GQ-AST-60 GQ-AST-100 GQ-AST-125 GQ-AST-250

1 x 60 mL 1 x 100 mL 1 X 125 mL 1 x 250 mL

Reactivo utilizado para la determinación cuantitativa “In
Vitro” AST en suero humano.

PREPARACION DE REACTIVO:
BIALEX AST Reactivo “Listo para usar”.
SIGNIFICADO CLINICO: ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO:
La AST (Transaminasa Glutámico Oxalacética) pertenece al
- Conservar entre 2ºC a 8 ºC.
grupo de las transaminasa que, por transferencia de grupos
- El reactivo es estable hasta la fecha de caducidad indicada
amino, catalizan la inter-conversión de los aminoácidos a los
en la etiqueta.
alfa-cetoácidos correspondientes y viceversa. Esta enzima se
encuentra ampliamente distribuida en varios tejidos del cuerpo
humano. Aunque la mayor actividad de la AST se observa en el
NO UTILIZAR EL REACTIVO SI:
1. El reactivo tiene una absorbancia menor a 1.000 a 340 nm.
miocardio, también tiene una actividad importante en el cerebro,
2. El reactivo presenta turbidez.
el hígado, la mucosa gástrica, el tejido adiposo, el músculo
esquelético y los riñones. 3. No se obtiene los valores esperados al usar los respectivos
La AST se encuentra en el citoplasma y en las mitocondrias. En controles.
las lesiones leves de los tejidos, la mayor parte de la enzima que 4. Es comunicado por Bialex para retirar el producto del
se libera proviene del citoplasma, sólo una pequeña parte mercado.
proviene de las mitocondrias. En caso de daño más severo, se
libera una mayor cantidad de enzima proveniente de las COLECCION Y CONSERVACION DE LA MUESTRA:
mitocondrias. 1.-No utilizar muestras hemolizadas. Los hematíes contienen
Se puede encontrar altas concentraciones de AST en el infarto AST.
del miocardio, hepatopatías (hepatitis viral, necrosis del hígado, 2.-El AST es estable por 3 días a temperatura ambiente, 7 días
cirrosis) distrofia muscular y otras lesiones orgánicas. en refrigeración (2ºC a 8ºC) y un mes en congelación.
3.-Emplear únicamente tubos o recipiente adecuados para
FUNDAMENTO DEL METODO: recoger y preparar las muestras. Centrifugar las muestras que
contienen precipitado antes de efectuar las pruebas.
Karmen desarrolló un procedimiento de ensayo cinético en 1995
4.-Si las muestras se procesan en tubos primarios, seguir las
el cual se basa en el uso de malato deshidrogenado y NADH.
instrucciones del fabricante de tubos con relación a la colección
Procedimientos optimizados fueron presentados por Henry en
y almacenamiento de las muestras.
1960, y Amador y Wacker en 1962. Estas modificaciones
aumentaron la exactitud y disminuyeron los efectos de
interferencia de algunas sustancias. La IFCC en 1986 publicó un INTERFERENCIAS:
método el cual incluye P-5-P. El presente método se basa en las 1. Los estudios realizados para determinar las interferencias de
recomendaciones de la IFCC. Pero no contiene P-5-P debido a hemoglobina, bilirrubina y lipemia, mostraron los siguientes
que el significado diagnóstico de AST se encuentra bajo estudio. resultados:
Hemoglobina: Usar sueros no hemolizados ya que los
Principio: hematíes contiene AST. Sin interferencia significativa (+/- 10 %)
hasta 400 mg/dL
Bilirrubina: Sin interferencia significativa (+/-10%)
hasta 22.7 mg/dL
Lipemia: Sin interferencia significativa (+/-10%) hasta
533 mg/dL medida como triglicéridos.
La AST cataliza la transferencia del grupo amino de la L- Para fines Diagnósticos, los resultados obtenidos en la prueba,
aspartato 2-oxoglutarato para producir oxalacetato y L- siempre deben de ser evaluados en conjunto con la historia
Glutamato. El oxalacetato pasa por una reducción con la clínica del paciente.
Ver Young y col.8 para observar otras sustancias interferentes.
oxidación simultánea de NADH a NAD en la reacción catalizada
por la Malato Deshidrogenasa (MDH). La tasa de reducción en
absorbancia resultante a 340 nm es directamente proporcional a EQUIPO ADICIONAL REQUERIDO PERO NO
la actividad de la AST. Se agrega Deshidrogenasa láctica (LDH) INCLUIDO:
para prevenir la interferencia del piruvato endógeno el cual 1.- Analizador de química clínica capaz de mantener
normalmente se encuentra presente en el suero. temperatura constante a 37ºC y medir absorbancia a 340nm.
2.- Material adicional requerido: pipetas, puntas descartables,
COMPOSICION DEL REACTIVO: agua desionizada / destilada, cronometro.
Ingredientes activos Concentración 3.- Controles como los suministrados por Bialex o de otras casas
2-oxoglutarato 13 mM comerciales.
L-aspartato 220 mM
NADH >0.12 mM PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO:
LDH > 1500 U/L Procedimiento para el uso manual:
MDH > 100 U/L 1) Identificar los tubos de prueba, tanto para muestras y
Tris buffer controles,. equilibre el reactivo y muestras a temp. amb.
pH (7.6 - 8.1) 2) Colocar 1000 uL de reactivo en cada tubo de prueba y
y pre incube a 37ºC por 3 minutos.
PRECAUCIONES: 3) Calibrar el espectrofotómetro con un blanco de agua
Este reactivo es sólo para uso diagnóstico “In Vitro”. (desionizada) a 340 nm .
4) Añadir 100 uL de muestra problema y suero control a su CONTROL DE CALIDAD:
correspondiente tubo de prueba, mezclar e incubar a 37ºC La integridad de la reacción debe ser evaluada usando un control
por 1 minuto. de dos niveles con valores conocidos Así mismo puede
emplearse otro material de control apropiado.
MUESTRA O CONTROL
DESEMPEÑO:
REACTIVO 1000 uL Linealidad: Será lineal de 1.2 hasta 600 U/L. Muestras con
MUESTRA O CONTROL 100 uL valores mayores a 600 U/L deberán ser diluidas 1:1 con
solución salina y ser evaluadas nuevamente. El resultado final
5) Exactamente después del minuto medir la absorbancia a debe ser multiplicado por dos.
340 nm y registrar como A1.
6) Continuar la incubación de la muestra de prueba a 37 ºC por COMPARACION DEL METODO:
2 minutos después de la primera lectura, tomar la segunda El siguiente estudio fueron obtenidos mediante estudios
lectura y regístrela como A2 realizados con este procedimiento y uno similar.
7) Calcular el promedio de la diferencia de las absorbancias
por minuto tomadas Número de pares de muestra: 55
(∆ Abs./min.) = ( A1-A2) Rangos de muestras: 12.0 – 278.0 (U/L)
2 Coeficiente de Correlación: 0.9987
8) El ∆ Abs./min. Multiplicado por el factor 2000(ver cálculos) Pendiente: 0.9601
es el resultado en U/L. El factor puede cambiar en relacion Intercepción: - 4.1 (U/L)
al equipo usado y cuveta, vea su certificado de analisis.
CÁLCULOS: Precisión:
Una unidad (U/L) es definida como la cantidad de enzima que Entre Corridas Nivel1 Nivel2 Nivel 3
cataliza la transformación de un micromol de sustrato por minuto Promedio (U/L) 26.3 157.0 278.7
bajo las condiciones específicas. S.D. (U/L) 0.7 0.5 1.0
C.V. (%) 3.6 0.9 1.2
Actividad AST (U/L) = (∆ Abs./min.) x 1.10 x 1000 = (∆ Abs./min) x factor (2000)
6.22 x 0.10 x 1.0
Entre Series: Nivel1 Nivel2 Nivel 3
Donde:
S.D. (U/L) 1.0 1.4 3.3
∆ Abs./min = Diferencia de la Absorbancia (A1-A2/ 2)
C.V. (%) 3.6 0.9 1.2
1.10 = Volumen total de reacción (mL)
1000 = Factor de conversión de U/mL a U/L
6.22 = La absorbancia mili molar de NADH Sensitividad:
0.10 = Volumen de muestra (mL) La sensitividad de este reactivo cuando usado según
1.0 = Paso de luz en cm. recomendado es 0.245 ∆mA/min por U/L.

