | ZA200307794B (fr) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8048917B2 (en) | 2005-04-06 | 2011-11-01 | Xenoport, Inc. | Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof |
| US7186855B2 (en) | 2001-06-11 | 2007-03-06 | Xenoport, Inc. | Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof |
| US7354574B2 (en) * | 2002-11-07 | 2008-04-08 | Advanced Ocular Systems Limited | Treatment of ocular disease |
| US7083803B2 (en) | 2003-09-19 | 2006-08-01 | Advanced Ocular Systems Limited | Ocular solutions |
| US7087237B2 (en) | 2003-09-19 | 2006-08-08 | Advanced Ocular Systems Limited | Ocular solutions |
| CA2571710A1 (fr) | 2004-06-24 | 2006-11-02 | Nicholas Valiante | Immuno-potentialisateurs a petites molecules et analyses visant a detecter leur presence |
| EP1904056B1 (fr) | 2005-07-18 | 2009-04-29 | Minu, L.L.C. | Utilisation d'un macrolide pour restaurer la sensation cornéenne |
| US7696165B2 (en) | 2006-03-28 | 2010-04-13 | Albany Molecular Research, Inc. | Use of cyclosporin alkyne analogues for preventing or treating viral-induced disorders |
| US7696166B2 (en) | 2006-03-28 | 2010-04-13 | Albany Molecular Research, Inc. | Use of cyclosporin alkyne/alkene analogues for preventing or treating viral-induced disorders |
| US7531572B2 (en) | 2006-07-28 | 2009-05-12 | Xenoport, Inc. | Acyloxyalkyl carbamate prodrugs of α-amino acids, methods of synthesis and use |
| US8394763B2 (en) | 2007-09-26 | 2013-03-12 | Oregon Health & Science University | Cyclic undecapeptides and derivatives as multiple sclerosis therapies |
| WO2009098533A1 (fr) * | 2008-02-08 | 2009-08-13 | Debiopharm Sa | Cyclosporine non immunosuppressive pour le traitement de la dystrophie musculaire |
| GB0912584D0 (en) * | 2009-07-20 | 2009-08-26 | Ucl Business Plc | Cyclosporin conjugates |
| RU2630690C9 (ru) | 2010-12-15 | 2017-12-28 | КонтраВир Фармасьютикалз, Инк. | МОЛЕКУЛЫ АНАЛОГОВ ЦИКЛОСПОРИНА, МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ПО 1 и 3 АМИНОКИСЛОТЕ |
| AR090964A1 (es) * | 2012-05-09 | 2014-12-17 | Novartis Ag | Proceso para la elaboracion de undecapeptidos ciclicos |
| CN113388002A (zh) * | 2021-06-10 | 2021-09-14 | 梯尔希（南京）药物研发有限公司 | 一种环孢菌素相关化合物的制备方法 |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4396542A (en) * | 1980-02-14 | 1983-08-02 | Sandoz Ltd. | Method for the total synthesis of cyclosporins, novel cyclosporins and novel intermediates and methods for their production |
| ATE43335T1 (de) * | 1980-02-14 | 1989-06-15 | Sandoz Ag | Peptide die einen (1s,2r,3r)- oder (1r,2s,3s)-1nitrilo-1-carbonyl-3-methyl-2-oxyheptan oder hept-5-en-rest enthalten brauchbar in totaler synsthese von cyclosporinen, und verfahren zu ihrer herstellung. |
| US5169773A (en) * | 1984-10-04 | 1992-12-08 | Sandoz Ltd. | Monoclonal antibodies to cyclosporins |
| ATE43499T1 (de) * | 1984-10-10 | 1989-06-15 | Ile De France | Synergistische empfaengnisverhuetende mischung. |
| US4764503A (en) * | 1986-11-19 | 1988-08-16 | Sandoz Ltd. | Novel cyclosporins |
| DK0484281T4 (da) * | 1990-11-02 | 2001-02-05 | Novartis Ag | Cyclosporiner |
| US6187547B1 (en) * | 1993-09-08 | 2001-02-13 | Novartis Ag | Assay kit |
| GB9624038D0 (en) * | 1996-11-19 | 1997-01-08 | Sandoz Ltd | Organic compounds |
| US6017879A (en) * | 1998-04-03 | 2000-01-25 | B.M.R.A. Corporation B.V. | Template associated NPY Y2-receptor agonists |
| DE69928938T2 (de) | 1998-07-01 | 2006-08-17 | Debiopharm S.A. | Neues cyclosporin mit verbesserter wirkung |
| US6204257B1 (en) * | 1998-08-07 | 2001-03-20 | Universtiy Of Kansas | Water soluble prodrugs of hindered alcohols |
| DE60028936T2 (de) * | 1999-02-05 | 2007-01-11 | Debiopharm S.A. | Cyclosporin-derivate und verfahren zu deren herstellung |
| US6765019B1 (en) * | 1999-05-06 | 2004-07-20 | University Of Kentucky Research Foundation | Permeable, water soluble, non-irritating prodrugs of chemotherapeutic agents with oxaalkanoic acids |
