CA3060365A1

CA3060365A1 - Derives amides des acides polycafeoylquiniques, procede de preparation et utilisations

Info

Publication number: CA3060365A1
Application number: CA3060365A
Authority: CA
Inventors: Damien Boeglin; Pierre WARNAULT
Original assignee: Warnault Pierre; Temisis
Current assignee: Temisis
Priority date: 2016-04-26
Filing date: 2017-04-26
Publication date: 2017-11-02
Also published as: JP2019515036A; EP3448376A1; WO2017186779A1; US10786690B2; FR3050455A1; CN109640974A; NZ748656A; FR3050455B1; IL262602A; AU2017256698B2; RU2742769C2; JP6945618B2; IL262602B; BR112018072015A2; ZA201807761B; RU2018141186A; AU2017256698A1; KR20190021213A; CN115197090A; RU2018141186A3

Abstract

La présente invention concerne donc des dérivés amides d 'acides quiniques poly substitués (abrégé en «QPS »), de formule générale (IA) : (IA), dans laquelle - R1A et R2A représentent indépendamment l'un de l'autre : H, sous réserve que R1A et R2A ne sont pas tous les deux un atome d 'hydrogène, Un groupement butyle, un groupement alkyle en C7-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou un groupement aryle en C7-C18; et - Q1, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables, ainsi que leur procédé de préparation, leur utilisation en tant que médicament, notamment pour le traitement et/ou la prévention de l'inflammation et des maladies inflammatoires, et les compositions pharmaceutiques, cosmétiques ou nutraceutiques les contenant.

Description

DERIVES AMIDES DES ACIDES POLYCAFEOYLQUINIQUES, PROCEDE DE PREPARATION ET
UTILISATIONS
DOMAINE DE L'INVENTION
La présente invention concerne des dérivés amides d'acides quiniques poly substitués (abrégé en QPS ), ainsi que leur procédé de préparation, leur utilisation en tant que médicament, notamment pour le traitement et/ou la prévention de l'inflammation, et les compositions pharmaceutiques, cosmétiques ou nutraceutiques les contenant.
ART ANTERIEUR
L'inflammation est un ensemble de réactions générées par l'organisme en réponse à une agression subie.
L'inflammation peut être causée par des agressions physiques (comme le chaud, le froid, les radiations ionisantes) ou chimiques (occasionnées par des composés acides ou basiques, des toxines bactériennes). Elle peut également être la conséquence d'une infection (en rapport avec la présence dans l'organisme d'organismes vivants pathogènes tels que bactéries, virus, parasites ou champignons). Elle peut aussi être provoquée par une réaction immunitaire secondaire à la réintroduction dans l'organisme d'un antigène (allergie) tel qu'un antibiotique. Elle est enfin souvent la conséquence d'une nécrose tissulaire, elle-même secondaire à de nombreuses causes, par exemple une occlusion artérielle.
La réaction inflammatoire a pour but la défense de l'organisme et l'inflammation lorsqu'elle est visible se manifeste classiquement par quatre signes cliniques : une rougeur, une douleur, une tuméfaction et/ou une augmentation de la chaleur.
Le déroulement du processus inflammatoire évolue en trois stades successifs :
- un stade caractérisé par les réactions vasculo-sanguines ;
- un stade caractérisé par les réactions cellulaires (phase productive) ;
- un stade de cicatrisation ou de régénération.
Il existe deux types d'inflammation, l'inflammation aiguë et l'inflammation chronique. L'inflammation aiguë correspond à l'élimination de l'agent responsable de l'inflammation ainsi que la réparation du tissu abîmé. Ses manifestations sont multiples :
des rougeurs de la peau lors d'une brûlure, le gonflement de l'amygdale pendant une angine, une inflammation articulaire lors d'une entorse ou encore la survenue de la toux

2 PCT/EP2017/059898 lors d'une bronchite pour éliminer les agents pathogènes. Elle est réversible en quelques minutes voire en quelques jours.
L'inflammation chronique correspond à une inflammation de durée prolongée, due à la persistance du ou des facteurs d'agression, à laquelle l'organisme n'arrive plus à
mettre fin spontanément et qui peut devenir néfaste pour l'organisme. Les facteurs prédisposant sont une agression persistante (telle que l'acide gastrique dans l'ulcère peptique), une réponse inadéquate de l'hôte à l'infection, une maladie auto-immune chronique (telle que la polyarthrite rhumatoïde ou la colite ulcéreuse). C'est l'inflammation et ses conséquences qui deviennent la maladie elle-même, souvent grave et invalidante. Chaque organe peut être concerné par cette inflammation chronique: tube digestif (maladie de Crohn), poumons (asthme), peau (psoriasis), muqueuses de la cavité
nasale (rhinite), vaisseaux (accidents vasculaires), système nerveux (scléroses en plaques), articulations (tous les rhumatismes). Une meilleure connaissance de l'inflammation chronique a également mis en évidence sa présence, dans des situations où d'autres mécanismes sont en cause : cancers, immunité de greffe, dégénérescence maculaire liée à l'âge (DMLA) etc.
Les cellules présentes dans le tissu infecté ou lésé, telles que les phagocytes mononucléés résidents (macrophages et cellules dendritiques) et les mastocytes, sont les premières cellules activées par des signaux de dangers. En réponse à cette activation, elles libèrent des composés actifs nommés médiateurs de l'inflammation, tels que l'histamine, des cytokines pro-inflammatoires et des leucotriènes ou des prostaglandines.
Les conséquences fonctionnelles de cette activation sont l'élimination du pathogène (par ex. par phagocytose) et/ou la réparation de la lésion (remodelage de la matrice extracellu lai re).
Les cytokines sont des petites protéines sécrétées par les cellules en réponse à
divers stimuli. Au niveau de la réponse immunitaire, elles permettent la communication entre les cellules immunes et l'orientation de la réponse en fonction de la nature du signal détecté. Parmi les cytokines médiatrices de l'inflammation, on peut citer l'Interleukine-6 (IL-6), l'Interleukine-8 (IL-8) et le Facteur de Nécrose Tumorale a (Tumor Necrosis Factor, TNFa).
L'IL-6 est produite par les phagocytes (macrophages et cellules dendritiques) et les cellules endothéliales en cas d'inflammation. Elle induit localement l'activation des phagocytes et la modification de l'endothélium. Elle favorise le recrutement de monocytes sanguins vers les tissus et la production de protéines de la phase aiguë par les hépatocytes.
L'IL-8 (IL-8 ou CX-CL8) est produite en particulier par les cellules épithéliales suite à la détection d'agents microbiologiques ou chimiques potentiellement pathogènes. Son

3 PCT/EP2017/059898 rôle principal est d'assurer le recrutement des polynucléaires neutrophiles sur le site de l'infection par la création d'un gradient chémotactique qui guide les cellules phagocytaires comportant des récepteurs correspondants à leur surface.
Le TNFa est produit par les macrophages, les cellules dendritiques résidentes et les mastocytes. Le TNFa stimule l'expression de molécules d'adhérence et la production de chimiokines par les cellules endothéliales permettant le recrutement des leucocytes sanguins (neutrophiles, éosinophiles, monocytes ou les lymphocytes NK) vers le foyer inflammatoire. Le TNFa active aussi les systèmes microbicides des phagocytes et est mitogène pour les lymphocytes T et B (pour la mise en place de la réponse adaptative si la réponse innée n'est pas suffisante à la résolution de l'infection). Enfin, le TNFa active la production de facteurs de croissance, qui seront indispensables à la réparation du tissu endommagé.
Les prostaglandines, notamment la prostaglandine E2 (PGE2), et les leukotriènes, notamment le leukotriène B4 (LTB4), sont des médiateurs lipidiques de l'inflammation et induisent l'augmentation de la dilatation des vaisseaux et leur perméabilité, facilitant l'arrivée des leucocytes sur le site de l'inflammation.
Certains dérivés de l'acide caféique, tel que l'ester caféate de phénéthyle (CAPE), sont reconnus comme d'importants inhibiteurs des médiateurs de l'inflammation et notamment des LTB4 (Fitzpatrick et al.). Ces dérivés sont aussi reconnus pour leur effet cytoprotecteur, notamment grâce à l'induction de la production de l'hème oxygénase-1 (H0-1) (Xinyu Wang et al.).
L'HO-1 joue un rôle crucial dans la cytoprotection contre le stress oxydatif cellulaire. Elle est hautement inductible par divers stimuli qui provoquent un stress cellulaire. Comme l'enzyme limite la vitesse de métabolisme de l'hème, la HO-1 exerce ses effets protecteurs en maintenant des niveaux appropriés de l'hème cellulaire et la libération des molécules bioactives, notamment la biliverdine, le fer libre et le monoxyde de carbone. La biliverdine et sa forme réduite, la bilirubine, sont de puissants antioxydants qui peuvent contribuer aux effets bénéfiques de l'HO-1 (Barahano et al, 2002; Stocker et al, 1987.). Le monoxyde de carbone a un effet sur la médiation de la protection de l'HO-1 et présentent des effets anti-inflammatoire et anti-apoptotiques (Otterbein et al., 2003).
Les acides dicaféoylquiniques, notamment les acides 3,4-0-dicaféoylquinique et

4,5-0-dicaféoylquinique, sont également connus dans l'art pour leur activité
anti-inflammatoire. Ces composés sont notamment connus pour inhiber la synthèse des leukotriènes B4 (LTB4) et la production d'IL-8 (Gianfranco Peluso et al.).
L'acide 3,4,5-tricafféoylquinique inhibe la production de médiateurs de l'inflammation (en particulier les cytokines et chemokines) dans des Keratinocytes traités avec du Lipopolysaccharide impliqué dans la pathogénie des maladies inflammatoires de la peau (Lee, SA et al.).
Cependant, d'autres dérivés de l'acide caféique, tel que le méthyle caféate ou l'acide chlorogénique, ont été montré comme n'ayant pas d'effet anti-inflammatoire significatif (Xinyu Wang et al.), ce qui montre que de petites variations de structure peuvent conduire à une abolition des capacités anti-inflammatoires.
Il existe un besoin pour de nouveaux composés permettant d'inhiber les médiateurs de l'inflammation et d'induire un effet cytoprotecteur encore plus puissant que ceux décrit dans l'art antérieur.
EP 2 128 125 décrit les effets anti-viraux de certains dérivés amides d'acides dicaféoylquiniques, et leur utilisation, notamment dans le traitement de l'infection par le virus du VIH, le virus de l'hépatite B et le virus respiratoire syncytial.
Les capacités anti-inflammatoires de ces composés n'ont pas été évaluées.
De façon surprenante, les inventeurs ont mis en évidence que de nouveaux dérivés amides de PCQ ont non seulement des capacités anti-inflammatoires mais que celles-ci sont significativement supérieures à celle des acides dicaféoylquiniques.
RESUME DE L'INVENTION
D'une manière surprenante, les inventeurs ont découvert que certains dérivés amides de QPS présentent des effets anti-inflammatoires remarquables et peuvent être utilisés dans le traitement de l'inflammation. Les inventeurs ont également découvert que les dérivés amides de QPS présentent un potentiel cytoprotecteur majeur, notamment sur des cellules en état inflammatoire.
Dans un premier aspect, la présente invention concerne donc un composé (dérivé

amide de QPS ou un mélange de composés de formule générale (IA) :
RIA,..,... ........R2A
N
QI

(IA) dans laquelle = Rip et R2A représentent indépendamment l'un de l'autre :
- H, sous réserve que Rip et R2A ne sont pas tous les deux un atome d'hydrogène,

5 PCT/EP2017/059898 - Un groupement butyle, - un groupement alkyle en C7-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou - un groupement aryle en C7-C18;
et = Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables.
Dans un second aspect, l'invention concerne un procédé de préparation d'un composé de formule générale (IA) RIAR

(IA), dans laquelle = RiA et R2A représentent indépendamment l'un de l'autre :
- H, sous réserve que Rip et R2A ne sont pas tous les deux un atome d'hydrogène, - Un groupement butyle, - un groupement alkyle en C7-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou - un groupement aryle en C7-C18;
et = Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables , caractérisé en ce qu'il comprend une étape a) durant laquelle un acide quinique poly substitué, réagit avec un composé de formule HNR1AR2A.

6 PCT/EP2017/059898 Dans un troisième aspect, la présente invention concerne un composé
susceptible d'être obtenu par ledit procédé selon l'invention.
Dans un autre aspect, la présente invention est relative à un composé ou un mélange de composés de formule générale (IB) :
RIB,,..... ......õR2B
N
QI

(IB) dans laquelle = RIB et R2B représentent indépendamment l'un de l'autre :
- H, - un groupement alkyle en Ci-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou - un groupement aryle en C6-C18;
et = Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables, pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de l'inflammation.
La présente invention concerne en outre un composé ou un mélange de composés (dérivé amide de QPS) de formule générale (IA) :
RIA\õ. ..õ...R2A
N
QI

(IA) dans laquelle = RiA et R2A représentent indépendamment l'un de l'autre :
- H, sous réserve que Rip et R2A ne sont pas tous les deux un atome d'hydrogène, - Un groupement butyle,

7 PCT/EP2017/059898 - un groupement alkyle en C7-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou - un groupement aryle en C7-C18;
et = Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables, pour son utilisation en tant que médicament.
DESCRIPTION DES FIGURES
Figure 1. Schémas des inductions réalisées pour les différents médiateurs inflammatoires étudiés : A. Schéma d'induction de l'IL-8, la PGE2, l'IL-6 et le TNF-a; B.
Schéma d'induction de LTB4.
Figure 2. Mesures de la viabilité des kératinocytes NHEKs après 26 h de traitement avec différentes concentrations des composés PAT965, PAT964, PAT967, PAT1658, PAT1657 ou PAT1648. Les pourcentages de viabilité ont été calculés par rapport au contrôle négatif non traité (CTL non traité) fixé à 100% et au contrôle positif de cytotoxicité
(SDS à
0.008%). DMSO 1%: contrôle véhicule des composés PAT. La barre d'erreur correspond à
l'écart-type autour de la moyenne.
Figure 3. Mesures de la viabilité des kératinocytes NHEKs après 50 h de traitement avec différentes concentrations des composés PAT965, PAT964, PAT967, PAT1658, PAT1657 ou PAT1648. Les pourcentages de viabilité ont été calculés par rapport au contrôle négatif non traité (CTL non traité) fixé à 100% et au contrôle positif de cytotoxicité
(SDS à
0.008%). DMSO 1%: contrôle véhicule des composés PAT. La barre d'erreur correspond à
l'écart-type autour de la moyenne.
Figure 4. Quantification de la production d'IL-8 par des kératinocytes NHEKs en état inflammatoire traités par les composés PAT965, PAT964, PAT967, PAT1658, PAT1657 ou PAT1648. Les résultats sont exprimés en pourcents par rapport à la condition traitée à la PMA (CTL) fixée à 100%. Le graphique présente la moyenne des mesures de l'IL-8 dans les surnageants provenant de 3 cultures indépendantes, ainsi que l'écart-type. Les valeurs de p (p-value) inférieures à 0,001 sont considérées comme très hautement significatives (***) (analyse de la variance ANOVA et test de comparaison de Dunnett par rapport à la condition induite à la PMA). La dexaméthasone a été utilisée comme molécule de référence.

