14 Preguntas Extraccion de Adn Lab 1 Biomol

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14. preguntas extracción de ADN lab 1 biomol
Biologia molecular (Universidad Libre de Colombia)
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1. ¿Cuál es la diferencia entre hemoglobina y hematocrito?

R/ El hematocrito hace referencia al volumen de glóbulos rojos en relación al total de sangre, mientras que la
hemoglobina mide la cantidad de la proteína homónima en sangre.
2. ¿Cuál es la influencia de la hemoglobina y del hematocrito en el color de la sangre?

R/ la influencia de la hemoglobina y el hematocrito en el color de la sangre es qué los glóbulos rojos contienen
hemoglobina un compuesto en el que está presente el hierro, elemento que al unirse con el oxígeno causa una
reacción química llamada oxidación responsable del color rojo de la sangre.
3. Se puede inferir algo acerca del contenido de ADN de la muestra a partir del contenido de hemoglobina y/o de
hematocrito?
R/ que el mayor contenido de ADN se encontrará en las células de la serie blanca de la sangre y no en los
eritrocitos, una parte mínima se va a encontrar en los reticulocitos que son los eritrocitos jóvenes que aún poseen
núcleo.
4. De los elementos corpusculados de la sangre, cuales sirven como fuente de ADN y porque?
R/ toda la serie blanca (neutrofilo, eusinofilo, basófilos, linfocito, monocito) de la sangre porque a diferencia de los
eritrocitos éstos tienen núcleo del cual extraer ADN, aunque en la sangre también hay reticulocitos con núcleo,
para evitar errores y hacer el trabajo mas simple solo se toma la serie blanca.
5. El EDTA contenido en los tubos en los que se obtuvo la muestra, funciona como un anticoagulante. describa
su acción en términos bioquímicos.
R/ El EDTA actúa como agente quelante capturando los iones de calcio imprescindible en la cascada de
coagulación ya que son los ayudan a la protrombina a convertirse trombina si está a su vez va a ser la que active
al fibrinógeno y el fibrinógeno será el que cree las fimbrina para que vayan a tapar la estructura dañada. La
ventaja es que respeta la morfología eritrocitaria y leucocitaria al menos 24 horas, permite la realización de frotis
(extendido de sangre) sanguíneo 2 horas después de la extracción de la muestra e impide una aglutinación de
plaquetas.
6. Cuál es la observación más notable después de incubar la muestra en RCLB (red cell lysis buffer) y a qué cree
que se debe tal efecto?
R/ la observación más notable Es que la mezcla adquiere una menor densidad y una mayor transiluminación Esto
se debe a la lisis de los eritrocitos de la sangre
7. ¿Cómo es posible que RCLB y WCLB tengan efectos tan diferentes? Explique los fundamentos bioquímicos
El WCLB solubiliza las membranas celular y nuclear (que no tiene el eritrocito), por lo que participa en la
desnaturalización de las células nucleadas y la disociación de complejos nucleoproteicos. Mientras el RCLB solo
garantiza un ambiente hipotónico para que se rompa la membrana celular del eritrocito.
8. ¿Cuál es el fundamento bioquímico para que la solución PPB realice su acción?
La adición de una solución saturada de sales (acetato de amonio), provoca la agregación de la proteína y debris
celular y debris celular. Deja libre al DNA en el líquido sobrenadante. Esto se explica a través del fenómeno

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cosmotrópico, que consiste en volver más hidrofílico el solvente produciendo que se produzca más interacciones
hidrofóbicas entre las macromoléculas.
9. ¿Cuál es el fundamento bioquímico para que los ácidos nucleicos precipiten en presencia de isopropanol?
R/ El ADN disuelto en solución acuosa se precipita añadiendo alcohol absoluto, ya que los ácidos nucleicos son
insolubles en soluciones alcohólicas. Porque el isopropanol posee grupos alquílicos los cuales permiten que la
molécula se de carácter hidrofóbica, mientras que el ADN es hidrofílica al tener grupos fosfatos, por lo que crea
que el efecto de precipitación.
10. ¿En qué se diferencian los efectos del isopropanol y del etanol sobre el ADN?
R/ Cuando se emplea etanol, la cantidad que se requiere para la precipitación es 2 veces el volumen de la fase
acuosa, mientras que con el isopropanol se demanda solamente 0.7 veces el volumen de la fase acuosa
11. ¿Que se espera del proceso de extraer alcohol y adicionarles agua al ADN?
R/ Después de la evaporación del alcohol, el botón de ADN se disuelve en soluciones que aseguren su
preservación como agua estéril y libre de ADNasas. La cantidad de solución debe ser mínima para mantener una
concentración adecuada del ácido nucleico que permita su empleo en técnicas posteriores, pero suficiente para
lograr una solución homogénea. Los lavados con etanol, se hacen para eliminar la cantidad de sales que
traspasan al ADN puro.
12. ¿Cuál propiedad fisicoquímica permite este efecto?

R/ Las propiedades fisicoquímicas que permiten este efecto son la hidrofobicidad y la solubilidad de los
compuestos.
13 ¿Cuál es la vida media del ADN en las condiciones finales en que se deja después de esta práctica?
- Es capaz de mantenerse durante varios meses a -20 grados.

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2. ¿Cuál es la influencia de la hemoglobina y del hematocrito en el color de la sangre?

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