RU2670767C9 - Способ получения низкомолекулярного гепарина - Google Patents
Способ получения низкомолекулярного гепарина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2670767C9 RU2670767C9 RU2017146005A RU2017146005A RU2670767C9 RU 2670767 C9 RU2670767 C9 RU 2670767C9 RU 2017146005 A RU2017146005 A RU 2017146005A RU 2017146005 A RU2017146005 A RU 2017146005A RU 2670767 C9 RU2670767 C9 RU 2670767C9
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- heparin
- benzethonium
- solution
- benzyl ester
- sodium acetate
- Prior art date
Links
- 239000003055 low molecular weight heparin Substances 0.000 title claims abstract description 7
- 229940127215 low-molecular weight heparin Drugs 0.000 title claims abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 8
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims abstract description 67
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 57
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims abstract description 49
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 35
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical class OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 31
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 229960003872 benzethonium Drugs 0.000 claims abstract description 30
- -1 heparin benzyl ester Chemical class 0.000 claims abstract description 29
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- SIYLLGKDQZGJHK-UHFFFAOYSA-N dimethyl-(phenylmethyl)-[2-[2-[4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethoxy]ethyl]ammonium Chemical compound C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SIYLLGKDQZGJHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 21
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 21
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims abstract description 16
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 claims abstract description 16
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000005574 benzylation reaction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims abstract description 6
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000007068 beta-elimination reaction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims abstract 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims abstract 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 11
- 229940040526 anhydrous sodium acetate Drugs 0.000 claims description 5
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 claims description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 abstract description 4
- 230000032050 esterification Effects 0.000 abstract description 4
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 abstract 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 16
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 6
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 4
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010022901 Heparin Lyase Proteins 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 3
- BQSMUQUKNCGJCT-SLPGGIOYSA-N 2-N,6-O-disulfo-D-glucosamine Chemical group OS(=O)(=O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](NS(O)(=O)=O)C=O BQSMUQUKNCGJCT-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 2
- 0 CC*(CC)*C(CC12NC)[C@]1OC(CO*)CC2(CO[C@@](C(C1O)O*)OC[C@@]1C(CC)(CC)O[C@@](C(C1O)NC)OC(C*)[C@]1OCC(*)(COC(*)=C1)C1O)O* Chemical compound CC*(CC)*C(CC12NC)[C@]1OC(CO*)CC2(CO[C@@](C(C1O)O*)OC[C@@]1C(CC)(CC)O[C@@](C(C1O)NC)OC(C*)[C@]1OCC(*)(COC(*)=C1)C1O)O* 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 229960004969 dalteparin Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229960000610 enoxaparin Drugs 0.000 description 2
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 2
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- PURMPUDWXOWORS-LECHCGJUSA-N (2s,3r,4r,5s)-2,3,4-trihydroxy-6-oxo-5-sulfooxyhexanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OS(O)(=O)=O)C=O PURMPUDWXOWORS-LECHCGJUSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 229960003616 bemiparin Drugs 0.000 description 1
- MTDHILKWIRSIHB-QZABAPFNSA-N beta-D-glucosamine 6-sulfate Chemical class N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O MTDHILKWIRSIHB-QZABAPFNSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000002612 cardiopulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N dibenzyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1COCC1=CC=CC=C1 MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 238000006345 epimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 1
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 1
- 229960001008 heparin sodium Drugs 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical group 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- GKTNLYAAZKKMTQ-UHFFFAOYSA-N n-[bis(dimethylamino)phosphinimyl]-n-methylmethanamine Chemical compound CN(C)P(=N)(N(C)C)N(C)C GKTNLYAAZKKMTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000012716 precipitator Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052594 sapphire Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010980 sapphire Substances 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 125000003003 spiro group Chemical group 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 229960005062 tinzaparin Drugs 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способу получения низкомолекулярного гепарина, который может быть использован в химико-фармацевтической промышленности. Способ включает стадии:(а) формирования защиты сульфогрупп взаимодействием высокомолекулярного гепарина с бензетония хлоридом с образованием гепарината бензетония,(б) этерификации полученной соли бензилированием в апротонном растворителе,(в) выделения неполного сложного бензилового эфира гепарина с удалением бензетониевой защиты сульфогрупп насыщенным раствором ацетата натрия в спирте,(г) расщепления макромолекулы гепарина щелочной деполимеризацией и(д) формирования концевых 1,6-ангидрогрупп β-элиминированием при взаимодействии с сильным восстановителем,и отличается тем, что на стадии (а) отмывку гепарината бензетония от избытка непрореагировавшего бензетония хлорида производят многократной дробной промывкой водой очищенной с применением ультразвука рабочей частоты 30-40 кГц, мощностью излучения 200-400 Вт, и на стадии (в) выделение сложного бензилового эфира гепарина проводят в две последовательные операции: выделение бензилового эфира гепарината бензетония из раствора осаждением метанольным раствором ацетата натрия с последующим снятием бензетониевой защиты сульфогрупп насыщенным метанольным раствором ацетата натрия. Предложен новый эффективный способ получения низкомолекулярного гепарина с улучшенными показателями чистоты и выхода при снижении расхода воды и снижении количества отходов. 3 з.п. ф-лы, 4 пр., 3 табл., 8 ил.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к технологии получения фармацевтической субстанции низкомолекулярного гепарина (НМГ) щелочной деполимеризацией бензилового эфира коммерческого высокомолекулярного гепарина натрия.
