RU2721417C2 - Адъювантная композиция, содержащая алюминий, и содержащая ее вакцинная композиция - Google Patents
Адъювантная композиция, содержащая алюминий, и содержащая ее вакцинная композиция Download PDFInfo
- Publication number
- RU2721417C2 RU2721417C2 RU2017146055A RU2017146055A RU2721417C2 RU 2721417 C2 RU2721417 C2 RU 2721417C2 RU 2017146055 A RU2017146055 A RU 2017146055A RU 2017146055 A RU2017146055 A RU 2017146055A RU 2721417 C2 RU2721417 C2 RU 2721417C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- aluminum
- acid
- antigen
- sensitive
- substance
- Prior art date
Links
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 294
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 292
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 233
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 title claims abstract description 112
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title description 75
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 284
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 233
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 233
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 233
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 124
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 108
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 claims abstract description 96
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims abstract description 95
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 80
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 65
- -1 sorbitan ester Chemical class 0.000 claims abstract description 62
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 61
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 claims abstract description 51
- RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N ursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N 0.000 claims abstract description 48
- 229960001661 ursodiol Drugs 0.000 claims abstract description 48
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 46
- VTAJIXDZFCRWBR-UHFFFAOYSA-N Licoricesaponin B2 Natural products C1C(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)CC1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O VTAJIXDZFCRWBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- 239000001685 glycyrrhizic acid Substances 0.000 claims abstract description 45
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 claims abstract description 45
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 claims abstract description 45
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 claims abstract description 45
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 40
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims abstract description 40
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 37
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 34
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 claims abstract description 31
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 claims abstract description 30
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 claims abstract description 30
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 claims abstract description 30
- MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 18beta-glycyrrhetic acid Chemical compound C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims abstract description 24
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 23
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 22
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims abstract description 22
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 claims abstract description 21
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 20
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 claims abstract description 20
- RZRNAYUHWVFMIP-KTKRTIGZSA-N 1-oleoylglycerol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(O)CO RZRNAYUHWVFMIP-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 230000014102 antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 claims abstract description 18
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 claims abstract description 18
- OQQOAWVKVDAJOI-UHFFFAOYSA-N (2-dodecanoyloxy-3-hydroxypropyl) dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCC OQQOAWVKVDAJOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N chenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 229960001091 chenodeoxycholic acid Drugs 0.000 claims abstract description 17
- WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N glycodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N 0.000 claims abstract description 17
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 claims abstract description 16
- 108010035713 Glycodeoxycholic Acid Proteins 0.000 claims abstract description 16
- WVULKSPCQVQLCU-UHFFFAOYSA-N Glycodeoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WVULKSPCQVQLCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 claims abstract description 16
- RZRNAYUHWVFMIP-HXUWFJFHSA-N glycerol monolinoleate Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)CO RZRNAYUHWVFMIP-HXUWFJFHSA-N 0.000 claims abstract description 16
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 15
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 claims abstract description 12
- MPDGHEJMBKOTSU-UHFFFAOYSA-N Glycyrrhetinsaeure Natural products C12C(=O)C=C3C4CC(C)(C(O)=O)CCC4(C)CCC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC(O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229960003720 enoxolone Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 40
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-(octadecanoyloxy)propyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- DGABKXLVXPYZII-UHFFFAOYSA-N Hyodeoxycholic acid Natural products C1C(O)C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 DGABKXLVXPYZII-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- DGABKXLVXPYZII-SIBKNCMHSA-N hyodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1[C@@H](O)C2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 DGABKXLVXPYZII-SIBKNCMHSA-N 0.000 claims description 17
- 229940074045 glyceryl distearate Drugs 0.000 claims description 14
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 claims description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 6
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 abstract description 70
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 29
- AFSHUZFNMVJNKX-UHFFFAOYSA-N 1,2-di-(9Z-octadecenoyl)glycerol Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC AFSHUZFNMVJNKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- AFSHUZFNMVJNKX-LLWMBOQKSA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycerol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC AFSHUZFNMVJNKX-LLWMBOQKSA-N 0.000 abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- UHUSDOQQWJGJQS-UHFFFAOYSA-N glycerol 1,2-dioctadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC UHUSDOQQWJGJQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 97
- 230000006870 function Effects 0.000 description 80
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 74
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 58
- FVXDQWZBHIXIEJ-LNDKUQBDSA-N 1,2-di-[(9Z,12Z)-octadecadienoyl]-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC FVXDQWZBHIXIEJ-LNDKUQBDSA-N 0.000 description 52
- 238000000034 method Methods 0.000 description 52
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 41
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 40
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 38
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 35
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 33
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 31
- 230000034217 membrane fusion Effects 0.000 description 31
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 30
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 27
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 24
- GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J potassium aluminium sulfate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 23
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 22
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 21
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 20
- 229940103272 aluminum potassium sulfate Drugs 0.000 description 19
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 19
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 18
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 18
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 18
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 17
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 17
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 17
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 16
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 16
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 16
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 16
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 15
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 15
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 15
- MLKLDGSYMHFAOC-AREMUKBSSA-N 1,2-dicapryl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCC MLKLDGSYMHFAOC-AREMUKBSSA-N 0.000 description 13
- 101000609767 Dromaius novaehollandiae Ovalbumin Proteins 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 13
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 13
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 13
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 13
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 13
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 12
- VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K aluminium trichloride Chemical compound Cl[Al](Cl)Cl VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 12
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 12
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 12
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 11
- NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N Sorbitan monooleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N 0.000 description 11
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 11
- 230000008859 change Effects 0.000 description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 11
- 235000011078 sorbitan tristearate Nutrition 0.000 description 11
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 11
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 11
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 11
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 11
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 10
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 10
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 10
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 10
- IYFATESGLOUGBX-YVNJGZBMSA-N Sorbitan monopalmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O IYFATESGLOUGBX-YVNJGZBMSA-N 0.000 description 10
- IJCWFDPJFXGQBN-RYNSOKOISA-N [(2R)-2-[(2R,3R,4S)-4-hydroxy-3-octadecanoyloxyoxolan-2-yl]-2-octadecanoyloxyethyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IJCWFDPJFXGQBN-RYNSOKOISA-N 0.000 description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 10
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 10
- 229940074049 glyceryl dilaurate Drugs 0.000 description 10
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 10
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 9
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 9
- 230000004719 natural immunity Effects 0.000 description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 9
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 8
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 8
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 7
- HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N Sorbitan monostearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 7
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 6
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 6
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 6
- KUVAEMGNHJQSMH-UHFFFAOYSA-N (3-dodecanoyloxy-2-hydroxypropyl) dodecanoate Chemical group CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCC KUVAEMGNHJQSMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 1,1-difluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)CCCCC1 ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 4
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 4
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 4
- DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H aluminium sulfate (anhydrous) Chemical compound [Al+3].[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 4
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 4
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 235000011069 sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 4
- 239000001593 sorbitan monooleate Substances 0.000 description 4
- 229940035049 sorbitan monooleate Drugs 0.000 description 4
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 3
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 3
- AZLIXMDAMOHKAG-CVBJKYQLSA-N OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O Chemical compound OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O AZLIXMDAMOHKAG-CVBJKYQLSA-N 0.000 description 3
- 108010075205 OVA-8 Proteins 0.000 description 3
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 3
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 3
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 3
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 3
- 101710123661 Venom allergen 5 Proteins 0.000 description 3
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical compound [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000011126 aluminium potassium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 3
- 229940050271 potassium alum Drugs 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- 210000000605 viral structure Anatomy 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 3
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFSHUZFNMVJNKX-CLFAGFIQSA-N 1,2-dioleoylglycerol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC AFSHUZFNMVJNKX-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 2
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QHZLMUACJMDIAE-UHFFFAOYSA-N 1-monopalmitoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO QHZLMUACJMDIAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJFVSSZAOYLHEE-UHFFFAOYSA-N 2,3-di(dodecanoyloxy)propyl 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCC IJFVSSZAOYLHEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100027211 Albumin Human genes 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 206010004593 Bile duct cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 2
- 241000218645 Cedrus Species 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 2
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000010956 Glypican Human genes 0.000 description 2
- 108050001154 Glypican Proteins 0.000 description 2
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 2
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 2
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 206010023825 Laryngeal cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 2
- 206010062038 Lip neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- 208000032271 Malignant tumor of penis Diseases 0.000 description 2
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 description 2
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 235000021360 Myristic acid Nutrition 0.000 description 2
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N Myristic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methyl-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound OCC(CO)(CO)NCCS(O)(=O)=O JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 208000002471 Penile Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010034299 Penile cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 2
- 208000009565 Pharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010034811 Pharyngeal cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 2
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 2
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000033781 Thyroid carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000003911 Thyrotropin Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000253 Thyrotropin Receptors Proteins 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N benzyl benzoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000026900 bile duct neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N dodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCO LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012645 endogenous antigen Substances 0.000 description 2
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 2
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 2
- 201000005619 esophageal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- XIRNKXNNONJFQO-UHFFFAOYSA-N ethyl hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC XIRNKXNNONJFQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MMXKVMNBHPAILY-UHFFFAOYSA-N ethyl laurate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC MMXKVMNBHPAILY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MMKRHZKQPFCLLS-UHFFFAOYSA-N ethyl myristate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC MMKRHZKQPFCLLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MVLVMROFTAUDAG-UHFFFAOYSA-N ethyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC MVLVMROFTAUDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000007487 gallbladder carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 125000003976 glyceryl group Chemical group [H]C([*])([H])C(O[H])([H])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 201000011066 hemangioma Diseases 0.000 description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- BTFJIXJJCSYFAL-UHFFFAOYSA-N icosan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO BTFJIXJJCSYFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 206010023841 laryngeal neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 201000006721 lip cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- UQDUPQYQJKYHQI-UHFFFAOYSA-N methyl laurate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC UQDUPQYQJKYHQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 2
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000011682 nervous system cancer Diseases 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920006289 polycarbonate film Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- ZNJHFNUEQDVFCJ-UHFFFAOYSA-M sodium;2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].OCCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 ZNJHFNUEQDVFCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000013077 thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 2
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 208000010570 urinary bladder carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010046885 vaginal cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000013139 vaginal neoplasm Diseases 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZQBULZYTDGUSSK-UHFFFAOYSA-N (3-hydroxy-2-octanoyloxypropyl) octanoate Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(=O)CCCCCCC ZQBULZYTDGUSSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IJFVSSZAOYLHEE-SSEXGKCCSA-N 1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCC IJFVSSZAOYLHEE-SSEXGKCCSA-N 0.000 description 1
- MMKBQSJLLGHVIM-UHFFFAOYSA-L 1-[[4-(pyridin-1-ium-1-ylmethyl)phenyl]methyl]pyridin-1-ium;dibromide Chemical compound [Br-].[Br-].C=1C=CC=C[N+]=1CC(C=C1)=CC=C1C[N+]1=CC=CC=C1 MMKBQSJLLGHVIM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 1-dodecoxydodecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCCCCCCCCCCC CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ARIWANIATODDMH-AWEZNQCLSA-N 1-lauroyl-sn-glycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)CO ARIWANIATODDMH-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- HBXWUCXDUUJDRB-UHFFFAOYSA-N 1-octadecoxyoctadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCCCCCCCCCCCCCCCCCC HBXWUCXDUUJDRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-M 2-(N-morpholino)ethanesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)CCN1CCOCC1 SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[[6-amino-2-[[2-[[2-[[5-amino-2-[[2-[[1-[2-[[6-amino-2-[(2,5-diamino-5-oxopentanoyl)amino]hexanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)p Chemical compound C1CCN(C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CCC(N)=O)C1C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AKVBCGQVQXPRLD-UHFFFAOYSA-N 2-aminooctanoic acid Chemical compound CCCCCCC(N)C(O)=O AKVBCGQVQXPRLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 2-cyanobenzohydrazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=CC=C1C#N TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEBDGRTWECSNNT-UHFFFAOYSA-N 2-methylidenepentanoic acid Chemical compound CCCC(=C)C(O)=O HEBDGRTWECSNNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 229910017119 AlPO Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 101100446590 Arabidopsis thaliana FIM5 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000712891 Arenavirus Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 229920001342 Bakelite® Polymers 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011814 C57BL/6N mouse Methods 0.000 description 1
- SYDHWDWHCQPIOC-UHFFFAOYSA-N CCCCCCCC(=O)OC.CCCCCCC(C)C(O)=O Chemical compound CCCCCCCC(=O)OC.CCCCCCC(C)C(O)=O SYDHWDWHCQPIOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 1
- LKUNXBRZDFMZOK-GFCCVEGCSA-N Capric acid monoglyceride Natural products CCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)CO LKUNXBRZDFMZOK-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 description 1
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 1
- 108010009685 Cholinergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 241001337994 Cryptococcus <scale insect> Species 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001815 DL-alpha-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011627 DL-alpha-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000001809 DL-alpha-tocopherylacetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011626 DL-alpha-tocopherylacetate Substances 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 208000019872 Drug Eruptions Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 101001065501 Escherichia phage MS2 Lysis protein Proteins 0.000 description 1
- KGWDUNBJIMUFAP-KVVVOXFISA-N Ethanolamine Oleate Chemical compound NCCO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O KGWDUNBJIMUFAP-KVVVOXFISA-N 0.000 description 1
- 101150106011 FIM2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150048576 FIM3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 101710154643 Filamentous hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 101710113436 GTPase KRas Proteins 0.000 description 1
- 102100039788 GTPase NRas Human genes 0.000 description 1
- 102000008214 Glutamate decarboxylase Human genes 0.000 description 1
- 108091022930 Glutamate decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 239000006173 Good's buffer Substances 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 241000589989 Helicobacter Species 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 1
- 101000851181 Homo sapiens Epidermal growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000744505 Homo sapiens GTPase NRas Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001073409 Homo sapiens Retrotransposon-derived protein PEG10 Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 206010021074 Hypoplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 241000710842 Japanese encephalitis virus Species 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N L-ascorbyl-6-palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N 0.000 description 1
- 239000011786 L-ascorbyl-6-palmitate Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ARIWANIATODDMH-UHFFFAOYSA-N Lauric acid monoglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO ARIWANIATODDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222722 Leishmania <genus> Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000209082 Lolium Species 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 101710085938 Matrix protein Proteins 0.000 description 1
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 1
- 101710127721 Membrane protein Proteins 0.000 description 1
- ILRKKHJEINIICQ-OOFFSTKBSA-N Monoammonium glycyrrhizinate Chemical compound N.O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C=C4[C@@H]5C[C@](C)(CC[C@@]5(CC[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2C1(C)C)C)C(O)=O)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O ILRKKHJEINIICQ-OOFFSTKBSA-N 0.000 description 1
- 101001044384 Mus musculus Interferon gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000047918 Myelin Basic Human genes 0.000 description 1
- 101710107068 Myelin basic protein Proteins 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- MXRIRQGCELJRSN-UHFFFAOYSA-N O.O.O.[Al] Chemical compound O.O.O.[Al] MXRIRQGCELJRSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000150452 Orthohantavirus Species 0.000 description 1
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 1
- 241000223960 Plasmodium falciparum Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 102100032709 Potassium-transporting ATPase alpha chain 2 Human genes 0.000 description 1
- 206010036774 Proctitis Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000004245 Proteasome Endopeptidase Complex Human genes 0.000 description 1
- 108090000708 Proteasome Endopeptidase Complex Proteins 0.000 description 1
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 1
- 108010010974 Proteolipids Proteins 0.000 description 1
- 102000016202 Proteolipids Human genes 0.000 description 1
- 108010083204 Proton Pumps Proteins 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100035844 Retrotransposon-derived protein PEG10 Human genes 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 235000004443 Ricinus communis Nutrition 0.000 description 1
- 241000606701 Rickettsia Species 0.000 description 1
- 241000242678 Schistosoma Species 0.000 description 1
- 108091058545 Secretory proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000040739 Secretory proteins Human genes 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004147 Sorbitan trioleate Substances 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 101000874347 Streptococcus agalactiae IgA FC receptor Proteins 0.000 description 1
- 239000007994 TES buffer Substances 0.000 description 1
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 1
- 208000008383 Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- NVANJYGRGNEULT-BDZGGURLSA-N [(3s,4r,5r)-4-hexadecanoyloxy-5-[(1r)-1-hexadecanoyloxy-2-hydroxyethyl]oxolan-3-yl] hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@H](CO)[C@H]1OC[C@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)[C@H]1OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC NVANJYGRGNEULT-BDZGGURLSA-N 0.000 description 1
- HTNVOHCAVLCTOK-PMGAGZRRSA-N [1-hydroxy-3-[(Z)-octadec-9-enoyl]oxypropan-2-yl] (Z)-20,21-dihydroxyhenicos-9-enoate Chemical compound C(C(O)CO)CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC(COC(CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)=O)CO HTNVOHCAVLCTOK-PMGAGZRRSA-N 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XGKPLOKHSA-N [2-[(2r,3r,4s)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XGKPLOKHSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 102000034337 acetylcholine receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010385 ascorbyl palmitate Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 159000000009 barium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 229960002903 benzyl benzoate Drugs 0.000 description 1
- 208000005980 beta thalassemia Diseases 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091022863 bile acid binding Proteins 0.000 description 1
- 102000030904 bile acid binding Human genes 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 201000001531 bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 229960001777 castor oil Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- DTPCFIHYWYONMD-UHFFFAOYSA-N decaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO DTPCFIHYWYONMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVPPCRBJTLKFPV-UHFFFAOYSA-N decanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.CCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCC(O)=O BVPPCRBJTLKFPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- QYDYPVFESGNLHU-UHFFFAOYSA-N elaidic acid methyl ester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OC QYDYPVFESGNLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000284 endotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002346 endotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 108700004025 env Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150030339 env gene Proteins 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 150000002168 ethanoic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- KQMHBTADAQTRHD-UHFFFAOYSA-N ethyl octanoate;2-ethyloctanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC.CCCCCCC(CC)C(O)=O KQMHBTADAQTRHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 229940067592 ethyl palmitate Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 208000024386 fungal infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 108700004026 gag Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150098622 gag gene Proteins 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 235000003969 glutathione Nutrition 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002314 glycerols Chemical class 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- 239000007986 glycine-NaOH buffer Substances 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- ZZVJLPROFSCODQ-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O ZZVJLPROFSCODQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000045108 human EGFR Human genes 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 208000033065 inborn errors of immunity Diseases 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 229940090044 injection Drugs 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 1
- 201000010666 keratoconjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- QYDYPVFESGNLHU-KHPPLWFESA-N methyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC QYDYPVFESGNLHU-KHPPLWFESA-N 0.000 description 1
- 229940073769 methyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000012737 microarray-based gene expression Methods 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 150000002759 monoacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 229940074096 monoolein Drugs 0.000 description 1
- 238000012243 multiplex automated genomic engineering Methods 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940039328 nanoparticle-based vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000002956 necrotizing effect Effects 0.000 description 1
- 108700004028 nef Genes Proteins 0.000 description 1
- 201000008026 nephroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- UQDVHJGNIFVBLG-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O UQDVHJGNIFVBLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIRLPEMNFBJPIT-UHFFFAOYSA-N odn 2395 Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(COP(O)(O)=O)C(OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O)C1 UIRLPEMNFBJPIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 108010021711 pertactin Proteins 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 108700004029 pol Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150088264 pol gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 208000028529 primary immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000009979 protective mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 1
- 208000028172 protozoa infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- LKUNXBRZDFMZOK-UHFFFAOYSA-N rac-1-monodecanoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO LKUNXBRZDFMZOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHBFNMLVSPCDGN-UHFFFAOYSA-N rac-1-monooctanoylglycerol Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC(O)CO GHBFNMLVSPCDGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000009342 ragweed pollen Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012429 release testing Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- IRHWMYKYLWNHTL-UHFFFAOYSA-M sodium 2-(N-morpholino)ethanesulfonate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CCN1CCOCC1 IRHWMYKYLWNHTL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 description 1
- VMSNAUAEKXEYGP-YEUHZSMFSA-M sodium glycodeoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 VMSNAUAEKXEYGP-YEUHZSMFSA-M 0.000 description 1
- WDFRNBJHDMUMBL-FUXQPCDDSA-M sodium;(4r)-4-[(3r,5s,7s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)CC1 WDFRNBJHDMUMBL-FUXQPCDDSA-M 0.000 description 1
- ZEDAGFBWUVYFQU-UHFFFAOYSA-M sodium;3-morpholin-4-ylpropane-1-sulfonate;hydrate Chemical compound [OH-].[Na+].OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 ZEDAGFBWUVYFQU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000011071 sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001570 sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 1
- 229940031953 sorbitan monopalmitate Drugs 0.000 description 1
- 235000011076 sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001587 sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 229940035048 sorbitan monostearate Drugs 0.000 description 1
- 235000019337 sorbitan trioleate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000391 sorbitan trioleate Drugs 0.000 description 1
- 239000001589 sorbitan tristearate Substances 0.000 description 1
- IJCWFDPJFXGQBN-BIFNRIDTSA-N sorbitan tristearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)[C@H]1OC[C@@H](O)[C@@H]1OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IJCWFDPJFXGQBN-BIFNRIDTSA-N 0.000 description 1
- 229960004129 sorbitan tristearate Drugs 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 239000008348 synthetic phosphatidyl choline Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 1
- 108010008775 thyroglobulin receptor Proteins 0.000 description 1
- AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N tocofersolan Chemical compound OCCOC(=O)CCC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229940121343 tricaprilin Drugs 0.000 description 1
- MAYCICSNZYXLHB-UHFFFAOYSA-N tricaproin Chemical compound CCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCC)COC(=O)CCCCC MAYCICSNZYXLHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLPFTAMPNXLGLX-UHFFFAOYSA-N trioctanoin Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC VLPFTAMPNXLGLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для получения адъювантной композиции. Адъювантная композиция включает pH-чувствительный носитель; и по меньшей мере одно вещество, выбранное из группы, состоящей из гидроксида алюминия и фосфата алюминия. В которой pH-чувствительный носитель содержит по меньшей мере одно pH-чувствительное соединение, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей. Где одно амфипатическое вещество, выбрано из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола. pH-чувствительный носитель демонстрирует эффект промотирования функции разрушения мембран. Алюминий-содержащее вещество содержится в количестве от 1 до 100 мкг, в расчете на металлический алюминий, на 100 нмоль амфипатического вещества. Группа изобретений относится также к композиции, содержащей указанный адъювант и антиген. Использование данной группы изобретений позволяет получить к адъювант, который индуцирует клеточно-опосредованный иммунитет эффективно через кросс-презентацию антигена. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 7 пр., 2 табл., 11 ил.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
[0001]
Настоящее изобретение относится к адъювантной композиции, содержащей алюминий, и к содержащей ее вакцинной композиции.
Предпосылки создания изобретения
[0002]
Иммунная система представляет собой защитный механизм для защиты живого организма от заболеваний или т.п. путем исключения инородных веществ, аномальных клеток и т.д., проникающих в живой организм. Кроме того, адъювант представляет собой вещество, используемое для усиления эффекта вакцины.
[0003]
Как правило, функция иммунной системы проявляется через два типа механизмов, а именно, гуморальный иммунитет и клеточно-опосредованный иммунитет.
[0004]
Гуморальный иммунитет представляет собой механизм, центром которого является компонент, присутствующий в состоянии, растворенном в сыворотке, такой как антитело и комплемент. Индукция антитела является важной с точки зрения вакцины, и оно обычно экспрессируется следующим образом. Экзогенный антиген, такой как бактерии, который внедрился в живой организм, проникает в антиген-презентирующие клетки посредством эндоцитоза и он расщепляется и разлагается на пептидные фрагменты протеазой в эндосомах в антиген-презентирующих клетках. Пептидные фрагменты объединяются с молекулами класса II главного комплекса гистосовместимости (MHC). Образовавшийся комплекс презентируется CD4-положительным T-клеткам на поверхностях антиген-презентирующих клеток, таким образом, активируются CD4-положительные T-клетки. Затем активированные CD4-положительные T-клетки осуществляют высвобождение цитокина или т.п. и, в результате, антитело продуцируется из B-клеток. Следует отметить, что указанные выше молекулы MHC класса II экспрессируются как таковые в макрофагах, дендритных клетках, активированных T-клетках, B-клетках и т.п. Существует множество адъювантов для усиления антигена, которые являются официально одобренными. Среди прочих, алюминий-содержащие вещества имеют давнюю историю и широко импользуются в всем мире. Их примеры включают гидроксид алюминия, фосфат алюминия, сульфат алюминия-калия (алюмокалиевые квасцы) и хлорид алюминия, которые также обобщенно называют ʺалюминиемʺ.
