CN111419853B

CN111419853B - 一种治疗乳腺癌的葫芦素与依鲁替尼组合物

Info

Publication number: CN111419853B
Application number: CN202010459184.3A
Authority: CN
Inventors: 吴莹; 邓意辉; 邓吉林
Original assignee: Deliwei Beijing biological Technology Co ltd
Current assignee: Deliwei Beijing biological Technology Co ltd
Priority date: 2020-05-27
Filing date: 2020-05-27
Publication date: 2022-07-19
Anticipated expiration: 2040-05-27
Also published as: CN111419853A

Abstract

本发明涉及一种治疗乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌的药物组合物，包括葫芦素和依鲁替尼。本发明还涉及葫芦素联合依鲁替尼在制备治疗三阴乳腺癌药物中的用途。本发明葫芦素联合依鲁替尼，对乳腺癌特别是三阴性乳腺癌治疗具有显著的协同疗效，为此类疾病患者带来新的希望，同时为研发新型肿瘤药物提供了科学依据，应用前景较广。

Description

一种治疗乳腺癌的葫芦素与依鲁替尼组合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种包含葫芦素和依鲁替尼的药物组合物及其治疗乳腺癌特别是三阴性乳腺癌的用途。

背景技术

乳腺癌位居我国女性恶性肿瘤死亡率的首位。三阴性乳腺癌(triple negativebreast cancer，TNBC)是雌激素受体(estrogen receptor，ER)、孕激素受体(progesteronereceptor，PR)和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factorreceptor2，HER-2)均呈现阴性的乳腺癌，占乳腺癌发病率的15％。TNBC是乳腺癌的一种特殊亚型，肿瘤细胞缺乏ER、PR和HER-2有效的靶标，至今尚无较好的治疗方案。三阴性乳腺癌一般按乳腺癌常规靶向标准治疗进行，但治疗预后差、易发生侵袭转移，严重危及患者生命，死亡率高。

葫芦素(Cucurbitacins)属于19-甲基出现在C-9位上的一类四环三萜化合物，主要分布于葫芦科植物中，在十字花科、玄参科、秋海棠科、杜英科、四数木科等高等植物及一些大型真菌中也有发现。目前，我国批准生产的葫芦素(Cucurbitacin)为中药甜瓜蒂(别名：苦丁香)提取物，主要含葫芦素B、E等成分，现有的提取物中葫芦素B含量为60％以上。我国批准上市的葫芦素药物适应症为湿热毒盛所致迁延性肝炎、慢性肝炎及原发性肝癌的辅助治疗，目前上市剂型有葫芦素片剂和葫芦素胶囊两种。

已有研究公开了葫芦素可应用于治疗乳腺癌。期刊文献“葫芦素B体外对乳腺癌细胞的生长抑制作用研究”(张美侠等，《实用药物与临床》2010年01期)公开了通过体外实验发现葫芦素B对人乳腺癌细胞的增殖具有抑制作用，诱导乳腺癌细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤效应。专利文献WO2008071968A中公开了葫芦素尤其是葫芦素B通过调节信号转导通路来抑制癌细胞的生长，例如乳腺癌中细胞的生长。专利文献CN106074567A中公开了使用葫芦素B抑制蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)，从而激活其底物抑癌蛋白PP2A活性来治疗胃癌、乳腺癌、肺癌、及神经胶质瘤。至今未见有关葫芦素B治疗三阴性乳腺癌的报道。

依鲁替尼(Ibrutinib，也有叫伊布替尼)是Johnson Johnson公司和Pharmacyclics公司合作研发的全球首个上市的布鲁顿酪氨酸激酶(Bruton tyrosinekinase，BTK)选择性和共价抑制剂，获批适应症有3项：(1)套细胞淋巴瘤；(2)慢性淋巴细胞白血病；(3)有17p缺失的慢性淋巴细胞白血病。依鲁替尼已经被批准上市剂型为胶囊剂。期刊文献“Ibrutinib as a potential therapeutic option for HER2 overexpressingbreast cancer-the role of STAT3 and p21”(Prabaharan Chandra Bose等，《Investigational new drugs》2019年)公开了依鲁替尼作为酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，被证明是过表达HER2乳腺癌的有效治疗选择。但至今未见有关依鲁替尼治疗三阴性乳腺癌的报道。