Краткое описание чертежей
На Фиг. 1 представлена структура фрагмента молекулы высокомолекулярного гепарина.
На Фиг. 2 изображена схема получения НМГ окислительной деполимеризацией.
На Фиг. 3 показана структура дальтепарина.
На Фиг. 4 приведена схема ферментативной деполимеризации в синтезе тинза-парина.
На Фиг. 5 показана структура фрагмента макромолекулы НМГ (эноксапарин), полученного щелочным гидролизом.
На Фиг. 6 изображена схема реакций, протекающих при получении гепарината бензетония.
На Фиг. 7 представлена схема реакций бензилирования гепарината бензетония (ГБ) и удаления защиты сульфогрупп.
На Фиг. 8 дана схема реакций, протекающих при эпимеризации и циклизации.
Уровень техники
Гепарин - органопрепарат, получаемый из легких или мукозы - слизистой оболочки крупного рогатого скота или свиней. Он является прямым антикоагулянтом и используется для приготовления лекарственных форм, применяемых для профилактики и терапии тромбоэмболических заболеваний, тромбообразования при операциях на сердце и кровеносных сосудах, при остром инфаркте миокарда, а также для поддержания жидкого состояния крови в аппаратах искусственного кровообращения и гемодиализа.
Коммерческий нефракционированный гепарин (НФГ) представляет собой смесь сульфатированных полисахаридов различной структуры (Фиг. 1) с молекулярной массой от 3000 до 30000 Да. От длины молекулы гепарина и величины ее заряда зависит фармакокинетика и фармакодинамика лекарственного препарата, а также способность гепарина взаимодействовать с белками крови и клетками организма [1]. Наряду с несомненными преимуществами препараты НФГ обладают серьезными недостатками, такими как: возможность возникновения неконтролируемых кровотечений, аллергические реакции, остеопороз, необходимость повторных инъекций и др. [2].
Фракционирование природного гепарина известными методами (гельфильтрация, диализ и др.) дает низкий выход целевой фракции с низкой молекулярной массой и высокой антикоагулянтной активностью. Более эффективна в этом отношении так называемая контролируемая деполимеризация гепарина [3] под действием неорганических или органических веществ, ферментов или радиационного излучения. Реализуемые в настоящее время способы контролируемой деполимеризации можно свести к процессам гидролиза, окислительной, радикальной или ферментативной деструкции.
Окислительная деполимеризация НФГ заключается в обработке его водных растворов различными окислителями, из которых чаще всего используют нитрит натрия [4]. В результате действия выделяющейся азотистой кислоты на НФГ происходит разрыв гликозидных связей основной цепи [5] с образованием гидроксильных и альдегидных групп которые восстанавливают, например, боргидридом натрия [6] как схематично показано на Фиг. 2. Таким образом получают, например, дальтепарин, который имеет среднюю молекулярную массу около 6,0 кДа и ангидроманнозные концевые фрагменты (Фиг. 3).