[0005]
С другой стороны, клеточно-опосредованный иммунитет представляет собой механизм, центром которого являются клетки, отвечающие за исключение инородных тел, такие как макрофаги, цитотоксические T-лимфоциты (CTL) и природные киллерные клетки. Индукция клеточно-опосредованного иммунитета привлекает большое внимание, с точки зрения иммунотерапии, из-за его способности исключать вирус-инфицированные клетки и раковые клетки. В частности реализация индукции CTL является ожидаемой, с точки зрения применения для иммунотерапии рака. Индукция CTL обычно проявляется следующим образом. Эндогенный антиген, такой как белок, который был образован в вирус-инфицированных клетках или раковых клетках, подвергается убиквитинированию и затем разлагается на пептид протеасомой. Пептид, образовавшийся в результате разложения, объединяется с молекулами MHC класса I. Образовавшийся комплекс презентируется CD8-положительным T-клеткам на поверхностях антиген-презентирующих клеток, таким образом, активируются CD8-положительные T-клетки. Затем активированные CD8-положительные T-клетки дифференцируются в цитотоксические T-лимфоциты (CTL). Следует отметить, что указанные выше молекулы MHC класса I существуют на клеточных поверхностях почти всех ядросодержащих клеток и тромбоцитов.
[0006]
В последние годы было осуществлено множество исследований так называемой кросс-презентации, которая положительно индуцирует CTL, используя экзогенные антигены. Более конкретно, экзогенный антиген разрагается в эндосомах в антиген-презентирующих клетках и затем объединяется с молекулами MHC класса II, как указано выше. Однако в кросс-презентации, даже когда часть экзогенного антигена проходит через клеточную мембрану или мембрану эндосомы таким образом, что он мигрирует в цитоплазматический субстрат, экзогенный антиген, который, таким образом, мигрировал в цитоплазматический субстрат, функционирует как эндогенный антиген, объединяясь в результате с молекулами MHC класса I, для индукции CTL.
[0007]
В кросс-презентации, необходимо, чтобы экзогенный антиген проходил через мембрану эндосом, и это тщательно исследовали. Например, Bioconjug. Chem. 2009 Feb. 20(2): 241-248 указывает, что pH-чувствительный поли(пропилакриловая кислота) (PPAA) конъюгат эффективно транспортирует антиген в цитоплазматический субстрат. Кроме того, Immune Netw. 2013 Oct 13(5) 177-183 описывает доставку вакцины на основе наночастиц для иммунотерапии рака.
[0008]
Что касается адъюванта для усиления клеточно-опосредованного иммунитета, в настоящее время не существует ни одного, который был бы официально одобрен, и предпринимаются попытки поиска вещества или материала, нового способа синтеза, использования вирусного компонента, и т.п. Сообщалось о том, что адъюванты для усиления антител, такие как алюминий-содержащие вещества, к сожалению не обладают эффектом усиления клеточно-опосредованного иммунитета (Immunology and ell Biology 2004 82, 497-505).
Сущность изобретения
[0009]
Существует огромное желание осуществить индукцию клеточно-опосредованного иммунитета, такого как CTL, с точки зрения разработки вакцин для терапии, и осуществляются интенсивные исследования для поиска адъювантных молекул и промотирования кросс-презентации. Однако достигнутые к настоящему времени эффекты для реализации индукции недостаточны.
[0010]
Кроме того, поскольку для большинства исследований используют новые синтетические материалы или вирусные компоненты, существуют опасения, связанные с безопасностью.
[0011]
Соответственно, целью настоящего изобретения является получение адъюванта, который является высокобезопасным и эффективно индуцирует клеточно-опосредованный иммунитет через кросс-презентацию.
[0012]
Автором настоящего изобретения были осуществлены экстенсивные и интенсивные исследования, в результате которых было обнаружено, что указанная выше цель может достигаться с использованием pH-чувствительного носителя совместно с алюминий-содержащим веществом в качестве вещества, обладающего стимулами, которые активируют природный иммунитет (далее иногда указано как ʺприродный иммунитет-активирующее веществоʺ). На основе этого открытия было создано настоящее изобретение.
[0013]
В частности, указанная выше цель настоящего изобретения достигается следующими средствами.
[0014]
(1) Адъювантная композиция, включающая:
pH-чувствительный носитель; и
алюминий-содержащее вещество;
(2) Адъювантная композиция, описанная в (1), в которой алюминий-содержащее вещество представляет собой по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из гидроксида алюминия и фосфата алюминия;
(3) Адъювантная композиция, описанная в (1) или (2),
в которой pH-чувствительный носитель содержит
по меньшей мере одно pH-чувствительное соединение, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей, и
по меньшей мере одно амфипатическое вещество, выбранное из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и
pH-чувствительный носитель демонстрирует эффект промотирования функции разрушения мембран;
(4) Адъювантная композиция, описанная в (3), в которой алюминий-содержащее веществ содержится в количестве от 1 до 1000 мкг, в расчете на металлический алюминий, на 100 нмоль амфипатического вещества;
(5) Адъювантная композиция, описанная в (3) или (4), в которое pH-чувствительное соединение содержится в пропорции не меньше чем 10 моль на 100 моль амфипатического вещества;
(6) Вакцинная композиция, включающая:
адъювантную композицию, описанную в (1) или (2), и;
антиген;
(7) Вакцинная композиция, включающая:
адъювантную композицию, описанную в любом из (3) - (5); и
антиген;
(8) Вакцинная композиция, описанная в (7), в которой содержание антигена составляет 3,2-400 мкг на 100 нмоль амфипатического вещества;
(9) Вакцинная композиция, описанная в любом из (6) - (8), в которой антиген представляет собой пептид или белок;
(10) Способ получения адъювантной композиции, включающий стадию приведения в ассоциацию друг с другом
по меньшей мере одного pH-чувствительного соединения, выбранного из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислот,ы глицирретиновой кислоты и их солей,
по меньшей мере одного амфипатического вещества, выбранного из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и
алюминий-содержащего вещества; и
(11) Способ получения вакцинной композиции, включающий:
стадию приведения в ассоциацию друг с другом
по меньшей мере одного pH-чувствительного соединения, выбранного из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей,
по меньшей мере одного амфипатического вещества, выбранного из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и
алюминий-содержащего вещества; и
стадию смешивания антигена с ассоциированным веществом, полученным путем ассоциации.
Краткое описание чертежей
[0015]
[Фиг. 1]
Фиг. 1 представляет схематическую диаграмму адъювантной композиции и включающей ее вакцинной композиции в соответствии с одним вариантом осуществления настоящего изобретения.
[Фиг. 2]
Фиг. 2 представляет диаграмму, показывающую результаты оценки индукции клеточно-опосредованного иммунитета (CTL) для композиций вакцины и сравнительных образцов (композиций) методом иммуноферментных пятен (ELIspot). Клетки, которые реагировали с SIINFEKL, который представляет собой MHC класса I связывающий пептид, для продукции IFNγ, определяли по образованию пятна. Результаты представлены для случаев, где иммунизацию осуществляли с использованием композиции, полученной с использованием (A) антигена только, (B) смеси антигена и токоферола, (C) смеси антигена и токоферолацетата, (D) смеси антигена и алюминия, (E) смеси антигена, токоферола и pH-чувствительного носителя, (F) смеси антигена, токоферолацетата и pH-чувствительного носителя и (G) смеси антигена, алюминия и pH-чувствительного носителя. Гидроксид алюминия использовали в качестве алюминия, и комплекс DLPC и дезоксихолевой кислоты использовали в качестве pH-чувствительного носителя.
[Фиг. 3]
Фиг. 3 представляет диаграмму, показывающую результаты сравнения с CpG-ODN и оценки антиген-специфичности индуцированного клеточно-опосредованного иммунитета методом иммуноферментных пятен. Результаты случаев, где иммунизацию осуществляли с использованием композиции, полученной с использованием (A) смеси антигена и алюминия, (B) смеси антигена, алюминия и pH-чувствительного носителя и (C) смеси антигена и CpG-ODN. Результат для (D) представляет собой результат иммунизации мыши с использованием композиции, полученной путем смешивания антигена, алюминия и pH-чувствительного носителя, с попыткой образования пятна без добавления пептида SIINFEKL. Гидроксид алюминия использовали в качестве алюминия, и комплекс DLPC и дезоксихолевой кислоты использовали в качестве pH-чувствительного носителя.
[Фиг. 4]
Фиг. 4 представляет диаграмму, показывающую результаты исследования количества алюминия, необходимого для индукции клеточно-опосредованного иммунитета, методом иммуноферментных пятен. При каждой оценке комплекс 100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты использовали в качестве pH-чувствительного носителя, и гидроксид алюминия использовали в качестве алюминия. Результаты представлены для случаев, где иммунизацию осуществляли с использованием композиции, полученной с использованием (A) антигена только, (B) смеси антигена и 10 мкг алюминия, (C) смеси антигена, 100 мкг алюминия и pH-чувствительного носителя, (D) смеси антигена, 10 мкг алюминия и pH-чувствительного носителя, (E) смеси антигена, 1 мкг алюминия и pH-чувствительного носителя и (F) смеси антигена, 0,1 мкг алюминия и pH-чувствительного носителя.
[Фиг. 5]
Фиг. 5 представляет диаграмму, показывающую результаты исследования количества pH-чувствительного носителя, необходимого для индукции клеточно-опосредованного иммунитета, методом иммуноферментных пятен. В качестве pH-чувствительного носителя, комплекс 100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты использовали в качестве эталона, и жидкости, полученные путем разбавления комплекса до предварительно определенных концентраций, каждую использовали для оценки. Гидроксид алюминия использовали в качестве алюминия. Результаты представлены для случаев, где иммунизацию осуществляли с использованием композиции, полученной с использованием (A) антигена только, (B) смеси антигена и алюминия, (C) смеси антигена, алюминия и pH-чувствительного носителя, (D) смеси антигена, алюминия и 10-кратно разбавленного pH-чувствительного носителя, (E) смеси антигена, алюминия и 100-кратно разбавленного pH-чувствительного носителя и (F) антигена, алюминия и 1000-кратно разбавленного pH-чувствительного носителя.
[Фиг. 6]
Фиг. 6 представляет диаграмму, показывающую результаты подтверждения индукции гуморального иммунитета путем совместного использования алюминия и pH-чувствительного носителя. Индукцию гуморального иммунитета оценивали на основе титра IgG антител.
[Фиг. 7]
Фиг. 7 представляет диаграмму, показывающую результаты исследования типа алюминия, подходящего в качестве элемента вакцинной композиции для индукции клеточно-опосредованного иммунитета, методом иммуноферментных пятен. При каждой оценке, комплекс 100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты использовали в качестве pH-чувствительного носителя, и гидрид алюминия использовали в качестве алюминия. Результаты представлены для случаев, где иммунизацию осуществляли с использованием композиции, полученной с использованием (A) смеси антигена и 10 мкг фосфата алюминия, (B) смеси антигена, 1 мкг фосфата алюминия и pH-чувствительного носителя, (C) смеси антигена, 0,1 мкг фосфата алюминия и pH-чувствительного носителя, (D) смеси антигена и 10 мкг сульфата алюминия-калия, (E) смеси антигена, 1 мкг сульфата алюминия-калия и pH-чувствительного носителя и (F) смеси антигена, 0,1 мкг сульфата алюминия-калия и pH-чувствительного носителя.
[Фиг. 8]
Фиг. 8 представляет диаграмму, показывающую результаты оценки влияния алюминия на эффект pH-чувствительного носителя промотирования функции разрушения мембран, в случае смеси алюминия и pH-чувствительного носителя. (A) показывает результаты оценки типа алюминия, и (B) показывает результаты оценки количества алюминия.
[Фиг. 9]
Фиг. 9 представляет диаграмму, показывающую результаты исследования влияния алюминия на эффект pH-чувствительного носителя промотирования функции разрушения мембран.
[Фиг. 10]
Фиг. 10 представляет диаграмму, показывающую результаты оценки влияния алюминия на эффект pH-чувствительного носителя промотирования функции разрушения мембран, в случае варьирования композиции pH-чувствительного носителя, в частности, количества дезоксихолевой кислоты. (A) показывает результаты исследования для диапазона, в котором количество дезоксихолевой кислоты составляло от 0 до 640 нмоль, и (B) представляет расширенную диаграмму для диапазона от 0 до 100 нмоль.
[Фиг. 11]
Фиг. 11 представляет диаграмму, показывающую результаты оценки методом иммуноферментных пятен индукции клеточно-опосредованного иммунитета композицией вакцины при использовании внутрикожного пути введения. При каждой оценке, комплекс 100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты использовали в качестве pH-чувствительного носителя, и гидроксид алюминия использовали в качестве алюминия. (A) показывает результаты подкожного введения композиции, полученной путем смешивания антигена и алюминия, (B) показывает результаты подкожного введения композиции, полученной путем смешивания антигена, алюминия и pH-чувствительного носителя, (C) показывает результаты внутрикожного введения композиции, полученной путем смешивания антигена и алюминия, (D) показывает результаты внутрикожного введения композиции, полученной путем смешивания антигена, алюминия и pH-чувствительного носителя. Кроме того, (E) - (H) показывают результаты оценки антиген-специфичности как попытки осуществления образования пятна без добавления пептида SIINFEKL. (E) показывает результаты подкожного введения композиции, полученной путем смешивания антигена и алюминия, (F) показывает результаты подкожного введения композиции, полученной путем смешивания антигена, алюминия и pH-чувствительного носителя, (G) показывает результаты внутрикожного введения композиции, полученной путем смешивания антигена и алюминия, и (H) показывает результаты внутрикожного введения композиции, полученной путем смешивания антигена, алюминия и pH-чувствительного носителя.
Способы осуществления изобретения
[0016]
В соответствии с одним аспектом, настоящее изобретение относится к адъювантной композиции, которая включает pH-чувствительный носитель и алюминий-содержащее вещество. В соответствии с указанной выше адъювантной композицией, изобретение относится к адъюванту, который может эффективно индуцировать клеточно-опосредованный иммунитет через кросс-презентацию. Кроме того, в соответствии с адъювантной композицией, изобретение относится к адъюванту, являющемуся высокобезопасным.
[0017]
<Адъювантная композиция>
Адъювантная композиция в соответствии с настоящим аспектом включает pH-чувствительный носитель (далее иногда просто указан как ʺносительʺ, ʺассоциированное веществоʺ или ʺкомплексʺ) и алюминий-содержащее вещество. В частности, адъювантная композиция в соответствии с настоящим аспектом включает алюминий-содержащее вещество в качестве вещества, обладающего стимулом, который активирует природный иммунитет (природный иммунитет-активирующее вещество).
[0018]
В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления, адъювантная композиция в соответствии с настоящим аспектом включает pH-чувствительный носитель, алюминий-содержащее вещество и водный растворитель. Поэтому адъювантная композиция в соответствии с настоящим аспектом предпочтительно находится в форме, в которой pH-чувствительный носитель и алюминий-содержащее вещество диспергированы в водном растворителе.
[0019]
Кроме того, в соответствии с предпочтительным вариантом осуществления, в адъювантной композиции в соответствии с настоящим аспектом pH-чувствительный носитель включает: по меньшей мере одно pH-чувствительное соединение, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей; и по меньшей мере одно амфипатическое вещество, выбранное из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и обеспечивает эффект промотирования функции разрушения мембран.
[0020]
Хотя настоящий вариант осуществления будет описан ниже со ссылкой на чертежи, технический объем настоящего изобретения должен определяться на основе описания в формуле изобретения и не ограничивается только следующими вариантами осуществления. Следует отметить, что размерные отношения на чертежах увеличены для удобства объяснения и могут отличаться от действительных отношений.
[0021]
Кроме того, процедуры и измерение физических свойств и т.п. осуществляли в условиях комнатной температуры (20°C - 25°C) и относительной влажности 40%RH - 50%RH, если не указано иное.
[0022]
Фиг. 1 представляет схематическую диаграмму адъювантной композиции и вакцинной композиции в соответствии с одним вариантом осуществления настоящего изобретения.
[0023]
В соответствии с Фиг. 1, адъювантная композиция 4 содержит амфипатическое вещество 1, pH-чувствительное соединение 2 и алюминий-содержащее вещество 3, которое представляет собой вещество, обладающее стимулом, который активирует природный иммунитет. Как проиллюстрировано в Фиг. 1, в соответствии с одним вариантом осуществления, алюминий-содержащее вещество 3 вступает в ассоциацию с гидрофобной частью, образующей амфипатическое вещество 1, вместе с pH-чувствительным соединением 2. В этом случае, адъювантная композиция 4 может называться адъювантым комплексом. Кроме того, в соответствии с другим вариантом осуществления, алюминий-содержащее вещество 3 существует независимо от pH-чувствительного носителя, который включает амфипатическое вещество 1 и pH-чувствительное соединение 2.
[0024]
Кроме того, вакцинная композиция 6 включает адъювантную композицию 4 и антиген 5. Как показано на Фиг. 1, антиген 5 может быть включен, либо может существовать независимо, в адъювантную композицию 4, в соответствии с указанными выше двумя вариантами осуществления. Из них, вакцинная композиция 6, в которой антиген 5 включен в адъювантый комплекс 4, также может называться вакцинным комплексом.
[0025]
ʺАдъювантная композицияʺ здесь означает композицию, включающую pH-чувствительный носитель и алюминий-содержащее вещество, и ее форма конкретно не ограничивается. Иными словами, ʺадъювантная композицияʺ может представлять собой композицию, полученную путем смешивания pH-чувствительного носителя и алюминий-содержащего вещества, или может представлять собой композицию, в которой алюминий-содержащее вещество нанесено на или включено в pH-чувствительный носитель (адъювантный комплекс), и оба этих типа композиций обобщенно указаны в настоящей заявке как ʺадъювантная композицияʺ.
[0026]
Кроме того, ʺвакцинная композицияʺ здесь означает композицию, включающую адъювантную композицию и антиген, и ее форма конкретно не ограничивается. Иными словами, ʺвакцинная композицияʺ может представлять собой композицию, в которой два или более, выбранных из группы, состоящей из компонентов адъювантной композиции, и антиген смешаны вместе, или может представлять собой композицию, в которой антиген нанесен на или включен в адъювантный комплекс (вакцинный комплекс), и оба этих типа композиций обобщенно указаны в настоящей заявке как ʺвакцинная композицияʺ.
[0027]
[pH-чувствительный носитель]
pH-чувствительный носитель чувствителен к pH и обладает такой функцией, что он способен транспортировать антиген в клетках в цитоплазматический субстрат при доведении pH до кислотного диапазона.
[0028]
Хотя pH-чувствительный носитель конкретно не ограничивается, он предпочтительно является таким, который включает по меньшей мере одно pH-чувствительное соединение, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей, и по меньшей мере одно амфипатическое вещество, выбранное из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и который демонстрирует эффект промотирования функции разрушения мембран. Следует отметить, что ʺколичество углеродовʺ, используемое здесь для амфипатического вещества, означает количество атомов углерода в жирнокислотном компоненте (ацильная группа), образующем гидрофобную часть амфипатического вещества.
[0029]
pH-чувствительный носитель, который включает pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество и который демонстрирует эффект промотирования функции разрушения мембран, будет описан подробно ниже.
[0030]
Следует отметить, что в качестве pH-чувствительного носителя в соответствии с настоящим аспектом можно таким же образом использовать ʺpH-чувствительный носительʺ, описанный в Международной публикации № WO2013/180253, поданной 24 мая 2013 года.
[0031]
(Структура pH-чувствительного носителя)
Считается, что pH-чувствительный носитель образуется в результате ассоциации между pH-чувствительным соединением и амфипатическим веществом при физиологическом pH или выше. Более конкретно, считается, что pH-чувствительный носитель образуется, когда pH-чувствительное соединение вступает в ассоциацию с гидрофобной частью амфипатического вещества. Следует отметить, что форма ассоциации pH-чувствительного носителя является предположительной, и pH-чувствительный носитель не ограничивается формой ассоциации.
[0032]
(Эффект промотирования функции разрушения мембран)
Термин ʺфункция разрушения мембранʺ означает функцию, обуславливающую высвобождение в испытании высвобождения. Испытание высвобождения, описанное в настоящей заявке, представляет собой испытание, состоящее из стадий добавления липосом (дисперсия), заключающих в себе водный раствор, содержащий гасящее вещество и флуоресцентное вещество, и дисперсии оцениваемого образца к водному раствору с соответственно доведенным pH, инкубации полученного водного раствора при 37°C в течение 90 минут или 30 минут и измерения интенсивности флуоресценции инкубированного водного раствора. Этот способ позволяет измерить количество флуоресцентного вещества, которое высвободилось из липосом, и подтвердить функцию разрушения мембран для pH-чувствительного носителя. Следует отметить, что испытание высвобождения будет описано более подробно в примерах ниже.
[0033]
Термин ʺдемонстрировать эффект промотирования функции разрушения мембраныʺ означает, что следующие два условия удовлетворяются одновременно.
(1) Испытание высвобождения показывает, что просачивание при заданном pH (ниже чем физиологический pH) выше, чем при физиологическом pH, и величина увеличения больше, чем наблюдаемая в эксперименте, который осуществляют только с pH-чувствительным соединением.
(2) Испытание высвобождения при заданном pH ниже физиологического pH показывает, что просачивание в случае, когда pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество образуют комплекс (pH-чувствительный носитель), больше, чем сумма просачивания при использовании только pH-чувствительного соединения и просачивания при использовании только амфипатического вещества. Более конкретно, термин ʺдемонстрировать эффект промотирования функции разрушения мембранʺ означает следующее: испытание высвобождения при pH 7,4 и pH 5,0 или pH 4,5 показывает, что взаимосвязь между La, Lb и Lc существует, как показано следующими двумя формулами, где La представляет просачивание для pH-чувствительного соединения, прсутствующего отдельно, Lb представляет просачивание для амфипатического вещества, прсутствующего отдельно, и Lc представляет просачивание для pH-чувствительного носителя (который представляет собой комплекс pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества). Иными словами, о чем говорилось в (1) и (2) выше, выражено представленными ниже формулами (1) и (2), соответственно. В следующих формулах, Lc7,4, La7,4 и Lb7,4 представляют просачивание при pH 7,4, и Lcx, Lax и Lbx представляют просачивание при pH 5,0 или pH 4,5.
[0034]
[Мат. формула 1]
[0035]
В представленной выше формуле (1), достаточно, чтобы Δ был больше 0, но Δ предпочтительно не меньше чем 2, более предпочтительно не меньше чем 2,5, еще более предпочтительно не меньше чем 5, особенно предпочтительно не меньше чем 10, и наиболее предпочтительно не меньше чем 30. Кроме того, в представленной выше формуле (2) достаточно, чтобы Δ' был больше чем 0, но Δ' предпочтительно не меньше чем 2, более предпочтительно не меньше чем 2,5, еще более предпочтительно не меньше чем 3, еще более предпочтительно не меньше чем 5, особенно предпочтительно не меньше чем 10, и наиболее предпочтительноне меньше чем 15.
[0036]
В одном варианте осуществления настоящего изобретения предпочтительно, чтобы оба Δ и Δ' в представленных выше формулах (1) и (2) были не меньше чем 2 (предпочтительно не меньше чем 5), и чтобы pH-чувствительный носитель содержал желчную кислоту и липид. Кроме того, в другом варианте осуществления настоящего изобретения предпочтительно, чтобы оба Δ и Δ' в представленных выше формулах (1) и (2) были не меньше чем 2 (предпочтительно не меньше чем 5), и чтобы pH-чувствительный носитель содержал глицирризиновую кислоту или глицирретиновую кислоту и липид.
