CN1286822C - 嘧啶酮化合物 - Google Patents

Abstract

式(I)的嘧啶酮化合物是酶Lp-PLA₂抑制剂并且能用于治疗，特别是治疗动脉粥样硬化。

Description

嘧啶酮化合物

本发明涉及一些新的嘧啶酮化合物、这些化合物的制备方法、在这些化合物的制备中的一些有用的中间体、含有这些化合物的药物组合物和其在治疗，尤其是在动脉粥样硬化治疗中的用途。

WO 95/00649(SmithKline Beecham plc)描述了与磷脂酶A2酶脂蛋白相关的磷脂酶A₂(Lp-PLA₂)、其序列、分离和纯化、分离的编码这种酶的核酸和用编码这种酶的DNA转化的重组宿主细胞。建议该酶抑制剂的治疗应用包括动脉粥样硬化、糖尿病、类风湿关节炎、中风、心肌梗塞形成、再灌注损伤和急性及慢性炎症。同一研究小组的此后的出版物进一步描述了这种被称为LDL-PLA₂的酶(Tew D等，Arterioscler Thromb Vas Biol 1996：16；591-9)。后来的专利申请(WO 95/09921，Icos Corp or ation)和在Nature上有关的出版物(Tjoelker等，第374卷，6 April 1995，549)描述了基本上与Lp-PLA₂有相同序列的酶PAF-AH并指出该酶可能有作为调节生理炎症事件的治疗蛋白的潜在作用。

业已表明，在低密度脂蛋白(LDL)转化为其氧化型期间，Lp-PLA₂起着将磷脂酰胆碱转化为溶血磷脂酰胆碱的作用。已知该酶将氧化的磷脂酰胆碱的sn-2酯水解得到溶血磷脂酰胆碱及氧化修饰的脂肪酸。Lp-PLA₂作用的两种产物对溶血磷脂酰胆碱是生物活性的，溶血磷脂酰胆碱是氧化的LDL的成分，被认为是用于循环单细胞的潜在的趋化因子。照此，溶血磷脂酰胆碱被认为在动脉粥样硬化中起重要作用，该作用是积累动脉中负载胆固醇酯的细胞。因此希望抑制Lp-PLA₂酶来阻止这些富集巨噬细胞的损伤的形成(通过抑制溶血磷脂酰胆碱和氧化的游离脂肪酸的形成)并有益于治疗动脉粥样硬化。

氧化修饰的LDL的溶血磷脂酰胆碱的量的增加也被认为是在患有动脉粥样硬化的病人中观察到的内皮的机能障碍的原因。因此，Lp-PLA₂抑制剂可提供对这种现象的有益治疗。Lp-PLA₂抑制剂也可用于具有内皮机能障碍的其它疾病，包括糖尿病、高血压，心绞痛和局部缺血及再灌注后。

此外，Lp-PLA₂抑制剂也可普遍应用于涉及活化的单核细胞、巨噬细胞或淋巴细胞的任何疾病，由于所有这些细胞都表达Lp-PLA₂。这些疾病的实例包括牛皮癣。

此外，Lp-PLA₂抑制剂也可普遍应用于涉及与Lp-PLA₂活性有关的脂质氧化产生两种有害产物-溶血磷脂酰胆碱和氧化性修饰的脂肪酸的任何疾病。这些疾病包括前述疾病动脉粥样硬化、糖尿病、类风湿关节炎、中风、心肌梗塞形成、再灌注损伤和急性及慢性炎症。此外，这些疾病包括各种神经精神病学的疾病，如精神分裂症(参见Psychopharmacology Bulletin，31，159-165，1995)。

除此之外，专利申请WO 96/12963、WO 96/13484、WO 96/19451、WO 97/02242、WO 97/217675、WO 97/217676、WO 96/41098和WO97/41099(SmithKline Beecham plc)公开了各种系列的4-亚硫酰/亚磺酰/磺酰氮杂环丁酮化合物，这些化合物是酶Lp-PLA₂的抑制剂。它们是不可逆的酰化抑制剂(Tew等，Biochemistry，37，10087，1998)。

专利申请WO 99/24420和WO 00/10980(SmithKline Beechamplc，在本申请的优先权日后发表)描述了一类新的、可逆的非酰化的酶Lp-PLA₂抑制剂，特别是一类嘧啶酮化合物。早期的2-(烷基硫基)嘧啶-4-酮化学先导物描述于Bioorganic and Medicinal ChemistryLetters，2000，10，395-8中。

另一类为酶Lp-PLA₂抑制剂的嘧啶酮化合物现已被证明。

因此，本发明提供式(I)化合物：

其中：

R¹为任选被1、2、3或4个取代基取代的芳基或杂芳基，取代基可以是相同的或不同的并选自C_(1-18)烷基、C_(1-18)烷氧基、C_(1-18)烷基硫基、芳基C_(1-18)烷氧基、羟基、卤素、CN、COR⁶、羧基、COOR⁶、CONR⁹R¹⁰、NR⁶COR⁷、SO₂NR⁹R¹⁰、NR⁶SO₂R⁷、NR⁹R¹⁰、单-到全氟-C_(1-4)烷基和单-到全氟-C_(1-4)烷氧基，或者，作为一个单取代基，任选与另一个前述定义的取代基联合，CH₂COOH或其盐、CH₂COOR⁸、CH₂CONR⁹R¹⁰、CH₂CN、(CH₂)_mNR⁹R¹⁰、(CH₂)_mOH或(CH₂)_mOR⁶，其中m为1-3的整数；

R²为任选被1、2、3或4个取代基取代的芳基或杂芳基，取代基可以是相同的或不同的并选自C_(1-18)烷基、C_(1-18)烷氧基、C_(1-18)烷基硫基、芳基C_(1-18)烷氧基、羟基、卤素、CN、COR⁶、羧基、COOR⁶、CONR⁹R¹⁰、NR⁶COR⁷、SO₂NR⁹R¹⁰、NR⁶SO₂R⁷、NR⁹R¹⁰、单-到全氟-C_(1-4)烷基、单-到全氟-C_(1-4)烷氧基和芳基C_(1-4)烷基；

R³为氢或C_(1-4)烷基，其可是未取代的或被羟基、OR⁶、COR⁶、羧基、COOR⁶、CONR⁹R¹⁰、NR⁹R¹⁰、单-或二-(羟基C_(1-6)烷基)氨基或N-羟基C_(1-6)烷基-N-C_(1-6)烷基氨基取代的；

R⁴为芳基或杂芳基环，其任选被1、2、3或4个取代基取代，这些取代基可以相同或不同并选自C_(1-18)烷基、C_(1-18)烷氧基、C_(1-18)烷基硫基、芳基C_(1-18)烷氧基、羟基、卤素、CN、COR⁶、羧基、COOR⁶、CONR⁹R¹⁰、NR⁶COR⁷、SO₂NR⁹R¹⁰、NR⁶SO₂R⁷、NR⁹R¹⁰、单-到全氟-C_(1-4)烷基和和单-到全氟-C_(1-4)烷氧基；

R⁵为芳环，其又任选被1、2、3或4个取代基取代，这些取代基可以相同或不同并选自C_(1-18)烷基、C_(1-18)烷氧基、C_(1-18)烷基硫基、芳基C_(1-18)烷氧基、羟基、卤素、CN、COR⁶、羧基、COOR⁶、CONR⁹R¹⁰、NR⁶COR⁷、SO₂NR⁹R¹⁰、NR⁶SO₂R⁷、NR⁹R¹⁰、单-到全氟-C_(1-4)烷基和单-到全氟-C_(1-4)烷氧基；

R⁶和R⁷独立为氢或C_(1-20)烷基，例如C_(1-4)烷基(例如甲基或乙基)；

R⁸为C_(1-4)烷基或可药用的体内可水解的酯基；

R⁹和R¹⁰可相同或不同，各自选自氢、C_(1-12)烷基、CH₂R¹¹、CHR¹²CO₂H或其盐，或者R⁹和R¹⁰和与之相连的氮形成4-到7-元环，优选5-到7-元环，其任选还含有一个或多个选自氧、氮和硫的杂原子，并任选被一或两个选自羟基、氧代、C_(1-4)烷基、C_(1-4)烷基CO、芳基，例如，苯基，或芳烷基，例如苄基的取代基取代，例如吗啉或哌嗪；

R¹¹为COOH或其盐、COOR⁸、CONR⁶R⁷、CN、CH₂OH或CH₂OR⁶；

R¹²为氨基酸侧链，例如丝氨酸的CH₂OH；

n为1到4的整数，优选1或3；

X为O或S；及

Z为CR¹³R¹⁴，其中R¹³和R¹⁴各自为氢或C_(1-4)烷基，或R¹³和R¹⁴与插入的碳原子一起形成C_(3-6)的环烷基环。

优选的，Z为CH₂。

当R¹是芳基时，其代表性实例包括苯基和萘基。

当R¹是杂芳基时，其代表性实例包括5-或6-元、包含1或2个氮杂原子的单环杂芳基。

优选地是，R¹为嘧啶基，其任选被1或2个取代基取代，取代基优选选自氧代、芳基C_(1-4)烷基(例如苄基)、C_(1-6)烷基(例如甲基或乙基)、C_(3-6)环烷基、羟基、C_(1-4)烷氧基(例如甲氧基)、羧基C_(1-6)烷基、C_(1-6)烷基羧基C_(1-6)烷基、二-C_(1-6)烷基氨基，和吗啉基；或任选被C_(1-6)烷基(例如甲基或乙基)取代的吡唑基。

优选地，ZR¹为嘧啶-5-基甲基，其任选被2-甲氧基、2-三氟甲基、2-(4-吗啉基)或2-二甲基氨基；2-氧代-嘧啶-5-基甲基或1-甲基-4-吡唑基甲基取代。

优选地，X为S。

当R²为芳基时，其代表性实例包括苯基和萘基。当R²为杂芳基时，其代表性实例包括吡啶基、嘧啶基、吡唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、喹啉基、苯并噻唑基、哒嗪基和吡嗪基。优选地，R²为任选被卤素取代的苯基。

R²CH₂X的代表性实例包括4-氟苄基硫基。

R³的代表性实例包括氢；和任选被下列基团取代的甲基、乙基和丙基：氨基、C_(1-3)烷基氨基、二C_(1-3)烷基氨基、羟基C_(1-3)烷基氨基、羟基、C_(1-3)烷氧基、羧基、C_(1-3)烷基羧基，和杂环基，如哌啶基、哌嗪基、吡咯烷酮基和吗啉基，其中的烷基部分，如果存在，优选为甲基或乙基。