Ферментативную деполимеризацию осуществляют при воздействии, например, микробных гепариназ (гепарин-лиазы), специфически разрушающих α-гликозидные связи между N-сульфатированным D-глюкозамин-6-сульфатом и 2-О-сульфатом идуроновой кислоты. Таким образом получают НМГ тинзапарин со средней молекулярной массой около 4,5 кДа и концевыми 2-N,6-O-дисульфо-D-глюкозаминовым и 4,5-ненасыщенным уроновокислым фрагментами [7] (Фиг. 4) В настоящее время известны способы ферментативной деполимеризации НФГ с помощью и других гепариназ [8]. К достоинствам ферментативной деполимеризации относятся мягкие условия синтеза и высокая селективность процесса.
Гидролитическая деполимеризация представляет собой специфический метод направленной деструкции НФГ, который подразумевает получение производных НФГ с их последующим щелочным гидролизом. Обычно процесс такого рода включает в себя предварительную защиту сульфогрупп НФГ реакцией с хлоридом бензетония и последующее преобразование карбоксильных групп в сложноэфирные за счет этерификации полученного продукта бензилхлоридом. Получаемый в результате бензиловый эфир гепарината бензетония осаждают, например, этанолом [9] с последующим удалением защиты с групп SO3 -, и полученный неполный сложный эфир подвергают щелочному гидролизу [5]. При этом образуются молекулы НМГ с 2-O-сульфо-4-енопиранозуроновым и 2-N, 6-О-дисульфо-D-глюкозаминовым концевыми фрагментами (Фиг. 5). Таким образом получают ультранизкомолекулярный семулопарин, а также такие НМГ, как бемипарин и эноксапарин. Дополнительно деполимеризацию такого рода можно стимулировать микроволновым облучением.
Производное НФГ получают аналогичным способом - реакцией с хлоридом бензетония и последующей этерификации бензилхлоридом. Полученный продукт подвергают гидролитической деполимеризации в органических растворителях таких как: формамид, диметилформамид или метиленхлорид, а в качестве катализатора применяют сильные основания семейства фосфазенов. Считается, что процесс в неводной среде проходит в сравнительно мягких условиях, благодаря чему снижается доля побочных реакций и сохраняется биологическая активность гепарина.
Наиболее близким по технической сущности к заявляемому изобретению является способ получения, раскрытый в описании и формуле изобретения к патенту [9], включающий стадии получения бензетониевой соли гепарина, бензилирования этой соли в неводном растворителе, спиртового осаждения неполного бензилового эфира бензетониевой соли гепарина и щелочной деполимеризации этого продукта, отличающийся тем, что бензетониевую соль нефракционированного гепарина получают в 0,05-0,5 М водном растворе натрия хлорида при температуре 50-60°С, рН в интервале 8,2-8,8 и массовом соотношении гепарин/бензетоний хлорид 1/(2,35-2,70), бензилирование бензетониевой соли гепарина проводят в течение 2-3 часов в среде биполярного апротонного растворителя бензилхлоридом в соотношении гепаринат/бензилхлорид 1/(0,2-1,0), который предварительно подвергают активированию в апротонном растворителе в течение 15-20 минут, осаждение бензилового эфира гепарина проводят методом Спиро этиловым спиртом, предварительно насыщенным безводным натрия ацетатом, с последующим удалением защиты с сульфогрупп, проведение β-элиминирования бензилового эфира со степенью этерификации гепарина 9-13% 1±0,5 N щелочью NaOH при температуре 55±5°С, длительности процесса 40-60 минут и массовым соотношением реагентов бензиловый эфир/щелочь 1/(0,5-2).
Стадию бензилирования проводят в смеси апротонных растворителей. Выделение бензилового эфира бензетониевой соли проводят осаждением этанолом в присутствии соосадителя ацетата натрия, удаление защиты сульфогрупп осуществляют действием насыщенного этанольного раствора того же реактива. Процесс отмывки бензетониевой соли от примесей проводят обработкой дистиллированной водой.
Среди недостатков этого способа следует отметить:
- большой расход воды для отмывки гепарината бензетония от избытка бензетония хлорида, остаточное количество которого на последующих стадиях синтеза НМГ значительно осложняет технологический процесс и приводит к значительным потерям целевого продукта, поскольку продукты реакции представляют собой липкие тестообразные вещества;
- проведение процессов осаждения бензилового эфира бензетониевой соли и последующей процедуры удаления защиты сульфогрупп гепарина одним и тем же реагентом без выделения промежуточного продукта не приводит к получению структурированного продукта и увеличивает суммарную продолжительность процесса;
- выделение готового продукта 96%-м этанолом осложнено высокой гигроскопичностью порошка.
