TW202432544A - 快速加速纖維肉瘤降解化合物及相關使用方法 - Google Patents

Abstract

本文提供雙功能化合物，其可用作快速加速纖維肉瘤(Raf，例如c-Raf、A-Raf和/或B-RAF)的調節劑。

Description

快速加速纖維肉瘤降解化合物及相關使用方法 相關申請

本申請請求2022年9月7日提交的美國臨時申請第63/404,228號、2023年3月13日提交的美國臨時申請第63/451,822號以及2023年7月10日提交的美國臨時申請第63/525,770號的優先權，該等各自的全部內容均藉由引用併入本文。

本揭露係關於一種快速加速纖維肉瘤(RAF)降解化合物及相關使用方法。

大多數小分子藥物在緊密且明確的口袋中結合酵素或受體。另一方面，由於蛋白質-蛋白質相互作用的接觸表面較大且涉及淺凹槽或平坦界面，因此使用小分子來靶向蛋白質-蛋白質相互作用是出了名的困難。E3泛蛋白鏈接酶(人類中已知有數百種)賦予泛素化底物特異性，由於其對某些蛋白質底物的特異性，因此其為比一般蛋白酶體抑制劑更有吸引力的治療標靶。E3鏈接酶配體的開發已被證明具有挑戰性，部分原因是它們必須破壞蛋白質-蛋白質相互作用。 然而，最近的發展提供了與這些鏈接酶結合的特異性配體。例如，自從發現第一個小分子E3鏈接酶抑制劑nutlins以來，已經報導了更多針對E3鏈接酶的化合物。

Cereblon是人類中由CRBN基因編碼的蛋白質。CRBN直系同源物從植物到人類都高度保守，這強調了其生理重要性。Cereblon與受損的DNA結合蛋白1(DDB1)、Cullin-4A(CUL4A)和cullins調節因子1(ROC1)形成E3泛蛋白鏈接酶複合物。該複合物泛素化許多其他蛋白質。藉由尚未完全闡明的機制，目標蛋白的cereblon泛素化導致纖維母細胞生長因子8(FGF8)和纖維母細胞生長因子10(FGF10)水平增加。FGF8反過來調節許多發育過程，例如肢體和聽囊的形成。最終結果是，這種泛蛋白鏈接酶複合體對於胚胎肢體的生長非常重要。在缺乏cereblon的情況下，DDB1與DDB2形成複合物，作為DNA損傷結合蛋白。

本領域持續需要與快速加速纖維肉瘤(RAF)過度表現或聚集、或RAF過度活化(例如組成型活性RAF)相關的疾病的有效治療。例如，目前的B-RAF抑制劑(例如，vemurafenib和daB-RAFenib)可能會靶向V600突變體B-RAF。因此，向對目前市售藥劑不敏感的具有不同B-RAF突變的疾病或失調(例如黑色素瘤、肺癌、胰腺癌和/或結直腸癌)仍存在需要。此外，B-RAF/MEK抑制劑治療可能會出現抗藥性突變。例如，p61剪接變異體可能出現在接受B-RAF/MEK抑制劑治療的黑色素瘤患者中，這使得這些患者沒有臨床選擇。目前上市的藥物也會與野生型B-RAF結合併引起其反常激活，導致臨床併發症。此外，藉由與CRaf異二聚化發出訊號的低活性III類B-RAF突變體家族，佔非小細胞肺癌(NSCLC)中B-RAF突變的40%，也零星出現在其他癌症中，其無法以 任何目前批准的或臨床階段的B-RAF抑制劑標靶。I類B-RAF突變體(V600E、V600K、V600D)具有高激酶活性，不依賴Ras和二聚化，並且對維莫非尼敏感。II類B-RAF突變體具有高至中等激酶活性，不依賴Ras，且依賴二聚化，且對維莫非尼不敏感。III類B-RAF突變體具有不同程度的激酶活性(例如一些III類B-RAF突變體具有高水平的激酶活性，而其他突變體沒有激酶活性)，依賴Ras和二聚化，並且對維莫非尼不敏感。

因此，非特異性作用以及無法標靶和調節RAF仍然是開發有效治療的障礙。因此，本領域持續需要對RAF相關疾病及失調的有效治療。

本文提供異雙功能化合物，其功能是將快速加速纖維肉瘤(RAF)蛋白或其突變形式募集至E3泛蛋白鏈接酶，以用於靶向泛素化和隨後的蛋白酶體降解。此類化合物包括具有以下化學結構的化合物：

PTM-L-CLM其中PTM是RAF標靶部分，CLM是結合cereblon E3泛蛋白鏈接酶的E3泛蛋白鏈接酶結合部分，L是將CLM共價交聯至PTM的化學鏈接部分。

還包括包含這些異雙功能化合物的藥物組成物、其製備方法以及使用所揭露的異雙功能化合物治療RAF相關病症的方法。

還包括使用所揭露的化合物、藥學上可接受的鹽及其組成物治療響應於RAF調節的病症的方法。

圖1顯示使用本揭露的化合物76和77在H1666腫瘤的腫瘤生長抑制結果。

圖2顯示使用本揭露的化合物74、73、76和77在H1666腫瘤的腫瘤生長抑制結果。

圖3顯示使用本揭露的化合物76、80和84在H1666腫瘤的腫瘤生長抑制結果。

圖4顯示使用本揭露的化合物76和112在H1666腫瘤的腫瘤生長抑制結果。

圖5顯示使用本揭露的化合物76和112在H1666腫瘤的腫瘤生長抑制結果。

1.化合物概述

在第一實施方案中，本文提供具有化學結構I的化合物：

PTM-L-CLM；(I)或其藥學上可接受的鹽，其中：

(a)PTM是一種小分子快速加速纖維肉瘤(RAF)標靶部分，例如由以下化學結構表示的一種：

其中：

X是O或NH；

R_PTM1選自氫、鹵素、C_1-4烷基和氰基；

R_PTM2選自氫、任選經取代的C_1-4烷基和任選經取代的C_1-4烷氧基；

R_PTM3選自任選經取代的C_1-4烷基、-NH(任選經取代的C_1-4烷基)、-N(任選經取代的C_1-4烷基)₂、任選經取代的環烷基和任選經取代的雜環基；以及

表示化學鏈接部分(L)的接附點；

(b)CLM是E3泛蛋白鏈接酶結合部分，其結合cereblon E3泛蛋白鏈接酶，例如由以下化學結構表示的一種：

或

；

其中：

W是CH₂或C(O)；

Y是N或CR⁵；

Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵各自獨立地為CH、CR^w或N；

Z¹和Z²各自獨立地為CH、CR^x或N；

V不存在或是NR^y或C(O)NR^z；

R⁴、R⁵和R⁶各自獨立地為氫或任選經取代的C_1-4烷基；

R^w和R^x各自獨立地選自鹵素、任選經取代的C_1-4烷基、任選經取代的C_1-4烷氧基、氰基、OH、-NH(任選經取代的C_1-4烷基)和-NH(任選經取代的C_1-4烷基)₂；

R^y和R^z各自獨立地為氫或任選經取代的C_1-6烷基、任選經取代的環烷基或任選經取代的雜環基；以及

虛線表示化學鏈接部分(L)所接附的結構部分；以及

(c)L是將CLM與PTM共價交聯的化學鏈接部分。

或者，作為第一實施方案的一部分，本文提供具有化學結構I的化合物：

PTM-L-CLM；(I)或其藥學上可接受的鹽，其中：

(a)PTM是一種小分子快速加速纖維肉瘤(RAF)標靶部分，例如由以下化學結構表示的一種：

其中：

X是O或NH；

R_PTM1選自氫、鹵素和氰基；

R_PTM2選自氫、任選經取代的C_1-4烷基和任選經取代的C_1-4烷氧基；

R_PTM3選自任選經取代的C_1-4烷基、-NH(任選經取代的C_1-4烷基)、-N(任選經取代的C_1-4烷基)₂、任選經取代的環烷基和任選經取代的雜環基；以及

表示化學鏈接部分(L)的接附點；

(b)CLM是E3泛蛋白鏈接酶結合部分，其結合cereblon E3泛蛋白鏈接酶，例如由以下化學結構表示的一種：

、

或

其中：

W是CH₂或C(O)；

Y是N或CR⁵；

Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵各自獨立地為CH、CR^w或N；

Z¹和Z²各自獨立地為CH、CR^x或N；

V不存在或是NR^y或C(O)NR^z；

R⁴、R⁵和R⁶各自獨立地是氫或任選經取代的C_1-4烷基；

R^w和R^x各自獨立地選自鹵素、任選經取代的C_1-4烷基、任選經取代的C_1-4烷氧基、氰基、OH、-NH(任選經取代的C_1-4烷基)和-NH(任選經取代的C_1-4烷基)₂；

R^y和R^z各自獨立地是氫或任選經取代的C_1-6烷基、任選經取代的環烷基或任選經取代的雜環基；以及

虛線表示化學鏈接部分(L)所接附的結構部分；以及

(c)L是將CLM與PTM共價交聯的化學鏈接部分。

2.定義

在本文沒有具體定義術語的情況下，該術語由本發明所屬技術領域中具有通常知識者在描述本揭露內容的上下文中應用該術語來賦予本領域公認的含義。

除非上下文明確指出，否則本文和所附請求項中使用的冠詞「一(a)」和「一(an)」在本文中用於指冠詞的一個或多於一個(即，至少一個)語法對象。舉例來說，除非另有說明，「一元件」是指一個元件或多於一個元件。

所有過渡短語諸如「包含(comprising)」、「包括(including)」、「攜帶(carrying)」、「具有(having)」、「含有(containing)」、「涉及(involving)」、「持有(holding)」、「構成(composed of)」等應被理解為開放式，即意味著包括但不限於。只有過渡短語「由...組成(consisting of)」和「基本上由...組成(consisting essentially of)」應分別是封閉式或半封閉式過渡短語，如《美國專利局專利審查程序手冊》第2111.03節中所述。

當本文使用碳原子範圍，例如C₁-C₆或C_1-6時，涵蓋所有範圍以及碳原子的單獨數目。例如，「C_1-3」包括C_1-3、C_1-2、C_2-3、C₁、C₂和C₃。

術語「鹵代(halo)」和「鹵素(halogen)」是指選自氟(氟基，F)、氯(氯基，Cl)、溴(溴基，Br)和碘(碘基，I)的原子。

術語「烷基」當單獨使用或作為較大部分例如「鹵代烷基」、「羥烷基」等的一部分使用時，是指飽和直鏈或支鏈單價烴基，除非另有說明，其具有1至20個碳原子，例如C_1-10、C_1-6或C_1-4。C_1-6烷基包括例如甲基、乙基、丙基(例如正丙基、異丙基)、丁基(例如正丁基、三級丁基、二級丁基、異丁基)、戊基(例如正戊基、3-戊基、戊基(amyl)、新戊基、3-甲基-2-丁基、三級戊基)和己基(例如，正己基)。應理解，當指定時，烷基上的任選取代基可以存在於任何可取代的位置。

術語「鹵代烷基」包括單、多和全鹵代烷基，其中鹵素獨立地選自氟、氯、溴和碘。

術語「羥烷基」包括單、多和全羥烷基，其中一個或多個氫原子被OH取代。

術語「烷氧基」是指藉由氧鏈接原子接附的烷基，由-O烷基表示。非限制性實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基和己氧基。應理解，當指定時，烷氧基上的任選取代基可以存在於任何可取代的位置上

術語「鹵代烷氧基」包括單、多和全鹵代烷氧基，其中鹵素獨立地選自氟、氯、溴和碘。

除非另有說明，術語「雜芳基」是指含有1-4個選自N、O和S的雜原子的5-16員芳族基。在某些情況下，雜芳基中的氮原子可以被季銨化。單環雜芳基包括例如噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、

唑基、異

唑基、

二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、吡啶基、噠

基、嘧啶基、吡

基等。雙環雜芳基包括以下基：其中單環雜芳基環稠合至一個或多 個芳基或雜芳基環。非限制性實例包括吲哚基、苯并

唑基、苯并側氧基二唑基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、吡咯并吡啶基、吡咯并嘧啶基、吡咯并吡啶基、噻吩并吡啶基、噻吩并嘧啶基、吲

基、嘌呤基、辛啉基、萘啶基和蝶啶基。應理解，當指定時，雜芳基上的任選取代基可以存在於任何可取代的位置上，並且包括例如接附雜芳基的位置(在化合價允許的情況下)。

除非另有說明，否則術語「雜環基」是指含有1至4個獨立選自N、O和S的雜原子的4至12員飽和或部分不飽和雜環。雜環基環可以在任何雜原子或碳原子處接附至其側基，從而形成穩定的結構。雜環基可以是單環或雙環(例如，橋連環、稠合環或螺雙環)。單環飽和或部分不飽和雜環基的實例包括但不限於氮雜環丁烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、吡咯啶基、吡咯啶酮基、哌啶基、

唑烷基、哌

基、二

烷基、二氧戊環基、

啉基、二氫呋喃基、二氫吡喃基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、二氫嘧啶基、四氫嘧啶基、二氫

二唑基和二氫異

唑基。雙環雜環基包括例如與另一個不飽和雜環基團、環烷基、芳基或雜芳基環稠合的不飽和雜環基團，例如苯并間二氧雜環戊烯基、二氫苯并二

英基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、5-氧雜-2,6-二氮雜螺環基[3.4]辛-6-烯基、6-硫雜-2,7-二氮雜螺[3.4]辛基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、螺[二氫吲哚-3,3'-吡咯啶]-基、硫苯并二氫吡喃基(thiochromanyl)、7-氮雜螺[3.5]壬基、6-氮雜螺[3.4]辛基等。應理解，當指定時，雜環基上的任選取代基可以存在於任何可取代的位置上，並且包括例如雜環基所接附的位置。

術語「螺」是指共享一個環原子(例如碳)的兩個環。

術語「稠合」是指彼此共用兩個相鄰環原子的兩個環。

術語「橋連」是指彼此共用三個相鄰環原子的兩個環。

術語「環烷基」是指如本文所述的飽和環狀脂族單環或雙環環系統，除非另有說明，其具有3至10個碳環原子。單環環烷基包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環庚基、環庚烯基和環辛基。應理解，當指定時，環烷基或環脂族基團上的任選取代基可以存在於任何可取代的位置上，並且包括例如環烷基所接附的位置。

術語「任選經取代的」是指指定部分的一個或多個氫可以被適當的取代基取代。除非另有說明，否則「任選經取代的」基團可以在化合價允許的情況下在該基團的每個可取代位置具有適當的取代基。任選的取代基包括但不限於選自氰基(-CN)、鹵素、亞胺基(=NH)、硝基(-NO2)、側氧基(=O)、-C(O)Rⁱ、-C(O)ORⁱ、-C(O)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-C(O)SRⁱ、-C(NRⁱ)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-C(S)Rⁱ、-C(S)ORⁱ、-C(S)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-ORⁱ、-OC(O)Rⁱ、-OC(O)ORⁱ、-OC(O)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-OC(O)SRⁱ、-OC(NRⁱ)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-OC(S)Rⁱ、-OC(S)ORⁱ、-OC(S)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-OP(O)(ORⁱⁱ)ORⁱⁱⁱ、-OS(O)Rⁱ、-OS(O)₂Rⁱ、-OS(O)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-OS(O)₂NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-NRⁱC(O)R^iv、-NRⁱC(O)OR^iv、-NRⁱC(O)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-NR^aC(O)SR^iv、-NRⁱC(NR^iv)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-NRⁱC(S)R^iv、-NRⁱC(S)OR^iv、-NRⁱC(S)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-NRⁱS(O)R^iv、-NRⁱS(O)₂R^iv、-NRⁱS(O)NRⁱⁱRⁱⁱⁱ、-NRⁱS(O)₂NRⁱⁱR^iv、-SRⁱ、-S(O)Rⁱ、-S(O)₂Rⁱ、-S(O)NRⁱⁱR^iv、-S(O)₂NRⁱⁱR^iv、烷基、雜烷基、烯基、炔基、環烷基、芳基、雜芳基及雜環基，其中所述烷基、雜烷基、烯基、炔基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環基各自進一步任選地經一個或多個，在一實施方案中，一、二、三或四個取代基Q^a取代，其中每個Rⁱ、Rⁱⁱ、Rⁱⁱⁱ和R^iv獨立地是烷基、雜烷基、烯基、炔基、環烷基、芳基、雜芳基或雜環基，其各自任選地經一個或多個，在一實施方案中，一、二、三、或四個取代基Q^a取代或 Rⁱⁱ和Rⁱⁱⁱ與它們所接附的N原子一起形成任選經一個或多個，在一實施方案中，一、二、三或四個取代基Q^a取代的雜環基，其中每個Q^a獨立地選自氰基、鹵素、亞胺基、硝基、側氧基、烷基、雜烷基、烯基、炔基、環烷基、C_6-14芳基、雜芳基，雜環基、-C(O)R^v、-C(O)OR^v、-C(O)NR^viR^vii、-C(O)SR^v、-C(NR^v)NR^viR^vii、-C(S)R^v、-C(S)OR^v、-C(S)NR^viR^vii、-OR^v、-OC(O)R^v、-OC(O)OR^v、-OC(O)NR^viR^vii、-OC(O)SR^v、-OC(NR^v)NR^viR^vii、-OC(S)R^v、-OC(S)OR^v、-OC(S)NR^viR^vii、-OP(O)(OR^v)OR^vi、-OS(O)R^v、-OS(O)₂R^v、-OS(O)NR^viR^vii、-OS(O)₂NR^vR^vii、-NR^viR^vii、-NR^vC(O)R^viii、-NR^eC(O)OR^vi、-NR^vC(O)NR^viR^vii、-NR^vC(O)SR^vi、-NR^vC(NR^viii)NR^viR^vii、-NR^vC(S)R^viii、-NR^vC(S)OR^vi、-NR^vC(S)NR^viR^vii、-NR^vS(O)R^viii、-NR^vS(O)₂R^viii、-NR^vS(O)NR^viR^vii、-NR^vS(O)₂NR^viR^vii、-SR^v、-S(O)R^v、-S(O)₂R^v、-S(O)NR^viR^vii和-S(O)₂NR^viR^vii；其中每個R^v、R^vi、R^vii和R^viii獨立地是烷基、烯基、炔基、環烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜環基；或(iii)R^vi和R^viii與它們所接附的N原子一起形成雜環基。

除非另有說明，否則術語「化合物」是指本文所述的任何異雙官能化合物。在某些方面，當指定時，揭露的化合物上的一個或多個氫原子可以被氘取代。與等效的「未氘化」化合物相比，此類氘化化合物可具有一種或多種改善的藥物動力學或藥效學特性(例如，更長的半衰期)。

本文所描述的一種或多種化合物可以以各種互變異構形式存在並且是本揭露的一部分。術語「互變異構體(tautomers)」或「互變異構體的(tautomeric)」是指由至少一種氫原子形式遷移和至少一種化合價變化產生的兩種或更多種可相互轉化的化合物/取代基。明確包括此類化合物的所有此類異構 形式。因此，當本文的化合物由本文的結構式表示或由本文的化學名稱指定時，此結構式涵蓋該化合物可能存在的所有互變異構形式。

具有一個或多個手性中心的化合物可以多種立體異構形式存在。立體異構體是僅空間排列不同的化合物。立體異構體包括所有非對映體、對映體和差向異構體形式以及外消旋體和其等的混合物。「幾何異構體」是指取代基相對於碳-碳雙鍵、環烷基環或橋聯雙環體系的取向不同的異構體。碳-碳雙鍵每一側的原子(除H之外)可以是E(取代基位於碳-碳雙鍵的相對側)或Z(取代基位於同一側)構型。「順式」是指取代基位於環的同一側，而「反式」是指取代基位於環的相對側。

當具有一個或多個手性中心的化合物中的手性中心處的立體化學構型由其化學名稱(例如，其中該構型在化學名稱中由“R”或“S”表示)或結構(例如，構型由「楔形」鍵表示)描述時，所表示的構型相對於相反構型的富集大於50%、60%、70%、80%、90%、99%或99.9%。「指定構型相對於相反構型的富集度」是莫耳百分比，且藉由將手性中心處具有指定立體化學構型的化合物的數量除以混合物中具有相同或相反立體化學構型的所有化合物的總數來確定。

當以名稱或結構描述幾何異構體時，所指示的異構體相對於相反異構體的富集大於50%、60%、70%、80%、90%、99%或99.9%。「指定異構體相對於相反異構體的富集度」是莫耳百分比，並且藉由將具有指定幾何構型的化合物的數量除以混合物中具有相同或相反幾何構型的所有化合物的總數來確定。

當所揭露的化合物藉由結構命名或描述而不指明立體化學時，應理解，該名稱或結構涵蓋可能的立體異構體或幾何異構體中的一種而不含其他， 或涵蓋立體異構體或幾何異構體的混合。「R*」和「S*」表示一個或多個手性碳原子周圍取代基的相對構型，即該化合物是單一對映體，但絕對構型未知。

術語「受試者」和「患者」可以互換使用，並且是指需要治療的哺乳動物，例如伴侶動物(如狗、貓等)、農場動物(如牛、豬、馬、綿羊、山羊等)和實驗動物(如大鼠、小鼠、豚鼠等)。通常，受試者是需要治療的人。

術語「抑制(inhibit、inhibition或inhibiting)」包括生物活性或過程的基線活性的降低。

如本文所用，術語「治療」是指逆轉、減輕、延遲疾病或失調或其一種或多種症狀的發作或進展，如在此描述。在某些方面，可以在一種或多種症狀出現後進行治療，即治療性治療。在其他方面，可以在沒有症狀的情況下進行治療。例如，可以在症狀出現之前對易感個體進行治療(例如，根據症狀病史和/或根據暴露於特定生物體或其他易感因素)，即預防性治療。症狀緩解後也可以繼續治療，例如延緩復發。

術語「藥學上可接受的載體」是指不破壞與其配製的化合物的藥理活性的無毒載體、佐劑或媒介物。可用於本文所述的組成物中的藥學上可接受的載體、佐劑或媒介物包括但不限於離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白如人血清白蛋白、緩衝物質如磷酸鹽、甘胺酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠體二氧化矽、三矽酸鎂、聚乙烯吡咯啶酮，纖維素基物質、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。

對於在藥物中的使用，本文所描述的化合物的鹽是指無毒的「藥學上可接受的鹽」。藥學上可接受的鹽形式包括藥學上可接受的酸性/陰離子或鹼性/陽離子鹽。本文所述化合物的適當的藥學上可接受的酸加成鹽包括例如無機酸(例如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硝酸和硫酸)和有機酸(例如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、甲磺酸和對甲苯磺酸)的鹽。具有酸性基團例如羧酸的本教示的化合物可以與藥學上可接受的鹼形成藥學上可接受的鹽。適當的藥學上可接受的鹼性鹽包括例如銨鹽、鹼金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)和鹼土金屬鹽(例如鎂鹽和鈣鹽)。具有季銨基的化合物還含有抗衡陰離子，如氯離子、溴離子、碘離子、乙酸根、高氯酸根等。此類鹽的其他例子包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、甲磺酸鹽、硝酸鹽、苯甲酸鹽以及具有胺基酸例如麩胺酸的鹽。

本文所述化合物的術語「有效量」和「治療有效量」是指足以在受試者中誘導特定反應的量，例如，以在本文所述病症的治療中提供治療益處。本揭露的化合物或其藥學上可接受的鹽的治療有效量可以根據預期應用(體外或體內)、受試者和所治療的疾病病症而變化，例如受試者的體重和年齡、疾病病症的嚴重程度、給藥方式等。本文所述的化合物和化合物的藥學上可接受的鹽的治療有效量或劑量可以藉由常規方法例如建模、劑量遞增研究或臨床試驗，並藉由考慮因素例如給藥的模式或途徑或藥物傳遞、化合物或鹽的藥物動力學、疾病或失調的嚴重性和病程、受試者先前或正在進行的治療、受試者的健康狀況和對藥物的反應以及治療醫生的判斷來確定。用於受試者的劑量的說明性實例在約0.001mg至約1000mg化合物的範圍內(每天，以單一或分開的劑量單位(例如，BID、TID、QID))。

術語「病症」、「疾病」和「失調」在本文中可互換使用，並且是指對受試者的全部或部分的結構或功能產生負面影響的異常病症，並且該異常病症不是直接由於任何外部損傷造成的。在一些實施方案中，疾病是與一種或多種特定徵兆和症狀相關的醫學病症、疾病或不適。

術語「給藥(administer、administering和“administration)」是指提供、植入、吸收、攝取、注射、吸入或以其他方式將本文所述的化合物或其藥學上可接受的鹽或藥物組成物引入受試者之中或之上。

術語「泛蛋白鏈接酶」是指促進一個或多個泛素蛋白轉移至特定底物蛋白的蛋白質家族。添加幾個泛素的鏈(多聚泛素化)可靶向底物蛋白進行降解。例如，cereblon是一種E3泛蛋白鏈接酶，單獨使用或與E2泛素綴合酶組合，最終可以導致四個泛素的鏈接附到目標蛋白的離胺酸殘基上，從而靶向蛋白質用於被蛋白酶體降解。泛蛋白鏈接酶參與多泛素化，使得第一個泛素接附到目標蛋白上的離胺酸上；第二個泛素接附在第一個泛素上；第三個接附到第二個，且第四個接附到第三個。這種多聚泛素化標記蛋白質用於被蛋白酶體降解。

除非另有說明，否則術語「RAF」包括野生型RAF和因此的突變形式。

「RAF相關病症」是指響應於RAF的調節的病症，例如透過降解RAF蛋白(例如，B-RAF)來調節的病症。RAF(例如，B-RAF)相關病症可能由蛋白質表現、過度表現、突變、錯誤折疊或失調(例如，患者中表達的蛋白質量升高)引起。

3.化合物和組成物

在第二實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM2選自氫、鹵素、鹵代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基和鹵代C_1-4烷氧基；R_PTM3選自C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、氰基C_1-4烷基、羥基C_1-4烷基、-NH(C_1-4烷基)、-N(C_1-4烷基)₂、環烷基和雜環基，其中所述環烷基和雜環基各自任選地經1至3個選自鹵素、側氧基、C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、鹵代C_1-4烷氧基和氰基的基團取代；R⁴和R⁵各自獨立地為氫或C_1-4烷基；R^w和R^x各自獨立選自鹵素、C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、鹵代C_1-4烷氧基、氰基、OH、-NH(C_1-4烷基)和-NH(C_1-4烷基)₂；且R^y和R^z各自獨立地為氫或C_1-4烷基，其中其餘變數如上文針對化學結構I所述。

在第三實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的X是O，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二實施方案所述。

在第四實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM1是氰基，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二或第三實施方案所述。或者，作為第四實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM1是氰基、-CH₃、-CH₂CH₃、F或-Cl，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二或第三實施方案所述。

在第五實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM2是鹵素，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第四實施方案中任一者所述。或者，作為第五實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM2是氟，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第四實施方案中任一者所述。

在第六實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM3是任選地經1至3個選自鹵素、側氧基、C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵代C_1-6烷氧基和氰基的基團取代的雜環基，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第五實施方案中任一者所述。或者，作為第六實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM3是任選地經1至3個選自鹵素、側氧基、C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵代C_1-6烷氧基和氰基的基團取代的N-鏈接雜環基，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第五實施方案中任一者所述。或者，作為第六實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM3是任選地經1至3個選自鹵素、側氧基、C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵代C_1-6烷氧基和氰基的基團取代的吡咯啶基，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第五實施方案中任一者所述。在另一個替代方案中，作為第六實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R_PTM3是任選地經1至3個鹵素取代的吡咯啶基，其中其餘變量如上文針對化學結構I以及第二至第五實施方案中任一者所述。

在第七實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的PTM由以下化學結構表示：

，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第 二至第六實施方案中任一者所述。或者，作為第七實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的PTM由以下化學結構表示：

，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第 二至第六實施方案中任一者所述。

在第八實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

或

， 其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第七實施方案中任一者所述。或者，作為第八實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

、

或

(CLMIII)，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第七實施方案中任一者所述。或者，作為第八實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至 第七實施方案中任一者所述。或者，作為第八實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第 七實施方案中任一者所述。或者，作為第八實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

，其中Y為CH，其餘變數如上文針對化學結 構I和第二至第七實施方案中任一者所述。

在第九個實施例中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R⁴是氫，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第八實施方案中任一者所述。

在第十實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的Y是CH，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第九實施方案中任一者所述。

在第十一實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R^y和R^z各自是氫，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十實施方案中任一者所述。

在第十二實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵各自獨立地是CH或CR^w，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第十一實施方案中任一者所述。

在第十三實施方案中，對於由化學結構CLMI和CLMIII表示的CLM，Q³、Q⁴和Q⁵各自是CH，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十二實施方案中任一者所述。

在第十四實施方案中，對於由化學結構CLMIII表示的CLM，Q¹和Q²各自是CR^w，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十三實施方案中任一者所述。在替代的第十四實施方案中，對於由化學結構CLMIII表示的CLM，Q¹是CH且Q²是CR^w，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十三實施方案中任一者所述。

在第十五實施例中，對於由化學結構CLMI表示的CLM，Q¹是CR^w且Q²是CH，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十四實施方案中任一者所述。在替代方案中，作為第十五實施方案的一部分，對於由化學結構CLMI表示的CLM，Q¹是CH且Q²是CR^w，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十四實方案中的任一者所述。或者，作為第十五實施方案的一部分，對於由化學結構CLMII表示的CLM，Q¹、Q²和Q³是CH並且Q⁴是CR^w，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第十四實施方案中任一者所述。

在第十六實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R^w選自鹵素和C_1-4烷氧基，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第十五實施方案中任一者所述。或者，作為第十六實施方案的一部分，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的R^w選自鹵素、C_1-4烷基和C_{1- 4}烷氧基，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第十五實施方案中任一者所述。

在第十七實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

或

，其中其餘變項如上文針對 化學結構I和第二至第十六實施方案中任一者所述。在替代的第十七實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

，其中其餘變項如上文針對化學結構I和第二至第十六實施方案 中任一者所述。在替代的第十七實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

、

、

、

，其 中其餘變項如上文針對化學結構I和第二至第十六實施方案中任一者所述。在替代的第十七實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中 的CLM由以下化學結構表示：

、

、

、

、

，其 中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十六實施方案中任一者所述。在另一替代的第十七實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的 鹽中的CLM由以下化學結構表示：

、

、

或

，其中其餘變項如上文針對化學結構I和第二至第十 六實施方案中任一者所述。在另一替代的第十七實施方案中，具有化學結構I 的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十 六實施方案中任一者所述。在另一替代的第十七實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的CLM由以下化學結構表示：

，其中其餘變項如上文針對化學結構I和第二至第十六實 施方案中任一者所述。

在第十八實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由化學結構A、B或C表示：

其中：Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和YL5各自獨立地不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和任選經取代的C_1-6伸烷基，其中所述C_1-6伸烷基還可以任選地被一個或多個O、NH和N(C_1-4烷基)間隔，且其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成側氧基；W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，它們各自任選地經取代，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十七實施方案中任一者所述。在替代的第十八實施方案中，具有化學結構I 的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由化學結構A、B或C表示：

其中：Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立地不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和任選經取代的C_1-6伸烷基，其中所述C_1-6伸烷基也可以任選地被一個或多個O、NH和N(C_1-4烷基)間隔，且其中所述C_1-6伸烷基的相同碳上的兩個氫可以一起形成側氧基或C_3-6環烷基；且W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，它們各自任選地經取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第十七實施方案中任一者所述。在替代的第十八實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由化學結構A、B或C表示：

其中：Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立地不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和任選經取代的C_1-6伸烷基，其中所述C_1-6伸烷基也可以任選地被一個或多個O、NH和NR^NY間隔，並且其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起 形成側氧基或C_3-6環烷基；R^NY是任選經C_1-3烷氧基或側氧基取代的C_1-4烷基；且W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，它們各自任選地經取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第十七實施方案中任一者所述。

在第十九實施方案中，化學結構A、B或C中的Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立地不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和C_1-6伸烷基，任選地被一個或多個O、NH和N(C_1-4烷基)間隔，且其中所述C_1-6伸烷基的相同碳上的兩個氫可以一起形成側氧基；W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，它們各自任選地經1至4個選自R^M的基團取代；且R^M選自鹵素、OH、氰基、氧代、C_1-4烷基、C_1-4鹵代烷基、C_1-4羥烷基、C_1-4烷氧基和C_1-4鹵代烷氧基，其中其餘變數如上文化學結構I和第二至第十八實施方案中的任一者所述。在第十九實施方案中，化學結構A、B或C中的Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立地不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和C_1-6伸烷基，且C_1-6伸烷基任選地經一個或多個O、NH和N(C_1-4烷基)間隔，且其中所述C_1-6伸烷基的相同碳上的兩個氫可以一起形成側氧基或C_3-4環烷基；W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，它們各自任選地經1至4個選自R^M的基團取代；且R^M選自鹵素、OH、氰基、側氧基、C_1-4烷基、C_1-4鹵代烷基、C_1-4羥烷基、C_1-4烷氧基和C_1-4鹵代烷氧基，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十八實施方案中任一者所述。

在第二十實施方案中，化學結構A、B或C中的Y^L1不存在，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第十九實施方案中任一者所述。

在第二十一實施方案中，化學結構A、B或C中的W^L1選自苯基、4-至7-員雜環基和5-至7-員雜芳基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第二十實施方案中任一者所述。或者，作為第二十一實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的W^L1選自苯基、4至7員雜環基和5至10員雜芳基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第二十實施方案中任一者所述。或者，作為第二十一實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的W^L1選自苯基、哌啶基、吡啶基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第二十實施方案中任一者所述。在替代的第二十一實施方案中，化學結構A、B或C中的W^L1選自吡唑基、噻吩基、苯基、哌啶基、吡啶基、噠

基、吡

基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第二十實施方案中任一者所述。或者，作為第二十一實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的W^L1選自吡唑基、噻吩基、苯基、哌啶基、吡啶基、1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸基、噠

基、吡

基、和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十實施方案中任一者所述。

在第二十二實施方案中，化學結構A、B或C中的Y^L2不存在或選自NH和C_1-6伸烷基，其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第二十一實施方案中任一者所述。在替代的第二十二實施方案中，化學結構A、B或C中的Y^L2不存在或選自NH和C_1-6伸烷基，其中所述C_1-6伸烷基的相同碳上的兩個 氫可以一起構成形成C_3-4環烷基，並且其中其餘變數如上文針對化學結構I和第二至第二十一實施方案中任一者所述。

在第二十三實施方案中，化學結構A、B或C中的W^L2選自4-至11-員雜環基和環烷基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十二實施方案中任一者所述。或者，作為第二十三實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的W^L2選自哌啶基、哌

基、氮雜環丁烷基、

啉基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、環丁基和環己基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十二實施方案中任一者所述。在替代的第二十三實施方案中，化學結構A、B或C中的W^L2選自吡咯烷基、哌啶基、哌

基、氮雜環丁烷基、

啉基、2-氮雜螺[3.3]庚基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、環丁基和環己基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十二實施方案中任一者所述。在替代的第二十三實施方案中，化學結構A、B或C中的W^L2選自吡咯啶基、哌啶基、哌

基、吡咯啶基、氮雜環丁基、

啉基、7-氮雜螺[3.5]壬基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、環丁基和環己基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十二實施方案中任一者所述。

在第二十四實施方案中，化學結構A、B或C中的Y^L3不存在或選自O和C_1-6伸烷基，其中所述C_1-6伸烷基可任選地被O、NH和N(C_1-4烷基)間 隔，且其中所述C_1-6伸烷基的相同碳上的兩個氫可以一起形成側氧基，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十三實施方案中任一者所述。

在第二十五實施方案中，化學結構A、B或C中的W^L3選自4-至7-員雜環基、環烷基及5-至7-員雜芳基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十四實施方案中任一者所述。在替代的第二十五實施方案中，化學結構A、B或C中的W^L3選自4-至11-員雜環基、環烷基及5-至7-員雜芳基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十四實施方案中任一者所述。或者，作為第二十五實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的W^L3選自哌啶基、氮雜環丁烷基、哌

基、環己基、環丁基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十四實施方案中任一者所述。或者，作為第二十五實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的W^L3選自吡咯啶基、哌啶基、氮雜環丁基、哌

