KR20240099289A - 항-cldn18.2 항체 및 그의 용도 - Google Patents
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Abstract
CLDN18.2에 특이적으로 결합하는 마우스, 인간, 키메라 또는 인간화 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 제공되고, 또한 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 코딩하는 핵산 분자, 뿐만 아니라 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 발현하는데 사용되는 발현 벡터 및 숙주 세포가 제공된다. CLDN18.2-양성 질환의 치료를 포함하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 용도가 추가로 제공된다.
Description
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2021년 11월 5일에 출원된 중국 특허 출원 번호 202111307619.3의 국제 출원에 기초하며, 상기 중국 특허 출원의 우선권 및 이익을 주장한다. 본 출원의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
기술분야
본 출원은 생명공학 분야에 관한 것이며, 구체적으로 클라우딘18.2 (CLDN18.2)에 결합하는 항체 및 그의 항원-결합 단편, 및 이러한 항체 및 항원-결합 단편을 사용하는 방법에 관한 것이다.
클라우딘18 (CLDN18)은 세포 밀착 연접 단백질 계열에 속한다. 이는 세포간 밀착 연접 형성에 참여하고, 세포간 분자의 흐름을 제어하며, 세포의 극성 및 투과성 유지 및 세포간 신호 전달에 중요한 역할을 한다. CLDN18은 테트라스파닌이고; 그의 N-말단 및 C-말단은 둘 다 세포 내에 있고, 2개의 루프 영역이 세포 외에서 형성된다. RNA의 대안적인 스플라이싱으로 인해, 2개의 상이한 이소형, 즉 클라우딘18.1 (CLDN18.1, 예를 들어 인간 CLDN18.1에 대한 유니프롯(Uniprot) 수탁 번호는 P56856-1임) 및 클라우딘18.2 (CLDN18.2, 예를 들어 인간 CLDN18.2에 대한 유니프롯 수탁 번호는 P56856-2임)가 조직에 존재한다.
CLDN18.1 및 CLDN18.2 단백질 서열은 높은 유사성을 갖지만 그의 발현 분포는 상이하다. CLDN18.1은 정상 폐 조직에서 선택적으로 발현되는 반면, CLDN18.2는 정상 조직에서 매우 제한된 수준으로 발현되며, 위 점막 분화된 상피 세포에서만 특이적으로 발현된다. 그러나, 연구는 CLDN18.2가 원발성 위암 및 그의 전이의 70%에서 높은 발현을 나타낸다는 것을 제시하며, 더욱이 CLDN18.2는 췌장암, 식도암, 폐암, 유방암, 난소암 및 이비인후과 종양을 포함하는 다양한 악성 종양에서 자주 이소성으로 활성화되는 것으로 밝혀졌다 (Niimi et al., (2001) Mol Cell Biol 21 (21): 7380-7390; Sahin, U. et al., (2008) Clin Cancer Res. 14, 7624-34; Tanaka et al., (2011) J Histochem Cytochem 59(10): 942-952; Micke et al., (2014) Int J Cancer 135(9): 2206-2214; Shimobaba et al., (2016) Biochim Biophys Acta 1863(6Pt A): 1170-1178; Sing h et al., (2017) J Hema tol Oncol 10 (1): 105; Tokumitsu et al., (2017) Cytopathology 28(2): 116-121).
다양한 CLDN18.2 항체, 예를 들어 가니메드(Ganymed)에 의해 개발된 CLDN18.2 키메라 IgG1 항체 클라우딕시맙 (IMAB362) (Sahin et al., (2018) Eur J Cancer 100: 17-26) 및 PCT 출원 WO2020211792에 개시된 CLDN18.2 인간화 항체가 암 치료 연구에 사용되었다. 진료 현장에서는 CLDN18.2에 대한 더 많은 항체가 여전히 필요하다.
