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GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO Fecha: 15/Oct/2015

1. IDENTIFICACIÓN

PROGRAMA ACADÉMICO INGENIERÍA QUÍMICA / INGENIERÍA AMBIENTAL

UNIDAD DE ESTUDIO BIOQUÍMICA

Análisis Cualitativo de Proteína- lípidos y Carbohidratos.

PRACTICA DE LABORATORIO

2. MEDIDAS DE SEGURIDAD PARA LAS PERSONAS Y EL AMBIENTE A TENER EN CUENTA EN EL

DESARROLLO DE LA PRACTICA

REACTIVOS
Cantidad Nombre Clase de riesgo* Medidas de En caso de accidente
seguridad
3mL Solución de Químico Use guantes Lave con agua
glucosa
3mL Solución de Químico Use Guantes. Lave con abundante
almidón Corrosivo. agua.
3mL Solución de Químico Use guantes Lave con agua
albumina de
huevo
3mL Solución de Químico Use guantes Lave con agua
tirosina
3mL Acido clorhídrico Químico Use guantes Lave con agua
diluido
3mL Solución diluida Químico Use guantes Lave con agua
de yodo-yoduro
(lugol)
3mL Reactivo de Químico Use guantes Lave con agua
Fehling A y B
3mL Reactivo de Químico Use guantes Lave con agua
Benedict
3mL Reactivo de Millón Químico Use guantes. Lave con agua.
Altamente tóxico Consulte servicio
Mercurio. Médico.
3mL Reactivo de Biuret Químico Use guantes Lave con agua
EQUIPOS
Cantidad Nombre Clase de riesgo * Medidas de En caso de accidente
seguridad
1 Baño Maria Superficie caliente Adecuada Consulte servicio
manipulación médico.

MATERIALES POR GRUPO DE TRABAJO

Cantidad Nombre Clase de riesgo* Medidas de En caso de accidente
seguridad
12 Tubo de ensayo Físico en caso de Adecuada Retirar los residuos
romperse manipulación sólidos.
1 Gradilla para tubo de Ninguno Adecuada No acercar a fuentes de
ensayo. manipulación calor.
1 Pinza para tubos Ninguno Adecuada No acercar a fuentes de

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manipulación calor.
1 Goteros para los Físico en caso de Adecuada Retirar los residuos
reactivos romperse manipulación sólidos.

*Clase de riesgo: Biológico grado 1, Químico, Eléctrico, Físico, ninguno

3. BUENAS PRÁCTICAS DE SOSTENIBILIDAD AMBIENTAL EN EL MANEJO DE RESIDUOS A TENER EN

CUENTA EN EL DESARROLLO DE LA PRACTICA

Nombre residuo Clasificación de la Manejo del residuo En caso de accidente

peligrosidad *
Soluciones acidas. RESIDUO TIPO 2 Disponer los residuos y Lave con solución de
residuos acuosos clasificarlos en las canecas del bicarbonato de sodio.
con metales laboratorio (verde o roja)
pesados. Los guantes de nitrilo siempre se
desechan en las canecas rojas
Desechar la materia orgánica en la
caneca verde.
Para los reactivos, deposite en los
recipientes correspondientes
marcados, no deseche los
reactivos ni muestras por la
tubería.

*Clasificación de peligrosidad: según la “Guía de almacenamiento de sustancias químicas y residuos químicos”.

Se relacionan los tipos de residuos generados durante la práctica, si no hay residuos generados se escribe no aplica.

4.1 OBJETIVO
 Realizar ensayos generales para carbohidratos y aminoácidos.
 Comprobar las propiedades químicas de los carbohidratos.
 Realizar pruebas de diferenciación para algunos tipos de carbohidratos y aminoácidos.

4.2 FUNDAMENTOS TEÓRICOS

La prueba del yodo - Reactivo Lugol: es una reacción química usada para determinar la
presencia de almidón u otros polisacáridos. Una solución de yodo - diyodo disuelto en una solución
acuosa de yoduro de potasio - reacciona con almidón.