[0037]
В настоящем описании, термин ʺфизиологический pHʺ означает значение pH в нормальной ткани или нормальной жидкости организма. Физиологический pH обычно равен 7,4, но слегка варьируется (± 0,1) от одной нормальной ткани или одной нормальной жидкости организма к другой. Термин ʺзаданный pH ниже чем физиологический pHʺ означает pH, который является достаточным, если он ниже чем 7,4, и который предпочтительно представляет собой pH не меньше чем 3,0 и меньше чем 7,4, более предпочтительно pH не меньше чем 4,0 и меньше чем 7,3, и еще более предпочтительно pH не меньше чем 4,5 и меньше чем 7,0.
[0038]
До сих пор не выяснен механизм, по которому pH-чувствительный носитель демонстрирует эффект промотирования функции разрушения мембран. Однако можно сделать следующее предположение, при этом такое предположение не ограничивает объем настоящего изобретения.
[0039]
Предполагается, что pH-чувствительный носитель изменяет вид ассоциации между pH-чувствительным соединением и амфипатическим веществом, когда pH окружающей среды опускается ниже физиологического pH, и это приводит к эффекту промотирования функции разрушения мембран. Например, когда система, содержащая pH-чувствительный носитель и биомембрану (такую как клеточная мембрана и везикулярная мембрана), изменяется таким образом, что ее pH снижается ниже физиологического pH, pH-чувствительный носитель будет изменяться, что касается формы ассоциации. Затем, после контактирования pH-чувствительного носителя с биомембраной это изменение вызывает изменение в структуре биомембраны. Иными словами, pH-чувствительный носитель будет вызывать изменение структуры биомембраны. Возможная причина этого в том, что изменение pH на слабокислотный делает нестабильным pH-чувствительное соединение в pH-чувствительном носителе в структуре носителя, результатом чего является то, что pH-чувствительный носитель претерпевает перегруппировку с биомембраной, существующей в системе, демонстрируя, таким образом, эффект промотирования функции разрушения мембраны. Изложенное выше можно объяснить иначе следующим образом. pH-чувствительное соединение состоит из молекул, которые, когда pH изменяется на слабокислотный, претерпевают протонирование и изменение состояния гидрофобной ассоциации. Иными словами, гидрофобная ассоциация с вовлечением pH-чувствительного соединения может демонстрировать функцию разрушения мембран в ответ на слабокислотное окружение. Следует отметить, что термин ʺразрушение мембранʺ означает такое изменение в структуре мембраны, и это необязательно означает, что образующие мембрану компоненты полностью разделяются или разрушаются. Как результат такого ʺразрушения мембранʺ, любой компонент, который может содержаться внутри биомембраны (такой как эндосома), например, высвобождается из биомембраны наружу (например, в цитоплазматический субстрат).
[0040]
pH-чувствительный носитель предпочтительно представляет собой такой, который имеет просачивание ниже чем 20% при pH 7,4 и выше чем 20% при pH 4,0 в испытании высвобождения. Просачивание в испытании высвобождения более предпочтительно ниже чем 20% при pH 6,5 и выше чем 20% при pH 4,0. Просачивание при pH 7,4 или pH 6,5 более предпочтительно не больше чем 15%, и еще более предпочтительно не больше чем 10%. Просачивание при pH 4,0 более предпочтительно не меньше чем 40%, и еще более предпочтительно не меньше чем 50%. В адъювантной композиции данного варианта просачивание в испытании высвобождения предпочтительно меньше чем 20% при pH 7,4 и больше чем 20% при pH 5,0. При просачивании pH-чувствительного носителя, как определено выше, pH-чувствительный носитель демонстрирует более ясно эффект промотирования функции разрушения мембран при pH в слабокислотном диапазоне. В адъювантной композиции в соответствии с настоящим аспектом достаточно использовать pH-чувствительный носитель, обладающий эффектом промотирования функции разрушения мембран, как указано выше.
[0041]
Кроме того, pH-чувствительный носитель демонстрирует не только эффект промотирования функции разрушения мембран, но также эффект промотирования функции слияния мембран.
[0042]
Термин ʺфункция слияния мембранʺ, как используется в настоящем изобретении, означает функцию, которая приводит к слиянию мембран в испытании слияния мембран. Испытание слияния мембран в настоящей заявке означает испытание, которое состоит из стадий добавления липосом (дисперсия), содержащих два типа флуоресцентных веществ, включенных в биомолекулярную мембрану, и оценки дисперсии образца в водном растворе, доведенном до заданного pH, инкубации полученного водного раствора при 37°C в течение 60 минут и измерения интенсивности флуоресценции инкубированного водного раствора. Этот способ позволяет измерить изменение резонансного переноса энергии для двух типов флуоресцентных веществ, включенных в липосомы, и подтвердить функцию слияния мембран для pH-чувствительного носителя. Следует отметить, что подробное описание испытания слияния мембран будет представлено ниже в Примерах.
[0043]
Термин ʺдемонстрировать эффект промотирования функции слияния мембранʺ означает ситуацию, в которой испытание слияния мембран показывает, что процент слияния при заданном pH ниже физиологического pH выше, чем процент слияния при физиологическом pH, и величина увеличения больше, чем наблюдаемая при испытании только pH-чувствительного соединения. Более конкретно, термин ʺдемонстрировать эффект промотирования функци слияния мембранʺ означает, что испытание слияния мембран при pH 7,4 и pH 5,0 показывает, что существует взаимозависимость, представленная следующей формулой (3), между процентом слияния Rc(%) для pH-чувствительного носителя (который представляет собой комплекс pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества) и процентом слияния Ra(%) для pH-чувствительного соединения, используемого отдельно. Следует отметить, что в формуле ниже, Rc7,4 и Ra7,4 представляют процент слияния при pH 7,4, соответственно, и Rcx и Rax представляют процент слияния при pH 5,0, соответственно.
[0044]
[мат. формула 2]
[0045]
В представленной выше формуле (3), достаточно, чтобы ΔR был больше чем 0, но ΔR предпочтительно не меньше чем 2, более предпочтительно не меньше чем 5, и еще более предпочтительно не меньше чем 10.
[0046]
pH-чувствительный носитель предпочтительно является таким, который имеет ΔR не меньше чем 2 в представленной выше формуле (3), и который содержит желчную кислоту и липид.
[0047]
pH-чувствительный носитель демонстрирует эффект промотирования функции слияния мембран при pH в слабокислотном диапазоне (заданный pH ниже, чем физиологический pH). Хотя механизм этого явления еще не выяснен, этот механизм возможно аналогичен тому, который осуществляет действие промотирования функции разрушения мембран, описанный выше. Следует отметить, что это предположение не предназначено для ограничения объема настоящего изобретения.
[0048]
То есть, предполагается, что pH-чувствительный носитель, используемый в настоящем изобретении, способствует слиянию мембран как результат перестройки с биомембранами, существующими в системе, через изменение типа ассоциации между pH-чувствительным соединением и амфипатическим веществом в случае, когда pH окружающей среды снижается ниже физиологического pH. В этом случае происходит слияние мембран как результат перестройки между компонентами, обладающими аффинностью друг к другу, и, следовательно, те компоненты, которые вообще не обладают или обладают незначительной аффинностью по отношению к биомембране (такие как антиген), исключаются и высвобождаются из мембраны, которая претерпевает перестройку.
[0049]
Как указано выше, антиген обычно окружен эндосомой, которая является одним видом биомембраны, чтобы он захватывался в клетки (такие как антиген-презентирующие клетки). После этого, pH эндосомы снижается вследствие действия протонного насоса. Затем эндосома сливается с лизосомой, содержащей гидролазы, и антиген разрагается (затем, разложившийся антиген образует комплекс с молекулами MHC класса II, посредством этого презентируется CD4-положительным T-клеткам). Поэтому бóльшая часть антигена остается недоставленной в цитоплазматический субстрат.
[0050]
В отличие от этого, pH-чувствительный носитель в соответствии с настоящим аспектом делает возможной доставку антигена (такого как экзогенный антиген) в цитоплазматический субстрат. Более конкретно, окружающая среда с пониженным pH таким же образом возникает, когда антиген вместе с pH-чувствительным носителем окружен эндосомами и захватывается в клетки. Как результат снижения pH (или повышения кислотности), pH-чувствительное соединение делает нестабильным pH-чувствительный носитель, таким образом, возникает перестройка мембран между эндосомой и pH-чувствительным носителем. Это заставляет pH-чувствительный носитель проявлять функцию разрушения мембран (которая проявляется сама вместе с функцией слияния мембран в некоторых случаях). Эта функция разрушения мембран (или обе функция слияния мембран и функция разрушения мембран) вызывает доставку антигена в цитоплазматический субстрат из эндосомы. Следует отметить, что указанный выше механизм предполагает, что, в принципе, антиген может транспортироваться в цитоплазматический субстрат сразу после его захвата в эндосому вместе с pH-чувствительным носителем. Это указывает на возможность использования антигена и pH-чувствительного носителя в виде их смешанной композиции или использования антигена в такой форме, когда он нанесен на, или включенн в, pH-чувствительный носитель.
[0051]
(pH-чувствительное соединение)
Как указано выше, pH-чувствительное соединение предпочтительно представляет собой по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей. Указанные выше ʺих солиʺ конкретно не ограничиваются, и их примеры включают: соли щелочных металлов, такие как соль лития, соль натрия и соль калия; соли щелочно-земельных металлов, такие как соль магния, соль кальция и соль бария; и соль аммония. Эти pH-чувствительные соединения можно использовать либо отдельно, либо в комбинации, включающей два или более из них.
[0052]
В соответствии с одним вариантом осуществления настоящего изобретения, pH-чувствительное соединение более предпочтительно представляет собой по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты и их солей.
[0053]
Кроме того, в соответствии с другим вариантом осуществления настоящего изобретения, pH-чувствительное соединение еще более предпочтительно представляет собой по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты или их солей, и особенно предпочтительно по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты или их солей.
[0054]
Дезоксихолевая кислота, холевая кислота, урсодезоксихолевая кислота, хенодезоксихолевая кислота, гиодезоксихолевая кислота, высшие желчные кислоты и гликодезоксихолевая кислота, которые предпочтительно используются в качестве pH-чувствительного соединения, имеют общее название ʺжелчные кислотыʺ. Желчные кислоты известны как типичное стероидное производное уже давно еще до 1920-х годов, и они используются в области бактериологии. Желчные кислоты в живом человеческом организме образуют комплекс с холестерином, липидом и жирорастворимым витамином, тем самым способствуя их всасыванию. Кроме того, желчные кислоты образуют комплексы с липидными, белковыми или гидрофобными веществами, благодаря физико-химическим свойствам, и, следовательно, они уже давно используются для разделения и очистки белков, а также в качестве солюбилизатора или эмульгатора. В последнее время это привлекает внимание в области производства вакцин из-за способности промотировать абсорбцию лекарственных средств с помощью транспортера желчных кислот. Типичными примерами желчных кислот для таких целей являются деоксихолат натрия (также известный как дезоксихолат натрия) и урсодеоксихолевая кислота (также известная как урсодезоксихолевая кислота); они нашли применение в качестве фармацевтической добавки, подходящей для инъекций в организм человека, как результат высокой безопасности. По этой причине рН-чувствительное соединение более предпочтительно выбирают из дезоксихолевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты и их солей (таких как натриевая соль).
[0055]
pH-чувствительное соединение предпочтительно содержится в пропорции не меньше чем 10 моль, более предпочтительно в пропорции от 10 до 640 моль, еще более предпочтительно в пропорции от 20 до 320 моль, и особенно предпочтительно в пропорции от 20 до 160 моль, на 100 моль амфипатического вещества. Следует отметить, что содержание pH-чувствительного соединения на 100 моль амфипатического вещества в настоящей заявке также называется ʺсвязанное в комплекс количество pH-чувствительного соединения.ʺ
[0056]
(Амфипатическое вещество)
Как указано выше, амфипатическое вещество предпочтительно представляет собой по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола. Эти амфипатические вещества можно использовать либо отдельно, либо в комбинации, включающей два или более из них.
[0057]
Следует отметить, что ʺколичество углеродовʺ, используемое здесь, для амфипатического вещества означает количество атомов углерода в жирнокислотном компоненте (ацильная группа), образующем гидрофобную часть амфипатического вещества.
[0058]
Фосфатидилхолин, содержащий только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, предпочтительно представляет собой диацилфосфатидилхолин, содержащий насыщенную ацильную группу, и примеры включают дидеканоилфосфатидилхолин (DDPC; 1,2-дидеканоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин) и дилауроилфосфатидилхолин (DLPC; 1,2-дилауроил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин). Из них, в качестве фосфатидилхолина, можно использовать природный или синтетический фосфатидилхолин, полученный известным способом, и можно использовать коммерческий фосфатидилхолин.
[0059]
Примеры сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, включают сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и монолауриновой кислоты (полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат), сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и миристиновой кислоты (полиэтиленсорбитанмономиристат), сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и монопальмитиновой кислоты (полиоксиэтиленсорбитанпальмитат), сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и моностеариновой кислоты (полиоксиэтиленсорбитанмоностеарат) и сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и моноолеиновой кислоты (полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат). Хотя степень полимеризации полиоксиэтилена конкретно не ограничивается, общая сумма степеней полимеризации соответствующих полиоксиэтиленовых цепей, добавленных к сорбитану, предпочтительно составляет от 10 до 200, более предпочтительно от 15 до 100, и еще более предпочтительно от 20 до 50. В качестве сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты можно использовать синтетическое соединение или можно использовать коммерческое соединение. В качестве коммерческого сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты можно использовать, например, соединения, коммерчески доступные под торговыми названиями Tween 20 (сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и монолауриновой кислоты), Tween 40 (сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и монопальмитиновой кислоты), Tween 60 (сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и моностеариновой кислоты) и Tween 80 (сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и моноолеиновой кислоты). Из них предпочтительно используют сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и моножирных кислот, содержащие от 16 до 18 атомов углерода (Tween 20, Tween 40, Tween 60 и Tween 80).
[0060]
Примеры сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, включают: сложные эфиры сорбитана и моножирных кислот, такие как сложный эфир сорбитана и монопальмитиновой кислоты (сорбитанмонопальмитат), сложный эфир сорбитана и моностеариновой кислоты (сорбитанмоностеарат) и сложный эфир сорбитана и моноолеиновой кислоты (сорбитанмоноолеат); и сложные эфиры сорбитана и три-жирных кислот, такие как сложный эфир сорбитана и трипальмитиновой кислоты (сорбитантрипальмитат), сложный эфир сорбитана и тристеариновой кислоты (сорбитантристеарат) и сложный эфир сорбитана и триолеиновой кислоты (сорбитантриолеат). В качестве сложного эфира сорбитана и жирной кислоты можно использовать синтетическое соединение или можно использовать коммерческое соединение. В качестве коммерческого сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, предпочтительно используют соединения, коммерчески доступные под торговыми названиями SPAN 40 (сложный эфир сорбитана и пальмитиновой кислоты), SPAN 60 (сложный эфир сорбитана и стеариновой кислоты), SPAN 80 (сложный эфир сорбитана и олеиновой кислоты), SPAN 65 (сложный эфир сорбитана и тристеариновой кислоты) и SPAN 85 (сложный эфир сорбитана и триолеиновой кислоты). Из них предпочтительно используют SPAN 80, SPAN 65 и SPAN 85.
[0061]
Глицеринмоноолеат (глицерилмоноолеат), глицериндилаурат (глицерилдилаурат), глицериндистеарат (глицерилдистеарат) и глицериндиолеат (глицерилдиолеат) представляют собой ацилглицерины, образованные сложноэфирной связью из глицерина и одной или несколькими молекулами жирной кислоты. Участок связывания для жирной кислоты конкретно не ограничивается. В случае глицеринмоноолеата, который представляет собой моноацилглицерин, например, жирная кислота может быть связана сложноэфирной связью в C1 или C2 положении глицерина. Также, в случае глицериндилаурата, который представляет собой диацилглицерин, жирная кислота может быть связана сложноэфирной связью в C1 и C2 положениях глицерина или в C1 и C3 положениях глицерина. Предпочтительным примером глицериндилаурата является α,α'-дилаурин, в котором замещение происходит в C1 и C3 положениях. Предпочтительными в качестве глицериндистеарата и глицериндиолеата являются диацилглицерины, в которых замещение происходит в C1 и C2 положениях. В качестве этих глицериновых производных можно использовать синтетические соединения или можно использовать коммерческие соединения.
[0062]
Полиоксиэтилен касторовое масло образуется путем добавления полиоксиэтилена к касторовому маслу. Степень полимеризации полиоксиэтилена конкретно не ограничивается, но предпочтительно составляет от 3 до 200, более предпочтительно от 5 до 100, и еще более предпочтительно от 10 до 50. В качестве полиоксиэтилен касторового масла можно использовать синтетический продукт или можно использовать коммерческий продукт. Например, подходящим образом используют PEG(10) касторовое масло, в котором степень полимеризации полиоксиэтилена составляет 10.
[0063]
В качестве α-токоферола можно использовать природное соединение или синтетическое соединение, полученное известным способом, а также можно использовать коммерческое соединение.
[0064]
Из указанных выше амфипатических веществ, предпочтительными являются такие, которые выбраны из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, полиоксиэтиленсорбитанмонолаурата, полиоксиэтиленсорбитанмоноолеата, сорбитанмоноолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и более предпочтительными являются такие, которые выбраны из группы, состоящей из дилауроилфосфатидилхолина, дидеканоилфосфатидилхолина, полиоксиэтиленсорбитанмонолаурата, полиоксиэтиленсорбитанмоноолеата, сорбитанмоноолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола.
[0065]
(Комбинация pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества)
pH-чувствительный носитель может демонстрировать эффект промотирования функции разрушения мембран при заданном pH, благодаря комбинации pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества. В этом случае, pH, при котором pH-чувствительный носитель начинает проявлять эффект промотирования функции разрушения мембран, различается в зависимости от комбинации pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества. Считают, что это явление возникает как результат того, что pKa варьирует от одного pH-чувствительного соединения к другому, и тип ассоциации с амфипатическим веществом также варьирует в зависимости от комбинации pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества. Поэтому можно сказать, что путем соответствующего изменения комбинации pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества можно выбрать pH, при котором такая функция проявляется, и осуществить точную доставку.
[0066]
В pH-чувствительном носителе в качестве комбинации pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества предпочтительными являются: холевая кислота и DLPC; дезоксихолевая кислота и DDPC; дезоксихолевая кислота и DLPC; дезоксихолевая кислота и Tween 20; дезоксихолевая кислота и Tween 40; дезоксихолевая кислота и Tween 60; дезоксихолевая кислота и Tween 80; дезоксихолевая кислота и SPAN 40; дезоксихолевая кислота и SPAN 60; дезоксихолевая кислота и SPAN 80; дезоксихолевая кислота и SPAN 65; дезоксихолевая кислота и SPAN 85; дезоксихолевая кислота и α-токоферол; дезоксихолевая кислота и глицеринмоноолеат; дезоксихолевая кислота и глицериндистеарат; дезоксихолевая кислота и глицериндиолеат; дезоксихолевая кислота и глицериндилаурат (α,α'-дилаурин); дезоксихолевая кислота и полиоксиэтилен касторовое масло; хенодезоксихолевая кислота и DLPC; гиодезоксихолевая кислота и DLPC; гликодезоксихолевая кислота и DLPC; урсодезоксихолевая кислота и DDPC; урсодезоксихолевая кислота и DLPC; урсодезоксихолевая кислота и Tween 20; урсодезоксихолевая кислота и Tween 40; урсодезоксихолевая кислота и Tween 60; урсодезоксихолевая кислота и Tween 80; урсодезоксихолевая кислота и SPAN 40; урсодезоксихолевая кислота и SPAN 60; урсодезоксихолевая кислота и SPAN 80; урсодезоксихолевая кислота и SPAN 65; урсодезоксихолевая кислота и SPAN 85; урсодезоксихолевая кислота и α-токоферол; урсодезоксихолевая кислота и глицеринмоноолеат; урсодезоксихолевая кислота и глицериндистеарат; урсодезоксихолевая кислота и глицериндиолеат; урсодезоксихолевая кислота и глицериндилаурат (α,α'-дилаурин); урсодезоксихолевая кислота и полиоксиэтилен касторовое масло; глицирризиновая кислота и DDPC; глицирризиновая кислота и DLPC; глицирризиновая кислота и Tween 20; глицирризиновая кислота и Tween 40; глицирризиновая кислота и Tween 60; глицирризиновая кислота и Tween 80; глицирризиновая кислота и SPAN 40; глицирризиновая кислота и SPAN 60; глицирризиновая кислота и SPAN 80; глицирризиновая кислота и SPAN 65; глицирризиновая кислота и SPAN 85; глицирризиновая кислота и α-токоферол; глицирризиновая кислота и глицеринмоноолеат; глицирризиновая кислота и глицериндистеарат; глицирризиновая кислота и глицериндиолеат; глицирризиновая кислота и глицериндилаурат (α,α'-дилаурин); и глицирризиновая кислота и полиоксиэтилен касторовое масло.
[0067]
Более предпочтительными являются: холевая кислота и DLPC; дезоксихолевая кислота и DDPC; дезоксихолевая кислота и DLPC; дезоксихолевая кислота и Tween 20; дезоксихолевая кислота и Tween 40; дезоксихолевая кислота и Tween 60; дезоксихолевая кислота и Tween 80; дезоксихолевая кислота и SPAN 40; дезоксихолевая кислота и SPAN 60; дезоксихолевая кислота и SPAN 80; дезоксихолевая кислота и SPAN 65; дезоксихолевая кислота и SPAN 80; дезоксихолевая кислота и SPAN 85; дезоксихолевая кислота и α-токоферол; дезоксихолевая кислота и глицерин моноолеат; дезоксихолевая кислота и полиоксиэтилен касторовое масло; хенодезоксихолевая кислота и DLPC; гиодезоксихолевая кислота и DLPC; гликодезоксихолевая кислота и DLPC; урсодезоксихолевая кислота и DDPC; урсодезоксихолевая кислота и DLPC; урсодезоксихолевая кислота и Tween 40; урсодезоксихолевая кислота и Tween 60; урсодезоксихолевая кислота и Tween 80; урсодезоксихолевая кислота и SPAN 40; урсодезоксихолевая кислота и SPAN 65; урсодезоксихолевая кислота и SPAN 85; урсодезоксихолевая кислота и α-токоферол; урсодезоксихолевая кислота и моноолеин; урсодезоксихолевая кислота и полиоксиэтилен касторовое масло; глицирризиновая кислота и DDPC; глицирризиновая кислота и DLPC; глицирризиновая кислота и Tween 40; глицирризиновая кислота и Tween 60; глицирризиновая кислота и Tween 80; глицирризиновая кислота и SPAN 40; глицирризиновая кислота и SPAN 65; глицирризиновая кислота и SPAN 85; глицирризиновая кислота и α-токоферол; глицирризиновая кислота и глицеринмоноолеат; и глицирризиновая кислота и полиоксиэтилен касторовое масло.
[0068]
Еще более предпочтительными являются: холевая кислота и DLPC; дезоксихолевая кислота и DDPC; дезоксихолевая кислота и DLPC; дезоксихолевая кислота и Tween 20; дезоксихолевая кислота и Tween 40; дезоксихолевая кислота и Tween 60; дезоксихолевая кислота и Tween 80; дезоксихолевая кислота и SPAN 40; дезоксихолевая кислота и SPAN 60; дезоксихолевая кислота и SPAN 80; дезоксихолевая кислота и SPAN 65; дезоксихолевая кислота и SPAN 80; дезоксихолевая кислота и SPAN 85; дезоксихолевая кислота и α-токоферол; дезоксихолевая кислота и глицеринмоноолеат; дезоксихолевая кислота и полиоксиэтилен касторовое масло; хенодезоксихолевая кислота и DLPC; гиодезоксихолевая кислота и DLPC; гликодезоксихолевая кислота и DLPC; урсодезоксихолевая кислота и DDPC; урсодезоксихолевая кислота и DLPC; и глицирризиновая кислота и DLPC.