基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、2-氮雜螺[3.3]庚基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、環己基、環丁基及嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十四實施方案中任一者所述。或者，作為第二十五實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的W^L3選自吡咯啶基、哌啶基、氮雜環丁烷基、哌

基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、2-氮雜螺[3.3]庚基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基，2-氮雜螺[3.5]壬基、3-氮雜螺[5.5]十一烷基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、環己基、環丁基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十四實施方案中任一者所述。或者，作為第二十五實施方案的一部分，化學 結構A、B或C中的W^L3選自吡咯啶基、哌啶基、氮雜環丁基、哌

基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、2-氮雜螺[3.3]庚基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、環己基、環丁基及嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十四實施方案中任一者所述。

在第二十六實施方案中，化學結構A、B或C中的Y^L4不存在或選自O、NH和C_1-6伸烷基，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十五實施方案中任一者所述。或者，作為第二十六實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的Y^L4不存在或選自O、NH、NCH₃和C_1-6伸烷基，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十五實施方案中任一者所述。

在第二十七實施方案中，化學結構A、B或C中的W^L4是任選地經1至3個選自R^M的基團取代的4至7員雜環基，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十六實施方案中任一者所述。或者，作為第二十七實施方案的一部分，化學結構A、B或C中的W^L4選自哌啶基和哌

基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十六實施方案中任一者所述。

在第二十八實施方案中，化學結構A、B或C中的Y^L5不存在或是C_1-6伸烷基，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十七實施方案中任一者所述。

在第二十九實施方案中，化學結構A、B或C中的R^M是C_1-4烷氧基或OH，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十八實施方案中任一者所述。在替代的第二十九實施方案中，化學結構A、B或C中的R^M是C_{1- 4}烷氧基、鹵素或OH，其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十八實施方案中任一者所述。

在第三十實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由以下結構表示：

、

或

，其中虛線表示PTM和CLM的接附點，且其中其餘變量 如上文針對化學結構I和第二至第二十九實施方案中任一者所述。在替代的第三十實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由以下結構表示：

或

，其中虛線表示PTM和CLM的接附點，且其中其餘 變量如上文針對化學結構I和第二至第二十九實施方案中任一者所述。在替代的第三十實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化 學鏈接部分(L)由以下結構表示：

、

、

或

，其中虛線表示PTM和CLM的接附點，且其中其餘變量 如上文針對化學結構I和第二至第二十九實施方案中任一者所述。在替代的第三十實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈 接部分(L)由以下結構表示：

、

或

，其中虛線表示PTM和CLM的接附點，且其中其餘 變量如上文針對化學結構I和第二至第二十九實施方案中任一者所述。

在第三十一實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由以下結構表示：

或

，其中虛線表示與 PTM的接附點，和

表示與CLM的接附點，且其中其餘變量如上文針對化學 結構I和第二至第二十九實施方案中任一者所述。在替代的第三十一實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由以下結構表示：

或

，其中虛線表示與 PTM的接附點，和

表示與CLM的接附點，且其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十九實施方案中任一者所述。在替代的第三十一實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由以下結構表示：

、

或

，其中虛線表示與PTM的接附點，和

表示與CLM 的接附點，且其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十九實施方案中任一者所述。在替代的第三十一實施方案中，具有化學結構I的化合物或其藥學上可接受的鹽中的化學鏈接部分(L)由以下結構表示：

或

，其中虛線表示與PTM的接附點，和

表示與CLM 的接附點，且其中其餘變量如上文針對化學結構I和第二至第二十九實施方案中任一者所述。

具有化學結構I的化合物在實施例中被進一步描述並且被納入本揭露內容中。還包括其藥學上可接受的鹽以及本文描述的化合物的中性形式。

本文也提供了包含本文所述化合物或所述化合物的藥學上可接受的鹽的藥物組成物，或包含本文所述的化合物或所述化合物的藥學上可接受的鹽；和藥學上可接受的載體的藥物組成物。

4.使用和給藥

本文所述的化合物和組成物通常可用於治療RAF(例如，B-RAF)相關病症。因此，一方面，提供了治療有需要的受試者中的RAF(例如，B-RAF)相關病症的方法，包括向受試者給藥治療有效量的本文所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，或包含所揭露的化合物或其藥學上可接受的鹽的藥物組成物。

還提供了本文所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、或包含所公開的化合物或其藥學上可接受的鹽的藥物組成物在製備用於治療RAF(例如，B-RAF)相關病症的藥物的用途。還提供了本文所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、或包含所揭露的化合物或其藥學上可接受的鹽的藥物組成物，其用於治療RAF(例如，B-RAF)相關病症。

一方面，RAF(例如，B-RAF)相關病症是藉由降解RAF(例如，B-RAF)蛋白來調節的那些病症。

在某些方面，RAF(例如，B-RAF)相關病症是癌症。

在某些方面，RAF(例如，B-RAF)相關病症是選自腦癌、眼癌、乳癌、攝護腺癌、口腔癌、卵巢癌、肺癌、大腸直腸癌、肝癌的癌症、子宮內膜癌、膽管癌、子宮內膜癌、淋巴瘤、胃癌、食道癌、生殖癌、甲狀腺癌、皮膚癌及血癌的癌症。在其他方面，RAF(例如，B-RAF)相關病症是選自腎細胞癌、胰臟癌、大腸癌、肺癌、卵巢癌、乳癌、甲狀腺癌、毛細胞星狀細胞瘤、攝護腺癌、胃癌、肝細胞癌和黑色素瘤的癌症。在其他方面，RAF(例如，B-RAF)相關病症是選自胰臟癌、結腸癌、結腸直腸癌、肺癌、非小細胞肺癌、膽道惡性腫瘤、子宮內膜癌、子宮頸癌、膀胱癌、肝癌、骨髓性白血病和乳癌的癌症。在其他方面，RAF(例如，B-RAF)相關病症是選自肺癌、皮膚癌或結腸直腸癌的癌症。在其他方面， RAF(例如，B-RAF)相關病症是肺癌。在其他方面，肺癌是非小細胞肺癌。在其他方面，皮膚癌是黑色素瘤。

在某些方面，RAF(例如，B-RAF)相關病症選自心面皮膚症候群、第一型神經纖維瘤病、科斯特洛症候群、努南氏症候群、LEOPARD(雀斑樣痣、心電圖異常、眼距過遠、肺動脈狹窄、生殖器異常、生長遲緩、耳聾)症候群。

本文所述的化合物、化合物的藥學上可接受的鹽和藥物組成物可以口服、腸胃外、透過吸入噴霧、局部、直腸、鼻、頰、陰道或透過植入型儲存庫給藥。此類藥物組成物的製劑是本發明所屬技術領域中眾所周知的。參見例如：Anderson,Philip O.；Knoben,James E.；Troutman,William G.,eds.,Handbook of Clinical Drug Data,Tenth Edition,McGraw-Hill,2002；Pratt和Taylor,eds.,Principles of Drug Action,Third Edition,Churchill Livingston,New York,1990；Katzung,ed.,Basic and Clinical Pharmacology,Ninth Edition,McGraw Hill,2003；Goodman和Gilman,eds.,The Pharmacological Basis of Therapeutics,Tenth Edition,McGraw Hill,2001；Remington’s Pharmaceutical Sciences,20th Ed.,Lippincott Williams & Wilkins,2000；Martindale,The Extra Pharmacopoeia,Thirty-Second Edition(The Pharmaceutical Press,London,1999)；所有這些均透過引用整體併入本文。本文所使用的術語「腸胃外」包括皮下、靜脈內、肌肉內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、肝內、病灶內和顱內注射或輸注技術。本文包括本文所述的化合物、化合物的藥學上可接受的鹽和藥物組成物的液體劑型、注射製劑、固體分散體形式和用於局部或透皮給藥的劑型。在一方面中，本文所述的化合物、化合物的藥學上可接受的鹽和藥物組成物經口服給藥。

針對任意特定患者的具體劑量和治療方案將取決於各種因素，該等因素包括所採用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、排泄速率、藥物組合、治療醫生的判斷以及所治療的特定疾病的嚴重程度。組成物中本文所描述的化合物的量也將取決於藥物組成物中的特定化合物。

實施例

一般綜合方法

用於製備所述化合物的一般合成方案描述如下。這些方案是說明性的，並不意味著限制本發明所屬技術領域中具有通常知識者可以用來製備本文所述的化合物的可能技術。

這些實施例中使用的起始材料和試劑，當不是藉由本文所述的程序製備時，通常是可商購的，或者在化學文獻中報導，或者可以藉由使用化學文獻中描述的程序來製備。

在某些情況下，可能需要保護基策略和/或官能基相互轉化(FGI)以促進所需材料的製備。這些化學過程對於合成有機化學家來說是眾所周知的，其中許多過程可以在諸如“Greene's Protective Groups in Organic Synthesis”Peter G.M.Wuts及Theodora W.Greene(Wiley)，以及“Organic Synthesis：The Disconnection Approach”Stuart Warren和Paul Wyatt(Wiley)的內文中找到。

合成步驟

一般合成方案

方案1

式A的化合物可以與式B的化合物在適合還原胺化反應的條件下反應，以得到式C的化合物，例如：三乙醯氧基硼氫化鈉和三乙胺或二異丙基乙胺；或氰基硼氫化鈉、乙酸鈉和乙酸；在室溫下，在適當的溶劑如異丙醇/二氯甲烷、二甲基亞碸/二氯甲烷、二氯甲烷、二氯乙烷或二甲基亞碸/二氯乙烷中。根據需要，可以使用本發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術，包括但不限於製備型高效液相層析法或製備型超臨界流體層析法，將對映異構體或非對映異構體的混合物拆分為其組成對映異構體或非對映異構體。L’、L”、 R’及

各表示鏈接子(L)的一部分，n是1，且

表示具有能夠進行特定反應以形成鏈接子的一部分的鹼性一級胺或二級胺的環系統。所有其他變數均如本 文所定義。對本發明所屬技術領域中具有通常知識者來說也顯而易見的是，式A 中的

和式B中的C(O)R’的位置在整個合成序列中可以顛倒，使得式C中

和

的位置顛倒。

方案1’

式A'化合物可與式B'化合物在適合還原胺化反應的條件下反應，以提供式C'化合物，例如：三乙醯氧基硼氫化鈉和三乙胺或二異丙基乙胺；或氰基硼氫化鈉、乙酸鈉和乙酸；在室溫下，在適當的溶劑如異丙醇/二氯甲烷、二甲基亞碸/二氯甲烷、二氯甲烷、二氯乙烷或二甲基亞碸/二氯乙烷中。根據需要，任何化合物A'、B'或C'的對映異構體或非對映異構體的混合物可以使用本發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術拆分成它們的組成對映異構體或非對映異構體，包括但不限於製備型高效液相層析法或製備型超臨界流體層析。其中Q為N或CH；A和A'各自獨立地為H、經取代的烷基、或任選地與Q稠合成環，其可具有進一步任選地取代基；G為H、鹵素、經取代的烷基或經取代的烷氧基；Ar表示具有一個或多個任選取代基的任選芳香或雜芳環系統； L表示任選的鏈接子或鏈接子的一部分；

表示一級胺或二級胺，任選地環化 成4至8員雜環和/或當L不存在時稠合至Ar；R’是H或烷基，並且當R’是烷基時，它可以任選地與L’連接成環；L’是任選的鏈接子或鏈接子的一部分；n是1；且ULM是：

或

， 其中W是：

；W’是：

； 每個Z₁、Z₂、Z₃、Z₄、Z₅、Z₆和Z₇獨立地選自N或CR；Z’₁是NR或CHR；X是NR或C(O)NR；Y是CH₂或C=O；並且R是H或任選的取代基。

對本發明所屬技術領域中具有通常知識者來說也顯而易見的是， 化合物A’中的

和化合物B’中的C(O)R’的位置在整個合成序列中可以顛倒， 使得化合物C’中

和

的位置顛倒。

對於本發明所屬技術領域中具有通常知識者來說也顯而易見的 是，式III的化合物可以轉化為不同的式III的化合物。例如，在

表示二級胺 的情況下，該胺可以藉由還原胺化或醯化進一步改性以分別產生三級胺或醯胺。

方案2

式D的化合物可以與式E的化合物在適合親核芳香取代反應的條件下反應，以得到式F的化合物，例如：在80至100℃下的二異丙基乙胺或碳酸鉀的DMSO溶液中或在80℃下的乙腈溶液中。根據需要，可以使用本發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術，包括但不限於製備型高效液相 層析法或製備型超臨界流體層析法，將對映異構體或非對映異構體的混合物拆分為其組成對映異構體或非對映異構體。S¹和S²各自獨立為N或CH，其中芳 香環含有S¹和S²，L’和

各表示鏈接子(L)的一部分。所有其他變數均如本文所定義。

方案2’

式D’的化合物可以與式E’的化合物在適合親核芳香取代反應的條件下反應，以得到式F’的化合物，例如：在80至100℃下的二異丙基乙胺或碳酸鉀的DMSO溶液中或在80℃下的乙腈溶液中。根據需要，可以使用本發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術，包括但不限於製備型高效液相層析法或製備型超臨界流體層析法，將任何化合物D’、E’或F’的對映異構體或非對映異構體的混合物拆分為其組成對映異構體或非對映異構體。於此Q是N或CH；A和A’各自獨立地為H、經取代的烷基或任選地與Q稠合成環，其可具有進一步任選的取代基；G是H、鹵素、經取代的烷基或經取代的烷氧基；Q₁和Q₂各自獨立為CR’或N，其中至少一個Q₁和Q₂是N，且R’表示任選的取 代基；X是適當的離去基，包括但不限於F、Cl或甲基磺醯基；

表示一級胺或二級胺，任選地環化成4至8員雜環；L’是任選的鏈接子或鏈接子的一部分； 並且ULM如方案1或1’所定義。

方案3

或者，式G的化合物可以與式H的化合物在適合醯胺交聯反應的條件下反應，以提供式I’的化合物，例如：在N,N-二甲基甲醯胺中的N-甲基咪唑和氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸鹽；或在N,N-二甲基甲醯胺中的(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲胺基)鏻六氟磷酸鹽和二異丙基乙胺。根據需要，可以使用本發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術，包括但不限於製備型高效液相層析法或製備型超臨界流體層析法，將對映異構體或非對映異構體的混合 物拆分為其組成對映異構體或非對映異構體。L’、L”、u和

各表示鏈接子(L) 的一部分。所有其他變數均如本文所定義。對本發明所屬技術領域中具有通常 知識者來說顯而易見的是，

和L”-CO₂H的位置可以顛倒。

方案3’

或者，式A’的化合物可以與式H’的化合物在適合醯胺交聯反應的條件下反應，以提供式I”的化合物，例如：在N,N-二甲基甲醯胺中的N-甲基咪唑和氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸鹽；或在N,N-二甲基甲醯胺中的(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲胺基)鏻六氟磷酸鹽和二異丙基乙胺。根據需要，可以使用本發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術，包括但不限於製備型高效液相層析法或製備型超臨界流體層析法，將任何化合物A’、H’或I”的對映異構體或非對映異構體的混合物拆分為其組成對映異構體或非對映異構體。於此Q是N或CH；A和A’各自獨立地為H、經取代的烷基或選擇性地與Q稠合成環，其可具有進一步任選的取代基；G是H、鹵素、經取代的烷基或經取代的烷氧基；Ar表示具有一個或多個任選取代基的任選芳香或雜芳環系統；L表示可 選的鏈接子或鏈接子的一部分；

表示一級胺或二級胺，任選地環化成4至8 員雜環和/或當L不存在時稠合至Ar；L’是可選的鏈接子或鏈接子的一部分；X是C=O；並且ULM如方案1或1’所定義。

對本發明所屬技術領域中具有通常知識者來說，進一步顯而易見 的是，化合物A'中

的位置和化合物H'中的C(O)OH位置在整個合成序列中 可以顛倒，使得化合物I”中

和X的位置顛倒。

方案4

或者，式J化合物可以與式K化合物在適合布赫瓦爾德-哈特維希(Hartwig-Buchwald)胺化反應的條件下反應，以得到式M化合物，例如：100℃ 下在二甲基亞碸中的[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)咪唑-2-亞基](3-氯吡啶基)二氯化鈀(II)或二氯[1,3-雙(2,6-二-4-庚基苯基)咪唑-2-亞基](3-氯吡啶基)鈀(II)和碳酸銫。根據需要，可以使用本發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術，包括但不限於製備型高效液相層析法或製備型超臨界流體層析法，將對映異構體或非對映異構體的混合物拆分為其組成對映異構體或非對映異構體。X表示能夠進行鈀催化氧化加成的官能基，例如：碘化物、溴化物、氯化物或三氟甲磺酸 鹽。L’、

和

各表示鏈接子(L)的一部分。所有其他變數均如本文所定義。

對本發明所屬技術領域中具有通常知識者來說還顯而易見的是

的位置可以顛倒。

方案4’

或者，式A’化合物可以與式K’化合物在適合布赫瓦爾德-哈特維希胺化反應的條件下反應，以得到式M’化合物，例如：100℃下在二甲基亞碸中的[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)咪唑-2-亞基](3-氯吡啶基)二氯化鈀(II)或二氯[1,3-雙(2,6-二-4-庚基苯基)咪唑-2-亞基](3-氯吡啶基)鈀(II)和碳酸銫。根據需要，可以使用本發明所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術，包括但不限於製 備型高效液相層析法或製備型超臨界流體層析法，將任何化合物A’、K’或M’的對映異構體或非對映異構體的混合物拆分為其組成對映異構體或非對映異構體。於此Q是N或CH；A和A’各自獨立地為H、經取代的烷基或任選地與Q稠合成環，其可具有進一步任選的取代基；G是H、鹵素、經取代的烷基或經取代的烷氧基；Ar表示具有一個或多個任選取代基的任選芳香或雜芳環系統；L表 示任選的鏈接子或鏈接子的一部分；

表示一級胺或二級胺，任選地環化成4 至8員雜環和/或當L不存在時稠合至Ar；X表示能夠進行鈀催化氧化加成的官能基，例如：碘化物、溴化物、氯化物或三氟甲磺酸鹽；並且ULM如方案1或1’所定義。

中間體1：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌啶基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-3-氟基吡咯啶鹽酸鹽(5.00g、39.8mmol)在1,4-二

烷(25mL)的溶液加入磺醯胺(2.0mL、33mmol)和三乙胺(9.2mL、66mmol)。將混合物在120℃攪拌15小時，然後濃縮。藉由快速矽膠層析法(80%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(4.3g、77%)。

步驟2：4-[(2-胺基-5-羥基-苯甲醯基)胺基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將2-胺基-5-羥基-苯甲酸(500mg、3.3mmol)在N,N-二甲基甲醯 胺(15mL)的溶液加入三乙胺(1.3mL、9.8mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(938mg、4.9mmol)和羥基苯并三唑(529mg、3.9mmol)。將混合物在20℃攪拌0.5小時。然後加入4-胺基哌啶-1-羧酸三級丁酯(653mg、3.3mmol)，將混合物在20℃攪拌11.5小時。將反應物用水(20mL)稀釋並用二氯甲烷(3x20mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x30mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型HPLC(流動相：[0.2%甲酸水-乙腈溶液]；B%：5%-35%、10分鐘)純化殘留物，以獲得為棕色固體的4-[(2-胺基-5-羥基-苯甲醯基)胺基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(140mg、12%)。MS(ESI)m/z：336.0[M+H]⁺。

步驟3：4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)哌啶-1-甲醛

將4-[(2-胺基-5-羥基-苯甲醯基)胺基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(1g、3mmol)溶解在醋酸(25mL)中。將反應物在110℃攪拌12小時，然後濃縮以獲得為棕色油的4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)哌啶-1-甲醛(730mg、89%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：274.1[M+H]⁺。

步驟4：6-羥基-3-(4-哌啶基)喹唑啉-4-酮

將4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)哌啶-1-甲醛(730mg、2.7mmol)在1,4-二

烷(15mL)的溶液加入1M鹽酸(14.6mL)。將混合物在100℃攪拌16小時，然後濃縮以獲得為白色固體的6-羥基-3-(4-哌啶基)喹唑啉-4-酮(650mg、粗製品)。MS(ESI)m/z：245.8[M+H]⁺。

步驟5：4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)哌啶-1-羧酸三級丁酯

將6-羥基-3-(4-哌啶基)喹唑啉-4-酮(400mg、1.6mmol)在二氯甲烷(40mL)的溶液加入三乙胺(0.7mL、5mmol)和二碳酸二三級丁酯(355mg、1.6mmol)。將混合物在20℃攪拌12小時。用水(50mL)稀釋反應混合物並用二氯甲烷(3x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x70mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0至5%甲醇/二氯甲烷)純化殘留物以獲得為白色固體的4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)哌啶-1-羧酸三級丁酯(400mg、71%)。MS(ESI)m/z：345.9[M+H]⁺。

步驟6：4-[6-(2-氰基-3,6-二氟基-苯氧基)-4-側氧基-喹唑啉-3-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)哌啶-1-羧酸三級丁酯(400mg、1.2mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(10mL)的溶液加入碳酸銫(433mg、1.3mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(236mg、1.5mmol)。將混合物在20℃攪拌12小時。用水(30mL)稀釋反應混合物並用二氯甲烷(3x15mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x8mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-8%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物，以獲得為黃色固體的4-[6-(2-氰基-3,6-二氟基-苯氧基)-4-側氧基-喹唑啉-3-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(440mg、78%)。MS(ESI)m/z：483.1[M+H]⁺。

步驟7：4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(292mg、1.7mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(5mL)的溶液加入碳酸銫(594mg、1.8mmol)。將混合物在50℃攪拌0.5小時。然後冷卻至20℃，並將在N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中的4-[6-(2-氰基-3,6-二氟基-苯氧基)-4-側氧基-喹唑啉-3-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(400mg、0.8mmol)加入該混合物，在100℃攪拌11.5小時。將反應混合物用水(30mL)稀釋並用二氯甲烷(3x30mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x50mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-2%甲醇/二氯甲烷)純化殘留物，以獲得為白色固體的4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(30mg、57%)。MS(ESI)m/z：631.2[M+H]⁺。

步驟8：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌啶基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(280mg、0.4mmol)在二氯甲烷(6mL)的溶液加入在1,4-二

烷(8mL)的4M鹽酸鹽。將混合物在20℃攪拌1小時，然後濃縮，以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4- 哌啶基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(270mg、粗製品)。MS(ESI)m/z：530.16[M+H]⁺。

中間體2：(3R)-N-[3-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-2-氰基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：N-(4-溴基苯基)-5-羥基-2-硝基-苯甲醯胺

將5-羥基-2-硝基-苯甲酸(10g、55mmol)和4-溴基苯胺(9.39g、55mmol)在吡啶(150mL)的溶液中加入1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(15.70g、82mmol)，將混合物在80℃攪拌1小時。將水(500mL)倒入混合物並攪拌10分鐘。藉由過濾收集沉澱物，然後藉由管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1/0至1/1)純化，以獲得為黃色固體的N-(4-溴基苯基)-5-羥基-2-硝基-苯甲醯胺(4g、21%)。MS(ESI)m/z：338.6[M+H]⁺。

步驟2：2-胺基-N-(4-溴基苯基)-5-羥基-苯甲醯胺

將N-(4-溴基苯基)-5-羥基-2-硝基-苯甲醯胺(4.0g、12mmol)在乙醇(40mL)和四氫呋喃(40mL)的溶液加入鐵(3.3g、59mmol)、鹽酸(12M、0.9mL)和氯化銨(1.9g、36mmol)。將混合物在40℃攪拌12小時。過濾反應混合物並濃縮，藉由管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=20/1至1/1)純化殘留物，以獲得為黃色固體的2-胺基-N-(4-溴基苯基)-5-羥基-苯甲醯胺(3.2g、87%)。MS(ESI)m/z：308.8[M+H]⁺。

步驟3：3-(4-溴基苯基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮

將2-胺基-N-(4-溴基苯基)-5-羥基-苯甲醯胺(5.0g、16mmol)懸浮在甲酸(70mL)。將混合物在110℃攪拌12小時，然後在減壓下濃縮。用乙酸乙酯(2x50mL)研磨粗製品以獲得為白色固體的3-(4-溴基苯基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮(3.5g、67%)。MS(ESI)m/z：318.5[M+H]⁺。

步驟4：2-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-3,6-二氟基-苯甲腈

將3-(4-溴基苯基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮(3.5g、11mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(70mL)的溶液加入碳酸銫(4.14g、13mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(2.25g、14mmol)。將混合物在20℃攪拌12小時。將水(100mL)倒入混合物並攪拌1分鐘。用乙酸乙酯(3x50mL)萃取水相。將合併的有機相用鹽水(2x50mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=20/1至1/1)純化殘留物，以獲得為白色固體的2-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-3,6-二氟基-苯甲腈(4.5g、89%)。MS(ESI)m/z：455.8[M+H]⁺。

步驟5：(3R)-N-[3-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-2-氰基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(3.5g、21mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(50mL)的溶液加入碳酸銫(7.1g、22mmol)。將混合物在50℃攪拌0.5小時，然後冷卻至20℃，將在N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中的2-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-3,6-二氟基-苯甲腈(4.5g、10mmol)加入混合物，並在100℃攪拌11.5小時。將水(100mL)倒入混合物並攪拌1分鐘。用乙酸乙酯(3x100mL)萃取水相。將合併的有機相用鹽水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型HPLC(流動相：[0.2%甲酸水-乙腈溶液]；B%：30%-60%、25分鐘)純化殘留物，以獲得為黃色固體的(3R)-N-[3-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-2-氰基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(2.76g、44%)。MS(ESI)m/z：604.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ 10.35(s,1H),8.32(s,1H),7.91-7.81(m,2H),7.80-7.70(m,3H),7.57-7.48(m,3H),7.43(d,J=3.2Hz,1H),5.43-5.20(m,1H),3.53(s,1H),3.50-3.40(m,2H),3.39-3.35(m,1H),2.19-1.98(m,3H)。

中間體3：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-[4-[(5-羥基-2-硝基-苯甲醯基)胺基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-(4-胺基苯基)哌

-1-羧酸三級丁酯鹽酸鹽(9.43g、30mmol)和5-羥基-2-硝基-苯甲酸(5.5g、30mmol)在吡啶(100mL)的溶液加入1-(3-二甲基 胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(8.64g、45mmol)。將混合物在80℃攪拌2小時，然後濃縮。用水(30mL)研磨粗製品，然後藉由快速矽膠層析法(5%二氯甲烷/甲醇)純化以獲得為黑色固體的4-[4-[(5-羥基-2-硝基-苯甲醯基)胺基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(7.2g、54%)。MS(ESI)m/z：443.0[M+H]⁺。

步驟2：4-[4-[(2-胺基-5-羥基-苯甲醯基)胺基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-[4-[(5-羥基-2-硝基-苯甲醯基)胺基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(6.2g、14mmol)在乙醇(40mL)、四氫呋喃(40mL)和水(25mL)的溶液加入鐵粉(4.7g、84mmol)、氯化銨(3.0g、56mmol)和鹽酸(12M、2mL)。將混合物在60℃攪拌12小時，然後過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(3-4%二氯甲烷/甲醇)純化殘留物，以獲得為深棕色固體的4-[4-[(2-胺基-5-羥基-苯甲醯基)胺基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(2.27g、39%)。MS(ESI)m/z：413.0[M+H]⁺。

步驟3：4-[4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)苯基]哌

-1-甲醛

將4-[4-[(2-胺基-5-羥基-苯甲醯基)胺基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(470mg、1.1mmol)和甲酸(8mL)的混合物在110℃攪拌12小時，然後濃縮以獲得為黑色固體的4-[4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)苯基]哌

-1-甲醛(390mg、粗製品)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：350.8[M+H]⁺。

步驟4：6-羥基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-4-酮

將4-[4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)苯基]哌

-1-甲醛(390mg、1.1mmol)在1,4-二

烷(5mL)的溶液加入1M鹽酸(5mL)。將混合物在100℃攪拌12小時，然後濃縮以獲得為黑色固體的6-羥基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-4-酮(355mg、粗製品)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：323.2[M+H]⁺。

步驟5：4-[4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將6-羥基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-4-酮(355mg、1.1mmol)在二氯甲烷(5mL)的溶液加入三乙胺(0.5mL、3mmol)和三級丁氧基羰基碳酸三級丁酯(240mg、1.1mmol)。將混合物在25℃攪拌12小時。用水(10mL)稀釋並用二氯甲烷(3x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(3%二氯甲烷/甲醇)純化殘留物以獲得為深棕色固體的4-[4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(225mg、48%)。MS(ESI)m/z：423.3[M+H]⁺。

步驟6：4-[4-[6-(2-氰基-3,6-二氟基-苯氧基)-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-[4-(6-羥基-4-側氧基-喹唑啉-3-基)苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(225mg、0.5mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(5mL)的溶液加入碳酸銫(199mg、0.6mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(108mg、0.7mmol)。將混合物在25℃攪拌12小時，用水(10mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌(3x10mL)，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(5%二氯甲烷/甲醇)純化殘留物以獲得為棕色油的4-[4-[6-(2-氰基-3,6-二氟基-苯氧基)-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(279mg、93%)。MS(ESI)m/z：560.4[M+H]⁺。

步驟7：4-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(176mg、1.1mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(1mL)的溶液加入碳酸銫(357mg、1.1mmol)。將混合物在50℃攪拌0.5小時。將混合物冷卻至20℃，且將在N,N-二甲基甲醯胺(2mL)中的4-[4-[6-(2-氰基-3,6-二氟基-苯氧基)-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(279mg、0.5mmol)加入該混合物，將混合物在100℃攪拌11.5小時。用水(5mL)稀釋該殘留物並以乙酸乙酯(3x5mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x5mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型HPLC(流動相：[0.2%甲酸水-乙 腈溶液]；B%：54%-84%，10分鐘)純化殘留物，以獲得為黃色固體的4-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(200mg、56%)。MS(ESI)m/z：708.2[M+H]⁺。

步驟8：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將4-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌

-1-羧酸三級丁酯(200mg、0.3mmol)在二氯甲烷(1mL)的溶液加入在1,4-二

烷(2mL)中的4M鹽酸。將混合物在25℃攪拌1小時，然後濃縮以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(171mg、粗製品)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：608.1[M+H]⁺。

中間體4：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-[4-(4-甲醯基-1-哌啶基)苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[3-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-2-氰基- 4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(200mg、0.3mmol)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(68mg、0.4mmol)在1,4-二

烷(3mL)的溶液加入碳酸銫(324mg、1.0mmol)和RuPhos Pd G4(28mg、0.03mmol)。將混合物在90℃攪拌12小時，然後用水(30mL)稀釋並用四氫呋喃(3x20mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x40mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-1%甲醇：二氯甲烷)純化殘留物。然後，藉由製備型薄層層析法(甲醇：二氯甲烷=20：1)進一步純化該粗製品，以獲得為淺黃色油的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(100mg、44%)。MS(ESI)m/z：681.2[M+H]⁺。

步驟2：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-[4-(4-甲醯基-1-哌啶基)苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(50mg、0.1mmol)在二氯甲烷(0.5mL)的溶液加入三氟基醋酸(0.1mL)。將混合物在20℃攪拌1小時，然後在真空下濃縮以獲得為棕色油的(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-[4-(4-甲醯基-1-哌啶基)苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(40mg、86%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：635.1[M+H]⁺。

中間體5：(3R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-{[3-(2-甲磺醯基嘧啶-5-基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：6-羥基-3-[2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-基]喹唑啉-4-酮

室溫氮氛圍圍下將2-胺基-5-羥基苯甲酸(6.0g、39mmol)和2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-胺(6.0g、43mmol)在醋酸(60mL)的攪拌混合物加入原甲酸三甲酯(16.0g、151mmol)。將所得混合物在氮氣、120℃下攪拌3小時。然後冷卻至室溫，懸浮在水(1000mL)中。藉由過濾收集沉澱物並用水(2x200mL)洗滌。將所得固體在60℃烘箱中乾燥以獲得為淡黃色固體的6-羥基-3-[2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-基]喹唑啉-4-酮(9.2g、82%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 10.32(s,1H),8.88(d,J=1.1Hz,2H),8.25(d,J=1.1Hz,1H),7.63(d,J=8.8Hz,1H),7.50(d,J=2.7Hz,1H),7.46-7.26(m,1H),2.59(s,3H)；MS(ESI)：m/z 287.05[M+H]⁺。

步驟2：3,6-二氟基-2-({3-[2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-基]-4-側氧基喹唑啉-6-基}氧基)苯甲腈

在室溫氮氣氛圍下，將6-羥基-3-[2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-基]喹唑啉-4-酮(9.0g、31mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(7.4g、47mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(100mL)的攪拌混合物加入碳酸銫(16g、49mmol)。將所得混合物在40℃隔夜攪拌，然後冷卻至室溫，用水(200mL)稀釋，並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由使用乙酸乙酯/石油醚(100mL/100mL)研磨純化殘留物，以獲得為灰白色固體的3,6-二氟基-2-({3-[2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-基]-4-側氧基喹唑啉-6-基}氧基)苯甲腈 (12.2g、92%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ 8.56(s,1H),7.94(s,1H),7.81-7.78(m,1H),7.59(s,2H),7.44-7.36(m,1H),7.07-7.03(m,1H),2.56(s,3H)；MS(ESI)：m/z 424.10[M+H]⁺。

步驟3：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({3-[2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-基]-4-側氧基喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

在N₂氛圍下將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(12g、71.3mmol)和碳酸銫(20g、262.7mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(150mL)的混合物在40℃攪拌30分鐘。然後，加入3,6-二氟基-2-({3-[2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-基]-4-側氧基喹唑啉-6-基}氧基)苯甲腈(12.2g、28.8mmol)。將所得混合物在氮氣、90℃下隔夜攪拌。將混合物冷卻至室溫，用水(200mL)稀釋，並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x100mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由反相快速層析法(流動相：乙腈在水中(10mM碳酸氫銨)，在20分鐘內梯度從20%升至50%)純化殘留物，以獲得為灰白色油的(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({3-[2-(甲基氫硫基)嘧啶-5-基]-4-側氧基喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(4.6g、29%)。MS(ESI)：m/z 572.20[M+H]⁺。

步驟4：(3R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-{[3-(2-甲磺醯基嘧啶-5-基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

在室溫氮氣氛圍下，將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({3-[2-(甲基氫硫 基)嘧啶-5-基]-4-側氧基喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(4.6g、8.1mmol)在四氫呋喃/水(5：1、200mL)的攪拌溶液分批加入過一硫酸氫鉀(14.7g、24mmol)。將所得混合物攪拌1小時，然後藉由水(250mL)淬火，用乙酸乙酯(3x250mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(150mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得粗製品，進一步藉由使用乙酸乙酯/石油醚研磨(20mL/100mL)將其純化，以獲得為灰白色固體的(3R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-{[3-(2-甲磺醯基嘧啶-5-基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(1.6g、33%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.37(s,1H),9.37(s,2H),8.53(s,1H),7.94-7.84(m,2H),7.80(m,1H),7.54(m,1H),7.49(d,J=3.0Hz,2H),5.39-5.26(dd,1H),3.54(d,J=2.0Hz,4H),3.51-3.40(m,2H),3.44-3.35(s,3H)；MS(ESI)：m/z 601.95[M-H]^-。

中間體6：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-(6-氟基-3-吡啶基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：6-甲氧基-1H-3,1-苯并噁

-2,4-二酮

將2-胺基-5-甲氧基-苯甲酸(19.0g、114mmol)在四氫呋喃(1L)的溶液加入三乙胺(15.8mL、114mmol)並冷卻至0℃。然後，分批加入(2,2,2-三氯乙醯基)2,2,2-三氯乙酸酯(23.7mL、130mmol)，並將混合物在25℃攪拌18小時。在0℃將水(38mL)加入該混合物，在減壓下去除溶劑以獲得為灰色固體的6-甲氧基-1H-3,1-苯并噁

-2,4-二酮(20g、91%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：193.7[M+H]⁺。

步驟2：3-(6-氟基-3-吡啶基)-6-甲氧基-喹唑啉-4-酮

將6-甲氧基-1H-3,1-苯并噁

-2,4-二酮(20.0g、104mmol)在三甲氧基甲烷(200mL)的溶液加入6-氟基吡啶-3-胺(11.6g、104mmol)。將混合物在100℃攪拌16小時，然後在減壓下濃縮。用乙腈(50mL)在25℃研磨粗製品60分鐘，過濾以獲得為白色固體的3-(6-氟基-3-吡啶基)-6-甲氧基-喹唑啉-4-酮(12g、42%)。MS(ESI)m/z：271.9[M+H]⁺。