8 PCT/EP2017/059898 Figure 5. Quantification de la production de PGE2 par des kératinocytes NHEKs en état inflammatoire traités par les composés PAT965, PAT964, PAT967, PAT1658, PAT1657 ou PAT1648. Les résultats sont exprimés en pourcents par rapport à la condition traitée à la PMA (CTL) fixée à 100%. Le graphique présente la moyenne des mesures de PGE2 dans les surnageants provenant de 3 cultures indépendantes, ainsi que l'écart-type. Les valeurs de 0,01<p<0,05 sont considérées comme significatives (*) ; 0,001<p<0,01 comme hautement significatives (**) et p<0,001 comme très hautement significatives (***) (analyse de la variance ANOVA et test de comparaison de Dunnett par rapport à
la condition induite au PMA). L'indométhacine a été utilisé comme molécule de référence.
Figure 6. Quantification de la production d'IL-6 par des kératinocytes NHEKs en état inflammatoire traités par les composés PAT965, PAT964, PAT967, PAT1658, PAT1657 ou PAT1648. Les résultats sont exprimés en pourcents par rapport à la condition traitée à la PMA combinée à l'ionophore de calcium en présence de Ca2+ à 0,8 mM (CTL) fixée à 100%.
Le graphique présente la moyenne des mesures de l'IL-6 dans les surnageants provenant .. de 3 cultures indépendantes, ainsi que l'écart-type. Les valeurs de p<0,001 sont considérées comme très hautement significatives (***) (analyse de la variance ANOVA et test de comparaison de Dunnett par rapport à la condition induite au PMA/ionophore de calcium/Ca2+ 0,8 mM). La dexaméthasone a été utilisée comme molécule de référence.
Figure 7. Quantification de la production de TNF-a par des kératinocytes NHEKs en état inflammatoire traités par les composés PAT965, PAT964, PAT967, PAT1658, PAT1657 ou PAT1648. Les résultats sont exprimés en pourcents par rapport à la condition traitée à la PMA combinée à l'ionophore de calcium dans un milieu contenant 0,06 mM de Ca2+
(CTL) fixée à 100%. Le graphique présente la moyenne des mesures du TNF-a dans les .. surnageants provenant de 3 cultures indépendantes, ainsi que l'écart-type.
Les valeurs de p<0,001 sont considérées comme très hautement significatives (***) (analyse de la variance ANOVA et test de comparaison de Dunnett par rapport à la condition induite au PMA/ionophore de calcium). La dexaméthasone a été utilisée comme molécule de référence.
Figure 8. Quantification de la production de LTB4 par des kératinocytes NHEKs en état inflammatoire traités par les composés PAT965, PAT964, PAT967, PAT1658, PAT1657 ou PAT1648. Les résultats sont exprimés en pourcents par rapport à la condition traitée à
l'acide arachidonique combiné à l'ionophore de calcium (CTL) fixée à 100%. Le graphique présente la moyenne des mesures du LTB4 dans les surnageants provenant de 3 cultures indépendantes, ainsi que l'écart-type. Les valeurs de p<0,001 sont considérées comme très hautement significatives (***) (analyse de la variance ANOVA et test de comparaison

9 PCT/EP2017/059898 de Dunnett par rapport à la condition induite à l'acide arachidonique/ionophore de calcium). L'acide nordihydroguaiarétique (NDGA) a été utilisé comme molécule de référence.
Figure 9. Schéma d'une souris vue de dos représentant les différentes zones d'application. Zone A: zone d'application de la solution acétonique de TPA;
Zones A et B : Zones d'application des pommades (contrôle et deux concentrations du composé
PAT1657) ; Zone C : le reste du dos pour lequel aucune application n'a été
faite.
Figure 10. Courbe représentative du degré de l'inflammation au niveau de la zone d'application de la solution acétonique de TPA et de la zone du traitement (zone A, Figure 9). Les courbes décrites par un rond, un triangle et un carré correspondent respectivement au contrôle (pommade Excipial seule), au traitement avec le composé
PAT1657 incorporé à 1,33% et 2,67% dans la pommade Excipial .
Figure 11. Courbe représentative du degré de l'inflammation au niveau de la zone d'application du traitement et en dehors de la zone d'application de la solution acétonique de TPA (zone B, Figure 9). Les courbes décrites par un rond, un triangle et un carré correspondent respectivement au contrôle (pommade Excipial seule), au traitement avec le composé PAT1657 incorporé à 1,33% et 2,67% dans la pommade Excipial .
Figure 12. Courbe représentative du degré de l'inflammation au niveau du reste du dos (zone C, Figure 9). Les courbes décrites par un rond, un triangle et un carré
correspondent respectivement au contrôle (pommade Excipial seule), au traitement avec le composé
PAT1657 incorporé à 1,33% et 2,67% dans la pommade Excipial .
Figure 13. Courbe représentative du score macroscopique global de l'inflammation cutanée (somme des zones A, B et C) en fonction du traitement. Les courbes décrites par un rond, un triangle et un carré correspondent respectivement au contrôle (pommade Excipial seule), au traitement avec le composé PAT1657 incorporé à 1,33% et 2,67% dans la pommade Excipial .
Figure 14. Courbe représentative du score moyen de sévérité du psoriasis (PASI
en ordonnées) des souris des 5 groupes de traitement au cours de l'expérimentation (temps en jours en abscisses). Les courbes décrites par un rond, une croix, un triangle noir, un carré blanc et un carré noir correspondent respectivement au contrôle positif ALD/EP
(induction du psoriasis et application pommade neutre Excipial ), au contrôle négatif EP/EP (pas d'induction du psoriasis et application pommade neutre Excipial ), au traitement avec le composé de référence Dermoval (ALD/Dermoval,0), au traitement avec le composé PAT1657 incorporé à 1,33% (ALD/PAT/PAT 1657-1,33%) et 2,67%
(ALD/PAT 1657-2,67%) dans la pommade Excipial .

10 PCT/EP2017/059898 DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION
Définitions Par groupement alkyl en Cx-C, , on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée monovalente saturée ou insaturé, linéaire ou ramifiée, cyclique ou cyclique ramifié, comportant de x à y atomes de carbone.
Ainsi, par groupement alkyle en C7-C30 , on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée monovalente saturée ou insaturée linéaire ou ramifiée, cyclique ou cyclique ramifié, comportant de 7 à 30 atomes de carbone, de préférence de 7 à 26 atomes de carbone, de manière préférée de 7 à 24 atomes de carbone, de manière encore plus préférée de 7 à 22 atomes de carbone, plus particulièrement de 7 à 20 atomes de carbone, notamment de 7 à 18 atomes de carbone.
A titre d'exemple et de façon non exhaustif, on peut citer les groupes heptyle, octyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, tridécyle, tétradécyle, pentadécyle, hexadécyle, heptadécyle, octadécyle, nonadécyle, eicosyle, docosyle, tétracosyle, héxacosyle, géranyle, farnésyle, géranylgéranyle, oléyle, citronéllyle et squalényle.
Dans un mode de réalisation préférée de l'invention, les groupements alkyles sont linéaires.
Par groupement aryle en Cx-Cy, on entend au sens de la présente invention, un hydrocarbure aromatique respectant la règle de Hückel sur l'aromaticité, mono-ou polycyclique, et comportant de x à y atomes de carbone.
Ainsi, par groupement aryle en Cx-C, , on entend, au sens de la présente invention, un hydrocarbure aromatique respectant la règle de Hückel sur l'aromaticité, mono- ou polycyclique, comportant de x à y atomes de carbone. A titre d'exemple, on peut citer les groupes cyclooctatétraène, biphényle, naphtalène, azulène, anthracène, phénanthrène, annulène-18.
Par un groupement alkylaryle en C7-C30, on entend au sens de la présente invention, un groupement alkyle en Ci-C24 lié de façon covalente à un groupement aryle en C6-C18.
Par un groupement arylalkyle en C7-C30, on entend au sens de la présente invention, un groupement aryle en C6-C18 lié de façon covalente à un groupement alkyle en C1-C24.
Par groupement caféoyl , on entend un radical de formule générale (VI), issu de l'acide caféique :

11 OH
k OH
(VI) Par groupement maloyl , on entend un radical de formule générale (Vila) ou (VIlb), issu de l'acide malique :

Is.,(00 H yC)c)H
0 (Vila) 0 OH (VIlb) Par groupement caféoylmaloyl , on entend un radical de formule générale (Villa) ou (V111b) :
OH
OH

O
OH H

0 (Villa) 0 (V111b) Par groupement maloylcaféoyl , on entend un radical de formule générale (IXa) ou (IXb) ou (IXc) ou (IXd) :

OLOH OLOH
OH
OH OH
(IXa) 0 (IXb) OH o OH

\,0 0 OH 0 (IXC) 0 O(IXd) Par "acide quinique poly substitué "(abrégé en QPS dans toute la présente description), on entend un mono, di, tri ou tetra ester composé d'une molécule d'acide

12 quinique dont une, deux, trois ou les quatre fonctions alcools ont été
estérifiées par un acide caféique, un acide malique, ou un mélange d'acide caféique et d'acide malique.
Les QPS sont donc des acides de formule générale (IV) :
OH
Qi Q4 (IV), dans laquelle Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH.
Dans un mode de réalisation préférée de l'invention, QPS est un acide polycafeoylquinique (abrégé en PCQ dans toute la présente description), correspondant à un mono, di, tri ou tetra ester composé d'une molécule d'acide quinique dont une, deux, trois ou les quatre fonctions alcools ont été estérifiées par un acide caféique. Les PCQ sont donc des acides de formule générale (IV) telle que définie ci-dessus dans laquelle Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH ou caféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH.
Les différents isomères de QPS sont donc des acides de formule générale (IV), avec Qi, Q3, Q4 et Q5 tels que définis de façon non exhaustive dans les Tableaux 1 à 4 ci-dessous.
Nom de l'acide Q 03 Q4 Q5 Acide 1 -0-caféoylquinique Caféoyl OH OH OH
Acide 3-0-caféoylquinique OH Caféoyl OH OH
Acide 4-0-caféoylquinique OH OH Caféoyl OH
Acide 5-0-caféoylquinique OH OH OH Caféoyl Tableau I. Exemples de structure de QPS dont trois des radicaux Qi, Q3, Q4 et représentent un groupement OH
Nom de l'acide Q 03 Q4 Q5 1,3-0-dicaféoylquinique (1,3-DCQ) Caféoyl Caféoyl OH OH

13 1,4-0-dicaféoylquinique (1,4-DCQ) Caféoyl OH Caféoyl OH
1,5-0-dicaféoylquinique (1,5-DCQ) Caféoyl OH OH
Caféoyl 3,4-0-dicaféoylquinique (3,4-DCQ) OH
Caféoyl Caféoyl OH
également appelé acide isochlorogénique B
3,5-0-dicaféoylquinique (3,5-DCQ) OH Caféoyl OH Caféoyl également appelé acide isochlorogénique A
4,5-0-dicaféoylquinique (4,5-DCQ) OH OH
Caféoyl Caféoyl également appelé acide isochlorogénique C
Tableau 2. Exemples de structure de QPS dont deux des radicaux Qi, Q3, Q4 et représentent un groupement OH.
Nom de l'acide Q 03 Q4 Q5 Acide 1,3,4-0-tricaféoylquinique (1,3,4-Caféoyl Caféoyl Caféoyl OH
TCQ) Acide 1,3,5-0-tricaféoylquinique (1,3,5-Caféoyl Caféoyl OH Caféoyl TCQ) Acide 1,4,5-0-tricaféoylquinique (1,4,5-Caféoyl OH Caféoyl Caféoyl TCQ) Acide 3,4,5-0-tricaféoylquinique (3,4,5 OH Caféoyl Caféoyl Caféoyl TCQ) Acide 1-0-(2-0-caféoylmaloyl)-(3,5-0-Caféoylmaloyl Caféoyl OH Caféoyl dicaféoyl)quinique Acide 1-0-maloyl-(3,4,5-0-Maloyl Caféoyl Caféoyl Caféoyl tricaféoyl)quinique Tableau 3. Exemples de structure de QPS dont un des radicaux Qi, Q3, Q4 et Q5 représente un groupement OH.
Nom de l'acide Q 03 Q4 Q5 Acide 1,3,4,5-0-tétracaféoylquinique Caféoyl Caféoyl Caféoyl Caféoyl (TétraCQ) Acide 1-0-(2-0-caféoylmaloyl)-(3,4,5-0-Caféoylmaloyl Caféoyl Caféoyl Caféoyl tricaféoyl)quinique Tableau 4. Exemple de structure de QPS dont aucun des radicaux Qi, Q3, Q4 et Q5 ne représente un groupement OH

14 PCT/EP2017/059898 Par agent d'activation des groupements carboxyles , on entend selon la présente invention tout réactif ou combinaison de réactifs permettant d'activer la fonction acide carboxylique pour permettre son couplage avec un nucléophile dans des conditions réactionnelles douces. A titre d'exemple et de façon non exhaustive, on peut citer les agents d'activation de la famille des carbodiimides comme le dicyclohexylcarbodiimide (DCC), le diisopropylcarbodiimide (DIC), le N-ethyl-N(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide (EDCI) seul ou en combinaison avec des alcools permettant la formation transitoire d'esters activés comme, par exemple, le 1-hydroxybenzotriazole (HOBT), le 1-hydroxy-7-azabenzotriazole (HOAt), le 1-hydroxysuccinimide (HOSu) ou encore l'éthyl (hydroxyimino)cyanoacetate.
L'agent d'activation utilisable peut également faire partie de la famille des sels de phosphoniums, d'uronium et/ou de guanidinium. A titre d'exemple, on peut citer le benzotriazol-1-yloxy)tris(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate (BOP), le benzotriazol-1 -yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBOP), le (1-Cyano-2-ethoxy-oxoethylidenaminooxy)dimethylamino-morpholino-carbenium hexafluorophosphate (COMU), N,N,N',N'-Tetramethyl-0-(1H-benzotriazol-1-yl)uronium hexafluorophosphate (HBTU), (0- (6-Chloro-1 - hydrocibenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluoroborate) (TCTU), (2- (7-Aza-1H-benzotriazole-1 -yl)-1,1,3,3-tetramethylu ronium hexafluorophosphate) (HATU).
Plus particulièrement, l'agent d'activation des groupements carboxyles est choisi parmi le diisopropylcarbodiimide (DIC) et le 1-hydroxybenzotriazole (HOBT).
Dans la présente invention, on entend désigner par pharmaceutiquement acceptable ce qui est utile dans la préparation d'une composition pharmaceutique qui est généralement sûr, non toxique et ni biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation vétérinaire de même que pharmaceutique humaine.
On entend désigner par sels pharmaceutiquement acceptables d'un composé, des sels qui sont pharmaceutiquement acceptables, comme défini ici, et qui possèdent l'activité pharmacologique souhaitée du composé parent. De tels sels comprennent :
(1) les hydrates et les solvates, (2) les sels d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptable formés avec des acides inorganiques pharmaceutiquement acceptables tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique et similaires ; ou formés avec des acides organiques pharmaceutiquement acceptables tels que l'acide acétique, l'acide benzènesulfonique, l'acide benzoïque, l'acide camphresulfonique, l'acide citrique, l'acide éthane-sulfonique, l'acide fumarique, l'acide glucoheptonique, l'acide gluconique, l'acide glutamique, l'acide glycolique, l'acide hydroxynaphtoïque, l'acide 2-hydroxyéthanesulfonique, l'acide lactique, l'acide maléique, l'acide malique, l'acide mandélique, l'acide méthanesulfonique, l'acide

