PT101027A

PT101027A - Peptideos, processo para a sua preparacao e sua utilizacao como compostos farmaceuticos

Info

Publication number: PT101027A
Application number: PT101027A
Authority: PT
Inventors: Laszlo Revesz; Trevor Glyn Payne; Richard Heng; Beat Weidmann
Original assignee: Sandoz Sa
Priority date: 1991-11-04
Filing date: 1992-11-02
Publication date: 1994-02-28
Also published as: NO941629L; HUT68200A; AU2885292A; WO1993009135A1; SK51194A3; MX9206306A; FI942061A0; NZ244985A; CA2116653A1; EP0611375A1; NO941629D0; FI942061A; GB9123326D0; ZA928511B; CZ106794A3; JPH07500828A; HU9401303D0; IL103612A0

Description

2 O presente invento está relacionado com peptídeos tendo utilidade farmacêutica, processos para a sua produção, composições farmacêuticas contendo-os e sua utilização como fármacos.

Mais particularmente o presente invento proporciona um composto da fórmula I (I) R-[Ai-A2]n-A3-A4-X-A5 em que R é hidrogénio, um grupo protector amina ou benziloxi facultativamente substituído no anel n é 0 ou 1, A1 é Vai, Leu, Ala, Ile ou trimetilsilil-Ala A2 é Fen ou Tir, A3 é uma ligação directa, Vai, Leu, Ala, Ile, trimetilsilil-Ala ou um radical divalente da fórmula (a)

(a) em que o anel A é facultativamente substituído por hidroxilo ou alcoxilo CL ., 1-4' A4 é uma ligação directa ou um radical divalente da fórmula (b) (b) _Ν - CH-CO-

Ri Yi em que R1 é hidrogénio ou alquilo C.^ e Y1 é o resíduo ligado ao átomo de carbono α do α-aminoácido e -CH2-CH2-N(alquilo Cl-4^2' iir‘idazol-2-il-metilo, benzimidazol-2-il-metilo, 1H-1,2,4-triazol-3-il-metilo, pirazol-3-il-metilo, indazol-3-il-metilo ou um radical da fórmula (c) ou (d) facultativamente protegidos

(c) (d) em que R2 e R3 são independentemente hidrogénio, halogénio, alquilo CF^ ou tritilo, quando muito R2 ou R^ é H e R^ e Rg são independentemente hidrogénio, alquilo C1-4, hidroxilo, alcoxilo C1-4, CF3, fenilo ou halogénio, quando muito R4 ou Rg é H, ou A e A » · 3 4 formam em conjunto um radical da fórmula (aa) 4

.Ν -NH-CH - CO-Ní.. i, CH-CO- I h Caa) em que ^ é como definido atrás e ^ e Rla formam em conjunto “(Cl^m ein 3ue m®2» 3/ 4ou5e 1) X é um radical divalente da fórmula (e^)

X ** ligado por um X1 é 0 ou S e um radical da em que R. é H ou alquilo C. ., e A5 é hidrogénio; CF3; um radical -2,^-Z^-Y^ em que e e 7*2 são independentemente uma ligação directa ou um resíduo de α-aminoácido e Y2 é NH2, alquilamino C1-4, di-(C.,_A-alquil)amino ou um radical heterociclico azoto a Z2; um radical -CH.j-O^-Y.j em que Y3 é heteroarilo; um radical -CH2~Y3; ou fórmula (k) a (m) j

5 X

-CHz-Xi-CO-Y,, 00 r9 \__ Rl 0 / 1 Vx

Rn (m)

(D R9 - x10 -CH 2-X^S^j Ru (O) R7 em que \ Y4 é tri-(alquil C1_4)metilo ou um resíduo

C \ ) anel B é piridilo,. . · . Re anel C é fenilo ou piridilo, R e R são independentemente alquilo C , alcoxilo / o _L “ 4 C, ., CF_, halogénio, azoto ou ciano e R_, R, n e R,_ 1-4' 3 ^ 9' 10 11 são independentemente azoto, ciano, CF3, carbamoilo, C02R12' -ch=ch-cn ou “Cí^CHCC^R^ ein 5110 R^2 ® alquilo Cl-6' sendo também um radical divalente da fórmula (^)

al kyl alkyl al < yl (e2 ) W· 6

quando A,, é H ou (2) X é um radical divalente da fórmula (f)

(f) e é -Z -Z -Y„ ou um radical da fórmula fk) a (o) como D 12 2 definido atrás ou OR13 ou em que R13 é alquilo C facultativamente substituído por OH ou .1 . is interrompido por O e R^4 e R são mdependentemente independentemente hidrogénio, alquilo C^_12/ cicloalquilo C5_7 ou benzilo, ou 3) X é um radical divalente da fórmula (g) 3 ‘ * /

e Ac é -Ζ,-Ζ -Y_ como definido atrás ou D 1 Z Δ 4) X é um radical divalente da fórmula (h) ou (j)

(h) (j) "W' 7 7

e A,, é um radical da fórmula (k) a (ο) , -CH2-Y3 ou -CH2-X1~Y3 como definido atrás, com a condição de apenas ou A^ poder ser uma ligação directa quando n é 0 e A3 ou A4 não ser uma ligação directa quando n é 1, e seus ésteres ou amidas fisiologicamente hidrolisáveis e aceitáveis, na forma livre, na forma de sal ou na forma de complexos.

Exemplos de grupos protectores R estão descritos e.g. em "Protective Groups in Organic Synthesis·', T.W. Greene, J. Wiley & Sons NY (1981), 219-287, por exemplo acilo como seja acetilo, metoxissuccinilo, hidroxissuccinilo ou benzoilo facultativamente substituído no anel fenilo com e.g. p-metoxicarbonilo, p-metoxilo ou p-nitro; alcoxicarbonilo como seja t-butiloxicarbo-nilo; arilmetoxicarbonilo como seja 9-fluorofenilmetoxicarbonilo ou benziloxicarbonilo facultativamente substituídos no anel fenilo com p-metoxilo, p-nitro, p-cloro ou m-fenilo; arilmetilo como seja benzilo facultativamente substituído no anel com p-metoxilo, p-nitro ou p-cloro; ou arilsulfonilo como seja fenilssulfonilo facultativamente substituído no anel com p-metilo ou p-metoxilo ou naftilsulfonilo facultativamente substituído no anel com e.g. amina ou di(alquil C^_4)amina.

Quando R é benziloxilo, é preferencialmente benziloxilo substituído com hidroxilo ou alcoxilo C1_4< Preferencialmente R é benziloxilo não substituído.

Halogénio é preferencialmente fluor ou cloro.