组合药物的研制已成为现代药物研发的新趋势。关于葫芦素B和依鲁替尼联合用于乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌目前未有研究，对这两种药物的组合物进行研制可以为此类疾病患者提供新的治疗方法，亦为其他药物的组合提供新的研究策略。

发明内容

为克服上述现有技术的缺陷和不足，本发明提供了一种葫芦素与依鲁替尼的药物组合物及其应用。该组合物将葫芦素与依鲁替尼联合使用，对于乳腺癌的治疗具有显著的协同疗效，尤其是在治疗三阴性乳腺癌方面具有协同作用，具有意料不到的技术效果。

本发明的首要目的是提供一种药物组合物，所述药物组合物包含葫芦素或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐。

本发明所述葫芦素或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐可以各自以游离或溶剂合物形式存在。例如可以通过吸收空气中的水分而以水合物形式存在。溶剂合物没有特别限制，只要其是药学上可接受的。具体地，溶剂合物优选为水合物、乙醇溶剂合物等。所述药学上可接受的盐包括与合适的有机或无机酸/碱成盐。

本发明的一个实施方式中，所述葫芦素或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐可以作为活性成分包含在同一制剂中。在另一个实施方式中，所述葫芦素或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐包含在不同的制剂中并且同时或不同时间施用。

本发明所述葫芦素中包含葫芦素B，所述葫芦素中葫芦素B的纯度为1％～100％(例如5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％)。优选的，本发明所述葫芦素中葫芦素B的纯度大于90％。更优选的，所述葫芦素中葫芦素B的纯度为100％。

本发明所述药物组合物中，葫芦素(以葫芦素B计)与依鲁替尼的重量比为1:1～1:100。优选的，本发明所述药物组合物中，葫芦素(以葫芦素B计)与依鲁替尼的重量比为1:5～1:50。更优选的，本发明所述药物组合物中，葫芦素(以葫芦素B计)和依鲁替尼的重量比为1:10～1:40。

本发明所述药物组合物可以与药学上可接受的载体制成适于人或动物使用的任何剂型。例如可以将所述药物组合物直接混合做成制剂；或者将所述药物组合物中的葫芦素或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐分别与相应的载体混合分别做成制剂，然后再按照常规的方式包装或结合在一起；或者，所述药物组合物中的葫芦素或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐分别与相应的载体混合后，再混合做成制剂。药学上可接受的载体是指作为制剂材料使用的各种有机载体物质或无机载体物质。药学上可接受的载体可举例如下，包括但不限于固体制剂中的赋形剂、润滑剂、粘合剂以及崩解剂，或液状制剂中的溶剂、增溶剂、悬浮剂、等渗剂、缓冲剂、pH调节剂等。另外，可以根据需要使用防腐剂、抗氧化剂、着色剂以及甜味剂等添加剂。适于人或动物使用的任何剂型例如可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型包括但不限于溶液剂、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)；固体剂型包括但不限于片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸等；半固体剂型包括但不限于软膏剂、凝胶剂、糊剂等。

本发明的另一个目的是提供一种药物组合物在制备治疗乳腺癌疾病的药物中的用途。优选的，本发明提供一种药物组合物在制备治疗三阴性乳腺癌疾病的药物中的用途。所述药物组合物包含葫芦素或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐。

本发明的其它目的还包括提供一种治疗乳腺癌疾病尤其是三阴性乳腺癌的方法。所述方法包括给患者使用有效量的药物组合物。所述药物组合物包含葫芦素或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐。

本发明中提供的药物组合物或者药物可以根据患者的性别、年龄、体重以及症状等，适当确定给药量，以达到有效量。有效量是指达到所希望的结果所必需的药物组合物或药物的量，是实现治疗或处置的状态进展的延迟、抑制、预防、逆转或治愈所必需的量。

本发明所述药物组合物的给药量，通常如下，葫芦素或其药学上可接受的盐(葫芦素B计)剂量0.1～1mg/kg，优选0.2～0.8mg/kg，最优选0.3～0.6mg/kg；依鲁替尼或其药学上可接受的盐剂量1～50mg/kg，优选5～20mg/kg，最优选10mg/kg。可以一天一次或者分多次给药。当分多次给药药物组合物时，该药物组合物优选一天给药1～4次。另外，也可以以每天、每隔一天、每周一次、每隔一周、每月一次等各种给药频率对药物组合物进行给药。优选地，给药频率很容易由医生等确定。另外，根据需要，可以使用超出上述范围的量。