R⁴的代表性实例包括任选被卤素取代的苯基；噻吩；吡啶；和嘧啶。

R⁵的代表性实例包括任选被卤素、三氟甲基或三氟甲氧基取代的苯基，优选在4-位取代。

优选地，R⁴和R⁵共同形成4-(苯基)苯基取代基，其中远处的苯环可任选被卤素或三氟甲基取代，优选在4-位取代。

R⁸可药用、可体内水解的酯基包括那些易于在人体内分解而离去母体酸或其盐的那些酯基。

R⁸可药用、可体内水解的酯基有价值的代表性实例包括：

-CH(R^a)O.CO.R^b；

-CH(R^a)O.CO.OR^c；

-CH(R^a)CO.NR^eR^f

-R^dNR^eR^f；

-CH₂OR^g；

CH(R^a)O.CO.C₆H₄Y¹COCH(Rⁱ)NH₂；和

其中：

R^a为氢、(C_1-6)烷基，特别是甲基、(C_3-7)环烷基或苯基，每一个基团可被任选取代；

R^b为(C_1-6)烷基、(C_1-6)烷氧基(C_1-6)烷基、苯基、苄基、(C_3-7)环烷基、(C_1-6)烷基(C_3-7)环烷基、1-氨基(C_1-6)烷基、或1-(C_1-6烷基)氨基(C_1-6)烷基，每一个基团可被任选取代；或

R^a和R^b共同形成任选被一个或两个甲氧基取代的1，2-亚苯基；

R^c为(C_1-6)烷基、(C_3-7)环烷基、(C_1-6)烷基(C_3-7)环烷基；

R^d为任选被甲基或乙基取代的(C_1-6)亚烷基；

R^e和R^f可相同或不同，各自为(C_1-6)烷基；或芳基(C_1-4)烷基，其任选被例如羟基取代；

R^g为(C_1-6)烷基；

R^h为氢、(C_1-6)烷基或苯基；

R¹为氢或任选被最多三个选自卤素、(C_1-6)-烷基或(C_1-6)烷氧基的基团取代的苯基；

和

Y¹是氧或NH；

例如：

(a)酰基氧基烷基如乙酰氧基甲基、异丁酰基氧基甲基、新戊酰基氧基甲基、苯甲酰基氧基甲基、α-乙酰氧基乙基、α-新戊酰基氧基乙基、1-(环己基羰基氧基)乙基、(1-氨基乙基)羰基氧基甲基、2-甲氧基丙-2-基羰基氧基甲基、苯基羰基氧基甲基和4-甲氧基苯基羰基氧基甲基；

(b)烷氧基/环烷氧基羰基氧基烷基，如乙氧基羰基氧基甲基，叔丁氧基羰基氧基甲基、环己基氧基羰基氧基甲基、1-甲基环己基氧基羰基氧基甲基和α-乙氧基羰基氧基乙基；

(c)二烷基氨基烷基，尤其是二-低级烷基氨基烷基，如二甲基氨基甲基、二甲基氨基乙基、二乙基氨基甲基或二乙基氨基乙基；

(d)乙酰氨基，如N，N-二甲基氨基羰基甲基、N，N-(2-羟基乙基)氨基羰基甲基；

(e)内酯基，如2-苯并[c]呋喃酮基和二甲氧基-2-苯并[c]呋喃酮基；

(f)(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯(dioxolen)-4-基)甲基；和

(g)(2-甲氧基羰基-E-丁-2-烯基)甲基。

R⁸的可药用的体内可水解的酯基代表性实例包括：(2-甲氧基羰基-E-丁-2-烯基)甲基、异丁酰基氧基甲基、2-甲氧基丙-2-基羰基氧基甲基、苯基羰基氧基甲基、4-甲氧基苯基羰基氧基甲基、叔丁氧基羰基氧基甲基、环己基氧基-羰基氧基甲基、1-甲基环己基氧基羰基氧基甲基、N，N-二甲基氨基羰基甲基和(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基)甲基。

应理解为在一些举例中，本发明化合物可包括碱性官能团，如氨基作为取代基。这些碱性官能团可用于形成酸加成盐，特别是可药用盐。可药用盐包括Berge，Bighley，和Monkhouse，J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19中描述的那些。这些盐可由无机和有机酸形成。其代表性实例包括马来酸、富马酸、苯甲酸、抗坏血酸、双羟萘酸、琥珀酸、双亚甲基水杨酸、甲烷磺酸、对甲苯磺酸、乙烷二磺酸、乙酸、丙酸、酒石酸、水杨酸、柠檬酸、葡糖酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、衣康酸、乙醇酸(glycolic)、对氨基苯甲酸、谷氨酸、牛磺胆酸、苯磺酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、环己基氨基磺酸、磷酸和硝酸。

应理解为在一些举例中，本发明化合物可包括羧基作为取代基。这些羧基可用于形成盐，特别是可药用盐。可药用盐包括Berge，Bighley，和Monkhouse，J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19中描述的那些。优选的盐包括碱金属盐，如钠盐和钾盐。

本文中所用的术语“烷基”和类似术语如“烷氧基”包括所有支链和直链的异构体。其代表性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基和正己基。

除非另外定义，本文中所用的术语“芳基”是指环上含有最多10个碳原子的单-或双环芳香环，例如苯基或萘基。

本文中所用的术语“杂芳基”是指环上含有最多4个，优选1或2个各选自氧、氮和硫的杂原子的单-或双环杂芳香环，每个环可具有4-7个，优选5或6个环原子。双环杂芳香环可包括一个碳环。

本文中所用的术语“卤素”和“卤代”分别包括氟、氯、溴和碘及氟代、氯代、溴代和碘代。

特别优选的式(I)化合物是：

1-(N-甲基-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基吡唑-4-基甲基)嘧啶-4-酮；

1-(N-甲基-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基吡唑-4-基甲基)嘧啶-4-酮；

1-(N-(2-二甲基氨基乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟-苄基)硫基-5-(1-甲基吡唑-4-基甲基)嘧啶-4-酮；

1-(N-甲基-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(2-(4-吗啉基)嘧啶-5-基甲基)嘧啶-4-酮；

1-(N-(2-(二甲基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮；

1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮；

1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(2-(4-三氟甲基苯基)吡啶-5-基甲基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮；

1-(N-(2-(1-哌啶基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮酒石酸氢盐；

1-(N-(羧基甲基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮钠盐；和

1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮或其可药用盐，包括盐酸盐，酒石酸氢盐，柠檬酸盐和甲苯磺酸盐。

由于本发明化合物，尤其式(I)化合物，要用于药物组合物，应理解为这些化合物是按基本纯的形式提供，例如纯度至少为50％，更合适至少75％和优选至少95％(％是重量百分数)。式(I)化合物不纯的制品可用于制备用于药物组合物的更纯的形式。虽然本发明中间体化合物的纯度不是很重要，但容易理解与式(I)化合物一样其优选基本上纯的形式。优选地，在可能的情况下，本发明化合物以结晶形式得到。

当本发明的一些化合物可以得到结晶或从有机溶剂中结晶时，结晶的溶剂可能会存在于结晶的产物中。本发明在此范围内包括这些溶剂化物。同样，本发明的一些化合物可从含水溶剂中结晶或重结晶，在这种情况下可形成结合水。本发明在此范围内包括计量的水化物及可能在如冷干过程中产生的含有可变量水的化合物。此外，不同的结晶条件可导致形成不同多晶型的结晶产物。本发明在此范围内包括所有多晶型的式(I)化合物。

本发明化合物是与酶脂蛋白有关的磷脂酶A₂(Lp-PLA₂)抑制剂并因此希望用于治疗，特别是动脉粥样硬化的治疗。因此，本发明的另一个方面提供用于治疗的式(I)化合物。

式(I)化合物是通过Lp-PLA₂产生的溶血磷脂酰胆碱产物的抑制剂，因此也可普遍应用于任何涉及内皮的机能障碍的疾病，例如动脉粥样硬化、糖尿病、高血压、心绞痛和局部缺血及再灌注之后。此外，式(I)化合物可普遍应用于任何涉及与酶活性有关的脂质氧化的疾病，例如除了疾病如动脉粥样硬化和糖尿病外，其它疾病如类风湿关节炎、中风、大脑炎症如阿尔茨海默病、心肌梗塞形成、再灌注损伤、脓毒症和急性和慢性炎症。此外，这些疾病包括各种神经精神病学疾病，例如精神分裂症(参见Psychopharmacology Bulletin，31，159-165，1995)。

其它用途包括涉及活化的单核细胞、巨噬细胞或淋巴细胞的任何疾病，由于所有这些细胞类型都表达Lp-PLA₂。这些疾病的举例包括牛皮癣。

因此，在另一方面，本发明提供一种治疗与酶Lp-PLA₂的活性有关的疾病状态的方法，该方法涉及用治疗有效量的酶抑制剂治疗需要这种治疗的患者。该疾病状态可与单核细胞、巨噬细胞或淋巴细胞的升高有关；与溶血磷脂酰胆碱和氧化的游离脂肪酸的形成有关；与和Lp PLA₂活性相关的脂质氧化有关；或与内皮的机能障碍有关。

本发明化合物也可与抗高血脂剂、抗动脉粥样硬化剂、抗糖尿病剂、抗心绞痛剂、抗炎剂或抗高血压剂或者降Lp(a)剂联合用于治疗上述疾病状态。上述的实例包括胆固醇合成抑制剂，如statins、抗氧剂如普罗布考、胰岛素敏化剂、钙通道拮抗剂和抗炎药如NSAIDs。降Lp(a)剂的实例包括描述于WO 97/02037，WO 98/28310，WO98/28311和WO 98/28312(Symphar SA和SmithKline Beecham)的氨基磷酸酯类。

一种优选的联合治疗是应用本发明化合物和statin。statins是众所周知的一类降胆固醇剂，并包括atorvastatin、昔伐司丁、普伐他汀、cerivastatin、氟伐他停、洛伐他汀和ZD 4522(也称为S-4522，Astra Zeneca)。按照医师的意见，这两种治疗剂可基本上同时施用或在不同时间施用。

另一种优选的联合治疗是应用本发明化合物和抗糖尿病剂或胰岛素敏化剂，由于冠心病是导致糖尿病死亡的主要原因。在这一类中，优选与本发明化合物联用的化合物包括PPARγ激活剂，例如G1262570(Glaxo Wellcome)和格列酮类化合物，如柔西格列酮(Avandia，SmithKline Beecham)，曲格列酮和吡格列酮。

在治疗应用中，本发明化合物常按标准药物组合物施用。因此，另一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含式(I)化合物和可药用载体。