15 PCT/EP2017/059898 muconique, l'acide 2-naphtalènesulfonique, l'acide propionique, l'acide salicylique, l'acide succinique, l'acide dibenzoyl-L-tartrique, l'acide tartrique, l'acide p-toluènesulfonique, l'acide triméthylacétique, l'acide trifluoroacétique et similaires, ou (3) les sels d'addition de base pharmaceutiquement acceptable formés lorsqu'un proton acide présent dans le composé parent est soit remplacé par un ion métallique, par exemple un ion de métal alcalin, un ion de métal alcalino-terreux ou un ion d'aluminium ;
soit coordonné avec une base organique ou inorganique pharmaceutiquement acceptable.
Les bases organiques acceptables comprennent la diéthanolamine, l'éthanolamine, N-méthylglucamine, la triéthanolamine, la trométhamine et similaires. Les bases inorganiques acceptables comprennent l'hydroxyde d'aluminium, l'hydroxyde de calcium, l'hydroxyde de potassium, le carbonate de sodium et l'hydroxyde de sodium.
Dans le cadre de la présente invention, on entend par inflammation un ensemble de réactions générées par l'organisme en réponse à une agression subie. Ces réactions se manifestent sur le plan clinique par une rougeur, une douleur, une tuméfaction et/ou une augmentation de la chaleur, et sur le plan biologique par le recrutement de cellules du système immunitaire et la libération de médiateurs de l'inflammation tels que des cytokines pro-inflammatoires, des leukotriènes ou des prostaglandines.
De même, en entend par maladie inflammatoire , une maladie résultant d'une inflammation excessive et souvent chronique. Parmi ces maladies, on peut citer des maladies inflammatoires résultant d'une réponse spécifique excessive du système immunitaire, telle que l'asthme, le psoriasis, la rhinite, l'arthrose et les maladies auto-immunes y compris le syndrome de Raynaud, la thyroïdite auto-immune, la dermatite, la sclérose en plaque, la polyarthrite rhumatoïde, le diabète sucré insulino-dépendant, l'uvéite, les maladies intestinales inflammatoires (notamment la maladie de Crohn et la colite ulcérative), le lupus érythémateux disséminé; et les maladies résultant d'une réponse non spécifique excessive du système immunitaire, telles que les maladies dues à
un syndrome de détresse respiratoire chez l'adulte, un choc septique, une toxicité à
l'oxygène, un syndrome de défaillance multiviscérale secondaire à une septicémie, un syndrome de défaillance multiviscérale secondaire à un traumatisme, une lésion de reperfusion tissulaire due à une circulation extracorporelle, un infarctus du myocarde, la glomérulonéphrite aiguë, la vascularite, l'arthrite réactive, la dermatose à
composantes inflammatoires aiguës, un accident vasculaire cérébral, une lésion thermique, une hémodialyse, une cytaphérèse, une entérocolite nécrosante et un syndrome associé à une transfusion de granulocytes.
Dérivés amides d'acides quiniques poly substitués (QPS) La présente invention concerne donc des composés ou un mélange de composés, dérivés amides de QPS, de formule générale (IA) :

16 RIA \ ,-R2A
QI
-1=1"-(IA), dans laquelle = Rip et R2A représentent indépendamment l'un de l'autre :
- H, sous réserve que Rip et R2A ne sont pas tous les deux un atome d'hydrogène, - Un groupement butyle, - un groupement alkyle en C7-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou - un groupement aryle en C7-C18;
et = Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH ;
ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables.
En particulier, la présente invention concerne des composés ou un mélange de composés, dérivés amides de PCQ, de formule générale (IA) telle que définie ci-dessus dans laquelle Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH ou caféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH.
De préférence, la présente invention concerne des composés ou un mélange de composés, dérivés amides de PCQ, de formule générale (IA) telle que définie ci-dessus dans laquelle deux quelconques des radicaux Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent un groupement caféoyl, les deux autres représentant un groupement OH.
Parmi les composés de formule (IA) selon la présente invention, on peut citer les dérivés amides de :
- L'acide 5-0-caféoylquinique (g.Q3=Q4=0H) ;
- L'acide 1,3-0-dicaféoylquinique(Q4=Q5=0H) ;
- L'acide 1,4-0-dicaféoylquinique (Q3=Q5=0H) ;
- L'acide 1,5-0-dicaféoylquinique (Q3=Q4=0H) ;
- L'acide 3,4-0-dicaféoylquinique (Q1=Q5=0H), ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide B ;

17 PCT/EP2017/059898 - L'acide 3,5-0-dicaféoylquinique (Q1=Q4=0H) ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide A;
- L'acide 4,5-0-dicaféoylquinique (Q1=Q3=0H) ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide C ;
- L'acide 1,3,4-0-tricaféoylquinique (Q5=0H) ;
- L'acide 1,3,5-0-tricaféoylquinique (Q4=0H) ;
- L'acide 1,4,5-0-tricaféoylquinique (Q3=0H) ;
- L'acide 3,4,5-0-tricaféoylquinique (Q1=0H) ; et - L'acide 1,3,4,5-0-tétracaféoylquinique.
En particulier, parmi les composés de formule (IA) avantageux de la présente invention, on peut citer les dérivés amides de:
- L'acide 1,3-0-dicaféoylquinique(Q4=Q5=0H) ;
- L'acide 1,4-0-dicaféoylquinique (Q3=Q5=0H) ;
- L'acide 1,5-0-dicaféoylquinique (Q3=Q4=0H) ;
- L'acide 3,4-0-dicaféoylquinique (Q1=Q5=0H), ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide B ;
- L'acide 3,5-0-dicaféoylquinique (Q1=Q4=0H) ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide A; et - L'acide 4,5-0-dicaféoylquinique (Q1=Q3=0H) ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide C.
Avantageusement, les composés de formule générale (IA) selon l'invention sont caractérisés en ce que Qi représente un groupement OH. Ainsi, parmi les composés avantageux de la présente invention on peut citer les dérivés amides de :
- L'acide 3,4-0-dicaféoylquinique (Q1=Q5=0H) ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide B ;
- L'acide 3,5-0-dicaféoylquinique (Q1=Q4=0H) ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide A; et - L'acide 4,5-0-dicaféoylquinique (Q1=Q3=0H) ce dérivé amide correspond à
l'isochlorogénamide C.
Les composés de formule générale (IA) selon l'invention particulièrement avantageux sont ceux caractérisés en ce que Qi et Q4 représentent un groupement OH et Q3 et Q5 représentent un groupement caféoyl, correspondant ainsi aux dérivés amides de l'acide 3,5-0-dicaféoylquinique (3,5-DCQ).
Dans un mode de réalisation avantageux, les dérivés amides de QPS, notamment les dérivés amides de PCQ, selon l'invention sont caractérisés en ce que Rip est un atome d'hydrogène. Dans un mode de réalisation particulier Rip est un atome d'hydrogène et R2A

18 PCT/EP2017/059898 est un groupement butyle ou un groupement alkyle, avantageusement linéaire, en C30, en particulier en C7-C26, de préférence en C7-C24, préférentiellement en C7-C22, encore plus préférentiellement en C7-C20, en particulier en C7-C18, notamment un groupement alkyle choisi parmi les groupements heptyle, octyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, tridécyle, tétradécyle, pentadécyle, hexadécyle, heptadécyle, octadécyle, nonadécyle, eicosyle, docosyle, tétracosyle, héxacosyle, géranyle, farnésyle, géranylgéranyle, oléyle, citronéllyle et squalényle, de manière préféré un groupement alkyle choisi parmi les groupements octyle, dodécyle ou octadécyle.
Dans un autre mode de réalisation, les dérivés amides de QPS, notamment les dérivés amides de PCQ, selon l'invention sont caractérisés en ce que Rip est un atome d'hydrogène et R2A est un groupement aryle en C7-Cio, en particulier un naphtyle, ou un groupement arylalkyle en C7-C30, en particulier un Phényl-(Ci-C24)alkyle, plus particulièrement un phénylbutyle.
De manière préférée, les composés selon l'invention sont de formule générale (II) ou (III) :
HN'On HNn _ Oe 0 OH OH
HO OH HO OH
(II) (III) dans laquelle n est égal à 3 ou est supérieur ou égal à 6, en particulier, n est égal à 3, 7, 11 ou 17.
Procédé de préparation d'un composé selon l'invention et composé susceptible d'être obtenu par ledit procédé
Il existe dans l'art des procédés de préparation de dérivés amides de PCQ
connus de l'homme du métier. Ces composés sont généralement préparés par synthèse chimique à partir de l'acide quinique et de l'acide caféique.
Un exemple de procédé de préparation de dérivés amide de PCQ est décrit dans la demande de brevet européen EP 2 128 125, notamment dans les schémas 1 et 2.
Dans ce document, l'acide quinique est préalablement soumis à une réaction de protection de ses groupements carboxyle et hydroxyles sous catalyse acide. Le quinide obtenu est traité
par une amine afin de privilégier la conversion en groupement amide du groupement carboxyle en position 1. Les groupements hydroxyles du dérivé amide de l'acide quinique obtenu sont ensuite déprotégés par une réaction de déprotection sous catalyse acide. Les dérivés amide de PCQ sont finalement obtenus par acylation des groupements hydroxyles des dérivés amide de l'acide quinique par le chlorure d'acide allyl-caféique puis par une

19 PCT/EP2017/059898 réaction de déprotection des groupements allyles en présence de Rh(PPh3)3C1/DABCO/Et0H ou Pd(PPH3)4/morpholine/THF.
Ce type de procédé de synthèse des dérivés amide de PCQ permet d'obtenir un mélange d'isochlorogénamides A, B et C. Afin d'obtenir un seul régioisomère de dérivé
amide de PCQ, tel que des isochlorogénamide A (dérivés amide du 3,5-DCQ) seul, une étape de purification supplémentaire est nécessaire. Une telle étape de purification est difficile à entreprendre compte tenu de la similarité des structures et entraine une baisse de rendement importante.
Les inventeurs ont découvert que la préparation des dérivés amide de QPS
pouvait être réalisée en une étape par hémisynthèse à partir d'un QPS particulier permettant l'obtention de dérivés amide de ce QPS sous la forme d'un seul régioisomère.
En particulier, les inventeurs ont découvert que l'isochlorogénamide A pouvait être obtenu par réaction de l'acide 3,5-DCQ avec une amine.
Dans un deuxième aspect, la présente invention concerne également un procédé
de préparation d'un composé de formule générale (IA) RIA',.., N
QI
O

Q5 = 3 (IA), dans laquelle RiA, R2A, Qi, Q, Q4 et Q5 sont tels que définis ci-dessus;
ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables, caractérisé en ce qu'il comprend une étape a) durant laquelle un QPS réagit avec un composé de formule HNR1AR2A. En particulier, ledit QPS est un PCQ, avantageusement choisi parmi l'acide 3-0-caféoylquinique, le 3,5-DCQ, le 3,4-DCQ, le 4,5-DCQ, le 3,4,5-TCQ et le TétraCQ, avantageusement le PCQ est le 3,5-DCQ, le 3,4-DCQ, le 4,5-DCQ, plus avantageusement le PCQ est le 3,5-DCQ.
Avantageusement, Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH ou caféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH. En particulier deux quelconques des radicaux Qi, Q3, Q4 et Q5 représentent un groupement caféoyl, les deux autres représentant un groupement OH.

20 PCT/EP2017/059898 Plus particulièrement, la présente invention concerne un procédé de préparation d'un composé de formule générale (IA), dans laquelle Rip est un atome d'hydrogène, plus particulièrement Rip est un atome d'hydrogène et R2A est un groupement butyle ou un groupement alkyle, avantageusement linéaires, en C7-C30, en particulier C7-C26, plus particulièrement en C7-C24, de préférence en C7-C22, préférentiellement en C7-C20, en particulier en C7-Ci8, notamment un groupement alkyle choisi parmi les groupements heptyle, octyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, tridécyle, tétradécyle, pentadécyle, hexadécyle, heptadécyle, octadécyle, nonadécyle, eicosyle, docosyle, tétracosyle, héxacosyle, géranyle, farnésyle, géranylgéranyle, oléyle, citronéllyle et squalényle, de manière préféré un groupement alkyle choisi parmi les groupements octyle, dodécyle ou octadécyle ; ou un groupement aryle en C7-Ci8, notamment un groupement aryle choisi parmi les groupements cyclooctatétraène, biphényle, naphtalène, azulène, anthracène, phénanthrène, annulène-18.
Avantageusement, le composé de formule HNR1AR2A est choisi parmi les alkylamines, notamment le butan-1-amine ou les alkylamines en C7-C30, en particulier C7-C26, plus particulièrement en C7-C24, encore plus particulièrement en C7-C20, de préférence en C7-Ci8.
Plus particulièrement, le composé de formule HNR1AR2A est choisi parmi l'un des composés suivants : octan-1-amine, laurylamine, 1-octadécylamine, 4-phénylbutan-1-amine ou 2-naphtylamine.
Dans un mode de réalisation préférée, la présente invention concerne un procédé
de préparation d'un composé de formule générale (II) ou (III):
HN )n HN in 0 ) 0 HO OH HO
OH
0' 0 0 0 OH
HO OH OH HO
OH
(II) (III) dans laquelle n est un nombre entier égal à 3 ou compris entre 6 et 29, en particulier égal à 3 ou compris entre 6 et 25, de manière préférée n est égal à 3, 7, 11 ou 17, caractérisé en ce qu'il comprend une étape a) durant laquelle un 3,5-DCQ
réagit avec un composé de formule de formule générale (V) n NH2 (v) dans laquelle n est tel que défini ci-dessus.

21 PCT/EP2017/059898 Dans un autre mode de réalisation préférée, la présente invention concerne un procédé de préparation d'un des composés suivants de formule respective (11a), (11b), (11c) et (11d)o :

HO OH
. 0 HO OH
(11a) HN
HO

HO OH

HO OH
(11b) Hieje*I
o H OH
. 0 OH HO
(liC) HN
o H OH
e' . 0 z HO OH
(11d) Avantageusement, la réaction de l'étape a) s'effectue en présence d'un solvant inerte tel que le dichlorométhane, le N,N-diméhylformamide ou le tétrahydrofurane notamment à une température comprise entre -15 C et le reflux du solvant.
Dans un mode de réalisation de l'invention, l'étape a) du procédé selon l'invention est éventuellement précédée d'une étape d'activation du groupement carboxyle d'un

22 PCT/EP2017/059898 QPS, notamment du PCQ, notamment par un agent d'activation des groupements carboxyles, tel que le 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide en combinaison avec l'hydrate 1-hydroxybenzotriazole.
Les procédés selon l'invention peuvent, par exemple, être décrits par les schémas 1 et 2 suivants :
OH RIBRue Q1 Agent d'activation des groupements carboxyles o __________________________________________________ Q5 3 Puis HNR1BP2B

Schéma 1. Hémisynthèse de dérivés isochlorogénamide à partir de QPS
RIA\,..
OH N
QI Qi Agent d'activation o des groupements carboxyles _______________________________________________ Puis HNR1AR2A Q5 Schéma 2. Hémisynthèse de dérivés isochlorogénamide à partir de QPS
Les procédés de préparation des composés selon l'invention peuvent éventuellement comprendre des étapes supplémentaires de protection et/ou déprotection afin d'éviter des réactions secondaires bien connues de l'homme du métier, ou afin d'éviter la formation de plusieurs régioisomères des composés selon l'invention.
Les composés obtenus par les procédés selon l'invention peuvent en outre être purifiés par des méthodes connues de l'homme du métier. On peut citer, par exemple, les méthodes de purification par cristallisation, par chromatographie ou par extraction.
L'invention concerne également un composé susceptible d'être obtenu par les procédés selon l'invention, tel que décrit ci-dessus