Quando A3 é um radical substituído da fórmula (a) é preferencialmente substituído por alcoxilo C^_4, preferencialmente para -C=0. δ

Por α-aminoácido pretende-se significar um a-aminoácido natural ou comercial ou não natural ou um seu isómero óptico. Um α-aminoãcido não natural é um α-aminoácido que não é incorporado numa proteína sob a direcção de mRNA, e.g. β-Nal, um fluoro-a-ami-noácido como seja fluoroalanina, trimetilsilil-Ala ou um a-aminoácido como seja

(CH 2 n2 HN 55. nh

2 ΚΗΛι

Η N—CH-COOH em que é um inteiro entre 1 e 6 e n^ é um inteiro entre 1 e 12.

Os grupos protectores que podem estar presentes em são grupos que protegem a função de 0, S ou N nos grupos amina das cadeias laterais de um α-aminoãcido. Os grupos protectores de N são e.g. como descritos atrás para R ou alquilo C3_5 como seja isopropilo, formilo, um resíduo de açúcar como seja 1-deso--fructosilo ou a-glucosil(l-4)-desoxifructosilo, di-hidroxi-al-quilo C3_6 como seja di-hidroxipropilo, cicloalquilo C5_? como seja ciclo-hexilo ou tropinilo. grupos protectores de 0 e S para as funções hidroxilo e tiol são conhecidos e podem ser e.g. metilo, t-butilo ou benzilo.

Quando é um radical heterociclico, ele pode ser e.g. um anel de 5 ou 6 membros, e.g. piperidino ou pirrolidinilo. 9

Exemplos de heteroarilo como Y3 incluem e.g. radicais heteroaciclicos insaturados de 5, 6 ou 7 membros, compreendendo pelo menos um azoto e facultativamente ainda heteroátomos tais como N, 0 ou S. De preferência é heteroarilo compreendendo entre 1 e 4 átomos de azoto, e.g. piridilo, triazolilo, tetrazo-lilo, triazin-dionilo.

No anel B do radical (o), o átomo de azoto pode estar em o, m ou para. Quando o anel C no radical (k) é piridilo ele pode ser 3-, 4- ou 5-piridilo.

Os radicais (e^, (e2), (f), (g) e (j) derivam de Asp e compreendem um átomo de carbono assimétrico e o radical (h) compreende dois átomos de carbono assimétricos e portanto conduzem a isomerismo óptico. Será compreendido que o presente invento inclui todas as formas isoméricas individuais e diasteroisómeros assim como misturas, e.g. racematos, a menos que de outra forma seja estabelecido. O radical da fórmula (e^) ligado a que é hidrogénio pode existir na forma ciclica e não ciclica e.g. como se segue: NR, co2h

OH

Deve-se entender que sempre que ocorrem formas tautomé-ricas, o presente invento engloba formas de lactol e de ácido oxo-carboxílico, i.e. se bem que os compostos da fórmula I em que X é um radical da fórmula (e^ sejam definidos por conveniência por referência apenas à forma de ácido oxo-carboxilico, o invento não deve ser compreendido como sendo de alguma forma limitado pela nomenclatura particular ou representação gráfica empregue. Considerações semelhantes aplicam-se em relação aos materiais de partida que apresentam tautomerismo do ácido lactol/oxo-carboxí-lico como aqui descrito a seguir.

As mesmas considerações aplicam-se ao radical da fórmula (h) o qual pode existir na forma linear e na forma cíclica como se segue:

OH

-NR6^A base/ag H +

^co2h e a compostos da fórmula I compreendendo um radical da fórmula (h) e aos correspondentes materiais de partida.

Pelo termo "ésteres ou amidas fisiologicamente hidroli-sãveis e aceitáveis" pretendesse significar ésteres e amidas que são hidrolisáveis em condições fisiológicas para dar alcoóis ou aminas que são elas próprias fisiologicamente aceitáveis, i.e. que não são tóxicas nos níveis de dosagem pretendidos. como

Tais ésteres ou amidas são obtidos por esterificação ou amidação, respectivamente de um composto da fórmula I em que X é um radical portador de um grupo carboxilo. Tais ésteres incluem ésteres com um álcool alifático ou aliciclico ou poliol tendo 1 a 12 átomos de carbono. Tais amidas incluem amidas com aminas alifáticas, e.g. alquilamina alcoxiC1_4alquilaminaC^_4 seja β-metoxi-etilamina ou anilina. 11

Os compostos da fórmula I podem existir e.g. na forma livre, forma de sal de adição ácida ou na forma de complexos. Os sais de adição ácida podem ser formados com e.g. ácidos orgânicos, ácidos poliméricos e ácidos inorgânicos. Tais formas de sal de adição de ácido incluem e.g. os hidrocloretos e acetatos. As formas de sal podem também incluir os obtidos com o grupo carbo-xilico presente em compostos da fórmula I, e.g. sais de metais alcalinos tais como sais de sódio ou potássio ou sais de amónio substituídos ou não substituídos. Os complexos são e.g. formados a partir de compostos da fórmula I quando da adição de substâncias orgânicas, e.g. sais inorgânicos ou hidróxidos tais como sais de Ca e Zn, e/ou uma adição de substâncias orgânicas polimê-ricas.

Nos compostos da fórmula I, as significâncias são preferidas individualmente ou em qualquer combinação ou subcombi- nação: 1. R é um grupo protector amina ou benziloxi, preferencialmente um grupo protector de amina. R é preferencialmente benziloxi quando n é 0 e é um radical da fórmula (a). 2. A3 e A4 não são uma ligação directa. 3. n é 0. 4. A3 é um radical da fórmula (a) quando n é 0. 5. A3 é uma ligação directa, Vai, Leu, Ala, Ile ou trimetilsilil-Ala. 6. Ri ® hidrogénio ou metilo, preferencialmente hidrogénio. 12 7. Y1 é o resíduo que se liga ao átomo de carbono a de um α-aminoácido seleccionado entre Ala, Leu, His, Fen, Met, Trp, trimetilsilil-Ala e Arg, Orn e Lis facultativamente protegidos na cadeia lateral, ou Y1 é um radical da fórmula (c) . -w 8. A^ e A^ podem também formar em conjunto um radical da fórmula (aa) quando n é 0. 9. m é 2 ou 3. 10. X é um radical da fórmula (e^) e A^ é diferente de H. 11. X é um radical da fórmula (g). 12. X é um radical da fórmula (h) ou (j). 13. R6 é hidrogénio ou metilo, preferencialmente hidrogénio. 14. Z- em Ac é o resíduo de um α-aminoãcido natural, 1 0 preferencialmente de um a-aminoácido aromãtico/heterociclico, particularmente Pro. 15. Zn em A,, é o resíduo de um α-aminoácido natural, & D preferencialmente um α-aminoácido alifático, particularmente um α-aminoãcido alifático sem outro grupo funcional, mais preferencialmente Vai. 16. 17. X é um radical da fórmula (e^) facultativamente esterificado ou amidado e Ag é um radical da fórmula (k), (1) ou (o). X é um radical da fórmula (e ), (h) ou (j) facultativamente esterificado ou amidado e Aj é -CI^-X^-Y^, preferencialmente 17. 13

-ch2-s-y3 ou -ch2-y3. 18. X é um radical da fórmula (h) ou (j) facultativamente esterifiçado ou amidado e A^ é (k). 19. X é um radical da fórmula (j) facultativamente esterifiçado ou amidado e A5 é um radical da fórmula (m). 20. Radical da fórmula (m) é mono-substituido, preferencialmente em para, mais preferencialmente é 4-nitrofenilo. 21. Todos os resíduos de α-aminoãcidos presentes excepto X têm a configuração L. X tem a configuração D ou L. 22. 0 carbono assimétrico em (h) portador do grupo OH tem a configuração S. Preferencialmente o carbono assimétrico em (j) portador de Rg tem a configuração R.