| WO2001005819A1 (fr) * | 1999-07-15 | 2001-01-25 | Kuhnil Pharm. Co., Ltd. | Nouveaux composes conjugues a base de cyclosporine hydrosoluble |
| MXPA02001857A (es) * | 1999-08-24 | 2003-07-14 | Cellgate Inc | Composiciones y metodos para incrementar la entrega de drogas a traves y dentro de tejidos epiteliales. |
-
2002
- 2002-04-22 CA CA2444278A patent/CA2444278C/fr not_active Expired - Fee Related
- 2002-04-22 UA UA20031110436A patent/UA75136C2/uk unknown
- 2002-04-22 JP JP2002583454A patent/JP4588979B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-04-22 MX MXPA03009586A patent/MXPA03009586A/es active IP Right Grant
- 2002-04-22 ES ES02713992T patent/ES2256450T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-22 AT AT02713992T patent/ATE313557T1/de not_active IP Right Cessation
- 2002-04-22 WO PCT/CH2002/000222 patent/WO2002085928A2/fr active IP Right Grant
- 2002-04-22 BR BR0208923-8A patent/BR0208923A/pt active Search and Examination
- 2002-04-22 EP EP02713992A patent/EP1379547B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-22 CN CNA028094050A patent/CN1507451A/zh active Pending
- 2002-04-22 AU AU2002245996A patent/AU2002245996B8/en not_active Ceased
- 2002-04-22 RU RU2003133742/15A patent/RU2290196C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-04-22 IL IL15838502A patent/IL158385A0/xx not_active IP Right Cessation
- 2002-04-22 US US10/474,396 patent/US6995139B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-04-22 DE DE60208180T patent/DE60208180T2/de not_active Expired - Lifetime
-
2003
- 2003-10-06 ZA ZA200307794A patent/ZA200307794B/en unknown
- 2003-10-17 KR KR1020037013666A patent/KR100932859B1/ko not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| See references of WO02085928A2 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE60208180T2 (de) | 2006-08-17 |
| CA2444278C (fr) | 2011-11-22 |
| KR100932859B1 (ko) | 2009-12-23 |
| ZA200307794B (en) | 2004-07-19 |
| UA75136C2 (en) | 2006-03-15 |
| AU2002245996B2 (en) | 2005-06-30 |
| JP4588979B2 (ja) | 2010-12-01 |
| IL158385A0 (en) | 2004-05-12 |
| KR20030094357A (ko) | 2003-12-11 |
| RU2003133742A (ru) | 2005-03-20 |
| CA2444278A1 (fr) | 2002-10-31 |
| AU2002245996B8 (en) | 2005-07-14 |
| US20040138108A1 (en) | 2004-07-15 |
| US6995139B2 (en) | 2006-02-07 |
| CN1507451A (zh) | 2004-06-23 |
| ES2256450T3 (es) | 2006-07-16 |
| ATE313557T1 (de) | 2006-01-15 |
| MXPA03009586A (es) | 2004-05-24 |
| EP1379547B1 (fr) | 2005-12-21 |
| JP2004536051A (ja) | 2004-12-02 |
| RU2290196C2 (ru) | 2006-12-27 |
| DE60208180D1 (de) | 2006-01-26 |
| WO2002085928A2 (fr) | 2002-10-31 |
| BR0208923A (pt) | 2004-04-27 |
| WO2002085928A3 (fr) | 2003-04-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1091975B1 (fr) | Nouvelle cyclosporine ayant un profil d'activite ameliore | |
| EP1379547B1 (fr) | Cyclosporine modifiee utilisable en tant que pro-drogue et son utilisation | |
| CA2627211C (fr) | Derives d'amino-acides contenant un groupement disulfanyle comme inhibiteurs mixtes de la neprilysine et de l'aminopeptidase n | |
| EP0274453A2 (fr) | Nouveaux composés à activité d'inhibiteurs de collagénase, procédé pour les préparer et compositions pharmaceutiques contenant ces composés | |
| US20100009953A1 (en) | Cyclosporin derivatives for treating ocular and dermal diseases and conditions | |
| EP1991235B1 (fr) | Utilisation de dérivés du 3,5-séco-4-nor-cholestane pour l'obtention d'un médicament cytoprotecteur | |
| JP2015155426A (ja) | 非免疫抑制性シクロスポリン類似体分子 | |
| EP0037388A2 (fr) | Formes pharmaceutiques, leur préparation et les compositions qui les contiennent | |
| CH634041A5 (fr) | Derives de la pepstatine, leur preparation et composition les contenant. | |
| EP1940818B1 (fr) | Derives d'amino-acides contenant un groupement disulfanyle comme inhibiteurs mixtes de la neprilysine et de l 'aminopeptidase n | |
| EP0005658A1 (fr) | Nouveaux dérivés de peptides analogues des enképhalines, leur procédé de préparation et leur application thérapeutique | |