根据本发明所述的药物组合物，也可以与其它抗癌剂并用。并用是指在规定期间内将药物组合物和抗癌剂对同一患者给药。并用时，优选将药物组合物与抗癌剂在时间上同时给药，不过也可以在一个的效果仍然存在的期间给药另一个，在时间上前后分别单独给药。在并用中，药物组合物以及抗癌剂的给药途径可以相同，也可以不同。

并用的抗癌剂没有特别限制，只要对乳腺癌有效，作为抗癌剂可以列举，例如，烷基化剂、抗代谢剂、抗癌抗生素、植物生物碱、铂制剂(铂化合物制剂)、生物治疗剂、激素剂以及分子靶标药等。作为抗癌剂，具体可以列举顺铂、卡铂、奥沙利铂、环磷酰胺、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、阿霉素、伊立替康、盐酸吉西他滨、替加氟尿嘧啶、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、拉帕替尼、来那替尼、索拉非尼、吉非替尼、舒尼替尼、厄洛替尼、坦西莫司、依维莫司、哌泊赛克雷以及多西他赛等。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明将葫芦素(尤其是葫芦素B)和依鲁替尼联合使用，对乳腺癌特别是三阴性乳腺癌治疗具有显著的协同疗效，为此类疾病患者带来新的希望，同时为研发新型肿瘤药物提供了科学依据，应用前景较广。

(2)本发明将葫芦素(尤其是葫芦素B)和依鲁替尼组合，一方面可以多靶点、多通路调节抑制乳腺癌细胞的生长和增殖；另一方面葫芦素(尤其是葫芦素B)和依鲁替尼组合物联合使用，对细胞的毒副作用小，安全方面也有所保证。

具体实施方式

下面结合实施例，更具体地说明本发明的内容。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通与/或改变都将落入本发明保护范围。

实施例1注射液

处方：

依鲁替尼 40mg

F68 1000mg

灭菌注射用水加至5ml

制备方法：将处方量的依鲁替尼与F68置于烧杯中，加入适量乙醇并加热溶解，磁力搅拌下注入灭菌注射用水，调整体积至5ml，即得。

实施例2注射液

处方：

葫芦素B 1mg

F68 1000mg

灭菌注射用水加至5ml

制备方法：将处方量的纯度大于99％的葫芦素B与F68置于烧杯中，加入适量乙醇并加热溶解，磁力搅拌下注入灭菌注射用水，调整体积至5ml，即得。

实施例3注射液

处方：

制备方法：将处方量的依鲁替尼、纯度大于99％的葫芦素B与F68置于烧杯中，加入适量乙醇并加热溶解，磁力搅拌下注入灭菌注射用水，调整体积至5ml，即得。

实施例4注射液

处方：

制备方法参照实施例3。

实施例5注射液

处方：

制备方法参照实施例3。

实施例6注射液

处方：

制备方法参照实施例3。

实施例7片剂

处方：

制备方法：称取处方量的葫芦素B、依鲁替尼、乳糖和F68，混合均匀后，加入1000g淀粉制成的10％淀粉浆，喷雾制粒，再加入PVPP100g、硬脂酸镁100g、亚硫酸氢钠和枸橼酸，混合均匀后压制成10000片。

实验例1抗小鼠4T1乳腺癌细胞研究

实验材料：选择小鼠乳腺癌4T1细胞(中科院上海细胞库)作为三阴乳腺癌模型。

实验方法：从液氮中取出保存的小鼠乳腺癌4T1细胞冻存管，迅速置于37℃水中复苏。将复苏的4T1细胞悬液进行体外培养，在倒置显微镜下计数，当肿瘤细胞活度大于95％时加生理盐水稀释成细胞混悬液并调整稀释倍数。采用75％酒精消毒，将4T1细胞混悬液接种于Balb/c小鼠乳房垫上，共接种35只，将小鼠随机分成7组，每组5只。各组小鼠均于肿瘤体积到达100mm³后开始给药(给药剂量按照表1所示)，每3天1次，共给药5次(接种后第8、11、14、17与20天)，对照组给予0.9％氯化钠注射液。在整个药效学试验期间，记录肿瘤体积、体质量、死亡事件等数据。抑瘤率(％)＝(对照组肿瘤的平均质量－实验组肿瘤的平均质量)/对照组肿瘤的平均质量×100％。结果见表1。