Целью настоящего изобретения является преодоление недостатков ближайшего аналога, в частности - снижение содержания примесей в готовом продукте, увеличение выхода полупродуктов на отдельных стадиях производства, сокращение расхода промывочной воды. Преимуществами предлагаемого технического решения являются снижение трудоемкости способа и затрат на производство готового НМГ.
Раскрытие сущности изобретения.
Цель настоящего изобретения достигается с помощью способа получения низкомолекулярного гепарина, включающего стадии:
(а) формирования защиты сульфогрупп взаимодействием высокомолекулярного гепарина с бензетония хлоридом с образованием гепарината бензетония (ГБ),
(б) этерификации полученной соли бензилированием в апротонном растворителе,
(в) выделения сложного бензилового эфира гепарина осаждением и удаления защиты сульфогрупп насыщенным раствором ацетата натрия в метиловом спирте,
(г) щелочной деполимеризации макромолекулы гепарина и
(д) формирования концевых 1,6-ангидрогрупп β-элиминированием при взаимодействии с сильным восстановителем,
в котором на стадии (а) отмывку гепарината бензетония от избытка непрореаги-ровавшего бензетония хлорида производят многократной дробной промывкой водой очищенной с применением ультразвука рабочей частоты 30-40 кГц, мощностью излучения 200-400 Вт и на стадии (в) выделение сложного бензилового эфира гепарина осаждением и удаление защиты сульфогрупп проводят как две последовательные операции, а применяемым спиртом является метанол.
Предпочтительно многократную дробную промывку с применением ультразвука осуществляют водой очищенной при массовом соотношении ГБ/вода равном 1/(50-60) и температуре 40-60°С при продолжительности каждого цикла ультразвукового воздействия 10-35 минут.
Также предпочтительно выделение неполного сложного бензилового эфира гепарината бензетония из раствора производят осаждением 1,5-2,5 объемами 8-10% метанольного раствора натрия ацетата при температуре от -2 до 4°С при перемешивании в течение 4-6 часов.
Далее предпочтительно удаление бензетониевой защиты сульфогрупп производят после отделения осадка взаимодействием с 4-6-кратным массовым количеством насыщенного метанольного раствора безводного натрия ацетата при температуре 18-24°С при перемешивании в течение 8-10 часов.
Кроме того, предпочтительно стадию щелочной деполимеризации проводят в присутствии инертного носителя перлита при массовом соотношении бензиловый эфир гепарина/перлит 1/(0,25-0,5).
В результате проведенных обширных исследований авторы изобретения неожиданно установили, что при проведении отмывки бензетония хлорида с применением ультразвука его частота и мощность имеют решающее значение для качества получаемого полупродукта. При рабочей частоте выше 40 кГЦ и мощности излучения более 400 Вт существует опасность непредсказуемой деструкции не только в полимерной цепи, но также и в отдельных звеньях моносахаридов, что приводит к потере активности готового продукта.
Природа спиртового растворителя также имеет большое значение для достижения технического результата изобретения. В ближайшем аналоге [9] для выделения полупродуктов из рабочих растворов на различных стадиях процесса применяется 96% этанол. При этом первоначально выделяется маслоподобная, липкая и вязкая гигроскопичная субстанция, которую невозможно извлечь из технологического оборудования без значительных потерь. Для получения порошка необходимо многократно перетирать это вещество с осадителем до получения аморфного порошка удовлетворительного качества.
В предлагаемом способе на стадии получения бензилового эфира бензетониевой соли процесс выделения из раствора продукта бензилирования с неудаленной бензетониевой защитой сульфогрупп осаждением метанолом проводят как отдельную операцию, причем в качестве соосадителя используют небольшое количество ацетата натрия.
В соответствии с изобретением процесс удаления бензетониевой защиты выделяют в отдельную стадию. Химизм этой реакции заключается во взаимодействии бензетониевого соединения с ацетатом натрия. В аналоге [9] процессы выделения и удаления защиты проводят многократной промывкой этанолом, насыщенным натрия ацетатом (его максимальная концентрация составляет 2,33% масс.). Для этого требуется трех-четырехкратная обработка продукта этим раствором с промежуточным выделением субстанции, т.к. в одной порции раствора реагента недостаточно.