步驟3：3-(6-氟基-3-吡啶基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮。

將3-(6-氟基-3-吡啶基)-6-甲氧基-喹唑啉-4-酮(6.0g、22mmol)在二氯甲烷(40mL)的溶液加入三溴化硼(8.5mL、89mmol)。將混合物在0℃攪拌0.5小時，然後在25℃攪拌1小時，並在減壓下濃縮。在25℃用水(3x50mL)研磨粗製品2小時，過濾以獲得為白色固體的3-(6-氟基-3-吡啶基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮(2.8g、49%)。MS(ESI)m/z：257.5[M+H]⁺。

步驟4：3,6-二氟基-2-[3-(6-氟基-3-吡啶基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯甲腈。

將3-(6-氟基-3-吡啶基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮(2.8g、11mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(30mL)的溶液加入碳酸銫(4.08g、12mmol)和2,3,6-三氟基苯 甲腈(1.71g、11mmol)。將混合物在25℃攪拌12小時。將水(30mL)倒入混合物並攪拌1分鐘。用乙酸乙酯(3x30mL)萃取水相。將合併的有機相用鹽水(3x90mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(20-30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為白色固體的3,6-二氟基-2-[3-(6-氟基-3-吡啶基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯甲腈(3.4g、79%)。MS(ESI)m/z：395.0[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 8.47(d,J=2.4Hz,1H),8.39(s,1H),8.27-8.21(m,1H),7.97(dt,J=5.2,10.0Hz,1H),7.89-7.84(m,1H),7.82-7.77(m,1H),7.63(d,J=2.8Hz,1H),7.58(dt,J=3.6,8.8Hz,1H),7.43(dd,J=2.8,8.8Hz,1H)。

步驟5：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-(6-氟基-3-吡啶基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將3,6-二氟基-2-[3-(6-氟基-3-吡啶基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯甲腈(3.40g、8.6mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(35mL)的溶液加入碳酸銫(8.43g、26mmol)和(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(2.90g、17mmol)。將混合物在80℃攪拌12小時，然後冷卻至室溫。用1M鹽酸水溶液(40mL)將反應混合物的pH調整至3。將水(100mL)倒入混合物並攪拌1分鐘。用乙酸乙酯(3x150mL)萃取水相。將合併的有機相用鹽水(2x300mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型HPLC(流動相：[0.2%甲酸水-乙腈溶液]；B%：35%-63%，22分鐘)純化殘留物，藉由製備型HPLC(流動相：[10mM碳酸氫銨在水-乙腈中]；B%：14%-44%，8分鐘)進一步純化該粗製品，以獲得為灰白色固體的(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-(6-氟基-3-吡啶基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯 啶-1-磺醯胺(761.7mg、15%)。MS(ESI)m/z：842.8[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 8.31(d,J=2.0Hz,1H),8.05(s,1H),7.93(ddd,J=2.8,6.4,8.8Hz,1H),7.85(d,J=8.8Hz,1H),7.68-7.58(m,3H),7.44(t,J=9.6Hz,1H),7.16(dd,J=3.2,8.8Hz,1H),6.95(s,1H),5.35-5.14(m,1H),3.76-3.49(m,4H),2.41-2.25(m,1H),2.20-1.96(m,1H)。

中間體7：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[6-(哌

-1-基)吡啶-3-基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)吡啶-2-基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將2-胺基-5-羥基苯甲酸(5.0g、33mmol)和原甲酸三甲酯(20.0g、188mmol)在吡啶(50mL)的攪拌混合物在室溫滴加4-(5-胺基吡啶-2-基)哌

-1-羧酸三級丁酯(10.0g、36mmol)。將所得混合物在120℃隔夜攪拌，然後冷卻至室溫並濃縮。用水(200mL)稀釋殘留物並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為棕色固體的4-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)吡啶-2-基]哌

-1-羧酸三級丁酯(5.1g、37%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ 8.11(d,J=2.7Hz,1H),7.90(s,1H),7.62(d,J=8.8Hz,1H),7.57-7.47(m,1H),7.33-7.23(m,1H),6.69(d,J=9.1Hz,1H),3.61-3.47(m,7H),1.43(s,8H),1.19(s,2H),0.84-0.73(m,2H)；MS(ESI)：m/z 424.20[M+H]⁺。

步驟2：4-{5-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]吡啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)吡啶-2-基]哌

-1-羧酸三級丁酯(5.0g、12mmol)和碳酸銫(6.0g、18mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(60mL)的攪拌混合物在室溫加入2,3,6-三氟基苯甲腈(3.0g、19mmol)，然後在40℃下隔夜攪拌。將反應物冷卻至室溫，用水(200mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為紫色固體的4-{5-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]吡啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯(6.5g、98%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ 8.10(d,J=2.7Hz,1H),7.96(s,1H),7.75(d,J=8.8Hz,1H),7.61-7.46(m,3H),7.46-7.30(m,1H),7.11-6.89(m,1H),6.69(d,J=9.1Hz,1H),3.62-3.47(m,6H),2.89(s,2H),1.43(s,7H),1.19(s,1H),0.78(t,J=7.6Hz,1H)；MS(ESI)：m/z 561.25[M+H]⁺。

步驟3：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[6-(哌

-1-基)吡啶-3-基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將4-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]吡啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯(1.5g、2.1mmol)在四氫呋喃(15mL)的攪拌混合物在室溫加入在1,4-二

烷中的4N鹽酸(15mL)。將所得混合物攪拌2小時，然後在減壓下濃縮以獲得為粉紅色固體的 (3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[6-(哌

-1-基)吡啶-3-基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(1.3g、95%)。MS(ESI)：m/z 609.45[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.47(s,1H),8.38(d,J=1.2Hz,1H),8.31(d,J=2.6Hz,1H),7.93-7.82(m,3H),7.85-7.61(m,1H),7.60-7.51(m,1H),7.44(d,J=3.0Hz,1H),7.18(d,J=9.2Hz,1H),3.75-3.53(m,1H),3.53(d,J=17.6Hz,1H),3.52-3.41(m,1H),3.45-3.25(m,2H),3.29-3.20(m,2H),2.90(s,1H),2.73(s,1H),2.23-2.05(m,4H),1.79-1.70(m,1H),1.41-1.32(m,1H),1.29-1.12(m,1H)。

中間體8：4-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯

步驟1：4-(5-硝基嘧啶-2-基)哌

-1-羧酸三級丁酯

將2-氯基-5-硝基嘧啶(20.0g、125mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(400mL)的溶液在氮氣氛圍下加入哌

-1-羧酸三級丁酯(25.7g、138mmol)，然後在室溫分批加入三乙胺(38.0g、376mmol)。將所得混合物在氮氣、90℃下隔夜攪拌。將混合物冷卻至室溫，用水(1000mL)稀釋。藉由過濾收集沉澱物並用水(3x200mL)洗滌。將所得固體在60℃烘箱中乾燥3小時以獲得為淡黃色固體的4-(5-硝基嘧啶-2-基)哌

-1-羧酸三級丁酯(34.2g、88%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 9.00(s,2H),3.92(s,4H),3.46(s,4H),1.42(s,9H)；MS(ESI)：m/z 328.10[M+H₂O]⁺。

步驟2：4-(5-胺基嘧啶-2-基)哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-(5-硝基嘧啶-2-基)哌

-1-羧酸三級丁酯(10.3g、33mmol)在甲醇(150mL)的溶液在氮氣氛圍下加入10%鈀碳(5g)。將混合物脫氣並用氫氣吹掃3次，然後在室溫、氫氣下攪拌3小時。藉由矽藻土墊過濾該混合物，並在減壓下濃縮以獲得為淡黃色固體的4-(5-胺基嘧啶-2-基)哌

-1-羧酸三級丁酯(7.5g、81%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ 7.91(s,1H),4.16(m,2H),3.64-3.54(m,4H),3.52-3.37(m,4H),3.10(s,1H),1.41(s,8H),1.39(s,1H)；MS(ESI)：m/z 280.05[M+H]⁺。

步驟3：4-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)嘧啶-2-基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-(5-胺基嘧啶-2-基)哌

-1-羧酸三級丁酯(5.0g、18mmol)和2-胺基-5-羥基苯甲酸(2.5g、16mmol)在吡啶(60mL)中的攪拌混合物在室溫加入原甲酸三甲酯(10g、94mmol)。將所得混合物在120℃隔夜攪拌，然後冷卻至室溫並濃縮。用水(100mL)稀釋殘留物並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由用乙酸乙酯(100mL)和石油醚(100mL)研磨純化殘留物以獲得為黃色固體的4-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)嘧啶-2-基]哌

-1-羧酸三級丁酯(5.5g、72%)。MS(ESI)：m/z 425.25[M+H]⁺。

步驟4：4-{5-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)嘧啶-2-基]哌

-1-羧酸三級丁酯(5.5g、13mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(3.1g、20mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(60mL)中的攪拌溶液在室溫加入碳酸銫(6.5g、20mmol)。將所得混合物在40℃隔夜攪拌，然後冷卻至室溫和用水(100mL)稀釋，用乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(1x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由用乙酸乙酯(200mL)和石油醚(100mL)研磨純化殘留物以獲得為黃色固體的4-{5-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯(6.11g、84%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ 8.29(s,2H),7.93(d,J=12.5Hz,2H),7.81-7.72(m,1H),7.61-7.50(m,2H),7.46-7.30(m,1H),7.12-6.97(m,1H),5.23(s,1H),3.87-3.72(m,4H),3.46(t,J=5.3Hz,4H),2.89(s,3H),2.81(d,J=0.6Hz,3H),1.19(s,1H)；MS(ESI)：m/z 562.25[M+H]⁺。

步驟5：4-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-{5-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯(3.0g、5mmol)和(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(1.4g、 8mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(40mL)中的攪拌混合物在室溫加入碳酸銫(3.0g、9mmol)。將所得混合物在90℃攪拌3小時，冷卻至室溫並用水(100mL)稀釋。用乙酸乙酯(3x200mL)萃取該混合物。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由反相快速層析法(乙腈在水中(10mM碳酸氫銨)，在20分鐘內梯度從20%升至50%)純化殘留物，以獲得為淡黃色固體的4-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯(1.8g、47%)。MS(ESI)：m/z 710.30[M+H]⁺。

步驟6：4-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}哌

-1-羧酸三級丁酯(1.9g、2.7mmol)在四氫呋喃(15mL)中的攪拌混合物在室溫加入在1,4-二

烷中的4N鹽酸(9.5mL)。將該反應物攪拌2小時，然後濃縮以獲得為淺棕色固體的(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[2-(哌

-1-基)嘧啶-5-基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(1.5g、92%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.43(s,1H),9.54(s,2H),8.61(s,2H),8.36(s,1H),7.93-7.81(m,2H),7.79-7.65(m,1H),7.58-7.50(m,1H),7.43(d,J=3.0Hz,1H),5.39(q,J=2.4Hz,2H),3.73-3.61(m,1H),3.59-3.51(m,2H),3.49-3.30(m,4H),3.23-3.14(m,4H),1.81-1.69(m,1H)；MS(ESI)：m/z 610.15[M+H]⁺。

中間體9：(3R)-N-{2-氰基-4-氟基-3-[(4-側氧基-3-{2-[1-(哌

-1-基)環丙基]嘧啶-5-基}喹唑啉-6-基)氧基]苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：N-(1-氰基環丙基)胺基甲酸芐酯

將1-胺基環丙烷-1-甲腈鹽酸鹽(50.0g、422mmol)在四氫呋喃(300mL)和水(100mL)中的攪拌混合物在10℃、氮氣氛圍下分批加入碳酸氫鈉(89.00g、1054mmol)和氯甲酸芐酯(64.8g、379mmol)。將所得混合物在室溫氮氣氛圍下隔夜攪拌。用乙酸乙酯萃取(3x300mL)該反應物。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。使用石油醚(100mL)研磨殘留物以獲得為白色固體的芐基N-(1-氰基環丙基)胺基甲酸酯(65g、71%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ 7.38-7.25(m,5H),5.84(s,1H),5.13(s,2H),2.05-2.02(m,2H),1.31-1.11(m,2H)。

步驟2：1-[[(芐基氧基)羰基]胺基]環丙烷-1-甲亞胺酯

將N-(1-氰基環丙基)胺基甲酸芐酯(61.0g、282mmol)在乙醇(400mL)中的攪拌溶液加入在1,4-二

烷中的4M鹽酸(400mL)。在室溫攪拌所得的溶液3天，然後濃縮。使用石油醚/乙酸乙酯(1：5、2x200mL)研磨殘留物以獲得為白色固體的1-[[(芐基氧基)羰基]胺基]環丙烷-1-甲亞胺酯(52g、粗製品)。MS(ESI)：m/z 263.00[M+H]+。

步驟3：N-(1-胺基甲醯基環丙基)胺基甲酸芐酯

將1-[[(芐基氧基)羰基]胺基]環丙烷-1-甲亞胺乙酯(55.0g、210mmol)在甲醇(300mL)中的溶液在10℃加入在甲醇中的7M氨(500mL)。將該反應物在室溫攪拌16小時，然後濃縮。使用石油醚/乙酸乙酯(1：5、2x150mL)研磨殘留物，以獲得為白色固體的N-(1-胺基甲醯基環丙基)胺基甲酸芐酯(43.3g、粗製品)。MS(ESI)：m/z 433.95[M+H]+。

步驟4：N-[1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙基]胺基甲酸芐酯

將N-(1-胺基甲醯基環丙基)胺基甲酸芐酯(130g、557mmol)和(Z)-N-(2-氯基-3-(二甲基胺基)烯丙基)-N-甲基甲銨(340.0g、1114mmol)在N,N-二甲基乙醯胺(1500mL)中的混合物加入4-甲基

啉(150mL)。將該反應物在75℃隔夜攪拌。將混合物冷卻至室溫，用水(2000mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x1000mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(4x300mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為棕色固體的N-[1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙基]胺基甲酸芐酯(83.5g、49%)。1H NMR(300MHz,CDCl₃)δ 8.55(s,2H),7.44-7.32(m,5H),5.70-5.25(s,1H),5.17(s,2H),1.95(s,2H),1.55-1.45(s,2H)；MS(ESI)：m/z 304.00[M+H]+。

步驟5：1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙-1-胺

將N-[1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙基]胺基甲酸芐酯(35.0g、115mmol)和三氟基醋酸(300mL)的溶液在60℃隔夜攪拌，然後在減壓下濃縮。將殘留物溶解在四氫呋喃(200mL)和水(50mL)中，使用氫氧化鈉固體調整至pH 13，並在室溫攪拌2小時。將混合物用水(200mL)稀釋，使用鹽酸水溶液調整至pH至7-8。用乙酸乙酯(3x250mL)萃取所得混合物。將合併的有機層用鹽水(3x25mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=2.5：1)純化殘留物，以獲得為淡黃色固體的1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙-1-胺(15.2g、78%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.83(s,1H),3.46(s,1H),2.57(s,2H),1.30(m,1H),1.13(m,1H)；MS(ESI)：m/z 170.15[M+H]+。

步驟6：N,N-雙(2-側氧基乙基)胺基甲酸三級丁酯

將N,N-雙(2-羥基乙基)胺基甲酸三級丁酯(15g、73mmol)在四氫呋喃(30mL)和水(10mL)的混合物中加入高碘酸鈉(21.9g、102mmol)，在室溫將反應物隔夜攪拌。用水(20mL)稀釋混合物並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x15mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘留物溶解在二氯甲烷(30mL)中，分批加入硫酸鎂(26.39g、219mmol)，並將所得混合物在室溫隔夜攪拌。過濾混合物並使用二氯甲烷(2x20mL)洗滌。在減壓下濃縮濾 液以獲得為灰白色油的N,N-雙(2-側氧基乙基)胺基甲酸三級丁酯(14.5g、99%)。MS(ESI)：m/z 224.10[M+Na]+。

步驟7：4-[1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙-1-胺(7.2g、42mmol)在甲醇(40mL)、四氫呋喃(10mL)和醋酸(1mL)中的混合物加入N,N-雙(2-側氧基乙基)胺基甲酸三級丁酯(17.08g、85mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(6.67g、106mmol)。將該反應物在室溫隔夜攪拌。用水(60mL)稀釋混合物並用二氯甲烷(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x35mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=2：1)純化殘留物，以獲得為黃色固體的4-[1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙基]哌

-1-羧酸三級丁酯(6.3g、43%)。MS(ESI)：m/z 339.10[M+H]+。

步驟8：4-(1-{5-[(二苯基亞甲基)胺基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-[1-(5-氯基嘧啶-2-基)環丙基]哌

-1-羧酸三級丁酯(1g、3mmol)、二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](3-氯基吡啶基)鈀(II)(0.12g、0.1mmol)、碳酸銫(2.4g、7mmol)和二苯基甲亞胺(0.8g、4mmol)在1,4-二

烷(15mL)中的混合物在110℃、氮氣氛圍下攪拌3小時。將混合物冷卻至室溫，用水(40mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水 (2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為白色固體的4-(1-{5-[(二苯基亞甲基)胺基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯(1.14g、79%)。MS(ESI)：m/z 484.35[M+H]+。

步驟9：4-[1-(5-胺基嘧啶-2-基)環丙基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-(1-{5-[(二苯基亞甲基)胺基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯(6.8g、14mmol)、鹽酸羥胺(4.4g、63mmol)和甲醇(50mL)的混合物在室溫攪拌5小時，然後濃縮。用水(60mL)稀釋殘留物並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(15mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為白色固體的4-[1-(5-胺基嘧啶-2-基)環丙基]哌

-1-羧酸三級丁酯(4.2g、93%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ 8.00(s,2H),5.30(s,2H),3.20(m,1H),2.90(m,4H),1.38(s,9H),1.07-0.87(m,4H)；MS(ESI)：m/z 320.25[M+H]+。

步驟10：4-{1-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)嘧啶-2-基]環丙基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-[1-(5-胺基嘧啶-2-基)環丙基]哌

-1-羧酸三級丁酯(4.7g、15mmol)、原甲酸三乙酯(18.74g、176mmol)和醋酸(100mL)的混合物在60℃攪拌28小時。將該反應冷卻至室溫，用水(80mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x60mL)萃取。 將合併的有機層用鹽水(5x20mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為黃色固體的4-{1-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)嘧啶-2-基]環丙基}哌

-1-羧酸三級丁酯(4.2g、61%)。MS(ESI)：m/z 465.15[M+H]+。

步驟11：4-(1-{5-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-{1-[5-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)嘧啶-2-基]環丙基}哌

-1-羧酸三級丁酯(4.2g、9mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(45mL)中的攪拌溶液加入碳酸銫(7.36g、23mmol)。將混合物在40℃攪拌0.5小時。然後分批加入2,3,6-三氟基苯甲腈(2.13g、14mmol)，並在40℃隔夜攪拌該反應物。冷卻混合物至室溫，用水(60mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。使用石油醚(20mL)研磨殘留物，以獲得為棕黃色固體的4-(1-{5-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯(2.1g、39%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ 10.34(s,1H),8.90(s,2H),8.41(s,1H),7.98-7.62(m,6H),7.52(m,1H),7.46(m,1H),5.41(m,1H),5.23(s,1H),4.23(m,2H),4.03(m,7H),3.55(s,1H),3.52-3.41(m,2H),3.46-3.34(m,5H),3.12(s,4H),2.89(s,1H),2.73(m,2H),2.55-2.46(m,2H),2.29-2.16(m,7H)；MS(ESI)：m/z 602.40[M+H]+。

步驟12：4-(1-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(2.73g、16mmol)和碳酸銫(5.28g、16mmol)的混合物在50℃攪拌1小時。然後分批加入4-(1-{5-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯(3.9g、6mmol)，在80℃隔夜攪拌所得混合物。冷卻該反應至室溫，用水(60mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x70mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由反相快速層析法(流動相：乙腈在水中(10mM碳酸氫銨)歷時50分鐘，15%至56%)純化殘留物，以獲得為棕色固體的4-(1-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯(2.8g、57%)。MS(ESI)：m/z 750.45[M+H]+。

步驟13：(3R)-N-{2-氰基-4-氟基-3-[(4-側氧基-3-{2-[1-(哌

-1-基)環丙基]嘧啶-5-基}喹唑啉-6-基)氧基]苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將4-(1-{5-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]嘧啶-2-基}環丙基)哌

-1-羧酸三級丁酯(400mg、0.5mmol)和在1,4-二

烷中的4M鹽酸(15mL)的溶液在室溫氮氣氛圍下攪拌2小時。濃縮該反應物以獲得為白色固體的(3R)-N-{2-氰基-4-氟基-3-[(4-側氧基-3-{2-[1-(哌

-1-基)環丙基]嘧啶-5-基}喹唑啉-6-基)氧基]苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(365mg、粗製品)。MS(ESI)：m/z 650.45[M+H]+。

以下中間體可以透過類似中間體3的程序來製備

中間體10：(3R)-N-{2-氰基-4-氟基-3-[(3-{4-[(2S)-2-甲基哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：(3S)-4-{4-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-3-甲基哌

-1-羧酸酯

將(3R)-N-(3-{[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}-2-氰基-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(600mg、1mmol)和(3S)-3-甲基哌

-1-羧酸三級丁酯(199mg、1mmol)在1,4-二

烷(15mL)中的攪拌混合物加入碳酸銫(974mg、3mmol)和(2-二環己基膦基-2’,6’-二異丙氧基-1,1’-聯苯基)[2-(2’-胺基-1,1’-聯苯基)]甲磺酸鈀(II)(83mg、0.1mmol)。將反應物在90℃隔夜攪拌，然後冷卻至室溫。用水(10mL)稀釋混合物並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。用水(2x20mL)洗滌合併的有機層，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為白色固體的(3S)-4-{4-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-3-甲基哌

-1-羧酸三級丁酯(300mg、42%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.35(s,1H),8.27(s,1H),7.42(d,J=3.0Hz,4H),7.33(d,J=8.5Hz,5H),7.01(d,J=8.8Hz,3H),5.76(s,2H),5.39-5.20(d,J=76Hz,1H),4.09(s,4H),3.84-3.74(m,1H),3.46(s,4H),2.99(s,2H),2.29-2.19(m,2H),2.19-2.10(m,2H),1.43(s,9H),1.22-1.07(m,2H),0.96(d,J=6.4Hz,2H)；MS(ESI)：m/z 722.1[M+H]+。

步驟2：(3R)-N-{2-氰基-4-氟基-3-[(3-{4-[(2S)-2-甲基哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3S)-4-{4-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-3-甲基哌

-1-羧酸三級丁酯(160mg、0.2mmol)和在1,4-二

烷中的4M鹽酸(10mL)的溶液在室溫攪拌2小時。將該反應物在減壓下濃縮。用乙酸乙酯(5mL)研磨殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-{2-氰基-4-氟基-3-[(3-{4-[(2S)-2-甲基哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(130mg、89%)。

以下中間體可以透過類似中間體4的程序來製備

中間體24：6-{[乙基(甲基)胺磺醯基]胺基}-3-氟基-2-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯甲腈

步驟1：乙基(甲基)胺磺醯基胺

將N-乙基甲基胺(22.14g、374mmol)在1,4-二

烷(1600mL)中的攪拌混合物在室溫以5分鐘加入磺醯胺(30.0g、312mmol)和三乙胺(63.18g、624mmol)。將所得混合物在110℃密封壓力反應器中攪拌12小時。將該反應物冷卻至室溫，並在減壓下濃縮。用水(600mL)稀釋該殘留物並用二氯甲烷(5x600mL)萃取。將合併的有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=2：1)純化殘留物，以獲得作為棕色油的乙基(甲基)胺磺醯基胺(27.3g、63%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 6.59(s,2H),2.98(m,2H),2.61(s,3H),1.08(s,3H)；MS(ESI)：m/z 139.20[M+H]⁺。

步驟2：4-{4-[6-(2-氰基-3-{[乙基(甲基)胺磺醯基]胺基}-6-氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將乙基(甲基)胺磺醯基胺(5.26g、38mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(120mL)中的攪拌混合物加入碳酸銫(10.34g、32mmol)。將混合物在50℃攪拌1小時，然後在50℃滴加4-{4-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(7.1g、13mmol)。將混合物在90℃攪拌12小時，然後冷卻至室溫。將反應物用水(200mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由反相快速管柱層析法(15%-60%乙腈在水中[10mmol/L碳酸氫銨]歷時45分鐘)純化殘留物，以獲得為灰白色固體的4-{4-[6-(2-氰基-3-{[乙基(甲基)胺磺醯基]胺基}-6-氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(3.3g、38%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 10.18(s,1H),8.26(s,1H),7.94-7.78(m,2H),7.73(m,1H),7.50m,1H),7.43-7.30(m,3H),7.07(m,2H),3.48(m,4H),3.17(m,6H),2.79(s,3H),1.43(s,9H),1.04(m,3H)；MS(ESI)：m/z 678.35[M+H]⁺。

步驟3：6-{[乙基(甲基)胺磺醯基]胺基}-3-氟基-2-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯甲腈

將4-{4-[6-(2-氰基-3-{[乙基(甲基)胺磺醯基]胺基}-6-氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(1.43g、2mmol)在1,4-二

烷中的4M鹽酸(60mL)中的混合物在室溫攪拌3小時。將所得物在減壓下濃縮，以獲得為灰白色固體的6-{[乙基(甲基)胺磺醯基]胺基}-3-氟基-2-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯甲腈鹽酸鹽(1.2g、98%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)：m/z 578.50[M+H]⁺。

中間體25：(3R)-N-[2,4-二氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：5-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)-2-硝基苯甲酸

將3-溴基-2,6-二氟基苯酚(10g、48mmol)和5-氟基-2-硝基苯甲酸甲酯(9.53g、48mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的攪拌溶液在室溫加入碳酸銫(39.0g、120mmol)。將所得混合物在100℃攪拌12小時，然後冷卻至室 溫。用水(100mL)稀釋混合物並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x50mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為黃色固體的5-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)-2-硝基苯甲酸(12.7g、71%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 14.03(s,1H),8.22-8.10(m,3H),7.71-7.58(m,4H),3.93(s,1H),3.11(s,1H)；MS(ESI)：m/z 371.92[M+H]⁺。

步驟2：2-胺基-5-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)苯甲酸

將5-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)-2-硝基苯甲酸(8.0g、21mmol)和四羥基二硼(3.83g、43mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的攪拌溶液在室溫滴加4,4'-二甲氧基-2,2'-聯吡啶(2.31g、11mmol)，將所得混合物在室溫攪拌10分鐘。將反應物用水(100mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x50mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為灰白色固體的2-胺基-5-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)苯甲酸(6g、82%)。¹H NMR(400MHz,DMSO--d₆)δ 7.95(s,1H),7.63(s,1H),7.31(s,1H),7.14(s,1H),6.94(s,1H),3.17(s,1H),1.47(s,2H)；MS(ESI)：m/z 341.90[M+H]⁺。

步驟3：4-{4-[6-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將2-胺基-5-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)苯甲酸(2g、6mmol)在醋酸(20mL)中的攪拌溶液在室溫緩慢地加入4-(4-胺基苯基)哌

-1-羧酸三級丁酯(1.93g、7mmol)。將所得混合物在70℃攪拌2天，然後冷卻至室溫。用水(20mL)稀釋混合物並用二氯甲烷(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為白色固體的4-{4-[6-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(1.2g、34%)。MS(ESI)：m/z 615.00[M+H]⁺。

步驟4：4-{4-[6-(2,6-二氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-{4-[6-(3-溴基-2,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(1g、2mmol)和6-(芐基氧基)-3-(4-溴基苯基)喹唑啉-4-酮(961.80mg、2mmol)在1,4-二

烷(15mL)中的攪拌混合物在室溫分批加入碳酸銫(1.59g、5mmol)和氯基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯基)]鈀(II)(0.12g、0.2mmol)。將所得混合物在100℃、氮氣氛圍下攪拌12小時。將混合物冷卻至室溫，用水(10mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物，以獲得為白色固體的4-{4-[6-(2,6-二氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基 喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(810mg、71%)。MS(ESI)：m/z 699.15[M+H]⁺。

步驟5：(3R)-N-[2,4-二氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽

將4-{4-[6-(2,6-二氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(800mg、1mmol)在1,4-二

烷中的4M鹽酸(10mL)中的溶液在室溫攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮，將殘留物用乙酸乙酯(5mL)和石油醚(5mL)研磨以獲得為白色固體的(3R)-N-[2,4-二氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(562mg、77%)。MS(ESI)：m/z 601.25[M+H]⁺。

以下中間體可以透過類似中間體25的程序來製備

中間體27：(3R)-3-氟基-N-[4-氟基-2-甲基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-{4-[6-(6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}-2-甲基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-{4-[6-(2-氯基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(720mg、1mmol)和三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧三硼烷(630mg、5mmol)在1,4-二

烷(14mL)中的攪拌混合物在室溫加入[1,3-雙(2,6-二異丙基苯基)亞咪唑-2-基](3-氯基吡啶基)二氯化鈀(II)(68mg、0.1mmol)和碳酸鉀(555mg、4mmol)。將所得混合物在90℃、氮氣氛圍下攪拌2小時，然後冷卻至室溫。用水(40mL)淬火混合物並以乙酸乙酯(3x40mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備薄層層析法(乙酸乙酯)純化殘留物，以獲得為淡黃色固體的4-{4-[6-(6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}-2-甲基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(560mg、80%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 9.39(s,1H),8.29-8.16(m,2H),7.86-7.70(m,2H),7.65(m,2H),7.60- 7.40(m,1H),7.49(s,2H),7.44-7.25(m,2H),7.22(d,J=3.0Hz,1H),7.08(m,3H),5.76(d,J=0.9Hz,1H),5.37(d,J=24.1Hz,1H),5.23(s,0H),4.23(m,1H),4.10-3.97(m,1H),3.48(m,1H),3.41(s,1H),3.33-3.15(m,2H),2.19(s,3H),2.12(d,J=16.2Hz,1H),2.00(d,J=0.9Hz,1H),1.73-1.57(m,1H),1.43(s,1H),1.37-1.08(m,3H),0.89(m,2H),0.87(s,3H)；MS(ESI)：m/z 697.35[M+H]⁺。

步驟2：(3R)-3-氟基-N-[4-氟基-2-甲基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]吡咯啶-1-磺醯胺

將4-{4-[6-(6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}-2-甲基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(530mg、0.8mmol)在1,4-二

烷中的4M鹽酸(10mL)中的溶液在室溫攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得為黃色固體的(3R)-3-氟基-N-[4-氟基-2-甲基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(450mg、99%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 9.39(s,1H),8.27-8.25(m,1H),7.79-7.68(m,1H),7.66-7.10(m,4H),5.90-5.45(b,2H),3.57-3.30(m,6H),3.27-3.11(m,2H)；MS(ESI)：m/z 597.3[M+H]⁺。

中間體28：(3R)-N-[2-乙基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-{4-[6-(2-乙烯基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-{4-[6-(2-氯基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(300mg、0.4mmol)和雙(二-三級丁基(4-二甲基胺基苯基)膦)二氯基鈀(II)(30mg、0.04mmol)在水(2mL)和1,4-二

烷(10mL)中的攪拌混合物在室溫加入碳酸鉀(173mg、1.2mmol)。將所得混合物在100℃、氮氣氛圍下攪拌12小時。將混合物冷卻至室溫，用水(40mL)稀釋並用二氯甲烷(3x40mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型高效液相層析法(乙腈：氯化銨=50：50)純化粗製品以獲得為灰白色固體的4-{4-[6-(2-乙烯基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(55mg、19%)。MS(ESI)：m/z 708.3[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 9.42(s,1H),8.20(s,1H),7.78(d,J=8.9Hz,1H),7.58(dd,J=8.9,3.0Hz,1H),7.39(d,J=7.2Hz,2H),7.36-7.29(m,2H),7.23(d,J=3.0Hz,1H),7.10-7.03(m, 2H),6.81(dd,J=18.0,12.0Hz,1H),5.85(dd,J=18.0,1.8Hz,1H),5.51(d,J=12.1Hz,1H),5.37(s,1H),5.24(s,1H),4.03(q,J=7.1Hz,1H),3.46(d,J=4.9Hz,5H),3.39(q,J=11.1,9.7Hz,2H),3.32-3.23(m,1H),3.19(t,J=5.3Hz,4H),2.15-2.05(m,1H),1.99(s,2H),1.43(s,9H),1.17(t,J=7.1Hz,2H)。

步驟2：4-{4-[6-(2-乙基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將4-{4-[6-(2-乙烯基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(100mg、0.1mmol)在甲醇(10mL)中的攪拌溶液加入10%鈀碳(15mg)。將混合物脫氣並用氫氣吹掃3次，然後在室溫、氫氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物以矽藻土墊過濾，用甲醇(3x30mL)洗滌。將濾液在減壓下濃縮以獲得為灰白色固體的4-{4-[6-(2-乙基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(90mg、90%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)：m/z 710.3[M+H]⁺.

