FACULTAD DE MEDICINA ALBERTO HURTADO

DIRECCION DE POSTGRADO Y ESPECIALIZACION

ESCUELA DE TECNOLOGIA MDICA
SEGUNDA ESPECIALIDAD MICROBIOLOGIA CLINICA

Familia Enterobacteriaceae

Javier Orlando Soto Pastrana

Tecnlogo Medico
Responsable Laboratorio de Microbiologa Clnica
Integrante del Comit de Control de Infecciones Intrahospitalarias
Hospital Nacional Docente Madre Nio San Bartolome
Enterobacteriaceae
La Familia Enterobacteriaceae
es referido a menudo como
"entricos"
Cuatro caractersticas
principales:
Todas fermentan la glucosa.
Todos reducen los nitratos a
nitritos.
Todos excepto Plesiomonas son
oxidasa negativa.
Todos excepto Klebsiella, Shigella
y Yersinia son mviles.
 Identificacin presuntiva de
Enterobacteriaceae
Cules son los indicios iniciales de que una cepa desconocida
aislada de una muestra clnica puede pertenecer
Enterobacteriaceae?

UTILIZACION DE ACTIVIDAD DE REDUCCION DE

HIDRATOS DE CITOCROMO NITRATO
CARBONO OXIDASA A NITRITO
Enterobacteriaceae: Microscopia y
Morfologa Colonial
Bacilos o cocobacilos Gram
negativos.
No forman esporas
La morfologa de la colonia en
AS o ACH son de poco valor, ya
que tienen el mismo aspecto,
salvo para Klebsiella.
Medios selectivos y
diferenciales se utilizan para la
evaluacin inicial de colonias
(ej. Agar MacConkey, HE, XLD)
 0.7-0.9 2-3 m 20 -70 m
m

Agar Mac Conkey Agar HE

Agar XLD
Enterobacteriaceae: Clasificacin
Debido al gran nmero de organismos de la familia
de las Enterobacterias , las especies se agrupan en
tribus, que tienen caractersticas similares.
Dentro de cada tribu, las especies son subagrupadas
adicionalmente en gneros.
Tribu I Escherichieae Tribu V Klebsielleae Tribu VI Proteeae
Escherichia Klebsiella Proteus
Shigella Raoultella Morganella
Enterobacter Providencia
Hafnia
Pantoea
Serratia
 Taxonoma de la Familia
Enterobacteriaceae

FARMER y col. (1985)

EDWARDS y EWING (1972)
22 gneros y 69 especies
11 gneros y 26 especies
y 29 grupos entricos.

CDC (2013)
31 gneros y 139
especies, biogrupos y
grupos entericos.
 UK Standards for Microbiology Investigations
Public Health England (2015)
53 gneros y mas de 170 especies
Arsenophonus Hafnia Providencia
Biostraticol Klebsiella Rahnella
Brenneria Kluyvera Raoultella
Buchnera Leclercia Saccharobacter
Budvicia Leminorella Salmonella
Buttiauxella Levinea, Samsonia
Calymmatobacterium Lonsdalea Serratia
Cedecea Mangrovibacter Shigella
Citrobacter Moellerella Shimwellia
Cosenzaea Morganella Sodalis
Cronobacter Obesumbacterium Tatumella
Dickeya Pantoea Thorsellia
Edwardsiella Pectobacterium Trabulsiella
Enterobacter Phaseolibacter Wigglesworthia
Erwinia Photorhabdus Xenorhabdus
Escherichia Plesiomonas Yersinia
Ewingella Pragia Yokenella
Gibbsiella Proteus www.gov.uk/uk-standards-formicrobiology-investigations-smi-quality-
and-consistency-in-clinical-laboratories
 Enterobacterias frecuentemente
aisladas en muestras clnicas
GENERO ESPECIE GENERO ESPECIE
Escherichia E. coli Hafnia H. alvei
Shigella Grupos A , B y C Serratia S. marcescens
S. sonnei Proteus P. mirabilis
Salmonella spp. P. vulgaris
S. typhi Providencia P. rettgeri
S. paratyphi A P. stuartii
Citrobacter C. freundii P. alcalifaciens
C. diversus Morganella M. morganii
klebsiella K. pneumoniae Yersinia Y. enterocolitica
K. oxytoca
Y. pestis
Enterobacter E. aerogenes
Y. pseudotuberculosis
E. cloacae
Enterobacterias designados
recientemente (1985)
GENERO ESPECIE GENERO ESPECIE