Основомоль гепарина содержит три сульфогруппы и, в соответствии с этим, для удаления бензетониевой защиты с макромолекулы необходимо израсходовать три эквивалента натрия ацетата. В метаноле растворимость натрия ацетата составляет 16,22% масс., что в семь раз больше, чем в этаноле. Поэтому расход осадителя значительно меньший. Кроме того, неожиданно достигается существенно лучшее качество осадка.
Таким образом, техническим результатом предлагаемого изобретения является усовершенствованный способ получения низкомолекулярного гепарина с улучшенными показателями чистоты и общего выхода субстанции при существенном снижении расхода отмывочной воды и образующихся стоков.
Осуществление изобретения
Далее возможность осуществления изобретения с достижением технического результата будет показана на неограничивающих примерах.
Пример 1. Синтез гепарината бензетония
Схема превращений приведена на Фиг. 6. В стеклянную двугорлую колбу вместимостью 250 мл, помещенную в водяную баню на платформе магнитной термостатируемой мешалки, наливают 50 мл воды очищенной и при перемешивании загружают 8,4 г бензетония хлорида (Hyamine 1622, Lonza Group Ltd.). После полного растворения устанавливают рН в интервале 6,0-6,7.
В другом стакане готовят раствор 3,2 г гепарина мукозного в 30 мл 0,2 М раствора NaCl при комнатной температуре. После полного растворения гепарина устанавливают рН в интервале 8,5-8,7.
Температуру водяной бани повышают до 60±1°С и с помощью капельной воронки в реактор при перемешивании, избегая вспенивания содержимого колбы, приливают раствор гепарина в течение 30-40 минут. После прибавления всего количества раствора реакцию продолжают еще 50-60 минут. Образовавшийся осадок горячим отделяют фильтрацией на воронке Бюхнера или центрифугируют. Жидкую фазу отбрасывают, предварительно измерив ее объем и оптическую плотность для количественного определения содержания примесей.
Осадок переносят в стакан вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл воды очищенной и помещают его в ультразвуковую ванну (тип УЗВ, Сапфир). Экстракцию избытка непрореагировавших реагентов (отмывку) производят при температуре 40-60°С и воздействии ультразвуком с рабочей частотой 30-40 кГц и мощностью излучения 200-400 Вт при продолжительности каждого цикла ультразвукового воздействия 10-35 минут. Степень отмывки и содержание примесей в промывочной воде определяют измерением оптической плотности раствора (D270) спектрофотометрически (Cary 60 UV-Vis, Agilent) при длине волны 270 нм по калибровочному графику. Промывку повторяют до достижения оптической плотности промывной воды менее 1,5. Результаты эксперимента с применением ультразвука (УЗ) приведены в таблице 1. Как видно из этих данных удовлетворительный результат достигается уже за 7 циклов промывки, на что расходуется 430 мл воды очищенной. Промытый продукт - гепаринат бензетония (ГБ) лиофильно высушивают (лиофильная сушилка Иней-6, ФГБУН ИБП РАН). Выход ГБ составляет 8,23 г при влагосодержании 5,3%. Расход воды очищенной в расчете на 1 г порошка составляет 52,2 мл.
*в том числе промывочных вод 350 мл.
**в том числе с промывной водой 3,035 г.
Параллельно проводят промывку при тех же условиях без применения УЗ (таблица 2). При этом для достижения требуемого результата необходимо провести 14-15 циклов промывки, причем расход воды очищенной составляет 700 мл. Выход порошка ГБ составляет 7,9 г при влагосодержании 5,1%. Расход воды очищенной в расчете на 1 г продукта составляет 88,6 мл.
*в том числе промывочных вод 700 мл.
**в том числе с промывной водой 3,424 г.
Как видно из приведенных данных, применение отмывки с помощью УЗ обработки приводит к значительной интенсификации процесса, снижению расхода воды очищенной на отмывку ГБ, количества стоков и трудозатрат на проведение процесса в два раза.
Пример 2. Синтез неполного бензилового эфира гепарина
Схема синтеза приведена на Фиг. 7.
