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Organización
de
Transfusión de Sangre
Servicios
segundo
Lood Los servicios de transfusión (BTS) es la parte vital del sistema de salud moderno sin la cual la atención médica eficiente es imposible. El
objetivo de los servicios de transfusión de sangre debe ser proporcionar eficaz de la sangre y los productos sanguíneos, que son tan seguros
como sea posible y adecuado para satisfacer las necesidades del paciente. Una sangre Servicio de Transfusión es una organización compleja,
El desarrollo del servicio de transfusión sanguínea debe basarse en las siguientes recomendaciones de la Sociedad
Internacional de Transfusión de Sangre y Inmunohematología (ISBTI), y la Organización Mundial de la Salud (OMS),
• El desarrollo del servicio de transfusión sanguínea debe basar en las donaciones de sangre voluntarias y no remuneradas.
La dependencia de donantes familiares / reemplazo debe ser eliminado.
• El desarrollo y la aplicación de la estrategia nacional para el tamizaje de toda la sangre donada para infecciones
transmitidas por transfusión, usando los ensayos más apropiados y eficaces para la prueba de VIH 1 y 2, hepatitis B
y virus C. la sífilis y la malaria.
medicina transfusional Manual técnico
• Promulgar legislación vigente que regula el funcionamiento del servicio de transfusión sanguínea para que cumpla con las
normas prescritas.
• Desarrollar buenas prácticas de fabricación y de laboratorio en los bancos de sangre con el fin de proteger la salud de los
donantes y receptores de sangre de la sangre y sus productos.
• Para proporcionar sangre segura y adecuada, y sus componentes para satisfacer los pacientes necesitan. Un servicio adecuado
incluye disponibilidad de al menos sangre entera, los glóbulos rojos, plaquetas, plasma fresco congelado (FFP), crioprecipitado
(Factor VIII) y plasma.
• Para establecer una unidad de donación voluntaria de sangre dentro del servicio de transfusión de sangre, con un oficial responsable
del programa de donación de sangre y designado como oficial de reclutamiento de donantes.
• La formación del personal responsable de la educación de los donantes, la motivación, reclutamiento y selección.
• La formación del personal del servicio de transfusión de sangre para los procedimientos de extracción de sangre seguras,
incluyendo la selección del donante y el cuidado de los donantes.
• Para capacitar al personal técnico de laboratorio en todos los aspectos de la investigación de la sangre, determinación del grupo
sanguíneo, pruebas de compatibilidad, preparación de componentes y la cuestión de la sangre y sus productos para la transfusión.
• Para desarrollar buenas prácticas de laboratorio, incluyendo el uso de procedimientos operatorios estándar,; en todos los aspectos de la
investigación de la sangre, la extracción de sangre y processin.
• Para promover la cooperación entre los servicios de transfusión sanguínea, servicios de salud y hospitales, instituciones educativas,
organizaciones religiosas, sociales e industriales, los medios de comunicación
y el público en general.
• Para garantizar un presupuesto adecuado y separada para los servicios de transfusión de sangre.
• Servicio de Transfusión Sanguínea en un país puede estar centralizada, regionalizado, basada en el hospital o alguna combinación
de ellos. Una vez que un sistema ha sido establecido en una región que es difícil de cambiar. El tamaño, la historia, la cultura, la
estructura política, el nivel de desarrollo económico y efecto de control administrativo de la evolución de los servicios de transfusión
de sangre. Así que en un país en desarrollo de gran tamaño el desarrollo de los servicios de transfusión de sangre o regionalizados
centralizados a nivel de las ciudades metropolitanas y grandes, estados y / o niveles de distrito es más práctico.
• Estimación de las necesidades de los donantes es esencial para el desarrollo de los servicios de transfusión de sangre. Las
estimaciones de necesidad se pueden basar en porcentaje fijo (5% recomendado por la OMS) de la población. Pero esta suposición
ignora la disparidad entre el tamaño de la población y el número de camas de hospital en un área. Estimación de las necesidades de
sangre en el número de camas hospitalarias agudas es más realista. La cifra puede variar de 5-15 unidades por cama por año. Las
proporciones más bajas se aplican a los hospitales donde se necesita la sangre en el manejo de la hemorragia como complicación del
embarazo o trauma o cirugía simple. Las proporciones más altas se aplican a los hospitales con instalaciones más especializadas como
la oncología, la cirugía a corazón abierto,
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Organización de los servicios de transfusión sanguínea
renal diálisis / trasplante o terapia de reemplazo en thalasseamia, hemofilia, leucemia y otros trastornos de la
sangre.
DONANTES Estrategias de reclutamiento
el reclutamiento de donantes es fundamental para el éxito del suministro de sangre segura y adecuada, y sus productos a las pacientes necesitan.
Pura estrategia de reclutamiento voluntario: Se depende de la seguridad generada internamente de altruismo o la responsabilidad de
la comunidad. Un donante voluntario dona la sangre en su / su propia voluntad, sin distinción de casta, credo, religión, color y estado del
destinatario y no espera ningún beneficio monitorizada desde las instalaciones de recolección u otras fuentes en el momento de la
donación o en el futuro.
Sin embargo, la mayoría de los donantes no donan sangre tan a menudo como pueden, pero pequeños incentivos como alfileres, insignias y
placas dadas a los donantes que han donado sangre a un número especificado expresan su reconocimiento a los donantes habituales y mejorar sus
sentimientos de altruismo y fomentar las donaciones más frecuentes.
La persuasión social basada en la estrategia de contratación: Se se asocia con la persuasión y la presión de amigos y colegas, jefes de
organizaciones religiosas y líderes políticos para donar sangre. Tales donaciones son a menudo asociados con las unidades exteriores
(móvil) Donación de sangre en el lugar de trabajo como colegios, escuelas, fábricas, oficinas, o en algún otro lugar en el que un grupo de
individuos recoger como unidad social, política o religiosa. En muchos casos, el grupo o el organizador promete el reclutador un número
mínimo de unidades de donaciones de sangre y la presión social sobre los miembros individuales del grupo es muy eficaz para fomentar las
donaciones y para cumplir con el objetivo prometido.
En la segunda forma de estrategia basada en la persuasión social son donantes de reposición también que donan sangre para pacientes
específicos, por lo general amigos cercanos o familiares sin ningún tipo de recompensa monitorizada. Estos donantes pueden sentir una expresión
de su interés y preocupación para los destinatarios. Los donantes de reposición pueden ser motivados con facilidad y persuadidos para convertirse
en donantes voluntarios regulares. A menudo existe una presión indebida (coerción) a los familiares / amigos de los pacientes, que obligan a que
paguen los donantes pagados profesional para servir como sustitutos de la familia y donar sangre que resulta en el suministro inseguro de la sangre.
La dependencia de las donaciones de reemplazo puede ser eliminado.
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medicina transfusional Manual técnico
donaciones basadas remunerados son realizados por los vendedores de sangre (donantes profesionales pagados) que son pobres y donan
sangre por dinero. Se reconoce en todo el mundo que su sangre es sobre todo de mala calidad y puede llevar a la infección de muchas
enfermedades como el virus de la hepatitis B (VHB), el virus de inmunodeficiencia humana (VHB), el virus de la hepatitis C (VHC) y la sífilis,
etc Es la sangre no segura y puede ser peligrosa para los destinatarios. Este sistema sobrevive debido a la ineficiencia de los servicios de
transfusión de sangre voluntaria y la apatía del público en general. No debe alentarse y se detuvo.
MOTIVACIÓN Y PROPAGANDA
propaganda eficaz y amplia es imprescindible para el reclutamiento de donantes de sangre voluntarios. Los siguientes medios y
métodos de comunicación para la donación de sangre voluntaria disponibles enumeradas se deben seguir
Comunicación oral
Este es el método más eficaz de reclutamiento de donantes. Hablar de la necesidad de la sangre, la escasez de sangre, la facilidad de la
donación y el mito sobre la donación de sangre, posiblemente ilustrado por películas es muy eficaz. Los altavoces / reclutadores deben tener la
capacidad de persuasión de apelar a los sentimientos humanitarios de la audiencia. El tiempo debe estar disponible en el final de la charla para
el público para hacer preguntas y dar respuestas precisas.
Comunicación personalizada
comunicación personalizada se consigue a través de circulares de las asociaciones profesionales y religiosas, clubes,
boletines y revistas de la escuela o por correo directo.
La comunicación impresa
Folletos, carteles y folletos informativos son valiosas formas de comunicación. El material debe coger el 'ojo', y ser
fácil de entender.
materiales de publicidad, por ejemplo, carteles, anuncios de televisión, jingles, dibujos animados, etc. deben ser preparados por
profesionales. Las tarjetas de felicitación de cumpleaños, aniversarios de matrimonio, Día de Año Nuevo o de otros días propicios que llevan lemas
de motivación para las donaciones voluntarias también son eficaces.
Instituciones educacionales
La educación entre los jóvenes es útil para eliminar la superstición y el mito relacionado con la donación de sangre. Es importante introducir
el tema de la donación de sangre en las escuelas como parte de la ciencia y los estudios cívicos. Los jóvenes son potenciales donantes.
reclutadores
La importancia de la contribución de los oficiales de reclutamiento, que pueden ser trabajadores sociales o, a menudo los donantes de sangre
en sí, no debe ser subestimada en donantes de reclutamiento. Su entusiasmo y empatía con los nuevos donantes es muy valiosa.
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Organización de los servicios de transfusión sanguínea
Los reclutadores son los conductos para el público en general y que debe tener toda la información sobre la donación voluntaria de
sangre, los avances científicos y técnicos relacionados con la medicina de transfusión, de modo que puedan dar respuestas precisas a los
donantes. No debe haber reuniones para los reclutadores a la que pueden expresar e intercambiar puntos de vista sobre su trabajo.
• Los donantes de sangre y organizadores pueden interactuar con los demás y el público.
• Atrae a las personas que quieren ayudar a los demás o hacer algún servicio social.
• En consulta con la persona 'clave' el contacto, una charla en una fecha conveniente para el organizador puede disponer, si así se
desea por el organizador.
• La fecha, hora y lugar de campamento de la donación de sangre conveniente para el organizador son fijos.
• carteles informativos, folletos, etc. se dan a la persona de contacto para que aparezca en el lugar del campo de la donación de
sangre.
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medicina transfusional Manual técnico
• equipo de recogida de sangre debe llegar en el lugar de campamento a cabo la donación de sangre de la puerta en el tiempo y debe
mantenerse hasta que el organizador quiere.
Es de primordial importancia para disipar el miedo del donante. Si un nuevo donante es convencido por experiencia personal que la donación de
sangre es indoloro e inocuo, él o ella generalmente volverá a donar sangre de nuevo. Éstos son eficaces para motivar pública para ser donantes de
sangre regulares.
Personal
El personal del personal deben ser corteses interesados, alegre y amable, así como profesional y eficiente. Si los donantes encuentran
los centros de recolección sucios malos templado o en el personal civil, y mal gestionado, desorganizado, o, no es probable que volver
a donar sangre otra vez.
incentivos
Incentivos como alfileres, insignias y placas de un número específico de donaciones ayudan en donaciones de repetición. Otros incentivos o
premios, simple y atractivo de escaso valor comercial, son útiles en la retención de los donantes.
Se extrae sangre de donantes con habilidad, bien tratados, teniendo en cuenta los refrescos y los donantes de luz tarjetas. Los donantes deben
ser agradecidos por la contribución y les anima a donar de nuevo. letras simples agradeciendo a los donantes / organizadores por sus donaciones
son importantes.
ceremonias especiales
ceremonias de premios anuales deben mantenerse a reconocer y felicitar a las personas que han donado sangre muchas veces o
asistidos en la promoción de las donaciones voluntarias. Estas ocasiones dar una amplia publicidad y los ciudadanos prominentes
deben ser invitados a abordar los donantes y las organizaciones / instituciones para su servicio valioso y excepcional a la
comunidad. Los donantes, los reclutadores, instituciones y organizaciones deben recibir copas, trofeos y escudos por sus
contribuciones en las donaciones de sangre voluntarias.
Saludos
Saludos en ocasiones especiales como cumpleaños, matrimonio aniversario, el día de Año Nuevo, etc a los donantes voluntarios
aumentan las donaciones de repetición.
CONCLUSIONES
No hay atajos para la programación eficaz de reclutamiento. La única manera de lograr buenos resultados es acercarse a la
tarea sistemática y profesionalmente. El trabajo de reclutamiento de donantes voluntarios de sangre es esencialmente
progresiva y activa. El reto está siempre presente.
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Los donantes
La selección y la Sangre
Colección
T que paso primero y más importante, para garantizar que la sangre y sus productos para la transfusión no tienen ningún virus / acteria
patógeno, es la adecuada selección de los donantes de sangre. Debe hacerse con cuidado. El donante debe estar en buen estado de
salud con el fin de evitar cualquier efecto adverso para el donante o el receptor.
La sangre recogida de donantes voluntarios y relaciones / amigos de los pacientes sin ningún tipo de coacción sobre ellos es seguro.
la selección de donantes
de laboratorio o él / ella puede ser llamado para la donación de futuro. (2) historial médico (3) examen físico Limited (4) Las
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medicina transfusional Manual técnico
Todos los donantes deben recibir materiales educativos para informarles de las actividades de alto riesgo de transmisión del VIH, de
los signos y síntomas clínicos de la infección por el VIH y el SIDA y de la importancia de abstenerse de donación de sangre si han
participado en estas actividades o signos experimentado y síntomas.
5. Las personas que han tenido relaciones sexuales con cualquiera en cualquiera de estos grupos.
Historial médico
Se evalúa la historia clínica del donante. El donante es aceptada por una persona debidamente cualificada capacitado para seguir las
pautas prescritas para la selección de donantes de sangre. Esta persona trabaja
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Selección de donantes y extracción de sangre
bajo las instrucciones de un médico del banco de sangre. Un donante con cualquier condición anormal se conoce el
médico del banco de sangre, que toma la decisión final sobre si se debe recoger la sangre de un donante o no tales. En
caso de duda, el donante debe ser diferida.
Infecciones respiratorias
• Resfriado, gripe, tos, dolor Aplazar hasta que todos los síntomas desaparecen
garganta o sinusitis aguda y temperatura normales
• Sinusitis crónica Sin aplazamiento menos que el uso de antibióticos
• ataque asmático 1 semana después del último ataque si el pecho está claro
• Los asmáticos en los esteroides Aplazar
Embarazo y Aborto
• Embarazadas o recientemente entregado Aplazar durante 6 meses después de la entrega
• Aborto Aplazar 6 meses después del aborto
• La lactancia materna Después destetados bebé (aplazar hasta el bebé está en
periodo de lactancia)
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medicina transfusional Manual técnico
Procedimientos quirúrgicos:
Enfermedades cardíacas
• Medicamentos cardíacos
(digitalis.nitroglycerine) aplazar de forma permanente
Enfermedades cardiovasculares
convulsiones
Desmayos, convulsiones y Defer, si no tomar medicamentos o libre de convulsiones
Epilepsia durante> 2 años pueden ser aceptados después de la evaluación.
Trastornos Endorcranial aplazar de forma permanente
Enfermedades infecciosas
Los donantes deben estar libres de enfermedades infecciosas se sabe que son transmisibles por la sangre, por lo que se
puede determinar mediante el examen y la historia de siempre.
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Selección de donantes y extracción de sangre
Hepatitis viral
Ictericia
MALARIA:
Los viajeros que han estado en una zona considerada endémica para la malaria pueden ser aceptados como donantes habituales de un año
después de regresar de la zona endémica -independientemente de la recepción de la profilaxis contra la malaria, siempre que hayan estado libres
de enfermedad febril de origen desconocido. Inmigrantes, refugiados o ciudadanos procedentes de un país endémico para la malaria pueden ser
aceptados como donantes de sangre tres años después de la salida de la zona endémica, si han estado asintomático en el ínterin. En una región
endémica para la malaria, que no es factible para rechazar los donantes que tienen antecedentes de infección por malaria o que han tomado la
droga (s) contra la malaria. Los pacientes se pueden administrar medicamentos contra la malaria. Historia de la malaria en zonas endémicas, pero
Sífilis
dolor genital o erupciones cutáneas generalizadas Aplazar por 12 mes después de erupciones
desaparecen y la finalización de la terapia
Tuberculosis Aplazar durante 5 años después del cese de los síntomas y el tratamiento
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medicina transfusional Manual técnico
Fiebre
enfermedades renales
Sistema digestivo
• úlcera de estómago con síntomas aplazar de forma permanente
o con hemorragias recurrentes
La vacunación e inoculación
1. No hay período de espera antes de la donación si los síntomas gratis
La inoculación con toxoide del tétanos o una vacuna muerta viral / bacteriana
Influenza
Difteria pertusis
Tifoidea La poliomielitis (vacuna Salk, inyección)
Paratifoidea La rabia como profiláctico
Cólera Plaga
Profiláctica contra la hepatitis B
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Selección de donantes y extracción de sangre
MEDICACIÓN
Si un donante está tomando algún medicamento que no sea en su / su propio interés para donar sangre y también puede afectar al
paciente que recibiría la sangre.
medicamentos
Aceptado / diferido
• Anticonceptivos orales
• analgésicos Aceptado
• vitaminas Aceptado
• sedantes suaves y
transquillisers
• Salicilatos (aspirina) tomadas en No se aceptan si se utiliza sangre
últimos tres días para la preparación de plaquetas
• La isotretinoína (Accutane) Aplazar durante 1 mes después de la última dosis
utilizado para el acné
• Finasteride (por ejemplo Proscar) utilizado Aplazar porque yo mes después de la
para el tratamiento de la hiperplasia benigna de próstata última dosis
• fármacos orales antidiabéticos Aceptable
sin complicación vascular
• . Los diabéticos que usan insulina Defer mientras toma el medicamento
• Los antibióticos (oral) Aplazar durante 3 días y hasta síntomas gratuitas
• Antibióticos (inyección) Aplazar durante 4 días y hasta síntomas libre después de la última inyección /
• Cortisona Aplazar durante 7 días después de la última dosis
• Medicamentos para tratar las Aceptado
hipercolesterolemia
Los donantes que toman medicamentos siguientes son rechazadas de forma permanente:
Antiarrítmicos inmunosupresor
Anticonvulsions harmones crecimiento de la pituitaria de origen humano
anticoagulantes Sedantes o tranquilizantes en dosis altas
Los fármacos antitiroideos vasodilatadores
Los fármacos citotóxicos El etretinato (egTegison) para tratar
psoriasis. Es teratogénico.
Digital vasodilatadores
Dilantin Medicamentos para la enfermedad de Parkinson
tendencia a la hemorragia anormal o trastorno de la coagulación sanguínea, tales como trastorno alérgica grave
hemofilia
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medicina transfusional Manual técnico
Los donantes con Cell relativamente menor Anomalías Talasemia Trait Se se asocia con poca o ninguna reducción en la vida de los glóbulos
rojos y la concentración de Hb es generalmente normal. Las personas con talasemia pueden ser aceptados como donantes, siempre que tengan
una concentración normal de hemoglobina y recuento de reticulocitos normal.
Policitemia vera
La sangre de personas que sufren de la policitemia vera no se utiliza para transfusión, ya que es una condición precancerosa
y su receptor a veces se desarrolla la leucemia u otras células malignas, aunque es raro.
En el almacenamiento, la viabilidad de las células rojas de G-6-PD donante deficiente es menor que la de los glóbulos rojos normales.
Peso:
Un donante de pesaje 45 kg puede dar 350 ml de sangre (8-9 ml / kg de peso corporal) además de las muestras piloto para su
procesamiento. Aquellos que pesa 60 kg o más pueden dar sangre 450 ml, así como muestras piloto.
Presión sanguínea:
La presión arterial sistólica debe estar entre 100 y 180 mm de Hg y la presión diastólica entre 50 a 100 mm
de Hg.
Pulso:
El pulso debe ser de entre 80 a 100 latidos por minuto y regular.
Temperatura:
Temperatura oral no debe exceder de 37,5 ° C.
donación de intervalo
El intervalo entre la donación de una unidad de sangre debe ser de al menos 12 semanas, excepto en circunstancias poco usual.
donación de sangre se debe aplazarse por al menos 72 horas después de plasma o plaquetas de aféresis.
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Selección de donantes y extracción de sangre
Donantes de la piel:
La piel en el sitio de la punción venosa debe estar libre de cualquier lesión o cicatriz de punciones con agujas indicativas de la adicción a los
narcóticos o donación de sangre frecuente como en el caso de los vendedores de sangre.
El examen sistémico:
Clínicamente corazón, los pulmones y el abdomen deben ser normales. Hígado y el bazo no deben ser palpable.
PRUEBAS DE LABORATORIO:
La hemoglobina (o hematocrito):
La hemoglobina (Hb) o el hematocrito (Hct) debe determinarse cada vez que el donante de presentarse a sí mismo / ella misma. La Hb
no debe ser inferior a 12,5 g / dl (o 38% Hct) La Hb se puede medir mediante los métodos siguientes:
(una) método Peso específico usando una solución de sulfato de cobre de la gravedad específica 1,053. (Ver
capítulo "Preparación de soluciones y métodos") (B) método
Sahlis
(do) método cianometahemoglobina utilizando espectrofotómetro o colorímetro fotoeléctrico. (Véase el capítulo "Preparación de
soluciones y métodos") (d) método Hemo-Cue (Véase el capítulo "Preparación de soluciones y métodos") La prueba de la gravedad
específica de sulfato de cobre se utiliza generalmente como un procedimiento de detección de Hb. Es prueba simple, rápida y barata.
Local
Debe ser atractivo, bien iluminado, limpio y para que los donantes se sientan cómodos y relajados con aire acondicionado.
Acceso El lavado de manos es esencial en todos los sitios de recolección. Moqueta o superficies difíciles de limpiar se pueden proteger con
un recubrimiento adecuado limpio. pantallas portátiles son útiles para proteger y mantener las áreas de trabajo seguras. áreas de servicio Refresco
deben ser separados de las áreas de recogida de sangre y almacenamiento. residuos de la sangre contaminada debe ser empaquetado y regresó a
una ubicación central para su eliminación usando térmica (autoclave, incinerador) o desinfectante químico de acuerdo con las regulaciones locales
para desechos médicos.
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medicina transfusional Manual técnico
Personal
El personal debe estar interesado, amable, así como profesional y bien entrenado. Se extrae sangre del donante por un
médico cualificado o bajo su / su supervisión por parte de técnicos entrenados en el procedimiento. Un médico debe estar
contenedores de sangre son de polivinilo bolsas de plástico de cloruro (PVC), que son sistema cerrado de bolsas
individuales, dobles o triples para la recogida de 350 ml o 450 ml de sangre. Las soluciones anticoagulantes
63 ml por 450 ml de sangre (14 ml CPD o CPDA- 1 para la sangre 100 ml). Actualmente CPDA-1 solución anticoagulante se
utiliza sobre todo. Debe ser estéril, libre de pirógenos. (segundo) Esfigmomanómetro, mezcla automática de la sangre y un
(Blood Collection monitor-Scale / Mixer como Combimix-X3, Baxter; Biomixer-321, Lungberg y Kogel AB etc.)
(c) clips de plástico, separador, sellador de tubo-di eléctrico o de aluminio clips, sellador, cortador. (re) hisopos
estériles de algodón y tiritas / vendas (e) alcohol metilado, tintura de yodo, solución de povidona-iodo (1%) y alcohol
solución salina normal cristaloide (cloruro de sodio 0,9%); Inyecciones: fosfato sódico de dexametasona; Gluconato de
calcio; Mephantine; Perinorm; Cilindro de oxígeno con el regulador y la máscara; documentos de bolsas para respirar;
papeles tisú; toallas; cuencas.
Identificación
Bolso de la sangre y el tubo (s) piloto se identifican mediante un número donación en el momento de la recogida de sangre, de modo que se
remonta al donante. Las fechas de recolección y de caducidad, y, grupo ABO Rh (D) se escriben en la etiqueta de la bolsa para la recogida de
sangre.
Volumen de sangre
Un donante de pesaje 45 kg puede dar 350 ml (369 octies) de sangre y los que pesan 60 kg o más puede dar 450 ml (474 g) de la sangre y
la muestra de sangre en el tubo piloto (8-9 ml de sangre por kg de peso corporal o 12 % de volumen de sangre)
14 ml de CPD o solución CPDA-1 se utiliza para 100 ml de sangre. Si menos cantidad de sangre debe ser dibujado dos factores
deben ser calculados:
dieciséis
Selección de donantes y extracción de sangre
(1) ¿Cuánta sangre se puede extraer de forma segura desde el donante. (2) Se necesita una solución la
una) En primer lugar, la cantidad de sangre que se elaborará está determinada por el peso del donante utilizando la
siguiente fórmula:
(Peso del donante en Kg 55) x 450 = cantidad (ml) que se elaborará
Por ejemplo, si la sangre entera es que puede extraerse de un donante que pesa 48 kg, el cálculo
sería: (48 55) x 450
= 392,72 dicen 390 ml de sangre que se pueden extraer
(390 100) x 14 = 54,6 ml anticoagulante necesario
63-54.6 ml = 8,4 ml de anticoagulante para ser retirado de la bolsa para el
almacenamiento adecuado de sangre.
MÉTODO DE flebotomía:
1. El flebotomista debe lavarse las manos con / agua y jabón y debe usar guantes estériles.
2. Inspeccionar la bolsa de fugas o cualquier otro defecto. La solución anticoagulante debe ser clara. Compruebe el nombre del
donante, el número de donaciones en la forma y la bolsa. Número de donación en la bolsa y la forma debe ser el mismo. Coloque
la bolsa en una balanza y asegúrese de que está por debajo del nivel del brazo.
4. Suelte el manguito de presión arterial y limpiar a fondo el sitio propuesto para la punción venosa
con una loción antiséptica de la siguiente manera: (a)
Clean área de 4-5 cm comenzando en el sitio de la punción venosa y en movimiento hacia el exterior de una manera
espiral concéntrica con metilado espíritu / alcohol. (segundo) Aplicar 10% de solución de povidona-iodo (betadine) o tintura de
yodo en la misma
así como el espíritu. Deje que se seque. (do) Limpiar con alcohol metílico o alcohol permitir que la
solución se seque. (re) El área limpiada está listo para la venopunción y no debe ser tocado.
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medicina transfusional Manual técnico
5. Inflar manguito de presión arterial para mantener la presión de 50-60 mm de Hg. Pedir al donante para cerrar el puño. Destapar la
aguja estéril y realizar la punción venosa inmediatamente, utilizando el procedimiento aséptico.
6. Pedir al donante para abrir y cerrar la mano o de apretar una pelota de goma.
7. El donante debe estar bajo observación constante a lo largo de la flebotomía y nunca deberá dejarse
desatendida.
9. El flujo de sangre debe ser ininterrumpida y constante, de lo contrario, no será adecuado para la preparación de
concentrado de plaquetas, plasma fresco congelado o crioprecipitado.
10. Controlar el volumen de sangre que se extrae usando una balanza de recogida de sangre o Monitor con
Escala / mezclador. Un ml de sangre pesa 1,05 g. Por lo tanto, a 350 ml de sangre pesa 367 g. y 450 ml
pesa 472 g. El peso inicial de la bolsa y la solución anticoagulante debe ser tomado en cuenta al medir el
peso total.
11. Tan pronto como se recoge la cantidad necesaria de sangre, sujetar el tubo de la bolsa con
clip de plástico. Desinflar el manguito o liberar el torniquete. Coloque el hisopo estéril en el sitio de la punción
venosa, aplicar una ligera presión y retirar la aguja.
13. Pedir al donante para poner los dedos de la otra mano sobre el hisopo en el sitio de la punción venosa y
para elevar el brazo.
15. Aflojar el pinzas arteriales / clip de plástico y aplicar una ligera presión sobre la bolsa para transferir 5-6
ml de sangre en el tubo (s) piloto con mismo número que en la bolsa de sangre.
dieciséis. Sellar el tubo con sellador de tubo-di eléctrico y separar la aguja.
17. Franja de tubo de la bolsa de sangre, a partir de sello, empujando la sangre en la bolsa. Hacerlo con rapidez, para evitar
permitiendo que la sangre se coagule en el tubo. Invertir bolsa varias veces para mezclar a fondo la sangre; luego permitir que la tubería
se vuelva a llenar con sangre anticoagulada de la bolsa. Repetir el proceso una segunda vez.
18. Sellar el tubo conectado a la bolsa en segmentos (2-3) con sellador de di-electrictube.
19. Mantenga la bolsa de sangre a 2-6 ° C en el refrigerador inmediatamente después de la recogida. Si las plaquetas
son para ser cosechadas, bolsa de sangre debe mantenerse a 20-24 ° C hasta que las plaquetas se separan. Las plaquetas
deben ser separados dentro de 6-8 horas después de la recogida de la sangre entera.
20. El donante debe permanecer en el sofá sangrado durante 8-10 minutos bajo la observación
del personal. A continuación, se permite que el donante de sentarse e ir para el refresco.
22. refresco ligero como las galletas y té / café / bebida suave se les da a los donantes.
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Selección de donantes y extracción de sangre
23. El donante debe dar la tarjeta de donación y dio las gracias por la contribución y alentó
donar de nuevo.
Aunque el proceso de donación de sangre es generalmente seguro y sin complicaciones, de vez en cuando los donantes experimentan reacciones
adversas durante o después de la donación; pero por lo general son inofensivas. Personal en el área de flebotomía deben estar formados y
preparados para responder con rapidez a esas reacciones. En general, si se producen reacciones adversas:
1) Eliminar / desinflar el torniquete y retirar la aguja de la vena del donante a la primera señal de una reacción.
Poner el hisopo estéril en el lugar venipumcture y aplicar presión con el pulgar.
(2) Solicitud de ayuda de otros miembros del personal o el director médico, si es necesario. (3) Si es posible, retire el donante a
Los síntomas pueden incluir sudoración, debilidad, mareo, palidez, pérdida de conciencia, convulsiones, y el paso involuntario
de orina y heces. La piel es generalmente frío, la presión arterial disminuye y el pulso se vuelve filiforme.
administración
[una] Coloque el donante en su / su espalda y elevar las piernas por encima del nivel de la cabeza del donante. [segundo] Aflojar las ropas
apretadas. [do] Asegurar una adecuada forma de aire. [re] Administrar la inhalación de espíritu aromático de amoniaco. [mi] Aplicar
compresas frías en la cabeza del donante. [F] Controlar la presión arterial, el pulso y la respiración hasta donante recuperarse.
La ansiedad y la respiración profunda pueden hacer que el donante excitado a perder el exceso de dióxido de carbono, que puede causar tetania se
caracteriza por contracciones o espasmos musculares debido a la hiperventilación.
administración
El donante se le pide a respirar en una bolsa de papel que trae alivio rápido. No le dé
Administración:
una) | Hacer que el donante lo más cómoda posible. b [Preguntar al
donante a respirar lenta y profundamente.
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medicina transfusional Manual técnico
do) Girar la cabeza del donante a un lado para evitar la aspiración de vómitos.
Gestión de
hematoma
una) Desinflar el manguito de presión arterial. Pedir al donante para abrir el puño y retire la aguja de la vena.
segundo) Coloque 3 o 4 piezas de gasa estéril o hisopos de algodón sobre el hematoma y aplicar presión digital para 7-10 min con los
donantes brazo en por encima del nivel del corazón.
convulsiones
convulsiones verdaderas son raras
produzcan:
[una] Evitar que el donante se dañe a sí mismo / a sí misma [b] Coloque dorso de la lengua entre los dientes para evitar que
él / ella se muerda la lengua [c] Asegurar la vía aérea adecuada.
problemas cardiacos graves son extremadamente raros en la donación de sangre. Si el donante está en paro cardíaco, comience la resucitación
cardiopulmonar y continuar hasta que llegue la ayuda médica. La naturaleza y el tratamiento de todas las reacciones adversas deben tenerse en
cuenta en el registro del donante.
20
Selección de donantes y extracción de sangre
2. grupo ABO se determina por ensayo de las células rojas con anti-A, anti-B y anti-AB sueros y probando el suero con las células A, B y
O conocidos. Prueba con anti-suero AB es opcional si se utilizan monoclonal anti-A y anti-B. La sangre no debe ser liberado para su
uso hasta que las discrepancias, en su caso, el arco no se ha resuelto.
3. grupo Rh debe ser probado para Rh (D), sólo con suero anti-D. Rh (D) negativas unidades debe ser probado para débil Rh
(D), es decir D u por el suero antiglobulina humana (AHG). Las unidades son aquellos Rh (D) negativo y D u positivo debe etiquetarse
Rh (D) positivo y las que son Rh (D) negativo y D 11 negativo debe etiquetarse Rh (D) negativo. No se recomienda realizar pruebas
de rutina para otros antígenos de sistema Rh.
4. sangre del donante debe ser probado para anticuerpos inesperados por solución salina, albúmina / enzima y pruebas de antiglobulina
humana con panel de células de detección, o con 3 células rojas de grupo O frescas agrupados. Véase el capítulo sobre 'Detección e
identificación de anticuerpos'
5. Las pruebas de enfermedades transmisibles por la sangre: (a) antígeno de superficie de Hepatitis B y anti-HCV mediante el
método de ELISA. (segundo) Prueba para anti-VIH 1 y 2 por ELISA para eliminar el riesgo de transmisión de la infección por VIH.
(do) Prueba para la sífilis - prueba de floculación, Laboratorio de Investigación de Enfermedades Veneral (VDRL) de ensayo o un
• La sangre puede ser probado para parásitos de la malaria por frotis de sangre, pero es difícil de encontrar parásitos en frotis
de sangre en corto tiempo, especialmente si el número de parásitos es menos del 100 por l de sangre. .
Como no hay una prueba adecuada que se puede hacer fácilmente en el cribado de donantes de sangre para la malaria, se ha sugerido que
los fármacos contra la malaria pueden ser administrados para los receptores de sangre en áreas altamente endémicas.
21
Preservación
y
almacenamiento
de sangre
T él primero conservante anticoagulante fue introducido por Rous y Turner en 1916. Consistía en una solución de citrato-glucosa en la que la sangre
de los conejos se almacenó durante dos semanas, lo que impidió la anemia cuando se transfunden en otro conejo que había sufrido la pérdida de
sangre. La solución de Rous Turner se utiliza para el almacenamiento de la sangre humana durante la Primera Guerra Mundial (Mollison, 1987).
El siguiente desarrollo importante se produjo en 1943 durante la Segunda Guerra Mundial, cuando se introdujo la solución de
dextrosa citrato (ACD) acidificado para uso clínico por Loutit y Mollison.
En 1957 Gibson et al desarrollado un conservante mejorado de citrato-fosfato-dextrosa (CPD), que era menos ácido que el ACD y se
mantiene 2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG) nivelar mejor que en solución ACD. CPD finalmente sustituido ACD y se convirtió utiliza comúnmente
conservante para el almacenamiento de células de la sangre / rojo en forma líquida. Periodo de validez de la sangre almacenada en CPD a
2-4 ° C fue de 21 días.
En 1978 citrato-fosfato-dextrosa con adenina (CPDA-1) conservante fue desarrollado. La adición de adenina mejoró la
síntesis de trifosfato de adenosina (ATP) en la sangre almacenada, lo que prolonga el almacenamiento de las células rojas de la
sangre / a 2-4 ° C a 35 días.
23
medicina transfusional Manual técnico
Conservantes / Anticoagulantes
El objetivo de la preservación de la sangre es proporcionar componentes sanguíneos viables y funcionales para los pacientes que requieren
transfusión de sangre. Más de 70% de células rojas debe permanecer viable en circulación de 24 horas después de la transfusión de sangre
almacenada en CPDA-1 durante 35 días. La sangre se almacenó a 2-6 ° C para mantener la viabilidad óptima.
La pérdida de células de viabilidad de rojo se correlaciona con la "lesión de almacenamiento", debido a diversos cambios bioquímicos:
Disminución en el pH
Cuando la sangre se almacena a 2-6 ° C, glycosis se reduce, pero no se detiene. Giycosis resulta en la producción de lactato, con la
consiguiente disminución en el pH. La sangre entera recogida en CPD tiene un pH
7,20 en el día 0 y 6,84 en el día 21. soluciones Conservante proporcionan una capacidad de tamponamiento para minimizar los cambios de pH y
optimizar el período de almacenamiento.
24
Conservación y almacenamiento de sangre
ATP se asocia con las células de viabilidad de rojo. La pérdida de ATP provoca aumento de la rigidez celular y disminución de la integridad de la
membrana de glóbulos rojos y deformabilidad. Una disminución de ATP permite la filtración de Na + y K + a través de la membrana de glóbulos
rojos en niveles superiores a los que normalmente se ve en vivo. El nivel de ATP en CPDA-1 en las células rojas en día 35 es 45% (± 12) del nivel
inicial.
Una caída en el pH en los resultados de sangre almacenadas en una disminución en el nivel de célula de 2,3-DPG rojo, lo que resulta en aumento
de la afinidad de la hemoglobina-oxígeno. células rojas DPG-empobrecido han deteriorado capacidad para suministrar oxígeno a los tejidos. El
grado de reducción de los niveles de 2,3-DPG depende de la solución conservante utilizado. solución ACD tiene un pH más bajo que el de la
solución de CPD. Por lo tanto 2,3-DPG cae dentro de los primeros pocos días en ACD donde como sangre almacenada en CPD / CPDA-1 mantiene
niveles adecuados de
2,3-DPG durante 10-14 días.
Los efectos patológicos de la transfusión de glóbulos rojos con bajos niveles de 2,3-DPG y aumento de la afinidad con el oxígeno
incluyen aumento del gasto cardíaco y una disminución en PO venosa mixta 2 tensión.
2,3-DPG niveles en sangre transfundida son importantes en ciertas condiciones clínicas. funciones miocárdicas mejoran después de la
transfusión de la sangre con altos niveles de 2,3-DPG durante la cirugía cardiovascular. En los pacientes con shock de la transfusión de
glóbulos rojos agotados-DPG hace una diferencia significativa en la recuperación.
Después de la transfusión, los glóbulos rojos siguen sintetizar 2,3-DPG y los niveles regresan a los valores normales esperados
dentro de las 24 horas. El estado ácido-base del recipiente, el metabolismo de fósforo y el grado de metabolismo de influir en la tasa de
recuperación de 2,3-DPG.
adenina
Simon (1962) mostró que en CPD solución suplementado con 17 mg (0,25 mM) adenina por 63 ml de anticoagulante y 25% más de
dextrosa, la supervivencia de las células rojas 24 horas después de la transfusión de sangre almacenada durante 35 días fue de 80 ± 6,5%.
Adenina sintetiza ATP y su nivel es 56,4 ± 15,9% del nivel inicial en la sangre almacenada durante cinco semanas.
nefrotoxicidad adenina debido a su producto sin metabolizar, 2,8-dioxyadenine, es insignificante a un nivel de peso corporal de 15 mg / kg.
Esta cantidad está presente en 30 unidades de adenina CPD fresco (0,5 mM / unidad) en la sangre o en 60 unidades de cada una adenina que
tiene 0,25 mM La cantidad de adenina es menor si se usan células rojas.
Durante el almacenamiento refrigerado, Na + y K + se escapan a través de la membrana de glóbulos rojos rápidamente. Las células pierden K + y la
ganancia de Na +, sin embargo, la pérdida de K + es mayor que la ganancia de Na + durante el almacenamiento.
Temperatura
La temperatura más baja mantiene la tasa de glucólisis en el límite inferior y reduce al mínimo la proliferación de bacterias que podría haber
entrado en la unidad de sangre durante la punción venosa o de la atmósfera. La velocidad de difusión de electrolitos (Na * y K +) a través de
la membrana celular también es menos a la temperatura más baja.
25
medicina transfusional Manua técnico
CPD CPDA-1
Días de almacenamiento 0 21 0 35 0 35
Soluciones addtive
Los conservantes tradicionales se pusieron en uso cuando la sangre entera fue el producto principal. Con el advenimiento del uso de la terapia
componente de los glóbulos rojos aumentado. Esto dio lugar a varios problemas en su conservación. En la preparación de glóbulos rojos
concentrados 40% de adenina y la glucosa presente en la solución CPDA-1 se elimina con plasma y no hay disminución de la viabilidad de las
células rojas, particularmente en las últimas dos semanas de almacenamiento. concentrados de hematíes relativamente vacío de plasma son
más viscoso y difícil para infundir en situaciones de emergencia. Para superar este problema concentrados de glóbulos rojos se preparan con
hematocritos de menos de 80%. Esto permite plasma adecuada para permanecer para las células rojas alimento y para mejorar las propiedades
de flujo. Esto se traduce en rendimientos más bajos de plasma, afectando plasma fresco congelado y la producción de crioprecipitado.
El uso de soluciones de aditivo permite la recuperación de cantidad máxima de plasma y la preparación de la unidad de glóbulos rojos con un
hematocrito final de aproximadamente 60%. Este nuevo sistema de recogida de sangre tiene una bolsa primaria que contiene un anticoagulante
estándar (CPD) y una bolsa satélite que contiene una solución aditiva. La sangre se recoge en la bolsa primaria que contiene la solución
anticoagulante. Después de que el plasma se elimina de la sangre entera en otra bolsa satélite vacía, se añade la solución de aditivo a los glóbulos
rojos, lo que proporciona nutrientes a las células rojas para la mejora de la viabilidad. Los glóbulos rojos se pueden almacenar durante seis semanas
a 2-6 ° C. La solución de aditivo debe ser añadido a los glóbulos rojos dentro de las 72 horas desde la flebotomía.
Tres soluciones aditivas están disponibles (1) Adsol (AS-1) [Baxter Laboratorios], (2) Nutricel (AS-3) [Medsep
Corporation, anteriormente cortador Biológicos] y Optisol (AS-5) [Terumo Corporation |.
26
Conservación y almacenamiento de sangre
Tabla 3.3 Composición de aditivos Soluciones
Ácido cítrico - 42 mg -
Dextrosa 2,20 g l.l0 g 900 mg
adenina 27 mg 30 mg 30 mg
Una ventaja importante del sistema de aditivo es aumento en el nivel de ATP, y células rojas viabilidad es mayor, se extiende la vida útil de
los glóbulos rojos a 42 días. Esto facilita un mejor control de inventario de sangre, así como un mayor uso de las donaciones autólogas depositar
previamente. Más de 80% de células rojas sobreviven en circulación de 24 horas después de la transfusión de sangre almacenada durante 42 días.
Las soluciones aditivas no aumentan los niveles de 2,3-DPG. Aditivo solución con manitol no se utilizan habitualmente para el intercambio o la
transfusión neonatal. No hay ninguna restricción en el uso de soluciones de aditivos en cualquier otro tipo de receptores de transfusiones. Además,
el uso de soluciones de aditivo permite la extracción de más plasma rico en plasma / plaquetas para la producción óptima de las plaquetas, los
rendimientos de factor VIII y plasma fresco congelado.
Como-3! AS-5
Días de almacenamiento 42 42 42
La heparina
La heparina impide la coagulación mediante la inactivación de la actividad profiláctica de la trombina después de complejación con AT 111 y la
trombina.
1.000 UI de heparina es igual a 10 mg de heparina pero IU y mg no son estrictamente intercambiables ya que las preparaciones
comerciales de heparina varían en composición.
Dosis de heparina para la anticoagulación es 0,5-2,0 UI / ml. de, por ejemplo sangre de aproximadamente 500 UI de heparina por 500
ml de sangre.
27
medicina transfusional Manual técnico
l
La sangre heparinizada se debe utilizar con en 24 horas. Se usó la sangre heparinizada antes en la cirugía a corazón abierto,
pero ahora no se suele utilizar como bombas extracorpóreas están generalmente preparados con cristaloides y no con sangre.
El efecto de la heparina se puede neutralizar con sulfato de protamina. 1 mg de sulfato de protamina neutraliza 1 mg de heparina
por ejemplo, para neutralizar 5000 unidades de heparina (50 mg), se necesitarán 5 ml de solución al 1% de sulfato de protamina.
rejuvenecer Soluciones
Rejuvenezca soluciones que tienen fosfato, inosina, glucosa, piruvato y adenina aumentan los niveles de 2,3-DPG y ATP en los glóbulos rojos
almacenados. Estas soluciones se pueden añadir en cualquier momento entre 3 días posteriores a la recogida y 3 días después de la expiración de
los glóbulos rojos. La solución se añadió directamente a las células rojas, mezclaron e incubaron a 37 ° C durante una hora.
Los glóbulos rojos rejuvenecidas se lavan bien con solución salina (2 litros de no tamponada 0,9% de NaCl) y se pueden mantener a 2-6 °
C, sin embargo, debe ser transfundido con en 24 horas después del lavado o que se glycerolized para mantener las células rojas en estado
congelado para mejorar la calidad de los glóbulos rojos.
solución de rejuvenecimiento células de la sangre roja, 50 ml vial estéril (Rejuvesol, citosol Laboratories, Braintree, MA) está
disponible comercialmente. El proceso de rejuvenecimiento es caro y lleva mucho tiempo y es poco utilizado.
Bolsas de plástico
Muchos otros factores pueden limitar la viabilidad de glóbulos rojos transfundidos. Uno de los factores es también el material plástico que se
utiliza para las bolsas. El material plástico debe ser suficientemente permeable para CO2 con el fin de mantener el pH más alto durante el
almacenamiento. Actualmente la sangre se almacena en bolsas de plástico hechas de cloruro de polivinilo (PVC) con plastificante, di- (2-etilhexil)
ftalato (DEHP). Se sabe que DEHP lixivia de plástico en plasma y la membrana celular durante el almacenamiento y puede ser perjudicial para el
paciente. La acumulación de una cantidad excesiva de ácido debido a glycosis incluso a baja temperatura de almacenamiento es también un problema
importante en la preservación de líquido de las células rojas. Por lo tanto existe la necesidad de desarrollar mejores bolsas de sangre de plástico, así
como para su conservación.
Smith en 1950 informó que el glicerol podría evitar lesiones congelación en las células rojas humanas y que las células rojas, mezcladas con
glicerol podrían ser congelados sin daño.
Efecto de la congelación
Se cree que la congelación de daños glóbulos rojos debido a la formación de hielo intracelular y, probablemente, en cierta medida debido a la
hipertonicidad. Si glicerol (agente crioprotector) se añadió a las células que pueden ser congeladas y descongeladas sin daño (Polge et al. 1949). El
efecto de la glicerina es probablemente debido al hecho de que limita la formación de hielo y proporciona fase líquida en la que se distribuyen sales;
como enfriamiento procede hipertonicidad excesiva se evita también (Lovelock, 1953). El glicerol que impregna las células rojas con bastante
rapidez durante la congelación es más eficaz en la protección de las células rojas humanas. glóbulos rojos congelados se utilizan principalmente
para transfusión autóloga y el almacenamiento de sangre grupo raro. Para congelar las células rojas se añade un agente crioprotector a los
glóbulos rojos que son menos de 6 días de edad. El glicerol se usa más comúnmente y se añade a las células rojas lentamente con agitación
vigorosa por lo que el glicerol penetra en las células rojas. Las células son rápidamente congelado y almacenado en un congelador. La temperatura
de congelación y de almacenamiento depende de la concentración de glicerol. Dos concentraciones se utilizan para congelar células rojas, un
28
Conservación y almacenamiento de sangre
concentración de glicerol [peso 20% en volumen (w / v)] en la concentración final de crioconservante. La mayoría de los bancos de sangre
utilizan la técnica de alta glicerol.
Tabla 3.5 ventajas de la alta concentración de glicerol TECNICA SOBRE baja concentración Ventajas GLYCEROL
tehnique
Las células congeladas se desglicerolizados antes de la transfusión. La eliminación del glicerol se consigue mediante la sustitución
sistemática el crioprotector con concentraciones decrecientes de solución salina. Las células se lavan con 12% de solución salina, seguido de
1,6% de solución salina, con un lavado final con 0,2% de dextrosa en solución salina normal. La vida útil de los glóbulos rojos descongeladas
almacenados a 2-6 ° C es de 24 horas. Comercialmente disponible Sistema Celular de lavado fabricado por varias compañías se puede
utilizar.
Generalmente las células se glycerolized y se congelaron con en 6 días de recogida de sangre en CPD o CPDA-1. Los glóbulos rojos
almacenados en soluciones aditivas se pueden congelar hasta por 42 días.
Los glóbulos rojos congelados se pueden almacenar durante 10 años. El período de desactualización de los glóbulos rojos descongeladas
almacenados a 2-6 ° C es de 24 horas.
Método de congelación y conservación de células rojas en estado congelado: 1 células rojas Glycerolized que tienen concentración final de 40%
W / V de glicerol pueden ser congelados en
- 80 ° C durante un período de 30 min usando refrigeración mecánica, a continuación, puede conservarse a -60 a
- 65 ° C durante 10 años. 2 células rojas Glycerolized que tienen concentración final de 20% W / V de glicerol pueden ser congelados en
- 196 ° C usando nitrógeno líquido durante 2-3 minutos y puede ser conservado en la fase gaseosa de nitrógeno líquido a -120 ° C
durante 3 años.
solución de glicerol de alta (40% de concentración W / V). La solución glycerolizing consta de solución 6,2 M de glicerol que
contiene 57 g de glicerol%, 1,6 gm% Na lactato, 0.03% gm KCl y un total de 25 mEq / 1 de fosfatos monobásicos y disodio
para producir un pH de aproximadamente 6,8 (Meryman et al . 1972)
Antes de glicerolización, sangre entera en solución CPD, fresco o almacenado a 4 ° C durante no más de 3-4 días, se centrifuga a 3000x
g durante 7 min; plasma sobrenadante se expresa en la bolsa satélite y se utiliza para la preparación de componentes o congelado. se añade
un volumen apropiado de solución 6,2 M de glicerol en dos etapas, por ejemplo, 300 ml cuando el peso de los glóbulos rojos empaquetados es
150-230 g. primero se añade 100 ml de solución glycerolizing a las células en la bolsa de recogida con agitación vigorosa. Después de al menos
dos minutos de equilibrado, la solución resto de glicerol y las células parcialmente glycerolized se transfieren a una bolsa de 850 ml de
poliolefina (bolsa de sangre Hebia). La bolsa se centrifugó, el sobrenadante se expresa y las células rojas se congelan a -80 ° C utilizando un
congelador. A continuación, pueden ser almacenados de -60 a -65 ( 'C.
29
medicina transfusional Manual técnico
La solución glycerolizing consta de 35,0 g de glicerol%, 2,88% de manitol, y cloruro de 0,65 g de sodio.
La sangre entera en CPD se centrifuga a 3000x g durante siete minutos. El plasma se retira y congela. Solución de bajo glicerol igual en
volumen a las células rojas (por ejemplo 250 ml de solución de 250 ml de glóbulos rojos) se añade con agitación vigorosa. Las células rojas de la
sangre glycerolized se transfieren a una bolsa de plástico de poliolefina y se mantienen en recipiente de aluminio que después se coloca en
posición vertical en un baño de nitrógeno líquido a -196 ° C y después se almacenó a -120 ° C en vapor de nitrógeno líquido.
Descongelación y Deglycerolizing
glóbulos rojos congelados se descongelan en un baño de agua a 37 ° C durante aproximadamente 10 min. El glicerol se debe retirar
correctamente a partir de la célula descongelado para evitar hemólisis in vivo y / o in vitro. El entorno intracelular de las células glycerolized
es hipertónico con respecto al plasma y la primera solución utilizada para deglycerolization debe ser también algo hipertónico. Esto permite
que el glicerol para comenzar la difusión de los glóbulos rojos, mientras que el medio intracelular permanece hipertónica. Posteriormente
seguido de lavado con solución progresivamente menos hipertónica y finalmente con solución electrolítica isotónica que contiene glucosa.
contenido de glicerol deben reducirse al 1-2% de lo contrario se hemolizar en contacto con plasma.
El 40% W / V glycerolized glóbulos rojos se diluyen con 150 ml de cloruro de 12 g% de sodio tamponada a aproximadamente pH 7,2
con 0,15% de fosfato disódico y se dejaron equilibrar durante 5 minutos. A continuación, lavar con uno a dos litros de solución% de cloruro de
sodio 1,6 g tamponadas a pH 7,2 con 0,03 g% de fosfato disódico y finalmente con un litro de solución de cloruro de 0,9 g% de sodio que
contiene 0,2 g% de glucosa tamponada con fosfato 0,065 g% disódico a un pH de aproximadamente 6,8 (solución isotónica de glucosa). Las
células lavadas se suspendieron finalmente en solución isotónica de glucosa y listo para la transfusión. La vida útil de la unidad de procesado
es 24h.
El 20% W / V glycerolized glóbulos rojos se diluyen con 500 ml de solución% de cloruro de sodio 3,2 g tamponada a aproximadamente pH
7,2 y después se lavaron con 1-2 litros de solución de cloruro de 0,9 g% de sodio que contienen 0,2 g% de glucosa tamponadas con 0,065 g % de
fosfato disódico a pH 6,8. Las células lavadas se suspendieron finalmente en solución salina isotónica de glucosa y listo para la transfusión.
Periodo de validez de la unidad de procesado es de 24 h.
El lavado puede llevarse a cabo ya sea por lavado de flujo continuo en el procesador de sangre Haemonetic o por lavado de
flujo continuo en el sistema de Elutramatic Fenwal o centrifugación de serie en el procesador de sangre IBM. Los protocolos para cada
instrumento se deben seguir según las indicaciones de los fabricantes.
La consideración clínica
1. células rojas desglicerolizados son comparables en volumen y de Hct a la unidad estándar de glóbulos rojos.
2. células rojas desglicerolizados consisten de glóbulos rojos en la solución de electrolito. Prácticamente todo el plasma,
anti-coagulantes y la mayor parte de los leucocitos y las plaquetas se han eliminado.
3. En la supervivencia y funciones de las células rojas vivo son comparables a las células rojas líquido almacenado dibujadas frescas
porque las curvas de disociación de oxígeno de 2,3-DPG y son normales.
30
Conservación y almacenamiento de sangre
Prevención de la reacción a la transfusión febril no hemolítica en pacientes sensibilizados a leucocitos, plaquetas o proteína de
plasma. 5 Prevención de la sensibilización contra antígenos HLA en potenciales receptores de trasplantes de tejido.
requeridos
1. 5% de citrato trisódico (Na 3 C6H 5 0 7)
YO. pesan 100 g de citrato trisódico
II. lugar en matraz aforado de 2 litros
III. medio llenar con agua destilada y mezclar hasta que se disuelven los cristales.
IV. hacer hasta 2 litros con agua destilada y mezclar
2. solución de glicerol al 12%
Disolver 120 ml de glicerol de grado analítico en 880 ml de solución de citrato trisódico 5%
Procedimiento de congelación:
1 La sangre se recoge en CPDA-1 paquete doble. El paquete se centrifugó a 3000 X g durante 7 min y
se retira el plasma. 2
Se añade 12% de solución de glicerol igual a la mitad del volumen de las células empaquetadas a las células empaquetadas, se mezcló
y se dejó equilibrar a temperatura ambiente durante 10 min. 3 Se añade 60% de solución de glicerol igual a la mitad del volumen de las
células empaquetadas al paquete y
mezcló y se dejó equilibrar durante 10 min. 4 Dispense en etiquetados 10 ml de plástico estéril
/ tubos de vidrio (15x100 mm) 5
Congelar a -40 ° C, mantenerlo en la parte más baja de congelador y cambiar congelador para congelación rápida o lugar en la parte
superior de tanque de nitrógeno líquido, es decir, en fase de vapor durante 5-10 min.
Nota: Los tubos deben ser colocados en una rejilla de metal para la congelación rápida. 6 Cuando
congelado, los tubos se pueden almacenar a -20 ° C.
Procedimiento para la descongelación y deglycerolization: 1 células rojas deshielo en baño de agua a 37 ° C. 2 Preparar 25 cm tiras de diálisis tubo
por inmersión en 0,9% de solución salina. Sellar un extremo por plegado. 3
Transferencia descongelado células rojas para diálisis tubo. Sellar ambos extremos por plegado y la abrazadera con el clip de papel. 4 Suspender
la tubería por medio de clip de papel soportados por un aplicador en un gran vaso de precipitados
31
medicina transfusional Manual técnico
5 Dializar durante al menos 1 -2 h a TA o durante la noche a 4 ° C. 6 La transferencia de células a partir de tubo a tubos etiquetados, giro y
lavar las células con 0,9% de solución salina hasta
sobrenadante es claro.
7. Añadir un volumen igual de suero AB a células empaquetadas.
8. lubricantes tapón y se almacenan a 4" C.
PLATELETPRESERVATION
La preservación de las plaquetas viables y funcionales depende de los siguientes factores:
Temperatura
Las plaquetas deben almacenarse a 22-24 ° C (temperatura controlada) con agitación suave continua en la incubadora de plaquetas
y agitador.
pH
pH debe estar por encima de 6,0.
Bolsa de plastico
Mantenimiento del pH y la función de las plaquetas depende de la permeabilidad de la bolsa de almacenamiento de oxígeno y dióxido de
carbono. Las plaquetas almacenadas en bolsas de cloruro de polivinilo (PVC) con plastificante di- (2-etilhexil) ftalato (DEHP) tienen vida útil
de 3 días. Nuevas bolsas de plástico de poliolefina sin plastificante (de Baxter PL 732) y delgado PVC amurallado con tri- (2-etilhexilo)
plastificante trimellate (PDM) [PL de Baxter 1240 y el cortador CLX] mantener el pH y las funciones de hasta aproximadamente 7 días. Sin
embargo, se recomienda almacenar plaquetas en sacos nuevos durante 5 días solamente a partir de la fecha de recogida de la sangre
Las plaquetas agrupados se pueden almacenar durante 4 horas a 22-24 ° C antes de que se transfunden.
GRANULOCITOS
La vida útil de los granulocitos es de 24 horas a 22-24 ( 1 C. Ellos no necesitan agitación. recuperación transfusión mensaje de granulocitos
en circulación y la migración en loci inflamatorio es mejor si transfundido con en 8 horas de almacenamiento que eso si granulocitos
almacenados durante 24 horas.
32
Conservación y almacenamiento de sangre
Transportar células / sangre entera rojo con en el hospital La sangre y células rojas deben ser transportados dentro del hospital
en el portador aislado o en cajas aisladas frío si la temperatura ambiente es más de 25 ° C. Instrucciones deben administrarse para
mantener en el refrigerador si hay posibilidad de que las células de sangre / rojo no se transfunden inmediatamente .
Envío de plaquetas
Envío de las plaquetas almacenadas a la instalación de transfusión debe utilizar un recipiente bien aislado, sin hielo, para mantener
la temperatura entre 20-24 ° C.
Todos los equipos de almacenamiento, ya sea un frigorífico, un congelador o una cámara ambiental de plaquetas debe tener las siguientes
instalaciones:
• Los refrigeradores para el almacenamiento de las células rojas de la sangre / deberían tener un ventilador para hacer circular aire
para garantizar la adecuada temperatura de 2-4 ° C en todos los compartimentos.
• Refrigeradores, congeladores y plaquetas incubadoras deben tener un sistema para controlar y registrar la temperatura de forma
continua. tablas de registro de la temperatura deben cambiarse con regularidad. También deben tener sistemas de alarma con señales
audibles. Estas instalaciones deben tener una copia de seguridad de la batería.
• Las áreas separadas deben reservarse para el almacenamiento de productos no probados, probados y puestos en cuarentena.
Ningún alimento debe ser almacenada en los refrigeradores y congeladores.
33
medicina transfusional Manual técnico
Sangre total Todos los componentes de la sangre del 2-6 ml CPD - 21 días CPDA-1 -
Glóbulos rojos donante más anticoagulante 2-6 sistema de 35 días Closed -
CPD, CPDA-1 de sangre entera con 200-250 plasma ver sangre entera abiertos del
eliminado; finales VOLUME- 300 ml, de Hct <80% sistema - 24 hr. AS aditivo -
42 días
AS: con la mayoría plasma retirado y 100 ml
aditivo soln. adicional; El volumen final - 350 ml
de Hct 55-65%
Las células rojas - RC modificado por centrifugación la eliminación de 2-6 Sistema cerrado - ver células
Los leucocitos la capa o filtración para eliminar buffy> 70% enteras sangre / rojo abierto del
reducido leucocitos al tiempo que conserva> 70% de RC sistema - 24 horas.
originales
Las plaquetas > 5,5 x l0 10 en 40-70 ml de plasma 20-24 con 3 o 5 días dependiendo de la
agitación bolsa de almacenamiento de 4
horas después de la puesta en común
Plaquetas, aféresis > 3.0x 10" en aproximadamente 200 ml 20-24 con 5 dias
de plasma agitación
Plasma 200-250 ml con plasma líquido Congelado -18 o por debajo 5yr 5 días después de la
anticoagulante Thawed 2-6 expiración de sangre entera
crioprecipitado AHF 80-120 unidades de Factor VIII 40-70% de Frozen <-18 Thawed l yr 6
factor de von Willebrand 2-6 Después de hr 4
agrupar hr
INSPECCIÓN DE SANGRE
La sangre debe ser inspeccionado antes de la transferencia de las unidades de una instalación a otra o la emisión para el uso del paciente. La
sangre debe ser inspeccionado para comprobar la posible contaminación bacteriana, que puede producir un color anormal en las células rojas o
plasma. Las unidades son inspeccionadas para la hemólisis, coágulos visibles, o púrpura, marrón y plasma rojo. anormales unidades no deben ser
emitidos y la causa deberían hacerlo
34
Conservación y almacenamiento de sangre
ser investigado. Plasma con una tonalidad verde no tiene por que ser rechazada porque esto es causado por la exposición de los pigmentos de
bilirrubina a la luz.
Antes de emitir plasma tanto en la bolsa principal y los segmentos debe inspeccionarse visualmente para la hemólisis o decoloración.
Yercinia enterocolitica, una bacteria, puede crecer a 4 ° C, la PO de la unidad disminuye y se hemolizados la sangre. Esta actividad
metabólica en la unidad no se duplica en los segmentos sellados. Cuando los segmentos de las unidades contaminadas son
cultivadas, que se encuentran para ser estéril, mientras que la sangre de la unidad puede crecer entrocolitica yercinia. Esto provoca
cambio de color en la unidad, pero no el color del segmento.
En caso de la sangre hemolizada el color de la sangre tanto en la bolsa y el tubo se cambia a púrpura.
35
4
Principios de
Inmunohematología
Los conceptos de la inmunología se derivan del estudio de la resistencia a las infecciones. Contribución a la inmunología
proviene tanto de las ciencias básicas (bioquímica, genética, y hematología) y el estudio de las entidades clínicas (alergias,
enfermedades infecciosas, trasplante de órganos, enfermedades de inmunodeficiencia y oncología).
sistema inmunológico humano consta de una serie de órganos y células que reconocen los antígenos no propios con exactitud y
específicamente. células pluripotenciales, cuyos descendientes, las células madre hematopoyéticas y linfopoyéticas las células madre se
encuentra dentro de la médula ósea, hígado fetal, y saco vitelino del feto, dan lugar a las dos líneas celulares inflamatorias e inmunes.
Off-manantiales de estas células madre, diferenciarse en células rojas de la sangre, plaquetas, leucocitos y células fagocíticas.
37
medicina transfusional Manual técnico
células del sistema inmune se encuentran en sangre, timo, bazo, hígado, ganglios linfáticos y tejidos.
Cell monocitos macrofase sangre productos de sistema óseo de células madre de médula monocitos, que circulan a los sitios
de inflamación o
migrar a diversos tejidos. Los monocitos en el tejido se diferencian en macrófagos tisulares, y se encuentran en todo el cuerpo,
pero especialmente prominente en los nodos de hígado, bazo y ganglios.
Los diferentes tipos de receptores y antígenos de histocompatibilidad están presentes en la superficie de los macrófagos y que son
importantes en los bancos de sangre.
Un receptor de superficie celular importante en los macrófagos es el receptor para la porción Fc de inmunoglobulina. Las células
recubiertas con anticuerpo se puede unir a los macrófagos cuando la porción Fc de la inmunoglobulina entra en contacto con el receptor
de Fc en macrófagos. De esta manera muchos tipos de células anormales - microbiana plantado, autólogas o células transfundidas se
pueden retirar de la circulación por los macrófagos.
macrófagos tisulares también poseen receptor para el componente C3b del complemento. Las células o microorganismos a la que se adjunta
complemento pueden ser eliminados por los macrófagos fagocíticas. Algunos anticuerpos de grupo sanguíneo son capaces de la activación del
complemento, dando como resultado glóbulos rojos recubiertos del complemento. Estas células son susceptibles a receptor C3b sobre los
macrófagos y que son eliminados por los macrófagos.
Un segundo grupo de proteína de superficie celular que se encuentra en los macrófagos son los de mayor de
histocompatibilidad. Los macrófagos expresan tanto de clase 1 (HLA-A, -B, -C) y la clase 11 (HLA -D, - DR, DQ, -DC) antígenos. 11 Los
antígenos de clase que son importantes para la inmunidad trasplante. Los macrófagos participan en la fagocitosis, la inflamación y la
inmunidad.
LINFOCITOS
Lymhocytes se diferencian en células T, células B y células nulas. Ellos pueden ser similares en apariencia, pero que se pueden
distinguir por la presencia de marcadores de células distintivas.
Linfocitos T (células T)
Los linfocitos T se originan en las células madre linfopoyéticas en la médula ósea. Las células precursoras dejan la médula ósea
y los viajes a la glándula timo donde Devel P y se liberan en la circulación como células T maduras. Aproximadamente 75 a 80in
la sangre son células-T. células T
38
Principios de Immunohcmatology
circular de la sangre a los órganos linfáticos y volver al torrente sanguíneo a través de los conductos linfáticos. Los diferentes tipos de células
T se nombran de acuerdo a sus respectivas funciones: las células T auxiliares, células T, de supresión de células T citotóxicas y otros.
Muchas proteínas en las células T son identificados por anticuerpos monoclonales, y se han clasificado como grupos de (CD)
antígenos de diferenciación. Fuera de estos antígenos, el CD4 y CD8 son significativos porque su detección e identificación es útil en
algunas condiciones clínicas. células CD4 mejorar y promover la acción de otras células inmunes y se llaman células T auxiliares;
células CD8 tienen efectos supresores o citotóxicos y se llaman células T supresoras.
marcadores CD4 reconocen el antígeno junto con un máximo de complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase 11 moléculas.
marcadores CD8 interactúan con MHC de clase 1 moléculas.
La células T auxiliares: supresor de relación de células T en un individuo sano e inmune-competente es aproximadamente 2: 1. En
el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), el virus destruye las células CD4, y su número en la disminución cuerpo y hay una
disminución en la relación CD4: CD8. Las células T participan en la regularización de la respuesta humoral (anticuerpo) y la respuesta
celular.
Linfocitos B (células B)
Los linfocitos B se derivan de células madre linfopoyéticas y se desarrollan en la médula ósea en los seres humanos. Al igual que las células T,
las células B circulan por la sangre a los órganos linfáticos y vuelven al torrente sanguíneo a través de los conductos linfáticos. Alrededor del 15%
de los linfocitos son las células B.
Las células B son las células más importantes del sistema inmune humoral. Las células B son los precursores de las células plasmáticas
productoras de anticuerpos. Células B, al igual que otras células inmunes, existen en una forma de reposo y una forma activada. Si se activan las
células B se someten a un proceso llamado expansión clonal producción de un tipo de anticuerpo y la proliferación de la línea celular particular. Sin
embargo, en la mayoría de los casos, el gatillo para la producción de anticuerpos de células B también requiere la presencia de células T auxiliares.
Estas células helper T- secretan productos químicos (linfocinas), conocidos como factores de crecimiento de células B, que se unen a receptores
específicos de células B e inducen la expansión clonal y la producción de anticuerpos.
Muchas proteínas de la superficie han sido reconocidos en las células B y se agrupan en tres categorías: marcadores de superficie
celular, antígenos de histocompatibilidad principales (CLAS MHC 11), inmunoglobulina de superficie y receptores. Cada célula B expresa
solamente un tipo de inmunoglobulina de superficie y cuando se activa sólo producen un tipo de anticuerpo. Por lo tanto, la immunoglbulin
superficie en células B sirve como el receptor para el antígeno particular a la que reacciona que de células B.
La mayoría de las células B activadas se diferencian en células plasmáticas secretoras de IgM-. Tras la estimulación continua, las células
B con frecuencia cambian la expresión de su cadena pesada, conocida como cambio de isotipo. Esto implica generalmente un interruptor de IgM a
IgG. Esto también resulta en la generación de células B de memoria con inmunoglobulina de superficie IgG y los resultados de respuesta de
anticuerpos secundarios en la producción de anticuerpos IgG.
células nulas
Algunos linfocitos que no llevan marcadores de células T o B se encuentran en la sangre y se denominan células asesinas naturales NK. Estas
células tienen la capacidad de lisar o destruir una amplia variedad de células infectadas y células tumorales sin ningún estímulo antigénico
aparente.
RESPUESTA INMUNE
39
medicina transfusional Manual técnico
Inmunidad innata
La inmunidad innata o natural es la primera línea de defensa. La primera línea de este mecanismo de defensa es siempre presente desde
el nacimiento y proteger al individuo de los invasores extraños y no cambia en repetidas exposiciones al mismo antígeno, por lo que se
considera como no específica. Este mecanismo consta de las barreras físicas y bioquímicas que impiden la entrada de agentes
patógenos en el cuerpo.
El exterior del cuerpo humano (piel) y las membranas mucosas son impermeables a la mayoría de las infecciones. defensas bioquímicas que
inhiben o destruyen el crecimiento bacteriano son el ácido láctico y el ácido graso en el sudor, secreciones sebáceas. Muchas secreciones corporales
como lágrimas, las secreciones nasales, y la saliva tienen lisozima (enzima de proteína de suero) tiene la capacidad de destruir la pared celular
bacteriana. defensas bioquímicas también están presentes en otras partes del cuerpo.
segunda línea de defensa del sistema innato es interno. Si un organismo penetra en la superficie epitelial,
leucocitos y células fagocitarias reconocen agentes extraños o no autónomos que los unen, internalizar y destruirlos.
Inmunidad adaptativa
La inmunidad adaptativa tiene la capacidad de especificidad, el reconocimiento, la memoria y la reactividad específica. La capacidad de
reconocer 'auto y' no-yo se establece en la vida fetal, pero la respuesta inmune se desarrollan más tarde después del contacto inicial
con la sustancia extraña. La inmunidad adquirida es específica y el anticuerpo reconoce al antígeno que inicializa su producción. La
inmunidad adquirida tiene memoria, la capacidad de recordar el antígeno y para mejorar el proceso de defensa inmunitaria tras la
exposición sucesiva.
No auto o material extraño inicia los cambios adaptativos que resultan ya sea en la producción de anticuerpos llamado respuesta
humoral o una respuesta mediada por células
La inmunidad celular
Inmunidad mediada por células o la inmunidad celular, se localiza reacción a organismo, patógenos normalmente intracelulares, mediadas por
linfocitos y fagocitos en lugar de por la producción de anticuerpos. Células T y macrófagos juegan importante papel en la inmunidad mediada
por células, ya sea como resultado de la citotoxicidad directa o por medio de la liberación de linfoquinas. Cell citotoxicidad mediada es
importante en la lisis de las células infectadas por virus y el rechazo de las células alo-injerto y tumorales.
Otras células citotóxicas que participan en la respuesta inmune mediada por células son células nulas (NK). Estas células NK son capaces
de atacar a las células diana y los matará.
Inmunidad humoral
La inmunidad humoral está mediada por los anticuerpos producidos por los linfocitos (células B). Anticuerpo tiene la capacidad de
reaccionar con el antígeno específico responsable de su producción.
La producción de anticuerpos consiste en dos tipos de células macrófagos, células B y células T. Mayormente antígenos que estimulan esta
respuesta son antígenos T-dependientes, sin embargo, algunos antígenos, en particular los polisacáridos, activan las células B para producir
anticuerpos independiente de células-T. En anticuerpo general producida por el antígeno T-independiente es IgM ..
Citoquinas producidas por células T activadas son importantes para muchas fases de la respuesta de las células B, y son esenciales
para el cambio de isotipo de IgM a IgG y para la generación de células de memoria.
40
Principios de Inmunohematología
CYTOKINES
Citocinas son polipéptidos que actúan como mediadores biológicos de las células inmunes y tejidos. Citoquinas se dividen en linfocinas, que
son producidas por los linfocitos, monocitos y macrófagos. Las citoquinas modulan la respuesta del huésped a los antígenos mediante la
regulación de crecimiento, la movilidad y la diferenciación de leucocitos.
Una variedad de lymphokins son secretadas por un número de diferentes tipos de células:
linfocinas Actividad
• La interleucina (IL-2) Estimular la proliferación de células T
• Interferon-y Mejora la actividad de los macrófagos citotóxicos
• factor de crecimiento de células B (IL-9) Estimula la división celular
• factor de diferenciación de células B (IL-6) Estimula la diferenciación de células B en células plasmáticas
• La interleucina (IL-3) Estimula la proliferación de células T
• Interleukin -4 diferenciación (IL-4) Promueve de células T y el crecimiento de células B y
• factores estimulantes de colonias (CSF) El crecimiento de diversas líneas celulares
pirógenos endógenos son proteínas de bajo peso molecular que se liberan por diversos leucocitos en particular monocitos,
granulocitos y macrófagos tisulares, Tres pirógenos endógenos han sido reconocidos: interleucina-1 (IL-1), el interferón (INFS) y el
factor de necrosis tumoral (TNFS). Todos estos factores estimulan directamente la síntesis de la prostaglandina en el hipotálamo, el
efecto es elevar el nivel en el que se establece la temperatura del cuerpo. Presumiblemente, en las reacciones febriles debido a los
anticuerpos de leucocitos en el receptor, IL-1 se libera a partir de leucocitos de donantes y causa fiebre.
Las respuestas inmunes, que se producen al individuo inmunocompetente se encuentra con un antígeno no propio por
primera vez son respuestas inmunes primarias. Además de la respuesta inmune, la respuesta inmune primaria genera células de
memoria. Estas células de memoria contribuyen a la respuesta inmune en segunda o subsiguiente exposición al mismo antígeno -
la respuesta inmune secundaria o anamnésica
41
medicina transfusional Manual técnico
la producción de anticuerpos detectable se produce después de unos pocos días a unos pocos meses después de un primer encuentro
antígeno. Durante este período de latencia, células T y células B respuesta está ocurriendo y se forman las células de memoria. La respuesta
secundaria se hace evidente más rápidamente, con el aumento de nivel de anticuerpos detectable en pocas horas.
clase de anticuerpo: Dos clases de anticuerpos se realizan en la respuesta inmune primaria. Los primeros anticuerpos son IgM.
Con en 2-3 semanas anticuerpos IgM disminución nivel y se forman anticuerpos IgG. Este cambio de isotipo de la producción de
anticuerpos IgM a IgG es causada por lymhokines de células T y las mutaciones del ADN en la división de células B.
En la respuesta inmune secundaria, la celda de memoria responde a la estimulación antigénica posterior, formando anticuerpos
mayoría de IgG. anticuerpos IgM, también forman en el comienzo de la respuesta, rápidamente disminuir a medida que se sustituyen
por antibdies IgG (ver Fig. 4.1)
Los anticuerpos respuesta secundaria tienen una mayor avidez por el antígeno, son producidos por dosis más bajas de antígeno que
los anticuerpos formados durante la respuesta primaria, y por lo general se forman rápidamente en 1-2 días.
hibridomas
La técnica de anticuerpo monoclonal ideado por Kohler y Milsten ha demostrado ser útil en la producción de alto título y anticuerpos específicos.
Los animales de laboratorio, por lo general se inmunizan ratones para la producción de anticuerpo monoclonal. Después de la respuesta inmune
adecuada, las células de bazo de ratón que contienen los linfocitos que secretan anticuerpos se fusionan con células plasmáticas neoplásicas de la
capacidad reproductiva infinita de un ratón (es decir, células de mieloma). Los hibridomas resultantes se criban para el anticuerpo con la
especificidad y la afinidad requerida. Los clones que secretan anticuerpo pueden ser entonces propagadas en cultivo de tejidos o por inoculación
en ratones, en cuyo caso el anticuerpo se recoge como ascitis. La línea clonal produce un único anticuerpo, no hay necesidad de absorción o para
eliminar los anticuerpos heteroespecíficos. Todas las moléculas de anticuerpo producidas por un clon de células de hibridoma son idénticos en
términos de estructura y especificidad del anticuerpo antígeno. Una vez se ha establecido un clon secretora de anticuerpos de las células, el
anticuerpo con las mismas características de especificidad y de reacción estará disponible indefinidamente.
El papel del banquero sangre es predominantemente preocupados con las pruebas dirigidas a la detección de antígenos de
grupo sanguíneo y anticuerpos, sus acciones y su interacción con otro sistema, el sistema de componentes. Como este papel se ha
ampliado, especialmente en la médula ósea y células madre del trasplante, un conocimiento básico de la respuesta inmune en general
es necesario
ANTÍGENOS
Un antígeno es una sustancia, generalmente una proteína compleja o polisacárido en la naturaleza, que cuando se introduce
parenteralmente en un individuo cuyos tejidos no poseen esa sustancia en particular, es capaz de instituir la producción de anticuerpo
específico a sí mismo.
ESSENTIALS de antígenos
Las sustancias deben tener un peso molecular suficientemente alto (más de 40.000-50.000 MW) para actuar como antígenos. Sustancias
por debajo de 40.000 MV se denominan haptenos. Por lo general, no actúan como antígenos y producir ningún anticuerpo a menos
acoplado a una proteína vehículo de un tamaño de aproximadamente más de 10.000 MW
42
Principios de Inmunohematología
En la superficie de los glóbulos rojos son glicoproteínas y glicolípidos hora, que están bajo control genético. Estas sustancias son de peso
molecular suficientemente alto como para actuar como antígenos y se conocen como antígenos de grupo sanguíneo. Los antígenos en las células
rojas pueden estar en, por debajo o que sobresale de la superficie de la membrana de glóbulos rojos. Por lo tanto, en algunos casos, las moléculas
de IgG son capaces de causar la aglutinación de glóbulos rojos si el antígeno correspondiente está encendido o que sobresale de la membrana
celular, pero no pueden aglutinar cuando el antígeno correspondiente está enterrado dentro de la membrana celular.
La especificidad de los antígenos de grupo sanguíneo se ha demostrado que será determinado por la adición secuencial de
residuos de azúcar a una sustancia precursor común como resultado de la acción de los genes. La sustancia precursor, que se
encuentra en o dentro de la membrana de glóbulos rojos, se compone de cuatro moléculas de tres azúcares diferentes, a saber.
D-galactosa (2 moléculas), galactosamina (lmolecule) y N-acetil glucosamina (una molécula). Hay dos tipos de sustancias precursoras
conocidos como Tipo 1 y Tipo 2, que se diferencian en enlace terminal (Ver Figs. 5.2,5.3 y 5.4 en el capítulo sobre el sistema ABO). La
acción del gen causa la producción de una enzima que a su vez hace que la adición de otro azúcar a la sustancia precursora de base,
que determina la especificidad del antígeno. Para más detalles ver el sistema del grupo sanguíneo ABO (Capítulo 5).
los número de sitios de antígeno en las células rojas varía en función de la especificidad. Por lo tanto hay aproximadamente lmillion sitios
de antígeno ABO y sitios de antígeno 25.000 Rh (D) sobre las células rojas. antígenos de células rojas están presentes no sólo en las células rojas
pero algunos también se han detectado en los leucocitos, plaquetas, en los fluidos corporales, saliva, leche, fluidos seminales, plasma (antígenos
Lewis) y en la mayoría de los tejidos del cuerpo. Antígenos de algunas especificidades están confinados enteramente en la membrana de glóbulos
rojos (por ejemplo, antígenos Rh).
