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    E.M.B. Agar (Con Eosina y Azul de Metileno)

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    Este documento describe el medio de cultivo EMB Agar (con Eosina y Azul de Metileno), el cual se utiliza para el aislamiento selectivo de bacterias Gram negativas como las enterobacterias. Explica la composición, uso, interpretación y limitaciones del medio. También incluye instrucciones para la siembra, incubación y control de calidad.

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    de 3

    B0210105

    B0210106

    E.M.B. Agar (con Eosina y Azul


    de Metileno)
    Uso
    Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aisla- FóRmULa (en gramos por litro)
    miento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y PEPTonA..........................................................................10.0

    escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las LACToSA................................................................................5.0

    especies de la familia Enterobacteriaceae. SACAroSA..........................................................................5.0


    FoSFATo diPoTáSiCo..............................................................2.0

    FUndamento EoSinA........................................................................................0.4.

    El medio de cultivo combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague AzuL dE METiLEno........................................................0.065

    con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aisla- AGAr...............................................................................13.5


    miento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos pH FinAL: 7.2 ± 0.2
    Gram negativos.
    Es nutritivo por la presencia de peptona que favorece el desarrollo instRUCCiones
    microbiano. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar Suspender 36 g del polvo en 1 litro de agua purificada. reposar 5
    la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, minutos. Calentar con agitación frecuente y llevar a ebullición hasta
    está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejer- su disolución total. Esterilizar en autoclave 121°C durante 15 minu-
    cen un efecto inhibitorio sobre una amplia variedad de bacterias tos. distribuir en placas de Petri estériles.
    Gram positivas. El agar es el agente solidificante.
    Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un CaRaCteRístiCas deL pRodUCto
    característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa po- Medio de cultivo deshidratado: color púrpura, homogéneo, libre
    seen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las deslizamiento.
    que no lo hacen son incoloras. Medio de cultivo preparado: color púrpura vinoso.
    También, pueden crecer especies de Candida y se observan como nota: La esterilización del medio de cultivo reduce el azul de meti-
    colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite leno al color naranja. El color púrpura se restaura por agitación. La
    el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. presencia de un precipitado en el medio esterilizado es normal y no
    crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, debe ser removido, ya que es parte esencial del mismo.
    mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas se
    observan como colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aLmaCenamiento
    aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
    al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
    membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo
    de especies de Salmonella y Shigella. pRoCedimiento
    siembra:
    Contenido y ComposiCión En superficie, por estriado directo a partir de la muestra.
    Código B0210105: envase x 100 En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.
    g. Código B0210106: envase x
    500 g.

    HoJA 1 dE 2
    E.M.B. Agar (con Eosina y Azul de Metileno)

    incubación: - Para la identificación de género o especie microbiana se deben


    En aerobiosis, a 35-37 °C durante 18-24. horas. realizar pruebas bioquímicas adicionales.
    - Algunas cepas de Salmonella y Shigella no crecerán en EMB
    inteRpRetaCión de Los ResULtados Agar.
    microorganismos fermentadores de lactosa y / o sacarosa: - durante la esterilización el azul de metileno puede precipitar. Es
    colonias de color negro azulado o amarronado. Pueden tener importante resuspender el precipitado mientras se distribuye en
    centro oscuro y brillo metálico. placas de Petri estériles el medio preparado.
    microorganismos no fermentadores de lactosa y sacarosa: - Conservar el medio preparado en placas a 2-8 ºC y protegido de
    colonias del color del medio, incoloras. la luz ya que los indicadores presentes son fotosensibles y pueden
    inhibir el desarrollo de algunas especies de Proteus si no se con-
    ContRoL de CaLidad servan apropiadamente.

    MiCroorGAniSMoS
    CrECiMiEnTo CArACTEríSTiCAS mateRiaLes neCesaRios no pRovistos
    dE LAS CoLoniAS Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
    Escherichia coli Satisfactorio negro azuladas con brillo calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requeri-
    ATCC 25922 metálico miento.
    Escherichia coli Satisfactorio negro azuladas con brillo
    ATCC 8739 metálico pReCaUCiones
    Klebsiella pneumoniae Satisfactorio Mucosas confluentes, con - Solamente para uso diagnóstico in vitro. uso profesional exclu-
    ATCC 700603 centro oscuro sivo.
    Proteus mirabilis Satisfactorio incoloras - no utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o da-
    ATCC 4.3071 ñado.
    Salmonella typhimurium Satisfactorio incoloras - no utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-
    ATCC 14.028 rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
    Shigella flexneri Satisfactorio incoloras - utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el produc-
    ATCC 12022 to.
    Pseudomonas aeruginosa Satisfactorio incoloras - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
    ATCC 27853 nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
    Enterococcus faecalis inhibición parcial incoloras puntiformes establecidas por el laboratorio.
    ATCC 29212 - Las características del producto pueden alterarse si no se
    Candida albicans inhibición parcial rosadas puntiformes conser- va apropiadamente.
    ATCC 10231 - descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
    Staphylococcus aureus inhibido --- mismo según reglamentaciones vigentes.
    ATCC 25923
    ReFeRenCias
    - Holt-Harris and Teague. 1916. J. infect. dis. 18:596.
    ConTroL dE ESTEriLidAd rESuLTAdo - Levine. 1918. J. infect. dis. 23:4.3.
    Medio sin inocular Sin cambios - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-
    maintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Bal-
    LimitaCiones timore, Md.
    - En el caso de los microorganismos fermentadores, no se puede
    diferenciar el carbohidrato metabolizado. indiCaCiones aL ConsUmidoR
    - Este medio de cultivo es moderadamente inhibitorio ya que las utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
    cepas de enterococo y candida pueden desarrollar en el mismo, Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
    observándose como colonias de tamaño puntiforme.
    11/2015 - rEV .01

    símBoLos UtiLiZados

    diAGnÓSTiCo CÓdiGo nº ELABorAdor ESTÉriL nº dE LoTE nº FECHA dE LíMiTE dE inSTruCCionES HoJA 2 dE 2


    in ViTro
    dETErMinACiÓnE VEnCiMiEnTo TEMPErATurA dE uSo
    S

    LABORATORIOS BRITANIA S.A.


    LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
    CABA - ARGENTINA
    TEL/FAX 54 11 4306 0041

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