Budvicia B. aquatica Koserella K. trabulsii

Buttiauxella B. agrestis Leclercia L. adecarboxilata

Cedecea C. davisae L. grimontii

C. neteri L. richardii
C. lapagei Moellerella M. wisconsensis
Ewingella E. americana Rahnella R. aquatilis

Kluyvera K. ascorbata Tatumnella T. ptyseos

K. cryocrescens Yokenella Y. regensburgii

Factores de virulencia y antgenos de
Enterobacteriaceae
Los factores de virulencia le da la capacidad a las
Enterobacteriaceae de colonizar, adherirse, producir
varias toxinas e invadir tejidos.
Algunos poseen plsmidos que pueden mediar la
resistencia a los antibiticos
Muchos Enterobacteriaceae poseen antgenos que
se pueden utilizar para identificar los grupos
El antgeno O - antgeno somtico, estable al calor
situado en la pared celular
El antgeno H - flagelar, antgeno termolbil
El antgeno K - capsular, antgeno termolbil
Factores de Virulencia Enterobacteriaceae

TraT
Islas de patogenicidad (PAIs)
Estructura antigenica de Enterobacteriaceae
S. typhi

O antigen
side chain

(Fimbriae)
Significancia clnica Enterobacteriaceae
Entricos son ubicuos en la
naturaleza.
Se encuentran:
El suelo, agua, plantas
Tubo digestivos de seres
humanos y animales ("coliformes
fecales")
Son causa importante de
infeccin nosocomial
Pacientes inmunodeprimidos
Colonizacion de cepas
ambientales.
Procedimientos invasivos.
Significancia clnica Enterobacteriaceae
Son los BGN que se recuperan con mayor frecuencia
en las muestras clnicas.
Representa el 50% de todos las bacterias aisladas en
el laboratorio de Microbiologa Clnica.
Dentro de las bacterias Gram negativas representa el
80% de todas las bacterias aisladas.
Segn tipo de muestra:
Sangre: 50%
Heces: 60-70%
Orina: 70%
Significancia clnica Enterobacteriaceae
Basado en la produccin de
infecciones clnicas las
Enterobacterias se dividen en
2 categoras:
Especies comensales
Especies patgenas primarias
Especies comensales
Viven en el tubo digestivo del
hombre.
Desarrollan funciones
fisiolgicas.
Cuando hay factores
favorecedores pueden causar
infecciones oportunistas.
Principales especies de
Enterobacterias de inters medico
Especies comensales (oportunistas potenciales)
Escherichia coli Citrobacter freundii
Citrobacter diversus

Klebsiella pneumonia Proteus mirabilis

Klebsiella oxytoca Proteus vulgaris

Serratia marcescens Providencia stuartii

Pantoea agglomerans Providencia alcalifaciens
Providencia rettgeri

Hafnia alvei Morganella morganii

Principales especies de
Enterobacterias de inters medico
Especies patgenas
Escherichia coli Salmonella enterica
Salmonella bongori

Klebsiella rhinoscleromatis

Shigella dysenteriae Yersinia enterocolitica

Shigella flexneri Yersinia pseudotuberculosis
Shigella sonnei Yersinia pestis
Shigella boydii
INFECTION BY
ENTEROBACTERIACEAE
 GENEROS DE IMPORTANCIA MDICA
EN LA FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE
Citrobacter spp. C. freundii