[0069]
[Алюминий-содержащее вещество]
Адъювантная композиция по настоящему изобретению включает указанный выше pH-чувствительный носитель, состоящий из амфипатического вещества и pH-чувствительного соединения, и алюминий-содержащее вещество в качестве вещества, обладающего стимулирующим действием, которое активирует природный иммунитет (далее указано как ʺприродный иммунитет-активирующее веществоʺ).
[0070]
Алюминий-содержащее вещество представляет собой один тип природный иммунитет-активирующего вещества. Природный иммунитет-активирующее вещество означает вещество, которое распознается рецептором для распознавания структурного паттерна, или которое дает стимул иммунокомпетентным клеткам, приводя иммунокомпетентные клетки в активное состояние.
[0071]
В настоящей заявке термин ʺалюминийʺ используется в качестве общего обозначения алюминий-содержащих адъювантов. Поэтому ʺалюминийʺ также означает ʺалюминий-содержащее веществоʺ.
[0072]
Алюминий-содержащее вещество, используемое в настоящем изобретении, конкретно не ограничивается, при условии, что оно способно индуцировать клеточно-опосредованный иммунитет при использовании совместно с pH-чувствительным носителем. Однако алюминий-содержащее вещество предпочтительно представляет собой соль алюминия, примеры которой включают гидроксид алюминия (Al(OH)3), фосфат алюминия (AlPO4), сульфат алюминия (Al2(SO4)3), сульфат алюминия-калия (алюмокалиевые квасцы; AlK(SO4)2·12H2O) и хлорид алюминия (AlCl3). Из них, по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из гидроксида алюминия и фосфата алюминия, является предпочтительным, с точки зрения эффекта индукции клеточно-опосредованного иммунитета. Кроме того, более предпочтительно, когда алюминий-содержащее вещество представляет собой гидроксид алюминия. Гидроксид алюминия и фосфат алюминия нерастворимы в воде; поэтому, когда их используют в адъювантной композиции, предпочтительно использовать их в диспергированном состоянии в диспергирующей среде. С использованием такого гидроксида алюминия и/или фосфата алюминия можно получить адъювант в форме геля.
[0073]
В качестве алюминий-содержащего вещества, можно использовать соединения алюминия, которые коммерчески доступны.
[0074]
Примеры гидроксида алюминия включают ʺАлюминий Гидроксидʺ от компании-изготовителя Sigma-Aldrich, ʺАлюмVax Гидроксид 2%ʺ от компании-изготовителя OZ BIOSCIENCES и ʺAlгидрогель адъювант 2%ʺ от компании-изготовителя InvivoGen. Из указанных выше гидроксидов алюминия, ʺАлюмVax Гидроксид 2%ʺ и ʺAlгидрогель адъювант 2%ʺ находятся в форме, в которой алюминий диспергирован в водном растворе в концентрации приблизительно 10 мг/мл в расчете на металл.
[0075]
Примеры фосфата алюминия включают ʺАлюминий Фосфатʺ от компании-изготовителя Sigma-Aldrich, ʺАлюмVax Фосфат 2%ʺ от компании-изготовителя OZ BIOSCIENCES и ʺAdju-Phosʺ от компании-изготовителя Alpha Diagnostic International, Inc. Из указанных выше фосфатов алюминия, ʺAdju-Phosʺ находится в форме, в которой алюминий диспергирован в водном растворе в концентрации приблизительно 5 мг/мл в расчете на металл. Кроме того, ʺАлюмVax Фосфат 2%ʺ также находится в форме, в которой фосфат алюминия диспергирован в водном растворе.
[0076]
В качестве сульфата алюминия можно использовать ʺАлюминий Сульфатʺ от компании-изготовителя Sigma-Aldrich.
[0077]
Примеры сульфата алюминия-калия включают ʺкристаллы алюмокалиевых квасцовʺ от компании-изготовителя InvivoGen.
[0078]
В качестве хлорида алюминия можно использовать ʺАлюминий Хлоридʺ от компании-изготовителя Sigma-Aldrich.
[0079]
ʺАлюминий-содержащее веществоʺ в диспергированной форме можно использовать как таковое в форме дисперсии. В частности, что касается гидроксида алюминия и фосфата алюминия, особенно предпочтительно смешивать ʺалюминий-содержащее веществоʺ в форме дисперсии с pH-чувствительным носителем (дисперсия (раствор) pH-чувствительного носителя), с точки зрения легкости контроля коагулированных частиц алюминия в водном растворе.
[0080]
Кроме того, в случае, когда соединение алюминия в твердом состоянии используют в виде гидроксида алюминия или фосфата алюминия, предпочтительно осуществлять диспергирование соединения алюминия в диспергирующей среде заранее до его смешивания с pH-чувствительным носителем (дисперсией pH-чувствительного носителя) и использовать его в форме дисперсии.
[0081]
В случае использования сульфата алюминия, сульфата алюминия-калия или хлорида алюминия в качестве алюминий-содержащего вещества, алюминий-содержащее соединение можно смешать с pH-чувствительным носителем (дисперсией pH-чувствительного носителя) как таковым в твердом состоянии, или алюминий-содержащее соединение можно смешать с pH-чувствительным носителем (дисперсией pH-чувствительного носителя) после растворения в водном растворителе.
[0082]
Алюминий-содержащие вещества можно использовать либо отдельно, либо в комбинации, включающей два или более из них.
[0083]
Кроме того, хотя содержание алюминий-содержащего вещества варьируется в зависимости от типа используемого алюминий-содержащего вещества, алюминий-содержащее вещество предпочтительно содержится в количестве от 1 до 1000 мкг, более предпочтительно от 1 до 500 мкг, и еще более предпочтительно от 1 до 100 мкг, в расчете на металлический алюминий, на 100 нмоль амфипатического вещества. Когда содержание алюминий-содержащего вещества на 100 нмоль амфипатического вещества не меньше чем 1 мкг, может подходящим образом индуцироваться иммунный ответ, что является желательным. С другой стороны, когда содержание алюминий-содержащего вещества на 100 нмоль амфипатического вещества не больше чем 1000 мкг, могут уменьшаться побочные реакции, что является желательным. Кроме того, особенно в случае, когда количество амфипатического вещества, содержащегося в 100 мкл адъювантной композиции, меньше чем 10 нмоль, содержание алюминий-содержащего вещества на 1 нмоль амфипатического вещества предпочтительно составляет от 10 до 100 мкг.
[0084]
Содержание (концентрация) алюминий-содержащего вещества в адъювантной композиции предпочтительно должна быть не меньше чем 1 мкг/100 мкл, более предпочтительно от 1 мкг/100 мкл до 100 мкг/100 мкл, и еще более предпочтительно от 10 мкг/100 мкл до 100 мкг/100 мкл, в расчете на металлический алюминий, в случае, когда адъювантная композиция находится в форме дисперсии в водном растворителе. Когда содержание алюминий-содержащего вещества не меньше чем 1 мкг/100 мкл, подходящим образом может индуцироваться иммунный ответ, что является желательным. С другой стороны, когда содержание алюминий-содержащего вещества не больше чем 100 мкг/100 мкл, побочные реакции могут уменьшаться, что является желательным.
[0085]
[Водный растворитель]
Адъювантная композиция может содержать водный растворитель (далее иногда указывается как ʺводная средаʺ).
[0086]
В случае, когда адъювантная композиция содержит водный растворитель, pH-чувствительный носитель и алюминий-содержащее вещество могут образовывать дисперсию (далее также указана как ʺводный растворʺ) в водном растворителе.
[0087]
В этой ситуации, pH-чувствительный носитель предпочтительно образует комплекс, содержащий pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество в водной среде. Форма этого комплекса конкретно не ограничивается, и pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество могут образовывать мембрану. Альтернативно, pH-чувствительное соединение может быть частично или полностью внедрено в структуру, образованную амфипатическим веществом, через ассоциацию и т.д. Кроме того, желательно, чтобы pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество образовывали мицеллы (частицы, в которых pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество вступают в ассоциацию с образованием частиц через гидрофобное взаимодействие, и которые типично представляют собой частицы мономолекулярной пленочной структуры). Мицеллы предпочтительно имеют диаметр от 10 до 200 нм, более предпочтительно от 10 до 100 нм, поскольку поглощение фагоцитозом и/или эндоцитозом активно осуществляется для частиц, имеющих размер, равный или больше определенного размера. Следует отметить, что указанные выше мицеллы не включают такие частицы, которые образуют липидную биомолекулярную мембранную структуру (такую как липосома). Кроме того, в настоящем изобретении диаметр частиц pH-чувствительного носителя измеряют методом динамического рассеяния света (с NanoZS90, изготовитель MALVERN Instruments Co., Ltd.).
[0088]
Кроме того, адъювантная композиция предпочтительно образует комплекс (адъювантный комплекс), который состоит из pH-чувствительного носителя в форме комплекса и алюминий-содержащего вещества в водной среде. Хотя форма комплекса конкретно не ограничивается, предпочтительно, чтобы pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество, которые образуют pH-чувствительный носитель, и алюминий-содержащее вещество образовывали мицеллы. Диаметр частиц мицелл предпочтительно составляет от 10 до 200 нм, более предпочтительно от 10 до 100 нм.
[0089]
Следует отметить, что в водном растворе, содержащем адъювантную композицию, по меньшей мере одно из pH-чувствительного соединения, амфипатического вещества и вещества, обладающего действием, активирующим природный иммунитет, может оставаться в свободном состоянии без образования ассоциированного вещества.
[0090]
Растворитель водного раствора, содержащего адъювантную композицию по настоящему изобретению, предпочтительно представляет собой водный раствор, содержащий буферный агент, NaCl и сахар, такой как глюкоза и сахароза.
[0091]
Буферный агент конкретно не ограничивается; можно использовать любой известный агент, при условии, что он может поддерживать pH адъювантной композиции, равным или выше физиологического pH. Примеры подходящего буферного агента включают фосфатный буфер, цитратный буфер, цитрат-фосфатный буфер, трис(гидроксиметил)аминометан-HCl буфер (трис-солянокислый буфер), MES буфер (2-морфолиноэтансульфонатный буфер), TES буфер (N-трис(гидроксиметил)метил-2-аминоэтансульфонатный буфер), ацетатный буфер, MOPS буфер (3-морфолинопропансульфонатный буфер), MOPS-NaOH буфер, HEPES буфер (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфонатный буфер), HEPES-NaOH буфер и другие GOOD буферы, аминокислотный буфер, такой как глицин-солянокислый буфер, глицин-NaOH буфер, глицилглицин-NaOH буфер и глицилглицин-KOH буфер; буфер на основе борной кислоты, такой как Трис-боратный буфер, борат-NaOH буфер и боратный буфер; и имидазольный буфер. Предпочтительными из этих буферов являются фосфатный буфер, цитратный буфер, цитрат-фосфатный буфер, Трис-солянокислый буфер, MES буфер, ацетатный буфер и HEPES-NaOH буфер. Эти буферы можно использовать в любой концентрации без конкретных ограничений. Подходящая концентрация составляет от 0,1 до 200 мМ, предпочтительно от 1 до 100 мМ. Следует отметить, что термин ʺконцентрация буфераʺ, используемый здесь, относится к концентрации (мМ) буфера, содержащегося в водном растворе.
[0092]
Концентрации NaCl и сахара, такого как глюкоза и сахароза, конкретно не ограничиваются и предпочтительно составляют от 0,1 до 200 мМ, более предпочтительно от 1 до 150 мМ.
[0093]
Концентрация pH-чувствительного носителя в водном растворе конкретно не ограничивается. Однако предпочтительно, когда общая молярная концентрация pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества составляет не меньше чем 7,3 мкмоль/л, более предпочтительно не меньше чем 8,0 мкмоль/л, еще более предпочтительно не меньше чем 50 мкмоль/л, особенно предпочтительно не меньше чем 100 мкмоль/л, и наиболее предпочтительно не меньше чем 1 ммоль/л. Кроме того, предпочтительно, когда общая молярная концентрация pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества составляет не больше чем 500 ммоль/л, более предпочтительно не больше чем 300 ммоль/л, еще более предпочтительно не больше чем 280 ммоль/л, особенно предпочтительно не больше чем 6,5 ммоль/л, и наиболее предпочтительно не больше чем 4,2 ммоль/л.
[0094]
Кроме того, в особенно предпочтительном варианте осуществления, с точки зрения уменьшения побочных реакций, общая молярная концентрация pH-чувствительного соединения и амфипатического вещества предпочтительно составляет от 100 мкмоль/л до 300 ммоль/л, более предпочтительно от 1 до 280 ммоль/л.
[0095]
Кроме того, алюминий-содержащее вещество в водном растворе предпочтительнымо используют в количестве от 1 мкг/100 мкл до 100 мкг/100 мкл, более предпочтительно от 10 мкг/100 мкл до 100 мкг/100 мкл, в расчете на металлический алюминий.
[0096]
[Другие компоненты]
Адъювантная композиция также может содержать другие компоненты. Хотя другие компоненты конкретно не ограничиваются, их примеры включают стабилизатор.
[0097]
Стабилизатор конкретно не ограничивается, при условии, что не оказывает негативного влияния на pH-чувствительный носитель или алюминий-содержащее вещество, и можно использовать известные стабилизаторы, примеры которых включают насыщенные или ненасыщенные спирты, содержащие 4-20 атомов углерода, такие как 1-октанол, 1-додеканол, 1-гексадодеканол и 1-эйкозанол; насыщенные или ненасыщенные жирные кислоты, содержащие 12-18 атомов углерода, такие как лауриновая кислота, миристиновая кислота, пальмитиновая кислота, стеариновая кислота и олеиновая кислота; алкиловые сложные эфиры (алкил, содержащий от 1 до 3 атомов углерода) насыщенных или ненасыщенных жирных кислот, содержащих 8-18 атомов углерода, такие как метилкаприлат (метилоктаноат), этилкаприлат (этилоктаноат), метиллаурат, этиллаурат, этилмиристат, этилпальмитат, этилстеарат, метилолеат и этилолеат; D(L)-аминокислоты, такие как D(L)-аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновая кислота, цистеин, глутамин, глицин, гистидин, лейцин, изолейцин, лизин, метионин, пролин, серин, треонин, триптофан, тирозин, валин и фенилаланин; триглицериды аминокислот, такие как трикапроин и трикаприлин; сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и трижирных кислот, содержащие 12-18 атомов углерода, такие как сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и трипальмитиновой кислоты и сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и триолеиновой кислоты (например, Tween 65 и Tween 85); полиоксиэтилен-алкиловые сложные эфиры, содержащие 12-18 атомов углерода, такие как сложный эфир полиоксиэтилена и лауриновой кислоты, сложный эфир полиоксиэтилена и миристиновой кислоты, сложный эфир полиоксиэтилена и пальмитиновой кислоты и сложный эфир полиоксиэтилена и стеариновой кислоты (например, PEG20 стеариловый эфир и PEG23 лауриловый эфир); полиоксиалкилен-отвержденное касторовое масло (например, PEG10-отвержденное касторовое масло, PEG40-отвержденное касторовое масло и PEG60-отвержденное касторовое масло); сложный эфир насыщенной или ненасыщенной моножирной кислоты и глицерина, содержащий 8-18 атомов углерода, такой как каприлин (глицериноктаноат), глицеринмонокапрат, глицеринмонолаурат, глицеринмономиристат, глицеринмонопальмитат, глицеринмоностеарат и глицеринмоноолеат; дижирной кислоты и глицерина, содержащий 8-16 атомов углерода, такой как глицерин диоктаноат, глицериндикапрат, глицериндилаурат, глицериндимиристат и глицериндипальмитат; сложный эфир α-токоферола и уксусной кислоты, касторовое масло, соевое масло, холестерин, сквален, сквалан, лактоза, аскорбилпальмитат, бензилбензоат, метилпараоксибензоат, этилпараоксибензоат, пропилпараоксибензоат и бутилпараоксибензоат. Следует отметить, что ʺколичество углеродовʺ в стабилизаторе означает количество атомов углерода в жирнокислотном компоненте (ацильная группа), образующем гидрофобную часть.
[0098]
Содержание этих других компонентов конкретно не ограничивается, при условии, что не оказывает негативного влияния на pH-чувствительный носитель или алюминий-содержащее вещество, но содержание предпочтительнымо не больше чем 150 моль, более предпочтительно больше чем 0 моль и не больше чем 66,4 моль, на 100 моль амфипатического вещества.
[0099]
Адъювантная композиция в соответствии с настоящим аспектом может эффективно индуцировать CTL при введении вместе с антигеном.
[0100]
В частности, в адъювантной композиции в соответствии с настоящим аспектом, даже когда алюминий-содержащее вещество используется совместно с pH-чувствительным носителем, функция pH-чувствительного носителя, например, эффект промотирования функции разрушения мембран (и эффект промотирования функции слияния мембран) может проявляться подходящим образом. Кроме того, когда алюминий-содержащее вещество используют вместе с pH-чувствительным носителем, функция алюминий-содержащего вещества также может проявляться подходящим образом. Причина этого еще не выяснена, но предположительно причина состоит в следующем.
[0101]
pH-чувствительный носитель в его желаемой форме включает pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество и обладает эффектом промотирования функции разрушения мембран (в некоторых случаях, как эффектом промотирования функции разрушения мембран, так и эффектом промотирования функции слияния мембран). В этом случае, как указано выше, эффект промотирования функции разрушения мембран (и эффект промотирования функции слияния мембран) основан на изменении состояния ассоциации pH-чувствительного носителя, вызываемом pH-чувствительным соединением в кислотной среде, и перестройке с клеточной мембраной, такой как эндосома, вызываемой амфипатическим веществом в этой ситуации. В данном случае, использование алюминий-содержащего вещества совместно с pH-чувствительным носителем не изменяет pH чувствительность pH-чувствительного соединения, таким образом, pH-чувствительное соединение может вызывать изменение состояния ассоциации pH-чувствительного носителя. Кроме того, независимо от того, является ли алюминий-содержащее вещество, например, включенным в амфипатическое вещество или присутствует независимо от pH-чувствительного носителя, амфипатическое вещество не влияет на перестройку с клеточной мембраной. Кроме того, даже с алюминий-содержащим веществом, используемым совместно с pH-чувствительным носителем, функция pH-чувствительного носителя не нарушается. Кроме того, алюминий-содержащее вещество, например, только включено в амфипатическое вещество pH-чувствительного носителя посредством гидрофобного взаимодействия, например, или только присутствует независимо от pH-чувствительного носителя, поэтому его функция также не нарушается. Как результат, адъювантная композиция в соответствии с настоящим аспектом, при введении вместе с антигеном, может вводить антиген в цитоплазматический субстрат при помощи функции pH-чувствительного носителя, и, в то же время, может подходящим образом индуцировать кросс-презентацию, обусловленную антигеном, введенным в цитоплазматический субстрат, посредством действия алюминий-содержащего вещества, таким образом, можно эффективно индуцировать клеточно-опосредованный иммунитет (CTL).
[0102]
Следует отметить, что указанная выше причина является только предположительной, и любые другие эффекты, вызываемые другими причинами, будут включены в технический объем настоящего изобретения.
[0103]
В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения, гуморальный иммунитет также можно индуцировать подходящим образом.
[0104]
Как указано выше, экзогенный антиген обычно разлагается на пептидные фрагменты эндосомами в антиген-презентирующих клетках и образует комплекс с молекулами MHC класса II, чтобы он мог презентироваться CD4-положительным T-клеткам.
[0105]
В случае, когда адъювантная композиция в соответствии с настоящим аспектом индуцирует CTL через кросс-презентацию антигена, введенного вместе с ней, антиген и алюминий-содержащее вещество могут быть введены в цитоплазматический субстрат, когда происходит перестройка клеточных мембран эндосом. В одном варианте осуществления, однако, даже если перестройка происходит, антиген и алюминий-содержащее вещество могут частично или полностью оставаться в эндосомах. Кроме того, в одном варианте осуществления, в случае, когда антиген и адъювантная композиция существуют независимо, поглощение только антигена может происходить в части эндосом. Затем антиген разлагается на пептидные фрагменты в эндосомах и образует комплекс с молекулами MHC класса II, чтобы он мог презентироваться CD4-положительным T-клеткам, таким образом, индуцируется гуморальный иммунитет. В этом случае, поскольку дендритные клетки, индуцирующие кросс-презентацию, подходяще находятся в иммунологически активированном состоянии, индукция гуморального иммунитета осуществляется подходящим образом. Альтернативно, дендритные клетки, индуцирующие кросс-презентацию, подходящим образом активно продуцируют цитокин (например, IFNγ), который активирует иммунитет, делая, таким образом, окружающую среду подходящей для индукции иммунитета.
[0106]
Поэтому, в соответствии с другим вариантом осуществления настоящего изобретения, гуморальный иммунитет можно индуцировать, вместе с кросс-презентацией или вместо кросс-презентации.
[0107]
<Вакцинная композиция>
Вакцинная композиция включает адъювантную композицию и антиген.
[0108]
[Адъювантная композиция]
В качестве адъювантной композиции можно использовать такую же композицию, которая указана выше, и, следовательно, ее описание здесь опускается.
[0109]
[Антиген]
Антиген конкретно не ограничивается, при условии, что он вызывает иммунный ответ, и предпочтительно он представляет собой пептид или белок.
[0110]
Примеры пептида или белка включают вирусный антиген, бактериальный антиген, грибковый антиген, протозойный или паразитарный антиген, раковый антиген, связанный с аллергией антиген, связанный с заболеванием антиген и связанный с отторжением трансплантата антиген.
[0111]
Вирусный антиген конкретно не ограничивается, и его примеры включают: антиген вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), такой как генный продукт gag, pol и env генов, белок Nef, обратную транскриптазу и другие компоненты ВИЧ; антиген вируса гепатита, такой как S, M и L белки вируса гепатита B, пред-S антиген вируса гепатита B, РНК вируса гепатита C и вирусные компоненты гепатита A, B и C; антиген вируса гриппа, такой как гемагглютинин, нейраминидаза и другие компоненты вируса гриппа; антиген вируса кори; антигена краснухи; ротавирусный антиген; цитомегаловирусный антиген; респираторно-синцитиальный вирусный антиген; антиген вируса простого герпеса; антиген вируса ветряной оспы; антиген вируса японского энцефалита; и антиген вируса бешенства. Другие примеры включают пептиды, происходящие из аденовируса, ретровируса, пикорнавируса, вируса герпеса, ротавируса, хантавируса, коронавируса, тогавируса, флавивируса, рабдовируса, парамиксовируса, ортомиксовируса, буниавируса, аренавируса, реовируса, папилломавируса, парвовируса, поксвируса, гепаднавируса или губчатого вируса.
[0112]
Бактериальный антиген конкретно не ограничивается, и его примеры включают бактериальный антиген, такой как коклюшный токсин, нитевидный гемагглютинин, пертактин, FIM2, FIM3, аденилатциклазу и другие компоненты бактериального антигена коклюша; бактериальный антиген дифтерии, такой как дифтерийный токсин или токсоид, и другие компоненты бактериального антигена дифтерии; бактериальный антиген столбнячной бациллы и стрептококка, такой как столбнячный токсин или токсоид, и другие компоненты бактериального антигена столбняка; Грам-отрицательный бацилловый бактериальный антиген, такой как липополисахарид и другие компоненты Грам-отрицательного бактериального антигена; бактериальный антиген бациллы туберкулеза, такой как миколиновая кислота, белок 65 теплового шока (HSP 65), главный секреторный белок 30 кДа, антиген 85А и другие компоненты антигена микобактерий; бактериальные антигенные компоненты helicobacter и pylori; пневмококковый бактериальный антиген; бактериальный антиген вируса гриппа; бактериальный антиген сибирской язвы; и бактериальный антиген риккетсии.
[0113]
Грибковый антиген конкретно не ограничивается, и примеры включают компоненты антимикробного антигена candida; гистоплазменный грибковый антиген; грибковый антиген Cryptococcus; грибковый антиген кокцидиоидоза; и грибковый антиген ringwork.
[0114]
Протозойный или паразитарный антиген конкретно не ограничивается, и примеры включают антиген plasmodium falciparum; антиген toxoplasma; антиген schistosoma; антиген Leishmania; и антиген trypanosome cruzi.