Numa série de realizações específicas , o presente invento também proporciona um composto da fórmula I em que n é 0, A3 é uma ligação directa, Vai, Leu, Ala, Ile ou trimetilsilil--Ala, A4 é como definido atrás, ou A3 e A4 formam em conjunto um radical da fórmula (e1) ou (e2) como definido atrás e i) X é um radical da fórmula (e^ ou (e2) como definido atrás e Ar é H ou

D ii) X é um radical da fórmula (e1) ou (f) e A5 é como definido atrás ou um radical da fórmula (k), (1) ou (m) em que X é 0, iii) X é um radical da fórmula (g) e A5 é -Z1-Z2~Y2 ou iv) X é um radical da fórmula (j) e A,_ é um radical da fórmula (k) , (1) ou (m) em que X1 é 0. 14

O presente invento também proporciona um processo para a produção de um composto da fórmula I, processo esse que se caracteriza por: a) remoção de pelo menos um grupo protector de um composto da fórmula I na forma protegida ou adição de um grupo protector R ao grupo N-terminal de um composto da fórmula I; ou b) conversão de um composto da fórmula I num outro composto da fórmula I; ou c) acoplagem através de uma ligação amida de dois fragmentos peptídicos, cada um dos quais contem pelo menos um aminoácido na forma protegida ou desprotegida e um fragmento peptídico contendo um radical da fórmula (e^) a (j) como definido atrás, os fragmentos peptídicos sendo tais que se obtem um peptídeo protegido ou desprotegido tendo a sequência de acordo com a fórmula I atrás e se necessário, remoção do grupo ou grupos protectores de um composto da fórmula I na forma protegida; ou

d) para a produção de um composto da fórmula I em que X é um radical da fórmula (e^) ou (h) e A5 é um radical da fórmula (k), (1) ou (o) ou -CH2-X1“Y3, reacção de um composto da fórmula III R-[A1-A2]n-A3-A4-X'-CH2-Za (III) em que R, A^ a A^ e n são como definidos atrás, X' é um radical da fórmula (e.) ou (h) e Z é um grupo migrante, X cl e.g. halogénio,

com um correspondente fenol, tiofenol ou HX^piridina ou um ácido da fórmula ΗΧ,-CO-Y. ou um seu derivado funcional 1 4 ou ΗΧ^-Υ^^; ou

e) para a produção de um composto da fórmula I H 0 MAi-Aa]n-AJ-A4-Nw/A^ A5 (I) C02Ri6 em que R, A. a A,, e n são como definidos atrás e R, ^ é um ^15 16

resíduo c1_12 alifático ou aliciclico, oxidação de um composto da fórmula V

H OH R-[Ai.-A2 ]n-A3~A4 -Nv/^As (V)

X C02Ri6 em que R, A^ a Ας, n e Rlg são como definidos atrás e recuperação de um composto da fórmula I assim obtido na forma livre ou de sal ou na forma de um complexo.

Os processos (a) a (e) atrás podem ser realizados de acordo com técnicas convencionais conhecidas. A remoção de um grupo protector no passo (a) do processo pode também incluir a remoção de R no grupo terminal N de um composto da fórmula I. Por exemplo, quando R é 16 x* V ' benziloxicarbonilo, este grupo pode ser removido por hidrogenação na presença de um catalisador e.g. Pd.

De acordo com o passo (b) do processo por exemplo, para a produção de um composto da fórmula I em que X compreende um grupo carboxilo, pode ser hidrolisado um composto da fórmula I em que X compreende um grupo carboxilo esterifiçado ou amidado. Tal hidrólise pode ser efectuada por tratamento com uma base adequada ou por hidrólise ácida, por exemplo na presença de ácido trifluo-roacético.

Ainda, de acordo com o passo (b) do processo para a produção de um composto da fórmula I em que X compreende um grupo carboxilo esterificado ou amidado, pode ser esterificado (trans) ou amidado um composto da fórmula I em que X compreende um grupo carboxilo ou um grupo carboxilado esterificado. Tal formação de éster ou amidação pode ser realizada usando qualquer uma das técnicas conhecidas, por exemplo conversão do grupo carboxilo num grupo reactivo funcional, e.g. um haleto ou anidrido correspondente, ou usando um composto da fórmula I em que X é um radical da fórmula (h) na forma de lactona e reacção de tal grupo com o álcool ou amina seleccionado.

De acordo com uma realização do passo (b) do processo, para a produção de um composto da fórmula I em que X é um radical da fórmula (g), um composto da fórmula I em que X é um radical da fórmula (e1) ou (e2) e A,. é H pode reagir com um composto da fórmula II (II) h2n-nh-co-a5 17 17

em que é como definido atrás. Este processo pode ser realizado em analogia com as técnicas conhecidas usadas na preparação de semicarbazonas.

Um composto com a fórmula I em que X é um radical da fórmula (e^) pode também ser convertido de acordo com técnicas conhecidas num composto com a fórmula I em que X é um radical da fórmula (e2) e vice-versa. 0 passo (c) do processo pode ser realizado por técnicas conhecidas da química de peptídeos. Por fragmento peptídico compreendendo um radical da fórmula (e1) a (j) pretende-se significar o próprio radical portador de um grupo protector na fracção -NR - e um extremo adequado, e.g. A ou CH -Z no outro O Í? L· cl lado. 0 passo (d) do processo pode ser convenientemente efectuado usando um reagente de Dess-Martin, e.g. na presença de uma base ou de um sal de prata que precipita com halogénios ou de acordo com os processos de oxidação de Swern.

Sempre que pretendido, nestas reacçóes, podem ser usados grupos protectores para grupos funcionais que não participem na reacção.

Estes podem ser por exemplo grupos protectores de amina, grupos protectores de carboxilo, grupos acetal, etc. Quando completada a reacção pretendida, os grupos protectores podem ser então removidos.

Cada um dos processos atrás pode ser realizado usando materiais de partida na forma de um ou outro dos isómeros õpticos individuais ou na forma de misturas [relacionadas com os carbonos 18 assimétricos presentes nos radicais das fórmulas (e1) a (j) como X ou em tal precursor de radical]. Por conveniência os materiais de partida são usados com enantiómeros S ou R para produzir um composto da fórmula I em que o carbono assimétrico nos radicais das fórmulas (e^ a (j) tem a configuração S ou R, respectivamen-te.

