CN109699812A - 固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法 - Google Patents
固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109699812A CN109699812A CN201910139300.0A CN201910139300A CN109699812A CN 109699812 A CN109699812 A CN 109699812A CN 201910139300 A CN201910139300 A CN 201910139300A CN 109699812 A CN109699812 A CN 109699812A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- saccharomyces cerevisiae
- lactobacillus plantarum
- seed
- culture medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 title claims abstract description 41
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 title claims abstract description 10
- 238000010563 solid-state fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 70
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 70
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 49
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims abstract description 49
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 43
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 42
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims abstract description 42
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims abstract description 34
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims abstract description 33
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 7
- 241000209094 Oryza Species 0.000 claims description 48
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 48
- 108010089934 carbohydrase Proteins 0.000 claims description 22
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- LFVGISIMTYGQHF-UHFFFAOYSA-N ammonium dihydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].OP(O)([O-])=O LFVGISIMTYGQHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229910000387 ammonium dihydrogen phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 235000019837 monoammonium phosphate Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 10
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 claims description 10
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 9
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 9
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 9
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 8
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims description 8
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 7
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 238000012549 training Methods 0.000 claims description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 6
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 6
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 6
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 5
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 3
- YXVFQADLFFNVDS-UHFFFAOYSA-N diammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(C(=O)O)CC([O-])=O YXVFQADLFFNVDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims description 3
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims description 3
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 3
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 2
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- KCIDZIIHRGYJAE-YGFYJFDDSA-L dipotassium;[(2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] phosphate Chemical compound [K+].[K+].OC[C@H]1O[C@H](OP([O-])([O-])=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O KCIDZIIHRGYJAE-YGFYJFDDSA-L 0.000 claims 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 244000144977 poultry Species 0.000 abstract description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 4
- 244000144972 livestock Species 0.000 abstract description 4
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 4
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 abstract 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 abstract 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- SEGLCEQVOFDUPX-UHFFFAOYSA-N di-(2-ethylhexyl)phosphoric acid Chemical compound CCCCC(CC)COP(O)(=O)OCC(CC)CCCC SEGLCEQVOFDUPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- -1 nitrogenous small molecule Chemical class 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229940100486 rice starch Drugs 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
- Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
本发明涉及微生物发酵技术领域，旨在提供一种固态发酵生产饲用酿酒酵母‑植物乳杆菌混合产品的方法。包括：酿酒酵母种子液培养；植物乳杆菌的种子液培养；酿酒酵母有氧固体发酵培养；以及酿酒酵母和植物乳杆菌混合固体发酵。本发明制得的产品中，酿酒酵母、植物乳杆菌及其代谢产物同时作为添加剂加入饲料后，相比单纯菌体，更能促进畜禽的健康，从而也提高了本发明混合发酵产品的应用优势。本发明以脱脂米糠等易得、廉价农副产品为发酵原料，在生产酿酒酵母的同时生产植物乳杆菌，而且采用不灭菌的生料混合发酵方法，发酵后不用烘干，显著降低了产品的生产成本，可推动该产品在畜禽、水产等饲料中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及微生物发酵技术领域，尤其涉及以酿酒酵母和植物乳杆菌的一种混合微生物发酵的生产方法。
背景技术
酿酒酵母(Saccharomyces cercvisiae)是一种可食用微生物，也是常用的微生态制剂菌种。该菌的发酵培养物中除包含有酵母细胞和细胞外的代谢产物及自溶产物，如肽、有机酸、寡糖、氨基酸、增味物质和芳香物质等，还包含有许多经实践证明对畜禽生长有益的“未知生长因子”。经长达几十年的科学研究和生产应用实践证明，酵母发酵培养物可有效地调节动物肠道中微生物的数量和比例，抑制病原体，显著减少动物肠道中有害微生物的数量，改善其肠道菌群结构，降低腹泻率，并提高饲料转化率和日增重，改善动物健康状态，从而显著提高饲养动物的生产力水平。因此，酿酒酵母在饲料工业中具有广泛的应用前景。