步驟3：(3R)-N-[2-乙基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將4-{4-[6-(2-乙基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(90mg、0.1mmol)在1,4-二

烷中的4M鹽酸(15mL)中的溶液在室溫氮氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得為灰白色固體的(3R)-N-[2-乙基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(70mg、91%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)：m/z 610.3[M+H]⁺。

中間體29：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-[4-(3-哌啶基)苯基]喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：3-(4-溴基苯基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮

將4-溴基苯胺(5.0g、29mmol)在甲苯(15mL)中的溶液加入三甲氧基甲烷(4.8mL、44mmol)和醋酸(1.7mL、29mmol)，然後加入在甲醇(2mL)中的2-胺基-5-羥基-苯甲酸甲酯(4.86g、29mmol)。將混合物在70℃攪拌6小時，然後冷卻至室溫。將混合物懸浮在甲基三級丁基醚(15mL)中、過濾，並用水(15mL)研磨濾餅以獲得為深棕色固體的3-(4-溴基苯基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮(9.65g、83%)。MS(ESI)m/z：318.8[M+H]⁺。

步驟2：2-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-3,6-二氟基-苯甲腈

將3-(4-溴基苯基)-6-羥基-喹唑啉-4-酮(5.0g、13mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(2.58g、16mmol)在二甲基甲醯胺(100mL)中的溶液加入碳酸銫(4.73g、14mmol)。將混合物在25℃攪拌2小時，然後用水(20mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x20mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x15mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾、並在減壓下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-36%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為灰白色固體的2-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-3,6-二氟基-苯甲腈(3.26g、56%)。MS(ESI)m/z：455.7[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 8.33(s,1H),7.98(dt,J=5.2,10.0Hz,1H),7.86-7.82(m,1H),7.80-7.75(m,3H),7.63-7.51(m,4H)。

步驟3：(3R)-N-[3-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-2-氰基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將2-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-3,6-二氟基-苯甲腈(4.97g、11mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(100mL)中的溶液加入碳酸銫(7.84g、24mmol)。將混合物在50℃攪拌0.5小時。然後將混合物冷卻至20℃並加入在N,N-二甲基甲醯胺(50mL)中的(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(1.84g、11mmol)，將所得混合物在100℃攪拌11.5小時。將該反應物在減壓下過濾和濃縮。藉由反相高效液相層析法(40%-70%乙腈在水中(0.2%甲酸)歷時22分鐘)純化粗製品，以獲得為淡黃色固體的(3R)-N-[3-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-2-氰基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(5g、75%)。MS(ESI)m/z：604.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.36(s,1H),8.31(s,1H),8.14(s,1H),7.89-7.83(m,2H),7.78-7.72(m,3H),7.52-7.50(m,2H),7.44(d,J=2.8Hz,1H),3.53(s,1H),3.50-3.39(m,3H),2.21-1.97(m,3H)。

步驟4：5-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯

將(3R)-N-[3-[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-2-氰基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(500mg、0.8mmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯(256mg、0.8mmol)在1,4-二

烷(10mL)和水(2mL)中的溶液加入碳酸鉀(229mg、1.7mmol)和[1,1'- 雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯基鈀(II)(60mg、0.08mmol)。將混合物在90℃攪拌12小時，然後冷卻至室溫。將反應混合物用水(10mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並在減壓下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-3%甲醇/二氯甲烷)純化殘留物以獲得為淡黃色固體的5-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯(410mg、70%)。MS(ESI)m/z：705.2[M+H]⁺。

步驟5：3-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將5-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸酯(410mg、0.6mmol)在四氫呋喃(5mL)中的溶液加入10%鈀載活性碳(60mg)。將混合物脫氣並用氫氣吹掃3次，然後將混合物在25℃、氫氣氛圍(15psi)下攪拌12小時。將反應混合物以矽藻土墊過濾並在減壓下濃縮，以獲得為淡黃色固體的3-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(441mg、粗製品)。MS(ESI)m/z：707.1[M+H]⁺。

步驟6：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-[4-(3-哌啶基)苯基]喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將3-[4-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]苯基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(411mg、0.6mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液加入在1,4-二

烷中的4M鹽酸(5.8mL)。將混合物在25℃攪拌2小時，然後濃縮以獲得為黃色固體的(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-[4-(3-哌啶基)苯基]喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(510mg、粗製品)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：607.2[M+H]⁺。

以下中間體可以透過類似中間體29的程序來製備。

中間體30：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{2,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基}苯基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：7-{4-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸三級丁酯

將(3R)-N-(3-{[3-(4-溴基苯基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}-2-氰基-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(1g、2mmol)在1,4-二

烷(30mL)中的溶液加入2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸三級丁酯(0.75g、3mmol)、[1,3-雙(2,6-二異丙基苯基)亞咪唑-2-基](3-氯基吡啶基)二氯化鈀(II)(0.08g、0.08mmol)和碳酸銫(1.1g、3mmol)，將混合物在100℃氮氣下攪拌16小時。用水(50mL)稀釋所得混合物並以乙酸乙酯(2x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物，以獲得為黃色固體的7-{4-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸 三級丁酯(680mg、55%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.34(s,1H),8.26(s,1H),7.89-7.87(m,2H),7.83(d,J=8.8Hz,1H),7.72(d,J=2.8Hz,1H),7.69(s,1H),7.31(d,J=8.8Hz,1H),7.05(d,J=7.2Hz,1H),5.32(d,J=32Hz,1H),3.60-3.48(m,5H),3.46-3.44(m,3H),3.21-3.20(m,4H),2.20-2.18(m,2H),1.67-1.60(m,4H),1.40(s,9H)；MS(ESI)：m/z 748.35[M+H]⁺。

步驟2：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{2,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基}苯基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將7-{4-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-羧酸三級丁酯(690mg、0.9mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液加入三氟基醋酸(271mg、2.8mmol)，將反應物在室溫攪拌2小時，然後濃縮以獲得為黃色油的(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{2,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基}苯基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺三氟乙酸酯(580mg、97%)。MS(ESI)：m/z 648.50[M+H]⁺。

以下中間體可以透過類似中間體30的程序來製備。

實施例1：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-(羥基甲基)哌啶-1-羧酸芐酯

將4-哌啶基甲醇(5.0g、43mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液在0℃加入在水(100mL)中的碳酸鈉(20.7g、195mmol)，然後滴加苯甲醯氯(48mmoL、6.8mL)。將混合物在20℃攪拌16小時，用水(100mL)稀釋，並用二氯甲烷(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌、用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=10：1至2：1)純化殘留物以獲得為無色油的4-(羥基甲基)哌啶-1-羧酸芐酯(14.2g、66%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.44-7.30(m,5H),5.15(s,2H),4.35-4.16(m,2H),3.53(t,J=5.7Hz,2H),2.81(s,2H),1.82-1.64(m,3H),1.42(t,J=5.4Hz,1H),1.19(d,2H)。

步驟2：4-甲醯基哌啶-1-羧酸芐酯

將4-(羥基甲基)哌啶-1-羧酸芐酯(13.2g、53mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液在0℃加入戴斯-馬丁試劑(18mL、58mmol)。將混合物在20℃攪拌2小時，然後用飽和碳酸氫鈉溶液(300mL)稀釋，並用二氯甲烷(2x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x200mL)洗滌、用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=10：1至3：1)純化殘留物以獲得為無色油的4-甲醯基哌啶-1-羧酸芐酯(11.6g、88%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 9.69(s,1H),7.44-7.30(m,5H),5.15(s,2H),4.13-3.99(m,2H),3.05(t,J=11.0Hz,2H),2.51-2.42(m,1H),1.94(s,2H),1.68-1.58(t,J=7.2Hz,2H)。

步驟3：4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-羧酸芐酯

將4-甲醯基哌啶-1-羧酸芐酯(11g、45mmol)在甲醇(100mL)中的溶液加入三甲氧基甲烷(24.0mL、222mmol)和4-甲基苯磺酸水合物(423mg、2.2mmol)。將混合物在20℃攪拌12小時，用水(200mL)稀釋，並用二氯甲烷(2x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x200mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮以獲得為無色油的4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-羧酸芐酯(11.2g、86%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.42-7.30(m,5H),5.14(s,2H),4.33-4.13(m,2H),4.04(d,J=6.9Hz,1H),3.37(s,6H),2.76(s,2H),1.86-1.70(m,3H),1.34-1.16(m,2H)。

步驟4：4-(二甲氧基甲基)哌啶

將4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-羧酸芐酯(11.2g、38mmol)在甲醇(150mL)中的溶液在氮氣下加入10%鈀碳(1.25g、3.8mmol)。將懸浮液在真空下脫氣並用氫氣吹掃數次。將混合物在氫氣(15psi)、20℃下攪拌12小時，然後過濾，並濃縮以獲得為無色油的4-(二甲氧基甲基)哌啶(5.92g、97%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 3.95(d,J=6.8Hz,1H),3.28(s,6H),3.03(d,J=12.0Hz,2H),2.50(d,2H),1.75-1.64(m,4H),1.24-1.04(m,2H)。

步驟5：2-溴基-4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]苯甲酸甲酯

將4-(二甲氧基甲基)哌啶(44.4g、279mmol)和2-溴基-4-氟基-苯甲酸甲酯(50.0g、215mmol)在二甲基亞碸(500mL)中的溶液加入N,N-二異丙基乙胺(55.5g、429mmol)。將混合物在120℃攪拌2小時，用水(1500mL)稀釋， 並以乙酸乙酯(3x500mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x1000mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將粗製品用石油醚和乙酸乙酯(20：1、200mL)研磨以獲得為淡黃色固體的2-溴基-4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]苯甲酸甲酯(64g、79%)。

步驟6：4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯

將2-溴基-4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]苯甲酸甲酯(52.0g、140mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(500mL)中的溶液加入2-異氰基-2-甲基-丙烷(23.2g、279mmol)、醋酸鈀(3.14g、14mmol)、三環己基膦(3.92g、14mmol)、碳酸鈉(14.81g、140mmol)和三乙基矽烷(48.73g、419mmol)。將混合物於高壓釜中在65℃攪拌12小時。將混合物用水(500mL)稀釋，並以乙酸乙酯(3x300mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x500mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-15%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物。然後，將粗製品用石油醚和乙酸乙酯(10：1、300mL)研磨以獲得為淡黃色固體的4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(22g、49%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 10.74(s,1H),7.90(d,J=8.8Hz,1H),7.33(d,J=2.8Hz,1H),7.00(dd,J=2.8,8.8Hz,1H),4.06(d,J=6.4Hz,1H),3.96(d,J=12.8Hz,2H),3.91(s,3H),3.38(s,6H),2.93-2.82(m,2H),1.86(d,J=10.0Hz,3H),1.46-1.35(m,2H)。

步驟7：3-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮

將3-胺基哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(12.11g、74mmol)在甲醇(400mL)中的溶液加入醋酸鈉(10.98g、134mmol)。將混合物在15℃攪拌10分鐘。然後將醋酸(40.18g、669mmol)和4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(21.5g、67mmol)加入該混合物，並在15℃攪拌20分鐘。然後將氰基硼氫化鈉(8.41g、134mmol)加入混合物。將混合物在35℃攪拌11.5小時。將粗製品倒入冰水(1000mL)並藉由飽和碳酸氫鈉將pH調整至8。將混合物在15℃攪拌10分鐘、過濾，並用水(200mL)和乙腈(2x200mL)洗滌濾餅。將濾餅在真空下乾燥，用乙酸乙酯(100mL)研磨以獲得為淺黃色固體的3-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(20g、73%)。MS(ESI)m/z：402.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ 10.93(s,1H),7.49(d,J=8.4Hz,1H),7.07-7.00(m,2H),5.04(dd,J=5.2,13.2Hz,1H),4.35-4.25(m,1H),4.24-4.14(m,1H),4.07(d,J=6.8Hz,1H),3.89(d,J=12.8Hz,2H),3.27(s,6H),2.94-2.85(m,1H),2.83-2.72(m,2H),2.63-2.54(m,1H),2.36(dq,J=4.4,13.2Hz,1H),2.00-1.91(m,1H),1.80(dtd,J=3.6,7.6,15.2Hz,1H),1.70(d,J=12.8Hz,2H),1.30(dq,J=3.6,12.4Hz,2H)。

步驟8：1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛

將3-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(500mg、1.3mmol)在四氫呋喃(50mL)中的溶液加入2M硫酸(25mL)。將混合物在20℃攪拌2小時。將反應物用水(50mL)稀釋並用飽和碳酸氫鈉水溶液將pH調整至8-9。將混合物用二氯甲烷(3x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x70mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮以獲得為白色固體的1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(390mg、88%)。MS(ESI)m/z：356.0[M+H]⁺。

步驟9：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(100mg、0.2mmol)和1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(66mg、0.2mmol)在異丙醇(5mL)和二氯甲烷(5mL)中的溶液加入三乙胺(0.06mL、0.5mmol)。將混合物在25℃攪拌0.5小時，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(98mg、0.5mmol)，並在25℃攪拌12小時。用水(10mL)稀釋該殘留物，並用二氯甲烷(3x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型HPLC(流動相：[0.2%甲酸水-乙腈溶液]；B%：17%-47%、10分鐘)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑 啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(71.2mg、46%)。MS(ESI)m/z：947.3[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.94(s,1H),8.25(s,1H),8.13(s,1H),7.82(d,J=8.8Hz,1H),7.69(dd,J=3.0,8.8Hz,1H),7.51(d,J=8.8Hz,1H),7.46-7.39(m,2H),7.35(d,J=8.8Hz,2H),7.12-7.03(m,4H),5.39-5.19(m,1H),5.04(dd,J=5.2,13.2Hz,1H),4.35-4.29(m,1H),4.23-4.17(m,1H),3.93-3.86(m,2H),3.48-3.41(m,2H),3.36(d,J=3.2Hz,4H),3.29-3.22(m,3H),2.97-2.79(m,5H),2.60(d,J=2.8Hz,1H),2.56(s,4H),2.38(dd,J=8.8,13.2Hz,1H),2.16-2.08(m,1H),2.07-2.00(m,1H),1.99-1.79(m,4H),1.30-1.19(m,2H)。

實施例2：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：2-氰基-4-[3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯

將氮雜環丁烷-3-基甲醇三氟基醋酸(2.01g、5.0mmol,50%)、2-氰基-4-氟基苯甲酸甲酯(1.08g、6.0mmol)、二異丙基乙胺(4.1mL)和二甲基亞碸(10mL)的混合物於密封管在110℃攪拌2小時，然後冷卻至室溫並用水(100mL)稀釋。將混合物用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將有機部分合併且用鹽水(2x100mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，並濃縮。藉由矽膠管柱(乙酸乙酯/石油醚=1：1)純化殘留物以獲得為黃綠色油狀的2-氰基-4-[3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯(0.45g、37%)。MS(ESI)：m/z 246.95[M+H]⁺。

步驟2：2-氰基-4-(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)苯甲酸甲酯

將2-氰基-4-[3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯(7.33g、29.8mmol)和戴斯-馬丁試劑(13.89g、32.7mmol)在二氯甲烷(150mL)中的混合物在室溫攪拌3小時，然後懸浮在水(100mL)中並過濾。將濾液用二氯甲烷(3x100mL)萃取、合併，並濃縮以獲得為固體的2-氰基-4-(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)苯甲酸甲酯(7.2g、99%)。

步驟3：2-氰基-4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯

將2-氰基-4-(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)苯甲酸甲酯(7.30g、30mmol)、對甲苯磺酸(0.26g、1.5mmol)、甲醇(150mL)和三甲氧基甲烷(9.48g、89mmol)的混合物在45℃攪拌2小時，然後濃縮。藉由矽膠管柱(乙酸乙酯/石油醚=1：5)純化殘留物以獲得為固體的2-氰基-4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯(8g、92%)。MS(ESI)：m/z 291.00[M+H]⁺。

步驟4：4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-2-甲醯基苯甲酸甲酯

將2-氰基-4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯(8.3g、29mmol)、吡啶(120mL)、醋酸(60mL)、水(60mL)、次磷酸鈉(25.2g、286mmol)和雷尼鎳(24.5g、286mmol)的混合物在70℃隔夜攪拌，然後過濾。將濾液溶液 用乙酸乙酯(3x100mL)萃取，用無水硫酸鈉乾燥，並濃縮。藉由矽膠管柱(乙酸乙酯/石油醚=1：5)純化殘留物以獲得為黃色固體的4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-2-甲醯基苯甲酸甲酯(3.11g、37%)。MS(ESI)：m/z 294.15[M+H]⁺。

步驟5：3-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮

將4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-2-甲醯基苯甲酸甲酯(3.10g、10.6mmol)、3-胺基哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(2.09g、12.7mmol)和二異丙基乙胺(2mL)在二氯甲烷(200mL)和甲醇(4mL)中的攪拌混合物加入醋酸(2mL)，將混合物在35℃攪拌4小時。然後加入氰基硼氫化鈉(1.99g、31.7mmol)並在35℃再攪拌2小時。將反應藉由水(100mL)淬火，用二氯甲烷(3x100mL)萃取，用無水硫酸鈉乾燥，並濃縮。藉由矽膠管柱(二氯甲烷/甲醇=95：5)純化殘留物以獲得為淺藍色固體的3-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(3.72g、94%)。MS(ESI)：m/z 374.15[M+H]⁺。

步驟6：1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-甲醛

將3-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(1.5g、4.0mmol)溶解在三氟基醋酸(20mL)、二氯甲烷(40mL) 和水(10mL)。將所得的溶液在40℃隔夜攪拌，然後濃縮以獲得為黃色固體的1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-甲醛(1.3g、99%)。MS(ESI)：m/z 328.20[M+H]⁺。

步驟7：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(350mg、0.5mmol),1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-甲醛(214mg、0.7mmol)、醋酸(98mg、1.6mmol)、二異丙基乙胺(70mg、0.5mmol)和二氯基乙烷(20mL)的混合物在室溫、氮氣氛圍下隔夜攪拌。對上述混合物加入三乙醯氧基硼氫化鈉(346mg、1.6mmol)，並再攪拌1小時。將該反應用水(100mL)淬火，用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物，藉由反相快速層析法(流動相：乙腈在水中(10mM碳酸氫銨)、在30分鐘內梯度5%至42%)進一步純化粗製品，以獲得為黃色固體的(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(130.5mg、26%)。MS(ESI)：m/z 917.35[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 10.94(s,1H),10.15(s,1H),8.25(s,1H),7.82(d,J=8.9Hz,1H),7.72- 7.65(m,2H),7.59-7.39(m,3H),7.35(d,J=8.5Hz,2H),7.09(d,J=8.7Hz,2H),6.56-6.44(m,2H),5.42-5.19(m,1H),5.15-4.85(m,1H),4.31(d,J=17.0Hz,1H),4.18(d,J=17.0Hz,1H),4.15-4.02(m,2H),3.68-3.55(m,3H),3.49-3.38(m,4H),3.31-3.19(m,3H),3.13-3.05(m,1H),2.95-2.86(m,3H),2.85-2.78(m,3H),2.64-2.55(m,2H),2.42-2.29(m,1H),2.19-2.11(m,1H),2.09-2.01(m,1H),1.99-1.91(m,1H),1.23(s,3H)。

實施例3：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[6-[4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]-3-吡啶基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-羧酸三級丁酯

將1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(400mg、1.1mmol)和哌

-1-羧酸三級丁酯鹽酸鹽(300mg、1.4mmol)在二氯甲烷(4mL)和異丙醇(4mL)中的溶液加入三乙胺(469μL、3.4mmol)。將混合物在25℃攪拌0.5小時。然後將三乙醯氧基硼氫化鈉(715mg、3.4mmol)加入混合物。將該反應物在25℃攪拌11.5小時。將水(30mL)倒入混合物並攪拌1分鐘。用乙酸乙酯(3x30mL)萃取水相。將合併的有機相用鹽水(2x30mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並在真空下濃縮。藉由快速矽膠層析法(30-50%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為白色固體的4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-羧酸三級丁酯(530mg、89%)。 MS(ESI)m/z：526.4[M+H]⁺。

步驟2：3-[1-側氧基-5-[4-(哌

-1-基甲基)-1-哌啶基]異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮

將4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-羧酸三級丁酯(530mg、1.0mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液加入在1,4-二

烷中的4N鹽酸(0.8mL)。將混合物在25℃攪拌12小時，然後過濾以獲得為白色固體的3-[1-側氧基-5-[4-(哌

-1-基甲基)-1-哌啶基]異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(400mg、85%)。MS(ESI)m/z：426.0[M+H]⁺。

步驟3：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[6-[4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]-3-吡啶基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-(6-氟基-3-吡啶基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(120mg、0.2mmol)和3-[1-側氧基-5-[4-(哌

-1-基甲基)-1-哌啶基]異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(204mg、0.4mmol)在二甲基亞碸(2mL)中的溶液加入二異丙基乙胺(85mg、0.7mmol)。將混合物在100℃攪拌12小時，然後冷卻、過濾、在減壓下濃縮。藉由製備型HPLC(管柱：Phenomenex Luna C18 150x25mm x 10um；流動相：[0.2%甲酸水-乙腈溶液]；B%：15%-45%、10分鐘)純化殘留物，以獲得為黃色固體的(3R)-N- [2-氰基-3-[3-[6-[4-[[1-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]-3-吡啶基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(41.8mg、19%)。MS(ESI)m/z：948.6[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ 10.95(s,1H),10.36-9.74(m,1H),8.28(s,1H),8.23(d,J=2.8Hz,1H),7.83(d,J=8.8Hz,1H),7.78-7.61(m,3H),7.51(d,J=8.8Hz,1H),7.47-7.39(m,2H),7.10-6.97(m,3H),5.42-5.20(m,1H),5.05(dd,J=4.8,13.2Hz,1H),4.39-4.29(m,1H),4.27-4.15(m,1H),3.91(d,J=13.2Hz,2H),3.77-3.58(m,3H),3.51-3.41(m,4H),3.32-3.21(m,4H),2.97-2.91(m,1H),2.88-2.81(m,2H),2.61(s,1H),2.59-2.55(m,2H),2.44-2.37(m,1H),2.18-1.79(m,7H),1.31-1.21(m,2H)。

實施例4：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[2-(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}-4-羥基哌啶-4-基)乙醯基]哌

-1-基}苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-哌啶-1-羧酸芐酯

將N-異丙基丙烷-2-胺(18.2mL、129mmol)在四氫呋喃(120mL)中的溶液在0℃加入正丁醇鋰(2.5M,51mL)，將混合物用氮氣吹掃3次，並在0℃、氮氣下攪拌0.5小時。然後將混合物冷卻至-70℃，並加入乙酸三級丁酯(17.0mL、129mmol)。將混合物在-70℃攪拌1小時。然後在-70℃加入在四氫呋喃(70mL)中的4-側氧基哌啶-1-羧酸芐酯(10.3mL、51mmol)並攪拌1小時。將混合物倒入冰飽和氯化銨水溶液(w/w=1/10、400mL)並攪拌30分鐘。用乙酸 乙酯(3x500mL)萃取水相。用飽和鹽水(3x500mL)洗滌合併的有機相，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-30%乙酸乙酯/石油醚)純化粗製品以獲得為黃色油的4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-哌啶-1-羧酸芐酯(15.8g、87%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.44-7.23(m,5H),5.06(s,2H),4.63(s,1H),3.73(td,J=3.2,12.8Hz,2H),3.14(s,2H),2.32(s,2H),1.55(dd,J=4.0,7.2Hz,4H),1.39(s,9H)。

步驟2：2-(4-羥基-4-哌啶基)醋酸三級丁酯

將4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-哌啶-1-羧酸芐酯(8.5g、24mmol)在乙酸乙酯(300mL)中的溶液在氮氣氛圍下加入10%鈀碳(2g)。將懸浮液脫氣並以氫氣吹掃3次，然後在20℃、氫氣下攪拌12小時。將反應混合物以矽藻土墊過濾並濃縮，以獲得為灰白色油的2-(4-羥基-4-哌啶基)醋酸三級丁酯(4.7g、89%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 3.04-2.95(m,2H),2.78(td,J=4.2,12.4Hz,2H),2.36(s,2H),1.70-1.56(m,2H),1.53-1.47(m,2H),1.45(s,9H)。

步驟3：2-溴基-4-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]苯甲酸甲酯

將2-(4-羥基-4-哌啶基)醋酸三級丁酯(1.8g、8.4mmol)在二甲基亞碸中(30mL)中的溶液加入二異丙基乙胺(4.9mL、28mmol)和2-溴基-4-氟基-苯甲酸甲酯(1.62g、7.0mmol)。將混合物在90℃攪拌12小時，然後用水(150 mL)稀釋並以乙酸乙酯300mL(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(5x200mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-30%乙酸乙酯/石油醚)純化粗製品以獲得為黃色油的2-溴基-4-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]苯甲酸甲酯(2.7g、88%)。MS(ESI)m/z：430.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.71(d,J=9.0Hz,1H),7.15(d,J=2.5Hz,1H),6.96(dd,J=2.8,9.2Hz,1H),4.67(s,1H),3.76(s,3H),3.64(br d,J=13.2Hz,2H),3.26-3.16(m,2H),2.33(s,2H),1.74-1.54(m,4H),1.35(s,9H)。

步驟4：4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-哌啶-1-羧酸芐酯

將2-溴基-4-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]苯甲酸甲酯(2.8g、6mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(3.50g、26mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯基鈀(II)(478mg、0.7mmol)、碳酸氫鈉(1.73g、16mmol)在1,4-二

烷(30mL)和水(5mL)中的混合物脫氣並用氮氣吹掃3次，然後將混合物在90℃、氮氣下攪拌12小時。將混合物用水(150mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x200mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-5%乙酸乙酯/石油醚)純化粗製品以獲得為黃色油的4-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]-2-乙烯基-苯甲酸甲酯(2.4g、95%)。MS(ESI)m/z：376.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 7.73(d,J=8.8Hz,1H),7.48(dd,J=11.2,17.6Hz,1H),7.02(d,J=2.4Hz,1H),6.91(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),5.70(dd,J=1.6,17.4Hz,1H),5.32-5.21(m,1H),4.64(s,1H),3.74(s, 3H),3.67(d,J=13.2Hz,2H),3.27-3.17(m,2H),2.34(s,2H),1.78-1.56(m,4H),1.35(s,9H)。

步驟5：2-(4-羥基-4-哌啶基)醋酸三級丁酯

將4-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]-2-乙烯基-苯甲酸甲酯(1.2g、3mmol)在1,4-二

烷(20mL)和水(4mL)中的溶液加入2,6-二甲基吡啶(0.70mL、6mmol)、氧化鉀鋨(IV)(12.2mg、0.06mmol)和高碘酸鈉(0.70mL、13mmol)。將混合物在20℃攪拌1小時，然後用水(150mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x200mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-10%甲醇/二氯甲烷)純化粗製品，以獲得為黃色固體的4-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(0.85g、68%)。MS(ESI)m/z：378.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 10.50(s,1H),7.80(d,J=8.8Hz,1H),7.24-7.13(m,2H),4.68(s,1H),3.87-3.79(m,3H),3.69(d,J=13.2Hz,2H),3.30-3.20(m,2H),2.34(s,2H),1.71-1.58(m,4H),1.34(s,9H)。

步驟6：(4S)-5-胺基-4-[5-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯

將(4S)-4,5-二胺基-5-側氧基-戊酸甲酯鹽酸鹽(547mg、2.8mmol) 在甲醇(30mL)中的溶液加入氰基硼氫化鈉(233mg、3.7mmol)。將混合物在15℃攪拌10分鐘。然後將醋酸鈉(456mg、5.6mmol)和甲基4-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]-2-甲醯基-苯甲酸酯(0.7g、2mmol)加入至該混合物。將混合物在15℃攪拌20分鐘。然後將醋酸(2.0mL、43mmol)加入至該混合物。將混合物在35℃攪拌11.5小時。用碳酸氫鈉溶液鹼化反應混合物，用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-5%甲醇/二氯甲烷)純化殘留物，以獲得為白色固體的(4S)-5-胺基-4-[5-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(850mg、88%)。MS(ESI)m/z：490.2[M+H]⁺。

步驟7：(4S)-5-胺基-4-[5-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯

將(4S)-5-胺基-4-[5-[4-(2-三級丁氧基-2-側氧基-乙基)-4-羥基-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(750mg、1.5mmol)在四氫呋喃(20mL)中的溶液在-50℃加入三級丁醇鋰(1M,2.8mL)。將混合物在-20℃攪拌1小時。藉由水溶液2M硫酸(2mL)在20℃淬火反應混合物，然後用飽和碳酸氫鈉(20mL)鹼化，直到將pH調整至7-8。用乙酸乙酯(2x30mL)萃取混合物。將合併的有機層用鹽水(2x60mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型HPLC(流動相：[0.2%甲酸水-乙腈溶液]；B%：30%-60%、2分鐘)純化殘留物以獲得為白色固體的2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基 -異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]醋酸三級丁酯(450mg、53%)。MS(ESI)m/z：458.5[M+H]⁺。

步驟8：2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]醋酸

將2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]醋酸三級丁酯(300mg、0.7mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液加入在1,4-二

烷中的鹽酸鹽(3mL)。將混合物在20℃攪拌2小時，然後在減壓下濃縮以獲得為白色固體的2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]醋酸鹽酸鹽(260mg、72%)。MS(ESI)m/z：402.2[M+H]⁺。

步驟9：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]乙醯基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]醋酸(81mg、0.2mmol)和(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽 (130mg、0.2mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(3mL)中的溶液加入4-甲基

啉(102mg、1.0mmol)。將混合物在20℃攪拌10分鐘。然後將1-羥基苯并三唑(40mg、0.3mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺(58mg、0.3mmol)加入至該混合物。將混合物在20℃攪拌50分鐘，然後用水(30mL)稀釋並用四氫呋喃(3x20mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x40mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並在真空下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-1.5%甲醇/二氯甲烷)、然後藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷：甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]乙醯基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(80.1mg、38%)。MS(ESI)m/z：991.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ 10.93(s,1H),10.33(s,1H),8.26(s,1H),7.91-7.80(m,2H),7.72(dd,J=3.2,9.2Hz,1H),7.56-7.46(m,2H),7.42(d,J=3.2Hz,1H),7.35(d,J=9.2Hz,2H),7.14-6.99(m,4H),5.46-5.21(m,1H),5.09-4.92(m,2H),4.39-4.27(m,1H),4.24-4.13(m,1H),3.68(d,J=16.4Hz,4H),3.61(d,J=13.2Hz,2H),3.53(s,1H),3.47-3.38(m,2H),3.28-3.20(m,6H),2.97-2.81(m,1H),2.62-2.55(m,4H),2.40-2.33(m,1H),2.22-2.08(m,2H),2.00-1.91(m,1H),1.74-1.63(m,4H)。

實施例5：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將3-(5-溴基-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(86mg、0.3mmol)、(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(172mg、0.3mmol)、碳酸銫(261mg、0.8mmol)和[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](3-氯吡啶基)二氯化鈀(II)(10mg、0.01mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中的混合物脫氣並用氮氣吹掃3次，然後將混合物在100℃、氮氣下攪拌12小時。用碳酸氫鈉溶液將該反應溶液的pH調整至8-9，並以乙酸乙酯(3x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由反相HPLC(管柱：Phenomenex Luna C18 150x25mm x 10um；流動相：[0.2%甲酸水-乙腈溶液]；B%：36%-68%、10分鐘)純化粗製品，以獲得為灰白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[2-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(34.7mg、14%)。MS(ESI)m/z：850.5[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.95(s,1H),10.39-10.29(m,1H),8.27(s,1H),7.90-7.79(m,2H),7.75-7.68(m,1H),7.56(d,J=8Hz,1H),7.51(dd,J=3.2,8.8Hz,1H),7.42(d,J=2.0Hz,1H),7.37(d,J=8.4Hz,2H),7.18-7.10(m,4H),5.42-5.20(m,1H),5.06(dd,J=4.8,13.2Hz,1H),4.41-4.32(m,1H),4.28-4.19(m,1H),3.55-3.38(m,12H),2.98-2.84(m,1H),2.59(d,J=16.4Hz,1H),2.41-2.34(m,1H),2.16-1.94(m,3H)。

實施例73：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-4-氟基-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}哌啶-4-基)甲基]哌

-1-基}苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：2-溴基-3,4-二氟基苯甲酸甲酯

將2-溴基-3,4-二氟基-苯甲酸(40.0g、169mmol)在甲醇(300mL)中的攪拌溶液在0℃加入硫酸(1.8mL、34mmol)。將混合物在80℃攪拌48小時，然後濃縮。用水(400mL)稀釋該殘留物並以乙酸乙酯(2x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x200mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮以獲得為黃色油的2-溴基-3,4-二氟基苯甲酸甲酯(42g、99%)，其無需進一步純化即可用於下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.68(ddd,J=2.1,5.3,8.8Hz,1H),7.20(dt,J=7.4,8.8Hz,1H),3.94(s,1H)。

步驟2：2-溴基-4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟基苯甲酸甲酯

將2-溴基-3,4-二氟基-苯甲酸甲酯(8.0g、32mmol)在二甲基亞碸(80mL)中的攪拌溶液加入二異丙基乙胺(28.0mL、159mmol)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(5.58g、35mmol)。將混合物在100℃攪拌2小時。將反應物用水(200mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x150mL)萃取。將合併的有機相用鹽水(2x150mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=100：1 to 2：1)純化殘留物以獲得為黃色固體的2-溴基-4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯甲酸甲酯(6g、48%)。MS(ESI)m/z：390[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.63(dd,J=1.6,8.4Hz,1H),6.85(t,J=8.4Hz,1H),4.10(d,J=7.2Hz,1H),3.90(s,3H),3.61(d,J=12.4Hz,2H),3.39(s,6H),2.81-2.55(m,2H),1.86(d,J=13.6Hz,3H),1.52(d,J=3.6Hz,2H)。

步驟3：4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟基-2-乙烯基苯甲酸甲酯

將2-溴基-4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯甲酸甲酯(3g、8mmol)在1,4-二

烷(25mL)和水(5mL)中的攪拌溶液加入乙烯基三氟硼酸鉀(4.12g、31mmol)、[1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯基鈀(II)二氯甲烷(628mg、0.8mmol)和碳酸鈉(2.04g、19mmol)。將反應混合物在90℃、氮氣下攪拌12小時。將混合物過濾並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=100：1至3：1)純化殘留物，以獲得為淺黃色油的4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-2-乙烯基-苯甲酸甲酯(2.3g、89%)。MS(ESI)m/z：338[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.63(dd,J=1.2,8.4Hz,1H),7.03(dd,J=11.6,17.6Hz,1H),6.83(t,J=8.4Hz,1H),5.73-5.46(m,2H),4.10(d,J=7.2Hz,1H),3.85(s,3H),3.63-3.50(m,2H),3.38(s,6H),2.79-2.59(m,2H),1.93-1.72(m,3H),1.53(dd,J=3.6,12.0Hz,2H)。

步驟4：4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟基-2-甲醯基苯甲酸甲酯

將4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-2-乙烯基-苯甲酸甲酯(1g、3mmol)在1,4-二

烷(7.5mL)和水(2.5mL)中的攪拌溶液加入2,6-二甲基吡啶(0.7mL、6mmol)、鋨酸鉀(VI)二水合物(22mg、0.06mmol)和高碘酸鈉(0.07mL、12mmol)。將混合物在20℃攪拌2小時。將反應物用水(150mL)稀釋，用乙酸乙酯(3x80mL)萃取。將合併的有機相用鹽水(80mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=100：1 to 2：1)純化殘留物以獲得為淡黃色固體的4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(900mg、89%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.42(s,1H),7.66(d,J=8.6Hz,1H),7.01(t,J=8.4Hz,1H),4.10(d,J=7.2Hz,1H),3.90(s,3H),3.64(d,J=12.0Hz,2H),3.38(s,6H),2.83-2.63(m,2H),1.90-1.73(m,3H),1.50(dd,J=3.2,11.8Hz,2H)。

步驟5：(S)-5-胺基-4-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-4-氟基-1-側氧基異二氫吲哚-2-基)-5-側氧基戊酸甲酯

將4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(600mg、1.8mmol)和甲基(4S)-4,5-二胺基-5-側氧基-戊酸甲酯鹽酸鹽(417mg、2.1mmol)在甲醇(10mL)中的攪拌溶液加入醋酸鈉(725mg、8.8mmol)。將混合物在20℃攪拌0.5小時，然後加入氰基硼氫化鈉(222mg、3.5mmol)。將所得混合物在35℃攪拌11小時，然後濃縮。將殘留物用乙酸乙酯(100mL)稀釋和用鹽水(2x60mL)洗滌。將合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=3：1至1：100)純化殘留物以獲得為淡黃色固體的 (4S)-5-胺基-4-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-4-氟基-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(500mg、59%)。MS(ESI)m/z：452.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.51(d,J=8.4Hz,1H),7.02(t,J=7.8Hz,1H),6.40(s,1H),5.48(s,1H),4.97-4.78(m,1H),4.59-4.36(m,2H),4.11(d,J=7.2Hz,1H),3.69-3.56(m,5H),3.39(s,6H),2.75(t,J=11.8Hz,2H),2.52-2.29(m,3H),2.19(dt,J=5.4,9.8Hz,1H),1.92-1.80(m,3H),1.61-1.44(m,2H)。

步驟6：(S)-3-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-4-氟基-1-側氧基異二氫吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮

將(4S)-5-胺基-4-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-4-氟基-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基戊酸甲酯(500mg、1.1mmol)在四氫呋喃(10mL)中的攪拌溶液在-70℃滴加在四氫呋喃中的2M三級丁醇鈉(1.11mL)。將反應物在-70℃攪拌4小時。藉由在-70℃加入2M硫酸水溶液將混合物的pH調整至5。然後加入飽和碳酸氫鈉溶液以調整pH至8。用乙酸乙酯(2x100mL)萃取該混合物。將合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=3：1至1：100)純化殘留物以獲得為淡黃色固體的(S)-3-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-4-氟基-1-側氧基異二氫吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(370mg、80%)。MS(ESI)m/z：420[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.15(s,1H),7.58(d,J=8.4Hz,1H),7.05(t,J=7.8Hz,1H),5.19(dd,J=5.2,13.2Hz,1H),4.54-4.44(m,1H),4.43-4.27(m,1H),4.11(d,J=7.2Hz,1H),3.67-3.52(m,2H),3.39(s,6H),3.00-2.70(m,4H),2.35(s,1H),2.23(s,1H),1.87(d,J=13.6Hz,3H),1.53(d,J=12.4Hz,2H)。

步驟7：1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-4-氟基-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛

將(3S)-3-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-4-氟基-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(200mg、0.5mmol)在四氫呋喃(2mL)中的溶液加入2M硫酸水溶液(2.4mL)。將混合物在25℃攪拌1小時，然後用水(5mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x5mL)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌(2x5mL)，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮以獲得為白色固體的1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-4-氟基-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(180mg、粗製品)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：374.1[M+H]+。