한 측면에서, 본 개시내용은 CLDN18.2에 결합하는 단리된 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 인간화 항체 또는 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 모노클로날 항체, 단일특이적 항체, 다중특이적 항체, Fab 단편, F(ab')2 단편, Fd 단편, Fv 단편, dAb, 단리된 CDR, 단일-쇄 Fv 분자, 나노바디, 재조합 폴리펩티드, 융합 단백질, 면역접합체 또는 이들의 조합이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 CDR1 (HCDR1), 중쇄 CDR2 (HCDR2) 및 중쇄 CDR3 (HCDR3)을 포함하며, 여기서
(1) 중쇄 CDR1은 서열식별번호(SEQ ID NO): 11의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(13) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3을 포함하며, 여기서
(1) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 4 및 7에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 4 및 7에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 5 및 7에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 5 및 7에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 6 및 7에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 6 및 7에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 20 및 24에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 20 및 24에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 21 및 24에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 21 및 24에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 22 및 24에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 22 및 24에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 23 및 24에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 23 및 24에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 37, 38 및 39에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 37, 38 및 39에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 45, 46 및 47에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 45, 46 및 47에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(10) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 53, 54 및 55에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 53, 54 및 55에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 경쇄 CDR1 (LCDR1), 경쇄 CDR2 (LCDR2) 및 경쇄 CDR3 (LCDR3)을 포함하며, 여기서
(1) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(9) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3을 포함하며, 여기서
(1) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 40, 41 및 42에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 40, 41 및 42에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 48, 49 및 50에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 48, 49 및 50에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(6) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 56, 57 및 58에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 56, 57 및 58에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3을 포함하며, 여기서
(1) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(13) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(14) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(15) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(16) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(17) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(18) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(19) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(20) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(21) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3을 포함하며, 여기서
(1) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 4, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 4, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 5, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 5, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 6, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 6, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 20, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 20, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 21, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 21, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 22, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 22, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 23, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 23, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 20, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 20, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 21, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 21, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 22, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 22, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 23, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 23, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 37, 38, 39, 40, 41 및 42에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 37, 38, 39, 40, 41 및 42에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(13) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 45, 46, 47, 48, 49 및 50에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 45, 46, 47, 48, 49 및 50에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(14) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 53, 54, 55, 56, 57 및 58에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 53, 54, 55, 56, 57 및 58에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3을 포함하며, 여기서
중쇄 CDR1은 서열식별번호: 3, 19, 37, 45 또는 53에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
중쇄 CDR2는 서열식별번호: 4, 5, 6, 20, 21, 22, 23, 38, 46 또는 54에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
중쇄 CDR3은 서열식별번호: 7, 24, 39, 47 또는 55에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
경쇄 CDR1은 서열식별번호: 8, 25, 40, 48 또는 56에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
경쇄 CDR2는 서열식별번호: 9, 26, 41, 49 또는 57에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
경쇄 CDR3은 서열식별번호: 10, 27, 28, 42, 50 또는 58에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3을 포함하며, 여기서
중쇄 CDR1은 서열식별번호: 3, 19 또는 53에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
중쇄 CDR2는 서열식별번호: 4, 5, 6, 20, 21, 22, 23 또는 54에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