El reactivo de Millón se prepara disolviendo una parte de mercurio (Hg) en una parte de ácido
nítrico (HNO3). De esta forma, la presencia de cantidades relativamente altas de mercurio conduce
a la formación de Nitrato de mercurio (I) Hg2(NO3)2 el cual en un medio fuertemente ácido
reacciona con el grupo -OH de la tirosina produciendo una coloración roja característica.

La reacción del Millón se debe a la presencia del grupo hidroxifenilo en la molécula proteica.
Cualquier compuesto fenólico que no esté sustituido en la posición 3,5 como la tirosina, el fenol y
el timol producen resultados positivos en esta reacción. De estos compuestos, sólo la tirosina está

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presente en las proteínas, de manera que sólo las proteínas que tienen este aminoácido ofrecen
resultados positivos.

El reactivo de Biuret: La reacción o prueba de Biuret es un método que detecta la presencia de

compuestos con dos o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las proteínas y
péptidos cortos.

El reactivo del biuret (sulfato de cobre en una base fuerte) reacciona con los enlaces del péptido
y cambia el color cuando entra en contacto con otra sustancia.

La reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH

anomérico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas,
pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O
de color rojo-naranja.

El reactivo de Fehling, es una solución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling
y que se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares reductores.

El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:

 Sulfato cúprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.

 Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 150 g; solución de hidróxido de sodio
al 40%, 3 g; agua, hasta 1.000 ml.

Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitación del hidróxido
de cobre (II).

El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un
aldehído. Éste se oxida a ácido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a óxido de cobre(I),
que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reacción es que la forma
aldehído puede detectarse fácilmente, aunque exista en muy pequeña cantidad. Si un azúcar
reduce el licor de Fehling a óxido de cobre (I) rojo, se dice que es un azúcar reductor.

Esta reacción se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores
como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede enlizarse a la forma aldehído dando lugar
a un falso positivo.

4.3 PROCEDIMIENTO

a. PREPARACIÓN DE PRUEBAS POSITIVAS

Tome 10 tubos de ensayo, márquelos de 1 a 10 y coloque:

Tubo 1: → 1 mL de agua + 1 mL de benedict

Tubo 2: →1 mL de solución de glucosa + 1 mL de solución de Benedict
¿Qué tubo es la prueba positiva?
¿Cual es la coloración?

Tubo 3: →1 mL de agua + 5 gotas de Lugol

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Tubo 4: →1 mL de solución de almidón + 5 gotas de Lugol

¿Qué tubo es la prueba positiva?
¿Cual es la coloración?

Tubo 5: → 1 mL de agua + 1 mL de biuret

Tubo 6: → 1 mL de albumina de huevo + 1 mL de biuret
¿Qué tubo es la prueba positiva?
¿Cual es la coloración?

Tubo 7: → 1 mL de agua + 5 gotas de millón

Tubo 8: → 1 mL de millon+ 1 ml de solución de tirosina
Lo llevamos al baño maría por 5 minutos.-Retirar, enfriar y observar.

¿Qué tubo es la prueba positiva?

¿Cuál es la coloración?

Tubo 9: → 1 mL de agua + 5 gotas de Fehling

Tubo 10: → 1 ml de solución de glucosa + 1 mL de fhling
¿Qué tubo es la prueba positiva?
¿Cual es la coloración?

NOTA: Todas las muestras calentar a baña maría

Observe y analicé las pruebas positivas.
Para reportar los resultados realice una tabla.

Deseche las pruebas negativas y deje las muestras positivas para comparar los resultados de las
muestras problema del siguiente punto.

b. DETERMINACIÓN EN MUESTRAS PROBLEMAS

A cada una de las 8 muestras problema realice todos los ensayos que a continuación se describen.
Identifique cuales son positivos y registre en sus resultados:

 Ensayo del yodo:

A las muestras problema agregar 3 gotas de solución diluida de yodo (yodo-yoduro) LUGOL.
Observar la formación de color.

 Ensayo de Felhing.

Añada 10mg ó 1 mL de solución problema más 5 gotas del reactivo de Feling A y B. Coloque el
tubo en un baño de agua hirviendo por tres minutos. Un precipitado amarillo naranja de Cu 2O es
prueba positiva para aldehídos.