步驟8：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-4-氟基-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-4-氟基-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(92mg、0.2mmol)和(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(160mg、0.2mmol)在二氯甲烷(3mL)和異丙醇(3mL)中的溶液加入三乙胺(0.06mL、0.5mmol)。將混合物在25℃攪拌0.5小時，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(157mg、0.7mmol)。將該反應物在25℃攪拌12小時，然後過濾並濃縮。藉由反相高性 能液體層析法(流動相：0.2%甲酸在水：乙腈中；B%：16%-46%、10分鐘)純化殘留物以獲得為灰白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-4-氟基-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺甲酸酯(112mg、43%)。MS(ESI)m/z：965.6[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.98(s,1H),8.25(s,1H),8.13(s,1H),7.82(d,J=8.8Hz,1H),7.71-7.63(m,2H),7.48(d,J=8.0Hz,1H),7.45-7.39(m,2H),7.35(d,J=8.8Hz,2H),7.17(t,J=8.0Hz,1H),7.08(d,J=9.2Hz,2H),5.40-5.18(m,1H),5.07(dd,J=5.2,13.2Hz,1H),4.48(d,J=16.8Hz,1H),4.31(d,J=16.8Hz,1H),3.52(s,2H),3.47-3.42(m,2H),3.41-3.35(m,6H),3.28-3.23(m,2H),2.96-2.72(m,8H),2.61(s,1H),2.42(dd,J=4.8,12.8Hz,1H),2.17-2.08(m,1H),2.07-1.95(m,2H),1.86(d,J=10.8Hz,3H),1.42-1.25(m,2H)。

實施例74：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1H-吲哚-4-基]哌啶-4-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：1-[2,6-雙(芐基氧基)吡啶-3-基]-4-溴基吲哚

將4-溴基-1H-吲哚(2.0g、10mmol)和2,6-雙(芐基氧基)吡啶-3-基硼酸(3.4g、10mmol)在1,4-二

烷(40mL)中的攪拌溶液在室溫分批加入醋酸銅(II)(5.6g、30mmol)和三級丁醇鉀(2.3g、20mmol)。將所得混合物在室溫氮氣氛圍下攪拌8小時。將反應物用水稀釋(50mL)並以乙酸乙酯萃取(3x50mL)。將合併的有機層用鹽水洗滌(3x50mL)，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管 柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為紅色固體的1-[2,6-雙(芐基氧基)吡啶-3-基]-4-溴基吲哚(900mg、18%)。MS(ESI)：m/z 487.10[M+H]+。

步驟2：1-[2,6-雙(芐基氧基)吡啶-3-基]-4-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]吲哚

將1-[2,6-雙(芐基氧基)吡啶-3-基]-4-溴基吲哚(150mg、0.1mmol)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(19.7mg、0.1mmol)在1,4-二

烷(20mL)中的攪拌混合物分批加入碳酸銫(101mg、0.3mmol)和二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](3-氯基吡啶基)鈀(II)(134mg、0.05mmol)。將混合物在90℃攪拌2小時。冷卻該反應物至室溫，用飽和氯化銨溶液(20mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌(2x10mL)，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(石油醚/乙酸乙酯=5：1)純化殘留物以獲得為白色固體的1-[2,6-雙(芐基氧基)吡啶-3-基]-4-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]吲哚(120mg、43%)。MS(ESI)：m/z 564.35[M+H]+。

步驟3：3-{4-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]吲哚-1-基}哌啶-2,6-二酮

將1-[2,6-雙(芐基氧基)吡啶-3-基]-4-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]吲哚(200mg、0.3mmol)在乙酸乙酯(500mL)中的溶液加入10%鈀碳(5g)。將混合物脫氣並用氫氣吹掃3次，然後在室溫、氫氣氛圍下隔夜攪拌。將反應混合物 以矽藻土墊過濾，濃縮濾液以獲得為淺黃色固體的3-{4-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]吲哚-1-基}哌啶-2,6-二酮(80mg、59%)。MS(ESI)：m/z 386.10[M+H]+。

步驟4：1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)吲哚-4-基]哌啶-4-甲醛

將3-{4-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]吲哚-1-基}哌啶-2,6-二酮(80mg、0.2mmol)和三氟醋酸(2mL)在二氯甲烷(4mL)中的攪拌溶液加入水(1mL)。將反應混合物在40℃攪拌2小時。將所得混合物在真空下濃縮以獲得為白色油的1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)吲哚-4-基]哌啶-4-甲醛(60mg、85%)。

步驟5：(3R)-N-(2-氰基-3-[(3-(4-[4-((1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)吲哚-4-基]哌啶-4-基甲基)哌

-1-基]苯基-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)吲哚-4-基]哌啶-4-甲醛(260mg、0.8mmol)和(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-((4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(465mg、0.8mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液在室溫氮氣氛圍下攪拌16小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(487mg、2mmol)加入上述混合物。將該反應物在室溫攪拌2小時。將混合物用水稀釋(40mL)並用二氯甲烷(3x30mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(30mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1) 純化殘留物以獲得為灰白色固體的(3R)-N-(2-氰基-3-[(3-(4-[4-((1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)吲哚-4-基]哌啶-4-基甲基)哌

-1-基]苯基-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(300mg、40%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.07(s,1H),8.26(s,1H),7.83(d,J=8.9Hz,1H),7.70(m,1H),7.44-7.34(m,3H),7.29(d,J=3.3Hz,1H),7.14-6.98(m,3H),6.56-6.50(m,1H),6.43(d,J=3.1Hz,1H),5.58(m,1H),5.39-5.26(d,J=56Hz,1H),3.61(t,J=12.8Hz,2H),3.54-3.44(m,5H),3.28(s,3H),2.90(d,J=15.3Hz,3H),2.72(d,J=13.4Hz,4H),2.65(s,1H),2.41(s,1H),2.13(m,2H),2.08(s,1H),2.04(s,1H),1.91(d,J=12.1Hz,2H),1.46(s,2H),1.24(s,3H)；MS(ESI)：m/z 931.10[M+H]+。

實施例75：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{1-[1-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}甲基)哌啶-4-基]-1H-吡唑-3-基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-{4-[(2,6-二側氧基哌啶-3-基)胺基]-2-氟基苯基}哌啶-1-羧酸三級丁酯

將4-(3-硝基吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸三級丁酯(6.5g、22mmol)在甲醇(60mL)中的溶液加入10%鈀碳(3.0g)。將混合物脫氣並用氫氣吹掃3次。將該反應物在室溫、氫氣氛圍下攪拌2小時，然後以矽藻土墊過濾和濃縮以獲得為 灰白色固體的4-{4-[(2,6-二側氧基哌啶-3-基)胺基]-2-氟基苯基}哌啶-1-羧酸三級丁酯(6.2g、70%)。MS(ESI)：m/z 267.10[M+H]+。

步驟2：4-[3-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將4-(3-胺基吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸三級丁酯(6.0g、22mmol)和原甲酸三甲酯(14.3g、135mmol)在吡啶(80mL)中的溶液加入2-胺基-5-羥基苯甲酸(6.9g、45mmol)。將所得混合物在120℃、氮氣氛圍下攪拌6小時。將反應物冷卻至室溫，並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為棕色固體的4-[3-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(3.5g、38%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.37(s,1H),8.27(s,1H),7.94-7.80(m,2H),7.72-7.62(m,1H),7.61-7.46(m,2H),7.43(d,J=3.0Hz,1H),7.37-7.29(m,2H),7.04-6.97(m,2H),5.76(s,1H),5.39-5.29(d,J=40Hz,1H),4.10(s,2H),3.97(s,1H),3.52-3.32(m,6H),2.99(s,2H),2.29-1.99(m,3H),1.99(s,1H),1.43(s,9H),1.29-1.07(m,3H)；MS(ESI)：m/z 412.25[M+H]+。

步驟3：4-{3-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸酯

將4-[3-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)吡唑-1-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(3g、7mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(1.72g、11mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(80mL)中的攪拌溶液在室溫分批加入碳酸銫(7.13g、22mmol)，將所得混合物在 90℃、氮氣氛圍下攪拌3小時。冷卻該反應物至室溫，用水(20mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為灰白色油的4-{3-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸三級丁酯(2.8g、70%)。MS(ESI)：m/z 493.25[M-56+H]+。

步驟4：4-{4-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]-3-甲氧基苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(1.1g、7mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(50mL)中的溶液在50℃、氮氣氛圍下攪拌0.5小時。然後在室溫、1分鐘內緩慢地加入4-{4-[6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]-3-甲氧基苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(2.5g、4mmol)。將該反應在90℃攪拌3小時，然後冷卻至室溫。將混合物用水(20mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用水(2x30mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為白色固體的4-{4-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]-3-甲氧基苯基}哌

-1-羧酸三級丁酯(3g、96%)。MS(ESI)：m/z 697.30[M+H]+；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ 10.36(s,1H),8.55(s,1H),8.01-7.81(m,5H),7.73-7.63(m,1H),7.54(dd,J=9.2,4.2Hz,1H),7.47(d,J=3.0Hz,1H),6.64(d,J=2.5Hz,1H),5.24-5.14(d,J=30Hz,1H),4.49-4.35(m,1H),4.04(td,J=10.7,5.3Hz,2H), 3.55(d,J=2.0Hz,3H),3.53-3.35(m,2H),2.89(s,4H),2.73(d,J=0.6Hz,4H),2.03(d,J=23.7Hz,5H),1.82(qd,J=12.3,4.3Hz,2H),1.42(s,9H)。

步驟5：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[1-(哌啶-4-基)吡唑-3-基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽

將4-{3-[6-(2-氰基-6-氟基-3-{[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基磺醯基]胺基}苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]吡唑-1-基}哌啶-1-羧酸三級丁酯(500mg、0.7mmol)和4M鹽酸在1,4-二

烷(10mL)中的混合物在室溫攪拌1小時。將該反應物在減壓下濃縮。將殘留物用乙酸乙酯(10mL)研磨以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[1-(哌啶-4-基)吡唑-3-基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(300mg、66%)。MS(ESI)：m/z 597.30[M+H]+。

步驟6：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{1-[1-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}甲基)哌啶-4-基]吡唑-3-基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[1-(哌啶-4-基)吡唑-3-基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(180mg、0.3mmol)在二氯甲烷(40mL)中的攪拌溶液在室溫分批加入1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側 氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(101mg、0.3mmol)。將混合物的pH用N,N-二異丙基乙胺(0.1mL)調整至9並在室溫攪拌1小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(181mg、0.9mmol)分批加入至上述混合物。將該反應在室溫攪拌1小時，然後用水(50mL)稀釋並用二氯甲烷(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{1-[1-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}甲基)哌啶-4-基]吡唑-3-基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(154.3mg、57%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ 10.96(s,1H),8.54(s,1H),7.99(d,J=2.4Hz,1H),7.84(d,J=8.9Hz,1H),7.70-7.65(m,1H),7.60(t,J=9.9Hz,2H),7.52(d,J=8.8Hz,2H),7.07(d,J=8.0Hz,2H),6.68(d,J=2.4Hz,1H),5.39-5.21(d,J=54Hz,1H),5.05-5.01(m,1H),4.41(s,3H),4.33(d,J=16.9Hz,2H),4.20(d,J=16.9Hz,1H),3.91(d,J=12.4Hz,2H),3.54-3.38(m,4H),3.24(q,J=8.9Hz,2H),2.88(q,J=14.8,12.1Hz,1H),2.62(s,1H),2.55(s,1H),2.40-2.32(m,1H),2.18(s,5H),1.99(s,3H),1.99(d,J=17.1Hz,2H),1.83(d,J=12.9Hz,4H),1.24(s,1H)；MS(ESI)：m/z 936.35[M+H]+。

實施例76：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}氮雜環丁烷-3-基)甲基]哌

-1-基}苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：2-溴基-4-[3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯

將氮雜環丁烷-3-基甲醇鹽酸鹽(6.5g、53mmol)在二甲基亞碸(100mL)中的溶液加入N,N-二異丙基乙胺(20.4g、158mmol)和2-溴基-4-氟基-苯甲酸甲酯(11.03g、47mmol)。將混合物在110℃攪拌12小時，然後用水(300mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x150mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(4x300mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。用石油醚/乙酸乙酯(93mL、30：1)研磨粗製品以獲得為白色固體的2-溴基-4-[3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯(8.8g、56%)。MS(ESI)m/z：302.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.71(d,J=8.8Hz,1H),6.60(d,J=2.4Hz,1H),6.39(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),4.81(t,J=5.2Hz,1H),3.94(t,J=8.0Hz,2H),3.75(s,3H),3.66(dd,J=5.6,8.0Hz,2H),3.56(t,J=6.0Hz,2H),2.88-2.75(m,1H)。

步驟2：2-溴基-4-(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)苯甲酸甲酯

將草醯氯(5.58g、44mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液在-70℃滴加在二氯甲烷(10mL)中的二甲基亞碸(6.87g、88mmol)。將混合物在-70℃攪拌1小時。然後將在二氯甲烷(30mL)中的2-溴基-4-[3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯(8.8g、29mmol)滴加至該混合物，並在-70℃攪拌2小時，然後加入三乙胺(14.83g、147mmol)。將該反應物在20℃攪拌1小時，然後用水(200mL)稀釋並用二氯甲烷(2x150mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x300mL)洗滌， 用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮，以獲得為白色固體的2-溴基-4-(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)苯甲酸甲酯(8g、91%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：318.0[M+H2O+H]+。

步驟3：2-溴基-4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯

將2-溴基-4-(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)苯甲酸甲酯(8.0g、27mmol)在甲醇(30mL)中的溶液加入對甲苯磺酸吡啶鎓(823mg、2.7mmol)和三甲氧基甲烷(28.5g、268mmol)。將混合物在25℃攪拌12小時，然後用水(100mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x80mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為白色固體的2-溴基-4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯(6.2g、67%)。MS(ESI)m/z：344.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.71(d,J=8.8Hz,1H),6.62(d,J=2.4Hz,1H),6.40(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),4.60(d,J=6.8Hz,1H),3.96(t,J=8.4Hz,2H),3.77-3.70(m,5H),3.29(s,6H),3.05-2.93(m,1H)。

步驟4：4-(3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基)-2-乙烯基苯甲酸甲酯

將2-溴基-4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]苯甲酸甲酯(20g、58mmol)在1,4-二

烷(200mL)和水(30mL)中的溶液在氮氣氛圍下加入[1,1’-雙 (二苯基膦基)二茂鐵]二氯基鈀(II)(2.13g、3mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(31.13g、232mmol)和碳酸鈉(15.4g、145mmol)。將混合物在90℃攪拌12小時，然後冷卻至室溫。將混合物用水(1000mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x500mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x800mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0至5%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為無色油的4-(3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基)-2-乙烯基苯甲酸甲酯(16g、95%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.86(d,J=8.4Hz,1H),7.58(dd,J=10.8,17.6Hz,1H),6.45(d,J=2.4Hz,1H),6.30(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),5.56(dd,J=1.6,17.2Hz,1H),5.29(dd,J=1.6,10.8Hz,1H),4.63(d,J=7.2Hz,1H),4.03(t,J=8.0Hz,2H),3.88-3.79(m,5H),3.39(s,6H),3.10-3.00(m,1H)。

步驟5：4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯

將4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-2-乙烯基-苯甲酸甲酯(19g、65mmol)在1,4-二

烷(600mL)和水(150mL)中的溶液加入2,6-二甲基吡啶(13.98g、130mmol)、二水合鋨酸鉀(VI)(480mg、1.3mmol)和高碘酸鈉(55.8g、261mmol)。將該反應物在20℃攪拌2小時。將混合物用水(1000mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x500mL)萃取。將合併的有機相用鹽水(200mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0至15%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為黃色油的4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(45g、78%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.72(s,1H),7.90(d,J=8.8Hz,1H),6.82(d,J =2.8Hz,1H),6.50(dd,J=2.8,8.8Hz,1H),4.61(d,J=6.8Hz,1H),4.05(t,J=8.0Hz,2H),3.91(s,3H),3.86(dd,J=5.6,8.0Hz,2H),3.39(s,6H),3.12-2.99(m,1H)。

步驟6：(4S)-5-胺基-4-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯

將(4S)-4,5-二胺基-5-側氧基-戊酸甲酯鹽酸鹽(18.5g、94mmol)在甲醇(450mL)中的溶液加入醋酸鈉(12.9g、157mmol)並在25℃攪拌10分鐘，然後加入4-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(23g、78mmol)和醋酸(22.4mL、392mmol)。將混合物在25℃攪拌20分鐘，然後加入氰基硼氫化鈉(9.86g、157mmol)，並將混合物在35℃攪拌11.5小時。將反應物濃縮，用水(1000mL)稀釋該殘留物，並藉由飽和碳酸氫鈉溶液將pH調整至8。將混合物用乙酸乙酯(3x1000mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x1000mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-2%甲醇/二氯甲烷)純化殘留物以獲得為灰白色固體的(4S)-5-胺基-4-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(25g、73%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.63(d,J=8.4Hz,1H),6.46-6.35(m,3H),5.39(s,1H),4.85(dd,J=6.0,9.2Hz,1H),4.62(d,J=7.2Hz,1H),4.33(d,J=2.4Hz,2H),4.01(t,J=8.0Hz,2H),3.86-3.77(m,2H),3.63(s,3H),3.39(s,6H),3.11-2.99(m,1H),2.47-2.27(m,3H),2.22-2.11(m,1H)。

步驟7：(3S)-3-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮

將(4S)-5-胺基-4-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(21g、52mmol)在四氫呋喃(400mL)中的溶液在-30℃滴加在四氫呋喃(93mL)中的1M三級丁醇鋰。將該反應在-30℃攪拌2小時。藉由2M檸檬酸水溶液在-30℃將混合物的pH調整至5。然後用鹽水(500mL)稀釋該混合物，並藉由飽和碳酸氫鈉溶液將pH調整至8。用四氫呋喃和乙酸乙酯(V：V=1：1、2x300mL)萃取混合物。將合併的有機層用鹽水(3x500mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。用乙酸乙酯(200mL)研磨粗製品以獲得為淡黃色固體的(3S)-3-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(37.5g、95%)。MS(ESI)m/z：374.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.93(s,1H),7.48(d,J=8.4Hz,1H),6.55-6.44(m,2H),5.03(dd,J=5.2,13.2Hz,1H),4.62(d,J=6.8Hz,1H),4.35-4.25(m,1H),4.22-4.12(m,1H),3.95(dt,J=1.6,8.0Hz,2H),3.76-3.65(m,2H),3.29(s,6H),3.09-2.97(m,1H),2.96-2.84(m,1H),2.61-2.56(m,1H),2.40-2.31(m,1H),1.98-1.91(m,1H)。

步驟8：1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異吲哚啉-5-基]氮雜環丁烷-3-甲醛

將(3S)-3-[5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(13g、35mmol)在丙酮(200mL)和水(30mL)中的溶液加 入4-甲基苯磺酸(1.2g、7mmol)。將混合物在70℃攪拌4小時，然後在減壓下濃縮。用丙酮(250mL)研磨殘留物以獲得為黃色固體的1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-甲醛(10.5g、92%)。MS(ESI)m/z：328.4[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.94(s,1H),9.85(s,1H),7.52(d,J=8.0Hz,1H),6.59(s,1H),6.54(d,J=8.4Hz,1H),5.04(dd,J=5.2,13.2Hz,1H),4.36-4.17(m,2H),4.11-4.01(m,4H),3.64(d,J=6.8Hz,1H),2.96-2.84(m,1H),2.58(d,J=17.2Hz,1H),2.42-2.31(m,1H),1.99-1.89(m,1H)。

步驟9：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(450mg、0.7mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液加入1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-甲醛(315mg、1mmol)在異丙醇(5mL)，然後加入醋酸(88mg、1.5mmol)。將混合物在25℃攪拌10分鐘。然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(313mg、1.5mmol)，並將該反應在25℃攪拌30分鐘。將混合物用水(30mL)稀釋，並用四氫呋喃(2x15mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由半製備型反相高性能液體層析法(流動相：0.2%甲酸在水中：乙腈；B%：12%-42%、15分鐘)純化殘留物以獲得為灰白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]氮 雜環丁烷-3-基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(257mg、37%,98% de)。MS(ESI)m/z：919.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.00-10.84(m,1H),10.23-10.00(m,1H),8.25(s,1H),7.82(d,J=9.2Hz,1H),7.73(s,1H),7.69(dd,J=2.8,9.2Hz,1H),7.50(d,J=8.4Hz,1H),7.47-7.39(m,2H),7.38-7.29(m,2H),7.13-7.04(m,2H),6.56-6.44(m,2H),5.39-5.20(m,1H),5.08-4.99(m,1H),4.36-4.26(m,1H),4.23-4.14(m,1H),4.12-4.02(m,2H),3.71-3.56(m,2H),3.52-3.34(m,4H),3.29-3.18(m,2H),3.14-3.04(m,1H),2.98-2.72(m,6H),2.69-2.55(m,3H),2.41-2.26(m,2H),2.17-2.09(m,1H),2.09-2.00(m,2H),1.99-1.87(m,1H)。

實施例77：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}哌啶-4-基)甲基]哌

-1-基}苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：(4S)-5-胺基-4-(三級丁氧基羰基胺基)-5-側氧基-戊酸甲酯

將(2S)-2-(三級丁氧基羰基胺基)-5-甲氧基-5-側氧基-戊酸(25g、96mmol)、(2-甲基丙烷-2-基)氧基羰基碳酸三級丁酯(33.41g、153mmol)和吡啶(1mL、191mmol)在1,4-二

烷(250mL)中的混合物脫氣並用氮氣吹掃3次，然後在0℃、氮氣氛圍下攪拌0.5小時。將混合物在0℃加入碳酸氫銨(22.7g、287mmol)，並在25℃攪拌16小時。將反應混合物用水(500mL)稀釋，並以乙酸乙酯(2x300mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x400mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。用石油醚/乙酸乙酯(330mL、30：1)研磨粗製品以獲得為白色固體的(4S)-5-胺基-4-(三級丁氧基羰基胺基)-5-側氧基-戊酸甲酯(39.4g、79%)。 MS(ESI)m/z：161.2[M-100+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.24(s,1H),7.00(s,1H),6.78(d,J=8.4Hz,1H),3.91--3.82(m,1H),3.58(s,3H),2.30(t,J=7.6Hz,2H),1.94--1.82(m,1H),1.79--1.66(m,1H),1.37(s,9H)。

步驟2：(4S)-4,5-二胺基-5-側氧基-戊酸甲酯

將(4S)-5-胺基-4-(三級丁氧基羰基胺基)-5-側氧基-戊酸甲酯(50.0g、192mmol)在二氯甲烷(500mL)的溶液加入在1,4-二

烷(500mL)中的4M鹽酸。將混合物在25℃攪拌1小時，然後在真空下濃縮。用石油醚/乙酸乙酯(620mL、30：1)研磨粗製品以獲得為白色固體的(4S)-4,5-二胺基-5-側氧基-戊酸甲酯鹽酸鹽(35g、92%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,3H),8.00(s,1H),7.57(s,1H),3.78(d,J=5.6Hz,1H),3.60(s,3H),2.47--2.40(m,2H),2.07--1.96(m,2H)。

步驟3：(4S)-5-胺基-4-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯

將(4S)-4,5-二胺基-5-側氧基-戊酸甲酯鹽酸鹽(27.8g、142mmol)在甲醇(500mL)中的溶液加入醋酸鈉(17.9g、218mmol)。將混合物在25℃攪拌30分鐘，然後加入4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(35.0g、109mmol)和醋酸(31.1mL、545mmol)。將混合物在25℃攪拌30分鐘，然後加入氰基硼氫化鈉(13.7g、218mmol)，將該反應物在35℃攪拌11小時。將混合物用水(600mL)稀釋，並以乙酸乙酯(3x500mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(4x600 mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為黃色固體的(4S)-5-胺基-4-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(40g、84%)。MS(ESI)m/z：434.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.55--7.43(m,2H),7.13(s,1H),7.08--6.97(m,2H),4.67(dd,J=4.8,10.4Hz,1H),4.47(d,J=17.2Hz,1H),4.38--4.27(m,1H),4.07(d,J=6.8Hz,1H),3.87(d,J=12.8Hz,2H),3.51(s,3H),3.27(s,6H),2.77(t,J=11.6Hz,2H),2.27--2.12(m,3H),2.05--1.97(m,1H),1.80(dtd,J=3.6,7.6,11.2Hz,1H),1.70(d,J=12.8Hz,2H),1.39--1.22(m,2H)。

步驟4：(3S)-3-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮

將(4S)-5-胺基-4-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(15g、35mmol)在四氫呋喃(300mL)中的溶液在-20℃加入在四氫呋喃(62mL)中的1M三級丁醇鋰。將混合物在-20℃攪拌2小時。將該反應物藉由0.2M硫酸水溶液淬火至pH 6，然後用飽和碳酸氫鈉溶液將pH調整至8。將混合物用水(300mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x200mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。用乙酸乙酯(100mL)研磨粗製品以獲得為黃色固體的(3S)-3-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(13g、93%)。

步驟5：(3S)-3-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮

將(3S)-3-[5-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(2g、5mmol)在丙酮(20mL)和水(2mL)中的溶液加入4-甲基苯磺酸(171mg、1mmol)。將混合物在70℃攪拌3小時。用乙酸乙酯(20mL)研磨粗製品以獲得為黃色固體的1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(1.5g、85%)。MS(ESI)m/z：374.2[M+H2O+H]+。

步驟6：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(342mg、1mmol)和(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(450mg、0.7mmol)在異丙醇(5mL)和二氯甲烷(5mL)中的溶液在25℃加入醋酸(88mg、1.5mmol)並攪拌10分鐘。然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(313mg、1.5mmol)，將所得混合物在25℃攪拌50分鐘。將反應混合物在四氫呋喃(60mL)和鹽水(60mL)之間分配。將有機相用鹽水(3x80mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由半製備型反相高性能液體層析法(流動相：[0.2%甲酸在水：乙腈]；B%：12%-42%、15分鐘) 純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(250mg、35%)。MS(ESI)m/z：948.4[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.95(s,1H),10.26-9.64(m,1H),8.25(s,1H),7.82(d,J=9.2Hz,1H),7.74-7.63(m,2H),7.51(d,J=8.4Hz,1H),7.47-7.39(m,2H),7.35(d,J=8.8Hz,2H),7.13-7.03(m,4H),5.41-5.16(m,1H),5.05(dd,J=4.8,13.2Hz,1H),4.39-4.28(m,1H),4.26-4.15(m,1H),3.90(d,J=12Hz,2H),3.52-3.36(m,4H),3.32-3.20(m,4H),2.91-2.76(m,6H),2.61(s,3H),2.47-2.31(m,2H),2.16-2.02(m,2H),1.96(dd,J=5.6,11.2Hz,2H),1.83(d,J=11.6Hz,2H),1.36-1.09(m,2H)。

實施例78：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-側氧基-2,3-二氫基-1H-1,3-苯并二唑-5-基]哌啶-4-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：N-(4-甲氧基芐基)-5-側氧基四氫呋喃-2-甲醯胺

將5-側氧基四氫呋喃-2-羧酸(10g、77mmol)在0℃緩慢地加入亞硫醯氯(21.0g、173mmol)。將混合物在85℃攪拌3小時，然後在15℃攪拌6小時。將混合物濃縮，將殘留物在0℃氮氣下溶解於無水二氯甲烷(1L)。然後，加入三乙胺(15.5g、153mmol)和4-甲氧基芐基胺(8.4g、62mmol)在二氯甲烷(400mL)中的溶液，將混合物在15℃攪拌3小時。將反應物用水(600mL)稀釋， 並用二氯甲烷(3x300mL)萃取。將合併的有機相用0.5M鹽酸水溶液(500mL)和鹽水(500mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為黃色固體的N-(4-甲氧基芐基)-5-側氧基四氫呋喃-2-甲醯胺(12.4g、65%)。MS(ESI)：m/z 250.10[M+H]+。

步驟2：3-羥基-1-(4-甲氧基芐基)哌啶-2,6-二酮

將N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-側氧基-四氫呋喃-2-甲醯胺(12g、48mmol)在無水四氫呋喃(150mL)中的溶液冷卻至-78℃。然後，將在無水四氫呋喃(100mL)中的三級丁醇鉀(6.45g、58mmol)在-78℃、氮氣氛圍下滴加至上述溶液。將該反應在-40℃攪拌1小時。將混合物用飽和氯化銨溶液(100mL)稀釋，用乙酸乙酯(3x150mL)萃取。將合併的有機相用鹽水(30mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚：乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為白色固體的3-羥基-1-(4-甲氧基芐基)哌啶-2,6-二酮(11g、92%)。

步驟3：1-(4-甲氧基芐基)-2,6-二側氧基哌啶-3-基三氟基甲磺酸鹽

將3-羥基-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌啶-2,6-二酮(4.0g、16mmol)和吡啶(2.6mL、32mmol)在二氯甲烷(40mL)中的攪拌溶液在0℃、氮氣氛圍下滴加至三氟基甲磺酸酐(4.1mL、24mmol)。將所得混合物在室溫氮氣氛圍下攪拌2小時，然後濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲 得為棕色固體的1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,6-二側氧基哌啶-3-基三氟基甲磺酸鹽(4g、65%)。MS(ESI)：m/z 399.00[M+H]+。

步驟4：3-(5-溴基-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基)-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌啶-2,6-二酮

將6-溴基-1-甲基-3H-1,3-苯并二唑-2-酮(0.89g、4mmol)在四氫呋喃(30mL)中的溶液加入三級丁醇鉀(0.53g、5mmol)並在50℃、氮氣氛圍下攪拌1小時。將混合物冷卻至0℃並滴加1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,6-二側氧基哌啶-3-基三氟基甲磺酸鹽(1.5g、4mmol)。將所得混合物在室溫氮氣氛圍下攪拌2小時。將該反應物用飽和氯化銨溶液在0℃淬火，將混合物用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將有機層在減壓下濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為黃色固體的3-(5-溴基-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基)-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌啶-2,6-二酮(1.2g、66%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.48(d,J=1.9Hz,1H),7.25-7.15(m,3H),7.01(d,J=8.4Hz,1H),6.90-6.82(m,2H),5.54(d,1H),4.83-4.76(d,J=14.3Hz,2H),3.73(s,3H),3.35-3.05(d,1H),2.82-2.73(d,2H),2.12-2.02(m,1H)；MS(ESI)：m/z 460.00[M+H]+。

步驟5：3-(5-溴基-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基)哌啶-2,6-二酮

將3-(5-溴基-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基)-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌啶-2,6-二酮(1.2g、2.6mmol)在甲苯(5mL)中的溶液分批在室溫氮氣氛圍下加入甲磺酸(2.5mL)。將所得混合物在120℃、氮氣氛圍下攪拌2小時。將該反應冷卻至室溫、並濃縮，用水稀釋(30mL)該殘留物，過濾混合物，並將固體用水(2x5mL)洗滌。藉由反相快速層析法(流動相：乙腈在水中(10mmol/L碳酸氫銨)、在40分鐘內梯度10%至80%)純化殘留物以獲得為白色固體的3-(5-溴基-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(430mg、48%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.13(s,1H),7.48(d,J=1.9Hz,1H),7.30-7.08(m,2H),5.39(d,1H),3.35(s,1H),2.97-2.57(m,2H),2.10-1.98(m,1H)；MS(ESI)：m/z 339.85[M+H]+。

步驟6：3-{5-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基}哌啶-2,6-二酮

將3-(5-溴基-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(400mg、1.2mmol)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(283mg、1.8mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中的攪拌溶液在室溫分批加入三級丁醇鈉(341mg、3.5mmol)和二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](3-氯基吡啶基)鈀(II)(49.8mg、0.06mmol)。將所得混合物在100℃、氮氣氛圍下攪拌2小時。將混合物冷卻至室溫，用飽和氯化銨(100mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x50mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：5)純化殘留物以獲得為黃色固體的3-{5-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基}哌啶-2,6-二酮(210mg、42%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.08(s,1H),7.96(s,1H),6.93(d,J=8.5Hz,1H),6.83(d,J=2.2Hz,1H),6.72-6.59(m,1H),5.29(d,1H),4.21-4.03(m,2H),3.70-3.49(m,2H),3.33-3.21(m,10H),3.03-2.83(m,2H),2.74-2.54(m,5H),2.57-2.48(m,1H),1.99-1.61(m,4H),1.44-1.30(m,2H),1.24(s,1H),1.06(d,1H)；MS(ESI)：m/z 417.15[M+H]+。

步驟7：1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-5-基]哌啶-4-甲醛

將3-{5-[4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基]-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-1-基}哌啶-2,6-二酮(60mg、0.1mmol)和三氟基醋酸(1mL)在二氯甲烷(4mL)中的攪拌溶液加入水(0.2mL)。將反應混合物在40℃攪拌2小時。將混合物冷卻至室溫，用飽和碳酸氫銨溶液將pH調整至8。將所得混合物用二氯甲烷(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x50mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮，以獲得為黃色油的1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-5-基]哌啶-4-甲醛(50mg、93%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.09(s,1H),7.23-7.01(m,1H),6.97(t,J=7.9Hz,1H),6.93-6.84(m,1H),5.37(d,1H),4.17-3.62(s,2H),3.35(s,2H),3.30(s,2H),3.12(d,J=11.2Hz,1H),2.89(d,4H),2.79-2.00(d,1H),1.74-1.49(d,J=12.3Hz,3H),1.44-1.14(m,2H)；MS(ESI)：m/z 371.10[M+H]+。

步驟8：(3R)-N-(2-氰基-3-[(3-(4-[4-((1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-5-基]哌啶-4-基甲基)哌

-1-基]苯基-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-5-基]哌啶-4-甲醛(225mg、0.6mmol)和(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-((4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(369mg、0.6mmol)在二氯甲烷(15mL)中的攪拌溶液加入N,N-二異丙基乙胺至pH為9。將所得混合物在室溫氮氣氛圍下攪拌16小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(386mg、1.8mmol)加入至上述混合物。將該反應物在室溫再攪拌2小時，將混合物用水(50mL)稀釋，用二氯甲烷(3x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(50mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為灰白色固體的(3R)-N-(2-氰基-3-[(3-(4-[4-((1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-5-基]哌啶-4-基甲基)哌

-1-基]苯基-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(262mg、43%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.12(s,1H),10.0(s,1H),8.25(s,1H),7.83(d,J=8.9Hz,1H),7.76(m,2H),7.50-7.30(m,4H),7.10(d,J=8.7Hz,2H),6.98(m,1H),6.60(m,1H),5.45-5.23(m,2H),3.64(m,2H),3.45(s,2H),3.40(m,2H),3.26(m,5H),2.89(m,4H),2.74-2.58(m,6H),2.52(m,6H),2.21-1.95(m,3H),1.88(d,J=12.6Hz,3H),1.30(m,2H),1.29-1.21(m,1H)；MS(ESI)：m/z 962.45[M+H]+。

實施例79：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]哌啶-1-基}甲基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-溴基-2-(溴基甲基)-3-氟基苯甲酸甲酯

將4-溴基-3-氟基-2-甲基苯甲酸甲酯(2.5g、10mmol)在二氯基乙烷(75mL)中的溶液在室溫加入過氧化苯甲醯(0.52g、2mmol)和N-溴基琥珀醯亞胺(2.16g、12mmol)，將所得混合物在90℃、氮氣氛圍下隔夜攪拌。冷卻該反應物至室溫，用水稀釋，並用二氯甲烷(3x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=5：1)純化殘留物以獲得為灰白色固體的4-溴基-2-(溴基甲基)-3-氟基苯甲酸甲酯(2g、61%)。

步驟2：3-(5-溴基-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮

將4-溴基-2-(溴基甲基)-3-氟基苯甲酸甲酯(1.5g、4.6mmol)和3-胺基哌啶-2,6-二酮(1.77g、14mmol)在乙腈(50mL)中的混合物在室溫加入N,N-二異丙基乙胺(10mL、57mmol)。將所得混合物在80℃、氮氣氛圍下隔夜攪拌。將混合物冷卻至室溫，用水(20mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x25mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為淡黃色固體的3-(5-溴基-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(1.23g、78%)。MS(ESI)：m/z 341.1[M+H]+。

步驟3：4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯

將3-(5-溴基-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(450mg、1.3mmol)在水(3mL)和1,4-二

烷(12mL)中的混合物加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯(530mg、1.7mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯基鈀(II)(72.9mg、0.1mmol)和氟化銫(601mg、4mmol)。將所得混合物在90℃、氮氣氛圍下攪拌3小時。冷卻該反應物至室溫，用水(20mL)稀釋，並以乙酸乙酯(3x25mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為淡黃色固體的4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯(230mg、39%)。MS(ESI)：m/z 443.4[M+H]+；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 7.99(s,1H),7.65(d,J=7.8Hz,1H),7.40(t,J=7.1Hz,1H),7.00(s,1H),6.02(s,1H),5.21(dd,J=13.2,5.1Hz,1H),4.54(d,J=16.3Hz,1H),4.39(d,J=16.3Hz,1H),4.10(d,J=3.2Hz,2H),3.64(t,J=5.6Hz,2H),2.95-2.75(m,2H),2.53(s,2H),2.39(qd,J=12.9,5.0Hz,1H),2.23(d,J=11.8Hz,1H),1.26(s,7H),0.87(q,J=7.0Hz,4H)。