Os materiais de partida usados nos passos (d) ou (e) do processo podem ser preparados por analogia com o passo (c) do processo. Uma vez que a produção dos materiais de partida não particularmente descrita, os compostos são conhecidos ou podem ser preparados de forma análoga a métodos conhecidos praticados neste campo.

Os exemplos que se seguem servem para ilustrar o invento. Todas as temperaturas são em °C.

Foram usadas as abreviaturas que se seguem: THF = tetra-hidrofurano TFA = ácido trifluoroacético MeOH = metanol EtOAc= acetato de etilo DCC = diciclo-hexilcarbodiimida HOBT = hidroxibenzotriazole Z benziloxicarbonilo t.a. = temperatura ambiente Fmoc = 9-fluorenilmetoxicarbonilo a = amorfo 19

EXEMPLO 1: Z-Val-Met-AsP (OH)-H O éster do aldeído dimetilacetal-6-tert.butílico do ácido Z-Val-Met-aspártico (1,17 g) foi ressuspenso em CH2C12 (150 ml), e adicionado TFA (15 ml) e água (1 ml) e agitado durante 2,5 horas à t.a.. 0 solvente foi evaporado, adicionado duas vezes e novamente evaporado. 0 resíduo cristalino foi dissolvido em água (60 ml) com aquecimento, decantado para retirar algum do material não dissolvido e cristalizado a 5°C, dando a primeira colheita do produto: p.f. 117°C. Todos os licores mãe foram colhidos e cromatografados (SiC>2, acetona/hexano/EtOAc 60/40/0,5) para dar uma segunda colheita de produto, cristalizando quando da titulação com água.

EXEMPLO 2: Semicarbazona Z-Val-Met-Asp(OH)-H 0 composto do Exemplo 1 (0,27 g, 0,55 mmol) em MeOH (2 ml) foi combinado com semicarbazida, HC1 (0,6 ml de uma solução 1 molar), e em seguida adicionadas 5 gotas de piridina. o produto cristaliza após 10 minutos à t.a.: p.f. 233-235°C. i *·· ViHw- .

EXEMPLO 3: Z-Val-Met-Asp(OH^-H semicarbazonil-Pro -Val-N(CH3)2) O composto do Exemplo 1 (0,48 g, 1 mmol) foi dissolvido numa mistura de MeOH (2 ml) água (0,5 ml) e 3 gotas de piridina. N-(hidrazinocarbonil)-Pro-Val-N(CH3)2 (0,3 g, l mmol) foi dissolvido em MeOH (1 ml), água (2 ml) e 3 gotas de HC1 2N. Ambas as soluções foram combinadas e aquecidas durante 2 minutos a 40--50°C. 0 produto cristaliza quando do arrefecimento: p.f. 118--120°C.

Repetindo o processo do exemplo 1, usando os correspondentes materiais de partida, podem ser preparados os compostos que se seguem:

EXEMPLO 4: Z-ValFen-Asp(OH)-H

EXEMPLO 5: Z-Val-His-Asp(OH)-H

Repetindo o processo do Exemplo 2 ou 3 respectivamente, usando os correspondentes materiais de partida, podem ser preparados os compostos que se seguem da fórmula IA H Z-A3-A4~n

(IA) em que A3, A^ e A5 são como definidos atrás 21

Exemplo A3 A4 A5 p.f.°C 6 Vai Fen H a 7 Vai His H 150 8 Vai Fen Pro-Val-N(CH3) 2 126-129 9 Vai His Pro-Val-N(CH3) 2 10 Ala-Tir-Val Fen H 205 EXEMPLO 11: Ácido Í3S)-3-fZ-valil-fenilalanil)amino-5-(2,6-dimetilbenzoiloxi)-4-oxo pentanóico O éster tert.-butilico do ácido (3S,4RS)-3-(Z-Val-His)-amino-4-hidroxi-5-(2,6-dimetilbenzoiloxi) pentanóico (0,6 mmol) foi tratado com o reagente de Dess-Martin (0,77 mmol) en CH2C12 (4 ml) durante 45 minutos e filtrado. Adicinou-se então acetona e NaOH 0,5 Ne a acetona foi evaporada. 0 material cristalino residual foi lavado com H20 acidificado com ácido tartárico a 10% e extraído com EtOAc. Os extractos combinados de EtOAc deram após evaporação o éster t. butilico do produto como cristais amarelos. Estes foram dissolvidos em CH2C12 (4 ml), adicionou-se TFA (4 ml) e a mistura foi agitada à t.a. durante 15 minutos. A mistura foi evaporada até secagem e cromatografada (Si02, aceto-na/hexano/EtOAc 60/40/1) dando o produto na forma de cristais ligeiramente corados. EXEMPLO 12: (Z-Valil-alanil)-(3R.4S)-3-amino-4-hidroxi-5-(2.6-diclorobenzoiloxi) O éster etílico do ácido (Z-valil-alanil)-3R,4S)-3-ami-no-4,5-di-hidroxi pentanóico e 4-dimetilaminopiridina foram dissolvidos em piridina e adicionado cloreto de 2, 6-dicloroben-zoílo gota a gota. A mistura de reacção foi agitada durante a 22 noite à temperatura ambiente, depois adicionados gelo e água e amistura foi extraída com AcOEt. A fase orgânica foi lavada com água, depois com solução de NaCl, seca sobre Na2S04, filtrada, evaporada e o produto bruto foi cromatografado para dar o composto do título. 0 derivado (3R,4S) do composto do título pode ser preparado como se segue: Z-Val-Ala-OH (0,26 mmol), DCC (53 mg, 0,26 mmol) e H0BT.H20 (39mg, 0,26 mmol) foram dissolvidos em THF/DMF (2 ml/ 2ml) e agitados durante 5 minutos, antes de se adicionar o éster tert.butílico do ácido (3S,4RS)-3-amino-4-hidroxi-5(2,6-dimetil-benzoiloxi)-pentanóico (87 mg, 0,26 mmol) em THF (2 ml). A mistura de reacção foi agitada durante a noite à t.a., evaporada e cromatografada (SiC>2, EtOAc/MeOH/NH3 95/5/0,5) para dar o composto do título (3R,4S). EXEMPLO 13: Éster etílico do ácidofZ-valil-alanil)-(3R^-3 amino-4-oxo-5-(2,6-diclorobenzoiloxi)pentanóico A uma solução de cloreto de oxalilo em CH2C12 a -50°C adicionou-se gota a gota dimetilsulfóxido em CH2C12. Após 15 minutos uma solução do composto do Exemplo 12 em CH2C12 foi adicionada gota e a mistura de reacção agitada durante 1 hora a -48°C. Adicinou-se trietilamina e a agitação continuou durante 3 horas à temperatura ambiente. Adicionou-se então água e a mistura de reacção foi extraída com CH2C12. A fase orgânica foi lavada com solução de NaHC03 e solução de NaCl, seou-se sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se. 0 resíduo foi cromatografado dando o composto do título. 23