2.1. Синтез бензилового эфира гепарината бензетония
В трехгорлую колбу вместимостью 1 л, снабженную механической мешалкой и гидрозатвором, помещенную в термостатируемую водяную баню при температуре 37±1°С, наливают 250 мл N,N-диметилформамида (ДМФА) и прибавляют при перемешивании 45,0 г гепарината бензетония, полученного по методике изложенной в примере 1. После полного растворения ГБ в колбу с раствором с помощью капельной воронки прибавляют 40 мл бензилхлорида. Реакцию продолжают при температуре 37±1°С и перемешивании в течение 8 часов после чего содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры. Выделение бензилового эфира гепарината бензетония из раствора производят осаждением 525 мл 9% метанольного раствора натрия ацетата при температуре 2-4°С при перемешивании в течение 4-6 часов. Осадок отделяют на воронке Бюхнера и влажным используют на стадии удаления бензетониевой защиты.
Выход влажного бензилового эфира гепарината бензетония 24,4 г с содержанием бензилового эфира гепарина 16,8 г.
2.2. Удаление защиты сульфогрупп бензилового эфира гепарината бензетония
В коническую плоскодонную колбу вместимостью 500 мл, помещенную на платформу магнитной мешалки, загружают 24.0 г влажного бензилового эфира гепарината бензетония, полученного по примеру 2.1, и приливают 100 мл насыщенного метанольного раствора безводного натрия ацетата. В колбу помещают якорь магнитной мешалки и закрывают ее притертой пробкой. Реакцию проводят при комнатной температуре при перемешивании в течение 8-10 часов. После окончания процесса осадок отделяют на воронке Бюхнера, и высушивают в вакуумном сушильном шкафу при температуре не выше 40С°.
Выход неполного бензилового эфира гепарина равен 16,2 г, что составляет 96% от теоретического.
Пример 3. Гидролиз бензилового эфира гепарина натрия
Схема синтеза приведена на Фиг. 8. В стакан вместимостью 250 мл, помещенный в водяную баню на платформе магнитной термостатируемой мешалки, наливают 75 мл воды очищенной и при перемешивании загружают 16,0 г бензилового эфира гепарина, полученного как описано в примере 2. Устанавливают температуру 60±1°С и перемешивают до полного растворения порошка. Затем в растворе устанавливают рН равным 11,0-11,1 с помощью свежеприготовленного 1 М раствора NaOH и прибавляют 8 мл 1 М раствора натрия гидроксида. Далее с помощью капельной воронки в течение 30-45 минут дозируют еще 8 мл того же раствора. Реакцию продолжают в течение 45 минут, поддерживая рН не ниже 11,0.
По окончании выдержки охлаждают реакционную массу до комнатной температуры, устанавливают рН равным 6,0±0,2 добавлением соляной кислоты (1:3), и раствор фильтруют. К прозрачному желтоватому фильтрату прибавляют 1,6 г безводного ацетата натрия и при необходимости корректируют рН до 6,0±0,2. Полученный раствор фильтруют через мембрану с размером пор 0,45 мкм, фильтрат охлаждают до температуры 0-4°С в течение 30-60 минут и осаждают продукт охлажденным метанолом (250-300 мл). Раствор помещают в холодильник и оставляют для созревания осадка на 3-4 часа. Надосадочную жидкость декантируют, а образовавшийся осадок дополнительно промывают 50-60 мл метанола. Осадок отделяют на воронке Бюхнера и высушивают в вакуумном сушильном шкафу при температуре не выше 40С°. Выход гидролизованого гепарина составляет 11,3 г, что составляет 84,3% от теоретического.
Пример 4. Боргидрирование сырца низкомолекулярного гепарина натрия
В стакан вместимостью 100 мл, снабженный мешалкой, наливают 50 мл воды очищенной и при перемешивании прибавляют 11,0 г продукта, полученного в примере 3. После полного растворения порошка устанавливают рН равным 8,4±0,2 и прибавляют 0,20 г боргидрида натрия. Реакцию продолжают в течение 50-60 мин. По окончании реакции устанавливают рН равным 4,0±0,2 добавлением соляной кислоты (1:3) при перемешивании в течение 10 минут, после чего добавлением 1 М раствора гидроксида натрия устанавливают рН равным 6,0±0,2. Полученный раствор фильтруют через мембрану с размером пор 0,45 мкм. Фильтрат охлаждают до температуры 0-4°С в течение 30-60 минут. Охлажденный фильтрат помещают в стакан вместимостью 200 мл и осаждают продукт охлажденным метанолом (150-200 мл). Раствор помещают в холодильник и оставляют для созревания осадка на 3 часа. Надосадочную жидкость декантируют, и образовавшийся осадок дополнительно промывают 30 мл метанола. Осадок отделяют на воронке Бюхнера и высушивают в вакууме при температуре не выше 40С°. Масса готового продукта составляет 9,7 г.