步驟4：4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯(200mg、0.5mmol)在四氫呋喃(15mL)中的溶液在室溫加入10%鈀碳(100mg)。將所得混合物脫氣並用氫氣吹掃3次，然後在室溫、氫氣氛圍下攪拌3小時，將反應混合物以矽藻土墊過濾，用乙酸乙酯(3x50mL)洗滌。將濾液濃縮以獲得為淡黃色固體的4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(185mg、92%)。MS(ESI)：m/z 445.4[M+H]+。

步驟5：3-[4-氟基-1-側氧基-5-(哌啶-4-基)-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮

將4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(500mg、1mmol)和在1,4-二

烷(15mL)中的4M鹽酸的溶液在室溫攪拌3小時。將該反應物濃縮以獲得為淡黃色固體的3-[4-氟基-1-側氧基-5-(哌啶-4-基)-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(350mg、90%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)：m/z 345.3[M+H]+。

步驟6：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-基}甲基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將3-[4-氟基-1-側氧基-5-(哌啶-4-基)-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(136mg、0.4mmol)、(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({3-[4-(4-甲醯基哌啶-1-基)苯基]-4-側氧基喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(250mg、0.4mmol)、二氯甲烷(15mL)和N,N-二異丙基乙胺(3mL)的混合物在室溫氮氣氛圍下隔夜攪拌。在1分鐘內將三乙醯氧基硼氫化鈉(250.5mg、1.2mmol)加入至上述混合物。將該反應物在室溫攪拌2小時。將混合物用水(10mL)稀釋，用二氯甲烷(3x15mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為灰白色固體的(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-4-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-基}甲基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(96.3mg、23%)。MS(ESI)：m/z 964.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 11.02(s,1H),8.24(s,1H),7.81(d,J=8.9Hz,1H),7.67(dd,J=9.0,3.0Hz,1H),7.61(d,J=7.7Hz,1H),7.51(s,2H),7.39-7.33(d,J=8.7Hz,4H),7.08(d,J=8.7Hz,2H),5.35(s,1H),5.21(s,1H),4.57(d,J=17.4Hz,1H),4.39(d,J=17.3Hz,1H),3.92-3.80(m,2H),3.61(m,1H),3.25(d,2H),3.00-2.86(d,2H),2.80(t,J=12.1Hz,2H),2.61(d,J=16.6Hz,1H),2.55(s,5H),2.45(d,J=13.0Hz,2H),2.01-1.86(d,J=12.9Hz,11H),1.32(d,J=13.4Hz,2H),1.24(s,2H)。

實施例80：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[(1-{4-[(3R*)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-2-氟基苯基}哌啶-4-基)甲基]哌

-1-基}苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟基-4-硝基-苯基)哌啶

將4-(二甲氧基甲基)哌啶(10g、63mmol)在二甲基亞碸(120mL)中的溶液加入N,N-二異丙基乙胺(16.23g、125mmol)和1,2-二氟基-4-硝基-苯(7.0mL、63mmol)。將該反應物在110℃攪拌1小時。將混合物用水(300mL)稀釋，並以乙酸乙酯(2x300mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(4x500mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。用石油醚/乙酸乙酯(63mL、20：1)研磨粗製品以獲得為黃色固體的4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟基-4-硝基-苯基)哌啶(15.8g、84%)。MS(ESI)m/z：299.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.03-7.93(m,2H),7.21-7.07(m,1H),4.10(d,J=6.8Hz,1H),3.70(d,J=12.8Hz,2H),3.27(s,6H),2.89(d,J=2.0,12.4Hz,2H),1.88-1.68(m,3H),1.36(d,J=4.0,12.4Hz,2H)。

步驟2：4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯胺

將4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟基-4-硝基-苯基)哌啶(15.8g、53mmol)在乙醇(100mL)和水(100mL)中的溶液加入氯化銨(14.2g、264mmol)和鐵(14.8g、264mmol)。將混合物在70℃攪拌2小時，然後用水(500mL)稀釋，並以乙酸乙酯(2x600mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x800mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。用石油醚/乙酸乙酯(84mL、20：1)研磨粗製品以獲得為黃色固體的4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯胺(14g、99%)。MS(ESI)m/z：269.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 6.75(dd,J=8.8,10.0Hz,1H),6.39- 6.25(m,2H),4.93(s,2H),4.09(d,J=7.2Hz,1H),3.27(s,6H),3.13-3.04(m,2H),2.49-2.42(m,2H),1.71-1.54(m,3H),1.41-1.26(m,2H)。

步驟3：4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟基-4-碘基-苯基)哌啶

將4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯胺(12g、45mmol)和對甲苯磺酸(25.5g、134mmol)在乙腈(120mL)中的溶液在0℃滴加在水(30mL)中的亞硝酸鈉(6.17g、89mmol)和碘化鉀(18.6g、112mmol)。將混合物在40℃攪拌1小時。將該反應物倒入水(500mL)中，並以乙酸乙酯(3x400mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x800mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為黃色固體的4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟基-4-碘基-苯基)哌啶(9g、53%)。MS(ESI)m/z：380.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.47(dd,J=2.0,12.0Hz,1H),7.41(dd,J=1.6,8.4Hz,1H),6.85-6.78(m,1H),4.10(d,J=6.4Hz,1H),3.41-3.29(m,4H),3.27(s,6H),1.74-1.63(m,3H),1.42-1.30(m,2H)。

步驟4：2,6-二芐基氧基-3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]吡啶

將4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟基-4-碘基-苯基)哌啶(7.8g、21mmol)和2,6-二芐基氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)吡啶(8.58g、21mmol)在1,4-二

烷(80mL)和水(16mL)中的溶液在氮氣氛圍下加入碳酸鈉(6.54 g、62mmol)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯基鈀(II)(1.51g、2.1mmol)。將混合物在90℃攪拌3小時。將反應物用水(200mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x600mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為黃色固體的2,6-二芐基氧基-3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]吡啶(9.3g、83%)。MS(ESI)m/z：543.4[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.74(d,J=8.4Hz,1H),7.45-7.26(m,12H),7.01(t,J=9.2Hz,1H),6.52(d,J=8.0Hz,1H),5.40(s,2H),5.36(s,2H),4.10(d,J=6.4Hz,1H),3.37(d,J=11.6Hz,2H),3.27(s,6H),2.67-2.56(m,2H),1.76-1.63(m,3H),1.44-1.30(m,2H)。

步驟5：3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]哌啶-2,6-二酮

將2,6-二芐基氧基-3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]吡啶(8.3g、15mmol)在2,2,2-三氟基乙醇(150mL)中的溶液在氮氣下加入10%鈀碳(0.8g)。將懸浮液脫氣並用氫氣吹掃3次。將混合物在氫氣(50psi)、30℃下攪拌12小時，然後以矽藻土墊過濾，並濃縮。用石油醚/乙酸乙酯(50mL、1：1)研磨粗製品以獲得為白色固體的3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]哌啶-2,6-二酮(5.2g、93%)。MS(ESI)m/z：365.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.81(s,1H),7.02(d,J=1.6Hz,1H),6.98(d,J=4.4Hz,1H),6.96-6.93(m,1H),4.11(d,J=6.4Hz,1H),3.79(dd,J=4.8,12.0Hz,1H),3.27(s,6H),2.71-2.54(m,5H),2.18(dd,J=4.4,12.4Hz,1H),2.04-1.94(m,1H),1.77-1.61(m,4H),1.45-1.32(m,2H)。

步驟6：(3R)-3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]哌啶-2,6-二酮和(3S)-3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]哌啶-2,6-二酮

藉由製備型超臨界流體層析法(流動相：二氧化碳：異丙醇；50% B等度洗脫)純化3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]哌啶-2,6-二酮(4.5g)。峰1作為白色固體(3R)-3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]哌啶-2,6-二酮(2.2g、98%)分離。MS(ESI)m/z：365.2[M+H]+。峰2作為白色固體(3S)-3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]哌啶-2,6-二酮(2.2g、98%)分離。MS(ESI)m/z：365.2[M+H]+。

步驟7：1-[4-[(3R)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-2-氟基-苯基]哌啶-4-甲醛

將(3R)-3-[4-[4-(二甲氧基甲基)-1-哌啶基]-3-氟基-苯基]哌啶-2,6-二酮(2g、5mmol)在丙酮(20mL)和水(2mL)中的溶液加入對甲苯磺酸(189mg、1.1mmol)。將混合物在70℃攪拌3小時，然後濃縮以獲得為黃色固體的1-[4-[(3R)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-2-氟基-苯基]哌啶-4-甲醛(1.7g、97%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：319.1[M+H]+。

步驟8：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[4-[(3R)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-2-氟基-苯基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(2.5g、4mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液加入在二甲基亞碸(20mL)和醋酸(494mg、8mmol)中的1-[4-[(3R)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-2-氟基-苯基]哌啶-4-甲醛(1.7g、5mmol)。將混合物在25℃攪拌15分鐘。然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(1.74g、8mmol)，並將混合物在25℃攪拌30分鐘。將反應物用水(100mL)稀釋並用四氫呋喃(2x60mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x200mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由製備型高性能液體層析法(流動相：0.2%甲酸在水：乙腈；梯度：30%-60% B歷時20分鐘)純化殘留物。藉由製備型超臨界流體層析法(流動相：二氧化碳：乙腈/異丙醇(0.1%氨)；B%：57.5%等度洗脫)進一步純化粗製品以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[1-[4-[(3R)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-2-氟基-苯基]-4-哌啶基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(1.85g、64%)。MS(ESI)m/z：910.5[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.83(s,1H),10.30-9.74(m,1H),8.25(s,1H),7.82(d,J=9.2Hz,1H),7.74-7.62(m,2H),7.46-7.39(m,2H),7.36(d,J=8.8Hz,2H),7.09(d,J=9.2Hz,2H),7.05-6.98(m,2H),6.97-6.93(m,1H),5.41-5.19(m,1H),3.80(dd,J=4.8,11.8Hz,1H),3.50-3.40(m,2H),3.36(s,4H),3.31-3.30(m,2H),3.29-3.22(m,2H),3.06-2.74(m,4H),2.73-2.60(m,5H),2.47-2.44(m,1H),2.27-2.17(m,1H),2.16-2.09(m,1H),2.07-1.95(m,2H),1.90-1.76(m,3H),1.42-1.27(m,2H)。

實施例81：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[(4-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}哌啶-1-基)甲基]哌啶-1-基}苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹喹啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：4-(二甲氧基甲基)-1-(4-硝基苯基)哌啶

將1-氟基-4-硝基苯(11.3mL、106mmol)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(17.8g、112mmol)在二甲基亞碸(150mL)中的溶液加入N-乙基-N,N-二異丙基胺(74.1mL、425mmol)。將該反應在90℃攪拌3小時。將混合物過濾，用乙腈(50mL)洗滌濾餅，並在真空下乾燥以獲得為黃色固體的4-(二甲氧基甲基)-1-(4-硝基苯基)哌啶(29g、95%)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：281.0[M+H]+。

步驟2：4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯胺

將4-(二甲氧基甲基)-1-(4-硝基苯基)哌啶(29.0g、103mmol)在乙醇(300mL)和水(60mL)中的溶液加入鐵(28.9g、517mmol)和氯化銨(16.6g、310mmol)。將該反應物在75℃攪拌3小時。將混合物用鹽水(50mL)稀釋並以乙酸乙酯萃取(3x50mL)。將合併的有機層用鹽水(3x50mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=100：1至1：1)純化殘留物以獲得為棕色固體的4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯胺(21g、77%)。MS(ESI)m/z：251.1[M+H]+。

步驟3：3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-6-羥基喹唑啉-4(3H)-酮

將2-胺基-5-羥基苯甲酸甲酯(3.67g、22mmol)和4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯胺(5.5g、22mmol)在甲苯(10mL)和甲醇(2mL)中的溶液加入三甲氧基甲烷(3.6mL、33mmol)和醋酸(1.3mL、22mmol)。將混合物在70℃攪拌6小時，然後冷卻至室溫。將混合物懸浮在三級丁基甲基醚(35mL)，過濾，並用三級丁基甲基醚(35mL)洗滌以獲得為棕色固體的3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-6-羥基喹唑啉-4(3H)-酮(7.7g、87%)。MS(ESI)m/z：396.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.14(s,1 H),8.09(s,1 H),7.59(d,J=8.8Hz,1 H),7.47(d,J=2.8Hz,1 H),7.24-7.34(m,3 H),7.03(d,J=8.8Hz,2 H),4.10(d,J=6.8Hz,1 H),3.80(d,J=12.4Hz,2 H),3.28(s,6 H),2.64-2.79(m,2 H),1.72(d,J=12.0Hz,3 H),1.25-1.42(m,2 H)。

步驟4：2-((3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-3,6-二氟基苯甲腈

將3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-6-羥基喹唑啉-4(3H)-酮(7.7g、19mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(3.98g、25mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(80mL)中的溶液加入碳酸銫(8.25g、25mmol)。將混合物在25℃攪拌5小時，然後用鹽水(80mL)稀釋並用四氫呋喃(3x80mL)和乙酸乙酯(3x80mL)萃取。將合 併的有機層用鹽水(3x50mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。用石油醚/乙酸乙酯(3：1)研磨粗製品以獲得為黃色固體的2-((3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-3,6-二氟基苯甲腈(14.4g、粗製品)。MS(ESI)m/z：533.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28(s,1 H),7.98(td,J=10.8,5.2Hz,1 H),7.80-7.86(m,1 H),7.73-7.79(m,1 H),7.53-7.66(m,2 H),7.31(d,J=8.8Hz,2 H),7.04(d,J=9.2Hz,2 H),4.04-4.16(m,1 H),3.82(d,J=12.4Hz,2 H),3.29(s,6 H),2.67-2.77(m,2 H),1.69-1.85(m,3 H),1.27-1.43(m,2 H)。

步驟5：(R)-N-(2-氰基-3-((3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將2-((3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-3,6-二氟基苯甲腈(10.4g、19mmol)和(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(5.91g、35mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(100mL)中的溶液加入碳酸銫(19.1g、59mmol)。將混合物在80℃攪拌5小時，然後用水(100mL)稀釋，用四氫呋喃(3x100mL)和乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x80mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由製備型高性能液體層析法(流動相：[0.2%甲酸水-乙腈溶液]；B%：46%-76%，20分鐘)純化殘留物以獲得為黃色固體的(R)-N-(2-氰基-3-((3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(7.8g、57%)。MS(ESI)m/z：681.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.12-10.47(m,1 H),8.26(s,1 H), 8.13(s,1 H),7.95(s,1 H),7.79-7.89(m,2 H),7.71(dd,J=8.8,3.2Hz,1 H),7.52(dd,J=9.2,4.0Hz,1 H),7.42(d,J=3.2Hz,1 H),7.29(d,J=8.8Hz,2 H),7.03(d,J=9.2Hz,2 H),5.21-5.43(m,1 H),4.09(d,J=6.8Hz,1 H),3.80(d,J=12.4Hz,2 H),3.52(s,1 H),3.41-3.49(m,2 H),3.27(s,6 H),2.65-2.72(m,2 H),1.97-2.20(m,2 H),1.64-1.84(m,3 H),1.26-1.43(m,2 H)。

步驟6：(R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-(3-(4-(4-甲醯基哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(R)-N-(2-氰基-3-((3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(3g、4mmol)在丙酮(30mL)和水(3mL)中的溶液加入對甲苯磺酸(303mg、1.8mmol)。將混合物在70℃攪拌3小時，然後濃縮以獲得為黃色固體的(R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-((3-(4-(4-甲醯基哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(2.8g、粗製品)。MS(ESI)m/z：635.2[M+H]+。

步驟7：(R)-N-(2-氰基-3-((3-(4-(4-((4-(2-((S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異二氫吲哚-5-基)哌啶-1-基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(R)-3-((R)-1-側氧基-5-(哌啶-4-基)-2,3-二氫基-1H-茚-2-基)哌啶-2,6-二酮(2.47g、4.4mmol)在二氯甲烷(30mL)和異丙醇(30mL)中的溶液加入醋酸鈉(253mg、3mmol)。將混合物在25℃攪拌10分鐘，然後加入(R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-((3-(4-(4-甲醯基哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(2.8g、4.4mmol)，將混合物在25℃攪拌10分鐘。然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(1.87g、8.8mmol)，將混合物在25℃攪拌40分鐘。將反應物用鹽水(80mL)和碳酸氫鈉(80mL)稀釋，用四氫呋喃(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x80mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由製備型高性能液體層析法(流動相：0.2%甲酸在水中：乙腈；梯度：20%-50% B，歷時14分鐘)純化殘留物。藉由超臨界流體層析法(流動相：二氧化碳：乙腈/異丙醇(0.1%氨溶液)；B%：70%)進一步純化粗製品以獲得為灰白色固體的(R)-N-(2-氰基-3-((3-(4-(4-((4-(2-((S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異二氫吲哚-5-基)哌啶-1-基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(1.28g、30%)。MS(ESI)m/z：946.3[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.99(s,1 H),9.05-9.67(m,1 H),8.23(s,1 H),7.80(d,J=8.8Hz,1 H),7.64-7.73(m,2 H),7.50(s,2 H),7.38-7.44(m,2 H),7.29-7.37(m,3 H),7.07(d,J=9.2Hz,2 H),5.17-5.39(m,1 H),5.11(dd,J=13.2,5.6Hz,1 H),4.39-4.51(m,1 H),4.26-4.37(m,1 H),3.85(d,J=12.0Hz,2 H),3.41(dd,J=12.4,3.8Hz,3 H),3.28(s,2 H),3.13-3.23(m,1 H),2.85-3.09(m,4 H),2.80(br t,J=12.0Hz,3 H),2.53-2.69(m,2 H),2.30-2.47(m,1 H),2.08-2.18(m,1 H),1.91-2.05(m,7 H),1.87(d,J=12.4Hz,2 H),1.26-1.40(m,2 H)。

實施例82：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

步驟1：6-(芐基氧基)-3-(4-溴基苯基)喹唑啉-4-酮

將3-(4-溴基苯基)-6-羥基喹唑啉-4-酮(8.3g、26mmol)和溴化芐(5.37g、31mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(100mL)中的攪拌溶液在室溫分批加入碳酸銫(17.91g、55mmol)。將所得混合物在室溫攪拌2小時，然後懸浮在水(100mL)中。藉由過濾收集沉澱物並用水(2x100mL)洗滌。藉由用乙酸乙酯(20mL)和石油醚(20mL)研磨來純化粗製品以獲得為白色固體的6-(芐基氧基)-3-(4-溴基苯基)喹唑啉-4-酮(10g、94%)。MS(ESI)：m/z 409.05[M+H]+。

步驟2：4-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將6-(芐基氧基)-3-(4-溴基苯基)喹唑啉-4-酮(700mg、1.7mmol)和4-(哌啶-4-基氧基)哌啶-1-羧酸三級丁酯(587mg、2mmol)在1,4-二

烷(20mL)中的攪拌混合物在室溫分批加入碳酸銫(1.68g、5mmol)和(2-二環己基膦基-2',6'-二異丙氧基-1,1'-聯苯基)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯基)]甲磺酸鈀(II)(144mg、0.2mmol)。將所得混合物在90℃隔夜攪拌，然後冷卻至室溫。將混合物用水(10mL)稀釋， 用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為白色固體的4-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(980mg、93%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ 7.73-7.62(m,1H),7.59-7.45(m,2H),7.51-7.31(m,3H),7.34-7.24(m,5H),7.09-7.00(m,2H),5.26(s,2H),3.67(t,J=4.3Hz,6H),3.34(s,4H),3.05-2.91(m,4H),1.90(d,J=11.7Hz,4H),1.77(d,J=11.5Hz,2H),1.40(s,9H)；MS(ESI)：m/z 611.45[M+H]+。

步驟3：6-(芐基氧基)-3-{4-[4-(哌啶-4-基氧基)哌啶-1-基]苯基}喹唑啉-4-酮

將4-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(980mg、1.6mmol)和4M氯化氫在1,4-二

烷(20mL)中的溶液在室溫攪拌2小時，然後濃縮。將殘留物用乙酸乙酯(10mL)研磨，過濾以獲得為白色固體的6-(芐基氧基)-3-{4-[4-(哌啶-4-基氧基)哌啶-1-基]苯基}喹唑啉-4-酮鹽酸鹽(800mg、91%)。MS(ESI)：m/z 511.40[M+H]+。

步驟4：3-(5-{4-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]哌啶-1-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮

將6-(芐基氧基)-3-{4-[4-(哌啶-4-基氧基)哌啶-1-基]苯基}喹唑啉-4-酮鹽酸鹽(700mg、1.3mmol)和3-(5-溴基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(496mg、1.5mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(15mL)中的攪拌混合物在室溫加入碳酸銫(1.67g、5mmol)和二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](3-氯基吡啶基)鈀(II)(53.8mg、0.06mmol)。將所得混合物在90℃攪拌5小時，然後冷卻至室溫。將混合物用水(10mL)稀釋，用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為灰白色固體的3-(5-{4-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]哌啶-1-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(900mg、93%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.96(s,1H),8.19(s,1H),7.73-7.64(m,2H),7.56-7.55(m,4H),7.54-7.47(m,2H),7.42-7.41(m,3H),7.11-7.04(m,4H),5.77(s,3H),5.27(s,2H),5.05-4.98(m,1H),4.33(d,J=16.9Hz,1H),4.21(d,J=16.9Hz,1H),4.04(q,J=7.1Hz,1H),3.69(q,J=15.1,12.2Hz,6H),3.61(s,4H),3.10(t,J=10.5Hz,1H),3.04(s,2H),3.01(d,J=10.9Hz,1H),2.91-2.86(m,1H),2.63-2.54(m,2H),2.00(s,1H),1.96-1.91(m,2H),1.59-1.47(m,4H),1.24(s,1H),1.22(s,1H),1.18(t,J=7.1Hz,1H)；MS(ESI)：m/z 753.35[M+H]+。

步驟5：3-{5-[4-({1-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌啶-4-基}氧基)哌啶-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮

將3-(5-{4-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]哌啶-1-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(600mg、0.8mmol)在四氫呋喃(50mL)和N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中的溶液加入10%鈀碳(300mg)。將混合物脫氣並用氫氣吹掃3次，然後在氫氣氛圍下於室溫攪拌2小時。將混合物以矽藻土墊過濾，在減壓下濃縮以獲得為灰白色固體的3-{5-[4-({1-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌啶-4-基}氧基)哌啶-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮(400mg、76%)。MS(ESI)：m/z 663.45[M-56+H]+。

步驟6：2-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈

將3-{5-[4-({1-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌啶-4-基}氧基)哌啶-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮(500mg、0.8mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(178mg、1.1mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(15mL)中的攪拌溶液在室溫加入碳酸銫(614mg、1.9mmol)。將所得混合物在90℃、氮氣氛圍下隔夜攪拌。冷卻該反應物至室溫，用水(20mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為灰白色固體的2-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧 基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈(510mg、85%)。MS(ESI)：m/z 800.55[M+H]+。

步驟7：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(101mg、0.6mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中的攪拌溶液加入碳酸銫(326mg、1mmol)。將所得混合物在50℃、氮氣氛圍下攪拌0.5小時。然後將2-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈(320mg、0.4mmol)分批加入至上述混合物，將反應物在90℃攪拌3小時，然後冷卻至室溫。將混合物用水(80mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(53.4mg、14%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ 10.96(s,1H),10.36(s,1H),8.27(s,1H),7.93-7.79(m,2H),7.72-7.62(m,1H),7.58-7.39(m,2H),7.31(d,J=8.8Hz,1H),7.11-6.99(m,6H),5.41-5.15(d,J=78Hz,1H),5.05-5.01(m,2H),4.28-4.14(m,2H),3.75-3.66(m,6H),3.64(t,J=11.2 Hz,1H),3.55(s,2H),3.53-3.40(m,5H),2.59(d,J=16.4Hz,1H),2.46-2.29(m,3H),1.92(d,J=12.5Hz,5H),1.59-1.50(m,5H),1.24(s,2H)；MS(ESI)：m/z 948.62[M+H]+。

實施例176：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-(2-{4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]哌啶-1-基}乙基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

步驟1：4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯

將3-(5-溴基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(1.0g、3mmol)和三級丁基4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸酯(0.96g、3mmol)在1,4-二

烷(10mL)和水(2mL)中的溶液加入氟化銫(1.4g、9mmol)和[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯基鈀(II)(0.23g、0.3mmol)。將混合物在90℃、氮氣氛圍下攪拌3小時，然後在減壓下濃縮。藉由製備薄層層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為白色固體的4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯(1.0g、76%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 8.34(s,1H),7.86(d,J=8.0Hz,1H),7.51(d,J=8.1Hz,1H),7.45(s,1H),6.15(s,1H),5.34-5.21(m,1H),4.51(d,J=16.0Hz,1H),4.40-4.28(m,1H),4.15-4.10(m,2H),3.78-3.55(m,2H),2.98-2.79(m,2H),2.71-2.49(m,2H),2.48-2.31(m,1H),2.29-2.19(m,1H),1.65-1.41(m,10H),1.27(s,2H),0.95-0.79(m,1H)；MS(ESI)：m/z 426.20[M+H]⁺。

步驟2：4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]-3,6-二氫基-2H-吡啶-1-羧酸三級丁酯(5.0g、12mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(100mL)和四氫呋喃(200mL)中的溶液加入10%鈀碳(2g)。將混合物脫氣並用氫氣吹掃三次，然後在室溫氫氣氛圍下攪拌12小時。將混合物以矽藻土墊過濾，並在減壓下濃縮以獲得為白色固體的4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(4.0g、80%)。MS(ESI)：m/z 426.25[M+H]⁺。

步驟3：3-[1-側氧基-5-(哌啶-4-基)-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽

將4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(4.7g、11mmol)和在1,4-二

烷中的4M鹽酸(80mL)的溶液在室溫攪拌12小時，然後濃縮。將殘留物用石油醚(20mL)研磨，並用石油醚(20mL)洗滌以獲得為白色固體的3-[1-側氧基-5-(哌啶-4-基)-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(3.8g、95%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δ 11.01(s,1H),9.15-8.75(m,2H),7.71(d,J=7.8Hz,1H),7.46(s,1H),7.41-7.31(m,1H),5.21-5.01(m,1H),4.45(d,J=17.3Hz,1H),4.32(d,J=17.3Hz,1H),3.71-3.61(m,1H),3.56-3.49(m,2H),3.37(d,J=12.3Hz,2H),3.11-2.88(m,4H),2.60(d,J=17.4Hz,1H),2.48-2.31(m,1H),2.04-1.83(m,5H)；MS(ESI)：m/z 328.15[M+H]⁺。

步驟4：(3R)-N-{3-[(3-{4-[4-(2-氯基乙基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-2-氰基-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(1g、1mmol)在N,N-二異丙基乙胺(2mL)和二甲基亞碸(15mL)中的攪拌溶液加入1-溴基-2-氯基乙烷(6.68g、46mmol)，將所得混合物在50℃攪拌2小時。將反應物用水(10mL)稀釋並以乙酸 乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-{3-[(3-{4-[4-(2-氯基乙基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-2-氰基-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(280mg、27%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.28(s,1H),8.26(s,1H),7.87-7.78(m,2H),7.71-7.62(m,1H),7.51-7.45(m,1H),7.42(d,J=3.1Hz,1H),7.38-7.29(m,2H),7.11-7.04(m,2H),5.41-5.35(d,J=20Hz，1H),3.79(t,J=6.7Hz,2H),3.51(d,J=2.2Hz,1H),3.48-3.39(m,4H),2.85(s,3H),2.75(s,4H),2.14(s,1H),2.13-1.97(m,2H)；MS(ESI)：m/z 669.17[M+H]⁺。

步驟5：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-(2-{4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-基}乙基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-{3-[(3-{4-[4-(2-氯基乙基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-2-氰基-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(160mg、0.2mmol)和3-[1-側氧基-5-(哌啶-4-基)-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(104mg、0.3mmol)在二甲基亞碸(5mL)中的攪拌溶液在室溫滴加N,N-二異丙基乙胺(1mL)，將所得混合物在80℃攪拌5小時。將反應物用水(20mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x60mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾 並濃縮。藉由製備型高效液相層析法(25%-55%乙腈在水中(10mmol/L碳酸氫銨)歷時9分鐘)純化產物以獲得為白色固體的(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-(2-{4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-1-基}乙基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(71.6mg、30%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.28(s,1H),8.26(s,1H),7.87-7.78(m,1H),7.71-62(m,2H),7.51-7.47(m,1H),7.42(d,J=3.1Hz,4H),7.38-7.29(m,2H),7.11-7.04(m,2H),5.41-5.35(d,J=3.1,24Hz,1H),5.24(d,J=3.9Hz,1H),3.79(t,J=6.7Hz,1H),3.51(d,J=2.2Hz,10H),3.48-3.39(m,2H),2.85(s,4H),2.75(s,6H),2.14(s,3H),2.13-1.97(m,7H),0.96-0.87(m,1H)；MS(ESI)：m/z 962.60[M+H]⁺。

實施例177：(3R)-N-{3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-2,4-二氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

將(3R)-N-[2,4-二氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(120mg、0.2mmol)在二氯甲烷(40mL)中的攪拌溶液在室溫分批加入1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(66.9mg、0.2mmol)，然後加入N,N-二異丙基乙胺(1mL)。將混合物在室溫攪拌1小時，然後分批加入三乙醯氧基硼氫化鈉(119.8mg、0.6mmol)。將所得混合物在室溫攪拌1小時。將反應物用水(50mL)稀釋並用二氯甲烷(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸 鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-{3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-2,4-二氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(107.1mg、60%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 10.93(s,1H),9.90(s,1H),8.25(s,2H),7.81(d,J=8.9Hz,1H),7.55-7.27(m,6H),7.10-7.00(m,4H),5.36-5.18(d,J=54Hz,1H),5.04(s,1H),4.32(d,J=16.9Hz,2H),3.89(d,J=12.5Hz,2H),3.47(d,J=2.1Hz,3H),3.44-3.32(m,5H),3.31-3.22(m,3H),2.89(s,5H),2.61(s,1H),2.24(s,1H),2.14-2.01(m,2H),2.00-1.91(m,2H),1.82(d,J=11.8Hz,3H),1.21(d,J=13.0Hz,2H)；MS(ESI)：m/z 940.50[M+H]⁺。

實施例178：3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({2-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基}氧基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

步驟1：6-(吡啶-4-基氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基-羧酸三級丁酯

將三苯基膦(8.85g、34mmol)在四氫呋喃(200.00mL)中的攪拌混合物加入偶氮二羧酸二乙酯(5.88g、34mmol)、4-羥基吡啶(2.14g、22mmol)和6-羥基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(4.80g、22mmol)。將所得的溶液在60℃攪拌16小時，然後用水(200mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x120mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x60mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱(乙酸乙酯/石油醚=7/3)純化殘留物以獲得為淡黃色油的6-(吡啶-4-基氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(6.53g、粗製品)。MS(ESI)：m/z 291.20[M+H]⁺。

步驟2：1-芐基-4-[[2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基]氧基]溴化-1-吡啶鎓

將6-(吡啶-4-基氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(6.53g、22mmol)在二氯甲烷(100mL)中的攪拌溶液加入溴化芐(4.62g、27mmol)。將所得的溶液在室溫攪拌16小時，然後濃縮。用石油醚研磨殘留物以獲得為白色固體的1-芐基-4-[[2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基]氧基]溴化-1-吡啶鎓(8.54g、82%)。MS(ESI)：m/z 381.25[M+H]⁺。

步驟3：6-[(1-芐基-3,6-二氫基-2H-吡啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯

將1-芐基-4-[[2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基]氧基]溴化-1-吡啶鎓(8.54g、18mmol)在甲醇(100mL)中的攪拌溶液加入硼氫化鈉(2.04g、55mmol)。將所得混合物在室溫攪拌16小時，然後用冰水(100mL)稀釋並以乙酸乙酯(100mL)萃取。將有機層用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由快速製備型高效液相層析法(10%-70%乙腈在水中(10mmol/L碳酸氫銨)歷時30分鐘)純化殘留物以獲得為黃色油的6-[(1-芐基-3,6-二氫基-2H-吡啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(3.6g、51%)。MS(ESI)：m/z 385.10[M+H]⁺。

步驟4：6-(哌啶-4-基氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯

將6-[(1-芐基-3,6-二氫基-2H-吡啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(3.6g、9mmol)在甲醇(100mL)中的攪拌溶液加入20%氫氧化鈀碳(1.50g、0.01mmol)，將混合物脫氣並用氫氣吹掃3次，在氫氣氛圍、30℃下攪拌5小時。將混合物以矽藻土墊過濾，濃縮濾液溶液以獲得為黃色固體的6-(哌啶-4-基氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(2.81g、98%)。

步驟5：6-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯

將6-(哌啶-4-基氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(700mg、2mmol)和6-(芐基氧基)-3-(4-溴基苯基)喹唑啉-4-酮(962mg、2mmol)在1,4-二

烷(20mL)中的攪拌混合物在室溫分批加入碳酸銫(2.3g、7mmol)和氯基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯基)]鈀(II)(200mg、0.2mmol)。將所得混合物在100℃、氮氣氛圍下攪拌12小時。將混合物冷卻至室溫，藉由水(10mL)淬火並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為白色固體的6-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(902mg、61%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 8.17(s,1H),7.73-7.63(m,2H),7.50(d,J=7.0Hz,8H),7.05(d,J=8.7Hz,2H),5.26(s,2H),3.97(p,J=7.0Hz,5H),3.59(s,2H),3.47(s,1H),3.34(s,2H),2.95-2.85(m,2H),2.46-2.36(m,2H),2.02-1.89(m,2H),1.36(s,9H)；MS(ESI)：m/z 623.50[M+H]⁺。

步驟6：3-[4-(4-{2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基氧基}哌啶-1-基)苯基]-6-(芐基氧基)喹唑啉-4-酮

將6-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(900mg、1mmol)在二氯甲烷(10mL)中的攪拌溶液滴加三氟基醋酸(2mL)。將所得混合物在室溫攪拌2小時，然後在減壓下濃縮。將殘留物用二氯甲烷(20mL)稀釋，用N,N-二異丙基乙胺將溶液的pH調整至8並在減壓下濃縮。藉由反相快速層析法(10%-50%乙腈在水中(10mmol/L碳酸氫銨)歷時10分鐘)純化殘留物以獲得為白色固體的3-[4-(4-{2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基氧基}哌啶-1-基)苯基]-6-(芐基氧基)喹唑啉-4-酮(720mg、95%)。MS(ESI)：m/z 523.40[M+H]⁺。

步驟7：3-(5-{6-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮

將3-[4-(4-{2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基氧基}哌啶-1-基)苯基]-6-(芐基氧基)喹唑啉-4-酮(700mg、1.3mmol)和3-(5-溴基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(433mg、1mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的攪拌溶液在室溫氮氣氛圍下分批加入碳酸銫(1.75g、5mmol)和二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](3-氯基吡啶基)鈀(II)(56.3mg、0.07mmol)。將所得混合物在90℃、氮氣氛圍下攪拌12小時，然後冷卻至室溫。將混合物用水(10mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為白色固體的3-(5-{6-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基) 氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(451mg、44%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.94(s,1H),8.18(s,1H),7.73-7.63(m,2H),7.59-7.27(m,4H),7.10-7.02(m,5H),6.49(d,J=1.9Hz,2H),6.45(s,2H),5.26(s,2H),5.03-5.01(d,J=13.3,5.1Hz,1H),4.30(d,J=17.0Hz,2H),4.17(d,J=16.9Hz,1H),3.92(s,4H),3.86(s,2H),3.65-3.57(m,1H),3.55-3.47(m,3H),2.93-2.83(m,2H),2.62-2.52(m,2H),2.18-2.02(m,2H),2.01-1.86(m,3H)；MS(ESI)：m/z 765.60[M+H]⁺。