植物乳杆菌这一类的乳酸菌已被证实具有改善动物肠道健康和提高免疫力的作用，其产生的乳酸和乳酸菌素可以直接作用于病原细菌，被认为是一种理想的促生长、替代抗生素的有益微生物，具有广阔的应用前景。
发明内容
本发明要解决的技术问题是，克服现有技术中的不足，提供一种固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法。该方法是以价格低廉、材料易得的农副产品为原料，辅以合理的发酵工艺，在生产酿酒酵母的同时，以较低成本生产植物乳杆菌。
为解决技术问题，本发明的解决方案是：
提供一种固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法，包括下述步骤：
(1)酿酒酵母种子液培养
将酿酒酵母菌株31015斜面菌种接入三角瓶种子培养基中，经30℃静止培养28h后成为三角瓶种子；按体积比5％的接种量将三角瓶种子接入装液量不超过25L卡氏罐(卡氏罐标准容积为30L)种子培养基中，经30℃静止培养20h，得到酿酒酵母卡氏罐种子(即固体发酵用种子液)；所述三角瓶及卡氏罐中的种子培养基均为糖化脱脂米糠培养基；
(2)植物乳杆菌的种子液培养
将植物乳杆菌菌株11016接入三角瓶种子培养基中，经37℃培养14h后成为三角瓶种子；按体积比1％的接种量将三角瓶种子接入装量为1L的蓝盖瓶种子培养基中，经37℃培养12h，得到植物乳杆菌固体发酵用种子液，在0～4℃保存；所述三角瓶及蓝盖瓶中的种子培养基均为MRS液体培养基；
(3)酿酒酵母有氧固体发酵培养
取步骤(1)中的卡氏罐种子液接入固体发酵培养基中，接入量为每100公斤培养基接入3～5升种子液；混合均匀后装入发酵曲盘中，发酵物料厚度为3cm左右，在30℃条件下在发酵室培养20h，得到酿酒酵母有氧固体发酵培物；
(4)酿酒酵母和植物乳杆菌混合固体发酵
取步骤(2)中植物乳杆菌固体发酵用种子液接入步骤(3)中酿酒酵母有氧固体发酵培物中，接入量以步骤(3)中用于接入卡氏罐种子液的固体发酵培养基的重量计，每100公斤固体发酵培养基接入1～2升种子液；混合均匀后装入呼吸袋，封口后在30℃条件下继续发酵24h；保温发酵完成后，移出发酵室，保持呼吸袋封口状态，无需烘干处理，即为酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品。
本发明中，所述步骤(1)和(2)中，按照500ml三角瓶装量为300ml在三角瓶中加入培养基。
本发明中，所述步骤(1)中，所述糖化脱脂米糠培养基通过下述方法制备获得：
将脱脂米糠粉碎，加至6倍重量的60℃水中；按每克脱脂米糠添加100单位的比例加入糖化酶，在58～60℃保温糖化；持续搅拌小时后，用四层纱布过滤除去残渣，煮沸后用再用四层纱布过滤一次，即得澄清的脱脂米糠糖化液；加水使脱脂米糠糖化液体积与添加糖化酶之前的体积保持一致；然后加入磷酸二氢铵，添加比例为每升脱脂米糠糖化液中添加5g；混匀后灌装，在105℃灭菌20min，即得糖化脱脂米糠培养基。
本发明中，所述步骤(2)中，所述MRS液体培养基中通过以下方式制备获得：
按以下比例取各组分：葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、牛肉浸膏10g/L、酵母浸膏5g/L、磷酸氢二钾2g/L、柠檬酸二铵2g/L、乙酸钠5g/L、吐温1g/L、硫酸镁0.58g/L、硫酸锰0.25g/L，余量为水；调节pH为6.2，在121℃灭菌15min，即得到MRS液体培养基。
本发明中，所述步骤(3)中，固体发酵培养基通过下述方法配制而成：
按重量份100∶1～2∶75～85取脱脂米糠、磷酸二氢铵和自来水，按每克脱脂米糠添加150酶活单位的比例取糖化酶；将糖化酶先溶于部分自来水中，再将其与其余组分混合均匀，无需灭菌，即得到固体发酵培养基。
发明原理描述：
本发明先将酿酒酵母和植物乳杆菌分别制备成种子，再按一定比例以及时间间隔先后接种，进行混合固体发酵。由于脱脂米糠中加入了一定量的糖化酶，糖化酶能将脱脂米糠中的淀粉进行分解，生成酿酒酵母能利用的葡萄糖等小分子物质。这样酿酒酵母就利用葡萄糖和磷酸二氢铵等营养物质进行有氧发酵，酵母菌体不断地生长繁殖。当酿酒酵母进行生长繁殖的同时时，能产生大量的小分子代谢产物，这些代谢物能促进植物乳杆菌的生长；发酵过程中还有一部分酵母由于老化等原因而自溶，会产生一些氨基酸等含氮小分子有机物，植物乳杆菌就能利用这些氨基酸和葡萄糖等小分子物质。在发酵培养基中糖化酶分解淀粉产生的葡萄糖、酵母生长产生的代谢物以及自溶物，这些为植物乳杆菌的高效生长繁殖能连续不断地提供所需营养物质。植物乳杆菌在生长繁殖的同时能产生乳酸和乳酸菌素等大量有益动物肠道健康的物质。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本发明制得的产品中，酿酒酵母、植物乳杆菌及其代谢产物同时作为添加剂加入饲料后，相比单纯菌体，更能促进畜禽的健康，从而也提高了本发明混合发酵产品的应用优势。
2、本发明以脱脂米糠等易得、廉价农副产品为发酵原料，在生产酿酒酵母的同时生产植物乳杆菌，而且采用不灭菌的生料混合发酵方法，发酵后不用烘干，显著降低了产品的生产成本，可推动该产品在畜禽、水产等饲料中的应用。
具体实施方式
本发明使用的酿酒酵母(Saccharomycescercvisiae)菌株31015和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)菌株11016均属现有技术，申请人系引进自中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)，社会公众亦可通过其他公开途径获得。因菌株本身不属于本发明创新内容，故不再详细介绍。