Los antígenos de los glóbulos rojos no siempre son constantes durante toda la vida, algunos antígenos están poco desarrollados al nacer (por
ejemplo 1, Lewis). Algunos pueden ser alterados en ciertos estados de enfermedad, por ejemplo, antígeno Adquirida B en A, individuos generalmente
como resultado de la acción de un organismo gram-negativa. antígenos A o B pueden ser debilitados en pacientes con leucemia. Los cambios en
antígenos de grupos sanguíneos también se han observado durante el embarazo (por ejemplo, Lewis).
Un gen puede ser un gen dominante; esto se expresa siempre como antígeno producto, independientemente de si se produce en el estado
homocigótico o heterocigótico (por ejemplo, antígenos A, B, M y N). Un gen puede ser gen recesivo; esto puede producir antígeno producto
solamente cuando está en estado homocigótico (por ejemplo, A 2).
Si tanto los genes heredados son dominantes, los productos de ambos genes son detectables y se
43
medicina transfusional Manual técnico
son llamados co-dominante, genes (por ejemplo M y N; A y B). Ciertos genes de grupos sanguíneos parecen producir ningún producto incluso
cuando está presente en un estado homocigoto; éstos se conocen como genes amorfas o amorfas (por ejemplo O).
Genotipo y fenotipo
El término genotipo se refiere a la suma total de los genes presentes en los cromosomas independientemente de si o no que
producen productos detectables. El genotipo se determina a través de pruebas directa de productos génicos (antígenos) y estudio
de la familia.
El fenotipo términos se refiere a los productos detectables (antígenos) demostrado por medio de pruebas directas solamente.
fenotipo Genotipo
A1 A1A1
A1O
\ A2A2
A2O
segundo BB
BO
0 00
K kk
kk
Anticuerpos (inmunoglobulina)
Los anticuerpos pertenecen a un grupo de proteínas conocidas como inmunoglobulinas (Igs) en el plasma / suero. Estos Igs constituyen
aproximadamente el 20% de proteínas totales de suero / plasma. Hay cinco formas diferentes de anticuerpos de grupo sanguíneo (IgM, IgG,
IgA, IgD e IgE). Todos los anticuerpos tienen dos características principales en común.
anticuerpos de grupos sanguíneos IgM, IgG o IgA son significativas en los bancos de sangre y que se tratan en detalle.
La producción de anticuerpos
La introducción de antígeno de glóbulos rojos en la circulación de un individuo (que carece de ese antígeno) puede estimular la
producción de un anticuerpo correspondiente. Esto puede ocurrir como resultado de la terapia de transfusión de sangre o incompatibilidad de
grupo sanguíneo materno-fetal en el embarazo. Estos se llaman
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Principios de Inmunohematología
anticuerpos incompletos o adquiridas (IgG). Mayormente anticuerpos inmunes son IgG que reacciona mejor a 37 ° C y requieren el uso de
suero de la globulina anti-humano para la detección. anticuerpos inmunes comunes reaccionan con Rh, Kell, Duffy, Kidd y sistema de grupo
sanguíneo Ss.
Ciertos anticuerpos se producen sin estímulo antigénico conocido. Estos son conocidos como anticuerpos completos o naturales
(IgM, IgA). Teóricamente, estos anticuerpos se producen en respuesta a las sustancias en el ambiente que genéticamente son idénticos o
similares a antígenos de células rojas. La ocurrencia frecuente de anticuerpos de origen natural sugiere que sus antígenos se encuentran
ampliamente en la naturaleza - es decir, en animales, bacterias y polen. La mayoría de ellos son IgM aglutininas frías, que reaccionan
mejor a temperatura ambiente o por debajo, y activan los componentes del complemento. anticuerpos de origen natural comunes
reaccionan con los sistemas de grupos sanguíneos ABO, HH, II, Lewis, Mn y P. Las personas generalmente no producen anticuerpos
cuando las células rojas poseen el antígeno correspondiente.
La unidad de inmunoglobulina básico (1 g) se compone de dos cadenas polipeptídicas idénticas pesadas (H) que tienen cada uno de
mayor peso molecular (55,000-75,000 MW) y dos cadenas ligeras polipéptido (L) idénticas cadenas que tienen cada uno de peso molecular más
bajo (22,500 MW).
Fig. 4.2
estructura química básica de La estructura básica de Immuno globulina (Ig)
antibodyMolecule
Cada cadena ligera contiene 220 aminoácidos y cada cadena pesada tiene 440 aminoácidos. Los primeros 110-120 aminoácidos de
ambas cadenas pesadas y ligeras tienen una secuencia variable y forman la región variable, que se considera para determinar la
especificidad del anticuerpo. El resto de las cadenas ligeras y pesadas representan regiones con secuencia de aminoácidos constante.
La cadena pesada tiene una región de bisagra en espiral que da la flexibilidad molécula y es en esta región que enzimas o
acto albúmina.
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medicina transfusional Manual técnico
Se cree que los sitios de unión de antígeno que se encuentra en el extremo de las cadenas pesada y ligera de la región variable de la
molécula. Las actividades biológicas distintas de antígeno reacciones de unión son responsabilidad de la parte constante de las cadenas
pesadas.
enzima papaína divide la inmunoglobulina en la región bisagra en tres fragmentos. Una cristalizable (Fc) fragmento y dos
fragmentos idénticos (FB). El fragmento Fc se compone de dos mitades de dos cadenas pesadas unidas por enlaces
co-valentes y es responsable de la fijación del complemento y la transferencia placentaria.
Cada fragmento Fb se compone de una cadena ligera y la mitad de una cadena pesada unida por enlaces covalentes disulfuro. Se cree
que los sitios de unión de antígeno que se encuentra en el extremo de las cadenas pesada y ligera de la región variable de la molécula de Ig.
IgG inmunoglobulina
La molécula de IgG consiste en una unidad estructural básica conocida como un monómero, que posee dos cadenas pesadas (cadenas gamma) y
dos cadenas ligeras (kappa o lambda). Ver Fig-4.3. Libre de IgG es por lo general Y- forma pero es capaz de cambiar su forma para combinar con
antígeno o para otras funciones, es decir, la fijación del complemento. El cambio de forma se facilita en la región bisagra, donde las cadenas se
desenrollan, lo que permite una flexibilidad considerable. IgG inmuno globulina puede ser transferido de la madre al feto causando la enfermedad
hemolítica del recién nacido.
inmunoglobulinas IgG son anticuerpos frente a Rh, Kell, Duffy, Kidd y otros antígenos de
sistemas. Estos anticuerpos son detectados por pruebas serológicas en base a sus características,
tales como la reactividad a 37 ° C, la activación del complemento, y la prueba de globulina indirecta.
diferencias. Estos son IgG 1, IgG2, IgG3 e IgG4. IgG1 e IgG3 activan el complemento, pero fuertemente IgG2 e IgG4 débilmente
activa en absoluto. IgG en el plasma tiene vida media de 23 días. Más detalles están más allá del alcance de este libro.
La inmunoglobulina IgM
4.4. La molécula típica IgM pentámero tiene 10 sitios de antígeno-anticuerpo, sin embargo,
debido a la restricción estérica, sólo el 5 son funcionales en cualquier momento. A pesar de
esta limitación, IgM son anticuerpos aglutinantes potentes y activar cumplidos. IgM es más
eficaz que la IgG en la activación del complemento.
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Principios de Inmunohematología
IgM constituye normalmente el 10% de la inmunoglobulina en el suero / plasma, muy pocas de estas moléculas se
difunden en el líquido intersticial. IgM en el plasma tiene vida media de 5 días. IgM, anticuerpos naturales, son en el sistema ABO
y en otros grupos como Lewis, Ii, P y MNS. IgM no atraviesa la placenta humana.
Si ambos anticuerpos IgM e IgG están presentes en cualquier suero, IgM puede interferir con la detección de anticuerpos IgG clínicamente
significativas enmascarando su actividad. IgM puede disociarse a través de la escisión de enlaces covalentes que interconectan las subunidades
por el uso de 2-mercaptoetanol (2-ME) o ditiotreitol (DTT). Este tratamiento destruye tanto de hemólisis y las actividades aglutinantes de
anticuerpos IgM y los anticuerpos IgG pueden ser identificados en una mezcla de anticuerpos IgM e IgG.
La inmunoglobulina (IgA)
IgA suele estar presente como monómero en plasma IgA es la única Ig presente en las secreciones epiteliales. En las secreciones IgA se produce como una
pequeña glicoproteína lo dimmer, dos unidades de IgA están vinculados conocido como pieza secretora o T-componentes, lo que hace IgA más resistente a
la enzima proteolítica. (Ver Fig-4.5). La presencia de IgA en las secreciones se cree que es debido a la producción local en lugar de transporte a partir de
plasma.
La inmunoglobulina (IgE)
Las inmunoglobulinas IgE son normalmente monomoric y se encuentran en una concentración muy baja en suero o plasma y tiene el lapso
de vida media más corta. antbodies de IgE en la sangre del paciente pueden reaccionar con la proteína extraña (alérgeno) en productos de sangre
o plasma transfundidos y se libera histamina que causa reacciones alérgicas o alergeno en la sangre del paciente y el anticuerpo IgE en plasma
transfundido también puede reaccionar y causa una reacción alérgica.
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medicina transfusional Manual técnico
cruza la placenta Sí No No
Temperatura de reacción 37 ° C. 20 ° C. 37 ° C
secreciones externas No No Sí
En circunstancias normales, el feto humano no comienza a sintetizar anticuerpos en un grado significativo hasta después del
nacimiento.
IgM es el único tipo de inmunoglobulina producida por el feto antes y en el momento del nacimiento. Desde IgM no se transfiere a través
de la placenta, todos los anticuerpos de IgM en suero de cordón son de origen fetal. En general, la concentración de IgM en suero de cordón es
de entre 5-10% de la encontrada en el suero de adultos. Varios anticuerpos IgM se pueden encontrar en el suero del cordón, a saber. Anti-I,
anti-A y anti-B. La concentración de IgM comienza a subir dentro de los 2-3 días después del nacimiento, llega a 50% de la del nivel adulto en 2-3
meses y 100% en aproximadamente 9 meses después del nacimiento.
En el nacimiento, la pequeña cantidad de IgG en el suero del cordón es principalmente materna, que es la IgG derivada de la madre por
transferencia placentaria.
IgA no se puede detectar en el suero del cordón. A la edad de 2 años, la cantidad de IgA en el suero alcanza a aproximadamente el
20% de la del nivel adulto.
SISTEMA COMPLEMENTARIO
Las proteínas del sistema del complemento son el componente principal de la respuesta inmune innata humoral. La función
del sistema de complemento es la lisis de las células mediante la interacción con anticuerpos, la mediación de la fagocitosis a
través de la opsonización, y el control de la inflamación.
El sistema del complemento se compone de un grupo de proteínas de suero que circulan en un estado pro-enzima
inactiva y se activan en una secuencia bioquímica muy precisa. Las proteínas en
48
Principios de Inmunohematología
sistema del complemento se dan ya sea designaciones numéricas o de letras. En muchos casos la activación de las proteínas se
asocia con la escisión del componente de proteína. El fragmento mayor producido por el corte de la proteína es responsable de la
continuación de la secuencia de la activación del complemento. El fragmento más pequeño a menudo tiene la función de promover la
respuesta inflamatoria. Estas proteínas pueden ser activados por dos vías principales utilizando mecanismo inmune específica y no
específica que convierten las proenzimas inactivas en enzimas activas. Estas dos formas son:
1) La vía clásica: - complejos antígeno-anticuerpo eritrocitos activan las proteínas del complemento C1-C9 por la
respuesta inmune específica.
2) El camino alternativo: - Las proteínas del complemento son activados por no específica innata,
reacciones inmunes con polisacárido y lipopolisacáridos encontrados en la superficie de muchos, células de
microorganismos tumorales y agregados de IgA y IgG4 que no activan el complemento componente C1.
La unión de CI al anticuerpo conduce a la activación de CI. Esta activación provoca la escisión de CI en Clq, Clr, Cls y. El
activado antígeno-anticuerpo-C 1 complejo ahora es capaz de interactuar con el siguiente componente del complemento C4 en
secuencia. C4 se escinde por C1, que actúa como una enzima, y se forman dos fragmentos de escisión de C4 y C4b. C4a flota
libre en el medio circundante, y tiene actividad anafilatóxicos. Las moléculas C4b activados en la superficie celular ataca las
moléculas de proenzima C2. Esta reacción implica la escisión del componente C2 en un pequeño fragmento de libre flotación C2b
y no tiene actividad biológica. Cuanto más grande C2 un fragmento se une a la superficie celular que conduce a la formación de
complejo C4b2a activado unido a la superficie celular. Después de este Clqrs e inmunoglobulina ya no son necesarios, si el
anticuerpo se disocia, el proceso todavía puede continuar. El complejo C4b2a activado se llama C3 convertasa y cleave C3 en
dos fragmentos C3a y C3b. C3a se libera en el medio circundante y tiene anafilotoxinas actividad. C3b se une a la membrana de
los eritrocitos y forma activada complejo C4b2a3b.
El C14b2a3b puede unirse y cleave C5 en dos fragmentos, C5a y C5b. C5a se libera en el medio circundante y
tiene anafilotoxinas actividad. Activado C5b se une a la membrana celular y es el núcleo para la formación de
membrana adjuntar complejo.
Membrana adjuntar complejo unido a la membrana C5b se une C6, y C7 por adsorción. Este complejo se une a la
membrana celular y se une C8, y moléculas C9. En el complejo de ataque de membrana terminal de extremo está formado
C5b6789 que de lisis de la célula.
49
medicina transfusional Manual técnico
vía clásica
Fig. 4.6
Camino alternativo
Figura-4,6 diagrama esquemático que ilustra la activación secuencial del sistema de complemento a través de las vías clásicas y
alternativas. El complejo complemento activado se indica en la barra encima de las letras y los números. La vía clásica utiliza C1,
C4, C2, la vía alternativa utiliza factores D, B y C3.
La vía alternativa no utilizar los componentes del complemento clásico, C1, C4 y C2 y también no tiene un requisito
absoluto de anticuerpo. Cuatro proteínas participan en la vía alternativa: factor B, el factor D, properdinCfactor P), y C3.
que son análogas a los componentes de la ruta del complemento clásica y que funcionan para formar una enzima C3 de
escisión. Factor D es análogo al CI de la vía clásica. Factor B es análoga a C2 y es importante en la escisión de C3.
Pequeña cantidad de C3b se genera debido continuamente a la escisión hidrolítica espontánea de moléculas de C3.
moléculas C3b unidos a la superficie de las células diana. C3b en combinación con factores B y D forma una enzima
C3bBb que es capaz de escindir C3. Esta enzima activada C3bBb interactuar con C3 de la vía clásica y formar C3Bb3b
que activan
C5 como en la vía clásica y la cascada del complemento continúa. Véase la Fig. 4.6.
50
8
El
antiglobulina
Prueba
Antiglobulina suero (Coombs'Serum) fue descubierto por Coombs et al en 1945. La prueba de antiglobulina se puede utilizar para detectar
glóbulos rojos sensibilizados con aloanticuerpos IgG, autoanticuerpos IgG o componentes del complemento. Sensibilización de los glóbulos rojos
puede ocurrir in vivo o in vitro. El uso de suero AHG para detectar sensibilización de las células rojas in vitro es una técnica en dos etapas
conocido como prueba de antiglobulina indirecta (IAT). La sensibilización de las células rojas in vivo se detecta mediante una técnica etapa de la
suero humano entero se utiliza para la preparación de poliespecífica (amplio espectro) sueros que contiene anticuerpos
antiglobulina (IgG) y los anticuerpos anti-complemento como C3b, C3d, el producto descomposición de C3; y puede contener también
C4d, romper producto de C4.
Monoclonal de ratón anti-IgG han sido evaluadas para su uso en reactivos AHG y ha sido
101
medicina transfusional Manual técnico
demostrado que no tienen ninguna ventaja sobre el reactivo anti-IgG preparado en conejos. Sin embargo monoclonales
descomponer productos anti-C3b, anti-C3d y C4d de C3 y C4 complementos son útiles en la producción de reactivo AHG.
Se ha observado que monoclonal anti-C3b y antiC3d en concentraciones apropiadas, mezclado con conejo anti-IgG producir
mejores suero AHG. Para PREPARACIÓN de monoclonal sueros AHG,
ver hibridoma en el capítulo 4 de los Principios de
Inmunohematología.
Anti-IgG
suero AHG debe contener actividad de anticuerpos a los anticuerpos de grupo sanguíneo no aglutinantes. La mayoría de estos son IgG. Rara
vez no aglutinantes IgM puede ser hallado, que fijan el complemento en la membrana de glóbulos rojos y pueden detectarse por la actividad
anticuerpos IgA nunca se han encontrado sin la presencia de IgG y / o anticuerpos IgM de la misma especificidad. Por lo tanto
tampoco se requiere la presencia de anti-IgA en el reactivo. Por lo tanto antiIgG es el único anticuerpo antiglobulina esencial en
reactivo AHG.
Anti-Complemento
Algunos anticuerpos fijan los componentes del complemento C3b y C3d a la membrana las células de color rojo después de complejos del
anticuerpo con sus correspondientes antígenos. Estos componentes del complemento unidas a la membrana pueden ser detectados por la actividad
anti-complemento en AHG.
Un suero de antiglobulina para el uso en la prueba de antiglobulina directa (DAT) contiene anti-IgG, anti-C3d, y posiblemente
anti-C4d. Un suero de antiglobulina para el uso en la prueba de antiglobulina indirecta (IAT) contiene anticuerpos anti-C3b y C3d.
reactivo de antiglobulina para ser utilizado tanto para DAT y IAT deben contener anti-IgG, anti-C3b, antiC3d y pueden contener
anticuerpos anti-C4d.
glóbulos rojos lavados recubiertas con IgG y / o componentes del complemento C3b o C3d mostrarán aglutinación con amplio
espectro suero AHG. El recubrimiento (sensibilización) de los glóbulos rojos puede ocurrir in vivo o in vitro tras la incubación a 37 ° C con
Los anticuerpos incompletos (IgG) se unen a la membrana de glóbulos rojos por la porción Fab de la molécula de inmunoglobulina
(IgG). Las moléculas de IgG unidas a las células rojas son incapaces de cerrar la brecha entre los glóbulos rojos sensibilizados que están
separados unos de otros por la carga negativa en su superficie y los glóbulos rojos sensibilizados no aglutinan. Cuando se añade suero
AHG a las células sensibilizadas lavados, la porción Fab de la molécula de AHG (anti-IgG) reacciona con las porciones Fc de dos
moléculas de IgG adyacentes unidas a células rojas de este modo cerrar la brecha entre los glóbulos rojos sensibilizados y causa la
Contenido
poliespecıfico
Monoespecífico anti-IgG
Anti-Complemento
103
medicina transfusional Manual técnico
El mejor control de la DAT y AT es la adición de IgG sensibilizado O Rh (D) células positivas a cualquier prueba AHG que es no
reactivo. Si hay aglutinación el resultado es válido.
necesarios:
1. poliespecífica humano anti-D o IgG humano + IgM monoclonal o IgG monoclonal + IgM anti-D Serum
Procedimiento:
1. Seleccionar una dilución de polyspecfic suero anti-D que cubre la O Rh (D) de glóbulos rojos lavados positivos a 37
° C in vitro pero que no se aglutinan ellos. Uno tiene que determinar por experiencia en qué medida el suero anti-D
debe diluirse para dar células sensibilizadas (sin aglutinación).
2. Añadir 3-5% lavó células rojas suspensión de O Rh (D) células positivas igual al volumen de
diluido anti-D en suero.
4. Busque aglutinación. Si hay aglutinación, el procedimiento se repite mediante la adopción de suero anti-D más diluida.
5. Si no hay aglutinación, lavar las células tres veces con un gran volumen de solución salina normal manualmente o por lavador de
células automático. Hacer una suspensión al 5% de las células sensibilizadas en solución salina.
6. Añadir 2 gotas de poliespecífica suero AHG a 1 gota de las células rojas 3-5% sensibilizados y lavados.
La prueba de antiglobulina directa (DAT) detecta sensibilizados glóbulos rojos con IgG y / o componentes del complemento C3b y C3d
in vivo.
104
La prueba de antiglobulina
Procedimiento de DAT
Muestra de sangre - Debe ser lo más fresco posible no más de 24 horas de edad, de lo contrario, la muestra debe tomarse en
EDTA (1,5 mg EDTA para I ml de sangre) para proteger la absorción del complemento.
2. Lavar las células rojas de 3-4 veces en un gran volumen de solución salina para eliminar las moléculas de globulina libres.
Retire todo el sobrenadante después de cada lavado. Completamente decantar el sobrenadante de lavado final.
3. Añadir 2 gotas de suero AHG poliespecífica en 1 gota de glóbulos rojos sensibilizados lavado o en 1 gota de 3-5% de suspensión de
5. Agitar suavemente el tubo para desalojar el botón de células y ver por aglutinación, utilizar la ayuda óptica si es necesario. Grabar el
resultado.
6. Agregar I gota de células rojas recubiertas de IgG a una prueba negativa. Mezclar, centrifugar a 1000 rpm durante 1 min.
Inmediatamente busque aglutinación. Si se obtiene un resultado negativo (sin aglutinación) el resultado de la prueba no es válida y
Caracterización de anemias hemolíticas autoinmunes requiere la detección de IgG o C3d o ambos. La detección de C3d sobre la
membrana de glóbulos rojos es importante en la investigación de anemias hemolíticas autoinmunes calientes y fríos. Muchos casos de
cálidos anemias hemolíticas autoinmunes, incluyendo la anemia hemolítica arrastre inducido están asociados con IgG o C3d o ambos.
Mientras que en la anemia hemolítica autoinmune frío, C3d puede ser la única globulina detectable en las células rojas. En la
investigación de anemias hemolíticas autoinmunes, initialy una DCT se realiza con posteriormente suero AHG poliespecífica pruebas
con monoespecífico AHG sueros anti-IgG y anti-C3d se realiza para identificar la globulina de recubrimiento. En la investigación de los
componentes de la prueba del complemento HDN no es necesario ya que las células recién nacidos se sensibilizan con IgG materna.
+ + WAIHA (67%)
+ - WAIHA (20%)
El IAT se hace para determinar la presencia de sensibilización de las células rojas con IgG y / o complementar in vitro en las siguientes
condiciones.
105
medicina transfusional Manual técnico
1. La prueba de compatibilidad.
3. La determinación de células rojas fenotipo K, Le una, Fy una Fy segundo, jk una, jk segundo y sub-grupo de Rh etc mediante el uso de sueros conocido.
Procedimiento:
YO. Coloque 2-3 gotas de suero de ensayo en un tubo. El suero debe ser fresco para la detección de componentes del complemento y
2. Añadir 1 gota de 3-5% de suspensión de (D) células rojas positivos O Rh lavan para el suero en el tubo,
5. Examine para la hemólisis y / o aglutinación. Utilizar la ayuda óptica, si es necesario. La aglutinación en esta etapa indica la
6. Si no se observa aglutinación, lavar las células 3-4 veces en el gran volumen de solución salina. Decantar el sobrenadante
9. Agitar suavemente el tubo para desalojar el botón y examinar para la aglutinación, usando ayuda óptica. Grabar el resultado.
10. Añadir 1 gota de células rojas recubiertas de IgG a cualquier prueba que es negativo. Mezclar y centrifugar a
1000 rpm durante 1 minuto. Busque aglutinación. Si no hay aglutinación, el resultado de la prueba no es válida y
todo se repite la prueba. Si se obtiene de aglutinación, el resultado es válido.
1. Tome conocido suero reactivo correspondiente al antígeno como en el paso (1) en lugar de suero de ensayo.
2. Añadir 1 gota de 3-5% de suspensión de células de ensayo se lavaron como en la etapa (2) en lugar de ORh (D) células
positivas.
106
La prueba de antiglobulina
Procedimiento
ENZIMA-IAT
1. Añadir dejo caer de solución de papaína cisteína en el paso (2) de solución salina-IAT
1. Los glóbulos rojos se lavan dos veces en solución salina normal y una vez en LISS. Hacer suspensión celular de 2% en LISS
Para la preparación de cisteína papaína y solución de baja fuerza iónica (LISS) véase el capítulo 21 sobre la preparación de soluciones y
métodos especiales.
Factores que afectan la sensibilidad de IAT
1. Ratio de suero a células
El aumento de la relación de suero a las células rojas aumenta el grado de recubrimiento de anticuerpo en las células rojas de esta manera la
sensibilidad de la prueba es mayor. Una proporción comúnmente utilizado es 2 gotas de suero a 1 gota de 3-5% de suspensión de células rojas. Un
volumen igual de suero y 2-3% de suspensión de glóbulos rojos en LISS debe ser utilizado.
2. medio de suspensión
La sensibilidad de IAT puede aumentarse con la adición de solución de albúmina o enzima bovina 22% o LISS. La albúmina y las enzimas
permite a las células recubiertas de anticuerpo a aproximarse entre sí y de aglutinación es mejor. Solución baja fuerza iónica (LISS)
mejora la absorción de anticuerpos y la disminución en el tiempo de incubación.
Sensibilidad de IAT se incrementa si la albúmina se incorpora en el medio de reacción. La mezcla de reacción se compone de 2
gota de suero, 2 gotas de albúmina bovina 22% y 1 gota de glóbulos rojos 3-5%. Se muestra la misma sensibilidad a los 30 minutos de
incubación como una prueba de solución salina 60 minutos. El uso de albúmina no parece ofrecer ninguna ventaja sobre la técnica de
LISS y no aumentan el costo de la prueba.
soluciones de fuerza iónica baja potenciar la captación de anticuerpos y el tiempo de incubación se reduce a 10-15 minutos. La
mezcla de reacción consta de 2 gotas de suero y 2 gotas de suspensión celular 3% en LISS. Si el suero a la proporción de células que
se aumenta la fuerza iónica de la mezcla se aumenta, lo que lleva
a una disminución en la sensibilidad.
Para más detalles, véase el capítulo 21 sobre la preparación de soluciones y métodos especiales.
3. Temperatura
La velocidad de reacción de la mayoría de los anticuerpos IgG y la activación del complemento es óptima a 37 ° C. Así que esta es la
107
medicina transfusional Manual técnico
4. Tiempo de incubación
El tiempo de incubación habitual de células suspendidas en solución salina es de 30-60 minutos en IAT. La mayoría de los anticuerpos significativos
clínicos pueden ser detectados después de 30 minutos de incubación. Si la técnica de LISS se utiliza tiempo de incubación es de 10-15 minutos.
5. Lavado de células
Los glóbulos rojos tienen que ser solución salina-lavado al menos 3 veces antes de la adición de reactivo de AHG. El lavado de las células elimina
globulina de suero no unido libre. lavado inadecuada e impropia puede resultar en reacción falsa negativa debido a la neutralización del suero AHG
por globulina no unido residual. El lavado debe ser ininterrumpida y realizado en tan corto tiempo como sea posible para minimizar la elución de los
anticuerpos de baja afinidad. El botón de células debe ser completamente re-suspendido en solución salina adecuada. Todo solución salina debe
ser desechada después del lavado final como solución salina residual puede diluir el suero AHG y disminuir la sensibilidad de la prueba. El lavado
6. bajo centrifugación
1. muestra de sangre inadecuado (refrigerado o coagulada) pueden causar fijación de complemento a las células rojas en vitro
5. Saline almacenada en recipiente de plástico por un largo período puede tener disminución del pH
6. cristalería sucias
7. Durante la centrifugación
108
9
La detección e
identificación de
anticuerpos
El propósito de la revisión anticuerpo es para detectar anticuerpos de células rojas otros de lo esperado anti-A y anti-B. Estos se
denominan anticuerpos 'inesperada'. Sólo 0,3 a 2,0% de la población en general tienen anticuerpos inesperados y la incidencia es mayor en
las mujeres debido a la embarazo. Estos anticuerpos inesperados son generalmente allo (dirigido contra un antígeno de RBC que falta en
los glóbulos rojos del productor de anticuerpos), pero puede ser auto (dirigido contra un antígeno en los glóbulos rojos del productor de
anticuerpos). Además, estos alo- inesperado y auto-anticuerpos se pueden subclasificar adicionalmente por su temperatura de reactividad
en reactivo fría o caliente. Los aloanticuerpos inesperados son generalmente células rojas inmune y formado por la exposición a las células
rojos debido a la transfusión de sangre o el embarazo.
2. En la detección de anticuerpos
4. DAT positivo
109
medicina transfusional Manual técnico
Efectos de anticuerpos inesperados clínicamente significativos:
3. En la investigación de HDN
4. reacción a la transfusión
pruebas de detección de anticuerpos implican probar sueros de donantes y de los pacientes contra 2-3 glóbulos rojos reactivos
llamadas células de detección. Grupo O glóbulos rojos se utilizan para que natural esperado anti-A y anti-B no pueden interferir. Dos grupo
especialmente seleccionado OR 1 R 1 y OR 2 R 2 se utilizan células rojas. Estas células deben llevar los antígenos más comúnmente encontrados y
clínicamente significativos de Rh, Kell. Duffy, Kidd, MNSs, P y Lewis (y Lutheran si es posible) sistemas de grupos sanguíneos. Muchos
anticuerpos pueden ser detectados más fácilmente si los antígenos son homocigotos en los glóbulos rojos, en particular de grupos comunes.
1 R1 R1 + - + - + + + -+ + + + + - -+ -+ -+
2 R2 R2 - + ++ - + - +- + -+ + + + - + - -+
Para mantener la resistencia óptima del antígeno, las dos células rojas o J R J y OR ^, se debe utilizar por separado (en
combinación con cada otro) y no se agrupan. Esto aumentará la probabilidad de detectar los anticuerpos débiles.
paneles de células están disponibles comercialmente en los países desarrollados, sin embargo, también se pueden preparar por el
laboratorio individual. La institución que prefieren prepararse su propio panel, debe determinar el fenotipo completo de los individuos en el personal
y los sangrados regularmente, o congelar las células rojas de grandes donaciones de estos individuos en glicerol. Para la congelación de células
Si el panel de células de detección no está disponible células reunidas frescas de sangre 2-3 grupo O pueden ser utilizados. El segundo
supuesto es mucho menos deseable que la primera y debe tomarse si panel de células de detección no está disponible. 110
La detección e identificación de anticuerpos
Para los detalles de las técnicas 1,2,3 ver capítulo sobre 'Preparación de soluciones y métodos' y para IAT ver capítulo sobre 'antihumano
de prueba Globulina.' En prueba de detección si se detecta el anticuerpo debe ser identificado.
IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS
2. Antecedentes de transfusión
3. Antecedentes de embarazo
REQUISITOS DE LA MUESTRA
Cualquiera de suero o plasma se pueden utilizar para la identificación de anticuerpos pero se utiliza sobre todo suero. El plasma no es adecuado
para la detección de la activación del complemento. A 10 ml de sangre completa en tubo liso por lo general contienen suero suficiente para la
identificación de anticuerpos.
Cuando se estudian las células rojas autólogas, el uso de células anticoagulada con EDTA evita los problemas asociados con la
absorción in vitro de componentes del complemento por las células rojas.
Selección de panel de células para la identificación de anticuerpos
Estas células del panel están disponibles comercialmente, pero se pueden preparar en el laboratorio individual. Por lo general
son de 8-10 grupos células S de diferentes donantes. Estas células deben carryD,
C, E, C, E, M, N, S, s, Fy una, Fy segundo; jk una, jk segundo; K, k; Lu a. lu segundo; Le una, Le segundo; PAG 1 antígenos, a identifyclinicallysignificant aloanticuerpos. Debe
haber un número suficiente de células ese ausencia, y suficiente rojo
111
medicina transfusional Manual técnico
Tabla 9.3 del panel típico de las células para la detección de anticuerpos
No. Cell C C D Ee C w MNS s P1 Lu una Lu segundo Le una Le segundo KK Kp una kp segundo Fy una Fy segundo jk una jk segundo
1 R1 R1 + -+ - + - -+ -+ - -+ -+ + +- + -+ -+
2 R1 R1 + - + - + + + - + + + -+ -+ -+ -+ + + + +
3 R2 R2 -+ + + -- + + + - + -+ -- -+ -+ + - + +
4 Ror -+ + - + - -+ + + + -+ -+ -+ -+ + + + -
r 5 r' + + - - - + - - +w - + - - - + - + - + + -
6 r”r + + - - -+ + + - + + -+ + + - + + + + +
7 r”r -+ -+ + - + + + + + -+ + - + - - + + + + -
8 rr -+ --+ - + + + + + + -+ -- -+ -+ + - -+
9 rr -+ --+ - + + - + - -+ + - -+ + + + + + -
10 rr -+ --+ - + + - +w -+ -+ -+
112
La detección e identificación de anticuerpos
control de autóloga
Es importante saber cómo reacciona un suero con eritrocitos autólogos. Esto ayuda a determinar si alo-anticuerpo,
autoanticuerpos, o ambos están presentes. Serum que sólo reacciona con las células de reactivos generalmente contiene sólo
aloanticuerpos, mientras que la reactividad con tanto reactivo y células rojas autólogas sugiere la presencia de autoanticuerpos, y
aloanticuerpos *. Si el control autólogo es positivo, se debe realizar DAT. En caso de DTA es positivo, técnica de elución se lleva a
cabo, y los estudios de adsorción puede ser necesario establecer si no está enmascarando aloanticuerpos.
Dos células de cordón grupo O uno Rh (D) positivo y uno Rh (D) negativo también pueden ser incluidos. células de cordón tienen i
El suero debe ser probado contra el panel de celdas (8-10), las propias células (autocontrol) y dos células de cordón. Tres técnicas
se utilizan comúnmente:
Para los detalles de las técnicas 1 y 2 en el capítulo sobre la preparación de soluciones y métodos y para 3 Véase el capítulo sobre
Interpretación de resultados
resultados panel incluir una gama de reacciones positivas y negativas, y ayudar a llegar a una conclusión final. el panel no reactivo
primer lugar de las células se examina y la posibilidad de anticuerpos correspondientes a los antígenos presentes en las células puede
ser excluido y los antígenos correspondientes puede ser tachado. Luego se evalúan las células reactivas con el suero. anticuerpos
concluyentes (es) identificados se confirman por la ausencia de los antígenos presentes en los glóbulos rojos de la muestra de ensayo.
113
Ejemplo 1
2 R1 R1 - + + - + + - + + + - + - + - + + + + + + + +44
-
3 R2 R2 - + + + - - + + + - + - + - - - + + + - + + +44
-
4 Ror - + + + - - - + + + + - + - + - + + + + + - +44
-
5 R'R + + - + - - + - +w - + - - - + + - + + - -
6 R'R + + - + - + + + + + + + + + + - -
7 R'R - + - + + - + + + + + - + + + - + + - + + + + + +3
+31
8 rr - + - - + + + + + + + + - + + + + + + - -
- +
+
9 rr - + - + - + + + - + + - - + + + + - + - -
10 ESO - + - + - + + - +W+ - + - + + - + + - - -
+
Auto - + - + - -
1 cable - -
2 cable
Cell No. 5 elimina C, C, E, M, s, P, Lu segundo, k, Kp segundo, Fy segundo, jk una, dejando D, E, C w, N, S, Lu una, Le una, Le segundo, K, Kp una, Fy una, y Jk segundo.
Cell no. 6 elimina N, Lu una, Le segundo, Fy una, dejando D, E, C w, S, Le una, K, Kp una, JK segundo.
Grotesco w puede ser eliminado en base estática y sólo anti-D puede estar presente.
Ejemplo 2
Cell No. 10 elimina Kp una dejando D, C W
Grotesco w puede ser eliminado en forma estática y sólo-D hormigas puedan presentar.
Ejemplo 2
2 Rw, R, + - + - + + + - + + + - + + - + + + + + + - - -
3 R1R1 - + + + - - + + + - + - + - - + + + - + + - +42
+
4 ROR - + + + + - - + + + + - + + + - + + + + + - - - -
5 R'R + + - + + - + - - + w++- - - + + - + + - - - -
6 R'R + + - + + - - + - + - + + + + - + + + + + - - - -
+
7 r”r - + - + + - + + + + + + + + - + + + + + + + +3 +31
+1
8 rr - + - + - - + + + + + + - + + - + + - + - +44 -
9 rr - + - - + - - + + + - + + + + - + + + + - + - - -
+
10 rr - + - - + - + + - +w - + - + - + + - + + - - - -
+
O aut - + + + + - - - -
d cor 1 - - -
d cor 2
Cell No. 2 elimina C, D, E C w, M, S, S, P 1, Lu segundo, Le segundo, k, Kp segundo, Fy una, Fy segundo, jk una Lc segundo y dejando c, E, N, Lu una, Le una, K, Kp a.
Como prueba adicional, el paciente debe ser escrito para los antígenos a los que se han detectado los anticuerpos. El paciente
debe ser negativo para los antígenos a los correspondientes anticuerpos detectados.
115
Pretranfusion
pruebas de
compatibilidad
El propósito de las pruebas pretranfusion es seleccionar componentes de la sangre que tendrán la supervivencia aceptable cuando son
transfundidos y no causará daño al recepient. Las pruebas de compatibilidad (transfusión previa) se hace para asegurar la terapia de transfusión
segura.
• Comprobación de los registros anteriores de receptores en caso de que haya antecedentes de transfusión de sangre, si es posible-
• detección de anticuerpos del suero del receptor para los anticuerpos comúnmente encontradas y su identificación, si es
necesario.
• La selección de ABO y Rh en la sangre del donante (D) compatible libre de cualquier anticuerpo irregular y enfermedades
• Pruebas cruzadas de suero del receptor contra células del donante para confirmar la compatibilidad
donorrecipients.
117
medicina transfusional Manual técnico
Las etapas implicadas en la identificación de muestra de sangre del receptor son como sigue:
• muestra de sangre del destinatario correcto debe ser tomado en un tubo de ensayo limpio y seco etiquetados antes
venopunción. Es responsabilidad del médico del paciente para recoger esta muestra de sangre.
• El personal del laboratorio del banco de sangre debe asegurarse de que la muestra de sangre esté adecuadamente etiquetado e
información como del nombre del paciente, la admisión / número de registro, sala y cama número y fecha de recogida son los mismos
• El formulario de solicitud de sangre debe dar detalles, como el nombre completo del paciente, ingreso en el hospital /
número de registro, edad, sexo, barrio y número de cama, diagnóstico clínico y serológico historia relevante (es decir, en
• Se requiere una nueva muestra de sangre si la transfusión anterior se haya dictado más de tres días de nuevo, con el fin de detectar
Si el paciente tiene una historia de transfusión de sangre, su / sus registros anteriores de transfusión deben estar
Agrupación
Los glóbulos rojos del paciente deben ser probados con anti-A, anti-B, anti-AB y el suero se prueba con células rojas A, B y S. Para las técnicas de
interpretación y ver capítulo sobre ABO de grupos sanguíneos del sistema., Cualquier descrepancy en las pruebas ABO debe ser resuelto antes de la
donación de sangre. Si el problema no se puede resolver y el paciente necesita sangre, los glóbulos rojos grupo 'O' pueden ser emitidos después de un
centro-fósforo.
Rh (D) Agrupación
glóbulos rojos del paciente se ensayaron para Rh antígeno (D) con anti-D. No se recomienda realizar pruebas de rutina para otros antígenos
porque no hay daños causen si D débil (D u) individuo se da Rh (D) de sangre negativo. Véase el capítulo sobre el sistema Rh.
• El suero del paciente se analiza para detectar anticuerpos irregulares comúnmente encontrados con OR 1 R 1 y OR 2 R 2 células
del panel de cribado que tienen una doble dosis del antígeno correspondiente (homocigoto), ya que reaccionan mejor con los anticuerpos
de ciertos sistemas de grupos sanguíneos en particular Rh. Kell, Duffy y Kidd. Si las células de panel de proyección no están disponibles
tres grupo agrupada células 'O' se puede utilizar para la detección de anticuerpos. Los anticuerpos pruebas de detección se llevan a cabo
y métodos indirectos globulina antihumanos a 37 ° C. Para más detalles véase el capítulo sobre el cribado
y la identificación de anticuerpos.
• Si los anticuerpos de detección pruebas muestran que algunos Antibody / es / están presentes, son detectados por un panel de células que
tiene 8 o 10 células del grupo O con como muchos antígenos como sea posible. Si anticuerpo (s) es (son) identificaron, seleccione la sangre
cuyas células rojos carecen del antígeno correspondiente. Para más detalles véase el capítulo sobre detección e identificación de
anticuerpos.
• Si no es posible determinar la especificidad de un anticuerpo irregular, ya sea debido a la falta de un panel de células o
porque no es un requisito de emergencia para la transfusión, el suero del paciente debe ser transversal emparejado con
varias unidades de la misma ABO y Rh ( D) tipo que el paciente para seleccionar la sangre compatible con el anticuerpo no
identificados / anticuerpos.
La selección de Sangre
la sangre del donante debe ser ya procesada para ABO y el grupo Rh (D), proyectado para el anticuerpo / anticuerpos irregulares y para
la enfermedad transfusión transmitida como el VIH 1 y 2, HBs Ag, HCV, pallidem treponema
y formalaria.
Para la selección de sangre segura, los criterios seguidos son:
Sistema ABO
sistema de grupos sanguíneos ABO sigue siendo el más peligroso porque todos los destinatarios tienen anticuerpos anti-A y / o anti-B en
su suero (excepto los del grupo AB) y incompatiblity en el grupo ABO entre el paciente y la sangre del donante causará reacción a la
transfusión hemolítica severa .
Sistema Rh
La (D) antígeno Rh es muy inmunogénica y es importante para evitar la inmunización de pacientes con Rh negativo, en particular cojinete de
niño pacientes de sexo femenino, a causa de la probabilidad de Rh enfermedad hemolítica del recién nacido en la posterior Rh (D) positivos
bebés.
Otros sistemas de grupos sanguíneos
de anticuerpos atípicos (es) de activos a 37 ° C de otros sistemas es (son) serológicamente significativo. En caso de que el paciente tiene anticuerpos
atípicos (s) activo a 37 ° C, la supervivencia del donante los glóbulos rojos no puede ser normal o el paciente puede tener reacciones de transfusión
hemolíticas.
Elección de la sangre en el sistema ABO
• se prefiere el grupo ABO mismo que el de la paciente.
• Si anti-A, en A., o A 2 paciente grupo B es activo a 30 ° C y por encima o muy activo a temperatura ambiente el grupo A 2 la
• En muy raras ocasiones anticuerpo anti HI (O) puede estar presente en A 1 paciente grupo, que no está inhibida por la sustancia H y es
activa a temperaturas superiores a 30 ° C. En tal caso, A, se selecciona de sangre grupo para transfusión.
• grupo sanguíneo del paciente (Oh) Bombay debe ser administrado sólo sangre Oh.
119
Manual Transfusion Medicine Técnica elección de los grupos
sanguíneos alternativo Tabla 10.1
Primera opción C)
Segundo
UNA O Ninguna
UNA 2 sin anti-A 1 o con anti-A 1 reaccionar O Ninguna
a TA o
UNA 2 con anticuerpos O Ninguna
anti-A, la reacción de
UNA 1 con anti-HI (O) Ninguna Ninguna
segundo 0 Ninguna
AB AoB O
UNA 2 B sin anti-A 1 o con anti-A, AoB 0
reaccionando a RT o
DO
UNA segundo
1 Bwithanti-HI (O) Ninguna Ninguna
• En los pacientes del grupo AB, si la sangre grupo AB no está disponible, el grupo es preferible a la sangre del grupo B A sangre
como en A sangre grupo anti-B es más débil que anti-A en el grupo B. No es aconsejable cambiar entre el Grupo A de sangre B
Grupo o viceversa, cuando más de una unidad se dan como una transfusión continua. Si el paciente ha recibido más de una unidad
de cualquiera de estos dos grupos y se necesita más sangre, lo mejor es utilizar la sangre del grupo O (libre de hemolisinas) o células
rojas.
• Si se ha dado más de una unidad de transfusión de grupo sanguíneo alternativo. La decisión de cambiar de nuevo a la sangre
específico grupo debe basarse en la presencia o ausencia de anticuerpos anti-A o anti-B en la muestra posterior del paciente. Si la
muestra de sangre del paciente recién extraída es compatible con la sangre específico del grupo, la sangre específico del grupo se
puede utilizar.
Elección de la sangre en el sistema Rh
La sangre del mismo grupo Rh (D) se debe utilizar como el de la paciente. Cuando Rh (D) negativo sangre no está disponible, Rh (D)
positivo de sangre puede ser dada a Rh (D) negativo paciente en lugar de con la sangre de retención de un paciente cuya necesidad
es crítico:
Cuando Rh (D) negativo no está disponible, los criterios o prioridades son:
1 se selecciona paciente que ya tiene anticuerpos Rh (IES), que carecen de la sangre antígeno Rh correspondiente (s). 2 Rh (D)
negati cinco mujeres que no han pasado la edad fértil, para evitar la reacción a la transfusión
en el futuro y HDN en posteriores bebé Rh positivo (D), Rh (D) negativo de sangre debe ser administrada. 3
120
Pretransfusional Pruebas de compatibilidad,
4 En Rh (D) macho negativo o Rh (D) negativo hembra después de la edad fértil: Rh (D) positivo se puede dar en lugar de con el
asimiento para un paciente cuya necesidad es crítica, siempre. (yo) Los anticuerpos anti-Rh (D), nunca se han detectado en el
suero del receptor y no anticuerpo (s) se encuentra en el suero de prueba en el cribado con el panel de glóbulos rojos por AHG
y técnicas enzimáticas. (Ii) La sangre es compatible
WeakD (D u)
• D u sangre del donante se toma como Rh (D) de sangre positivo.
• La débil D (D u) destinatario se trata como una Rh (D) negativo individuo, aunque la transfusión de Rh (D) de sangre
positivo en D u positiva del paciente implica muy poco riesgo de inmunización Rh (D).
• Si el anticuerpo irregular (es) de otros sistemas en el suero del paciente son activos a 37 ° C, deben tenerse en cuenta, ya que pueden
provocar una reacción de transfusión hemolítica o la supervivencia de donante células rojas pueden no ser óptima. En tales casos, se
selecciona la sangre apropiado que carece del antígeno correspondiente para la transfusión, por ejemplo K sangre negativo para
paciente con anti-K; y Fy una de sangre negativo para aquellos con anti-Fy una
• Si no es posible identificar la especificidad para un anticuerpo irregular ya sea por la falta de un panel de células o
porque hay una necesidad de transfusión de emergencia, el suero del paciente debe corresponder cruz con varias
unidades de la misma ABO y Rh (D) tipo de sangre que la de la paciente con el fin de seleccionar las unidades
compatibles de sangre.
• En algunos casos, cuando no es posible encontrar unidades compatibles de sangre, los familiares del paciente, especialmente
• Si el paciente se sabe que tiene anticuerpos irregulares (es), la transfusión autóloga se puede considerar en caso de
En ABO HDN, deben utilizarse grupo O glóbulos rojos del mismo tipo Rh como la de bebé.
RhHDN
• En Rh HDN, Rh (D) negativo de sangre del mismo grupo ABO como el de bebé se utiliza si es el mismo que el de la
madre o si es compatible con la sangre de la madre.
• Cuando el grupo ABO de bebé no es compatible con el grupo ABO de la madre o si la unidad de donante se prepara antes de la
entrega, debe ser O Rh (D) negativo y que debe estar libre de hemolisinas, anti-A y anti-B.
• En caso de que la exanguinotransfusión se requiere más de una vez, la sangre posterior debe ser de la misma ABO y el
tipo de Rh que el utilizado durante la primera transfusión.
121
medicina transfusional Manual técnico
• Cuando se da la sangre del grupo O a un bebé que es un grupo A, B o AB, deben utilizarse los concentrados de glóbulos rojos. Es una buena
práctica utilizar células empaquetadas se resuspenden en el volumen de un tercio de un plasma AB fresco (o A plasma plasma o B según el
caso).
• La sangre debe ser tan frescos como sea posible y no debe ser más de cinco días de edad, para evitar alto nivel de potasio en el plasma en
la sangre transfundida y para asegurar una larga supervivencia de glóbulos rojos transfundidos en infantil.
específico, ABO y Rh (D), que el de la paciente se selecciona del grupo normalmente. Sin embargo, en cierta situación, debido a la no disponibilidad de la
sangre específico del grupo, se selecciona de sangre grupo O (glóbulos rojos) para una o paciente B y A o B de sangre para un paciente AB como se explicó
anteriormente.
La prueba de compatibilidad (prueba cruzada) incluye
• Major partido cruz - suero del destinatario es transversal emparejado con células rojas 's donantes para IgM e IgG compatibilidad
anticuerpos.
• suero cruz Minor de match-donantes es transversal emparejado con células rojas de receptores para IgM e IgG compatibilidad
anticuerpos. Si el suero del donante ha sido filtrado para anticuerpos irregulares con OR 1 R 1, y OR 2 R 2 células del panel de selección de
• Si incompatibilidad no se detecta en pruebas cruzadas entonces, es probable que la sangre del donante transfundida en
• Dictamen de incompatibilidad indica que la transfusión de sangre tal es potencialmente peligroso y se debe tomar medidas
técnica Saline está diseñado para detectar la compatibilidad de anticuerpo IgM (es) en el suero del paciente contra los antígenos en las células rojas de
donantes.
Método
122
Pretransfusional pruebas de compatibilidad
4. Mezclar e incubar durante 5-10 min. (Método de centrifugado) o incubar durante 30-60 min (sedimentación
método) a TA.
5. Centrifugar a 1000 rpm durante 1 min. en el método de centrifugado (después de 5-10 minutos de incubación.);
técnica Saline es inadecuada como una prueba de compatibilidad completa debido a que es inadecuado para detectar anticuerpos IgG
clínicamente significativas.
prueba globulina humanos anti indirecta (IAT) es el procedimiento serológico más importante y ampliamente utilizado en la moderna bancos de sangre
para probar la compatibilidad IgG entre el suero del receptor y las células del donante. La mayoría de los anticuerpos incompletos son IgG y se
5. Si no hay hemólisis / aglutinación, se lavan las células tres veces con solución salina normal.
Interpretación
Hemeolysis o aglutinación en cualquier etapa indica incompatibilidad.
Nota: Cross-fósforo se puede hacer por dos tubos técnica para IgM amd IgG por separado como se describe anteriormente o por uno tubos en
los que después se incuba el paso 5 en la técnica de solución salina 'célula donante y el suero del paciente a 37 ° C durante 20-30 minutos y
luego hacer IAT. En la principal-cruz por IgG anticuerpos albúmina o enzima o LISS se puede utilizar con IAT para aumentar la sensibilidad. Para
123
medicina transfusional Manual técnico
• En la solicitud de la sangre clínico puede ser emitido en caso de emergencia después de ABO y Rh (D) escribiendo seguidas por
prueba cruzada por la técnica de tubo de Centrifugación Inmediata para la compatibilidad IgM.
• En casos extremos, donde no hay tiempo para tomar la muestra y para probarlo, O, Rh (D) negativo sangre,
• unidad de donantes que no ha sido probado o parcialmente probado para la compatibilidad para los anticuerpos IgM e IgG contra el
suero del paciente, debe estar claramente etiquetado 'sin cruzar-fósforo Blood'.
• Es recomendable completar la rutina de compatibilidad cruzada tanto para la compatibilidad IgM y IgG, después de la emisión de la sangre con
Menor-Cross Match
• Si el suero del donante no ha sido filtrado para anticuerpos irregulares con OR 1 R l y OR 2
células del grupo de selección, con resultados negativos, es recomendable hacer pruebas cruzadas de menor importancia.
• En el suero menor transversal partido del donante se transversal emparejado con células rojas de receptores tanto para IgM e IgG
compatibilidad anticuerpos.
Método
Método es el mismo que el de mayor compatibilidad cruzada excepto en suero menor de compatibilidad cruzada de donante se prueba
contra las células del paciente, tanto para IgM e IgG compatibilidad antibdies.
La transfusión masiva
• Cuando se dan transfusiones masivas, que es cuando el número de unidades transfundidas en un período de 24 horas excede del
destinatario volumen de sangre s, pruebas de compatibilidad se puede reducir a la comprobación de los tipos ABO y Rh (D) de las
unidades transfundidas. Si el paciente ha conocido allo-anticuerpo reactivo a 37 ° C, la sangre debe ser negativo para el antígeno
• Después de la situación de emergencia haya sido tratado, si se detectan anticuerpos en la muestra de pre-transfusión, y en caso
• unidades de donantes que no han sido probados o se han probado parcialmente contra el suero del paciente, deben estar claramente
Para más detalles ver la transfusión masiva en el capítulo sobre Tansfusion práctica en la medicina clínica.
PRUEBAS la transfusión de neonatos (en menos de 4 meses de
• (D) Grupo ABO y Rh grupo de células infantiles debe ser determinado por célula única agrupación.
• AHG prueba directa sobre las células del bebé se lleva a cabo.
• suero materno debe ser examinado para cualquier anticuerpo irregular, si la muestra de sangre de la madre está disponible.
124
Pretransfusional pruebas de compatibilidad
• Si la detección de anticuerpos y DAT es negativo en la sangre de la madre, y no hay evidencia de HDN, cruzan -match
sangre de la misma ABO y Rh (D) tipo que el del bebé usando suero de la madre (si ABO compatible y la muestra está
disponible) o suero del bebé. Se trata de excluir la posibilidad de que el anticuerpo incompleto de la madre puede estar
en el suero del bebé en la ausencia del antígeno en las células rojas de la bebé. ese anticuerpo.
• Si la detección de anticuerpos es positivo, el directo AHG es positivo o HDN está presente; la sangre del donante debe coincidir
cruzada contra el suero materno. El suero del neonato también se puede utilizar (si la muestra de sangre de la madre no está
disponible),
• Cuando la sangre del grupo O necesita ser dada a un bebé que es el grupo A y / o B, a continuación, los glóbulos rojos concentrados
de unidades con títulos bajos anti-A o anti-B debe ser utilizado. Es una buena práctica utilizar células empaquetadas se resuspenden
en un tercio del volumen de plasma AB (o A plasma plasma o B según el caso).
1. informe de compatibilidad cruzada debe ser enviado junto con la sangre que se emitan. El formulario de
2. Etiqueta o etiqueta está unido de forma segura a ser unidad de sangre que debe contener:
• la sangre del donante no reactivo para VIH y anticuerpos del VHC, HB s Ag, VDRL
• Compruebe la fecha de caducidad de la sangre para evitar la emisión de la sangre hacia fuera de fecha
125
medicina transfusional Manual técnico
CRUZ REGISTROS
Nombre del paciente ................................................ ........................................ Admisión No ......... ..... ..
GRUPO DEL PACIENTE
Un Un Un Un segundo O AB Rh
(D)
• Control autólogo
PRUEBAS CRUZADAS
Majo mi jor Mi Sí No
ni ma
Observaciones si alguno)_______________________________________________________________________
Firma del tecnólogo
Nota: Un resultado positivo (aglutinación y / o hemólisis) indica incompatibilidad.
126
11
Los efectos adversos de la
transfusión sanguínea
La transfusión de sangre y su producto es, normalmente, de una manera segura y eficaz de corregir defectos hematológicos pero los
efectos adversos no ocurrir durante o después de la transfusión y se les llama comúnmente reacciones de transfusión de sangre. Estos
efectos adversos varían de ser relativamente leves a mortales y algunos de ellos se pueden prevenir, mientras que otros no pueden.
El tiempo entre la sospecha de una reacción a la transfusión y la investigación y la iniciación de un tratamiento adecuado
debe ser tan corto como sea posible. Las enfermeras transfusionist / clínicos en las salas, los funcionarios médicos y los técnicos
en los bancos de sangre deben tener el conocimiento acerca de las reacciones transfusionales y su gestión.
127
medicina transfusional Manual técnico
malaria
IHTRs se producen muy poco después de la transfusión de glóbulos rojos de la sangre total o incompatibles immunologocal a un
destinatario. Los anticuerpos células comúnmente rojos, por ejemplo anti-A, anti-B, anti-Kell, anti Jk una y Fy segundo causar reacciones transfusionales
hemolíticas inmediatas. Estos anticuerpos se unen complemento en la superficie de los glóbulos rojos, causando la lisis de las células rojas.
reacciones de transfusión hemolíticas mediadas inmunes pueden destruir las células rojas por uno de dos mecanismos: (1) la hemólisis
intravascular o (2) la hemólisis extravascular. Tanto en el evento inicial es la unión del anticuerpo del paciente al antígeno en la superficie de los
En hemólisis intravascular complejo Ag-Ab activar el complemento que hemolysesred células y hemoglobina y el
estroma de glóbulos rojos son liberados en la circulación.
En las reacciones de transfusión hemolítica inmune mediada extravasculares complejo Ag-Ab causa incompleta o
no activación del complemento. Así RBC lisis no ocurre en la circulación intravascular y no hay liberación de hemoglobina y
glóbulos rojos estroma.
(yo) etiquetado inadecuado o incorrecto de la bolsa de sangre, muestra de sangre del receptor.
(Iii) identificación inadecuada de muestra de sangre del paciente por el técnico banco de sangre
2. Error tecnico
(Iv) Destrucción de las células rojas receptores por los anticuerpos de los donantes.
Puede ocurrir cuando la sangre donante tiene anticuerpo (s) contra el antígeno (s) en los receptores. Puede que no sea grave
como anticuerpo donante (s) se diluye en la sangre del paciente. En su mayoría se produce en la transfusión de sangre grupo O al
grupo A, grupo B o receptores AB grupo. Esto por lo general resulta de la utilización indiscriminada de grupo O toda la sangre, que
no ha sido filtrado para determinar los anticuerpos anti-A y el título de anti-B y hemolisinas.
128
Los efectos adversos de Transfttssion Sangre
(V) interpretación errónea de los resultados de las pruebas.
La interacción de anticuerpo con el antígeno en una membrana de glóbulos rojos puede iniciar una secuencia de respuestas neuroendocrinas, la
Signos y síntomas
Signos y síntomas que pueden ocurrir con las reacciones transfusionales establecidos o inminente incluyen:
• En el paciente anestesiado durante la cirugía hay exudación difusa desde el sitio quirúrgico, hypotesion,
hemoglobinuria, rosa o rojo orina puede verse cuando el paciente tiene catéter urinario
• hemoglobinuria
• oliguria
• anuria
• Choque
• La hiperpotasemia
La contaminación bacteriana de la sangre refrigerada es raro ahora porque la sangre se recoge en bolsas de plástico desechables.
reacciones de transfusión debido a la contaminación bacteriana son causadas comúnmente por endotoxinas producidas por las bacterias
capaces de crecer en temperatura fría tales como las especies Pseudomonos. Escherichia coli y Y.enterocolitica. Ellos se atribuyen
comúnmente para plaquetas
transfusión porque las plaquetas se almacenan a
20-24 0 DO.
129
Manual de Medicina de Transfusión técnicas causas:
• La contaminación puede ocurrir en el momento de la flebotomía y por ello es importante limpiar el sitio de la punción venosa
con mucho cuidado y todas las precauciones asépticas debe tomarse en flebotomía.
• bombas de sangre
de la unidad
hemolizadas
Después de la transfusión masiva, una carga que amenaza la vida de potasio puede ser liberado en el plasma y causa signos de
hiperpotasemia particularmente arryhthmias.
Los signos y síntomas de productos contaminados o unidades hemolizadas:
Aparecen rápidamente durante la transfusión o dentro de los 30 minutos después de la transfusión. Clínicamente este tipo de reacción se denomina
• Sever hipotensión
• Fiebre y escalofríos
• Dolor muscular
• vómitos
• Calambres abdominales
• Hemoglbinuria
• Choque
• Insuficiencia renal
• DIC
Medidas preventivas :
En el momento de emisión del cheque sangre evidencia de contaminación, que incluyen hemólisis bruto o cambio en el color de la
sangre, en particular en comparación con el color de la tubería segmentada adjunta o la presencia de materia particulada o coágulos.
130
Los efectos adversos de Transfussion Sangre
En caso de hemólisis de los glóbulos rojos no puede ser cambio de color (púrpura), tanto en la bolsa y los segmentos de tubo
adjuntos.
En caso de contaminación bacteriana puede haber cambio en el color de la sangre en la bolsa y el color de la sangre en el
2. El uso de un nuevo equipo de infusión, mantener la línea intravenosa (IV) abierta con un goteo de solución salina normal.
3. Compruebe la etiqueta de la bolsa de sangre, informe de pruebas cruzadas e identificar al paciente para confirmar que el paciente
orden de cosas, debe ser enviada al banco de sangre junto con la bolsa de sangre y de transfusión y reacciones transfusionales
informe.
7. En primer lugar la orina evacuada debe ser enviada por al laboratorio para el análisis de hemoglobina libre
1. Comprobar la identidad del paciente, la sangre de los donantes y todos los documentos pertinentes para asegurarse de que no había
2. Compara el color de plasma de muestras de sangre pre y post-transfusión del paciente. (yo) Rosa decoloración roja
la hemoglobina debido a la destrucción de los glóbulos rojos. (Ii) decoloración amarilla o marrón en las muestras del
3. Compruebe el color de la bolsa (i) púrpura y de coágulos en la bolsa de sangre (sin cambio de color en los segmentos de tubo
de
la bolsa) puede ser debido a la contaminación bacteriana (ii) El cambio de color tanto en la bolsa y el tubo de la
sangre.
4. Repetir ABO, Rh (D), las pruebas en muestras de sangre antes y después de la transfusión del paciente, y la sangre de la bolsa o
de un segmento de los tubos todavía unido a la unidad para comprobar cualquier error en ABO y Rh (D)
5. Realizar la prueba de antiglobulina directa en la sangre del paciente. (yo) Si DCT es negativo, los glóbulos rojos no se recubren
con anticuerpos IgG y no hay incompatibilidad. (Ii) Si las células incompatibles donantes recubierta con anticuerpo no se destruyen
131
medicina transfusional Manual técnico
(Iii) Si la muestra de pacientes se extrae sangre varias horas después de la reacción se sospecha, los glóbulos rojos del donante
recubierta con anticuerpo se destruyen y la DCT serán negativos. (Iv) En la reacción no inmunológica DCT será negativo.
6. frotis bacteriológico y la cultura de la sangre del donante se realiza para descartar la contaminación bacteriana.
1. Si nada anormal se encuentra en las conclusiones anteriores, se indica que no ha habido una reacción hemolítica
aguda.
2. Si cualquier hallazgo es positivo o dudoso o condiciones clínicas del paciente sugieren fuertemente una reacción hemolítica,
las siguientes investigaciones están garantizados: (i) Repita la cruz-partido, las pruebas de pre y post muestra de transfusión
del paciente
contra la muestra de sangre de la bolsa o un segmento de tubo todavía unido a la unidad por una solución salina, enzima /
albúmina e indirectos técnicas de pruebas de antiglobulina. (Ii) detección de anticuerpos en muestras de repetición de transfusión antes
(una) Identificar anticuerpo (s) por el panel de células por solución salina, enzima y IAT. Auto-control y dos células de cordón
(uno ORh (D) positivo, uno ORh (D) negativo) también se incluyen; [Véase el capítulo 9 de selección e identificación de
Identificar el antígeno (s) en las células rojas de donantes correspondientes al anticuerpo implicado (s).
1. bilirrubina no conjugada en suero se prueba en muestras de sangre de transfusión pre y post de los pacientes. Los niveles
máximos de bilirrubina se producen 5 a 7 horas después de la transfusión y desaparecen en 24 horas si la función renal es
normal.
muestra de los receptores de sangre se toma después de 1 -2 días, su valor está disminuida en la muestra de sangre de transfusión
posterior. hemoglobinemia resultados visibles sólo cuando las reservas de haptoglobina se agotan, por lo que no hay ningún punto en la
medición de nivel de haptoglobina. La haptoglobina puede regenerar rápidamente cuando empobrecido, por lo que si las mediciones se
realizan varios días después de la reacción hemolítica, los niveles normales pueden ya sido restaurada.
prueba.
4. Estimación de la hemoglobina libre se hace en la muestra de sangre post-reacción. Si la muestra se toma después de algún tiempo,
el plasma puede ser clara de la hemoglobina y puede que no sea visible. hemoglobina plasma normal es 10-40 mg / litro
En un paciente con hemoiysis asociada a transfusiones para las que se han eliminado las causas tanto inmunes y no
inmunes, la posibilidad podría considerarse que el paciente o el donante tiene un glóbulos rojos intrínseca defecto.
132
Los efectos adversos de Transfussion Sangre
Tratamiento
Si el paciente desarrolla una reacción grave con hipotensión, shock y disfunción renal manejo clínico intensivo es necesario
incluso antes de que se investigó la causa de la reacción.
El tratamiento de la hipotensión
Bajas dosis de dopamina <5 mg / kg / min. producir vasodilution renal selectiva, se evitan otros fármacos vasopresores
El tratamiento debe ser prevenir la hipotensión sistémica y el mantenimiento del flujo sanguíneo cortical renal. se dan - (100 mg, por vía
intravenosa 20) o manitol para mejorar la perfusión cortical renal y redistribución del flujo sanguíneo renal, produciendo diuresis cuando
la hidratación es adecuada dosis bajas a moderadas de furosemida. En adultos, la producción de orina de 100 ml / hora durante 24
horas debe mantenerse.
La terapia de hiperpotasemia
Después de la carga que amenaza la vida hemólisis masiva de potasio puede ser liberado en el plasma. Es importante controlar el nivel de
potasio en el plasma y debe ser tratada con prontitud. La hipercalemia es uno de la indicación para la diálisis después de una reacción de
La terapia de coagulación diseminada lntravascular: Véase el capítulo 16 sobre Transfution práctica de la medicina clínica.
Como las reacciones son potencialmente fatal, que deben ser reconocidas y tratadas de inmediato si se sospecha una transfusión contaminada
bacteriana. No hay que esperar a que las pruebas de laboratorio confirmatorias.
Inicia la terapia con antibióticos de amplio espectro agresivo y cuidados de apoyo, los corticosteroides se dan a menudo
empíricamente. volumen intravascular del paciente debe ser mantenido con una solución cristaloide y posibles fármacos vasopresores
como la dopamina.
Prevención
Deben existir procedimiento escrito para todos los aspectos de la adquisición, la emisión, y la administración de
transfusión. Todo el personal debe estar entrenado en el uso adecuado de los equipos, soluciones intravenosas, y los medicamentos utilizados
durante la administración de la sangre y de componentes sanguíneos. El equipo debe ser mantenido y mantienen registros de cómo y cuando se
utilizan elementos. Los medicamentos que pueden ser administrados por vía intravenosa nunca deben ser inyectados en bolsas de sangre, y se
debe tener cuidado en la selección y uso de dispositivos de acceso intravenosos.
133
medicina transfusional Manual técnico
Estos son autolimitados y normalmente se observan en pacientes con múltiples transfusiones o mujeres multíparas que tienen un
anticuerpo dirigido contra leucocitos del donante. Tal reacción antígeno-anticuerpo puede activar el complemento y estimular la producción de
citocinas, lo que resulta en la liberación de pirógenos endógenos. En algunos casos, las citoquinas se acumulan en la sangre almacenada
pueden activar directamente los pirógenos endógenos.
Signos y síntomas
Generalmente los síntomas son leves y benignas
• La hipotensión es raro.
• hipotensión
• Cianosis
• Taquicardia
• taquipnea
• disnea
• Tos
• leucopenia
administración
Una vez que la hemólisis aguda se descarta, la atención de apoyo incluye:
• Antipiréticos por ejemplo, paracetamol, aspirina (la aspirina puede ser evitado en paciente trombocitopénica).
• Si una segunda reacción ocurre, se debe dar componentes de la sangre reducida de leucocitos.
• El uso rutinario de antipiréticos profilácticos no es recomendable, ya que pueden enmascarar los síntomas de
hemólisis aguda.
Reacción alérgica
• Estos se atribuyen a proteína extraña (alérgeno) en el plasma de donantes que reaccionan con la
inmunoglobulina IgE en el paciente unido a mastocitos y basófilos.
• El plasma de donantes que tienen Reagins (IgE) se combinan con alérgenos en el plasma del paciente. La reacción
antígeno anticuerpo iniciar la liberación de histamina que causa urticaria, picazón y edema laríngeo rearly. Signos y síntomas
Sobre todo las reacciones alérgicas son leves y no en peligro la vida. Los signos y síntomas más comunes son:
• prurito
• La urticaria (urticaria)
134
Los efectos adversos de Transfussion Sangre
administración
El paciente debe ser monitoreado con cuidado porque la urticaria puede ser el único signo de una reacción alérgica más grave.
• El paciente debe ser tratado con un antihistamínico para aliviar el malestar. Si los únicos síntomas es erupción cutánea o
urticarias, y si los síntomas se resuelven con 30 minutos del tratamiento de la transfusión puede ser reiniciado.
• Los pacientes que han tenido dos o más reacciones alérgicas pueden beneficiarse de antihistamínicos por vía oral o parenteral
• La transfusión de glóbulos rojos lavados con solución salina puede ayudar a los pacientes con reations alérgicas graves frecuentes.
Anafilácticas y anafilactoides son debidas a hipersensibilidad inmediata del sistema inmunológico. Ellos pueden comenzar después de la infusión
de sólo unos pocos ml de plasma o productos de la sangre que contiene plasma. Por lo general son leves al principio, pero puede progresar a la
pérdida de la conciencia, el choque y en raros casos la muerte.
Las reacciones generalizadas no pueden comenzar de inmediato; algunos desarrollan tanto tiempo como una hora después de la transfusión es la
práctica requiere transfusión de completed.Good para la observación cercana durante el primer cuarto de hora de la infusión y la vigilancia después,
pero, no obstante, continuar menor intensidad se mantiene throughtout y después de la transfusión. causas
Anafilácticas y anafilactoides son causadas generalmente en pacientes que son congénitamente deficiencia de IgA y que
han desarrollado anticuerpos anti-IgA por la sensibilización de transfusión o embarazo.
deficiencia de IgA es la deficiencia inmune cogenital más común, afectando a una de cada 700-800 personas, de los cuales hasta un
30% han circulantes anticuerpos anti-IgA. reacciones transfusionales anafiláctico, sin embargo, son bastante raros.
administración
• Detener la transfusión. Mantener la línea intravenosa abierta con solución salina normal
• Inyectar epinefrina (adrenalina) subcutaneousIy / IM (por lo general aproximadamente 0,5 ml de solución 1: 1000)
• Si la hipoxia desarrolla, dar oxígeno por catéter nasal o una máscara. La intubación endotraqueal puede ser necesario.
• Para aquellos pacientes raros con una historia de una reacción anafiláctica a la sangre / plasma y que tienen deficiencia
congénita IgA y tienen anticuerpos anti-IgA, componente de la sangre, representada de plasma debe ser utilizado.
135
medicina transfusional Manual técnico
• Para transfusión de glóbulos rojos, esto se puede lograr mediante el uso de solución salina-lavado o glóbulos rojos
congelados-descongelados.
• Si se necesita el plasma, que debería ser de un donante con deficiencia de IgA conocida.
También conocido como edema pulmonar no cardiogénico, esto, complicación en peligro la vida inusual se asocia con la
permeabilidad alterada de la cama capilar pulmonar de la activación del complemento, eventos mediados por la histamina, o las
prostaglandinas, lo que conduce a la acumulación fliuds, oxigenación inadecuada, y la reducción cardiaca regreso. La reacción también
se atribuye a los anticuerpos anti-leucocitos del donante o el plasma del paciente que reaccionan con leucocitos en el sistema
microvascular pulmonar, dando como resultado émbolos de leucocitos de agregación en las capllaries pulmones. Otra causa sugerido
incluye citocinas en las unidades de donantes.
Manifestación
lesión pulmonar aguda relacionada con la transfusión (TRALI) se manifiesta por un inicio agudo de dificultad respiratoria, disnea, cianosis,
fiebre y escalofríos. Una radiografía de tórax mostrará infilterates pulmonares bilaterales, pero no se observan otros signos de insuficiencia
cardíaca izquierda. Potencialmente fatal hipoxia puede ocurrir y persistir durante 24-28 horas.
Tratamiento
• La piedra angular de la terapia es la atención de apoyo eficaz para la insuficiencia respiratoria. La terapia de
oxígeno y, a veces ieintubation ventilatoria assitance puede ser necesaria
• esteroides intravenosos se utilizan imparically, pero su eficacia no se ha demostrado.
• Si TRALI es causada por paciente anti-leucocitos anticuerpos Los componentes de leucocitos de los pobres deben ser utilizados.
Donante que se han implicado en un caso de TRALI y que posee potentes leuco-aglutininas pueden desencadenar reacciones en
Los pacientes que son muy jóvenes o muy viejos, y que tienen insuficiencia cardíaca congestiva subyacente o tiene anemia crónica
normovolumic y un volumen de sangre expandida están en mayor riesgo de sobrecarga circulatoria. Cuando demasiada sangre se transfunde
demasiado rápidamente, estos pacientes no pueden tolerar el aumento de volumen y por consiguiente desarrollar insuficiencia cardíaca
• Cianosis
• disnea
• Taquicardia
• Edema periférico
• Hipertensión
136
Los efectos adversos de Transfussion Sangre
administración
• diuréticos intravenosos
Prevención
insuficiencia cardíaca congestiva asociada transfusión se puede prevenir mediante la identificación de pacientes susceptibles y tomar medidas
preventivas como:
• Transfundir glóbulos rojos en vez de sangre entera o dar pequeñas alícuotas de los productos concentrados durante un largo
período.
• La velocidad de infusión debe ser I ml / kg de peso corporal / hora, La transfusión debe sobre el plazo de 4 horas.
Aloinmunización primaria
Esta reacción se produce varias semanas después de la transfusión y es en su mayoría leves. Es el resultado de la primaria alo-inmunización
debido a la incompatibilidad de Rh, Kell, Duffy, Kidd, y otros sistemas. Puede ser debido a la transfusión de sangre, trasplante de tejido o el
embarazo. Los anticuerpos se forman muchas semanas después de la transfusión los signos y síntomas pueden ser leves:
• Fiebre leve
• Descenso de la hemoglobina
Es debido a la transfusión de glóbulos rojos incompatibles en un paciente que ya está inmunizado por transfusión anterior. También se
debe a la de incompatibilidad de Rh, Kell, Duffy, Kidd y otros sistemas de grupos sanguíneos. Pocos días después de la transfusión,
los anticuerpo (s) aumenta la concentración y se
destruir los glóbulos rojos causando reacciones hemolíticas retardadas.
• Caída de la hemoglobina;
137
medicina transfusional Manual técnico
administración
• La transfusión de sangre compatible si es necesario.
• Es imposible evitar todos los DHTRs. Cuando los anticuerpos GR se identifican por el banco de sangre, los médicos deben
informar a sus pacientes y aconsejarlos para proporcionar esta información cuando hospitalizado en otro lugar.
• Una tarjeta de alerta transfusión se debe realizar por parte del paciente.
PLAQUETARIA INCOMPATIBILIDAD
Una complicación poco común de la sangre transfusión, generalmente plaquetaria implica concentrado, es
púrpura trombocitopénica como resultado de la producción anamnésica de anticuerpos plaquetarios. La púrpura post-transfusión ocurre en
los casos que ya están inmunizados por transfusiones de plaquetas anteriores. Después de la transfusión púrpura trombocitopénica es un
evento raro que ocurren generalmente en las mujeres multíparas. Algunos pacientes desarrollan una plaqueta alo-específica de anticuerpos
anti-Pl Alabama. El anticuerpo destruye no sólo el P1 transfundida A1 plaquetas positivas, pero también causa la destrucción no específica de los
pacientes P1 A1 plaquetas negativos
Los anticuerpos frente a plaquetas en pacientes con múltiples transfusiones pueden causar reacción, tal como: escalofríos, fiebre y disnea etc. similar a la
incompatibilidad de leucocitos.
FEVR Dyspea
• La trombocitopenia es generalmente severa y produce la púrpura generalizada alrededor de una semana después de la transfusión
de sangre.
administración
El thrombocytepenia es generalmente autolimitante y la transfusión de plaquetas por lo general no es beneficioso. El tratamiento incluye:
• Los corticosteroides
• La inmunoglobulina intravenosa.
Enfermedad huésped (EICH) - injerto contra
enfermedad de injerto contra huésped asociada transfusión es una complicación de la terapia de componentes sanguíneos o trasplante de
médula ósea. enfermedad GVH se produce si los linfocitos de donantes funcional se injertan y se multiplican en un destinatario inmunodeficiente
severamente. Estas células injertadas del donante reaccionan contra el tejido extraño del huésped (receptor).
GVHD es una complicación poco frecuente y los pacientes en situación de riesgo son:
• pacientes lymphopenic
• La médula ósea casos suprimida
• Feto recibir transfusiones intrauterinas
• Nuevos bebés bom que reciben transfusiones de intercambio
138
Los efectos adversos de Transfussion Sangre
La tasa de mortalidad con TA-GVHD es de aproximadamente 84% con una supervivencia media de 21 días después de la transfusión. La muerte es causada
generalmente por infección o Hemmorhage secundaria a la aplasia de la médula ósea. Los sysmptoms de la enfermedad GVH pueden incluir:
• Fiebre
• Erupciones en la piel
• Hepatitis
• Diarrea
• supresión de la médula ósea
• Infecciones.
Administración:
• irradiación Pre-transfusión de todos los componentes de la sangre que contienen linfocitos evitará funciones GVH
diseases.The de glóbulos rojos, granulocitos y plaquetas no están afectadas por dicha irradiación.
• Los corticosteroides
• ciclosporina
• Metotrexato, etc.
La eficacia clínica de estos fármacos no se han demostrado ser adecuados en TA-GVHD.
Efectos inmunomoduladores de Transfusión
Transfusión ha sido conocido para modular la respuesta inmune dado que las observaciones de mejora de la supervivencia del injerto
renal en pacientes transfundidos en la década de 1970. Transfusion se thuoght tener otros efectos, menos benificial en otros entornos
clínicos, incluyendo tasas de aumento de la recurrencia del tumor sólido y el aumento de las tasas de infecciones bacterianas
postoperatorias. Estos efectos son controvertidos, pero sugieren que la relación entre la transfusión y el sistema inmune es más complejo
de lo considerado anteriormente.
No existe ningún mecanismo específico se ha demostrado definitivamente para immunodulation poste transfusión
(inmunosupresión)
Sin régimen de terapia específica disponible. Se aconseja La transfusión de componente sanguíneo apropiado (s) para tener efectos beneficiosos.
139
medicina transfusional Manual técnico
Tratamiento está dirigido a la eliminación de hierro sin reducir la hemoglobina circulatorio del paciente. infusión subcutánea dosificada
de la deferoxamina, un agente quelante de hierro es valioso para reducir los depósitos de hierro en estos pacientes.
La desferrioxamina se prescribe generalmente en una dosis diaria de 20-40 mg / kg de peso corporal, administrada por vía subcutánea en 8-12 horas
Las transfusiones de neocitos (células rojas jóvenes) han sido eficaces en la supervivencia más larga de neocitos, causando intervalo de transfusión
Un riesgo importante de transfusión de sangre es la transmisión de enfermedades infecciosas, algunas de las cuales tienen importancia clínica. La sangre
debe ser examinado para enfermedades transmisibles por transfusión como el VIH 1 y 2, Hepatitis B y C, la sífilis y la malaria para asegurar la transfusión
de sangre segura.
Treponema pallidum:
• En la sangre citrada almacenado durante más de 72 horas a 2-6 ° C, espiroquetas son pocas probabilidades de sobrevivir.