步驟8：3-(5-{6-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮

將3-(5-{6-[(1-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-4-基)氧基]-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(450mg、0.6mmol)在四氫呋喃(5mL)和N,N-二甲基甲醯胺(15mL)中的溶液加入10%鈀碳(0.9g)。將混合物脫氣並用氫氣吹掃3次，然後在室溫、氫氣氛圍下攪拌1小時。將混合物藉由矽藻土墊過濾並在減壓下濃縮以獲得為灰白色固體的3-{5-[6-({1-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌啶-4-基}氧基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮(389mg、98%)。MS(ESI)：m/z 673.50[M+H]⁺。

步驟9：2-[(3-{4-[4-(2-{4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌

-1-基}乙基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈

將3-{5-[4-(2-{4-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌

-1-基}乙基)哌

-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮(210mg、0.3mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(24.4mg、0.2mmol)在二甲基乙醯胺(15mL)中的攪拌溶液在室溫分批加入碳酸銫(303.3mg、0.9mmol)。將所得混合物在90℃、在氮氣氛圍下攪拌3小時。將混合物冷卻至室溫，用水(20mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用水(2x100mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為灰白色固體的2-[(3-{4-[4-(2-{4-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌

-1-基}乙基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈(200mg、80%)。MS(ESI)：m/z 812.45[M+H]⁺。

步驟10：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[1-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-側氧基-1,3-苯并二唑-4-基]氮雜環丁烷-3-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(62.2mg、0.4mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)的攪拌溶液加入碳酸銫(240.8mg、0.7mmol)，將混合物在50℃、氮氣氛圍下攪拌0.5小時。將上述混合物在室溫分批加入2-[(3-{4-[4-({2-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基}氧基)哌 啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈(200mg、0.2mmol)。將所得混合物在90℃攪拌3小時，然後冷卻至室溫，用水(10mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由手性製備型高效液相層析法(20%-80%甲醇/二氯甲烷(1：1)在甲基三級丁基醚(0.1%二乙基胺))純化粗製品以獲得為白色固體的(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({2-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基}氧基)哌啶-1-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(42.3mg、17%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.93(s,1H),10.34(s,1H),8.26(s,1H),7.83(s,3H),7.71-7.61(m,2H),7.34-7.27(m,3H),7.08-7.02(m,2H),6.52-6.41(m,2H),5.38(s,1H),5.25-5.03(d,J=88Hz,1H),4.30(d,J=17.0Hz,3H),4.17(d,J=17.0Hz,2H),4.06(p,J=7.1Hz,2H),3.92(s,2H),3.86(s,2H),3.61(d,J=12.0Hz,2H),3.53-3.46(m,2H),3.46-3.39(m,2H),3.01-2.88(m,3H),2.62-2.51(m,3H),2.42-2.27(m,1H),2.13-21.93(m,7H),1.51(d,J=9.6Hz,2H)；MS(ESI)：m/z 934.70[M+H]⁺。

實施例179：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[(2-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基)甲基]哌

-1-基}苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

步驟1：2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-酮

將6-側氧基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基-羧酸三級丁基酯(23.0g、109mmol)在二氯甲烷(230mL)中的溶液加入三氟基醋酸(88.3g、774mmol)。將反應物在25℃攪拌1小時，然後濃縮以獲得為黃色油的2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-酮三氟基醋酸酯(24.51g)，其無需進一步純化即可用於下一步。

步驟2：6-側氧基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基-羧酸芐酯

將2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-酮三氟基醋酸酯(24.51g、109mmol)在四氫呋喃(240mL)中的溶液滴加在水(120mL)中的碳酸氫鈉(45.72g、544mmol)，然後加入氯甲酸芐酯(22.28g、131mmol)。將所得混合物在25℃攪拌12小時。將 反應物用水(100mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x200mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並在減壓下濃縮。藉由管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=100/1至3/2)純化殘留物以獲得為白色固體的6-側氧基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯(26g、97%)。MS(ESI)m/z：268.0[M+Na]⁺。

步驟3：6-(甲氧基亞甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯

將甲氧基甲基三苯基氯化磷(52.41g、153mmol)在四氫呋喃(400mL)中的溶液在0℃滴加1M三級丁醇鉀(163mL)。將混合物在0℃攪拌1小時，然後在0℃加入在四氫呋喃(100mL)中的6-側氧基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯(25.0g、102mmol)，將所得混合物在25℃攪拌12小時。將反應物用水(200mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x200mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並在減壓下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-30%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為黃色油的6-(甲氧基亞甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯(6g、20%)。MS(ESI)m/z：274.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.30-7.41(m,5 H),5.77-5.88(m,1 H),5.09(s,2 H),4.01(s,4 H),3.55(s,3 H),2.88(s,2 H),2.80(s,2 H)。

步驟4：6-甲醯基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯

將6-(甲氧基亞甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯(6.0g、22mmol)在四氫呋喃(120mL)中的溶液加入1M鹽酸水溶液(120mL)。將混合物在 100℃攪拌2小時，然後用飽和碳酸氫鈉溶液(100mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x100mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮以獲得為黃色固體的6-甲醯基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯(5.69g、粗製品)，並將其直接用於後續步驟。MS(ESI)m/z：260.1[M+H]⁺。

步驟5：6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯

將6-甲醯基-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-基-羧酸芐酯(5.69g、22mmol)和三甲氧基甲烷(23.29g、219mmol)在甲醇(4mL)中的溶液加入對甲苯磺酸(377mg、2mmol)。將混合物在20℃攪拌12小時，然後用水(120mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x100mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並在減壓下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為無色油的6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯(4.15g、43%、70%純度)。MS(ESI)m/z：306.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.30-7.39(m,5 H),5.08(s,2 H),4.22(d,J=6.0Hz,1 H),4.00(s,2 H),3.91(s,2 H),3.32(s,6 H),2.40-2.51(m,1 H),2.17-2.27(m,2 H),2.06-2.12(m,2 H)。

步驟6：6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷

將6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸芐酯(4.15g、13mmol)在甲醇(20mL)和四氫呋喃(20mL)中的溶液加入10%鈀碳(0.2g)和10%氫氧化鈀(0.2g)。將懸浮液脫氣並用氫氣吹掃3次。將混合物在氫氣(50psi)、30℃ 下攪拌12小時，然後以矽藻土墊過濾和濃縮以獲得為黑色固體的6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷(2.2g、94%)。MS(ESI)m/z：172.1[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 4.20(d,J=6.0Hz,1 H),3.72(s,2 H),3.63(s,2 H),3.30(s,6 H),2.37-2.52(m,1 H),2.16-2.32(m,2 H),2.00-2.10(m,2 H)。

步驟7：2-溴基-4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]苯甲酸甲酯

將6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷(720mg、4.2mmol)和2-溴基-4-氟基-苯甲酸甲酯(817mg、3.5mmol)在二甲基亞碸(15mL)中的溶液加入N-乙基-N,N-二異丙基胺(1.8mL、10mmol)。將混合物在90℃攪拌2小時，然後用水(50mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x50mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並在減壓下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為無色油的2-溴基-4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]苯甲酸甲酯(870mg、58%)。MS(ESI)m/z：384.1[M+H]⁺。

步驟8：4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-2-乙烯基-苯甲酸甲酯

將2-溴基-4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]苯甲酸甲基酯(870mg、2.3mmol)、碳酸鈉(480mg、4.5mmol)、1,1-雙(二苯基膦基)二茂鐵- 鈀(II)氯(166mg、0.2mmol)和乙烯基三氟硼酸鉀(1.21g、9mmol)在1,4-二

烷(10mL)和水(2mL)中的混合物脫氣並用氮氣吹掃3次，然後將混合物在90℃、氮氣氛圍下攪拌12小時。將反應物用水(30mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x30mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x30mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並在減壓下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-10%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為黃色油的4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-2-乙烯基-苯甲酸甲酯(580mg、73%)。MS(ESI)m/z：332.1[M+H]⁺。

步驟9：4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯

將4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-2-乙烯基-苯甲酸甲酯(580mg、1.8mmol)在1,4-二

烷(6mL)和水(1.5mL)中的溶液加入2,6-二甲基吡啶(375mg、3.5mmol)、高碘酸鈉(1.50g、7mmol)和二水合鋨酸鉀(VI)(13mg、0.04mmol)。將混合物在25℃攪拌2小時，然後過濾和用乙酸乙酯(10mL)洗滌。將該濾液溶液用水(30mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x30mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x30mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為黃色油的4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(340mg、55%)。MS(ESI)m/z：334.1[M+H]⁺。

步驟10：(4S)-5-胺基-4-[5-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯

將(4S)-4,5-二胺基-5-側氧基-戊酸甲酯鹽酸鹽(200mg、1mmol)在甲醇(10mL)中的溶液在25℃緩慢地加入醋酸鈉(83mg、1mmol)，然後加入4-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-2-甲醯基-苯甲酸甲酯(340mg、1mmol)和醋酸(612mg、10mmol)。將混合物在25℃攪拌15分鐘。然後加入氰基硼氫化鈉(128mg、2mmol)，並將所得混合物在35℃攪拌12小時。將混合物稀釋用飽和碳酸氫鈉溶液調整pH至8並以乙酸乙酯和四氫呋喃(1：1,3x20mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x20mL)洗滌，用硫酸鈉乾燥、過濾，並在減壓下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-5%甲醇/二氯甲烷)純化殘留物以獲得為無色油的(4S)-5-胺基-4-[5-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(315mg、69%)。MS(ESI)m/z：446.3[M+H]⁺。

步驟11：(3S)-3-[5-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮

將(4S)-5-胺基-4-[5-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]-5-側氧基-戊酸甲酯(315mg、0.7mmol)在四氫呋喃(6mL)中的溶液加入1M三級丁醇鋰(1.3mL)。將混合物在-20℃攪拌2小時，然後加 入2M硫酸水溶液在-20℃將pH調整至5，然後加入飽和碳酸氫鈉溶液以調整pH至8。將混合物用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。用乙酸乙酯研磨粗製品以獲得為白色固體的(3S)-3-[5-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(170mg、58%)。MS(ESI)m/z：414.2[M+H]⁺。

步驟12：2-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-甲醛

將(3S)-3-[5-[6-(二甲氧基甲基)-2-氮雜螺[3.3]庚-2-基]-1-側氧基-異二氫吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮(170mg、0.4mmol)在丙酮(2mL)和水(0.2mL)中的溶液加入對甲苯磺酸(14mg、0.8mmol)。將混合物在70℃攪拌3小時，然後濃縮以獲得為黃色固體的2-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-甲醛(151mg)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：368.1[M+H]⁺。

步驟13：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[2-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-(4-哌

-1-基苯基)喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(178mg、0.3mmol)在二甲基亞碸(4mL) 和二氯甲烷(2mL)中的溶液加入在二氯甲烷(4mL)和異丙醇(4mL)中的2-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-甲醛(151mg、0.4mmol)，然後加入醋酸(35mg、0.6mmol)。將混合物在25℃攪拌10分鐘，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(124mg、0.6mmol)，並將所得混合物在25℃攪拌50分鐘。將混合物倒入鹽水(30mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(10mL)和四氫呋喃(20mL)中並攪拌10分鐘。然後用四氫呋喃(3x10mL)萃取該混合物。將合併的有機層用鹽水(3x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型高效液相層析法(15%-45%乙腈在水中(0.2%甲酸)歷時15分鐘)純化殘留物以獲得為灰白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[4-[4-[[2-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-2-氮雜螺[3.3]庚烷-6-基]甲基]哌

-1-基]苯基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺甲酸酯(193.4mg、62%)。MS(ESI)m/z：959.5[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.92(s,1 H),9.69-10.52(m,1 H),8.23(s,1 H),8.13(s,1 H),7.81(d,J=9.2Hz,1 H),7.67(dd,J=8.8,3.0Hz,1 H),7.53-7.64(m,1 H),7.48(d,J=8.4Hz,1 H),7.32-7.43(m,4 H),7.09(d,J=8.8Hz,2 H),6.42-6.54(m,2 H),5.18-5.39(m,1 H),5.03(dd,J=13.2,5.2Hz,1 H),4.13-4.35(m,2 H),3.97(s,2 H),3.78-3.87(m,2 H),3.35-3.52(m,4 H),3.33-3.34(m,2 H),3.17-3.27(m,2 H),2.65-2.98(m,7 H),2.54-2.63(m,2 H),2.31-2.44(m,3 H),1.91-2.15(m,5 H)。

實施例180：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{8-[2-(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}-4-羥基哌啶-4-基)乙醯基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸-3-基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

步驟1：3-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3(4H)-基)-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯

將3-胺基-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(1.8g、7mmol)和2-胺基-5-羥基苯甲酸甲酯(1.17g、7mmol)在甲苯(18mL)和甲醇(3.6mL)中的溶液加入三甲氧基甲烷(1.2mL 10mmol)和醋酸(0.4mL、7mmol)。將混合物在70℃攪拌6小時，然後冷卻至室溫。將該反應物懸浮在三級丁基甲基醚(35mL)中，將混合物過濾並用三級丁基甲基醚(35mL)洗滌。藉由製備型高效液相層析法(28-58%乙腈在水中(0.2%甲酸)歷時15分鐘)純化該濾餅以獲得為棕色固體的3-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3(4H)-基)-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(1.7g、59%)。MS(ESI)m/z：402.2[M+H]⁺。

步驟2：3-(6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3(4H)-基)-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯

將3-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3(4H)-基)-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(1.4g、3mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(548mg、3.5mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的溶液加入碳酸銫(1.31g、4mmol)。將混合物在15℃攪拌1小時，然後用水(15mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x15mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x15mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。藉由快速矽膠層析法(0-50%乙酸乙酯/石油醚)純化殘留物以獲得為棕色固體的3-(6-(2-氰基-3,6-二氟基苯氧基)-4-側氧基喹唑啉-3(4H)-基)-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(1.8g、90%)。MS(ESI)m/z：539.4[M+H]⁺。

步驟3：3-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(406mg、2mmol)和3-[6-(2-氰基-3,6-二氟基-苯氧基)-4-側氧基-喹唑啉-3-基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(650mg、1mmol)在N,N-二甲基乙醯胺(10mL)的溶液加入碳酸銫(1.18g、3.6mmol)。將混合物在室溫攪拌12小時，然後用水(10mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。藉由製備型高效液相層析法(42%-72%乙腈在水中(0.2%甲酸)歷時15分鐘)純化殘留物以獲得為白色固體的3-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(400mg、48%)。MS(ESI)m/z：687.2[M+H]⁺。

步驟4：3-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(406mg、2.4mmol)和3-[6-(2-氰基-3,6-二氟基-苯氧基)-4-側氧基-喹唑啉-3-基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(650mg、1.2mmol)在N,N-二甲基乙醯胺(10mL)中的溶液加入碳酸銫(1.18g、3.6mmol)。將混合物在60℃攪拌12小時，然後用水(10mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。藉由製備型高效液相層析法(42%-72%乙腈在水中(0.2%甲酸)歷時15分鐘)純化殘留物以獲得為白色固體的3-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(400mg、48%)。MS(ESI)m/z：687.2[M+H]⁺。

步驟5：(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-(1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸-3-基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將3-[6-[2-氰基-6-氟基-3-[[(3R)-3-氟基吡咯啶-1-基]磺醯基胺基]苯氧基]-4-側氧基-喹唑啉-3-基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸三級丁酯(400mg、0.6mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液加入在乙酸乙酯中的4M鹽酸(2mL)。將混合物在25℃攪拌1小時，然後濃縮以獲得為黃色固體的(3R)-N-[2-氰基-4- 氟基-3-[3-(1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-3-基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(340mg)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)m/z：587.2[M+H]⁺。

步驟6：(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[8-[2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-啶啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]乙醯基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-3-基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[3-(1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-3-基)-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(150mg、0.3mmol)和2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]醋酸(123mg、0.3mmol)在二甲基甲醯胺(5mL)中的溶液加入N-甲基

啉(0.1mL、1mmol)。將混合物在25℃攪拌10分鐘，然後加入N-(3-二甲基胺基丙基)-N-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(64mg、0.3mmol)和1-羥基苯并三唑(45mg、0.3mmol)。將混合物在25℃攪拌2小時。將該反應物用鹽水(10mL)稀釋並用四氫呋喃(3x10mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並在減壓下濃縮。藉由製備型高效液相層析法(35%-65%乙腈在水中(0.2%甲酸)歷時7分鐘)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[8-[2-[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-羥基-4-哌啶基]乙醯基]-1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-3-基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(128.5mg、50%)。MS(ESI)m/z：970.6[M+H]⁺；¹H NMR(400 MHz,DMSO-d₆)δ 10.94(s,1H),10.44-10.25(m,1H),8.35(s,1H),7.89-7.74(m,2H),7.68(dd,J=3.2,8.8Hz,1H),7.56-7.45(m,2H),7.38(d,J=2.8Hz,1H),7.11-6.97(m,2H),5.44-5.17(m,2H),5.07-5.01(m,2H),4.35-4.27(m,1H),4.23-4.06(m,3H),3.80-3.71(m,1H),3.60(d,J=12.0Hz,3H),3.54-3.38(m,5H),3.27-3.16(m,2H),2.95-2.83(m,1H),2.60(d,J=3.2Hz,1H),2.44-2.29(m,3H),2.20-1.88(m,5H),1.77-1.42(m,8H)。

實施例247：(3R)-N-{2-氰基-3-[(3-{4-[4-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-7-氟基-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-基}甲基)哌

-1-基]苯基}-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基]-4-氟基苯基}-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

步驟1：4-溴基-2-(溴基甲基)-6-氟基苯甲酸甲酯

將4-溴基-2-氟基-6-甲基苯甲酸甲酯(6.0g、24mmol)和偶氮二異丁腈(0.8g、5mmol)在二氯基乙烷(20mL)中的混合物加入N-溴基琥珀醯亞胺(4.32g、24mmol)，並將所得混合物在氮氣氛圍、80℃下攪拌12小時。將反應物用飽和氯化銨水溶液(100mL)稀釋並用二氯甲烷(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮以獲得為灰白色固體的4-溴基-2-(溴基甲基)-6-氟基苯甲酸甲酯(7.2g、91%)，其無需進一步純化即可用於下一步。

步驟2：(4S)-4-(5-溴基-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)-4-胺基甲醯基丁酸三級丁酯

將4-溴基-2-(溴基甲基)-6-氟基苯甲酸甲酯(1g、3mmol)和(4S)-4-胺基-4-胺基甲醯基丁酸三級丁酯(620.5mg、3mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的混合物加入N,N-二異丙基乙胺(5mL)。將所得混合物在50℃攪拌3小時，然後在100℃攪拌5小時。將反應混合物冷卻至室溫，用水(60mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為黃色固體的(4S)-4-(5-溴基-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)-4-胺基甲醯基丁酸三級丁酯(1.1g、86%)。MS(ESI)：m/z 417.05[M+H]⁺。

步驟3：(4S)-4-胺基甲醯基-4-{5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}丁酸酯

將(4S)-4-(5-溴基-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)-4-胺基甲醯基丁酸三級丁酯(500mg、1mmol)、3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷(158mg、1mmol)和氟化銫(549mg、3.6mmol)在1,4-二

烷(20mL)中的混合物分批加入二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](2-甲基吡啶基)鈀(II)(50.6mg、0.06mmol)，將所得混合物在70℃、氮氣氛圍下攪拌3小時。將混合物冷卻至室溫，用水(80mL)稀釋並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水 (2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯=3：1至1：100)純化粗製品以獲得為白色固體的(4S)-4-胺基甲醯基-4-{5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}丁酸三級丁酯(260mg、46%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 6.33(s,1H),6.12(s,1H),6.03-5.98m,1H),5.23(s,1H),4.82-4.74(m,1H),4.60(d,J=6.8Hz,1H),4.34(d,J=3.0Hz,2H),3.99(t,J=8.0Hz,2H),3.80-3.72(m,2H),3.39(s,5H),3.05(q,J=5.9Hz,1H),2.39-2.05(m,3H),1.42(s,9H),1.26(s,3H)；MS(ESI)：m/z 466.15[M+H]⁺。

步驟4：3-{5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮

將(4S)-4-胺基甲醯基-4-{5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}丁酸三級丁酯(210mg、0.4mmol)在乙腈(20mL)的攪拌混合物緩慢地加入碳酸銫(294mg、0.9mmol)。將所得混合物在80℃攪拌3小時。將反應混合物過濾、濃縮，以獲得為黃色固體的3-{5-[3-(二甲氧基甲基)氮雜環丁烷-1-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮(145mg、82%)。MS(ESI)：m/z 392.15[M+H]⁺。

步驟5：1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基}氮雜環丁烷-3-甲醛

將(3S)-3-{5-[3-(二甲氧基甲基)環丁基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮(140mg、0.4mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液加入水(2mL)和三氟基醋酸(4mL)。將所得混合物在40℃攪拌2小時，然後濃縮以獲得為白色固體的1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基}氮雜環丁烷-3-甲醛三氟基醋酸酯(95mg、77%)。MS(ESI)：m/z 364.10[M+H+H₂O]⁺。

步驟6：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基}氮雜環丁烷-3-基)甲基]哌

-1-基}苯基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]氮雜環丁烷-3-甲醛三氟基醋酸酯(90mg、0.3mmol)和(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-({4-側氧基-3-[4-(哌

-1-基)苯基]喹唑啉-6-基}氧基)苯基]-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺鹽酸鹽(201.4mg、0.3mmol)在二氯甲烷(20mL)中的混合物加入N,N-二異丙基乙胺(0.1mL、0.5mmol)和醋酸(0.1mL、1mmol)。將混合物在室溫攪拌3小時，然後分批加入三乙醯氧基硼氫化鈉(166mg、0.8mmol)，並在室溫攪拌2小時。將反應混合物用水(20mL)稀釋並用二氯甲烷(3x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為白色固體的(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(4-{4-[(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-7-氟基-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基}氮雜環丁烷-3-基)甲基]哌

-1-基}苯基)-4-側氧基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯 基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(10.5mg、4.3%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.95(s,1H),8.25(s,1H),7.82(d,J=8.9Hz,1H),7.69(dd,J=8.9,3.1Hz,2H),7.64(s,2H),7.41(d,J=3.0Hz,2H),7.35(d,J=8.6Hz,2H),6.24(d,J=11.9Hz,1H),5.7(s,1H),5.23(s,1H),5.00(dd,J=13.3,5.0Hz,1H),4.19(d,J=17.2Hz,1H),4.08(t,J=7.8Hz,2H),3.65(s,2H),3.07(s,6H),2.88(d,J=12.9Hz,1H),2.70(s,4H),2.61(s,1H),2.31(s,3H),2.13(d,J=15.4Hz,2H),2.04(s,3H),1.95(s,1H),1.24(s,2H)；MS(ESI)：m/z 935.50[M-H]^-。

實施例248：(3R)-N-(2-氰基-3-{[3-(1-{1-[(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}哌啶-4-基)甲基]哌啶-4-基}-1H-吡唑-3-基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

將(3R)-N-[2-氰基-4-氟基-3-[4-側氧基-3-[1-(4-哌啶基)吡唑-3-基]喹唑啉-6-基]氧基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(3.35g、6mmol)在二甲基亞碸(40mL)中的溶液加入在異丙醇(10mL)和二氯甲烷(10mL)中的1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]哌啶-4-甲醛(2.59g、7mmol)，然後加入醋酸(0.64mL、11mmol)。將混合物在25℃攪拌10分鐘，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(2.38g、11mmol)，並將混合物在25℃攪拌50分鐘。將反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液(1000mL)稀釋並用四氫呋喃(3x300mL)萃取。將合併 的有機層用鹽水洗滌(3x300mL)，用硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮。藉由製備型HPLC(20%-50%乙腈在水中(0.2%甲酸)歷時10分鐘)純化殘留物，然後藉由快速管柱層析法(二氯甲烷/甲醇=1：0至10：1)進一步純化以獲得為白色固體的(3R)-N-[2-氰基-3-[3-[1-[1-[[1-[2-[(3S)-2,6-二側氧基-3-哌啶基]-1-側氧基-異二氫吲哚-5-基]-4-哌啶基]甲基]-4-哌啶基]吡唑-3-基]-4-側氧基-喹唑啉-6-基]氧基-4-氟基-苯基]-3-氟基-吡咯啶-1-磺醯胺(2.51g、47%)。MS(ESI)m/z：936.2[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ 10.94(s,1H),8.53(s,1H),7.97(s,1H),7.83(d,J=8.8Hz,1H),7.68(dd,J=2.4,8.8Hz,1H),7.58(t,J=10Hz,1H),7.51(d,J=8.4Hz,1H),7.47-7.37(m,2H),7.10-7.02(m,2H),6.66(s,1H),5.40-5.18(m,1H),5.04(dd,J=4.8,13.2Hz,1H),4.46-4.27(m,2H),4.24-4.15(m,1H),3.90(d,J=12.0Hz,2H),3.48-3.43(m,2H),3.28-3.20(m,4H),2.92-2.80(m,3H),2.75-2.54(m,5H),2.42-2.30(m,1H),2.17(s,4H),2.08(d,J=8.0Hz,2H),1.98-1.88(m,2H),1.82(d,J=12.0Hz,2H),1.32-1.17(m,2H)。

實施例249：(3R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-{[4-側氧基-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

步驟1：4-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將2-胺基-5-羥基苯甲酸(6.0g、39mmol)和原甲酸三甲酯(12.47g、117mmol)在吡啶(75mL)中的混合物加入4-(4-胺基苯基)哌啶-1-羧酸三級丁酯(14.08g、51mmol)，並將所得混合物在氮氣氛圍、120℃下攪拌12小時。將反應混合物冷卻至室溫，用水(500mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：8)純化殘留物以獲得為淺棕色固體的4-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(11g、67%)。MS(ESI)：m/z 422.1[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 10.15(s,1H),8.14(d,J=1.9Hz,1H),7.61(dd,J=8.7,1.8Hz,1H),7.53-7.40(m,5H),7.36(s,1H),4.11-3.96(m,2H),2.79(t,J=12.8Hz,3H),1.81(d,J=12.9Hz,2H),1.57(td,J=12.5,4.1Hz,2H),1.43(d,J=1.9Hz,9H)。

步驟2：4-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-1-羧酸三級丁酯

將4-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(6.0g、14mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(75mL)的溶液加入溴化芐(3.65g、21mmol)和碳酸銫(13.91g、43mmol)，將所得混合物在室溫氮氣氛圍下攪拌2小時。將反應混合物用水(200mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x150mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘留物以獲得為淺棕色固體的4-{4-[6-(芐基氧基)-4-側 氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-1-羧酸三級丁酯(6.1g、84%)。MS(ESI)：m/z 511.1[M+H]⁺。

步驟3：6-(芐基氧基)-3-[4-(哌啶-4-基)苯基]喹唑啉-4-酮鹽酸鹽

將4-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-1-羧酸三級丁酯(3g、6mmol)和在1,4-二

烷中的4M鹽酸(25mL)的混合物在室溫攪拌3小時，然後濃縮以獲得為白色固體的6-(芐基氧基)-3-[4-(哌啶-4-基)苯基]喹唑啉-4-酮鹽酸鹽(2.5g、粗製品)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)：m/z 411.1[M+H]⁺。

步驟4：4-[(1r,3r)-3-(4-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-1-基)環丁氧基]哌啶-1-羧酸三級丁酯

將6-(芐基氧基)-3-[4-(哌啶-4-基)苯基]喹唑啉-4-酮鹽酸鹽(3g、7mmol)和4-[(1s,3s)-3-(三氟基甲磺醯基氧基)環丁氧基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(2.7g、7mmol)在乙腈(70mL)中的混合物加入N,N-二異丙基乙胺(5.8mL、33mmol)，並將所得混合物在室溫氮氣氛圍下攪拌5小時。將反應物用水(100mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x50mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由反相快速層析法(10%至90%乙腈在水中(10mM碳酸氫銨)歷時45分鐘)純化殘留物以獲得為淡黃色固體的4-[(1r,3r)-3-(4-{4-[6- (芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-1-基)環丁氧基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(3.9g、88%)。MS(ESI)：m/z 664.8[M+H]⁺。

步驟5：6-(芐基氧基)-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-(哌啶-4-基氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-4-酮

將4-[(1r,3r)-3-(4-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-1-基)環丁氧基]哌啶-1-羧酸三級丁酯(3.5g、5mmol)在四氫呋喃(40mL)中的溶液加入在1,4-二

烷中的4M鹽酸(25mL)。將所得混合物在室溫攪拌2小時，然後濃縮。藉由反相快速層析法(10%至90%乙腈在水中(10mM碳酸氫銨)歷時45分鐘)純化殘留物以獲得為灰白色固體的6-(芐基氧基)-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-(哌啶-4-基氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-4-酮(2.5g、84%)。MS(ESI)：m/z 564.8[M+H]⁺。

步驟6：6-(芐基氧基)-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-(哌啶-4-基氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-4-酮

將6-(芐基氧基)-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-(哌啶-4-基氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-4-酮(500mg、0.9mmol)、3-(5-溴基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(343mg、1mmol)和碳酸銫(865mg、2.7mmol)在N,N-二甲基乙醯胺(15mL)中的混合物加入二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](2-甲基吡 啶基)鈀(II)(1.5mg、0.002mmol)。將所得混合物在100℃、氮氣氛圍下攪拌3小時，然後冷卻至室溫。將混合物用水(100mL)稀釋並以乙酸乙酯(3x60mL)萃取。將合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥、過濾，並濃縮以獲得為紫色固體的3-(1-側氧基-5-{4-[(1r,3r)-3-(4-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-1-基)環丁氧基]哌啶-1-基}-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(510mg、71%)。MS(ESI)：m/z 806.9[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.95(s,1H),8.23(s,1H),7.74-7.61(m,2H),7.57(dd,J=8.9,3.0Hz,1H),7.54-7.46(m,2H),7.50(s,2H),7.46-7.34(m,7H),7.38-7.31(m,1H),7.06(d,J=10.0Hz,2H),5.27(s,2H),5.04(dd,J=13.3,5.1Hz,1H),4.71(s,2H),4.33(d,J=17.0Hz,1H),4.19(s,2H),3.71(s,1H),3.02(s,6H),2.95(s,1H),2.79(s,1H),2.59(d,J=15.4Hz,3H),2.22-2.14(m,2H),2.05-1.95(m,0H),1.96(s,1H),1.89(d,J=10.6Hz,1H),1.80(t,J=11.4Hz,3H),1.70(t,J=12.1Hz,2H),0.90-0.79(m,1H),0.57(s,2H),0.51(s,1H)。

步驟7：6-(芐基氧基)-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-(哌啶-4-基氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-4-酮

將3-(1-側氧基-5-{4-[(1r,3r)-3-(4-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}哌啶-1-基)環丁氧基]哌啶-1-基}-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(450mg、0.6mmol)在四氫呋喃(25mL)中的溶液加入10%鈀碳(178mg)。將懸浮液在真空下脫氣並用氫氣吹掃數次。將所得混合物在室溫氫氣氛圍下攪拌2小時，然後過濾並用N,N-二甲基甲醯胺(3x10mL)洗滌。將濾液濃縮以獲得為灰白色固體的3-(1-側氧基-5-{4-[(1r,3r)-3-{4-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌 啶-1-基}環丁氧基]哌啶-1-基}-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(290mg、72%)。MS(ESI)：m/z 716.8[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 10.99(d,J=6.8Hz,1H),8.14(s,1H),7.95(s,2H),7.91-7.68(m,2H),7.73-7.59(m,2H),7.04(m,1H),6.90-6.76(m,1H),5.18-5.00(m,1H),4.79(m,1H),4.66-4.09(m,3H),3.79(d,1H),3.52(m,J=4.0Hz,1H),3.11-2.92(m,3H),2.89(s,4H),2.85(d,3H),2.73(d,1H),2.61(m,1H),2.18(m,2H),1.91-1.58(m,12H),1.48(m,,2H),1.37-1.25(m,1H),0.83(m,,3H)。

步驟8：3,6-二氟基-2-{[4-側氧基-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-6-基]氧基}苯甲腈

將3-(1-側氧基-5-{4-[(1r,3r)-3-{4-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]哌啶-1-基}環丁氧基]哌啶-1-基}-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(200mg、0.3mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(25mL)中的溶液加入碳酸銫(272.7mg、0.8mmol)和2,3,6-三氟基苯甲腈(65.7mg、0.4mmol)。將所得混合物在室溫氮氣氛圍下攪拌4小時。將反應混合物用水(100mL)稀釋並用二氯甲烷(3x35mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由反相快速層析法(10%至90%乙腈在水中(10mmol/L碳酸氫銨)歷時30分鐘)純化殘留物以獲得為灰白色固體的3,6-二氟基-2-{[4-側氧基-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-6-基]氧基}苯甲腈(130mg、55%)。MS(ESI)：m/z 716.8[M+H]⁺。

步驟9：(3R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-{[4-側氧基-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-6-基]氧基}苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將3,6-二氟基-2-{[4-側氧基-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-6-基]氧基}苯甲腈(100mg、0.1mmol)和(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(19.7mg、0.1mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的溶液加入碳酸銫(114.5mg、0.3mmol)。將所得混合物在50℃、氮氣氛圍下攪拌12小時。將反應混合物冷卻至室溫，用水(100mL)稀釋並用二氯甲烷(3x20mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(10mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為灰白色固體的(3R)-N-(2-氰基-4-氟基-3-{[4-側氧基-3-(4-{1-[(1r,3r)-3-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)環丁基]哌啶-4-基}苯基)喹唑啉-6-基]氧基}苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(9.6mg、7.4%)。MS(ESI)：m/z 1001.4[M+H]⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.95(s,2H),8.27(s,1H),8.14(s,1H),7.79(s,1H),7.55(d,1H),7.40(m,9H),7.16(m,2H),7.06(m,2H),4.31(m,7H),3.70(d,10H),3.01(d,11H),2.31(s,9H),1.89(m,17H),1.56(s,5H),1.36(s,15H),1.24(s,2H)。

實施例250：(3R)-N-(2-氰基3-{[3-(4-{2-[(1-{2-[(3S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基]-1-側氧基-2,3-二氫基-1H-異吲哚-5-基}哌啶-4-基)氧基]-7-氮雜螺[3.5] 壬-7-基}苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基]氧基}-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺之示例性合成

步驟1：2-(吡啶-4-基氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯

將氫化鈉(2.49g、104mmol)在二甲基亞碸(167mL)中的混合物滴加2-羥基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(10g、41mmol)。將混合物在30℃攪拌1小時，然後緩慢地加入4-氯基吡啶(4.70g、41mmol)，將混合物在室溫攪拌1小時，並在80℃、氮氣氛圍下攪拌12小時。將該反應物用飽和氯化銨溶液(100mL)在0℃稀釋，並用二氯甲烷(3x200mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3x150mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇=12：1)純化殘留物以獲得為白色固體的2-(吡啶-4-基氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(10.62g、80%)。MS(ESI)：m/z 319.15[M+H]⁺。

步驟2：1-芐基-4-[[7-(三級丁氧基羰基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基]氧基]吡啶-1-鎓

將2-(吡啶-4-基氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(10g、31mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液加入溴化芐(26.86g、157mmol)。該反應物在室溫攪拌2小時，然後濃縮。藉由矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化 殘留物以獲得為黃色油的1-芐基-4-[[7-(三級丁氧基羰基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基]氧基]吡啶-1-鎓(12g、93%)。MS(ESI)：m/z 409.35[M+H]⁺。

步驟3：2-[(1-芐基-3,6-二氫基-2H-吡啶-4-基)氧基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯

將1-芐基-4-[[7-(三級丁氧基羰基)-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基]氧基]吡啶-1-鎓(10g、24mmol)在甲醇(200mL)中的溶液加入硼烷鈉(2.70g、73mmol)。將該反應物在室溫攪拌2小時，然後用飽和氯化銨溶液(100mL)稀釋，並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x150mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(石油醚/乙酸乙酯=2：1)純化殘留物以獲得為淺黃色油的2-[(1-芐基-3,6-二氫基-2H-吡啶-4-基)氧基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(6.3g、63%)。MS(ESI)：m/z 413.25[M+H]⁺.