23 PCT/EP2017/059898 Applications thérapeutiques Les inventeurs ont découvert que les composés selon l'invention ont des propriétés anti-inflammatoires.
Dans le cadre de la présente invention, les composés selon l'invention peuvent être utilisés dans le traitement de l'inflammation ou de maladies inflammatoires, notamment des maladies inflammatoires résultant d'une réponse spécifique excessive du système immunitaire, telle que l'asthme, le psoriasis, la rhinite, l'arthrose et les maladies auto-immunes y compris le syndrome de Raynaud, la thyroïdite auto-immune, la dermatite, la sclérose en plaque, la polyarthrite rhumatoïde, le diabète sucré
insulino-dépendant, l'uvéite, les maladies intestinales inflammatoires (notamment la maladie de Crohn et la colite ulcérative), le lupus érythémateux disséminé; et les maladies résultant d'une réponse non spécifique excessive du système immunitaire, telles que les maladies dues à un syndrome de détresse respiratoire chez l'adulte, un choc septique, une toxicité
à l'oxygène, un syndrome de défaillance multiviscérale secondaire à une septicémie, un syndrome de défaillance multiviscérale secondaire à un traumatisme, une lésion de reperfusion tissulaire due à une circulation extracorporelle, un infarctus du myocarde, la glomérulonéphrite aiguë, la vascularite, l'arthrite réactive, la dermatose à
composantes inflammatoires aiguës, un accident vasculaire cérébral, une lésion thermique, une hémodialyse, une cytaphérèse, une entérocolite nécrosante et un syndrome associé à une transfusion de granulocytes.
Dans le cadre de la présente invention, l'inflammation peut avoir une origine physique (chaleur, froid, radiations ionisantes, infra-rouges, rayonnement solaire), mécanique (frottement), chimique (contact avec des produits irritants ou allergisants) ou biologique (microbe, champignon), ou peut être due au stress oxydatif.
Dans un autre aspect, l'invention concerne donc un composé ou un mélange de composés de formule générale (IB), RIB-...... R2B
N
QI

Q4 (IB), dans laquelle R1B, R2B, R, Qi, Q,3, Q4 et Q5 sont tels que définis ci-dessus, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables,

24 PCT/EP2017/059898 pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de l'inflammation ou d'une maladie inflammatoire.
Selon un autre aspect, l'invention concerne également un composé ou un mélange de composés de formule générale (IB) selon l'invention pour son utilisation pour la prévention et/ou le traitement de toutes maladies inflammatoires citées ci-dessus.
En outre, l'invention concerne l'utilisation d'un composé ou un mélange de composés de formule générale (IB) selon l'invention pour la fabrication d'un médicament pour la prévention et/ou le traitement de l'inflammation ou d'une maladie inflammatoire, notamment d'une des maladies citées ci-dessus.
L'invention concerne aussi une méthode de prévention ou de traitement de l'inflammation ou d'une maladie inflammatoire, notamment d'une des maladies citées ci-dessus, comprenant l'administration d'une quantité thérapeutiquement efficace d'au moins un composé de formule (IB) selon l'invention à un patient en ayant besoin.
Dans un autre mode de réalisation, l'invention concerne un composé ou un mélange de composés de formule générale (IA) Q5 Il 3 (IA), dans laquelle R1A, R2A, R, Qi, Q,3, Q4 et Q5 sont tels que définis ci-dessus, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables, pour son utilisation en tant que médicament.
L'invention concerne également un composé ou un mélange de composés de formule (IA) selon l'invention pour son utilisation en tant que médicament pour la prévention et/ou le traitement de l'inflammation ou d'une maladie inflammatoire, notamment d'une des maladies citées ci-dessus.
La présente invention concerne notamment un composé ou un mélange de composés de formule (IA) selon l'invention pour son utilisation en tant que médicament pour la prévention et/ou le traitement du psoriasis.

25 PCT/EP2017/059898 En outre, l'invention concerne l'utilisation d'un composé ou un mélange de composés de formule générale (IA) selon l'invention pour la fabrication d'un médicament, notamment pour la prévention et/ou le traitement de l'inflammation ou d'une maladie inflammatoire, en particulier d'une des maladies citées ci-dessus. L'invention concerne notamment l'utilisation d'un composé ou un mélange de composés de formule générale (IA) selon l'invention pour la fabrication d'un médicament pour la prévention et/ou le traitement du psoriasis.
L'invention concerne aussi une méthode de prévention ou de traitement, notamment de l'inflammation ou d'une maladie inflammatoire, en particulier d'une des maladies citées ci-dessus, comprenant l'administration d'une quantité
thérapeutiquement efficace d'au moins un composé de formule (IA) selon l'invention à
un patient en ayant besoin. L'invention concerne notamment une méthode de prévention et/ou de traitement du psoriasis, comprenant l'administration d'une quantité
thérapeutiquement efficace d'au moins un composé de formule (IA) selon l'invention à
un patient en ayant besoin Compositions cosmétiques ou pharmaceutiques La présente invention concerne également une composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant en tant qu'agent actif au moins un composé selon l'invention ou un extrait selon l'invention et avantageusement un excipient cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable.
Les modes d'administration, les posologies et les formes galéniques optimales des compositions pharmaceutiques ou cosmétiques selon l'invention peuvent être déterminés selon les critères généralement pris en compte dans l'établissement d'un traitement pharmaceutique ou cosmétique adapté à un sujet comme par exemple l'âge ou le poids corporel du patient, la gravité de son état général, la tolérance au traitement, les effets secondaires constatés, le type de peau. En fonction du type d'administration souhaitée, la composition pharmaceutique ou cosmétique selon l'invention peut en outre comprendre au moins un excipient pharmaceutiquement ou cosmétiquement acceptable.
La composition cosmétique ou pharmaceutique selon la présente invention peut en outre comprendre au moins un adjuvant pharmaceutiquement ou cosmétiquement connu de l'homme du métier, choisi parmi les épaississants, les conservateurs, les parfums, les colorants, des filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants, les eaux thermales, etc.
Avantageusement, la composition cosmétique ou pharmaceutique comprend au moins un composé de formule générale (IA) selon l'invention en une quantité
comprise entre 0,01 et 10%, en particulier entre 0,05 et 5 %, plus particulièrement entre 0,1 et 2 %, en poids par rapport au poids total de la composition.

26 PCT/EP2017/059898 Compositions pharmaceutiques La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant en tant qu'agent actif au moins un composé de formule générale (IA) RIA

(IA) dans laquelle Rip, R2A, R, 02, Q3, Q4 et Q5 sont tels que définis ci-dessus, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables, et avantageusement un excipient pharmaceutiquement acceptable.
La composition pharmaceutique est particulièrement adaptée pour une administration par voie orale, nasale, transdermique, parentérale, topique, rectale, et mucosale. Elle peut se présenter sous forme sèche, telle que par exemple :
capsule molle, gélule, comprimé, lyophilisat, poudre, granule, ou patch, ou sous forme liquide, telle que : solution, suspension, spray, crème ou gel.
L'excipient pharmaceutiquement acceptable est connu de l'Homme du Métier et est choisi selon le mode d'administration de la composition pharmaceutique. A
titre d'exemple, l'excipient pharmaceutiquement acceptable peut être choisi dans le groupe constitué par les agents diluants, liants, désintégrants, les colorants, les lubrifiants, les agents solubilisants, les agents promoteurs d'absorption, les filmogènes, les agents gélifiants, et leurs mélanges.
La composition pharmaceutique selon l'invention peut en outre comprendre au moins un composé choisi dans le groupe constitué par les émollients, les actifs hydratants, les activateurs de la synthèse de kératine, les kératorégulateurs, les kératolytiques, les agents restructurant de la barrière cutanée (activateurs de la synthèse des lipides cutanés, agonistes PPARs ou Peroxysome Proliferator Activated Receptor), les activateurs de la différenciation des kératinocytes (rétinoïdes, calcidoneD, le calcium), les antibiotiques, les agents anti-bactériens, les composés antifongiques, les agents anti-viraux, les sébo-régulateurs, les immunomodulateurs, tels que le tacrolimus, le pimécrolimus, les oxazolines, les conservateurs, les agents anti-irritants, les agents apaisants, des filtres et écrans solaires, les agents anti-oxydants, les facteurs de

27 PCT/EP2017/059898 croissance, les agents cicatrisants ou les molécules eutrophiques, les médicaments et les agents anti-inflammatoires.
La présente invention concerne également une composition pharmaceutique selon l'invention, pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de l'inflammation, notamment l'inflammation cutanée. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique selon l'invention, pour son utilisation en tant que médicament pour la prévention et/ou le traitement du psoriasis.
La présente invention concerne également l'utilisation d'une composition pharmaceutique selon l'invention, pour la préparation d'un médicament destiné
au traitement et/ou à la prévention de l'inflammation, notamment l'inflammation cutanée.
L'invention concerne notamment l'utilisation d'une composition pharmaceutique selon l'invention, pour la fabrication d'un médicament pour la prévention et/ou le traitement du psoriasis.
En outre, l'invention concerne une méthode de traitement et/ou de prévention de l'inflammation, notamment l'inflammation cutanée, chez un sujet en ayant besoin, comprenant l'administration au sujet d'une quantité thérapeutiquement efficace d'une composition pharmaceutique selon l'invention. L'invention concerne notamment une méthode de prévention et/ou de traitement du psoriasis, comprenant l'administration d'une quantité thérapeutiquement efficace d'une composition pharmaceutique selon l'invention à un patient en ayant besoin La présente invention concerne également une composition pharmaceutique selon l'invention, pour son utilisation pour prévenir ou ralentir le vieillissement cutané, pour la cicatrisation de la peau et/ou pour favoriser la régénération des tissus du derme.
La présente invention concerne également l'utilisation d'une composition pharmaceutique selon l'invention, pour la préparation d'un médicament destiné
à
prévenir ou ralentir le vieillissement cutané, à la cicatriser la peau et/ou à
favoriser la régénération des tissus du derme En outre, l'invention concerne une méthode pour prévenir ou ralentir le vieillissement cutané, pour la cicatrisation de la peau et/ou pour favoriser la régénération des tissus du derme, chez un sujet en ayant besoin, comprenant l'administration au sujet d'une quantité thérapeutiquement efficace d'une composition pharmaceutique selon l'invention.

28 PCT/EP2017/059898 Compositions cosmétiques La présente invention concerne donc une composition cosmétique comprenant en tant qu'agent actif au moins un composé selon l'invention ou un extrait selon l'invention et avantageusement un excipient cosmétiquement acceptable.
La composition cosmétique selon l'invention peut en outre comprendre d'autres agents cosmétiquement actifs, tels que d'autres agents anti-âge ; ou bien des agents hydratants ; des agents ayant une activité calmante, apaisante ou relaxante ;
des agents stimulant la microcirculation cutanée ; des agents sebo-régulateurs pour le soin des peaux grasses ; des agents nettoyant ou purifiant ; des agents anti-radicalaires ;
des agents anti-inflammatoires ; des filtres solaires chimiques ou minéraux, etc.
L'excipient cosmétiquement acceptable peut être choisi parmi les polymères, les composés silicones, les agents tensioactifs, les agents de rhéologie, les agents humectants, les agents de pénétration, les composants huileux, les cires, les émulsifiants, les agents filmogènes, les parfums, les électrolytes, les ajusteurs de pH, les agents antioxydants, les conservateurs, les colorants, les nacres, les pigments et leurs mélanges.
La composition cosmétique selon l'invention est avantageusement destinée à une application topique. Elle peut notamment se présenter sous la forme d'une crème, d'un lait, d'une lotion, d'un gel, d'un sérum, d'un spray, d'une mousse, d'une solution, d'une pommade, d'une émulsion, d'un patch ou d'un masque.
L'invention concerne également l'utilisation en tant qu'agent actif d'un composé
de formule (IB) ou de formule (IA) selon l'invention, dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition cosmétique, pour traiter ou prévenir le vieillissement cutané, l'inflammation de la peau (effet calmant ou apaisant), et/ou pour favoriser la cicatrisation ainsi que la régénération des tissus du derme.
La composition cosmétique selon l'invention peut notamment être destinée à
prévenir ou ralentir le vieillissement cutané.
La composition cosmétique selon l'invention peut notamment être destinée à
prévenir ou traiter l'inflammation de la peau.
La composition cosmétique selon l'invention peut notamment être destinée à
obtenir un effet calmant de la peau ou un effet apaisant de la peau.
La composition cosmétique selon l'invention peut notamment être destinée à
favoriser la cicatrisation.
La composition cosmétique selon l'invention peut notamment être destinée à
favoriser la régénération des tissus du derme.

29 L'invention concerne en outre une méthode de soin cosmétique de la peau visant à prévenir ou traiter le vieillissement cutané et/ou l'inflammation de la peau, caractérisée en ce qu'elle comprend l'application sur au moins une partie de la peau du corps ou du visage d'une composition cosmétique selon l'invention.
L'invention concerne en outre une méthode de soin cosmétique de la peau pour obtenir un effet calmant de la peau ou un effet apaisant de la peau et/ou pour favoriser la régénération des tissus du derme, caractérisée en ce qu'elle comprend l'application sur au moins une partie de la peau du corps ou du visage d'une composition cosmétique selon l'invention.
Avantageusement, dans la méthode selon l'invention, la composition cosmétique est appliquée chez un sujet en ayant besoin, notamment en prévision de ou consécutivement à une exposition unique ou répétée de la peau à un stress oxydant. En effet, ce dernier peut générer un excès de radicaux libres pouvant accélérer les signes de vieillissement cutané. Aussi, la lutte contre diverses pathologies ou conditions pro-inflammatoires, sont également génératrices d'espèces réactives de l'oxygène.
Les exemples qui suivent visent à illustrer la présente invention.
EXEMPLES
Exemple 1 : Hémisynthèse de dérivés amides de 3,5-DCQ à partir du 3,5-DCQ
(acide isoch [orogénique A) _____________________________________________________________________________ , HO
HN =
oo, HO,õ
HO,õ, 1 0 DIC / HOM, OMF/DCM, 0 C, 15 min p 5 3 OH 0 5 1 3 0 0' . then FI
---... ,==
0' _ ----.