| EP0639586B1 (fr) | Dérivés d'acide phosphonique, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
| WO2004043993A2 (fr) | Nouveaux vecteurs moleculaires amphiphiles fluorocarbones a usage biomedical et medical | |
| EP0723974B1 (fr) | Dérivés de mercaptoalcanoyldipeptides, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
| WO2003026701A1 (fr) | Vectorisation de derives taxoides a travers la barriere hematoencephalique | |
| FR2529461A1 (fr) | Tripeptide provenant d'un fragment d'immunoglobuline, son procede de preparation et ses applications | |
| EP0165151A1 (fr) | Dérivés peptidiques inhibiteurs de la rénine, leur procédé de préparation et leur application en thérapeutique | |
| JPH07278187A (ja) | シクロスポリン類のリン酸エステル誘導体及び医薬組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUAI | Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase |
Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012 |
|
| 17P | Request for examination filed |
Effective date: 20031022 |
|
| AK | Designated contracting states |
Kind code of ref document: A2 Designated state(s): AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LI LU MC NL PT SE TR |
|
| AX | Request for extension of the european patent |
Extension state: AL LT LV MK RO SI |
|
| RAP1 | Party data changed (applicant data changed or rights of an application transferred) |
Owner name: DEBIOPHARM S.A. |
|
| GRAP | Despatch of communication of intention to grant a patent |
Free format text: ORIGINAL CODE: EPIDOSNIGR1 |
|
| RTI1 | Title (correction) |
Free format text: MODIFIED CYCLOSPORIN AS A PRO-DRUG AND USE THEREOF AS A MEDICAMENT |
|
| GRAS | Grant fee paid |
Free format text: ORIGINAL CODE: EPIDOSNIGR3 |
|
| 18W | Application withdrawn |
Effective date: 20050829 |
|
| GRAA | (expected) grant |
Free format text: ORIGINAL CODE: 0009210 |
|
| D18W | Application withdrawn (deleted) | ||
| AK | Designated contracting states |
Kind code of ref document: B1 Designated state(s): AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LI LU MC NL PT SE TR |
|
| AX | Request for extension of the european patent |
Extension state: AL LT LV MK RO SI |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: IE Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20051221 Ref country code: AT Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20051221 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: CH Ref legal event code: EP |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: IE Ref legal event code: FG4D Free format text: LANGUAGE OF EP DOCUMENT: FRENCH |
|
| REF | Corresponds to: |
Ref document number: 60208180 Country of ref document: DE Date of ref document: 20060126 Kind code of ref document: P |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: CH Ref legal event code: NV Representative=s name: ANDRE ROLAND S.A. |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: SE Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20060321 Ref country code: GR Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20060321 Ref country code: DK Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20060321 |
|
| GBT | Gb: translation of ep patent filed (gb section 77(6)(a)/1977) |
Effective date: 20060309 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: MC Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20060430 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: PT Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20060522 |
|
| LTIE | Lt: invalidation of european patent or patent extension |
Effective date: 20051221 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: ES Ref legal event code: FG2A Ref document number: 2256450 Country of ref document: ES Kind code of ref document: T3 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: IE Ref legal event code: FD4D |
|
| PLBE | No opposition filed within time limit |
Free format text: ORIGINAL CODE: 0009261 |
|
| STAA | Information on the status of an ep patent application or granted ep patent |