중쇄 CDR3은 서열식별번호: 7, 24 또는 55에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
경쇄 CDR1은 서열식별번호: 8, 25 또는 56에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
경쇄 CDR2는 서열식별번호: 9, 26 또는 57에 제시된 아미노산 서열을 포함하고;
경쇄 CDR3은 서열식별번호: 10, 27, 28 또는 58에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 중쇄 가변 영역은 서열식별번호: 11, 12, 13, 14, 15, 29, 30, 31, 32, 33, 43, 51 또는 59에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 11, 12, 13, 14, 15, 29, 30, 31, 32, 33, 43, 51 또는 59에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 경쇄 가변 영역은 서열식별번호: 16, 17, 18, 34, 35, 36, 44, 52 또는 60에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 16, 17, 18, 34, 35, 36, 44, 52 또는 60에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서
(1) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 11 및 16에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 11 및 16에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 12 및 17에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 12 및 17에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 13 및 17에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 13 및 17에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 14 및 17에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 14 및 17에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 15 및 17에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 15 및 17에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 12 및 18에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 12 및 18에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 13 및 18에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 13 및 18에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 14 및 18에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 14 및 18에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 15 및 18에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 15 및 18에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 29 및 34에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 29 및 34에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 30 및 35에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 30 및 35에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 31 및 35에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 31 및 35에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(13) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 32 및 35에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 32 및 35에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(14) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 33 및 35에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 33 및 35에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(15) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 30 및 36에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 30 및 36에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(16) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 31 및 36에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 31 및 36에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(17) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 32 및 36에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 32 및 36에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(18) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 33 및 36에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 33 및 36에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(19) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 43 및 44에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 43 및 44에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(20) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 51 및 52에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 51 및 52에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(21) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 59 및 60에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 59 및 60에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 중쇄 가변 영역은 서열식별번호: 11, 12, 13, 14, 15, 29, 30, 31, 32, 33, 43, 51 또는 59에 제시된 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열식별번호: 16, 17, 18, 34, 35, 36, 44, 52 또는 60에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 중쇄 가변 영역은 서열식별번호: 11, 12, 13, 14, 15, 29, 30, 31, 32, 33 또는 59에 제시된 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 가변 영역은 서열식별번호: 16, 17, 18, 34, 35, 36 또는 60에 제시된 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 가변 영역 및 중쇄 불변 영역을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역 및 경쇄 불변 영역을 포함하는 경쇄를 포함하며, 여기서 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 상기 기재된 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하고, 중쇄 불변 영역은 인간 IgG1, IgG2 또는 IgG4 불변 영역 또는 그의 변이체, 바람직하게는 인간 IgG1 불변 영역 또는 그의 변이체를 포함하고, 경쇄 불변 영역은 인간 κ 불변 영역 또는 인간 λ 불변 영역 또는 그의 변이체, 바람직하게는 인간 κ 불변 영역 또는 그의 변이체를 포함한다. 예시적인 변이체는 부위-지정 공학 및 중쇄 불변 영역의 아미노산 치환, 예컨대 관련 기술분야에 공지된 AAA 돌연변이, DLE 돌연변이 (Shields et al., 2002; Lazar et al., 2006), YTE 돌연변이, 및 LS 돌연변이 (Ghetie et al., 1997; Zalevsky et al., 2010)를 갖는 IgG1, IgG2 또는 IgG4 중쇄 불변 영역 변이체를 포함한다.
일부 특정 실시양태에서, 중쇄 불변 영역은 서열식별번호: 61에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 61에 제시된 아미노산 서열과 비교하여 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 불변 영역은 서열식별번호: 62에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 62에 제시된 아미노산 서열과 비교하여 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함한다.
이러한 맥락에서, 아미노산 치환은 보존적 아미노산 치환, 즉 동일한 부류 (유사한 화학적 특성 또는 기능을 갖는)의 또 다른 아미노산으로의 치환일 수 있다. 예를 들어, 아미노산은 측쇄 특성에 따라 하기와 같이 분류될 수 있다: (1) 비-극성 아미노산: Ala (A), Val (V), Leu (L), Ile (I), Pro (P), Phe (F), Trp (W) 및 Met (M); (2) 비하전된 극성 아미노산: Gly (G), Ser (S), Thr (T), Cys (C), Tyr (Y), Asn (N) 및 Gln (Q); (3) 산성 아미노산: Asp (D) 및 Glu (E); (4) 염기성 아미노산: Lys (K), Arg (R) 및 His (H). 대안적으로, 아미노산은 공통 측쇄 특성에 기초하여 하기와 같이 분류될 수 있다: (1) 소수성 아미노산: Met, Ala, Val, Leu 및 Ile; (2) 중성 친수성 아미노산: Cys, Ser, Thr, Asn 및 Gln; (3) 산성 아미노산: Asp 및 Glu; (4) 염기성 아미노산: His, Lys 및 Arg; (5) 쇄 배향에 영향을 미치는 아미노산: Gly 및 Pro; (6) 방향족 아미노산: Trp, Tyr 및 Phe.