H
2h, 0 C to RT
HO
HO
3,5-DCQ / acide isochlorogénique A / PAT965 Dérivés amides du 3.5-DCQ
Scheme 2. Hémisynthèse de dérivés amides de 3,5-DCQ à partir du 3,5-DCQ

30 PCT/EP2017/059898 Synthèse de l'Octyl-lsochlorogénamide A (2E,2 E)-((1R,25,3R,55)-2,5-dihydroxy-(octylcarbamoyl)cyclohexane-1,3-diy1) bis(3-(3,4-dihydroxyphenyl)acrylate) =
PÅTI 657 A une solution de 3,5-DCQ (300 mg; 0,581 mmol) et de 1-Hydroxybenzotriazole hydrate (118 mg; 0,871 mmol) dans du N,N-Diméthylformamide anhydre (2249 pL; 29,0 mmol) et du dichlorométhane (2243 pL ; 35,9 mmol) est ajouté goutte à goutte du 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide (123 pL, 0.697 mmol) à une température de 0 C.
Le mélange réactionnel est agité pendant 15 minutes à 0 C puis une solution de l'octan-1-amine (241 pL, 1.452 mmol) dans du dichlorométhane anhydre (1000 pL, 15.54 mmol) est ajoutée sur 45 minutes.
Le mélange réactionnel est agité pendant 1 heure à 0 C puis pendant 2 heures à
température ambiante. La réaction est alors stoppée par ajout d'une solution de HCl aqueuse 1M (30 mL). La phase organique est ensuite extraite avec 3 fois 30 mL
d'Et0Ac puis lavée avec 50 mL d'une solution de HCl 1M et de la saumure (50 mL) puis séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée sous vide pour obtenir un solide.
Le solide obtenu est purifié par HPLC préparative (Vydac Denali column C18,50 x 250 mm, 10 pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (Me0H) suivant un gradient linéaire de 80 à 100 % de B pendant 15 minutes à un débit de 60 mL/minutes. Le composé
obtenu est un solide blanc.
¨ Rendement isolé : 49 % (180 mg) ;
¨ Formule moléculaire : C33H41N011 ;
¨ Poids moléculaire : 627.68 g/mol ;
¨ 1H (400MHz, CD30D, 300K) ppm) 0.87 (t, J=6.3Hz, 3H), 1.17-1.37 (m, 10H), 1.49 (t, J=6.5Hz, 2H), 1.98-2.20 (m, 3H), 2.31 (dd, J=15.1Hz, 3.3Hz, 1H), 3.17(m, 2H), 3.92 (dd, J=9.7Hz, 3.3Hz, 1H), 5.46 (m, 1H), 5.52 (m, 1H), 6.30 (d, J=15.8Hz, 1H), 6.37 (d, J=15.8Hz, 1H), 6.77 (d, J=1.0Hz, 1H), 6.79 (d, J=1.0Hz, 1H), 6.90-7.00 (m, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.07 (m, 1H), 7.60 (d, J=15.8Hz, 1H), 7.62 (d, J=15.8Hz, 1H). 13C (100MHz, CD30D, 300K) ppm) 14.6, 23.8, 28.0, 30.5 (2x), 30.6, 33.1, 36.9, 39.7, 40.6, 71.8, 72.8, 73.9, 76.7, 115.3(x2), 115.4, 115.8, 116.6(2x), 123.1 (2x), 127.9, 128.1, 146.9, 147.0, 147.2, 147.3, 149.6, 149.8, 169.1 (2x), 177.8.
¨ Rf (Et0Ac/Cy 8/2 +1%AcOH) = 0,22 Les analyses LC/MS ont été effectuées sur colonne Zorbax Eclipse (Cis, 3.0x100mm, 1.8pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (acétonitrile) comme éluant suivant un gradient linéaire de 5 à 95% de B pendant 15 minutes, un gradient linéaire de 95% à 100% pendant 1 minute puis un mode isocratique à 100% de B pendant 2 minutes à

31 PCT/EP2017/059898 un débit de 0,4 mL/min. Rt = 12,161 min, m/z (ESI+APCI Negative mode) [M-H]
626.3 (100).
Synthèse du Butyl-lsochlorogénamide A (2E,2 E)-((1R,25,3R,55)-5-(butylcarbamoyl)-2,5-dihydroxycyclohexane-1,3-diy1) bis(3-(3,4-dihydroxyphenyl)acrylate) =

Le Butyl-lsochlorogénamide A est préparé comme décrit précédemment en utilisant la butan-1-amine comme amine de départ.
Le solide obtenu est purifié par HPLC préparative (Vydac Denali column C18,50 x 250 mm, pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (Me0H) suivant un mode 10 isocratique de 60 % de B pendant 20 minutes à un débit de 60 mL/minutes. Le composé
obtenu est un solide blanc.
¨ Rendement isolé : 45 % (148 mg) ;
¨ Formule moléculaire C29H33N011 ;
¨ Poids moléculaire : 571,57 g/mol ;
¨ 1H (400MHz, CD30D, 300K) ppm) 0.90 (t, J=7.3Hz, 3H), 1.32 (m, 2H), 1.37 (m, 2H), 2.05 (m, 2H), 2.16 (m, 1H), 2.31 (dd, J=3.2Hz, 15.4Hz, 1H), 3.18 (t, J=7.1Hz, 2H), 3.93 (dd, J=3.3Hz, 9.72Hz, 1H), 5.46 (m, 1H), 5.53 (m, 1H), 6.30 (d, J=15.9Hz, 1H), 6.37 (d, J=16Hz, 1H), 6.77 (d, J=1.0Hz, 1H), 6.79 (d, J=1.0Hz, 1H), 6.92-6.99 (m, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.07 (m, 1H), 7.60 (d, J=15.9Hz, 1H), 7.62 (d, J=15.9Hz, 1H). 13C (100MHz, CD30D, 300K) ppm) 14.2, 21.1, 32.7, 36.9, 39.7, 40.3, 71.8, 72.8, 73.9, 76.7, 115.3 (x2), 115.4, 115.8, 116.6 (2x), 123.1 (2x), 127.9, 128.1, 146.9, 147.0, 147.2, 147.3, 149.6, 149.7, 169.1 (2x) 177.8.
¨ Rf (Et0Ac/Cy 8/2 +1%AcOH) = 0,15 Les analyses LC/MS ont été effectuées sur colonne Zorbax Eclipse (Cis, 3.0x100mm, 1.8pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (acétonitrile) suivant un gradient linéaire de 5 à 95% de B pendant 15 minutes, un gradient linéaire de 95% à 100%
pendant 1 minute puis un mode isocratique à 100% de B pendant 2 minutes à un débit de 0,4 mL/min. Rt = 9.579 min, m/z (ESI+APCI Negative mode) [M-H]- 570.2 (100).
Synthèse du Lauryl-lsochlorogénamide A (2E,2"E)-((1R,2S,3R,5S)-5-(dodecylcarbamoyl)-2,5-dihydroxycyclohexane-1,3-diy1) bis(3-(3,4-dihydroxyphenyl) acrylate) = PÅTI 648 Le Lauryl-lsochlorogénamide A est préparé comme décrit précédemment en utilisant la laurylamine comme amine de départ.
Le solide obtenu est purifié par HPLC (Luna Column C18, 5 pm, 21,2 x 250 mm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (Acétonitrile) suivant un mode isocratique

32 PCT/EP2017/059898 de 72 % de B pendant 20 minutes à un débit de 20 mL/minutes. Le composé obtenu est un solide blanc.
¨ Rendement isolé : 25 % (101 mg) ;
¨ Formule moléculaire C37H49N011 ;
¨ Poids moléculaire : 683,79 g/mol ;
¨ 1H (400MHz, CD30D, 300K) 8(ppm) 0.88 (t, J=6.3Hz, 3H), 1.05-1.38 (m, 18H), 1.49 (m, 2H), 1.98-2.20 (m, 3H), 2.31 (dd, J=15.1Hz, 3.3Hz, 1H), 3.17 (m, 2H), 3.92 (dd, J=9.7Hz, 3.3Hz, 1H), 5.46 (m, 1H), 5.52 (m, 1H), 6.30 (d, J=15.8Hz, 1H), 6.37 (d, J=15.8Hz, 1H), 6.77 (d, J=1.0Hz, 1H), 6.79 (d, J=1.0Hz, 1H), 6.90-7.00 (m, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.07 (m, 1H), 7.60 (d, J=15.8Hz, 1H), 7.62 (d, J=15.8Hz, 1H).

(100MHz, CD30D, 300K) 8(ppm) 14.6, 23.9, 28.0, 30.5 (2x), 30.6 (2x), 30.8, 30.9 (2x), 33.2, 36.9, 39.7, 40.5, 71.8, 72.8, 73.9, 76.7, 115.3 (x2), 115.4, 115.9, 116.6 (2x), 123.1 (2x), 127.9, 128.1, 146.9, 147.0, 147.2, 147.2, 149.7, 149.8, 169.1 (2x), 177.8.
¨ Rf (Et0Ac/Cy 8/2 +1%AcOH) = 0,27 Les analyses LC/MS ont été effectuées sur colonne Zorbax Eclipse (Cis, 3.0x100mm, 1.8pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (acétonitrile) suivant un gradient linéaire de 5 à 95% de B pendant 15 minutes, un gradient linéaire de 95% à 100%
pendant 1 minute puis un mode isocratique à 100% de B pendant 2 minutes à un débit de 0,4 mL/min. Rt = 14.770 min, m/z (ESI+APCI Negative mode) [M-H] 682.3 (100).
Synthèse de l'Octadécyl-lsochlorogénamide A (2E,2 E)-((1R,2S,3R,5S)-2,5-dihydroxy-5-(octadecylcarbamoyl)cyclohexane-1,3-diy1) bis(3-(3,4-dihydroxyphenyl)acrylate) .. = PAT1656 L'Octadécyl-lsochlorogénamide A est préparé comme décrit précédemment en utilisant la 1-octadécylamine comme amine de départ.
Le solide obtenu est dissous dans 20 mL d'un mélange de Me0H/DCM (1/1 v/v) et 3 g de Dowex 50WX8-100 sont ajouté. Le mélange réactionnel est agité pendant 30 minutes puis filtré. Le filtrat est évaporé sous vide et le produit obtenu est purifié par HPLC (Luna Column C18, 5 pm, 21,2 x 250 mm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B
(Acétonitrile) suivant un mode isocratique de 96 % de B pendant 5 minutes puis un mode isocratique de 100% de B pendant 20 minutes à un débit de 20 mL/minutes. Le composé
obtenu est un solide blanc.
¨ Rendement isolé : 44 % (195 mg) ;
¨ Formule moléculaire C43H61N011 ;
¨ Poids moléculaire : 767,94 g/mol ;

33 PCT/EP2017/059898 ¨ 1H (250MHz, CD30D, 300K) 8(ppm) 0.89 (t, J=6.3Hz, 3H), 1.14-1.40 (m, 30H), 1.49 (m, 2H), 1.98-2.20 (m, 3H), 2.31 (dd, J=15.1Hz, 3.3Hz, 1H), 3.17 (m, 2H), 3.92 (dd, J=9.7Hz, 3.3Hz, 1H), 5.46 (m, 1H), 5.52 (m, 1H), 6.30 (d, J=15.8Hz, 1H), 6.37 (d, J=15.8Hz, 1H), 6.77 (d, J=1.0Hz, 1H), 6.79 (d, J=1.0Hz, 1H), 6.90-7.00 (m, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.07 (m, 1H), 7.60 (d, J=15.8Hz, 1H), 7.62 (d, J=15.8Hz, 1H).

(67MHz, CD30D, 300K) 8(ppm) 14.6, 23.9, 28.0, 30.5 (2x), 30.6 (2x), 30.8, 30.9 (8x), 33.2, 37.0, 39.7, 40.6, 71.8, 72.8, 73.9, 76.8, 115.3 (x2), 115.4, 115.9, 116.6 (2x), 123.1 (2x), 127.9, 128.1, 147.0 (2x), 147.2, 147.3, 149.7, 149.8, 169.1 (2x), 177.7.
¨ Rf (Et0Ac/Cy 8/2 +1%AcOH) = 0,27 Les analyses LC/MS ont été effectuées sur colonne Zorbax Eclipse (Cis, 3.0x100mm, 1.8pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (acétonitrile) suivant un gradient linéaire de 5 à 95% de B pendant 15 minutes, un gradient linéaire de 95% à 100%
pendant 1 minute puis un mode isocratique à 100% de B pendant 9 minutes à un débit de 0,4 mL/min. Rt = 19.020 min, m/z (ESI+APCI Negative mode) [M-H] 766.4 (100).
Synthèse du Phénylbutyl-lsochlorogénamide A: (2E,2"E)-((1R,2S,3R,5S)-2,5-dihydroxy-5-(4-phenylbutylcarbamoyl)cyclohexane-1,3-diy1) bis(3-(3,4-dihydroxyphenyl)acrylate) = PAT1961 Le Phénylbutyl-lsochlorogenamide A est préparé comme décrit précédemment en utilisant la 4-phénylbutan-1-amine comme amine de départ.
Le solide obtenu est purifié par HPLC préparative (colonne Luna C18, 21.5 x 250 mm, 5 pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (Me0H) suivant un mode isocratique de 70 % de B pendant 20 minutes à un débit de 15 mL/minutes. Le composé
obtenu est un solide blanc.
¨ Rendement isolé : 28 % (17.43 mg) ;
¨ Formule moléculaire C35H37N011;
¨ Poids moléculaire : 647,66 g/mol ;
¨ 1H NMR (200 MHz, Me0D, 300K) d (ppm) 1.42 - 1.77 (m, 4H), 1.91- 2.41 (m, 4H), 2.51 - 2.67 (m, 2H), 3.22 (s, 2H), 3.93 (dd, J = 9.5, 3.0 Hz, 1H), 5.38 - 5.66 (m, 2H), 6.36 (dd, J= 15.8, 11.1 Hz, 2H), 6.80(d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.99(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.37 - 7.03 (m, 7H), 7.64 (d, J = 15.8 Hz, 2H).
¨ Rf (Et0Ac/Cy 8/2 +1%AcOH) = 0,38 Les analyses LC/MS ont été effectuées sur colonne Poroshell 120 (Cis, 3.0x150mm, 2.7pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (acétonitrile) suivant un gradient linéaire de 5 à 95% de B pendant 15 minutes, un gradient linéaire de 95% à
100% pendant

34 PCT/EP2017/059898 1 minute puis un mode isocratique à 100% de B pendant 10 minutes à un débit de 0,4 mL/min. Rt = 11.995 min, m/z (ESI+APCI Negative mode) [M-H] 646.2 Synthèse du 2-naphtyl-lsochlorogénamide Å: (2E,2 E)-((1R,25,3R,55)-2,5-dihydroxy-5-(naphthalen-2-ylcarbamoyl)cyclohexane-1,3-diy1) bis(3-(3,4-di hydroxyphenyl)acryla te) = PÅTI 960 Le 2-naphtyl-lsochlorogénamide A est préparé comme décrit précédemment en utilisant la 2-naphtylamine comme amine de départ.
Le solide obtenu est purifié par HPLC préparative (colonne Luna C18, 21.5 x 250 mm, 5 pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (Me0H) suivant un mode isocratique de 70% de B pendant 20 minutes à un débit de 15 mL/minutes. Le composé
obtenu est un solide blanc.
¨ Rendement isolé : 34 % (21.09 mg) ;
¨ Formule moléculaire C35H31N011;
¨ Poids moléculaire : 641,62 g/mol ;
¨ 1H (200 MHz, Me0D, 300K) d (ppm) 1.95 - 2.56 (m, 4H), 4.02 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.48 - 5.64 (m, 2H), 6.36 (dd, J = 24.4, 15.9 Hz, 2H), 6.65 - 7.17 (m, 6H) , 7.26 -7.46 (m, 2H), 7.50 - 7.89 (m, 6H), 8.23 (s, 1H).
¨ Rf (Et0Ac/Cy 8/2 +1%AcOH) = 0,52 Les analyses LC/MS ont été effectuées sur colonne Poroshell 120 (Cis, 3.0x150mm, 2.7pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (acétonitrile) suivant un gradient linéaire de 5 à 95% de B pendant 15 minutes, un gradient linéaire de 95% à
100% pendant 1 minute puis un mode isocratique à 100% de B pendant 10 minutes à un débit de 0,4 mL/min. Rt = 12.272 min, m/z (ESI+APCI Negative mode) [M-H] 640.2 Synthèse du octyl-chlorogénamide : (E)-((1R,2R,3R,55)-2,3,5-trihydroxy-5-(octylcarbamoyl)cyclohexyl) 3-(3,4-dihydroxyphenyl)acrylate = PÅTI 962 Le octyl-chlorogénamide est préparé comme décrit précédemment en utilisant la octylamine comme amine de départ et l'acide 3-chlorogénique pour l'acide de départ.
Le solide obtenu est purifié par HPLC préparative (colonne Luna C18, 21.5 x 250 mm, 5 pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (Me0H) suivant un mode isocratique de 70 % de B pendant 20 minutes à un débit de 15 mL/minutes. Le composé
obtenu est un solide blanc.
¨ Rendement isolé : 16 % (14.99 mg) ;
¨ Formule moléculaire C24H35N08;
¨ Poids moléculaire : 465,53 g/mol ;