步驟4：2-(哌啶-4-基氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯

將2-[(1-芐基-3,6-二氫基-2H-吡啶-4-基)氧基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(6.3g、15mmol)在甲醇(100mL)中的溶液在氮氣氛圍下加入10%鈀碳(5.0g)。將懸浮液在真空下脫氣並用氫氣吹掃數次。將所得混合物在氫氣氛圍下攪拌12小時。將反應混合物藉由矽藻土墊過濾並濃縮，以獲得為灰白色油 的2-(哌啶-4-基氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(5g、粗製品)，其無需進一步純化即可用於下一步。

步驟5：2-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯

將2-(哌啶-4-基氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(700mg、2mmol)和3-(5-溴基-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(697mg、2mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的溶液加入碳酸銫(2812mg、9mmol)和二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](2-甲基吡啶基)鈀(II)(91mg、0.1mmol)。將所得混合物在90℃、氮氣氛圍下攪拌12小時。將混合物冷卻至室溫，用水(10mL)稀釋，並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為白色固體的2-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(612mg、67%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.95(s,1H),7.60(d,J=8.8Hz,1H),7.09-7.01(m,2H),5.52-5.42(m,2H),5.03(s,1H),4.30(d,J=17.0Hz,1H),4.17(d,J=17.0Hz,1H),4.07(p,J=7.1Hz,1H),3.92(s,2H),3.86(s,2H),3.62(s,2H),3.50-3.45(m,1H),3.03-2.83(m,4H),2.73(s,1H),2.62-2.52(m,3H),2.42-2.27(m,1H),2.18-2.08(m,2H),1.99-1.87(m,3H),1.59-1.46(m,9H)；MS(ESI)：m/z 566.55[M+H]⁺。

步驟6：3-[5-(4-{7-氮雜螺[3.5]壬-2-基氧基}哌啶-1-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽

將2-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯(612mg、1mmol)和在1,4-二

烷(20mL)中的4M鹽酸鹽的溶液在室溫攪拌2小時。將該反應物濃縮以獲得為白色固體的3-[5-(4-{7-氮雜螺[3.5]壬-2-基氧基}哌啶-1-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(541mg、粗製品)，其無需進一步純化即可用於下一步。MS(ESI)：m/z 467.35[M+H]⁺。

步驟7：3-(5-{4-[(7-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基]哌啶-1-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮

將3-[5-(4-{7-氮雜螺[3.5]壬-2-基氧基}哌啶-1-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮鹽酸鹽(300mg、0.6mmol)和6-(芐基氧基)-3-(4-溴基苯基)喹唑啉-4-酮(243mg、0.6mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中的混合物加入二氯基[1,3-雙(2,6-二-3-戊基苯基)亞咪唑-2-基](2-甲基吡啶基)鈀(II)(0.84mg、0.001mmol)和碳酸銫(971.6mg、3mmol)。將所得混合物在90℃攪拌5小時，然後冷卻至室溫。將混合物用水(20mL)稀釋，並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，以無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇=10：1)純化殘留物以獲得為棕色固體的3-(5-{4-[(7-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基]哌啶-1-基}- 1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(325mg、69%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ 10.93(s,1H),8.16(d,J=1.6Hz,1H),7.73-7.62(m,3H),7.59-7.25(m,6H),7.10-7.00(m,5H),6.66(t,J=9.5Hz,1H),5.75(d,J=1.5Hz,1H),5.26(s,1H),4.45-4.26(m,3H),3.68(d,J=12.9Hz,2H),3.28(d,J=4.7Hz,2H),3.15(s,2H),2.92-2.83(m,2H),2.60(s,2H),2.21(d,J=9.3Hz,1H),1.49(d,J=9.7Hz,1H),1.23(s,9H),1.10(d,J=5.9Hz,2H)；MS(ESI)：m/z 793.40[M+H]⁺。

步驟8：3-{5-[4-({7-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基}氧基)哌啶-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮

將3-(5-{4-[(7-{4-[6-(芐基氧基)-4-側氧基喹唑啉-3-基]苯基}-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基)氧基]哌啶-1-基}-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(379mg、0.5mmol)在四氫呋喃(20mL)和N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的溶液在氮氣氛圍下加入10%鈀碳(200mg)。將懸浮液在真空下脫氣並用氫氣吹掃數次。將所得混合物在氫氣氛圍下攪拌2小時，然後藉由矽藻土墊過濾並濃縮以獲得為灰白色固體的3-{5-[4-({7-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基}氧基)哌啶-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮(310mg、92%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.95(s,1H),10.15(s,1H),8.09(s,1H),7.95(s,1H),7.53-7.44(m,2H),7.36-7.26(m,3H),7.05-6.89(m,4H),5.04-5.01(d,J=12Hz,1H),4.32(d,J=16.8Hz,3H),4.24-4.13(m,2H),3.69(d,J=12.7Hz,1H),3.21(s,1H),3.15(t,J=5.6Hz,2H),3.04(t,J=10.3Hz,2H),2.94(s,3H),2.89(s,2H),2.78(s,2H),2.41- 2.33(m,1H),2.22(t,J=9.0Hz,2H),1.96(s,3H),1.89(d,J=12.2Hz,2H),1.72-1.61(m,5H),1.48(t,J=11.1Hz,1H)；MS(ESI)：m/z 703.45[M+H]⁺。

步驟9：2-[(3-{4-[2-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬-7-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈

將3-{5-[4-({7-[4-(6-羥基-4-側氧基喹唑啉-3-基)苯基]-7-氮雜螺[3.5]壬-2-基}氧基)哌啶-1-基]-1-側氧基-3H-異吲哚-2-基}哌啶-2,6-二酮(300mg、0.4mmol)在N,N-二甲基乙醯胺(15mL)中的混合物分批加入2,3,6-三氟基苯甲腈(101mg、0.6mmol)。將所得混合物在40℃攪拌3小時，然後過濾，並用N,N-二甲基乙醯胺(20mL)洗滌。將濾液溶液濃縮以獲得為灰白色固體的2-[(3-{4-[2-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬-7-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈(218mg、61%)。MS(ESI)：m/z 840.65[M+H]⁺。

步驟10：(R)-N-(2-氰基-3-((3-(4-(2-((1-(2-((S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異二氫吲哚-5-基)哌啶-4-基)氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬-7-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺

將(3R)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(45mg、0.3mmol)在N,N-二甲基乙醯胺(20mL)的溶液加入碳酸銫(146mg、0.4mmol)，並將混合物在50℃、氮氣氛圍下攪拌0.5小時。然後在1分鐘內加入2-[(3-{4-[2-({1-[2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基-3H-異吲哚-5-基]哌啶-4-基}氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬-7-基]苯基}-4-側氧基喹唑啉-6-基)氧基]-3,6-二氟基苯甲腈(150mg、0.2mmol)，並將所得混合物在90℃攪拌3小時。將反應混合物冷卻至室溫，用水(10mL)稀釋，並以乙酸乙酯(2x100mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由製備型薄層層析法(甲醇/二氯甲烷=1：12)純化殘留物，然後藉由手性SFC(甲基三級丁基醚(0.1%甲酸)：(甲醇/二氯甲烷=1：1)=20：80)進一步純化以獲得為白色固體的(R)-N-(2-氰基-3-((3-(4-(2-((1-(2-((S)-2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異二氫吲哚-5-基)哌啶-4-基)氧基)-7-氮雜螺[3.5]壬-7-基)苯基)-4-側氧基-3,4-二氫基喹唑啉-6-基)氧基)-4-氟基苯基)-3-氟基吡咯啶-1-磺醯胺(45.6mg、25%)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ 10.95(s,1H),10.35(s,1H),8.25(s,1H),7.87-7.78(m,2H),7.71(s,1H),7.51-7.49(m,J=8.9,3.9Hz,2H),7.42(d,J=3.0Hz,1H),7.29(d,J=8.7Hz,2H),7.09-7.00(m,4H),5.41-5.35(d，J=24Hz,,1H),5.25(s,1H),5.05(s,1H),4.32(d,J=16.8Hz,2H),4.24-4.10(m,2H),3.68(d,J=12.8Hz,2H),3.57-3.49(m,2H),3.52-3.39(m,2H),3.25-3.18(m,2H),3.09-2.99(m,2H),2.90-2.80(d,J=40Hz,1H),2.58(d,J=17.5Hz,1H),2.44-2.30(m,3H),2.26-2.15(m,2H),2.18-2.01(m,3H),2.01-1.92(m,6H),1.92-1.85(m,2H)；MS(ESI)：m/z 986.40[M+H]⁺。

表1中的下列化合物依上述程序使用適當的起始材料和中間體製備。例如，化合物6-29、181-240和254-268可根據一般方案1或1’以及實施例1和2中概述的程序來製備。實施例83-138可類似地根據一般方案1或1’以及 實施例1和73-81中概述的程序來製備。實施例139-178可根據一般方案1或1’和實施例2中概述的程序來製備。化合物30-64可根據一般方案2或2’和實施例3中概述的程序來製備。化合物65-70和241-243可根據一般方案3或3’和實施例4中概述的程序來製備。化合物71、72和269可根據一般方案4或4’和實施例5中概述的程序來製備。化合物244-246可根據實施例176中概述的程序來製備。化合物251可根據實施例247中概述的程序來製備。化合物252和253可以根據實施例248中概述的程序來製備。

生物測定

標靶蛋白降解

A. T-Rex 293細胞(96孔格式)

T-Rex 293細胞購自Invitrogen(#R71007)，並以pcDNA4/TO_HA-B-RAF_V600E構建體穩定轉染，並使用400ug Zeocin進行篩選。V600e細胞以5,000個細胞/孔的密度接種在含有10%胎牛血清(FBS；Gibco#16000044)和1ng/mL多西環素(Selleckchem #4163)的Ulbecco改良Eagle培養基(DMEM；Gibco #11965118)(50μl)中，置於聚D-賴胺酸(PDL)塗覆的黑色透明底96孔板(Corning #354640)上並在37℃、5% CO₂下培育24小時。隔天，將50ul測試化合物以DMEM中2倍濃度加入，終濃度範圍為0.1%二甲基亞碸(DMSO)中1μM至0.1nM，並在37℃、5% CO₂下培育24小時。實驗處理結束時，彈去培養基，用磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)++(含CaCl和MgCl的PBS)洗滌細胞一次，並輕輕地用每孔200μl PBS++替換。除去PBS++，加入50uL 4%多聚甲醛(PFA；EMS#15710)的PBS++溶液，並在室溫下培育15分鐘。用PBS++洗滌細胞一次並加入50uL 0.1% Triton X-100(Fisher#BP151-500)的PBS++溶液。將板在室溫下培育5分鐘。將細胞用PBS++清洗一次。將細胞以100uL Licor封閉緩衝液(Licor #927-50000)在室溫下封閉1小時。接下來，加入50uL以1：1000的比例在Licor封閉緩衝液中的HA抗體(CST #3724)，並將板在4℃下培育過夜。將板封上封口膜以防止蒸發。用200uL PBS++洗滌板3次。加入50微升HCS二抗溶液[1：1000 Hoechst(Invitrogen #H3570)、1：1000鬼筆環肽(Invitrogen #A22287)和1：5000 Alexafluor(Invitrogen #A11008)]，培育1小時。用200uL PBS++清洗板3次，並在高內涵讀取器(ImageXpress Micro XLS，Molecular Devices)上成像。

B. T-Rex 293細胞(96孔格式)

T-Rex 293細胞購自Invitrogen(#R71007)，並以pcDNA4/TO_HA-B-RAF_G466V構建體穩定轉染，並使用400ug Zeocin進行篩選。G466V細胞以5,000個細胞/孔的密度接種在含有10%胎牛血清(FBS；Gibco# 16000044)和0.75ng/mL多西環素(Selleckchem#4163)的Ulbecco改良Eagle培養基(DMEM；Gibco#11965118)(50μl)中，置於聚D-賴胺酸(PDL)塗覆的黑色透明底96孔板(Corning#354640)上並在37℃、5% CO₂下培育24小時。隔天，將50ul測試化合物以DMEM中2倍濃度加入，終濃度範圍為0.1%二甲基亞碸(DMSO)中30nM至3pM，並在37℃、5% CO₂下培育24小時。實驗處理結束時，彈去培養基，用磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)++(含CaCl和MgCl的PBS)洗滌細胞一次，並輕輕地用每孔200μl PBS++替換。除去PBS++，加入50uL 4%多聚甲醛(PFA；EMS#15710)的PBS++溶液，並在室溫下培育15分鐘。用PBS++洗滌細胞一次並加入50uL 0.1% Triton X-100(Fisher#BP151-500)的PBS++溶液。將板在室溫下培育5分鐘。將細胞用PBS++清洗一次。將細胞以100uL Licor封閉緩衝液(Licor#927-50000)在室溫下封閉1小時。接下來，加入50uL以1：1000的比例在Licor封閉緩衝液中的HA抗體(CST #3724)，並將板在4℃下培育過夜。將板封上封口膜以防止蒸發。用200uL PBS++洗滌板3次。加入50微升HCS二抗溶液[1：1000 Hoechst(Invitrogen #H3570)、1：1000鬼筆環肽(Invitrogen #A22287)和1：5000 Alexa fluor(Invitrogen #A11008)]，培育1小時。用200uL PBS++清洗板3次，並在高內涵讀取器(ImageXpress Micro XLS，Molecular Devices)上成像。

C. T-Rex 293細胞(384孔格式)

T-Rex 293細胞購自Invitrogen(#R71007)，並以pcDNA4/TO_HA-BRAF_V600E構建體穩定轉染，並使用400ug Zeocin進行篩選。V600E細胞以 7,500個細胞/孔的密度接種在含有10%FBS(Gibco#16000044)、1%青黴素-鏈黴素(ThermoFisher #15140122)、1：250博萊黴素(Invitrogen #R-25005)和1ng/mL多西環素(Selleckchem# 4163)的DMEM培養基(Gibco#11965118)(45μl)中，置於PDL塗覆的黑色透明底384孔板(Corning#354663)上並在37℃+5% CO₂下培育24小時。隔天，使用Agilent Bravo將1：3 11點稀釋的PROTAC化合物稀釋入DMEM培養基中。將5ul懸浮於DMEM培養基中的PROTAC加入細胞中，最終測定濃度範圍為300nM至5pM(0.5% DMSO)。將板在37℃+5% CO₂下培育24小時。處理結束時，吸出培養基，並將細胞固定在含50uL 4% PFA(EMS#15710)的PBS++(PBS、1mM CaCL、1mM MgCl)中，室溫固定15分鐘。將細胞以60uL PBS++洗滌2次，並在室溫下以50uL PBS++中的1% Triton X-100(Sigma #93443)透化5分鐘。將細胞在PBS++中洗滌，然後用50uL Licor封閉緩衝液(Licor #927-60001)在室溫下封閉1小時。使用50uL以1：1000在Licor封閉緩衝液中的HA抗體(CST #3724)對HA標記的BRAF在室溫下染色兩小時。吸出一抗，然後加入50ul二抗溶液，其含有1：1000 Hoechst(ThermoFisher #62249)、1：1000 HCS CellMask Deep Red Stain(ThermoFisher #H32721)和1：5000羊抗兔IgG Alexa-Fluor 488(ThermoFisher #A32731)在PBS++中，在室溫下1小時。將板用60uL PBS++洗滌4次，然後用黏性黑色吸光膜(VWR#89087-692)密封，並在ThermoFisher CX7 PRO高內涵儀器上成像。BRAF強度在HCS Studio軟體(ThermoFisher)中使用自訂腳本進行量化、匯出、使用KNIME分析，並在ELN(Scilligence)中進行曲線管理。藉由比較PROTAC處理孔與DMSO對照孔中的細胞核數量來測量細胞毒性。

D. T-Rex 293細胞(384孔格式)

T-Rex 293細胞購自Invitrogen(#R71007)，並以pcDNA4/TO_HA-BRAF_G466V構建體穩定轉染，並使用400ug Zeocin進行篩選。G466V細胞以7,500個細胞/孔的密度接種在含有10%FBS(Gibco#16000044)、1%青黴素-鏈黴素(ThermoFisher #15140122)、1：250博萊黴素(Invitrogen #R-25005)和1ng/mL多西環素(Selleckchem# 4163)的DMEM培養基(Gibco#11965118)(45μl)中，置於PDL塗覆的黑色透明底384孔板(Corning#354663)上並在37℃+5% CO₂下培育24小時。隔天，使用Agilent Bravo將1：3 11點稀釋的PROTAC化合物稀釋入DMEM培養基中。將5ul懸浮於DMEM培養基中的PROTAC加入細胞中，最終測定濃度範圍為300nM至5pM(在0.5% DMSO中)。將板在37℃+5% CO₂下培育24小時。處理結束時，吸出培養基，並將細胞固定在含50uL 4% PFA(EMS#15710)的PBS++(PBS、1mM CaCL、1mM MgCl)中，室溫固定15分鐘。將細胞以60uL PBS++洗滌2次，並在室溫下以50uL PBS++中的1% Triton X-100(Sigma #93443)透化5分鐘。將細胞在PBS++中洗滌，然後用50uL Licor封閉緩衝液(Licor #927-60001)在室溫下封閉1小時。使用50uL以1：1000在Licor封閉緩衝液中的HA抗體(CST #3724)對HA標記的BRAF在室溫下染色兩小時。吸出一抗，然後加入50ul二抗溶液，其含有1：1000 Hoechst(ThermoFisher #62249)、1：1000 HCS CellMask Deep Red Stain(ThermoFisher #H32721)和1：5000羊抗兔IgG Alexa-Fluor 488(ThermoFisher #A32731)在PBS++中，在室溫下1小時。將板用60uL PBS++洗滌4次，然後用黏性黑色吸光膜(VWR#89087-692)密封，並在ThermoFisher CX7 PRO高內涵儀器上成像。BRAF強度在HCS Studio軟體(ThermoFisher)中使用自訂腳本進行量化、匯出、使用KNIME分析，並在 ELN(Scilligence)中進行曲線管理。藉由比較PROTAC處理孔與DMSO對照孔中的細胞核數量來測量細胞毒性。

導致半最大降解(DC₅₀)以及觀察到的最大降解(D_max，通常表示為對照組的百分比)的示例性化合物的濃度如下表2所示。

測定A和B用於實施例1-82

測定C和D用於實施例83-269

*DC₅₀ V600E(nM)D>500；50<C

500；5<B

50；A

5

*DC₅₀ G446V(nM)A

1；1<B

10；10<C

30；D>30

**D_Max(%)：C

35；35<B<70；A

70

NT=未測試

腫瘤生長抑制研究

H1666獲自ATCC(CRL-5885)並維持在補充10%胎牛血清(Gibco 26140-079)的RPMI-1640培養基(Gibco 21870-076)中。雌性CB17SCID小鼠右側皮下接種於0.2ml苯酚-無紅RPMI(Gibco 11835030)中的H1666細胞(5X10⁶)，並以1：3的比例補充Matrigel以促進腫瘤生長。每週兩次用卡尺測量腫瘤體積，按下式計算體積(mm³)：V=0.5axb²，其中a和b分別為腫瘤的長徑和短徑，單位為mm。植入後約21天，腫瘤平均體積達到150mm³後，動物隨機分入治療組，治療從第0天開始。

將化合物以指定濃度口服(PO)、每天(QD)或每天兩次(BID)給藥至攜帶H1666腫瘤的小鼠，持續20-36天。所有化合物均配製在作為載體的10mM檸檬酸鹽(pH 3.0)中的30% SBE-B-CD中，並以5ml/kg的體積給藥。每週測量兩次體重和腫瘤體積並報告為平均值±SEM。腫瘤生長抑制百分比(%TGI)計算公式：[1-(Tf-Ti)/(Cf-Ci)]*100(T：治療；C：載體；f：終點；i：初始點)。結果如圖1至圖5所示。

雖然我們已描述了許多實施方案，但顯然我們的基本範例可改變以提供利用本發明的化合物和方法的其他實施方案。因此，應理解，本發明的範圍由所附申請專利範圍限定，而非由藉由實施例表示的具體實施方案限定。

本申請全文所引用的所有參考文獻(包括參考文獻、已公告的專利、已公開的專利申請和共同申請中的專利申請案)的內容均明確地整體併入本 文作為參考。除非另外定義，本文所使用的所有技術和科學術語均符合本發明所述技術領域中具有通常知識者公知的含義。

Claims (89)

1. 一種具有化學結構I的化合物：

   PTM-L-CLM (I)；

   或其藥學上可接受的鹽，其中：

   (a)PTM係由下述化學結構表示：

   

   其中：

   X係O或NH；

   R_PTM1係選自氫、鹵素、C_1-4烷基、和氰基；

   R_PTM2係選自氫、鹵素、任選經取代的C₁-₄烷基、和任選經取代的C₁-₄烷氧基；

   R_PTM3係選自任選經取代的C₁-₄烷基、-NH(任選經取代的C₁-₄烷基)、-N(任選經取代的C₁-₄烷基)₂、任選經取代的環烷基、和任選經取代的雜環基；以及，

   

   表示化學鏈接部分(L)的接附點；

   (b)CLM係由下述化學結構表示：

   

   

   或

   

   ；

   其中：

   W係CH₂或C(O)；

   Y係N或CR⁵；

   Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵各自獨立為CH、CR^w或N；

   Z¹和Z²各自獨立為CH、CR^x或N；

   V係不存在或係NR^y或C(O)NR^z；

   R⁴和R⁵各自為氫；

   R⁶係氫或任選經取代的C₁-₄烷基；

   R^w和R^x各自獨立地選自鹵素、任選經取代的C₁-₄烷基、任選經取代的C₁-₄烷氧基、氰基、OH、-NH(任選經取代的C₁-₄烷基)和-NH(任選經取代的C₁-₄烷基)₂；

   R^y和R^z各自獨立地為氫或任選經取代的C₁-₆烷基、任選經取代的環烷基或任選經取代的雜環基；以及，

   虛線表示化學連接部分(L)所接附的結構部分；以及，

   (c)L係將CLM與PTM共價交聯的化學連接部分。
2. 如請求項1所述之化合物，其中：

   (a)X係O或NH；

   R_PTM1係選自氫、鹵素、和氰基；

   R_PTM2係選自氫、鹵素、任選經取代的C₁-₄烷基、和任選經取代的C₁-₄烷氧基；

   R_PTM3係選自任選經取代的C₁-₄烷基、-NH(任選經取代的C₁-₄烷基)、-N(任選經取代的C₁-₄烷基)₂、任選經取代的環烷基、和任選經取代的雜環基；以及

   

   表示化學鏈接部分(L)的接附點；

   (b)CLM係由下述化學結構表示：

   

   

   或

   

   ；

   其中：

   W係CH₂或C(O)；

   Y係N或CR⁵；

   Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵各自獨立為CH,CR^w或N；

   Z¹和Z²各自獨立為CH、CR^x或N；

   V係不存在或係NR^y或C(O)NR^z；

   R⁴和R⁵各自為氫；

   R⁶係氫或任選經取代的C₁-₄烷基；

   R^w和R^x各自獨立地選自鹵素、任選經取代的C₁-₄烷基、任選經取代的C₁-₄烷氧基、氰基、OH、-NH(任選經取代的C₁-₄烷基)和-NH(任選經取代的C₁-₄烷基)₂；

   R^y和R^z各自獨立地為氫或任選經取代的C₁-₆烷基、任選經取代的環烷基、或任選經取代的雜環基；以及

   虛線表示化學連接部分(L)所接附的結構部分；以及

   (c)L係將CLM與PTM共價交聯的化學連接部分。
3. 如請求項1或2所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，

   R_PTM2係選自氫、鹵素、鹵代C₁-₄烷基、C₁-₄烷氧基、和鹵代C₁-₄烷氧基；

   R_PTM3係選自C₁-₄烷基、鹵代C₁-₄烷基、氰基C₁-₄烷基、羥基C₁-₄烷基、-NH(C₁-₄烷基)、-N(C₁-₄烷基)₂、環烷基、和雜環基，其中所述環烷基和雜環基各自任選地經1至3個選自鹵素、側氧基、C₁-₄烷基、鹵代C₁-₄烷基、C₁-₄烷氧基、鹵代C₁-₄烷氧基、和氰基的基團取代；

   R^w和R^x各自獨立地選自鹵素、C₁-₄烷基、鹵代C₁-₄烷基、C₁-₄烷氧基、鹵代C₁-₄烷氧基、氰基、OH、-NH(C₁-₄烷基)和-NH(C₁-₄烷基)₂；以及

   R^y和R^z各自獨立地為氫或C₁-₄烷基。
4. 如請求項1至3中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，X係O。
5. 如請求項1至4中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R_PTM1係氰基、-CH₃、-CH₂CH₃、F或-Cl。
6. 如請求項1至4中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R_PTM1係氰基。
7. 如請求項1至6中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R_PTM2係鹵素。
8. 如請求項1至7中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R_PTM2係氟基。
9. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R_PTM3係任選地經1至3個選自鹵素、側氧基、C₁-₆烷基、鹵代C₁-₆烷基、C₁-₆烷氧基、鹵代C₁-₆烷氧基、和氰基的基團取代的雜環基。
10. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R_PTM3係任選地經1至3個選自鹵素、側氧基、C₁-₆烷基、鹵代C₁-₆烷基、C₁-₆烷氧基、鹵代C₁-₆烷氧基、和氰基的基團取代的N-連接雜環基。
11. 如請求項1至10中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R_PTM3係任選地經1至3個選自鹵素、側氧基、C₁-₆烷基、鹵代C₁-₆烷基、C₁-₆烷氧基、鹵代C₁-₆烷氧基、和氰基的基團取代的吡咯啶基。
12. 如請求項1至11中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R_PTM3係任選地經1至3個鹵素取代的吡咯啶基。
13. 如請求項1至12中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述PTM係由下述化學結構表示：

    
14. 如請求項1至13中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述PTM係由下述化學結構表示：

    
15. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    

    、

    

    或

    

    (CLMIII)。
16. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    

    或

    

    。
17. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    
18. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    
19. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    

    其中，Y係CH。
20. 如請求項1至19中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R^y和R^z各自為氫。
21. 如請求項1至20中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Q¹、Q²、Q³、Q⁴和Q⁵各自獨立為CH或CR^w。
22. 如請求項1至21中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Q³、Q⁴和Q⁵各自係由化學結構CLMI和CLMIII所表示的所述CLM的CH。
23. 如請求項1至22中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Q¹和Q²各自係由化學結構CLMIII表示的所述CLM的CR^w。
24. 如請求項1至22中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，對於由化學結構CLMIII表示的所述CLM，Q¹係CH和Q²係CR^w。
25. 如請求項1至22中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，對於由化學結構CLMI表示的所述CLM，Q¹係CR^w和Q²係CH。
26. 如請求項1至22中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，對於由化學結構CLMI表示的所述CLM，Q¹係CH和Q²係CR^w。
27. 如請求項1至21中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，對於由化學結構CLMII表示的所述CLM，Q¹、Q²和Q³係CH，和Q⁴係CR^w。
28. 如請求項1至27中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R^w係選自鹵素、C_1-4烷基、C_1-4鹵代烷基、和C₁-₄烷氧基。
29. 如請求項1至27中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R^w係選自鹵素、C_1-4烷基、和C₁-₄烷氧基。
30. 如請求項1至28中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R^w係選自鹵素和C₁-₄烷氧基。
31. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    

    

    
32. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中所述所述CLM係由下述化學結構表示：

    

    
33. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    

    
34. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    

    

    

    或

    

    。
35. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    

    

    或

    

    。
36. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    
37. 如請求項1至14中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述CLM係由下述化學結構表示：

    
38. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述化學結構表示：

    

    其中：

    Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立為不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和任選經取代的C_1-6伸烷基，其中，所述C_1-6伸烷基也可以選擇性地被一個或多個O、NH和NR^NY中斷，且其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成側氧基或C_3-6環烷基；

    R^NY係任選地經C_1-3烷氧基或側氧基取代的C_1-4烷基，以及

    W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，它們各自任選地經取代。
39. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述化學結構表示：

    

    

    其中：

    Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立為不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和任選經取代的C_1-6伸烷基，其中所述C_1-6伸烷基也可以選擇性地經一個或多個O、NH和N(C_1-4烷基)中斷，且其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成側氧基或C_3-6環烷基；以及

    W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，它們各自任選地經取代。
40. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述化學結構表示：

    

    其中：

    Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立為不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和任選經取代的C_1-6伸烷基，其中所述C_1-6伸烷基也可以任選地經一個或多個O、NH和N(C_1-4烷基)中斷，且其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成側氧基；以及

    W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，它們各自任選地經取代。
41. 如請求項37或38所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，

    Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立為不存在選自O、NH、N(C_1-4烷基)和可任選地經一個或多個O、NH和N(C_1-4烷基)中斷的C_1-6伸烷基，且其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成側氧基或C_3-4環烷基；

    W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，其各自任選地經1至4個選自R^M的基團取代；以及

    R^M係選自鹵素、OH、氰基、側氧基、C_1-4烷基、C_1-4鹵代烷基、C_1-4羥基烷基、C_1-4烷氧基和C_1-4鹵代烷氧基。
42. 如請求項39所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，

    Y^L1、Y^L2、Y^L3、Y^L4和Y^L5各自獨立為不存在或選自O、NH、N(C_1-4烷基)和可任選地經一個或多個O、NH和N(C_1-4烷基)中斷的C_1-6伸烷基，且其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成側氧基；

    W^L1、W^L2、W^L3和W^L4各自獨立地選自苯基、雜環基、雜芳基和環烷基，其各自任選地經1至4個選自R^M的基團取代；以及

    R^M係選自鹵素、OH、氰基、側氧基、C_1-4烷基、C_1-4鹵代烷基、C_1-4羥基烷基、C_1-4烷氧基和C_1-4鹵代烷氧基。
43. 如請求項37至41中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中Y^L1係不存在。
44. 如請求項37至42中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中W^L1係選自苯基、4-至10-員雜環基和5-至7-員雜芳基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
45. 如請求項37至42中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L1係選自苯基、4-至7-員雜環基和5-至7-員雜芳基，其各自任選地經1至3個選自RM的基團取代。
46. 如請求項37至42中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L1係選自吡唑醯基、苯硫基、苯基、哌啶基、吡啶基、1-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸基、嗒

    

    基、吡

    

    基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
47. 如請求項37至42中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L1係選自吡唑醯基、苯硫基、苯基、哌啶基、吡啶基、嗒

    

    基、吡

    

    基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
48. 如請求項37至42中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L1係選自苯基、哌啶基、吡啶基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
49. 如請求項37至47中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y^L2係不存在或選自NH和C_1-6伸烷基；其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成C_3-4環烷基或側氧基。
50. 如請求項37至47中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y^L2係不存在或選自NH和C_1-6伸烷基；其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成C_3-4環烷基。
51. 如請求項37至47中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y^L2係不存在或選自NH和C_1-6伸烷基。
52. 如請求項37至50中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L2係選自4-至11-員雜環基和環烷基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
53. 如請求項37至50中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L2係選自吡咯啶基、哌啶基、哌

    

    基、氮雜環丁烷基、

    

    啉基、2-氮雜螺[3.3]庚基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、環丁基和環己基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
54. 如請求項37至50中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L2係選自哌啶基、哌

    

    基、吡咯啶基、氮雜環丁烷基、

    

    啉基、7-氮雜螺[3.5]壬基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、環丁基和環己基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
55. 如請求項37至50中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L2係選自哌啶基、哌

    

    基、氮雜環丁烷基、

    

    啉基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、環丁基和環己基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
56. 如請求項37至54中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y^L3係不存在或選自O和C_1-6伸烷基，其中所述C_1-6伸烷基可任選地經一個或多個O、NH和NR^NY中斷，且其中所述C_1-6伸烷基的同一碳上的兩個氫可以一起形成側氧基。
57. 如請求項37至55中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L3係選自4-至11-員雜環基、環烷基和5-至7-員雜芳基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
58. 如請求項37至55中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L3係選自吡咯啶基、哌啶基、氮雜環丁烷基、哌

    

    基、7-氮雜螺[3.5]壬基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、2-氮雜螺[3.3]庚基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、2-氮雜螺[3.5]壬基、3-氮雜螺[5.5]十一基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一基、環己基、環丁基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
59. 如請求項37至55任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L3係選自吡咯啶基、哌啶基、氮雜環丁烷基、哌

    

    基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、2-氮雜螺[3.3]庚基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、2-氮雜螺[3.5]壬基、3-氮雜螺[5.5]十一基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一基、環己基、環丁基和嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
60. 如請求項37至55中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L3選自吡咯啶基、哌啶基、氮雜環丁基、哌

    

    基、2,6-二氮雜螺[3.3]庚基、2-氮雜螺[3.3]庚基、2,7-二氮雜螺[3.5]壬基、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、環己基、環丁基及嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
61. 如請求項37至55中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L3選自哌啶基、氮雜環丁烷基、哌

    

    基、環己基、環丁基、嘧啶基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
62. 如請求項37至60中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y^L4係不存在或選自O、NH、NCH₃和C_1-6伸烷基。
63. 如請求項37至60中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y^L4係不存在或選自O、NH和C_1-6伸烷基。
64. 如請求項37至62中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L4係任選地經1至3個選自R^M的基團取代的4至7員雜環基。
65. 如請求項37至62中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，W^L4係選自哌啶基和哌

    

    基，其各自任選地經1至3個選自R^M的基團取代。
66. 如請求項37至64中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，Y^L5係不存在或係C_1-6伸烷基。
67. 如請求項37至65中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R^M係C_1-4烷氧基、鹵素、或OH。
68. 如請求項37至65中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R^M係C_1-4烷氧基或OH。
69. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構表示：

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    或

    

    ，其中虛線表示PTM和CLM的接附點。
70. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構所示：

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    或

    

    ，其中虛線表示 PTM和CLM的接附點。
71. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構所示：

    

    

    

    

    

    

    

    或

    

    ，其中虛線表示PTM和CLM的接附點。
72. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構所示：

    

    

    

    

    

    

    或

    

    ，其中虛線表示 PTM和CLM的接附點。
73. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構所示：

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    或

    

    ，其中虛線表示 與PTM的接附點和

    

    表示與CLM的接附點。
74. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構所示：

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    、

    

    或

    

    ，其中虛線表示與PTM的接附點和

    

    表示與CLM的接 附點。
75. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構所示：

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    或

    

    ，其中虛線表示與PTM的接附點和

    

    表示與CLM的 接附點。
76. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構所示：

    

    

    

    

    

    

    

    

    或

    

    ，其中虛線表示 與PTM的接附點和

    

    表示與CLM的接附點。
77. 如請求項1至36中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，所述化學連接部分(L)係由下述結構所示：

    

    

    

    

    

    

    或

    

    ，其中虛線表示 與PTM的接附點和

    

    表示與CLM的接附點。
78. 如請求項1所述之化合物，其中，所述化合物選自實施例1-5、實施例73-82、實施例176-180、實施例247-250或來自表1中的那些；或其藥學上可接受的鹽。
79. 如請求項1所述之化合物，其中，所述化合物選自實施例1-5、實施例73-82、實施例176-180或來自表1中的那些；或其藥學上可接受的鹽。
80. 如請求項1所述之化合物，其中，所述化合物選自實施例1-5、實施例73-82或來自表1中的那些；或其藥學上可接受的鹽。
81. 如請求項1所述之化合物，其中，所述化合物選自實施例1-5或來自表1中的那些；或其藥學上可接受的鹽。
82. 如請求項1所述之化合物，其中，所述化合物選自實施例73-82或來自表1中的那些；或其藥學上可接受的鹽。
83. 一種藥物組成物，其包含如請求項1至81中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽；以及藥學上可接受的載體。
84. 一種治療有需要的受試者的RAF相關病症的方法，其包含向所述受試者給藥治療有效量的如請求項1至81中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，或如請求項82所述的藥物組成物。
85. 如請求項83所述之方法，其中，所述RAF相關病症係癌症。
86. 如請求項84所述之方法，其中，所述癌症係選自腦癌、眼癌、乳癌、攝護腺癌、口腔癌、卵巢癌、大腸直腸癌、肺癌、肝癌、子宮內膜癌、膽管癌、子宮內膜癌、淋巴癌癌症、胃癌、食道癌、生殖癌、甲狀腺癌、皮膚癌和血癌。
87. 如請求項84或85所述之方法，其中，所述癌症係肺癌、皮膚癌或大腸直腸癌。
88. 如請求項86所述之方法，其中，所述肺癌係非小細胞肺癌。
89. 如請求項86所述之方法，其中，所述皮膚癌係黑素瘤。