Ejemplo de Calculo: NOTA: Datos obtenidos mediante pruebas realizadas en el

Si el promedio del cambio de absorbancia por minuto es: 0.12 Synchron CX
entonces 0.12 x 2000 = 240 U/L
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
PROCEDIMIENTO PARA USO AUTOMATIZADO: 1.-Tietsz N. W. Fundamental of Clinical Chemistry, W.B.
Los parámetros son para ser utilizados como guía general para Saunders, Co., Phila, p674-675(1982).
la adaptación al instrumento automatizado. 2.-Henley, K.S. Pollard, HM, J. Lab. Clin. Med. 46:785 (1955).
3.- Wroblewski, F, La Due, J.S., Proc. Soc. Exp. Bio. Med.
91:569 (1956).
PARAMETROS:
4.- Henry, R.J. et al, Am. J. Clin. Path. 34:381 (1960).
Temperatura: 37ºC
5.- Committee on Enzymes of the Scandinavian Society for
Longitud de onda: 340 nm
Clinical Cjçhemistry and Clinical Physiology, Scand. Clin. Lab.
Tipo de Ensayo: Ratio/Cinético
Invest. 32:291 (1974).
Dirección: Decreciente
6.- Henry, RJ., Clínical Chemistry: Principles and Technics,
Relación: Muestra/Reactivo 1:10
Harper and Row, New York, p522 (1968).
Volumen de muestra: 100uL
7.- Henry,J.B., Clinical Diagnostics & Management by
Volumen de Reactivo: 1000uL
Laboratory Methods, W.B. Saunders Con., Philadelphia, p. 1437
Tiempo de Espera: 90 segundos
(1984).
Tiempo de Lectura: 1 a 3 minutos
8.- Young, et al. Clin Chem. 21:1D (1975).
NOTA: Los volúmenes de muestra y reactivo pueden ser
Verifique el protocolo de análisis en:
modificados proporcionalmente para adaptarlos a los requisitos
de varios instrumentos.
Muestras con valores sobre los 600 U/L deben ser diluidos 1:1
Producto Fabricado por Bialex
con solución salina, reevaluados y el resultado multiplicado por
850 E. Ohio St. Suite 12
2.
Tucson, AZ 85714
United State of America
VALORES REFERENCIALES:
5 – 34 U/L a 37ºC. Contacto en Estados Unidos:
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango QC liable Dennis Klein Tel. (650)7228640
de referencia. eFAX®: 520-8422001
Para otros países llame a su distribuidor autorizado.
CALIBRACION:
El procedimiento esta estandarizado por medio de la Visit us online:
absorbancia mili molar del NADH tomada como 6.22 a 340 nm www.bialexlab.com
bajo las condiciones descritas de la prueba.