[0115]
Раковый антиген конкретно не ограничивается, и примеры включают те раковые антигены, которые происходят из клеточной поверхности клеток опухолевой ткани, протоплазмы, ядер и клеточных органелл. Примеры рака включают лейкоз, лимфому, нервную опухоль, меланому, рак молочной железы, рак легких, рак головы и шеи, рак желудка, рак толстой кишки, рак печени, рак поджелудочной железы, рак шейки матки, рак матки, рак яичников, вагинальный рак, тестикулярный рак, рак предстательной железы, рак полового члена, рак кости, гемангиому, рак губы, рак эпифаринкса, рак глотки, карциному пищевода, рак прямой кишки, карциному желчного пузыря, рак желчных протоков, рак гортани, карциному мочевого пузыря, рак почки, опухоль головного мозга, карциному щитовидной железы, болезнь Ходжкина и неходжкинскую лимфому. Следует отметить, что типичные примеры ракового антигена включают HER2/neu (связанный с человеческим EGFR 2), CEA (канцерогенный эмбриональный антиген), MAGE (ассоциированный с меланомой антиген), XAGE (член семейства антигенов X), NY-ESO-1, gp100, Melan/mart-1, тирозиназу, PSA (простата-специфический антиген), PAP (кислая фосфатаза простаты), p53, K-ras, N-ras, Bcr-Abl, MUC-1 (муцин-1), PSMA (простата-специфический мембранный антиген), связанный с выживанием WT-1 (супрессорный ген 1 опухоли Вильмса), AFP (альфа-фетопротеин), GPC (глипикан) и EGFR (рецептор эпидермального фактора роста).
[0116]
Антиген, связанный с аллергией, конкретно не ограничивается, и примеры включают пыльцевой антиген, такой как антиген пыльцы кедра, антиген пыльцы амброзии и антиген пыльцы райграса; антиген животного происхождения, такой как антиген крысиного клеща и кошачий антиген; гистосовместимый антиген; и терапевтический препарат, такой как пенициллин.
[0117]
Связанный с заболеванием антиген (аутоиммунное заболевание, аллергия и т. д.) конкретно не ограничивается, и примеры включают диабет, суставный ревматизм, миастению gravis, системную красную волчанку, атопический дерматит, псориаз, синдром Шегрена, алопецию, болезнь Крона, язвенный колит, конъюнктивит, кератоконъюнктивит, астму, аллергическую астму, проктит, медикаментозную сыпь, аллергический энцефаломиелит, острую некротизирующую геморрагическую энцефалопатию, гипопластическую анемию, эритробластную анемию, идиопатическую тромбоцитопению, гранулематоз Вегенера, синдром Стивенса-Джонсона и интерстициальный легочный фиброз. Конкретные примеры антигена, связанного с аутоиммунным заболеванием, включают декарбоксилазу 65 глутаминовой кислоты (GA9D 65), природную ДНК, основной белок миелина, белок миелолинового протеолипида, компоненты рецептора ацетилхолина, тиреоглобулин и рецептор тиреоид-стимулирующего гормона (TSH).
[0118]
Антиген, связанный с отторжением трансплантата, конкретно не ограничивается, и примеры включают антигенные компоненты трансплантата, подлежащие переносу в организм реципиента трансплантата, такие как компоненты трансплантата для сердца, легких, печени, поджелудочной железы, почек и нервов.
[0119]
Указанные выше антигены можно использовать либо отдельно, либо в комбинации, включающей два или более из них.
[0120]
Содержание антигена предпочтительнымо составляет 3,2-400 мкг, более предпочтительно 16-80 мкг, на 100 нмоль амфипатического вещества, образующего pH-чувствительный носитель.
[0121]
Процент антигена, который должен быть включен, конкретно не ограничивается; хотя антиген и адъювантная композиция огут существовать независимо, процент включения предпочтительно должен быть не меньше чем 3%, более предпочтительно 5% - 80%, и еще более предпочтительно 10% - 60%. Когда процент включения составляет не меньше чем 3%, например, когда происходит эндоцитоз вакцинной композиции в клетках, антиген весьма вероятно проникает в эндосому, в которую попадает адъювантная композиция, и может быть подходящим образом получен эффект изобретения, который является желательным. Следует отметить, что ʺпроцент включения антигенаʺ означает, в основном, пропорцию, в которой антиген нанесен на, или включен в, адъювантную композицию, в качестве величины процента включения подходящими являются значения, измеренные способом, описанным в Примерах.
[0122]
[Добавки]
Вакцинная композиция может содержать другие фармацевтические добавки.
[0123]
Полезные добавки варьируются в зависимости от дозированной формы вакцинной композиции. В этом случае вакцинная композиция может представлять собой твердый препарат, такой как таблетка, порошок и капсула, или может представлять собой жидкий препарат, такой как препарат для инъекций, но предпочтительно представляет собой жидкий препарат. Следует отметить, что в случае жидкого препарата он может поставляться в виде высушенного продукта, который восстанавливают водой или другим подходящим эксципиентом во время использования.
[0124]
В случае, когда вакцинная композиция находится в форме таблеток или капсул, желательно нанесение на них энтеросолюбильного покрытия обычным способом. В качестве энтеросолюбильного покрытия можно использовать те, которые обычно используют в соответствующей области. Кроме того, капсулы могут содержать как порошок, так и жидкость.
[0125]
Кроме того, в случае, когда вакцинная композиция представляет собой твердый препарат, он может содержать эксципиент (например, сахар, такой как лактоза, сахароза и т.д., крахмал, такой как кукурузный крахмал и т.д., целлюлозы, такие как кристаллическая целлюлоза и т.д., аравийская камедь, алюминат метасиликата магния, фосфат кальция и подобные); смазывающее вещество (например, стеарат магния, тальк, полиэтиленгликоль и подобные); связующее (например, сахар, такой как маннит, сахароза и т.д., кристаллическая целлюлоза, поливинилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлоза и т.п.); разрыхлитель (например, крахмалы, такие как картофельный крахмал и т.д., целлюлозы, такие как карбоксиметилцеллюлоза и т.д., сшитый поливинилпирролидон и т.д.); краситель и корригент.
[0126]
С другой стороны, в случае, когда вакцинная композиция представляет собой жидкий препарат, он может содержать растворитель (например, физиологический раствор, стерилизованная вода, буферный раствор и т.д.), мембранный стабилизатор (например, холестерин и т.д.), тонический агент (например, хлорид натрия, глюкоза, глицерин и т.д.), антиоксидант (например, токоферол, аскорбиновая кислота, глутатион и т.д.) и антисептики (например, хлорбутанол, парабен и т.д.). Следует отметить, что растворитель может быть растворителем, который используется для получения вакцинной композиции.
[0127]
В соответствии с одним вариантом осуществления настоящего изобретения, вакцинная композиция может индуцировать клеточно-опосредованный иммунитет через эффективную кросс-презентацию антигена. Это позволяет индуцировать CTL, например. Термин ʺиндуцировать клеточно-опосредованный иммунитетʺ здесь означает, что можно получить образование множества пятен в методе иммуноферментных пятен, описанном в настоящей заявке, по сравнению с контролем, который не обрабатывали композицией вакцины (т.е. который представляет собой смесь антигена и алюминий-содержащего вещества).
[0128]
Кроме того, в соответствии с другим вариантом осуществления настоящего изобретения, вакцинная композиция может индуцировать гуморальный иммунитет. Это делает возможной продукцию антитела, такого как IgG. В этом случае, термин ʺиндуцировать гуморальный иммунитетʺ означает, что получают высокий титр IgG антител по сравнению с контролем, которому вводили антиген.
[0129]
[Применение]
Вакцинная композиция в соответствии с настоящим аспектом, при введении субъекту и при снижении pH окружающей среды ниже физиологического pH (например, pH 6,5) демонстрирует эффект промотирования функции разрушения мембран или эффект промотирования функции разрушения мембран и эффект промотирования функции слияния мембран, позволяя посредством этого антигену эффективно высвобождаться в цитоплазматический субстрат. Затем, клеточно-опосредованный иммунитет можно индуцировать подходящим образом и можно придать иммунитет.
[0130]
Поэтому, в соответствии с одним аспектом настоящего изобретения, обеспечивается способ лечения или профилактики заболевания, включающий введение эффективного количества вакцинной композиции субъекту, который нуждается в лечении или профилактике заболевания.
[0131]
Способ введения вакцинной композиции конкретно не ограничивается, и его примеры включают пероральное введение; парентеральное введение, такое как внутривенная инъекция, артериальная инъекция, подкожная инъекция, внутрикожная инъекция, внутримышечная инъекция, интратекальная инъекция, внутрикожное введение или чрескожную абсорбцию и т.д. Например, в случае использования пептида или белка в качестве антигена, предпочтительно введение парентеральным путем, в частности, введение путем подкожной инъекции, внутрикожной инъекции, внутримышечной инъекции или внутривенной инъекции. Следует отметить, что вакцинную композицию, в которой антиген независимо смешан, не будучи нанесенным на, или включенным в, адъювантную композицию, предпочтительно вводить в форме для местного введения, в частности, подкожного введения, внутрикожного введения или внутримышечного введения.
[0132]
Указанный выше субъект предпочтительно представляет собой млекопитающее, особенно предпочтительно человека.
[0133]
Примеры вышеуказанных заболеваний включают следующие: вирусные инфекционные заболевания, такие как синдром иммунодефицита человека (ВИЧ), гепатит и грипп; бактериальная инъекция, такая как коклюш, дифтерия, столбняк, туберкулез, Helicobacter pylori и микробизм, вызванный пневмококком; микоз, такой как кандидоз; протозойная или паразитарная инфекция, такая как малярия; рак, такой как лейкоз, лимфома, нервная опухоль, меланома, рак молочной железы, рак легких, рак головы и шеи, рак желудка, рак толстой кишки, рак печени, рак поджелудочной железы, рак шейки матки, рак матки, рак яичников, вагинальный рак, тестикулярный рак, рак предстательной железы, рак полового члена, рак кости, гемангиома, рак губы, рак эпифаринкса, рак глотки, карцинома пищевода, рак прямой кишки, карцинома желчного пузыря, рак желчного протока, рак гортани, рак легких, карцинома мочевого пузыря, рак почки, опухоль головного мозга, карцинома щитовидной железы, болезнь Ходжкина и неходжкинская лимфома; аллергия, вызванная пыльцой кедра; аутоиммунное заболевание, такое как диабет, суставный ревматизм, миастения gravis и системная красная волчанка; и отторжение трансплантата, такое как болезнь трансплантат-против-хозяина (GVHD).
[0134]
В соответствии с одним предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения, обеспечивается способ лечения или профилактики заболевания. Для такого открытия можно, по мере необходимости, обращаться к общим техническим знаниям на момент подачи заявки.
[0135]
Кроме того, в одном варианте осуществления настоящего изобретения вакцинная композиция позволяет транспортировать антиген в клетки путем культивирования. Другими словами, в соответствии с одним аспектом настоящего изобретения, обеспечивается способ культивирования для транспортировки антигена в клетки.
[0136]
Способ культивирования включает стадию культивирования клеток в культуральной среде, содержащей вакцинную композицию.
[0137]
Культуральная среда конкретно не ограничивается, и можно использовать известные среды. Конкретные примеры подходящей для использования культуральной среды включают MEM, DMEM и RPMI.
[0138]
Количество вакцинной композиции, которое может быть добавлено к культуральной среде, конкретно не ограничивается, но молярная концентрация амфипатического вещества предпочтительно составляет 0,66 мкмоль/л - 1,0 ммоль/л, более предпочтительно 6,6 мкмоль/л - 0,88 ммоль/л, и еще более предпочтительно 7,2 мкмоль/л - 0,56 ммоль/л.
[0139]
Кроме того, pH культуральной среды предпочтительно должен быть не меньше чем 7,0, и более предпочтительно 7,2-7,8. Когда pH культуральной среды не меньше чем 7,0, это может воспрепятствовать тому, чтобы pH-чувствительное соединение, образующее pH-чувствительный носитель, становилось нестабильным в культуральной среде, что является предпочтительным.
[0140]
Клетки конкретно не ограничиваются, и их примеры включают клетки, собранные у субъекта, и сформировавшиеся культивированные клетки.
[0141]
В этом случае, конкретные примеры клеток, собранных у субъекта, или сформировавшихся культивированных клеток включают дендритные клетки, NK (Природные Киллерные) клетки, T-клетки, B-лимфоциты и лимфобласты.
[0142]
Из указанных выше клеток, предпочтительными для использования являются клетки, собранные у субъекта, более предпочтительными для использования являются дендритные клетки, NK клетки, T-клетки, лимфобласты и т.п., собранные у субъекта, и более предпочтительными для использования являются дендритные клетки.
[0143]
в случае использования клеток, собранных у субъекта, клетки собирают у субъекта путем взятия крови, биопсии или т.п. Иными словами, в одном варианте осуществления способ культивирования может включать стадию сбора клеток у субъекта.
[0144]
Следует отметить, что культивированные клетки можно вводить субъекту. Это делает возможным лечение или профилактику заболевания у субъекта. Таким образом, в одном варианте осуществления настоящего изобретения обеспечивается способ лечения или профилактики заболевания.
[0145]
В одном предпочтительном варианте осуществления, способ лечения или профилактики включает стадию сбора клеток у субъекта, стадию культивирования собранных клеток в культуральной среде, содержащей вакцинную композицию, и стадию введения культивированных клеток субъекту.
[0146]
Это делает возможным лечение или профилактику заболевания. Следует отметить, что заболевание является таким, которое указано выше.
[0147]
<Способ получения адъювантной композиции>
Адъювантную композицию в соответствии с настоящим изобретением можно получить различными способами без конкретных ограничений.
[0148]
Например, адъювантную композицию, в которой pH-чувствительный носитель и алюминий-содержащее вещество существуют независимо, можно получить путем смешивания pH-чувствительного носителя и алюминий-содержащего вещества. Кроме того, адъювантную композицию, в которой алюминий-содержащее вещество нанесено на, или включено в, pH-чувствительный носитель, можно получить путем приведения pH-чувствительного носителя и алюминий-содержащего вещества в ассоциацию друг с другом.
[0149]
Далее представлено подробное описание предпочтительного варианта осуществления использования pH-чувствительного носителя, который включает предварительно определенное pH-чувствительное соединение и предварительно определенное амфипатическое вещество, и который обладает действием, промотирующим функцию разрушения мембран, в качестве pH-чувствительного носителя.
[0150]
Способ получения адъювантной композиции в соответствии с настоящим аспектом включает стадию приведения в ассоциацию друг с другом по меньшей мере одного pH-чувствительного соединения, выбранного из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей, по меньшей мере одного амфипатического вещества, выбранного из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и алюминий-содержащего вещества.
[0151]
Для осуществления способа приведения pH-чувствительного соединения, амфипатического вещества и алюминий-содержащего вещества в ассоциацию друг с другом может быть достаточным контактирование pH-чувствительного соединения, амфипатического вещества и алюминий-содержащего веществ друга с другом в водном растворе. Поэтому адъювантную композицию в соответствии с настоящим аспектом можно получить путем приведения pH-чувствительного соединения, амфипатического вещества и алюминий-содержащего вещества в контакт друг с другом в водном растворе.
[0152]
Способ для приведения pH-чувствительного соединения, амфипатического вещества и алюминий-содержащего вещества в контакт друг с другом в водном растворе конкретно не ограничивается, при условии, что они образуют ассоциированное вещество. Примеры способа включают (1) <a> способ, в котором водный раствор, содержащий pH-чувствительное соединение, водный раствор, содержащий амфипатическое вещество, и водный раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество, получают отдельно, эти водные растворы смешивают вместе и образовавшийся раствор интенсивно перемешивают для получения дисперсии, используя эмульгатор или т.п., с получением адъювантной композиции; <b> способ, в котором водный раствор, содержащий pH-чувствительное соединение, и водный раствор, содержащий амфипатическое вещество, смешивают вместе, образовавшийся раствор интенсивно перемешивают для получения дисперсии, используя эмульгатор или т.п., с получением дисперсии pH-чувствительного носителя, затем дисперсию смешивают с алюминий-содержащим веществом или водным раствором, содержащим алюминий-содержащее вещество, с получением адъювантной композиции; <c> способ, в котором pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество диспергируют в водном растворе, раствор интенсивно перемешивают для получения дисперсии, используя эмульгатор или т.п., с получением дисперсии pH-чувствительного носителя, затем дисперсию смешивают с алюминий-содержащим веществом или водным раствором, содержащим алюминий-содержащее вещество, с получением адъювантной композиции; и (2) способ получения адъювантной композиции методом Бэнгхема, который известно как метод получения липосом. Следует отметить, что касается конкретного метода, такого как метод Бэнгхема, его можно осуществить, например, следующим образом. А именно, сначала компоненты pH-чувствительного носителя растворяют в органическом растворителе (например, метанол или хлороформ) в стеклянном контейнере и органический растворитель удаляют на роторном испарителе или т.п., вызывая образование тонкой пленки на стенках стеклянного контейнера. Затем водный раствор добавляют в стеклянный контейнер, в котором образовалась тонкая пленка, тонкая пленка при этом набухает при 5°C - 35°C, и затем стеклянный контейнер встряхивают при 5°C - 35°C. В этом случае, тонкую пленку можно в достаточной степени диспергировать в водном растворе при интенсивном перемешивании с использованием эмульгатора, вихревого смесителя, ультразвука или т.п. Путем диспергирования тонкопленочного компонента в водном растворе получают водный раствор, содержащий pH-чувствительный носитель (дисперсию pH-чувствительного носителя). Водный раствор, содержащий pH-чувствительный носитель (дисперсию pH-чувствительного носителя), и водный раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество, смешивают друг с другом, таким образом, получают адъювантную композицию. При этом, в случае, когда водный раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество, используют в качестве водного раствора, который может быть добавлен к тонкой пленке, адъювантную композицию можно получить путем диспергирования тонкой пленки. Подробное описание метода Бэнгхема можно найти со ссылкой на известные способы получения липосом, и они описаны в ʺLiposomeʺ (составители Shoshichi Nojima, Junzo Sunamoto и Keizo Inoue, опубликован Nankoudo) и ʺLiposome in Life Scienceʺ (составители Hiroshi Terada и Tetsuro Yoshimura, опубликован Springer-Verlap, Tokyo).
[0153]
В описанном выше способе получения (1), интенсивное диспергирование для получения дисперсии можно осуществить, используя эмульгатор, вихревой смеситель, ультразвук или т.п. Кроме того, водный раствор, содержащий амфипатическое вещество, можно смешать с pH-чувствительным соединением и алюминий-содержащим веществом. Следует отметить, что в качестве растворителя для водного раствора можно использовать растворители для водного раствора, указанные выше. В описанном выше способе (1), температуры для получения водных растворов и температура для смешивания водных растворов конкретно не ограничиваются и предпочтительно находятся в диапазоне 5°C - 35°C, более предпочтительна нормальная температура от 15°C до 25°C.
[0154]
Следует отметить, что способ добавления других компонентов, таких как стабилизатор, которые могут содержаться в адъювантной композиции, содержащей водный растворитель в качестве компонента, конкретно не ограничивается. Например, другие компоненты можно добавить к водному раствору, содержащему pH-чувствительное соединение, водному раствору, содержащему амфипатическое вещество, и/или водному раствору, содержащему алюминий-содержащее вещество. Альтернативно, во время получения тонкой пленки методом Бэнгхема другие компоненты можно растворить вместе с компонентами адъювантной композиции, и тонкую пленку, содержащую эти компоненты, можно использовать для получения, таким образом, водного раствора, содержащего адъювантную композицию.
[0155]
В качестве водного раствора, содержащего pH-чувствительное соединение, водного раствора, содержащего амфипатическое вещество, и водного раствора, содержащего алюминий-содержащее вещество, можно использовать растворы, подобные тем, которые используют в ʺспособе получения вакцинной композицииʺ, описанном ниже, или которые получены со ссылкой на этот способ получения.
[0156]
<Способ получения вакцинной композиции>
Способ получения вакцинной композиции в соответствии с настоящим изобретением конкретно не ограничивается, и вакцинную композицию можно получить различными способами. Способ получения вакцинной композиции в соответствии с одним вариантом осуществления включает: стадию приведения в ассоциацию друг с другом по меньшей мере одного pH-чувствительного соединения, выбранного из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей, по меньшей мере одного амфипатического вещества, выбранного из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и алюминий-содержащего вещества; и стадию смешивания антигена с ассоциированным веществом, полученным путем ассоциации.
[0157]
На стадии смешивания антигена с ассоциированным веществом достаточно смешать антиген в водном растворе, содержащем ассоциированное вещество. Например, адъювантную композицию, полученную описанным выше способом (1) или (2), и антиген можно смешать друг с другом, таким образом, можно получить вакцинную композицию. Примеры подходящего способа включают: (V-1) <a> способ, в котором водный раствор, содержащий pH-чувствительное соединение, водный раствор, содержащий амфипатическое вещество, водный раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество, и водный раствор, содержащий антиген, получают отдельно, эти водные растворы смешивают и образовавшийся раствор интенсивно перемешивают для получения дисперсии, используя эмульгатор или т.п., с получением вакцинной композиции; <b> способ, в котором водный раствор, содержащий pH-чувствительное соединение, и водный раствор, содержащий амфипатическое вещество, смешивают, образовавшийся раствор интенсивно перемешивают для получения дисперсии, используя эмульгатор или т.п., с получением дисперсии pH-чувствительного носителя, затем дисперсию смешивают с алюминий-содержащим веществом (или с содержащим его водным раствором) и антигеном (или содержащим его водным раствором), с получением вакцинной композиции; <c> способ, в котором pH-чувствительное соединение и амфипатическое вещество диспергируют в водном растворе, образовавшийся раствор интенсивно перемешивают для получения дисперсии, используя эмульгатор или т.п., с получением дисперсии pH-чувствительного носителя, и затем дисперсию смешивают с алюминий-содержащим веществом (или с содержащим его водным раствором) и антигеном (или содержащим его водным раствором) с получением вакцинной композиции; и (V-2) способ, в котором адъювантную композицию, полученную указанным выше методом Бэнгхема (2), смешивают с антигеном или водным раствором, содержащим антиген, с получением вакцинной композиции. В этом случае, раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество и антиген, можно использовать в качестве водного раствора, который добавляют к тонкой пленке, образованной из компонентов pH-чувствительного носителя. Кроме того, водный раствор, содержащий антиген, можно использовать в качестве водного раствора, который добавляют к тонкой пленке, и затем с полученной смесью можно смешать водный раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество.
[0158]
Температура, при которой водный раствор, содержащий антиген, смешивают с адъювантной композицией или дисперсией pH-чувствительного носителя, конкретно не ограничивается и предпочтительно составляет 5°C - 35°C, более предпочтительно представляет собой нормальную температуру от 15°C до 25°C.
[0159]
В качестве водного раствора, содержащего pH-чувствительное соединение, водного раствора, содержащего амфипатическое вещество, водного раствора, содержащего алюминий-содержащее вещество, водного раствора, содержащего антиген, и водного раствора, содержащего антиген и алюминий-содержащее вещество, можно использовать растворы, полученные следующим образом.
[0160]
(Водный раствор, содержащий pH-чувствительное соединение)
Раствор, содержащий pH-чувствительное соединение, содержит pH-чувствительное соединение и растворитель. Кроме того, он может содержать добавки, если необходимо.
[0161]
В качестве pH-чувствительного соединения, можно использовать такие, которые были указаны выше, и, следовательно, их описание здесь опускается.
[0162]
В качестве растворителя можно использовать стерилизованную воду и т.п., а также водные растворы, содержащие буферный агент, NaCl и сахар, такой как глюкоза и сахароза. Из них предпочтительными для использования являются физиологический солевой раствор, стерилизованная вода и буферы, с точки зрения того, что они являются подходящими для введения вакцинной композиции в живой организм.