본원에서, 상기 기재된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 다양한 변이체는 항원 CLDN18.2에 특이적으로 결합하는 능력을 유지한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 디술피드 결합에 의해 연결된 2개의 중쇄 (H) 및 2개의 경쇄 (L)를 포함하거나 이로 이루어지고, 여기서 각각의 중쇄는 상기 기재된 중쇄 가변 영역 (VH) 및 중쇄 불변 영역을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 영역 (VH)은 상기 기재된 프레임워크 영역 (FR) 및 중쇄 상보성 결정 영역 (HCDR)을 포함하고; 각각의 경쇄는 상기 기재된 경쇄 가변 영역 (VL) 및 경쇄 불변 영역을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 영역 (VL)은 상기 기재된 FR 및 경쇄 상보성 결정 영역 (LCDR)을 포함하고; 중쇄 가변 영역의 C-말단은 중쇄 불변 영역의 N-말단에 연결되고, 경쇄 가변 영역의 C-말단은 경쇄 불변 영역의 N-말단에 연결된다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 전장 항체, 예를 들어 IgG1 이소타입의 것일 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 단일-쇄 항체 (scFv), 나노바디, 또는 항체 단편 (예를 들어, Fab, F(ab')2 단편, Fd 단편, Fv 단편, dAb, 또는 단리된 CDR)일 수 있다.
본원에 제공된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 CLDN18.2에 결합하여, 이에 의해 CLDN18.2를 발현하는 세포에 대해 항체-의존적 세포성 세포독성 (ADCC) 및/또는 보체-의존적 세포독성 (CDC)을 유도한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.2에 결합하여, 이에 의해 인간 CLDN18.2를 발현하는 세포에 대해 ADCC 및/또는 CDC를 유도한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 CLDN18.1에 실질적으로 결합하지 않는다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.1에 실질적으로 결합하지 않는다. 단백질 또는 세포에 "실질적으로 결합하지 않는다"는 용어는 단백질 또는 세포에 결합하지 않거나 단백질 또는 세포에 특이적으로 결합하지 않음을 의미한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 CLDN18.1을 발현하는 세포에 대해 ADCC 및/또는 CDC를 유도하지 않는다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.1을 발현하는 세포에 대해 ADCC 및/또는 CDC를 유도하지 않는다.
한 측면에서, 본 개시내용은 CLDN18.2에 결합하는 단리된 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공하며, 여기서 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 본원에서 28G3, 40F6, 22F12, 34G6 및 10D8로 지정된 하이브리도마로 이루어진 군으로부터 선택된 하이브리도마에 의해 생산된다. 따라서, 본 개시내용은 하이브리도마 28G3, 40F6, 22F12, 34G6 및 10D8에 의해 생산되는 항체 또는 그의 항원-결합 단편, 및 본원에 개시된 항체를 생산하는 임의의 하이브리도마를 추가로 포함한다.
한 측면에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 임의의 예시적인 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편과 동일한 인간 CLDN18.2 상의 에피토프에 결합하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 인간 CLDN18.2에 대한 결합에 대해 본 개시내용의 임의의 예시적인 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편과 경쟁하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 하나 이상의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편, 및 본 개시내용의 항체 또는 항원-결합 단편과 상이한 특이성을 갖는 적어도 하나의 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는 다중특이적 항체를 추가로 제공하며, 여기서 다중특이적 항체는 적어도 2개의 상이한 결합 부위 또는 표적에 결합할 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같은 "다중특이적 항체"는 2개 표적 (즉, 이중특이적 항체), 3개 표적 (즉, 삼중특이적 항체), 4개 표적 (즉, 사중특이적 항체), 또는 그 이상의 표적에 대해 특이성을 갖는 항체를 포함한다. 이들 다중특이적 항체는 관련 기술분야에 널리 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 하나 이상의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는 재조합 폴리펩티드 또는 융합 단백질을 추가로 제공하며, 여기서 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 또 다른 펩티드, 단백질, 시토카인 또는 수용체 리간드를 포함하나 이에 제한되지는 않는 적어도 하나의 다른 기능적 단편에 연결된다. 이들 재조합 폴리펩티드 및 융합 단백질은 관련 기술분야에 널리 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 하나 이상의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는 면역접합체를 추가로 제공하며, 여기서 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 적어도 하나의 다른 치료제 (예를 들어, 세포독성제, 방사성동위원소, 면역접착 분자 또는 영상화제), 예컨대 항체-약물 접합체 (ADC)에 연결된다. 이들 면역접합체는 관련 기술분야에 널리 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다.