下面通过具体实施例对本发明作进一步的详细说明，但其发明内容并不受这些内容所限制。
各实施例中所用糖化脱脂米糠培养基通过下述方法制备获得：取一定数量脱脂米糠，粉碎，加6倍于脱脂米糠重量的60℃水，加入糖化酶，每克脱脂米糠糖化酶的添加量为100单位，在58～60℃保温糖化，不断搅拌，经4小时后，用四层纱布过滤，除去残渣，煮沸后用再用四层纱布过滤一次，即得澄清脱脂米糠糖化液，补足水分，使脱脂米糠糖化液量与与添加糖化酶之前的体积保持一致，再加入磷酸二氢铵使每升脱脂米糠糖化液中含量为5g/L。
各实施例中所用MRS液体培养基，其组分包括(g/L)：葡萄糖20，蛋白胨10，牛肉浸膏10，酵母浸膏5，磷酸氢二钾2，柠檬酸二铵2，乙酸钠5，吐温1，硫酸镁0.58，硫酸锰0.25，调pH为6.2，121℃灭菌15min。
实施例1
(1)酿酒酵母(Saccharomyces cercvisiae菌株编号CICC 31015)的种子液培养：
灌装三角瓶及卡氏罐后105℃、灭菌20分钟即得糖化脱脂米糠三角瓶种子培养基及卡氏罐的种子培养基；将酿酒酵母斜面菌种接入三角种子瓶培养基中，500ml三角瓶培养基装量为300ml，经30℃静止培养28h后成为三角瓶种子；按体积比5％的接种量将三角瓶种子接入装液量不超过25L卡氏罐种子培养基中，经30℃静止培养20h成酿酒酵母卡氏罐种子，也就是固体发酵用种子液，备用；
(2)植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum菌株编号CICC 11016)的种子液培养：
将植物乳杆菌菌种接入三角瓶培养基中，在500ml三角瓶中装入300ml培养基，经37℃培养14h后成为三角瓶种子。按体积比1％的接种量将三角瓶种子接入装量为1L的蓝盖瓶培养基中，经37℃培养12h后成为植物乳杆菌固体发酵用种子液，于0～4℃保存，备用。上述三角瓶及蓝盖瓶的种子培养基均采用MRS液体培养基。
(3)酿酒酵母有氧固体发酵培养：
取步骤(1)卡氏罐种子液，按每100公斤脱脂米糠接入5升种子液的量接入固体发酵培养基中，混合均匀，装入发酵曲盘中，发酵物料厚度为3cm左右，于30℃室温条件下在发酵室发酵培养20h，备用。
固体发酵培养基通过下述方式获得：取脱脂米糠、磷酸二氢铵、糖化酶加自来水混合，无需灭菌，成固体发酵培养基，固体发酵培养基中各组分含量分别为：脱脂米糠∶磷酸二氢铵∶自来水按重量份100∶1∶75比例配制而成；糖化酶添加量为每克脱脂米糠添加150酶活单位，使用时先将糖化酶在水中溶解。
(4)酿酒酵母和植物乳杆菌混合固体发酵：
取步骤(3)酿酒酵母有氧固体发酵培物，按发酵前脱脂米糠重量计，每100公斤脱脂米糠接入2升步骤(2)植物乳杆菌种子液的量进行混合，混合后装入呼吸袋，封口后于30℃室温条件下继续发酵24h，保温发酵完成后，移出发酵室，保持呼吸袋封口状态，无需烘干处理，即为产品。
实施例2
本实施例步骤(3)中，取脱脂米糠、磷酸二氢铵、糖化酶加自来水混合，无需灭菌，成固体发酵培养基，固体发酵培养基中各组分含量分别为：脱脂米糠∶磷酸二氢铵∶自来水按重量份100∶1.5∶85比例配制而成；糖化酶添加量为每克脱脂米糠添加150酶活单位，使用时先将糖化酶在水中溶解。取步骤(1)卡氏罐种子液，按每100公斤脱脂米糠接入3升种子液的量接入固体发酵培养基中，混合均匀，装入发酵曲盘中，发酵物料厚度为3cm左右，于30℃室温条件下在发酵室发酵培养20h，备用；
步骤(4)中，取步骤(3)酿酒酵母有氧固体发酵培物，按发酵前脱脂米糠重量计，每100公斤脱脂米糠接入1升步骤(2)植物乳杆菌种子液的量进行混合，混合后装入呼吸袋，封口后于30℃室温条件下继续发酵24h，保温发酵完成后，移出发酵室，保持呼吸袋封口状态，无需烘干处理，即为产品。
其余工艺、步骤同实施例1。
实施例3
本实施例步骤(3)中，取脱脂米糠、磷酸二氢铵、糖化酶加自来水混合，无需灭菌，成固体发酵培养基，固体发酵培养基中各组分含量分别为：脱脂米糠∶磷酸二氢铵∶自来水按重量份100∶2∶80比例配制而成；糖化酶添加量为每克脱脂米糠添加150酶活单位，使用时先将糖化酶在水中溶解。取步骤(1)卡氏罐种子液，按每100公斤脱脂米糠接入4升种子液的量接入固体发酵培养基中，混合均匀，装入发酵曲盘中，发酵物料厚度为3cm左右，于30℃室温条件下在发酵室发酵培养20h，备用；
步骤(4)中，取步骤(3)酿酒酵母有氧固体发酵培物，按发酵前脱脂米糠重量计，每100公斤脱脂米糠接入1.5升步骤(2)植物乳杆菌种子液的量进行混合，混合后装入呼吸袋，封口后于30℃室温条件下继续发酵24h，保温发酵完成后，移出发酵室，保持呼吸袋封口状态，无需烘干处理，即为产品。
其余工艺、步骤同实施例1。
使用方法：
本发明制备获得的饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品作为饲料添加剂使用，可按照0.4～0.6％的重量百分比将本产品加入到饲料中，混合均匀即可。
Claims (5)
1.一种固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法，其特征在于，包括下述步骤：
(1)酿酒酵母种子液培养
将酿酒酵母菌株31015斜面菌种接入三角瓶种子培养基中，经30℃静止培养28h后成为三角瓶种子；按体积比5％的接种量将三角瓶种子接入装液量不超过25L的卡氏罐种子培养基中，经30℃静止培养20h，得到酿酒酵母卡氏罐种子；所述三角瓶及卡氏罐中的种子培养基均为糖化脱脂米糠培养基；
(2)植物乳杆菌的种子液培养