合适的药物组合物包括那些适合口服或胃肠外施用或用作栓剂的药物组合物。

合适的药物组合物包括那些适合口服或胃肠外施用或用作栓剂的药物组合物。口服有活性的式(I)化合物可配制成液体如糖浆、悬浮剂或乳剂、片剂、胶囊剂和锭剂。液体制剂一般包括在合适的液体载体，例如乙醇、甘油、非水溶剂，如乙二醇、油或水中的化合物或可药用盐并含有悬浮剂、防腐剂、调味剂或调色剂的悬浮液或溶液。片剂组合物可以用任何常规用于制备固体制剂的合适药物载体制备。这些载体的实例包括硬脂酸镁、淀粉、乳糖、蔗糖和纤维素。胶囊剂组合物可以用常规包囊方法制备。例如，含有活性成分的小丸可用标准载体制成，然后装入硬明胶胶囊中；另外，分散体或悬浮液可用任何合适的药物载体，例如水溶性树胶、纤维素、硅酸盐或油制备，然后将分散体或悬浮液装入软明胶胶囊中。典型的胃肠外组合物包括在无菌水性载体或胃肠外可用油如聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、花生油或芝麻油中的式(I)化合物的溶液或悬浮液。另外，溶液可被冷干，然后刚好在施用前与合适的溶剂重新配制。典型的栓剂包含以此方式施用时有活性的式(I)化合物与结合和/或润滑剂，如聚二醇类、明胶或可可脂或其它低熔点植物的或合成的蜡或脂肪。

优选的组合物是单位剂型，如片剂或胶囊。用于口服的各剂量单位优选包含1到500mg(对胃肠外施用优选包含0.1到25mg)的式(I)化合物。对成年患者的日剂量方案可以是，例如，口服剂量为1mg到1000mg，优选1mg到500mg，或静脉注射、皮下注射或肌内注射剂量为0.1mg到100mg，优选0.1mg到25mg的式(I)化合物，每天施用1到4次。施用这些化合物适于进行一连续的治疗，例如一周或更长时间。

式(I)化合物可经很多方法制备，这些方法包括：

(a)式(II)化合物：

其中X、Y、Z、R¹和R²如前述定义，

与式(III)化合物在形成酰胺条件下反应：

            R⁵-R⁴-CH₂NHR³    (III)

其中R³、R⁴和R⁵如前述定义；

(b)式(IV)化合物：

其中X、Z、R¹和R²如前述定义，

与式(V)化合物在碱如仲胺或叔胺，例如二异丙基乙基胺存在下，在惰性溶剂如二氯甲烷中反应：

         R⁵-R⁴-CH₂NR³-CO-(CH₂)_n-L¹    (V)

其中n，R³，R⁴和R⁵如前述定义，并且L¹为离去基团，如卤素，如溴或碘；

(c)当X是S时，式(VI)化合物：

其中n、Z、R¹、R³、R⁴和R⁵如前述定义，

与式(VII)化合物在碱如仲胺或叔胺，例如二异丙基乙基胺存在下，在惰性溶剂如二氯甲烷中反应：

              R²-CH₂-L    (VII)

其中R²和L¹如前述定义；或

(d)当X为0时，式(VIII)化合物：

其中n、Z、R¹、R³、R⁴和R⁵如前述定义，并且L²是离去基团，如卤素或烷基硫基，例如甲基硫基，

与式(IX)化合物在碱如4-二甲基氨基吡啶存在下，在惰性溶剂如吡啶中反应：

               R²-CH₂-OH    (IX)

其中R²如前述定义。

在上述方法中用的式(II)、(IV)、(VI)和(VIII)化合物可按下列反应路线I所示方法制备：

                     反应路线I

其中：

L³为C_(1-6)烷基，例如甲基；

R¹⁵为C_(1-6)烷基，例如甲基、乙基或叔丁基，及

L¹、L²、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、n、X和Z如前述定义。

关于反应路线I：

步骤(a)的酰胺形成条件是本领域众所周知的。优选地，式(II)的酸与式(III)的胺在惰性溶剂，如二氯甲烷中，在室温和一种活化剂，如1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺和羟基苯并三唑存在下反应。

步骤(b)的烷基化条件包括在碱如仲胺或叔胺，例如二异丙基乙基胺存在下，在惰性溶剂如二氯甲烷中反应形成中间体酯，其经水解，例如用氢氧化钠水溶液在溶剂，如二_烷中或者通过例如用三氟乙酸，在溶剂例如二氯甲烷中选择性去保护转化为式(II)的酸。

步骤(c)的条件包括形成硫醚的条件。有利地，该反应在碱如乙醇钠或碳酸钾存在下，优选在溶剂如乙醇或二甲基甲酰胺，或仲胺或叔胺碱，如二异丙基乙基胺，在溶剂如二氯甲烷中进行。

在步骤(d)中，式(XVII)化合物与硫脲在乙醇钠(优选就地用钠和乙醇产生)存在下反应。

在步骤(e)中，式(XVIII)化合物与甲酸乙酯在碱如氢化钠或异丙醇钾存在下反应。

在步骤(f)中，式(IV)化合物与式(V)化合物在碱，例如仲胺或叔胺，如二异丙基乙基胺存在下，在溶剂如二氯甲烷中反应。

在步骤(g)中，式(XIII)化合物与式(XIV)化合物在溶剂如二甲基甲酰胺中反应生成中间体硫脲，然后用碱如甲醇钠处理。

在步骤(h)中，式(XVI)化合物与金属硫氰酸盐，例如硫氰酸钾，在溶剂如乙腈中反应。

在步骤(i)中，式(XVII)化合物与甲基化试剂，如硫酸二甲酯在碱如碳酸钾存在下反应，然后按常规方法，例如通过用氢氧化钠碱性水解，将中间体酯水解得到相应的羧酸，然后例如用草酰氯处理转化成酰氯。

在步骤(j)中使用催化剂如4-二甲基氨基吡啶和溶剂如吡啶。

在步骤(k)中，式(XIII)化合物与式(XV)化合物在溶剂如二甲基甲酰胺中反应生成中间体硫脲，然后用碱如甲醇钠处理。

现在用下列实施例说明本发明。

实施例

中间体和实例的结构和纯度用¹H-NMR和(几乎所有情况下)质谱确定，即使在下面没有详细说明。

中间体A1-4-(4-氯苯基)苯甲醛

(a)将4-甲酰基苯溴酸(2.50g，2当量)、4-氯碘苯(1.98g，1当量)、四(三苯膦)钯(O)(0.50g，0.05当量)、碳酸钠水溶液(18ml，2M溶液，2当量)和二甲氧基乙烷(50ml)的混合物在氩气氛下搅拌回流过夜，然后冷却并用乙酸乙酯稀释。按需要过滤混合物以除去无机残余物，然后有机层依次用柠檬酸水溶液和盐水洗涤，干燥并蒸发。粗产品经色谱纯化(硅胶，5％乙酸乙酯的己烷)；蒸发产品级分得到白色固体(1.32g，72％)。

(b)将4-氯苯溴酸(19.4g，1当量)、4-溴苯甲醛(22.9g，1当量)、乙酸钯(II)(1.4g，0.05当量)、碳酸钠水溶液(30.3g于144ml溶液中，2当量)和二甲氧基乙烷(500ml)的混合物在氩气氛下搅拌回流2.5h，然后蒸发至少量体积并用二氯甲烷稀释。按照上述(a)中的方法继续处理得到相同的物质(25.2g，94％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ10.05(1H，s)，7.96(2H，d)，7.73(2H，d)，7.57(2H，d)，746(2H，d)；MS(AP+)实测值(M+1)＝217，C₁₃H₉ ³⁵C10计算值216。

中间体A2-N-甲基-4-(4-氯苯基)苄胺

在室温下搅拌中间体A1(3.5g，1当量)、甲胺(32.3ml 2M的THF溶液，4当量)和无水硫酸镁(4.47g，2当量)的混合物16h，然后过滤，用乙酸乙酯充分洗涤固体，蒸发合并的滤液得白色固体(3.7g)。将该亚胺中间体悬浮在乙醇(100ml)中，用冰冷却并分批加入硼氢化钠(0.61g，1当量)。移走冰浴，在室温下搅拌混合物45min，然后在50℃下搅拌1h。在真空下除去溶剂，向残余物中加入水，将产物萃取到二氯甲烷中。干燥并蒸发溶剂得到白色固体(3.56g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.51(4H，d)，7.40(4H，d)，3.79(2H，s)，2.48(3H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝232，C₁₄H₁₄ ³⁵ClN计算值231。

中间体A3-N-(2-二乙基氨基乙基)-4-(4-氯苯基)苄胺

中间体A1(55.0g)、N，N-二乙基亚乙基二胺(35.6ml)、4A分子筛(37g)和二氯甲烷(1100ml)的混合物在室温、氩气氛和偶尔搅拌下反应16h。过滤出固体并用二氯甲烷洗涤，蒸发合并的滤液得到黄色泡沫(72.4g)。如对中间体A2所述，在乙醇(850ml)中用硼氢化钠(8.7g)还原该中间体亚胺得到黄色油状标题化合物(72.7g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.70(2H，t)，2.22(6H，s)，2.33(2H，t)，2.69(2H，br.m)，3.83(2H，s)，7.37-7.43(4H，m)，7.52-7.56(4H，m)。

中间体A4-4-(4-氯苯基)苄醇

搅拌中间体A1(1.73g，1当量)、硼氢化钠(0.3g，1当量)和乙醇(20ml)的混合物直至得到澄清的溶液；观察到缓慢的放热。将温度升至50℃并继续搅拌2h，然后在真空下蒸发溶剂，向残余物中加入水并将产物萃取到二氯甲烷中。干燥并蒸发溶剂得到白色固体(1.67g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.73(1H，t)，4.74(2H，d)，7.2-7.6(8H，m)。

中间体A5-N-(4-(4-氯苯基)苄基)苯邻二甲酰亚胺

将中间体A4(1.62g，1当量)、苯邻二甲酰亚胺(1.42g，1.3当量)和三苯基膦(2.53g，1.3当量)溶于无水THF(50ml)中，用并冷却溶液，搅拌下慢慢加入偶氮二甲酸二乙酯(1.52ml，1.3当量)。在室温下搅拌黄色的溶液16h，然后蒸发溶剂。经色谱(硅胶，1∶1二氯甲烷/石油醚)并用醚研制得到目的产物(2.03g，79％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ4.89(2H，s)，7.36-7.50(8H，m)，7.69-7.74(2H，m)，7.82-7.89(2H，m)。