35 ¨ 1H NMR (200 MHz, Me0D, 300K) d (ppm) 0.78- 1.04 (m, 3H), 1.15 - 1.42 (m, 10H), 1.43 - 1.59 (m, 2H), 1.84- 2.24 (m, 4H), 3.08- 3.27 (m, 2H), 3.73 (dd, J =
9.8, 3.0 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.30 - 5.54 (m, 1H), 6.31 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 8.2, 1.9 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 15.9 Hz, 1H).
¨ Rf (Et0Ac/Cy 8/2 +1%AcOH) = 0,28 Les analyses LC/MS ont été effectuées sur colonne Poroshell 120 (Cis, 3.0x150mm, 2.7pm) avec un solvant A (H20 + 0.1% HCOOH) et un solvant B (acétonitrile) suivant un gradient linéaire de 5 à 95% de B pendant 15 minutes, un gradient linéaire de 95% à
100% pendant 1 minute puis un mode isocratique à 100% de B pendant 10 minutes à un débit de 0,4 mL/min. Rt = 12.762 min, m/z (ESI+APCI Negative mode) [M-H]- 464.2 Exemple 2 : Analyse des effets des composés selon l'invention sur la production des médiateurs inflammatoires IL-6, IL-8, TNF-a, leukotriène B4 et prostaglandine E2 par des kératinocytes NHEKs en état inflammatoire.
L'étude a consisté à mesurer les effets anti-inflammatoires de 6 composés par analyse de la production de médiateurs inflammatoires cibles : Interleukine 8 (IL-8), Prostaglandine E2 (PGE2), Interleukine 6 (IL-6), Tumor Necrosis Factor alpha (TNF-a) et Leukotriène B4 (LTB4).
Matériels et méthodes Composés Les 6 composés étudiés sont décrits dans le tableau 5 ci-dessous :
Code Composé Concentrations Solvant testées PAT965 3,5-DCQ (acide isochlorogénique A) PAT964 3,4-DCQ (acide isochlorogénique B) PAT967 4,5-DCQ (acide isochlorogénique C) 100pM, 50pM, Composés 25pM, 12,5pM, préparés dans du PAT1658 Butyl-lsochlorogénamide A 6,25pM DMSO
100%
PAT1657 Octyl-lsochlorogénamide A
PAT1648 Lauryl-lsochlorogénamide A
Tableau 5. Composés étudiés

36 PCT/EP2017/059898 Culture cellulaire L'étude a été réalisée sur des kératinocytes humains NHEKs (Lonza, CC-2507, origine :
prépuce) cultivés en monocouche en milieu Epilife (Invitrogen, M-EPI-500-A) contenant les composants du mélange HKGS (Human Keratinocyte Growth Supplement, Invitrogen, S-001-K) ajoutés séparément, hormis l'hydrocortisone ayant des propriétés anti-inflammatoires.
Détermination des concentrations d'analyse des 6 composés par une étude de cyto toxicité
Afin de déterminer la concentration d'analyse optimale pour chacun des composés, une expérience préliminaire a été réalisée sur kératinocytes NHEKs. L'étude a consisté à
évaluer la viabilité des cellules au MTS (3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-5-(3-carboxy-methoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium) (Promega, G3581) après 26h et 50h de traitement avec ces composés, et ce à 5 concentrations (100 pM, 50 pM, 25 pM, 12,5 pM, 6,25 pM), en triples de culture (n=3). Les cellules ont été ensemencées en plaque 24-puits, 24h avant le traitement avec les différentes concentrations des composés à tester.
Le SDS (VWR, 444464T) à 0,008% a été utilisé comme contrôle positif de cytotoxicité afin de valider l'expérience.
Induction de l'état inflammatoire au sein d'une culture de kératinocytes NHEKs et application des composés Induction de l'état inflammatoire et cinétiques expérimentales Pour la quantification de l'IL-8 et de la PGE2, l'état inflammatoire des kératinocytes NHEKs en culture a été induit par un traitement à la PMA (Phorbol Myristate Acétate /10 ng/ml / H20) durant 24h. L'induction de l'IL-6 a été obtenue par un traitement à la PMA
(10 ng/ml / H20) combinée à l'ionophore de calcium A23187 (2 pe / DMSO) dans un milieu contenant du calcium à une concentration de 0,8 mM. La sécrétion de TNF-a a été induite par une combinaison de PMA (10 ng/ml / H20) et d'ionophore de calcium A23187 (2 pe /
DMSO) appliqués durant 24h (TNF-a) dans un milieu contenant 0,06 mM de calcium. Les molécules de référence utilisées sont la dexaméthasone (10 pM / H20) et l'indométhacine (10 g/ml / éthanol).
L'induction de la production de LTB4 ayant une cinétique très rapide, le schéma a été
adapté. Dans ce cas, l'induction de l'état inflammatoire a été réalisée pendant 2h par l'application de l'acide arachidonique (a.a. / 1 pe / éthanol) associé à
l'ionophore de calcium A23187 (2 pe / DMSO). L'acide nordihydroguaiarétique (NDGA) a été
utilisé
comme molécule de référence (2 pe / éthanol).

37 PCT/EP2017/059898 L'effet des composés a été étudié par application de ceux-ci dans le milieu de culture des kératinocytes 2h préalablement à l'induction de l'état inflammatoire ainsi que durant l'induction (2h pour LTB4, 24h pour IL-8, PGE2, IL-6 et TNF-oc ).
Chaque condition a été réalisée en triples de culture et les surnageants ont été récupérés au terme des différents traitements.
Les schémas des inductions réalisées pour les différents médiateurs inflammatoires étudiés sont représentés dans la Figure 1.
Les surnageants de cultures ont été récoltés au terme de chaque cinétique étudiée. Ceux-ci ont été aliquotes et congelés à -20 C jusqu'au jour de l'analyse.
La quantification des différents médiateurs inflammatoires a été réalisée avec des kits spécifiques, sur base d'une droite standard, selon les instructions fournies par les fournisseurs des kits, REtD Systems, Cayman chemical.
Les cellules, traités et non traitées par les composés à tester, ont été
observées au microscope optique 48h après le traitement inflammatoire suivant : PMA 10 ng/mL/ H20 + ionophore de calcium A23187 2pM/DMSO.
Résultat Détermination de la concentration d'analyse de chacun des 6 composés par une étude de cytotoxicité
Afin d'optimiser les concentrations de travail des composés, une étude de cytotoxicité
sur kératinocytes NHEKs a été réalisée, sur base de 5 concentrations (100pM, 50pM, 25pM, 12,5pM, 6,25pM) de chacun des 6 composés préparés dans du DMSO.
Les paramètres expérimentaux étaient identiques à ceux utilisés par la suite pour l'étude des effets sur les médiateurs inflammatoires, en termes de passages en culture des cellules, confluence et temps de contact (26h pour l'IL-6, l'IL-8, le TNF-oc, le LTB4 et la PGE2).
Le SDS, à 0,008 % a été utilisé comme contrôle positif de cytotoxicité afin de valider l'expérience.
Les résultats sont illustrés dans les Figures 2 et 3 et sont exprimés en pourcentage par rapport à la condition contrôle (CTL) non traité et le seuil de cytotoxicité a été
arbitrairement fixé à 80% de viabilité.
Sur la base de ces résultats, une concentration de 50 pM a été choisie pour chacun des 6 composés.

38 PCT/EP2017/059898 Quantification des médiateurs sécrétés dans les surnageants de culture par des kératinocytes en état inflammatoire Avant l'induction de l'état inflammatoire, les kératinocytes NHEKs ont été
traités par les composés et molécules de référence durant 2h. L'état inflammatoire a ensuite été induit selon les conditions décrites dans la partie méthodologie, les surnageants de culture ont été collectés et les différents médiateurs inflammatoires ont été quantifiés par la technique ELISA.
Quantification de l'IL-8 L'effet des composés sur la production d'IL-8 est présenté dans la Figure 4.
Les données sont exprimées par rapport à la production d'IL-8 par les kératinocytes en état inflammatoire (traités à la PMA), dont la condition a été fixée arbitrairement à 100%.
Les résultats montrent que le traitement à la PMA induit bien une surproduction de l'IL-8 et la dexaméthasone à 10 pM présente un effet inhibiteur très hautement significatif sur la production d'IL-8, ce qui valide l'expérience.
En outre, chacun des 6 composés diminue de façon très hautement significative la production d'IL-8 par rapport à la condition contrôle induite (CTL). Les composés PAT1657 et PAT1648 sont particulièrement efficaces voir même supérieurs à la molécule de référence (dexaméthasone), puisqu'ils permettent d'inhiber/de diminuer la production d'IL-8 au niveau de base mesuré en condition non induite (CTL non traité).
Quantification de la PGE2 L'effet des composés sur la production de PGE2 est présenté dans Figure 5 et est exprimé
en pourcentage par rapport au traitement à la PMA fixé à 100%.
La production de PGE2 est bien induite suite au traitement à la PMA et l'indométhacine permet de réduire à un niveau quasiment indétectable cette production de PGE2 dans les surnageants de culture.
Quant aux composés, ils diminuent tous la production de PGE2. Les composés PAT1648, PAT1657 et, dans une moindre mesure, les composés PAT1658 et PAT967 permettent une diminution très hautement significative du niveau de PGE2 présent dans les surnageants de culture.
Quantification de l'IL-6 L'effet des composés sur la production de l'IL-6 par les kératinocytes NHEKs en état inflammatoire est présenté dans la Figure 6 et est exprimé en pourcentage par rapport

39 PCT/EP2017/059898 au traitement à la PMA combinée à l'ionophore de calcium A23187 (en condition hyper calcique : 0,8 mM Ca2+).
Le traitement à la PMA combinée à l'ionophore de calcium en présence de Ca2+ à
0,8 mM
permet bien d'induire la surproduction de l'IL-6. La molécule de référence, à
savoir la dexaméthasone, inhibe cette production d'IL-6 de manière très hautement significative, ce qui valide le test.
Une fois de plus, chacun des composés diminue de façon très hautement significative la production d'IL-6 par les kératinocytes NHEKs en état inflammatoire. Les 2 composés PAT1648 et PAT1657 permettent les diminutions les plus importantes et sont plus .. efficaces que la dexaméthasone elle-même.
Quantification du TNF-a L'effet des composés sur la production de TNF-a est illustré dans la Figure 7 par rapport au traitement à la PMA combinée à l'ionophore de calcium A23187.
Le traitement à la PMA combinée à l'ionophore de calcium permet d'induire la sécrétion du TNF-a dans les surnageants de culture des kératinocytes. La dexaméthasone à
10 pM
présente un effet inhibiteur très hautement significatif sur la production de TNF-a.
Les composés agissent tous en tant qu'inhibiteurs de la production du TNF-a et ce, de façon très hautement significative. Une fois encore, ce sont les composés PAT1648 et PAT1657 qui présentent les effets les plus marqués et sont plus efficaces que la dexaméthasone elle-même.
Quantification du LTB4 Les effets des composés sur la production de LTB4 sont présentés Figure 8 et sont exprimés en pourcentage par rapport au traitement à l'acide arachidonique (a.a.) combiné à l'ionophore de calcium A23187 fixé à 100%.
.. Le traitement des cellules à l'acide arachidonique combiné à l'ionophore de calcium permet d'induire la sécrétion de LTB4. La molécule de référence, à savoir le NDGA, inhibe de manière très hautement significative cette production de LTB4 dans la cinétique étudiée.
Les composés PAT1648, PAT1657 et dans une moindre mesure le composé PAT1658, bloquent/diminuent également de manière très hautement significative le niveau de LTB4.

40 PCT/EP2017/059898 Evaluation de la survie cellulaire Des kératinocytes NHEK ont été mises en contact ou non avec les composés à
tester. Au bout de 2h, les cellules ont subi ou non un traitement d'inflammation (PMA 10 ng/mL/
H20 + ionophore de calcium A23187 2pM/DMS0).
Les cellules ont été observées au microscope optique 48h après le traitement inflammatoire.
L'observation microscopique des cultures après 48h d'incubation est présentée dans le tableau 6 suivant :
Groupe Traitement Résultat à 48h d'inflammation reçu Culture contrôle saine Non Culture à confluence : 100% de cellules survivantes Culture contrôle Oui 10% de cellules survivantes pathologique Culture + Oui 10% de cellules survivantes dexaméthasone (molécule de référence) Culture + PAT965 Oui 10% de cellules survivantes Culture + PAT964 Oui 10% de cellules survivantes Culture + PAT967 Oui 10% de cellules survivantes Culture + PAT1658 Oui 80% de cellules survivantes Culture + PAT1657 Oui Culture à confluence :100% de cellules survivantes Culture + PAT1648 Oui Culture à confluence :100% de cellules survivantes Tableau 6 : Résultats de l'observation microscopique des cultures de kératinocytes NHEK
48h après le traitement inflammatoire.
On observe que la molécule de référence (dexaméthasone), ainsi que les composés PAT965, PAT964 et PAT967 n'ont pas ou peu d'effet sur la survie cellulaire. A
l'inverse, les composés PAT1658, et surtout PAT1657 et PAT1648 montrent une forte protection cellulaire contre l'inflammation.
Cependant, il est remarquable qu'en présence des composés PAT1658, et surtout et PAT1648, les kératinocytes sont protégés contre la toxicité induites par l'inflammation.
Conclusion De manière générale, les 6 composés testés présentent des effets anti-inflammatoires remarquables.

41 PCT/EP2017/059898 Selon les marqueurs analysés, plusieurs d'entre eux (PAT1648 et PAT1657) présentent un effet protecteur supérieur aux contrôles internes considérés comme références absolues en la matière (dexaméthasone et indométhacine).
Par ailleurs, les 3 composés PAT1648, PAT1657 et PAT1658 démontrent un effet protecteur majeur sur la cytotoxicité induite sur des kératinocytes en état inflammatoire depuis 48H. Ces observations se basent sur l'analyse en microscopie des cellules 48h après le traitement inflammatoire.
Ces 3 composés présentent donc un potentiel cytoprotecteur et anti-inflammatoire remarquable.
Exemple 3 : Etude de l'effet anti-inflammatoire du composé PAT1657 chez des souris femelles hairless SKH-1 soumises à l'induction d'une inflammation cutanée par applications cutanées répétées de solution acétonique de TPA (12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate) Matériels et méthodes Animaux L'étude est effectuée sur 18 souris femelles Hairless Skh-1, pesant environ 20-25 g et réparties en 3 groupes (n=6 /Stabulation par 2 des souris) dans des conditions contrôlées de température (24 2 C), d'humidité (50 20%), et avec un cycle de lumière inversé de 12h (lumière de 21h à 9h) (nourriture et boisson ad libitum).
Composés à tester Les composés à tester sont les suivants :
= Pommade Excipial (contrôle) = PAT1657 (octyl-lsochlorogénamide A) incorporé à 1,33% ou 2,67% en masse dans la pommade Excipial Les groupes de traitement sont répartis de la manière suivante :
= G1 : inflammation cutanée induite + traitement quotidien avec le véhicule (pommade Excipial(D) (Contrôle), = G2 : inflammation cutanée induite + traitement avec PAT1657 incorporé à
1,33% en masse dans pommade Excipial (PAT1657/1,33%), = G3 : inflammation cutanée induite + traitement avec PAT1657 incorporé à
2,67% en masse dans pommade Excipial (PAT1657/2,67%).