Malaria
El período de incubación para la transmisión de la malaria depende del número y de las cepas de plasmodios transfundidos.
Para detalles, véase el capítulo 12, sobre "Enfermedades transmitidas por transfusión y su programación.
140
Los efectos adversos de Transfussion Sangre
Color de la sangre en la bolsa _________________ en tubo unido a bag___________ Color de la muestra de sangre
hemólisis La
ictericia
Reagrupación
Pre-transfusión de
post-transfusión de
Pre-transfusión
postransfusional
Auto Auto
* O 1 R 1 Células; **O 2 R 2 Células
anticuerpos irregulares detectado en el cribado ___________________ Sí / No ___________________ La identificación de anticuerpos, Si
anticuerpo que se encuentra en el cribado (si es posible) ____________________
# muestra de sangre después de transfusión del paciente Hb libre ______________________________________
Bilirrubina Total __________Direct Bilirrubina ______Indirect Bilirubin_____
# Muestra de orina vacío después de HTR gratis Hb ___________________________________________
# Frotis de sangre del donante (patógena organismo) _____________________________. ________
# Cultura sangre del donante _________________________________________________________ Interpretación
__________________________________________________________________
Contador de cuadros Sr. Tech. Oficial
(JfGencraly hecho en Patología Lab) Firma del Técnico con fecha
141
12
Transfusión de sangre
transmitida
enfermedades
Introducción
Florence Nightingale, hace más de 100 años, dijo “No se condena más fuerte de cualquier hospital o sala podría ser pronunciado
que el solo hecho de que zymotic enfermedades (infecciosas) se ha originado en ella, o que tal enfermedad ha atacado a otros
pacientes que los trajo con ellos".
Debe, por lo tanto, será obligatorio para aquellos que están involucrados en la transfusión de sangre a un paciente por salvar su
vida, que la transfusión de sangre hace, no hay daño para el paciente. Nada podría ser peor que el hecho de que en un intento de salvar a
los productos de vida, la sangre y la sangre que tienen los agentes infecciosos transmisibles se han dado. Muchos de estos agentes
infecciosos pueden causar la muerte o una enfermedad prolongada. Por lo tanto es necesario entender los organismos que podrían
transmitirse por transfusión de sangre y medio por el cual esto podría ser prevenido.
Agentes infecciosos
Hay cuatro grupos principales de microorganismos que se sabe causan infecciones a saber, virus, bacterias, protozoos y hongos
Se han reportado a transmitir por transfusión de sangre - sólo los primeros tres grupos de microbios - virus, bacterias y protozoos. Las
personas con infecciones por hongos son por lo general demasiado enfermo para ser aceptados como donantes de sangre. Los virus se transmiten
Recientemente, una nueva forma de agente infeccioso - el prión - ha sido identificado. En este momento, no hay evidencia para sugerir
143
medicina transfusional Manual técnico
Los virus
Los virus son las formas más simples de la vida. Se infiltran en todas las formas de vida, carecen de ciertos componentes que se necesitan
para vivir y, por tanto, su crecimiento dependerá de la célula huésped al que infectan a proporcionar estos componentes que faltan.
Los siguientes son algunos de los virus que se sabe que ser transmitida a través de la sangre:
2. virus de la hepatitis B
3. virus de la hepatitis C
4. virus de la hepatitis A
5. virus de la hepatitis G
6. No - A, no - B de la hepatitis
8. citomegalovirus (CMV)
9. virus T linfocítica humana (HTLV - 1 y HTLV - 2)
Algunos virus tienen la propiedad de latencia. Esta es la capacidad de un virus para unirse a su propio ácido nucleico con el ácido
nucleico de la célula huésped, sin tener el control completo de la célula huésped como un virus normalmente hacer. Latencia ocurre
generalmente después de una infección activa cuando el individuo se ha recuperado y la inmunidad se está acumulando. existe El ácido
nucleico viral en una forma inactiva que no parece hacer daño a la célula huésped. Cuando la célula huésped divide, el ácido nucleico de la
célula se copia, junto con el ácido nucleico viral. De esta manera, el ácido nucleico viral se convierte en parte del ácido nucleico de la célula y
La latencia es por lo general indefinida y sin efectos nocivos sobre la célula huésped. Sin embargo, en cualquier momento, el ácido
nucleico latente podría convertirse en activa y hacerse cargo de las funciones de las células, lo que resulta en una infección activa. Esto se
llama una reactivación de la infección (recrudescencia), que es causada por la reactivación del virus ya presentes en el individuo.
Hay tres condiciones básicas que determinan si un agente infeccioso es susceptible de transmitirse por transfusión:
1. El agente debe ser capaz de utilizar la corriente de la sangre como una vía de entrada en host.
2. El donante infectado debe ser esencialmente libre de cualquier signo o síntoma de la enfermedad notables, de lo
contrario, habrían sido identificados durante la selección de donantes y el donante hubieran sido excluidos o diferida.
3. El agente debe existir de forma natural por un período de tiempo, ya sea libre en el plasma o presente en un componente celular en
Cualquier agente infeccioso satisfacer todas estas condiciones se puede transmitir por transfusión de sangre. Sin embargo, si
la transmisión se produce o no en realidad depende de una serie de otros factores, en particular en el estado inmune del paciente y la
cantidad de agente infeccioso transfundida.
144
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
Se sabe que puede, y no se produce la transmisión de ciertos agentes infecciosos a través de transfusiones de sangre, y puede
ser una vía importante de infección, sin embargo, el punto clave a recordar aquí es que hay un número de maneras en que el riesgo se
puede reducido.
Las estrategias para reducir el riesgo de infecciones transmitidas por transfusión.
• La cuidadosa selección de los donantes para asegurar que, en la medida de lo posible, la sangre no se recoge de las personas que
tienen probabilidades de ser portadores de agentes infecciosos. donación de sangre segura depende, la construcción de un panel de
regulares, voluntarios y no - donantes remunerados como el primer paso para garantizar un suministro seguro y adecuado de sangre. En
nuestro país, donde la mayor parte de la sangre se obtiene de donantes familiares / allegados, el riesgo de infección transmisible
transfusión es mayor.
• La proyección directa de la sangre para la evidencia de la presencia de agentes infecciosos o marcadores producidos por
ellos ..
• La eliminación de componentes específicos de pensamiento sangre al puerto agentes infecciosos, por ejemplo, por la filtración
• La inactivación física / química de cualquier agente contaminante que pueda estar presente, por ejemplo, tratamiento térmico
No todos los agentes infecciosos pueden ser detectados directamente en la sangre donada. La sangre se suele evaluar la evidencia de
infección previa mediante la búsqueda de la presencia de anticuerpos específicos dirigidos contra el agente infeccioso.
Claramente, es sólo mediante la comprensión de lo que los marcadores de la infección son producidos por el agente infeccioso que el cribado para el
VIH-1 SIDA
Carcinoma - Sequelace
145
medicina transfusional Manual técnico
reportado en tres hemofílicos y en un lactante de 17 meses de edad, cuyo transfusiones múltiples en el nacimiento incluido una unidad de
plaquetas de un donante que posteriormente desarrollaron el SIDA. En pocos años, más del 50% de los hemofílicos que reciben factor de
VIH se aisló primero a partir de las células de un paciente infectado en 1983 (VIH-1). El virus fue identificado posteriormente como
el agente causante del SIDA. En 1986, un segundo tipo de VIH, VIH-2, fue identificada en ciertas áreas de África Occidental. VIH-2 parece
causar las mismas enfermedades como el VIH-1, pero puede ser menos patógeno. Es morfológicamente similares a VIH-1. Los dos tipos
se pueden distinguir por la presencia de proteínas y glico-proteínas específicas para ellos. Aunque la reactividad cruzada se produce entre
la proteína núcleo de ambos virus, las proteínas de la envoltura son diferentes.
La reactividad cruzada se produce cuando un anticuerpo reconoce no sólo su propio antígeno sino también otros antígenos que tienen
ciertas similitudes. En el caso del VIH, esto significa que un individuo infectado con HTV-1 sería producir anticuerpos que reconocen tanto el
núcleo como la envoltura proteínas de VIH-1 y las proteínas del núcleo del VIH-2. Del mismo modo, un individuo infectado con el VIH-2
produciría anticuerpos que reconocen tanto el núcleo como la envoltura proteínas de VIH-2 y proteínas del núcleo de VIH-1.
ADN es generalmente de doble cadena. Es el material genético transmitido a las células hijas cuando una célula se divide. Es
de ADN que es responsable de la transmisión de las características hereditarias de padres a hijos.
El ácido nucleico en el virus VIH es ARN. No hay ADN presente. En cambio, el virus utiliza la maquinaria de las células
humanas que entra a convertir su ARN a ADN de manera que el virus puede replicarse o integrarse en el ADN de la célula.
El ARN viral se condensa en un núcleo cilíndrico junto con dos proteínas estructurales estrechamente asociados-y una
importante enzima llamada ARN dependiente de ADN polimerasa. Esto es
146
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
más comúnmente conocida como transcriptasa inversa. Esta enzima se encuentra en todos los retrovirus, ya que se necesita para copiar
La forma en que se describen virales y otras tales proteínas se basa en su peso molecular (medido en Daltons) y de
si son proteínas o glicoproteínas. Las dos proteínas asociadas con el ARN del VIH son 7000 daltons (7kDa) y 9000
daltons (9kDa). Estos se abrevian a P7 y P9 respectivamente. La enzima transcriptasa inversa es una proteína de 66 kDa,
que se abrevia a p66. Glicoproteínas se abrevian de manera similar a “GP”.
El núcleo está totalmente encerrado en una cáscara en forma de cono de la proteína p24. Esto se llama la proteína principal del
núcleo y parece ser la misma en ambos VIH-1 y VIH-2. Todo el conjunto se llama la cápside viral. (Fig 12.1)
Fig. 12.1
La estructura de VIH
La cápside en sí está cubierto por dos capas. El primero de estos es una cáscara de proteína de la matriz PL7 al que están unidos
proteínas que se proyectan desde la superficie de la partícula de virus. Esto está cubierto por una bicapa lipídica. Se proyecta a través del
lípido son muchas proteínas transmembrana. Estas proteínas, gp41, están unidos a la matriz de p17 y ellos mismos se unen las proteínas
de la envoltura gpl20. Estos aparecen como pequeños salientes en la superficie de la partícula de virus. Es la estructura de estos pequeños
proyección y sus proteínas de fijación que parece ser la principal diferencia entre el VIH-1 y VIH-2. Los correspondientes HFV-2 proteínas
se GPL 10/130 y GP 36 respectivamente. Los anticuerpos contra estos dos conjuntos específicos de proteínas no reaccionan de forma
cruzada.
Toda la partícula de virus se llama el virión. Esta es la partícula infecciosa que se secreta y se transmite entre los
individuos. El virión completo es 100 -120 pm de diámetro.
Todos retrovineses contienen tres principales genes Estructurales de gen gag que codifica para el gen de proteínas del núcleo, pol
147
medicina transfusional Manual técnico
Fig. 12.2
Estructura genética del VIH incluye los nueve genes, pero su son tres principales genes - gag, pol y env y son antigénica, otros
genes que sirven para regular la expresión de estos genes de viriones. Los productos génicos marcados con asterisco no se
usuallay visible en un Western Blot.
La entrada del VIH en las células
VIH entra en células susceptibles por unión a un receptor - una proteína llamada CD4 - en la superficie celular. CD4 se encuentra en la
• los macrófagos que engullen partículas de virus en muchas partes del cuerpo. Después de la fusión del virión a la
membrana celular, la cápside descubierta pasa en el citoplasma de la célula. Dentro del citoplasma, el RNA se copia en DNA
de doble cadena por la enzima transcriptasa inversa presente en la cápside utilizando materias primas desde dentro del
citoplasma. El ADN pasa entonces en el núcleo de la célula y se integra en el ADN celular. Una vez en la célula, el ADN
permanece latente.
La etapa final de la infección se produce cuando el virus comienza a replicarse. Grandes cantidades de virus infecciosos
(viriones) se producen. A medida que el virus emerge (brotes) de la célula, que se envasa en la membrana celular para producir las
partículas de virus completos. Estos viriones se liberan y pueden infectar a otras células.
lugar a una serie de diferentes condiciones de gravedad variable, aunque por lo general los resultados (y finalmente) en el SIDA.
VIH tiene una predilección por la infección y destrucción de CD o células T helper, produciendo de esta manera immundeficiency
grave y enfermedades asociadas.
En individuos que sufren de SIDA, la principal causa de la enfermedad es la aparición de enfermedades infecciosas secundarias,
las infecciones oportunistas. Estas infecciones oportunistas son causados por
agentes infecciosos que no producen enfermedad en individuo normal.
148
Blood Transmisión enfermedades de transmisión
• criptosporidiosis crónica
• toxoplasmosis
• La infección viral, tal como citomegalovirus
Los cánceres secundarios como el sarcoma de Kaposi y no-Hodgkins' linfoma son otra
condiciones que se encuentran a veces en pacientes con SIDA. Estos cánceres suelen ser agresivos y no responden muy bien a la quimioterapia
estándar. El sarcoma de Kaposi, como se describió originalmente, era un tumor maligno benigna que se encuentra en los hombres de edad avanzada
que no tiene ningún efecto adverso en la individual.However, el sarcoma de Kaposi encuentra principalmente en pacientes con SIDA en África es un
En muchas partes del mundo, los pacientes con complejo relacionado con SIDA (ARC) o el SIDA presente simplemente con diarrea
severa. La presencia de infecciones oportunistas o cánceres secundarios solamente se determina siguiendo la investigación clínica y de
laboratorio.
LABORATORIO diagnóstico de infección por VIH
Poco después de la exposición, la proteína del núcleo, p24, se ha encontrado en algunos individuos. Dentro de pocas
semanas anticuerpos contra envoltura (gp41) y el núcleo (p24), las proteínas aparecen en casi todos los individuos
infectados. Durante la fase temprana de la infección por una aguda no específica “enfermedad viral” puede ocurrir. Una
vez que aparezca anticuerpos, que aumentan en el título a pesar de que el anfitrión es asintomática. Durante esta fase de
la infección cultivos virales de linfocitos aislados demuestran la presencia de virus. Como el progreso de la infección, los
cambios en la proporción de linfocitos T con marcadores de superficie específicos, CD4 (helper) para células CD8
(supresor), se observan. La relación de CD4 a CD8 en persona competente saludable y inmune es aproximadamente 2: 1.
En el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), el virus destruye las células CD4 y su número en la disminución
cuerpo y hay disminución de la relación CD4: CD8.
Antes de que se identificó el VIH, el SIDA fue diagnosticado por su apariencia clínica. Cualquier pruebas de laboratorio que se utilizaron
fueron pruebas sustitutas. Todas estas pruebas iniciales medidas de los resultados de la infección por VIH en lugar de detectar específicamente ya
La producción de pruebas específicas para HTV ayudó a entender tanto la infección por el VIH y el SIDA. El hallazgo de
anticuerpos anti-VIH en pacientes con inmunodeficiencia previamente explicada es diagnóstico de SIDA.
La presencia de anti-VIH en un individuo asintomático significa que el individuo ha estado expuesto al virus. Se acepta
que, en casi todos los casos, el virus estará presente en el individuo. La seroconversión en muestras secuenciales significa
que la infección ha sido reciente.
Algunos trabajos de investigación indican que anticuerpos están presentes tan pronto como 14 días después de la infección, mientras que
otros indican que no pueden estar presentes hasta 28 días o más después de la infección. Los anticuerpos producidos se dirigen contra ambas
proteínas del núcleo y de la envoltura. Los anticuerpos más importantes son específicamente anti-p24 (núcleo) y anti-gp41 (sobre). Aunque se
producen anticuerpos frente a otras proteínas del virión, la presencia de estos dos anticuerpos se ha encontrado para proporcionar el
149
medicina transfusional Manual técnico
mejor confirmación de la infección. También se ha encontrado que la mejor manera de monitorear el progreso de la infección.
Después de la infección y antes de la producción de anticuerpos, hay 'período de ventana' de longitud variable durante el cual la
infección establece. Durante este periodo cuando no se detecta anticuerpos, el antígeno viral (p24, gp41) podía ser detectado. El
período de tiempo se puede detectar que el antígeno es muy corto, a menudo no más de 1-2 semanas. Aunque la detección de
antígeno de VIH proporcionaría teóricamente evidencia de infección en una etapa anterior, hay muy pocos ensayos de antígeno
comercial y también no son muy sensibles. Sin embargo, en algún caso en que se han utilizado ensayos de antígeno, antígeno de VIH
se ha detectado en una etapa cuando los anticuerpos anti-VIH no habían aparecido o simplemente aparecido. En la actualidad, por lo
tanto, parece que los ensayos de antígeno de VIH pueden tener un valor limitado en servicio de transfusión sanguínea. Sin embargo,
es posible que su valor puede crecer con un aumento de la prevalencia del VIH en la población de donantes.
Fig. 12.3
eventos serológicos después de la infección por VIH
La figura 12.3 muestra las actividades después de la infección por el VIH. Poco después de antígeno ha aparecido, el anticuerpo
correspondiente emerge con una disminución de antígeno libre. Los niveles de anticuerpos frente a p-24 y gp-41 de pico y permanecen
constantes a lo largo de las etapas de la infección asintomática persistente. No está claro si la producción de antígeno p24 se detiene por
completo. El uso de tratamiento con detergente de muestras de suero, antígeno p24 complejado con antobody anti-p24 se ha detectado en
algunos pacientes considerados previamente poseer único anticuerpo anti-p24. Es posible que la producción de antígeno p24 no cesa por
completo, pero que el antígeno circulante - se forman complejos de anticuerpos, por lo tanto, no se pudo detectar el antígeno.
Como se desarrolla ARC, el nivel de anticuerpos anti-p24 se cae y aparece antígeno p24 detectable. En esta etapa, los
anticuerpos anti-gp41 y antígeno p24 son detectables. Esta situación es el preludio del desarrollo del SIDA en toda regla.
Puede observarse que la viremia es máximo durante el periodo de ventana y después de ARC y SIDA se desarrolla.
150
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
3. De una madre infectada a su hijo, en el útero, durante el parto o la lactancia. La transfusión de sangre
puede ser una importante vía de infección. La eficiencia de la transmisión de VIH a través de transfusión de
sangre se estima en más de 90%. La OMS informa que la dosis viral en la transmisión del VIH a través de sangre
es tan grande que la transfusión de un VIH-positivo conduce a la muerte, por término medio, después de dos
años en los niños y después de tres a cinco años en los adultos. Sin embargo, el grado en que la transfusión de
sangre es una vía real de transmisión depende de la prevalencia de individuos infectados en la población y sobre
la eficacia del programa de detección utilizado. En una población con una baja prevalencia de individuos
infectados y un buen programa de detección, transmisión por transfusión de sangre puede ser extremadamente
rara.
La transfusión de sangre, por lo tanto, se puede propagar la infección por VIH muy ampliamente si la sangre no se tamiza
sistemáticamente.
151
Manual Técnico Transfusion Medicine
Por último, se necesitan pruebas de detección de la infección por VIH a permitir que los donantes infectados que ser excluidos y la sangre
donada para ser desechados. Las pruebas para detectar el VIH viral Marcadores
La detección de anti-VIH es el enfoque más adecuado para la identificación de las donaciones de sangre infectados por el VIH. Los tres
principales tipos de ensayos de cribado para detectar anti-VIH disponibles son:
• Inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA / EIA)
• ensayos de aglutinación de partículas
• ensayos rápidos Specialized
Durante la selección de ensayos para ensayos de anti-VIH siguientes características pueden tenerse en cuenta:
• alta especificidad
• Alta sensibilidad
• La simplicidad de la prueba
• Tiempo de incubación
• Costo
Los fabricantes suelen utilizar los términos de la primera generación, segunda generación y ensayo de tercera generación.
• ensayos de primera generación son purificadas o no purificadas de virus nativo o células infectadas por virus lisados preparados a partir
de cultivo celular.
• Los ensayos de segunda generación utilizan antígeno recombinante producido por clonación de fragmentos de ácido nucleico viral en
levadura, creciendo gran cantidad de la levadura manipulada en cultivo en masa y purificación de las proteínas virales producidas.
• ensayos de tercera generación son polipéptidos virales sintéticos producidos artificialmente por síntesis química.
Los ensayos se basan en los mismos principios pero difieren en la forma en que se inmoviliza el antígeno viral:
• En pequeñas perlas de poliestireno. Este método requiere equipo especializado. Hay tres
tipos de ELISA:
(1) Antiglobulina tipo ELISA: (2) anticuerpo viral presente en la muestra de ensayo se une al antígeno viral inmovilizado y se
detecta
por marcado con enzima anticuerpo anti-humano. (3) ELISA competitivo: (4) Es ampliamente utilizado ensayo, en el que el anticuerpo
presente en la muestra de ensayo compite con enzima
vinculada anticuerpo específico para los sitios de unión a antígeno inmovilizado. (5) Sandwich ELISA: (6) Este es de tipo muy
específico de ELISA en el que el anticuerpo viral en la muestra de ensayo se une a
inmovilizado antígeno y entonces detectado por el antígeno viral libre marcado con enzima.
152
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
Conjugado
anticuerpo globulina humana marcado Enzyme
Fig 12-4. Antiglobulina los métodos del
tipo ELISA
153
Manual Técnico Transfusion Medicine
Fig 12-5.
Método ELISA competitivo
que contiene anti-VIH bloquear la unión del conjugado al antígeno mientras que la muestra no contiene anti-VIH se permitir la
1. sueros sin diluir y el conjugado se añaden en pocillos al mismo tiempo. Los controles positivos y negativos también se ponen.
2. Los pocillos se incubaron durante el período definido y a temperatura correcta. Durante esto
154
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
• Un color intenso significa una muestra de reactivo que tiene el VIH, mientras que falta de color significa un espécimen no reactivos
que no tienen el VIH.
• Las densidades ópticas (valores de DO) de la solución en los pocillos son leídos por el lector de ELISA después de
determinar el valor de corte, y los resultados se determinan. Método: (Véase la figura 12-6)
1. Sera o sueros diluidos se añadieron a pocillos unido a antígeno. Los controles positivos y negativos
155
Manual Técnico Transfusion Medicine
También se ponen. Los pocillos se incubaron durante el período de tiempo definido y a la temperatura correcta.
Durante este período anti-VIH presente en el bind sueros al antígeno.
2. Al final del período de incubación, los pocillos se lavaron con solución de lavado para eliminar
el exceso de suero y los pocillos se preparan para el siguiente paso como se describió anteriormente.
3. El conjugado se añadió a los pocillos. Los pocillos se incubaron durante el período de tiempo definido y a la
temperatura correcta. Durante este periodo, el conjugado se une al anticuerpo unido al antígeno inmovilizado. Un
sándwich está constituido por antígeno-anticuerpo-antígeno.
4. Al final del periodo de incubación, los pocillos se lavan con líquido de lavado para eliminar
conjugado no unido y el pozo se preparan para el siguiente paso, como se describió anteriormente.
5. La solución de sustrato se añade inmediatamente a todos los pocillos y se incuban en el período de tiempo definido y a
temperatura correcta.
6. Al final del período de incubación, ácido (1 NH diluido 2 ASI QUE 4) se añade a todos los pocillos para detener la
reacción.
7. Se desarrolla color en los pocillos que tienen sueros que contienen anti-VIH y no voluntad el color se desarrolla en
los pocillos que tiene sueros sin anti-VIH.
8. Las densidades ópticas (valores de DO) de las soluciones son leídos por el lector de ELISA después de calcular el valor
de partículas
ensayo de aglutinación de partículas detecta la presencia de anti-VIH por la aglutinación de partículas recubiertas con antígenos
del VIH. Las partículas están hechas de gelatina o látex. El ensayo se realiza en microplacas. Método:
156
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
3. Las partículas de VIH recubiertas se añaden a las muestras y los controles diluidos. Luego se incuban, por lo general a
temperatura ambiente (20-24 ° C) durante el período definido. Durante la incubación, las partículas son aglutinadas por
anti-VIH presente en el suero.
4. Al final del período de incubación, el resultado de las pruebas se puede leer a simple vista. Si se utilizan partículas de
gelatina, en que aparecen en color azulado. Si se utilizan partículas de látex, que aparecen de color blanco que se
puede ver sobre un fondo negro.
5. Un resultado reactivo aparece como una estera uniforme de partículas aglutinadas a través de la parte inferior de los pocillos. Un
resultado no reactivo aparece como un botón o un anillo de partículas no aglutinado, que se instalan en el centro de bien. Véase la figura
Detecta anti-HTV. Es rápido y sencillo y se basa en la técnica de ELISA / EIA. El antígeno del VIH, el péptido por lo general recombinante o
sintético, se inmoviliza en bien de membrana porosa o semi-porosa normalmente se establece en un pozo, en un casete de plástico que contiene la
almohadilla absorbente. La mayoría de los ensayos rápidos son especializados en la forma de un kit que tiene todo lo necesario para la prueba.
Método;
1. La solución de muestra de ensayo y tampón (proporcionado con el kit) se ponen en la membrana porosa y se dejó en remojo en.
Puede ser necesario pre-dilución de la muestra de ensayo. Esto se logra mediante la adición de gotas de diluyente y la muestra en
un vial adecuado. La muestra diluida es entonces directamente poner en la membrana porosa.
2. Se incuba durante 10-15 minutos. Durante este período la muestra pasa a través de la membrana y si
contiene anticuerpos anti-VIH, que se unirá al antígeno del VIH en la membrana.
3. La membrana se enjuaga con la solución tampón para eliminar los anticuerpos no unidos.
4. A continuación, se añade conjugado. La composición del conjugado varía entre ensayos. Algunos ensayos utilizan una
enzima conjugada anti-inmunoglobulina humana como en antiglobulina de tipo ELISA. Cuando se utiliza tal conjugado, una
etapa de lavado adicional y la adición de cromógeno se requiere para visualizar los resultados. Algunos ensayos utilizan
proteína A marcada con oro coloidal como el conjugado. Se unirá al anti-VIH presente y da un color rojo / púrpura.
5. El resultado final se lee visualmente y se compara con los resultados esperados descritos por el fabricante.
6. Aunque no es necesario un control, es una buena práctica para establecer un control negativo y un control positivo
débil.
157
Manual Técnico Transfusion Medicine
Nota: Las instrucciones proporcionadas por los fabricantes de kits de detección deben seguir estrictamente
para obtener resultados fiables.
útil para determinar con qué componentes virales los anticuerpos reaccionan. Es relativamente especializado y prueba costosa y no es
apropiado para el cribado de las donaciones de sangre. Ya no se recomienda como prueba confirmatoria de rutina. Western blot o
inmunotransferencia
Esta es la técnica ligado a enzimas immunoelectro de transferencia de blot (inmunotransferencia) y se utiliza para detectar humano
anti-VIH. Es la prueba de confirmación de elección. Detergente interrumpida viriones de VIH purificados se separan en varias proteínas
(antígenos) de acuerdo con su peso molecular relativo por electroforesis en un gel de poliacrilamida losa en presencia de dodecilsulfato de
sodio (SDS). Las proteínas del VIH separadas se transfirieron a una membrana de nitrocelulosa. Ellos conservan sus posiciones relativas
alcanzadas en la separación. La membrana de nitrocelulosa antígeno impregnado se corta a continuación en tiras, teniendo cada tira la
gama completa de las proteínas virales que fueron separados en el gel (figura
12.8)
Método:
• tiras de nitrocelulosa individuales se incuban con muestras de suero o plasma en los pocillos de la bandeja de incubación.
Los controles no reactivos y débilmente reactivos se incluyen con cada serie, sin importar el número de muestras de
ensayo.
• El fuerte control reactivo se utiliza para establecer criterios de reactividad de bandas y se incluye con la primera ejecución para
cada kit y no está incluido en ejecución posterior a menos que la tira está fuera de lugar. La figura 12.9 muestra bandas
VlH-específicas para el control fuertemente reactiva.
• Durante la incubación, si los anticuerpos del VIH están presentes en la muestra, que se unen con antígenos virales
unidos a la tira de nitrocelulosa.
• Al final de la incubación, los pocillos de la bandeja de plástico se aspiran y las tiras se lavan para eliminar el material
no unido.
• Anti-VIH unido a los antígenos del VIH en tiras se detecta por el anticuerpo de inmunoglobulina antihumana al
que la biotina se ha unido. La unión de este anticuerpo trazador a la
158
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
inmunoglobulina humana se detecta por la adición de un conjugado enzima-avidina, seguido por la aplicación de
sustrato. Este sustrato cambia de color en presencia de enzima y permanentemente las manchas de las tiras.
Ubicación o posición en la que los anticuerpos en la muestra se unen a antígeno viral en tiras indican si el anticuerpo es
específico para el antígeno viral o no.
interpretación de resultados
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-VIH en una muestra se determina por comparación de cada tira de nitrocelulosa de la
muestra de ensayo con las tiras utilizadas para los controles no reactivos y débilmente reactivos probados con la carrera, y la tira
utilizada para el control fuertemente reactivos probados una vez con el kit. Figura 12-9, indica las bandas en la tira se usa con el control
fuertemente positivo.
159
Manual Técnico Transfusion Medicine
• Un donante es considerado positivo para anti-VIH si bandas a la proteína p24 gag; proteína pol p 31 y env glicoproteína
gp 41 y gpl 60/120 están presentes.
• Recientemente criterio menos estricto pero igualmente específica están surgiendo, lo que requiere la presencia de
anticuerpos a al menos una de las proteínas gag (p 17, p 24, y p 55), una de las proteínas pol (p 31, p 51, p 66) y uno de
los glcoproteins env (gp 41, gp 120, y gp 160).
• Otras bandas que no cumplen con los criterios de resultados positivos se evalúan como "indeterminado" y son una nueva investigación en
una fecha posterior después de 3 a 6 meses.
• Si hay información de diagnóstico indicativos de la infección por VIH, el patrón blot puede interpretarse más liberalmente,
y se requieren bandas que representan sólo dos genes estructurales para una interpretación positiva.
encuentra durante la seroconversión en las personas expuestas a la infección por el VIH y desarrollar una respuesta inmunitaria
completa más adelante. Este patrón también se puede encontrar entre las personas que no tienen riesgo de infección por el VIH y no
desarrollan respuesta inmune completa con otros productos de genes de VIH después. Recomendaciones para el VIH 1 y 2 pruebas
Sera de todas las donaciones de sangre se analizan para determinar anti-HIV 1 & 2 por ELISA / EIA. Sera no reactivo en la primera
proyección se consideran como VIH negativo y se recomiendan para transfusión, mientras que un suero reactivo en la primera proyección
se considera VIH positivo y no se utiliza para la transfusión y se descarta.
Las pruebas confirmatorias son importantes para determinar cómo aconsejar a un donante de sangre saludable y si es o no puede ser notificado.
ELISA de detección
reactiva Repetir ELISA por duplicado Si uno No reactivo, donación es segura
o ambos Postive Si ambas negativas, para transfusión
VIH negativo
En la selección de las pruebas de anticuerpos del VIH para su uso, la primera kit ELISA debe tener la más alta sensibilidad, en tanto que para las
pruebas de repetición de kits de ELISA deben tener especificidad más alta que la primera. La OMS ha recomendado anti-HIV 1 & 2 de ensayo con
ELISA o ensayo de punto rápido.
160
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
La detección de antígeno de VIH ha muy limitado valor en servicios de transfusión de sangre, sin embargo, puede ser útil en las
siguientes condiciones:
• La detección de la infección por VIH durante el período de ventana antes de la seroconversión.
• La confirmación de la infección por VIH en niños nacidos de madres infectadas por el VIH.
• Puede ayudar a resolver los resultados indeterminados prueba de Western Blot.
• Para controlar a los pacientes infectados por el VIH en tratamiento antiviral.
161
Manual Técnico Transfusion Medicine
• Al final del periodo de incubación, ácido diluido (1 H 2 SO4) se añade a todos los pocillos para detener la reacción.
• Un color intenso significa una muestra de reactivo que tiene el VIH, mientras que falta de color significa un espécimen no reactivos
que no tienen el VIH.
• Los densites ópticas (valores de DO) de la solución en los pocillos son leídos por el lector de ELISA después de determinar
el valor de corte, y los resultados se determinan (Fig. 12,10). Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para el VIH
PCR es el ensayo más sensible para la detección de la infección por VIH. PCR detecta la infección por VIH antes de las pruebas para el
antígeno o anticuerpo por otros métodos y período de ventana así aún más acorta (tiempo entre la infección y la conversión sero). Esta prueba
depende de la amplificación del VIH integrado en el ADN de células infectadas. sistemas de reacción en cadena de polimerasa requieren varios
ciclos con una polimerasa termoestable a temperaturas cuidadosamente controladas y necesitan cebadores específicos presentes en las
plantillas para el ADN amplificado. La detección del producto de amplificación es por una sonda marcada en un ensayo de
inmunotransferencia. Este método requiere un control muy cuidadoso para asegurar que las reacciones positivas son específicos.
Las pruebas de PCR de rutina pueden tener sólo un pequeño impacto sobre la seguridad de la sangre con respecto al VIH, sin
embargo, el potencial para el cierre del período de ventana para la infección por VIH es significativo. La aplicación de la prueba de PCR de
rutina de sangre de los donantes requerirá desarrollo de sistemas automatizados que eliminarán el consumo de pasos necesarios para extraer
el ADN y para preparar muestras de tiempo.
epidemia asociada con el agua contaminada. La mayoría de transfusión asociada hepatitis son debidos a HBV o HCV. Virus de la
hepatitis A
La infección es generalmente el resultado de la propagación viral por alimentos o agua contaminados debido a modo fecal-oral de transmisión.
HAV está presente en la sangre durante un corto período de tiempo y no hay estado de portador crónico en seres humanos. El período de
incubación es de 15-40 días.
infección por el VHA transmitida por la transfusión ha ocurrido, pero es muy raro. Un brote de infección por VHA se ha informado en los
receptores de factor de coagulación disolvente tratada con detergente. La infección por transfusión de requerir que los donantes tiene la viremia y
el destinatario sea susceptible al virus. La viremia, si se produce, por lo general es BERIEF y en el momento de la enfermedad, cuando nadie va a
donar sangre. Anticuerpos contra el VHA regularmente aparece después de la infección y por lo tanto gran número de la población tiene
inmunidad. La rareza de la infección por el VHA después de la transfusión no quiere pruebas de rutina de los donantes.
162
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
Virus de la Hepatitis B
virus de la hepatitis B es en la familia de Hepadnaviridae. En 1945, era aficionado a los seres humanos por Blumberg y compañeros de
trabajo en el suero de un aborigen australiano, que llamaron antígeno Australia.
En humanos el virus es de 42 nm de diámetro que consiste en un núcleo de 28 nm con ADN circular de doble cadena y la ADN
polimerasa. El núcleo está rodeado por una proteína de recubrimiento HBsAg, que también se produce libre en el suero como 22 esferas
nm y 22 nm a 200 filamentos nm. El virión contiene otras dos proteínas; hepatitis Sé antígeno (HBeAg) y el antígeno del núcleo (HBcAg).
Tanto estos antígenos (proteínas) están asociados con el núcleo de la cápside del virión (Fig. 12-11).
antígeno HBc
soluble
• El contacto sexual
• transmisión neonatal o perinatal
• La transfusión de sangre o productos sanguíneos infectados. Los
• Anti-HBs se hace detectable después de HBsAg desaparecer lo que indica la recuperación de la enfermedad aguda. A veces
aparición de anti-HBs se retrasa por semanas y meses después de HBsAg se convierte en indetectable. Durante este período,
llamado 'ventana núcleo anticuerpo', anti-HBc puede ser el único marcador detectable de infección reciente HBV.
163
Manual técnico Transfusion Medicine
• Poco después de la infección y antes de los signos y síntomas clínicos o cambios bioquímicos en las funciones del hígado
produce, otros dos marcadores - HBeAg y anti-HBc son detectables en el suero de la persona infectada.
• Inicialmente, el anti-HBc IgM es, sin embargo, como aparece el progreso infección IgG anti-HBc y la posterior persiste en
las personas que se recuperan de la infección.
• HBeAg generalmente desaparece cuando el paciente entra en la fase convaleciente.
• En otras personas con infección crónica (persistencia de HBsAg durante más de 6 meses), se borra HBeAg y anti-HBe se
encuentra.
• En las personas que no desarrollan inmunidad al VHB, HBsAg, HBeAg y anti-HBc puede estar presente.
• Los individuos, que se recuperan de la infección, tendrán anti-HBs y / o anti-HBc en el suero. marcadores serológicos
Significado
HBsAg La infección activa, aguda o crónica
Anti-HBs La recuperación clínica, infección resuelta, la inmunidad a desarrollar
Anti HBc (IgM) infección aguda temprana
Anti- HBc (IgG) La infección activa o pasada (estado de portador)
HBeAg infección crónica o aguda grave
anti-HBe Resolución de la infección aguda, puede ser señal de secuelas tardías
164
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
1. Ponga volumen apropiado de la muestra de prueba y un volumen igual de controles positivos y negativos en los pocillos
de microplacas recubiertas con anti-HBs.
2. Incubar durante el período de tiempo correcto a temperatura definida.
3. Al final del periodo de incubación, los pocillos se lavan para eliminar el exceso de suero y secar los pozos tanto como sea
posible antes de la siguiente etapa del ensayo.
4. A continuación, añadir volumen apropiado de conjugado (unido a enzima anti-HBs anti-cuerpo) a cada pocillo. marcador de enzima
es por lo general peroxidasa de rábano picante.
5. Incubar durante el período de tiempo correcto a temperatura definida.
6. Después de la incubación, los pocillos se lavan y se preparan para el siguiente paso.
7. Añadir un volumen apropiado de sustrato cromógeno en los pozos.
8. Se incuba la placa en la oscuridad durante correcto periodo de tiempo, el desarrollo del color sugiere la presencia de
HBsAg, y no o poco color sugiere ausencia de HBsAg.
9. Los resultados se pueden leer visualmente o por lector de ELISA. Radio
1. En la primera etapa de HBsAg en el suero de ensayo se une al anticuerpo en fase sólida. Después de incubación las
proteínas no unidas extraños y tluid en la prueba se retira por aspiración y lavado.
2. En el segundo yodo radioactivo etapa (1 l25) - Se añade anticuerpo anti-HBs vinculado. Después de la incubación, el
anticuerpo yodo ligado no unido se elimina por aspiración y lavado.
165
Manual Técnico Transfusion Medicine
3. Medir la cantidad de la envolvente de yodo ligado anti-HBs con contador gamma. Calcula el
media de los controles negativos.
Un resultado positivo es por lo general cualquier valor más de 2 a 2,5 veces del recuento medio de control negativo.
reacciones falsos positivos para HBsAg pueden ocurrir con EIA o RIA. Los resultados pueden ser confirmados por repetición o prueba de
neutralización de confirmación.
Figura 12.14: secuencia esquemática para la detección de HBsAg por RIA. Medidas de seguridad
• Mesa de trabajo debe limpiarse después de la prueba. Eliminar derrames con hisopos empapadas en 1,0 solución de hipoclorito por
ciento inmediatamente.
• En el caso de la inoculación accidental de sangre positivo HBsAg o la secreción en los individuos, la inyección
profiláctico de HBIG debe ser dada.
El tipo VHC, VHD, VHE y VHG se han identificado, de entre los no - A, no B (NANB) grupo de virus de la hepatitis, sin
embargo, todavía hay algunos tipos de hepatitis que no presentan anticuerpos frente a cualquiera de estos tipos
conocidos y de ahí el término no-a, no-B (NANB) todavía está en uso. Buscar aún más y nuevos virus hepatotropos
continúa. Hepatitis C (VHC)
Hepatitis C (VHC) es la causa más común de poste transfusión no A, hepatitis no-B en todo el mundo. La
países desarrollados rangos de 0,4 a 2%. Sin embargo, en Egipto es tan alta como 14%. La prevalencia de HCV en donantes
de sangre de la India no ha habido estudios ampliamente pero según algunos informes disponibles la prevalencia de anti VHC
varía forma 0,6% a 5,2% en donantes voluntarios / recambio.
75% - 80% de la infección por VHC se informa de progresar a una infección crónica de los cuales 10% - 20% puede progresar a
cirrosis y carcinoma hepatocelular.
El período de incubación promedio es de 6 - 7 semanas, puede ser tan menos como 2 semanas o tanto como 26 semanas, la enfermedad aguda
(ictericia) es leve.
acciones VHC relación con los flavivirus. Estructura del virus de la hepatitis C (HCV) ha sido recientemente identificado por
técnicas de clonación. El virus es un solo virus ARN con envuelta Standed, 50-60 mm de diámetro con un genoma que
contiene aproximadamente 9500 bases que codifican para aproximadamente 3000 aminoácidos. El genoma consta de un
muy conservadas región no codificante 5' (NCR), que se utiliza generalmente para la amplificación PCR y tienen funciones
reguladoras. Downsteam a la región no codificante son las regiones que codifican para los elementos estructurales,
incluyendo el núcleo o de la nucleocápside (C) y la envoltura (El, E2 / NSI), es actualmente claro si NS1 es aparte de la
región de la cubierta o el primer gen no estructural . El extremo 5' de E2 / NSI contiene una región hipervariable (HV) que
muta rápidamente y probablemente juega un papel clave en la capacidad del virus para escapar de la neutralización.
El clon inicial descubierto era de la región NS 4, la proteína derivada fue designado 5-1-1. Esto se expande para
formar el antígeno cl00-3, la base del ensayo EIA anti-HCV primera generación.
ensayo de segunda generación EIA añadió el antígeno y antígeno de núcleo de c33c c22 de la región NS3. Estos antígenos
aumentaron la sensibilidad del segundo ensayo de generación en alrededor de 20% en el
ensayo de primera generación.
Figura 12.15: genoma propuesta de HCV: equivalentes funcionales y los principales antígenos
utilizado en el ensayo de detección de anticuerpos.
167
Manual Técnico Transfusion Medicine
ensayo de tercera generación EIA añade una proteína NS5 y reconifigures algunos de los antígenos anteriores. Ahora tiene péptidos
sintéticos que ofrecen la ventaja de minimizar la incidencia de reacciones no específicas. Los EIA de tercera generación sólo tienen
beneficios adicionales en la prevención de enfermedades.
Instrucciones dadas para los métodos por los fabricantes de los kits deben ser estrictamente. Debido al problema de no especificidad,
es importante confirmar la reactividad EIA con un ensayo suplementario, un ensayo de inmunotransferencia recombinante (RIBA) que
muestra los epítopos clave en una forma lineal sobre una tira de nitrocelulosa. Ahora en RIBA las proteínas recombinantes C22-3 y
cl00-3 se sustituyen con péptidos sintéticos que representan sólo una parte de las respectivas regiones de codificación y sustituyendo
5-1-1 antígeno con NS5 recombinante. Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para el VHC
La detección de la infección por VHC durante la fase temprana de la infección es posible por la detección de ARN-VHC por diversas técnicas
de amplificación de ácidos nucleicos técnicas de biología molecular. la amplificación por PCR puede detectar bajo nivel de ARN de VHC en el
suero. Ensayo de ARN de VHC es una manera fiable de lo que demuestra que la infección de hepatitis C está presente y es la test.Testing
más spefific de ARN de VHC por PCR es útil en:
• En el paciente imunodepressed.
• En los pacientes que tienen trasplante de órganos recientemente.
• En ensayo de inmunotransferencia recombinante indeterminado.
• En la infección aguda como viremia VHC ocurre mucho antes del desarrollo de anti-HCV. Ciertas técnicas de detección
rápida de anticuerpos tales como prueba immunochromatic (ITC) están también disponibles.
Antes del desarrollo de marcadores específicos determinados marcadores indirectos, es decir, determinación de aminotransferasa en
suero de alanina (ALT) y los anticuerpos contra el antígeno central de la hepatitis (anti-HBc) se han utilizado para identificar los
donantes de alto riesgo para la transmisión de la hepatitis NANB (VHC). Aunque los marcadores sustitutos jugaron un papel
importante en la prevención de la hepatitis C antes de la introducción de ensayos específicos de HCV pero actualmente el valor de
estas pruebas no son concluyentes y controvertido. En un estudio publicado de la India se encontró muy poca correlación entre los
marcadores indirectos es decir (anti-HBc y ALT) y anti - VHC donantes reactivos. Es demasiado pronto para comentar si la hepatitis
C (VHC) es la única causa de hepatitis NANB parenteral como el ensayo de anticuerpos de HCV actual no puede detectar el 100%
de la hepatitis NANB.
comunidad esporádica o adquirida hepatitis NANB debido a virus de la hepatitis C (HCV), sin antecedentes de exposición
También se conoce como hepatitis delta. Es causada por virus ARN defectuoso que es incapaz de producir su propia capa de proteína y por lo
tanto a sí mismo abrigos con antígeno de superficie de HBV. El virus delta es dependiente preexistente o concomitante infección por el VHB para
su propagación. Co-infección causa la hepatitis viral aguda, que a menudo se convierte fulminante y es normalmente fatal, mientras que la
superinfección causa la hepatitis aguda progresa a hepatitis activa crónica y cirrosis en 75% de los portadores.
168
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
Delta hepatitis tiene modo parenteral de transmisión y por lo general sigue la infección por VHB. Aunque las pruebas para el antígeno delta
y el anticuerpo existen, pero no se deben utilizar en el cribado de donantes de sangre como todas las infecciones con virus delta son positivos
para HBsAg. Por lo tanto las pruebas de rutina para HBsAg eliminará el riesgo de su transmisión. HEPATITIS G VIRUS (HGV)
virus de la hepatitis G es un virus de ARN con envoltura y pertenece a la familia flavivridae. El virus fue descubierto en 1995. El
genoma del virus es similar a la de HCV con el que comparte una homología del 25% a nivel de nucleótidos. El Permiso aparece
menos variable aunque se han descrito variantes. HGV se replica en células de sangre periférica, pero su replicación en el hígado es
todavía cuestionable. El modo de propagación de HGV es casi igual que el VHC. El HGV se puede detectar en el suero por la
tecnología de ácidos nucleicos (PCR). Recientemente un inmuno-ensayo ha sido desarrollado para detectar anticuerpos contra HGV.
La prevalencia de HGV en la población de donantes de sangre haciendo prueba de anticuerpos en los países desarrollados
oscila entre 1 a 5%, pero la detección de anticuerpos en general indica la recuperación de una infección y, probablemente, la
CMV es conocida por estar realizado en los leucocitos, por lo tanto, componentes de la sangre que contienen células blancas de la sangre son
más propensos a transmitir la infección por CMV. componentes derivados de plasma y derivados no son probablemente infecciosa para CMV.
Transmitida por la transfusión CMV puede causar una enfermedad grave en el bebé prematuro seronegativos de bajo peso al nacer y los
pacientes inmunodeprimidos seronegativos
por ejemplo, los receptores de trasplante de médula ósea o pacientes con infction VIH. Desde hace más de un 50-80% de los adultos en los países
desarrollados y más del 90% en los países subdesarrollados tienen anticuerpos frente al CMV, por lo que no es práctico o conveniente examinar a
los donantes de sangre para la infección por CMV. Sin embargo, los servicios de transfusión de sangre deben tener el panel de donantes
negativos CMV. En los pacientes seronegativos grupo de alto riesgo, es aconsejable utilizar la sangre negativo de CMV o utilizar leucocitos de la
• aglutinación de látex
• inmunoensayo enzimático
• Fijación del complemento
La prueba de aglutinación de látex se utiliza sobre todo en los centros de transfusión de sangre debido a que es simple y rápida.
La importancia de HTLV-11 no está claro. Por lo general se asocia con el abuso de drogas por vía intravenosa y se ha encontrado en algunos
casos de leucemia de células pilosas.
la infección por HTLV-1 puede transmitirse por la sangre, lo que ha causado preocupación en aquellas partes del mundo donde el
virus es frecuente, sobre todo en algunos países en el Pacífico occidental y el
169
Manual Técnico Transfusion Medicine
cuenca del Caribe. Las encuestas realizadas en Europa y América del Norte indican que HTLA-1 infección es muy rara.
Transmisión
• Se transmite con la transfusión de componentes celulares de la sangre. Después de un almacenamiento refrigerado durante 10 días
o más, los glóbulos rojos de un donante infectado son mucho menos propensos a causar sero-conversión
la selección de donantes debe considerarse en aquellos países en los que el HTLV-1 es endémica. estudios epidemiológicos preliminares
son por lo tanto es necesario (OMS, 1992, Directrices para la organización de un Servicio de Transfusión de Sangre).
técnicas de ELISA se utilizan para las técnicas de precipitación radioinmunes cribado HTLV-1 anticuerpos, y Western blot,
inmunofluorescencia, o se utilizan para pruebas de confirmación. Es difícil diferenciar entre HTLV-1 y HTLV-11 a menos técnicas
Las bacterias consisten en células distintas que poseen paredes celulares, y tienen una estructura muy simple y carecen de un núcleo verdadero.
Las bacterias pueden tener cápsulas que a menudo son importantes en la respuesta inmune. Ejemplo de bacterias comunes que son conocidos
agente etiológico de la sífilis es Treponema pallidum. La sangre y sus componentes pueden transmitir la sífilis. El período de
incubación para la sífilis transmitida transfusión es de 1 a 4 meses, el destinatario de la sangre que presenta los signos y
síntomas de la sífilis secundaria.
la sífilis transmitida por la transfusión no es un peligro importante de la terapia de transfusión moderna, sus principales razones son:
• Las espiroquetas no sobreviven en la sangre tratada con citrato se almacena a 4 ° C durante 72 horas.
• Ahora se recoge la sangre en su mayoría de los donantes voluntarios y las personas sexualmente promiscuas están excluidos
de la donación de sangre.
• La mayoría de los pacientes que necesitan transfusiones de sangre o de sus componentes reciben antibióticos terapia debido a su
condición clínica.
• El uso generalizado de la penicilina y otros antibióticos para el tratamiento de la sífilis y su portador podría explicar la rareza de los
Espiroquetemia por lo general es común en las primeras etapas durante la invasión de los ganglios linfáticos. Las pruebas de detección utilizados
para los donantes de sangre a menudo son negativos en la sífilis temprana, cuando las espiroquetas pueden transmitirse por transfusión de
sangre. Sólo el 25% de los pacientes con sífilis primaria tiene una prueba serológica reactiva para sífilis (STS). y el resto no se conviertan en
positivo hasta la semana 4" los' después de la
170
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
aparición de la sífilis primaria. En el momento en que la persona desarrolla un STS positivos, el espiroquetemia normalmente ha despejado.
Además, una gran proporción de las personas sanas tienen reacciones positivas falsas biológicos aún no tienen espiroquetas
circulantes. Puede ser debido a las infecciones virales, la inmunización, lupus eritematoso y disproteinemias.
La prevención de la transmisión espiroqueta no está bien logra mediante la prueba STS. En cualquier caso se considera seguro para probar
la donación de sangre para la sífilis debido a las siguientes razones:
• Hay posibilidad de transmisión de la sífilis.
• La demanda de la sangre fresca de transfusión de intercambio, y plaquetas.
• La detección de espiroquetas ayuda a excluir a los donantes que están en el grupo de alto riesgo de infecciones por VIH y VHB.
pruebas
de prueba no específico:
La prueba más comúnmente utilizada en la selección de donantes de sangre son pruebas no específicas debido a que son simple, rápida
y económica, son:
• Laboratorio de Investigación de Enfermedades venéreas (VDRL)
• VDRL (RPR) Las pruebas
específicas:
Estas pruebas son principalmente pruebas confirmatorias y tienen largos procedimientos. Ellos no son adecuados para la detección rutinaria de
los donantes de sangre. Las pruebas son:
• Treponema pallidum prueba de hemaglutinación (TPHA)
• prueba de absorción de anticuerpos treponémicos fluorescentes (FTA-ABS)
• Treponema pallidum prueba de inmovilización (TPI)
• Inmunoensayo enzimático
PROTOZOARIOS
Los protozoos son organismos unicelulares. Tienen una estructura celular bien definida con un núcleo claro y otros orgánulos. Una célula
típica está encerrado por una membrana citoplasmática. Esto puede ser cubierto en una capa citoplasmática exterior. Las proteínas presentes
en las membranas son importantes en la respuesta inmune.
Los ejemplos de infecciones por protozoos comunes, que se pueden transmitir debido a la transfusión de sangre son especies de Plasmodium.
Malaria
171
Manual Técnico Transfusion Medicine
Sangre infectada con parásitos de la malaria también puede transmitir la infección. la malaria transmitida por la transfusión puede llegar a ser
evidente una semana a varios meses después de la transfusión de sangre infectada. El período de incubación de Plasmodium vivax y P.
falciparum es más corto por ejemplo, una semana a un mes, mientras que la de P. malariae es la más larga por ejemplo, muchos meses.
parásitos de la malaria sobrevive durante al menos una semana a 4 ° C en enteros concentrados sanguíneos y las células
rojas, y al menos durante una semana a temperatura ambiente en plaquetas. Las pruebas de detección para la malaria
incluyendo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Ninguno de los métodos anteriores, excepto el examen microscópico
Dado que no existe un método apropiado para la detección de parásitos de la malaria en la donación de sangre, se ha sugerido
que la terapia de la quimioprofilaxis para la malaria se debe dar a todos los receptores de sangre en áreas altamente endimic.
inactivación viral
Con la aparición del VIH / SIDA hay una gran demanda de sangre y productos sanguíneos seguros garantizados. Hoy en día existe rigurosa
selección de sangre para prevenir la transmisión de la infección transmitida por la sangre, la transfusión de productos sanguíneos ya han
logrado un alto nivel de seguridad. La viremia "período ventana" puede reducirse aún más mediante el cribado de la sangre donada para
métodos de prueba de ácidos nucleicos. De este modo reducir aún más el riesgo y aumentar el ya elevado costo de las pruebas. MÉTODOS
DE aclaramiento viral
están siendo probado varios métodos para eliminar o inactivar virus que pueden estar presentes en las mezclas de plasma de la fuente o
donaciones de plasma recuperadas. Estos pasos podrían dividirse en dos grandes categorías: la eliminación, o de partición, es la
separación física de los virus o partículas virales de la sangre y los productos sanguíneos; y la inactivación, que destruye el virus de manera
que los fragmentos virales restantes carecen de la estructura y los componentes necesarios para infectar a un individuo que recibe el
producto de sangre o sangre.
procesos de eliminación incluyen la filtración, cromatografía de afinidad, cromatografía de intercambio iónico, y fraccionamiento
polietilenglicol. La inactivación de virus se ha intentado por calentamiento.
Además, algunos procesos, como los resultados de fraccionamiento de etanol, tanto en la eliminación e inactivación de los virus. Por
último, una serie de nuevos métodos están en desarrollo, tales como la irradiación, fotoinactivación y el tratamiento con una variedad de
productos químicos. Varias de estas nuevas técnicas
172
Transfussion Blood enfermedades de transmisión
han sido incorporados en la producción de productos de investigación. Con el fin de ser eficaz, las técnicas de inactivación viral deben
destruir al menos un elemento viral esencial para la replicación. técnicas Fotosensibilizados utilizar la luz - colorantes activado que son
irradiados, haciendo que los tintes para convertir a las moléculas que pueden alterar de ADN o de membrana lipoproteínas. El tratamiento
con calor desnaturaliza las proteínas virales y ácidos nucleicos, representación virus incapaz de replicación. procesos de irradiación pueden
destruir los ácidos nucleicos virales mediante la inducción de roturas y vínculos. técnicas de detergentes solventes destruyen la envoltura
viral en lípidos - virus envueltos.
Ultra Violeta (UV) inactivación era uno de los método pensado para ser útil para este propósito, como la mayoría de los virus son muy
sensibles a los rayos UV, sin embargo, la corriente de opinión de los expertos es que la inactivación viral suficiente para que el propósito no es
factible sin nivel intolerable de dañar los diferentes componentes de la sangre.
la inactivación fotoquímica de los virus en los concentrados de plaquetas mediante el uso de novela psoraleno y largo - longitud
luz UV de onda, reduce significativamente la carga viral, pero no puede ser invocado por la eliminación total. Este proceso se basa en la
reacción fotoquímica de novela psoraleno (S - 59) con ácido nucleico, tras la iluminación con luz de onda larga longitud UV (UVA, 320 -
400 nm).
Recientemente (Nov. 2000) Gambro BCT anunció la inactivación de patógenos en productos sanguíneos, tales como glóbulos rojos
empaquetados por riboflavina y luz UV. La riboflavina puede inactivar patógenos en todos los tres principales componentes de la sangre que
corresponde a glóbulos rojos, plaquetas y plasma fresco congelado.
173
13
La enfermedad
hemolítica del recién
nacido (HDN)
Introducción
enfermedad hemolítica del recién nacido y el feto se debe a la destrucción prematura de los glóbulos rojos del feto en el útero y los recién
nacidos en el período neonatal temprana después del parto. La destrucción de glóbulos rojos se provoca más comúnmente por los
anticuerpos IgG producidos por la madre debido a la incompatibilidad de grupo sanguíneo entre la madre y el feto. La madre puede ser
estimulado para formar anticuerpos IgG por el embarazo anterior o transfusión, y en pequeño número durante el embarazo en sí.
Las causas menos comunes de la enfermedad hemolítica del recién nacido se deben a alteraciones de color rojo células como en la talasemia,
la deficiencia de las enzimas glucolíticas y esferocitosis hereditaria, o infecciones neonatales.
HDN también puede ser debido a la prematuridad y la ictericia fisiológica debido a insuficiente producción de transferasas glucuronil.
Servicio de Transfusión Sanguínea se refiere principalmente a la HDN causada por los anticuerpos maternos y que se discutirá en
detalle.
La causa más común de HDN suficientemente grave como para requerir tratamiento es la incompatibilidad de sistema Rh y en el 95%
de estos casos el antígeno D es responsable. Raramente c. antígenos C y E han sido implicados.
175
Manual Técnico Transfusion Medicine
Mecanismo de la enfermedad
enfermedad hemolítica del recién nacido y el feto es causada por la destrucción de los glóbulos rojos del feto o recién nacido por anticuerpos
IgG producidos por la madre. Solamente los anticuerpos de la clase IgG immunoglbulin transferir activamente a través de la placenta, otras
clases como IgA e IgM no lo hacen. En HDN, los anticuerpos de la madre actúan contra los antígenos de las células rojas fetales que se
Anemia
La destrucción de los glóbulos rojos fetales y los anemia resultantes estimulan la médula ósea fetal t producir glóbulos rojos a un ritmo
acelerado, incluso hasta el punto de que immature glóbulos rojos (eritroblastos se liberan en la circulación. El fetal término eritroblastosis
se utiliza en este hallazgo. Cuando la médula ósea no puede producir suficientes glóbulos rojos para mantenerse al día con la tasa de
glóbulos rojos destrucción eritropoyesis fuera de la médula ósea se incrementa en el bazo y el hígado. el hígado y splee se agrandan, lo
que resulta en la hipertensión portal y daño hepatocelular. la anemia severa a lo largo de con hipoalbuminemia causar insuficiencia
cardíaca con efusiones edem generalizadas, y ascitis conocida como hidropesía foetalis.
El proceso de destrucción de los glóbulos rojos que pasa en el recién nacido. siempre y cuando los anticuerpos maternos permanecen en la
circulación del bebé durante varios días a semanas después del parto. hiperbilirrubinemia
La continua destrucción de los glóbulos rojos del feto y para niños libera grandes cantidades de bilirrubina para su eliminación durante tanto
intrauterino y período neonatal. Esta bilirrubina es la bilirrubina indirecta
176
La enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN)
Esta bilirrubina indirecta atraviesa la placenta y conjugados en el hígado materno para dirigir la bilirrubina, la bilirrubina conjugada
se excreta por la madre. Los niveles de bilirrubina total pueden ser elevados en el líquido amniótico. Al nacer, los bebés son
anémicos, pero no pueden ictericia.
Sin embargo después de su nacimiento, el niño no es capaz de conjugar la bilirrubina de manera eficiente especialmente en bebés
prematuros debido a la falta de glucuronil transferasa para convertir indirecta para dirigir la bilirrubina, y se desarrolla ictericia (ictericia neonatal
grave). Cuando el nivel de bilirrubina excede a la capacidad de unión de la albúmina, la bilirrubina no conjugada puede llegar a niveles tóxicos
(más de 18 g / dl) al cerebro del lactante. Si no se trata, puede causar ictericia nuclear o un daño permanente en el cerebro. Los cambios
tisulares
La destrucción de glóbulos rojos en el bazo y el aumento de la actividad eritropoyética en el hígado y el bazo causa el
agrandamiento del hígado y el bazo en HDN. RH (D) la enfermedad hemolítica del recién nacido
Anti-Rh (D) anticuerpos IgG son la causa principal de graves HDN. Iso-inmunización de Rh (D) negativo madre puede ser el resultado de
Rh (D) positivo de embarazo o transfusión de Rh (D) positivo de sangre. Factores que influyen en la producción de Rh-anticuerpos son:
La cantidad de células rojas fetales que atraviesan la placenta en la circulación materna en el tercer trimestre del embarazo es generalmente
pequeña e insuficiente para provocar la producción de anticuerpos. Además, los niveles de esteroides elevados y otros factores, asociados con
el embarazo pueden suprimir la respuesta primaria de la madre. Por lo general, el primer feto Rh incompatible no se ve afectada.
En el parto, una hemorragia transplacentaria no es infrecuente. La cantidad de sangre fetal de entrar en la circulación
materna varía desde menos de 1 ml a 10 ml o más. El Rh (D) de glóbulos rojos fetales positivos estimular la producción de anti-Rh
(D) en aproximadamente 5-9% de estos Rh (D) negativas madres. El anticuerpo aparece en la sangre de la madre dentro de los 6
meses de la entrega y 7-12% de las madres sensibilizarse pero no tienen niveles demostrables de anticuerpos hasta que tienen
estímulo secundario durante un embarazo posterior.
Cuando se produce embarazo con un Rh segunda (D) feto positivo, las células rojas fetales de cruzar la placenta de
aproximadamente el 24 º semana de gestación o bien estimular la madre sensibilizada para producir anticuerpos o estimular el anticuerpo
existente a un título mayor. Esta es la respuesta secundaria y por lo tanto, sólo una pequeña cantidad de glóbulos rojos son capaces de
producir anticuerpo suficiente para causar HDN. El anti-Rh (D) formado es IgG, por lo que es capaz de atravesar la placenta en la
circulación fetal, donde se combina con Rh fetal (D) células rojas positivos, lo que conduce a su destrucción.
2. paridad
Incidencia de sensibilizado
1 Para II Para III Para Para IV V Para y por encima de media
- 1:50 1:29 1:20 1: 9 01:33
Alrededor del 70% de los casos se enfrentan a HDN en el embarazo II y III. Por lo general, el primer embarazo no se ve afectada.
177
Manual Técnico Transfusion Medicine
La incompatibilidad ABO entre la madre y el feto ofrece cierta protección al feto con Rh-HDN. Se cree que los anticuerpos de la
ABO materna existente alo destruyen los Rh (D) las células rojas fetales positivos de inmediato al entrar en la circulación
materna antes de que puedan sensibilizar a la madre. Una vez que la madre se inmunizan contra el antígeno Rh, se pierde este
efecto protector. (Ver tabla 13.1).
Tabla: 13.1: grupo ABO de la madre y el bebé que son incompatibles. Madre
Bebé
O A o B (el bebé no puede ser AB si la madre es del grupo O)
UNA BorAB
segundo AorAB
5. la interrupción médica del embarazo (MTP) o Aborto Involuntario también pueden inmunizar a la madre Rh negativo.
Rh positivo transfusión de sangre puede inmunizar a una mujer Rh negativa; su significado se ha discutido anteriormente.
178
Enfermedades Hemotyac del recién nacido (HDN)
Agrupación (III)
ABO y agrupación Rh incluyendo D u agrupamiento
visita ya que algunos anticuerpos IgG (es decir, Kell, Duffy, Kidd, Ss) que pueden causar HDN se pueden encontrar en Rh (D) positivas. Un
régimen de muestreo se da a continuación: Etapa del Embarazo El embarazo precoz 28 º 34-36 semanas º semana
prueba de detección de anticuerpos IgG (es) debe hacerse con al menos dos panel de células de detección grupo O individuo (véase el
capítulo 9 sobre el cribado e identificación de anticuerpos) por prueba de antiglobulina indirecta, utilizando el suero poliespecífico antiglobulina
y la técnica enzimática de dos etapas. Este último tiene una mayor sensibilidad para la detección de anticuerpos Rh.
(V) si se se detectan anticuerpo (s) / en cualquier etapa entonces ser hecho lo siguiente:
(una) Repetir título de cada mes: La gravedad de la enfermedad es generalmente, aunque no siempre,
correlacionado con el título de los anticuerpos. A título de 1:32 o superior y un título ascendente en pruebas repetidas es
significativa y es una indicación para aminocentesis. Para la técnica de titeration de anticuerpo ver capítulo de métodos
especiales. (segundo)
Identificar el anticuerpo (s) con 8-10 panel de células (véase el capítulo 9) (c) Llevar
a cabo Rh fenotipo confirmar el anticuerpo implicado. (Vi) Posible genotipo Rh del padre
los glóbulos rojos del padre se prueban con anti-D, -C, -E, -c y -e para determinar Rh fenotipo. A partir de estos datos, el
genotipo probable puede ser estimado. Si el padre es homocigoto o heterocigoto para D no se puede determinar con certeza si
no tiene un hijo vivo negativo Rh (D). Sin embargo, para los antígenos C y E, el verdadero genotipo puede ser determined.If el
padre es heterocigoto existe una probabilidad del 50% de los niños no se ven afectados con Rh-HDN. (Vii) medicado
El resultado de ADCC se correlaciona bien con la gravedad de HDN. Un alto ADCC indica seria HDN mientras que si el resultado
sigue siendo baja hasta el final del embarazo, el bebé está ligeramente afectada o no se ve afectada (para más información se
El líquido amniótico es casi incoloro, pero en caso de que el bebé tiene un proceso hemolítico grave es de color amarillo brillante
debido a la bilirrubina. la concentración de bilirrubina amniótico se puede estimar mediante la prueba espectrofotométrica y es
extremadamente valiosa para predecir el grado del proceso hemolítico en el embarazo y la severidad de HDN. Las principales
indicaciones de la amniocentesis son:
179
Manual Técnico Transfusion Medicine
(una) El litro de anticuerpos IgG maternas por IAT es 01:32 o superior o un título ascendente en
repetir la prueba por cerca de 28 semanas de gestación; (segundo) antecedentes obstétricos de nacimiento, aún foetalis
hydrop o muerte neonatal en Rh (D)
madres negativas.
La amniocentesis se realiza generalmente entre el 28 lh - 32 Dakota del Norte semana de embarazo. También se puede hacer antes. La
amniocentesis se puede repetir después de 2 semanas. Dos muestras de líquido amniótico son útiles para verificar los resultados y establecer si la
densidad óptica es constante, creciente o decreciente. La densidad óptica de líquido amniótico (a 450-460 nm) en el embarazo normal es de
aproximadamente 0,05 en el 30 lh semana, cayendo a alrededor de 0,02 a término. La caída se debe probablemente a la disminución de la
concentración de albúmina en el líquido amniótico. La caída también está presente en los lactantes que tienen HDN. La densidad óptica a 450 nm
varía de acuerdo con el período de gestación. Si la densidad óptica a 450 nm se encuentra en la zona inferior, el bebé no se verá afectada o
puede tener una enfermedad leve. Un patrón-zona media sugiere que el bebé probablemente se efectuará moderadamente, y uno debe estar
preparado para una transfusión de intercambio después de la entrega.
Fig. 13.3
Enfermedades Hemotyac del recién nacido <w>
Procedimiento
La amniocentesis se realiza bajo ultrasonido para encontrar una ventana libre de la placenta para la inserción de la aguja a través de la pared
abdominal y el útero en la cavidad uterina. Por lo general se realiza en 28" 1 a 32 Dakota del Norte semana de embarazo; También se puede hacer antes.
El líquido amniótico de aspiración se analiza espectrofotométricamente, y la densidad óptica (DO) se midió a longitud de onda
diferente en un intervalo de 400-600 nm. En la normal, se obtiene una curva suave mientras que en HDN un pico a 450-460 nm
sugiere aumento en los niveles de bilirrubina de líquidos amnióticos. (Fig 13.3) madurez fetal
Una determinación de lecitina / esfingomielina (L / S) relación en el líquido amniótico puede ser valiosa en la predicción de la madurez de los
pulmones fetales y por tanto la capacidad del feto para sobrevivir después de un parto prematuro. Una relación L / S de menos de 2,0 / 1,0 indica
pueden ser necesarios la inmadurez pulmonar y transfusión intrauterina.
La condición fetal puede ser evaluado por ecografía. Esto ha reemplazado aminography. Investigación de
nuevos BORN
Las investigaciones de muestras de sangre del cordón umbilical de la madre Rh negativo juegan un papel importante en la gestión de HDN. Una
muestra de sangre venosa tomada del bebé después del nacimiento (incluso 30 min) es mucho menos valioso que las muestras de sangre de
cordón en la evaluación de la gravedad de HDN. muestras de sangre de cordón umbilical deben ser obtenidos desde el lado materno del cable
umblical después de que se divide, mediante la inserción de una aguja unida a una jeringa en la vena umbilical. Uno muestras deben tenerse en
anti-coagulante, EDTA (EDTA LMG en lml). Se utiliza para pruebas ABO y Rh, prueba de antiglobulina y para medir el valor de hemoglobina. La
segunda muestra se toma en un tubo de llanura seca; y el suero se separa que se utiliza para la determinación de bilirrubina y para el cribado
de los anticuerpos.
ABO del recién nacido se realiza sólo por las células de agrupación porque aloanticuerpos en la sangre del cordón umbilical son de origen
materno. Los glóbulos rojos se deben lavar 4-5 veces para evitar resultados falsos positivos debido a la gelatina de Wharton. Agrupación Rh
Accurate agrupación Rh puede ser difícil si los glóbulos rojos están fuertemente recubiertas con anticuerpos IgG. Cualquiera de resultados falsos
positivos o falsos negativos puede que se produce.
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Manual Técnico Transfusion Medicine
reacción.
El problema puede ser resuelto por
• utilizando células se lavaron 4-5 veces en solución salina
• elución suave de anticuerpo seguido de agrupación (D) de repetición Rh.
• utilizando reactivos diluyente como control. Si hay aglutinación en el tubo de control, solución salina o suero anti-D modificados
químicamente se pueden utilizar para determinar el grupo Rh (D). resultados falsos negativos o débiles-positivos: resultados positivos
negativos o débiles veces falsas se producen con solución salina anti-D cuando el recién nacido es Rh positivo y las células rojas están
totalmente recubiertas con maternal anti-D que no hay sitios D están disponibles para reaccionar con el suero reactivo. Esto se debe
sospechar cuando la madre es Rh negativo inmunizado y células del bebé dan un fuerte DAT positivo. Maternal anti-D se puede retirar de
estas células por elución de calor (véase el capítulo sobre Métodos especiales) y la prueba de Rh se repite. Directa prueba de antiglobulina
(DAT)
DAT generalmente da buenos resultados positivos en HDN debido a anti-D o anticuerpos para otros antígenos de células rojas; Las reacciones son
mucho más débil o negativo en HDN debido a la ABO. Si la DAT es positivo y el suero materno tiene una prueba de detección de anticuerpos
negativo, la sospecha cae sobre ABO-HDN o HDN debido a anticuerpo contra un antígeno de baja incidencia no está presente en el cribado panel
El anticuerpo Rh materna puede o no puede ser encontrado en el suero del bebé, sin embargo, la identificación de anticuerpo puede también ser
hemoglobina sangre del cordón umbilical se correlaciona bien con la gravedad clínica de HDN. El nivel de hemoglobina espinal (Tablel3.2) sirve
como una guía para evaluar la gravedad de HDN. la sangre del cordón normal Hb es 18.6-
19,6 g / dl)
Más de 14 uneffected
182
Cord Blood Bilirrubina
(Bilirrubina espinal normal es 0,7 a 3,1 mg / dl)
También hay una correlación entre la concentración de bilirrubina sangre del cordón umbilical y la gravedad de HDN pero es menos cerca de la
hemoglobina espinal. La concentración cable de bilirrubina en sangre es valiosa para evaluar la gravedad de la enfermedad cuando el valor de Hb
está dentro de límites normales. Cable de bilirrubina en sangre por encima de 4 mg / dl es generalmente sugestivo de enfermedad muy grave. los
niveles de bilirrubina pico suele llegar en el tercer o cuarto día de vida.
Los glóbulos rojos empaquetados de grupo O Rh (D) negativo se dan y que debe ser menos de cinco días de edad, de leucocitos agota y
se irradiaron (preferiblemente) y compatible con la sangre de la madre. El volumen de glóbulos rojos para la transfusión se calcula
utilizando la fórmula: (edad de gestación en semanas -
20) xl0ml. Leucocitos hematíes pobres que han sido irradiados reducirá la posibilidad de que la madre el desarrollo de glóbulos
blancos o plaquetas anticuerpos, e incluso enfermedad injerto contra huésped en el feto.
(B) la transfusión intravascular (TIV): transfusión intravascular directa de compatibles irradiadas, leucocitos hematíes pobres a través
de la vena del cordón umblical bajo foetescopic o un control de ultrasonido es un procedimiento mejor que IPT en los bebés que
necesitan transfusiones antes-25 semanas de gestación y se anemia severa.
Los glóbulos rojos suspendidos en Adsol o SAGM no deben utilizarse para la transfusión para el feto en el útero.
2. inducción prematura del trabajo: La mayoría de los pregnacies de alto riesgo se terminan de forma selectiva después de 34 semanas de
gestación para reducir la incidencia de mortinatos y reducir la severidad de HDN en bebés nacidos vivos. La decisión de inducir el trabajo
de parto prematuro depende de análisis del líquido amniótico, la historia obstétrica previa, título de anticuerpos y estudios de ultrasonido
fetal para la madurez. inducción prematura del parto a 30-32 semanas es posible con un mejor cuidado médico y de enfermería.
3. La plasmaféresis: Intensivo plasmaféresis ha sido eficaz en la reducción de nivel de anticuerpos en el suero materno y la mejora de las
posibilidades de supervivencia fetal. volumen óptimo de plasma que se plasmapherized aún no ha sido determinada. resultados
prometedores se han obtenido en algunos casos con el intercambio de pequeño volumen de 250 ml a 600 ml de plasma cada semana a
partir de las 10-20 semanas de embarazo hasta que el bebé se entrega a las 34-35 semanas de gestación. El fluido de sustitución más
segura es la solución de albúmina humana 4-5% y pequeño suplemento de plasma fresco congelado (de donantes Rh negativo) es
necesario para mantener los niveles normales de IgG, factores de coagulación, etc. 183TRANSFUSION MEDICINE Manual Técnico
No hay consenso sobre el valor terapéutico de la plasmaféresis en mujeres embarazadas inmunizadas-Rh y esto sigue
siendo un enfoque experimental del valor comprobado. Post - Natal TRATAMIENTO DE INFANTIL
Alrededor del 40% de los bebés que nacen con DAT positivo, no requieren tratamiento, mientras que otros, si no se trata, mueren a las pocas horas
debido a una insuficiencia cardíaca o se vuelven profundamente ictericia y pueden desarrollar ictericia nuclear
en cualquier etapa después de la edad de alrededor de 36 horas. Es deseable seleccionar como muy pronto, los casos de HDN que requieren
Los bebés con HDN leve (menos de una semana de edad) que exhiben solamente anemia pueden ser transfundidos con glóbulos rojos se
concentran para corregir la anemia. De vez en cuando una transfusión de intercambio parcial puede ser necesario.
exanguinotransfusión
En los lactantes con moderada a severa HDN, una transfusión de intercambio se realiza con los siguientes objetivos:
(una) La corrección de anemia proporcionando glóbulos rojos compatibles con O adecuada 2 capacidad de carga. (segundo) La eliminación de la
bilirrubina no conjugada. (do) La eliminación de las células rojas recubiertas de anticuerpo del bebé. (re) La eliminación de la Indicación anticuerpo
Hay poco acuerdo sobre los criterios para la exanguinotransfusión. Sin embargo, la hemoglobina de la sangre del cordón, bilirrubina y el peso al nacer
son los principales determinantes de la exanguinotransfusión. Todos los recién nacidos en riesgo, deben ser controlados de cerca por la
determinación de bilirrubina en intervalos de 4-8 horas, con el objetivo de mantener el nivel de bilirrubina en suero por debajo de 20 mg / dl en recién
nacidos a término y 15 mg / dl en la tabla infants.See prematura 13,3 .
intercambiar cuando
La hemoglobina al
hemoglobina primero 24 h
* Si el nivel de bilirrubina se eleva a una velocidad que indica que va a llegar a 20 mg / dl antes de que el niño es de 48 horas de edad.
184
La enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN)
para transfusión de intercambio para asegurar una larga supervivencia de glóbulos rojos en el bebé y para evitar alto nivel de
potasio en el plasma en la sangre transfundida.
2. Rh (D) negativo de sangre del mismo grupo ABO como la de la del bebé se utiliza si el grupo ABO del bebé es el
mismo que el de la madre o es compatible con la sangre de la madre. Tabla 13.4: Selección de grupo sanguíneo ABO de
exsanguinotransfusión en Rh -HDN
Grupo exanguinotransfusión
UNA AB AB AOR OOA
oO
OAB AB OOB o
segundo
OB o O
OOAB AB OOA o OB o O
O AB AB, A, B, O
OAB AB OOOOO
O
3. Cuando el grupo ABO del bebé no es compatible con el grupo ABO de la madre o si la unidad de donante es
preparado antes de la entrega, debe ser O Rh (D) negativo sangre y debe ser de forma hemolisinas libres anti-A
y anti-B.
4. En la transfusión de intercambio caso se requiere más de una vez, la sangre posterior debe ser de la misma ABO y el tipo
de Rh que la de la primera vez.
5. Si anticuerpos de la madre es reactivo frente a un antígeno de alta frecuencia y la sangre no compatible está disponible: (a) los
hermanos de la madre pueden ser probados para la sangre compatible. (segundo) Una unidad de sangre se puede recoger de la madre, si
Si la sangre no compatible está disponible y la situación clínica es urgente, cambio de transfusión con sangre incompatible
(para el antígeno de alta frecuencia) se prefiere sin transfusión en absoluto, ya que ayuda a eliminar el anticuerpo (s) y
bilirrubina. Retención en la sangre puede causar la muerte del bebé.
6. En las zonas donde la anemia llamada falciformes es prevalente, la sangre del donante debe ser examinado para el rasgo de
células falciformes antes de que se utilizó la sangre para transfusión de intercambio.
185
Manual Técnico Transfusion Medicine
recién nacido a término es de aproximadamente 85 ml / kg. exanguinotransfusión con células rojas parcialmente concentrado que tiene hematrocrit de
55-65% es preferible a la sangre entera. Algunos clínicos como para intercambiar volumen relativamente grande de sangre, por ejemplo, 200 ml / kg
en 60-90 min. una consideración especial en las pruebas de compatibilidad para la exanguinotransfusión
1. Si el grupo ABO de la madre y el niño son compatibles, es conveniente obtener el suero de la madre que del bebé
para la prueba de compatibilidad.
2. Si la sangre de la madre no está disponible o el grupo ABO de la madre no es conocido o el grupo ABO de la madre y el niño son
incompatibles, el suero del bebé o la elución a partir de células del cordón umbilical se utilizan para la coincidencia cruzada.