中间体A6-4-(4-氯苯基)苄胺

将中间体A5(1.98g，1当量)和水合肼(0.55ml，2当量)在乙醇(40ml)中的混合物回流加热2h，然后蒸发溶剂。残余物与二氯甲烷和0.5M的氢氧化钠水溶液一起振摇，用二氯甲烷再萃取水层，合并的有机萃取物经色谱纯化(硅胶，1-3％在二氯甲烷中甲醇的氨溶液)。蒸发产品级分得到白色固体(0.53g，43％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ3.92(2H，s)，7.28-7.41(4H，m)，7.49-7.54(4H，m)。

中间体A7-N-甲基-N-(4-(4-氯苯基)苄基)溴乙酰胺

将溴乙酰溴(0.123ml，1.1当量)加到中间体A2(0.3g，1当量)、氢氧化钠(0.06g，1.2当量)、水和二氯甲烷已搅拌的混合物中。在室温下继续搅拌3h，然后将两相分开，干燥并蒸发有机层。经色谱纯化(硅胶，3∶1己烷/乙酸乙酯)得到油状目的产物(0.37g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ7.38-7.68(8H，m)，4.77(2H，s)，4.07(2H，s)，3.24(3H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝352，C₁₆H₁₅ ⁷⁹Br³⁵ClNO计算值351。

中间体A8-5-羟基甲基-2-(4-氟苯基)吡啶

在氩气氛下，将中间体A23(4.63g)的无水二氯甲烷(100ml)溶液冷至-78℃，然后在20分钟以上滴加DIBAL-H(26.7ml，1.5M的甲苯溶液)。继续在-78℃下搅拌40min，然后在15分钟以上滴加2M的盐酸(52ml)。将溶液慢慢温至室温，然后分出有机层，用水洗涤、干燥并蒸发溶剂。用色谱纯化(硅胶，1∶1乙酸乙酯/己烷)得到白色固体产物(3.03g，75％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ(1H，d)，7.98(2H，m)，7.77(1H，m)，7.68(1H，d)，7.15(2H，t)，4.77(2H，d)，1.802(1H，t)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝204，C₁₂H₁₀FNO计算值203。

中间体A9-5-甲酰基-2-(4-氟苯基)吡啶

将活化的二氧化锰(3.19g)加到中间体A8(0.75g)的二氯甲烷(50ml)溶液中并在室温下搅拌16h。过滤出固体，蒸发滤液得到浅黄色固体(0.57g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ10.15(1H，s)，9.11(1H，s)，8.22(1H，dd)，8.10(2H，m)，7.87(1H，d)，7.20(2H，t)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝202，C₁₂H₈FNO计算值201。

中间体A10-N-甲基-4-(4-氯苯基)-3-氟苄胺

在氩气氛、冰冷却下搅拌甲硼烷(1M的THF溶液，2当量)并在数分钟以上逐渐加入中间体A39(1当量)的无水THF溶液.5min后撤去冰浴并加热混合物回流1h，然后冷至室温。滴加5M盐酸，通过蒸馏从所得悬浮液中除去THF。用水稀释残余物，用氢氧化钠调至强碱性，然后将产物萃取到醚中.有机溶液经干燥和蒸发，随后经色谱纯化得到油状标题化合物(88％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ2.48(3H，s)，3.79(2H，s)，7.12-7.18(2H，m)，7.33-7.50(5H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝250；C₁₄H₁₃ClFN计算值249。

中间体A11-N-(乙氧基羰基甲基)-4-(4-氯苯基)苄胺

在室温下，搅拌中间体A1(0.5g，1当量)、甘氨酸乙酯盐酸盐(0.32g，1当量)、二异丙基乙基胺(0.4ml，1当量)和1，2-二氯乙烷(10ml)的混合物，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.73g，1.5当量)并继续搅拌过夜。用二氯甲烷稀释后，用水洗涤溶液并用碳酸钾干燥。蒸发溶剂得到白色蜡状固体标题化合物(0.57g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.22-1.37(3H，t)，3.44(2H，s)，3.85(2H，s)，4.15-4.32(2H，q)，7.35-7.62(8H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝304；C₁₇H₁₈ClNO₂计算值303。

中间体A12-2-羟基甲基-5-(4-氯苯基)吡啶

在30min以上，将间氯过苯甲酸(0.93g)分批加到中间体A41(0.77g)的二氯甲烷(10ml)溶液中，然后在室温下继续搅拌混合物1小时，用二氯甲烷稀释，用碳酸氢钠水溶液洗涤、干燥和蒸发。经色谱纯化(硅胶，5％甲醇的二氯甲烷溶液)得到白色固体状2-甲基-5-(4-氯苯基)吡啶-N-氧化物(0.79g)。将其溶于二氯甲烷(15ml)中，加入三氟乙酸酐(1.9ml)，并在室温下搅拌混合物1小时，随后在回流下搅拌1小时。在真空下除去挥发性成分，然后将残余物重新溶解于二氯甲烷(5ml)中，加入2M碳酸钠水溶液(14ml)并剧烈搅拌2小时。用二氯甲烷和水稀释混合物，有机层用水洗涤、干燥并蒸发。色谱纯化(硅胶，5％甲醇的二氯甲烷溶液)得到米色固体状标题化合物(0.67g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ3.61(1H，t)，4.82(2H，d)，7.33(1H，d)，7.45(2H，m)，7.51(2H，m)，7.85(1H，dd)，7.78(1H，d)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝220/222；C₁₂H₁₀ClNO计算值219/221。

中间体A13-2-(4-氯苯基)-4-氧代嘧啶-5-甲酸乙酯

将21％w/v乙醇钠(11.12ml，2当量)的乙醇溶液滴加到乙氧基丙二酸二乙酯(3.03ml，1当量)和4-氯苄脒盐酸盐(4.23g，1当量)的乙醇(30ml)悬浮液中，然后加热混合物回流4小时。冷却后，在真空下除去溶剂，残余物用醚研制。过滤出固体，然后将其重新悬浮到水中并酸化到pH2。过滤产物、用水洗涤并干燥得到2.94g。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ1.29(3H，t)，4.26(2H，q)，7.65(2H，m)，8.18(2H，m)，8.65(1H，s)；MS(APCI-)实测值(M-1)＝277/279；C₁₃H₁₁ClN₂O₃计算值278/280。

中间体A14-2-(4-氯苯基)-4-氯嘧啶-5-甲酸乙酯

在冰冷却下，将草酰氯(0.31ml，2当量)加到中间体A13(0.49g)的二氯甲烷(20ml)中，然后搅拌混合物3小时并温至室温。蒸发挥发性成分得到白色固体产物(2.94g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.44(3H，t)，4.48(2H，q)，7.50(2H，m)，8.45(2H，m)，9.17(1H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝297；C₁₃H₁₀Cl₂N₂O₂计算值296。

中间体A15-2-(4-氯苯基)嘧啶-5-甲酸乙酯

在60℃、氩气氛下，搅拌中间体A14(6.8g，1当量)、锌粉(1.79g，1.2当量)、乙酸(1.57ml，1.2当量)和THF(100ml)的混合物18小时，然后再加入一份乙酸(1ml)和锌(1.0g)，并再继续反应24小时。在真空下除去溶剂，残余物用二氯甲烷和甲醇混合物处理，过滤除去未溶解的锌粉。蒸发溶剂后，产物用乙醇重结晶得到2.02g。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.44(3H，t)，4.46(2H，q)，7.48(2H，m)，8.48(2H，m)，9.30(2H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝263；C₁₃H₁₁ClN₂O₂计算值262。

中间体A16-5-羟基甲基-2-(4-三氟甲基苯基)嘧啶

在1大气压下，用10％的钯/炭(96mg)在三乙胺(2ml)和乙醇(20ml)的混合物中氢化中间体A129(0.96g)90mins。过滤除去催化剂，蒸发溶剂，残余物用乙酸乙酯处理，并依次用氯化铵水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤。干燥并蒸发得到标题化合物(2.02g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ4.82(2H，s)，7.75(2H，m)，8.57(2H，m)，8.85(2H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝255；C₁₁H₉ClN₂O计算值254。

通过中间体A1的方法制备下列中间体：

下列中间体是通过中间体A2的方法制得，按需要用适当的胺代替甲胺：

A67：N-甲基-4-苯基苄胺是用商购的4-联苯基甲醛制备的。

下列中间体是通过中间体A3的方法制备的：

下列中间体是用中间体A4的方法制得：

下列中间体是用中间体A5的方法制得：

下列中间体是用中间体A6的方法制得：

A124：4-苯基苄胺是可商购的。

下列中间体是用中间体A8的方法制备：

下列中间体通过中间体A9的方法制备：

下列中间体通过中间体A12的方法制备：

下列中间体通过中间体A13的方法制备：

下列中间体是用中间体A14的方法制得：

下列中间体是用中间体A7的方法制得：

下列中间体是用中间体A11的方法制得：

中间体B1-2-三氟甲基-4-氧代嘧啶-5-甲酸乙酯

在超过5min的时间，向三氟乙脒(36.5g)和乙氧基丙二酸二乙酯(71g)的乙醇(300ml)溶液中加入乙醇钠的乙醇(21wt％，109.5ml)溶液。将混合物回流加热6h，然后冷却、浓缩并加入水(200ml)。过滤收集所得固体，用冷水(50ml)和乙醚(2×100ml)洗涤，然后悬浮在水中(400ml)。加入二氯甲烷(300ml)并用稀HCl(2.5M，125ml)酸化混合物。有机萃取物用水洗涤、干燥(MgSO₄)并蒸发得到米色固体标题化合物(53g，68％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ12.00(1H，brs)，9.18(1H，s)，4.57(2H，q)，1.49(3H，t)；¹³C-NMR(CDCl₃)δ171.4，167.3，160.4，160.2(q，J＝38Hz)，118.8(q，J＝276Hz)，109.2，63.8，14.0；MS(APCI+)实测值(M+1)＝237，C₈H₇F₃N₂O₃计算值236。

中间体B2-2-三氟甲基-4-氯嘧啶-5-甲酸乙酯

向在冰浴中冷却的4-羟基-2-三氟甲基嘧啶-5-甲酸乙酯(51.8g)的二氯甲烷(600ml)溶液中加入草酰氯(57.4ml)，然后加入二甲基甲酰胺(0.2ml)。在室温下搅拌混合物16h，然后蒸发。加入甲苯并蒸发。将残余物溶于二氯甲烷中，用水洗涤、干燥(MgSO₄)并蒸发得到橘黄色油状标题化合物(55.7g，100％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ9.25(1H，s)，4.51(2H，q)，1.46(3H，t)；¹³C-NMR(CDCl₃)δ162.0(2C)，161.1，158.1(q，J＝39Hz)，127.0，118.9(q，J＝276Hz)，63.5，14.4。