Repetindo o processo dos Exemplos 1-3 e 11-13, usando os correspondentes materiais de partida, podem ser preparados os compostos da fórmula IB

O·.·

R x (IB) em que A3, A4, R e R são como definidos abaixo, x y 33 ^ O CM 0 'w

Cu CM 'w-' cd

O o O o i—1 0 r—1 o rH o i—1 O o r—! Γ—I i—1 •*H •tH mH *H rH rH Ή *H O ò O O *H •H O O o‘ N N M N Q O N N N C c c C N N C a r-l e 0 <u 0 0 C3 c 0 0 •H ω X3 Λ JC J3 0 0 •Q xs C l 1 1 1 -O J3 1 1 0 1 n rN m m | | 0 0 r—1 Cu O Cu Cu r-H rH X 2: Çh 33 O O z O O O O •rH •rH I •H •H •rH •rH •rH •rH •rH Π3 1 | rsj Q T3 I T3 I T3 1 Ό I Ό TJ Ί3 vo 2 1 & 1 vO 1 vO I vO 1 M3 1 v£> 1 MD ** ·» I PS *s e* ·» «» ·* p,. CM CM CL CM CM CM CM CM CM CM >1os 33 33 33 33 33 33 33 33 33

- 25 - i

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O o O N C <y j

u *»h Ό I Ό cM

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O rHm m cm nm m

TriMe-silil- Ala H 2,6-diCl-benzo.i 1 oAla m VOmm m 28

EXEMPLO A3 A4 Ry Rx M20 c(MeOH) EXEMPLO 58:

Cl

Z-His-Asp-CH2-0-C0—( O

Cl 20

[a] D = -20,3° c=l em MeOH EXEMPLO 59:

Cl

Fmoc-Val-His-Asp-O-CO—( Q

Cl EXEMPLO 60:

Cl C6H5-CH2-0 ,CO-His-Asp-CH2-0-C0

Cl [ct]20D = -21,5°C c=l, 07 MeOH 30 EXEMPLO 61:

Cl

CgHs-CHj-O

CO-His-Asp-CHj-O-CO—( Q

ψ

Cl EXEMPLO 62:

Cl.fe> S02-Val-Ala-Asp-CH2-0-C0—\0y

Cl

Repetindo o processo dos Exemplos 1-3 e 12-13 e usando os correspondentes materiais de partida, podem ser preparados os compostos que se seguem da fórmula IC

OH Z-Val-A4-NH

0

IC

R x

em que A-, R e R ^ 3' x y são como definidos abaixo 31

EXEMPLO *4 R y R* * 63 Ala H 2,6-diCl-benzoil R,S 64 Ala C2H5 Cl -CO _>õ) R / Cl 65 Ala ^4¾ 2,6-diCl-benzoil R, S 66 Ala -c2h4-och3 2,6-diCl-benzoil R,S EXEMPLO 67; Ácido (3RS1-3-(Z-valil-fenilalanillamino-4-oxo-6 fp-nitrofenil)-trans-hex-5-enóico tert.butilo 0 éster tert.butil-5-dietilfosfonato do ácido (3RS)-3--(Z-valil-fenilalanil)amino-4-oxo-pentanóico (0,2 g, 0,29 mM) foi dissolvido em THF (15 ml) a 5°C. Adicionou-se NaH (25 mg, 0,59 inM) e a mistura foi agitada durante 10 minutos. Adicionou-se p-Nitrobenzaldeído (0,18 g, 1,1 mM) em THF (2 ml) a 0°Ce a mistura de reacção foi agitada durante 45 minutos a esta temperatura. A mistura de reacção foi vertida sobre ácido tartárico a 5%, extraído com acetato de etilo, as fases orgânicas secas sobre Na2S04, evaporadas e o produto purificado por cromatografia dando o composto do título. EXEMPLO 68: Éster dimetilacetal-B-metilico do aldeído Z-Val-Fen-aspártico Z-Val-Fen-Asp(OH)-H (0,8 g) foi dissolvido em MeOH (25 ml) contendo 8% HC1, deixado à temperatura ambiente durante a noite, evaporado até secagem e os cristais residuais lavados com éter, dando o composto do título na forma de cristais brancos. P.f.: 168-171°C. 0 materiais de partida podem ser preparados como se segue: EXEMPLO 69: éster tert.butllico do ácido (3S)-3- (fluorenilmetoxicarbonil)amino-5-iodo-4-oxobutanõico

Trietilamina (1,3 ml, 9,6 mmoles) seguido de etilcloro-formiato (0,92 ml, 9,6 mmoles) foram adicionados ao éster tert.-butílico do ácido (3S)-3-(fluorenilmetoxicarbonil)amino-3-carbo-xi-butanóico (3,5 g, 8,5 mmoles) em THF (60 ml) a -10°C. Após 10 minutos, a solução de diazometano em éter foi adicionada lentamente e a mistura de reacção agitada durante 45 minutos a 0-5°C. Adicionou-se HC1 em éter (2N) a 5-10°C até cessar a libertação de gás. A mistura de reacção foi evaporada até secagem, ressuspensa em acetona (50 ml) adicionado Nal (4 g) e agitada durante 1 hora à t.a. Adicionou-se éter (150 ml), a mistura de reacção foi filtrada e evaporada. 0 resíduo foi cromatografado (Si02, EtOAc/hexano), dando o composto do título na forma de cristais ligeiramente amarelos. 33 EXEMPLO 70: fÉster tert.butílico do ácido (3S)-3-(fluorenilmetoxicarbonil)amino--5(2.6-dimetilbenzoiloxi)-4-oxopenta-noico Éster tert.butílico do ácido 3S-3-(fluorenilmetoxi-carbonil)amino-5(2,6-dimetilbenzoiloxi)-4-oxo-butanóico (1 g, 1,8 mmoles), ácido 2,6-dimetilbenzóico (0,5 g, 3,3 mmoles) e AgOAc (0,6 g, 3,6 mmoles) foram dissolvidos em acetona (25 ml) e sujeito a refluxo durante 1 hr. Após filtração e evaporação o produto bruto foi cromatografado (Si02, éter/hexano 3/7)dando o composto do título. EXEMPLO 71: Éster tert.butílico do ácido (3S)-3-fluorenilmetoxicarbonil)amino -5(4-nitrofenoxi)-4-oxopentanóico Éster tert.butílico do ácido 3S-3-(fluorenilmetoxicarbonil) amino-5-iodo-4-oxo-butanóico (1 g, 1,8 mmoles), p-nitrofe-nol (0,5 g, 3,7 mmoles) e K2C03 (0,38 g, 2,8 mmoles) foram sujeitos a refluxo em acetona (6 ml) durante 30 minutos, adicionado CH2C12 e a fase orgânica lavada com NaHCC>3 2N. As fases orgânicas foram secas, evaporadas e cromatografadas (s^°2' EtOAc/hexano 2/8), dando o composto do título na forma de um óleo amarelo. EXEMPLO 72: Éster etílico do ácido (Z-valil-alaniU- (3R, 4S^-3-amino-4,5-di-hidroxipentanóico a) (3R,4S)-3-Benzilamino-4,5-(isopropilidenedioxi) pentanoato de etilo (Y. Yamada, Tetrahedron Leters 1983, 24, 3009) e 10% Pd/C em etanol foram agitados à temperatura ambiente durante 30 minutos 34