[0163]
В водном растворе, содержащем pH-чувствительное соединение, молярная концентрация pH-чувствительного соединения предпочтительно составляет не меньше чем 5 мкмоль/л, более предпочтительно не меньше чем 10 мкмоль/л, еще более предпочтительно не меньше чем 50 мкмоль/л, особенно предпочтительно не меньше чем 100 мкмоль/л, и наиболее предпочтительноне меньше чем 1 ммоль/л. Кроме того, молярная концентрация pH-чувствительного соединения в водном растворе предпочтительно составляет не больше чем 500 ммоль/л, более предпочтительно не больше чем 300 ммоль/л, еще более предпочтительно не больше чем 250 ммоль/л, и особенно предпочтительно не больше чем 200 ммоль/л.
[0164]
Кроме того, с точки зрения уменьшения побочных реакций, молярная концентрация pH-чувствительного соединения предпочтительно составляет 100 мкмоль/л - 300 ммоль/л, более предпочтительно 1-200 ммоль/л.
[0165]
(Водный раствор, содержащий амфипатическое вещество)
Раствор, содержащий амфипатическое вещество, содержит амфипатическое вещество и растворитель. Кроме того, он может содержать добавки, если необходимо.
[0166]
В качестве амфипатического вещества и растворителя можно использовать вещества, которые были указаны выше, и, следовательно, их описание здесь опускается.
[0167]
В водном растворе, содержащем амфипатическое вещество, молярная концентрация амфипатического вещества предпочтительно составляет не меньше чем 5 мкмоль/л, более предпочтительно не меньше чем 10 мкмоль/л, еще более предпочтительно не меньше чем 50 мкмоль/л, особенно предпочтительно не меньше чем 100 мкмоль/л, и наиболее предпочтительноне меньше чем 500 мкмоль/л. Кроме того, молярная концентрация амфипатического вещества в водном растворе предпочтительно составляет не больше чем 500 ммоль/л, более предпочтительно не больше чем 300 ммоль/л, еще более предпочтительно не больше чем 250 ммоль/л, особенно предпочтительно не больше чем 200 ммоль/л, и наиболее предпочтительноне больше чем 150 ммоль/л.
[0168]
Кроме того, с точки зрения уменьшения побочных реакций, молярная концентрация амфипатического вещества предпочтительно составляет 50 мкмоль/л - 200 ммоль/л, более предпочтительно 500 мкмоль/л - 150 ммоль/л.
[0169]
(Водный раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество)
Раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество, содержит алюминий-содержащее вещество и растворитель. Кроме того, он может содержать добавки, если необходимо.
[0170]
В качестве алюминий-содержащего вещества и растворителя можно использовать вещества, которые были указаны выше, и, следовательно, их описание здесь опускается.
[0171]
Концентрация алюминия в водном растворе, содержащем алюминий-содержащее вещество, предпочтительно составляет 1 мкг/100 мкл - 100 мкг/100 мкл, более предпочтительно 10 мкг/100 мкл - 100 мкг/100 мкл, в расчете на металлический алюминий.
[0172]
(Водный раствор, содержащий антиген)
Раствор, содержащий антиген, содержит антиген и растворитель.
[0173]
В качестве антигена и растворителя можно использовать такие, которые были указаны выше, и, следовательно, их описание здесь опускается.
[0174]
Смешивание
Способ смешивания водного раствора, содержащего pH-чувствительное соединение, водного раствора, содержащего амфипатическое вещество, водного раствора, содержащего алюминий-содержащее вещество, и водного раствора, содержащего антиген, который указан выше, конкретно не ограничивается.
[0175]
Предпочтительным является диспергирование компонентов при перемешивании полученной смешанной жидкости, и перемешивание можно осуществить, используя, например, эмульгатор, вихревой смеситель, ультразвук или т.п.
[0176]
Следует отметить, что в одном варианте осуществления водный раствор, содержащий pH-чувствительное соединение, водный раствор, содержащий амфипатическое вещество, водный раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество, и водный раствор, содержащий антиген, могут быть в форме смешанной жидкости, полученной путем объединения двух или более из этих составляющих, не делая их отдельными растворами. Например, получают водный раствор, содержащий pH-чувствительное соединение, и водный раствор, содержащий алюминий-содержащее вещество, и затем этот полученный раствор можно смешать с водным раствором, содержащим амфипатическое вещество, и водным раствором, содержащим антиген.
ПРИМЕРЫ
[0177]
Настоящее изобретение будет описано более подробно ниже при помощи Примеров, но настоящее изобретение никоим образом не должно ограничиваться этими Примерами.
[0178]
<Исходные вещества>
В примерах использовали следующие соединения. В случае, когда название реагента идентично названию продукта, название продукта опускается.
[0179]
(1) pH-чувствительное соединение, амфипатическое вещество и т.д.
⋅Дезоксихолат натрия (от Nacalai Tesque Inc.)
⋅Холат натрия (от Nacalai Tesque Inc.)
⋅Урсодезоксихолат натрия (от Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.)
⋅Хенодезоксихолевая кислота (от Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.)
⋅Гиодезоксихолевая кислота (от Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.)
⋅Натрия гликодезоксихолат (от Nacalai Tesque Inc.)
⋅Моноаммоний глицирризинат (от Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.)
⋅EYPC (негидрированный фосфатидилхолин яичного желтка: от NOF Corporation, COATSOME NC-50)
⋅DDPC (1,2-дидеканоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин: от NOF Corporation, COATSOME MC-1010)
⋅DLPC (1,2-дилауроил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин: от NOF Corporation, COATSOME MC-1212)
⋅Сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты (Tween 20, 80: от Tokyo Chemical Industry Col, Ltd.)
⋅Сложный эфир сорбитана и жирной кислоты (SPAN 80: от Nacalai Tesque Inc., сорбитанмоноолеат)
⋅Полиоксиэтилен касторовое масло (от Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Полиоксиэтилен 10 касторовое масло)
⋅Токоферол (от Nacalai Tesque Inc., DL-α-токоферол)
(2) Вещество, обладающее стимулирующим действием, которое активирует природный иммунитет и т.д.
⋅CpG-DNA (CpG-ODN: от InvivoGen, ODN-2395)
⋅Токоферолацетат (DL-α-токоферолацетат: от Nacalai Tesque Inc.)
⋅Гидроксид алюминия (от InvivoGen, Alгидрогель 2%)
⋅Фосфат алюминия (от Alpha Diagnostic International, Adjuphos)
⋅Сульфат алюминия-калия (от InvivoGen, кристаллические квасцы)
(3) Растворитель и т.д.
⋅Вода для инъекций (от Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.)
⋅MES-Na (от Merck Ltd.)
⋅Натрия хлорид (от Kanto Chemical Co., Inc.)
⋅PBS таблетки (Фосфатно-солевой буферный раствор: от Takara Bio Inc.)
⋅Метанол (от Nacalai Tesque Inc.)
⋅Этанол (от Kanto Chemical Co., Inc.)
⋅Хлороформ (от Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)
⋅Водный раствор гидроксида натрия (0,1 моль/л: от Nacalai Tesque Inc.)
⋅Хлористоводородная кислота (0,1 моль/л, 1 моль/л: от Nacalai Tesque Inc.)
⋅OVA пептид: SIINFEKL (закупаемый со стороны для синтеза компанией PH Japan Co., Ltd.) (Далее может быть просто указан как ʺпептидʺ).
⋅OVA белок (Овальбумин: от Wako Pure Chemical Industries, Inc., овальбумин с низкой эндотоксичностью) (Далее может быть просто указан как ʺOVAʺ).
(4) Культуральная среда и т.д.
⋅RPMI (от Nacalai Tesque Inc., RPMI 1640 культуральная среда (жидкость))
⋅Пенициллин-Стрептомицин смешанный раствор (от Nacalai Tesque Inc.)
⋅FBS (Фетальная бычья сыворотка, сертифицированная, термоинактивированная, происхождение США: от Gibco)
⋅RBC лизирующий буфер (от Santa Cruz Biotechnology): эритроцит-гемолитический буфер
⋅HBSS (сбалансированный солевой раствор Хэнкса: от Nacalai Tesque Inc.)
⋅D-PBS (Фосфатно-солевой буферный раствор Дульбекко: от Nacalai Tesque Inc.)
(5) Другие реагенты
⋅Фосфолипид C-Test wako (от Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)
⋅Пиранин (от Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.)
⋅DPX (п-ксилол-бис-пиридиний бромид: от Molecular probes Inc.)
⋅Triton-X100 (от Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)
⋅NBD-PE (1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N(7-нитро-2-1,3-бензоксадиазол-4-ил)аммония: от Avanti Polar Lipids, Inc.)
⋅Rh-PE (1,2-диолеил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-(лиссамин родамин B сульфонил)аммоний: от Avanti Polar Lipids, Inc.): флуоресцентно-меченный липид
⋅Набор ELISPOT с мышиным IFNγ (от BD Biosciences, Inc.)
⋅Содержащий AEC Субстрат набор (от BD Biosciences, Inc.)
⋅Гидрокарбонат натрия (от Wako Pure Chemical Industries, Inc.)
⋅Карбонат натрия (от Wako Pure Chemical Industries, Inc.)
⋅Вторичное антитело (анти-мышиное IgG HRP конъюгат, от R&D systems, Inc.)
⋅Альбумин (Альбумин из бычьей сыворотки, от Sigma Corporation)
⋅Набор для проявления цвета для пероксидазы (от Sumitomo Bakelite Co., Ltd.)
(6) Животные
C57BL/6N мыши, самки, (возраст шесть-восемь недель), закупали у Japan S.L.C, Inc. Эксперименты осуществляли в соответствии с руководством по проведению экспериментов на животных, разработанным Terumo Corporation.
[0180]
<Используемое оборудование>
Ультразвуковой излучатель: USC-J
Спектрофотометр: FP-6500
Спектрофотометр в УФ и видимой областях спектра: UV-3600
CO2 инкубатор: MCO20AIC
<Клеточная культура>
Культивирование клеток осуществляли с использованием инкубатора (MCO20AIC), установленного на 5% CO2 и 37°C.
[0181]
<Подготовка образца и т.д.>
(MES Буфер)
Получали из MES (25 мМ) и NaCl (125 мМ). MES имел значение pH 7,4, если не указано иное.
(PBS)
PBS получали путем растворения 10 таблеток PBS (от Takara Bio Inc.) в 1000 мл дистиллированной воды. Следует отметить, что pH был на уровне 7,35-7,65. Альтернативно, закупленный D-PBS использовали в качестве PBS.
(RPMI среда)
Пенициллин (100 Ед./мл) и стрептомицин (100 мг/мл) добавляли в качестве антибиотиков. Кроме того, дополнительно добавляли FBS, если необходимо, с получением RPMI среды, содержащей 10% сыворотки.
(Первичный раствор кандидата природный иммунитет-активирующего вещества (это вещество далее может быть указано как вещество-кандидат))
⋅Первичный раствор токоферола
10 мг токоферола отвешивали и растворяли в 1,0 мл этанола. Полученный раствор затем 10-кратно разбавляли при помощи PBS, с получением первичного раствора токоферола.
⋅Первичный раствор токоферолацетата
10 мг токоферолацетата отвешивали и растворяли в 1,0 мл этанола. Полученный раствор затем 10-кратно разбавляли при помощи PBS, с получением первичного раствора токоферолацетата.
⋅Первичный раствор алюминия
В качестве алюминия использовали гидроксид алюминия, фосфат алюминия и сульфат алюминия-калия.
[0182]
в случае, когда гидроксид алюминия использовали в качестве алюминия, и когда конечная концентрация составляла 100 мкг/100 мкл, исходную жидкость, содержащую закупленный реагент (концентрация алюминия (в расчете на металлический алюминий): приблизительно 10 мг/мл), использовали в качестве первичного раствора алюминия для получения адъювантной композиции. В случае, когда конечная концентрация была ниже чем 100 мкг/100 мкл, исходную жидкость, содержащую закупленный реагент, разбавляли при помощи PBS с получением первичного раствора алюминия, который использовали для получения адъювантной композиции. В частности, в случае, когда конечная концентрация была 10 мкг/100 мкл, исходную жидкость, содержащую закупленный реагент, 10-кратно разбавляли при помощи PBS, перед использованием для получения адъювантной композиции. В случаях, когда конечная концентрация составляла 1 мкг/100 мкл и 0,1 мкг/100 мкл, осуществляли 100-разбавление при помощи PBS и 1000-разбавление при помощи PBS, соответственно, с получением первичных растворов алюминия, которые использовали для получения адъювантной композиции.
[0183]
В случае, когда фосфат алюминия использовали в качестве алюминия, исходную жидкость, содержащую закупленный реагент, и жидкость, полученную путем разбавления исходной жидкости при помощи PBS, использовали в качестве первичных растворов алюминия для получения адъювантных композиций, как в случае гидроксида алюминия.
[0184]
10 мг сульфата алюминия-калия отвешивали и растворяли в 1 мл воды для инъекций. Полученный раствор обрабатывали таким же способом, как исходную жидкость, содержащую закупленный реагент, в случае гидроксида алюминия, для использования для получения адъювантных композиций.
[0185]
(Получение pH-чувствительного носителя)
Получение методом Бэнгхема
1000 нмоль амфипатического вещества растворяли в метаноле (или хлороформе) и pH-чувствительное соединение, растворенное в метаноле (или хлороформе), смешивали в 10-мл грушевидной колбе и растворитель выпаривали, с получением тонкой пленки. К полученное тонкой пленке добавляли 0,5 мл MES Буфера (в случае испытания высвобождения и испытания слияния мембран) или 0,5 мл PBS (в случае иммунизации мыши) и осуществляли диспергирование с использованием ультразвукового излучателя, с получением дисперсии(раствора) pH-чувствительного носителя. Кроме того, во время использования дисперсию (раствор) разбавляли MES буфером или PBS, с учетом при этом общего количества.
[0186]
Получение путем смешивания
Отвешивали заданное количество pH-чувствительного соединения и растворяли в MES Буфере или PBS, с получением раствора pH-чувствительного соединения. Затем отвешивали заданное количество амфипатического вещества, полученный раствор добавляли и смешивали с ранее полученным раствором pH-чувствительного соединения, с получением, таким образом, дисперсии (раствора) pH-чувствительного носителя. Процедуру осуществляли при комнатной температуре. В частности, в случае pH-чувствительного носителя, состоящего из 1600 нмоль дезоксихолевой кислоты на 1000 нмоль DLPC, отвешивали 13,8 мг дезоксихолата натрия моногидрата и растворяли в 10 мл MES Буфера или PBS. Затем отвешивали 12,4 мг DLPC и добавляли и смешивали с ранее полученным раствором дезоксихолевой кислоты с получением, таким образом, дисперсии pH-чувствительного носителя. Кроме того, во время использования дисперсию (раствор) разбавляли MES Буфером или PBS, с учетом при этом общего количества.
[0187]
Следует отметить, что соотношение между амфипатическим веществом и pH-чувствительным соединением регулировали для получения нужного соотношения. Кроме того, в случае использования нескольких амфипатических веществ, регулирование осуществляли так, чтобы их общее количество представляло собой необходимое молярное количество (1000 нмоль). Кроме того, используемое количество pH-чувствительного соединения, указанное в Примерах и пояснении к чертежам, означает количество в расчете на 100 нмоль амфипатического вещества.
[0188]
(Получение адъювантной композиции и вакцинной композиции)
Первичный раствор кандидата природного иммунитет-активирующего вещества (далее указано также как вещество-кандидат) добавляли к полученной дисперсии (раствору) pH-чувствительного носителя, с последующим смешиванием. Для доведения концентрации, к смеси дополнительно добавляли MES Буфер или PBS, с последующим смешиванием, с получением адъювантной композиции.
[0189]
Кроме того, PBS с заданным количеством OVA, растворенным в нем, добавляли к таким образом полученной адъювантной композиции, с последующим смешиванием, с получением вакцинной композиции.
[0190]
В других экспериментах, кроме эксперимента оценки (4), pH-чувствительный носитель, адъювантную композицию и вакцинную композицию регулировали таким образом, чтобы получить концентрацию амфипатического вещества 100 нмоль/100 мкл. В эксперименте оценки (4), дисперсию (раствор) pH-чувствительного носителя разбавляли перед использованием. В завершение, вакцинную композицию получали таким образом, чтобы получить концентрацию амфипатического вещества от 100 нмоль/100 мкл до 0,1 нмоль/100 мкл.
[0191]
в случае использования CpG-DNA (CpG-ODN), 200 мкг CpG-ODN растворяли в 200 мкл воды для инъекций, с получением первичного раствора вещества-кандидата, которое использовали для получения адъювантной композиции.
[0192]
(Получение сравнительных образцов)
Сравнительные образцы получали с использованием антигена только или с использованием смеси антигена и вещества-кандидата (указано также как вещество-кандидат только). Кроме того, в испытании высвобождения также получали дисперсию только амфипатического вещества и дисперсию только pH-чувствительного носителя.
[0193]
<Способ измерения>
(Испытание высвобождения: Измерение просачивания)
Просачивание оценивали в соответствии со способом, описанным в K. Kono et al., Bioconjugate Chem. 2008 19 1040-1048. Оценку осуществляли с использованием EYPC липосом, которые содержали Пиранин в качестве флуоресцентного вещества и DPX в качестве гасителя.
[0194]
3000 нмоль EYPC, растворенных в хлороформе, отмеряли и помещали в 10-мл грушевидную колбу и EYPC преобразовывали в тонкую пленку на роторном испарителе. В колбу добавляли 500 мкл раствора Пиранина (Пиранин: 35 мМ, DPX: 50 мМ, MES: 25 мМ, pH 7,4), с последующим диспергированием с использованием ультразвукового излучателя (USC-J), и затем полученную дисперсию пропускали через поликарбонатную пленку, имеющую диаметр пор 100 нм, используя экструдер, для получения равномерного диаметра частиц. Полученную дисперсию подвергали обработке для замещения внешнего водного слоя с использованием MES Буфера и G100 колонки, с получением дисперсии EYPC липосом, включающих флуоресцентное вещество. Концентрацию фосфолипида определяли с использованием фосфолипид C-теста Wako, и ее регулировали при помощи MES Буфера так, чтобы концентрация фосфолипида была 1,0 ммоль/л.
[0195]
20 мкл дисперсии EYPC липосом доводили до нужной концентрации и 20 мкл дисперсии оцениваемого образца добавляли к 2960 мкл pH-отрегулированного MES Буфера, полученную смесь подвергали инкубации при 37°C в течение 90 или 30 минут (Значения, полученные в результате инкубации в течение 90 минут, использовали в Примерах, если не указано иное.). Флуоресценцию наблюдали при Ex461 нм и Em512 нм, используя спектрофотометр FP-6500 для контроля просачивания.
[0196]
Следует отметить, что просачивание рассчитывали, принимая значение в случае использования дисперсии только EYPC липосом за 0%, а значение в случае добавления 30 мкл 10-кратно разведенного Triton-X100 за 100%. В частности, просачивание рассчитывали в соответствии со следующей формулой. Следует указать, что в представленной ниже формуле L означает измеренную интенсивность флуоресценции, L0 означает интенсивность флуоресценции только дисперсии EYPC липосом, включающих флуоресцентное вещество, и L100 означает интенсивность флуоресценции в случае добавления Triton-X100.
[0197]
[Мат. формула 3]
[0198]
(Испытание слияния мембран: Измерение слияния (слияния мембран))
Слияние (слияние мембран) оценивали в соответствии со способом, описанным в K. Kono et al., Biomaterials 2008 29 4029-4036, используя FRET (резонансный перенос энергии флуоресценции). Флуоресцентное мечение осуществляли с использованием NBD-PE и Rh-PE.
[0199]
Получали тонкую пленку EYPC (EYPC 1000 нмоль), содержащую 0,6 мол.% NBD-PE и Rh-PE относительно EYPC. Тонкую пленку диспергировали вместе с 1,0 мл добавленного MES Буфера, используя ультразвуковой излучатель (USC-J). Полученную дисперсию пропускали через поликарбонатную пленку, имеющую диаметр пор 100 нм, используя экструдер, с получением дисперсии EYPC липосом с двойной флуоресцентной меткой.
[0200]
20 мкл дисперсии EYPC липосом с двойной флуоресцентной меткой и 20 мкл дисперсии оцениваемого образца добавляли к 2960 мкл pH-отрегулированного MES Буфера, с последующей инкубацией при 37°C в течение 60 минут. Полученную жидкость использовали для измерения спектра флуоресценции при 500 до 620 нм с использованием спектрофотометра (FP-6500) с возбуждением при 450 нм. Было получено соотношение интенсивности флуоресценции при 520 нм и при 580 нм.
[0201]
Процент слияния рассчитывали, принимая отношение интенсивности флуоресценции в случае, когда дисперсию EYPC с двойной флуоресцентной меткой, полученную выше, и амфипатическое вещество инкубировали, за 0%, а отношение интенсивности флуоресценции в случае, когда дисперсию EYPC липосом с двойной флуоресцентной меткой и дисперсию оцениваемого образца подвергали обработке метанолом, за 100%. Следует отметить, что обработка метанолом состояла из растворения дисперсии EYPC липосом с двойной флуоресцентной меткой и диспергирования оцениваемого образца в метаноле, преобразования полученного раствора в тонкую пленку на роторном испарителе и диспергирования тонкой пленки в 3,0 мл MES Буфера, используя ультразвуковой излучатель.
[0202]
В частности, процент слияния рассчитывали в соответствии со следующей формулой. Следует указать, что в представленной ниже формуле R означает измеренное отношение интенсивности флуоресценции, R0 означает отношение интенсивности флуоресценции в случае, когда дисперсию EYPC липосом с двойной флуоресцентной меткой и амфипатическое вещество инкубируют, и R100 означает отношение интенсивности флуоресценции, полученное, когда дисперсию EYPC липосом с двойной флуоресцентной меткой и дисперсию оцениваемого образца подвергают обработке метанолом.
[0203]
[Мат. формула 4]
[0204]
(Иммунизация мыши)
Введение осуществляли под анестезией. В случае подкожного введения, его осуществляли путем подкожной инъекции, 100 мкл/животное, в одном положении на спине. Доза алюминия составляла 0-100 мкг/животное, и доза кандидата природный иммунитет-активирующего вещества составляла 10 мкг/животное. Что касается pH-чувствительного носителя, концентрация фундаментальной дозы для амфипатического вещества составляла 100 нмоль/животное, а для pH-чувствительного соединения 10-640 нмоль/животное, и часть этой дозы вводили в разбавленном состоянии. В качестве антигена использовали OVA белок или OVA пептид, при этом доза составляла 80 мкг/животное. Кроме того, в случае внутрикожного введения, внутрикожную инъекцию, 20 мкл/животное, вводили в одном положении на спине с использованием для введения жидкости аналогично тому, как в случае подкожного введения. В случае оценки клеточно-опосредованного иммунитета, введение осуществляли один раз, и анализ осуществляли через семь дней после введения. В случае оценки гуморального иммунитета, введение осуществляли два раза. Второе введение осуществляли через 14 дней после первого введения, и анализ осуществляли через 14 дней после второго введения.
[0205]
(Получение дисперсии клеток из селезенки мыши)
Мышь умерщвляли на седьмой день после последнего введения и экстрагировали ее селезенку. После добавления 3,0 мл среды RPMI, содержащей 10% сыворотки, селезенку обрабатывали с использованием сита BD Falcon для получения суспензии клеток. Клетки подвергали гемолизу с использованием буфера для лизиса RBC, затем промывали средой RPMI, содержащей 10% сыворотки. Клетки диспергировали в среде RPMI, содержащей 10% сыворотки, после чего подсчитывали количество клеток и получали дисперсию клеток селезенки.
[0206]
(Метод иммуноферментных пятен)
Метод иммуноферментных пятен осуществляли с использованием набора ELISPOT с мышиным IFNγ. За один день до инокуляции 96-луночному планшету ELIspot давали адсорбировать антитело для детекции, прилагаемое к набору, для подготовки планшета. Полученный таким образом планшет промывали средой RPMI, содержащей 10% сыворотки, после чего добавляли 200 мкл содержащей 10% сыворотки среды RPMI и оставляли при 37°C на два часа для блокирования. Планшет промывали содержащей 10% сыворотки средой RPMI. В случае, когда антиген подвергается рестимуляции, в планшет добавляли 100 мкл содержащей 10% сыворотки среды RPMI, содержащей 40 мкг/мл OVA пептида. В случае, когда антиген не подвергается рестимуляции, в планшет добавляли 100 мкл содержащей 10% сыворотки среды RPMI. Планшет инокулировали дисперсией клеток селезенки так, чтобы существовало предварительно определенное количество клеток. В завершение, добавляли содержащую 10% сыворотки среду RPMI так, чтобы общее количество на лунку было доведено до 200 мкл. После этого культивирование осуществляли в течение двух ночей, и осуществляли окрашивание планшета.