中间体B3-2-三氟甲基嘧啶-5-甲酸乙酯

在氢气压维持在1大气压下，将4-氯-2-三氟甲基嘧啶-5-甲酸乙酯(55.7g)、10％钯炭(0.3g)、乙醇(1000ml)和N，N-二异丙基乙胺(90ml)的混合物振摇2h。然后滤出催化剂并蒸发溶剂。将残余物溶于二氯甲烷中，先用氯化铵溶液、再用水洗涤、干燥(MgSO₄)并蒸发得到米色固体标题化合物(48g，100％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ9.42(2H，s)，4.51(2H，q)，1.45(3H，t)；¹³C-NMR(CDCl₃)δ162.7，159.4(2C)，159.3(q，J＝37Hz)，126.3，119.6(q，J＝275Hz)，62.9，14.4。

中间体B4-2-三氟甲基-5-甲酰基嘧啶

在干冰/丙酮冷却下，在超过15分钟的时间内，向2-三氟甲基嘧啶-5-甲酸乙酯(5.17g)的甲苯(120ml)溶液中加入二异丁基氢化铝(25wt％，31ml)。在-78℃下搅拌混合物45min，然后小心加入稀盐酸(2M，120ml)。在混合物温至室温后加入乙醚。分出有机相，用水和盐水依次洗涤、干燥(MgSO₄)并蒸发得到无色固体标题化合物(3.46g，84％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ10.29(1H，s)，9.37(2H，s)；¹³C-NMR(CDCl₃)δ187.7，159.6(q，J＝38Hz)，159.1(2C)129.6，119.2(q，J＝276Hz)。

中间体B5-1-(2-甲氧基乙基)吡唑

间断用冰冷却维持温度低于10℃下，将2-溴甲基甲基醚(10.22g)搅拌下滴加到吡唑(5.0g)、细粉状的氢氧化钾(8.25g)和四丁基溴化铵(1.19g)的混合物中。将混合物在室温下放置48小时，然后经硅胶柱色谱纯化并用醚洗脱。蒸发产物级分得到淡绿色油状物(7.27g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ3.33(3H，s)，3.75(2H，t)，4.30(2H，t)，6.25(1H，s)，7.47(1H，d)，7.52(1H，d)；MS(APCI+)实测值(M+H)＝127；C₆H₁₀N₂O计算值126。

中间体B6-1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-甲醛

加热1-(2-甲氧基乙基)吡唑(7.27g)的无水DMF(11.4ml)溶液至90℃，然后在超过1小时的时间内滴加三氯氧磷(5.4ml)，维持温度为95-100℃。再加热2小时后，冷却混合物并倒到冰上，加入氢氧化钠调混合物至pH4，然后将产物萃取到二氯甲烷中，干燥并蒸发有机萃取物得到棕色油状物(7.19g)。1H-NMR(CDCl₃)δ3.34(3H，s)，3.75(2H，m)，4.32(2H，m)，7.98(1H，s)，8.02(1H，s)，9.85(1H，s)。

中间体B10-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙烯酸

在氩气氛下，在110℃将1-甲基吡唑-4-甲醛(85.55g)、丙二酸(80.85g)、吡啶(69.2ml)和哌啶(1.5ml)的混合物加热4小时。冷却后，加入水(100ml)，随后加入氨水(75ml)得到一澄清溶液，用盐酸酸化至pH 1。滤出所得固体，用水洗涤并干燥得到标题化合物(93.5g)。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ3.83(3H，s)，6.18(1H，d)，7.44(1H，d)，7.83(1H，s)，8.07(1H，s)。(APCI)实测值(M+H)＝153。C₇H₈N₂O₂计算值152。

中间体B11-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙烯酸甲酯

将3-(1-甲基吡唑-4-基)丙烯酸(86.8g)加到硫酸(20ml)的甲醇(690ml)溶液中，将混合物回流2.5小时，冷却，然后倒到冰上。用氢氧化钠溶液中和酸并将产物萃取到二氯甲烷中，干燥并蒸发二氯甲烷。用醚/汽油结晶得到3-(1-甲基吡唑-4-基)丙烯酸甲酯(89.0g)。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ3.77(3H，s)，3.91(3H，s)，6.16(1H，d)，7.54(1H，s)，7.56(1H，d)，7.69(1H，s)。(APCI)实测值(M+H)＝167。C₈H₁₀N₂O₂计算值166。

中间体B12-3-(5-嘧啶基)丙烯酸乙酯

在压力容器中、在150℃下搅拌5-溴嘧啶(5.93g)、丙烯酸乙酯(5.08g)、乙酸钯(0.112g)、三苯基膦(0.23g)和三乙胺(4.5g)的混合物6小时。冷却过夜后，向深色的残余物中加入水(50ml)，并将产物萃取到甲苯中。干燥、活性碳脱色并蒸发得到浅色油状物，用石油醚研制得到3-(5-嘧啶基)丙烯酸乙酯(4.78g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.36(3H，t)，4.27(2H，q)，6.59(1H，d)，7.62(1H，d)，8.88(2H，s)，9.20(1H，s)。

中间体B13-3-(2-甲氧基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯

在氩气氛、135℃(油浴温度)下，加热2-甲氧基-5-溴嘧啶(75.43g，0.399mol)、丙烯酸乙酯(47.5ml，0.439mol)、乙酸钯(II)(1.07g，0.0048mol)，三(邻甲苯基)膦(2.92g，0.0096mol)和三乙胺(84ml)的混合物搅拌12h。固体冷却之后溶于水和乙酸乙酯中，过滤，分出水相并进一步用乙酸乙酯萃取。合并的萃取物用饱和的氯化铵水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发。得到的固体用醚/轻汽油(1∶3，350ml)研制，过滤，洗涤并干燥，得到52.41g(63％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.33(3H，t)，4.06(3H，s)，4.28(2H，q)，6.45(1H，d)，7.58(1H，d)，8.67(2H，s)；MS(APCI+)实测值(M+H)＝209；C₁₀H₁₂N₂O₃计算值208。

下列中间体是用中间体B10(诺文葛耳)的方法制备：

下列中间体是用中间体B11(酯化)的方法制备：

下列中间体是用中间体B13(丙烯酸酯Heck)的方法制备：

中间体B20-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙酸甲酯

在50℃/50psi下，用10％的钯炭(5.2g)将3-(1-甲基吡唑-4-基)丙烯酸甲酯(181g)的甲醇(2升)溶液氢化至反应终止。滤出催化剂，最后在真空下与甲苯共沸蒸发出甲醇，得到油状标题化合物(179g)。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ2.56(2H，t)，2.79(2H，t)，3.67(3H，s)，3.85(3H，s)，7.17(1H，s)，7.31(3H，s)。(APCI)M+H＝169。C₈H₁₂N₂O₂计算值168。

中间体B21-3-(2-甲氧基嘧啶-5-基)丙酸乙酯

用10％的钯炭(3g)处理3-(2-甲氧基嘧啶-5-基)丙烯酸乙酯(52.4g，0.252mol)的乙醇(400ml)和三乙胺(50ml)的悬浮液并在50psi下氢化1.75h。用hyflo滤出催化剂并蒸发滤液。将残余物溶于二氯甲烷，用饱和的氯化铵水溶液洗涤两次，干燥(MgSO₄)并蒸发得到油状物41.2g(78％)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.23(3H，t)，2.61(2H，t)，2.87(2H，t)，3.99(3H，s)，4.13(2H，q)，8.39(2H，s)；MS(APCI+)实测值(M+H)＝211；C₁₀H₁₄N₂O₃计算值210。

下列中间体是用中间体B20(乙酯在乙醇溶剂中，甲酯在甲醇中)的方法制得：

下列中间体是用中间体B21(乙酯在乙醇溶剂中，甲酯在甲醇中)的方法制得：

中间体B30-5-((1-甲基吡唑-4-基)甲基)-2-硫代尿嘧啶

在氩气氛及搅拌下、超过2小时的时间，将3-(1-甲基吡唑-4-基)丙酸甲酯(170g)和甲酸甲酯(131ml)的无水乙醚(2000ml)溶液滴加到冰冷的叔丁醇钾(284g)的无水THF(1800ml)溶液中。然后将混合物温至室温并继续搅拌16小时。真空蒸发溶剂得到浅色固体。加入甲醇(2500ml)和硫脲(154g)，强烈搅拌下将混合物在50℃加热16小时。蒸出溶剂，用水(750ml)处理浅棕色固体残余物。用盐酸将冰冷的溶液调至pH3，在冰浴中搅拌2小时，然后滤出沉淀物并用水和醚洗涤得到标题化合物(120g)。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ3.33(3H，s)，3.75(3H，s)，7.15(1H，s)，7.23(1H，s)，7.46(1H，s)，12.2(1H，brs)，12.4(1H，brs)。(APCI)M+H＝223。C₉H₁₀N₄OS计算值222。

中间体B31-2-甲酰基-3-(5-嘧啶基)丙酸乙酯

在氮气氛下、超过30min，将3-(5-嘧啶基)丙酸乙酯(2.28g)和甲酸乙酯(1.41ml)溶于无水二甲氧基乙烷(5ml)的混合物滴加到氢化钠(60％，4.0g)的DME(5ml)悬浮液中，滴加过程中保持温度在0℃以下。滴完后再继续搅拌24h，然后将混合物倒到冰上并用醚洗涤。将水层调至pH 7，然后蒸发并用丙酮萃取残余物。过滤并蒸发得到粗产物，用乙酸乙酯处理，用活性炭脱色，干燥并蒸发得到2-甲酰基-3-(5-嘧啶基)丙酸乙酯。象这一类型的其它化合物一样，该化合物难于表征并不经进一步纯化使用。

中间体B32-5-(嘧啶-5-基甲基)-2-硫代尿嘧啶

将钠(0.25g)溶于乙醇(5ml)中，加入硫脲(0.77g)，在回流下搅拌混合物1小时。慢慢加入2-甲酰基-3-(5-嘧啶基)丙酸乙酯(1.99g)的乙醇(5ml)溶液，并继续回流18小时。蒸出溶剂，用水处理残余物并用二氯甲烷洗涤。将水溶液酸化至pH 5，并滤出沉淀物，用水洗涤并干燥得到5-(嘧啶-5-基甲基)-2-硫代尿嘧啶(0.71g)。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ3.58(2H，s)，7.54(1H，s)，8.70(2H，s)和9.02(1H，s)。MPt265-6℃。