TSI K/A o A/A + gas y H2S

LIA K/A + H2S
Urea frecuentemente +
Motilidad +
Citrobacter bioqumicamente a Salmonella
(aglutinan con antisueros polivalente de salmonella)
C. freundii, C. diversus (koseri) y C. amalonaticus
SIGNIFICANCIA CLINICA:
Se pueden encontrar en las heces de humanos y
animales como parte de la flora normal
Son patgenos oportunistas causando ITU o ITR y
ocasionalmente infecciones de heridas, osteomielitis,
endocarditis y meningitis.
Edwardsiella tarda
TSI K/A + gas y H2S
LIA K/K + H2S
Urea
Citrato
Indol +
E. tarda (humanos), E.hoshinae y E. ictaluri (peces)
Edwarsiella tarda se asemejan bioqumicamente a
especies de Salmonella.
SIGNIFICANCIA CLINICA:
causa enfermedad gastrointestinal en pases tropicales y
subtropicales.
Produce gastroenteritis(50 a 80% de los casos), de forma
leve en la mayora de los casos o colitis grave.
Klebsiella spp.
TSI A/A + gas
LIA K/K
Urea +
Citrato +
MR -, VP +
Motilidad -
Tiene antgeno O y antgeno K
Factores de virulencia:
Capsula (K)
Fimbrias tipo 1: adhesina FimK
Sideroforos: habilidad para capturar hierro (Fe+3)
Ureasa.
Klebsiella spp.
En 2001 cambios taxonmicos (Grupos filogenticos)
Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3

Klebsiella pneumoniae Klebsiella Klebsiella oxytoca

subespecie pneumoniae ornithinolytica
Klebsiella pneumoniae Klebsiella planticola
subespecie rhinoescleromatis
Klebsiella pneumoniae Klebsiella trevisanii
subespecie ozaenae
Klebsiella granulomatis* Klebsiella terrgena

Klebsiella dividida en 2 gneros:

GRUPO 1 : especies del genero Klebsiella.
GRUPO 2 : especies del genero Raoultella.
Significancia Clnica de Klebsiella
Forma parte de la flora normal del tracto
gastrointestinal, pero es un patgeno potencial en
otras reas.
K. pneumoniae es el 2do agente etiolgico de ITU
comunitario.
Causa neumona, mayormente en pacientes
inmunocomprometidos.
o frecuentemente ocurre dao permanente al pulmn (raro en otros
tipos de neumona bacteriana)
Es la causa principal de infecciones nosocomiales tal como
sepsis y meningitis.
Recientemente ha surgido una nueva variante de K.
pneumoniae hipervirulenta (hipermucoide).
Significancia Clnica de Klebsiella
Klebsiella ozaenae se asocia
con rinitis atrofica (ocena).
Klebsiella rhinoescleromatis
produce la enfermedad
granulomatosa rinoescleroma,
una infeccin de la mucosa
respiratoria, orofaringe, nariz y
senos paranasales.
K. granulomatis es el agente
etiologico del granuloma
inguinal (Donovanosis).
Klebsiella pneumoniae hipervirulenta
Descrita por primera vez en el Pacfico asitico, ahora
es reconocido en los pases occidentales.
Estas cepas tienen la capacidad de causar graves
infecciones adquiridas en la comunidad
potencialmente mortales en personas jvenes
saludables.
absceso heptico, neumona, meningitis y endoftalmitis
Tienen la capacidad de propagarse metastasicamente
(caracterstica inusual para BGN en pacientes no
inmunocomprometidos).
Esta infeccin bacteriana es muy invasiva con una
alta mortalidad.
Prueba de la cuerda (String test):
Se realiza a las colonias que Prueba de la cuerda
tienen un aspecto mucoides
(patognomnico).
La prueba puede ser
realizado en el laboratorio,
define la infeccin y es
tambin til para el
diagnstico precoz.
Los genes magA y rmpA
establecen el diagnstico de
infeccin debido a Klebsiella Resultado: > de 5 mm es
pneumoniae hipervirulenta definida como positiva.
 Brote por Klebsiella pneumoniae Lisina
Descarboxilasa Negativa productora de
-Lactamasa de Espectro Extendido en una
Unidad de Cuidados Intensivo Neonatal
Javier Soto, Socorro Torres, Juan Carlos Riveros, Nazario Silva, Rosa Sacsaquispe, Vctor Suarez
HONADOMANI San Bartolome , Instituto Nacional de Salud , Lima, Per, 2007

XI CONGRESO PERUANO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y TROPICALES