[0207]
Окрашивание планшета осуществляли в соответствии с протоколом, описанным в Наборе ELISPOT с мышиным IFNγ и в Наборе с AEC Субстратом.
[0208]
(Измерение титра антител)
Частичный сбор крови осуществляли за день до второго введения, и титр антител исследовали после разового введения. Кроме того, сбор крови осуществляли через 14 дней после второго введения, и титр антител исследовали после двухразового введения. Собранную кровь оставляли выстаиваться при комнатной температуре в течение двух часов, с последующим центрифугированием, с получением сыворотки. Блокирующий буфер получали путем растворения 5 г альбумина в 500 мл PBS. Покрывающий буфер получали путем растворения 1,47 г гидрокарбоната натрия и 0,80 г карбоната натрия в 500 мл воды. Промывку планшета осуществляли с использованием жидкости, полученной путем добавления 2,5 мл Tween 20 к 500 мл PBS.
[0209]
В покрывающем буфере растворяли OVA белок и полученный раствор добавляли в 96-луночный планшет так, чтобы количество было 0,1 мкг/лунка (100 мкл). После выстаивания при 37°C в течение двух часов покрывающий буфер заменяли на 300 мкл блокирующего буфера, с последующим выстаиванием в течение ночи при 4°C. После промывки планшета 100 мкл сыворотки, разведенной, как предварительно определено, добавляли в каждую лунку, с последующим выстаиванием при 37°C в течение двух часов. После промывки планшета 100 мкл вторичного раствора антигена, разбавленного 1000-кратно блокирующим буфером, добавляли в каждую лунку, с последующим выстаиванием при 37°C в течение два часов. После промывки планшета проявление цвета осуществляли с использованием окрашивающего набора для пероксидазы, и был получен титр антител.
[0210]
[Оценка]
Различные оценки осуществляли с использованием дисперсий, полученных в соответствии с описанными выше способами.
[0211]
(1) Выбор природного иммунитет-активирующего вещества, подходящего для совместного использования с pH-чувствительным носителем
Осуществляли выбор природного иммунитет-активирующего вещества, которое обладает высоким эффектом индукции клеточно-опосредованного иммунитета при использовании совместно с pH-чувствительным носителем. Учитывая доступность и реальные результаты инъекции, токоферол, токоферолацетат и алюминий (гидроксид алюминия) использовали в качестве кандидатов природного иммунитет-активирующего вещества (далее указаны также как вещества-кандидаты), и их исследовали на эффект индукции клеточно-опосредованного иммунитета при использовании совместно с pH-чувствительным носителем.
[0212]
В качестве pH-чувствительного носителя использовали комплекс 100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты на мышь. Вещества-кандидаты все использовали в количестве 10 мкг на мышь, и OVA белок использовали в качестве антигена в количестве 80 мкг на мышь. Жидкости для введения получали путем последовательного добавления дисперсии (раствора) pH-чувствительного носителя, вещества-кандидата и антигена, в указанном порядке, к PBS для контроля дозы и их смешивания. Следует отметить, что жидкости для введения получали таким образом, чтобы дисперсия (раствор) pH-чувствительного носителя, вещество-кандидат и антиген присутствовали в предварительно определенных концентрациях в 100 мкл жидкости. Доза составляла 100 мкл на мышь, и путь введения был подкожным. Индукцию клеточно-опосредованного иммунитета оценивали в соответствии с методом иммуноферментных пятен, описанным выше.
[0213]
Кроме того, в качестве сравнительного образца использовали антиген только и смесь антигена и вещества-кандидата; в качестве жидкости для введения использовали жидкость, полученную путем смешивания PBS с антигеном или с антигеном и веществом-кандидатом и вводили при дозе 100 мкл на мышь.
[0214]
Кроме того, индукцию клеточно-опосредованного иммунитета (CTL), используя метод иммуноферментных пятен, сравнивали с полученной для контроля (смесь антигена и алюминий-содержащего вещества) путем визуального наблюдения и оценивали в соответствии со следующим критерием.
[0215]
ο: Индукция клеточно-опосредованного иммунитета наблюдается четко по сравнению с контролем
Δ: Индукция клеточно-опосредованного иммунитета наблюдается слабо по сравнению с контролем
×: Индукция клеточно-опосредованного иммунитета сопоставима с контролем или ниже
[0216]
Как результат оценки, естественно, использование антигена только не приводило к образованию пятна и не вызывало клеточно-опосредованный иммунитет (Фиг. 2(A)). Кроме того, использование токоферола и токоферолацетатов в качестве сравнительных образцов не вызывало образования пятна, также как использование антигена только и не вызывало клеточно-опосредованный иммунитет (Фиг. 2(B) и (C)). Кроме того, поскольку широко известно, что алюминий не может индуцировать клеточно-опосредованный иммунитет, образование пятна в Фиг. 2(D) определяли как отсутствие индукции клеточно-опосредованного иммунитета. Поэтому считается, что клеточно-опосредованный иммунитет индуцируется, когда количество образованных пятен больше, чем на Фиг. 2(D).
[0217]
Совместное использование токоферола с pH-чувствительным носителем и совместное использование токоферолацетата с pH-чувствительным носителем приводило к образованию количества пятен, сопоставимого с использованием алюминия только (антиген+алюминий на Фиг.2(D)) и, таким образом, не могло индуцировать клеточно-опосредованный иммунитет (Фиг. 2(E) и (F)). С другой стороны, совместное использование алюминия с pH-чувствительным носителем приводило к образованию значительно большего количества пятен по сравнению с количеством пятен, образованных алюминием только (Фиг. 2(G)). Таким образом, было подтверждено, что совместное использование алюминия с pH-чувствительным носителем приводит к индукции клеточно-опосредованного иммунитета. Этот результат показал, что алюминий представляет собой природное иммунитет-стимулирующее (активирующее) вещество, подходящее для совместного использования с pH-чувствительным носителем.
[0218]
(2) Сравнение с CpG-ODN и оценка антиген-специфичности
CpG-ODN представляет собой синтетический олигонуклеотид, содержащий специфическую последовательность оснований, и представляет собой реагент, который был описан для индукции клеточно-опосредованного иммунитета. С использованием этого реагента в качестве положительного контроля оценивали уровень активности для индукции клеточно-опосредованного иммунитета путем совместного использования алюминия с pH-чувствительным носителем. CpG-ODN использовали в количестве 10 мкг на мышь, и другие экспериментальные условия все были такими же, как в (1). Оценку осуществляли с использованием такого же планшета, как планшет ELIspot в (1).
[0219]
Количество образованных пятен, полученное путем совместного использования алюминия с pH-чувствительным носителем, было больше, чем полученное для CpG-ODN (Фиг. 3(B) и (C)). Показывая высокую активность по сравнению с CpG-ODN, который представляет собой общеизвестный реагент, совместное использование алюминия с pH-чувствительным носителем, как было обнаружено, может обеспечивать высокую индукцию клеточно-опосредованного иммунитета.
[0220]
Кроме того, то, что индуцируемый иммунитет является антиген-специфическим, является очень важным с точки зрения практического использования. В свете этого, клеточно-опосредованный иммунитет, индуцируемый совместным использованием алюминия с pH-чувствительным носителем, оценивали на антиген-специфичность. Оценку осуществляли в соответствии с вышеописанным методом иммуноферментных пятен, в котором рестимуляцию не применяли. В частности, дисперсию клеток селезенки, выделенных у иммунизированного животного, инокулировали в ELIspot планшет и получали образование пятна IFNγ продуцирующими клетками, без добавления пептида SIINFEKL. Как результат, образование пятна не наблюдали вообще, и образованное пятно, полученное при совместном использовании алюминия с pH-чувствительным носителем на Фиг.3(B), исчезало полностью (Фиг. 3(D)). Таким образом, было показано, что клеточно-опосредованный иммунитет, индуцируемый совместным использованием алюминия с pH-чувствительным носителем, действительно является антиген-специфическим. Кроме того, индуцированные клетки показали реакцию с пептидом SIINFEKL класса I, и, таким образом, было сделано предположение, что индуцированные клетки представляли собой CTL.
[0221]
(3) Относительно количества алюминия, необходимого для индукции клеточно-опосредованного иммунитета
Было ясно показано, что алюминий (гидроксид алюминия) индуцирует клеточно-опосредованный иммунитет при использовании совместно с pH-чувствительным носителем. В свете этого, исследовали количество алюминия, необходимое для индукции клеточно-опосредованного иммунитета. Гидроксид алюминия использовали в качестве алюминия, и комплекс DLPC и дезоксихолевой кислоты использовали в качестве pH-чувствительного носителя (100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты на мышь). Алюминий использовали в количестве 100-0,1 мкг на мышь, и OVA белок использовали в качестве антигена в количестве 80 мкг на мышь. Жидкость для введения получали путем последовательного добавления PBS для контроля дозы, алюминия и антигена, в указанном порядке, к дисперсии (раствору) pH-чувствительного носителя и их смешивания. Использовали дозу 100 мкл на мышь и подкожный путь введения. Индукцию клеточно-опосредованного иммунитета оценивали в соответствии с описанным выше методом иммуноферментных пятен. Следует отметить, что ʺалюминий толькоʺ относится к смеси антигена и алюминия.
[0222]
Как результат оценки, вакцинная композиция, содержащая 100-1 мкг алюминия (концентрация алюминия в растворе была 100 мкг/100 мкл - 1 мкг/100 мкл) (на Фиг. антиген+алюминий+pH-чувствительный носитель), приводила к образованию количества пятен больше, чем с использованием алюминия только (на Фиг., антиген+алюминий) (Фиг. 4(B), (C), (D) и (E)). С другой стороны, в случае, когда алюминий использовали в количестве 0,1 мкг, количество образовавшихся пятен было сопоставимо с тем, когда использовали алюминий только (Фиг. 4(B) и (F)). На основании этих результатов эффект индукции клеточно-опосредованного иммунитета подтверждали, когда количество алюминия было от 1 до 100 мкг (концентрация алюминия в растворе была 1 мкг/100 мкл - 100 мкг/100 мкл) на 100 нмоль DLPC. Таким образом, было сделано предположение, что клеточно-опосредованный иммунитет индуцируется, когда количество алюминия составляет от 1 до 100 мкг (концентрация алюминия: 1 мкг/100 мкл - 100 мкг/100 мкл) на 100 нмоль амфипатического вещества.
[0223]
(4) Относительно количества pH-чувствительного носителя, необходимого для индукции клеточно-опосредованного иммунитета
Далее, исследовали количество pH-чувствительного носителя, необходимое для индукции клеточно-опосредованного иммунитета. Жидкости для введения получали с использованием гидроксида алюминия в количестве 10 мкг на мышь и с использованием дисперсий pH-чувствительных носителей, разбавленных до разной степени. Комплекс, состоящий из 160 нмоль дезоксихолевой кислоты на 100 нмоль DLPC, использовали в качестве pH-чувствительного носителя. Другие условия были такими же, как в (1) и (3).
[0224]
Как результат оценки, количество образовавшихся пятен при использовании полученной жидкости для введения, было больше, чем при использовании алюминия только, в случае, когда кратность разведения pH-чувствительного носителя составляла от 1 до 100 (кратно) (Фиг. 5(B), (C), (D) и (E)). С другой стороны, 1000-кратно разбавленная жидкость для введения приводила к образованию количества пятен, несколько большего, чем при использовании алюминия только (Фиг. 5(B) и (F)). На основании этих результатов, было подтверждено, что жидкость для введения, полученная так, чтобы DLPC образующий pH-чувствительный носитель присутствовал в концентрации от 1 до 1000 нмоль/100 мкл, и дезоксихолевая кислота присутствовала в концентрации от 1,6 до 160 нмоль/1000 мкл, индуцирует клеточно-опосредованный иммунитет. Таким образом, было сделано предположение, что вакцинная композиция индуцирует клеточно-опосредованный иммунитет в случае, когда концентрация амфипатического вещества образующего pH-чувствительный носитель, составляет от 1 до 1000 нмоль/100 мкл.
[0225]
(5) Относительно индукции гуморального иммунитета
Подтверждали индукцию гуморального иммунитета путем совместного использования алюминия и pH-чувствительного носителя. Индукцию гуморального иммунитета оценивали на основании титров IgG антигена. Что касается дозы в расчете на одно введение, использовали 10 мкг гидроксида алюминия в качестве алюминия, при этом комплекс, состоящий из 100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты, использовали в качестве pH-чувствительного носителя. OVA белок в количестве 80 мкг использовали в качестве антигена. Жидкости для введения получали путем последовательного добавления PBS для контроля дозы, алюминия и антигена, в указанном порядке, к дисперсии (раствору) pH-чувствительного носителя и их смешивания. Использовали дозу 100 мкл на мышь и подкожный путь введения. Для оценки гуморального иммунитета введение осуществляли два раза. Оценку титра антител осуществляли в соответствии с описанным выше измерением титра антител.
[0226]
Как результат оценки, использование алюминия только показало наивысший титр IgG антител, и совместное использование алюминия с pH-чувствительным носителем показало второй наивысший титр антител (Фиг. 6, вводили два раза). Кроме того, совместное использование алюминия и pH-чувствительного носителя показало высокий титр IgG антител по сравнению с группами использования PBS или антигена только (Фиг. 6, вводили два раза). На основании этих результатов было показано, что вакцинная композиция, полученная путем совместного использования алюминия и pH-чувствительного носителя, индуцирует гуморальный иммунитет.
[0227]
Было ясно показано, что вакцинная композиция, полученная путем совместного использования алюминия и pH-чувствительного носителя, способна индуцировать и усиливать как клеточно-опосредованный иммунитет, так и гуморальный иммунитет. Поэтому адъювантную композицию в соответствии с настоящим изобретением можно использовать в качестве отличного адъюванта.
[0228]
(6) Относительно типа алюминия
в настоящей заявке термин ʺалюминийʺ используется в качестве общего названия алюминий-содержащих адъювантов. Типы алюминия включают гидроксид алюминия, фосфат алюминия, сульфат алюминия-калия и хлорид алюминия. Из них исследованы были те, которые доступны и способны индуцировать клеточно-опосредованный иммунитет при использовании совместно с pH-чувствительным носителем.
[0229]
В этом Примере в качестве алюминия использовали фосфат алюминия и сульфат алюминия-калия, при этом комплекс DLPC и дезоксихолевой кислоты (100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты на мышь) использовали в качестве pH-чувствительного носителя. Согласно Примеру (3), алюминий использовали в количестве от 1 до 0,1 мкг на мышь, и OVA белок использовали в качестве антигена в количестве 80 мкг на мышь. Жидкости для введения получали путем последовательного добавления PBS для контроля дозы, алюминия и антигена, в указанном порядке, к дисперсии (раствору) pH-чувствительного носителя и их смешивания. Использовали дозу 100 мкл на мышь и подкожный путь введения. Индукцию клеточно-опосредованного иммунитета оценивали в соответствии с описанным выше методом иммуноферментных пятен.
[0230]
Как результат оценки, было обнаружено, что использование смеси антигена с фосфатом алюминия и использование смеси антигена с сульфатом алюминия-калия приводило к образованию слаборазличимого пятна и не могло индуцировать клеточно-опосредованный иммунитет (Фиг. 7(A) и (D)). Вакцинная композиция, полученная с использованием 1 мкг фосфата алюминия, приводила к образованию пятен, количество которых было больше, чем при использовании смеси антигена с фосфатом алюминия, и индуцировала клеточно-опосредованный иммунитет (Фиг. 7(B)). С другой стороны, вакцинная композиция, полученная с использованием 0,1 мкг фосфата алюминия, приводила к образованию пятна, аналогичного тому, как при использовании смеси антигена с фосфатом алюминия, и не вызывала клеточно-опосредованный иммунитет (Фиг. 7(C)). Что касается минимального количества алюминия, необходимого для индукции клеточно-опосредованного иммунитета, фосфат алюминия показал результаты, аналогичные результатам гидроксида алюминия; поэтому фосфат алюминия рассматривается для индукции клеточно-опосредованного иммунитета, когда количество алюминия составляет от 1 до 100 мкг (концентрация алюминия: 1 мкг/100 мкл до 100 мкг/100 мкл) на 100 нмоль амфипатического вещества, таким же образом, как в случае гидроксида алюминия.
[0231]
Кроме того, вакцинная композиция, полученная с использованием 1 мкг сульфата алюминия-калия, показала образование пятен, количество которых было несколько больше, чем при использовании смеси антигена и сульфата алюминия-калия, что указывает на индукцию клеточно-опосредованного иммунитета (Фиг. 7(E)).
[0232]
На основании этих результатов, было обнаружено, что гидроксид алюминия и фосфат алюминия обеспечивают более высокий эффект, чем сульфат алюминия-калия.
[0233]
Было ясно показано, что гидроксид алюминия и фосфат алюминия особенно полезны в качестве компонента вакцинной композиции для индукции клеточно-опосредованного иммунитета при использовании совместно с pH-чувствительным носителем.
[0234]
(7) Относительно влияния алюминия на функцию pH-чувствительного носителя
(7-1) Относительно влияния типа алюминия и количества алюминия на эффект промотирования функции разрушения мембран
Эффект промотирования функции разрушения мембран и эффект промотирования функции слияния мембран pH-чувствительного носителя, являются важными функциями для разрушения эндосомной мембраны клеток и промотирования кросс-презентации. Кроме того, известно, что алюминий адсорбирует различные вещества. Поэтому исследовали влияние смеси алюминия и pH-чувствительного носителя на функцию pH-чувствительного носителя.
[0235]
Сначала исследовали влияние на эффект промотирования функции разрушения мембран. Дисперсию (раствор) pH-чувствительного носителя и алюминий смешивали с получением образцов для оценки так, чтобы общее количество образца для оценки было 100 мкл. После инкубации образцов для оценки в течение ночи часть (20 мкл) каждого образца для оценки брали для испытания высвобождения. Испытание высвобождения осуществляли в соответствии с описанным выше испытанием высвобождения. В 100 мкл, комплекс 100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты использовали в качестве pH-чувствительного носителя, при этом гидроксид алюминия, фосфат алюминия и сульфат алюминия-калия использовали в качестве алюминия в количестве 10 мкг.
[0236]
Дезоксихолевая кислота, используемая отдельно, показала просачивание не больше чем 1% при pH 7,4 и просачивание приблизительно 15% при pH 5,0; pH-чувствительный носитель, не смешанный с алюминием, показал просачивание не больше чем 1% при pH 7,4 и просачивание приблизительно 60% при pH 5,0 (Фиг. 8(A)). Просачивание, показанное DLPC, используемым отдельно, было не больше чем 2% при pH 5,0 (Фиг. 10(A)), таким образом, pH-чувствительный носитель действительно имел эффект промотирования функции разрушения мембран. Кроме того, pH-чувствительный носитель, смешанный с любым алюминием из гидроксида алюминия, фосфата алюминия и сульфата алюминия-калия, вызывал незначительное высвобождение при pH 7,4 и вызывал высвобождение приблизительно 60% при pH 5,0 (Фиг. 8(A)). Таким образом, при смешивании с любым алюминием pH-чувствительный носитель удовлетворял формуле (1) и формуле (2), это говорит о том, что смешанный pH-чувствительный носитель действительно имеет эффект промотирования функции разрушения мембран. Кроме того, в случае любого типа алюминия, pH-чувствительный носитель, смешанный с алюминием, показал просачивание, сопоставимое с тем, что было показано pH-чувствительным носителем, не смешанным с алюминием, при pH 7,4 и 5,0. Таким образом, было ясно показано, что смешивание с алюминием не влияет на эффект промотирования функции разрушения мембран pH-чувствительного носителя.
[0237]
Далее, исследовали влияние количества смешиваемого алюминия. Алюминий в виде каждого из гидроксида алюминия, фосфата алюминия и сульфата алюминия-калия смешивали с pH-чувствительным носителем, состоящим из 100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты, в количестве от 0 до 100 мкг (общее количество: 100 мкл). Полученные растворы инкубировали в течение ночи и использовали в испытании высвобождения. Следует отметить, что раствор, полученный с использованием 100 мкг сульфата алюминия-калия, имел низкий pH, и, следовательно, его не использовали для измерения. Как результат, в случае любого алюминия и в любом добавляемом количестве, просачивание при pH 5,0 было приблизительно 60%, и никакого изменения не происходило по сравнению со случаем pH-чувствительного носителя, не смешанного с алюминием (Фиг. 8(B)). Поэтому было сделано предположение, что алюминий, независимо от его типа и независимо от его добавляемого количества, не имел никакого влияния на эффект промотирования функции разрушения мембран pH-чувствительного носителя.
[0238]
(7-2) Влияние алюминия на эффект промотирования функции слияния мембран
Далее, исследовали влияние алюминия на эффект промотирования функции слияния мембран. Фиг. 9 показывает результаты исследования эффекта промотирования функции слияния мембран pH-чувствительного носителя в случаях использования смеси с различными типами алюминия. В качестве амфипатического вещества использовали 100 нмоль DLPC, в качестве pH-чувствительного соединения использовали 160 нмоль дезоксихолевой кислоты, и алюминий использовали в количестве 10 мкг. Дисперсию (раствор) pH-чувствительного носителя и алюминий смешивали таким образом, чтобы общее количество было 100 мкл. Полученные смешанные растворы инкубировали в течение ночи и часть каждого из смешанных растворов оценивали в испытании слияния мембран. Испытание слияния мембран осуществляли в соответствии с описанным выше испытанием слияния мембран.
[0239]
pH-чувствительный носитель, смешанный с любым алюминием, показал процент слияния вплоть до приблизительно 70% при pH 5,0 и удовлетворял формуле (3) (Фиг. 9). Таким образом, pH-чувствительный носитель, смешанный с алюминием, действительно имел эффект промотирования функции слияния мембран. Кроме того, в случаях использования любого алюминия, pH-чувствительный носитель, смешанный с алюминием, показал проценты слияния, сопоставимые с показанными pH-чувствительным носителем, не смешанным с алюминием, при pH 7,4 и 5,0 (Фиг. 9). Поэтому было подтверждено, что смешивание с алюминием не оказывает никакого влияния на эффект промотирования функции слияния мембран pH-чувствительного носителя.
[0240]
pH-чувствительный носитель показывал одинаковый эффект промотирования функции разрушения мембран и одинаковый эффект промотирования функции слияния мембран, независимо от смешивания с алюминием. Таким образом, было ясно показано, что смешивание с алюминием не оказывает никакого влияния на функцию pH-чувствительного носителя.
[0241]
(7-3) Влияние алюминия в pH-чувствительных носителях, содержащих дезоксихолевую кислоту в различных количествах
Затем исследовали влияние алюминия на функцию pH-чувствительного носителя в случае, когда композиция pH-чувствительного носителя изменялась. В качестве алюминия использовали 10 мкг гидроксида алюминия, и комплексы, состоящие из 100 нмоль DLPC и различных количеств дезоксихолевой кислоты, использовали в качестве pH-чувствительного носителя (общее количество: 100 мкл). Также как в (7-1), смешивали дисперсии (растворы) pH-чувствительных носителей и алюминий. Полученные смешанные растворы инкубировали в течение ночи и часть каждого из смешанных растворов использовали в испытании высвобождения. Испытание высвобождения осуществляли в соответствии с описанным выше испытанием высвобождения.
[0242]
При pH 5,0 pH-чувствительные носители, смешанные с алюминием, при любом количестве дезоксихолевой кислоты, показали значения просачивания, сопоставимые с теми, которые были показаны pH-чувствительным носителем, не смешанным с алюминием (Фиг. 10(A) и (B)). Иными словами, было показано, что в случае pH-чувствительных носителей, состоящих из 100 нмоль DLPC и 10 до 640 нмоль pH-чувствительного соединения, смешивание с алюминием не оказывало никакого влияния на функцию pH-чувствительных носителей. Было сделано предположение, что в случаях pH-чувствительных носителей, содержащих любое количество pH-чувствительного соединения, смешивание с алюминием не оказывает никакого влияния на функцию pH-чувствительных носителей.