下列中间体是用中间体B30(硫代尿嘧啶)的方法制得：

中间体B40-2-(甲氧基亚甲基)-3-(2-甲氧基嘧啶-5-基)丙酸，甲酯/乙酯混合物

在搅拌下，向氢化钠(0.83g、60％的油分散体)的无水1，2-二甲氧基乙烷(6ml)的悬浮液中滴加溶液甲酸甲酯(1.54ml)和3-(2-甲氧基嘧啶-5-基)丙酸乙酯(3.5g)的无水1，2-二甲氧基乙烷(6ml)溶液，控制滴加速度维持反应温度为25-30℃。1h后，加入醚使沉淀出的油沉下。倾出溶液重加入新醚，并且油状物慢慢固化。过滤固体2-(羟基亚甲基)的衍生物，用醚洗涤并干燥得到3.8g。将一份1.33g悬浮于含有无水碳酸钾(1.15g)的二甲基甲酰胺(10ml)中，并在搅拌下、超过30min滴加硫酸二甲酯(0.48ml)的二甲基甲酰胺(10ml)溶液。16h后，蒸发溶剂，残余物用水处理并用乙酸乙酯萃取。萃取液用水洗涤、干燥(MgSO₄)并蒸发得到油状产物0.91g。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.23(3H，t)，3.46(2H，s)，3.69(3H，s，甲酯)，3.88(3H，s)，3.97(3H，s)，4.16(2H，q)，7.39(1H，s)，8.40(2H，s)。甲酯与乙酯的比例为3∶2。MS(APCI+)实测值(M+1)＝253，239(乙酯和甲酯)；C₁₂H₁₆N₂O₄计算值252，C₁₁H₁₄N₂O₄计算值238。

中间体B41-2-(甲氧基亚甲基)-3-(2-甲氧基嘧啶-5-基)丙酸

在室温下将中间体B4O(0.9g)的混合酯在2M氢氧化钠水溶液(3.6ml)中的悬浮液搅拌16h得到澄清溶液。用水稀释，用二氯甲烷萃取并蒸发到约一半体积，然后酸化至pH3-4(2M盐酸)产物结晶析出。滤出白色固体，用冰冷的水洗涤并干燥，得到0.46g。¹H-NMR(CDCl₃)δ3.43(2H，s)，3.91(3H，s)，3.99(3H，s)，7.49(1H，s)，8.42(2H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝225，C₁₀H₁₂N₂O₄计算值224。

中间体B42-1-(3-乙氧基羰基丙-1-基)-5-(2-甲氧基嘧啶-5-基甲基)-2-硫代尿嘧啶

在超过5min的时间内，将草酰氯(3.94ml，2当量)加到中间体B41(5.0g，1当量)和DMF(1滴)的无水二氯甲烷(50ml)溶液中，然后在氩气氛下搅拌混合物4h。蒸发溶剂，残余物用二氯甲烷处理两次并再蒸发除去挥发性杂质。将酰氯溶于乙腈中(100ml)并用无水、粉末状的硫氰酸钾(3.2g，1.5当量)处理。将所得悬浮液在氩气氛下搅拌24h，然后蒸发至干。将残余物悬浮在无水DMF(100ml)中，冷至10℃，加入4-氨基丁酸乙酯盐酸盐(4.60g，1.25当量)和三乙胺(7.34ml，2.4当量)，将混合物在室温下搅拌20h。将甲醇钠溶液(通过将钠(1.26g，2.5当量)溶于甲醇(25ml)中制备)加到DMF溶液中，将混合物在110℃加热2h。蒸发溶剂，加入水，并用乙酸酸化至pH5，然后将产物萃取到乙酸乙酯中。干燥，蒸发，并用醚研制得到浅棕色固体(4.55g)。在反应期间发生了一些醚/酯交换，得到混合约30％的2-乙氧基嘧啶的标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ1.17(3H，t)，1.31(t，乙氧基)，1.97(2H，t)，2.36(2H，t)，3.49(s，乙氧基)，3.51(s，甲氧基)，3.88(s，甲氧基)，4.04(2H，q)，4.16(2H，t)，4.31(q，乙氧基)，7.81(1H，s)，8.48(s，乙氧基)，8.50(s，甲氧基)，12.50(bs，NH)(浅棕色固体)。

下列中间体是用中间体B40的方法制备：

下列中间体是用中间体B41的方法制备：

下列中间体是用中间体B42的方法制备：

中间体B50-2-(4-氟苄基硫基)-5-((1-甲基吡唑-4-基)甲基)嘧啶-4-酮

将5-((1-甲基吡唑-4-基)甲基)-2-硫代尿嘧啶(118g)、4-氟苄基氯(76.8g)、碳酸钾(183.5g)和无水DMF(100ml)的混合物在氩气氛及80℃下搅拌16小时，然后冷却并蒸发。强烈搅拌下将固体残余物悬浮在水中(1500ml)，然后用盐酸酸化至pH2并再搅拌1小时。滤出白色固体并用水和醚洗涤得到标题化合物(168g)。¹H-NMR(d₆DMSO)δ3.47(2H，s)，3.81(3H，s)，4.41(2H，s)，7.19(2H，s)，7.29(1H，s)，7.48(3H，m)，7.84(1H，s)，12.74(1H，br.s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝331；C₁₆H₁₅FN₄OS计算值330。

中间体B51-1-(3-乙氧基羰基丙-1-基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(2-甲氧基-嘧啶-5-基甲基)嘧啶-4-酮

先用二异丙基乙基胺(0.63ml，1.3当量)、再用4-氟苄基溴(0.38ml，1.1当量)处理在二氯甲烷(60ml)中的中间体B24(1.0g，1当量)，得到一橘黄色溶液，在氩气氛下将其搅拌4h，然后用水洗涤，干燥并蒸发。色谱纯化(硅胶，5％乙醇的乙酸乙酯)，先洗脱出的是2-乙氧基嘧啶杂质，接着是标题化合物(0.35g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.25(3H，t)，2.03(2H，m)，2.33(2H，t)，3.64(2H，s)，3.83(2H，m)，3.99(3H，s)，4.12(2H，q)，4.47(2H，s)，6.98(3H，m)，7.37(2H，m)，8.46(2H，s)；MS(APCI+)M+1＝473；C₂₃H₂₅FN₄O₄S计算值472(浅色蜡状固体)。

下列中间体是用中间体B50的方法制得：

下列中间体是用中间体B51的方法制得：

中间体B70-1-(叔-丁氧基羰基甲基)-2-(4-氟苄基硫基)-5-((1-甲基吡唑-4-基)甲基)嘧啶-4-酮

在室温、氩气氛下搅拌2-(4-氟苄基硫基)-5-((1-甲基吡唑-4-基)甲基)嘧啶-4-酮(175g)、碘乙酸叔丁基酯(128.3g)、二异丙基乙胺(101.5ml)和二氯甲烷(200ml)的混合物48小时。该溶液用碳酸氢钠水溶液洗涤，然后用氯化铵水溶液洗涤，干燥并蒸发得到浅色粘稠油状物。加入乙酸乙酯(300ml)，滤出沉淀并弃掉，溶液经色谱纯化(硅胶，2.5％-10％甲醇+0.5％氨水的二氯甲烷溶液)，产物级分经蒸发并放置固化得到橙色固体(140g)。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ1.36(9H，s)，3.37(2H，s)，3.76(3H，s)，4.42(2H，s)，4.65(2H，s)，7.13(2H，m)，7.23(1H，m)，7.45(4H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝445；C₂₂H₂₅FN₄O₃S计算值444。

中间体B71-1-(羧基甲基)-2-(4-氟苄基硫基)-5-((1-甲基吡唑-4-基)甲基)嘧啶-4-酮

将1-(叔丁氧基羰基甲基)-2-(4-氟苄基硫基)-5-((1-甲基吡唑-4-基)甲基)嘧啶-4-酮(96.8g)溶于二氯甲烷(195ml)中，用冰/水冷却并在快速搅拌下慢慢加入三氟乙酸(130ml)。再搅拌36小时后，蒸发溶剂，玻璃状残余物用醚研制得到78.6g。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ3.36(2H，s)，3.76(3H，s)，4.41(2H，s)，4.67(2H，s)，7.14(2H，m)，7.23(1H，s)，7.43-7.49(4H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝389；C₁₈H₁₇FN₄O₃S计算值388。

中间体B72-1-乙氧基羰基甲基-2-(4-氟苄基)硫基-5-(嘧啶-5-基甲基)-嘧啶-4-酮

搅拌中间体B52(10g)、溴乙酸乙酯(3.38ml)、二异丙基乙基胺(5.84ml)和二氯甲烷(50ml)的混合物过夜，然后该溶液依次用氯化铵水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤。色谱纯化(硅胶，5-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)并用醚研制得到目的产物(7.02g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.26(3H，t)，3.71(2H，s)，4.26(2H，q)，4.46(2H，s)，4.48(2H，s)，6.91(1H，s)，6.98(2H，m)，7.35(2H，m)，8.70(2H，s)，9.09(1H，s)；MS(APCI⁺)M+1＝415，C₂₀H₁₉FN₄O₃S计算值414。MPt 145.1℃。

中间体B73-1-羧基甲基-2-(4-氟苄基)硫基-5-(嘧啶-5-基甲基)嘧啶-4-酮

将0.5M氢氧化钠水溶液(33.8ml)缓慢加到中间体B72(7.01g)的二_烷(150ml)溶液中。在室温下搅拌混合物2.5h，然后蒸发二_烷，加入水并用硫酸氢钠水溶液酸化混合物。滤出沉淀，用水洗涤并干燥得到目的产物(6.31g)。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ3.59(2H，s)，4.41(2H，s)，4.67(2H，s)，7.11(2H，m)，7.45(2H，m)，7.72(1H，s)，8.70(2H，s)，9.03(1H，s)，13.55(1H，bs)；MS(APCI-)M-1＝385，C₁₈H₁₅FN₄O₃S计算值386。MPt 206-207℃。

中间体B74-1-乙氧基羰基甲基-2-(4-氟苄基)硫基-5-(2-氧代嘧啶-5-基甲基)嘧啶-4-酮

用中间体B86通过实施例21的方法制备，例外之处是仅用2当量的B-溴儿茶酚甲硼烷。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ1.28(3H，t)，4.26(4H，q)，4.53(2H，s)，4.90(2H，s)，7.26(2H，m)，7.57(2H，m)，7.691H，s)，8.25(2H，br.s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝431；C₂₀H₁₉FN₄O₄S计算值430。