3. La sangre debe ser cruzada emparejado contra el suero de la madre por IAT y el método enzimático. Procedimiento
exanguinotransfusión se logra generalmente a través de un único acceso vascular (vena umblical). Una de tres vías-de grifo de cierre se une a la
unidad de sangre, el tubo de bebé y de extensión que conduce a un recipiente de descarte graduado. Un máximo de 5 ml / kg se utiliza para
cada sorteo y sangre infusión .La donante se deben mezclar adecuadamente durante el intercambio; el intercambio se completa en
aproximadamente 90 min. Un calentador de sangre en línea, si es posible, y un filtro de sangre estándar deben ser incorporados en el conjunto
1. Oxigenación y ácido - base de equilibrio debe ser monitoreado; a menudo es necesario aumentar la concentración de oxígeno
inspirado durante el procedimiento.
2. Si el recuento de plaquetas post-intercambio es inferior a 25.000 / mm 3, puede ser necesaria la administración de plaquetas.
3. La hipoglucemia puede ocurrir como un fenómeno de rebote después del intercambio o un fenómeno secundario al aumento de insulina
en plasma que puede acompañar a la enfermedad hemolítica severa. puede ser necesaria la infusión de solución de glucosa al 10%
después de la transfusión de intercambio.
4. 1 ml de gluconato de calcio al 10% después de la infusión de 100 ml de sangre se pueden administrar para evitar la toxicidad del
citrato.
PREVENCIÓN DE HDN
La dosis habitual de 250-300 (ig de hiperinmune anti-D inmunoglobulina (RhIg) es suficiente para contrarrestar el efecto de 15
ml de Rh (D) - glóbulos rojos positivos que corresponden a 30 ml de sangre fetal.
Si se detectan más número de células fetales en la circualtion materanal por la prueba Kleiharu Betke Acid elución, la dosis se
debe aumentar proporcionalmente.
1. RhIg (300 (g) se administra por vía intramuscular dentro de las 72 hrs a Rh (D) negativas mujeres que tienen (i) Emitido
2. Se ha defendido que el riesgo de la inmunización se reduce aún más si 300 ug RhIg se da antipartum a 28
semanas de gestación y una segunda dosis de 300 ug RhIg se repite dentro de 72 h de la entrega.
(yo) antígenos A y B no están completamente desarrollados en RBC del lactante; (Ii) Tissue A y antígenos B de la
infante neutralizan el anti-A y anti-B de la madre,
disminuyendo de ese modo el número de moléculas de anticuerpo que pueden unirse a la RBC (Mollison)
anteriores apoyan aún más el diagnóstico de la ABO-HDN Investigación en pruebas ABO-HDN en la madre
3. Prueba de anticuerpos dependientes de la citotoxicidad medicada por células (ADCC) en relación con la gravedad. Una
buena correlación se ha observado entre los resultados de ADCC utilizando suero de la madre, y la gravedad de HDN (Mollison
187
Manual Técnico Transfusion Medicine
3. los niveles de bilirrubina en suero se incrementaron moderadamente y pueden ser controlados por la fototerapia, pero, muy a
menudo pueden necesitar transfusión de intercambio.
4. Nivel de hemoglobina puede reducirse ligeramente en la sangre del cordón en moderadamente grave ABO HDN.
1. Fototerapia
2. Transfusión de sangre: Niño con leves ABO-HDN que exhiben solamente la anemia puede ser transfundido con las células rojas de la
sangre se concentran .El debe ser lo más frescos posible, pero no debe ser más de 5 días de edad, en cualquier caso.
3. Transfusión de intercambio con sangre entera debe llevarse a cabo cuando el nivel de bilibrubin amenaza con exceder de 20 mg /
dl. sanguíneo O Rh grupo de tipo de los recién nacidos se debe utilizar. La sangre debe tiene títulos bajos de anti-A y anti-B y también
debe estar libre de hemolisinas. Cuando se da la sangre del grupo O a un bebé que es un grupo A, B o AB, deben utilizarse los
concentrados de glóbulos rojos. Es una buena práctica utilizar células empaquetadas se resuspenden a un volumen de un tercio de
plasma AB fresco (o A plasma plasma o B según el caso) de volumen y el Hct de la transfusión de sangre for.exchange es misma que
de origen natural IgM anti-A o anti-B complican la determinación precisa de IgG anti-A o anti-B. Estimación de IgG anti-A
o anti-B se realiza después de la neutralización parcial o inactivación de IgM anti-A o anti-B por los siguientes métodos:
1. La neutralización parcial de IgM anti-A o anti-B según el grupo sanguíneo sustancia A o B (prueba de Witebsky)
prueba de neutralización parcial de Witebsky para determinar reactivos anti-A y anti-B IgG requeridos
paciente:
188
La enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN)
2. Sobre la base del título de anticuerpos solución salina, añadir una cantidad adecuada de A y B específico del grupo
saliva para neutralizar y-A y anti-B, respectivamente. Cantidad de saliva generalmente necesaria para la neutralización
parcial es el siguiente: IgM Titre en suero
Volumen de suero Volumen de saliva
3. La mezcla se mantiene a temperatura ambiente durante 20 min y se ensayó para solución salina anti-A y anti
B. Si la reacción es débil o 1, continúa para incompleta (IgG) el título de anticuerpos. Si la mezcla neutralizada da 2
a 3 reacciones, añadir más grupo saliva sustancia específica y repetir la prueba hasta que se da reacciones débiles
o +1.
Si la mezcla neutralizada da reacciones negativas, procedimiento de neutralización se repite usando menor cantidad
de sustancia (saliva)
4. Hacer doble dilución en serie del suero parcialmente neutralizado en dos filas A o B. En la fila A hacer la valoración de solución
salina (IgM) anti-A o anti-B. En la fila B hacer la valoración de incompleto (IgG) de anticuerpos anti-A o anti-B usando
albúmina o enzima o de la técnica de ensayo AHG indirecta.
Un ejemplo típico de incompleta anti-A en un caso de HDN debido a anti-A se da a continuación: Anti-A título de
ABO-HDN prueba antes y después de la neutralización del suero con sustancia grupo (Test de Witebsky) Titre
ordenado H H +2 +4
1: 2 H H + +4
1: 4 H H + +4
1: 8 +4 +4 - +4
uno y dieciséis +4 +4 - +3
01:32 +4 +4 - +2
1:64 +3 +4 - +2
1: 128 +3 +3 - +
1: 256 +3 +3 - +
1: 512 +2 +2 - -
1: 1024 +2 +2 -
1: 2048 + +2 - -
1: 4096 + + - -
1: 8192 - +/- - -
189
Manual Técnico Transfusion Medicine
mezcla de suero Dextron -AB de Aderson también se puede utilizar en hacer título de IgG anti-A y anti-B (Gupte et.al. 1972)
o B para cada dilución. Incubar durante 1 hora antes de leer los resultados. INACTIVACIÓN DE ANTICUERPOS IgM POR
3. Salina tamponada con fosfato pH 7,4 (a) 0,15 M NaH 2 correos 4 . 2 H 2 O - disolver 23,4 g de NaH 2 correos 4 2 H 2 O - en
1000 ml de
agua destilada. (segundo) 0,15 M NaH 2 correos 4- disolver 21,3 g NaH 2 correos 4- en 1000 ml de agua destilada. (do) Hacer
tampón de fosfato de iso-osmótica pH 7,4 - mediante la mezcla de 18 ml. NaH 2 correos 4. 2H 2 O
Solución con 82 ml de Na 2 HPO 4 solución. (re) Para hacer una solución salina tampón fosfato - mezclar un volumen igual
de iso - osmótica de fosfato
tampón de pH 7,4 y 9 g / L de NaCl.
4. 0,2 M yodoacetamida, preparada por disolución de 0,37 g yodoacetamida en 100 ml de solución salina tamponada con fosfato pH
7,4 Método
5. Hacer dos veces la dilución en serie de la mezcla de mezcla de ensayo y control en solución salina isotónica en
duplicate.Titer ellos con las células adecuadas para IgM anti-A y / o anti-B mediante la técnica de solución salina y para IgG anti-A y /
o anti-B por la albúmina o enzima o de la técnica de ensayo AHG indirecta.
190
Enfermedad hemolítica del Nuevo Bom (HDN)
Interpretación
1. Si no se observa reactividad en el control, indica la dilución del cuerpo contra e invalida los resultados.
2. Igualdad reactividad tanto en la mezcla de mezcla de ensayo y de control indica que sólo IgG
anticuerpos están presentes.
3. Si no reactividad se ve en la mezcla de ensayo y la reactividad se ve en la mezcla de control, esto indica solamente
anticuerpo presente IgM.
4. A cuatro veces (diferencia de dos tubos) o más de reducción de Acitivity cuando se compara con el tubo de control
indica la presencia de ambos anticuerpos IgM e IgG. Nota: 2-ME tiene olor nocivo y debería por lo tanto, ser utilizado bajo una
capucha. Más reciente
investigaciones muestran 2-ME es más eficaz que el ditiotreitol. La adición de iodoaceetamide es
necesario para evitar falsas - resultados positivos. La inactivación de anticuerpos IgM por Dithiotheritol Reactivos
1. ditiotreitol 0,01 M se prepara disolviendo 0,154 g (DTT) en 100 ml de PBS pH 7,4. La solución de DTT es estable a -20
° C durante hasta 6 meses. Cuando se almacena en el refrigerador a 4 ° C se deteriora en menos de una semana.
Método
1. Dispensar 1 ml de suero en cada uno de los dos tubos.
2. A un tubo, etiquetado como control de añadir 1 ml de PBS pH 7,4
3. Para otro tubo, prueba etiquetado, añadir 1 ml de 0,01 M de DTT
4. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 2 h
5. Hacer una dilución en serie de dos veces de la mezcla de ensayo y mezcla de control en solución salina isotónica
en duplicado. Título de ellos con las células adecuadas para IgM anti-A o anti-B mediante la técnica de solución salina y para IgG anti-A
191
Manual Técnico Transfusion Medicine
1. Si no se observa reactividad en el control, indica la dilución del anticuerpo e invalida los resultados.
2. Igualdad de reactividad, tanto en la mezcla de ensayo y control, indica que los anticuerpos IgG sólo están presentes.
Nota: la TDT no es tan oloroso como el 2-ME y proporciona una prueba más rápida. Sin embargo, puede no ser tan sensible como 2- ME
192
14
componentes de la sangre
Preparación y
sus usos
Estos terapia de transfusión sanguínea efectiva días depende de la disponibilidad de los diferentes componentes de la sangre. Estos
componentes, utilizados por separado o en combinaciones, pueden cumplir la mayoría necesidad de transfusión de pacientes y mantener el riesgo
de transfusión a un mínimo. Un donante de sangre dona el producto conocido como sangre entera, a partir del cual se preparan los componentes.
La capacidad para separar los diversos componentes de la sangre entera es deseable por las razones siguientes:
1. Separación de sangre en componentes permite una supervivencia óptima de cada componente de. Por ejemplo después de 24 horas
de almacenamiento de sangre entera a 2-6 ° C, tiene pocas plaquetas viables y niveles de factores lábil V y VIII disminución, mientras
que después de las plaquetas de separación pueden ser almacenados durante 5 días a 22 ° C y los factores V y VIII puede ser
almacenado como FFP por 1 año en- 30 ° C o por debajo.
2. preparación componente permite la transfusión de único componente de sangre específico que el paciente requiere.
3. La transfusión de sólo el componente específico de la sangre necesaria evita el uso de componente innecesario, lo que podría estar
contraindicado en un paciente. Por ejemplo, debido al riesgo de hipervolemia, un paciente anémico ancianos en la insuficiencia
cardíaca congestiva puede no tolerar fácilmente la transfusión de dos unidades de sangre entera, mientras que el mismo paciente
puede ser transfundida dos unidades de células rojas de la sangre fácilmente.
193
Manual Técnico Transfusion Medicine
4. Mediante el uso de componentes de la sangre, varios pacientes pueden ser tratados con la sangre de un donante, dando un
uso óptimo de cada unidad de sangre donada.
5. El uso de componentes de la sangre, complementa el suministro de sangre - se suma al inventario de sangre. componentes de
sangre tales como glóbulos rojos, plaquetas y plasma se preparan a partir de una sola donaciones de sangre entera. Componentes han
estrechamente regulado requisitos de preparación y almacenamiento. la compatibilidad del grupo sanguíneo entre el componente y el paciente
es considerado durante la selección del producto. Cada componente lleva el mismo riesgo de hepatitis, virus de la inmunodeficiencia humana
En contraste, los derivados de plasma (fracciones) tales como albúmina, inmunoglobulinas séricas y factores de coagulación concentrados etc.
se preparan a partir de grandes reservas de plasma de donantes. Tienen requisitos de almacenamiento más flexibles y se dan sin tener en
cuenta la compatibilidad ABO. Dependiendo del proceso de fabricación, derivados pueden llevar a una disminución del riesgo de la hepatitis y la
transmisión del VIH, en comparación con los componentes.
Los componentes del plasma de la sangre se indican a continuación se pueden preparar de banco de sangre por métodos convencionales
(por ejemplo, la centrifugación, la congelación y descongelación) para uso terapéutico. La gravedad específica de los glóbulos rojos y los granulocitos
es muy similar por lo que la centrifugación no es método eficiente de separación de ellos. Mientras que los derivados del plasma (fracciones) se
preparan por el proceso de fabricación bioquímica o sí en condiciones de fabricación farmacéutica en un laboratorio de Fraccionamiento de Plasma
bien equipado.
Componentes de sangre (celulares y plasma) y los derivados del plasma (fracciones): Los componentes
Debido a diferente peso específico de los componentes celulares, se pueden separar por centrifugación a diferente fuerza
centrífuga en g de tiempo diferente.
Refrigerada velocidad del rotor de centrífuga y la duración de giro son críticos en la preparación de los componentes por centrifugación.
Cada centrífuga debe ser calibrado para velocidades y tiempos de giro para la preparación de cada componente óptimas, tiempos dados
en este manual incluyen sólo el tiempo de aceleración y su velocidad, no el tiempo de deceleración.
194
Componentes preparación de sangre y sus usos
Los componentes de la sangre se preparan por centrifugación a diferente fuerza centrífuga relativa en g en un momento diferente.
La conversión de la fuerza centrífuga relativa (RCF) de rpm depende de la radio del rotor de la centrifugadora. Puede ser calculado por:
Este dispositivo permite que el tubo a partir de dos bolsas separadas a soldar juntos sin perder la esterilidad de ambos. El
diámetro y el material de los tubos a conectar deberán ser similares. Este dispositivo es útil en la fabricación de unidades pediátricas
de una bolsa primaria que no tiene bolsas satélites.
Artículos consumibles
• 450 ml bolsas dobles y triples CPDA bolsas
• 450 ml bolsas dobles y triples con solución de CPD y aditivo (Adsol / SAG-M)
• cajas de cartón fino para almacenar el plasma en el congelador
195
Manual Técnico Transfusion Medicine
Similarmente, si se conoce la fuerza centrifual relativa deseada, la velocidad necesaria para un radio de rotación dada puede ser
determinada por la conexión de los dos puntos conocidos y leyendo la intersección de la regla con la escala de velocidad.
196
Componentes preparación de sangre y sus usos
• Una cantidad correcta de sangre proporcional a anticoagulante debe ser recogida en la bolsa primaria que tiene bolsas
satélites conectados con tubos integrales.
• Monitorear la recogida de sangre con el mezclador / Escala automático que se utiliza para la recogida de la cantidad deseada
de la sangre y mezclando la sangre con el anticoagulante.
• Si las plaquetas son para ser cosechado la bolsa de sangre debe mantenerse a emperatura ambiente 20- 24 ° C hasta que las
plaquetas se separan. Las plaquetas deben ser separados dentro de 6-8 horas desde el momento de la recogida de sangre.
• sistema de paquetes de Triple con dos bolsas unidas hace que sea posible hacer que las células rojas, concentrado de plaquetas y
plasma fresco congelado. Si bien el sistema paquetes cuádruples con tres bolsas adjuntas se utiliza para la preparación de glóbulos
rojos, concentrados de plaquetas, crioprecipitado (factor VIII) y plasma pobre en crio. bolsas dobles se utilizan para la fabricación de
• Oponerse tazas con bolsa de sangre y bolsas satélite debe ser igual en peso excesivas cargas excéntricas de lo contrario
colocados en el rotor de desgaste irregular centrífuga causa y el desgarro y la eventual rotura.
• Las bolsas deben ser colocados de tal manera que su lado ancho se enfrenta a la pared lateral de la copa.
• Disco de goma deben ser usados para equilibrar.
• Plástico sobre viste para las bolsas puede ser utilizado (opcional).
• velocidad correcta de la centrifugación y el tiempo se debe mantener, ya que son los factores más críticos en la preparación de
componentes.
• Observe si hay vibración anormal hasta la velocidad requerida se alcanza, si hay alguna, detenga la centrífuga y comprobar el
peso de las copas opuestas con bolsas. Centrífugas utilizados para la separación se calibran para producir más alto rendimiento de
producto en el menor tiempo en el más bajo de giro posible a fin de causar el menor trauma a cada producto y, al mismo me
mantenimiento de la temperatura óptima para la viabilidad de los componentes. En una unidad de sangre, el centrifugado
197
medicina transfusional Manual técnico
productos se depositan en capas, comenzando desde la parte inferior: las células rojas de la sangre, células blancas de la sangre, y el plasma rico
en plaquetas. Después de separar el plasma rico en plaquetas (PRP) de los glóbulos rojos, el PRP se centrifuga a una pesada giro para un tiempo
más largo. Esta vez las plaquetas se depositan en el fondo de la bolsa. El plasma se transfiere a otra bolsa satélite.
SANGRE PURA
La sangre entera contiene 450 ± 45 ml o 350 ± 35 ml de sangre del donante más solución anticoagulante. El nombre del anticoagulante se
utiliza con el nombre del producto, por ejemplo CPDA-1 de sangre entera. La sangre entera tiene un hematocrito de 30-40 por ciento.
Mínimo 70% de los glóbulos rojos transfundidos debe sobrevivir en la circulación del receptor 24 horas después de la transfusión. La
sangre almacenada no tiene plaquetas funcionales y no lábil factores de coagulación V y VIII.
Rojas preparaciones células sanguíneas son: sedimentaron glóbulos rojos: Tienen un PCV de 60-70 por ciento, 30 por ciento de plasma y
glóbulos rojos centrifugados: Tienen un PCV de 70 a 80 por ciento, 15 por ciento de plasma y todos los leucocitos y las plaquetas originales,
células rojas con aditivo (Adsol o SAG-M): Tienen PCV de 50-60 por ciento, plasma mínimo y todos los leucocitos y las
plaquetas.
Sedimentación:
centrifugación:
1. Recoger volumen apropiado de sangre del donante
en CPDA bolsa doble o triple.
2. Almacenar a 2-6 o C hasta procesada.
3. Coloque las bolsas en los cubos de centrífuga refrigerada
1.Primary 2.100 ml 3. Vaciar
y equilibrar las bolsas opuestas con precisión.
Envase solución ción en transferir
(CPD paquete contenedor de 400 ml
4. Centrifugar a efectos pesados (5000 xg) durante 5 minutos a solución
2-6 o DO. anticoagulante)
(Fig. 14-2).
198
Componentes preparación de sangre y sus usos
rojos impide que la mayoría de las reacciones transfusionales febriles no hemolíticas. Para otras complicaciones como la prevención de la
transmisión de CM V o aloinmunización a los antígenos HLA, el contenido de leucocitos debe reducirse a menos de 5 x 10 6 C en una unidad de
glóbulos rojos.
reducción de leucocitos se ha usado con un éxito considerable para evitar FNHTR pero a veces publicar almacenamiento leuco-reducción
no es mucho eficaz como citocinas generadas por los leucocitos durante el almacenamiento pueden causar FNHTR.
Las citoquinas son generados por leucocitos, incluso a 2-6 ° C, pero a un grado mucho mayor a 20- 24 ° C. Los niveles de interleucina una
alfa más beta (1L- la e IL-IB), la interleucina 6 (IL-6) y factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) aumentar bruscamente en unidades almacenadas con
los leucocitos en comparación con unidades similares almacenados después de leuco-reducción (pre acopio leuco-redction). los niveles de
citoquinas aumentan en proporción directa con el número de leucocitos. Por lo tanto leuco-reducción antes (reducción leuko- pre-almacenamiento)
de almacenamiento en el banco de sangre es mucho mejor que el leuco-reducción después (reducción leuko- post-almacenamiento) de
almacenamiento en el lado de la cama del paciente para eliminar FNHTR.
Los donantes de linfocitos de injerto en el receptor y reaccionar contra antígenos del huésped puede causar GVHD.
La reacción entre los antígenos de leucocitos y anticuerpos puede resultar en leuco-aglutinación, agregados de células blancas de
ser atrapado en la microcirculación de los pulmones, causando edema pulmonar, que es relacionada con la transfusión lesión pulmonar
aguda (TRALI). En la mayoría de los casos de TRALI.
199
medicina transfusional Manual técnico
anticuerpos leucocitos en receptor de la transfusión previamente sensibilizadas reaccionan con los leucocitos en la sangre o plasma
transfundida o revertir a ella, es decir, anticuerpos de leucocitos en la sangre o plasma reaccionan con los leucocitos del receptor de formación
de leucocitos agregados que están atrapados en la microcirculación de los pulmones, causando TRALI.
Método
1. La unidad de sangre completa se centrifuga en una posición vertical a 5000 xg durante 5 minutos a 4 ° C.
2. El plasma sobrenadante, capa leucocitaria y algunas células rojas se transfieren a una bolsa satélite.
3. Doble cierre del tubo entre la bolsa primaria y la bolsa satélite, separarlos.
4. Mantener las células rojas a 4 ° C.
Este es uno de los método más fácil y menos costoso y se puede hacer en el sistema cercano, pero es el menos eficiente.
Reduce el nivel de leucocitos en un 70-80% (menos de 1 log) y se sacrifica 20% de las células rojas. Que no cumple las normas mínimas
para la reducción del CMB. Además de su hematocrito es más de> 80%, que es difícil de transfundir a menos algo de plasma se
devuelve de nuevo o se añade solución de aditivos. También es el método laborioso. Hoy en día este método ha sido reemplazado por
otras técnicas más eficientes.
filtración:
Existen muchos tipos de filtros están disponibles en la actualidad que pueden producir un producto reducido de leucocitos aceptable dependiendo de
la exigencia.
200
Los componentes sanguíneos preparación y su usuario
filtros de microagregados son filtros de poliéster o de pantalla de plástico con un tamaño de poro de 20-40 micras., que atrapan la
mayoría de los microagregados compuestas de glóbulos blancos, plaquetas, y los hilos de fibrina que se forman en la sangre después de 5-6
días de almacenamiento refrigerado. Estos microagregados pasan a través de filtros de sangre estándar y se encuentran atrapados en
micro-circulación de pulmón causando TRALI. La eficacia de los filtros de microagregados de leuco-reducción se incrementa por enfriamiento de
la unidad en 4 0 C durante 3-4 horas después de la centrifugación y antes de la filtración. La filtración de este tipo suelen dar una reducción de 1 -2
log (90-92%) de los leucocitos en la unidad (<5 x 10 8) y recuperar la mayor parte de los glóbulos rojos. Tales células LR-rojos reducen la
filtros de leucocitos reductor más reciente (tercera generación) utilizan absorción selectiva de leucocitos o leucocitos y
plaquetas. Están hechas de acetato de poliéster o celulosa y producirán una reducción de 2 a 4 log (99-99,9%) de los glóbulos
blancos (<5 x 10 6). Hay muy poca pérdida de glóbulos rojos y el proceso es bastante fácil. Evitan allommunization a los antígenos
HLA, la transmisión de CMV, y NHFTRs.
respuesta inmune a antígenos HLA y llevar a la actividad viral. células blancas en la sangre almacenada también pueden producir citoquinas que
pueden causar NHFTRs. Con el fin de prevenir estos efectos puede ser deseable para eliminar las células blancas antes de su almacenamiento. Esto
se puede hacer mediante el uso de una de las dos tecnologías, el dispositivo de conexión tubo estéril o el filtro en línea.
Utilizando el dispositivo de tubo estéril de conexión, un LR-filtro de cabecera se puede conectar a una unidad de sangre antes de
su almacenamiento y para otra bolsa estéril. Las células se pueden filtrar de la bolsa primaria a través de filtro unido en la bolsa adjunto.
Esto conserva la fecha de caducidad original del producto inicial y todo rojo células, plaquetas y plasma.
La segunda tecnología es posible con un sistema de bolsas de recogida de sangre diseñado especialmente con filtros
integral (en línea) incorporados entre la bolsa de recogida principal y una bolsa satélite (fig, 14.3).
Fig. 14.3
Paquete de sangre con filtro integrado para Leucorreducción de sangre entera
201
medicina transfusional Manual técnico
Dentro de las 8 horas después de la flebotomía, la sangre se hace pasar a través de este filtro en un adjunto
bolsa de recolección. Los glóbulos rojos filtrados en la bolsa se reducen de leucocitos y retienen la fecha de caducidad originales.
eliminación de leucocitos con este sistema es 99 a 99,9 por ciento (3 log), con> 90 por ciento de las células rojas restante.
Cabecera de filtración:
filtración de noche comúnmente se practica ha demostrado ser muy eficaz para prevenir NHFTRs sino que también puede haber desintegrado
leucocitos y citoquinas que pueden causar FNHTRs. Ellos no son muy eficaces para la prevención de la aloinmunización HLA.
El lavado de glóbulos rojos elimina leucocitos, plaquetas y plasma, Se puede hacer manualmente o mediante máquina por ejemplo la máquina de lavado de
células Haemonetic.
Método manual
(1) Recoger la sangre en una doble bolsa y almacenar a 2-4 ° C, hasta que se procesa. (2) Centrifugar la bolsa a 5.000 xg (SPIN pesado) durante 5 minutos a 2-6 °
C. (3) Separar el plasma, junto con la capa leucocitaria en una bolsa de bolsa satélite / transferencia. (4) Junta doble tubo entre las bolsas primaria y satélite. (5) Conectar
la bolsa con los glóbulos rojos a IV botella de solución salina con la bolsa para embotellar conector de bajo flujo laminar.
Transferir aproximadamente 250 ml de solución salina en la bolsa de glóbulos rojos. (6) Sujetar el tubo de conector de botella (conjunto de transferencia) y
la espiga o aguja del conjunto de transferencia por sellador-di eléctrico. Retire la aguja del tubo de la bolsa y para abarcar la espiga
(7) Mezclar bien las células rojas y solución salina. Centrifugar la bolsa a efectos pesados (5000 xg durante 5
minutos). (8) Coloque la bolsa en el exprimidor y retire la solución salina en el recipiente de residuos.
(9) Repetir el lavado tres veces (pasos 5 a 8). (10) Después del lavado final añadir 60-70 ml de solución salina
en las células rojas y mezclar. (11) Sellar el tubo cerca de la bolsa y separar el conector. (12) Mantener células
Se prepara a partir de 450 ml de sangre entera se mantuvo a temperatura ambiente (22-22 ° C) y dentro de 6 a 8 horas de la recogida.
Procedimiento:
1. Recoger 450 ml de sangre por una limpia, solo venipunctuer en 450 ml CPDA o sistema triple bolsas Adsol / SAGM.
2. Mantenga la bolsa de sangre a temperatura ambiente (20-22 ° C) antes de plaquetas que se preparan, por no más de 6 horas. No relajarse en
3. Mantenga las bolsas en los cubos de centrífuga refrigerada y equilibrarlas curately. Centrifugar las bolsas de sangre
a 20-24 ° C en Spin luz para el tiempo apropiado (2000 xg durante 3 minutos).
4. Separada 4/5 del plasma rico en plaquetas (PRP) en una bolsa satélite si se utilizan sistemas de CPDA triples bolsas. Doble
cierre del tubo entre la bolsa primaria y las bolsas satélite. Separar la bolsa primaria con eritrocitos. Una de la bolsa satélite
contienen PRP. Si se utiliza el sistema de bolsas triples Adsol / SAG-M, transfere todo PRP en la bolsa satélite vacía y
añadir la solución de aditivos a los glóbulos rojos. Doble cierre el tubo de la bolsa con las células rojas y separarla de las
bolsas satélites. Una de las bolsas satélites contiene PRP. PRP se puede usar como tal o se procesa adicionalmente para
preparar concentrado de plaquetas (PC).
5. Centrifugar la bolsa con PRP y otra bolsa satélite a 20-40 ° C en 'giro pesado' para el tiempo apropiado, por ejemplo 5000xg
durante 5 minutos.
6. Expresar sobrenadante de plaquetas - plasma pobre en otra bolsa satélite vacía.
203
medicina transfusional Manual técnico
8. Deja concentrado de plaquetas (PC) no alterados a 20-22 ° C durante 1 hora, a continuación, volver a suspender las plaquetas en el plasma mediante la
9. plaquetas tienda a 20-22 ° C con agitación constante en la incubadora de plaquetas con agitador hasta que se utiliza. La vida útil es de 3-5
días, dependiendo del tipo de bolsas de plástico utilizado (véase el capítulo 3 en la conservación y almacenamiento de sangre)
CMB ≥10 8
pH 6,0 o más
Número de plaquetas en sangre entera = Plaquetas por mm 3 x 1,000 x volumen de sangre total (ml)
Cálculo
% De las plaquetas en PRP dió Número de plaquetas en el PRP X 100 = erofplateletin
Numb que leblo desde
Precaución y almacenamiento:
• formación de pseudópodos.
Los cambios anteriores son responsables de la baja recuperación y pobres supervivencia de las plaquetas in vivo.
Mantenimiento del pH y la función de las plaquetas durante el almacenamiento depende de la permeabilidad de la bolsa de almacenamiento
para el oxígeno y el dióxido de carbono. Las plaquetas se almacenan en bolsas hechas de plyvinylchloride estándar (PVC) con Di- (2-ethylhexyle)
ftalato (DEHP) plastificante hasta 72 horas a temperatura ambiente
(20-24 ° C). Nuevas bolsas de plástico de poliolefina sin plastificante, o PVC de pared delgada con tri (2-etilhexil)
trimelitato (PDM) plastificante mantener el nivel de pH y de plaquetas función hasta aproximadamente
7 días, pero se recomienda utilizarlos dentro de los 5 días siguientes a la fecha de recogida de la sangre.
La agitación durante el almacenamiento ayuda el intercambio de gases, el mantenimiento del pH, y reducir
formación de plaquetas agregados. Agitador (cama plana) con 1” a 1.5” trazos en 70 ciclos por minuto a 20-24 ° C, da buenos
resultados. 204
Componentes preparación de sangre y sus usos
concetrate GRANULOCITOS
Como la gravedad específica de los glóbulos rojos y los granulocitos es muy similar, la separación de
granulocitos por centrifugación no es satisfactoria. La leucaféresis es un método mejor.
1. Recoger 450 ml de sangre del donante en 450 ml de CPD A o triple sistema de paquetes de Adsol SAGM y mantener a 20-24 ° C antes
de separar la capa leucocitaria, pero en ningún caso más de 6 hr después de la recogida de sangre.
2. Mantener el bolsas en los cubos de productos refrigerados, se centrifugan y equilibrar con precisión. Se centrifuga la las bolsas de sangre a
20-24 ° C en Spin luz para el tiempo apropiado, por ejemplo 2000x g durante 3 minutos.
3. expresar la plasma sobrenadante en primera bolsa satélite. Deje aproximadamente 20 ml de plasma por encima de la capa celular (Capa
4. expresar la 20 ml de plasma y los superiores 20-25 ml de la capa celular, rica en glóbulos blancos, en otro paquete de satélite. sello doble tubo
y separada. El rendimiento de las células blancas por este método es de aproximadamente 1 x 10 9, de los cuales alrededor de la mitad es decir,
0,5-0,6 x 10 9
son los granulocitos por 450 ml unidad de sangre. Eso está fuertemente contaminada con las plaquetas y otros
leucocitos. Los granulocitos pueden almacenarse a 20-24 ° C, pero que deben utilizarse tan pronto como sea posible
y no más tarde de 24 horas desde la recogida de sangre. Para los detalles de la
FFP es plasma obtenido a partir de un solo donante, ya sea por donación normal o por plasmaféresis y se congeló rápidamente dentro de
las 6-8 horas de ser recogido. Contiene todos los factores de coagulación y gran
se debe tener cuidado durante la recopilación de la sangre, la congelación y descongelación de preservar su actividad.
Acumulación de sangre
3. El tiempo total tomado para recoger 450 ml de sangre no debe ser más de 8 minutos.
procedimiento:
1. Recoger volumen apropiado de sangre en 350-450 ml sistemas de bolsas dobles CPDA o sistema triple bolsas SAGM /
Adsol 450 ml.
2. Almacenar a 4 ° C o en la sala de aire -conditioned hasta procesa pero no para más de 6-8 horas.
4. Expresar aproximadamente cuatro quintas partes del plasma en una bolsa satélite, si se recogió sangre
en el sistema de bolsas CPDA doble / triple. sello doble el tubo entre la bolsa principal y el
205
medicina transfusional Manual técnico satélite
bolsa satélite que tiene de plasma con clips metálicos o sellador dieléctrico. Separar el plasma bolsa satélite que tiene. Si la sangre
se recoge en triple sistema de bolsa de SAGM o Adsol, expresar todo el plasma en la bolsa satélite.
5. Etiqueta de la bolsa de plasma y se congela rápidamente. Esto debe hacerse tan pronto como sea posible después de la recolección,
en cualquier caso dentro de las 6-8 horas. El proceso de congelación completa debe ser tan corto como sea posible y
preferiblemente no deben tomar más de una hora. La congelación rápida se puede lograr mediante la difusión del plasma en una capa
delgada (bolsas coloca plana y no vertical) en congelador a - 70 ° C o la colocación de las bolsas protegidas por un plástico sobre
envoltura a - 70 ° C en etanol baño de hielo seco.
6. Se ha demostrado que los factores de coagulación más lábiles se conservan para un año si FFP se mantiene a -30 ° C o por debajo.
Si FFP no se utiliza dentro de un año, se designó de nuevo como un plasma de un donante individual que se puede mantener más de
4 años a -30 ° C o menos.
El FFP debe administrarse tan pronto como sea posible después de la descongelación, y en cualquier caso dentro de las 12 horas si se mantiene a 2-6 ° C.
CRYO PRECIPITADO
El crioprecipitado se precipitan las proteínas de plasma, rico en Factor VIII y de fibrinógeno, obtenidos
a partir de una sola unidad de plasma fresco (aproximadamente 200 ml) por congelación rápida dentro de las 6 horas de la recogida.
Eso es rico en factor VIII, factor de von-Willebrand, fibrinógeno (XIII Factor) y fibronectina.
Varios factores que mejoran el rendimiento de los factores VIII en crioprecipitado son:
2. flujo rápido de sangre, donación de sangre (450 ml) obtenido en menos de 8-10 minutos se debe utilizar.
4. La congelación rápida de plasma tan pronto como sea posible después de la recogida en cualquier caso dentro de las 6-8 horas después de la recogida
6. El uso de la técnica de sifón que evita inContact restante plasma descongelado con el crioprecipitado.
Procedimiento
1. Preparar plasma fresco congelado (FFP), como se describe en FFP, para la transformación en
crioprecipitado.
2. Congelar el plasma a -70 ° C en el congelador o en el baño seco de etanol.
3. plasma congelado deshielo ya sea a 4 ° C en una habitación fría (deshielo aire) o a 4 ° C en baño de agua circulante.
• Si FFP se descongela en una habitación fría, colgar la bolsa en una posición invertida con los puertos más inferior y coloque la segunda
bolsa satélite en un estante inferior. Observar el paquete con frecuencia para asegurarse de que el plasma descongelado está fluyendo
206
Componentes preparación de sangre y sus usos
• Si FFP se descongela en 4 ° C baño de agua, se centrifuga la bolsa cuando el plasma es fangosa a 5000 xg durante 5 minutos a 4 °
C. A continuación, el plasma desprovisto de crioprecipitado sobrenadante se desvía en la bolsa satélite,
dejando 10-15 ml de plasma con crioprecipitado. Sello el tubo
y separar las bolsas. bolsas etiqueta.
4. Guarde la bolsa con croprecipitate a -30 ° C o inferior y bolsa con plasma Cryo-pobres en el segundo
satélite bolso es almacenado a - 20 ° C o abajo.
El almacenamiento y la vida útil de croprecipitate: Un año a -30 ° C o menos.
crioprecipitado reconstituir
(Descongelación y tema de crioprecipitado) Reconstituir crioprecipitado antes de la emisión mediante la colocación en una envoltura en un baño de agua C
30 ° hasta la
crioprecipitado se haya disuelto. Crioprecipitado debe volvió a suspender a fondo por amasado suave. Después de la descongelación de la piscina
la crioprecipitado de todo bolsas descongeladas en una bolsa bajo flujo laminar por
los medios de bolsa para conector de la bolsa. Lavar las bolsas vacías con 10 ml de solución salina normal para disolver residual
crioprecipitado y añadir a crioprecipitado agrupado. Una vez descongelado, crioprecipitado debe
mantenerse a 2-6 ° C y se administra con en 4 horas No debe congelarse. Uno bolsa de crioprecipitado contiene en un promedio de
plasma solo donante se puede preparar por lo separa de las células rojas cualquier momento hasta 5 días después de la expiración de toda la unidad de
sangre. Cuando se almacena a -20 ° C o inferior, plasma donante individual puede mantenerse hasta 5 años.
Es un subproducto de la preparación del crioprecipitado. Carece lábil factores de coagulación V y VI11 y fibrinógeno. Contiene niveles
adecuados de la coagulación estable factores II, VII, IX y X. Es congelados y almacenados a -20 ° C o más baja temperatura durante 5
años.
(Semi-automatizado Método)
Leuco-reducción en el componente de la sangre mediante la eliminación de la capa leucocitaria de la sangre entera por el manual
procedimiento es laborioso. Esta conducido a la necesidad de automatizar la preparación de leuco-agotado
componentes de la sangre entera para lograr consistencia en la calidad y reproducibilidad. M / s Baxter ha desarrollado sistema Opti
con Optipacs especialmente configurados para producir leuco reducido
componentes de la sangre y para cosechar concentrado leuco-plaquetaria reducida de la capa leucocitaria.
En más nueva técnica denominada método de 'parte superior e inferior', desarrollado por M / S Baxter, sangre completa se centrifuga a una velocidad relativamente
alta. Después de giro dura, la capa leucocitaria contiene glóbulos blancos y ambos
207
medicina transfusional Manual técnico
plaquetas. De hecho, la ley de la física dictan que no sólo las plaquetas en la parte superior de la bolsa caerá a la capa leucocitaria, sino también que
las plaquetas en la parte inferior de las bolsas subirán a la capa leucocitaria. Por lo que la capa leucocitaria es una buena fuente de plaquetas
también. El plasma se transfiere a una bolsa satélite y glóbulos rojos se separan en la bolsa en la parte inferior que tiene solución de aditivo SAGM.
La bolsa primaria, que contiene la suspensión de 10-20 ml de glóbulos rojos, la capa leucocitaria y algo de plasma,
se centrifuga a giro suave y
plaquetas suspendidas en plasma se expresan en la bolsa satélite vacía lentamente y con cuidado.
Este es un extractor automático usando dos placas de presión paralelos, uno es estacionaria y otra es accionado neumáticamente que
simultáneamente expulsar plasma en una bolsa satélite vacía y células rojas en otra bolsa que contiene SAG-M una solución aditiva.
El sistema está diseñado para dejar un volumen específico de la capa leucocitaria con plasma en el paquete de colección original. Una luz
transmisor y dos fotocélulas de control el flujo de glóbulos rojos y plasma
en bolsas separadas por los medios de dos dispositivos de sujeción automatizados en el OPTIPRESS.
OPTIPACKS
El sistema optipacs consiste en una bolsa de 600 ml hecho de PVC plastificado con DEPH tener solución CPD 63 ml con dos salida en el fondo
y uno en la parte superior. Una de la parte inferior hacia fuera let tiene un tubo de conexión con la aguja para la flebotomía, mientras que el
otro está conectado a una bolsa de 400 ml hecho de PVC plastificado con DEPH que contiene 100 ml de solución de aditivo SAG-M. La salida
superior
208
Componentes preparación de sangre y sus usos
está conectado a través de un tubo de V-pieza a dos vacíos 400 ml bolsas hechas de PVC plastificado con PDM, uno para la recogida de plasma y el
otro para la recogida de las plaquetas a almacenar durante 5 días.
Fig. 14.5
1. 450 ± 10% se recoge la sangre en la bolsa principal de sistema Optipac tener CPD
anticoagulante. La sangre anticoagulada se almacena a temperatura ambiente (22 ° C) durante aproximadamente 4 horas antes del procesamiento
adicional.
3. La unidad de centrífuga se pone en el OPTIPRESS y se pulsa un botón para activar la placa de presión.
4. Abrir el tubo de conexión entre la bolsa y la transferencia de plasma envase primario para permitir el flujo de plasma a una de la
bolsa satélite. A continuación, abra la conexión del tubo entre la bolsa primaria y la bolsa con SAG-M para permitir el flujo de
sangre.
6. Las bolsas que contienen glóbulos rojos y plasma se sellan con sellador-di eléctrico y se separó.
7. Los glóbulos rojos en solución de aditivos se mantiene a 2-6 ° C y el plasma a -30 ° C o menos.
YO. La bolsa primaria con la capa leucocitaria y el plasma con bolsa satélite se deja colgando durante aproximadamente 2 horas a temperatura
209
medicina transfusional Manual técnico
2. El plasma sobrenadante con plaquetas se transfiere lentamente en la bolsa vacía usando extractor convencional.
Para más detalles consulte las instrucciones en el manual suministrado con el equipo.
Conclusión
• El proceso se semi-automatizado.
• La consistencia en la calidad de los productos y la reproducibilidad es mejor.
• Todo el proceso dura aproximadamente 6-8 horas por lo que la calidad y la vida útil de las plaquetas no se efectúa y los niveles de
los factores VIII y V en FFP no deje caer.
• concentrados de hematíes tienen en promedio 10 8 leucocitos por ejemplo, reducción de leucocitos de un log, la incidencia de FNHTR se
redujo significativamente en comparación con las células rojas en solución aditiva preparada sin la eliminación de la capa leucocitaria.
Además se proporciona una buena base para más leucorreducción en los glóbulos rojos que tiene menos de 5,5 x 10 6 el uso de filtros de
reducción de leuco laterales de la cama e incluso reduce las posibilidades de HLA de sensibilización de antígeno.
• El rendimiento de plaquetas en concentrados de plaquetas preparado a partir de buffy es en promedio de 6-9 x 10 10 y leuco-reducción es de
aproximadamente 90%, lo que es significativamente más que eso preparado a partir de PRP. Los concentrados de plaquetas tienen en
promedio 10 7 leucocitos.
• Los leucocitos se eliminan antes de su almacenamiento, se forman menos cantidad de citoquinas, y el número de células blancas de
la degenerados es menor en las células rojas y concentrado de plaquetas. Incidencia de FNHTRs se reduce además por su
transfusión.
• espín duro inicial causa más rendimiento de plasma dejando muy poca cantidad de plasma en los glóbulos rojos, esto reduce la
incidencia de reacciones alérgicas y anafilácticas después de las células rojas de la transfusión. Además, el rendimiento de FFP
es más y allí por un mejor rendimiento de croprecipitate (factores V y VIII).
desventajas:
• Hay pérdida de glóbulos rojos alrededor del 20%.
• Es más costoso.
La sangre entera está indicado para aquellos pacientes que tienen una disminución en los síntomas la capacidad de transporte de oxígeno combinado
con hipovolemia de suficiente grado asociada con shock. Pocos pacientes entran en esta categoría. Los pacientes de trauma y de cirugía mayor
o exanguinotransfusión pueden ser considerados para toda la transfusión de sangre.
Incluso en un traumatismo importante o intervención quirúrgica, una pérdida de sangre hasta el 30% puede ser corregido por el uso de soluciones
crytstalloid solo. Si la pérdida de sangre es más de un 30% y el paciente está en riesgo de shock hemorrágico transfusión de sangre completa es el
componente de elección para restaurar el volumen sanguíneo y la capacidad de transporte de oxígeno. Incluso en la mayoría de estos casos, la transfusión
de combinación de 210
Componentes preparación de sangre y sus usos
células cristaloides y rojos o glóbulos rojos y plasma fresco congelado proporciona tanto la expansión de volumen y capacidad de transporte de oxígeno.
SANGRE FRESCA
La sangre entera o los glóbulos rojos concentrados de menos de 12-24 horas de edad desde el momento de la recogida se consideran fresco. El
procesamiento de sangre de donantes que incluye la detección de los marcadores de
enfermedades transmitidas por transfusión por ejemplo, VIH, HBsAg, HCV, Treponema pallidum, etc., ABO y Rh a escribir y de detección de
anticuerpos, raramente se completa en 24 horas. Es difícil proporcionar sangre fresca garantizar la seguridad de la sangre.
Acerca de 80-90% de las plaquetas en una unidad de sangre se convierten en no funcionales y aproximadamente 30-40% de lábil factores de coagulación
V y VIII se pierden en 24 horas en el almacenamiento a 2-6 ° C. Además de una o dos unidades de sangre fresca no ayudará a un paciente con una deficiencia
específica de componentes.
La sangre fresca podría justificarse antes, cuando estaban disponibles y las pruebas para no hay instalaciones para la separación de
componentes la enfermedad transmitida por transfusión no fuera obligatorio. Ahi esta
creencia de que tiene algunas propiedades humorales místicas. Pero es mito.
No hay indicaciones válidas para la transfusión de sangre fresca antes de completar todas las pruebas necesarias. Antes de que se
requisado sangre fresca, eso Es conveniente establecer el diagnóstico y planificar
componente (s) terapia específica.
Aunque la justificación de sangre fresca es a menudo difícil, puede tener una sangría en la creencia de que
sangre fresca proporciona la mayor capacidad de oxígeno portadora, ya que tiene el nivel máximo de
2, 3 - di-fosfoglicerato (2, 3-DPG) y la cantidad mínima de potasio en comparación con sangre más antigua. Los niveles de 2, 3-DPG
retorno a la normalidad con en 12 a 24 horas después de la transfusión en los receptores, para que esto no presentar un problema
para la transfusión de rutina. 2, 3-DPG y potasio pueden ser importantes
en los recién nacidos prematuros y otros pacientes con deterioro de la función cardíaca,
choque hemorrágico, o cortar la enfermedad pulmonar.
Los recién nacidos a veces necesitan sangre fresca porque que tienen un alto porcentaje de fetal
hemoglobina, que no libera oxígeno a los tejidos, así como la hemoglobina adulta. Su
2, los niveles de 3-DPG pueden verse gravemente disminuyeron en condiciones como síndrome de dificultad respiratoria, y la sangre
transfundida representa una gran proporción de su volumen de sangre total. En esos casos,
la sangre de menos de 7 días de edad, con niveles casi completos de 2, 3 - DPG es de importancia clínica. En transfusión de intercambio y en la sangre
cirugía a corazón abierto menos de 7 días de edad es apropiado.
Una unidad de sangre total de 350 ml de sangre aumentará la hemoglobina en alrededor de 0,75 g / dl mientras que una unidad de 450 ml
aumentará Hb en alrededor de 1 g / dl en un paciente adulto de aproximadamente 70 kg de peso corporal que no está sangrando. En los pacientes
pediátricos de la transfusión de 8 ml / Kg de glóbulos rojos aumentará la Hb aproximadamente por 1 g / dl.
211
medicina transfusional Manual técnico
La anemia
aplásica leucemia
La talasemia anemia
Hemolyic
• En pacientes sangrantes
hemorragia traumática
sangrado quirúrgico
No hay niveles establecidos de la hemoglobina que indican la necesidad de transfusión. Sin embargo, se sugiere que los valores de tigre de
hemoglobina de menos de 6,0 g / dl en la ausencia de enfermedad y entre 8 y 10 g / dl con la enfermedad necesitan la transfusión de glóbulos rojos.
Se espera que cada unidad de glóbulos rojos transfundidos preparados a partir de 450 ml de sangre entera para aumentar la hemoglobina por
aproximadamente 1 g / dl (el Hct 3 por ciento) en un paciente de 70 Kg de peso corporal y que no está sangrando como con todo una unidad de toda
sangre. El aumento de la hemoglobina y el hematocrito es evidente más rápidamente con la transfusión de 1 unidad de glóbulos rojos que con 1 unidad de
sangre entera.
Razones indicaciones
> 40% de vol sangre. La sangre entera o los glóbulos rojos y cristaloides
Otros
• Anemia asociada con insuficiencia cardíaca incipiente / establecido
• valor Hb <6 g / dl
• En anemias hemolíticas hereditarias y beta talasemia mayor. Directrices son más liberales
• anticuerpos ABO se reducen, los glóbulos rojos no ABO idéntico al grupo de paciente se puede dar,
si son compatibles.
• plasma eliminado se puede utilizar para la preparación de FFP y cryoprocipitate (factores VIII y V).
• anemia nutricional, tales como la deficiencia de hierro o anemia perniciosa sensibles al hierro, fólico
ácido, eritropoyetina recombinante etc. menos que el paciente muestra signos de descompensación (necesidad
• Para mejorar el bienestar general, promover la cicatrización de heridas, prevenir infección, expanda sangre
volumen cuando la capacidad de oxígeno de carga es adecuada.
• Leucemia
• Anemia aplásica
• inmunosuprimidos
• inmunodeficiente
• mujeres multíparas
El lavado de glóbulos rojos elimina 70 - 95% de leucocitos y no hay pérdida concomitante de 15 - 20 ml de células rojas de la sangre, pero es eficaz en
indicaciones
• IgA deficientes paciente que ha desarrollado anti-IgA (incidencia de deficiencia de IgA es de 1 de cada 700 personas).
• El suministro de sangre raro que carecen de antígenos comunes para los pacientes con anticuerpos correspondientes.
213
medicina transfusional Manual técnico
• unidades autólogas de pacientes con múltiples células aloanticuerpos rojos almacenados para una futura cirugía.
• Su uso para prevenir FNHTRs ha sido suplantada por el uso de células LR-rojas.
PLAQUETAS
Plaquetas forma el tapón hemostático y proporcionar la superficie sobre la que las formas de fibrina en un paciente trombocitopénica
plaquetas
trombocitopenia
La producción de plaquetas en una persona sana es de aproximadamente 40.000 plaquetas / l por día. Esta producción saldos con tasas de eliminación de
plaquetas y mantiene un recuento de plaquetas normal, siempre y cuando se mantengan las condiciones de estado estacionario. Sin embargo,
si las condiciones alteradas a cualquiera menor producción o incrementar
destrucción de las plaquetas, el equilibrio puede ser perturbado para producir trombocitopenia.
• Leucemia
• Quimioterapia
• Anemia aplásica
■ el secuestro de plaquetas
• hiperesplenismo
• Hipotermia
supervivencia de las plaquetas endógeno y exógeno se acorta. Beneficio de plaquetas transfusión es baja.
215
Componentes preparación de sangre y sus usos
aloinmunización
Cuando plaquetas reactiva y HLA-anticuerpos son Inducido por transfusión, plaquetas después
administrada a menudo no logran para producir un beneficio terapéutico. Aloinmunización a los antígenos de plaquetas es
común en pacientes que han recibido repetidas de plaquetas transfusiones. Sin embargo, un apreciable
número de pacientes no responde para formar anticuerpos de plaquetas reactiva para razones que no están claras.
leucocitos presentes en plaquetas preparado rutinariamente concentrados, provocar la formación de HLA-anticuerpo
más fácilmente que las plaquetas.
Paciente se vuelve refractaria a plaquetas transfusión, Si incremento en el recuento de plaquetas una hora después
transfusión es inferior al 20% del aumento esperado del valor en dos ocasiones.
refractariedad plaquetaria puede ser debido a:
plaquetas específica
Hyperspleenism
Diversas técnicas se han utilizado para mejorar la eficacia de las plaquetas en pacientes aloinmunizados.
• transfusión de plaquetas-Matched
• esplenectomía
Infección
Infecciones transmitidas por plaquetas transfusiones son similares a los asociados con otra sangre
217
medicina transfusional Manual técnico
huésped: - Esta es una complicación rara de plaquetas transfusiones que pueden ser
impedido por irradiación gamma de concentrados antes de la transfusión a pacientes que han sido sometidos a trasplante de médula ósea o
tienen otra forma de inmunodeficiencia.
2. No hay un papel para la transfusión profiláctica de plaquetas en la cirugía a corazón abierto primaria habitual a menos que haya:
segundo. Microvascular sangrado (por ejemplo post-operatorio tubo de drenaje torácico mayor de 500 ml a menos de 6 horas) y la
anormalidad de la coagulación no diagnóstico
3. La cirugía o procedimientos invasivos en los que el recuento de plaquetas es de más de 50,000 / l, no se indica la transfusión de plaquetas
profiláctico.
Conclusión
Indicaciones de plaquetas Las transfusiones no pueden ser rígidos y tienen que ser individualizado, dependiendo
el recuento de plaquetas y la condición clínica del paciente.
GRANULOCITOS
embargo los granulocyres trasfusion todavía se utilizan en veces con éxito en el siguiente
condiciones:
• La septicemia no respondiendo a los antibióticos. Las infecciones en los pacientes sometidos a quimioterapia /
• Recuento de neutrófilos inferior a 0,50 x 10 9 / L (500 / mm 3), tener infección por bacterias gram-negativas, que no responden a los
antibióticos
• depresión temporal de la médula ósea para 1 - 2 semanas. 218
Componentes preparación de sangre y sus usos
• capa leucocitaria
• Granulocitos, Aféresis
• 0,60 x 10 9 granulocitos
• Contaminados con glóbulos rojos, plaquetas, otros leucocitos
• plasma 15-20 ml
• granulocitos 1 x 10 10
• otros leucocitos 1 x 10 8
• En lxl0 adultos 10 granulocitos diario por ejemplo, 1 unidad de granulocitos preparados por aféresis (equivalente a 18 - 20 unidades de la
capa leucocitaria)
El plasma fresco congelado (FFP) es plasma que está separada de la sangre total y se congela dentro de 6-8 horas de la recogida. FFP
contiene proteínas de plasma y todos los factores de coagulación, incluyendo la lábil
Factores V y VIII si se almacena a - 30 ° C o por debajo.
219
medicina transfusional Manual técnico
• TTP
• Cuando el trastorno específico no puede ser o que aún no ha sido identificado
Es debido a la ausencia de vitamina K o el uso de drogas como la cumarina, como warfarina sódica y dicumarol
ese interferir con el metabolismo de la vitamina K. La administración de vitamina
K se prefiere FFP con el fin de corregir la deficiencia de vitamina K o cumarina sobre dosis. Debido a que se requieren
varias horas para la vitamina K eficacia, signos de hemorragia
puede requerir una transfusión de PFC en caso de emergencia.
■ El uso de FFP en conjunción con células rojas ha sustituido en gran medida la transfusión de sangre fresca.
■ plasma pobre en crioprecipitado contiene 80% de la cantidad de Factor V en FFP y se puede utilizar como una alternativa a
FFP.
La dosificación de FFP: Alrededor de 10 ml / Kg de peso corporal. evaluación posterior a la transfusión de niveles de aPTT, PT y fibonogen se
realiza para monitorizar el efecto de PFC. FFP debe descongeló a 30-37 ° C en baño de agua circulante.
plasma descongelado debe ser transfundida tan pronto como sea posible, o dentro de 12 horas, si se almacena at2-4 ° C.
prueba de compatibilidad antes de la transfusión no es necesario. Plasma debe ser ABO compatible con la sangre del receptor, pero no
necesariamente grupo específico. Sin embargo se prefiere plasma del mismo grupo ABO que la del receptor. plasma del donante no
debe contener anticuerpos ABO que podrían interactuar con un antígeno o B en las células rojas de la sangre del receptor.
UNA A, AB
segundo B, AB
AB AB
Rh (D) positivo de plasma no debe administrarse a Rh (D) negativas las mujeres en edad de procrear.
• hipoproteinemia
• Fuente de las inmunoglobulinas
220
Componentes preparación de sangre y sus usos
Plasma se trata con el disolvente tri (n-butil) fosfato (TNPB) y el detergente Triton X-100
para inactivar los virus de envoltura lipídica como la hepatitis B y C y VIH. El disolvente - detergente de tratamiento no tiene ningún
efecto sobre los virus-no lipídicos envuelto, como la hepatitis A o parvovirus B19. la coagulación
factores de disolvente / detergente plasma son comparable a FFP.
Las indicaciones para su uso son los mismos que el de FFP.
Contraindicaciones:
• Los pacientes bajo tratamiento con ir médula ósea quimioterapia o radiación perjudicial
Plasma separado de una unidad de la sangre completa en o antes del quinto día de la fecha de caducidad que se llama como una sola plasma de
donantes. plasma pobre en crioprecipitado es un subproducto de la preparación del crioprecipitado. Ambos estos productos carecen de los factores de
coagulación lábiles V y VIII, pero contienen factores de coagulación estable II, VII, IX plasma, y X. Cryo-pobre carece de fibrinógeno también.
indicaciones
• En la deficiencia de factores de coagulación estables (por ejemplo, coagulopatías debido a las drogas warfarina)
• Quemar
Plasma 10- 15 ml
El factor VIII 80-100 UI
fibrinógeno 150 - 250 mg
fibronectina 55 mgm
indicaciones:
• la hemofilia A
221
medicina transfusional Manual técnico
• Fuente de cola de fibrina utilizada como agente hemostático tópico en procedimientos quirúrgicos y para
Concentrado de factor VIII, 500 botella iu, disponible como producto farmacéutico, es el producto de
opción para la mayoría de los hemofílicos.
Dosis y Administración de concentrados de factor VIII
Croprecipitate puede no ser idéntica ABO se prefiere compatible ABO sin embargo croprecipitate. La prueba de compatibilidad no es
necesario, el tipo de Rh No es necesario considerar cuando se utiliza este componente.
En el cálculo de la dosis, se puede suponer que 1 UI de peso corporal de factor VIII / Kg aumentará el factor del paciente por 2%
(0,02 UI / ml). Por lo tanto, si el nivel de factor VIII línea de base del paciente es 0,01
iu / ml, una dosis de 20 UI / sería de esperar Kg de peso corporal para elevar el nivel de 40% (0,4 UI / ml). La vida media del factor VIII es de
10-12 horas.
Si se requieren 20 unidades / kg de peso corporal, una persona de 70 kg de peso requerirá 1.400 UI de factor
VIII.
CRYO podría ser utilizado para suministrar 1.400 UI de factor VIII, pero a 80 UI por bolsa esto requeriría al menos 17-18 bolsas de crio.
Ejemplo:
A 70 Kg hemofílico severo con hematocrito del 40% tiene un nivel de factor VIII inicial de 2 UI por dl (0,02 UI / ml, 2% de actividad).,
¿Cómo se debe dar muchas unidades de concentrado de factor VIII para elevar su nivel de factor VIII al 50 UI / dl?
222
Componentes preparación de sangre y sus usos
iu / k
• Acut hemarthosis
20
La duración del tratamiento con factor VIII depende del tipo y la ubicación de la hemorragia. Después de la cirugía importante, el nivel de
factor VIII debería mantenerse por encima de 40-50 UI / dl durante al menos 10 días.
ensayo de factor VIII debe ser hecho para servir como una guía para la terapia. En caso de emergencia el aPTT se puede utilizar como una guía aproximada al
agentes antifibrinolíticos (ácido aminocaproico y ácido tranexámico) son útiles en el sangrado controlando
en la cavidad oral. La dosis recomendada de ácido amincaproic es 75 mg / kg de peso corporal cada 4-6 horas,
la del ácido tranexámico es 25 mg / kg de peso cada 6-8 horas. Los agentes antifibrinolíticos se dan 1 día preoperatorio y
continuó durante 7-10 días. La terapia de elección para sever hemofilia A es Factor VIII concentrado.
Cryo se descongela a 30 - 37 ° C en baño de agua circulante y todas las bolsas son reunidas en una bolsa por medio de la bolsa de
conector de la bolsa bajo flujo laminar. Lavar cada bolsa vacía con 10 ml de solución salina normal estéril para disolver crioprecipitado
residual y añadir a la crioprecipitado agrupado. Se debe utilizar
preferiblemente inmediatamente después descongelación y puesta en común.
223
medicina transfusional Manual técnico
Sangre pura RBC (aprox. De Hct 40%) 500 ml Aumentar los glóbulos rojos y
las células rojas de la sangre RBC (aprox. De Hct 75%), 250 ml Aumentar la masa de glóbulos rojos en
células rojas + Aditivo RBC (aprox. De Hct 60%) 330 ml Aumento de los glóbulos rojos
Los leucocitos reducido RBC> 85% de volumen original 225 ml Aumentar la masa de glóbulos rojos,
Los glóbulos rojos WBC <5x 10 8 a <5x 10 6 reducir FNHTR, WBC <5 x 10 6
Pocas plaquetas y mínimo disminución HLA Inmunización
RBC lavados RBC (aprox. 75%) 180 ml Aumentar la masa de glóbulos rojos,
Los glóbulos rojos congelados / RBC (aprox. De Hct 75%) 180 ml Aumento de la masa de glóbulos rojos,
se preparan
Plasma fresco congelado que tiene todo el plasma 220 ml trastornos de la coagulación, si
224
Componentes preparación de sangre y sus usos
La conciencia de los médicos con respecto a los problemas de los productos de sangre / sangre seguridad, la conservación de la sangre, un gran énfasis se ha
puesto en alternativas a los productos sanguíneos alogénicos. Estas alternativas son las intervenciones farmacológicas pocos de ellos muestran prometedor
• Thrombpoietin
Existen datos suficientes para EPO, G-CSF y GM-CSF para su uso clínico.
• La desmopresina
• dipiridamol
• prostaciclina
• La heparina
• ácido Epsilon-Aminocorproic
• Ácido tranexámico
• Aptotinin
• Perfluocarbons
• solución de hemoglobina
EPO es producida por el riñón. En condiciones normales, la EPO asegura la supervivencia de las células progenitoras eritroides
para reemplazar las células rojas. Cuando el nivel de EPO disminuye, algunos de dependiente de EPO
células progenitoras mueren, y la producción de glóbulos rojos disminuye. La vida media de la EPO es de 4-13 horas.
eritropoyetina Reombinant (EPO) se prepara por tecnología de ADN recombinante.
225
medicina transfusional Manual técnico
• Anemia con infección por VIH sometidos a tratamiento con zidovudina (AZT) (eficaz cuando el nivel de eritropoyetina
<500 u / L)
• anemia preoperatoria
• la anemia quirúrgica
• La anemia de la prematuridad
• síndrome mielodisplásico
• Anemia falciforme
Las dosis:
Tres veces a la semana con la dosis reducción de una vez la Hematocrito del paciente. alcances
0,30-0,34.
G-CSF y GM-CSF estimulan la proliferación de las células progenitoras de neutrófilos y movilizan granulocitos de la médula.
GM-CSF si se administra repetidamente, también aumentará eosinófilos y monocitos. Se utilizan clínicamente en:
transfusiones
• Paciente que tiene supresión de la médula ósea debido a los agentes anti-virales
• Ambos pueden ser agentes eficaces para aumentar la recaudación resultados rendimiento granulocitos, G-CSF hasta 10 x 10 10 rapheresis
Las dosis:
G-CSF - <5 ug / kg de peso corporal por día dosis GM-CSF puede estar limitado debido a efectos
secundarios. G-CSF - 10 - 16 <s> g / kg de peso corporal por día para movilizar PBSC 226
componentes sanguíneos Preparación ana Sus usos
acetato de desmopresina (DDAVP) - [1-desamino, 8-D arginina, vasopressine] es un análogo sintético de harmone antidiurética
(vasopresina)
DDVAP aumenta los niveles de factor VIII y factor de von Willebrand (vWF)
Dosis: 0.3 mgm / Kg de peso corporal, por vía intravenosa. Utilizado
en : • Leve Hemofilia A
• enfermedad de von Willebrand
• Para mejorar o tiempo de hemorragia correcta en pacientes con defectos plaquetarios adquiridos como en la uremia, la cirrosis, la ingestión de
aspirina
• Los agentes tópicos
La cola de fibrina y gel de fibrina son derivados de la sangre, más agentes farmacológicos, y se utilizan como la intervención en la hemostasis
quirúrgica. Los agentes se aplican directamente a las heridas sangrado se presentan o se pueden utilizar para sellar injertos.
La cola de fibrina se deriva de una fuente de fibrinógeno y Factor XIII (factor de estabilización de fibrina), en el que una solución de fibrinógeno
se mezcla con una solución de albúmina bovina y se aplicó a campo quirúrgico. Alternativamente plasma autólogo puede ser utilizado como una
fuente de fibrinógeno y factor XIII. gel de fibrina consiste en rico en plaquetas-plasma, que se mezcla con una solución de albúmina bovina y se
aplicó a campo quirúrgico. plasma rico en plaquetas puede ser autólogo.
Prostaciclina tiene un efecto de ahorro de plaquetas durante la CEC, presumiblemente debido a la inhibición de la agregación plaquetaria.
antifibrinolíticos TERAPIA
Tres agentes antifibrinolíticos disponibles en el mercado son:
• Epsilon - ácido aminocarporic (EACA)
• Ácido tranexámico
• aprotinina
Son particularmente útiles en el control de la hemorragia en la cavidad oral por ejemplo, extracción de los dientes permanentes, la lengua y la boca
laceración y cirugía oral.
Las dosis: ácido E-aminocarporic - 75 mgm / Kg cada 4-6 horas por vía oral
ácido Tranexaminc - 25 mgm / Kg cada 6-8 horas
227
medicina transfusional Manual técnico
No hay estudios que apoyan satisfactorios el uso regular de agente farmacológico para anti-
coagulación de la circulación extacoporeal, la preservación de las plaquetas y la terapia anti-fibrinolítico.
Muchas soluciones sustituto de la sangre de llevar el oxígeno como perfluocarbons emulsiones, libre de células
soluciones de hemoglobina y la hemoglobina en liposomas encapsulted, se han intentado, pero ninguno está disponible para uso clínico satisfactorio. La investigación
Los perfluorocarbonos (PFCs) son relativamente simples, material inerte (por ejemplo, Teflón) que tiene la capacidad de
disolver gran cantidad de oxígeno. La mayoría de ellos causan efectos secundarios desagradables. Sin embargo, una
humano. Una limitación significativa a la emulsión de PFC es que con el fin de llevar a cantidad de oxígeno similar a la hemoglobina, un paciente
tiene que respirar alta concentración de oxígeno. Recientemente, un número de muy mejorada emulsión estable de una variedad de compuesto
perfluoro han sido desarrollados con la capacidad de carga más alta de oxígeno. Sin embargo, ninguno de estos son actualmente disponibles para
uso clínico.
En Se han hecho los últimos esfuerzos para desarrollar soluciones de hemoglobina libre de células. Tales soluciones de Hb eliminarán la
dependencia de la respiración de oxígeno como en emulsiones de PFC porque Hb se une al oxígeno químicamente. Sin embargo, la
solución de Hb en sí no es adecuado para la infusión directa, ya que se elimina rápidamente de la circulación, y su afinidad por el oxígeno
es demasiado alto cuando despojado de su membrana celular protectora. Se han hecho esfuerzos mediante la modificación de Hb por
piridoxilación que reduce su afinidad por el oxígeno y por subsiguiente conjunción de la Hb con diversos polímeros biocompatibles o
mediante polimerización de por sí Hb que aumentar el tamaño del complejo de molécula de Hb a un punto que no va a filtrar en glomérulos
renales .
Alternativamente se han realizado esfuerzos para separar resto hemo de la hemoglobina y adjuntar a polímero de tamaño apropiado. Esto
permite el uso de hemo de origen animal y preparar hemes sintéticos. Sin embargo, hasta ahora no existe un informe del uso de la Hb
modificada en humanos.
La hemoglobina encapsulada
hemoglobina encapsulada nunca ha sido administrado en el ser humano y su futuro como un sustituto de la sangre depende del desarrollo de una
el concepto que uno podría elegir simplemente “artificial” sobre la sangre real para
transfusiones en ser humano es ingenuo. Es probable que los servicios de transfusión de sangre de futuro pueden proporcionar una serie de productos - algunos
228
15 aféresis
INTRODUCCIÓN
Aféresis (o aféresis) es una palabra griega que significa separar o eliminar. En la aféresis de sangre es extraída de un
donante o paciente en solución anticoagulante y se separa en componentes.
Uno (o más) componente es retenida y los constituyentes restantes se devuelven al individuo.
Cualquiera de los componentes de la sangre se puede quitar y los procedimientos se indique para el componente seleccionado. El
proceso de eliminación del plasma de los glóbulos rojos se denomina plasmaféresis. Del mismo modo términos se dan a la eliminación de
otros componentes, incluyendo plaquetas (plaquetoféresis),
glóbulos rojos (Erythrocytapheresis) o leucocitos (Leucoféresis). La aféresis puede ser no terapéutico
o terapéutico. Se puede hacer manualmente o usando un equipo automatizado.
máquinas célula-separador automatizadas se utilizan tanto para la preparación de componentes y aplicaciones terapéuticas.
En la aféresis manual de sangre completa se recoge en el sistema de múltiples bolsas y se centrifugó
desconectado. Se trata de un gran cuidado de que las bolsas están correctamente etiquetados y su contenido se devuelven al donante IHE
correcta. Con la actual tecnología automática disponibles ahora el proceso manual se utiliza raramente.
Las cuestiones de seguridad y calidad, que son el requisito básico en los bancos de sangre, se cumplen mediante el uso de componentes de aféresis de
única para el instrumento. Cada uno tiene un mecanismo para girar y dispositivo de separación sin retortijón
cada fabricante suministra información detallada y protocolos operativos. Eso debiera ser
a disposición de enfermería y personal técnico.
La filtración de plasma a través de una membrana permite la recogida de plasma de donantes sanos o eliminación terapéutica de
constituyentes del plasma anormales. La mayoría de Los instrumentos tienen la membrana
dispuestos como fibras huecas, pero algunos tienen placas planas. superficie de la membrana interior repeler elementos celulares en el flujo de sangre para que las
230
aféresis
L-leucocitos.
Tecnología Haemonetic
Intermitente-flujo-centrifugación célula separadores, principalmente
MCS Plus de Haemonetic es nuevo separador de células de la tecnología de flujo intermitente (Fig. 15.1). ENTRADA
PUERTO
PUERTO DE SALIDA
plasma a la bolsa externa
Red Cell
Interface capa / Buffy
Glóbulos
rojos
(Todo Sangre)
Fig.15.2
231
medicina transfusional Manual técnico
Es muy ligero. MCS Plus se ha desarrollado para la recogida de glóbulos rojos automatizado también y tiene la capacidad de utilizar más
pequeña aguja de extracción y un anticoagulante dosificada para la recogida de glóbulos rojos.
Ambas máquinas MCS y MCS Plus son capaces de recopilar las plaquetas de un solo donante con o sin plasma adicional que puede ser
plasma y 500-600 ml de plasma pueden ser recogidos. Puede ser utilizado para el
Abrazadera
Fig.15.4
CS-3000 Plus tiene micro-procesado controlado y el sistema de flujo continuo (Fig. 15.3). Eso
utiliza detector de interfaz, que detecta la densidad óptica de limitar la contaminación cruzada. Siempre hay bajo volumen extracoporeal y
el proceso toma menos tiempo en comparación con el procedimiento de un solo brazo. Es totalmente sistema cerrado.
Durante el funcionamiento de la sangre anticoagulada se bombea en el recipiente de separación de hilado. Los glóbulos rojos se embalan por la
fuerza centrífuga hacia los bordes exteriores del contenedor. A continuación, la salida de glóbulos rojos
el recipiente de separación. El componente de densidad inferior, tal como plasma, plaquetas o glóbulos blancos se elimina mediante
bomba de plasma y entra en el recipiente de recogida de hilatura donde plaquetas o glóbulos blancos se embalan por la fuerza centrífuga hacia
los bordes exteriores del contenedor. El componente separado sigue siendo embalado en el contenedor, mientras que otros constituyentes de
la sangre son devueltos al donante / paciente (Fig. 15.4).
Es capaz de colección de plaquetas de donantes individuales sin o con plasma adicional para transfusión como plasma fresco o plasma fresco
congelado.
233
TRANSUFUSION MDlCINE T Manual técnicaLista
una correa como la cámara de separación inicial Tiene una tranquila alta centrífuga, la
eficiencia que proporcionan volúmenes de producto de acuerdo con en más corto tiempo
cantidades recogidas
Las plaquetas 3,0-8,0 x 10 1 1 en 180-200 El separador
Amicus
ml de plasma
Fig.15.5
Plasma 400 - 600 ml BAXTER
Los glóbulos rojos 180 - 200 ml RBCs absolutos
PBSC variable
Donantes Reacciones
Reacción WB Plasma
entera 234
aféresis
Fig. 15.6
Diagrama de flujo de AMICUS Separador individual de agujas
1. Un médico idóneo, debidamente calificado es responsable de todos los aspectos del programa de aféresis.
4. Operador (de enfermería o personal técnico) de la máquina de aféresis deben conocer todos los aspectos de sus disparos de operación y de
problemas.
5. Un operador de aféresis debe ser amable y debe ser capaz de aliviar la ansiedad del donante / paciente.
6. Debe haber un manual a disposición del personal de enfermería y técnicos, dando descripción detallada de cada tipo de
7. Los registros de los resultados de laboratorio y los datos para cada procedimiento de aféresis deben mantenerse.
1. Donador de someterse a un procedimiento de aféresis de vez en cuando (no realizado frecuencia de una vez cada 4 semanas) debe cumplir
235
236
medicina transfusional Manual técnico
2. Donante debe ser preferentemente de donantes de repetición - podría haber donado sangre 1-2 veces antes.
3. consentimiento por escrito del donante se toma después de explicar el procedimiento en detalle, el tiempo
4. El acceso venoso es una consideración importante en la aféresis de donantes y las venas debe ser examinada en el momento de la
5. Donantes debe ser examinado antes de la aféresis para los marcadores de las enfermedades infecciosas transmitidas por la
transfusión de sangre y sus componentes en la misma manera que para la sangre entera. Cada donante debe ser probado antes de
cada aféresis menos que el donante en someterse a procedimientos repetidos, en tales pruebas de casos para los marcadores de
6. Las pruebas para la hemoglobina, grupo ABO, el tipo de Rh, y la detección de anticuerpo inesperado se hacen.
7. regulaciones más estrictas gobiernan el donante que participan en el programa de aféresis en serie
(Procedimiento realizado con más frecuencia que cada 4 semanas).
i) Intervalo entre dos procedimientos debe ser de al menos 48 horas y la pérdida de glóbulos rojos no debe exceder de 25
ml por semana,
ii) Si los glóbulos rojos del donante no se podían vuelven a infundir durante un procedimiento, o si el participante dona una unidad
de sangre total, 12 semanas deben transcurrir antes de que la posterior procedimiento de aféresis,
iii) el monitoreo cuidadoso de peso, contar las células de la sangre, los niveles de proteína de suero y la cuantificación de las
inmunoglobulinas se requiere.
1. Los donantes que han tomado aspirina que contiene la medicación dentro de las 36 horas son generalmente diferido.
2. De plaquetas puede ser recogida a partir de donantes que no cumplan con el requisito si el componente es de particular valor para el
3. El intervalo entre los procedimientos debe ser de al menos 48 horas. Un donante no deberá someterse al procedimiento de más de 2
5. Si plaquetoaféresis se realiza con mayor frecuencia que cada 4 semanas, un recuento de plaquetas se debe hacer y
debe ser más de 150.000 / l antes de realizar subsiguiente
plaquetoaféresis.
6. Algunos abogan por el recuento de plaquetas se puede hacer antes de que todo plateletapheresis de manera que no se comprometa la salud de los donantes.
7. Si se recoge plasma extra y si el procedimiento se lleva a cabo más de una vez cada 4 semanas, el procedimiento no se
debe hacer si la proteína sérica total es de menos de 6,0 g / dl o si ha habido una pérdida de peso sin explicación.
leucoféresis
De vez en cuando se necesitan granulocitos en neonatos y adultos con neutropenia y sepsis (infección gramnegativos), no
respondiendo a los antibióticos. Para recoger número adecuado de granulocitos -
generalmente cercanos 1.0 - 3.0 x 10 10, se aplica la técnica de aféresis.
Un diario dosis de al menos I x 10 10 granulocitos y compatibilidad HLA es necesario para alcanzar terapéutico
efecto. granulocitos concentrados puede inducir HLA inmunización, pueden transmitir
citomegalovirus infección, y si no irradiado puede causar la enfermedad de injerto contra huésped en susceptibles
destinatarios. HLA-incompatible granulocitos pueden causar dificultad respiratoria.
Hay un renovado interés en la terapia de transfusión de granulocitos en los recién nacidos y adultos con sepsis
y neutropenia que no responden a los antibióticos ya que las dosis de células mucho más grandes pueden ser obtenidos cuando las células se
recogen de donantes estimulados con factores o corticosteroides estimulantes de colonias de granulocitos.
almidón Hydroxlethyl (HES), en forma de bajo o de alto peso molecular, se infunde durante el
procedimiento de recogida de RBC para aumentar la sedimentación y para facilitar la separación y recogida de los granulocitos.
Todos pruebas de laboratorio, ABO y Rh, detección de anticuerpos y de enfermedades infecciones marcadores son probados antes de la
flebotomía. glóbulos rojos en granulocitos concentrados están siempre presentes, glóbulos rojos
deben ser compatibles con el plasma del receptor, y si más de 2 ml de glóbulos rojos están presentes en concentración de granulocitos
se debe ser transversal coincidente. destinatario Idealmente D-negativo deben recibir
concentración de granulocitos del donante D-negativo.
ERYTHROCYTAPHERESIS
avance reciente en aféresis implica la recogida de glóbulos rojos por aféresis automatizado. Muchos
las máquinas de aféresis automatizados se han mejorado y permitir la recogida de cualquiera de dos
237
medicina transfusional Manual técnico
puede ocurrir. En tales casos, la plasmaféresis en serie se diferirá durante 12 semanas. glóbulos rojos
pérdida debe no ser Más que 25 ml por semana.
La plasmaféresis con equipo automatizado se basa en los principios de separación de plasma a partir de
otros componentes de la sangre mediante técnicas de centrifugación y filtración por membrana. Existen
Las máquinas para la plasmaféresis que trabaja en el principio de la técnica de centrifugación son el sistema de recogida de
plasma (PCS / PCS 2) ambos fabricados por M / S Haemonetics Corporación Haemonetics MCS Plus y. Autopheresis C (APC),
fabricado por Fenwal (Baxter), trabaja en
el principio de tanto de filtración de membrana y centrifugación. Todos estas máquinas tienen intermittent-
sistema de flujo. Otro TPE máquina fabricada por Cobe trabaja en la filtración de membrana y el sistema de flujo continuo.
Autopheresis C es máquina de flujo intermitente en la que se recoge la sangre en un pequeño cilindro que está girando y
forzando plasma a través de una membrana de policarbonato (Fig. 15- 8). Hay tanto de filtración de membrana y la tecnología
centrifugación en Autopheresis C. La filtración tiene la ventaja sobre la
centrifugación que recoge el plasma libre de células.
3. Los filtros de membrana tienen problemas potenciales tales como fugas o daño a las células. los
complementar pueden activar.
1. Los criterios para la aceptación de donantes de plasmaféresis son ligeramente adhesivo que el de los donantes de sangre de rutina.
2. Los donantes son informados acerca el procedimiento en detalle, acerca de los posibles peligros, y escrito
consentimiento se toma.
6. Recuento total de sangre y suero proteínas deben ser con en condiciones normales limitado, y probado
periódicamente.
