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PRACTICA 2!! Elaboracià N de Cã©lulas Competentes de Escherichia Coli Con Cloruro de Calcio
PRACTICA 2!! Elaboracià N de Cã©lulas Competentes de Escherichia Coli Con Cloruro de Calcio
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RESUMEN
INTRODUCCIÓN
DNA recombinante produce una modificación genética
El ADN recombinante, o ADN que permite la adición de una nueva
recombinado, es una molécula de secuencia de ADN al organismo,
ADN artificial formada de manera conllevando a la modificación de
deliberada in vitro por la unión de rasgos existentes o la expresión de
secuencias de ADN provenientes de nuevos rasgos.
dos organismos distintos que El proceso de producción de un ADN
normalmente no se encuentran juntos. recombinante comienza con la
Al introducirse este ADN identificación desde un organismo de
recombinante en un organismo, se una secuencia de ADN de interés con
el fin de propagarlo en otro organismo
que carece de la secuencia y, por Muchas bacterias poseen genes no
ende, del producto proteico de esa esenciales en pequeñas piezas
secuencia de ADN. circulares de doble cadena de ADN,
En términos simples, el procedimiento además de su ADN cromosómico.
consiste en: Estas piezas de ADN, llamadas
Localización de genes y sus plásmidos, permiten a las bacterias
funciones. intercambiar beneficios. La tecnología
Clonación del ADN, y su del ADN recombinante permite a los
posterior almacenamiento en científicos colocar genes de diferentes
genes. orígenes en los plásmidos
Reacción en cadena de la bacterianos. Estos plásmidos
polimerasa (PCR) especiales reciben el nombre de
Utilización de vectores de vectores y tiene las siguientes
expresión. características:
DIAGRAMA DE FLUJO
Primera centrifugación
Re suspender en 2ml de CaCl2 Centrifugar 600 rpm
Obtención de células
competentes
RESULTADOS realizado la inserción en plásmido,
posteriormente podríamos haber
inoculado nuestra bacteria
competente esperando que en el agar
LB suplementado con ampicilina,
IPTG y X-gal incubándolo por 16 hrs a
37°C, esperando el crecimiento de
colonias color azul indicándonos que
la bacteriarealmente fue transformada
con el plásmido recombinante con el
gen reportero -galactosidasa.