2009
Muestras Clnicas
Paciente H.C. Cod. Lab. Edad Servicio Fecha Cultivo Bacteria Biotipo API BLEE
Ayala Lorenzo RN. 616819 07D-2075 4 das UCI 01/09/07 Sangre K. pneumoniae 1215773 si
Ayala Lorenzo RN. 616819 07D-2086 6 das UCI 03/09/07 Sangre K. pneumoniae 1215773 si
Requena Saucedo RN. 618226 07D-2126 4 das UCI 07/09/07 Sangre K. pneumoniae 1215773 si
Jimnez Valverde RN. 618197 07D-2133 3 das UCI 10/09/07 Sangre K. pneumoniae 1215773 si
Alamo Sanchez RN. 617751 07D-2135 3 das UCI 10/09/07 Sangre K. pneumoniae 1215773 si
Requena Saucedo RN. 618226 07D-2157 11 das UCI 11/09/07 Sangre K. pneumoniae 1215773 si
Alamo Sanchez RN. 617751 07D-2156 6 das UCI 11/09/07 Sangre K. pneumoniae 1215773 si
Requena Saucedo RN. 618226 07C-1597 10 das UCI 14/09/07 Cateter K. pneumoniae 1215773 si

Estudio de Portadores (3/7)

Paciente H.C. Cod. Lab. Edad Servicio Fecha Bacteria Biotipo API BLEE
Lopez Sanches RN
618350 P-01 5 das UCI 11/09/07 K. pneumoniae 1215773 si
Alamo Sanchez RN.
617751 P-05 6 das UCI 11/09/07 K. pneumoniae 1215773 si
si
Llano Meneses RN. 612990 P-07 10 dias UCI 11/09/07 K. pneumoniae 1215773

Estudio Ambiental (1/14)

Muestra Cod. Lab. Servicio Fecha Bacteria Biotipo API BLEE
Leche Materna
M-12 UCI 11/09/07 K. pneumoniae 1215773 si
(Alamo Sanches RN)

Agar Mac Conkey con Cefotaxima 2g/ml

 CARACTERSTICAS DE FALLECIDOS CON CULTIVO POSITIVO
A KLEBSIELLA PNEUMONIAE UCIN HONADOMANI SB. SETIEMBRE 2007
PACIENTES 1 (AL) 2 (RS) 3 (JV) 4 (AS)
Fecha de nacimiento 27/08/07 03/09/07 05/09/07 05/09/07
Catter Umbilical SI SI SI SI
Ventilacin Mecnica SI SI SI SI
Peso al nacer 840 1320 785 860
Edad Gestacional 34 32 26 28
Edad Materna - 27 24 31
CPN Inadec 1 1 0
T' hosp materna (horas) - 1 120 168
Tipo de parto PV Cesrea Cesrea P.V
Infecc Materna - no no no
RPM 10 das no no 7 das
Fecha de Dx de Infeccin 03/09/07 04/09/07 07/09/07 07/09/07
Fecha de Hemocultivo (KP) 03/09/07 08/09/07 08/09/07 10/09/07
SDR, EMH SI NO SI SI
Depresion Severa ASFIXIA No SI SI SI
Fallecimiento SI SI SI SI
 N Biotipo 3043

N Biotipo 1215773

Klebsiella pneumoniae Productora de BLEE

Para comparar genticamente las cepas
se realiz la prueba molecular ERIC-PCR,
la cual amplifica regiones repetitivas de INFORME DEL INS: Los resultados
enterobacterias mediante PCR.
moleculares muestra que las cepas de K.
MP SB-A SB-B SB-C SB-D SB-E SB-F SB-G SB-H SB-I CS pneumoniae aisladas e identificadas por
laboratorio de Microbiologa del Hospital
San Bartolom estn genticamente
relacionadas.