Si la plasmaféresis se realiza no más de una vez cada 4 semanas, se siguen los criterios de selección que se aplican a las
donaciones de sangre total. sin embargo si los donantes está participando en una serie
programa de plasmaféresis (por ejemplo, plasma es donado con más frecuencia que una vez cada 4 semanas), el procedimiento no debe realizarse
si la proteína total es menos de 6,0 g / dl o se ha producido la pérdida de sangre sin explicación. Cada 4 meses, todos los registros y pruebas de
laboratorio deben ser revisados, y los niveles de electroforesis de proteínas séricas o de inmunoglobulina (IgM e IgG) debe ser determinado.
Es seguro para aceptar 600 ml de plasma por sesión con un intervalo de dos semanas entre las donaciones o 24 veces en un año. Es
mejor tener un mayor número de donantes que someter a un pequeño número de donantes a las donaciones más frecuentes.
La plasmaféresis no terapéutico
1. Para aumentar el inventario de plasma de FFP para la transfusión
3. Para obtener plasma para preparar inmunoglobulinas a Rh, el tétanos o HBsAg etc.
4. Para recoger plasma para la preparación de la albúmina, factor de proteína de plasma (PPF) y otros componentes del plasma.
5. Para preparar factores de coagulación como el factor VIII, factor IX complejo etc.
Aféresis FFP (AFFP) difiere significativamente de FFP derivado de sangre completa (WBD-FFP).
AFFP WBD-FFP
Volumen total 540 ml 200 ml
plasma Absolute * 486 ml 160 ml
Anticoagulante CPD / CPDA1 4% de citrato de sodio citrato de sodio 3%
Anticoagulante/ 1:10 1: 5
* * Reacciones causadas por la liberación de citoquinas por leucocitos son menos en los receptores por la transfusión de AFFP en
comparación con WBD-FFP.
241
medicina transfusional Manual técnico
procedimientos terapéuticos
aféresis terapéutica no cura una enfermedad, pero puede ser muy eficaz en el alivio de los síntomas de la enfermedad subyacente. La
eficacia del procedimiento se ve reforzada por la terapia de fármaco concomitante, en particular
immunosoppresive terapia en problemas inmune-mediada. La aféresis se clasifican
por el componente eliminado - citaféresis si el componente de cambio iscellular y plasma si se retira la sustancia nociva en el
plasma.
Plaquetoféresis
Puede ser utilizado para el tratamiento de pacientes que tienen el recuento de plaquetas anormalmente elevada con síntomas relacionados. Esta
condición ha sido reportada en pacientes con trastornos mieloproliferativos como polcythemia
vera. Los pacientes con conteo de más de 1, 000,000 / l pueden desarrollar complicaciones trombóticas o hemorrágicas. Durante procedimiento de
aféresis el recuento de plaquetas se puede disminuir tanto como un tercio a la mitad del valor inicial. El procedimiento se puede repetir con tanta
frecuencia como sea necesario hasta que la terapia con medicamentos se haga efectiva y los síntomas desaparecen.
Leucaféresis terapéutica
Eso se ha utilizado para tratar a los pacientes de leucemia, en particular con leucostasis inminente, en el cual
agregado leucocitos y trombos pueden interferir con el flujo sanguíneo pulmonar y cerebral. Leucoféresis se indica si el recuento de
leucocitos es más de 100.000 / ul. Sin embargo la eficacia
de tal leucorreducción es no probada. El recuento de glóbulos blancos se eleva durante semanas, y leukoreduction puede efectuarse con la
quimioterapia.
Eythrocytapheresis terapéutica
plasmaféresis terapéutica no es una cura para la enfermedad subyacente, sino más bien una forma de proporcionar corta
alivio plazo. El proceso de la plasmaféresis terapéutica es en realidad un intercambio de plasma en lugar de aféresis. Durante el
intercambio terapéutico de plasma, lo patológico sustancias en el plasma se
eliminado y reemplazado con un fluido. El fluido de sustitución puede ser plasma, albúmina, solución salina o una combinación de albúmina y
solución salina. El plasma está constantemente reemplaza con el fluido de modo volumen de sangre del paciente no cambia.
La eficiencia de un intercambio de plasma está relacionado con se elimina la cantidad de plasma. Un procedimiento que elimina el plasma
igual a volumen de plasma del paciente se llama intercambio de plasma en un solo volumen. Un intercambio de plasma en un volumen reduce
30% de constituyentes no deseados de plasma. El segundo intercambio de plasma, como una parte del mismo procedimiento, reducir sólo el 10% de
constituyentes no deseados de plasma. Se recomienda que aproximadamente 1 a 1,5 L de plasma puede ser intercambiado por procedimiento.
constituyentes patológicos presente
en intravascular y espacios extravasclar, efecto el cabo de venir
el intercambio de plasma. Si el anticuerpo, que es la causa de la enfermedad es la IgM, aféresis es eficaz como IgM es principalmente en intravascular. Donde
como IgG está igualmente presente en los espacios intravascular y extravascular 242
aféresis
y aféresis es menos eficaz y IgG sintetizar y reaparecen rápidamente. La eliminación de anticuerpos IgG es más eficaz cuando se combina
con fármacos inmunosupresores.
La plasmaféresis es indica en las condiciones mediadas por factores de plasma tales como
autoanticuerpos, complejo inmune, drogas o toxinas unidas a proteínas, colesterol alto o
triglicéridos.
El intercambio de plasma se realiza a petición del médico del paciente.
Todos los procedimientos de aféresis utilizan anticoagulante para prevenir la coagulación de la sangre a medida que entra la separación
máquina. anticoagulante utilizado más comúnmente es ACD. La solución salina normal se usa para cebar el sistema de
para mantener la línea abierta y para ayudar a mantener el volumen de líquido.
En la plasmaféresis terapéutica (intercambio de plasma) Procedimiento de gran volumen de plasma del paciente se mantiene y tiene
que ser reemplazado con fluidos para mantener el volumen intravascular adecuado y la presión oncótica.
243
medicina transfusional Manual técnico
5% de albúmina con solución salina normal se prefiere generalmente como reemplazo fluido. 5% de albúmina es
ligeramente hiper-oncótica y puede diluirse con solución salina a 4,0-4,5% para el intercambio de plasma.
FFP contiene todos los constituyentes del plasma eliminado y esto es fluido de sustitución óptima. FFP tiene
la desventaja ese puede transmitir enfermedades transmitidas por transfusión, puede causar alérgica
reacciones, la incompatibilidad ABO o sensibilización a las proteínas plasmáticas. Eso es el líquido de elección solamente
cuando se desea reemplazar los factores de coagulación o para dar un poco de proteína. FFP se recomienda en el recambio plasmático
en pacientes con citopenia trombótica tromboplastina (TTP) o urinario hemolítica
síndrome (SUH). FFP puede proporcionar algunos de los factores que faltan en pacientes con TTP o SUH como precursor de la prostaciclina u
otros factores anti-trombóticos.
244
Transfusión
en la práctica
Medicina CLINICA
la práctica componentes de la sangre de transfusión requiere el uso constante de clínica crítica juicio.
El médico indicaciones para cada transfusión deben ser cuidadosamente evaluados, y cada transufion
debe ser para monitered la eficacia terapéutica. Los resultados adversos pueden seguir hemoterapia,
incluso cuando esa terapia está indicada, transfusión debe llevarse a cabo sólo si el beneficio esperado
supera los riesgos potenciales.
1. El paciente con pérdida de sangre aguda debe recibir reanimación efectiva (fluidos de reemplazo intravenosa, oxígeno, etc ..),
mientras que la necesidad de transfusión se evalúa.
2. Las indicaciones clínicas o de laboratorio específicas para la transfusión deben ser considerados.
3. vlaue hemoglobina del paciente, aunque es importante, no debe ser el único factor decisivo en el inicio de la transfusión. La
decisión de transfundir debe ser apoyada por la necesidad de aliviar los signos y síntomas clínicos y prevenir la morbilidad y
mortalidad significativas.
4. Transfusion debe ser prescrito sólo cuando los beneficios para los pacientes son propensos a ser mayores que los riesgos de
transmisión de VIH, hepatitis B y C, u otros agentes infecciosos a través de productos sanguíneos.
5. El consentimiento informado para la transfusión de sangre y sus productos se deben tomar. El médico debe explicar los riesgos y
alternativas de transfuion al destinatario o familiar responsable
245
medicina transfusional Manual técnico
y miembro documento en el médico constancia de que se ha hecho. consentimiento una vez para
TRANSFUSION MÚLTIPLE
transfusión múltiple es la transfusión repetida de sangre total o glóbulos rojos durante un largo período de tiempo (meses o años).
indicaciones:
■ la anemia hipoproliferativa:
• Hipoplasia o aplasia de las anemias
■ anemias Hemoiytic
• talasemia mayor
• Anemia falciforme
• La anemia hemolítica autoinmune (AIHA)
• glóbulos rojos leucocitos pobres deben utilizarse en pacientes que tienen reacciones transfusionales febriles no hemolíticas.
• Los glóbulos rojos deben ser del mismo grupo ABO y Rh (D) como la del paciente y deben ser cruzada emparejado mediante la prueba de
antiglobulina humana.
• Los pacientes que reciben múltiples transfusiones regulares deben administrarse agentes quelantes del hierro para prevenir la hemosiderosis.
246
Práctica transfusión en Medicina Clínica
ANEMIA FALCIFORME
Oxygen afinidad de los glóbulos rojos de la enfermedad falciforme se reduce y 2, 3 - niveles de DPG son elevados. Los síntomas de la anemia son por lo
general menos.
• infarto de hígado
• El priapismo
Cuando al menos 60% de los glóbulos rojos se sustituyen por HbA normales que contienen células, el progreso de
Los síntomas por lo general cesa. Dos métodos terapéuticos están disponibles para lograr este objetivo:
Transfusión de eritrocitos frescos
• Los glóbulos rojos frescos a partir de células donantes no falciformes, se da 10-15 ml / kg de peso cada 12
hora hasta que los niveles de hemoglobina aumentan a 12-13 g / dl.
• Las células falciformes, a causa de la supervivencia se acortan, desaparecerán rápidamente de la circulación. A partir de entonces, los
pequeños glóbulos rojos transfusión dan cada 2-3weeks mantendrá el nivel de HbS por debajo de 40%, suprimir la síntesis de HbS y
asegurar que la mayoría de los glóbulos rojos que circulan será normal
Exanguinotransfusión:
■ transfusión simple es mucho tiempo y aumenta el riesgo de sobrecarga de líquidos y la insuficiencia cardíaca congestiva.
■ Así parcial - exanguinotransfusión se recomienda como una alternativa que es más rápida y eficiente método para
disminuir el nivel de Hb
• crisis dolorosas
• Enfermedad del corazón
procedimientos
• transfusión de intercambio parcial se realiza por los glóbulos rojos que transfundieron, 15 ml / kg de peso corporal, mediante
una vena antecubital y retirando simultáneamente. 20 ml de sangre / kg de peso corporal, por gravedad desde la vena
anticubital opuesto.
247
medicina transfusional Manual técnico
indicaciones
• Transfusion se indica en la anemia de células falciformes con pneumococol fatal infecciones, tales
como sepsis, neumonía y meningitis, además de anticuerpos.
• En niños con anemia de células falciformes homocigóticos y con anemia de células falciformes - talasemia B asociada con esplenomegalia
• Durante las crisis el bazo se agranda masivamente, Hb cae desde un nivel estable de 7-8 g / dl a 2 g / dl o menos y
shock hipovolémico y puede ocurrir la muerte.
Tratamiento
• toda pronta transfusión de sangre va a corregir la hipovolemia y revertir el shock. Se retrae el bazo agrandado.
• Transfusion se da a disminuir el nivel de HbS a 20% o menos por simples transfusiones de glóbulos rojos o de cambio.
• Clínico la mejora se produce en los casos en cuyo programa de transfusiones mantiene la Hb por encima de 10 g / dl y el nivel de Hb por
El embarazo
• programa de transfusión crónica durante el segundo o tercer trimister puede reducir la insuficiencia placentaria, menor tasa de
nacimiento prematuro o todavía
• Resultados de la transfusión de intercambio parcial manual o usando automatizado flujo erythrocytapheresis continua-
también son alentadores. Nivel de HbA se mantiene a o mayor que 40%. El procedimiento se repite si el nivel de HbA
está por debajo de 20% y la hematorcrit debajo del 25%.
Los síntomas dolorosos de úlceras en las piernas y sequely devastador del priapismo pueden ser disminuidos por transfusión.
TALASEMIA
se ha hecho un progreso considerable en la terapia de transfusión para pacientes con talasemia homocigótica β- (talasemia mayor)
• El tratamiento ha consistido principalmente de apoyo y constaba de transfusión de glóbulos rojos intermitentes para controlar la anemia
1. programa de Transfusión de corrección de la anemia severa a un nivel de Hb segura de 7 a 9 g / dl para evitar los síntomas de la anemia.
248
Práctica transfusión en Medicina Clínica
3. programa Super-transfusión en el que el nivel de Hb se mantiene a 12 g / dl está diseñado para suprimir completamente la
hematopoyesis. Si este programa se inicia desde la infancia, sus
ventajas son:
• crecimiento y desarrollo normales
• Normal de la función diaria y el bienestar psicológico
• la necesidad de transfusión es menor
• Lavado rojo células-lavado de glóbulos rojos es un proceso engorroso, y tiene riesgo de contaminación.
Dosis
Sobrecarga de hierro
Como resultado de múltiples transfusiones, hemosiderosis transfusional desarrolla. Alrededor de 200 mgm de hierro se acumula con cada
unidad de sangre transfundida.
• hiperpigmentación
• La deposición de hierro en el corazón, hígado, páncreas y otras glándulas endocrinas, los resultados en la fibrosis y disfunción de órganos
• 8 horas diarias de infusión subcutánea de desferrioxamina 20-40 mg / kg de peso durante el sueño con pilas portable
bomba de infusión, 5 días en una semana es la terapia suficiente para lograr un equilibrio negativo de hierro.
249
medicina transfusional Manual técnico
Vitamina C
Convierte forma férrica de hierro a la forma ferrosa y también facilita la movilización de las reservas de hierro a hierro libre. forma ferrosa del
hierro y el hierro libre consigue atado con deferoxamina fácilmente. La vitamina C hasta 200 mgm / día se administra junto con
desferrioxamina.
esplenectomía
neocitos
Los pacientes jóvenes con ciertos trastornos hematológicos especialmente la talasemia, a menudo requieren
continua terapia de células rojas. Cada mililitro de RBCs contiene aproximadamente 1 mg de hierro, que se acumula en los tejidos y
causa hemosidrosis, su tradicional terapia es un quelante de hierro
agente.
Otro enfoque es la transfusión de glóbulos rojos más pequeños (neocitos). La preparación de neocitos implica la eliminación selectiva de
neocitos del donante o células rojas más jóvenes que se encuentran en la parte superior de la capa de glóbulos rojos después de la centrifugación o
neocytapheresis.
La vida media de los glóbulos rojos jóvenes, es decir, neocitos es de 90 - 100 días, mientras que los glóbulos rojos es de 60 días. Por lo tanto
algunos trabajadores han intentado utilizar neocitos a (1) reducir el requerimiento de la sangre (2) para aumentar intervalos de transfusión y (3) para
reducir la sobrecarga de hierro. Pero la terapia neocitos no tuvo mayor aceptación debido a que la preparación de neocitos mediante la eliminación
de la capa superior de las células después de la centrifugación o neocytapheresis es largo y costoso.
Hemoglobina:
• concentración media de Hb de recién nacidos a término al nacer es de aproximadamente 18,0 g / dl. Todos los bebés tienen una disminución fisiológica
• la concentración de Hb promedio en niño normal de 3 meses a 6 años es 11,0 a 12,0 g / dl. De 7 a 13 años de edad es
de Hb 13,0 g / dl.
• La mayor parte de la Hb en neo-nacido es hemoglobina fetal (Hb F) que proporciona menos oxígeno que HbA.
• nivel de Hb de los niños sanos mayores de 14 años es la misma que las de un adulto.
Volumen de sangre :
• El volumen de sangre de recién nacidos a término es el peso 85 ml / Kg / cuerpo, mientras que la de los recién nacidos prematuros son 100 - 105 ml /
kg / peso corporal.
250
Práctica transfusión en Medicina Clínica
Transfusión
Las transfusiones se dan en volúmenes pequeños (10-20 ml RBCs / kg de peso corporal), lo que aumenta el riesgo de exposición múltiples
donantes. Por lo tanto, una sola unidad de donante asignado a un individuo recién nacido y el uso de dispositivo de sellado tubo estéril para la
adquisición de pequeños volúmenes de transfusiones de más de la vida útil de la unidad de donante o la técnica de división de una sola unidad
multipack puede disminuir el número de múltiples donantes exposición.
La sangre debe ser lo más frescos posible y no más de 6 días de edad a la lección el riesgo de hiperpotasemia y para maximizar los niveles
de 2,3-diphophoglcerate (2,3-DPG). Se prefieren las transfusiones de glóbulos rojos. Sin embargo, para los glóbulos rojos de exposición limitada de
los donantes almacenados hasta 42 días es aceptable a no ser que la hiperpotasemia es un problema conocido.
bolsa-mascarilla,
5. la pérdida de sangre aguda con shock: reemplazo de sangre para establecer el volumen de sangre adecuado y
HCT. 0.40.
Blood Modificado / células rojas se prefiere
• Citomegalovirus seronegativos o leucocitos reducido de sangre deben ser administrados para disminuir el riesgo de
transmisión de citomegalovirus en recién nacidos prematuros y inmunodeficientes.
• Unidades de sangre pueden ser irradiados para disminuir el riesgo de enfermedad de injerto contra huésped, sobre todo en
los recién nacidos prematuros con sospecha de inmunodeficiencia o para los recién nacidos que son potenciales
candidatos a trasplante. Transfusiones en un plazo completo de los recién nacidos no requieren irradiación.
Los pacientes casi siempre requieren transfusión de glóbulos rojos perioperatorias cuando su Hb es de menos de 6 g / dl. y rara
vez cuando su Hb es mayor que 10 g / dl. Entre 6 y 10 g / dl de Hb, la transfusión
251
medicina transfusional Manual técnico
requisitos dependen de la extensión de la pérdida de sangre, enfermedad cardíaca subyacente, y el estado clínico general.
En general, la pérdida de menos del 15% de resultados voloume sangre en síntomas mínimos; 15% a 30% taquicardia; 30% a
40% aumentó signos de shock, y mayor que 40% en estado de shock severo.
Anteriormente pacientes sanos pueden ser tratados con cristaloide solo para la pérdida de volumen de sangre de menos de 30%. Los
pacientes con enfermedad de base pueden necesitar transfusiones de sangre en la pérdida de 30%, dependiendo del grado de anemia y la
naturaleza de la enfermedad.
Directrices rojos transfusión de glóbulos (Excluyendo los recién nacidos) - Resumen pérdida de
sangre aguda:
> 40% del volumen sanguíneo La sangre entera o células rojas y cristaloides
Nivel de Hb
Taquicardia, hipotensión no se puede corregir mediante la reposición de volumen solo, glóbulos rojos necesaria cuando Pvo 2 < torr,
relación de extracción> 50% Vo 2 < 50% de la línea de base
Mote - PVO 2 - la tensión de oxígeno de la sangre arterial pulmunary en la terminación de la descarga de oxígeno.
Vo 2 - consumo de oxigeno
La anemia crónica
1. Tratar con agentes farmacológicos específicos como vitmain B 12, ácido fólico, hierro, recombinante
eritropoyetina humana. si el diagnóstico indica
2. Utilizar estrategias específicas para la enfermedad de células falciformes y la talasemia
3. Transfundir para minimizar los síntomas y el riesgo de anemia en el nivel de Hb de 5,8 g / dl
• La sustitución de más de 50% del volumen de sangre en 3 horas en un adulto .. volumen de sangre normal
• En los recién nacidos 85-90 ml por kg de peso corporal o 8,5 a 9,0% del peso corporal. La transfusión
• casos obstétricos.
• En trauma múltiple
• Trasplante de hígado
La estrategia de transfusión de sangre debe ser mantener el volumen de sangre y su composición con en límites que sean seguros
con respecto a la hemostasia, la sangre oxígeno-capacidad, y la presión oncótica y bioquímica plasma (Tabla 16.1). Muestra de sangre
debe ser enviada al laboratorio en la oportunidad más temprana posible para determinación del grupo sanguíneo, rastreo de anticuerpos,
pruebas de compatibilidad, así como hematología línea de base, la detección de la coagulación, incluida la estimación de fibrinógeno y la
investigación bioquímica.
• La transfusión de plaquetas
Restauración de volumen de sangre es sumamente importante para mantener la perfusión de tejidos, la presión sanguínea y shock
hipovolémico, prevenir el daño tisular, y el empeoramiento de la trombocitopenia y coagulopatía.
253
medicina transfusional Manual técnico
Restauración de volumen circulante se logra inicialmente por la infusión rápida de cristaloides como solución de lactato de
Ringer y solución salina o coloides normal a través de gran calibre (calibre 14 o más grande) cánulas periféricas. El uso de
albúmina y albúmina no coloides frente cristaloides para la sustitución de volumen han sido recientemente objeto de debate. El
uso de coloides no se recomienda en el Colegio Americano de Cirujanos Advanced Trauma directrices de soporte vital.
solución de lactato de Ringer se rcommended como terapia inicial y la solución salina normal es una alternativa aceptable a la
solución de lactato de Ringer. solución de lactato de Ringer contiene calcio, y si se mezcla inadvertidamente con una unidad de sangre, la
sangre puede coagularse en la línea o la bolsa.
Cristaloides se infunde en proporción de 3: 1 por cada unidad de sangre perdida. Terapia se controla por la respuesta hemodinámica
y el retorno de la perfusión tisular (medido por el estado mental, la producción de orina, de llenado capilar y ausencia de acidosis).
Reanimación procede entonces por el uso de componentes de la sangre, dependiendo de la respuesta del paciente. Los pacientes que
responden a unos 2000 ml de cristaloides con el regreso de los signos vitales estables y la perfusión tisular por lo general no requieren
transfusión de sangre. Los pacientes que no responden a esta, por lo general tienen gran pérdida de sangre y requieren glóbulos rojos o toda
la transfusión de sangre y aún más la reposición de líquidos emergentes.
Transfusión de glóbulos rojos es probable que se requiera junto con la reposición de líquidos cuando se pierde un 30-40% de volumen de
sangre. La pérdida de más del 40% del volumen sanguíneo también es posible que se requiera la vida mortal y la sangre entera.
La pérdida de sangre es generalmente subestimada y no hay que olvidar que los valores de hemoglobina y hematocrito no se caigan
durante varias horas después de la hemorragia aguda. La determinación de si las concentraciones de hemoglobina intermedios justifican la
transfusión de glóbulos rojos se debe basar en los factores de riesgo del paciente de desarrollar complicaciones de la oxigenación inadecuada,
tales como:
• reserva cardiorrespiratoria
• Consumo de oxigeno
• las variables cardiológicas medidos, tales como el gasto
cardíaco del pulso de presión arterial de la frecuencia cardíaca
Estas señales pueden ayudar en el proceso de toma de decisiones, pero debe hacerse hincapié en que la isquemia silenciosa puede
ocurrir incluso en la presencia de signos vitales estables.
Prevención de la hipotermia
La hipotermia aumenta el riesgo de coagulación intravascular diseminada y otras complicaciones y puede ser impedido por precalentar los
fluidos de resucitación, los dispositivos de paciente-calentamiento tales como mantas de aire caliente y el uso de calentadores de
temperatura controlada de sangre.
La transfusión masiva de 100 ml / min o 1 unidad de sangre cada 3 minutos requiere el calentamiento de la sangre de otro modo
receptor puede desarrollar hipotermia y arritmias.
horas. 254
Práctica transfusión en Medicina Clínica
2. Si se requiere con urgencia la sangre, el tiempo de requisito debe ser mencionado en el formulario de solicitud. ABO y Rh
tipificación se realiza mediante la técnica del tubo de centrifugado y de compatibilidad cruzada se realiza por la técnica de
centrifugado solución salina o método LISS.
3. En casos muy urgentes uncorss-emparejado glóbulos rojos del mismo grupo que el de la paciente, después de hacer ABO y Rh (D)
tipificación del paciente se suministran con la concurrencia de los clínicos. Posteriormente, la compatibilidad cruzada se realiza
mediante un tubo de centrífuga de solución salina o por la técnica de LISS.
4. En situación de urgencia extrema puede ser necesario para suministrar glóbulos rojos grupo -matched O descruzar si el
grupo del paciente no se conoce o no hay tiempo para hacer ABO y Rh (D) agrupación del receptor.
En una emergencia, mujeres premenopáusicas, cuya ABO y Rh (D) del grupo sanguíneo no se conoce, O Rh (D)
engative glóbulos rojos se deben dar a evitar Rh (D) la sensibilización y el riesgo de enfermedades hemolíticas de
nuevo nacidos en embarazo posterior. O Rh (D) glóbulos rojos positivos se pueden dar a Rh (D) negativas machos y
hembras pacientes postmenopáusicas si no tienen anticuerpos anti-Rh en la sangre y Rh (D) negativo de sangre no
está disponible.
En el caso de (3) o (4) la sangre se suministra con el consentimiento de los clínicos, y "Blood
Monitorización hematológica:
La investigación se muestra en la Tabla 16.1 se debe realizar cuando la pérdida de sangre se reduce sustancialmente a la orden de (<0,5 L /
h) y después de la hemorragia está bajo control. Sobre la base de los hallazgos de laboratorio anormalidades hemostáticas correctas.
1. concentrados de plaquetas:
Los concentrados de plaquetas se dan para mantener recuentos plaquetarios 50 x 10 9 / L o superior, el nivel mínimo necesario
para lograr la hemostasia eficaz cuando la función plaquetaria es normal. Consenso de expertos sostiene que las plaquetas no
se debe permitir que caiga por debajo del nivel crítico de 50x 10 9 / litros en pacientes gravemente la coagulación. A nivel objetivo
más alto de l00x 10 9 / litros ha sido recomendado para las personas con traumatismos de alta energía múltiple o lesión del
sistema nervioso central.
Durante cardiaca sangrado cirugía de derivación puede ocurrir en los recuentos de plaquetas más alto que este, probablemente a
causa de un defecto funcional adquirida en plaquetas. transfuion plaquetas empírica puede ser necesaria cuando la función
plaquetaria es anormal, como se encuentra durante o después de un bypass cardiopulmonar.
• transfusión de volumen masivo o grande puede dar lugar a trastornos de co-agulation debido a la dilución de factores de
coagulación y plaquetas.
• La prolongación del tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) y tiempo de protrombina (PT) a 1,5 a
1,8 veces de los valores de control se correlaciona con un mayor riesgo de coagulopatía clínico y requiere
corrección.
El plasma fresco congelado (15 ml / kg de peso corporal) se da para corregir anomalías de la coagulación.
255
medicina transfusional Manual técnico
• Sangrado continuo junto con la coagulación gravemente perturbado, necesita un tratamiento más
enérgico. Concentrados de plaquetas, FFP o crioprecipitado se dan particularmente cuando hay evidencia
de coagulopatía intravascular diseminada (DIC). Cyoprecipitate reemplazará el fibrinógeno y el factor VIII.
La infusión de FFP debe considerarse después de un volumen de sangre se ha perdido. FFP solo, si se administra en
calidad suficiente corregirá fibrinógeno y la mayoría de las deficiencias de factores de coagulación, pero puede ser
necesaria gran volumen si el volumen de fibrinógeno permanece críticamente baja (<10 g / litro), y la terapia de
crioprecipitado debe ser considerado.
• Acidosis
Durante el almacenamiento de la sangre, el metabolismo de las células rojas genera ácidos que resultan en la reducción de su pH. La
acidosis en un paciente es más probable debido al tratamiento inadecuado de la hipovolemia que debido a los efectos de la
transfusión.
Por lo general, el cuerpo puede neutralizar esta carga de ácido de transfusión y el uso de agente alcalinizante bicarbonato u otra
no es necesario.
• La hiperpotasemia
En la sangre almacenada hay un pequeño aumento en el potasio extracelular. Este aumento no suele ser clínico significativo.
Como medida preventiva utilizar sangre fresca preferiblemente que es menos de 7 días de edad.
La mayoría de los pacientes que se someten a la transfusión masiva no requieren suplementos de calcio. En algunos casos, si los
niveles de calcio se vuelven excesivamente baja, gluconato de calcio o cloruro de calcio se pueden dar.
por;
recuento de plaquetas reducida (thromboycytopenia)
tiempo propthrombin prolongada (PT) - (. normal de 10-14 seg) de 1,5 a 1,8 veces del control prolongado activa
tiempo de tromboplastina parcial aPTT -1,5 a 1,8 veces del control (normal 25-35 seg.)
tiempo de trombina prolongado - 1,5 veces de control (normales 10 ± LSEC) Disminución de la concentración de
fibrinógeno - <1,0 g / L sugestivo de DIC (normal 2-4 g / L) productos de degradación de fibrinógeno elevados (normal
<l0mg / L)
Administración:
El tratamiento inmediato y apropiado o eliminación de la enfermedad subyacente es esencial para prevenir la isquemia de tejidos y
shock.
■ Identificar y tratar o eliminar la causa de la DIC
■ Mantener el volumen sanguíneo
257
medicina transfusional Manual técnico
■ Si el paciente está anémico dar sangre entera fresca disponible, ya que contiene fibrinógeno y otros factores de
coagulación.
■ Mantener las funciones hemostáticas
• Si PT y aPTT se prolongan y el paciente está sangrando, dar FFP (15 a 20 ml / kg de peso corporal).
• Si el fibrinógeno es baja (< 80 mg / dl), crioprecipitado (de 6 a 12 unidades / kg de peso corporal.) Se puede dar.
• Si el recuento de plaquetas es inferior al 50 x 10 9 / L, y el paciente está sangrando, dar concentrados de plaquetas 4-6
unidades o una unidad de aféresis de plaquetas.
■ exanguinotransfusión puede ser una terapia eficaz para los bebés que sufren CID severa sintomática después de la asfixia del
nacimiento.
■ Intravenosa Heparina: La heparina inhibe la formación de fibrina y puede resultar en la concentración de fibrinógeno aumento
plasma pero que no inhiba el efecto de los productos de degradación de la fibrina. La heparina no es eficaz en gramo -
septicemia negativo y en algunos otros casos, la heparina está indicada en los casos de trombosis persistente. El papel de la
heparina es dudosa. En algunos casos la heparina puede ser útil anterior a la transfusión de FFP. El recomendado hace de
heparina para un adulto es una dosis de carga de 5000 unidades IV seguido de 1500 unidades / por hora durante 6-12 horas. Si
se produce el sangrado debido a la heparina dar sulfato de protamina (reversión de heparina).
• Hb y Hto.
IRRADIACIÓN
Desde hace varios años el uso de productos sanguíneos irradiados (glóbulos rojos y plaquetas primalary) ha aumentado de forma
espectacular. Durante mucho tiempo se ha sabido que la irradiación gamma inactiva los linfocitos en la sangre.
linfocitos viables en la sangre pueden ser responsables de la enfermedad de injerto contra huésped (GVHD) en el receptor-host. La
enfermedad resultante tiene consecuencias graves como fiebre, erupciones en la piel, hepatitis, diarrea, depresión de la médula ósea y la
infección, todos ellos pueden progresar a la mortalidad.
Los receptores en alto riesgo de esta enfermedad son aquellos que están inmunocomprometidos o severamente immunsuppressed,
como los pacientes con trasplante de médula ósea, los recién nacidos que han recibido una transfusión intrauterina y la
exanguinotransfusión, y las personas que están receptor de sangre de familiares de primer grado.
generalmente aceptados:
• células de trasplante de médula ósea o madre de sangre periférica destinatarios
• Neonatos receptores de transfusiones intrauterinas
• receptores de transfusiones de intercambio neonatal
• Prematuros nacidos s nuevos (menos de 1.200 g)
• receptores inmunocomprometidos o inmunosuprimidos 258
La práctica de transfusión en la medicina clínica
• Los pacientes con tumores malignos hematológicos tales como leucemia aguda
• recién nacidos a término en la membrana extracorpórea oxi-generadores
• los receptores de trasplantes de órganos
No indicaciones de la empresa:
• Los pacientes con infección por VIH o SIDA
• La mayoría de los pacientes que reciben quimioterapia
• Los pacientes con anemia aplástica no reciben terapia inmunosupresora
• los recién nacidos a término sin otros riesgos Parcialmente cualquiera de cesio-137 ( 137 Cs) o cobalto-60 ( 60 Co) se
utiliza como la fuente de rayos gamma. La dosis habitual es de 25 Gray (Gy) a 35 Gy (1 Gray = 100 rads), Esta dosis inactiva 85
a 95% de los linfocitos en los componentes de la sangre sin ningún efecto adverso sobre otros componentes celulares (glóbulos
rojos, plaquetas y granulocitos) de la sangre,
La vida de almacenamiento de sangre irradiada (RBCs) es de 28 días desde la fecha de la irradiación o la fecha original de expiración de la
unidad, lo que ocurra primero. Los estudios han demostrado que la irradiación provoca una fuga modesta de potasio, reduciendo su supervivencia
después de la transfusión. Por lo tanto las células rojas de la sangre irradiados se dan en un tiempo de almacenamiento reducida. Algunos
médicos creen que las células rojas de la sangre irradiados para transfusión de intercambio deben lavarse para eliminar potasio, este paso no es
considerado como habitualmente necesario y debe realizarse sólo en los pacientes con problemas seleccionados - por ejemplo, los recién nacidos
que recibieron transfusión de intercambio con pre-existente hiperpotasemia o renal fracaso. Otras preocupaciones sobre el efecto de la irradiación
se mantienen teórico.
Los productos tales como FFP y crioprecipitados no requieren la irradiación, ya que no llevan linfocitos
viables.
La irradiación no se debe realizar en la médula ósea o células progenitoras de sangre periférica antes de su infusión.
■ Los pacientes de estado hematológico perioperatoria, tales como anemia, trombocitopenia, o trastorno de la coagulación.
■ El cebado de la bomba de oxigenadores con electrolitos o sangre depende de la condición del paciente y la preferencia
personal de cirujanos y anestesista. Generalmente el cebado de bombas de oxigenadores ahora se hace con soluciones de
electrolitos (por ejemplo, lactato de Ringer o solución de Hartman). Sin embargo, puede ser necesario cebar la
bomba-oxigenador de sangre en circumctances excepcionales, por ejemplo en pacientes con insuficiencia renal sever o en
recién nacidos y niños pequeños.
259
Práctica transfusión en Medicina Clínica
vascular Cardíacos
resección de aneurisma aórtico 6
de derivación aórtica con injerto 4
bypass de la arteria coronaria, adulto 4 (2)
derivación de la arteria coronaria, los niños 2
Endarterectomía carotídea 2
de derivación femoral-poplítea con injerto 4
Urología
Vejiga, la resección transuretral T&S
nefrectomía radical 3
Prostatectomía perineal 2
Prostatectomía, transuretral T&S
trasplante renal 2 (2)
Obstétrico y Ginecología
Aborto, terapéutico T&S
Cesárea T&S
CORRIENTE CONTINUA T&S
Hystrectomy, abdominal / vaginal T&S
Hystrectomy, radical 3
Trabajo / entrega, sin complicaciones T&S
laparoscopia T&S
Ligadura de trompas T&S
Tuboplasty T&S
reparación vaginal 1
reparación de la fístula vesico-vaginal o
recto-vaginal- T&S
Nota: Las cifras pueden variar con la práctica institucional T & S = Tipo
de cribado y el anticuerpo
En general dos tipos de filtros se utilizan para la transfusión de sangre: un filtro de 170-mm o un filtro de supresión leukocyte-. El filtro de 170-mm
elimina coágulos o restos celulares se desarrollan durante el almacenamiento de cualquiera de los productos de la sangre y se utiliza en equipos
de administración de rutina. Un filtro de la administración de sangre estándar debe ser utilizado para la transfusión de todos los componentes de la
sangre.
filtros de leucocitos-agotamiento están diseñados para eliminar los glóbulos blancos (GB). Este filtro está diseñado para
prevenir reacciones de transfusión hemolíticas febriles, para prevenir o retrasar el desarrollo de anticuerpos HLA, y para reducir el
riesgo de CMV. Filtración en el banco de sangre de decantación. en lugar de en la cabecera, es más fiable y mejor para la
reducción de leucocitos. La administración de los productos sanguíneos
2. Antes de iniciar la transfusión, verificación de la identidad del paciente debe hacerse al lado de la cama del paciente:
3. Verificar los siguientes detalles en el informe de compatibilidad, y la etiqueta de compatibilidad unido al producto de la sangre:
Si el paquete de apariencia anormal de ninguna manera, la unidad no debe ser transfundida y el banco de sangre debe ser informado
inmediatamente.
1. La administración de células de la sangre o rojos enteros debe iniciarse dentro de los 30 minutos de la emisión del banco
de sangre. Si no se requiere para la transfusión debe ser devuelto inmediatamente al banco de sangre con razones.
Después de 30 minutos de la emisión desde el banco de sangre, no se toma de nuevo en el banco de sangre.
2. Transfusion debe ser completado dentro de las 4 horas de iniciar la transfusión. Estos límites de tiempo se han determinado
para los climas templados donde la temperatura en el edificio del hospital están generalmente entre 22 ° Cand 25 ° C. Si la
temperatura ambiente (ambiente) es muy alta, más corto 'veces fuera de la nevera' debe ser utilizado.
3. Cambiar el conjunto de administración de sangre después de 12 horas, si el paciente requiere soporte de transfusión en curso.
1. FFP debe infundirse tan pronto como sea posible después de la descongelación para evitar la pérdida de factores de coagulación lábiles o
plasma descongelado se almacena a 2-4 o C debe utilizarse dentro de las 12 horas. 262
Práctica transfusión en Medicina Clínica
2. En adultos, I unidad de plasma generalmente debe infundirse con en unos 15-20 minutos.
3. Thawed o plasma parcialmente descongelado no se toma de nuevo en el banco de sangre.
Desechable equipos de transfusión
1. Debe ser estéril y nunca deben ser reutilizados.
2. La sangre entera, los glóbulos rojos, concentrados de plaquetas, plasma y crioprecipitado se infunden aunque
conjunto de administración de sangre estéril que contiene 170-200 filtro de micra.
3. Utilizar cánulas de plástico flexible, si es posible, ya que son más seguros y preservar las venas.
4. filtros de leucocitos de ozono son caros, pero son eficaces en la reducción de las reacciones hemolíticas no fibrile
transfuion y el desarrollo de anticuerpos anti-leucocitos en pacientes iransfused múltiple.
4. Sólo isotónica (0,9 por ciento) de solución salina o 5% de albúmina se deben utilizar para diluir componentes de la sangre
o puede ser infundido con el sistema de transfusión de sangre utilizado para los productos de transfusión, porque otra
soluciones IV como soluciones de dextrosa tal como 5% dextrosa en agua destilada puede dañar los glóbulos rojos y causar hemólisis
soluciones o de calcio que contiene, como la solución de Ringer lactato iniciar la coagulación en el equipo de infusión. Además,
muchos fármacos provocan hemólisis si se inyecta a través del equipo de infusión de sangre.
El calentamiento de la sangre
no es necesario el calentamiento de rutina de sangre; la infusión de 2-4 unidades de sangre refrigrated durante varias horas no causa ningún
daño. Los pacientes que pueden necesitar beneficio de la sangre calentada incluyen: adultos que reciben múltiples transfuin a tasas mayores
de 50 ml / kg / hr
263
medicina transfusional Manual técnico
■ No sumerja unidad entera de los glóbulos rojos o en un baño de agua, o ejecutar la sangre a través de un tubo extendido o bobina
en baño de agua.
dispositivos de presión o bombas son algunas veces usados para alcanzar velocidades de flujo muy rápidos en rápida transfusión:
en peligro la vida. Todas las reacciones deben ser documentadas e informadas. Directrices para el reconocimiento de las reacciones
transfusionales son:
264
Práctica transfusión en Medicina Clínica
sangre y el paciente de
identidad. Si hay alguna discrepancia, detener la transfusión inmediatamente y consultar el banco de sangre.
En un paciente inconsciente o anestesiado, la hipotensión y la hemorragia no controlada pueden ser los únicos síntomas de una
transfusión incompatible.
En un paciente consciente experimentar una reacción de transfusión hemolítica severa, signos y síntomas pueden aparecer
rápidamente - a pocos minutos de la infusión de sólo 5-10 ml de sangre. La observación detallada en el inicio de la infusión de
cada unidad es esencial.
Leve
1. Slow la transfusión.
2. Administrar IM antihistamínico (por ejemplo, clorfeniramina 0,01 mg / kg o equivalente)
3. Si no hay mejoría clínica dentro de 30 minutos o si los signos y los síntomas empeoran, trate como Categoría 2.
1. Detener la transfusión, vuelva a colocar el conjunto de dar y mantener la línea IV abierta con solución salina normal.
antipirético rectal (. ej paracetamole 10 gm / kg; 500 mg - lg en adultos). Evitar la aspirina en pacientes con
trombocitopenia.
5. Dar corticosteroides y broncodilatadores IV si hay características anafilactoides (por ejemplo.
broneospasm. estridor).
6. Recoger la orina para los próximos 24 hrs para evidencia de hemólisis y enviado al laboratorio.
7. En imporvement clínica, reinicie la transfusión lentamente con la nueva unidad de sangre si es necesario y observar cuidadosamente.
265
medicina transfusional Manual técnico
8. Si no hay mejoría clínica con 15 en mintes o si los signos y los síntomas empeoran, trate como Categoría 3.
1. Detener la transfusión, sustituir la entrega -set y mantener abierta la línea IV con solución salina normal.
2. Infundir solución salina normal (inicialmente 20-30 ml / kg) para mantener la BP sistólica.
3. Mantener las vías respiratorias y dar alto flujo de oxígeno por máscara.
4. Dar la adrenalina (como 1: 1000 de solución) 0,01 mg / kg de peso corporal mediante inyección intramuscular en
reacción alérgica grave.
5. Dar IV corticosteroides y broncodilatadores si hay características anafilactoides (por ejemplo,
broncoespasmo, estridor)
6. Dar diurético: por ejemplo, furosemida 1 mg / kg IV o equivalente (inicialmente 40 iv mgm, hasta 250 mgm
más de 4 horas)
9. Disponibilidad de una muestra de orina fresca visualmente en busca de signos de hemoglobinuria (orina de color rosa roja ro).
10. Comience en orina de 24 horas y el gráfico equilibrio de líquidos y registrar todas las entradas y salidas.
Mantener el equilibrio de líquidos.
11. Valorar la presencia de sangrado sitios de forma punción o heridas. Si hay evidencia clínica o de laboratorio
de DIC, dar plaquetas (adultos 5-6 unidades) y ya sea crioprecipitado (adultos de 12 unidades) o plasma fresco congelado (para
adultos: 3 unidades)
266
17
autoinmune
Anemia
hemolítica
anemia hemolítica inmune es una condición en la que la vida útil de los glóbulos rojos se acorta debido a la presencia de un anticuerpo
humoral en la circulación que es reactivo con un antígeno en la célula roja. En términos generales la anemia hemolítica inmune se
pueden clasificar en:
1) aloinmune
2) autoinmune
267
medicina transfusional Manual técnico
En el tipo de calentamiento anticuerpo de la anemia hemolítica hemólisis directa mediada por el complemento es raro. En AIHA-en frío de
reactivo, sin embargo, la hemólisis directa mediada por el complemento puede ocurrir que conduce a intravascular hemólisis - hemoglobinemia
y hemoglobinuria.
Descubrimientos de laboratorio:
En la anemia hemolítica se acelera la hemólisis (es decir, la duración de la vida de las células rojas se acorta). La hemólisis puede ser
intravascular o extravascular.
en AIHA hemólisis es predominantemente extravascular. hemólisis acelerada se caracteriza por la presencia de
reticulocitosis, esferocitosis, hiperbilirrubinemia no conjugada, elevado de lactato deshidrogenasa en suero (LDH), el agotamiento
de la haptoglobina en suero y la hiperplasia eritroide.
En hemólisis intravascular, hemoglobinemia, pueden producirse hemoglobinuria y el agotamiento de hemopexina suero.
1. La incidencia de la DAT positivo ha sido informado de que 1 de cada 10.000 en la sangre saludable
donantes sin evidencia de hemólisis acelerada; mientras que en los pacientes hospitalizados la incidencia de DAT
positivo es de 0,3 a 1% con el reactivo de antiglobulina IgG y 1,5% con poliespecífica reactivo ( 'amplio espectro').
La mayor frecuencia de reacción con el reactivo poliespecífica es probablemente debido a la unión de anticuerpos
anti-complemento de las células rojas. Por lo tanto, un DAT positivo es diagnóstico de AIHA sólo si hay evidencia
de hemólisis acelerada.
Cuando la DAT es positiva con el reactivo poliespecífico, reactivos monoespecíficos, tales como IgG. anti-complemento, y rara
vez IgA o IgM se utilizan para determinar la naturaleza de autoanticuerpos. 268
La anemia hemolítica autoinmune
2. En raras ocasiones la DAT puede ser negativo en AIHA. técnicas más sensibles han demostrado que la
los glóbulos rojos se recubren con un menor número de anticuerpos, que están por debajo del límite detectable de la prueba,
3. Cuando los glóbulos rojos están fuertemente recubiertas con autoanticuerpos la misma puede eluir en plasma.
La mayoría de estos autoanticuerpos son contra antígenos de células rojas comunes y dar una prueba positiva indirecto de
antiglobulina (prueba de Coombs indirecto) con células del donante durante la prueba de compatibilidad.
4. Autoanticuerpos se adsorbe en los glóbulos rojos y puede estar en pequeña cantidad en el suero,
mientras aloanticuerpos, puede o no puede ser adsorbido en los glóbulos rojos, pero siempre presente en el suero, por lo tanto:
WAIHA
De tipo mixto + + IgG y IgM IgG y reactiva poco claro, pueden ser anti-I, -i
AIHA autoanticuerpos o un otro crioaglutininas
hemoglobinuria fría 0 + IgGbiphasic hemolisina No reactivo Anti-P
paroxística (Donath- Landsteiner
anticuerpo), anticuerpo
reacciona en frío
y la hemólisis se produce, a
37 ° C en presencia de
complemento
Inducida por + + autoanticuerpos IgG No reactivo a menudo relacionada Rh
medicamentos AIHA
Naturaleza de autoanticuerpos:
Mayormente los autoanticuerpos formados son contra los antígenos de alta incidencia y por lo tanto, reaccionan con las células rojas de donantes
más aleatoria sangre que causa problemas en la selección de una muestra de sangre adecuado para transfusión. La capa de autoanticuerpos
glóbulos rojos del paciente y también están presentes en el suero. Por consiguiente, la interpretación de la tipificación celular, pruebas de
compatibilidad, detección de anticuerpos y "identificación anticuerpo puede ser difícil por los procedimientos de rutina.
269
La anemia hemolítica autoinmune
2. En raras ocasiones la DAT puede ser negativo en AIHA. técnicas más sensibles han demostrado que la
los glóbulos rojos se recubren con un menor número de anticuerpos, que están por debajo del límite detectable de la prueba,
3. Cuando los glóbulos rojos están fuertemente recubiertas con autoanticuerpos la misma puede eluir en plasma.
La mayoría de estos autoanticuerpos son contra antígenos de células rojas comunes y dar una prueba positiva indirecto de
antiglobulina (prueba de Coombs indirecto) con células del donante durante la prueba de compatibilidad.
4. Autoanticuerpos se adsorbe en los glóbulos rojos y puede estar en pequeña cantidad en el suero,
mientras aloanticuerpos, puede o no puede ser adsorbido en los glóbulos rojos, pero siempre presente en el suero, por lo tanto:
WAIHA
24 a 76% + + IgG tibia IgG, y reactiva Parcialmente anti-Rh, otros
contra
De tipo mixto + + IgG y IgM IgG y reactiva poco claro, pueden ser anti-I, -i
AIHA autoanticuerpos o un otro crioaglutininas
hemoglobinuria fría 0 + IgGbiphasic hemolisina No reactivo Anti-P
paroxística (anticuerpo Landsteiner
Donath-), anticuerpo reacciona
en frío y la hemólisis se produce,
a 37 ° C en presencia de
complemento
AIHA
Naturaleza de autoanticuerpos:
Mayormente autoanticuerpos RHE formados son contra los antígenos de alta incidencia y por lo tanto, reaccionan con las células rojas de donantes
más aleatoria sangre que causa problemas en la selección de una muestra de sangre adecuado para transfusión. La capa de autoanticuerpos
glóbulos rojos del paciente y también están presentes en el suero. Por consiguiente, la interpretación de la tipificación celular, pruebas de
compatibilidad, la detección de anticuerpos e identificación de anticuerpos puede ser difícil por los procedimientos de rutina.
269
La anemia hemolítica autoinmune
2. Si el resultado es D-negativo, las pruebas de D parcial o débil no es necesario ya que el paciente puede recibir con seguridad
compatibles con la sangre ABO-D negativo.
Esto está más allá del alcance de este libro. centros de transfusión interesados en el desarrollo de estas técnicas deben referirse a
la AABB manuales técnicos y Práctica Clínica de Medicina de Transfusión, Tercera Edición, por Lawrence D. Petz, Scott N.
Swisher, Steven Kleinman. Richard K. Spence y Ronauld
G. Strauss. Churchill Livinstone, Nueva York, 1 996.
Estudios de suero:
• Suero puede contener autoanticuerpos por debajo del límite detectable. La cantidad formada puede ser pequeño y se
absorbe a los eritrocitos in vitro.
• Clínicamente significativos aloanticuerpos pueden estar enmascarados por el autoanticuerpo. Una aproximación a la evaluación
1. Si la detección de anticuerpos es negativa, no se indican estudios adicionales con el suero del paciente.
a fin de optimizar el procedimiento autoadsorption. (segundo) Diferentes métodos para eliminar los aoutoantibodies son (i)
de elución a 56 ° C con la enzima
células pretratadas (ii) Zzap (ditiotreitol y papaína de cisteína-activado) (iii) difosfato de cloroquina. Para más detalles
véase el capítulo sobre la preparación de soluciones y métodos especiales. Es eficaz para pretratar dos alícuotas de las
células del paciente y autoadsorb el suero dos veces. (do) Siguiendo autoadsorption una detección de anticuerpos se
debe realizar con el adsorbida
suero, si no se observa reactividad, unidades de sangre debe ser seleccionado y pruebas pretransfusional está hecho. Si no se
observa reactividad en la detección de anticuerpos, identificación de anticuerpos se realiza. Si se detecta de aloanticuerpos,
unidades negativas de antígeno se seleccionan y pruebas pretransfusional se hace para transfusión.
las células del paciente no está disponible, la adsorción alogénico se hace para determinar si aloanticuerpos significativos
están presentes con autoanticuerpos calientes Fig. 17.1 / B.
13 Determinar el fenotipo del paciente para anigens comunes (Rh, Kell, Duffy. Kidd, MNSs). Absorber
anticuerpo ción con células alogénicas emparejaron con células del paciente. 252
La anemia hemolítica autoinmune
, Si es negativo se necesitan estudios de detección de anticuerpos pies de repetición no hay más estudios. Seleccione las unidades
de la sangre y hacer pruebas de pre-transfusión. Si no se observa reactividad en la detección de anticuerpos, identificación de
anticuerpos se realiza. Si se detecta anticuerpo, unidades negativas de antígeno se seleccionan y pruebas pretransfusional se hace.
• Transfusión en pacientes con WAIHA se evita siempre que sea posible ya que la mayoría de los pacientes pueden ser
controlados con éxito sin células transfusión de rojo, con prednisona, 60 mg por día administrados en tres dosis durante 10-14
días. La mayoría de los pacientes tendrán una marcada mejoría, con disminución de la hemólisis y la estabilización seguida por
aumento de hematocrito. A continuación, la prednisona se reduce gradualmente.
• La esplenectomía se considera cuando el paciente no responde al tratamiento con prednisona y posteriormente prednisona
dosis de más de 15-20 mg / día también se utilizan utilizado en mantener la remisión.
• Blood transfusión transfusión de glóbulos rojos es dada para aumentar la capacidad de transporte de oxígeno de la sangre.
Transfusión se reserva para los pacientes con enfermedad cardíaca subyacente, isquemia cerebrovascular o anemia que
amenaza la vida.
Los glóbulos rojos más compatibles deben administrarse y el paciente se vigila de cerca para cualquier signo de reacción a la
transfusión adverso. Los glóbulos rojos transfundidos suelen ser destruidos tan rápidamente como propios glóbulos rojos del paciente,
a menos que el paciente ha respondido al tratamiento con prednisona.
yo. anemia hemolítica frecuente en los niños debido a las infecciones virales
ii. La sífilis congénita o terciario
Patogenesia:
Mos vendidos anticuerpos no aglutinan RBC por encima de 30 ° C y son inofensivos; más alto es el ampitude térmica de su
mayor acción es el grado de patogenicidad (Tabla 17.3).
273
medicina transfusional Manual técnico
La clase de inmunoglobulina de autoanticuerpo frío es principalmente IgM, se han reportado sin embargo IgA e IgG autoanibodies
fríos. El autoanticuerpo causante de la PCH es siempre IgG y se caracteriza por hemólisis bifásica o bitérmico. Autoanticuerpos une
a las células rojas a baja temperatura en las extremidades y, a continuación provoca hemólisis a través de la activación del
complemento como la sangre se calienta a 37 ° C, y provoca hemólisis y hemogloninuria.
autoanticuerpos benignos están presentes sobre todo en individuos sanos y son clínicamente silente. autoanticuerpos patológicos están
asociados anemia hemolítica autoinmune.
Los problemas encontrados en los procedimientos de los bancos de sangre debido a autoanticuerpos reactivos con el frío: la
tipificación ABO:
El autoaglutinación es visible en el examen a simple vista de la muestra de sangre recogidas en el tubo de EDTA a TA. Es más evidente en el
enfriamiento a 4 ° C. Autoaglutinación desaparece cuando las células rojas se calentaron a 37 ° C. Autoaglutinación puede ser visto en las
películas de sangre periférica también. Los glóbulos rojos que están fuertemente recubiertas con autoanticuerpos fríos aglutinan
espontáneamente dar resultados falsos positivos con anti-A y anti-B y anti-D sueros. Estas discrepancias se pueden eliminar con los glóbulos
rojos del paciente se lavaron dos veces con solución salina normal calentada a 37 ° C o mediante la recopilación y mantenimiento de muestra
de sangre del paciente a 37 ° C 274
La anemia hemolítica autoinmune
Aglutinación con
Anti-A Anti-B
las células del paciente en el suero propia + +
agrupación inversa:
suero precalentado a 37 ° C + + 0 0
Si la elución de los anticuerpos no se produce por las células de lavado con solución salina se calienta a 37 ° C, lavado con solución salina
se calienta a 45 ° C puede ser un éxito. A veces puede ser necesario elución con reactivo de tiol. El calentamiento del suero o auto
absorción resuelve discrepancias de la agrupación de suero.
Rh (D) escribiendo:
Rh (D) escribiendo en general dio reacciones positivas falsas cuando mejorada anti-D (alto contenido en proteínas) los reactivos estaban en uso. El
control de Rh puede ser positivo, lo que hace la prueba no válida. La mayoría de los reactivos en estos días son monoclonal anti-D (baja en
proteínas), que normalmente dan resultados válidos; un resultado negativo con cualquiera de los reactivos ABO sirve como control para la
tipificación D. Los glóbulos rojos se lavaron con solución salina caliente se utilizan si una discrepancia en ABO Se observa a escribir. Si el lavado de
las células dan resultados insatisfactorios, reactivos de tiol se utilizan para eliminar los autoanticuerpos.
aglutininas frías activan el complemento in vitro que se adhiere a las células rojas. Cuando prueba para D débil se lleva a
cabo usando un reactivo de antiglobulina poliespecífica se obtiene una reacción positiva. El Para que no es negativo con
monoespecífico anti-IgG o cuando la muestra se recoge en EDTA, que interfiere con la unión in vitro del complemento.
Problemas similares se producen con las pruebas de otros fenotipos (por ejemplo, K, Fy una) donde se utiliza el reactivo de antiglobulina. Esto
también se resuelve mediante el uso de anti-IgG reactivo antiglobulina o muestra EDTA recogido.
Es positivo cuando las células se obtienen a partir de sangre coagulada o se utiliza un reactivo poliespecífica o anti-C3.
• Si las células se lavaron con solución salina se calentaron a 37 ° C da resultado negativo, reactivos de tiol se utilizan para eliminar
autoantobodies.
275
Transfusion Medicine t Manual técnicaLista
Estudios de suero:
• A diferencia de autoanticuerpos calientes, fríos autoanticuerpos casi siempre son demostrables en el suero.
autoanticuerpos fríos pueden presentar problemas serológicos si la terapia de transfusión se indica: Las razones son:
• suero antiglobulina que contiene tanto anti-IgG y anti-C3 puede dar resultado falso. Los problemas pueden
• Precalentamiento de suero y células rojas a 37 ° C, seguido con un procedimiento de antiglobulina que evita temperatura por
debajo de 37 ° C, puede aliviar estos problemas.
estudios de adsorción con células autólogas y alogénicas se llevan a cabo en la misma forma que en WIHA.
Autólogo de adsorción -
• Si el paciente no ha sido transfundido dentro de 2-3 meses, autoadsorption es el método de elección.
• La adsorción a 4 ° C es mejor si se utilizan los glóbulos rojos del paciente pretratadas con enzima, pero ciertos autoanticuerpos,
por ejemplo, anti-P son desnaturalizados, y no puede ser adsorbido. En tales casos, la adsorción se repite con las células no
tratadas.
• Después de la adsorción. estudios de detección de anticuerpos se realizan para evaluar la presencia de cualquier aloanticuerpos.
• Si las pruebas de detección de anticuerpos son positivos, se deben realizar estudios de identificación de anticuerpos.
• Las pruebas con suero autoadsorbed también pueden resolver ABO agrupación inversa.
Alogénico de adsorción -
• Si el paciente ha sido dado transfusión recientemente con en 2-3 meses, adsorción alogénico puede ser hecho.
• Las células alogénicas se deben seleccionar como se describe en la sección de autoanticuerpos calientes
Tratamiento
• Transfusion: (a) Rara vez se requiere. Los pacientes cuyos cardiovascular o cerebro-vascular sistemas se
significativamente comprometida por anemia pueden requerir transfusión de sangre. (segundo) ells rojos
lavados se dan para evitar la transfusión de componentes del complemento.
• hemólisis intravascular aguda se produce en la exposición al frío y se caracteriza por la aparición de fiebre, escalofríos,
malestar, calambres abdominales y el dolor de espalda. Todos los signos de hemólisis intravascular son evidentes, junto con
hemoglobinuria, hemoglobinemia, bilirrubinemia dependiendo de la gravedad y la frecuencia de los ataques y el agotamiento
de los niveles de haptoglobina sérica.
• El diagnóstico se confirma mediante la prueba positiva Donath-Landsteiner (DL). El anticuerpo DL es un anticuerpo IgG.
Recoger dos sepcimens sangre del paciente, un espécimen, el control, se mantiene a 37 ° C durante 60 minutos después de
la recogida. La segunda muestra se colled a 4 ° C durante 30 minutos y después se incubó a 37 ° C durante 30 mintes
adicionales. Ambas muestras se centrifugan a continuación y o dedos para la hemólisis. En una prueba de
Donath-Landsteiner positivo, la hemólisis se ve en la muestra colocada a 4 ° C y luego a 37 ° C, mientras que no se observa
hemólisis en la muestra de control.
Tratamiento
• PCH es generalmente una enfermedad autolimitante, con una recuperación en pocos días o una semana.
autoanticuerpos inmunitaria inducida por medicamentos pueden resultar en disminución de la supervivencia de glóbulos rojos y pueden
complicar las pruebas de pre-transfusión.
Se han descrito tres mecanismos, que causan las drogas inducida por IHA: (Tabla 17-4)
• Drogas o adsorción hapteno
• complejo inmune entre el fármaco, membrana de células rojas y el anticuerpo
• La inducción de autoanticuerpos
277
medicina transfusional Manual técnico
Un cuarto mecanismo de adsorción no inmunológica de las proteínas a las células rojas (modificación de la membrana) puede
producir DAT positivo, pero no causa anemia hemolítica por ejemplo, con cefalotina (Keflin).
La proteína Detección de
Hapteno o adsorción IgG Ab reacciona con drogas grado moderado de hemólisis generalmente
del fármaco (por C3d * - glóbulos rojos recubiertos extravascular
ejemplo, penicilina)
tipo complejo inmune (células de c3d Ab + droga + sensibilización de aparición brusca de la hemólisis
Drogas-anticuerpo objetivo células rojas, nación aggluti- o intravascular grave, insuficiencia
complejo) hemólisis de glóbulos rojos. Ab es renal
por ejemplo, quinina, quinidina IgG o IgM: eluyen es negativo
fenacetina
inducción IgG rara vez se Los autoanticuerpos contra las Mild grado de hemólisis
Autoimmune- (por complementan células rojas; eluyen reacciona extravascular a moderada
ejemplo, metildopa) con células rojas
Tratamiento:
• El grado de hemólisis es generalmente leve a moderada, y la anemia se desarrolla gradualmente. Hemólisis generalmente una
regresión a los pocos días después de suspender el medicamento, pero puede continuar durante períodos más largos.
278
18
autólogo
Transfusión
de sangre
Sangre recogida de un paciente para volver a transfusión en un momento posterior en el mismo individuo se llama "sangre
autóloga". El paciente que recibe su propia sangre puede llegar a la sangre más segura posible, porque no hay antígenos extraños
infundidas, no hay enfermedades infecciosas que no sea el paciente pueden ya han se transmiten. Su uso ha aumentado con la
conciencia de las infecciones de virus de inmuno-deficiencia particularmente humana (VIH) transmitidas a través de transfusión
alogénica (homólogo).
(1) donación preoperatoria de sangre - 2 o más unidades de sangre se extrae y se almacena antes de la
necesidad anticipada.
279
medicina transfusional Manual técnico
• donación autóloga preoperatoria estimula la médula ósea para aumentar la producción de células.
desventajas
• Preoperatorias sujetos donación de sangre autóloga a paciente a la anemia y la hipovolemia.
• Consecuencias de la transfusión de unidad incorrecto debido a este error material.
• Puede haber una pérdida innecesaria de sangre si se pospone la operación o no se necesita la transfusión.
Cada unidad extraído de la paciente se le asigna un número que se coloca en los registros de la bolsa y donantes- pacientes en el
banco de sangre. Esto permite a la unidad ser rastreado a su disposición final. Una etiqueta
indicando "Para uso autólogo Sólo" debe ser colocado en el bolso.
unidades de sangre autóloga deben ser almacenados en un estante separado del refrigerador banco de sangre.
Las indicaciones para donaciones depósito previo autólogo:
donación autóloga depósito previo se indica en los procedimientos quirúrgicos electivos con una probabilidad razonable para la
transfusión y para los que existe tiempo suficiente para obtener una o más unidades de sangre con el mínimo riesgo y sin crear
déficit hemoglobina significativo en el paciente donante. Ejemplos son la cirugía ortopédica (reemplazo de la articulación), cirugía
plástica y reconstructiva, cirugía cardiovascular, cirugía abdominal mayor (esplenectomía), y en obstetricia y condiciones
ginecológicas - en particular las mujeres que tienen múltiples anticuerpos o anticuerpos frente a antígenos de alta frecuencia. 280
Transfusión de sangre autóloga
Paciente-donante, para la donación autóloga no tiene que cumplir con todos los criterios de donación de sangre homóloga. Siempre que los
requisitos para la selección de donantes o de recogida de sangre de las donaciones de sangre homóloga no se pueden aplicar, directrices
adecuadas para el paciente-donante individual deberían establecerse en consulta con el médico / cirujano del paciente-donante y deben ser
registrados. Las principales directrices son:
Hemoglobina: Aceptable en 11 gm / dl o 33 por ciento (0,33) hematocrito o superior. Por debajo de este nivel de la flebotomía no se
debe hacer, excepto en circunstancias especiales con la aprobación del médico del paciente, pero no debe hacerse si la hemoglobina
es inferior a 10 g / dl.
Años: No hay límite superior o inferior de edad. Los pacientes pediátricos sometidos a cirugía electiva se pueden beneficiar de la sangre
autlogous.
Peso y volumen de sangre extraída: Los donantes que pesan 60 kg o más pueden donar 450 ml de sangre y los donantes que
pesan menos de 60 kg pueden donar volumen proporcionalmente menor de la sangre pero no más de 8-9 ml / kg peso corporal.
En paciente pediátrico de 8 años de edad, el peso debe ser de 27 kg y no más de 10% del volumen de sangre de los pacientes
debe ser dibujado en cada flebotomía.
Frecuencia de la donación: Las donaciones a menudo se programan semanalmente o incluso a los 4 días intervalos con la última
flebotomía realizaron 72 horas o más antes de la operación. Esto permite que el plasma del paciente donante para volver a la
normalidad antes de la cirugía. El hierro oral (325 mgm de sulfato ferroso tres veces al día) se da para acelerar la restauración de la
hemoglobina a los niveles de predonación. El uso de eritropoyetinas, junto con el hierro es la forma más eficaz para mejorar las
posibilidades de éxito del programa de predonación, pero es caro.
281
medicina transfusional Manual técnico
Laboratorio de Ensayo mínimo requisitos de las pruebas de laboratorio, para la unidad autólogo son el grupo ABO y la tipificación Rh.
Verificación de las donaciones de sangre autóloga para los marcadores de enfermedades infecciosas es objeto de controversia. Lo racional para el
ensayo de marcadores de enfermedades es la de proteger al personal del hospital en lugar de su destinatario. Algunos abogan por que la primera
unidad de sangre autóloga debe ser probado para los marcadores de las enfermedades transmitidas por transfusión. Si cualquier ensayo de
enfermedad por infección es positivo, una etiqueta de riesgo biológico se debe aplicar a la unidad (s) y el médico del paciente debe ser informado.
El volumen de sangre que se recoge para un hematocrito dada puede determinarse por la siguiente fórmula:
Estimado vol (
× inicial. sangre HCT - deseadaHCT )
sangre puede de Vol.remved ser =
deseada y media inicial HCTS
de
contiene plaquetas viables, los niveles de proteína adecuados y buenos niveles de todos los factores de coagulación de plasma.
La sangre recogida por lo general no sale de la sala de operaciones. Se puede almacenar a temperatura condicionada Teatro en
funcionamiento o en el refrigerador a 2-6 ° C durante hasta 24 horas. Todos los procedimientos y políticas deben garantizar la adecuada
recogida, manipulación, almacenamiento, identificación, y la transfusión o disposición.
6. bacteriemia
7. Embarazo con anemia
Procedimiento
Muchos dispositivos de autotransfusión intraoperatoria están disponibles. Los principios básicos involucrados son de succión del aspirador
accionado, que recoge sheded sangre de la herida o cavidad del cuerpo durante la cirugía, la anticoagulación; filtración para eliminar los
residuos, y la fibrina; centrifugación y lavado de las células rojas con solución salina y transferencia normal en un paquete separado para
reinfusión.
Los dispositivos más nuevos (por ejemplo, Sorenson autotransfusión Systems, Cell de Haemonetic de ahorro) que transfundir
rescatado sangre entera o lavó los glóbulos rojos han demostrado ser más seguro y sin mayores complicaciones desarrollar. embolia aérea
nunca ha sido reportado con un dispositivo de autotransfusión más reciente. Los dispositivos son costosos y el proceso es rentable.
283
Transfusion Medicine T Manual técnicaLista
Todas las técnicas de salvamento intaoperative deben confirmar a los requisitos de seguridad. sangre recuperada debe estar claramente
marcado que tiene el nombre del paciente, número de identificación, la fecha y hora de la recogida. La sangre debe infundirse el plazo de seis
horas desde el inicio de la recogida y debe permanecer con el paciente hasta que vuelven a infundir.
anticoagulantes
Sangre rescatado de una cavidad serosa es con frecuencia deficiente en fibrinógeno y las plaquetas y no coágulo. Es factible transfundir
tales sangre con mínima o ninguna anticoagulante añadido. Para la mayoría de situaciones quirúrgicas, sin embargo el paciente es o bien
sistémicamente anticoagulada (por ejemplo, en la cirugía cardíaca), o se añade anticoagulante a la sangre recuperada. En el último caso,
los anticoagulantes citrato son preferibles a la heparina, que a dosis bajas, puede causar la activación de plaquetas y la coagulación
paradójico.
Utiliza el mismo dispositivos para recoger y procesar la sangre que se utilizan en la autotransfusión intraoperatoria. Debe ser
filtrada (Lavado es opcional) antes de ser devuelta al paciente. La sangre debe ser reinfundida con en seis horas desde el inicio de
la recogida con el fin de minimizar la proliferación de las bacterias. La bolsa de sangre debe ser etiquetado con el nombre del
paciente y un número de identificación.
conclusiones
La sangre autóloga es generalmente aceptado ser el tipo más seguro de la sangre para transfusión. Se disminuye la demanda de sangre
almacenada. Los problemas logísticos pueden minimizarse mediante protocolos desarrollados en los hospitales para los programas de transfusión
autóloga exitosas.
adjunten
CONSENTIMIENTO PARA LA DONACIÓN DE SANGRE depósito previo autólogo
2. Doy mi consentimiento para la abstinencia de mi sangre por un miembro autorizado del personal del banco de sangre
para transfusión autóloga. Si no requerir transfusión de la sangre extraída de transfusión autóloga, puede desecharse de
acuerdo con la política del hospital. Fecha:
la firma de los donantes en el Paciente
Firma de testigo
Firma del padre / tutor
(Si el paciente es menor de edad)
284
19
madre hematopoyéticas
Las células y
las células progenitoras
Hay ciertas células en la médula ósea y sangre periférica, cuya única función es la de producir diferentes tipos de células en la
sangre. Estas células se llaman células madre hematopoyéticas y cuando se dividen, que producen células hijas llamadas células
progenitoras. Tanto las células madre y células progenitoras son igualmente importantes en el proceso de recuperación del paciente
después de un trasplante de células madre.
El trasplante de células madre hematopoyéticas regenera la médula ósea del paciente y inmune
sistemas que han sido destruidos por el tratamiento de quimioterapia y / o radiación para destruir las células cancerosas. Las células
madre también tienen la capacidad de regenerarse y convertirse en funcionales sangre población células hecha de ocho tipos de
células distintas - eritrocitos, granulocitos (neutrófilos, eosinófilos, basófilos), macrófagos, megakarocyte (plaquetas), y linfocitos T y
B. Ver figura 19-1. Las fuentes de células madre hematopoyéticas.
285
medicina transfusional Manual técnico
Fig. 19-1
• enfermedad de Hodgkin
• Mieloma múltiple
hemoglobinopatías
• talasemia
• Enfermedad de célula falciforme
• Cáncer de mama
• neuroblastoma
• inmunodeficiencia congénita
• Anemia aplásica
Tipos de células madre Trasplante
Hay tres tipos de células hematopoyéticas progenitoras trasplantes;
• autólogo
• alogénico
• singénico
Trasplante autólogo
En el trasplante autólogo, los pacientes propia médula ósea o células madre de sangre periférica (PBSC) son recogidas y después
transfunden en su propia circulación para restaurar la función hematopoyética después de quimioterapia y / o radiación de terapia para
El trasplante alogénico
En el trasplante alogénico de las células madre hematopoyéticas procedentes de individuos (generalmente hermanos), que son
antígenos de leucocitos humanos (HLA) idénticos en los loci A, B, y DR, se utilizan para el trasplante. Cuando tal partido no se pudo
encontrar, los donantes relacionados no concordantes en I o 2 loci HLA se han utilizado.
El trasplante singénico
En este las células madre hematopoyéticas de gemelo idéntico se utilizan para el trasplante.
ml.
El objetivo usual de células nucleadas es de 1-2 x 10 8 células nucleadas / kg de peso corporal del receptor o 1.000 unidad de
granulocitos-macrófagos de formación de colonias (CFU-GM). Estos niveles se alcanzan habitualmente mediante la recopilación de 10-20 ml
de médula ósea por kg de peso corporal del donante. Sin embargo más cantidad puede ser necesario si se requiere la purga de células
tumorales de la médula.
La médula ósea se cryopreserved generalmente en 20 sulfóxido% de dimetilo (DMSO) [concentración final 10%] y se almacena en nitrógeno
líquido hasta su uso. Congelación y almacenamiento de la médula ósea se da en detalle más adelante.
Después de la ablación de la médula con quimioterapia y / o radiación, la médula ósea se descongela rápidamente y se infunde en
la corriente sanguínea del paciente para repoblar la médula. La médula ósea se puede obtener ya sea desde un HLA compatible o
donante parcialmente emparejado (alogénico) o del propio paciente (autólogo).
287
Transfusion Medicine Técnica Manual
Más tarde se descubrió que, por mecanismo desconocido, las células madre y los contenidos de células progenitoras de la sangre
periférica se incrementan notablemente durante la recuperación de la quimioterapia mielosupresora (particularmente ciclofosfamida), y / o
después de la administración de factores de crecimiento hematopoyéticos recombinantes particularmente G-CSF y GM -CSF). células
madre de sangre periférica son ahora rutinariamente movilizadas por factores de crecimiento hematopoyéticos (con o sin quimioterapia),
que incluyen el G-CSF y GM-CSF o una combinación de los dos. G-CSF se administra en las dosis de 10-22 ug / kg / día durante 5-7 días.
Esta práctica requiere un menor número de sesiones de aféresis (1-3 vs 7-10) para recoger suficientes para el trasplante de PBSC.
La mayoría de los centros de trasplante recogen mínimo de 1-2 x 10 6 CD34 + células / kg o 10 x 10 4 CFU-GM / kg. o células mononucleares de
2xl0 8 / kg de peso corporal. Inmediatamente después de la recogida, las células mononucleares, con o sin Percoll o sedimentación
Ficoll-Hypaque, se suspenden en plasma autólogo, mezclado con sulfóxido diméthyle (DMSO) y se almacenaron congeladas en nitrógeno
líquido.
CD34 + de selección de celda se lleva a cabo mediante la separación de perlas inmunomagnéticas o columna de inmunoafinidad de avidina-biotina o el
uso de una máquina llamada de flujo - citómetro.
El uso de PBSC movilizadas condujo a la recuperación significativa de los niveles de neutrófilos y plaquetas tras el trasplante. Con PBSC
trasplante, la recuperación de neutrófilos se produce dentro de 8-12 días, mientras que las plaquetas recuperar promedios 8-15 días.
PBSC movilizadas trasplantes se realizan predominantemente en la configuración autólogo debido a la preocupación inicial de que
el aumento del número de linfocitos T podrían aumentar la frecuencia y la gravedad de GVHD. alogénico con éxito Sin embargo,
numerosos informes recientes han demostrado movilizó PBSC trasplantes sin aumentar las tasas de EICH.
Abreviatura:
G-CSF - Granulocitos - factor estimulante de colonias
GM-CSF - macrofase de granulocitos - colonia factor de simulación de CFU-GM - unidad
formadora de colonias - macrofase de granulocitos
288
Células madre hematopoyéticas y células progenitoras
• Procedimiento es menos compleja, tiene menores riesgos, es menos doloroso y se puede hacer sobre una base en exteriores
• La incidencia de GVHD con HLA emparejado PBSC trasplante es casi la misma que con la transfusión de médula
ósea autólogo.
Hay dos métodos que se pueden utilizar para determinar la idoneidad de la colección de células madre para trasplante. Estos ensayos son la
unidad de formación de colonias (CFU) y análisis de CD34 +.
El ensayo CFU implica el cultivo de una pequeña porción de recolección de células madre en un cultivo. Una célula de células madre o progenitoras
sola formará un grupo de células sanguíneas maduras y estos grupos pueden ser contados usando microscopio. El ensayo CFU es el mejor
indicador de la capacidad de las células madre para crecer en el paciente después del trasplante, pero inconveniente principal de este ensayo es que
los resultados no están disponibles para 2 semanas. La prueba de UFC no se puede utilizar para determinar el día a día.
La prueba de CD34 + es la prueba más prominente para la medición de los contenidos madre y células progenitoras de la colección. Las
células madre se distinguen de la mayoría de las células en la médula ósea o de la sangre debido a que las células madre muestran una
proteína en su superficie designada como CD34 +. Esta exclusividad permite contar las células CD34 +, utilizando una máquina
técnicamente complejo llamado un citómetro de Flow.
• La principal ventaja de CD34 + pruebas durante la prueba CFU es que CD34 + resultados pueden estar disponibles dentro de las 24 horas.
• Este rápido CD34 + pruebas pueden ayudar a evitar que el paciente / donante de someterse a una segunda recolección de
células madre innecesario en los casos en que la primera colección contenía células madre suficientes necesarias para el
trasplante. Un número de estudios han reportado una dosis adecuada trasplante consiste en el 2-5 millones de células CD34 + /
kg de peso del paciente.
289
medicina transfusional Manual técnico
• El análisis CD34 + también se puede utilizar para comprobar la disposición del donante del paciente o de comenzar la recogida de aféresis de
células madre.
Las células de selección es un proceso de laboratorio especializado que se utiliza para reducir los contaminantes de células no madre, incluyendo células
tumorales, a partir de productos de trasplante a yeild células madre CD34 + en una forma purificada y concentrada.
Durante la terapia de trasplante, tallo producto trasplante de células (llamada injerto), derivada de médula ósea o sangre
periférica, se cosecha y procesado en el laboratorio y después re- infundido en el paciente por vía intravenosa después de la
quimioterapia y / o radioterapia.
Este trasplante es esencial para regenerar la médula ósea destruida a partir de los efectos de los fármacos tóxicos y
radiación. Las células que son necesarios para regenerar la médula ósea son células madre CD34 + (células que expresan el
marcador CD34 Ag en la superficie). Por lo tanto es necesario recoger su dosis óptima y pura de un trasplante exitoso.
Sin embargo, el producto de células madre recolectadas contiene un número significativo de las células tumorales, células T y otros
contaminantes a lo largo con las células CD34 +. Las células tumorales presentes en el trasplante pueden aumentar la carga tumoral en el
paciente la reducción de la eficacia del trasplante con un mayor riesgo de recaída y las células T presentes en el producto puede aumentar la
incidencia de GVHD. Por lo tanto es extremadamente importante para purgar o eliminar las células tumorales, y las células no madre de
trasplante.
Las células de selección realiza esta función de las células tumorales de purga, así como la eliminación de las células T y otros contaminantes.
Hay varios procesos de selección de célula tal como centrifugación, Ficoll separación por densidad y mediada por
anticuerpos o selección inmuno. Entre estos, mediada por la selección de anticuerpos (Immuno) se utiliza comúnmente
debido a su alta especificidad y eficacia. Se trata de la selección física real de células.
3. Selección de células con gradiente de densidad de centrifugación (células se aíslan directamente de Whole
Sangre).
1. Selección positiva: ( Passive agotamiento) Aquí, las células CD34 + se retienen magnéticamente
y se eliminan las células no deseadas.
2. La selección negativa: ( Agotamiento) Las células tumorales activas están magnéticamente retenidas y los deseados
las células se liberan y se recogieron.
Algunas de las máquinas avanzadas que proporcionan la selección de celda Inmunomagnética disponibles son Isolex, CliniMACs, Seprate.
290
Células madre hematopoyéticas y células progenitoras
Las células CD34 + madre son magnéticamente retenidas. La Las células tumorales restantes se magneti- camente
mayoría de las otras células, incluyendo células tumorales, se retenidos mientras se recogen las células CD34 +
eliminan. liberados.