Полученная субстанция охарактеризована показателями, приведенными в таблице 3.
Литература
1. Hirsh J. et al. Clinicalof Chest Physicians Evidence-Based Parenteral Anticoagulants: American College Practice Guidelines (8th Edition) / Chest, 2008, V. 133, pp. 141S-159S.
2. Макаров B.A. и др. Применение гепаринов в клинической практике / РМЖ, 1998, №3, с. 4.
3. Кудрявцев В.Н. / Химия высоких энергий, 1993, Т. 27, №1, С. 41.
4. Авторское свидетельство SU 1570651 A3, опубл. 07.06.1990.
5.Linhardt R.J. et. al. Production and chemical processing of low molecular weight heparins / Seminars in Thrombosis and Hemostasi, 1999, V. 25, N. 3, pp. 5-16; патент US 6384021 B1, опубл. 07.05.2002.
6. Linhardt R.J. et. al. Differential anticoagulant activity of heparin fragments prepared using microbial heparinase / Journal of Biological Chemistry, 1982, V. 257, N. 13, pp. 7310-7313.
7. Патент RU 2295538 C2, опубл. 20.03.2007.
8. Патент RU 2396282 C1, опубл. 10.08.2010.
9. Патент RU 2512768 C1, опубл. 10.04.2014.
Claims (9)
1. Способ получения низкомолекулярного гепарина, включающий стадии:
(а) формирования защиты сульфогрупп взаимодействием высокомолекулярного гепарина с бензетония хлоридом с образованием гепарината бензетония (ГБ),
(б) этерификации полученной соли бензилированием в апротонном растворителе,
(в) выделения неполного сложного бензилового эфира гепарина с удалением бензетониевой защиты сульфогрупп насыщенным раствором ацетата натрия в спирте,
(г) расщепления макромолекулы гепарина щелочной деполимеризацией и
(д) формирования концевых 1,6-ангидрогрупп β-элиминированием при взаимодействии с сильным восстановителем, отличающийся тем, что на стадии (а) отмывку гепарината бензетония от избытка непрореагировавшего бензетония хлорида производят многократной дробной промывкой водой очищенной с применением ультразвука рабочей частоты 30-40 кГц, мощностью излучения 200-400 Вт, и на стадии (в) выделение сложного бензилового эфира гепарина проводят в две последовательные операции: выделение бензилового эфира гепарината бензетония из раствора осаждением метанольным раствором ацетата натрия с последующим снятием бензетониевой защиты сульфогрупп насыщенным метанольным раствором ацетата натрия.
2. Способ по п. 1 отличающийся тем, что многократную дробную промывку с применением ультразвука осуществляют водой очищенной при массовом соотношении ГБ/вода равном 1/(4-6) и температуре 40-60°C при продолжительности каждого цикла ультразвукового воздействия 10-35 минут.
3. Способ по п. 1 отличающийся тем, что выделение сложного бензилового эфира гепарината бензетония из раствора производят осаждением 1,5-2,5 объемами 8-10% метанольного раствора натрия ацетата при температуре от -2 до 4°C при перемешивании в течение 4-6 часов.