MP: Marcador de peso molecular 1 Kb ladder Fermentas;

SB-A: cepa K. pneumoniae 2126.:
SB-B: cepa K. pneumoniae 2133;
SB-C: cepa E. coli 196-07 (cepario del INS);
SB-D: cepa K. pneumoniae 2135;S
B-E: cepa K. pneumoniae 206-07 (cepario del INS);
SB-F: cepa K. pneumoniae 2086;S
B-G: cepa K. pneumoniae 1;
SB-H: cepa K. pneumoniae 12;
SB-I: cepa K. pneumoniae 223-07 (cepario del INS);
CS: Control de sistema.
 AZT CAZ

AMC IMP
CTX

FOX

UCI - NEONATAL
Rev Soc Peru Med Interna 2013; vol 26 (4)
Enterobacter spp.
TSI, LIA, y urea variables
dependiendo de la especie.
Citrato +
Las colonias de Enterobacter pueden ser ligeramente
mucoide.
Enterobacter y las especies Klebsiella se puede
diferenciar (Enterobacter es motilidad + y ornitina +).
Enterobacter agglomerans genero Pantoea
SIGNIFICANCIA CLINICA
Forma parte de la flora normal del tracto gastrointestinal
E. cloacae y E. aerogenes frecuente en muestras clnicas.
Produce infecciones nosocomiales (ITU, sepsis, neumona)
Tambien bacteremia en pacientes quemados.
Enterobacter sakazakii
Antes de 1980; "Enterobacter
cloacae con pigmento
amarillo".
En 1980, una nueva especie
E. sakazakii ( en honor al
microbilogo japons, Riichi
Sakazaki).
En 2007, un nuevo genero,
"Cronobacter".
C. sakasakii es un peligro
microbiolgico en la cadena
de la alimentacin infantil.
Serratia spp.
TSI A/A o K/A; +/- gas
no fermentan lactosa
LIA frecuentemente K/K
Citrato + Positivo