ν' . em atmosfera de H2< Filtração e evaporação da mistura de reacção dá (3R,4S)-3-amino-4,5-(isopro pildenedioxi)pentanoato de etilo que é usado sem qualquer outra purificação. b) Z-Val-Ala-OH foi dissolvido em THF, H0BTH20 e DCC foram adicionados a 5°C. Após agitação durante 20 minutos a 5°C, adicionou-se diisopropilidenedioxi)pentanoato em THF. A mistura de reacção foi agitada durante a noite à temperatura ambiente, filtrada, evaporada e cromatografada para dar o éster etílico do ácido (Z-valil-alanil)-(3R,4S)-3-amino-4,5-(isopropilide nedioxi)pentanóico. c) O composto 74 b) foi dissolvido em Ac0H/H20 (75/25) e agitado a 40°C durante 4 horas. Após evaporação, adicionou-se água e a mistura foi extraída com AcOEt. Os extractos combinados foram lavados com água, solução de NaHC03, solução de NaCl, secos sobre Na2SO^, filtrados e evaporados, dando o composto do título.

Os compostos da fórmula I, os seus ésteres e amidas hidrolisáveis e fisicamente aceitáveis (daqui em diante referidos como compostos do invento) apresentam actividade farmacêutica e são portanto úteis como fármacos.

Em particular, os compostos do invento inibem a secreção de IL-Ιβ como indicado no teste in vitro que se segue usando células THP-1 e métodos de testes in vivo. 6 a) 900 μΐ de células THP-l (0,5 x 10 células) juntamente com 35 100 U de gama-interferão/O,9 ml de meio RPMI 1640 (contendo 2 mM L-glutamina e 5% de soro fetal de vitela inactivado pelo calor) foram pipetados para placas de cultura de tecidos de 24 cavidades. 100 μΐ do composto a ser testado foram então adicionados. Após 3 horas a 37°C em 5% 002/95% de ar, adicionou-se 10 /xl de lipopolissacárido a 500μg/ml e a incubação continuou durante mais 40 horas. Foram também incluídas testemunhas adequadas (com ou sem estímulo, solvente). Os meios foram então removidos e clarificados por centrifugação a 1000 g durante 10 min. Adicionou-se 1,0 ml de digitonina a 0,01% às cavidades para lisar as células que são descoladas raspando com uma raspador de borracha e deixados a 4°C durante 10 minutos. As medições de lactato-desidrogenase foram então realizadas imediatamente e as amostras guardadas a -20°C até serem feitas outras determinações. Os ensaios são: IL-Ιβ (meio e lisado), IL-6 (meio), TNF-α (meio), PGE2 (meio e lisado), lactato-desidrogenase (LDH) e DNA (lisados). Os ensaios de IL-Ιβ, IL-6 e TNF-α foram determinados usando kits de ELISA comerciais (Cistron), PGE2 foi medido usando uma RIA convencional e o DNA determinado fluorimetricamente usando DAPI.

Neste teste, os compostos do invento inibem selectiva-mente a libertação de IL-Ιβ em concentrações entre cerca de 0,01 e 100 μΜ. Pelo contrário os níveis de IL-6, TNF-α, PGE2 e permanecem substancialmente não afectados e os compostos são não tõxicos, uma vez que a libertação de LDH não é afectada. Por exemplo foi determinado que os compostos dos exemplos 40 e 50 têm um valor de IC50 (concentração do composto que inibe em 50% a libertação de IL-Ιβ) de 1 e 0,1 μΜ respectivamente.

Febre causada por LPS

Uma suspensão de LPS. (Sigma, N2 L-5886; 100 Mg/5ml de solução de glucose/Kg s.c.) foi injectada em ratos macho Tuttlingen SD (150-I60g). 2 horas mais tarde mediu-se a temperatura do corpo usando uma sonda rectal ligada a um teletermómetro ELLAB. Após 4 horas o composto a testar foi administrado p.o. 2 horas mais tarde (6 horas após a administração de PLS) a temperatura foi novamente medida. O aumento de temperatura apresentado pelas testemunhas não tratadas é considerado como 100% e no grupo tratado é expresso como uma percentagem deste valor. A ED5Q é a dose causadora de uma inibição de 50% do aumento de temperatura determinado nos ratos testemunha. Neste teste os compostos do invento inibem o aumento de temperatura causado por LPS quando administrados numa dosagem na gama entre 0,001 e 0,1 mg/Kg p.o. Foi por exemplo determinado que os compostos dos exemplos 40 e 50 têm um valor de ED5Q de 0,01 mg/Kg p.o. e o composto do exemplo 51 um valor de ED^ de 0,05 mg/Kg p.o.

Edema da pata induzido por carraqenano no rato

Para cada grupo usou-se 5 ratos machos OFA, peso 150-170 g. 0 composto a testar foi administrado oralmente como uma suspensão em soro fisiológico/0,5% tragacanta 1 hora antes da injecção de carragenano. 0 carragenano (0,1 ml de uma suspensão a 1% em soro fisiológico) é dado por injecção subplantar numa pata traseira. 0 inchaço da pata foi medido com um antiflogómetro segundo Kemper & Arnelm. Uma medida testemunha foi tirada imediatamente após a injecção e o inchaço foi medido após 3 e 5 horas. 0 valor médio da leitura das 3 e 5 horas é determinado após dedução da leitura da testemunha. Os 37

valores obtidos a partir dos animais tratados são expressos como percentagem do valor obtido a partir de testemunhas não tratadas. 0 ED5Q é a dose causadora de uma inibição de 50% do inchaço induzido pelo carragenano após 3 horas. Neste teste os compostos do invento inibem significativamente o inchaço induzido pelo carragenano quando administrados p.o. numa dosagem na gama entre 0,02 e 5 mg/Kg. Determinou-se por exemplo que o composto dos exemplos 40 e 50 têm um valor de ED^0 de 0,2 e 1 mg/Kg p.o. respectivamente.