4. Способ по п. 1 отличающийся тем, что удаление бензетониевой защиты сульфогрупп производят после отделения осадка взаимодействием с 4-6-кратным массовым количеством насыщенного метанольного раствора безводного натрия ацетата при температуре 18-24°C при перемешивании в течение 8-10 часов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017146005A RU2670767C9 (ru) | 2017-12-26 | 2017-12-26 | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017146005A RU2670767C9 (ru) | 2017-12-26 | 2017-12-26 | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2670767C1 RU2670767C1 (ru) | 2018-10-25 |
| RU2670767C9 true RU2670767C9 (ru) | 2018-11-26 |
Family
ID=63923439
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017146005A RU2670767C9 (ru) | 2017-12-26 | 2017-12-26 | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2670767C9 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2725545C1 (ru) * | 2020-01-30 | 2020-07-02 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "МИРЭА-Российский технологический университет" | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
| CN115043959A (zh) * | 2022-05-25 | 2022-09-13 | 湖北亿诺瑞生物制药有限公司 | 一种高收率依诺肝素钠的制备方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3724235B1 (en) | 2017-12-11 | 2024-08-07 | Biological E Limited | Process for the preparation of low molecular weight heparin |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2295538C2 (ru) * | 2005-03-01 | 2007-03-20 | Гематологический научный центр РАМН | Способ получения гепаринов с низкой молекулярной массой |
| RU2396282C1 (ru) * | 2009-04-02 | 2010-08-10 | Государственное учреждение гематологический научный центр Российской академии медицинских наук (ГУ ГНЦ РАМН) | Способ получения гепарина с низкой молекулярной массой и антикоагулянтной активностью |
| RU2512768C1 (ru) * | 2012-12-18 | 2014-04-10 | Федеральное бюджетное учреждение "Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов (ФБУ "ГИКиМП") | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
-
2017
- 2017-12-26 RU RU2017146005A patent/RU2670767C9/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2295538C2 (ru) * | 2005-03-01 | 2007-03-20 | Гематологический научный центр РАМН | Способ получения гепаринов с низкой молекулярной массой |
| RU2396282C1 (ru) * | 2009-04-02 | 2010-08-10 | Государственное учреждение гематологический научный центр Российской академии медицинских наук (ГУ ГНЦ РАМН) | Способ получения гепарина с низкой молекулярной массой и антикоагулянтной активностью |
| RU2512768C1 (ru) * | 2012-12-18 | 2014-04-10 | Федеральное бюджетное учреждение "Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов (ФБУ "ГИКиМП") | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2725545C1 (ru) * | 2020-01-30 | 2020-07-02 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "МИРЭА-Российский технологический университет" | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
| CN115043959A (zh) * | 2022-05-25 | 2022-09-13 | 湖北亿诺瑞生物制药有限公司 | 一种高收率依诺肝素钠的制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2670767C1 (ru) | 2018-10-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU1658820A3 (ru) | Способ получени мукополисахаридов | |
| US4981955A (en) | Depolymerization method of heparin | |
| CN101735336B (zh) | 低聚岩藻糖化糖胺聚糖及其制备方法 | |
| RU2670767C9 (ru) | Способ получения низкомолекулярного гепарина | |
| JPS63278901A (ja) | 通常の構造の低分子量のヘパリンとその製法並びに生物学的な応用 | |
| NO304991B1 (no) | FremgangsmÕte for fremstilling av blandinger av sulfaterte polysakkarider | |
| US10870711B2 (en) | Process for the preparation of polysaccharides | |
| EA005995B1 (ru) | Смеси полисахаридов на основе гепарина, их получение и фармацевтические композиции, их содержащие | |
| JPH04502928A (ja) | ヘパリン・サッカリドおよび医薬組成物 | |
| RU2512768C1 (ru) | Способ получения низкомолекулярного гепарина | |
| RU2753678C1 (ru) | Способ получения надропарина кальция | |
| CA2908959C (en) | Low-molecular-weight glycosaminoglycan derivative containing terminal 2, 5-anhydrated talose or derivative thereof | |
| AU2002321225B2 (en) | Polysaccharidic esters of retinoic acid | |
| Tang et al. | A regular Chlorella mannogalactan and its sulfated derivative as a promising anticoagulant: structural characterization and anticoagulant activity | |
| AU2002321225A1 (en) | Polysaccharidic esters of retinoic acid | |
| CA2907887C (en) | Low-molecular-weight glycosaminoglycan derivative, pharmaceutical composition thereof, preparation method therefor and use thereof | |
| CA2914256C (en) | New processes for the production of chemically-modified heparins | |
| EP3724235B1 (en) | Process for the preparation of low molecular weight heparin | |
| CN116515013A (zh) | 一种超低分子肝素及其制备方法与应用 | |
| CN108484792B (zh) | 右旋糖酐硫酸酯及制备右旋糖酐硫酸酯的方法 | |
| RU2725545C1 (ru) | Способ получения низкомолекулярного гепарина | |
| CN102585034B (zh) | 果胶磺化的方法 | |
| RU2441024C1 (ru) | Способ получения низкомолекулярного пектина | |
| JP4221946B2 (ja) | 低平均重合度ポリガラクツロン酸の製造方法 | |
| CN118459618A (zh) | 一种新型的半乳糖基化糖胺聚糖及其制备方法和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TH4A | Reissue of patent specification |