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S4 - Laboratorio

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CICLO I – BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR MEDICINA HUMANA

MEMBRANA PLASMÁTICA
Biología celular y molecular

Medinet plus
Semana 4 (PRÁCTICA)
LABORATORIO DE PRÁCTICA 01

- RESULTADOS DE APRENDIZAJE

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a. Observar los diferentes tipos de
transporte que se utilizan en la
incorporación y liberación de moléculas
y el efecto de la concentración del
medio sobre las células.
- MATERIALES Y EQUIPOS

b. Observar el transporte vesicular de


macrófagos en preparados histológicos
fijos.
LABORATORIO DE PRÁCTICA

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PROCEDIMIENTO
Transporte a través de la membrana
a) Difusión
1. Preparar previamente dos buches de pollo, uno de los extremos debe
quedar abierto.
2. Luego llenar un buche con 10 ml de agua destilada y agregar 3 a 5 gotas de
fenolftaleína, amarrar la abertura libre con un hilo pabilo. Posteriormente,
llenar un vaso de precipitación con agua de caño, aproximadamente 300 ml
y agregar 10 ml de NaOH. Colocar en este vaso el buche que contiene
fenolftaleína.
3. Al otro buche llenar con 10 ml de una suspensión de almidón, amarrar la
abertura.
4. Llenar otro vaso de precipitación con aproximadamente 300 ml de agua de
caño y agregar 10 gotas de lugol.
5. Observar el cambio de color del contenido de los buches y de las
soluciones en las que fueron colocadas.
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PROCEDIMIENTO
Transporte a través de la membrana
b) Diálisis
1. Dentro de un buche seco de ave, colocar 20 ml de solución de ovoalbúmina (5 ml
de clara de huevo + 15 ml de agua destilada), 5 ml de solución de NaCl y 5 ml de
glucosa.
2. Introducir el buche dentro de un vaso de precipitación con 300 ml de agua
destilada).
3. Dejar el sistema en reposo por 20 minutos.
4. Cumplido el tiempo retire el buche
5. Tomar del vaso de precipitación una muestra de 20 ml de agua y dividirlo en 3
tubos de ensayo.
6. Al tubo “A” con 10 ml provenientes de la muestra añadir 1ml de NaOH y 5 gotas
de CuSO4
7. Al tubo “B” con 10 ml provenientes de la muestra añadir 5 gotas de AgNO3.
8. Al tubo “C” con 10 ml provenientes de la muestra, realice la prueba de fehling.
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PROCEDIMIENTO
c) Ósmosis: Resistividad Osmótica de los Eritrocitos Humanos (ROE).
1. Se preparan soluciones de cloruro de sodio a distintas concentraciones. Se mezcla una solución de NaCl al 1% con agua;
según la tabla.
2. En cada tubo se agrega 0,2 mL de sangre. Se tapa los tubos con parafilm y se mezcla correctamente (No agitar porque
se puede hemolizar la sangre).
3. Deje reposar por 30 minutos en la gradilla a temperatura ambiente.
4. Vuelva a mezclar y centrifugan durante 10 minutos a 2 000 rpm.
5. Proceda a medir la absorbancia en el espectrofotómetro. Retire los tubos con cuidado de la gradilla y extraiga el
sobrenadante con una pipeta pasteur y colóquela en la cubeta del espectrofotómetro y realice la lectura a 540 nm.
6. Reconoce los tubos en los cuales la hemólisis acaba de iniciarse, y aquellos donde ésta se realizó hasta el final. El inicio
de hemólisis se detecta por la coloración roja del líquido sobre el precipitado en presencia de un sedimento de
eritrocitos no bemolizados.
7. Utilizando una hoja de papel milimetrado, graficar; en el eje de ordenadas (Y) el porcentaje de hemólisis y en el eje de
las abscisas (X) la concentración de solución salina. Indicar la concentración de NaCl cuando; se inició la hemólisis,
ocurrió el 50% de hemólisis y fue completa el 100% de hemólisis.
LABORATORIO DE PRÁCTICA

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LABORATORIO DE PRÁCTICA
Transporte Vesicular. Endocitosis: Fagocitosis

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Los leucocitos sanguíneos y las células fagocitarias de otros tejidos, rodean y
destruyen bacterias y otras sustancias extrañas, lo que constituye un
mecanismo de defensa vital para protegernos de la enfermedad. Los
macrófagos se desarrollan a partir de un tipo de glóbulo blanco
denominado monocito. Los monocitos se convierten en macrófagos cuando
pasan del torrente sanguíneo a los tejidos. Los macrófagos permanecen en
los tejidos e ingieren las bacterias, las células extrañas y las células dañadas
y muertas a través de la fagocitosis. La capacidad fagocítica de los
macrófagos permite su identificación segura. Los macrófagos en su periodo
muy activo adquieren un diámetro de unos 20µm. A microscopía óptica, los
macrófagos con frecuencia muestran un citoplasma granular. La inyección in
vivo de un colorante vital, como el azul tripán, carmin litinado, azul pirrol o
tinta china, tiñe selectivamente los macrófagos porque estas células
fagocitan estos colorantes y los almacenan en su citoplasma bajo la forma
de gránulos, visibles al microscopio óptico.
LABORATORIO DE PRÁCTICA: CUESTIONARIO

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LABORATORIO DE PRÁCTICA

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Observación de macrófagos
Corte de bola de edema. Coloración azul tripán
1. Observe al microscopio con objetivo de 40x y
100 x el preparado histológico.
2. Identifique los macrófagos que contienen en
su interior el azul tripán.
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Observación de células de Kupffer
Corte transversal de hígado. Coloración tinta china
1. Observe al microscopio el preparado histológico
con objetivo de 40X y 100X.
2. Identifique las células de Von Kupffer que
contienen en su interior la tinta china. Las células
de Kupffer o macrófago sinusoidal estrellado
forman el revestimiento del sinusoide.
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LABORATORIO DE PRÁCTICA
LABORATORIO DE PRÁCTICA: CUESTIONARIO

