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    LES METHODES

    CHROMATOGRAPHIQUES

    BENDIABDALLAH Djamel

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    Les divers type de chromatographie :
    Les méthodes chromatographiques, bien que très diverses, mettent en
    jeu un certain nombre de principes communs :

    Les substances se répartissent entre deux phases non miscibles, selon


    un équilibre lié à un coefficient de partition, qui dépend à la fois de la
    nature des composés et de celle des deux phases considérées.

    Le renouvellement continu de la phase mobile remet en cause cet


    équilibre et entraîne une succession d'autres équilibres, ce qui se traduit
    par une migration des substances le long de la phase stationnaire.

    La séparation est obtenue car chaque composé migre avec une vitesse
    qui lui est propre et dépend du coefficient de partition.

    On peut classer les différents types de chromatographies de plusieurs


    façons différentes selon que l’on considère la nature des phases utilisées ou
    les mécanismes de séparation des composés
    2 Passer à la
    première page
    CHROMATOGRAPHIE
    Chromatographie d ’adsorption et
    de partage.
     Chromatographie sur colonne.

     Chromatographie en phase gazeuse à

    haute résolution (HRGC).


    Chromatographie en phase liquide

    (CL/HPLC).
     Chromatographie sur couche
    mince (CCM/TLC).
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    première page
    La chromatographie est une technique de
    séparation des constituants d ’un mélange.

    A/ Historique:
     Dés 1903 quelques essais montrent la
    possibilité de mettre à profit les
    phénomènes d ’adsorption pour séparer
    les constituants d ’un mélange.
     1906, suite à la suite des travaux du
    botaniste russe Tswett que naquit la
    méthode à laquelle l ’auteur donna le nom
    de Chromatographie

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    Solvant
    (éluant)
    Pigment
    Séparation des Fractions
    selon la vitesse
    Adsorbant CaCO3
    phase stationnaire
    Eluat
    Les étapes:
    1- Fixation initiale des substances sur
    Verre
    la phase stationnaire au sommet de la
    Fritté colonne.
    2- Déplacement sélectif des composé
    par l ’éluant entraînant leur
    séparation.

    3- Identification des différentes


    Passer à la
    fraction première page
    En 1941 Martin & Synge montrent que dans certains
    cas, la phase stationnaire solide peut être remplacée par une
    phase stationnaire liquide, et aussi dès cette époque ils prévient
    une phase mobile gazeuse pouvant se substituée à la phase
    liquide. Mais ce n ’est qu’en 1952 que Martin et James
    appliquent cette hypothèse à la séparation des composés
    volatils ouvrant le champ à la Chromatographie en phase
    gazeuse.

    Classification des Méthodes chromatographiques

    Selon: * La nature physique des phases

    * Le principe du phénomène chromatographique

    * le procédé utilisé. Passer à la


    première page
    Selon la nature physique des phases
    La phase mobile est par définition un fluide: gaz ou, liquide.
    La phase stationnaire peut être solide, ou liquide immobilisée sur
    une phase fixe( support poreux) qui ne participe pas à la
    chromatographie:

    * Chromatographie liquide-liquide
    * Chromatographie liquide-solide
    * Chromatographie gaz-liquide
    C.P.G
    * Chromatographie gaz-solide

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    première page
    Selon le phénomène chromatographique
    Dépendre de la nature de la phase stationnaire:
    * Chromatographie d’adsorption
    * Chromatographie de partage
    * Chromatographie par échange d ’ion
    * Chromatographie d ’exclusion diffusion

    Selon les procédés utilisés


    * Chromatographie sur colonne
    * Chromatographie sur papier
    * Chromatographie sur couche mince
    * Chromatographie d’élution

    Passer à la
    première page
    La chromatographie d ’élution

    L ’élution est poursuivie jusqu’à ce que chaque substance soit


    entraînée hors de la phase stationnaire; l ’identification se réalise
    alors sur l ’éluat..
    La chromatographie se base sur le partage du soluté vis-à-vis
    de la phase mobile et de la phase stationnaire.l ’équation générale est
    alors de la forme linéaire:
    Cs = K.Cm (1)
    où Cs: concentration du soluté dans la phase stationnaire;
    Cm: concentration du soluté dans la phase mobile.
    le coefficient de partage (partition) d ’une substance
    K : est
    entre les deux phases pour la Chromato.de partage liqu/liqu,
    gaz/liqu.
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    première page
    La représentation graphique de l’équation (1) à une
    température donnée , est une droite appelée  isotherme de
    distribution 
    Cs

    Cm
    ISOTHERME DE DISTRIBUTION
    Passer à la
    première page

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