Motilidad +
Urea +/-
Gelatinasa +
S. marcescens produce pigmento rojo
La mayoria + en cepas ambientales
Algunas veces + en cepas nosocomiales
Significancia clinica: Es un microorganismo saprofito
Se ha aislado en sepsis, ITR y ITU nosocomial.
Es resistente a muchos antimicrobianos.
Proteus, Providencia y Morganella
Proteus, Providencia, and Morganella
Todos son mviles
Proteus H2S presenta fenmeno de swarming
Fenilalanina desaminasa +
R/A
Lisina desaminasa y Triptofano desaminasa.
Lisina desaminasa +: (LIA R/A)
La mayoria Urea +
Urea muy fuerte para Proteus
P. alcalifaciens es siempre urea
TSI es variable
Indole +
solamente P. mirabilis is
Proteus, Providencia y Morganella
Factores de virulencia
Ureasa: genes UreA y UreB, el
amonio producido puede daar las
clulas epiteliales del tracto urinario.
Flagelos peritricos: FlaA y FlaAB.
SIGNIFICANCIA CLINICA
Todos son parte de la flora normal
del tracto gastrointestinal (excepto
Providencia).
Causan infecciones del tracto
urinario (ITU), como tambien
neumonia, sepsis e infecciones de
heridas.
Plesiomonas shigelloides
TSI K/A gas - y H2S -
LIA K/K (fuerte)
Indol +
Citrato -
Motilidad + Oxidasa
positiva
Oxidasa +
P. shigelloides es un nuevo miembro de la familia
Enterobacteriaceae (2005).
Denominada shigelloides debido a su parecido con
Shigella sonnei.
BGN, anaerobio facultativo, mvil, utiliza la glucosa
e inositol.
Plesiomonas shigelloides
Algunas cepas de Plesiomonas comparten antgenos
con Shigella sonnei, y ocurren reacciones cruzadas
con antisueros de Shigella.
Significancia Clnica:
Crece de 0 - 5% de sal (Habitante natural de ros, lagos,
agua de mar).
La infeccin ms comn en humanos es la gastroenteritis
(fuente de infeccin el agua, peces y vegetales frescos
contaminados con aguas residuales).
La han aislado a partir de muestras clnicas humanas:
heces, sangre, orina, LCR, heridas y el tracto respiratorio.
Tambin se ha aislado de agua dulce, peces de agua
dulce y mariscos y de muchos tipos de animales.
Especies de Yersinia
Tres especies son importantes patgenos en el
hombre.
Yersinia pestis causa la plaga o peste
Yersinis enterocolitica enteropatognica
Yersinia pseudotuberculosis enteropatognica
Identification
Y. pestis no es movil.
Y. enterocolitica y Y. pseudotuberculosis ambos son no
moviles a 37C, pero moviles a 22C.
Y. pestis es identificado por las siguientes caractersticas:
o No mvil
o Coloracin bipolar
o Pequeas colonias en medios de cultivos de rutina (lento
crecimiento, mejor crecimiento a bajas temperaturas 25-30 C).
Yersinia pestis.
o TSI K/A no gas
o LIA K/A
o Urea
o Estudios de patogenicidad en ratones
o Prueba de inmunofluorescencia directa (anticuerpos)
o Pruebas moleculares (DNA probe test)
Factores de virulencia:
Endotoxina: es responsible de muchos de los sintomas.
La fraccin 1: protena de la cpsula antifagocitica..
Antgeno V: controla la expresin de genes de virulencia.
Pla - una proteasa anticomplemento (degrada C3b, C5a)
PSA - una adhesina fimbrial
Sideroforos (yersiniobactina)
SST3, Sistema de Secrecion Tipo 3
o YopB y YopD evacion de la fagocitosis
Yersinia pestis.
SIGNIFICANCIA CLINICA
En el hombre, la peste se presenta en dos formas;
bubnica y neumnica.
La peste bubnica (transmitida por las pulgas de un roedor
infectado), la tasa de mortalidad es alta sin tratamiento.
La peste neumnica puede ser transmitida directamente a los
dems a travs de aerosoles. La inhalacin directa de aerosoles
que contienen el microorganismo produce una forma de la
enfermedad que progresa mucho ms rpidamente y la tasa de
mortalidad es cercana al 100%.
El tratamiento de la plaga
La estreptomicina y la tetraciclina son efectivos
factores de virulencia de Yersinia
enterocolitica y Yersinia pseudotuberculosis
Factores de virulencia Yersinia enterocolitica
Enterotoxina: similar a E. coli ST (diarrea acuosa)
Adhesinas: fimbriales y no fimbriales
o Invasina (Inv), la mas importante.
Protenas antifagociticas (YopE, YopH y YopT): incluyen
protenas secretadas y de la membrana externa.
o Algunos se inyecta directamente en el husped a travs de un
mecanismo de secrecin de tipo III (SST3).
o YopP y YopJ, interfiere con la capacidad de los PMNs para
responder a seales que los conducen a las bacterias invasoras
(antiflamatorias).
o YopP y YopJ, alteran el citoesqueleto de actina y provocan la
muerte de los PMN (apoptosis).
 Factores de virulencia de Y. enterocolitica y
Y. pseudotuberculosis
Factores de virulencia Yersinia enterocolitica (cont.)
Antgeno V - una protena secretada que controla la
expresin de muchos de los genes de virulencia adems de
que parece tener otra funcin desconocida que es esencial
para la virulencia.
Sideroforos (yersiniabactina) captacin de hierro
Yad A - una protena de membrana externa que interfiere
con la unin del complemento (C3b) y la bacteria,
evitando as la formacin de un complejo de ataque de
membrana.
Endotoxina (LPS). Productor de fiebre.
Factores de virulencia de Y. pseudotuberculosis
Los mismos factores de virulencia como Y. enterocolitica,
excepto la enterotoxina.
 Significancia Clnica de Y. enterocolitica y
Y. pseudotuberculosis
Ambos son adquiridas por
ingestin de alimentos o agua
contaminadas.
Y. enterocolitica causa enfermedad
en humanos
Y. pseudotuberculosis causa
enfermedad en animales.
Ambos causan una enfermedad
que implica la fiebre y el dolor
abdominal.
Y. enterocolitica tambin causa una
diarrea acuosa.
Yersinia enterocolitica
Causa la enfermedad yersiniosis
Infeccin a travs de:
alimentos
agua contaminadas (transfusiones).
Dosis infectante: 104 105.
En el tracto digestivo produce:
Gastroenteritis aguda
Enterocolitis
Linfaedenitis mesenterica
Ileitis terminal.
La sepsis es poco frecuente.
 Primeros Aislamientos de Yersinia
enterocolitica en el Per
Guevara J M, Chumpitaz J, Vergara J. Anaya R, Terreros A, y Requena A.
Diagnostico,1980, 6 (6): 273-276