일부 실시양태에서, 연결은 공유결합적 연결이다. 일부 실시양태에서, 연결은 비-공유결합적 연결이다. 일부 실시양태에서, 연결은 직접 연결이다. 일부 실시양태에서, 연결은 링커를 통해 이루어진다. 적합한 링커는 아미노산 및 폴리펩티드 링커를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 키메라 항원 수용체 (CAR)의 일부일 수 있다. 본 개시내용은 키메라 항원 수용체를 포함하는 면역 세포, 예를 들어 T 세포 (즉, CAR-T 세포)를 추가로 제공한다.
또한, 본 개시내용은 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 코딩하는 유전자를 포함하고 유전자의 포유동물 세포 (바람직하게는 인간 세포)로의 진입 및 그 안에서의 발현을 허용하는 유전자 벡터를 추가로 제공한다. 이러한 유전자 벡터는 네이키드 플라스미드 벡터, 효모 벡터, 아데노바이러스 벡터, 아데노-연관 바이러스 벡터, 레트로바이러스 벡터, 렌티바이러스 벡터, 폭스바이러스 벡터, 랍도바이러스 벡터 또는 바큘로바이러스 벡터를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
한 측면에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 코딩하는 단리된 핵산 분자를 추가로 제공한다. 본 개시내용은 핵산 분자를 포함하는 발현 벡터, 및 핵산 분자 또는 발현 벡터를 포함하는 숙주 세포를 추가로 제공한다.
한 측면에서, 본 개시내용은 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제조하는 방법을 추가로 제공하며, 이는 (i) 숙주 세포에서 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 발현시키는 단계, 및 (ii) 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 숙주 세포 또는 그의 세포 배양물로부터 단리하는 단계를 포함한다.
한 측면에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 재조합 폴리펩티드, 융합 단백질, 다중특이적 항체, 면역접합체, 키메라 항원 수용체, 핵산 분자 또는 유전자 벡터, 및 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 추가로 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 대상체에서 CLDN18.2-양성 질환을 예방, 경감 또는 치료하는 방법을 제공하며, 이는 치료 유효량의 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편 또는 그의 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 또 다른 측면에서, 본 개시내용은 CLDN18.2-양성 질환을 예방, 경감 또는 치료하기 위한 의약의 제조에 있어서 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편 또는 그의 제약 조성물의 용도를 제공한다. 대안적으로, 본 개시내용은 CLDN18.2-양성 질환을 예방, 경감 또는 치료하는데 사용하기 위한 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 일부 실시양태에서, CLDN18.2-양성 질환은 암이다. 특정 실시양태에서, 대상체는 인간이다.
그러므로, 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 대상체에서 암을 예방, 경감 또는 치료하는 방법을 제공하며, 이는 치료 유효량의 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편 또는 그의 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 인간이다.
본원에서 사용된 바와 같은 "암"은 신체 내 비정상 세포의 제어되지 않는 성장을 특징으로 하는 광범위하게 다양한 질환을 지칭한다. "암" 또는 "암 조직"은 종양을 포함할 수 있다. 본 개시내용의 방법에 의해 치료될 수 있는 암은 암종, 육종, 림프종, 모세포종 및 백혈병을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 용어 "암"은 신체의 특정 부위에서 유래하는 원발성 암, 초기 위치로부터 신체의 다른 부위로 확산된 전이성 암종, 관해 후 원발성 암의 재발성 암, 및 2차 원발성 암 (상이한 유형의 암 병력을 갖는 환자의 새로운 원발성 암)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 암은 혈액학적 종양 및 고형 종양을 포함한다. 혈액학적 종양은 예를 들어 백혈병, 림프종 및 골수종을 포함한다. 일부 실시양태에서, 암은 CLDN18.2-양성 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 위암, 식도암, 위장관암 (결장암 및 직장암 포함), 췌장암, 간암, 폐암 (소세포 폐암 및 비소세포 폐암 포함), 기관지암, 중피종, 신장암, 난소암 (크루켄베르그 종양 포함), 유방암, 방광암, 자궁암 (자궁내막암 포함), 전립선암, 고환암, 항문암, 질암, 담관암, 담낭암, 두경부암, 척수 종양, 이비인후과 종양, 갑상선암, 중피종, 골암, 피부암, 흑색종, 선암종, 육종, 신경모세포종, 교모세포종, 뇌암, 중추신경계암, 신경내분비 종양, 백혈병, 림프종 및 골수종을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 암은 제자리, 전이성, 재발성 및/또는 불응성일 수 있다.