Un avanzada, totalmente automatizado, el dispositivo de selección de celda sistema cerrado usado para aislar específicamente o seleccionar células
madre de la trasplante obtenida del paciente. A través de un proceso inmunomagnética, contaminantes no deseados, incluyendo células tumorales, se
retiran dejando las células madre enriquecidas.
Mecanismo: El anticuerpo mediada por la tecnología inmunomagnética de Isolex 300i Selector de células magnético reconoce
específicamente y las células madre de captura. En la selección positiva (agotamiento pasivo),
la selección se realiza usando anticuerpos de células madre (moléculas de proteínas que se unen sólo a las células madre), mientras que la mayoría de
las otras células (células T y células tumorales) se eliminan. El agotamiento pasiva se combina simultáneamente con la selección negativa
(agotamiento activo) en la que las células tumorales restantes son retenidos magnéticamente mientras que las células CD34 purificadas se liberan y se
recogieron.
1. Sensibilización: anticuerpo monoclonal anti-CD34 se mezcla con las células para unirse a células CD34 +.
2. Roseta / Captura: Después del lavado, se añaden perlas magnéticas (Dynabeads) recubiertos con oveja anti-IgG de ratón
para eliminar el anticuerpo no unido. Reconocen el anticuerpo anti-CD34 murino derivado, que conduce a la formación de
complejos de roseta celular bead-diana.
3. separación: Un campo magnético se aplica permitiendo a los complejos de perlas de células CD34 + para separar magnéticamente
desde el resto de la suspensión celular.
4. Lanzamiento: Después de retirar las células no diana mediante lavado, el tallo se añade célula agente de liberación para separar el grano /
anticuerpo a partir de las células CD34 +.
Después, las células CD34 + separadas se lavan para eliminar los reactivos residuales y se recogieron.
291
TRANSFUSION MBDICINE Manual técnico
Indicaciones y uso
1. Indicado para tratamiento
autólogo periférico sangre
progenitor célula (PBPC)
productos para obtener una célula CD34 +
enriquecido población destinado a para
hematopoyético reconstitución
después de la terapia mieloablativa.
• Reemplazar genes que faltan o defectuosos en las células madre para expresar la proteína normal (Hb)
Consentimiento informado
El consentimiento informado para la recolección de sangre del cordón umbilical antes de la entrega se debe tener preferiblemente de ambos
padres o al menos un padre o tutor legal después de explicar el propósito y el proceso de recogida de sangre de cordón.
• Una historia clínica personal y familiar de la madre; y el padre también si está disponible, debe ser obtenido y documentado
antes o dentro de las 48 horas de la extracción de sangre. Tal historial médico debe incluir una evaluación del trastorno
genético que afecta la madre, el padre y los hermanos de la nueva lista de materiales.
• Una muestra de sangre de la madre debe ser recogida 48 a 72 horas antes de la entrega para las pruebas para
anti-HIV 1 & 2, HBsAg, anti-HCV, sífilis; y anti-HBc.
• Si alguna de la prueba es positivo para cualquiera de estos marcadores, la sangre del cordón debe estar preparado tras el
consentimiento de los padres y el médico de trasplante que si se podría utilizar para el trasplante autólogo en el bebé si es
necesario. De lo contrario, la sangre del cordón no debe ser recogida para transplante alogénico.
Una muestra de sangre del cordón umbilical debe mantenerse separado en el momento de la recolección y la prueba de:
• células de sangre de cordón deben ser probados para grupo ABO y Rh.
• Para las colecciones espinal comunidad de sangre (trasplante alogénico), Clase 1 tipificación de HLA y preferiblemente Clase
11 tipificación de HLA también debe ser realizado poco después de la recolección. Será necesario para determinar la
compatibilidad HLA con receptor relacionado alogénico para reducir las posibilidades de la enfermedad GVH. No es necesario
para el trasplante autólogo.
• Un análisis de CD 34 + células o CFU-MG o células mononucleares se realiza para evaluar los contenidos células progenitoras.
Las células mononucleares se pueden contar en frotis de sangre periférica.
• colección sangre del cordón umbilical debe ser realizado por el ginecólogo / obstetra capacitado o enfermera entrenada, la
realización de la entrega, en la recogida de la sangre del cordón umbilical.
• Deben tener experiencia en la punción venosa. control de la infección, la manipulación de material bio-peligrosos.
293
medicina transfusional Manual técnico
método de recogida
• Procedimiento utilizado debe ser documentado para dar lugar a la retención de la esterilidad adecuada y células madre viabilidad.
• La colección de la sangre del cordón no debe dar lugar a cualquier desviación de los procedimientos obstétricos normales (por
ejemplo, tiempo de sujeción del cable).
• Tanto en el útero (antes de la expulsión de la placenta) y ex-utero (después de la entrega de la placenta) métodos de
recolección son aceptables y tienen una eficacia comparable. Se recomienda el uso de un sistema de semi-cerrado o
cerrado (jeringa heparinizada o bolsa con ACD / CPD anticoagulante) por punción venosa de la vena umbilical en
condiciones asépticas.
• El uso de recipientes abiertos para la recolección es inaceptable.
• El procedimiento de recogida no debe ser perjudicial ya sea para la madre o el bebé o poner en peligro la extracción de sangre del
cordón umbilical.
Procedimiento:
• El cordón umbilical se pinza y se corta como en forma rutinaria.
• sitio de inserción en la vena umbilical se prepara mediante la limpieza con betadine y alcohol.
• aguja estéril de bolsa de recogida se inserta en la vena umbilical que señala hacia placenta permitiendo que la sangre del cordón
fluya dentro de la bolsa de recogida por gravedad. Una vez que la vena se colapsa o la sangre deja de fluir, el procedimiento de
recogida se ha completado.
• En promedio 60-120 ml de sangre del cordón anti-coagulada puede ser recogida.
• Alternativamente jeringa heparinizada se puede utilizar para la recogida de sangre de cordón. Cerca de 85 ml de sangre pueden ser
recogidos con el método de la jeringa y la tasa de contaminación es menor que 1%.
• El procedimiento se puede realizar en los partos vaginales o cesárea incluyendo nacimientos múltiples.
pruebas de esterilidad: El ensayo de esterilidad para la contaminación bacteriana y fúngica se debe realizar en una muestra recogida después de
la adición de la mezcla de crioprotector y los resultados evaluados como un procedimiento de control de calidad.
criopreservación: Las células deben ser crioconservadas en un 20% de sulfóxido de dimetilo (DMSO) [10% de concentración final].
etiquetado: El producto final debe ser etiquetado y / o etiquetado y debe contener el número de identificación del
donante y fecha de recogida. La etiqueta debe ser legible, indeleble.
• Los tallos células se utilizan principalmente en la medicina de trasplantes para regenerar la médula ósea de un paciente y el
sistema inmune después de que han sido tratados con quimioterapia y / o radiación para destruir las células cancerosas. Estas
células madre también migrar a la médula ósea del paciente y tienen la capacidad de regenerarse donde se reproducen,
• Las células madre se utilizan para uso propio (antologous), en caso de necesidad futura.
• Bajo rendimiento de 4xl0 6 células progenitoras hematopoyéticas, actualmente restringe el uso de las células madre del cordón umbilical
en niños.
• Recientemente se ha informado de injerto con éxito de las células madre de sangre de cordón de donantes no relacionados en los
receptores de un peso de 45 kg.
• La médula ósea es difícil hacer coincidir entre donante y receptor. Las posibilidades de partido de la médula ósea dentro de la familia
son 25%, mientras que en las células de sangre de cordón posibilidades son hasta un 50%.
• Recogida de médula ósea es invasiva y puede ser doloroso, ya que requiere muchas inserciones para extraer la médula
ósea de la médula del donante con una aguja y una jeringa. Este es un proceso largo que requiere anestesia general.
También es un procedimiento caro.
• trasplante de sangre del cordón umbilical puede tener una mayor tasa de supervivencia, una mayor calidad de vida después del
trasplante y la hospitalización de menos frecuentes debido a un menor número de complicaciones tales como Injerto contra Huésped
(GVHD), debido a la incapacidad de las células de sangre de cordón juveniles para montar un ataque contra el beneficiario.
• Se ha encontrado sangre del cordón umbilical para contener menos virus que en la médula ósea de edad de los donantes.
• Esto hace que el costo total del cable de trasplante de sangre de menos de trasplantes de médula ósea tradicionales.
La mezcla estándar contiene 20% de DMSO [concentración final 10%], una solución salina o electrolito isotónica, y una fuente de
proteína, por lo general de plasma autólogo o albúmina de suero humano. Stiff et al modificarse la técnica de congelación estándar
para incorporar una fracción de bajo peso molecular de almidón de hidroxietilo (pentastarch, McGaw chemical co., Irvine CA) como
un crioprotector adicional. Esta modificación hace que sea posible el uso de la mitad de la cantidad de DMSO (concentración final
5%) con recuperación comparable y la viabilidad con el método estándar. A menor concentración de DMSO reduce los efectos
secundarios desagradables de DMSO que son de vez en cuando con experiencia, cuando se infunden gran volumen de células
descongeladas.
A temperatura ambiente 10% de DMSO puede ser tóxica para las células progenitoras, por lo que el proceso de congelación no debe ser
retrasada. Cada bolsa se coloca en un recipiente metálico o entre placas de metal y se pone en el congelador programable enfriar a la tasa de
control de -1 a-5 ° C por minuto a-80 a-100 ° C o en vapor de nitrógeno. Entonces se transfirió a congelador de nitrógeno líquido para
almacenamiento a-196 ° C.
295
medicina transfusional Manual técnico
Después de la cosecha, la médula ósea es extensamente procesada antes de la congelación. La médula ósea se puso en vasos de
precipitados de acero inoxidable con medio de cultivo tisular y heparina para la dilución y la anticoagulación. Los diversos medios de
cultivo utilizados para la crioconservación, MEM, RPMI, HBBS y TC199. A continuación, la médula se presiona a través de tamices de
malla de acero inoxidable, de tamaño de malla 300 y 200 m, para filtrar la mayor parte del astillas de hueso, la formación de coágulos,
la grasa y la fibrina. La colección se transfiere entonces a paquete de transferencia de sangre estéril y se transfiere a laboratorio. En el
laboratorio la médula ósea se procesa mediante el uso de separador de células para eliminar el 95% de las células rojas, mientras que
la recuperación de más del 75% de formación de colonias de células en unidades de granulocitos macrofase (CFU-GM) o CD34 + en
el producto final que contiene más de 80% de células mononucleares (CMN). 7 células / ml.
Un volumen igual de 20% de DMSO y células en suspensión se mezcló vigorosamente a 0-4 ° C y se transfiere en 50-100 ml alícuotas a las
bolsas de poliolefina e inmediatamente se congeló a una velocidad controlada de 1 a 5 ° C por minuto a -80 hasta 100 ° C en un congelador
mecánico o en el vapor de nitrógeno y se almacenan a -196 ° C en nitrógeno líquido.
sangre de cordón 50 ml se toma en la congelación de la bolsa y se enfrió a 4 ° C. Una solución al 20% de DMSO en solución salina es llevado a 4 °
C en un recipiente separado y se mantuvo en baño de hielo. La sangre del cordón umbilical se mezcla vigorosamente con un volumen igual de la
solución de DMSO 20% y las bolsas se congelan como se describe para la médula ósea y PBSC.
Se añade una mezcla de 10% de DMSO y 12% HES a un volumen igual de la suspensión de células en albúmina de suero humano. Las células
madre preparación que tiene DMSO a una concentración de 5%, almidón de hidroxietilo (HES) en el 6% y albúmina de suero humano al 4% en
solución salina de glucosa se puede congelar directamente a -70 hasta -80ºC sin temperatura controlada y no causa daños durante período corto.
Sin embargo, para un almacenamiento más prolongado que se haya informado a almacenar en -135 ° C.
Descongelación y Transfusión
células progenitoras crioconservadas pueden ser descongelados por inmersión de la bolsa en un baño de agua bien agitada en 30-37 ° C. Esto se
hace en o cerca de lado de la cama del paciente, y las células descongeladas debe ser transfundida inmediatamente para evitar la formación de
grumos en el material.
296
20
Transfusión en el
trasplante
La importancia de los trasplantes de órganos como una actividad clínica ha aumentado en los últimos años. El trasplante de riñón
todavía representa la gran mayoría de operaciones de trasplante, además de médula ósea autólogo y alogénico y sangre periférica
células madre trasplante ahora están bien procedimientos en el tratamiento de ciertos tumores malignos hematológicos establecida.
Además, el trasplante de hígado se hace ahora con éxito cada vez mayor y la de otros órganos sólidos, incluyendo, corazón, pulmón
y páncreas se lleva a cabo, al menos en forma experimental.
El banco de sangre juega un papel vital en los programas de trasplante en la transfusión de sangre y productos sanguíneos en el
trasplante.
los receptores de trasplante de médula ósea presentan diferentes tipos de problemas que los receptores de trasplante de órganos sólidos:
• El receptor de trasplante de médula ósea está totalmente ablación antes de recibir un ósea alogénica, debido a que el
receptor está en riesgo de infecciones oportunistas.
297
medicina transfusional Manual técnico
• injerto de médula ósea alogénico tiene linfocitos inmunológicamente potentes, y los linfocitos del donante puede
reconocer y responder a la antígenos HLA en el receptor, lo que resulta en la enfermedad de injerto contra huésped
(EICH). El rechazo del injerto y la enfermedad son más graves con los antígenos HLA no coincidentes. HLA-A, HLA-B,
HLA-C y HLA-DR a juego de donante y receptor es importante.
• Otra diferencia es que los antígenos ABO no sirven como una barrera de trasplante para los receptores de médula. La
incompatibilidad ABO donante-receptor no aumenta la incidencia de rechazo del injerto o GVHD. Los datos muestran que los
antígenos ABO no están presentes en células madre
• Los principales receptores de trasplante ABO compatible requieren pocos glóbulos rojos transfusión de que en el trasplante ABO
incompatibles. anticuerpos ABO pueden causar retraso en donantes de producción de glóbulos rojos, lo que exige más transfusión de
glóbulos rojos. La mediana del tiempo para la desaparición de anticuerpos incompatible en ABO - trasplante incompatible es de
alrededor de 38,5 días (rango de 0 -116 días).
• Durante el trasplante, las células de médula ósea madre hematopoyéticas del receptor y el sistema inmunológico se
extirpan y se reconstituyeron con células del donante. Esto causa problemas en los bancos de sangre relacionada con
soporte transfusional y la selección de sangre durante el injerto. Se hace difícil decidir si utilizar componentes de la sangre
del grupo sanguíneo ABO del donante o receptor de.
• Para grandes receptores de médula ABO-incompatible, de tipo receptor RBCs se proporcionan hasta que no hay
anticuerpos detectables en plasma incompatibles y la prueba de DCT es negativo. Cualquier producto que contenga plasma
deben ser de tipo donante, para evitar la transferencia pasiva de anticuerpos incompatibles A y B.
Por ejemplo, en el grupo O paciente que recibió el grupo A trasplante de médula ósea, el paciente continúa para
producir anti-A y anti-B. En este grupo situación se da O glóbulos rojos transfusión hasta que ya no se detecta anti-A.
Componentes que contienen una cantidad significativa de plasma, tales como plaquetas y FFP deben ser compatibles
con los grupos donantes de sangre. En este grupo de casos se deben utilizar A plaquetas o FFP.
• Para los trasplantes menores ABO-incompatible ósea, (grupo sanguíneo receptor A / B y de los donantes O grupo ósea)
RBC debe ser de tipo donantes, y productos de plasma deben ser de tipo receptor hasta RBCs receptores ya no se
detectan.
• Para el trasplante que son a la vez mayor y menor ABO incompatible, glóbulos rojos deben ser grupo O y productos de
plasma deben ser de grupo AB.
Por ejemplo, en caso de que el grupo B ósea es trasplantado en un receptor de grupo o inversa, a continuación, se utilizan grupo O
glóbulos rojos y plasma de grupo AB o plaquetas.
• Cuando las plaquetas se cuentan> 20 x l0 9 / litros con sangrado o asociada con GVHD o infección viral.
La dosis para adultos de las plaquetas es 2.4-3x10 11 plaquetas. Esto puede ser proporcionado mediante la infusión de las plaquetas
separadas de 5 a 6 unidades de sangre entera (450 ml) u obtenidos de un donante por plaquetoféresis. Aloinmunización se retrasa y / o
disminuye por el uso de plaquetas de un solo Dolor. Leucocitos - productos de la sangre pobre puede disminuir la incidencia de
aloinmunización y la refractariedad a la transfusión de plaquetas.
Complicaciones y su gestión:
• BMT los pacientes son a menudo immnuosuppressed y pueden estar en el riesgo de enfermedad de injerto contra
huésped (EICH), que es una complicación potencialmente fatal por linfocitos transfundidos. El tratamiento de células
rojas y plaquetas por irradiación gamma en condiciones controladas inactiva los linfocitos y reduce el riesgo de GVHD.
• Algunos pacientes inmunodeprimidos corren el riesgo de infección por el virus de cytomegalous (CMV) transmitida por la
transfusión de sangre. Esto puede evitarse o reducirse por la transfusión de sangre que se prueba y no contiene anticuerpos
CMV o por el uso de componentes de la sangre leucocitos-agotados.
conclusiones
Antes de transfusiones de BMT
• La transfusión de sangre o componentes antes de trasplante de médula ósea disminuye el éxito del injerto a largo plazo.
• Transfusión de sangre relativo, especialmente pariente que sirva como donante de médula, es probable que inmunizar al
receptor.
• Menor riesgo de inmunización con la sangre del donante al azar.
• Aspirado de médula ósea y la pérdida de sangre es 300-1800 ml (promedio 1.000 ml). donante de médula ósea sufre una pérdida de
20 - el volumen de sangre 30%.
299
medicina transfusional Manual técnico
• Las plaquetas se dan cada 2-3 días para mantener el recuento de plaquetas> 10.000 / ul
• Si el paciente se vuelve refractaria a los donantes de plaquetas aleatorias, HLA emparejado plaquetas, preparados a partir de
aféresis, se les da.
Granulocitos Transfusión:
• granulocitos profilácticos transfusión no se da.
• granulocitos terapéuticos rara vez son necesarios.
Los antígenos del sistema ABO son también una barrera a la selección de órganos para el trasplante. Todos los individuos normales poseen
isoaglutininas a aquellos antígenos que carecen. Por lo tanto, las mismas reglas que rigen la selección de sangre para transfusiones se aplican a la
selección de la mayoría de trasplante renal y cardíaca.
Además de las pruebas de laboratorio, rechazo de injerto se puede minimizar con la terapia inmunosupresora. Los
esteroides disminuyen la respuesta humoral y la respuesta celular puede ser inhibida con ciclosporina y azatioprina.
El tercer mecanismo que influyen se basa en la inducción de tolerancia a los antígenos específicos del donante. La transfusión de
sangre de un donante potencial promover la aceptación de injerto a través de la inducción de tolerancia si el paciente no está sensibilizado
después de transfusiones específicos del donante.
• La eliminación del hígado durante la cirugía abandonan el ahepatic paciente durante algún tiempo, lo que complica aún
más la coagulación. Esta fase se asocia con:
Este período continúa hasta aproximadamente 30-60 minutos después de la revascularización de hígado de
donante y durante este período es muy difícil mantener la hemostasia.
• El período post operatorio se asocia a menudo con estado de hipercoagulabilidad, tal vez debido a la lenta recuperación de los
niveles normales de proteínas anticoagulantes tales como la antitrombina III y la proteína C y S después de la cirugía.
• En la fase temprana de la operación, el uso de sangre entera puede ser estrategia óptima, ya que proporciona soporte volumen
necesario, la capacidad de transporte de oxígeno y factores de coagulación estables.
• Durante la fase ahepatic ya que hay cese de la producción de factores de coagulación y fibrinólisis mejorada.
se requieren FFP y crioprecipitado (factor VIII) junto con las células rojas.
• trasplante de hígado niños pueden requerir una media de 4 unidades de glóbulos rojos (0,6 unidades de glóbulos rojos / Kg de
peso corporal), de 7 a 8 unidades de FFP, de 3 a 4 unidades de plaquetas, y de 1 a 2 unidades de crioprecipitado.
Monitoreo de la coagulación:
• La coagulación se controló cada hora con el tiempo rápidamente ensayadas de protrombina, tiempo de tromboplastina parcial, el
nivel de fibrinógeno, recuento de plaquetas y otros factores clave de la coagulación (por ejemplo, V y VII) si está indicado.
• La aprotinina es serina bovina inhibidor de la proteasa, lo que reduce la fibrinolisis y protege la función plaquetaria durante
la cirugía. Sin embargo, su régimen de dosificación no se ha normalizado, reacciones anafilácticas y la trombosis se han
reportado durante el trasplante de hígado.
301
medicina transfusional Manual técnico
Los glóbulos rojos. Si el suministro de AB FFP es insuficiente, el uso temprano de un grupo de glóbulos rojos seguido de un interruptor para el
grupo A FFP es apropiado. Una regla gneral para transfusión masiva es cambiar glóbulos rojos primero, luego cambiar plasma, y revertir el
orden al volver a tipo de sangre original del paciente. soporte transfusional de RH (D) de los pacientes negativos al no immunizd al antígeno D
no está estandarizado. Sobre todo se prefiere proporcionar sangre D-negativa a las mujeres premenopáusicas D-negativo, si se exceptúan las
necesidades a ser moderados. Si se produce pérdida masiva de sangre, el paciente podría entonces ser cambiado intra-operativamente a
sangre D-positivo, si es necesario. La producción de anti-D se produce con menor frecuencia en los pacientes con trasplante de hígado
D-negativo. D-machos y hembras negativo posmenopáusicas D-negativos sin anti-D en la sangre pueden ser transfundidos con sangre
D-positivo.
Consideraciones de la coagulación:
Durante la cirugía, la hemodilución, el consumo de plaquetas, la regulación de trombina desordenada, y la fibrinólisis trastornar el
proceso hemostático. La coagulopatía es especialmente grave durante la fase de reperfusión anhepática y principios. Hematocrito
guía el uso de glóbulos rojos, coloides y cristaloides; el recuento de plaquetas guía a la transfusión de plaquetas; el tiempo de
protrombina y tiempo de tromboplastina activada uso guía parcial de FFP; determinaciones de fibrinógeno guiar el uso de
crioprecipitado AHF y agentes atifibrinolytic.
• lympocytes donantes de órganos trasplantados con el pueden continuar para sobrevivir y funcionar en los receptores.
linfocitos B trasplantadas pueden continuar para producir anticuerpo (s) que pueden producir en el donante.
La producción de células rojas derivadas del donante anticuerpo (s) se producen con mayor frecuencia en el receptor que reciben ABO hígado
incompatible. En tales casos anticuerpo derivado donador (es) de desarrollar en 1 a 2 semanas y puede persiste durante 6 meses.
Donantes de derivados de anticuerpo (s) puede resultar en DAT positivo. Durante este período de sangre seleccionado para la
transfusión debe ser compatible tanto con el receptor y el anticuerpo derivado del donante (es).
• Gran cantidad de transfusión de sangre puede causar irnmunosuppression en el paciente.
• Los pacientes que reciben gran volumen de sangre pueden tener una mayor tasa de infección bacteriana y la transmisión del
CMV.
la supervivencia del injerto óptimo. HLA-DR es el más crítico para una buena supervivencia del injerto. En los receptores
altamente sensibilizados, es necesario para que coincida para HLA-A y HLA-B debido a la presencia de anticuerpos de clase 1.
En los receptores altamente sensibilizados, la identificación de anticuerpos séricos HLA también es importante.
(3) La inducción de tolerancia a los antígenos específicos del donante: Varios estudios han demostrado que
específica del donante transfusiones de sangre y trasplantes de individuos que viven relacionados tienen beneficios potenciales.
Los efectos de la transfusión de sangre en el éxito del trasplante renal son complejos y paradójica. La transfusión de sangre
puede conducir a la inmunización anticuerpo HLA. Sin embargo, las tasas de supervivencia de injerto se mejoran con la sangre
pre-trasplante que no resulta en la formación de anticuerpos HLA. Se ha observado que el efecto de la transfusión se pierde con los
nuevos agentes inmunosupresores. Preferiblemente transfusión de glóbulos rojos reducido de leucocitos con filtros de
leucocitos-deplated se debe dar a reducir las posibilidades de la inmunización.
Los datos para re-combinant Epo, G-CSF y GM-CSF llevaron su uso rutinario en pacientes con insuficiencia renal. Terapéuticamente
niveles efectivos se mantienen después de la inyección intravenosa o subcutánea única durante 24 horas. Un aumento en los recuentos de
reticulocitos se produce en 10 días si no se da todos los días de EPO. Epo evita la exposición viral y reduce la sensibilización HLA asociado
con la transfusión de sangre.
La transfusión perioperatoria
Con el cambio general en la práctica quirúrgica intraoperatoria, los niveles de hematocrito inferiores (30%) se aceptan sin transfusión. Algunos
investigadores han encontrado una mayor incidencia de la función retardada del injerto cuando el nivel de hematocrito del paciente es superior
al 30%. Esto se ha atribuido a la formación de sedimentos de la sangre en la microcirculación. Las cantidades mínimas de células rojas se
utilizan durante trasplante de riñón, y rara vez se requieren otros componentes. Mayormente dos unidades transversales emparejados se
mantienen para el trasplante de riñón. Muchos institución sólo tiene que utilizar procedimiento de recepción y de pantalla.
Los trasplantes de corazón necesitan un promedio de 5 a 6 unidades de glóbulos rojos, 4 unidades de FFP e Ito 2 unidades de
plaquetas.
TRANSFUSION EN PULMÓN TRASPLANTE:
Mayoría de los casos con enfisema y la fibrosis quística necesitan trasplantes bilaterales. Las indicaciones para el trasplante de un solo
pulmón son fibrosis pulmonar y enfisema. Además, más pacientes ahora sometidos a un trasplante de un solo pulmón para la
hipertensión primaria, previamente tratados por el trasplante de corazón-pulmón.
tiempo de isquemia corto como el corazón, la compatibilidad HLA no es posible. Sin embargo, la compatibilidad HLA entre el receptor y el
donante jugar un papel importante en el trasplante de donante vivo en la tasa de supervivencia del injerto.
El requisito de la sangre y sus componentes es similar a la de trasplante de corazón. 303
medicina transfusional Manual técnico
Los trasplantes de páncreas solo necesitan aproximadamente 2 unidades de glóbulos rojos y los trasplantes de riñón y páncreas receptores
necesitan un promedio de 3-4 unidades de glóbulos rojos.
Debido a los riesgos de complicaciones cardíacas con el trasplante de páncreas, el trasplante de células de los islotes se ha
perseguido activamente.
304
21
Preparación de la
solución Y
Métodos
T que definiciones, cálculos dados a continuación servirán como principios simples necesarios para la preparación de soluciones.
definiciones:
Mole, peso molecular-gramo
Peso, en gramos, de una sustancia es igual al peso molecular de la sustancia.
Solución molar
Una solución uno molar (IM) contiene un mol de soluto en un litro de solución. El disolvente es generalmente agua destilada a menos que
se indique lo contrario.
Solución normal:
A una solución normal (IN) contiene un gramo de peso equivalente de soluto en un litro de solución.
Porcentaje solución:
El porcentaje de solución da el peso o el volumen de soluto presentes en 100 unidades de solución total. Porcentaje se puede
experessed como:
• KH 2 correos 4 = 39 + 2 + 31 + 64 = 136 g
soluciones molares:
• 1MKH 2 correos 4
• 1 M KH 2 correos 4 requiere 1 x 136 = 136 g de soluto KH 2 correos 4 hecho hasta 1000 ml de agua destilada.
• 0.15MNaH 2 correos 4. 2H 2 O
soluciones normales:
• EN NaOH
• El peso molecular de NaOH = 23 + 16 + 1 = 40 g
• IN NaOH requiere 1x40 = 40 g de soluto (NaOH) hecha hasta 1000 ml de agua destilada.
• HCl 1N
El peso molecular de HCL = 36g
En HCl requiere 36 g de soluto hecho hasta 1000 ml de agua destilada. Un mol HCL se disocia en un mol H +,
por lo que el peso equivalente gramo y el peso molecular gramo son los mismos.
El peso molecular del H 2 ASI QUE 4 = 98g 1 NH 2 ASI QUE 4 = ( 98 ± 2) = saludo 49g compone de agua destilada 1 L. Un mol
H 2 ASI QUE 4
se disocia para dar 2 moles de H +, por lo que el peso equivalente gramo es la mitad del peso molecular gramo
es decir, 49 g.
Porcentaje Solución:
0,9% de NaCl es solución salina normal
solución salina normal requiere 0,9 g de soluto (NaCl) hecha hasta 100 ml de agua destilada, pH
07.02 a 07.04
306
Preparación de la solución Y Métodos
2 correos 4. 2H 2 O 23,4 g / L
Preparar soluciones de tampón de trabajo de la pH deseado mediante la mezcla de volúmenes apropiados de las dos soluciones. Algunos
ejemplos son:
suero humano normal tiene una osmolaridad de 289 ± 4 mM. Hendry (1961) recomienda ligeramente diferentes concentraciones
de la solución madre, es decir, 25,05 g / L NaH 2 correos 4. 2H2O y 17.92g / L Na2HPO4, por un tampón iso-osmótica.
• Tomar un volumen igual de tampón iso-osmótica, pH 7,4 y 9 g / L de solución salina normal. solución salina tamponada es ciertamente
mejor que la solución salina normal para la suspensión de los glóbulos rojos para su uso durante el período de almacenamiento y 12-24
horas a 4 ° C.
CuSO 4 solución del sp. gramo. 1053 se utiliza para la estimación de la Hb.
La solución debe ser almacenado a temperatura ambiente en recipientes herméticamente cerrados para evitar la evaporación.
307
MEDICINA transfusión Manual técnico
Método-2
Disolver 8,33 g de cristales secados al aire puro de sulfato de cobre (CuSO 4 5H 2 O) en 100 ml de agua destilada. El peso
específico de la solución debe ser 1.053.
Control de calidad
1. Cada lote de CuSO 4 se debe comprobar con muestras de sangre de la hemoglobina conocido en una
oscilar alrededor de 12,5 g / dl, (por ejemplo, 12 g / dl; 12,5 g / dl; 13,0 g / dl y 13,5 g / dl)
2. colocar suavemente una gota de cada muestra de sangre en CuSO 4 solución del sp. gramo. 1.053.
3. Gotas de todas las muestras de sangre con hemoglobina de 12,5 g / dl o superior se hundirá y aquellos
La gravedad específica de la CuSO se puede medir directamente con un hidrómetro calibrado, una gravedad específica 1,053 + 0,0003 g /
ml hace que la solución de CuSO4 aceptable para uso en la selección de donantes.
Procedimiento
Un CuSO 4 solución de gravedad específica 1,053 se utiliza para determinar el nivel de hemoglobina de
12,5 g / dl.
2. El sitio de la punción de la piel es decir, la punta del dedo se limpia con una solución antiséptica y se dejó
seco.
3. lanceta estéril desechable se utiliza para el pinchazo y no debe haber libre circulación de la sangre.
4. La gota de sangre se recoge ya sea en tubo capilar o una pipeta y se dejó caer
suavemente desde una altura de lcm encima de la superficie de la solución de sulfato de cobre.
5. La caída se encapsulado en un saco de proteinato de cobre, lo que impide cualquier cambio en concreto
gravedad durante unos 15 segundos. Si la gota de sangre se mantiene en la superficie, o se eleva desde la parte inferior de la
solución, la caída es más ligero que la solución de CuSO4 y el contenido de hemoglobina de la sangre es inferior a 12,5 g / dl. Sin
embargo, si la gota se hunde dentro de los 15 segundos, Hb de la sangre es 12,5 g / dl + 0,19 o más.
Nota: Si el nivel de proteína del plasma de donantes es el límite inferior de la normalidad, es posible un donante puede ser rechazada si él /
ella puede haber requerido Hb.
La base del método es la dilución de la sangre en una solución que contiene cianuro de potasio y ferricianuro de potasio.
Hb, Hola y COHb (pero no SHb) están convertidos en HiCN.
La absorbancia de la solución se mide a continuación, en colorímetro fotoeléctrico a una longitud de onda de 540 nm o con un
filtro verde.
reactivos necesarios
• reactivo de modificación de Drabkin (diluyente)
Otros detergentes no iónicos que pueden ser utilizados en lugar de Nomidet incluyen Sterox SE (Harleco)
0,5 ml, Triton X - 100 (Rohm y Hass) 1 ml o Saponic 218 (Alcoac Inc.) de 1 ml. El reactivo debe ser clara y de color
amarillo pálido y el pH debe ser 7,0 a 7,4.
Cuando se mide contra agua como blanco en un colorímetro fotoeléctrico a una longitud de onda de 540 nm. La absorbancia debe
leer cero. La solución de Drabkin está disponible comercialmente.
• los solución no utilizada debe desecharse al final del día en el que se abre la ampolla, para evitar la
contaminación.
• La solución estándar HiCN se utiliza para la comparación directa con la sangre, que también se convierte en HiCN en
solución de Drabkin.
Muestra de sangre
• La medición puede llevarse a cabo en la sangre que se ha almacenado en EDTA (1,5 mgm EDTA / ml) AT4 ° C.
• sangre capilar fresca de pinchazo en el dedo también se puede utilizar si se añade inmediatamente a la solución de reactivo.
Método
1. Encender el colorímetro fotoeléctrico y esperar 15-20 minutos para calentarse antes de su uso.
2. Añadir 20 | il de sangre a 4 ml de diluyente. Tapar el tubo que contiene la solución y invertido
varias veces. Dejar reposar a temperatura ambiente durante 5-10 min para garantizar la finalización de la reacción.
Esta solución de HiCN está listo para ser comparado con la norma.
Interpretación
• Registre el valor de absorbancia (A) directamente en el colorímetro calibrado para lectura directa de Hb en g / dl.
• Si el colorímetro no es para tomar la lectura directa de la hemoglobina ficha g / dl las lecturas de la observancia y
la hemoglobina se pueden calcular a partir de la siguiente fórmula: -
precauciones
• Solución estándar debe ser desechado al final del día en que se abre la ampolla.
sistema de hemoglobina Hemocue es método preciso, exacto para medir la hemoglobina. Consiste en:
1. Auto -Llenado microcubeta desechable con el reactivo en forma seca. Que sirva como una pipeta, prueba
tubo de medición cubeta todo en uno.
2. cubeta de control se suministra con cada fotómetro para la verificación de la calibración de la
fotómetro.
3. Fotómetro calibrado en la fábrica contra el cianmetahemoglobina método (HiCN)
• Medición a 570 nm y 880 nm
• pone a cero automáticamente después de las mediciones
• La reacción química tiene lugar en la cubeta y el fotómetro muestra automáticamente el resultado en menos de
60 segundos.
• rango de medición de hemoglobina 0-25,6 g / dl
ventajas:
• manejo seguro e higiénico rápida
• La exactitud es de ± 1,5%
Extracto de Dolichos biflorus → Lectina Anti-A 1 Un aglutina 1, células pero no una 2 células Extracto de Ulex europaeus →
Anti-H. Reacciona con células que tienen actividad de antígeno H Vicia graminia → Anti- N. Se reacciona con células que
tienen N antígeno anti-A 1, y anti-H están disponibles comercialmente.
POLYAGGLUTIEVATION
Parcialmente polyagglutination está asociada con infecciones bacterianas o virales y desaparece cuando se elimina la infección. enzimas
microbianas altera la estructura normal de la membrana de glóbulos rojos y expone a los receptores ocultos tales como T, Tk, Th y VA. Todo
normal de sueros humano adulto contiene anti- T y reacciona con el cryptantigen T expuesta. La mayoría cable de falta sueros anti-T. Por lo
tanto, los sueros cable de ABO compatible puede utilizarse como reactivo de escribir. Monoclonal anti-A y anti-B también pueden ser utilizados
para obtener resultados válidos con células polyagglutinable. Las lectinas (extractos semillas) también se pueden utilizar para detectar
polyagglutination. (Véase la tabla 19.2)
Una mutación somática (Tn) es persistente y las formas heredadas (por ejemplo, CAD) son permanentes.
Tabla 19.2: Reacción (polyagglutination) de las células rojas con lectinas
Dolicus - - - + +
Salviasclarea
- - - + -
Método
1. Ponga 2 gotas de suero de ensayo o suero conocido en tubo debidamente etiquetado.
2. Añadir 1 gota de 2-4% de suspensión de glóbulos rojos apropiadas en solución salina y mezclar.
3. Incubar a temperatura ambiente durante 30-45 min. En caso de urgencia, centrifugar los tubos a 1000 rpm durante 1 min.
Después de 5-10 min. incubación a temperatura ambiente (método de la vuelta)
Interpretación
La aglutinación o hemólisis es un resultado positivo.
(yo) concentración 22% para mejorar la aglutinación de glóbulos rojos recubiertos con anticuerpos IgG (ii) concentración de 1-7% como
Mayormente 22% de albúmina bovina se utiliza para mejorar la aglutinación de células rojas recubiertas con anticuerpos de IgG para la
detección e identificación de anticuerpos IgG, a juego transversal y tipificación celular.
Método
Un método de una etapa (albúmina se utiliza como aditivo)
2. Añadir una gota de 2-4% de suspensión de glóbulos rojos apropiados en solución salina
3. Añadir dos gotas de albúmina bovina 22%
4. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 30-60 min
5. Centrifugar a 1000 rpm durante Lmin
6. resuspender suavemente el botón de células y observar la aglutinación / hemólisis
7. Confirmar todos los resultados negativos bajo el microscopio
técnica de una sola etapa (método aditivo) toma menos tiempo y se utiliza con más frecuencia, pero la técnica de dos etapas (método de
estratificación) es más sensible.
Nota: Las instrucciones del fabricante deben ser seguidas: La aglutinación
o hemólisis es un resultado positivo.
ENZIMAS
La reacción de cierto antígeno de grupo sanguíneo y anticuerpos se han mejorado de forma selectiva por el uso de enzimas. Las enzimas
mejoran la reactividad del anticuerpo a Rh. Kidd, P, Lewis y I antígenos y destruir o deprimir la reactividad a las células rojas antígenos Fy una, Fy segundo
M, N, S. Algunos de los enzimas utilizados en la detección de anticuerpos son los siguientes:
Las enzimas reducen rojo carga negativa de la superficie celular y el potencial zeta. Para más detalles, véase 'Factores que afectan reacciones
antígeno-anticuerpo' en el capítulo sobre principios básicos o Inmunología. La papaína, ficina o bromelina se utilizan por lo general como solución
• técnica de enzima en dos etapas: los glóbulos rojos se tratan previamente con las enzimas antes de la adición de suero.
2. Preparación de solución de trabajo de tampón de fosfato en el momento de la preparación de solución de cisteína papaína que tiene
pH 6,2
M / 15 Na 2 HP0 4. 2H 2 0 M / 15 KH 2 P0 4
(1) Suspender I g de papaína (BDH / Merck 1: 350) en 100 ml de solución salina tamponada con fosfato (Este
solución puede mantenerse durante varios meses a 4 ° C, pero se puede mantener mejor a -20 ° C). (2) Si se desea, esta
Para su uso, se añade 1 volumen de la solución madre a 9 volúmenes de solución salina tampón de fosfato, pH 7,3, preparado
mediante la adición de 3 volúmenes de M / 15 Na2HPO4 (9,46 g / L) a 1 volumen de M. / 15 KH 2 P0 4 ( 9.07g / L)
métodos de IgG
La técnica de enzima de dos etapas es más sensible que la técnica de enzima de una etapa. Dos método etapa se utiliza para la
detección e identificación de anticuerpos IgG. método en una sola etapa se utiliza generalmente para la coincidencia de cruz y la
tipificación de células, ya que es muy conveniente. También se puede utilizar para la detección e identificación de anticuerpos de IgG en
suero.
Usos de LISS
• Útil en la cirugía electiva, el suero del paciente se mantiene después de hacer grupo sanguíneo, rastreo de anticuerpos y de
compatibilidad cruzada se realiza bajo petición en el momento de la operación
8. Agregue 100 ml en viales pequeños esterilizados bajo flujo laminar. Almacenar a 4 ° C oa -20 ° C a
evitar el crecimiento bacteriano.
315
medicina transfusional Manual técnico
Control de Calidad de
No serológica
NOTA: La adición de azida de sodio en esta cantidad aumenta la fuerza iónica ,0355-,043.
Esto no afecta el comportamiento serológico de la solución.
4. Tome igual volumen (2 gotas) de suero y células suspendidas LISS- (2 gotas) en el tubo.
5. Incubar a 37 ° C durante 15 min en la rutina y 5 min en caso de emergencia.
6. Centrifugar a 1000 rpm durante un minuto
7. Examine el sobrenadante para la hemólisis, resuspender las células y observar la aglutinación,
y registrar los resultados. Un resultado positivo (aglutinación y / o hemólisis) indica incompatibilidad.
8. Si no hay hemólisis o aglutinación visto en el ensayo anterior, se lavan las células tres veces en gran cantidad de solución
salina normal. Decantar el sobrenadante en cada lavado lo más completamente posible.
11. Agitar suavemente el tubo para desalojar el botón y examinar para la aglutinación, utilizando óptico
ayudar y grabar el resultado.
12. Añadir 1 gota de células rojas recubiertas de IgG a cualquier prueba que no es Reactivo. Mezcla, se centrifuga a
1000 rpm para I min. Busque aglutinación. Si se obtiene un resultado negativo (sin aglutinación), el resultado de la
prueba no es válida y toda la prueba debe repetirse
316.
Preparación de la solución Y Métodos
Interpretación
• Es igual que en DAT o IAT.
• Hemólisis o aglutinación es un resultado positivo.
precauciones
Por rutina LISS trabajo debe estar a temperatura ambiente tan frío LISS recta de los aumentos de almacenamiento C 4 °
reacción anticuerpo frío no deseada.
• Los glóbulos rojos se deben lavar dos veces en solución salina normal para liberarlos de suero antes de añadir LISS a ellos. Las
huellas de suero residual resultará en la absorción no específica de complemento del suero autólogo en las células rojas en
LISS.
• Un volumen igual de suero y LISS suspendió 2-3 celular% debe ser utilizado.
• El tubo debe agitarse suavemente para ver aglutinación.
• Botella de LISS en uso debe desecharse después de 48 horas.
ANTIBODYTITRATION
La titulación es técnica semi-cuantitativa de medir la concentración de un anticuerpo en un suero. El título de un anticuerpo se determina
habitualmente mediante pruebas de la dilución de dos veces en serie del suero contra las células rojas apropiados.
• meticulosa técnica de pipeteo es necesario para obtener resultados significativos de titulación. pipetear con la boca
no debe hacerse y la punta de la pipeta no debe ser roto. se recomienda la pipeta semiautomática con puntas
desechables. Nueva punta desechable se debe utilizar para cada suero.
• El tiempo óptimo de incubación, la temperatura y método apropiado dependiendo del tipo del anticuerpo debe ser utilizado. Los
anticuerpos IgM son probados por el método de solución salina y los anticuerpos IgG se prueban por la albúmina o enzima o
método AHG.
• La edad y la concentración de glóbulos rojos pueden afectar los resultados. Recién extraídos y células preparadas suspensión
debe ser utilizado. Cuando se comparan los títulos de un anticuerpo en dos o más sueros, todos los sueros se debe probar
simultáneamente contra los glóbulos rojos del mismo donante.
• Cuando las muestras de suero prenatales secuenciales son probados para el cambio de título de anticuerpos, las muestras se
deben almacenar congelado para la comparación con las muestras posteriores. Cada espécimen deben probarse junto con la
muestra inmediatamente anterior.
• Los resultados deben ser leídos macroscópicamente. los fenómeno prozona pueden producir reacciones más débiles en los
primeros uno o dos tubos que en diluciones más altas, por lo que debe ser evaluado toda la serie de tubos.
1. Etiquetar una fila de tubos de ensayo, de acuerdo con la dilución de suero, por lo general 1: 1 a 1: 512.
2. Administrar 0,1 ml o 1 volumen de solución salina en todos los tubos, excepto el primer tubo.
4. Mezclar el contenido del tubo 2 con una pipeta limpia y luego transferir 0,1 ml o 1 volumen de la
mezcla de tubo 3 (dilución 1: 4).
5. Continuar la misma técnica, a través de todas las diluciones y retirar 0,1 ml o 1 volumen de
el tubo de dilución con una dilución de 1: 512 y descartar o guardar para su posterior dilución si es necesario.
6. Añadir 0,1 ml o 1 volumen de 2-5% suspensión salina de glóbulos rojos apropiadas a cada tubo.
7. Incubar a la temperatura apropiada de acuerdo con el anticuerpo que se está probando. En caso de anti- A y anti-B,
incubar a temperatura ambiente durante 30-45 minutos.
NOTA
• Para el título de anticuerpos IgG añadir 0,1 ml o 1 volumen de albúmina bovina 22% o cisteína papaína después de la etapa 5.
AVIDEZ
La velocidad y la fuerza de aglutinación que se denomina como la avidez. La prueba se realiza mediante la mezcla de dos gota de anti-suero con
una gota de suspensión celular 40-50% en un portaobjetos o baldosas y balanceo suavemente a temperatura ambiente (RT). El tiempo para una
reacción claramente visible (1) y luego por (4) reacción fuerte a ocurrir se registran con la ayuda de reloj de parada.
+ W 2 a 3 células se pegan juntos por campo de baja potencia, la distribución desigual visualmente sin
aglutinación
(Técnica de inhibición)
Aproximadamente el 75% de los individuos poseen el gen Se que gobierna la secreción de agua antígenos ABH soluble en todos los fluidos
Bods con la excepción de líquido cefalorraquídeo. Estos antígenos secretados pueden demostrarse en saliva mediante la prueba de inhibición
persona a masticar una goma elástica o mantener unos granos de sal en la boca.
• Mantenga el recipiente en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos para inactivar las enzimas.
La dilución de saliva
La saliva de adultos debe diluirse 1: 2, saliva no diluida contiene glicoproteínas no específicos que pueden causar resultados
erróneos.
La dilución de antisuero
Título anti-A, anti-B y anti-H: dependiendo del título final, diluir el suero en solución salina a un título de 1: 8 a 1:16 (ejemplo: si el título
final de anti-Ais 1: 256 y la de titulación deseado es de 1: 8, diluir anti-a en 32 (256 ÷ 8 = 32).
Método
+ + +
2 gotas de diluido 2 gotas de diluido 2 gotas de diluido
anti-A anti-B anti-H
Un control de Control B control de H
+ + +
2 gotas de diluido 2 gotas de diluido 2 gotas de diluido
• Añadir 1 gota de 5% suspensión salina de células A a tubo A, B células de suspensión al tubo B, y O células
suspensión a tubo H.
• Mezclar e incubar todos los tubos a temperatura ambiente durante 30-60 minutos.
319
medicina transfusional Manual técnico
Interpretación
• No aglutinación en la muestra de ensayo y la aglutinación en el tubo de control correspondiente indica que el
antisuero se ha neurteralized por la sustancia específica de grupo sanguíneo
A, B, o H y el individuo es secretor.
• La aglutinación en todas las muestras de ensayo y tubos de control indica la ausencia de sustancias de grupos
Aglutinación + + +
Este ejemplo indica la presencia de sustancias A y H en la saliva y el individuo es el grupo sanguíneo A. Del mismo
modo B grupo secretor segregará B y H sustancias y secretor grupo O sólo tendrá sustancia H en la saliva.
Método
1. Colocar 2 gotas de suero de ensayo fresco, no más de 24 horas de edad, en cada uno de los dos tubos
etiquetados A y B. Si el suero es inevitablemente más de 24 horas de edad, añadir un volumen igual de fresco suero AB
humano libre de lisinas, como una fuente de complemento, que es importante para la reacción.
2. Añadir 1 gota de fresco suspensión salina 2-5% de A lavó 1 células a tubo A y 1 gota de B
suspensión de células al tubo B.
3. Mezclar suavemente y se incuba a 37 ° C durante 2 horas.
4. Centrífuga y examinar el sobrenadante contra el fondo blanco espalda bien iluminado para detectar
hemólisis.
5. Puntuación el grado de lisis de acuerdo con la intensidad del color sobrenadante (rosa a
rojo) y el botón celular tamaño.
6. Cualquier tono de color rosa o rojo indica hemólisis.
7. La hemólisis en el tubo containg A 1 glóbulos rojos indican la presencia de hemolisinas anti-A
y la hemólisis en el tubo containg células B rojo indica la presencia de anti-B hemolisina.
NÓTESE BIEN: Uso de la suspensión celular más débil o más grande cantidad de suero se incrementará la actividad hemolítica.
Metodo alternativo
Un volumen de cada suspensión de 50% de un lavado, y las células B se pone en dos tubos A y B marcadas que tienen 9 volúmenes de
suero de ensayo fresco de sangre grupo O. La mezcla se incuba a 37 ° C durante 2 horas, después se centrifugó y el sobrenadante se
inspecciona para hemólisis. El resultado se interpreta como anteriormente. 320
Preparación de la solución Y Métodos
ELUCIÓN
Un resultado DAT positivo indica que los glóbulos rojos se sensibilizan con anticuerpo IgG y / o complementan in vivo, y puede haber poco o
ningún anticuerpo en el suero. Positivo DAT puede ser causada por autoanticuerpos, aloanticuerpos (en HTR o HDN) o anticuerpos frente a
ciertos medicamentos. Las pruebas con reactivos AHG monoespecíficos pueden determinar si la IgG o componente del complemento o
ambos son el recubrimiento de la célula roja, pero la especificidad del anticuerpo no se puede determinar que está unido a la membrana de
los glóbulos rojos por DAT.
La elución es una técnica utilizada para disociar anticuerpo de los glóbulos rojos sensibilizados y para recuperar el anticuerpo en un diluyente
inerte tal como solución salina normal o 6% de albúmina, y se llama eluyen. Este eluido se puede probar, como suero, para determinar la
especificidad del anticuerpo.
El objetivo de tales procedimientos es recuperar anticuerpo limitada a las células rojas en eluyen para la detección y la identificación y
algunos procedimientos de elución recuperar libre de anticuerpos glóbulos rojos en forma utilizable para fenotipado y o absorción de
auto-anticuerpo.
La elución puede llevarse a cabo por un número de siguiendo los procedimientos físicos y químicos CAMBIAR
en termodinámica (temperatura)
Los cambios en las fuerzas de atracción inversa termodinámicas entre antígeno y anticuerpo, o perturban la complementariedad
estructural del antígeno y anticuerpo.
La elución de calor
(Landsteiner y Miller 1925)
Solicitud
Esto es útil en eluyendo anti-A y / o anti-B a partir de células rojas en el diagnóstico de ABO-HDN o para la elución de otros anticuerpos
que se unían más fuertemente a baja temperatura. No es mucho eficiente en la recuperación de los anticuerpos IgG. Este método tiene la
ventaja de la velocidad y simplicidad.
materiales
• 6% de albúmina bovina, preparado por dilución de 22% de albúmina de bovino con solución salina (1,4 ml 22% de albúmina
bovina + 3,6 ml de solución salina normal) o suero AB.
• Anticuerpo recubre los glóbulos rojos, DAT positivo (2 ml)
• solución salina sobrenadante de último lavado de las células recubiertas de anticuerpo.
métodos
1. Preparación de sobrenadante de último lavado
• Lavar las células rojas recubiertas de anticuerpo (de la que el eluido se quiere realizar) seis veces en grandes volúmenes de
solución salina normal.
• El lavado final se debe realizar mediante la adición de solución salina igual al volumen de concentrado de glóbulos rojos
lavados. Centrifugar y recuperar el sobrenadante de la última de lavado y probarlo en paralelo con el eluato.
• Este último lavado es un importante control negativo que demuestra que el anticuerpo del suero residual se ha eliminado
antes de que el eluato se prepara a partir de los glóbulos rojos lavados.
2. Preparación de Eluir
• Añadir solución salina (o AB de suero o 6% de albúmina) igual al volumen de células empaquetadas lavadas.
• Colocar el tubo en un baño de agua C 56 ° durante 5-10 minutos. Agitar con frecuencia durante la incubación.
321
medicina transfusional Manual técnico
• Inmediatamente centrifugar a 1000 rpm durante 2 minutos. Una centrífuga calentada se mantiene a 56 ° C es ideal,
pero si esto no es posible, entonces calentar las tazas de la centrífuga en agua a 56 ° C y centrifugar rápidamente.
• transferir inmediatamente el eluyen sobrenadante a otro tubo de ensayo y prueba frente a un panel de; las células para la
presencia de anticuerpos en paralelo con el último sobrenadante de lavado.
• Si eluyen utiliza mismo día, se puede preparar en solución salina, si el almacenamiento se eluyen anticipado se
prepara en el suero AB o en 6% de albúmina.
NÓTESE BIEN: Última sobrenadante de lavado es la prueba de anticuerpo en paralelo con eluyen para asegurar que cualquier eluido
anticuerpo no es contiminants de suero residual.
Congelación-descongelación (Lui)
Es un método de elución anticuerpos ABO mediante la congelación de las células rojas recubiertas de anticuerpo lavados en 5% de albúmina y
luego descongelar ellos. Tras la eliminación del estroma por centrifugación el eluido está listo para anticuerpos de prueba.
materiales
• Dietil éter de grado reactivo o grado anestesiológico).
• Pic DAT células rojas positivos (2 ml), se lavaron 6 veces en solución salina.
• El sobrenadante m último lavado de las células rojas recubiertas de anticuerpo.
Método
1, Preparación de sobrenadante de último lavado
• Lavar las células rojas antebody de la que el eluido se hace que, seis veces en un gran volumen de solución salina.
• Recuperar el lavado no sea como se describe anteriormente en el paso 1 en el método de elución de calor.
2. Preparación de elure
1. Añadir un volumen igual de solución salina a las células rojas lavadas y mezclar.
2. Añadir éter en una cantidad igual al volumen total de glóbulos rojos más solución salina. El éter debe
sé fresco; la aparición de color marrón del éter indica que el éter es oxidado y el eluato será
inútil.
3. Stopper y mezclar el tubo mediante inversión repetida durante 1 min.
6. Centrifugar el tubo a 1000 x g (3.400 rpm) durante 10 min. El tubo contendrá entonces 3
capas- éter claro en la parte superior, estroma de glóbulos rojos en el eluato medio y hemoglobina tensas en la parte inferior.
9. Incubar la eluyen en el tubo sin tapón a 37 ° C durante 15 min y periódicamente aire de la burbuja a través eluyen mediante una
pipeta para eliminar el éter residual.
10. Prueba de la elución para la presencia de anticuerpos en paralelo con el último sobrenadante de lavado. Última sobrenadante del
lavado se prueba en paralelo con eluyen para asegurar que cualquier anticuerpo eluido no es contaminantes de suero residual.
reactivos
• xileno de grado reactivo.
• Pic DAT células rojas positivos, se lavó 6 veces en solución salina.
Método
1. Mezclar un volumen igual de glóbulos rojos, solución salina normal y xileno en un tubo de ensayo.
ACIDELUTES
En ácido eluye técnicas el uso de solución de ácido reduce el pH y se altera la complementariedad de bonos antígeno-anticuerpo. El pH
óptimo para la unión antígeno-anticuerpo es 6/8 a 7/2. Acid eluye reducir el pH a 3 o menos mediante la mezcla de las células
sensibilizadas con una solución ácida. El anticuerpo es liberado de la membrana de los glóbulos rojos. La solución de ácido se convierte en
eluyen. El ácido cítrico, glicina, y el ácido Digiton se utilizan en técnicas de elución de ácido.
• solución de elución: ácido cítrico (monohidrato), 1,3 g; KH 2 P0 4, 0,65 g; Saline a 100 ml ,: Almacenar a 4 ° C.
323
medicina transfusional Manual técnico
Método
1. Chill todos los reactivos a 4 ° C antes de su uso.
2. Tomar 1 ml de glóbulos rojos envasados en un tubo y añadir 1 ml de solución de elución. Tenga en cuenta el tiempo.
3. Tapar el tubo y mezclar por inversión durante 90 segundos.
4. Retirar el tapón y centrifugar inmediatamente el tubo a 1000 g durante 45 segundos.
5. Transferir el sobrenadante a un tubo limpio y añadir 5-6 gotas de solución de neutralización: guardar los glóbulos rojos para su
uso en la adsorción si es necesario.
6. Verificar el pH; ajustar, si es necesario, a pH 7,0 mediante la adición de más solución neutralizante.
7. Centrifugar a 1000 xg durante 23 minutos para eliminar el precipitado que se forma después de la neutralización. Retire el eluyen
sobrenadante y prueba en paralelo con la solución salina de lavado sobrenadante del lavado final.
NOTA • Una vez que los glóbulos rojos se han rendido DAT negativos, pueden ser utilizados para fenotipificación,
a excepción del sistema Kell. Los antígenos de los sistemas Kell se debilitan después del tratamiento ácido cítrico.
• Cítrico-ácido glóbulos rojos modificados pueden ser tratados con enzimas y se usan en la adsorción autólogo.
ELUCIÓN FRÍO-ÁCIDO
reactivos
• Glicina-HCl (0,1 M, pH 3,0) se prepara disolviendo 3,75 g de glicina y 2,992 g de cloruro de sodio en 500 ml
de agua destilada. Ajustar el pH a 3,0 con 12 N de HCl. Tienda AT4 ° C.
• Tampón fosfato (0,8 M, pH 8,2) se prepara disolviendo 109,6 g de Na, HP0 4 y 3,8 g de KH 2 P0 4 en aproximadamente 600
ml de agua destilada. Ajustar el pH con NaOH IN o IN HCl si es necesario. Añadir agua destilada hasta un volumen final
de 1 litro. Almacenar a 4 ° C.
• La solución salina normal, AT4 ° C.
5. Transferir el eluido sobrenadante a un tubo de ensayo limpio y añadir 0,1 ml de fosfato bufferPH
8,2 por cada 1 ml de eluato.
6. Mezclar y centrifugar a 1000 rpm durante 2-3 minutos.
7. Transferir el sobrenadante se eluyen en un tubo de ensayo limpio y probar el eluato en paralelo con el
solución salina sobrenadante del lavado final.
NOTA
• Mantenga glicina en baño de hielo durante el uso, para mantener el pH correcto.
• La adición de tampón de fosfato restaura la neutralidad a la elución de ácido. acidez no neutralizado puede causar hemólisis de
los glóbulos rojos reactivo utilizado en prueba en el eluido.
Las técnicas anteriores, a veces se hace referencia apropiadamente a como 'eluido total' para su uso en anticuerpo
-- estudios de identificación; RBCs a partir de los cuales se prepara eluyen generalmente se vuelven inútiles para cualquier propósito. "eluye parcial
para eliminar el anticuerpo de eritrocitos sensibilizados se pueden realizar usando Zzap o disulfato cloroquina soluciones para que los glóbulos
rojos se puede usar para autoabsorption o fenotipificación respectivamente.
• difosfato de cloroquina
• Zzap reactivo, (una mezcla de enzima proteolítica y agente reductor ditiotreitol).
materiales
1. Solución difosfato de cloroquina
• 20 g de difosfato de cloroquina (Sigma Chemical) se disuelve en 100 ml de solución salina tamponada
con 0,01 M fosfato, pH 7,2 (200 mg de cloroquina difosfato por ml. De tampón fosfato salino).
Procedimiento 1.
A un volumen de concentrado de glóbulos rojos lavados añadido 4 volúmenes de solución de difosfato de cloroquina.
2. Mezclar por inversión. A continuación, dejar la muestra a temperatura ambiente durante 2 horas con mezcla periódica
3. Después de la incubación, los tratados con cloroquina glóbulos rojos se lavaron 4 veces con grandes volúmenes de solución salina
isotónica y luego hacer suspensión celular 2-5% de células lavadas en solución salina para la prueba.
4. Tomar un volumen de 2-5% suspensión tratada celular y 1 volumen de reactivo anti-IgG-mono específico
(AHGS) y realizar DAT
325
medicina transfusional Manual técnico
5. Si reactiva, repita los pasos 1-3, hasta que las células son no reactivos a DAT.
6. Hacer la suspensión de células como en el paso 3. Las células pueden usarse para la tipificación de antígeno o auto-
procedimiento de absorción.
NÓTESE BIEN: Toda célula sensibilizada IgG no puede volverse no reactivo, incluso después de un tratamiento prolongado y en ocasiones células rojas
obtener hemoliza.
Esto da lugar a la disociación completa de anticuerpo y el componente del complemento de los glóbulos rojos, pero antígenos MNSS, Duffy y Kell
son destruidos. Se descubre los sitios antigénicos en glóbulos rojos que son capaces de autoanticuerpos de unión en el suero. ZAAP tratada
glóbulos rojos están especialmente adecuados para procedimientos autoabsorption porque los resultados de tratamiento en intacta RBC que han
reducido IgG. ZAAP glóbulos rojos tratados por lo general no se utilizan para escribir (excepto Rh mecanografía).
reactivos necesarios
• 1% papaína cisteína activado; almacenar a-20 ° C (ficina, bromelina, o tripsina se puede sustituir por la papaína
activada cisteína).
• 0,2 M de ditiotreitol (DTT); almacenar a -20 ° C, (0,2 M 2- mercaptoetanol puede ser sustituido por 0,2 MDTT).
Método
AT4 ° C.
4. Lavar las células rojas 3-4 veces con solución salina isotónica, y eliminar el sobrenadante tanto como sea posible.
5. Resuspender Zzap células tratadas con 2 - 5% en solución salina para su uso. Las células se pueden utilizar para auto-
absorción.
326
ABSORCIÓN
Absorción: Esta técnica se utiliza para la eliminación de un anticuerpo a partir del suero mediante la unión del anticuerpo específico
para el antígeno correspondiente en la superficie de células rojas en condiciones óptimas (opuesto de elución), a menudo se usa de
manera intercambiable con adsorción.
Solicitud
• Separación de anticuerpo en el suero que contiene anticuerpos múltiples.
• La eliminación del anticuerpo no deseado, especialmente anti-A o anti-B a partir de un suero que contiene un anticuerpo adecuado
para el reactivo.
• La eliminación de auto-anticuerpo para permitir la detección de la coexistencia de alo-anticuerpo (s).
• La confirmación de la presencia de antígenos en las células rojas través de su capacidad para eliminar el anticuerpo en suero
específico.
Método
1. Lavar un gran volumen de células rojas para ser utilizado en la absorción, tres veces en solución salina normal. Estas
células deben poseer el antígeno correspondiente al anticuerpo que es para ser absorbida y faltará el antígeno
correspondiente a otro anticuerpo, en su caso, que no es para ser absorbida (es decir, a permanecer en el suero).
2. Después del lavado final .Centrifuge las células de modo que estén bien embalados y eliminar la mayor cantidad de solución salina
como sea posible.
5. Incubar a temperatura óptima, en el que el anticuerpo sea absorbido reaccionará, durante 30-60 min, la mezcla de vez en
cuando.
6. Centrifugar y recuperar el suero.
7. Pruebe el suero para ver que la absorción se ha completado., Si no, repetir el procedimiento utilizando otra alícuota de glóbulos
rojos empaquetados. Siempre prueba para asegurar que el anticuerpo que ha de permanecer en el suero es suficientemente
reactivo antes de continuar con la absorción de repetición.
Solicitud
Esta técnica está indicada cuando la reactividad del anticuerpo se ve a temperatura ambiente con las células de detección y con
autocontrol del paciente. Si el paciente ha sido transfundidos recientemente, el procedimiento se debe usar con precaución, ya que
aloanticuerpos pueden eliminarse además de autoanticuerpos.
Muestras de sangre
• Para obtener mejores resultados de absorción, muestras de sangre fresca deben obtenerse en solución anti-coagulante y vial
llanura separado ..
Suero de absoiption: Permitir que la muestra se coagule en el baño de hielo o el refrigerador, eliminar el suero y
mantener a temperatura fría.
327
medicina transfusional Manual técnico
• Las células para la absorción: Anti-coagulada muestra se coloca a 37 ° C. Permitir que las células se asienten por gravedad. Eliminar
plasma, lavar las células restantes tres veces con solución salina caliente (37 ° C).
1. Se lavan las células rojas tres veces en solución salina (esto se puede omitir si se ha recogido la muestra
como se describió anteriormente).
1. Añadir yo volumen de solución de papaína 1% a 1 volumen de lavado, concentrado de glóbulos rojos autólogos.
5. Añadir el suero del paciente igual al volumen de células empaquetadas en una parte alícuota.
6. Mezclar e incubar en la nevera durante 30-60 min. Mezclar con frecuencia durante la incubación para
una máxima absorción.
suero absorbido todavía es reactivo con las células autólogas, la absorción no es completa y
debe ser repetido con la segunda alícuota de células rojas tratadas con enzimas empaquetadas lavadas.
TÉCNICA WARMAUTO-ABSORCIÓN
Solicitud
Esta técnica está indicada cuando la reactividad del anticuerpo se ve a 37 ° C con células de detección y con autocontrol del paciente. El
procedimiento debe utilizarse con precaución si el paciente ha recibido una transfusión en los últimos 2-3 meses.
Método 1
El calor y el método enzimático
1. Recoger la muestra del paciente en el anticoagulante y otra muestra en un vial de llanura a
37 ° C y separar el suero a 37 ° C.
328
Preparación de la solución Y Métodos
2. Lavar las células rojas de la paciente con solución salina caliente (37 ° C). Retire la solución salina sobrenadante de
el último lavado.
3. Suspender los glóbulos rojos del paciente se lavó en solución salina a 1: 1 ratio.
4. Eluir los autoanticuerpos calientes de las células en un volumen igual de solución salina a 56 ° C durante 3 a
4 minutos (o a 44 ° C durante 60 min si las células rojas son frágiles) mezclar constantemente, centrifugar y eliminar el
sobrenadante.
5. Lavar las células de nuevo 3 a 4 veces en solución salina caliente.
6. Girar y retirar el exceso de solución salina.
7. Añadir un volumen de solución de papaína 1% a un volumen de lavado de color rojo autólogo embalado
Células.
8. Mezclar e incubar a 37 ° C durante 15 min.
9. Lavar las células tres veces con solución salina normal. Retire la solución salina sobrenadante.
10. Dividir las células rojas en 2 alícuotas.
11. Añadir el suero del paciente igual al volumen de células empaquetadas en una parte alícuota.
Si el suero absorbida es todavía reactiva, la absorción no es completa y repita los pasos 11-13 con la segunda alícuota de lavado las
células tratadas con enzimas empaquetadas.
Recoger dos muestras de sangre del paciente, un espécimen, el control, se mantiene a 37 ° C durante 60 minutos después de la
recogida. La segunda muestra se enfría a 4 ° C durante 30 minutos y después se incubó a 37 ° C durante 30 minutos. Ambas
muestras se centrifugaron y se observaron la para la hemólisis.
Interpretación
En una prueba de Donath-Landsteiner positivo, la hemólisis se ve en la muestra colocada a 4 ° C y luego a 37 ° C, mientras que no se
observa hemólisis en la muestra de control.
2. Añadir nueve gotas de suero del individuo sometido a prueba a una gota de lavados embalado rojo
células (grupo O) en el tubo 1.
3. En el segundo tubo de tomar partes iguales de suero de la undertest individual, suero normal fresco para actuar
como una fuente de complemento y células rojas lavaron (grupo O)
4. Coloque el primer tubo y el segundo tubo a 0 ° C en hielo picado durante 30 minutos. Negativo
los controles se proporcionan al mantener un duplicado de los tubos 1 y 2 a 37 ° C durante toda la prueba. Transferir los tubos a
0 ° C al baño de agua (37 ° C) y mantener durante una hora.
329
medicina transfusional Manual técnico
Interpretación
Una prueba positiva muestra hemólisis en los tubos 1 y 2 (o en 2 solamente, si el paciente es deficiente en complemento). Sin
hemólisis debe ser observada en los controles negativos.
Donath -Landsteiner Technique (cuantitativo) Método 1. Hacer diluciones dobles en serie de suero del paciente en el
tubo.
3. Sumergir los tubos en hielo picado a 0 ° C durante 30 minutos, a continuación, transferir el tema a un 37 ° C
+4 = hemólisis completa
+3 = profundo sobrenadante rojo
+2 = sobrenadante roja
+1 = sobrenadante de color rosa pálido
± = hemólisis débil
Interpretación
El título de hemólisis es el recíproco de la mayor dilución que da una reacción ±.
ABSORCIÓN y elución
(Para los subgrupos débiles de A o B)
1. Lavar 1 ml. células a ensayar al menos tres veces con solución salina. Descartar el
sobrenadante después
de la última de lavado.
2. Añadir 1 ml. de anticuerpos anti -A para glóbulos rojos si se sospecha débil variante de A, o 1 ml de anticuerpos anti -B
Si
Se sospecha variante débil de B.
3. Mezclar las células con anti-suero y se incuba a temperatura ambiente durante una hora.
4. Centrifugar la mezcla y descartar el sobrenadante anti-sueros
5. Lavar las células rojas restantes para un mínimo de cinco veces con un gran volumen de
solución salina (10
ml o más). Guardar el sobrenadante del quinto lavado para la prueba de anticuerpo libre.
6. Añadir un volumen igual de solución salina a las células lavadas y empaquetadas y mezclar.
7. Eluir el anticuerpo absorbido colocando el tubo 56 ° C baño de agua durante diez minutos y
mezcla
Los glóbulos rojos mezcla de solución salina al menos una vez durante este período.
8. Centrifugar y eliminar la elución de color cereza y desechar las células.
1. Si se utilizó anti-A, probar el eluato contra tres muestras diferentes de, células A y células tres grupo O a
temperatura ambiente, a 37 ° C y con suero de antiglobulina.
2. Es contra -B se utilizó, probar el eluato contra tres muestras de células B y tres grupo de células O a temperatura
ambiente, a 37 ° C y con suero de antiglobulina.
3. Pruebe el quinto lavado de solución salina de la misma manera para mostrar que el lavado se ha eliminado todo el anticuerpo,
no unido a las células. 330
Preparación de la solución Y Métodos
Interpretación
Si los aglutinados Eluir o reaccionan con células específicas A o B y no reacciona con 0 células, las células ensayadas tienen Un
antígeno activo ro B en su superficie capaz de unirse con el anticuerpo específico. Si el eluato reacciona también con las células S,
indica reactividad no específica en eluir, y los resultados no son válidas.
Si el quinto material de lavado de solución salina es reactivo con células A y B, los resultados de la prueba realizada en el eluato no son válidos, ya
que indica que el anticuerpo activo estaba presente en el medio no unido a las células que están siendo probados.
TECNOLOGÍA MICROPLACA
El uso de la microplaca se ha aplicado con éxito en el laboratorio del banco de sangre. Todas las pruebas de rutina de determinación del grupo
sanguíneo, el cribado contra el cuerpo y pruebas cruzadas se pueden hacer en microplaca sin pérdida de sensibilidad de anitbodies o cualquier
problema en la determinación del grupo sanguíneo.
microplaca:
Estas son placas polystyene que tienen 96 pocillos dispuestos en 8 filas (con letras de A a H) que tienen cada uno 12 pozos (lto numerada
12). Fig. 20-1
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
DOOOO O OO O OO OO
BOOOO O O O O OO OO
COOOO O O O OOO OO
Doooo O O O OOO OO
eooo O O O O O OO OO
fooo O O O O O OO OO
GOOO O O O O O OO OO
HOOO O O O O O OO OO
Estas son placas polystryene, que tienen 96 pocillos dispuestos en 8 filas (con letras de A a H) que tienen cada uno 12 pozos
(numeradas del 1 al 12). Microplaca con forma de U o V pozos forma, teniendo cada uno capicity de 25 micras se puede utilizar en la
serología de grupos sanguíneos ,. Las placas tienen propiedades electrostáticas. Es importante seleccionar las placas con propiedades
estáticas bajas. La adición de albúmina bovina y para Tween 20 al diluyentes y soluciones de lavado puede ayudar a eliminar efecto estático
producido por poliestireno. Incluso entonces es aconsejable preparar placas antes de su uso. Se puede hacer lavando las placas con Tween
20, después de lo cual se agitaron y se secó durante la noche a 37 ° C. Microplacas son desechables.
331
medicina transfusional Manual técnico
Principio
Microplaca es una matriz de 96 tubos de ensayo "cortas". también se aplica aquí Principio de hemaglutinación por el método de tubo de ensayo.
Microplaca puede ser rígido o flexible, ya sea con forma de U o V en forma de pozos. placas de fondo en U son más ampliamente utilizados
debido resultado se puede-leer mediante la observación de las características de resuspendió RBC o el patrón de streaming de RBC de cuando la
placa se coloca en un ángulo.
la fuerza de aglutinación se puede estimar mediante dispositivos fotométricos automática también, que leen resultados por la
observancia luz en fondo en U pozos para diferenciar entre los resultados positivos y negativos.
U pozos y pozos V
En de grupos sanguíneos serológicos las placas con pocillos de U o pozos V se pueden utilizar igualmente bien. En los pocillos en forma de V
cuando se utilizan baja concentración (0,1 -0,2%) de las células rojas, la sensibilidad es más, mientras que en forma de U células suspensiones
bien rojas de 2-3% se utilizan.
Equipo 1. Dispensadores semiautomática dispositivos para dispensar volúmenes iguales a una fila de
pozos.
2. Arandelas semi-automatizados se utilizan normalmente para lavar los especímenes antes
añadiendo
suero de antiglobulina. placas de fondo en U se prefieren para el lavado de RBC porque las muestras
resultados interfaz con microprocesador. El lector automatizado pasa haces de luz a través de
el fondo de los pocillos. Los resultados negativos producen lecturas de alta densidad ópticas, debido
dispersos en la parte inferior así absorber más luz de los glóbulos rojos que el botón de concentrado
interpreta las reacciones y se imprimen los resultados de los grupos sanguíneos para el registro de laboratorio.
el control de RBC se debe ejecutar con el lector automatizado para que el lector pueda diferenciar
falsa reacción, positiva debido a la agregación no específica. Para obtener resultados precisos, de los glóbulos rojos
concentración de muestras de ensayo de rutina debe ser controlada cuidadosamente (0,5 a 2% dar el
mejor sensibilidad) y la centrifugación y resuspensión deben llevarse a cabo de manera muy uniforme.
Para las células procedimiento de enzima se tratan previamente con 1% de papaína o 0,05% bromelina y células suspensiones se hace en
solución salina normal o en solución de baja fuerza iónica. 332
Preparación de la solución Y Métodos
1. Hacer diluciones dobles maestras de los anticuerpos anti-A, anti-B, anti-AB y anti Rh (D) monoclonales
anticuerpos.
más de 5 min) no el resultado puede obtenerse a través de lector automático a 570 nm de longitud de onda.
(Ii) Después de centrifugar la placa (etapa 4), colocar la placa a un soporte de placa en ángulo a 60 ° -
70 ° desde la horizontal durante 2-3 min y que invertir para la lectura. Las reacciones se leen macroscópicamente de la
cara posterior de las placas. En unas reacciones negativas células rastro rojo desde el centro del pozo y en las células de
reacción positiva permanecer en el centro o caída de un botón discreto a la parte inferior del pozo.
6. La mayor dilución que da aglutinación +++ macroscópico, y una reacción de control negativo claro está seleccionado para
su uso:
Nota: Probar los anti - A contra una 1 UNA 2, UNA 1 B. Un 2 B, las células B y O agrupados; contra -B contra B, A 1 B, A 2 Células B y O
agrupados. Anit Rh (D) contra OR 1 R 2 O 2 R 2 Se ,, y las células Orr.
pruebas:
1. 25? L Anti-sueros (-A, -B, -AB, y -D) de la dilución apropiada se dispensan en los pocillos
de microplacas. En ABO y Rh escribiendo las placas se pueden almacenar en bolsa de plástico sellada a 4 ° C.
2. Añadir 25? L de un 3% suspensión de células de las células a anti-sueros (-A, -B, -AB y -D) en los pozos.
12 34 567 8 9 10 11 12
ABO Anti-A AOOOOOOOOOOOO
Célula Anti-B BOOOOOOOOOOOO
Mecanografía Anti-AB COOOOOOOOOOOO
ABO A Cells DOOOOOOOOOOOO
Suero Las células B EOOOOOOOOOOOO
Mecanografía Las células O FOOOOOOOOOOOO
Rh (D) Anti-Dl GOOOOOOOOOOOO
Mecanografía Anti-D2 HOOOOOOOOOOOO
Anti-cuerpo de cribado o 1 R
2 O OOOOOOOOOOOOO
O2 R2 O OOOOOOOOOOOOO
1. Dispensar 25pL suero, papaína de 25pL Low y 25 ul 3% de células de suspensión en solución salina o
LISS a los pocillos apropiados de la microplaca.
2. Incubar la placa a 37 ° C durante 20-25 minutos.
3. Centrifugar la placa a 100 g durante 40 segundos.
4. Examinar la aglutinación ya sea después de la agitación o después de inclinar a aproximadamente 60 ° -70 pag hasta el
control negativo comienzan a pista como se ha descrito antes.
Método:
1. Dispensar 25 | iL de suero, 25 ul de células pre-tratadas con enzimas en los pozos.
1. Dispensar 25 ul de suero y 25 (IL de una suspensión al 5% de los glóbulos rojos lavados en solución salina o
LISS en pocillos apropiados.
2. Incubar a 37 ° C durante 30 min (cubierto con una tapa)
6. Resuspender las células y mezclar en el agitador de placas durante 40-60 segundos, repite el proceso de
lavar cuatro veces y dejar las células concentradas después del último lavado.
7. Añadir 50 uL de suero sin diluir poliespecıfico contra la globulina humana- (suero AHG) a la
las células en cada pocillo.
8. Los contenidos de los pocillos se mezclan agitando la placa en el agitador de placas durante una
minutos a baja velocidad.
11. Añadir ldrop de células IgG conciencia de todas las reacciones negativas.
12. Re-centrífuga de la placa y leer los resultados. Todas las reacciones negativas ahora deben ser positivos.
3. Lavar las células cuatro veces tal como se describe en la prueba antigloubulin indirecto (paso .5,6).
4. Realizar la prueba del peine como en la prueba de antiglobulina indirecta (Paso 7-12)
GELTECHNOLOGY
Gel Tecnología DiaMed ID Sistema Microtyping desarrollado por el Dr. Yves Lapierre de Francia, da más reproducible y resultados de
pruebas estandarizadas prueba de antiglobulina se puede realizar sin el lavado múltiple de glóbulos rojos antes de añadir en suero anti
globulina humana (AHG) y sin la necesidad de añadir sensibilizado las células de control a todas las pruebas negativas AHG. tecnología de
gel se puede utilizar para cualquier prueba de hemaglutinación inmunohematológico que tiene como su punto final, tales como:
• ABO y Rh
• El pulsar por otros sistemas de grupos sanguíneos
La prueba de gel DiaMed ID se proporciona como geles, celebrada en microtubos contenidos en una tarjeta de plástico. Cada microtubo
contiene aproximadamente 35 ml de Sephadex gel (acrilamida dextrano) preparado en una solución tampón tal como LISS o solución salina. El
gel puede contener otros elementos: conservantes tales como azida de sodio, regentes específicos tales como AHG u otro antisueros
RBC-específico para la agrupación, agentes como albúmina de suero bovino etc. sedimentan Estos reactivos se añaden al gel en el momento
de la fabricación. Así. el reactivo se dispersa uniformemente en toda la longitud de la columna de gel. Seis de estos microtubos están
incrustados en una tarjeta de plástico para permitir la facilidad de manejo, el ensayo, la lectura y la disposición. Una amplia gama de sistemas
de prueba está disponible, incluida la tipificación de células rojas, DAT. detección e identificación de anticuerpos y pruebas de compatibilidad.