42 PCT/EP2017/059898 Induction et maintien de l'inflammation cutanée L'inflammation cutanée est induite pour chaque souris, par l'application cutanée quotidienne au niveau dorsal sur la zone A (Figure 9) pendant 7 jours (J1 à
J7) de 100 pl de solution acétonique de TPA à une concentration de 0,2 mg/ml.
Elle est ensuite maintenue par application cutanée tous les 2 jours pendant 7 jours (J8 à
J14) de 100 pl de solution acétonique de TPA.
La mise au contact de la solution acétonique de TPA au niveau de la même zone cutanée pour chaque souris est effectuée avec l'utilisation d'un système de contention.
Traitement des animaux Le début des traitements a lieu 7 jours après le début de l'induction de l'inflammation cutanée (J8).
Pour le véhicule, le traitement quotidien des animaux (G1) se fait par application cutanée 0,125 g de pommade sur le dos des souris au large de la zone d'application de la solution acétonique de TPA (surface de 5 cm2 environ correspondant aux zones A et B
représentées en Figure 9), pendant 7 jours de J8 à J14.
Pour le composé PAT1657, le traitement des animaux (G2 et G3) se fait par application cutanée de 0,125 g de pommade sur le dos des souris au large de la zone d'application de la solution acétonique de TPA (surface de 5 cm2 environ correspondant aux zones A et B
représentées en Figure 9), à J8, J11 et J14.
Les jours où les applications de la solution acétonique de TPA étaient effectuées, les pommades étaient appliquées 1 heure environ après application de la solution acétonique de TPA.
Suivi des animaux = Observation quotidienne des animaux avant et après traitement, = Pesée des animaux 1 fois par semaine.
Scorage visuel macroscopique de l'inflammation cutanée Le scorage visuel macroscopique de l'inflammation cutanée est réalisée quotidiennement pour chaque souris de J8 à J15 en la quantifiant selon l'échelle suivante (Guenon-Macé
et al. ,2015) :
0 : nulle ou plus d'inflammation 1 : faible 2: modéré
3 : important 4: très important

43 PCT/EP2017/059898 Le scorage visuel macroscopique de l'inflammation cutanée permet de quantifier les paramètres suivants :
- degré d'inflammation cutanée au niveau de la zone application de la solution acétonique de TPA et de la zone de traitement par une pommade correspondant à
la zone A de la Figure 9, - degré d'inflammation cutanée au niveau de la zone de traitement par la pommade et en dehors de la zone d'application de la solution acétonique de TPA
correspondant à la zone B de la Figure 9, - degré d'inflammation cutanée sur le reste du dos correspondant à la zone C
de la Figure 9, - Score macroscopique global d'inflammation cutanée (addition des scores des trois zones A, B et C schématisées Figure 9).
Résultat Mortalité des animaux Aucune mortalité observée dans l'ensemble des groupes de traitement au cours de l'expérimentation.
Comportement des animaux Aucun comportement anormal observé dans l'ensemble des groupes de traitement au cours de l'expérimentation. Aucune différence significative de poids dans l'ensemble des groupes de traitement n'a été observée au cours de l'expérimentation.
Réaction à l'application des produits à tester Aucune réaction observée dans l'ensemble des groupes traités avec les pommades testées (contrôle et PAT1657) au cours de l'expérimentation.
Scorage macroscopique de l'inflammation cutanée Les résultats des mesures du degré de l'inflammation cutanée au niveau de l'application de la solution acétonique de TPA et de la zone de traitement (zone A, figure 9) en fonction du traitement utilisé (contrôle et deux concentrations de PAT1657) sont représentés dans la Figure 10. On observe une diminution significative du scorage visuel macroscopique de l'inflammation cutanée pour le composé PAT1657 aux 2 doses testées par rapport au contrôle à partir de J13.
Les résultats des mesures du degré de l'inflammation cutanée au niveau de la zone de traitement et en dehors de la zone d'application de la solution acétonique de TPA (zone B, Figure 9) en fonction du traitement utilisé (contrôle et deux concentrations de PAT1657) sont représentés dans la Figure 11. On observe une diminution significative du scorage visuel macroscopique de l'inflammation cutanée pour le composé PAT1657 aux 2 doses testées par rapport au contrôle à partir de J13.

44 PCT/EP2017/059898 Les résultats des mesures du degré de l'inflammation cutanée au niveau du reste du dos (zone C, Figure 9) en fonction du traitement utilisé (contrôle et deux concentrations de PAT1657) sont représentés dans la Figure 12. On observe une diminution significative du degré de l'inflammation pour le composé PAT1657 aux 2 doses testées par rapport au contrôle à partir de J10.
Les résultats des mesures du degré de l'inflammation cutanée global (zones A, B et C, Figure 9) en fonction du traitement utilisé (contrôle et deux concentrations de PAT1657) sont représentés dans la Figure 13. On observe une diminution significative du scorage visuel macroscopique de l'inflammation cutanée pour le composé PAT1657 aux 2 doses testées par rapport au contrôle à partir de J10.
Conclusion Le composé PAT1657 aux 2 doses testées, administré par application cutanée tous les 3 jours, en traitement curatif chez des souris femelles Hairless Skh-1 soumises à l'induction d'une inflammation cutanée, a réduit significativement l'intensité de celle-ci d'un point de vue macroscopique avec un effet dose-dépendant.
Exemple 4 : Etude de l'effet du composé PAT1657 sur le traitement de psoriasis induit avec l'imiquimod chez la souris Balb/c Matériels et méthodes Animaux L'étude est effectuée sur 40 souris femelles Balb/c, pesant environ 18-20 g et randomisées sur la base du poids en 5 groupes (n = 8) en fonction des traitements, dans des conditions contrôlées de température (24 2 C), d'humidité (50 20%), et avec un cycle de lumière inversé de 12h (lumière de 20h00 à 08h00) (nourriture et boisson ad libitum).
Composés à tester Les composés à tester sont les suivants :
= Pommade neutre Excipial (contrôle) = PAT1657 (octyl-lsochlorogénamide A) incorporé à 1,33% ou 2,67% en masse dans la pommade Excipial = Crème Aldara contenant 5% d'imiquimod, agent inducteur du psoriasis = Crème Dermoval contenant 0,05% de propionate de clobétasol et utilisée pour le traitement topique du psoriasis (produit de référence) Les groupes de traitement sont répartis de la manière suivante :

45 PCT/EP2017/059898 - Groupe 1 : pas d'induction de psoriasis mais application cutanée de pommade neutre de J1 à J10 et traitement avec la pommade neutre Excipial de J7 à J10 (contrôle négatif) (EP/EP) ;
- Groupe 2 : induction de psoriasis par application cutanée de crème Aldara contenant de l'imiquimod de J1 à J10 et traitement avec la pommade neutre Excipial de J7 à J10 (contrôle positif) (ALD/EP) ;
- Groupe 3 : induction de psoriasis par application cutanée de crème Aldara contenant de l'imiquimod de J1 à J10 et traitement avec la pommade neutre contenant 1,33% de composé PAT1657 de J7 à J10 (ALD/PAT1657-1,33%) ;
- Groupe 4 : induction de psoriasis par application cutanée de crème Aldara contenant de l'imiquimod de J1 à J10 et traitement avec la pommade neutre contenant 2,67% de composé PAT1657 de J7 à J10 (ALD/PAT1657-2,67%) ;
- Groupe 5 : induction de psoriasis par application cutanée de crème Aldara contenant de l'imiquimod de J1 à J10 et traitement avec la crème Dermoval de J7 à J10 (ALD/Dermoval,0).
Induction et maintien du psoriasis Pour réaliser l'induction du psoriasis, il a été nécessaire d'éliminer les poils des animaux sur le dos en les rasant et en les épilant pour avoir accès direct au tissu cutané. Le psoriasis a été induit sur l'ensemble des souris des groupes 2 à 5 par une application cutanée quotidienne pendant 10 jours, de J1 à J10, d'environ 70 mg de crème Aldara .
La crème a été appliquée sur le dos des souris préalablement rasé à l'aide d'un pinceau de soie. Pour les souris du groupe 1, une application cutanée quotidienne de pommade neutre Excipial a été effectuée dans les mêmes conditions : environ 70 mg ont été
appliqués pendant 10 jours de J1 à J10 dans la matinée à l'aide d'un pinceau de soie.
Traitement des animaux Les pommades contenant le composé PAT1657 aux 2 doses à tester, la pommade neutre Excipial et la crème Dermoval ont été administrées par applications cutanées pendant 4 jours de J7 à J10 sur le dos des souris au niveau de la région d'induction du psoriasis.
Pour chaque application, environ 100 mg de pommade ou de crème ont été
appliqués à
l'aide d'un pinceau en soie, 4 heures au minimum après application de crème Aldara ou de pommade neutre Excipial pour l'induction ou non de psoriasis.
Scorage de la sévérité du psoriasis (PAS!) Un scorage de la sévérité du psoriasis (PASI) a été effectué quotidiennement tout au long de l'expérimentation de J1 à J11, en tenant compte de 3 paramètres qui étaient :

46 PCT/EP2017/059898 = La présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis, c'est-à-dire des rougeurs sur la peau, avec la grille de score suivante : 0 =
aucun ou plus d'érythème ; 1 = érythème léger ; 2 = érythème modéré ; 3 = érythème important ; 4 =
érythème très important.
= Le degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis, c'est-à-dire le durcissement et l'épaississement de la peau, avec la grille de score suivante : 0 = aucune ou plus d'induration ; 1 = induration légère ; 2 = induration modérée ; 3 =
induration importante ; 4 = induration très importante.
= Le degré de desquamation au niveau de la région d'induction du psoriasis, c'est-à-dire la présence de plaques à la surface de la peau, avec la grille de score suivante : 0 = aucune ou plus de desquamation ; 1 = desquamation légère ; 2 =
desquamation modérée ; 3 = desquamation importante ; 4 = desquamation très importante.
La somme des scores de ces 3 paramètres a permis d'obtenir le score de sévérité du psoriasis.
Analyses statistiques Les scores de présence d'érythème, de degré d'induration et de desquamation et le score de sévérité du psoriasis (PASI) ont été analysés à la fin de l'expérimentation. Une analyse de la variance (ANOVA) a été réalisée en mode non paramétrique à l'aide du test de Kruskal-Wallis suivi en cas de significativité par le test de Mann-Whitney pour comparer les groupes traités aux groupes contrôle négatif EP/EP, contrôle positif ALD/EP et ALD/Dermoval . Les traitements statistiques ont été réalisés à l'aide du logiciel Statview,05 (SAS, Institute Inc., USA) et les différences ont été considérées significatives pour des valeurs de P<0.05.
Résultat Mortalité des animaux Aucune mortalité n'a été observée au cours de l'expérimentation dans les 4 groupes de traitement.
Comportement des animaux Aucun comportement anormal des animaux n'a été observé au cours de l'expérimentation dans les 4 groupes de traitement.
Scorage de la sévérité du psoriasis (PAS!) Présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis

47 PCT/EP2017/059898 Au cours de la période d'entretien du psoriasis et la réalisation des traitements entre J8 et J11, les différences significatives suivantes ont été observées :
- Pour J8, les scores moyens de présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,001 ; P=0,007 et P=0,007, respectivement).
- Pour J9, les scores moyens de présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,002 ; P=0,002 et P=0,004, respectivement).
- Pour J10, les scores moyens de présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,001 dans tous les cas). Le score moyen de présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris du groupe ALD/PAT1657-1,33% a été
significativement plus faible que celui des souris du groupe ALD/Dermoval (P=0,037) et celui des souris du groupe ALD/PAT1657-2,67% a montré une tendance à être significativement plus faible que celui des souris du groupe ALD/Dermoval (P=0,079).
- Pour J11, les scores moyens de présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,001 dans tous les cas). Les scores moyens de présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%
et ALD/PAT1657-2,67% ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/Dermoval (P=0,001 et P=0,014, respectivement).
Degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis Au cours de la période d'entretien du psoriasis et la réalisation des traitements entre J8 et J11, les différences significatives suivantes ont été observées :
- Pour J8, les scores moyens du degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,001; P=0,004 et P=0,001, respectivement).
- Pour J9, les scores moyens du degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe

48 PCT/EP2017/059898 ALD/EP (P=0,001; P=0,001 et P=0,001, respectivement). Le score moyen du degré
d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris du groupe ALD/PAT1657-1,33% a été significativement plus élevé que celui des souris du groupe ALD/Dermoval (P=0,015).
- Pour J10, les scores moyens du degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,001 dans tous les cas). Les scores moyens du degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%
et ALD/PAT1657-2,67% ont été significativement plus élevés que celui des souris du groupe ALD/Dermoval (P=0,025) dans les 2 cas.
- Pour J11, les scores moyens du degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,001 dans tous les cas). Le score moyen du degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris du groupe ALD/PAT1657-1,33% a montré une tendance à être significativement plus élevé que celui des souris du groupe ALD/Dermoval (P=0,063).
Degré de desquamation au niveau de la région d'induction du psoriasis Au cours de la période d'entretien du psoriasis et la réalisation des traitements entre J8 et J11, les différences significatives suivantes ont été observées :
- Pour J8, scores moyens du degré de desquamation au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,007 ; P=0,006 et P=0,013, respectivement).
- Pour J9 et Jio, les scores moyens du degré de desquamation au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67%
et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,001 dans tous les cas).
- Pour J11, les scores moyens du degré de desquamation au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP (P=0,001 dans tous les cas). Le score moyen du degré de desquamation au niveau de la région d'induction du psoriasis des souris du groupe ALD/PAT1657-1,33% a été
significativement plus élevé que celui des souris du groupe ALD/Dermoval et celui des

49 PCT/EP2017/059898 souris du groupe ALD/PAT1657-2,67% a montré une tendance à être significativement plus élevé que celui des souris du groupe ALD/Dermoval (P=0,059).
= Score de sévérité du psoriasis (PASI) Le score de sévérité du psoriasis (PASI) correspond à la somme des scores de la présence d'érythème, du degré d'induration et du degré de desquamation au niveau de la région d'induction du psoriasis et des traitements. La Figure 14 montre les scores moyens de sévérité du psoriasis des souris des 5 groupes de traitement au cours de l'expérimentation.
Le test de Kruskal-Wallis montre qu'il n'y a pas eu de différence significative entre les scores moyens de sévérité du psoriasis sur les souris des 5 groupes de traitement avant le début de l'induction du psoriasis à J1.
Au cours de la période d'induction du psoriasis et avant le début des traitements entre J2 et J7, les scores moyens de sévérité du psoriasis des souris des groupes ALD/EP, ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été
significativement plus élevés que ceux des souris du groupe EP/EP représenté sur la Figure 14 par la courbe avec les croix se fondant avec l'axe des abscisses (P=0,009 ; P=0,009 ;
P=0,003 et P=0,009, respectivement pour J2, et P=0,001 dans tous les cas pour J3 à J7) Au cours de la période d'entretien du psoriasis et la réalisation des traitements entre J8 et J11, les différences significatives suivantes ont été observées :
- Pour J8, les scores moyens de sévérité du psoriasis des souris des groupes 1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP représenté sur la Figure 14 par la courbe avec les ronds (P=0,001 ; P=0,001 et P=0,001, respectivement).
- Pour J9, J10 et J11, les scores moyens de sévérité du psoriasis des souris des groupes ALD/PAT1657-1,33%, ALD/PAT1657-2,67% et ALD/Dermoval ont été
significativement plus faibles que celui des souris du groupe ALD/EP représenté sur la Figure 14 par la courbe avec les ronds (P=0,001 dans tous les cas).
Conclusion Le composé PAT1657 aux 2 doses testées a montré des effets significatifs sur le traitement du psoriasis. Le composé PAT1657 a permis de diminuer de façon significative et comparable à la crème Dermoval la présence d'érythème au niveau de la région d'induction du psoriasis, le degré d'induration au niveau de la région d'induction du psoriasis et le degré de desquamation au niveau de la région d'induction du psoriasis, permettant donc de diminuer significativement le score de sévérité du psoriasis.