본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 단독으로 또는 하나 이상의 다른 치료제와 조합하여 투여될 수 있다. 다른 치료제와 조합하여 투여되는 경우, 다른 치료제는 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 투여 전 또는 후에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 다른 치료제는 본 개시내용의 항체 또는 항원-결합 단편과 상이한 특이성을 갖는 항체 또는 그의 항원-결합 단편, 예를 들어 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, CTLA-4 항체 또는 그의 항원-결합 단편이다. 일부 실시양태에서, 다른 치료제는 시토카인, 예컨대 인터루킨 2이다. 일부 실시양태에서, 다른 치료제는 Vγ9Vδ2 T 세포일 수 있는 γδT 세포를 자극하는 작용제이고, γδT 세포를 자극하는 작용제는 비스포스폰산 또는 그의 염 또는 에스테르, 예컨대 졸레드론산, 클로드론산, 이반드론산, 파미드론산, 리세드론산, 미노드론산, 올파드론산, 알렌드론산, 인카드론산 및 그의 염을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 다른 치료제는 알킬화제, 포도필룸, 캄프토테신 유사체, 탁산, 항대사물질 및 항생제, 예컨대 백금제 (시스플라틴, 카르보플라틴 또는 옥살리플라틴), 안트라사이클린 (예를 들어, 아드리아마이신 또는 에피루비신), 탁산 (예를 들어, 파클리탁셀), 플루오로피리미딘 유도체 (예를 들어, 5-플루오로우라실 또는 젬시타빈), 및 이들의 전구약물을 포함하나 이에 제한되지는 않는 화학요법제이다. 일부 실시양태에서, 다른 치료제는 CLDN18.2의 발현을 안정화시키거나 증가시키는 작용제, 예컨대 에피루비신, 옥살리플라틴, 5-플루오로우라실, 류코보린, 이리노테칸, 도세탁셀, 시스플라틴, 젬시타빈 및 이들의 전구약물이다.
"치료한다" 또는 "치료"는 증상, 장애, 병태 또는 질환의 진행 또는 중증도를 경감하는 방법을 지칭한다. 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편, 핵산 분자, 제약 조성물, 재조합 폴리펩티드, 융합 단백질, 다중특이적 항체, 면역접합체, 키메라 항원 수용체 또는 유전자 벡터는 대상체에서 암을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 인간이다.
본 개시내용의 다른 특색 및 장점은 하기 상세한 설명 및 실시예를 참조하여 더욱 명백해질 것이며, 이는 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 개시내용에 인용된 모든 문서, 진뱅크(Genbank) 기록, 특허 및 공개된 특허 개시내용의 내용은 명시적으로 본원에 참조로 포함된다.
도 1은 U2OS-CLDN18.2 세포 (A-C), NUGC-4 세포 (D-F) 및 KATOIII 세포 (G-I)에 대한 키메라 항체 xi40F6, xi34G6, xi10D8, xi22F12 및 xi28G3의 결합 활성을 제시한다.
도 2는 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6 및 xi34G6의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제는 이펙터 세포이고, KATOIII (A), NUGC-4 (B) 및 U2OS-CLDN18.2 (C)는 표적 세포이다.
도 3은 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6 및 xi34G6의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 PBMC는 이펙터 세포이고, KATOIII (A) 및 NUGC-4 (B)는 표적 세포이다.
도 4는 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6, xi34G6 및 xi10D8의 CDC 활성을 제시하며, 여기서 KATOIII (A) 및 U2OS-CLDN18.2 (B)는 표적 세포이다.
도 5는 키메라 항체 xi28G3 및 xi40F6의 내재화 활성을 제시하며, 여기서 NUGC-4 (A) 및 NIH-3T3-CLDN18.2 (B)는 표적 세포이다.
도 6은 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6, xi34G6 및 xi10D8의 비-특이적 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제는 이펙터 세포이고, NIH-3T3-CLDN18.1은 표적 세포이다.
도 7은 NUGC-4 세포 (A) 및 KATOIII 세포 (B)에 대한 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1, hz28G3-1.2, hz28G3-1.3, hz28G3-1.4, hz28G3-2.1, hz28G3-2.2, hz28G3-2.3 및 hz28G3-2.4의 결합 활성을 제시한다.