表1葫芦素B和依鲁替尼对小鼠4T1抑制作用实验结果

实验结果：由表1可知，实施例1制剂(单独依鲁替尼)几乎没有抗三阴乳腺癌作用，实施例制剂4-6具有明显的抗三阴乳腺癌的协同作用。

实验例2不同葫芦素B给药剂量

选择1：20(葫芦素B与依鲁替尼的质量比)进行不同葫芦素B剂量的研究。

4T1肿瘤模型按照实验例1进行，细胞混悬液接种于Balb/c小鼠乳房垫上，共接种30只，将小鼠随机分成5组，每组6只。各组小鼠均于肿瘤体积到达100mm³后开始给药(腹腔注射)，每3天1次，共给药5次(接种后第8、11、14、17与20天)，对照组给予0.9％氯化钠注射液。在整个药效学试验期间，记录肿瘤体积、体质量、死亡事件等数据。抑瘤率(％)＝(对照组肿瘤的平均质量－实验组肿瘤的平均质量)/对照组肿瘤的平均质量×100％。结果见表2。

表2不同葫芦素B剂量抗小鼠4T1实验结果

由表2结果可知，虽然葫芦素B的剂量为1.0mg/kg的抑瘤率最高，但出现2只小鼠死亡的问题，因此，在联合治疗过程中，葫芦素B的最高剂量不超过1.0mg/kg。

Claims

1.一种治疗三阴性乳腺癌的药物组合物，所述药物组合物包含葫芦素B或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐；其中葫芦素B或其药学上可接受的盐以葫芦素B计和依鲁替尼或其药学上可接受的盐的重量比为1:40。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述葫芦素B的纯度大于90％。

3.如权利要求1或2所述的药物组合物，所述葫芦素B的纯度为100％。

4.如权利要求1-3任一项所述的药物组合物，所述葫芦素B或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐作为活性成分包含在同一制剂或不同制剂中。

5.如权利要求1-3任一项所述的药物组合物，所述药物组合物可以与药学上可接受的载体制成适于人或动物使用的剂型。

6.如权利要求5所述的药物组合物，所述剂型包括液体剂型、固体剂型或半固体剂型。

7.如权利要求6所述的药物组合物，所述液体剂型包括溶液剂、混悬剂、注射剂；固体剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸；半固体剂型包括软膏剂、凝胶剂、糊剂。

8.如权利要求5-7任一项所述的药物组合物，所述剂型包括水针剂、粉针剂、普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片、硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊。

9.一种药物组合物在制备治疗三阴性乳腺癌的药物中的用途，所述药物组合物包含葫芦素B或其药学上可接受的盐和依鲁替尼或其药学上可接受的盐；其中葫芦素B或其药学上可接受的盐以葫芦素B计和依鲁替尼或其药学上可接受的盐的重量比为1:40。

10.如权利要求9所述的用途，其中所述葫芦素B的纯度大于90％。

11.如权利要求9或10所述的用途，其中所述葫芦素B的纯度为100％。

12.如权利要求9-10任一项所述的用途，其中所述葫芦素B或其药学上可接受的盐以葫芦素B计的给药剂量为0.1～1mg/kg。

13.如权利要求9-10任一项所述的用途，其中所述葫芦素B或其药学上可接受的盐以葫芦素B计的给药剂量为0.2～0.8mg/kg

14.如权利要求9-10任一项所述的用途，其中所述葫芦素B或其药学上可接受的盐以葫芦素B计的给药剂量为0.3～0.6mg/kg。

15.如权利要求9-14任一项所述的用途，其中所述依鲁替尼或其药学上可接受的盐给药剂量为1～50mg/kg。

16.如权利要求9-14任一项所述的用途，其中所述依鲁替尼或其药学上可接受的盐给药剂量为5～20mg/kg。

17.如权利要求9-14任一项所述的用途，其中所述依鲁替尼或其药学上可接受的盐给药剂量为10mg/kg。