335
medicina transfusional Manual técnico
principio:
El principio básico de la prueba de gel es que, en lugar de un tubo de ensayo, el suero y la reacción celular se lleva a cabo en un microtubo que
consiste en una cámara de reacción que se estrecha para convertirse en una columna (higueras
21,3). Los glóbulos rojos o mezcla de células y suero, (según corresponda) se dispensan en el gel. Las células son siempre añadido
antes de la suero - de manera que el suero no entra en contacto con el gel, lo que es muy importante en IAT. Así se elimina la
necesidad de que el ' phase'as de lavado en las técnicas convencionales. La incubación se lleva a cabo, seguido de centrifugación en
condiciones estrictamente controladas.
Rh (D) Determinación
• Una suspensión 0,8% de los glóbulos rojos del paciente se prepara añadiendo 10 T L de los glóbulos rojos del paciente a 1 ml de
solución de LISS.
células se usan con las tarjetas gel neutro y LISS células suspendidas se introducen en los geles
2+ reacciones se caracteriza por aglutina los glóbulos rojos dispersos por toda la columna de gel con pocos aglutinados
en la parte inferior del tubo Micro. Aglutina deben ser distribuidos a través de las mitades superior e inferior del gel.
1+ reacciones se caracteriza por células aglutina rojas observadas predominantemente en la mitad inferior del gel columna con células
rojas también en la parte inferior. Estas reacciones pueden ser débiles, con unas pocas aglutina restantes en la zona de gel justo por encima
de los glóbulos rojos sedimento en el fondo del microtubo.
Negativo reacción se representa por las células rojas que forman un sedimento delineado bien en la parte
inferior
Las células aglutinadas forman una capa de Las células aglutinadas se dispersan a través de los
células en la parte superior de los medios de gel. medios de comunicación de gel y pueden
1+
Las células aglutinadas comienzan a dispersarse Todas las células pasan a través de los medios de
3+
Negativo
Las células aglutinadas dispersan intoe la Las células aglutinadas forman una capa en la
2+ El campo mixto
Fig-21.4
337
medicina transfusional Manual técnico
Fig-21,5 La centrifugación
de microtubos
del microtubo. El gel por encima del sedimento celular rojo es clara la libre de aglutinados.
Mixed-campo reacciones pueden ser reconocidos como una capa de aglutinados de glóbulos rojos en la parte superior de la
gel acompañado de sedimento de células no aglutinadas en el fondo del microtubo.
• son necesarios el volumen de muestra Disminución para llevar a cabo un gran número de pruebas.
• No tubo de agitación o la resuspensión de botón de glóbulos rojos que conduce a la variación entre los tecnólogos en la
lectura y la clasificación de la aglutinación.
• En AHG probar no hay etapas de lavado, y no hay necesidad de utilizar glóbulos rojos sensibilizados en pruebas negativas AHG
• La provisión de centrifugadora (Fig. 21.5) calibrado para girar a una velocidad óptima para la longitud fija y de tiempo
correcta, reducir el potencial de errores durante esta fase de la prueba.
Este sistema para el cribado de anticuerpos irregular fue descrito en 1993 por Reis KJ Esta prueba se realiza en una microcolumna rellenada
previamente con microesferas de vidrio en la suspensión de suero globulina antihumana, cualquier reactivo de diagnóstico o solución isotónica
neutra. Las células sensibilizadas son atrapados por la suspensión de las microperlas durante la centrifugación de la columna. Véase la Figura
12.6.
Fig-12.6
La detección de glóbulos rojos sensibilizados se basa en el efecto de tamizado de microperlas de vidrio. Los glóbulos rojos y el suero se
incuban a la parte superior de una columna sobre la suspensión microesferas de vidrio. Estas microbolas están calibrados y durante la
etapa de centrifugación que retienen los aglutinados y las células no sensibilizadas de sedimento en la parte inferior. Kits son fabricados
por el sistema de diagnóstico Ortho y comercializados con el nombre de sistema de Ortho Bio Vue. Véase la Figura 12.7.
Fig-12.7
339
medicina transfusional Manual técnico
4. Pruebas cruzadas
3-5% de suspensión
suero / donante
Indirecto prueba AHG (IAT) 50? L LISS + 10ul3-5% de células 10-30 min 5 minutos.
3. En la prueba AHG no hay necesidad de lavar las células o el uso de células sensibilizadas para la confirmación
la aglutinación
5. La provisión de centrífuga de calibrado para girar a una velocidad óptima de longitud fija y correcta
de tiempo, reducir el error durante esta fase de la prueba
6. Más objetiva, la interpretación consistente y reproducible de los resultados
1. centrifugadora especial para acomodar cuentas de vidrio de cassettes (Bio Vue TM Centrifugar)
2. incubadoras especiales a incuban los cassettes panes de vidrio (Bio Vue TM Incubadora 32)
4. Es caro 340
22
Aseguramiento
de la Calidad en
la transfusión
sanguínea
Los servicios de transfusión sanguínea deben proporcionar sangre y productos sanguíneos que son seguros, puro, potente y eficaz. Para
proporcionar un alto nivel de seguridad de las prácticas de transfusión de sangre y seguras a los donantes de sangre, los médicos, los pacientes y
las familias de los pacientes, una filosofía de calidad debe ser desarrollado por los servicios de transfusión de sangre
El método de llevar esta filosofía de calidad en funcionamiento incluye, control de calidad, control de calidad y la mejora
continua de la calidad.
Aseguramiento de un producto de calidad incluye temas de seguridad de los pacientes y donantes de sangre, control de calidad de reactivo, el
control de la reparación y mantenimiento de equipos, competencia del personal, y el ensayo de un número definido de unidades de cada
producto para los parámetros adecuados y gestión de residuos peligrosos. Inherente a este objetivo es la provisión de un ambiente de trabajo
seguro. el mantenimiento de registros adecuados es esencial para el proceso de aseguramiento de la calidad y la seguridad. Además, la
recogida de datos apropiado, recuperación y análisis son también esenciales para el proceso de seguimiento de la calidad.
sangre y sus componentes son productos biológicos y considerado como medicamentos. el cumplimiento del banco de sangre con las
regulaciones federales y las normas prescritas en Drogas y Cosméticos Hechos es el requisito legal de la Contraloría General de
Drogas de la India.
El control de calidad, control de calidad y la mejora continua de la calidad son conceptos complementarios, pero claramente
diferentes
341
medicina transfusional Manual técnico
CONTROL DE CALIDAD
• Los reactivos deben ser probados para determinar si han mantenido su especificidad y sensibilidad.
SEGURO DE CALIDAD
• aseguramiento de la calidad es el término utilizado para todas las medidas de reclutamiento de donantes a la transfusión de
sangre o productos sanguíneos, para asegurar que los productos son de la calidad requerida para el uso previsto, y que los
resultados de laboratorio son fiables. Esto asegura que el paciente recibe una, ventaja positiva definida a partir de un producto en
particular, que los donantes, los pacientes y el personal no se vean perjudicados. Algunas actividades son totalmente bajo el
control de los servicios de transfusión de sangre, mientras que otros (por ejemplo, muestra de sangre recogida y administración de
sangre) pueden estar fuera de su control inmediato, aunque incluso éstos deben cumplir los requisitos establecidos por el servicio
de transfusión.
• La garantía de calidad implica definir, controlar y documentar todos los aspectos de un proceso o procedimiento de tal manera
que el cumplimiento de las normas determinadas se puede predecir. Así, el control de calidad es la parte integral de
aseguramiento de la calidad.
Dependiendo del nivel de operación, una sección con responsabilidad específica para el control de calidad bajo un alto nivel
técnico entrenado puede ser creado.
Las principales áreas que requieren atención en el programa de garantía de calidad incluyen:
• Local
• Personal
• Las especificaciones y el control de calidad de
Local
• El diseño y construcción de instalaciones de transfusión de sangre son aspectos importantes de buenas prácticas de
fabricación.
• Debe haber un espacio adecuado para el trabajo y el movimiento del personal, el hacinamiento debe ser evitado.
• Muebles, accesorios y material del suelo deben ser cuidadosamente seleccionados para que pueda ser limpiado, y conveniente
para trabajar.
• La iluminación debe ser adecuada en todo el recinto, y la iluminación adecuada puede ser necesario en la habitación y las zonas
donde las pruebas se llevan a cabo sangrado.
• Se debe prestar atención para una ventilación adecuada.
• energía y agua suministros adecuados, las instalaciones de residuos adhesión desechable y estricta a las normas de
saneamiento son esenciales.
• Local debe ser climatizado, si no es posible, al menos habitación sangrado, laboratorios, y el componente
sala de preparación debe ser aire acondicionado.
• Provisión de generador para suministro continuo de energía es esencial.
personal de ese centro debe ser suficiente personal con cualificación adecuada educación, capacitación y experiencia para asegurar un
rendimiento competente de las funciones asignadas aplicables a todas las categorías del personal que trabaja en el departamento de los
servicios de transfusión de sangre incluyendo laboratorios, los trabajadores sociales.
descripción del trabajo debe existir para todo el personal involucrado en el servicio de transfusión de sangre que incluye centro de donación.
El personal del personal deben ser amables, interesado, alegre y amable, así como profesional y eficiente.
personas técnicas
• Las personas técnicas deben tener título de estudios básico en la tecnología de laboratorio médico junto con la
experiencia de trabajar en el servicio de transfusión sanguínea.
• Se les debe dar la formación interna para los procedimientos de laboratorio, una vez que son contratados.
• La competencia del personal a continuar cumpliendo con sus funciones de trabajo asignados deben ser evaluados y
registrados periódicamente.
• No es aconsejable disponer de programa de educación médica continua (CME) para actualizar los conocimientos en las
técnicas recientes.
• El personal de supervisión deben revisar periódicamente los resultados y evaluaciones, para asegurar que todas las personas que
se adhieren a los estándares de prueba. Las acciones correctivas se deben tomar, si es necesario.
Los organizadores de donantes de sangre, que pueden ser trabajadores sociales, deben tener toda la información sobre la donación voluntaria de
sangre, necesidad de sangre y productos sanguíneos, y los avances científicos y técnicos en la sangre
343
medicina transfusional Manual técnico
bancario. No debe haber reuniones para los trabajadores sociales y los donantes organizadores a la que pueden expresar e intercambiar
opiniones acerca de su trabajo.
Los organizadores de los donantes deben ser corteses, interesado, alegre y amable, así como profesional y eficiente,
Asegura que los técnicos hagan procedimientos de acuerdo con los procedimientos operativos estándar y control de calidad se
mantiene.
Representantes del Estado / central Drugs Controller
Asegura que el servicio de transfusión sanguínea sigue la regla y regultions establecidas en la parte B del XII Drogas y Cosméticos
Hechos y Reglas notificado por el Controlador General de Drogas (India).
Comité de Transfusión del Hospital
comité de transfusión hospitalario evalúa la adecuación del servicio de transfusión de sangre, así como el rendimiento de los
clínicos en el uso de la sangre y sus componentes de manera apropiada. Cuenta con representantes de las disciplinas que son
usuarios máximos de la sangre, superintendente médico como presidente, a cargo del servicio de transfusión sanguínea como
miembro - secretaria, y el superintendente de enfermería.
Se calcula dividiendo unidades de cruce-emparejado por el número de unidades transfundidas. Si es más, es un indicador
de que el exceso de unidades se les pide que 'en espera'.
Todos los servicios de transfusión de sangre debe tener sus propios procedimientos operativos estándar (SOP) manual. Se debe tener
instrucciones en detalle acerca de las técnicas, procedimientos y otras actividades en el laboratorio del banco de sangre para mantener
normas uniformes de procedimientos y control de calidad. Cada actividad debe llevarse a cabo de acuerdo con las instrucciones
claramente escrito en los SOP. Los procedimientos operativos estándar deben revisarse tan a menudo como sea necesario; y la fecha de
revisión se graba con claridad. procedimientos operativos obsoletos deben ser retirados de la circulación. SOP debe estar disponible en
cada área de trabajo.
• El procedimiento de notificación de los resultados, y las medidas que deben tomarse si se produce un problema.
• El entrenamiento de los requisitos para el personal para llevar a cabo los procedimientos.
Ventajas de SOP.
• Eso asegura que los estándares especificados se cumplen de manera uniforme y en todo momento.
• Ayuda a normalizar y controlar el rendimiento de todos los miembros del personal, en especial el
personal técnico.
• Esto ayuda en la formación del personal sobre todo los recién nombrados.
Generales
• Los reactivos deben ser de alta calidad y tienen un -la vida útil de por lo menos un año para su uso.
• Todos los antisueros debe cumplir con las normas establecidas para la potencia (título y avidez) y especificidad.
• Todos los reactivos antiglobulina humana (AHG) determinación del grupo sanguíneo y deben contener un conservante para
• Ellos deben mantenerse en los refrigeradores a 2 ° C-6 ° C, sin embargo, no se recomienda la congelación. Las instrucciones del
• Todos los reactivos deben estar claramente etiquetados con el número de lote, fecha de caducidad y la temperatura de
345
medicina transfusional Manual técnico
• Todos los reactivos deben ser utilizados de acuerdo a las instrucciones del fabricante. Ellos deben ser re-estandarizados si
son para ser utilizado por técnicas alternativas, o en una forma diluida (por ejemplo ABO y Rh en el sistema de microplacas
o automático)
• Nuevos reactivos no deben ser introducidos en el trabajo rutinario hasta que las evaluaciones serológicas internos han
confirmado que los nuevos reactivos son satisfactorios.
• Policlonales (suero humano) los reactivos deben llevar una declaración diciendo que las donaciones individuales que se utilizan
para preparar el producto han sido probados y encontrados negativos para VIH
anticuerpo, HBsAg y el anticuerpo HCV. Sin embargo, dado que no existe ninguna prueba ofrece la completa seguridad de que
los productos derivados de la sangre humana no transmitan infecciones, debe ser manejado con cuidado.
REACTIVOS
Normalización de los reactivos de grupos sanguíneos se lleva a cabo por los fabricantes y que debe cumplir con los requisitos establecidos.
El control de calidad en el laboratorio el usuario debe realizar para comprobar los lotes nuevos para asegurar que cumplen con todas las
normas biológicas.
Casi todos los laboratorios utilizan reactivos de células rojas, ABO y Rh sueros, globulina anti-humana (AHG), una o más
proteasas, albúmina de suero bovino (BS A), solución salina isotónica y soluciones de sal de baja fuerza iónica (LISS). Su control de
calidad es muy esencial.
Si las células rojas reactivas están ligeramente hemolizados, las células se pueden lavar una vez con solución salina. Si el sobrenadante se vuelve
transparente después de un lavado, y que son reactivos, las células son aceptables para su uso. Hemolizadas y se descartan los glóbulos rojos
descoloridos.
Los principales criterios para la calidad de reactivos de anticuerpos ABO están probando para la especificidad, y la potencia (avidez, y
título). No debería haber ninguna reacción con control negativo, no reactiva cruz y no hay rouleaux o prozona fenómenos.
Tabla 22.2 Control de calidad de reactivo ABO (anti-A, anti-B y anti-AB) Parámetro REQUISITOS
Avidez aglutinación macroscópica con 50% de células rojas Diaria y cada nuevo lote
suspensión en suero homólogo de solución salina / normal
utilizando la prueba de cremallera; 10 segundos para anti-A,
anti-B y anti-AB con A 1 y / o células B a TA; 20 segundos con
A 2 y A 2 células B.
347
medicina transfusional Manual técnico
O - - -
UNA 1 - - -
monoclonal segundo 1: 256 3-4sec ++++
UNA 1 segundo 1: 128 5-6sec ++ + A +++
O - - -
UNA 1 - - -
Anti-AB policlonal UNA 1: 256 10-12sec +++
segundo 1: 256 10-12sec +++
UNA 2
1:64 15-18sec + + A +++
O
monoclonal UNA 1 1: 256 3-4sec ++++
segundo 1: 256 3-4sec
UNA 1 1: 128 5-6sec +++
O - - -
Control de calidad de Anti-D sueros
Rh (D) es más inmunogénica y tiene una distribución de frecuencia más alta entre todos los cinco variedades de Rh. Control de
calidad de regentes anti-Rh (D) son más complejos que los reactivos ABO debido a la gran variedad de reactivos, métodos de uso y
el procedimiento de control necesario. El control de calidad de los principales tipos de reactivos anti -D se dan en la tabla 22-4 y 5.
especificidad reacción clara con R1, células r Cada día y cada nuevo lote. y ninguna
reacción con ESO Células:
Avidez aglutinación visible con 40% de células rojas Cada día y cada nuevo lote
suspensión en suero ogous homol- usando la
prueba de diapositivas.
Potencia suero sin diluir dar +++ reacciones en la prueba designada Cada nuevo lote
para cada suero y un título de 32-64 para el anti-D, anti-C
contra -E, anti-CD anti-DE usando, R, R, R, glóbulos rojos
R.
348
Aseguramiento de la Calidad en la transfusión sanguínea
Mezcla de Lo mismo que arriba Lo mismo Lo mismo que arriba Lo mismo que arriba +++
monoclonal IgM que arriba
policlonal + (humano)
IgG.
1. Use dos reactivo distinto anti-Rh (D) de dos fabricantes diferentes o utilizar dos distintos
anti-Rh (D) reactivos de dos lotes diferentes de un mismo fabricante.
2. Incorporar Rh- positivo (grupo OR 1 r) y negativo Rh- ( ESO) las células de control con ensayo.
3. Cada muestra de prueba debe dar una prueba negativa 'auto' (las propias células y el suero propio). controles de automóviles
son necesarias para minimizar los resultados positivos falsos debido a la auto-aglutinación o la presencia de células
sensibilizadas in vivo ..
Poliespecíficos reactivos antiglobulina humana tienen anti-complemento C3b y C3d, así como anti- acitvity IgG.
• Cada vial de un nuevo lote se prueba por su especificidad y sensibilidad con IgG (anti-D) recubiertos o 1 r células rojas como
control positivo y no sensibilizados OR 1 células R como control negativo.
• Para Acitivity complemento, comprobar con glóbulos rojos recubiertos con C3b, C3d o células rojas sensitizied con la unión del
complemento (anti -Le una).
• La potencia de anti-IgG de AHG reactivos pueden ser estimados mediante valoración usando IgG (anti-D) sensibilizada OR 1 células
r.
349
medicina transfusional Manual técnico
Tabla 22.6 aceptable calidad de reactivo anti-globulina: Parámetro
• La aglutinación de los glóbulos rojos recubiertos con C3b Cada nuevo lote.
y C3d, y no débil aglutinación / con células rojas C4
recubiertos.
350
Aseguramiento de la Calidad en la transfusión sanguínea
La técnica de una etapa, en el que la enzima, anticuerpo y las células rojas son todos mezclados es satisfactoria
pero no tan sensible como la técnica de 2 etapas.
2. 1-7% de albúmina como estabilizador en los demás reactivos especialmente aquellos que deben almacenarse a 4 ° C.
Pureza > 98% de albúmina, como determied por Cada nuevo lote
electroforesis.
Reactividad La ausencia de aglutinación de los glóbulos rojos sensibilizados; Cada nuevo lote
Potencia IgG anti-D debe dar un título de 32-64 con glóbulos Cada mes
rojos R 1 r
Para la preparación y control de calidad de la lista véase el capítulo sobre métodos especiales.
351
Manual técnico Transfusion Medicine Manual
• Técnica de flebotomía
• Temperatura de almacenamiento
• Control de calidad de volumen de sangre entera: se pesan al menos 1% de las donaciones y calcular el volumen de la fórmula dada a
continuación:
Vol (ml) = Wt. de la bolsa de sangre + (g) - peso de la bolsa de vacío (g)
1.05
• Actualmente variando cantidad de sangre se recoge 350/450 ml en varios centros. Centros de preparación de componentes de la
sangre toman 450 ml de sangre.
• La mayoría de centros utilizan equipos para sacudir automático y un peso de la sangre recogida.
Tabla 22-12: Control de calidad de los glóbulos rojos concentrado (preparado a partir de sangre 450 ml) Parámetro
352
Aseguramiento de la Calidad en la transfusión sanguínea
Tabla 22-13: Control de calidad de los glóbulos rojos en sol conservante. (Adsol / SAGM)
Leucocitos glóbulos rojos pobres tengan al menos 70% de las células blancas retiradas al tiempo que conserva al menos el 70% de células de sangre rojas.
leucocitos pobres Los glóbulos blancos eliminan 99% eliminado 4 unidades al mes
En unidad de inspección visual que no tiene una coloración rosa o rojo se puede suponer que para contener glóbulos rojos insuficiente para
causar immuniztion.
353
medicina transfusional Manual técnico
Volumen 200-300 ml
pH > 6.0
unidades 75% muestreados y probados deben tener los valores indicados anteriormente.
Volumen 200-220 ml
354
Aseguramiento de la Calidad en la transfusión sanguínea
Cantidad requisito
Volumen 200-250 ml
granulocitos 0,5-1 x 10 9
Selección y Evaluación
1. Todos los equipos utilizados en el banco de sangre debe cumplir con los estándares técnicos, eléctricos y de seguridad obligatorias.
2. Preferiblemente equipo se debe comprar para los que la experiencia para el mantenimiento y la reparación está disponible localmente
con el fabricante / proveedor.
3. La instalación debe ser formalizada con la asistencia del personal de la instalación comercial en conjunto con los
departamentos de ingeniería hospitalaria, para garantizar el cumplimiento eléctrica
estándares de seguridad.
4. Una vez que el equipo ha sido instalado y calibrado de acuerdo con las especificaciones del proveedor, se debe confirmar
que su desempeño cumple con los estándares requeridos. Se puede entonces ser introducido en el trabajo de rutina.
5. Cada equipo debe ser revisado y evaluado para su buen funcionamiento después de la reparación y su registro debe ser
mantenido.
3. El personal del laboratorio debe hacer la limpieza del equipo, y la verificación periódica de la velocidad por el tacómetro y la
temperatura de termómetro.
almacenamiento de la sangre:
• Leer gráfico de registro de temperatura y de temperatura digital con frecuencia, al menos una vez al día, el rango de temperatura
apropiado está entre 2-6 ° C.
355
medicina transfusional Manual técnico
• El mecanismo de las agujas del reloj conduce el registrador de temperatura debe de heridas regularmente y el gráfico se cambian
semanalmente.
• periódicamente, temperatura dentro del gabinete debe ser contador verificado con la ayuda de
termómetro de precisión.
• Sistema de alarma se debe a pilas e independiente del suministro eléctrico principal. El sistema de alarma deberá ser ajustada
de una manera tal como para hacer el sonido cuando la temperatura es fuera del lado de la gama requerida de 2 0- 6 0 C. El
sistema se debe comprobar una vez a la semana por inmersión del sensor en agua con hielo (para baja temperatura) y en
agua a 15 ° -20 ° C (para una temperatura más alta).
Si el sistema de alarma no está funcionando adecuadamente medidas correctoras deben
ser tomado.
congeladores:
• Control de calidad de los congeladores es similar al refrigerador para bancos de sangre. Compruebe el temperaturechart y digital de la temperatura
• Periódicamente comprobar la temperatura del sistema digital por termómetro de precisión mantenido dentro del gabinete
periódicamente.
• Si no existe un sistema de descongelación automática debe ser descongelada cada vez que sea necesario.
Centrífuga refrigerada:
• Esto debe ser revisado por el ingeniero de servicio, cada 3-4 meses.
• Precisión de la velocidad y el tiempo se debe comprobar con el metro de precisión rpm (tacómetro) y cronómetro.
• La temperatura dentro del taza de la centrifugadora debe ser registrada por un probador de temperatura con la tapa cerrada y el
diseño de rotor.
• Esto se debe comprobar cada 3-4 meses para la exactitud de la velocidad y el tiempo con el medidor de precisión
Microscopio:
• Mantenga el microscopio cubierto no cuando está en uso
• Mantenga limpia etapa, condensador limpio, lentes, lentes con papel humedecido con frecuencia y
• lavador de células automático es centrífuga programada para agregar solución salina automáticamente a tubos de ensayo, a continuación,
centrifúguelas y decantar la solución salina. Ellos se pueden configurar para realizar esta función 1-4 veces.
356
Aseguramiento de la Calidad en la transfusión sanguínea
• La lavadora de células se debe comprobar periódicamente para determinar si los tubos reciben
correctamente llena con solución salina, se vació y se realiza el botón adecuado de las células.
• Un estrechamiento en la tubería de entrada de solución salina, el bloqueo del puerto de solución salina debido a los cristales de sal o puerto salina doblada o
• Realizar titulación duplicado de las normas de los antisueros, por ejemplo, Anti-D (IgM + IgG)
• contra las células positivas D en solución salina. Lavar un conjunto de título con lavador de células y otro conjunto de forma manual, prueba ambos establecidos
• El objetivo del control de calidad de las técnicas es garantizar un alto nivel de rendimiento de las técnicas más
comúnmente utilizadas, tales como ABO y la tipificación Rh, prueba globulina humana anti-, detección e identificación de
anticuerpos irregulares de clínica
importancia y prueba de compatibilidad.
• Técnicas que han sido validados para la exactitud, fiabilidad y sensibilidad están sujetas
al monitoreo de la calidad mediante el uso de controles positivos, negativos y automático.
• células demasiado fuertes o demasiado débiles suspensión, hemólisis leerse como un resultado negativo
• Análisis microbiológico HBsAg, anticuerpos contra el VIH y el VHC debe realizarse en una habitación separada.
• Para la desinfección de la solución de hipoclorito% viral y bacteriana contaminación 1 es el desinfectante de elección para uso en
banco de sangre. Todos los tubos y portaobjetos de vidrio utilizadas deben ser desinfectados en solución hyprochlorite antes del
lavado, y tubos de plástico deben ser sumergidos en hyprochlorite antes de su eliminación, el tiempo de mantener
el material infectado en hyprochlorite
solución debe tener al menos 30 minutos.
• Para la desinfección derrame de sangre y equipos muy sucia, solución hyprochlorite de 10 veces de la fuerza (1%) debe
ser utilizado.
• El material infectado debe ser descontaminado en autoclave, antes de su eliminación o incinerados.
• Cualquier interrupción en el corte Tike piel, herida por punción o erupción cutánea debe mantenerse cubierto de agua a prueba de vestidor.
357
Manual Técnico Transfusion Medicine
• capas protectoras deben ser usados en el laboratorio y se deben retirar antes de salir del laboratorio
banco de sangre y servicios de transfusión de sangre deben tener un manual de sistema de archivo, informatizado o una combinación de
ambos. Los registros deben ser indeleble, legible mano oa máquina o pueden ser retenidos por vía electrónica, proporcionar que puedan ser
recuperados fácilmente para referencia de revisión y existe un respaldo adecuado en caso de fallo del sistema. Los registros deben ser
almacenados de manera que los protege de los daños y de la destrucción o modificación accidental o no-autorizado. Los registros deben
mantenerse durante 5 años según lo dispuesto en medicamentos y cosméticos Hechos y reglas.
Un banco de sangre debe ser capaz de trazar una unidad de sangre / componente de la colección / preparación para desechable final en una manera oportuna.
documentación eficiente requiere un diseño apropiado de las formas, etiquetas y registros para cada actividad
de banco de sangre. Registro debe ser legibles y la corrección debe ser rubricado.
• Historial de enfermedad
• número donación
• ABO y Rh (D) grupo
• Fecha de preparación
358
Garantía de Calidad de Transfusión de Sangre
• ABO y Rh (D)
• Número de donación, ABO y Rh (D)
• Fecha de la Colección y fecha de caducidad
• Nombre de Componentes
• Cruz-igualada por
• Publicado por y hora de emisión
• Malaria
359
medicina transfusional Manual técnico
Para más detalles de documentación y registro véase el capítulo sobre Seguridad de la sangre y federales Regularidad
360
sistema HLA
Laboratorio
técnicas
El Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC) existe en casi todas las especies de animales y en el hombre está representado por
el sistema HLA. La letra H en HLA designa humana y L designa leucocitos, ya que éstos eran las primeras células que se muestran
para llevar a los antígenos de este complejo. La letra A fue originalmente una designación locus. Sin embargo, con el descubrimiento
de varios más loci HLA, es
ahora toma para representar un antígeno. sistema HLA es el determinante genético más importante de la aceptación o el rechazo del injerto
entre genéticamente distintas los individuos y por lo que sus productos son conocidos como
las principales moléculas de histocompatibilidad en contraste a otros loci genéticos, los cuales ejercen solamente relativamente
efectos menores sobre histocompatibilidad. Así individuos que expresan los mismos moléculas MHC
aceptar injertos de tejido entre sí, mientras que los que difieren en sus loci MHC rechazar tales injertos.
Las moléculas de HLA están codificados por un grupo de genes en una pequeña región de aproximadamente 2cm (centimorgan)
de longitud, en el brazo corto (p21.3) del cromosoma 6. La región tramos
aproximadamente 4 megabases o 4x10 6 nucleótidos y contiene numerosos genes, sólo algunos de los cuales se ocupan de
Histocompatibilidad. La principal biológica funcion de los genes HLA
se refiere a la presentación de extranjero (o auto) antígenos al sistema inmune. Por lo tanto moléculas de HLA actúan como
'receptores' que los fragmentos de péptidos de captura de antígeno que se muestran (o presentan) el
la superficie de la célula donde pueden ser reconocidos por las células T apropiadas. En la presentación de antígenos extraños
361
medicina transfusional Manual técnico
a las células T, moléculas de HLA evocan CTL (linfocitos T citotóxicos) y células T helper respuestas,
El sistema HLA contiene cerca de 240 genes potenciales dispuestos tan estrechamente entre sí ese
por lo general se heredan juntos. Un conjunto de antígenos en el mismo cromosoma heredado en bloque de cada padre
se llama un haplotipo. Casi el 40% del total de genes de HLA tienen inmune relacionada
funciones. Hay 6 importante loci HLA codificada en el MHC humano (Fig. 23.1). Estos genes codifican los productos
estructuralmente homólogas, que se clasifican en HLA de clase I y moléculas de clase II sobre la base de su estructura,
distribución en los tejidos, fuente de antígeno péptido y la función
de la respuesta de células T.
Las moléculas de HLA de clase I están codificadas por tres loci genético distinto, conocido como HLA-A, B y C, agrupadas en la
región de clase I del MHC y que abarca aproximadamente 2 megabases. Las moléculas de la clase II incluyen HLA-DR, DQ y DP, cada uno
de los cuales está codificado por los loci genéticos distintos agrupado en la región de clase II que abarca aproximadamente 1 megabase.
Cada uno de los 6 loci ligados codifica un producto HLA distinto expresado en la superficie de las células presentadoras de antígeno. La
parte del MHC entre la clase I y clase II regiones se refiere como la región de clase III o central.
La Fig 23.1 El complejo mayor de histocompatibilidad: El complejo mayor de histocompatibilidad humano (MHC) en el
brazo corto del cromosoma 6. El HLA de clase I, clase II y Clase III regiones se muestran que abarca una región 4000 Kb.
transportador TAP de péptidos antigenec; 21- OHOSteroid enzima de 21-hidroxilasa; C4 A & B-complemento loci C4; factor
de Bf-properdina B la patheway complemento alternativo; C2- componente del complemento C2; TNF-factor de necrosis
tumoral, clase MICA-MHC I gen de la cadena relacionados; gen haemachromatosis HFE. La clásica loci HLA) A, B, C, DR,
DQ, DP) se muestran en barras sólidas
Una característica única de el sistema HLA estrechamente relacionada con su importancia biológica es su ,
polimorfismo extraordinario. En efecto, no hay otra loci sabe que tienen grado similar de
polimorfismo, lo que significa ese excepcional enterrar- variabilidad individual es encontrado en las secuencias de ADN
Todos regiones el MHC se sabe que son altamente polimórficos, constituyendo varias cercanamente
vinculado loci cada uno con un gran número de genes que puede ser aún más dividido en muchos tipos alélicas
que difieren en sus secuencias de nucleótidos. La figura 23.2 muestra el número de alelos en los últimos años
362
definido por separado por medio de técnicas basadas serológicas y de ADN en el HLA de clase I (A, B, C loci) y II (DR, DQ, DP loci)
regiones clase. En julio de 2001, más de un total de 1340 alelos se han conocido a nivel del ADN (IMGT / base de datos de HLA)
(Robinson et al, 2000).
Eso es evidente ese la determinación del polimorfismo depende fuertemente de la metodología
empleado para el estudio. Por lo tanto polimorfismo detectado por molecular tecnologías es mucho más grande
Tabla 23.1. Polimorfismo en HLA. Número de alelos definidos por métodos basados serológicas y de ADN.
UNA segundo do DR DQ DP
No. de alelos
Serología 23 47 8 14 9 6
Teóricamente varios millones de combinaciones fenotípicas (Aproximadamente 150 mil millones o incluso
más) son posibles en el sistema HLA. Un estudio detallado de diferentes grupos de población revela que el grado de polimorfismo
en el sistema HLA puede no ser tan extensa como se indica ya que ciertos alelos están asociados entre sí con más frecuencia de lo
esperado sobre la base de sus frecuencias de los genes individuales. Esta asociación no aleatoria de los alelos de loci HLA dos se
encuentran juntos en el mismo haplotipo HLA es desequilibrio termed''Linkage' y se expresa en términos de delta.
Eso se conoce a variar entre las diferentes poblaciones. Cada individuo hereda dos
antígenos de cada loci -A, -B, -C y DR, uno de cualquiera de los padres. Un conjunto de antígenos en el mismo cromosoma heredado
en bloque de un padre se llama un haplotipo. Los dos haplotipos HLA en
un individuo formar el genotipo, mientras que el perfil total de antígeno HLA constituye el fenotipo.
363
medicina transfusional Manual técnico
De acuerdo con el patrón mendeliano de segregación al azar, un niño en la familia tiene una probabilidad del 25% de ser HLA idéntico con
uno de sus hermanos, 50% de probabilidad de ser HLA haplo-idénticas (compartiendo un único haplotipo parental) y 25% de probabilidad
ser HLA no idéntico, es decir, una falta de coincidencia total. Ya que
padres y descendencia comparten 50% de los genes, el partido HLA en esta categoría de trasplantes es un 'partido de un haplotipo', es decir, el
3. NOMENCLATURA
Los antígenos HLA se designan numéricamente por separado para cada locus. Individual loci se dan
nombres descriptivos en letras romanas, por ejemplo, HLA-A26, HLA-B8, HLA-DR3, etc. A 'prefijo W en el número
indica una especificidad taller, que, aunque reconocido serológicamente, no tiene todavía
alcanzado la definición óptima, por ejemplo, HLA-BW22 o DRw6. Con la introducción de procedimientos de biología molecular,
las secuencias de nucleótidos y aminoácidos de casi todos los alelos en el HLA
sistema han dado a conocer. Por lo tanto, una nomenclatura revisado que se ha introducido entra
alelos de la cuenta (y sus divisiones) definidos en cada uno de los alfa o beta cadenas de loci individuales. Por ejemplo, el DR4
original se ha dividido en al menos 22 subtipos. Éstas se designan como símbolo locus (por ejemplo, DRB1) seguido por (*) y luego el
número de alelos. En consecuencia, los nuevos alelos DR4
y sus subtipos están diseñados como DRB1 *, 040l. * 0402, * 0403, etc., indicando varios molecular
subtipos. Igualmente, los 14 subtipos conocidos de HLA-B27 se designan como B * 2701, B * 2702,
B * 2703, etc. Un ejemplo de la nueva nomenclatura de una alelo DR4 se muestra a continuación.
HLA-DRBI * 04 02
Subtipo de un alelo
nombre del locus
familia alélica
las pruebas de HLA se lleva a cabo en pacientes que requieren trasplante de órganos y de médula ósea con el fin de encontrar un donante
compatible adecuado de entre los miembros de la familia o el grupo de donantes no relacionados. coincidente de los donantes es esencial para el
trasplante para evitar el riesgo de enfermedad injerto contra huésped (GVHD) y el injerto
se ha utilizado con fines de diagnóstico y / o el pronóstico. El ejemplo más común en esta área es la prueba de HLA-B27 de la
espondilitis anquilosante y espondiloartropatías relacionados. pruebas de HLA precisa es también esencial
para el componente de la sangre terapia, antropológicos estudios la participación de diferentes
grupos raciales y para una variedad de aplicaciones de investigación, incluyendo el desarrollo de vacunas basadas MHC.
(H) Sangre periférica: Para las pruebas de serología en los linfocitos viables o para la extracción de ADN para las pruebas basadas en PCR. 364
SISTEMA HLA - Técnicas de Laboratorio
segundo)Los ganglios linfáticos / Bazo: Para las pruebas de serología en los linfocitos extraídos (requerido para la tipificación del donante cadáver) o para la extracción
do) Suero / plasma: Para la detección de moléculas de HLA solubles y prueba para anticuerpos anti HLA
re) Tissue: Necesario para la extracción de ADN para las pruebas basadas en PCR.
En función de las necesidades y requerimientos, siguientes metodologías pueden ser seguidos para la prueba
polimorfismo del HLA -A, -B, -C (clase I), DR, DQ y -DP (II clase) loci.
ii) Celular: cultivo mixto de linfocitos (MLC), las pruebas de linfocitos Primed (PLT).
iv) Los métodos moleculares: Varias técnicas se han hecho disponibles, de los cuales más de una
técnica es esencial para la prueba de HLA óptima. RFLP, PCR-SSP, PCR-SSOP, PCR-SSCP, ARMS PCR, RBH /
RLS.
Serología se basa en la expresión e identificación de diferentes motivos de la molécula de HLA en la superficie celular. Por
otra parte, las metodologías basadas en PCR dependen de la calidad del ADN extraído y se basan en la identificación de
diferencias de nucleótidos entre alelos HLA en varios niveles de resolución (bajo / intermedio / alto) (Figura 23.3).
La utilidad de los ensayos serológicos convencionales para la tipificación de HLA ha estado limitada por la no disponibilidad de alelo
fiable sueros específicos. En efecto, a menudo es difícil obtener sueros que reaccionan
exclusivamente con el producto de un alelo de un locus. Aunque la tecnología de hibridomas ha ayudado a superar el problema en cierta
medida, un conjunto completo de anticuerpos monoclonales para la detección de los serotipos regulares todavía falta. La razón principal de esto
es el hecho de que la mayoría de estos anticuerpos se producen en el sistema de ratón y por lo tanto no son idénticos a los aloanticuerpos
humanos. También,
Fig 233. Principio de la prueba de HLA serológico y molecular.: Serología se basa en la identificación de diferencias
expresadas en la superficie celular, mientras que los métodos basados en ADN identificar las diferencias en el nivel de
365
medicina transfusional Manual técnico
serología convencional está diseñado para identificar amplias familias alélicas (por ejemplo HLA-A2, B40). Sin embargo monoclonal
anticuerpos menudo reconocen determinantes estrechas y por lo tanto muchas de-
ellos no son aplicables para el sistema de examen de serología. Figura 23.3 listas varias otras limitaciones de la serología ya que la
prueba depende principalmente de la expresión de moléculas HLA en la superficie celular, los requisitos de las células viables y de
complemento. Molecular de técnicas, por otro lado, son
más preciso, diferencias fiables y detectar incluso a diferencia de un solo nucleótido. Estos son
por lo tanto, más adecuado para la definición de varias veces más número de alelos que serología
4.1.1 Serología
El método convencional para la clase de las pruebas de HLA I y clase II alelos es la de microlinfocitotoxicidad dependiente del
complemento prueba (Terasaki y McClelland, 1964), mono implican o
sueros oligospecific. Esta es una prueba de dos etapas que implica la reacción antígeno-anticuerpo en el inmune
superficie celular (primera etapa), seguido de la lisis mediada por el complemento de las células (segundo paso). Eso es
realizado sobre una bandeja de microensayo con 60 ó 72 pocillos que contiene un ml de capa preliminar antisuero específico de alelo que define
una especificidad HLA particular (figura 23.4). Generalmente, periférico sangre
linfocitos o preparaciones de células T purificadas se utilizan para HLA-ABC escribir, mientras que para las pruebas de clase II de los
antígenos HLA-DR y DQ, las preparaciones de linfocitos B de lana de nylon separados se
empleada. Aproximadamente 2000 linfocitos se añaden en cada pocillo y la bandeja incubaron a temperatura ambiente durante media hora. Esto es
seguido por una etapa de incubación adicional de una hora utilizando complemento de conejo. La prueba se termina mediante la tinción de las
células muertas con colorante azul o eosina Y tripano y se fijan con formaldehído. Para la tipificación de clase II, se utilizan periodos de incubación
dobles.
individuales. Dos antígenos, con las mismas secuencias de aminoácidos en posiciones críticas para el plegamiento de proteínas tendrán la misma
La Fig 23.4. Principio de la prueba microlinfocitoxicidad. Las células muertas son vistos bajo el microscopio de
contraste de fase, como las células teñidas más grandes y oscuras, mientras que las células vivas aparecen como
366
SISTEMA HLA - Técnicas de Laboratorio
ser identificados por el mismo anticuerpo, un fenómeno llamado " reactividad cruzada'. Los alelos con diferentes secuencias de nucleótidos pero
con la misma estructura conformacional de la proteína expresada no puede ser
distinguido por serología. Por lo tanto la identificación de nuevos alelos es difícil por técnicas serológicas.
resultados de HLA de clase I por la serología son bastante fiables para todas las especificidades amplios pero a menudo es difícil
para asignar correctamente las especificidades de clase II por serología. De hecho, sólo la diversidad limitada en el
HLA-DR, DQ y DP loci puede ser satisfactoriamente discriminado por este método. Dado que la técnica depende de la clara
diferenciación entre células vivas y muertas, Tiene varias limitaciones debido
de escasa viabilidad de las células B, los defectos de procesamiento, el fondo de células T, la expresión de la superficie celular variables de las moléculas de HLA y
el fracaso de las reacciones mediados por complemento. Aunque la técnica está perdiendo rápidamente su fiabilidad como un método para generar un resultado de
ii) HLA-DR / DQ fenotipificación: serológica tipificación de HLA de clase II (DR y DQ) alelos es
generalmente realizada en lana de nylon linfocitos separados B por métodos y propósitos
descrito arriba. Una vez que el HLA de clase I y antígenos de todos los miembros de la familia II han sido definidos mediante
serología, los cuatro haplotipos HLA parentales pueden ser deducidas y se analizaron
para HLA coincidente genotipo para el trasplante de órganos y médula ósea.
367
medicina transfusional Manual técnico
La citometría de flujo prueba cruzada es a menudo deseable en situaciones que implica segundo injertos
y en los receptores con antecedentes de pre-sensibilización debido a otros factores tales como múltiples transfusiones de sangre y los
embarazos. La prueba utiliza los donantes linfocitos y destinatario sueros utilizando una
fluorocromo segundo anticuerpo marcado con el fin detectar anticuerpos IgG donante-específicos contra T
y / o células B en un citómetro de flujo. El FCXM es 10-100 veces más sensible que la prueba de compatibilidad cruzada serológica
convencional. También eso identifica tanto celular, así como tipo específico (IgM o
IgG) anticuerpos de litros incluso bajas.
La técnica serológica también se utiliza para detectar anticuerpos dirigidos al tipo de HLA específico mediante el ensayo el suero del
paciente (del destinatario) con un panel de células de donantes de tipos de HLA conocidos. Esto ayuda a evitar selectivamente injertos
positivos para HLA alelos a los que el receptor puede haber sido sensibilizado previamente. Esta
prueba que se llama el ' Panel Reactivo Anticuerpo (ARP) screening' para
HLA Clase I y / o anticuerpos de clase II, utilizando un panel de células seleccionadas al azar. Se trata esencialmente de un dependiente del complemento
ensayo de linfocitotoxicidad, aunque PRA basado flujo puede también ser empleado
para lograr una mayor sensibilidad.
Como alelos HLA se definen por sus secuencias de nucleótidos, una metodología de tipificación detectar directamente
variaciones en la secuencia / polimórficas motivos de secuencia definiría el HLA codificada moléculas mejor
que el serológica técnicas. Las metodologías basadas en ADN requieren
amplificación de ADN mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) un proceso descubierto originalmente
368
SISTEMA HLA - Técnicas de Laboratorio
Ries y permite una mejor resolución de fenotipos HLA. Estos métodos se basan en la discriminación de diferencias específicas de
secuencias de nucleótidos entre los alelos. A diferencia de al rápido desa-
rrollo de clase II estrategias de tipificación de HLA, la tipificación de ADN para los alelos HLA de clase I ha sido lento debido a la
complejidad de polimorfismo en la región de clase I, y alto grado de homología y el intercambio de motivos de secuencia entre loci. Una
variedad de técnicas basadas en PCR se utilizan dependiendo de la resolución de la prueba deseada y el número de muestras a ensayar.
Las técnicas derivan sus nombres por el uso de reactivos empleados, con PCR como el de prefijo.
4.4.1 RFLP: los fragmentos de restricción polimorfismo de la longitud (RFLP) o hibridación de transferencia de Southern
fue la primera tecnología basada en ADN empleado para la tipificación de HLA a principios de los 80. Se proporciona un nuevo enfoque
para el estudio de clase II HLA polimorfismos estructurales previamente no reconocidos por serología. Brevemente, los fragmentos de
ADN de diferentes longitudes generados por digestión con endonucleasas de restricción específicas están separados por electroforesis
en gel y luego se hibridan utilizando secuencias de ADN de radio etiquetado como sondas. Aunque RFLP proporciona un medio para
estudiar tanto la codificación, así como regiones no codificantes del complejo HLA ya sea en intrones o en regiones que flanquean,
4.4.2 PCR-SSCP o RSCA: La técnica implica la reacción en cadena de la polimerasa o basadas sola
conformacional strand polimorfismo o referencia hebra mediada análisis conformación.
El método se basa en las diferencias en la movilidad de las moléculas de ADN causadas por bases no complementarias en
dos hebras de la doble hélice. Así, cuando los productos de PCR de idéntica
longitud de diferentes alelos se hibridan con una cadena de referencia, se mueven diferente
distancias en el gel debido a desajustes en el dúplex formado con la hebra de referencia y el ADN de prueba.
4.4.3 PCR-SSOP: La técnica de sonda de oligonucleótido específica de la secuencia basado en la PCR es bien
establecido como una baja a procedimiento de tipificación de alta resolución para la definición de HLA de clase II polimórfica
alelos. La resolución del método depende del tipo y el número de sondas utilizadas para la prueba. Esencialmente,
se trata de la amplificación del locus a ensayar usando genérico
cebadores a todos los alelos que constituyen dicho locus e inmovilización de el ADN covalentemente
unido a membranas de nylon por irradiación UV. La membrana se incuba posteriormente
369
medicina transfusional Manual técnico
con una sonda de oligonulceotide al motivo polimórfica a detectar. Una serie de incubación y etapas de lavado seguir
después de que el oligonucleótido unido se detecta por un sistema de detección (quimioluminiscente, colorimétrica o
radiactivo). Sólo el ADN amplificado con secuencias complementarias se unen a la sonda y por lo tanto son
detectados como positivos señales dot blots (Figura 23.5a).
La técnica de PCR-SSOP es especialmente adecuado para pruebas de gran número de muestras a la vez. Un aparato de transferencia
en punto se utiliza para inmovilizar hasta 96 ADN sobre una membrana de nylon y se hibridó con sondas específicas marcadas con otros
sistemas de detección biotina o. La eficiencia de la técnica
depende de la disponibilidad de , secuencias de la sonda monoespecíficos ideales para identificación de alelos individuales
en alta resolución, estandarización de temperatura de hibridación de la sonda y el lavado crítico
pasos para descartar falsas reacciones positivas y negativas (Mehra et al, 1991, 1 994; Rajalingam et al,
1996). Aunque PCR-SSOP es una técnica de muy alta sensibilidad, eso no es discriminatoria en
cis que definen / trans localizaciones de la secuencia de motivos en heterocigotos los individuos. Por ejemplo
B * 3501 / B * 4901 no puede distinguirse de B * 5001 / B * 5301 heterocigotos ya que las secuencias HLA-B de ambos genotipos
difieren sólo con respecto a las cis o posiciones trans de secuencia
motivos en la región hipervariable del exón 2 y el exón 3. PCR-SSOP produce lo mismo
patrón de hibridación tanto para las combinaciones. En tales situaciones, PCR-SSP o PCR anidada
son técnicas más útil. PCR-SSOP necesita mayor mejoras para convertirse en una más fiable
y precisa procedimiento de tipificación rutinaria. Recientemente, otros dos muy similares relacionada con técnicas
PCR-SSOP se han desarrollado, tanto que implica una metodología inversa SSOP el uso de tiras de nylon con sondas de pre-inmovilizado (Reverse
hibridación de transferencia (RBH) y las tiras de línea inversa (RLS)).
una segundo
Fig 23.5:. PCR-SSP y SSOP metodologías: La figura representa del principio de las dos técnicas * 'basado en
la PCR comúnmente empleados para la tipificación HLA
370
4.4.4.1 PCR-SSP: La técnica cebador específico de secuencia basado en la PCR es fiable para ambos alelos de clase 1 y de clase II. Aquí, se
utilizan oligonucleótidos basados en secuencias polimórficas como un conjunto de pares de cebadores para amplificar regiones de diferencias
entre cualquiera de los dos alelos. El número de diferentes PCRs necesarios para distinguir entre un conjunto de alelos que son al menos la
mitad el número de alelos para ser escrito. Solamente los oligonucleótidos complementarios son capaces de cebar una reacción de PCR y se
pueden visualizar como una banda amplificada en un gel de agarosa (Figura 23.5b). Completo alta resolución tipificación se puede llevar a
cabo utilizando cebadores anidados. La técnica es más conveniente para el pequeño número de muestras y para obtener resultados rápidos.
Aunque el costo es un factor limitante para la PCR-SSP, es la técnica de elección para la donante-receptor a juego para el trasplante de
médula ósea y para HLA-DR / DQ tipificación alelo en situaciones de trasplante de órganos. Una versión de
Fig 23.6:. Principio de la metodología de la línea de tira inversa. muestras de ADN marcadas mediante la incorporación de
cebadores biotinilados se hibridan con sondas inmovilizadas sobre membranas de nylon con la ayuda de enlazadores químicos. El
ADN hibridado se detecta entonces mediante la adición de estreptavidina conjugada con la enzima peroxidasa de rábano de caballo.
La posterior adición de sustrato (3,3' , 5,5' tetrametil bencidina) conduce a desarrollo de color sólo en muestras positivas.
371
Transfusion Medicine T Manual técnicaLista
4.4.5 técnicas RBH / RLS: Las técnicas de hibridación de transferencia inversa y la línea de tira inverso son de proa corredores a la
tecnología de chip de ADN, donde un conjunto de sondas de oligonucleótidos a défini ng
motivos polimórficos específicos se inmovilizan sobre membranas de nylon y luego se hibridan con el amplificado DNA para ser
probado. La técnica es adecuada para escribir pequeño número de muestras como en los casos forenses (figura 23.6). La técnica
es una mejora sobre la PCR-SSP ya que puede definir HLA-A, B, C en un nivel intermedio tipificación de alta resolución; No
disponible con cualquier otra técnica similar para la clase Ihla escribir.
4.4.6 ARMS-PCR técnica: La técnica es un sistema de mutación refractario amplificación definida originalmente por Newton y
compañeros de trabajo (1989). El método utiliza una combinación de cebadores diseñados contra de grupo y de los alelos sitios
específicos de secuencia. El diseño SSP se basa en los brazos 1 sistema por el que una falta de coincidencia en 3 1 residuo de la
imprimación inhibe la amplificación no específica. La técnica es particularmente útil para la detección de alelos HLA de clase I a nivel
de alta resolución, en donde la variación de la secuencia no se limita a regiones específicas del genoma de ser repartidos en todo el
locus. alelos HLA de clase I muestran extensa homología entre diferentes alelos en el mismo locus, así como similitudes interlocus. El
diseño especial de imprimación en esta técnica permite la asignación alelo correcto y inhibe las reacciones de falsos positivos (figura
23.7).
Fig. 23.7. Principio de la metodología ARMS-PCR: Se consigue una amplificación positiva cuando el cebador
es un partido complementaria exacta a la secuencia de ADN diana. Por otra parte el cebador no se une a las secuencias no diana resulta en un
fracaso de la amplificación de PCR.
4.5 Secuencia de tipificación basado (SBT): la tipificación basada en la secuencia ha ganado gran importancia durante los últimos pocos años como una
372
de alelos de HLA. La técnica se basa en la identificación de la secuencia exonic completa del alelo en cuestión y por lo tanto no
permite discrepancias. Una PCR se realiza que amplifica tanto los alelos
en un heterocigoto individual. Los dos alelos son luego secuenciados y posiciones de
heterocigosidad se analizan utilizando software informático que se alinea Las secuencias obtenidas con
combinación de todos los alelos conocidos y por lo tanto asignan posibles tipos de HLA. La técnica es muy adecuado para la tipificación de
Clase II, pero de clase I alelos debido a sus extensas lugar polimorfismo grandes exigencias en la calidad de los análisis de secuenciación.
Alto grado de homología de secuencia entre los diferentes HLA de clase I loci
incluyendo el menos polimórficos HLA-E, F, G, genes y varios pseudogenes
causar múltiples problemas si un particular, locus tiene que ser investigado. Teniendo en cuenta la creciente
número de alelos detectados recientemente, la secuenciación está convirtiendo rápidamente en el más razonable y adecuada
enfoque tipificación tanto para HLA de clase I y II alelos.
Como resultado de la aplicación de técnicas basadas en el ADN, un gran número de nuevos alelos HLA se han descubierto y
caracterizado. Varios' nuevos alelos se han descubierto en la población india y reportado recientemente por nuestro grupo (Mehra et al,
2001, Jainietal, 2001).
yo.) El costo de la mayoría de las tecnologías basadas en PCR es prohibitivo para su uso en laboratorios de rutina de servicio y por lo tanto éstos se
utilizan principalmente en los grandes centros de referencia, como las técnicas de tipificación secundarias, confirmatorias, para fines de
ii.) Dado que la alta resolución de métodos se basan en las secuencias disponibles a partir de estudios llevados a cabo
predominantemente en Caucasoid y poblaciones orientales, identificación de nuevos alelos
encontrado en otros grupos étnicos o de alelos raros podría perderse menos que se aplique más de un procedimiento.
iii.) Algunos heterocigotos no pueden ser distinguidos por las técnicas basadas en PCR en función de las secuencias de los alelos en
cuestión. Los métodos alternativos a continuación, tienen que ser utilizados para resolver tales discrepancias.
iv.) reacciones positivas y negativas falsas debido a un fallo de la amplificación y / o hibridación necesitan estandarización
laborioso de las técnicas y análisis cuidadoso de los resultados para evitar la asignación incorrecta de los alelos.
Histocompatibilidad ha cambiado mucho a lo largo los años. Desde los primeros días de comparativamente
serología simple, metodologías bioquímicos y celulares, HLA ha recorrido un largo camino para la presente sofisticación de
procedimientos moleculares incluyendo la tipificación basada en la secuencia recientemente definido
(SBT). Debido a la extraordinaria papel importante que desempeñan las moléculas de HLA en la presentación de antígenos y rigor de
la relación entre el epítopo y alelos de HLA asociados, de alta resolución
escribir es cada vez más en la demanda en clínicas y experimentales ajustes. funcionalmente significativa
alta resolución tipificación de alelos de HLA sólo es alcanzable a través de métodos moleculares.
la tecnología de matriz basado oligonucleótido de ADN (popularmente llamada la tecnología de chips de ADN)
373
Y los derivados del plasma
inmunoglobulinas ya sea por el método de extracción con etanol Conn o por el método cromatográfico.
1. Albúmina solución al 5%
• Los productos se calientan y / o tratado químicamente para reducir el riesgo de transmisión de enfermedades virales.
375
<W>. Manual técnico
2 ° -8 ° C 5 años
• quemaduras
• cirugía retroperitoneal en la que gran volumen de líquido rico en proteínas puede acumularse en el intestino
• Los diuréticos también deben recibir alongwith albúmina si el edema está presente.
■ Hyperbilirubinema en el recién nacido: se da 5-10 ml de sal pobre albúmina junto con la sangre para transfusión de
intercambio. Se une exceso de bilirrubina y reducir la incidencia de
ictericia nuclear.
Contraindicaciones:
• Hipoproteinemia de la malnutrición.
Efecto adverso:
• reacciones febriles
• La hipotensión debido a la sustancia vasoactivo en el plasma, a veces se ve con PPF cuando la velocidad de administración es
de más de 10 ml / min.
Nota:
Proceso de calor tratamiento o químico tratamiento de los derivados de plasma para reducir el riesgo de
la transmisión de los virus es muy eficaz contra los virus que tienen lípidos envuelve:
• virus de VIH 1 y 2
• virus de la hepatitis B
• virus de la hepatitis C
• HTLV-1 y 2 virus
La inactivación de la no-lípido virus envueltos, por ejemplo, hepatitis A son menos eficaces.
376
Derivados de plasma y plasma Sustitutos
(1) Factor VIII preparó a partir de grandes reservas de plasma es estéril, liofilizado.
• Viales de proteína liofilizada etiquetados con el contenido, por lo general 250 UI de factor VIII.
• Una UI es la actividad del factor presente en 1 ml de plasma de mezcla normal de menos de 1 hora de edad.
• Eso inactiveated se para virus por calor de tratamiento, de disolvente / detergentes o purificada con
anticuerpos monoclonicos.
(2) tecnología de ADN recombinante se utiliza actualmente para la producción de factor VIII concentrado
que está disponible comercialmente. Eso es equivalente clínicamente al factor VIII derivado de
plasma. No tiene el riesgo de transmisión de infecciones virales. Almacenamiento: productos secos por congelación se
Dosis: 10 - 20 UI / kg de peso corporal después de cada 12 horas. (Véase el capítulo 14 'Factor crioprecipitado
VIII).
aPTT se puede utilizar para monitorizar niveles de factor VIII.
Aproximadamente 10-15 hemofílicos por ciento desarrollan inhibidor al factor VIII. En las personas con
hemofilia A, un inhibidor se sospecha si la administración del factor VIII concentrado ya no
produce los resultados terapéuticos esperados. Las personas que desarrollan inhibidores pueden ser divididos en dos grupos:
baja y alta respondedores. baja respuesta tienen una baja concentración de anticuerpos y
pueden ser tratados con el estándar o ligeramente más alta que las dosis normales de concentrado de factor VIII. De alta respuesta
tienen alta concentración de anticuerpo al factor VII y son difíciles para tratar.
protrombina: (PCC)
Contiene factores II, IX y X y a un grado variable de factor VII
[Complejo de coagulación Anti-inhibidor (AICC) para el tratamiento de pacientes con títulos elevados de anticuerpos contra el factor
VIII]
• PCC también se usa para tratar el tiempo de protrombina prolongado y los pacientes con alto título de anticuerpos contra el factor VIII.
377
medicina transfusional Manual técnico
PREPARATIVOS inmunoglobulinas de
inmunoglobulina para uso intramuscular ::
UNA solución concentrada del componente de anticuerpo IgG de plasma, preparado a partir de grandes reservas de plasma de donantes que
contienen anticuerpos contra agentes infecciosos. Ellos son inactivados en busca de virus
y no transmitir infecciones virus transmitidos. indicaciones:
indicaciones:
• La púrpura trombocitopénica idiopática autoinmune y algunos otros trastornos del sistema inmune.
• hipogammaglobulinemia
• Miastenia gravis
globulinas hiperinmunes
Preparado a partir de plasma que contiene alto nivel de anticuerpo anti-Rh D de personas previamente inmunizados.
Indicaciones: Prevención de Rh (D) negativo madre de la inmunización Rh que está embarazada de Rh (D) positivo lactante.
aproximado
complejo del factor IX, X Facror II, VII, IX, cantidades factor de la herencia II. IX, o
Factor IX conc.) mínimas de otras proteínas deficiencia X, inhibidor del factor VIII
378
Los derivados del plasma <w>
derivados de plasma y sus usos ( Continuado)
Aquellos diseñados para proporcionar una presión osmótica de coloides o expandir el volumen de plasma es decir, coloides y cristaloides.
3. Gelatina
salina normal
La gelatina (Haemacel) 3,5% polipéptido gelatina (MW 35.000) con las 3-5 horas
soluciones de Ringers
dextrano 40
Eso es del 10% de polisacárido solución (MW40,000) en solución salina normal. Dextrano 40 aumenta el volumen de plasma
relativamente rápidamente debido a su alta concentración y bajo peso molecular. Sus
intravascular vida media es más corta (4-6 h) que la de hidroxietil almidón o dextrano 70, ya que se excreta rápidamente en la orina.
La infusión de dextrano está asociada con la deshidratación intersticial en paciente
cristaloides no se dan con ella. También tiene un papel en la prevención de la trombosis. En general se acepta que la dosis de
Dextrano 40 no debe exceder de 500 ml en 24 h en adultos.
dextrano 70
Es 6% de polisacárido (MW 70.000) solución en solución salina normal. Tiene un efecto fuerte y comparativamente larga duración
(6-8 horas). Dextrano 70 tiene acción antitrombótica significativa a través de interferir
con el factor de plaquetas VIII- interacción endotelial. La infusión de 500 ml de dextrano 70 por 24 horas se ha visto
ofrecer significativo protección contra postoperatorio tromboembólica
complicación. Su uso de más de 1000-1500 ml puede causar sangrado anormal en los pacientes y
debido a esto, el uso de dextrano 70 ha reducido en algunos lugares.
379
medicina transfusional Manual técnico
• Circulatorio sobre carga, sobre todo en pacientes en los que la anemia es más marcada.
• reacciones anafilácticas.
realizado pocos ensayos clínicos controlados de este sustituto del plasma coloidal. Sus efectos de expansión son más modestas que las
de dextrano 70, pero su vida media intravascular parece ser más largo. Su inicial vida media en la circulación es de 24 h, pero casi 20%
de la HES infundido permanece en el cuerpo después de una semana después de una sola infusión de HES, y la administración repetida
• HES se utiliza como aditivo para aumentar yiels de granulocitos en leucoféresis por los efectos secundarios separartor celular:
• HES interfiere en cierta medida con los mecanismos hemostáticos, a través de menos de dextrano.
Gelatina (Haemacel)
Succinil gelatina y gelatina parcialmente degradado tienen un peso molecular de 35.000. Están disponibles como 3.5-4.0 soluciones% en
botellas de 500 ml (Haemacel). La gelatina tiene una vida media en la circulación de entre tres y cinco horas. La gelatina tiene ninguna
propiedad antigénica y no interfiere con la hemostasia. Las gelatinas son los menos potente de los sustitutos de plasma coloidales.
efectos de la expansión del volumen de sangre son satisfactorios a la espera de la sangre. La dosis es de 500-1000 ml. Efectos secundarios:
380
Derivados de plasma y plasma Sustitutos
Nombre de Los efectos de volumen La sobrecarga Los posibles efectos reacciones La dosis
Coloides intravascular circulatoria secundarios lactoid máxima (ml).
Anaphy- para "adulto a
intia l duración damag
alteradarenal 70 kg '
soluciones cristaloides
soluciones cristaloides de tipo reemplazo se formulan para corregir el déficit de fluidos corporales. Tienen la capacidad de ampliar el
volumen de plasma temporalmente ya que la concentración intravascular aand extravascular de los electrolitos tienden a equilibirate
rápidamente.
cristaloide de reemplazo son isotónicas con respecto a la concentración de sodio e incluyen
soluciones de cloruro de sodio lactato y 0,9% de Ringer.
Estos fluidos entran tanto en el plasma y el compartimento de fluido intersticial sin desplazar el equilibrio osmótico. Como
resultado gran volumen de estos fluidos de reemplazo son necesarios para expandir el volumen de plasma intravascular. Ellos
deben ser administrados juiciosamente para evitar la inundación del espacio extravascular, en particular en el edema pulmonar. Las
ventajas y desventajas de coloides y soluciones cristaloides de la Tabla 24.3
381
Transfusión de sangre
seguridad y
Regulador
requisitos
servicios de transfusión de sangre es una parte vital de los Servicios Nacionales de Salud y el aumento de avance en el campo de la tecnología
de la transfusión ha hecho necesario para hacer cumplir las regulaciones para garantizar la seguridad y la eficacia de los productos biológicos, que
incluyen la sangre, y sus componentes y reactivos de diagnóstico y dispositivos utilizados por el establecimiento de la sangre . Controlador General
de Drogas de la India ha formulado una legislación integral para asegurar un mejor sistema de control de calidad en la recogida, almacenamiento,
Director General de Servicios de Salud lleva a cabo modificaciones de vez en cuando en relación a los requisitos de los servicios de
transfusión sanguínea de los Medicamentos y Cosméticos de 1940 y reglas relacionadas con él para cumplir con los últimos requisitos de seguridad
de la sangre y sus componentes.
El Controlador General de Drogas (India) emitió una notificación de que la sangre no debe ser recogido de los donantes de
sangre profesionales pagados wef enero de 1998, con el fin de suministrar más sangre segura y sus componentes a los pacientes, a
raíz de una orden del Tribunal Supremo.
El problema de asociada a la transfusión adquirido el síndrome de inmunodeficiencia (SIDA)
como resultado la introducción de una serie de políticas y procedimientos nuevos relacionados con la seguridad de la sangre. El Ministerio
de Salud y Bienestar de la Familia (Gobierno de la India) emitió una notificación en el año 1989 bajo las Drogas y Cosméticos Hechos y
Reglas e hizo la prueba para el virus immunodefiiency humana (VIH) obligatoria.
Para el cumplimiento estricto, las Reglas de medicamentos y cosméticos fueron nuevamente modificado (Reglas 68A, Parte XB y Parte XIIB de
383
medicina transfusional Manual técnico
fue concedida con el poder de la Licencia central autoridad de aprobación (CLAA) para aprobar la licencia de drogas notificadas a saber. sangre y
productos sanguíneos, fluidos IV, vacunas y sueros.
Gobierno Central Modifica los medicamentos y los cosméticos Reglas de 1945 y notificado la
Medicamentos y Cosméticos (Reglas segunda enmienda), de 1999 y entró en vigor y se han destacado en este capítulo.
Concurrentes nuevos datos y una mayor preocupación por la seguridad de la sangre provocaron la introducción de las pruebas para el marcador
del virus de la hepatitis C (VHC) y la prueba de anticuerpos contra el VHC se ha hecho obligatoria en 2001 bajo las Drogas y Cosméticos Reglas.
La sangre humana está cubierto por la definición de "drogas" bajo la Sección 2 (b) de la Ley de Medicamentos y Cosméticos. Por lo tanto, es
imperativo que los bancos de sangre necesitan ser regulados por la Ley y el Reglamento bajo el mismo Medicamentos y Cosméticos
y la licencia se concede para el funcionamiento de un banco de sangre por
la Central de Licencias y Licencias Estado Aprobar Autoridades después de la inspección.
PARTXB
122-EA. Definición - En esta parte y en los formularios que figura en el Anexo A y en la Parte B y la Parte XII XIIC de la Lista F, a
menos que haya algo repugnante en el contexto objeto:
(A) "banco de sangre" significa un lugar o organización o unidad o institución u otros acuerdos
efectuado por dicha organización, unidad o institución para llevar a cabo la totalidad o cualquiera de las operaciones, para las colecciones,
aféresis, almacenamiento, procesamiento y distribución de la sangre extraída de donantes y / o para la preparación, almacenamiento y distribución
de componentes de la sangre. (B) "donante" se refiere a una persona que dona sangre voluntariamente después de haber sido declarado apto
después de
un examen médico, por la donación de sangre, en el cumplimiento de los criterios dados a continuación, sin aceptar a cambio de toda
contraprestación en metálico o en especie de cualquier fuente, pero no incluye un profesional o de un donante remunerado;
Explicación- A los efectos de esta cláusula, beneficios o incentivos como alfileres, placas, insignias, medallas,
certificados de elogio, tiempo- fuera del trabajo, miembros de aseguramiento de la sangre
programa, regalos de poco o intrínseco valor monetario no se interpretarán como contraprestación. (C) "donante de reposición" significa un
(D) "donante profesional" significa una persona que dona sangre a título oneroso, en
dinero en efectivo o en especie, de cualquier fuente, en nombre del destinatario - paciente e incluye un donante pagado o un donante
comercial"
(e) medios de "sangre" e incluye sangre humana total, extraído de un donante y se mezcla con una
anticoagulante.
(F) "sangre autóloga" significa la sangre extraída del paciente para volver a la transfusión en sí mismo /
a sí misma más adelante.
(G) "componente sanguíneo" significa un fármaco preparado, obtenido, derivado o separada de una unidad de
la sangre extraída de un donante. (H) "Aphersis" significa el proceso por el cual la extracción de sangre de un donante, después de separar el
plasma
384
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
(yo) "Plaquetoféresis" significa el proceso por el cual la extracción de sangre de un donante, después de concentrados de plaquetas se han
separado, se retransfundida simultáneamente en dicho donante. (J) "Plasmaféresis" significa el proceso por el cual la extracción de sangre
de un donante, después de la
plasma ha sido separado, se vuelve a transfundida en el mismo sentado en a dicho donante. (K) "Leucapheresis" significa el proceso por el
concentrados han sido separados, se re-transfunden simultáneamente en dicho donante (l) "Productos de la sangre" significa un fármaco
122-F. Formulario de solicitud de licencia para la operación del Banco de Sangre / procesamiento de la sangre humana entera para componentes /
Solicitud de concesión y / o renovación de la licencia para la operación del Banco de Sangre / procesamiento de la sangre humana
para componentes / fabricación de productos sanguíneos se efectuará a la autoridad otorgante designado por la Parte VII en el
Formulario 27-C o Formulario 27-E ( Apéndices 1 y 2) como sea el caso, y irán acompañadas de los derechos de licencia de seis
mil rupias y una tasas de inspección de rupias mil quinientos por cada inspección de los mismos o con el propósito de la renovación
de la licencia.
A condición de que si el solicitante pide la renovación de la licencia después de la expiración, pero dentro de los seis meses a
partir de la expiración del impuesto fijado para la renovación de la licnece será rupias seis mil y tasas de inspección de rupias mil
quinientos más un cargo adicional en el tasa de rupias mil por mes o una parte del mismo en adicional a la tasa de inspección.
Condición adicional de que una licencia de titular de una licencia en el Formulario 28 C o el Formulario 28 E (apéndices 3 y 4) como puede ser el
caso para el funcionamiento del banco de sangre / procesamiento de la sangre humana entera para componentes / fabricación de productos de la sangre se
aplicará para la concesión de licencia para renovación en
subregla (1) antes de la expiración de dicho licenece en el Formulario 27-C o el Formulario 27-E, como puede ser el caso y que deberá
seguir funcionando de la misma hasta que las órdenes de su aplicación se comunican con él.
2. Una cuota de rupias mil se pagará por un duplicado de la licencia emitida bajo
esta regla, si ha sido borrado el original, dañado o perdido.
Autoridad, (i) Verificar las declaraciones hechas en el formulario de solicitud. (yo) Inspeccionar
385
medicina transfusional Manual técnico
(yo) En caso de que la solicitud es para la renovación de licencia, la información de los resultados anteriores de
A condición de que si la Dirección de Licencias es de la opinión de que el solicitante no está en condiciones de cumplir los
requisitos establecidos en estas bases, se puede, por fin, por razones que se registra por escrito, se niegan a otorgar o renovar la
licencia, según el caso puede ser.
6. Si, al recibir la solicitud y el informe de la Dirección de Licencias se refiere el párrafo 5 y después de tomar este tipo de
medidas, incluida la inspección de los locales, por el inspector, designado por el Gobierno central. bajo la Sección 21 de la
Ley, y / o junto con experto en el campo en cuestión si se considera necesario,
la Licencia central autoridad de aprobación, es
considera que el solicitante está en condiciones de cumplir el requisito establecido en esta norma, se concede o se renovó la licencia,
como puede ser el caso.
Siempre que Si la licencia central autoridad de aprobación es de la opinión de que la
solicitante no está en condiciones de cumplir los requisitos establecidos en estas reglas puede, no obstante el informe de
la Dirección de Licencias, por fin, por razones que se registró
en la escritura, denegará la solicitud de concesión o renovación de la licencia como puede ser el caso y deberá proporcionar al
solicitante una copia del informe de inspección.
122-G. Forma de licencia para el funcionamiento de un Banco de Sangre / Procesamiento de entera humana
La sangre de los componentes y fabricación de productos sanguíneos y las condiciones para la concesión o renovación de dicha licencia
Una licencia para la operación de un banco de sangre o para el procesamiento de sangre humana total para los componentes y la
fabricación de productos de la sangre se emiten en forma 28-C o Forma 28 forma E o 26-G o el Formulario 26-1. Antes de una licencia en el
Formulario 28-C o la Forma 28 Forma E o G-26 o el Formulario 26-I se conceda ni se renueve las siguientes condiciones deberán ser cumplidas
por la demandante-
1. El funcionamiento del banco de sangre y / o el procesamiento de sangre humana total para componentes /
fabricación de producto de la sangre se lleva a cabo bajo la dirección y supervisión activa de personal de competente
el personal técnico que consta de por lo menos una persona que es toda
tiempo de los empleados y que es un oficial médico y que posee -
componentes; o
do) Licenciado en Medicina (MBBS) que tienen experiencia en el Banco de Sangre de un año durante
servicio regular y también tiene el conocimiento y la experiencia adecuada en la serología de grupos sanguíneos,
metodología de grupos sanguíneos y los principios médicos involucrado en el
obtención de sangre y / o preparación de sus componentes, el grado o diploma de ser
de una universidad reconocida por el Gobierno central explicación-A los efectos de esta condición,
386
seguridad transfusión de sangre y <w>
2. El solicitante deberá proporcionar un espacio adecuado, maquinaria y equipo para cualquiera o todas las operaciones de recogida de
sangre o de procesamiento de sangre. El espacio, planta y equipo requerido para
vario funcionamiento se da en la Lista 'F', Parte XII-B y / o XII-C.
3. El solicitante deberá proporcionar y mantener el personal técnico adecuado como se especifica en el Anexo 'F', la parte XII-B y / o C-XII.
4. El aplicante deberá proporcionar disposiciones adecuadas para el almacenamiento de sangre entera humana,
Human componentes sanguíneos y los productos sanguíneos.
5. El solicitante deberá presentar a la Dirección de Licencias, si así lo requiere, los datos sobre la
estabilidad de sangre humana entera, sus componentes o productos de la sangre que puedan
deteriorándose, para la fijación de la fecha de caducidad que se imprime en las etiquetas de estos productos sobre la base de los datos de
modo amueblado.
Una licencia original en el Formulario 28-C o el Formulario 28-E o una licencia renovada en el Formulario 28-G o Formulario 28I menos
pronto suspendido o cancelado será válida durante un período de cinco años desde la fecha del año en el que es concedido o renovado.
122-I. Inspección antes de la concesión o renovación de La licencia de funcionamiento del Banco de Sangre, el procesamiento
Antes de una licencia en la Forma 28-C o el Formulario 28-E se concede o se hace una renovación de la licencia en el formulario 26G o el
Formulario 26-I, como puede ser el caso, la Dirección de Licencias y / o Licencia central
La aprobación de Autoridad, inspeccionar el establecimiento en el que se propone banco de sangre para ser
operado / sangre entera humana para el componente se procesa / productos sanguíneos se fabrican deberán
ser inspeccionado por uno o más inspectores, nombrados de conformidad con la Ley y / o junto con el Experto en el ámbito en cuestión.
El inspector o inspectores deberán examinar todas las partes de las instalaciones y aparatos / equipos e inspeccionar
el proceso de fabricación destinado a ser empleado o estar
empleado para el funcionamiento del banco de sangre / procesamiento de la sangre humana entera para componentes / fabricación de productos de la
sangre. El inspector (s) también deberá inspeccionar las instalaciones de ensayo y también
El inspector o inspectores deberán remitir un informe descriptivo detallado con su conclusión sobre cada aspecto de
inspección junto con su recomendación de conformidad con lo dispuesto en el
Regla 122-I de la Dirección de Licencias o para la Licencia central autoridad de aprobación.
Si en un plazo de seis meses desde el rechazo de la solicitud de licencia el solicitante informa a la autoridad de concesión de
licencias que las condiciones establecidas se han aplicado y depósitos
una tasa de inspección de rupias doscientos cincuenta, la Dirección de Licencias, puede volver a inspeccionar la
establecimiento y si estima que las condiciones para la concesión o renovación de una licencia se han cumplido, podrán otorgar o renovar una
licencia en el Formulario 28-C o el Formulario 28-E;
Siempre que en el caso de un fármaco notificado por el Gobierno Central en virtud del artículo 68-A, la
solicitud junto con el informe de inspección y el formulario de licencia (por triplicado a concederse
387
<W>
o renovada), debidamente cumplimentado deberá ser enviado, a la Licencia central autoridad de aprobación, que puede
aprobar la misma y devolverla a la autoridad de concesión de licencias para la emisión de la licencia ".
La oficina central de licencias autoridad de aprobación podrá, con la aprobación de el Gobierno Central,
por el delegado notificación de su poder de licencias de firma o cualquier otra potencia bajo las reglas a las personas bajo su control que
tiene mismas calificaciones según lo prescrito por Autoridad de Control bajo la Regla 50-A, para tales áreas y en los plazos que se
especifiquen.
122 M-. Provisión para llamamiento al Gobierno del Estado por una Parte cuya licencia no haya sido concedida o renovada
Cualquier persona que está perjudicada por la orden dictada por la autoridad de licencia o una Licencia central autoridad de aprobación, como
sea el caso, podrá, dentro de los treinta días siguientes a la fecha de recepción de dicha orden, de interés para el Gobierno del Estado o del Gobierno
central, según sea el caso puede ser, después de dicha investigación,
en la materia que considere necesario y después de dar a dicho individuo una oportunidad para representar su punto de vista en la materia
puede pasar dicha orden en relación con ello que considere oportuno.
122-n. Adicional Información a facilitar por un [demandante] para la licencia o por un licenciatario
a la Dirección de Licencias
los solicitante de la concesión de la licencia o cualquier persona designada para recibir una licencia bajo la parte expedirán, a
instancia suministrar a la Dirección de Licencias, antes de la concesión de la licencia o durante el período de la licencia está en vigor, como
puede ser el caso, las pruebas documentales en materia de propiedad u ocupación, alquiler u otra base de las premisas, se especifica en
la solicitud de licencia o en la licencia concedida, la constitución de la empresa o cualquier otro asunto relevante, que pueda ser requerida
con el fin de verificar la exactitud de la declaración hecha por el solicitante o el titular de la licencia, mientras que la solicitud o después de
obtener la licencia, como se en su caso.
(1) La Autoridad de licencia o una Licencia Autoridad central que aprueba mayo de este certificado
concedido o renovado por él después de darle al licenciatario una oportunidad para mostrar causa por una orden de este
tipo no debe ser aprobada por una orden por escrito indicando el motivo de la misma, cancelar una licencia emitida bajo esta
parte o suspenderla por el período que considere adecuada, en todo o en relación con algunas de las sustancias a que se
refiere, [o dirigir el titular de la licencia para detener recogida, almacenamiento, procesamiento, fabricación y distribución de
dichas sustancias y acto seguido ordenar la destrucción de las sustancias y las poblaciones de los mismos en presencia de
una inspector] si, en su opinión, el titular ha dejado de cumplir alguna de las condiciones de la licencia o con cualquier
disposición de la Ley o reglas relacionadas con él. (2) Un licenciatario cuya licencia ha sido suspendida o cancelada, en el
plazo de tres meses
la fecha de la orden con arreglo a las subreglas (1) prefieren un recurso contra dicha orden al Gobierno del Estado o del
Gobierno central, que decidirá sobre el mismo.