将植物乳杆菌菌株11016接入三角瓶种子培养基中，经37℃培养14h后成为三角瓶种子；按体积比1％的接种量将三角瓶种子接入装量为1L的蓝盖瓶种子培养基中，经37℃培养12h，得到植物乳杆菌固体发酵用种子液，在0～4℃保存；所述三角瓶及蓝盖瓶中的种子培养基均为MRS液体培养基；
(3)酿酒酵母有氧固体发酵培养
取步骤(1)中的卡氏罐种子液接入固体发酵培养基中，接入量为每100公斤培养基接入3～5升种子液；混合均匀后装入发酵曲盘中，发酵物料厚度为3cm，在30℃条件下在发酵室培养20h，得到酿酒酵母有氧固体发酵培物；
(4)酿酒酵母和植物乳杆菌混合固体发酵
取步骤(2)中植物乳杆菌固体发酵用种子液接入步骤(3)中酿酒酵母有氧固体发酵培物中，接入量以步骤(3)中用于接入卡氏罐种子液的固体发酵培养基的重量计，每100公斤固体发酵培养基接入1～2升种子液；混合均匀后装入呼吸袋，封口后在30℃条件下继续发酵24h；保温发酵完成后，移出发酵室，保持呼吸袋封口状态，无需烘干处理，即为酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)和(2)中，按照500ml三角瓶装量为300ml在三角瓶中加入培养基。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述糖化脱脂米糠培养基通过下述方法制备获得：
将脱脂米糠粉碎，加至6倍重量的60℃水中；按每克脱脂米糠添加100单位的比例加入糖化酶，在58～60℃保温糖化；持续搅拌小时后，用四层纱布过滤除去残渣，煮沸后用再用四层纱布过滤一次，即得澄清的脱脂米糠糖化液；加水使脱脂米糠糖化液体积与添加糖化酶之前的体积保持一致；然后加入磷酸二氢铵，添加比例为每升脱脂米糠糖化液中添加5g；混匀后灌装，在105℃灭菌20min，即得糖化脱脂米糠培养基。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述MRS液体培养基中通过以下方式制备获得：
按以下比例取各组分：葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、牛肉浸膏10g/L、酵母浸膏5g/L、磷酸氢二钾2g/L、柠檬酸二铵2g/L、乙酸钠5g/L、吐温1g/L、硫酸镁0.58g/L、硫酸锰0.25g/L，余量为水；调节pH为6.2，在121℃灭菌15min，即得到MRS液体培养基。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，固体发酵培养基通过下述方法配制而成：
按重量份100∶1～2∶75～85取脱脂米糠、磷酸二氢铵和自来水，按每克脱脂米糠添加150酶活单位的比例取糖化酶；将糖化酶先溶于部分自来水中，再将其与其余组分混合均匀，无需灭菌，即得到固体发酵培养基。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910139300.0A CN109699812A (zh) | 2019-02-24 | 2019-02-24 | 固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910139300.0A CN109699812A (zh) | 2019-02-24 | 2019-02-24 | 固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109699812A true CN109699812A (zh) | 2019-05-03 |
Family
ID=66263905
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910139300.0A Pending CN109699812A (zh) | 2019-02-24 | 2019-02-24 | 固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109699812A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112544787A (zh) * | 2020-11-02 | 2021-03-26 | 浙江大学 | 菌酶协同发酵构树复合饲料的方法及其复合饲料 |
| CN112646736A (zh) * | 2020-12-15 | 2021-04-13 | 北京化工大学 | 生物乙醇发酵中植物乳杆菌提高酿酒酵母乙醇耐受力的方法 |
| CN113907187A (zh) * | 2021-11-01 | 2022-01-11 | 山东省烟台市农业科学研究院 | 一种复合微生物饲料添加剂及其制备方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101708031A (zh) * | 2009-12-07 | 2010-05-19 | 浙江省农业科学院 | 一种抗应激促生长饲料添加剂的生产方法 |
| CN102488089A (zh) * | 2011-11-18 | 2012-06-13 | 吉林省农业科学院 | 微生态培养物饲料添加剂的制备方法 |
| CN102618609A (zh) * | 2012-03-26 | 2012-08-01 | 郑州凯乐生物能有限公司 | 一种综合利用脱脂米糠的方法 |
| WO2015180176A1 (zh) * | 2014-05-26 | 2015-12-03 | 上海创博食品技术发展有限公司 | 一种利用亚洲鲤鱼制得的蛋白饲料原料及其制备方法 |
| CN105941899A (zh) * | 2016-04-27 | 2016-09-21 | 浙江省农业科学院 | 一种断奶仔猪用复合微生态制剂的生产方法 |