Free format text: STATUS: NO OPPOSITION FILED WITHIN TIME LIMIT |
|
| 26N | No opposition filed |
Effective date: 20060922 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: FI Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20051221 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: TR Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20051221 Ref country code: LU Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20060422 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: CH Ref legal event code: PUE Owner name: OPHTHALMOPHARMA AG Free format text: DEBIOPHARM S.A.#FORUM "APRES-DEMAIN" CP 5911 CHEMIN DE MESSIDOR 5-7#1002 LAUSANNE (CH) -TRANSFER TO- OPHTHALMOPHARMA AG#BAHNHOFPLATZ 5#6060 SARNEN (CH) |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: GB Ref legal event code: 732E |
|
| NLS | Nl: assignments of ep-patents |
Owner name: OPHTHALMOPHARMA AG Effective date: 20080708 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: ES Ref legal event code: PC2A |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: CY Free format text: LAPSE BECAUSE OF FAILURE TO SUBMIT A TRANSLATION OF THE DESCRIPTION OR TO PAY THE FEE WITHIN THE PRESCRIBED TIME-LIMIT Effective date: 20051221 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: FR Ref legal event code: TP |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: CH Ref legal event code: PCAR Free format text: ANDRE ROLAND S.A.;CASE POSTALE 5107;1002 LAUSANNE (CH) |
|
| PGFP | Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: ES Payment date: 20120419 Year of fee payment: 11 |
|
| PGFP | Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: BE Payment date: 20130418 Year of fee payment: 12 Ref country code: DE Payment date: 20130419 Year of fee payment: 12 Ref country code: GB Payment date: 20130418 Year of fee payment: 12 Ref country code: CH Payment date: 20130422 Year of fee payment: 12 |
|
| PGFP | Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: IT Payment date: 20130429 Year of fee payment: 12 Ref country code: FR Payment date: 20130515 Year of fee payment: 12 Ref country code: NL Payment date: 20130418 Year of fee payment: 12 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: DE Ref legal event code: R119 Ref document number: 60208180 Country of ref document: DE |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: NL Ref legal event code: V1 Effective date: 20141101 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: CH Ref legal event code: PL |
|
| GBPC | Gb: european patent ceased through non-payment of renewal fee |
Effective date: 20140422 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: DE Ref legal event code: R119 Ref document number: 60208180 Country of ref document: DE Effective date: 20141101 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: FR Ref legal event code: ST Effective date: 20141231 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: LI Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20140430 Ref country code: DE Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20141101 Ref country code: GB Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20140422 Ref country code: CH Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20140430 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: FR Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20140430 Ref country code: NL Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20141101 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: IT Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20140422 |
|
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: ES Ref legal event code: FD2A Effective date: 20150526 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: ES Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20140423 |
|
| PG25 | Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo] |
Ref country code: BE Free format text: LAPSE BECAUSE OF NON-PAYMENT OF DUE FEES Effective date: 20140430 |