中间体B75-1-乙氧基羰基甲基-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-乙基-2-氧代嘧啶-5-基-甲基)嘧啶-4-酮

在氩气氛下，向中间体B74(3.1g)的无水二甲基甲酰胺(40ml)溶液中加入乙基碘(1.4g)和无水碳酸钾(2.5g)。在室温下搅拌该混合物20h并在真空下除去溶剂。残余物在乙酸乙酯和水中分配。有机层用盐水洗涤并按等份加到三个10g的硅胶萃取柱中，各柱用EtOAc到18％MeOH∶EtOAc洗脱并合并合适的级分得到标题化合物(1.5g)。¹H-NMR(CDCl₃)δ1.27t1.39t)，3.46(2H，s)，3.94(2H，q)，4.25(2H，q)，4.48(2H，s)，4.57(2H，s)，6.9-7.15(2H，m)，7.21(1H，s)，7.3-7.4(2H，m)，7.9(1H，m)，8.4(1H，m)，MS(APCI+)实测值(M+1)＝459；C₂₂H₂₃FN₄O₄S计算值458。

下列中间体是用中间体B70的方法制得：

下列中间体是用中间体B72的方法制得：

下列中间体是用中间体B71的方法制得：

下列中间体是用中间体B73的方法制得：

实施例1-1-(N-甲基-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基吡唑-4-基甲基)嘧啶-4-酮

在室温下搅拌中间体A2(0.27g，1当量)、中间体B71(0.45g，1当量)、羟基苯并三唑(0.018g，0.1当量)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.25g，1.1当量)和二氯甲烷(15ml)的混合物过夜，然后用二氯甲烷稀释并用碳酸氢钠水溶液洗涤。有机层直接加到10g硅胶柱上，用0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，蒸发产物级分得到油状物，用醚研制得到白色固体(0.39g)。¹H-NMR(d₆-DMSO)δ2.95和3.08(3H，2Xs)，3.61(2H，m)，3.86(3H，m)，4.46-4.61(6H，m)，6.74和6.80(1H，2Xs)，6.91-6.99(2H，m)，7.21-7.49(12H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝602；C₃₂H₂₉ClFN₅O₂S计算值601。

实施例2-1-(N-甲基-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基吡唑-4-基甲基)嘧啶-4-酮

通过实施例1的方法用中间体A45和B71制得。¹H-NMR(DMSO)δ2.96(3H，s)，3.39(2H，m)，3.77(3H，s)，4.43(2H，s)，4.57(2H，s)，4.97(2H，s)，7.12(3H，m)，7.25(1H，s)，7.34-7.48(6H，m)，7.62-6.70(2H，m)，8.84(4H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝636；C₃₃H₂₉F₄N₅O₂S计算值635。

实施例3-1-(N-(2-二甲基氨基乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基吡唑-4-基甲基)嘧啶-4-酮盐酸盐

通过实施例1的方法用中间体A61和B71制得。¹H-NMR(CDCl₃)δ2.95(3H，s)，2.96(3H，s)，3.19(2H，m)，3.58(2H，s)，3.87(3H，s)，3.91(2H，m)，4.42(2H，s)，4.68(2H，s)，4.99(2H，s)，6.88-6.93(2H，m)，7.25-7.29(6H，m)，7.36-7.45(6H，m)7.62(1H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝659；C₃₅H₃₆ClFN₆O₂S计算值658。

实施例4-1-(N-甲基-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(2-(4-吗啉基)嘧啶-5-基甲基)嘧啶-4-酮

在室温、氩气氛下搅拌中间体A7(0.23g，1当量)、中间体B55(0.27g，1当量)和二异丙基乙基胺(0.10g，1.2当量)的无水二氯甲烷(6ml)溶液20h，然后用更多的二氯甲烷稀释并依次用水和氯化铵水溶液洗涤，干燥并蒸发有机相，然后色谱纯化(硅胶，0-5％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到浅色固体状目的产物(0.19g)。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ2.95(d，3H)，3.42(d，2H)，3.64(s，8H)，4.40(d，2H)，4.60(d，2H)，4.95(d，2H)，7.1(m，2H)，7.30(d，2H)，7.35-7.6(m，6H)，7.65(m，3H)，8.30(s，2H)。MS(APCI+)实测值(M+1)＝685/687；C₃₆H₃₄ClFN₆O₃S计算值685。

实施例5-1-(N-(2-(二甲基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮盐酸盐

通过实施例1的方法用中间体A72和B71制得。¹H-NMR(CDCl₃)δ2.98(3H，s)，2.99(3H，s)，3.20(2H，m)，3.60(2H，s)，3.93(5H，m)，4.42(3H，s)，4.69(2H，s)，5.00(2H，s)，6.89(2H，m)，7.2-7.3(4H，m)，7.47(4H，m)，7.55(2H，d)，7.70(3H，m)，11.7(1H，br s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝693；C₃₆H₃₆F₄N₆O₂S计算值692。

实施例6-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮

在氩气氛、室温下，搅拌中间体A3(82.7g，1当量)、B71(101.3g，1当量)、羟基苯并三唑(39.9g，1当量)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(100.0g，2当量)和二氯甲烷(1200ml)的混合物过夜，然后在搅拌下慢慢加入碳酸氢钠水溶液。分出有机层，水层再用二氯甲烷萃取两次，合并的有机萃取液用碳酸钾干燥并蒸发得到棕色油状物。用醚研制得到固体，过滤并用硅胶色谱纯化，用甲醇/二氯甲烷、然后用甲醇的氨溶液/二氯甲烷洗脱。蒸发产物级分得到黄色泡沫状物(98g)。¹H-NMR(CDCl₃，旋转异构体混合物)δ0.9-1.0(6H，m)δ2.4-2.6(6H，m)，3.23/3.52(4H，2x t)，3，58/3.61(4H，2xs)，3.85(3H，s)，4.46/4.53/4.64/4.82(6H，4x s)，6.75/6.79(1H，2x s)，6.9(2H，m)，7.2-7.5(12H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝687/689；C₃₇H₄₀ClFN₆O₂S计算值686/688。

实施例7-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮盐酸盐

将实施例6的游离碱(8.7g，1当量)溶于二氯甲烷(50ml)中并在氩气氛下滴加1M的盐酸醚溶液(1当量)。将混合物蒸发到约一半体积并超声得到澄清溶液，将其转移到注射器中并在剧烈搅拌下滴加到醚(200ml)中。滤出白色固体，用醚洗涤并在真空下干燥得到8.55g。¹H-NMR(DMSO，约2∶1的旋转异构体混合物)δ1.14-1.24(6H，m)，3.1(6H，m)，3.6(2H，m)，3.76(3H，s)，4.38/4.45(2H，2x s)，4.61/4.70(2H，2x s)，4.98/5.11(2H，2x s)，6.75/6.79(1H，2x s)，7.1-7.7(15H，m)，10.15/10.75(1H，2x br s；MS(APCI+)实测值(M+1)＝687/689；C₃₇H₄₀ClFN₆O₂S计算值686/688。

实施例8-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮酒石酸氢盐

在搅拌下，将L-酒石酸(0.75g，1当量)的2-丙醇(12ml)溶液加到实施例6的游离碱(3.43g，1当量)的2-丙醇(25ml)溶液中。蒸发混合物至约三分之一体积，用醚稀释，然后滤出固体，用醚洗涤，真空干燥得3.87g。¹H-NMR(DMSO，约60∶40的旋转异构体混合物)δ0.9-1.1(6H，m)，2.5-2.8(4H，m)，3.2-3.4(6H，m)，3.76(3H，s)，4.20(2H，s)，4.39/4.43(2H，2x s)，4.60/4.67(2H，2x s)，4.92/5.08(2H，2x s)，7.1/7.7(15H，m)，MS(APCI+)实测值(M+1)＝687/689；C₃₇H₄₀ClFN₆O₂S计算值686/688。

实施例9-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮马来酸盐

在搅拌下，将马来酸(0.58g，1当量)的甲醇(10ml)溶液加到实施例6游离碱(3.43g，1当量)的甲醇(10ml)溶液中。蒸发混合物至约一半体积，用醚稀释，然后倾出上清液。油状物用醚研制得到固体，滤出固体，用醚洗涤，真空干燥得3.69g。¹H-NMR(DMSO，约3∶1的旋转异构体混合物)基本类似于实施例7，加上δ2.33(3H，s)，MS(APCI+)实测值(M+1)＝687/689；C₃₇H₄₀ClFN₆O₂S计算值686/688。

实施例10-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮甲苯磺酸盐

通过实施例9的方法，用甲苯磺酸(0.32ml，1当量)代替马来酸得到3.59g。¹H-NMR(DMSO，约3∶1的旋转并构体混合物)基本类似于实施例7，加上δ6.03(2H，s)，MS(APCI+)实测值(M+1)＝687/689；C₃₇H₄₀ClFN₆O₂S计算值686/688。

实施例11-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基-甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮牛磺胆酸盐

通过实施例9的方法，用牛磺胆酸(2.57g，1当量)代替马来酸得到5.56g。¹H-NMR(DMSO，约3∶1旋转异构体混合物)基本类似于实施例7，加上(除别的以外)δ0.58(3H，s)，0.81(3H，s)，0.91(3H，d)，1.14(3H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝687/689；C₃₇H₄₀ClFN₆O₂S计算值686/688。

实施例12-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)-氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮

通过实施例1的方法，用中间体A73和B71制备。¹H-NMR(CDCl₃，旋转异构体混合物)δ0.9-1.0(6H，m)δ2.4-2.6(6H，m)，3.24/3.4-3.6(4H，2x m)，3.85(3H，s)，4.46/4.53/4.66/4.83(6H，4x s)，6.75/6.8(1H，2x s)，6.9-7.0(2H，m)，7.3-7.7(12H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝721；C₃₈H₄₀F₄N₆O₂S计算值720。

实施例13-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)-氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮盐酸盐

将实施例12的游离碱(0.75g，1当量)溶于二氯甲烷(5ml)中并在氩气氛下滴加1M的盐酸醚溶液(1当量)，然后在剧烈搅拌下加入过量的醚。滤出白色固体，用醚洗涤并在真空下干燥得到0.73g。¹H-NMR(DMSO，约3∶1的旋转异构体混合物)δ1.1-1.2(6H，m)，3.1(6H，m)，3.37(2H+H₂O，m)，3.66(2H，m)，3.76(3H，s)，4.37/4.45(2H，2x s)，4.63/4.72(2H，2x s)，4.97/5.12(2H，2xs)，7.1(2H，m)，7.24/7.26(1H，2x s)，7.4-7.5(6H，m)，6.62/6.71(2H，2x d)，7.84(4H，m)，10.1/10.65(1H，2x br s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝721；C₃₈H₄₀F₄N₆O₂S计算值720。