388
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
"Una licencia en el Formulario 28-C, Formulario 28-E, Formulario 28-G o el Formulario 26-I estará sujeta al
condiciones especiales establecidas en el Anexo F, Parte XII-B y la Parte XII-C, según el caso puede ser, que * se refieren a la
sustancia para la que se concede o se renueva la licencia y con las siguientes condiciones generales, a saber: - "
(yo)
(una) El titular de la licencia deberá proporcionar y mantener una adecuada del personal, instalaciones y locales para la
el correcto funcionamiento de un banco de sangre para el procesamiento de sangre humana entera, sus componentes
y / o fabricación de los productos sanguíneos. (segundo) La licencia mantendrá personal, locales y equipos
especificados en la Norma
122-G. El licenciatario deberá mantener registros y los registros necesarios según se especifica en la Lista F, Parte
XII-B y XII-C. (do) El titular
prueba en su propio laboratorio de sangre humana entera, sus componentes
y productos de la sangre y mantener los registros y los registros respecto de tales pruebas como se especifica en la Lista F,
Parte XII-B y la Parte XII-C. Los registros y los registros se conservarán durante un período de cinco años a partir de la fecha
de fabricación. (D) La
licenciatario deberá mantener / preservar muestra de referencia y el suministro a la Inspector la muestra de referencia
de toda la sangre humana recogida por él en cantidad adecuada para llevar a cabo todas las pruebas prescritas. (Ii)
El titular de la licencia deberá permitir que un inspector designado en virtud de la Ley para entrar, con o [sin] previo aviso, los
lugares en que las actividades del Banco de Sangre se están llevando a cabo, para el procesamiento de sangre entera humana
y / o productos de sangre, para inspeccionar los locales
y la planta y el proceso de fabricación y los medios empleados para la normalización y probar la sustancia. (Iii)
El titular de la licencia deberá permitir que un inspector designado en virtud de la Ley de inspeccionar todos los registros y
los registros mantenidos bajo estas reglas y tomar muestras del producto fabricado y proporcionará al inspector dicha
información que pueda requerir con el fin de determinar si las disposiciones de la Ley y reglas relacionadas con él se han
observado. (Iv)
El titular de vez en informe de tiempo para la Dirección de Licencias cualquier cambio en el equipo de expertos responsables de la
operación de un banco / procesamiento de sangre de la sangre humana entera para componentes y / o fabricación de productos de la
sangre y sus distintas modificaciones sustanciales de las instalaciones o plantas utilizado a tal fin que se han realizado desde la fecha
de la última inspección realizada en nombre de la Autoridad de licencias antes de la concesión de la licencia. (V)
El titular de la licencia, previa solicitud, proporcionar a la Dirección de Licencias, o autoridad de aprobación de licencia central
o a la autoridad que la Licensing Authority, o el central
Autoridad de aprobación de licencia puede dirigir, desde cualquier unidad de lote de medicamentos como la Autoridad de licencia o de la
licencia de central aprobador puede de vez en cuando especifique, muestra de la cantidad que puede ser considerada adecuada por parte de
esa Administración para cualquier examen y, si así se requiere, también proporcionar protocolos completos de la prueba que se han aplicado.
(Vi)
(Vii) La persona con licencia al ser informado por la Dirección de Licencias o El control"
Autoridad que cualquier parte de cualquier lote / unidad de la sustancia se ha encontrado por la Autoridad de licencia o una
la Licencia central autoridad de aprobación no para cumplir con las normas
de fuerza, calidad o pureza especificado en estas Normas y al ser que lo indique, retirar, de las ventas y la medida en que
puede, en las circunstancias particulares del caso será el recuerdo de lo posible todos los temas ya hechos de ese lote /
unidad. (Viii)
Ningún fármaco fabricado bajo la licencia se venderá a menos que las precauciones necesarias
para la conservación de sus propiedades se han observado a lo largo el período después de la fabricación.
El titular de la licencia deberá cumplir con las disposiciones de la Ley y de este Reglamento y con las especificaciones
adicionales, si la hay, que pueda ser fijado en cualquier Reglas hecho posteriormente
bajo el capítulo IV de la Ley, siempre que, cuando las especificaciones adicionales que se especifican en las Normas,
éstos vendrían en vigor cuatro meses después de su publicación en el Diario Oficial
Gaceta.
(X) El titular deberá mantener un libro de Inspección en el Formulario 35 para permitir que un inspector para registrar sus impresiones y
defectos notado. (Xi)
El titular deberá destruir las existencias de lotes / unidad que no cumpla con las pruebas estándar, de tal manera que no se
propagaría cualquier enfermedad / infección por medio del método de desinfección adecuada. (Xii)
Todos los residuos bio-sanitario será tratado, desecharse o destruidas de acuerdo con las disposiciones
El licenciatario no podrá percibir la sangre de un donante profesional o de donantes pagados ni podrá preparar componentes de la
sangre y / o fabricación de productos de la sangre de la sangre extraída de
un donante tal.
A . GENERAL
3. La salud, la ropa y el saneamiento del personal: Los empleados deberán estar libres de contagiosa o
enfermedades infecciosas. Ellos deberán estar provistos de un mono limpio, cabeza-engranajes, Lleva pies
y guantes, siempre que sea necesario. Habrá instalaciones de lavabos y retretes adecuados, limpio y conveniente.
390
seguridad de las transfusiones de sangre y la transfusión de regulación,
Un banco de sangre tendrá un área de 100 metros cuadrados para su operativa y una adicional zona
de 50 metros cuadrados para la preparación de componente de la sangre s. Eso se cuenta con una sala
cada una para -
(1) Registro y examen médico con muebles y de los medios adecuados para el registro
y la selección de los donantes; (2) La recogida de
NOTAS:
(1) La requisitos anteriores en cuanto a alojamiento y área pueden ser relajado, con respecto a
laboratorios de ensayo y sala de esterilización-cum-lavado, para razones para ser registrada en
escrito por la Dirección de Licencias y / o la Licencia central autoridad de aprobación, en
el respeto de los bancos de sangre que operan en los hospitales, siempre que el hospital en cuestión tiene una patológica
laboratorio y una esterilización-cum-lavado sala común con otra
departamentos en dicha hospitalaria. (2) Refrescos para el donante después de la flebotomía, serán atendidos de manera que se
mantiene bajo
observación en el banco de sangre.
DO. PERSONAL
Cada banco de sangre tendrá siguientes categorías de tiempo todo el personal técnico competente: - (a) General de Salud Pública, que
reúna los requisitos especificados en la condición (I) de la Regla 122-G. (segundo) Banco de Sangre Técnico (s), que posee -
(yo) Licenciado en Tecnología de Laboratorio Médico (MLT) con seis meses experiencia en
la prueba de sangre y / o sus componentes; o (ii) Diploma en Laboratorio de Tecnología Médica (ML T) con la
experiencia de un año en
la prueba de sangre y / o sus componentes, el grado o diploma de ser de una
Universidad / Institución reconocida por la Administración General del Estado o de Gobierno del Estado. (do) Enfermeras
registradas). (re) Supervisor Técnico (donde se fabrican componentes de la sangre), que posee -
(yo) Licenciado en Tecnología de Laboratorio Médico (MLT) con seis meses experiencia en
la preparación de componentes de la sangre; o (ii) Diploma en Tecnología de Laboratorio Médico (MLT), con un año
de experiencia en
la preparación de componentes de la sangre, el grado o diploma de ser de una universidad /
Institución reconocida por la Administración General del Estado o de Gobierno del Estado.
391
medicina transfusional Manual técnico
NOTAS:
(1) Los requisitos de cualificación y experiencia en materia de Supervisor Técnico y
Banco de Sangre Técnico se aplicará en los casos de personas que han sido aprobados por la Dirección de Licencias y / o
autoridad de aprobación de licencia Central después el inicio
de las Reglas de Medicamentos y Cosméticos (enmienda), 1999. (2) En cuanto
y otras últimas técnicas utilizadas en el sistema de almacenamiento de la sangre que el personal involucrado en las actividades de los bancos de sangre
RE. MANTENIMIENTO:
Los locales deberán mantenerse de una manera limpia y adecuada para garantizar la limpieza y el mantenimiento de las operaciones adecuadas
(1) Privacidad y examen exhaustivo de los individuos para determinar su idoneidad como donantes. (2) Recogida de sangre de
de pruebas. (4) Provisión de cuarentena, el almacenamiento de sangre y componentes sanguíneos en un lugar designado,
pendiente de repetición de aquellas pruebas que inicialmente dan resultados serológicos cuestionables. (5) Provisión para la cuarentena,
relativos a la plasmaféresis,
plaquetoaféresis y leucapheresis.
(9) La conducta apropiada de todos los envases, etiquetado y otras operaciones de acabado. (10) Provisión para la
(yo) Sangre y / o componentes de la sangre no es adecuado para uso, distribución o venta. (Ii) La basura y los elementos utilizados
E. EQUIPO:
El equipo utilizado en la recolección, procesamiento, control, almacenamiento y venta / distribución de la sangre
y sus componentes se mantendrán en una manera limpia y adecuada y colocados de tal manera como para facilitar la limpieza y el
mantenimiento. se observará el equipo, estandarizado y calibrado sobre una base regular como se describe en el Manual de
Procedimientos de Operación Estándar y deberá
392
Requisitos reglamentarios ana seguridad de las transfusiones de sangre
operar de la manera para la que fue diseñado con el fin de garantizar el cumplimiento de los requisitos oficiales (los equipos) como se indica a
continuación para sangre y sus componentes.
Equipo que se observarán, estandarizado y calibrado con al menos el seguimiento
frecuencias: -
2. Refrigerado Observe velocidad y Cada día de uso Cuantas veces sea necesario
centrífugo temperatura
1 -
3. hematocrito - Estandarizar antes de su uso inicial,
centrífugo después de reparación o ajustes, y
anualmente.
393
medicina transfusional Manual técnico
15. agitador Blood / Observe peso del primer Cada día de uso estandarizar con recipiente
dispositivo de pesaje contenedor de sangre de masa conocida o
lleno de resultados volumen antes de su uso
correctos inicial, y después de
reparaciones o adustment
Todos los suministros y reactivos utilizados en la recogida, el tratamiento, la compatibilidad, control, almacenamiento y distribución de sangre
y componentes sanguíneos deberán almacenarse a temperatura adecuada en un lugar seguro e higiénico, de una manera apropiada y en particular-
(una) Todos los suministros que entran en contacto con la sangre y componentes sanguíneos destinados a la transfusión
deberá ser estéril, libre de pirógenos, y no deberán interactuar con el producto de una manera tal como para tener un efecto adverso
sobre la seguridad, pureza, potencia o eficacia del producto. (segundo) Suministros y reactivos que no estén provistos de una fecha de
más antiguo se utiliza primero. (do) Suministros y reactivos deberán ser usados de una manera consistente con las instrucciones
proporcionadas por
el fabricante. (re) Todos los recipientes y cierres finales para sangre y componentes sanguíneos destinados a la transfusión
deberá estar limpia y libre de sólidos de superficie y otros contaminantes. (mi) Cada contenedor de recogida de sangre, y su recipiente (s)
visualmente por daños o evidencia de contaminación antes de su uso e inmediatamente después del llenado. Este examen
deberá incluir la inspección para la rotura de precintos, cuando esté indicado, y la decoloración anormal. Cuando se observa
ningún defecto, el recipiente no será utilizada o, si se detecta después del llenado, deberá ser desechado adecuadamente. (F) Las
probado regularmente de forma programada mediante los métodos descritos en el Manual de procedimientos operativos estándar para
394
La transfusión de sangre con seguridad y los requisitos reglamentarios
Escritos procedimientos operativos estándar se mantendrán y serán incluir todos los pasos que se
seguido en la recogida, el tratamiento, pruebas de compatibilidad, almacenamiento y venta o distribución de
sangre y / o la preparación de componentes de la sangre para homóloga transfusión, autólogo transfusión
y fines de fabricación adicionales. Tales procedimientos deberán estar disponibles para el personal para usar
1. Criterios de (a) utilizado para determinar la idoneidad del donante. (segundo) métodos de realización de pruebas de calificación de los
soluciones y métodos utilizados para preparar el sitio de flebotomía a fin de dar la máxima garantía de un recipiente estéril de la
sangre; (re) método de relacionarse con precisión el producto (s) para el donante; (mi)
procedimiento de recogida de sangre, incluyendo precauciones en proceso tomado para medir con precisión
la cantidad de sangre extraída del donante; (F)
los métodos de preparación de los componentes incluidos, las restricciones de tiempo para pasos específicos en el procesamiento; (sol)
todas las pruebas y ensayos repetidos realizados en sangre y sus componentes durante el procesamiento; (H)
pruebas previas a la transfusión, en su caso, incluyendo precauciones que deben tomarse para identificar
las temperaturas de almacenamiento y métodos de control de temperaturas de almacenamiento de sangre y sus componentes y reactivos;
(K)
longitud de las fechas de caducidad, en su caso, asignado para todos los productos finales;
(L) criterios para determinar si la sangre devuelta es adecuado para reedición; (metro)
procedimientos usados para relacionar una unidad de sangre o componente de la sangre del donante a su eliminación final; (norte)
procedimientos de control de calidad de los suministros y reactivos empleados en la extracción de sangre, procesamiento y ensayo
de re-transfusión; (O)
procedimientos de etiquetado para salvaguardar su confusiones, la recepción, emisión, rechazado y en mano; (Q)
(R) procedimientos para la preparación de plasma recuperado (salvado) si se realiza, incluyendo detalles de
la separación, puesta en común, etiquetado, almacenamiento y distribución. (S)
todos los registros pertinentes para el lote o unidad mantenida de conformidad con el presente reglamento serán revisados antes de
la liberación o la distribución de un lote o unidad de producto final. La revisión o porciones de la revisión se pueden realizar en
períodos apropiados durante o después de la recogida de sangre, el procesamiento,
pruebas y almacenamiento. Una investigación a fondo, incluyendo el
conclusiones y seguimiento, de cualquier discrepancia inexplicable o el fracaso de un lote o unidad para satisfacer cualquiera de sus
2. Un concesionario puede utilizar actuales procedimientos operativos estándar, tales como los manuales de la
siguientes organizaciones, siempre que tales procedimientos específicos son consistentes con, y al menos tan estrictas como, los
requisitos contenidos en esta parte, a saber: (i) Dirección General de Servicios de Salud Manual. (Ii) Otras organizaciones o
-No persona General donar sangre y ningún banco de sangre deberá extraer la sangre de una persona, más de una vez en tres
meses. El donante deberá estar en buena salud, mentalmente alerta y en buena forma física y no será presos de la cárcel, las
personas que tienen múltiples parejas sexuales y drogadictos. Los donantes deberán cumplir los siguientes requisitos, a saber:
(a)
del donante será en el grupo de edad de 18 a 60 años. (segundo)
las presiones arteriales sistólica y diastólica son dentro de lo normal sin límites
medicación; (mi) hemoglobina que no deberá ser inferior a 12,5
gramos; (F)
el donante debe estar libre de cualquier enfermedades de la piel en el sitio de flebotomía; (H)
el donante debe estar libre de cualquier enfermedad transmisible por transfusión de sangre, en lo
lo que puede ser determinado por la historia y examen se ha indicado anteriormente; (yo)
los brazos y antebrazos del donante deberán estar libres de pinchazos o cicatrices indicativos de donantes de sangre
Ninguna persona podrá donar sangre, y ningún banco de sangre deberá extraer la sangre de un donante, en las condiciones
mencionadas en la columna (1) de la Tabla dada a continuación antes de que expire el período de aplazamiento mencionado en la
columna (2) de dicho cuadro .
396
Aplazamiento de la donación de sangre ( continuado)
(yo) Inmunización (cólera, 15 días
Tifoidea, la difteria, el tétanos plaga,
gammaglobulina)
(J) vacuna contra la rabia 1 año después de la vacunación
(K) Historia de la hepatitis en 12 meses
la familia o el contacto directo
(L) inmunoglobulina 12 meses
2. Ninguna persona podrá donar sangre y ningún banco de sangre deberá extraer la sangre de una persona,
que sufre de cualquiera de las enfermedades mencionadas a continuación, namely.- una
Cáncer
segundo. Enfermedad del corazón
j. Tuberculosis
k, Policitemia vera
YO. Asma
metro. Epilepsia
norte. Lepra
o. Esquizofrenia
pag. Desordenes endocrinos
camas donantes, sillas y mesas: Estos deben estar protegidos adecuadamente y comfortbly y deben ser de tamaño apropiado. (Ii) Mesilla
de noche. (Iii) Esfigmomanómetro y un estetoscopio. (Iv) camas de recuperación para los donantes. (V)
capilares.
397
hemoglobinómetro de Sahli / método Colorimeteric.
(yo) Los termómetros clínicos. (Ii) Watch (equipado con un segundo mano) y
un cronómetro.
4. Para contenedores de sangre: (a) Sólo desechables bolsas de sangre de PVC se deben usar (sistema cerrado) según
la
especificaciones de IP / USP / BR (b) Anticoagulantes:
solución de citrato fosfato dextrosa (CPD) o citrato fosfato dextrosa adenina 1 (CPDA-1), 14 ml. será
necesaria solución para 100 ml de sangre.
NOTA 1.
(yo) En caso de las bolsas individuales / doble / triple / cuádruple de recogida de sangre utilizadas para las preparaciones de componentes de la sangre, se
solución de citrato ácido de dextrosa (ACD con la Fórmula-A). IP, será necesaria una solución de 15 ml para 100 ml de
sangre. (Iii)
soluciones aditivo tal como SAGM, ADSOL, Nutricel se pueden usar para almacenar y retener los glóbulos
rojos de la sangre hasta 42 días.
NOTA 2.
los licenciatario velará por que las soluciones anti-coagulantes son de un fabricante con licencia
y el bolsas de sangre en la que están contenidas las citadas soluciones tienen un certificado de análisis de la dicho fabricante.
6. Accesorios: (i)
Tales como mantas, cuencas emesis, pinzas hemostáticas, abrazaderas de ajuste, fórceps de esponja, gasa,
tarros vestidores, frascos, latas de soluciones de desecho.
Incinerador
398
Equipo de laboratorio:
(yo) refrigeradores, para el almacenamiento de kits y reactivos de diagnóstico, el mantenimiento de una temperatura
entre 4-6 0 C + 2 0 C con dial digital termómetro que tiene provisión para
fuente de alimentación continua. (Ii)
deslizamiento.
Incubadora
(Vi) con control termostático. (Vii) agitadores mecánicos para las pruebas
serológicas para la sífilis. (Viii) Hand-lente para la observación de las pruebas realizadas en
vidrio (xii) Tubos de ensayo de varias placas de tamaños / de micropocillos (U o de tipo V) (xiii) tubos precipitantes de 6 mm x 50
especificaciones, (xv)
Temporizador de intervalos eléctrico o de resorte de la herida, (xvi) Equipo y materiales para la limpieza de artículos de
vidrio de manera adecuada, (xvii) Aislado contenedor para el transporte de sangre, entre centígrados 2 grados a 10
de lavado (xix) Los papeles de filtro (xx) sellador de tubo dieléctrico. (Xxi) viales Plain y
EDTA (xxii) equilibrio químico (cuando sea necesario) (xxiii) lector de ELISA con la
J. reactivos especiales:
(1) Standard grupo sanguíneo sueros anti-A, anti-B y anti-D con controles conocidos. la tipificación Rh
sueros deberá estar en cantidad doble y cada uno de diferente marca o si de la misma, suministrando cada suministro deberá ser de diferentes
números de lote. (2) Reactivos para pruebas serológicas para la sífilis y sueros positivos para los controles. (3) Anti-humano globulina en suero (suero de
Coombs) (4) Albúmina bovina 22 por ciento y enzimáticos reactivos para anticuerpos incompletos. (5) ELISA o RPHA kits de prueba para la hepatitis B y C y
VIH I y II. (6) Detergentes y otros agentes para la limpieza de artículos de vidrio de laboratorio.
399
Transfusion Medicine T Manual técnicaLista
K. PRUEBA DE SANGRE:
(1) Será responsabilidad del titular de la licencia para asegurarse de que toda la sangre recogida
se ajusta procesados y suministrados a las normas establecidas en la Farmacopea India y otros ensayos publicados, en
su caso, por el Gobierno. (2) La libertad de VIH anticuerpos (SIDA) Prueba -Cada titular deberá obtener muestras de cada
unidad de sangre de prueba, antes de su uso, por la libertad de anticuerpos ya sea desde los laboratorios especificados para el
efecto por el Gobierno Central o en su propio laboratorio de VIH I y II VIH. Los resultados de tales pruebas se registrarán en la etiqueta
del recipiente. (3) Cada unidad de sangre también se someterá a ensayo para la libertad de antígeno de superficie de Hepatitis B, y
anticuerpo virus de la hepatitis C, VDRL y malaria parásito y los resultados de tales pruebas se registrarán en la etiqueta
del recipiente.
NOTA:
(una) Las muestras de sangre de donantes en tubo piloto y las muestras de sangre del receptor serán
conservada durante 7 días después de su emisión. (segundo) La sangre destinada a la transfusión no se
congela en cualquier etapa. (do) contenedores de sangre no vendrán directamente en contacto con el hielo en
cualquier etapa.
L. Registros:
Los registros que se requiere el licenciatario para mantener incluirán entre otras cosas, los datos siguientes, a saber: -
(1) registro de donantes de sangre: Se deberá indicar el número de serie, fecha de sangrado, nombre, edad, dirección
y la firma del donante con otras particularidades de la edad, el peso, hemoglobina, agrupación de sangre, presión arterial,
examen médico, número de bolsa y el detalle del paciente para quien donado
en caso de donaciones de reposición, categoría de donación (voluntaria / reemplazo) y
expedientes de aplazamiento y la firma del médico oficial de InCharge. (2) Los registros maestros de la sangre y sus componentes: Se deberán indicar el
colección, fecha de caducidad, la cantidad en ml. ABO / Rh Grupo, como resultado de las pruebas de VIH I y II VIH anticuerpos,
malaria, VDRL, antígeno de superficie de la Hepatitis B y anticuerpos irregulares (si existe), nombre y dirección del
el donante con datos, número de emisión de utilización,
componentes preparados o desechados y la firma del médico oficial InCharge. (3) Registro de Emisión: Se indicará el número de
serie, fecha y hora de emisión, número de serie de la bolsa,
ABO / Rh Grupo, cantidad total en ml, nombre y dirección del destinatario, grupo de destinatario,
unidad / institución, los detalles del informe de las pruebas cruzadas, indicación para la transfusión. (4) Los
se mantendrán.
400
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
NOTA: Lo anterior dijo que los registros serán conservados por el titular de la licencia por un período de cinco años.
M. ETIQUETAS:
los etiquetas de cada bolsa que contiene la sangre y / o componente deberá contener la siguiente
datos, a saber:
(1) El nombre correcto del producto en un lugar prominente y en negrita en la bolsa. (2) Nombre y dirección del banco de sangre (3) Número
de licencia (4) Número de serie (5) La fecha en la cual se extrae la sangre y la fecha de expiración como se prescribe en la Lista
P a estas reglas. (6) Una etiqueta de color deberá ser puesto en cada bolsa que contiene la sangre. El siguiente esquema de colores
O Azul
UNA Amarillo
segundo Rosado
AB Blanco
(7) Los resultados de las pruebas para el antígeno de la hepatitis B de superficie, y el anticuerpo virus de la hepatitis C, la sífilis, la libertad de
anticuerpos VIH I y VIH II y parásito de la malaria. (8)
El grupo Rh. (9)
Volumen total de la sangre, la preparación de la sangre, la naturaleza y el porcentaje de anti-coagulante. (10)
Mantener continuamente la temperatura a 2 ° C-6 ° C para la sangre y / o componentes humana entera que figuraba bajo III de la
Parte XIIB. (11)
equipos de transfusión con filtro desechables se utilizan en equipos de administración. (12)
cruz compatible adecuada emparejado sangre sin un anticuerpo típico de destinatario se utilizará. (13)
El contenido de la bolsa no se utilizarán si hay alguna evidencia visible de deterioro como la hemólisis, la coagulación o
decoloración. (14)
La etiqueta deberá indicar la clasificación de los donantes apropiados como “Donante Voluntario” o
“Donante de reposición” de no menos importancia que el nombre propio.
NOTAS:
1. En el caso de componentes de la sangre, las referencias de la sangre de la que se han preparado estos componentes serán
dados contra números de artículos (5), (7), (8), (9) y (14).
2. La sangre y / o sus componentes se distribuirán sobre la prescripción de un médico practicante registrado.
401
medicina transfusional Manual técnico
(do) la Sociedad India de la Cruz Roja o (d) un banco de sangre con licencia a cargo de las organizaciones de voluntarios o de beneficencia registrados
reconocido
por estado o territorio de la Unión Consejo de Transfusión de Sangre.
NOTAS:
(yo) “Designado Regional de Transfusión de Sangre” será un centro autorizado y designado por un Consejo de Transfusión
de Sangre constituido por un Gobierno del Estado para recoger, procesar
y distribuir la sangre y sus componentes para atender a las necesidades de la región y que el centro también ha sido
autorizada y aprobada por la Autoridad de Licencias y autoridad de aprobación de licencia con el propósito central. (Ii) El
designado Regional de Transfusión de Sangre, banco de sangre y Gobierno de la India
Sociedad de la Cruz Roja se íntimas dentro de un período de siete días, el lugar donde la sangre
campo se llevó a cabo y los detalles del grupo sabia unidades de sangre recogidas en dicho campo a la oficina de licencias y la autoridad de
Para recoger la sangre de 50 a 70 donantes en aproximadamente 3 horas o de 100 a 120 donantes en 5 horas, los siguientes requisitos
deberán cumplirse / cumplirse: -
(yo) Un oficial médico y dos enfermeras o flebotomistas para la gestión de 6-8 mesas de donantes; (Ii) dos trabajadores sociales médico; (Iii) tres
técnicos de bancos de sangre; (Iv) dos asistentes; (V) vehículo que tiene una capacidad para asentar 8-10 personas, con previsto el transporte de
donación
bienes que incluyen instalaciones para llevar a cabo un campamento de la donación de sangre.
402
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
(C) Equipo:
1. aparato de BP.
2. Estetoscopio.
3. Las bolsas de sangre (simple, doble, triple, cuádruple)
4. cuestionario para los donantes.
5. dispositivo de pesaje para los donantes.
6. dispositivo de pesaje para bolsas de sangre,
7. pinzas hemostáticas, tijeras.
8. Stripper para tubos de sangre.
9. sábanas, mantas / colchón.
10. selecciones de lancetas, hisopo / diente.
11. Diapositivas de vidrio.
12. Portable metros Hb / sulfato de cobre.
13. tubo de ensayo (grande) y 12x100 mm (pequeño)
14. Soporte para tubos de ensayo.
15. Anti-A, Anti-B y Anti.AB, antisueros y Anti-D
dieciséis. Tubo de ensayo film sellador.
17. cinta adhesiva medicado.
18. cesto de basura de plástico
19. Las tarjetas de donación y refresco para los donantes.
20. El botiquín de emergencia
21. contenedores de bolsa de sangre aisladas con disposiciones para almacenar entre 2 ° - 10 ° C
22. sellador dieléctrico o sellador de tubo portátil
23. destructor de agujas (cuando sea necesario)
III. PROCESAMIENTO de los componentes sanguíneos de la sangre entera POR un banco de sangre
Los componentes sanguíneos serán preparados por los bancos de sangre como parte de los servicios de banco de sangre. Las condiciones para la concesión o renovación de
la licencia para preparar componentes de la sangre serán los siguientes: -
(UNA) ALOJAMIENTO:
(1) Habitaciones con un área adecuada y otras especificaciones, para la preparación de componentes de la sangre
dependiendo de la cuantía de la carga de trabajo serán los especificados en el punto B en la rúbrica “I. BANCOS DE SANGRE /
componentes de la sangre”de esta parte.
(2) Preparación de componentes de sangre se llevará a cabo sólo bajo sistema cerrado usando,
doble, bolsas triples o cuádruples de plástico, excepto para la preparación de los glóbulos rojos
Concentrados, donde las bolsas individuales se pueden usar con bolsas de transferencia.
(SEGUNDO) EQUIPO:
(yo) Aire acondicionado; (Ii) banco de flujo de aire laminar; (Iii) centrífuga
refrigerada adecuado; (Iv) exprimidor de plasma (v) Clipper y
clips y o sellador dieléctrico;
403
medicina transfusional Manual técnico
(DO) PERSONAL:
Durante todo el tiempo competente técnico El personal destinado para el procesamiento de los componentes sanguíneos (que es
Médico, Supervisor Técnico, Técnico del Banco de Sangre y enfermera registrada) serán los especificados en el punto C, bajo
la rúbrica “I. Los bancos de sangre / componentes de la sangre”de esta
Parte.
Requerimientos generales :
(una) Almacenamiento: Inmediatamente después de la transformación, Los glóbulos rojos empaquetados se mantienen a una
temperatura se mantuvo entre centígrados 2 grados a 6 grados centígrados. (segundo) Inspección: El componente deberá ser
inspeccionado inmediatamente después de la separación de el plasma,
durante el almacenamiento y otra vez en el momento de su emisión. El producto no deberá ser emitido si hay alguna anormalidad
en color o físico apariencia o alguna indicación de microbiana
contaminación. (do) se obtendrá La sangre fuente de concentrado de glóbulos rojos: Idoneidad de Donante
de un donante que cumple los criterios de donación de sangre como se especifica en el punto H en el apartado “I. BANCOS DE
SANGRE / componentes de la sangre”de esta parte. (re) Pruebas de Sangre Total: Sangre de la que de glóbulos rojos empaquetados
se preparan deberá
ser probado como se especifica en el punto K en relación a las pruebas de sangre entera bajo los “componentes BANCOS I.BLOOD /
Blood” la partida de esta parte.
404
(E) las muestras piloto: muestras piloto recogidos en integral tubos o en piloto separada tubos deben
cumplir las siguientes especificaciones: (i) Una o más muestras piloto de cualquiera de la sangre original o de la Sangre rojos
empaquetados
Las células que se están procesando se conservarán con cada unidad de glóbulos rojos empaquetados que se emiten. (Ii) Antes de ser
llenados, todos los tubos de muestra piloto deberán estar marcados o identificados de manera que se
relacionarlos con el donante de esa unidad o concentrados de glóbulos rojos. (Iii) Antes
de que el recipiente final está vacío o al el tiempo que el producto final Esta preparado, la
tubos de muestra piloto que acompañan a una unidad de glóbulos rojos empaquetados, se adjuntan en el
una de manera a prueba de manipulaciones ese deberá conspicuamente identificar eliminación y re-
adjunto archivo. (Iv) Todos los tubos de muestra piloto, que acompaña a una unidad de glóbulos rojos empaquetados, se llenarán
inmediatamente después de que se recogió la sangre o por lo el tiempo que el producto final Esta preparado,
en cada caso, por la persona que realiza la recogida de preparación.
(F) Procesamiento:
(yo) Separación: de glóbulos rojos empaquetados se separan de la sangre entera, - (a)
si toda la sangre se almacena en solución ACD dentro de 21 días, y (b)
si toda la sangre se almacena en solución CPDA-1, dentro de los 35 días, desde la fecha de colección- de glóbulos
rojos empaquetados se pueden preparar ya sea por centrifugación hecho de una manera que no se tenderá a aumentar
la temperatura de la sangre o por la normalidad sedimentación sin perturbaciones “método. Una porción de
el plasma, suficiente para asegurar
conservación óptima de la célula, se dejó con los concentrados de glóbulos rojos.
(Ii) de glóbulos rojos empaquetados congelados: sustancia Cryophylactic se puede añadir a la
De glóbulos rojos empaquetados para el almacenamiento del fabricante extendida no wanner de menos 65 ° C
siempre que el fabricante envía datos a la satisfacción de la concesión de licencias
Autoridad y autoridad de aprobación de licencias central, como demostrando de manera adecuada
a través de células de supervivencia in vivo y otras pruebas apropiadas que la suma de la
sustancia, del material utilizado y los métodos de transformación da como resultado un producto final cumple con los
estándares requeridos de seguridad, pureza y potencia para de glóbulos rojos empaquetados, y que
el producto congelado deberá mantener esas propiedades para el especificado
periodo de caducidad. (Xiv) De pruebas: de glóbulos rojos empaquetados deberán ajustarse a las normas establecidas en el
Farmacopea India.
Requerimientos generales :
(yo) Fuente: El material de origen para las plaquetas deberán ser plasma rico en plaquetas o capa leucocitaria
que puede obtenerse de la sangre entera o por plaquetoféresis. (Ii) Procesamiento de (a) La separación de la capa leucocitaria o
plasma rico en plaquetas y las plaquetas y re-suspensión de
405
medicina transfusional Manual técnico
Las unidades preparadas a partir de diferentes donantes se someterán a ensayo en el final de la almacenamiento
período para - (a) El recuento de plaquetas: (b) pH de no menos de 6 medido a la temperatura de
almacenamiento de la unidad; (do) medición del volumen de plasma actual; (re) uno por ciento del total de las
plaquetas preparadas se les realizarán pruebas de esterilidad; (mi)
las pruebas de viabilidad funcional de las plaquetas se hará por turbulencia movimiento antes de la emisión; (F)
406
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
(5) CRIOPRECIPITADO:
El concentrado de factor anti-hemofílico será preparado por descongelación de el plasma fresco congelado
se almacena a -30 ° C.
(una) almacenamiento:
El crioprecipitado se conserva a una temperatura no superior a -30 ° C y puede ser conservado durante un periodo de no más de un
año desde la fecha de recogida.
(segundo) Actividad :
la actividad del factor antihemofílico en el producto final no deberá ser menos de 80 unidades por bolsa. Uno
por ciento de la crioprecipitado total preparado se someterá a ensayo de los cuales setenta y cinco por ciento de la unidad se ajustará a dicha
especificación.
Una superficie de 10 metros cuadrados se proporcionará para la aféresis en el banco de sangre. Los bancos de sangre permiten
específicamente para llevar a cabo dicha aféresis en el donante deberá observar los criterios como se especifica en el punto H en relación
con los criterios de donación de sangre en el epígrafe “sangre COMPONENTES DEL BANCO / sangre” de esta parte. El consentimiento por
escrito del donante será tomado, y el donante debe ser explicado,
los peligros de aféresis. El médico deberá certificar que es donante
apto para aféresis y se llevará a cabo por una persona entrenada bajo la supervisión del oficial médico.
NOTA: ( yo) Al menos 48 horas deben transcurrir entre aféresis sucesiva y no más de dos veces en una
semana. (Ii) el volumen de sangre Extracoporeal no excederá del 15% del volumen sanguíneo estimado del donante, (iii) trombocitaféresis no
se llevará a cabo en los donantes que han tomado medicamentos que contengan
407
medicina transfusional Manual técnico
PARTE XIIC
A REQUISITOS GENERALES:
1. Ubicación y el entorno, los edificios y el suministro de agua:
Los requisitos relativos a la ubicación y los alrededores, los edificios y el suministro de agua contenidas en los párrafos
1.1.1,1.1.2,1.1.3 de la parte I del Anexo M se aplicarán mutatis mutandis a la fabricación de productos de la sangre.
408
Requisitos reglamentarios transfusión de sangre y Seguridad
área se llevará a cabo durante las operaciones de fabricación. Los resultados de estos conteos deberá
cotejarse con bien documentada los estándares internos y mantenerse registros.
Acceso a las áreas de fabricación deberá ser restringido a un número mínimo de
autorizado personal. Especial procedimientos para entrar y dejando de la
Se expondrá visiblemente áreas de fabricación. (Iii) Sumideros serán excluidos de las zonas asépticas. Cualquier fregadero
instalado en otras áreas limpias
deberá ser de material adecuado como inoxidable acero, sin un desbordamiento, y se
alimentado con agua de calidad potable. Se tomarán las precauciones adecuadas para evitar la contaminación
de la drenaje sistema con peligroso efluentes y aerotransportado
difusión de microorganismos patógenos. (Iv) Iluminación,
aire acondicionado, ventilación deberá ser diseñado mantener una satisfactorio
temperatura y humedad relativa para minimizar la contaminación y para tener en cuenta la comodidad de los personales que
trabajan con la ropa de protección, (v) Locales utilizados para
la fabricación de productos de la sangre estará diseñada adecuadamente y
construido para facilitar un buen saneamiento, (vi) Local
deberá ser cuidadosamente mantenido y eso deberá garantizarse ese reparar y
operaciones de mantenimiento no presentan ningún peligro para la calidad de los productos. locales deberán
ser limpiado y donde aplicable, desinfectado conforme detallado por escrito
procedimientos validados, (vii) Adecuado
instalaciones y equipos deberá ser usado para la fabricación de sangre
productos derivados de plasma de la sangre, (viii) Todos
envases de productos de la sangre, a pesar de la fase de fabricación, deberá ser
identificado por firmemente sujeto etiquetas. Cruzar contaminación deberá prevenirse
adopción de las siguientes medidas, a saber: - (a)
procesamiento y llenado deberán estar en áreas segregadas; (segundo)
fabricación de diferentes productos al mismo tiempo deberá ser evitado; (do)
llenado simultáneo de los diferentes productos se evitará; (re)
asegurar transferir, contenedores / materiales por medio de esclusas de aire, extracción de aire, ropa
cambiar y cuidadoso lavado y descontaminación de equipos; (mi)
la protección de contenedores / materiales contra la riesgo de la contaminación causada por re-
circulación de aire sin tratar o por accidental re-entrada de aire extraído; (F)
el uso de contenedores que se esterilizan o son de “carga biológica” documentado baja;
(Ix) zona de presión positiva se dedica al área de procesamiento que se trate; (X) Las unidades de aire de
manipulación se dedican al área de procesamiento que se trate; (Xi) tuberías,
válvulas y de ventilación filtros deberá estar debidamente diseñada para facilitar la limpieza
y sterlisation. válvulas en fraccionamiento / buques que reaccionan deberá ser completamente vapor-
sterlisable. Aire respiraderofiltros deberá ser hidrófobo y deberá validarse para su
uso designado;
5. Zonas auxiliares:
(yo) Descanso y refrigerio habitaciones deben estar separados de otras áreas. (Ii) Instalaciones
para cambiar y guardar la ropa y para el lavado y aseo debe ser fácilmente accesible y adecuada para
el número de usuarios. Los inodoros no serán
conectado directamente con las zonas de producción o de almacenamiento, (iii) Los talleres de mantenimiento deben estar
separadas de las zonas de producción. Dondequiera piezas
409
medicina transfusional Manual técnico
claramente marcada y su acceso restringido sólo el personal to.authorised. (5) Habrá área de muestreo separado para
las materias primas. Si el muestreo se realiza en
el área de almacenamiento, que se llevará a cabo de tal manera a fin de evitar la contaminación o la contaminación cruzada. (6) La
segregación deberá ser proporcionada por
el almacenamiento de los rechazados, se recuerda, o devuelto
materiales o productos. (7) instalación adecuada será suministrada para el suministro de material auxiliar, tal como etanol,
agua, sales y polietilenglicol. Instalaciones separadas se proporcionan para la recuperación de disolventes orgánicos
utilizados en el fraccionamiento.
C. personal;
1. Fabricación:
La fabricación de productos de la sangre se llevará a cabo bajo la dirección activa y
supervisión personal de competente personal técnico, que consta de por lo menos una persona que
deberá ser un empleado a tiempo entero, con un año de experiencia práctica en la fabricación de productos de sangre
fraccionamiento / plasma y posee - (a) Post-grado
la licenciatura En medicina - MD (Microbiología / Patología / Bacteriología /
Inmunología / Bioquímica); o
410
seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
2. Pruebas:
La cabeza de la unidad de pruebas será independiente del la unidad de fabricación y pruebas
deberá ser llevada a cabo bajo la dirección activa y personal supervision de competente
el personal técnico que consta de por lo menos una persona que deberá ser un empleado a tiempo entero. los
Jefe de la unidad de ensayo debe tener experiencia práctica dieciocho meses en la prueba de drogas, especialmente los
productos sanguíneos y posee -
(una) Postgrado la licenciatura en Farmacia o Science- (Química / Microbiología / Bio-
química); o (b) Poste grado
graduado En medicina -MD (Microbiología / Patología / Bioquímica),
de una universidad reconocida o institución
D. CONTROL DE PRODUCCIÓN:
(1) La zona de producción y la sala de inactivación viral serán aire acondicionado central y
equipado con filtros HEPA que tiene ambiente como se da en la siguiente Tabla Grado C (Clase 10.000). (2) El
relleno y el sellado se llevarán a cabo en condiciones asépticas en aire centralmente
áreas acondicionado equipados con filtros HEPA teniendo grado A o, en su caso, de grado B (100 Class) entorno
dado en dicho cuadro.
MESA
AIRE SISTEMA DE CLASIFICACION DE FABRICACIÓN DE PRODUCTOS estéril. El número máximo de
(3) Las operaciones físicas y químicas que se utilizan para la fabricación de fraccionamiento de plasma
deberá mantener un alto rendimiento de proteína seguro y eficaz. (4) El procedimiento de fraccionamiento utilizado dará un buen
rendimiento de productos que cumplen los in-
requisitos de calidad de la casa según lo aprobado por la Autoridad de Licencias y Central License autoridad de
aprobación reducir el riesgo de contaminación microbiológica y la desnaturalización de proteínas al mínimo. (5) El
procedimiento adoptado no afectará a la actividad de los anticuerpos y la vida media biológica o
411
medicina transfusional Manual técnico
NOTAS: ( 1) No conservante (excepto estabilizador para evitar la desnaturalización-proteína tal como glicina, sodio
F. Control de calidad:
Se proveerán instalaciones separadas para el Control de Calidad tales como hematológica, Bio-química,
Físico-química, Microbiológico, Pirógenos. Instrumental y La seguridad pruebas. La calidad
Departamento de Control tendrá entre otras, las siguientes funciones principales, namely.-
(1) Para preparar instrucciones detalladas, por escrito para la realización de pruebas y análisis. (2) Para aprobar o rechazar las materias primas, componentes,
contenedores, dispositivos de cierre, materiales en proceso,
material de embalaje, etiquetado y los productos terminados. (3) Autorizar o rechazar el lote de productos terminados, listos para
su distribución. (4) Para evaluar la idoneidad de las condiciones bajo las cuales las materias primas, semi-acabado
productos terminados y se almacenan. (5) Para evaluar la calidad y estabilidad de los productos terminados y cuando sea necesario de
las materias primas
materiales y productos semi-acabados. (6) Para revisar los registros de producción para asegurar que no se han producido errores o
si tienen errores
ocurrieron que han sido ampliamente investigadas. (7) Para aprobar o rechazar todos los procedimientos o especificaciones que impactan
sobre la identidad, la fuerza,
la calidad y la pureza del producto (8) Para establecer los requisitos de vida útil de almacenamiento y sobre la base de pruebas de estabilidad
relacionados con
condiciones de almacenaje.
(9) Para establecer y cuando sea necesario revisar, procedimientos de control y especificaciones. (10) Para examinar las
reclamaciones, recuerda, productos e investigaciones llevadas a cabo devueltos o recuperados
en virtud del mismo para cada producto
(11) Para revisar la fórmula maestra Records / Tarjetas periódicamente.
412
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
(I) Los productos finales se almacenarán entre 2 ° C - 8 ° C, a menos que se especifique lo contrario por el
Autoridad de aprobación de licencia central. (Iii)
La vida útil asignada a los productos por parte del titular de la licencia será sometido a la
aprobación a
la Autoridad de Licencias y Central License autoridad de aprobación.
I. ETIQUETADO
Los productos fabricados se clasificarán como se especifica en la Farmacopea India, el británico
Farmacopea o los Estados Unidos Farmacopea que sea además de cualquier otra
. requisito establecido en la Parte IX o X Parte de estas reglas Las etiquetas deberán indicar los resultados de las pruebas para el antígeno de la
hepatitis B de superficie y el anticuerpo virus de la hepatitis C, la libertad de anticuerpos VIH I y VIH II.
RECORDS J.:
El titular de la licencia deberá mantener registros de acuerdo con el Anexo U y también cumplir con los registros de fabricación por lotes según se
especifica en el párrafo 9 de la Parte I de la Lista M y cualquier otro requisito que pueda ser dirigida por Autoridad de Licencias y autoridad de
aprobación de licencia central.
(I) la patente o nombre comercial del producto alongwith el nombre genérico, en su caso, la fuerza
y la forma de dosificación;
(Ii) una descripción o identificacion de el final contenedores, materiales de embalaje, y etiquetas
cierres para ser utilizado;
(Iii) la identidad, cantidad y calidad de cada materia prima para ser utilizado independientemente de si
o no que aparece en el producto acabado. El exceso admisible que puede ser incluido en un lote formulado se
indicará;
(Iv) una descripción de todos los buques y equipos y los tamaños utilizados en el proceso; (V) de
fabricación y control instrucciones junto con los parámetros de crítica etapas tales como
mezcla, el secado, mezcla, tamizado y esterilizante la producto;
(Vi) la rendimiento teórico que se espera de la formulación a diferentes las etapas de
fabricar y límites de rendimiento admisibles;
(Vi) instrucciones detalladas sobre precauciones que deben tomarse en la fabricación y almacenamiento de medicamentos
y de productos semi-acabados; y (vii)
los requisitos en proceso de control de calidad pruebas y análisis a llevar a cabo durante
cada escenario de la fabricación incluso la designación de personas o departamentos
responsable de la ejecución de tales pruebas y análisis.
Cuando los productos sanguíneos, tales como albúmina, proteína de plasma Fracción, inmunoglobulinas y
Factor de coagulación concentrados se fabrica a través de las actividades de fabricación de relleno
y sellar los productos de la sangre a partir de polvo a granel o solución o ambos, los requisitos que se
aplicará a la fabricación de productos de la sangre de la sangre entera se aplicarán mutatis mutandis a dicha fabricación de productos de
la sangre, a menos que otros requisitos han sido aprobados por la autoridad de aprobación de licencias central.
413
medicina transfusional Manual técnico
directrices para la aprobación de la sangre y o sus componentes centros de almacenamiento gestionados por Primera
Remisión Unidad, Community Health Center, centro de atención primaria o de cualquier hospital:
Ministerio de Salud y Bienestar Familiar (Deptt. De Salud) la notificación vide No GSR 909 (E) de 20 de diciembre,
2001 centros de almacenamiento de sangre exentas a cargo de la Unidad de Referencia de Primera (FRU),
Community Health Center, Centro de Salud Pública (PHC) o cualquier hospital del ámbito de
la obtención de la licencia para la operación. Esta notificación se ha insertado en la Lista K de Medicamentos y Cosméticos reglas,
1945 bajo 5B NO- serie. El objetivo principal de esta notificación es hacer abundante disponibilidad de toda la sangre humana o sus
componentes a los citados hospitales sin teniendo licencia.
Sin embargo, esta exención es aplicable a aquellos centros que están transfundir sangre y / o sus
componentes de menos de 2000 unidades por año.
Con el fin de garantizar la seguridad y calidad de la sangre y / o de sus componentes para ser almacenados en dichos centros de almacenamiento de sangre,
las siguientes condiciones son aplicables antes de obtener la exención de la
ámbito de toma de una licencia de los respectivos controladores Drugs Estado: - (1)
La primera unidad de referencia, Community Health Center, Centro de Salud y / o cualquier hospital deben ser aprobados por el
Territorio Estado / Unión Licensing Authority después de satisfacer las condiciones y facilidades a través de la inspección. (2)
El consumo cautivo de IP sangre humana o sus componentes en la primera unidad de referencia, Community Health
Center, Centro de Salud y / o cualquier hospital no deberá contener más de 2000 unidades al año. (3) La sangre humana
entera y / o sus componentes deberán ser adquiridos solamente de Gobierno
Los bancos de sangre y / o indio Cruz Roja de Banco de Sangre y / o Centros Regionales de Transfusión de sangre debidamente
licenciados. (4) La aprobación será válida por un período de dos años a partir de la fecha de emisión a menos que sea
suspendido o cancelado y la primera unidad de referencia, Community Health Center, Centro de Salud o el hospital deberán
solicitar la renovación de la Autoridad de Licencias Estado tres meses antes de la fecha de expiración de la autorización. (5) La Unidad
de Referencia En primer lugar, Community Health Center, centro de atención primaria y / o cualquier
Hospital deberá tener el siguiente personal técnico para el almacenamiento de la sangre o de sus componentes: - (a) Un oficial médico entrenado
para la adquisición, almacenamiento y pruebas cruzadas de sangre y
/ O sus componentes. Él / ella también será responsable de la identificación de hemolizado de sangre y garantizar la no provisión de la fecha de
vencimiento de la sangre o de sus componentes. (segundo) Un técnico de banco de sangre con la calificación y experiencia, como se especifica en la
Parte B del XII
Lista F o un técnico de laboratorio experimentado entrenado en determinación del grupo sanguíneo y pruebas cruzadas.
(2) La primera unidad de Referencia. Community Health Center, Centro de Salud y el Hospital tendrán una superficie de 10 m². Metros.
Eso será así iluminado, limpio y preferiblemente aire.
acondicionado. refrigerador para bancos de sangre de capacidad apropiada equipado con dispositivo de alarma y
Indicador de la temperatura con un seguimiento regular la temperatura se proporciona para almacenar la sangre
414
Transfusión de sangre segura y los requisitos reglamentarios
requisitos para eximir a la primera unidad de remisión, Community Health Center, Primaria
Centro de salud o cualquier hospital como centro de almacenamiento de la sangre y sus componentes, o:
1. El solicitante tendrá como primera unidad de referencia, Community Health Center, Centro de Salud o cualquier hospital.
2. El aplicante deberá proporcionar una empresa a la Autoridad para licenciar ese el cautivo
consumo de sangre humana entera o componentes no será más de 2000 unidades anualmente.
3. El solicitante lista de equipos necesarios para el almacenamiento a saber refrigerador de banco de sangre con el sistema de alarma y
temperatura encerrar indicador. Una separacion lista de equipos para la sangre
componentes serían encerrados si propuesto para ser almacenados.
4. El solicitante deberá presentar la siguiente:
un nombre del médico responsable de la realización de la operación del centro de almacenamiento de sangre. b Arrested copias
certificadas de MBBS o MD cualificación c
Nombre, copias certificadas de calificación y experiencia del técnico banco de sangre.
d Nombre. copias certificadas y acreditados de cualificación y experiencia de los técnicos de bancos de sangre,
no tener calificación DMT.
5. El aplicante deberá proporcionar la fuente de adquisición de Sangre Total / Sangre humana
Componentes a saber, el nombre y la dirección de los bancos de sangre.
a. La fuente de obtención de sangre / componentes será de bancos de sangre con licencia a cargo de Gobierno. Hospitales / única Sociedad de la Cruz
Roja de la India / Centros Regionales de Transfusión Sanguínea. b Una carta de consentimiento de los bancos de sangre anteriores que tengan la
intención de suministrar sangre entera humana /
Los componentes sanguíneos a los centros de almacenamiento de sangre serán suministrados junto con la solicitud. do
El solicitante deberá presentar el plano de los locales. Una superficie mínima de 10 sq. Metros es
esencial para el Centro de Almacenamiento de sangre. re
Con el fin de satisfacer las condiciones y facilidades, una inspección de la propuesta de centro de almacenamiento de sangre puede ser llevada a cabo por el
respectivo Departamento de Control Estatal de Medicamentos. mi
El equipo de inspección también inspeccionará los bancos de sangre que hayan dado su consentimiento cartas para
seguramente de Whole Human Blood / Componentes. los grupo de inspección podrá verificar si la
Bancos de sangre tienen una cantidad suficiente de unidades de sangre para ser suministrado a los centros de almacenamiento de la sangre y también verificar el modo
de transporte o contenedores utilizados para el suministro de unidades de sangre /
415
medicina transfusional Manual técnico
La determinación de anticuerpos
contenidos c hemoglobina D HIV
I & II anticuerpos e
Antígeno de superfície para la hepatitis B
F anticuerpo de la hepatitis C
sol parásito de la malaria
h sífilis orVDRL
La etiqueta de la unidad de sangre probado contendrá los elementos anteriores con fecha de pruebas
antes de suministrar a los centros de almacenamiento de sangre.
El Banco de Sangre deberá mantener un registro separado para el suministro de unidades de sangre / componentes a centros de almacenamiento de sangre con todos
los detalles necesarios.
10. La validez de la aprobación se concederá por un período de 2 años a partir de la fecha de concesión de la homologación.
11. La Autoridad de Licencias del Estado remitirá los centros de almacenamiento de sangre aprobados a la
preocupados Oficial Zonal de inmediato.
12. Un formato de la proforma de aprobación está encerrado. (Apéndice VII).
416
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
APÉNDICE I
“Form27-C (Ver la
regla 122-F)
Solicitud de concesión / renovación * de licencia para el funcionamiento de un banco de sangre para el procesamiento de sangre total y / o *
preparación de componentes de la sangre,
1. Yo / Nosotros __________________________ de M / s ______________________________ la presente solicito la concesión de la licencia / renovación
de number______________________________________dated_________________ licencia para operar un banco de sangre,
para el procesamiento de sangre total y / o * para la preparación de sus
componentes en el at______________________________________ locales situados
3. El nombre (s), calificación y experiencia del personal técnico componente son las siguientes:
(una) Nombre (s) del oficial médico. (segundo) Nombre (s) del
Supervisor Técnico. (do) Nombre (s) de la enfermera registrada.
(re) Nombre (s) del Banco de Sangre del técnico.
4. Los locales y la planta son Listo para inspección ser Listo para inspección
_________________________________
Firma____________________________
417
medicina transfusional Manual técnico
ANEXO II
“Forma 27-E (Ver la
regla 122-F)
Solicitud para concesión / renovación de * licencia para la fabricación de productos de la sangre para venta
o distribución 1. Yo / Nosotros ___________________________ de M / s __________________________ la presente solicito
para la conceder de
/ renovación de licencias de dated___________________________ licencia number_______________________ para la fabricación de productos
de la sangre en el local situado at________________________
2. Nombre (s) del artículo (s):
1.
2.
3.
4.
3. El nombre (s), calificación y experiencia del personal técnico competente, conforme a: (a) responsable de
(B) el responsable de
fabricación pruebas
1. 1.
2. 2.
3. 3.
4. Los locales y las plantas son preparado para inspección / será ser preparado para inspección
en________________________________
15. Una tasa de licencia de rupias. ___________________________ y una tasa de inspección de rupias
____________________has ha acreditado al Gobierno en virtud el Jefe de Cuenta
_________________ (recibo adjunto).
Firma_____________________
418
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios APÉNDICE III
“Form28-C (Ver la regla
122-G)
Licencia para operar un banco de sangre para la recolección, almacenamiento y procesamiento de toda humana
sangre y / o sus componentes * para la venta o distribución
1. Número de la fecha de licence___________________ issue_____________________________ en los locales situados
at________________________________
2. m / s __________________________________ es por este medio con licencia para recoger, almacenar, proceso
y distribuir la sangre entera y / o sus componentes.
3. Nombre (s) del artículo (s):
1.
2.
3.
4. Nombre (s) del personal técnico competente: (a)
responsable de (B) el responsable de
Pruebas fabricación
1. 1.
2. 2.
3. 3.
5. La licencia autoriza licencia para fabricar, almacenar, vender o distribuir los productos de la sangre, con sujeción a las condiciones
aplicables a esta licencia.
6. La licencia deberá estar en vigor from______________________to______________________
7. La licencia estará sujeta a las condiciones indicadas a continuación y en las demás condiciones que se especifique de vez
en cuando en las Reglas hechas bajo la Ley de Medicamentos y Cosméticos de 1940.
5.
Firma______________________
CONDICIONES DE LICENCIA
1. El titular ni recoger la sangre de un donante profesional ni de donantes pagados ni podrá preparar componentes de la sangre
de la sangre extraída de un donante tales.
2. Esta licencia y cualquier certificado de renovación en vigor se muestra en el aprobado
locales y el original deberán presentarse en la solicitud de un inspector designado
bajo la Ley de Medicamentos y Cosméticos de 1940.
3. Cualquier cambio en el personal técnico será comunicada inmediatamente a la Dirección de Licencias y / o autoridad de aprobación
de licencia central.
4. El titular deberá informar a la Dirección de Licencias y / o Licencia central Aprobar
419
medicina transfusional Manual técnico
ANEXO IV
“Forma 28-E (Ver la
regla 122-G)
5. La licencia autoriza licencia para fabricar, almacenar, vender o distribuir los productos de la sangre, con sujeción a las condiciones
aplicables a esta licencia.
6. La licencia deberá estar en vigor from__________________to____________________.
7. La licencia estará sujeta a las condiciones indicadas a continuación y en las demás condiciones que se especifique de vez
en cuando en las Reglas hechas bajo la Ley de Medicamentos y Cosméticos de 1940.
Firma_____________________
Anticuado_______________________ Nombre y Designation__________________ Licencias
Licencia Authority____________________ central
autoridad de aprobación
420
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
CONDICIONES DE LICENCIA
1. El licenciatario no podrá fabricar productos de sangre de un donante profesional o de donantes pagados.
2. Esta licencia y cualquier certificado de renovación en vigor se muestran en los locales autorizados y el original será
expedida a petición de un inspector designado en virtud de la Ley de Medicamentos y Cosméticos de 1940.
APÉNDICE V
“Form26-G (Ver la regla
122-F)
Certificado de renovación de licencia para operar un banco de sangre para el procesamiento de toda humana
sangre y / o * para la preparación para la venta o distribución de sus componentes
autoridad de aprobación
421
medicina transfusional Manual técnico
ANEXO VI
“Forma 26-1 (Ver regla
122-1)
Firma____________________________
Nombre y Designation_________________
Anticuado:
422
Seguridad de las transfusiones de sangre y los requisitos reglamentarios
ANEXO VII
M / s _____________________________________________ Queda aprobado para almacenar los siguientes elementos en los locales
situados en __________________________________________ bajo la supervisión del personal técnico siguiente:
Designation________________________ Licencias
Authority___________________________
Fecha
CONDICIONES
El centro de almacenamiento de sangre deberá cumplir con las condiciones según se estipula en 5B del elemento
Anexo K de las Normas de medicamentos y cosméticos que también incluye como en: -
1. La concepción cautiva de sangre humana entera o sus componentes en el dicho centro por encima
no deberá contener más de 2000 unidades al año.
2. En el caso de cualquier cambio en el personal técnico se pondrán inmediatamente a la autoridad otorgante.
3. En el caso de anychange en el nombre del banco de sangre con licencia de los cuales se obtienen las unidades de sangre, la misma se
dio a entender a thelicensing autoridad para su aprobación.
4. El centro deberá solicitar la renovación de la aprobación de la autoridad de concesión de licencias de tres meses
antes de la fecha de expiración de la autorización.
5. El centro deberá mantener registros y los registros, incluyendo los detials de adquisición de la sangre * /
sus componentes
6. El centro deberá almacenar muestras de donantes, así como patients'sera por un período de 7 días después de
transfusión.
423
1. medicina transfusional Manual técnico
GLOSARIO
Absorción: La eliminación de un anticuerpo deseado a partir de un suero; a menudo se usa de manera intercambiable con la absorción.
antígeno adquirida: Antígeno no determinado genéticamente y, a veces transitoria.
Adsorción: Proporcionar un anticuerpo con su antígeno correspondiente en condiciones óptimas para que el anticuerpo se unirá al antígeno, eliminando de
este modo el anticuerpo a partir del suero; a menudo se usa de manera intercambiable con la absorción.
aglutinina (normal o típico): Un aglutinina que es regularmente presente en el suero de un individuo que carece de antígeno correspondiente sobre las células
rojas.
aglutinina { atípico): Un aglutinina irregular presente en el suero de un individuo que carece correspondiente antígeno anti-Ig D presente en Rh
(D) negativo persona.
aglutinina (frío): Un anticuerpo que reacciona a temperatura fría, cuya potencia disminuye con el aumento de la temperatura y a 35 ° C es muy semanas o
ausente.
aglutinina (Automático): Un aglutinina que reacciona con las células rojas de la persona en cuyo suero se encuentra; reacciona con las células rojas de la mayoría
del otro individuo también.
alelo: Una de dos o más genes diferentes que pueden ocupar un locus específico en un cromosoma.
Amorph: Un gen que no aparece para producir un antígeno detectable; un gen silencioso, tales como JK, Lu, O.
respuesta anamnésica: Una respuesta de anticuerpos acentuado tras una exposición secundaria a un antígeno. Los niveles de anticuerpos a partir de la exposición
inicial no son detectables en el suero del paciente hasta que las exposiciones secundarias, cuando se observa un rápido aumento de litros de anticuerpos.
prueba de la globulina anti-humana o prueba de antiglobulina ( AGT): Prueba para determinar la presencia o ausencia de recubrimiento de glóbulos rojos por la
inmunoglobulina G (IgG) o complemento, o ambos; prueba de la globulina anti-humana directa (DAT): Se utiliza para detectar en la sensibilización de células vivo. Indirecto
prueba globulina antihumana (IAT): Se utiliza para detectar antígeno - anticuerpo reacciones que se producen in vitro.
suero antihumano: Un anticuerpo preparado en conejos u otros animales adecuados que se dirige contra la inmunoglobulina humana o del complemento,
o ambos; utilizado para realizar la globulina anti-humana o la prueba de Coombs. El suero puede ser poliespecífico (anti - IgG más anti - complemento) o
monoespecíficos (anti IgG o anti - complemento).
anti - M lectina: Un reactivo de suero anti - M producido a partir de la planta Iberis amara.
Anti - N lectina: Un reactivo anti - suero N producido a partir de la planta Vicia graminea.
aféresis: Un método de recogida de sangre en el que se retira la sangre entera, un componente deseado separó y se conservó, y el
resto de la sangre devuelta al donante. Ver también Plaquetoféresis y plasmaféresis.
aplasia: El fallo de un órgano o tejido se desarrolle normalmente.
Arachis hypogoea: Una lectina de cacahuete utiliza para diferenciar polyagglutination T de Tn polyagglutination.
Autoabsorption: Un procedimiento para eliminar el anticuerpo de un paciente usando las propias células del paciente.
Control autólogo: Prueba de suero del paciente con sus propias células, en un esfuerzo para detectar la actividad de autoanticuerpos
bilirrubina: El pigmento de color amarillo anaranjado en la bilis llevado al hígado por la sangre; producida a partir de la hemoglobina de las células rojas de la sangre por
las células reticuloendoteliales de la médula ósea, el bazo y en otros lugares. biliubin directa: La forma soluble en agua conjugado de bilirrubina. bilirrubina indirecta: La
forma insoluble en agua no conjugada de la bilirrubina.
sustancias específicas de grupo de sangre: Los antígenos solubles presentes en los fluidos que se pueden utilizar para neutralizar sus correspondientes anticuerpos:
sistemas que demuestran sustancias de grupos sanguíneos specifiic incluyen ABO, Lewis, y sistemas de grupos sanguíneos P.
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Glosario
Filtros de sangre: (1) filtros de sangre estándar (primera generación) - tener filtros de pantalla con un tamaño de poro de 170 - 200 micras. Estos filtros se utilizan
para la sangre / componente transfusión y tienen capacidad para filtrar grandes derbis, como la fibrina y la formación de coágulos. ( 2) los filtros de microagregados
(segunda generación) - filtros de pantalla o de tipo de profundidad que eliminan agregados más pequeños de 170 micras. filtros de pantalla de microagregados tienen
tamaño de poro de 20 - 40 micras y eliminan eficazmente 70 - 90 por ciento de los leucocitos. ( 3) filtros de reducción de leucocitos (tercera generación) - adhesión
que eliminan eficazmente 99,0 a 99,9 por ciento de los leucocitos.
Bombay: Fenotipo ocurre en individuos que poseen genes normales A o B, pero que son incapaces de expresar ellos debido a que carecen del gen necesario
para la producción de antígeno H, el precursor requerido para A y B. Estas personas a menudo tienen una potente -H contra en su suero, que reacciona con
todas las células, excepto Bombays otros. También conocido
Quimera: Genetic Chimera: (1) Una persona que posee una población celular mixto derivado genéticamente de la. vínculos cigóticos distintas, por ejemplo, la
anastomosis vascular entre los gemelos durante la vida embrionaria. (2) quimerismo Dispermic: fertilización de un huevo con dos espermatozoides también
puede causar quimera.
Quimera artificial: La transfusión de sangre, trasplante de médula ósea, y de purga fetal / materna pueden resultar en quimera artificial.
Difosfato de cloroquina: Sustancia que se disocia de anticuerpos IgG a partir de células rojas con poco o ningún daño a la membrana de glóbulos rojos.
Cromosoma: Las estructuras dentro de un núcleo que contienen un hilo lineal de ADN, que transmite la información genética. Los genes se disponen
a lo largo de la hebra de DAN y constituyen porciones del ADN.
unidad comprometido a la eritropoyesis (CFU-E) formadoras de colonias: Una célula progenitora que se ha comprometido a la formación de células de la serie de glóbulos
rojos.
Formación de colonias-cultivo (CFU-C); Generación de células madre usando métodos de cultivo de tejidos. sinonimo actual es CFU-GM. que es una
colonia - unidad de formación comprometido a la producción de células mieloides (granulocitos y monocitos).
células del cordón: Las células fetales obtenidas del cordón umbilical al nacer; pueden estar contaminados con gelatina de Wharton. La cumarina (Coumadin): Un
anticoagulante comúnmente empleado que actúa como un antagonista de la vitamina K que prolonga el tiempo de protrombina.
crioprecipitado: Una fuente concentrada de factor de coagulación VIII preparado a partir de una sola unidad de sangre del donante; también contiene fibrinógeno,
factor XIII, y el factor de von Willebrand.
criopreservación: Conservación por congelación a temperaturas muy bajas.
Cytopheresis: Un procedimiento realizado usando una máquina mediante la cual se puede eliminar selectivamente una rype célula particular que se encuentra normalmente en la
sangre periférica de un paciente o donante.
23 -Diphosphoglycerate (2,3-DPG): Un fosfato orgánico en las células rojas de la sangre que altera la afinidad de la hemoglobina por el oxígeno. Las células sanguíneas
almacenadas en un banco de sangre pierden 2,9-DPG. Pero una vez infundido, la sustancia se vuelve a sintetizar o reactivado.
La coagulación intravascular diseminada (DIC); condición clínica del alterado coagulación de la sangre secundaria a una variedad de enfermedades.
Ditiotreitol (DTT): Un compuesto de sulfhidrilo utiliza para interrumpir los enlaces disulfuro de la inmunoglobulina IgM, produciendo unidades monoméricas
en lugar de la molécula pentamérica típico.
Dominante: Un rasgo o característica que se expresa en la descendencia a pesar de que sólo se realiza en uno de los cromosomas
homólogos.
electroforesis: El movimiento de partículas cargadas a través de un medio (papel, gel de agar) en presencia de un campo eléctrico: útiles en la
separación y análisis de las proteínas.
elución: Un proceso por el cual las células que están recubiertas con anticuerpo son tratados de una manera tal como para romper los enlaces entre el antígeno y el
anticuerpo. El anticuerpo liberado se recoge en un diluyente inerte tal como solución salina o 6
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medicina transfusional Manual técnico
por ciento de albúmina. Este suero de anticuerpos puede ensayarse para identificar su especificidad utilizando métodos de rutina. El mecanismo para liberar
el anticuerpo puede ser física (calefacción, agitación) o químicos (éter, ácido), y el anticuerpo cosechado que contiene fluido se llama un eluato.
El tratamiento enzimático: Un procedimiento en el cual los glóbulos rojos se incuban con una solución de enzima que escinde algunas de las glicoproteínas de la
membrana, después se lavó libre de la enzima, y se utiliza en las pruebas serológicas. Enzyme escinde de tratamiento de algunos antígenos y expone otro.
epítopo: La porción de la molécula de antígeno que está implicado directamente en la interacción con el anticuerpo; el determinante antigénico.
eritroblastos: Cualquier forma de corpúsculos rojos nucleados, que contiene hemoglobina, que normalmente no se ven en la sangre circulante.
ácido etilendiaminotetraacético (EDTA): Un anticoagulante útil en las pruebas hematológicas y cuando preferible pruebas de globulina
anti-humana directa se indica.
reacción febril: Una reacción a la transfusión causada por leukoagglutinins que se caracteriza por fiebre; por lo general se observa en multiplican
transfundida de pacientes multíparas.
fibrinógeno: Una proteína producida en el hígado que circula en plasma. En presencia de trombina, una enzima producida por la activación del
mecanismo de coagulación, el fibrinógeno se escinde en fibrina, que es una proteína insoluble que es responsable de la formación de coágulos.
fibrinolisina: La sustancia que tiene la capacidad de disolver la fibrina; también llamada plasmina.
El plasma fresco congelado (FFP): Un producto congelado plasma (de un único donante) que contiene todos los factores de la coagulación, especialmente el
factores lábil V y VIII; útiles para deficiencias de factores de coagulación distintos de la hemofilia A, von
* S Willebrand enfermedades, y hipofibrinogenemia.
G6PD (glucosa -6-fosfato deshidrogenasa): Una enzima del hígado utiliza para controlar la función hepática.
prueba de gel: Un método de prueba serología de grupos sanguíneos que utiliza un gel de microtubo que contiene (la incorporación de antisueros o sueros de antiglobulina) que
actúa como un recipiente de reacción para la aglutinación.
Gene: Una unidad de herencia dentro de un cromosoma.
Genotipo: la composición genética de un individuo real.
El síndrome de Goodpasture: Una entidad de enfermedad que representa una glomerulonefritis rápidamente progresiva asociada con lesiones pulmonares. Por
lo general, los pacientes poseen un anticuerpo a la membrana basal de los glomérulos renales.
Injerto - contra -host (ICH) de la enfermedad: Un trastorno resultante de injerto de tejido de un donante en un huésped comprometida inmuno ..
enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN): Una enfermedad caracterizada por anemia, ictericia, agrandamiento del hígado y el bazo, y edema
generalizado (hidropesía fetal) que es causada por anticuerpos IgG maternas que cruzan la placenta y atacar a las células rojas fetales cuando hay una
incompatibilidad de grupo sanguíneo fetomatenal (por lo general ABO o Rh anticuerpos). Sinónimo es eritroblastosis fetal.
reacción a la transfusión hemolítica (HTR): Una reacción de la destrucción de glóbulos rojos causada por el anticuerpo del paciente (es) dirigida a antígeno (s) de glóbulos rojos
del donante.
La hemofilia A: Un trastorno hereditario caracterizado por el tiempo de coagulación en gran medida prolongada. La sangre no coagula y se produce una hemorragia; causado
por la herencia de una deficiencia del factor VIII, que se produce casi exclusivamente en varones.
La hemofilia B: “Enfermedad de Navidad”, que es la hemofilia como una enfermedad causada por una deficiencia del factor IX.
Hepatitis B Inmunoglobulina (HBIg): Un suero inmune dado a los individuos expuestos al virus de la hepatitis B.
heterocigóticos: La posesión de los diferentes alelos en un locus dado.
HLA: Antígeno leucocitario humano.
homocigoto: Un individuo en desarrollo de gametos con alelos similares y poseer así como pares de genes para una característica hereditaria
dado.
hibridoma: Un híbrido (cruz) entre una célula de plasmacitoma y un bazo (o anticuerpo - producción) célula que produce un anticuerpo monoclonal, lo que
resulta en un tailandés línea celular maligno puede crecer indefinidamente en cultivo y puede
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Glosario
producir grandes cantidades de anticuerpos. Este anticuerpo es monoclonal porque sólo una célula productora de anticuerpos se combina con la célula de
plasmocitoma está presente.
almidón de hidroxietilo (HES): Un agente de sedimentación de glóbulos rojos utiliza para facilitar la retirada de los leucocitos durante sukapheresis.
idiopática: Relativas a las condiciones sin patogénesis clara, o la enfermedad sin causa reconocible, un origen contaneous.
La púrpura trombocitopénica idiopática (ITP): Sangrado debido a una disminución del número de plaquetas; la etiología es desconocida, con la mayoría de pruebas
que apuntan a plaquetas auto-anticuerpos.
Respuesta inmune: Las reacciones del cuerpo a sustancias que son extraños o se interpretan como extrañas. inmunidad-Fell mediada o celular se refiere a
la destrucción de tejidos mediada por células T, tales como rechazo del injerto y reacciones persensitivity. La inmunidad humoral se refiere a la respuesta de
la destrucción de células durante el período temprano de la acción.
Leucemia: proliferación maligna de leucocitos, que se derrame en la sangre, produciendo un leuckocyte elevada <w>.
macrófagos: el desarrollo en fase terminal para el monocitos de sangre; estas células pueden ingerir (phagocytose) una variedad de sustancias para la digestión o
almacenamiento posterior y se encuentran en un número de sitios en el cuerpo (por ejemplo, bazo, hígado,
- ~ G) células móviles libres existente o como células fijadas. Las funciones incluyen la eliminación de células sanguíneas senescentes y anticipación en la respuesta
inmune.
Mercaptoetanol (2-ME): Un compuesto de sulfhidrilo utiliza para interrumpir los enlaces disulfuro de la inmunoglobulina
- 'I. produciendo unidades monomric en lugar de las unidades pentaméricas típicas.
campo mixto: Un tipo de patrón de aglutinación en el que existen numerosos pequeños grupos de células en medio de un mar de libre
monoclonal: Anticuerpo derivado de un solo la producción de anticuerpo-células parentales ancestrales.
El mieloma múltiple: A proliferación neoplásica de células plasmáticas, que se caracteriza por una muy alta inmunoglobulina
- - els de origen monoclonal.
Muraminidase: Una enzima que escinde el ácido siálico de la membrana de glóbulos rojos.
Muturalization: La inactivación de un anticuerpo por reaccionar ins con un (sustancia de grupo sanguíneo) antígeno contra el que se
-; al.
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medicina transfusional Manual técnico
neutrófilos: Un leucocito que ingiere bacterias y partículas pequeñas y desempeña un papel en la lucha contra la infección.
oliguria: cantidad disminuida de formación de orina.
Panagglutinin: Un anticuerpo capaz de aglutinar todas las células rojas de la sangre ensayadas, incluyendo las células del propio paciente.
Fancytopenia: Una reducción en todos los elementos celulares de la sangre, incluyendo glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas.
Papaína: Una enzima proteolítica derivada de papaya.
hemoglobinuria paroxística nocturna (PNH): Un defecto intrínseco en las células rojas .blood membrana haciéndola más susceptible a
hemolisinas en un medio ácido; caracterizado por la hemoglobina en la orina después de períodos de duerme.
fenotipo: La expresión exterior de genes (por ejemplo, un tipo de sangre). En las células rojas de la sangre, serológicamente antígenos demostrables constituyen el
fenotipo.
Flebotomía: El procedimiento utilizado para extraer la sangre de una persona.
Fototerapia: La exposición a la luz solar o artificial con fines terapéuticos.
Plasma: La porción líquida de la sangre entera que contiene agua, electrolitos, glucosa, grasas, proteínas, y los gases de plasma contiene todos los factores de
coagulación necesarios para la coagulación, pero en una forma inactiva. Una vez que se produce la coagulación, el líquido se convierte en suero.
La plasmaféresis: Un procedimiento de uso de una máquina para eliminar solamente el plasma de un donante o paciente.
Plaqueta: Una ronda o disco oval, de 2 a 4 m de diámetro, que se deriva desde el citoplasma de la megacariocitos, una células grandes en la mañana hueso. Las
plaquetas desempeñan un papel importante en la coagulación de la sangre, la hemostasia y la formación de trombos en la sangre. Cuando una pequeña embarcación está
lesionado, las plaquetas se adhieren entre sí y a los bordes de la lesión, la formación de un “tapón” que cubre el área y se detiene la hemorragia.
plaquetoaféresis: Un procedimiento de uso de una máquina para eliminar sólo las plaquetas de un donante o paciente.
refractariedad plaquetaria: No ceder un aumento en plaquetas del receptor cuente con transfusión de plaquetas adecuadamente conservadas. HLA
aloinmunización es una causa común.
Polyagglutination: Un estado en el que las células rojas de un individuo son aglutinadas por todos los sueros independientemente del tipo de sangre.
Polyagglutinins: anticuerpos de origen natural de inmunoglobulinas que se encuentran en la mayoría de los sueros de humano adulto normal.
Policitemia vera: Una vida crónica acortando trastorno mieloproliferativo que involucra todos los elementos de la médula ósea, que se caracteriza por un aumento de la
masa de glóbulos rojos y la concentración de hemoglobina.
reacción en cadena de la polimerasa (PCR): Un método in vitro de la amplificación de un segmento de ADN específico.
sueros poliespecıfico Cooombs': Un reactivo que contiene suero globulina anti-humana contra la inmunoglobulina IgG y C3d y C3b.
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Glosario
Secretor: Un individuo que es capaz o secretoras de glicoproteína solubles ABH- sustancias solubles en saliva y otros fluidos corporales.
Duracion: La cantidad de sangre o productos sanguíneos de tiempo puede ser almacenada tras la recogida.
Ácido siálico: Un grupo de azúcares que se encuentran en la membrana de glóbulos rojos unido a un esqueleto de la proteína; la principal fuente de carga negativa neta de la
membrana.
rasgo falciforme: La sangre que es heterocigoto para el gen codificante para la hemoglobina anormal de la anemia de células falciformes.
Soltero - plaquetas de donantes; Las plaquetas recogidas de un solo donante por aféresis.
especificidad: La afinidad de un anticuerpo y el antígeno contra el que se dirige. Vástago célula: Una célula no especializada, capaz de auto-renovación, que
da lugar a un grupo de células diferenciales tales como las células hematopoyéticas.
trombina: Una enzima que convierte el fibrinógeno en fibrina para que un coágulo soluble puede ser formado.
trombocitopenia: Una reducción en el recuento de plaquetas por debajo del nivel normal, que se asocia con hemorragia espontánea.
púrpura trombocitopénica trombótica (TTP): Un trastorno de la coagulación caracterizado por (1) aumentó la hemorragia debido a una disminución del
número de plaquetas, (2) anemia hemolítica, (3) insuficiencia renal, y (4) el cambio de signos neurológicos. los lesión morfológica característica es la
oclusión trombótica de las pequeñas arterias o capilares en diversos órganos.
El síncope vasovagal: Síncope resultante de la hipotensión causada por el estrés emocional, el dolor, la pérdida de sangre aguda, trasera, o rápida levantarse de una
posición reclinada.
venopunción: La punción de una vena para cualquier propósito.
Viabilidad: Capacidad de una célula para vivir o de sobrevivir durante un período de vida razonablemente normal.
factor de von Willebrand: El factor de coagulación VIII. von Willebrand 's enfermedad:
Un trastorno de sangrado congénito.
WAIHA: anemia hemolítica autoinmune caliente. A anemia hermolytic causada por antuantibody del paciente que reacciona a 37 ° C
Wharton; s jalea: Una sustancia intercelular gelatinosa que consiste en tejido conectivo primitiva del cordón umbilical.
período de ventana: ese período entre la infección y la capacidad de detectar la enfermedad mediante pruebas de laboratorio.
Zeta potencial: La diferencia en la densidad de carga entre las capas interior y exterior de la nube iónica que rodea las células rojas en una solución
electrolítica.
Zzap: Una mezcla de la papaína de cisteína-activado y di-thiothreitol. Los glóbulos rojos tratados con Zzap han reducido IgG y se tratan previamente
enzima
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medicina transfusional Manual técnico
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