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LABORATORIO DE PRÁCTICA: CUESTIONARIO

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El texto en la caja de cereales no está completamente preciso en su afirmación
sobre el colesterol. Mientras es cierto que el colesterol es un componente
importante en la formación de membranas celulares y es un precursor de
hormonas esteroides, como el estrógeno y la testosterona, así como de la
vitamina D, no es del todo exacto decir que el colesterol juega un rol "benéfico"
en el cuerpo.
El colesterol es esencial para varias funciones biológicas, pero un exceso de
colesterol en la sangre puede aumentar el riesgo de enfermedades
cardiovasculares.
LABORATORIO DE PRÁCTICA: CUESTIONARIO

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La xilosa está siendo transportada a favor de su
gradiente de concentración y hacia el interior
de la célula. Dado que el pH intracelular es más
alto que el pH extracelular, el gradiente
protónico (diferencia en concentración de
iones de hidrógeno) está en la dirección
opuesta al gradiente de concentración de
xilosa. Por lo tanto, para que la xilosa sea
transportada hacia el interior de la célula, debe
ser en contra de su gradiente de concentración.
LABORATORIO DE PRÁCTICA: CUESTIONARIO

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El oxígeno (O2) puede atravesar la membrana plasmática del eritrocito mediante un proceso de difusión simple. La
membrana plasmática es permeable al oxígeno debido a su naturaleza lipídica y a la presencia de proteínas transportadoras
específicas, como las proteínas de canal, que permiten el paso del O2 a través de la membrana.
LABORATORIO DE PRÁCTICA: CUESTIONARIO

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Las cuatro clases de bombas dependientes de ATP que producen transporte activo de iones y moléculas son:

1.Bombas de iones tipo P: Estas bombas transportan iones a través de la membrana celular utilizando energía derivada de la
hidrólisis del ATP.
2.Bombas de iones tipo F: Estas bombas están involucradas en la generación de ATP en la fosforilación oxidativa en la membrana
mitocondrial interna. Utilizan la energía liberada por la flujo de protones a través de la membrana para sintetizar ATP a partir de ADP
y fosfato inorgánico.
3.Bombas ABC (ATP-binding cassette): Estas bombas son responsables del transporte de una amplia variedad de sustratos,
incluyendo iones y moléculas orgánicas, a través de las membranas celulares. Utilizan la energía del ATP para impulsar el transporte
contra un gradiente de concentración.
4.Bombas V-ATPasa: Estas bombas se encuentran en las membranas de diversos compartimentos celulares, como los lisosomas y los
endosomas, y están involucradas en la acidificación del interior de estos compartimentos. Utilizan la energía del ATP para bombear
protones desde el citosol al interior del compartimento, generando un gradiente de pH. Esto es esencial para la degradación de
proteínas y otros procesos intracelulares.
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Los fármacos que inhiben la secreción de ácido
estomacal actúan sobre una clase específica de
bomba de protones llamada bomba de protones
de tipo H^+/K^+-ATPasa. Esta bomba se
encuentra localizada en la membrana de las
células parietales del estómago.
LABORATORIO DE PRÁCTICA: CUESTIONARIO

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El proceso de simporte por el cual las células del epitelio intestinal importan glucosa implica el transporte activo
secundario de glucosa junto con sodio (Na^+). Este proceso se lleva a cabo en la superficie apical de las células
epiteliales intestinales, donde se encuentran las microvellosidades que aumentan la superficie de absorción.
El transporte de glucosa y sodio se realiza mediante una proteína transportadora especializada llamada
cotransportador de sodio-glucosa (SGLT). Este cotransportador utiliza la energía almacenada en el gradiente de
concentración de sodio generado por la bomba de sodio-potasio (Na^+/K^+-ATPasa) para impulsar el transporte
de glucosa hacia el interior de la célula contra su gradiente de concentración.
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1.Dilución de la concentración de sodio: El agua que se ingiere en exceso diluye la concentración de sodio en el
torrente sanguíneo. El sodio es un electrolito esencial para la transmisión de los impulsos nerviosos y el
equilibrio del agua en el cuerpo. Cuando los niveles de sodio en sangre disminuyen significativamente, puede
causar una alteración en la función normal de las células nerviosas en el cerebro.
2.Inflamación cerebral: Con niveles bajos de sodio en sangre, el agua puede fluir hacia el interior de las células
nerviosas en un intento de equilibrar la concentración de solutos. Este aumento en el volumen celular puede
causar inflamación cerebral, lo que ejerce presión sobre el tejido cerebral y puede llevar a síntomas como dolor
de cabeza, náuseas, vómitos, confusión y convulsiones.
3.Disfunción cerebral grave: En casos severos de hiponatremia, la hinchazón cerebral puede resultar en una
disfunción cerebral grave, incluyendo coma y, en casos extremos, la muerte. La hinchazón cerebral puede causar
daño irreversible al tejido cerebral si no se trata de manera adecuada y oportuna.
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La inyección de 10 ml de agua pura en lugar de
una preparación isotónica puede resultar en
hemólisis de las células sanguíneas en el área
cercana a la inyección. Esto se debe a que las
células sanguíneas, especialmente los glóbulos
rojos, tienen una concentración interna de
solutos que es más alta que la del agua pura.
Cuando se administra agua pura por vía
intravenosa, el agua se difundirá hacia el interior
de las células sanguíneas en un intento de igualar
las concentraciones de solutos dentro y fuera de
la célula.

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