Os compostos do invento são portanto úteis para o tratamento de perturbações com uma etiologia associada ou ou devida à libertação excessiva de IL-Ιβ, e.g. numa larga variedade de estados inflamatórios e doenças, por exemplo deficiência de cálcio nos tecidos, processos degenerativos nos ossos e cartilagens, e.g. artrite reumatóide e osteoartrite, doenças inflamatórias dos intestinos, doenças irritativas dos intestinos, choque séptico, psoríase, asma, síndroma da distrofia respiratória em adultos, diabetes tipo I, osteoporose de origem vária incluindo e.g. osteoporose climatérica ou pós-menopausa assim como osteoporose devida a idade avançada, imobilização ou trauma, arteriosclerose e doença de Alzheimer.

Para as utilizações atrás referidas a dosagem necessária variará dependendo do modo de administração, do estado particular a ser tratado e do efeito pretendido. No entanto, em geral podem ser conseguidos resultados satisfatórios com dosagens diárias entre cerca de 0,001 e cerca de 100 mg/Kg, preferencialmente entre 0,001 e cerca de 10 mg/Kg de peso. As dosagens diárias para mamíferos maiores, por exemplo humanos, são da ordem de entre cerca de 0,1 mg e cerca de lg/dia, por conveniência administradas de uma só vez, em dosagens divididas 2 a 4x/dia ou na forma de libertação controlada. 38

Os compostos dos Exemplos 50 e 51 são os preferidos.

De acordo com o que foi dito o presente invento também proporciona: a) Um método para o tratamento de perturbações com uma etiologia associada ou devida à libertação excessiva de IL-Ιβ, e.g. como indicado atrás num indivíduo necessitado, método esse que se caracteriza pela administração ao referido individuo de uma quantidade eficaz de um composto ) da fórmula I, um seu éster ou amida fisiologicamente hidrolisável e aceitável ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; b) Um composto da fórmula I, um seu éster ou amida fisiologicamente hidrolisável e aceitável ou um seu sal farmacologicamente aceitável para usar como fármaco, por exemplo para utilizar como um agente por exemplo no método descrito atrás.

Os compostos do invento podem ser administrados por qualquer via convencional, em particular por via nasal, entérica, } preferencialmente oralmente, e.g. na forma de comprimidos ou cápsulas ou parenteralmente e.g. na forma de soluções injectáveis ou suspensões ou na forma de supositórios. As formas unitárias de dosagem contêm por exemplo entre cerca de 25 μg e 500 mg de um composto do invento.

J

Os compostos do invento podem ser administrados na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável. Tais sais podem ser preparados de forma convencional e apresentam a mesma ordem de actividade dos compostos livres. 39

Ainda o presente invento também proporciona: c) Uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula I, um seu éster ou amida fisiologicamente hidrolisável e aceitável, como aqui descrito anteriormente, juntamente com um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável. Tais composições podem ser produzidas de forma convencional. Eles podem compreender até 99,9% por peso de ingrediente activo.

Lisboa, 2 de Novembro de 1992

J. PEREIRA DA CRUZ Agantt Qteial 4« Wopriedafe industriai RUA VICTQR COWOOW, 10-A 3.» 1206 U3BOA

Claims

REIVINDICAÇÕES 1§. - Composto, caracterizado por apresentar a fórmu-

la (I) em que R n é hidrogénio, um grupo protector amina ou benziloxi facultativamente substituído no anel é 0 ou 1, é Vai, Leu, Ala, Ile ou trimetilsilil-Ala é Fen ou Tir, é uma ligação directa, Vai, Leu, Ala, Ile, trimetilsilil-Ala ou um radical divalente da fórmula (a)

(a) em que o anel A é facultativamente substituído por hidroxilo ou alcoxilo C1-4, 2

em que A4 é uma ligação directa ou um radical divalente da fórmula (b) - N - CH - CO - I I (to) Ri Yi em que R é hidrogénio ou alquilo C^_4, e Y é o resíduo ligado ao átomo de carbono α do α-aminoácido e -CH2~CH2-N(alquilo c1_4)2' imida-zol-2-il-metilo, benzimidazol-2-il-metilo, 1H--1,2,4-triazol-3-il-metilo, pirazol-3-il-metilo, indazol-3-il-metilo, facultativamente substituídos, ou ura radical da fórmula (c) ou (d) R2 e R3 são independentemente hidrogénio, halogénio, alquilo C1-4, CF3 ou tritilo, quando muito R2 ou R3 é H e e R^ são independentemente hidrogénio, alquilo 01-4, hidroxilo, alcoxilo CF3, quando muito R^ ou Rj- é fenilo ou halogénio, H, ou A3 e A4 formaiIlí em conjunto, um radical com a fórmula (aa) CH - CO - N - CH - CO - 1 Rla 1 Ri 1 Yi (aa em que Yl é como definido anteriormente e R e R formam, em conjunto, -(CH ) em que m é 2, 3, i 13. z m 4 ou 5, e i) X é um radical divalente da fórmula (e^) R -N

(ei) co2h em que Rc é H ou alquilo C , D 1“4 e 'Ag é hidrogénio; CF3; um radical -Z^-Z^-Y^ em que e Ζ2 são, cada um, independentemente, uma ligação directa ou um resíduo de α-aminoãcido, e Y2 é NH2, alquilamino 01-4, di-(C.^-alquli)amino ou um radical heterociclico ligado por um azoto a Z2; um radical -CH2~X^-Y3 em que é O ou S e Y3 é heteroarilo; um radical -CH2-Y3; ou um radical da fórmula (3c) a (m) 00 K9

Kn (m)

(D B /

(o) em que Y4 é tri-(alquil C^^^Jmetilo ou um resíduo 5 c; r8 o anel B é piridilo, o anel C é fenilo ou piridilo, R? e Rg são, cada um, independentemente, alquilo C , alcoxilo C , CF3, halogénio, azoto ou ciano, e Rn, R n e R são, cada um, independentemente, azoto, y 1 u 11 ciano, CFg, carbamoilo, ^2^12' **CH=CH-CN ou -ch=chco2r12 em que R12 é alquilo C1_6, sendo X também um radical divalente de fórmula (e2) 6

(e2) quando é H ou (ii) X é um radical divalente da fórmula (f)

e A5 é -Z -Z2~Y2 ou um radical da fórmula (k) a (o) como anteriormente definido ou 0R13 ou N^14R15 em que R13 é alquilo 01-12 facultativamente substituído por OH ou interrompido por 0 e 15 . . r14 e R são, cada um, índependentemente, hidrogénio, alquilo C1_12, cicloalquilo C5_7 ou benzilo, ou iii) X ' é um radical divalente da fórmula (g) •Λ

II (g) e Ac é -Z.-Z.-Y_ como anteriormente definido ou D 1 Z Z iv) X é um radical divalente da fórmula (h) ou (j) . *\

e é um radical da fórmula (k) a (o) , -CH^-Yg ou -CH2-X1~Y3 como anteriormente definido, com as condição de apenas A3 ou A4 poder ser uma ligação directa quando n é 0 e A3 ou A4 não ser uma ligação quando n é l; e seus ésteres ou amidas fisiologicamente hidrolisáveis e aceitáveis, na forma livre, na forma de sal ou na forma de complexos. 2a..- Composto da fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por n ser 0, A3 ser uma ligação directa, 8