50 PCT/EP2017/059898 Exemple 5 : Caractérisation du composé PAT1657 vis-à-vis d'un bénéfice pour la peau.
L'étude a consisté à mesurer les effets du composé PAT1657 par qRT-PCR sur l'expression de 94 gènes impliqués dans la biologie du derme, le remodelage des tissus conjonctifs et le vieillissement.
Le protocole a consisté à appliquer le composé PAT1657 durant 24h dans le milieu de culture de fibroblastes humains NHDFs (Normal Human Dermal Fibroblasts) en monocouche, et à analyser les différentes populations d'ARN pour identifier les gènes différentiellement exprimés par qRT-PCR en temps réel.
Matériels et méthodes L'étude a été réalisée sur des fibroblastes de derme humains NHDFs (Normal Human Dermal Fibroblasts) (ATCC, CRL-2522, origine : prépuce) à environ 40% de leur potentiel prolifératif et cultivés en monocouche en milieu DMEM (lnvitrogen, 31885-049) contenant des antibiotiques (pénicilline/streptomycine, lnvitrogen, 15140-122) mais ne contenant pas de sérum. Les cellules ont été maintenues dans une atmosphère humide à 37 C
contenant 5% de CO2.
Une étude préalable de cytotoxicité a permis de définir une concentration de travail de 4 pM (préparé dans du DMSO) pour le composé PAT1657 pour l'étude d'expression génique.
Le composé PAT1657 a été appliqués dans le milieu de culture des fibroblastes NHDFs durant 24h (n=3). Des contrôles traités par le solvant DMSO (1% pour les fibroblastes NHDFs) dans lequel ont été préparés les actifs ont également été analysés. Au terme des traitements, les populations d'ARNs totaux ont été extraites, leur intégrité a été analysée par électrophorèse capillaire, et les différences d'expression géniques ont été analysées par qRT-PCR à l'aide de cartes microfluidiques TaqMan 96-puits (produites à
façon par Applied Biosystems), ciblant les fonctions clés du derme et de l'épiderme. Les détails techniques de mise en oeuvre du présent paragraphe sont détaillés dans la partie Matériels et méthodes relative à l'exemple 1 la demande de brevet FR1650745 et plus particulièrement la sous-partie intitulée Analyse des modifications d'expression génique (page 26 ligne 22 à la page 28 ligne 9).
Les modifications d'expression de gènes induites par les actifs sont exprimées sous forme de quantité relative (RQ) par rapport aux contrôles solvant DMSO respectifs.
Résultats Le composé PAT1657 induit de nombreuses inductions remarquables.
Les résultats sont présentés de manière récapitulative sous forme d'un tableau (Tableau 7) indiquant des gènes représentatifs d'un effet cosmétique bénéfique, variant significativement, avec le composé PAT1657 appliqué pendant 24h sur des fibroblastes de derme humains NHDFs.

51 PCT/EP2017/059898 Symbole du Non du gène RQ P-value gène CCL5 Chémokine (C-C motif) ligand 5 28,13 0,0006 VEGFA Vasculaire endothélial facteur de croissance A 8,28 0.0001 MMP1 Matrice métalloprotéinase 1 (interstitiel 6,91 0,0447 collagénase) POU5F1 POU domaine, classe 5, facteur de transcription 5,10 0,0305 1 (POU5F1) NANOG Homéobox protéine NANOG 4,67 0,0406 50D2 Superoxyde dismutase 2, mitochondrial 4,66 0,001 RORA Nucléaire récepteur ROR-alpha ( Retinoid- 4,41 0,0317 related orphan receptor-alpha ) GADD45A Growth arrest and DNA-damage-inducible, 3,68 0,0024 alpha MMP3 Matrice métalloprotéinase 3 (stromelysin 1) 3,12 0,007 TXNRD1 Thioredoxine réductase 1 2,82 0,0007 DDIT3 DNA damage inducible transcript 3 protéine 2,81 0,0056 FTL Ferritine, Light polypeptide 1 2,08 0,0005 SIRT1 Sirtuin NAD-dépendent deacétylase sirtuin-1 2,02 0,0047 KLF4 Krueppel-like facteur 4 1,93 0,0147 MTNR1A Mélatonine récepteur type 1A 1,46 0,0014 NOX1 NADPH oxydase 1 1,46 0,0014 RBP2 Rétinol-binding protéine 2 1,46 0,0014 Tableau 7 : Gènes qui augmentent de manière significative avec l'extrait PAT1657 (à 4 pM) appliqué pendant 24h sur fibroblastes de derme humains NHDFs. Le symbole des gènes, le nom des gènes, l'expression relative (RQ) par rapport au véhicule DMSO à 1% et la valeur p (p-value) sont présentés.
Effet Cicatrisant :
L'accélération de cicatrisation est notamment favorisée par la migration des fibroblastes vers le site de lésion cutanée, la stimulation de l'angiogenèse et la déposition de collagène. Le composé PAT1657 augmente l'expression des gène CCL5 (28,13 x) et VEGFA
(8,3 x) codant respectivement pour une chémokine et un médiateur de l'angiogenèse qui

52 PCT/EP2017/059898 jouent un rôle dans la cicatrisation cutanée. Il a été montré que cette chémokine joue un rôle important dans le processus de cicatrisation cutanée. Elle est impliquée dans la migration des cellules souches dérivées du derme (dermal stem cells, DSC) vers le site de lésion cutanée. Ce processus est essentiel pour la ré-épithélialisation, la repopulation des fibroblastes au niveau du derme et l'angiogenèse (Kroeze et al., 2009).
Plusieurs gènes codant pour des protéines impliquées dans le remodelage de la matrice extracellulaire sont induits comme MMP1 (6,9 x) ou MMP3 (3,1 x). Les métalloprotéinases (MMP) jouent un rôle dans le processus de réparation des plaies cutanées à
travers le remodellage de la matrice extracellulaire (Stevens et al., 2012). La métalloprotéinase 1 (MMP1) initie le clivage des fibrilles de collagène de type I et III dans la peau. Ce processus de dégradation de collagène est ensuite poursuivi par la MMP3 (Krieg et al., 2011).
Le composé PAT1657 pourrait donc se révéler pro-cicatrisant en accélérant la ré-épithélialisation des kératinocytes, l'angiogenèse et en favorisant ainsi la fermeture de la plaie.
Effet Régénérant :
Les gènes POU5F1 et NANOG et KLF4 sont des marqueurs des cellules souches du derme (respectivement 5,1 x, 4,7 x et 1,9 x). Ils participent au processus de reprogrammation des cellules différenciées en cellules souches pluripotentes. Ces dernières sont importantes pour le maintien de l'homéostasie du derme, pour réparer les dommages et régénérer les tissus (Jerabek et al., 2014).
Effet Anti-âge :
De nombreux gènes impliqués dans la réponse au stress oxydant sont également surexprimés : SOD2 (4,7 x), RORA (4,4 x), TXNRD1 (2,8 x), FTL (2,1 x), MTNR1A, NOX1, RBP2 et GSS. La superoxyde dismutase 2 codée par le gène SOD2 est une protéine mitochondriale impliquée en première ligne dans la défense contre les ROS.
Elle convertit l'anion superoxyde en hydroperoxyde qui, lui-même, est convertit en oxygène et en eau par la catalase et les peroxyrédoxines (Weyemi et al., 2012).
Des gènes codant pour des protéines impliquées dans les mécanismes de réparation des dommages encourus à l'ADN en cas de stress cellulaire voient aussi leur expression augmenter : DDIT3, GADD45A et SIRT1.
La surexpression de plusieurs de ces gènes témoigne de la capacité du composé

à réduire les effets de stress pro-oxydants générant un excès de radicaux libres, comme les UV accélérant les signes de vieillissement cutané, ou encore de lutter contre diverses pathologies ou conditions pro-inflammatoires cutanée, également génératrices d'espèces réactives de l'oxygène.

53 PCT/EP2017/059898 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
Barahano et al.: PNAS, Vol.58, NO.25, PP.16093-16098, December 2002.
Fitzpatrick, et al.: Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, Vol. 299, NO.3, PP.915-920, December 2001.
Gianfranco Peluso et al.; Journal of Natural Products, Vol. 58, NO.5, pp.639-646, May 1995 (Abstract).
Jerabek et al.: Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Gene Regulatory Mechanisms, Vol.1839, Issue 3, PP.138-154, March 2014.
Krieg et al.: Experimental Dermatology, Vol.20, NO.8, PP.689-695, August 2011.

Lee, SA et al.: Pharmacology, Vol.90, Issue 3-4, PP.183-192, August 2012.
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Stevens et al.: Molecular Biology of the Cell, Vol.23, NO.6, PP.1068-1079, March 2012.
Stocker et al.: PNAS, Vol.84, PP.5918-5922, August 1987.
Xinyu Wang et al.: European Journal of Pharmacology, Vol.635, PP.16-22, March 2010.
Guenin-Macé et al.: Science Translational Medecine, Vol.7, Issue 289, PP.289ra85, May 2015.
Weyemi et al.: Aging, Vol.4, NO.2, PP.116-118, February 2012.

Claims

REVENDICATIONS

1. Composés ou un mélange de composés selon la formule générale (IA) dans laquelle .cndot. R1A et R2A représentent indépendamment l'un de l'autre :
- H, sous réserve que R1A et R2A ne sont pas tous les deux un atome d'hydrogène, - Un groupement butyle, - un groupement alkyle en C7-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou - un groupement aryle en C7-C18;
et .cndot. Q1, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables.

2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Q1, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH ou caféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, en particulier deux quelconques des radicaux Q1, Q3, Q4 et Q5 représentent un groupement caféoyl, les deux autres représentant un groupement OH.

3. Composé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que Q1 représente un groupement OH, plus particulièrement Q1 et Q4 représentent un groupement OH.

4. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que R1A
est un atome d'hydrogène, plus particulièrement R1A est un atome d'hydrogène et R2A est un groupement butyle ou un groupement alkyle en C7-C30.

5. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que Q1 et Q4 représentent un groupement OH, Q3 et Q5 représentent un groupement caféoyl, R1A est un atome d'hydrogène et R2A est un groupement butyle, octyle, dodécyle, octadécyle, phénylbutyle ou naphtyle.

6. Procédé de préparation d'un composé de formule générale (IA) dans laquelle .cndot. R1A et R2A représentent indépendamment l'un de l'autre :
- H, sous réserve que R1A et R2A ne sont pas tous les deux un atome d'hydrogène, - Un groupement butyle, - un groupement alkyle en C7-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou - un groupement aryle en C7-C18;
et .cndot. Q1, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables , caractérisé en ce qu'il comprend une étape a) durant laquelle un acide quinique poly substitué, réagit avec un composé de formule HNR1AR2A.

7. Procédé de préparation selon la revendication 6, caractérisé en ce que Q1, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH ou caféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, en particulier deux quelconques des radicaux Q1, Q3, Q4 et Q5 représentent un groupement caféoyl, les deux autres représentant un groupement OH.

8. Procédé de préparation selon la revendication 6 ou 7, caractérisé en ce que l'acide polycaféoylquinique est l'acide de 3,5-di-O-caféoylquinique.

9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 6 à 8, caractérisé en ce que R1A est un atome d'hydrogène, plus particulièrement R1A est un atome d'hydrogène et R2A est un groupement butyle, un groupement alkyle en C7-C30, un groupement aryle en C7-C10, ou un groupement arylalkyle en C7-C30 tel qu' un Phényl-(C1-C24)alkyle.

10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 6 à 9, caractérisé en ce que le composé de formule HNR1A R2A est choisi parmi l'un des composés suivants :
octan-1-amine, butan-1-amine, laurylamine,1-octadécylamine, 4-phénylbutan-1-amine, ou naphtylamine.

11. Procédé de préparation selon l'une quelconque des revendications 6 à 10, caractérisé
en ce que l'étape a) est précédée d'une étape d'activation du groupement carboxyle de l'acide quinique poly substitué, par un agent d'activation des groupements carboxyles, en particulier par un agent d'activation des groupements carboxyles choisi parmi les agents d'activation de la famille des carbodiimides comme le dicyclohexylcarbodiimide (DCC), le diisopropylcarbodiimide (DIC), le N-ethyl-N(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide (EDCI) seul ou en combinaison avec des alcools permettant la formation transitoire d'esters activés comme, par exemple, le 1-hydroxybenzotriazole (HOBT), le 1-hydroxy-7-azabenzotriazole (HOAt), le 1-hydroxysuccinimide (HOSu) ou encore l'éthyl (hydroxyimino)cyanoacetate, ou encore parmi les agents d'activation de la famille des sels de phosphoniums, d'uronium et/ou de guanidinium comme le benzotriazol-1-yloxy)tris(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate (BOP), le benzotriazol-1-yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBOP), le (1-Cyano-2-ethoxy-2-oxoethylidenaminooxy)dimethylamino-morpholino-carbenium hexafluorophosphate (COMU), N,N,N',N'-Tetramethyl-O-(1H-benzotriazol-1-yl)uronium hexafluorophosphate (HBTU), (O-(6-Chloro-1-hydrocibenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluoroborate) (TCTU), (2- (7-Aza-1H-benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate) (HATU), et plus particulièrement par un agent d'activation des groupements carboxyles choisi parmi le diisopropylcarbodiimide (DIC) et le 1-hydroxybenzotriazole (HOBT).

12. Composé susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 9 à 11.

13. Composé ou un mélange de composés de formule générale (IB) dans laquelle .cndot. R1B et R2B représentent indépendamment l'un de l'autre :
- H, - un groupement alkyle en C1-C30, - un groupement alkylaryle ou arylalkyle en C7-C30, ou - un groupement aryle en C6-C18;
et .cndot. Q1, Q3, Q4 et Q5 représentent, indépendamment les uns des autres, un groupement OH, caféoyl, maloyl, caféoylmaloyl ou maloylcaféoyl, sous réserve qu'au moins un de ces radicaux n'est pas un groupement OH, ou un de ses sels ou stéréoisomères ou hydrates pharmaceutiquement acceptables, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de l'inflammation ou d'une maladie inflammatoire.

14. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, pour son utilisation en tant que médicament.

15. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 ou 12, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de l'inflammation ou d'une maladie inflammatoire.

16. Composé pour son utilisation selon la revendication 13 ou 15, caractérisé
en ce que la maladie inflammatoire est choisie parmi les maladies inflammatoires résultant d'une réponse spécifique excessive du système immunitaire, telle que l'asthme, le psoriasis, la rhinite, l'arthrose et les maladies auto-immunes y compris le syndrome de Raynaud, la thyroïdite auto-immune, la dermatite, la sclérose en plaque, la polyarthrite rhumatoïde, le diabète sucré insulino-dépendant, l'uvéite, les maladies intestinales inflammatoires (notamment la maladie de Crohn et la colite ulcérative), le lupus érythémateux disséminé; et les maladies résultant d'une réponse non spécifique excessive du système immunitaire, telles que les maladies dues à un syndrome de détresse respiratoire chez l'adulte, un choc septique, une toxicité à l'oxygène, un syndrome de défaillance multiviscérale secondaire à une septicémie, un syndrome de défaillance multiviscérale secondaire à un traumatisme, une lésion de reperfusion tissulaire due à une circulation extracorporelle, un infarctus du myocarde, la glomérulonéphrite aiguë, la vascularite, l'arthrite réactive, la dermatose à composantes inflammatoires aiguës, un accident vasculaire cérébral, une lésion thermique, une hémodialyse, une cytaphérèse, une entérocolite nécrosante et un syndrome associé à une transfusion de granulocytes.

17. Composition pharmaceutique comprenant au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 ou 12, pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de l'inflammation, notamment cutanée, ou pour favoriser la cicatrisation.

18. Composition cosmétique comprenant au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 ou 12 pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention du vieillissement cutané, pour obtenir un effet calmant de la peau ou un effet apaisant de la peau, et pour favoriser la régénération des tissus du derme.