实施例14-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)-氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮酒石酸氢盐

按实施例8的方法用实施例12的游离碱制得。¹H-NMR(DMSO，约60∶40的旋转异构体混合物)δ0.9-1.0(6H，m)，2.5-2.8(4H，m)，3.2-3.5(6H，m)，3.76(3H，s)，4.19(2H，s)，4.38/4.43(2H，2xs)，4.62/4.69(2H，2x s)，4.92/5.10(2H，2x s)，7.0-7.5(12H，m)，7.6/7.7(1H，2x d)，7.84(2H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝721；C₃₈H₄₀F₄N₆O₂S计算值720。

实施例15-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)-氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮柠檬酸盐

将实施例12的游离碱(0.69g，1当量)加到丙酮(10ml)中，然后加入柠檬酸(0.20g，1当量)。加热混合物使固体溶解，然后冷却，滤出固体并在真空下干燥得到0.80g，90％，m.p.130-133℃。¹H-NMR(d₆-DMSO，约1∶1旋转异构体混合物)基本类似于实施例14，加上δ2.61(2H，d)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝721；C₃₈H₄₀F₄N₆O₂S计算值720。

实施例16-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)-氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮甲苯磺酸盐

在室温下，将实施例12的游离碱(1.0g，1当量)和甲苯磺酸(0.26g，1当量)溶于丙酮(20ml)中，然后在搅拌下加入乙酸异丙酯(60ml)。再搅拌2小时后，将混合物放置过夜并滤出固体，用3∶1乙酸异丙基酯/丙酮洗涤，在真空下干燥得到0.87g，m.p.147℃。¹H-NMR(d₆-DMSO，约3∶1旋转异构体混合物)基本类似于实施例13，加上(除其它的以外)δ2.28(3H，s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝721；C₃₈H₄₀F₄N₆O₂S计算值720。

实施例17-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(2-(4-三氟甲基苯基)吡啶-5-基甲基)-氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮

在氩气氛、室温下，搅拌中间体A106(0.523g，1当量)、中间体B71(0.473g，1当量)、HATU(0.55g，1.2当量)、二异丙基乙基胺(0.622ml，2.4当量)和二氯甲烷(20ml)混合物过夜，然后用氯化铵水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤。有机层经干燥和蒸发并经色谱(硅胶，3-8％甲醇的二氯甲烷溶液)分离得到浅色泡沫状游离碱产物(0.39g)。¹H-NMR(CDCl₃，主要旋转异构体)δ0.94(6H，t)，2.47(4H，q)，2.58(2H，m)，3.26(2H，m)，3.61(2H，s)，3.85(3H，s)，4.52(2H，s)，4.66(2H，s)，4.82(2H，s)，6.78(1H，s)，6.98(2H，m)，7.3-7.4(4H，m)，7.6-7.8(2H，m)，8.08(2H，m)，8.57(1H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝722；C₃₇H₃₉F₄N₇O₂S计算值721。

实施例18-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(2-(4-三氟甲基苯基)吡啶-5-基甲基)-氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮盐酸盐

将实施例17的游离碱(0.373g，1当量)溶于二氯甲烷(10ml)中并在搅拌下滴加盐酸醚溶液(0.517ml，1.0M溶液，1当量)。在真空下除去溶剂，残余物用醚研制得到白色固体(0.362g)。¹H-NMR(DMSO，约60∶40的旋转异构体混合物)δ1.1-1.3(6H，m)，3.77(3H，s)，4.38/4.43(2H，s)，4.65/4.76(2H，s)，5.00/5.08(2H，s)，7.10(2H，m)，7.25(1H，m)，7.3-7.5(4H，m)，7.78(1H，m)，7.87(2H，d)，7.97/8.06(1H，d)，8.28(2H，d)，8.61/8.70(1H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝722；C₃₇H₃₉F₄N₇O₂S计算值721。

实施例19-1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(2-(4-三氟甲基苯基)吡啶-5-基甲基)-氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮酒石酸氢盐

通过实施例8的方法，用实施例17的游离碱制得。¹H-NMR(DMSO，约60∶40的旋转异构体混合物)δ0.88-1.05(6H，m)，3.76(3H，s)，4.39/4.42(2H，s)，4.65/4.74(2H，s)，4.97/5.10(2H，s)，7.11(2H，m)，7.25(1H，m)，7.3-7.5(4H，m)，7.78(1H，m)，7.87(2H，m)，7.98/8.07(1H，d)，8.28(2H，d)，8.61/8.70(1H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝722；C₃₇H₃₉F₄N₇O₂S计算值721。

实施例20-1-(N-(2-(1-哌啶基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮酒石酸氢盐

通过实施例1的方法，用中间体A108和B71制得游离碱，然后通过实施例8的方法转化成酒石酸氢盐。¹H-NMR(DMSO，约60∶40的旋转异构体混合物)δ1.3-1.6(6H，m)δ2.3-2.7(6H，m)，3.3-3.6(4H，m)，3.77(3H，s)，4.22(2H，s)，4.37/4.44(2H，2x s)，4.62/4.69(2H，2x s)，4.88/5.08(2H，2x s)，7.1-7.5(12H，m)，7.6/7.7(1H，2x d)，7.83(2H，m)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝733；C₃₉H₄₀F₄N₆O₂S计算值732。

实施例21-1-(N-(羧基甲基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基-甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮钠盐

将实施例102的化合物(130mg)加到碳酸氢钠(16mg)的水(4ml)溶液中并在室温下搅拌1小时。加入少量甲醇在加热和超声下形成透明溶液。过滤并冷冻干燥得到白色固体状目的钠盐。¹H-NMR(DMSO)δ3.49(2H，s)，3.76(3H，s)，4.42(2H，s)，4.85(2H，s)，7.14(2H，m)，7.26(1H，s)，7.36(3H，m)，7.49(3H，m)，7.60(2H，m)，7.84(4H，m)；MS(APCI-)实测值(M+1)＝678；C₃₄H₂₉F₄N₅O₄S计算值679。

实施例22-1-(N-(2-氨基乙基)-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮盐酸盐

Boc-保护的产物是通过实施例1的方法，由中间体A84和B71制备的，然后通过悬浮在二_烷中用过量的盐酸(4M的二_烷溶液)处理去保护。搅拌1小时后，加入过量醚并继续搅拌直至得到细的白色固体。过滤、用醚洗涤并干燥得到粗产品，粗产品用色谱纯化(硅胶，10-20％甲醇的二氯甲烷溶液)。¹H-NMR(DMSO，约60∶40旋转异构体混合物)δ2.97/3.04(2H，m)δ3.37(2H，m)，3.55(2H，m)，3.77(3H，s)，4.36/4.45(2H，2x s)，4.60/4.67(2H，2x s)，4.93/5.09(2H，2x s)，7.0-7.7(15H，m)，8.05/8.20(2H，2x br s)；MS(APCI+)实测值(M+1)＝733；C₃₉H₄₀F₄N₆O₂S计算值732。

实施例23-1-(N-甲基-N-(4-(4-氯苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(2-氧代嘧啶-5-基甲基)嘧啶-4-酮

在氩气氛、室温下，搅拌实施例121(0.73g，1.2mmol)、B-溴儿茶酚甲硼烷(1.01g，5.1mmol)和无水二氯甲烷(20ml)的混合物过夜得到透明的橙色溶液。加入水并继续搅拌30min。然后分出有机层并直接加到10g硅胶柱上，用0-14％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱。蒸发产物级分得到浅黄色固体(0.36g)。¹H-NMR(DMSO)δ2.80-3.06(3H，2xs)，3.37(2H，s)，4.33-4.49(2H，2xs)，4.50-4.72(2H，2xs)，4.87-5.06(2H，m)，7.04-7.75(13H，m)，8.19(2H，s)；MS(APCI-)实测值(M-1)＝614；C₃₂H₂₇N₅O₃SFCl计算值615。

下列实施例或者通过实施例1的方法(EDC偶联)或实施例15的方法(HATU偶联)制备；若已指明，其盐随后通过实施例7-8的适合的方法制备：

下列实施例通过实施例4的方法制备，其盐随后通过实施例7-8的适合的方法制备：

下列实施例通过实施例22的方法制备；其盐随后通过实施例7-8的适合的方法制备：

下列实施例通过实施例21的方法制备：

生物学数据

1.筛选对Lp-PLA₂的抑制作用

通过在37℃、于含有150mM NaCl、pH 7.4的50mM HEPES(N-2-羟基乙基哌嗪-N’-2-乙烷磺酸)缓冲液中测定合成底物(A)的翻转速率确定酶的活性。

测定在96孔板中进行。

用锌螯合柱、blue sepharose亲和性色谱和阴离子交换柱从杆状病毒感染的Sf9细胞中纯化Lp PLA₂重组体至均匀。在纯化和超滤后，置该酶于6mg/ml、4℃下保存。用自动机器人将化合物或载体加缓冲液的分析板设置成170μl。通过加入20μl的10x底物(A)启动反应，得到最终底物浓度为20μM和10μl稀释的酶得到最终0.2nM的LpPLA₂。

在405nm和37℃下用具有自动混合的多孔板记录器跟踪反应20分钟，通过吸光度的变化速率测定反应速率。

结果

按如上所述测定实施例中描述的化合物，IC₅₀值在0.001-0.00005μM范围内。

Claims (8)

1. 1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5-(1-甲基-4-吡唑基甲基)嘧啶-4-酮或其可药用盐，

2.权利要求1的化合物，该化合物呈其游离碱的形式。

3.权利要求1的化合物，该化合物呈盐酸盐的形式。

4.一种药物组合物，它包含权利要求1的化合物和可药用载体。

5.适用于口服给药的权利要求4的药物组合物。

6.权利要求1-3中任何一项的化合物或权利要求4或5的药物组合物在制备用于治疗与酶Lp-PLA₂活性有关的疾病状态的药物方面的用途。

7.权利要求1-3中任何一项的化合物或权利要求4或5的药物组合物在制备用于治疗动脉粥样硬化的药物方面的用途。

8.一种制备权利要求1的化合物的方法，该方法包括：

(a)式(II)的化合物：

与式(III)化合物在生成酰胺的条件下反应：

或者

(b)式(IV)化合物：

与式(V)化合物在碱的存在下，在惰性溶剂中反应：

其中L¹为离去基团；或者

(c)式(VI)化合物：

与式(VII)化合物在碱的存在下，在惰性溶剂中反应：

其中L¹如前所定义。