 Ensayo de Benedict:

A 1 mL del reactivo agregue 5 gotas de la solución problema y coloque en un baño de agua maría
por 5 minutos. La aparición de un precipitado naranja-pardo es prueba positiva para los
carbohidratos reductores. Este ensayo es más estable que el de Fehling.

 Ensayo Biuret

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A 1 mL de muestra problema agregue 5 gotas de reactivo de Biuret. Observe y analice los

resultados.

 Ensayo Millón.
A 1 mL de muestra problema agregue 5 gotas de reactivo de Millón. Observe y analice los
resultados.
Lo llevamos al baño maría por 5 minutos.
- Retirar, enfriar y observar.
Elabore una tabla de DATOS Y RESULTADOS.
Se da un ejemplo de tabla, pero puede modificarla.

TABLA DE RESULTADOS

Consigne todas las observaciones que considere importantes en la siguiente tabla, reporte las
pruebas positivas (+) o negativas (-).

MUESTRA YODO FEHLING BENEDICT BIURET MILLON

PROBLEMA
1
2
3
4
5
6
7
8

1. Resalte si la prueba es + ó -, y las observaciones generales.

4.4 CUESTIONARIO

La entrega del informe se realiza en el formato de Informe antes de terminar la práctica, por ello
es necesario que Ud. Ingrese a la práctica con una impresión del formato de informe para
diligenciar.

Haga un análisis de los resultados

Taller evaluativo

1. Si una sustancia da coloración azul con el yodo, se puede concluir que es:

a. Celulosa b. Sacarosa c. Almidón d. Glucosa e. un ácido

2. La ribosa es:

a. Triosa b. Tetrosa c. Pentosa d. Hexosa e. Cetosa

3. La glucosa se obtiene industrialmente por hidrólisis de:

a. Celulosa b. Glucógeno c. Almidón d. Goma Arábiga e. Lignina

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4. El polisacárido empleado en la alimentación, que se encuentra en los granos y tubérculos,

es:

a. Almidón b. Celulosa c. Glucógeno d. Pentosas

4.5 BIBLIOGRAFÍA.

VOLHARDT K. PETER C. AND SCHORE NEIL E. Organic Chemistry. New York: W.H. Freeman
and Company.
BREWTER,R.Q; VANDERWERF,C.A; Mc EWEN,W.E. “ Curso práctico de química orgánica”.
Primer reimp; Alambra, Madrid, 1975.
MARTINEZ,J.C. “Conferencias para el laboratorio de análisis orgánico I, Universidad nacional,
Bogotá.1972. Pág: 86-90
MORRISON, B.T; BOYD,R.N; “ Química orgánica”. Fondo educativo interamericana, EUA.1976.
NOLLER, C.R; “Química orgánica”. 3° edición. Interamericana, México.1968.
PLUMMER,D.T. “Bioquímica práctica”. Segunda ed; Mc Graw-Hill, Bogotá. 1981.pp: 164-169.
MARTINEZ J,C. “ Análisis orgánico cualitativo”. Bogotá: Universidad Nacional de Colombia. 1982
ALZATE SERNA, R.A. “ Análisis orgánico cualitativo”. Universidad Nacional de Colombia.
Seccional Manizales. Abril de 1984. pág: 66-71.

COMPETENCIA RESULTADOS DE APRENDIZAJE

Capacidad de desarrollar y llevar a cabo la Competencias en el manejo de material de laboratorio para la
experimentación adecuada, analizar e realización de montajes de laboratorio para producción a pequeña
interpretar los datos, y el uso de criterios de escala de un gas de uso Industrial.
ingeniería para sacar conclusiones.
Apropiación de conceptos de química orgánica a partir de
Capacidad de reconocer la necesidad experiencias propias.
continúa de nuevos conocimientos y
localizar, evaluar, integrar y aplicar este
conocimiento de manera apropiada.

ELABORA REVISA APRUEBA

DOCENTE COORDINADOR DIRECTOR
DIANA VARELA
Coordinador Ingeniería Ambiental

Fecha: JUNIO DE 2017 Fecha: S Fecha:

CONTROL DE CAMBIOS

FECHA DESCRIPCIÓN DEL CAMBIO

30/05/17 Creación

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