Vai, Leu, Ala, lie ou trimetilsilil-Ala, A^ ser conforme definido na reivindicação 1 ou A_ e A. formaremm em conjunto um radical da fórmula (aa) como definido na reivindicação 1 e i) X ser um radical da fórmula (e^ ou (e2) como definido na reivindicação 1 e A5 ser H, ou ii) X ser um radical da fórmula (e. ) ou (f) e Ac ser -Z -Z -Y como definido na reivindicação 1 ou um radical dafórmula (k) , (1) ou (m) como definido na reivindicação 1 em que X.^ é 0, ou iii) X ser um radical de fórmula (g) e A^ ser -Z -Z2~Y2 como definido na reivindicação 1, ou iv) X ser um radical da fórmula (j) e ser um radical da fórmula (k), (1) ou (m) como definido na reivindicação 1 em que X^ é 0. e seus ésteres ou amidas fisiologicamente hidrolisãveis e aceitáveis , na forma livre, na forma de sal ou na forma de complexos. 3â_ - Composto da fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por n ser 0 e A3 e A4 não serem uma ligação directa e seus ésteres ou amidas fisiologicamente hidro-lisáveis e aceitáveis, na forma livre, na forma de sal ou na forma de complexos. 4®. - composto da fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1 ou 3, caracterizado por ser o resíduo que se liga ao átomo de carbono a de um α-aminoácido seleccionado entre Ala, Leu, His, Fen, Met, Trp, trimetilsilil-Ala e facultativamente Arg, Orn e Lis protegidos na cadeia lateral, ou um radical da 9 9

fórmula (c) e seus ésteres ou amidas fisiologicainente hidrolisá-veis e aceitáveis, na forna livres, na forna de sal ou na forna de complexos.
53. - Conposto da fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, 3 ou 4, caracterizado por X ser um radical de fórmula (e^) , (h) ou (j), sendo A_ diferente de H quando X é (e^) e seus ésteres ou amidas fisiologicamente hidrolisáveis, na forma livre, na forma de sais ou na forma de complexos. 6§. - Composto, caracterizado por ser seleccionado de entre éster etílico do ácido benziloxicarbonil-valil-alanil)-3R--3-amino-oxo-5-(2,6-diclorobenzoiloxi)pentanóico, éster etílico do ácido benziloxcarbonil-valil-alanil)-3R,S-3-amino-oxo-5-(2,6--diclorobenzoiloxi)pentanóico, éster etílico do ácido benziloxi-carbonil-valil-alanil)-3R-3-amino-oxo-5-(2,6-dicloro-piridil-4--carboniloxi)pentanóico, ácido (benziloxicarbonil-valil-alanil)--3R,S-3-amino-oxo-5-(2,6-diclorobenzoiloxi)pentanóico, éster isopropílico do ácido (benziloxicarbonil-valil-alanil)-3R, S-3--amino-oxo-5-(2,6-diclorobenzoiloxi)pentanóico, éster t.-butílico do ácido (benziloxicarbonil-valil-alanil)-3R,S-3-amino-oxo-5--(2,6-diclorobenzoiloxi)pentanóico e ácido benziloxicarbonil-valil-alanil) -3R-3-amino-oxo-5-(2,6-diclorobenzoiloxi)pentanóico na forma livre, na forma de sal ou na forma de complexos. 7^. - Processo para a produção de um composto da fórmula (I) e de seus ésteres e amidas fisiologicamente hidroli-sãveis e aceitáveis, caracterizado por compreender: a) a remoção de pelo menos um grupo protector de um composto da fórmula (I) na forma protegida ou adição de um grupo protector R como definido na reivindicação 1 no grupo N-terminal de um composto da fórmula (I); ou b) a conversão de um composto da fórmula I num outro composto da fórmula (I); ou c) o acoplamento de dois fragmentos peptídicos por uma ligação amida, cada um dos quais contem pelo menos um aminoácido na forma protegida ou desprotegida e um fragmento peptídico contendo um radical da fórmula (e^) a (j) como definido na reivindicação l, sendo os fragmentos peptídicos tais que se obtem um peptídeo protegido ou desprotegido tendo a sequência de acordo com a fórmula I atrás e, caso seja necessário, a remoção do grupo ou grupos protectores de um composto da fórmula I na forma protegida; ou d) para a produção de um composto da fórmula I em que X é um radical da fórmula (e^) ou (h) e A,_ é um radical da fórmula (k) , (1) ou (o) ou -CH2-X1~Y3 como definido na reivindicação 1, a reacção de um composto da fórmula (III) R-tArA2]n-A3"A4-X'-CH2-Za (ITI> em que R, A^ a e n são como definido na reivindicação 1, X' é um radical da fórmula (e1) ou (h) como definido na reivindicação 1, e Z é um grupo separável, com um correspondente .fenol, tiofenol ou HX^-piridina ou um ácido da fórmula HX -CO-Y. ou um seu derivado 1 4 funcional ou HX,-Y_, em que X., Y_ e Y. são como 13' ^ 1' 3 4 definidos na reivindicação 1; ou e) para a produção de um composto da fórmula (I) (I) (I) 1 Αχ -Ας i η "3 Η Ο -Aj -Α-4 -Ν 002^16 em que R, a Α5 e η são como definidos na reivindicação 1 e R.. é um resíduo C ._ alifático ou alicíclico, 16 1”1ά a oxidação de um composto da fórmula V H OH 1 I

(V) R-lAx-Aj ]n-A3-A«-N^X^ AS CO2R16 em que R, A1 a A5, n e Rlg são como anteriormente definidos, e a recuperação de um composto da fórmula I ou de um seu éster ou amida fisiologicamente hidrolisá-vel e aceitável assim obtido na forma livre ou de sal ou na forma de um complexo. sa. - Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por se destinar a ser utilizado como composto farmacêutico. 9a. - composição farmacêutica, caracterizada por compreender um composto da fórmula (I), como definido na reivindicação 1, ou um seu éster ou amida fisiologicamente hidrolisável e aceitável, na forma livre ou na forma de sal fisiologicamente aceitável, juntamente com um diluente ou veículo farmaceuticamen-te aceitável. 12

10ê. - Método para o tratamento de perturbações com uma etiologia associada ou caracterizada pela libertação excessiva de IL-Ιβ, num indíviduo necessitado, método esse que se caracteriza pela administração ao referido indíviduo de uma quantidade eficaz de um composto da fórmula I como definido na reivindicação 1, um seu éster ou amida fisiologicamente hidrolisável e aceitável, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Lisboa, 2 de Novembro de 1992

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