[0243]
Кроме того, pH-чувствительные носители, смешанные с алюминием, где количество pH-чувствительного соединения представляло собой любое количество в диапазоне от 10 до 640 нмоль, удовлетворяли формуле (1) и формуле (2) и, таким образом, действительно имели эффект промотирования функции разрушения мембран. Считают, что эти pH-чувствительные носители индуцируют клеточно-опосредованный иммунитет, когда они смешаны с алюминием.
[0244]
(7-4) Влияние алюминия в pH-чувствительных носителях, состоящих из разных pH-чувствительных соединений
Далее, исследовали влияние алюминия на функции pH-чувствительных носителей, состоящих из различных pH-чувствительных соединений. В качестве алюминия использовали 10 мкг гидроксида алюминия, и комплексы, состоящие из 100 нмоль DLPC и 160 нмоль каждого из различных pH-чувствительных соединений, использовали в качестве pH-чувствительного носителя (общее количество: 100 мкл). Также как в (7-1), pH-чувствительные носители и алюминий смешивали, полученные смешанные растворы инкубировали в течение ночи и часть каждого из смешанных растворов оценивали в испытании высвобождения. Испытание высвобождения осуществляли в соответствии с описанным выше испытанием высвобождения. Просачивание, показанное DLPC (амфипатическим веществом), используемым отдельно, было не больше чем 2,0% при pH 5,0.
[0245]
В случаях pH-чувствительных носителей, полученных с использованием любого pH-чувствительного соединения, pH-чувствительные носители, смешанные с алюминием, показали эквивалентные значения просачивания, сопоставимые с показанными pH-чувствительными носителями, не смешанными с алюминием (Таблица 1, pH 7,4 и pH 5,0). В случаях любого pH-чувствительного соединения, было подтверждено, что смешивание с алюминием не оказывает никакого влияния на функцию pH-чувствительного носителя.
[0246]
Кроме того, pH-чувствительные носители, смешанные с алюминием, в случаях использования любого pH-чувствительного соединения, удовлетворяли формуле (1) и (2), и, таким образом, действительно имели эффект промотирования функции разрушения мембран. Поэтому считают, что эти pH-чувствительные носители индуцируют клеточно-опосредованный иммунитет, когда они смешаны с алюминием (Таблица 1).
[0247]
Таблица 1 | ||||||||
Холевая кислота | Урсодезокси-холевая кислота | Хенодезокси-холевая кислота | Гиодезокси-холевая кислота | Гликодезокси-холевая кислота | Глицирризиновая кислота | |||
pH 7,4 Просачивание (%) | Lc'7,4 | pH-чувствительный носитель+алюминий | 1,0 | 1,7 | 5,5 | 4,3 | 3,9 | 1,1 |
Lc7,4 | pH-чувствительный носитель | 0,1 | 0,8 | 3,8 | 1,5 | 0,8 | 0,4 | |
La7,4 | pH-чувствительное соединение только | 0,6 | 0,8 | 1,1 | 0,6 | 1,6 | 0,8 | |
pH 5,0 Просачивание (%) | Lc'5,0 | pH-чувствительный носитель+алюминий | 7,7 | 16,6 | 64,9 | 39,9 | 14,2 | 28,2 |
Lc5,0 | pH-чувствительный носитель | 8,1 | 13,1 | 64,1 | 43,9 | 11,7 | 30,7 | |
La5,0 | pH-чувствительное соединение только | 1,9 | 2,6 | 3,1 | 2,8 | 5,9 | 3,0 | |
Lb5,0 | Амфипатическое вещество (DLPC) только | 1,9 | 1,9 | 1,9 | 1,9 | 1,9 | 1,9 | |
Формула (1)* | Δ | pH-чувствительный носитель+алюминий | 5,4 | 13,1 | 57,4 | 33,4 | 6,0 | 24,9 |
pH-чувствительный носитель | 6,7 | 10,5 | 58,3 | 40,2 | 6,6 | 28,1 | ||
Формула (2)* | Δ' | pH-чувствительный носитель+алюминий | 3,9 | 12,1 | 59,9 | 35,2 | 6,4 | 23,3 |
pH-чувствительный носитель | 4,3 | 8,6 | 59,1 | 39,2 | 3,9 | 25,8 |
*В случае pH-чувствительного носителя
Δ=(Lc5,0-Lc7,4)-(La5,0-La7,4)
Δ'=Lc5,0-(La5,0+Lb5,0)
*В случае pH-чувствительного носителя+алюминий
Δ=(Lc'5,0-Lc'7,4)-(La5,0-La7,4)
Δ'=Lc'5,0-(La5,0+Lb5,0)
[0248]
(7-5) Влияние алюминия в pH-чувствительных носителях, включающих различные амфипатические вещества
Кроме того, исследовали влияние алюминия на функции pH-чувствительных носителей, включающих различные амфипатические вещества. В качестве алюминия использовали 10 мкг гидроксида алюминия, и комплексы 100 нмоль каждого из различных амфипатических веществ и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты использовали в качестве pH-чувствительного носителя (общее количество: 100 мкл). Также как в (7-1), дисперсии (растворы) pH-чувствительных носителей, каждая из которых состояла из 100 нмоль предварительно определенного амфипатического вещества и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты, и алюминий смешивали, полученные смешанные растворы инкубировали в течение ночи и часть каждого из смешанных растворов использовали в испытании высвобождения. Испытание высвобождения осуществляли в соответствии с описанным выше испытанием высвобождения.
[0249]
в случаях pH-чувствительных носителей, полученных с использованием любого амфипатического вещества, pH-чувствительный носитель, смешанный с алюминием, показал значения просачивания не меньше чем значения, показанные pH-чувствительным носителем, не смешанным с алюминием (Таблица 2-2 и Таблица 2-3). Следует отметить, что просачивание дезоксихолевой кислоты (pH-чувствительное соединение), используемой отдельно, было не больше чем 1% при pH 7,4, и приблизительно 15% при pH 5,0.
[0250]
Кроме того, pH-чувствительные носители, смешанные с алюминием, в случаях использования любого амфипатического вещества, удовлетворяли формуле (1) и формуле (2) и, таким образом, действительно имели эффект промотирования функции разрушения мембран. Поэтому считают, что эти pH-чувствительные носители индуцируют клеточно-опосредованный иммунитет, когда они смешаны с алюминием (Таблица 2-2 и Таблица 2-3).
[0251]
Таблица 2-1. Касательно пунктов, представленных в Таблице 2-2 и Таблице 2-3
Таблица 2-1 | ||
pH 7,4 Просачивание(%) | Lc'7,4 | pH-чувствительный носитель+алюминий |
Lc7,4 | pH-чувствительный носитель | |
La7,4 | pH-чувствительное соединение только | |
Lb7,4 | Амфипатическое вещество только | |
pH 5,0 Просачивание(%) | Lc'5,0 | pH-чувствительный носитель+алюминий |
Lc5,0 | pH-чувствительный носитель | |
La5,0 | pH-чувствительное соединение только | |
Lb5,0 | Амфипатическое вещество только | |
Формула(1) Δ | pH-чувствительный носитель+алюминий | Δ=(Lc'5,0-Lc'7,4)-(La5,0-La7,4) |
pH-чувствительный носитель | Δ=(Lc5,0-Lc7,4)-(La5,0-La7,4) | |
Формула(2) Δ' | pH-чувствительный носитель+алюминий | Δ'=Lc'5,0-(La5,0+Lb5,0) |
pH-чувствительный носитель | Δ'=Lc5,0-(La5,0+Lb5,0) |
[0252]
Таблица 2-2 | |||||||||
DDPC | Tween 20 |
Tween 40 |
Tween 60 |
Tween 80 |
ПЭГ(10) касторовое масло | Span80 | Глицерин моноолеат | ||
pH 7,4 Просачивание(%) | Lc'7,4 | 51,7 | 67,3 | 15,8 | 7,6 | 8,2 | 28,7 | 18,9 | 69,6 |
Lc7,4 | 52,7 | 70,0 | 7,8 | 4,7 | 2,1 | 7,5 | 14,0 | 62,5 | |
La7,4 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | |
Lb7,4 | 8,4 | 50,4 | 8,3 | 3,8 | 0,6 | 3,4 | 4,4 | 4,1 | |
pH 5,0 Просачивание(%) | Lc'5,0 | 99,2 | 95,7 | 80,8 | 26,9 | 28,0 | 50,4 | 39,5 | 95,2 |
Lc5,0 | 97,7 | 94,6 | 68,4 | 21,9 | 23,8 | 29,1 | 42,6 | 86,3 | |
La5,0 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | |
Lb5,0 | 10,1 | 48,8 | 11,5 | 6,7 | 1,6 | 6,2 | 7,3 | 6,0 | |
Формула(1) Δ | pH-чувствительный носитель+алюминий | 41,3 | 64,2 | 58,7 | 8,5 | 5,8 | 10,5 | 10,4 | 15,1 |
pH-чувствительный носитель | 38,8 | 60,4 | 54,3 | 6,4 | 7,7 | 10,4 | 18,4 | 13,3 | |
Формула(2) Δ' | pH-чувствительный носитель+алюминий | 74,5 | 32,3 | 54,7 | 5,6 | 11,8 | 29,6 | 17,6 | 74,6 |
pH-чувствительный носитель | 73,0 | 31,2 | 42,3 | 0,6 | 7,6 | 8,3 | 20,7 | 65,7 |
[0253]
Таблица 2-3 | |||||||||
Span40 | Span60 | Span65 | Span85 | Токоферол | Глицирризиновая кислота | Глицериндистеарат | α,α'-дилаурин | ||
pH 7,4 Просачивание(%) | Lc'7,4 | 8,2 | 10,5 | 7,5 | 17,7 | 7,6 | 21,8 | 21,8 | 13,8 |
Lc7,4 | 2,1 | 2,8 | 2,2 | 1,8 | 10,4 | 12,2 | 12,2 | 0,9 | |
La7,4 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | |
Lb7,4 | 0,6 | 1,6 | 1,5 | 1,8 | 1,7 | 0,3 | 0,3 | 1,0 | |
pH 5,0 Просачивание(%) | Lc'5,0 | 28,0 | 36,5 | 39,5 | 54,2 | 45,7 | 38,2 | 38,6 | 30,4 |
Lc5,0 | 23,8 | 36,5 | 29,8 | 47,5 | 52,8 | 31,5 | 31,5 | 17,2 | |
La5,0 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | 14,6 | |
Lb5,0 | 1,6 | 4,3 | 4,2 | 2,0 | 1,2 | 4,0 | 4,0 | 0,8 | |
Формула(1) Δ | pH-чувствительный носитель+алюминий | 5,8 | 13,0 | 18,9 | 23,7 | 25,2 | 2,1 | 2,5 | 3,0 |
pH-чувствительный носитель | 7,7 | 20,7 | 14,5 | 32,9 | 29,5 | 5,0 | 5,0 | 2,7 | |
Формула(2) Δ' | pH-чувствительный носитель+алюминий | 11,8 | 17,6 | 20,7 | 37,6 | 29,9 | 19,6 | 20,0 | 15,0 |
pH-чувствительный носитель | 7,6 | 17,6 | 11,0 | 30,9 | 37,0 | 12,9 | 12,9 | 1,8 |
[0254]
(8) Исследование пути введения
Как правило, многие иммуннокомпетентные клетки присутствуют в коже, и известно, что путем инокуляции вакцины в кожу можно усилить стимуляцию иммунитета и уменьшить количество антигена. В свете этого, была подтверждена индукция клеточно-опосредованного иммунитета в случае введения вакцинной композиции в кожу.
[0255]
Гидроксид алюминия использовали в качестве алюминия, при этом комплекс DLPC и дезоксихолевой кислоты (100 нмоль DLPC и 160 нмоль дезоксихолевой кислоты) использовали в качестве pH-чувствительного носителя. В случае подкожного введения, доза в расчете на животное составляла 100 мкл, и вводили 10 мкг алюминия, 80 мкг OVA и pH-чувствительный носитель, состоящий из 100 нмоль DLPC. Кроме того, в случае внутрикожного введения, доза в расчете на животное составляла 20 мкл, и вводили 2 мкг алюминия, 16 мкг OVA и pH-чувствительный носитель, состоящий из 20 нмоль DLPC. В частности, для внутрикожного введения использовали жидкость, которую используют для подкожного введения, изменяя дозу от 100 до 20 мкл, с получением, таким образом, описанного выше количества. Индукцию клеточно-опосредованного иммунитета оценивали в соответствии с описанным выше методом иммуноферментных пятен.
[0256]
Как результат оценки, совместное использование алюминия и pH-чувствительного носителя при внутрикожном введении приводило к образованию пятен, количество которых было больше, чем при использовании только алюминия (Фиг. 11(C) и (D)). Было подтверждено, что вакцинная композиция индуцирует клеточно-опосредованный иммунитет, даже при введении внутрикожно. Кроме того, сравнение этого результата с результатом, полученным при подкожном введении, показало, что внутрикожное введение вакцинной композиции приводило к образованию большего количества пятен, чем в случае подкожного введения вакцинной композиции, несмотря на небольшую дозу (Фиг. 11 (B) и (D)). Было ясно показано, что эффект индукции клеточно-опосредованного иммунитета, обеспечиваемый вакцинной композицией, усиливается при внутрикожном введении.
[0257]
Далее, оценивали антиген-специфичность индуцируемого клеточно-опосредованного иммунитета. Оценку осуществляли в соответствии с описанным выше методом иммуноферментных пятен, в котором не применяли рестимуляцию. Как результат, внутрикожное введение вакцинной композиции не образовывало пятен (Фиг. 11(H)). Было ясно показано, что клеточно-опосредованный иммунитет, индуцируемый внутрикожным введением вакцинной композиции, является антиген-специфическим.
[0258]
Настоящая заявка основана на Японской патентной заявке № 2015-112519, поданной 2 июня 2015 года, полное содержание которой включено в настоящую заявку посредством ссылки.
Claims (14)
1. Адъювантная композиция, включающая:
pH-чувствительный носитель; и
по меньшей мере одно вещество, выбранное из группы, состоящей из гидроксида алюминия и фосфата алюминия,
в которой pH-чувствительный носитель содержит
по меньшей мере одно pH-чувствительное соединение, выбранное из группы, состоящей из дезоксихолевой кислоты, холевой кислоты, урсодезоксихолевой кислоты, хенодезоксихолевой кислоты, гиодезоксихолевой кислоты, высшей желчной кислоты, гликодезоксихолевой кислоты, глицирризиновой кислоты, глицирретиновой кислоты и их солей, и
по меньшей мере одно амфипатическое вещество, выбранное из группы, состоящей из фосфатидилхолина, содержащего только ацильную группу, содержащую от 10 до 12 атомов углерода, сложного эфира полиоксиэтиленсорбитана и моножирной кислоты, содержащего ацильную группу, содержащую от 12 до 18 атомов углерода, сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, содержащего только ацильную группу, содержащую от 16 до 18 атомов углерода, глицеринмоноолеата, глицериндилаурата, глицериндистеарата, глицериндиолеата, полиоксиэтилен касторового масла и α-токоферола, и
pH-чувствительный носитель демонстрирует эффект промотирования функции разрушения мембран,
где алюминий-содержащее вещество содержится в количестве от 1 до 100 мкг, в расчете на металлический алюминий, на 100 нмоль амфипатического вещества.
2. Адъювантная композиция по п.1, где pH-чувствительное соединение содержится в пропорции не меньше чем 10 моль на 100 моль амфипатического вещества.
3. Композиция для обеспечения кросс-презентации антигена, включающая:
адъювантную композицию по п.1 или 2; и
антиген.
4. Композиция для обеспечения кросс-презентации антигена по п.3, где содержание антигена составляет 3,2-400 мкг на 100 нмоль амфипатического вещества.
5. Композиция для обеспечения кросс-презентации антигена по п.3 или 4, где антиген представляет собой пептид или белок.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2015-112519 | 2015-06-02 | ||
JP2015112519 | 2015-06-02 | ||
PCT/JP2016/065216 WO2016194685A1 (ja) | 2015-06-02 | 2016-05-23 | アルミニウムを含有するアジュバント組成物およびこれを含むワクチン組成物 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2017146055A RU2017146055A (ru) | 2019-07-09 |
RU2017146055A3 RU2017146055A3 (ru) | 2019-07-17 |
RU2721417C2 true RU2721417C2 (ru) | 2020-05-19 |
Family
ID=57441384
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017146055A RU2721417C2 (ru) | 2015-06-02 | 2016-05-23 | Адъювантная композиция, содержащая алюминий, и содержащая ее вакцинная композиция |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20180153985A1 (ru) |
EP (1) | EP3305320B1 (ru) |
JP (1) | JPWO2016194685A1 (ru) |
CN (1) | CN107614009A (ru) |
AU (1) | AU2016273638B2 (ru) |
CA (1) | CA2987864C (ru) |
RU (1) | RU2721417C2 (ru) |
WO (1) | WO2016194685A1 (ru) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3603668A4 (en) * | 2017-03-29 | 2021-01-06 | Terumo Kabushiki Kaisha | ADDITIVE COMPOSITION, VACCINE COMPOSITION AND MEDICINAL KIT WITH IT |
JPWO2018207841A1 (ja) * | 2017-05-11 | 2020-03-12 | テルモ株式会社 | 複合体、複合体を含むpH感受性組成物、および複合体の製造方法 |
CN118105473B (zh) * | 2024-04-30 | 2024-08-16 | 成都欧林生物科技股份有限公司 | 一种预防或治疗Hp感染口服免疫原性组合物及其应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110097418A1 (en) * | 2009-05-29 | 2011-04-28 | Variation Biotechnologies, Inc. | Compositions and methods for treating influenza |
WO2013180253A1 (ja) * | 2012-05-31 | 2013-12-05 | テルモ株式会社 | pH感受性担体およびその製造方法、並びに該担体を含むpH感受性医薬、pH感受性医薬組成物およびこれを用いた培養方法 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5100662A (en) * | 1989-08-23 | 1992-03-31 | The Liposome Company, Inc. | Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability |
CA2489019A1 (en) * | 2001-06-15 | 2002-12-27 | Nordic Vaccine Technology A/S | Therapeutical vaccination |
WO2004056389A1 (en) * | 2002-12-20 | 2004-07-08 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Hpv-16 and -18 l1 vlp vaccine |
AU2009259964B2 (en) * | 2008-06-19 | 2015-04-09 | Variation Biotechnologies, Inc. | Compositions and methods for treating influenza |
WO2011005769A1 (en) * | 2009-07-06 | 2011-01-13 | Variation Biotechnologies, Inc. | Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom |
BR112013021732B1 (pt) * | 2011-02-25 | 2021-11-30 | South Dakota State University | Micela estável e utilização da micela estável |
-
2016
- 2016-05-23 CN CN201680032101.4A patent/CN107614009A/zh active Pending
- 2016-05-23 EP EP16803120.1A patent/EP3305320B1/en active Active
- 2016-05-23 AU AU2016273638A patent/AU2016273638B2/en active Active
- 2016-05-23 CA CA2987864A patent/CA2987864C/en active Active
- 2016-05-23 RU RU2017146055A patent/RU2721417C2/ru active
- 2016-05-23 WO PCT/JP2016/065216 patent/WO2016194685A1/ja active Application Filing
- 2016-05-23 US US15/578,535 patent/US20180153985A1/en not_active Abandoned
- 2016-05-23 JP JP2017521826A patent/JPWO2016194685A1/ja active Pending
-
2020
- 2020-10-08 US US17/066,172 patent/US20210030867A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110097418A1 (en) * | 2009-05-29 | 2011-04-28 | Variation Biotechnologies, Inc. | Compositions and methods for treating influenza |
WO2013180253A1 (ja) * | 2012-05-31 | 2013-12-05 | テルモ株式会社 | pH感受性担体およびその製造方法、並びに該担体を含むpH感受性医薬、pH感受性医薬組成物およびこれを用いた培養方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
YUBA E. et al. The application of pH-sensitive polymer-lipids to antigen delivery for cancer immunotherapy //Biomaterials. 2013 Jul;34(22):5711-21. YUBA E. et al. Dextran derivative-based pH-sensitive liposomes for cancer immunotherapy // Biomaterials. 2014 Mar;35(9):3091-101. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2987864A1 (en) | 2016-12-08 |
CA2987864C (en) | 2020-08-18 |
RU2017146055A (ru) | 2019-07-09 |
EP3305320A4 (en) | 2019-01-23 |
RU2017146055A3 (ru) | 2019-07-17 |
EP3305320A1 (en) | 2018-04-11 |
WO2016194685A1 (ja) | 2016-12-08 |
US20180153985A1 (en) | 2018-06-07 |
US20210030867A1 (en) | 2021-02-04 |
JPWO2016194685A1 (ja) | 2018-03-29 |
CN107614009A (zh) | 2018-01-19 |
EP3305320B1 (en) | 2024-02-07 |
AU2016273638B2 (en) | 2019-06-06 |
AU2016273638A1 (en) | 2017-12-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11000586B2 (en) | Adjuvant composition, vaccine composition containing the same, and method for producing both of them | |
RU2441647C2 (ru) | Виросомы, включающие гемагглютинин, выделенный из вируса гриппа, полученного в линии клеток, композиции, содержащие указанные виросомы, способы изготовления и применение | |
RU2682249C2 (ru) | рН-ЧУВСТВИТЕЛЬНЫЙ НОСИТЕЛЬ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ, И рН-ЧУВСТВИТЕЛЬНОЕ ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, И рН-ЧУВСТВИТЕЛЬНАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ГДЕ КАЖДОЕ ИЗ НИХ СОДЕРЖИТ НОСИТЕЛЬ, И СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ С ИХ ПРИМЕНЕНИЕМ | |
US20210030867A1 (en) | Adjuvant composition containing aluminum and vaccine composition containing the same | |
TWI673062B (zh) | 粒狀疫苗調配物 | |
US20180162913A1 (en) | Methods for potentiating an immune response using depot-forming and non-depot-forming vaccines | |
Nakamura et al. | Incorporation of polyinosine–polycytidylic acid enhances cytotoxic T cell activity and antitumor effects by octaarginine-modified liposomes encapsulating antigen, but not by octaarginine-modified antigen complex | |
EA024074B1 (ru) | Водная адъювантная композиция, содержащая неионный агент, обеспечивающий изотоничность, иммуногенная композиция и набор на её основе и способ приготовления иммуногенной композиции | |
Zurbriggen et al. | Immunogenicity of IRIV-versus alum-adjuvanted diphtheria and tetanus toxoid vaccines in influenza primed mice | |
JP7409594B2 (ja) | 医薬組成物、規定のサイズの脂質ベシクル粒子を使用する調製物のための方法、及びそれらの使用 | |
CN110430868A (zh) | 包含基于咪唑并喹啉的材料的纳米乳液及其用途 | |
Romero et al. | Ether lipids from archaeas in nano-drug delivery and vaccination | |
US11517620B2 (en) | Adjuvant composition, and vaccine composition and drug kit each containing the same | |
Even-Or et al. | Immunogenicity, protective efficacy and mechanism of novel CCS adjuvanted influenza vaccine | |
WO2023056089A1 (en) | Immunological adjuvant formulations comprising tlr4 agonist e6020 | |
US20210145750A1 (en) | COMPLEX, pH SENSITIVE COMPOSITION INCLUDING COMPLEX, AND METHOD FOR PRODUCING COMPLEX | |
WO2024181580A1 (ja) | 脂質ナノ粒子、医薬組成物、および脂質ナノ粒子の製造方法 | |
Watson et al. | Corrigendum to “Design considerations for liposomal vaccines: Influence of formulation parameters on antibody and cell-mediated immune responses to liposome associated antigens”[Vaccine 30 (13)(2012) 2256–2272] | |
US20170296638A1 (en) | Synergistic compositions of immunostimulating reconstituted influenza virosomes with immunopotentiators and vaccines containing them |