Fecha de Medio de Aislamiento

Caso N Hospital Edad Sexo Diarrea Serogrupo
aislamiento

1 HSB 1a F + 15/05/78 SB- Resembrado en DC O:3

2 HSB 2m M + 17/05/78 SB- Resembrado en H O:3

3 HMC 17 a F + 25/05/78 Sel- Resembrado en SS O:3

4 HMC 52 a F + 27/05/78 SS O:3

5 HMC 6m F + 03/06/78 Sel- Resembrado en Te O:9

6 HMC 59 a F + 06/06/78 SS O:9

7 HNio 8m F + 12/12/78 SS O:3
N casos: 100 muestras de heces; HSB: Hospital San Bartolome, HMC: Hospital Militar Central y Hnio: Hospital del Nio.
Los medios de cultivo empleados: medio de transporte Cary Blair, Agar Salmonella-Shigella (SS), Agar Desoxicolato-Citrato (DC), Agar
Hektoen Enteric (H), Agar Tergitol (Te), caldo Selenito (Sel) y Solucin Salina Bufferada. (SB).
Medios de Aislamiento Primario
Las colonias de Y. enterocolitica Agar Mac Conkey

en agar Mac Conkey y agar SS son

transparentes.
En agar Hektoen son de color
salmn (fermentan sacarosa) y en Agar SS

agar XLD son de color amarillas

(fermentan xilosa).
Crecen mas lentamente a 37C.
Las colonias son muy pequeas, y Agar XLD

pueden pasar desapercibidas.

Revista Argentina de Microbiologa (2010) 42: 79
Medios de Aislamiento Primario
Medio selectivo y diferencial el
Agar CIN (contiene Cefsulodine,
Irgasan, Novobiocina y manitol).
cefsulodine
La concentracin de cefsulodine
4g/ml (C3G)
Las colonias son manitol positivo
(ojo de buey).
Puede ser usado para la deteccin
de Aeromonas spp. , Yersinia spp.
y P. shigelloides. (costo-beneficio)
Clin. Microbiol. Rev. 2010, 23(1): 1 35-73
Medios de Enriquecimientos
Enriquecimiento en frio (4C):
Sol. salina buferada (pH 7,2)
Agua peptonada.
Desventaja: mantener a 4 C
durante un mximo de 21 das.
Caldo Selenito
Caldo Rappaport
Caldo bilis-oxalato-sorbosa
Desventaja:
Posibilidad de aislar cepas de
Yersinias no patgenas.
Identificacin
Identificacin de Yersinia enterocolitica y Yersinia
pseudotuberculosis :
Ambos son mviles a 22-25C, pero no mviles a 37C
Ambos exhiben coloracin bipolar.
Ambos crecen mejor a bajas temperaturas y producen
pequeas colonas a 37C.
TSI A/A para Y. enterocolitica (fermentacin de sacarosa,
no de lactosa).
K/A para Y. pseudotuberculosis
LIA K/A para ambos
Urea + para ambos
ODC + para Y. enterocolitica solamente
Identificacin
Bioqumicamente Y. enterocolitica se caracteriza
porque fermenta carbohidratos sin produccin de
gas, son mviles a 28C pero no a 37C.
Escherichia coli Y. enterocolitica
P
H
Y
S
28C 37C

API 20E
S: 93% (a 28C)

TSI LIA TSI LIA

Caso Clnico
Paciente masculino de 7 meses (HC: 742535) llega el da 27/09/12 al
servicio de emergencia del Hospital San Bartolome con dos das de
enfermedad, presentando fiebre y diarrea con heces semilquida, con
moco y sangre.
El 27/09/12 se solicita reaccin inflamatoria presentando leucocitos mas
de 100/campo y hemates de 30 a 40/campo. Se deriva al servicio de la
URO para evaluacin y tratamiento, y se le solicita tambin cultivo de
heces.
El 29/09/12 se asla colonias sospechosas de Y. enterocolitica en el
cultivo de heces.
El 01/10/12 se confirma como Y. enterocolitica bioqumicamente
mediante sistema automatizado VITEK y serolgicamente.
Caso Clnico
 Caso Clnico
Agar XLD Agar CIN Agar SS