| CN107853452A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-03-30 | 广西塔锡科技有限公司 | 一种微生物饲料添加剂的生产方法 |
-
2019
- 2019-02-24 CN CN201910139300.0A patent/CN109699812A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101708031A (zh) * | 2009-12-07 | 2010-05-19 | 浙江省农业科学院 | 一种抗应激促生长饲料添加剂的生产方法 |
| CN102488089A (zh) * | 2011-11-18 | 2012-06-13 | 吉林省农业科学院 | 微生态培养物饲料添加剂的制备方法 |
| CN102618609A (zh) * | 2012-03-26 | 2012-08-01 | 郑州凯乐生物能有限公司 | 一种综合利用脱脂米糠的方法 |
| WO2015180176A1 (zh) * | 2014-05-26 | 2015-12-03 | 上海创博食品技术发展有限公司 | 一种利用亚洲鲤鱼制得的蛋白饲料原料及其制备方法 |
| CN105941899A (zh) * | 2016-04-27 | 2016-09-21 | 浙江省农业科学院 | 一种断奶仔猪用复合微生态制剂的生产方法 |
| CN107853452A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-03-30 | 广西塔锡科技有限公司 | 一种微生物饲料添加剂的生产方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 侍宝路等: "混菌固态发酵豆渣生产酸化饲料工艺条件研究", 《饲料工业》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112544787A (zh) * | 2020-11-02 | 2021-03-26 | 浙江大学 | 菌酶协同发酵构树复合饲料的方法及其复合饲料 |
| CN112646736A (zh) * | 2020-12-15 | 2021-04-13 | 北京化工大学 | 生物乙醇发酵中植物乳杆菌提高酿酒酵母乙醇耐受力的方法 |
| CN113907187A (zh) * | 2021-11-01 | 2022-01-11 | 山东省烟台市农业科学研究院 | 一种复合微生物饲料添加剂及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102160595B (zh) | 一种复合微生物发酵活性饲料的制备工艺 | |
| CN101703105B (zh) | 一种糙米酵素酸奶的制备方法 | |
| CN103173371B (zh) | 酿酒酵母与嗜酸乳杆菌的饲料用复合微生物制剂的生产 | |
| CN102687792A (zh) | 一种基于啤酒糟和米糠粕的饲用微生态制剂 | |
| CN106974063B (zh) | 一种以饲用酶协同凝结芽孢杆菌生产高效蛋白饲料的方法 | |
| CN111172077A (zh) | 一种调节生猪肠道菌群的微生物制剂及制备方法 | |
| CN104664154B (zh) | 酵母培养物及其制备方法 | |
| CN103602590A (zh) | 液态发酵制取功能性红曲菌丝体和发酵液的方法及制品 | |
| CN109666599A (zh) | 一种罗伊氏乳杆菌高密度发酵培养基及发酵方法、应用 | |
| CN102960541B (zh) | 一种利用白酒糟和糖蛋白生产环保型生物饲料的方法 | |
| CN104004675A (zh) | 一种利用酒精工业黄水生产乳酸菌的方法 | |
| CN109699812A (zh) | 固态发酵生产饲用酿酒酵母-植物乳杆菌混合产品的方法 | |
| CN106520584A (zh) | 酵母菌和乳酸菌共培养用培养基及其制备方法 | |
| CN101836688B (zh) | 一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法 | |
| CN107509532A (zh) | 一种富含多糖香菇的栽培方法 | |
| CN104855674A (zh) | 组合菌种联合转化的微生物发酵全价饲料生产方法 | |
| CN109971682A (zh) | 一种用于水产养殖的em菌液及其制作方法和应用 | |
| CN113215051A (zh) | 一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法 | |
| CN105176870B (zh) | 一种固体发酵生产饲用凝结芽孢杆菌的方法 | |
| CN107853452A (zh) | 一种微生物饲料添加剂的生产方法 | |
| CN107594416A (zh) | 一种发酵槟榔的加工方法 | |
| KR101082838B1 (ko) | 제과, 제빵 및 제면부산물을 이용한 효모균 미생물제 | |
| CN102453679B (zh) | 一种用于生物发酵的发酵液及其制备方法 | |
| CN109123076A (zh) | 一种畜禽用维生素b2营养型微生态制剂的生产方法 | |
| CN103392920A (zh) | 一种大豆皮的发酵方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190503 |