Agar Hektoen Agar MacConkey Agar SMAC

CONCLUSIONES:
Los mtodos de aislamientos ineficientes son la
razn de la tasa de la baja de prevalencia de Y.
enterocolitica.
El limite de deteccin para Y. enterocolitica
patognica es 103 a 106 o mas UFC/gr. de heces.
Las colonias de Y. enterocolitica no patognicas y
patognicas tienen la misma apariencia.
Los mtodos de aislamiento favorecen la
recuperacin de el bioserotipo O:3
Colonias de Y. enterocolitica en
agar CIN
Serologa de Y. enterocolitica
La serotipificacin parece ser un
buen marcador de virulencia.
La Y. enterocolitica serotipo O:8 es
conocido como altamente
patognico.
Los serotipos O:3 y O:9 son los mas
frecuentes causando infeccin y son
menos destructivos
El serotipo O:9 presenta reacciones
cruzadas con Brucella sp. y Vibrio
cholerae.
Contaminacin porcina
Diversos alimentos procedentes
de animales pueden ser
portadores de Y. enterocolitica.
Y. enterocolitica puede
multiplicarse en refrigeracin (2-
10C) y en condiciones
microaerofilia (5-10% de O2) carne de cerdo

Control de la bacteria en todos

los procesos:
en la granja
en el transporte al matadero
durante el sacrificio
 XI CONGRESO PERUANO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y TROPICALES
JOSE NEYRA RAMIREZ
19, 20 y21 de Noviembre de 2009 - LIMA SHERATON & CONVENTION CENTER

MTODO DE ENRIQUECIMIENTO RPIDO PARA EL AISLAMIENTO DE YERSINIA

ENTEROCOLITICA EN MUESTRAS DE INTESTINO DE CERDOS
Autores: Salinas Ivan, Gonzales Arturo, Soto Javier.
OBJETIVOS: Evaluar un mtodo de enriquecimiento rpido para
Yersinia enterocolitica y determinar su frecuencia en cerdos de un
camal en la ciudad de Lima.
MATERIAL Y METODOS: Se recolectaron 44 hisopados de intestino
de cerdos. Estos fueron transportados en Cary- Blair al Laboratorio
del Hospital San Bartolome y fueron sembrados inicialmente en agar
Mac Conkey, posteriormente enriquecidos en medio alcalino de KOH
al 0,5% en solucin salina al 0,85% (2 minutos), sembrndose
finalmente en otra placa de agar Mac Conkey. Las placas fueron
incubadas a 37 C por 24 horas y mantenidas a temperatura
Fig. 1. Mtodo de enriquecimiento para Yersinia Fig. 2. Colonias de Yersinia enterocolitica en Agar Mac
enterocolitica; KOH al 0.5% en suero fisiolgico y Conkey las 48 horas a temperatura ambiente. El

ambiente por 24 horas adicionales. Los aislamientos fueron

el medio de transporte de Cary-Blair. numero de colonias en el medio de cultivo es escaso.

identificados por medios convencionales y confirmadas por API 20E.

RESULTADOS: Se aisl Yersinia entercoltica en un 20.4% (9/44) de
los hisopados procesados por el mtodo de enriquecimiento y hubo
ausencia total de flora acompaante en las placas de aislamiento. En
la siembra directa, no se aisl ninguna cepa de Yersinia enterocoltica.
CONCLUSIONES: La escasa recuperacin de Yersinia enterocoltica en los productos alimenticios y en materias primas puede
tener diversas causas. Entre ellas se encuentra el nivel de flora acompaante en el producto, la cantidad de yersinias patgenas
y no patgenas presentes en la muestra, la prdida de factores de virulencia durante las etapas de enriquecimiento y
aislamiento; y por ltimo, el mtodo de recuperacin. Dada la alta frecuencia encontrada en muestras intestinales de cerdos, y
que estas son utilizadas para el consumo humano, recomendamos su bsqueda en muestras de pacientes con EDA.
Sugerimos evaluar el uso de este mtodo de enriquecimiento en muestras clnicas humanas por ser rpido,
econmico y de fcil uso.
Correspondencia: Gonzales Arturo, Escuela de Tecnologa Mdica. Facultad de Medicina de San Fernando -UNMSM- Local Central Av.
Grau 755 Lima 01 Tlf: 999977435, e-mail: 06010146@unmsm.edu.pe.