도 8은 NUGC-4 세포 (A) 및 KATOIII 세포 (B)에 대한 키메라 항체 xi40F6 및 인간화 항체 hz40F6-1.1, hz40F6-1.2, hz40F6-1.3, hz40F6-1.4, hz40F6-2.1, hz40F6-2.2, hz40F6-2.3 및 hz40F6-2.4의 결합 활성을 제시한다.
도 9는 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1, hz28G3-1.2, hz28G3-1.3, hz28G3-1.4, hz28G3-2.1, hz28G3-2.2, hz28G3-2.3 및 hz28G3-2.4의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제는 이펙터 세포이고, U2OS-CLDN18.2 (A) 및 KATOIII (B)는 표적 세포이다.
도 10은 키메라 항체 xi40F6 및 인간화 항체 hz40F6-1.1, hz40F6-1.2, hz40F6-1.3, hz40F6-1.4, hz40F6-2.1, hz40F6-2.2, hz40F6-2.3 및 hz40F6-2.4의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제는 이펙터 세포이고, NIH-3T3-CLDN18.2 (A) 및 NUGC-4 (B)는 표적 세포이다.
도 11은 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1, hz28G3-1.3 및 hz40F6-1.4의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 PBMC는 이펙터 세포이고, NIH-3T3-CLDN18.2 (A), KATOIII (B) 및 NUGC-4 (C)는 표적 세포이다.
도 12는 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1, hz28G3-1.3, hz40F6-1.1, hz40F6-1.2, hz40F6-1.3, hz40F6-1.4, hz40F6-2.1, hz40F6-2.2, hz40F6-2.3 및 hz40F6-2.4의 CDC 활성을 제시하며, 여기서 NIH-3T3-CLDN18.2는 표적 세포이다.
도 13은 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1 및 hz28G3-1.3의 내재화 활성을 제시하며, 여기서 U2OS-CLDN18.2 (A) 및 NUGC-4 (B)는 표적 세포이다.
도 14는 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1 및 hz28G3-1.3의 비-특이적 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 PBMC는 이펙터 세포이고, NIH-3T3-CLDN18.1은 표적 세포이다.
도 2는 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6 및 xi34G6의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제는 이펙터 세포이고, KATOIII (A), NUGC-4 (B) 및 U2OS-CLDN18.2 (C)는 표적 세포이다.
도 3은 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6 및 xi34G6의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 PBMC는 이펙터 세포이고, KATOIII (A) 및 NUGC-4 (B)는 표적 세포이다.
도 4는 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6, xi34G6 및 xi10D8의 CDC 활성을 제시하며, 여기서 KATOIII (A) 및 U2OS-CLDN18.2 (B)는 표적 세포이다.
도 5는 키메라 항체 xi28G3 및 xi40F6의 내재화 활성을 제시하며, 여기서 NUGC-4 (A) 및 NIH-3T3-CLDN18.2 (B)는 표적 세포이다.
도 6은 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6, xi34G6 및 xi10D8의 비-특이적 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제는 이펙터 세포이고, NIH-3T3-CLDN18.1은 표적 세포이다.
도 7은 NUGC-4 세포 (A) 및 KATOIII 세포 (B)에 대한 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1, hz28G3-1.2, hz28G3-1.3, hz28G3-1.4, hz28G3-2.1, hz28G3-2.2, hz28G3-2.3 및 hz28G3-2.4의 결합 활성을 제시한다.
도 8은 NUGC-4 세포 (A) 및 KATOIII 세포 (B)에 대한 키메라 항체 xi40F6 및 인간화 항체 hz40F6-1.1, hz40F6-1.2, hz40F6-1.3, hz40F6-1.4, hz40F6-2.1, hz40F6-2.2, hz40F6-2.3 및 hz40F6-2.4의 결합 활성을 제시한다.
도 9는 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1, hz28G3-1.2, hz28G3-1.3, hz28G3-1.4, hz28G3-2.1, hz28G3-2.2, hz28G3-2.3 및 hz28G3-2.4의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제는 이펙터 세포이고, U2OS-CLDN18.2 (A) 및 KATOIII (B)는 표적 세포이다.
도 10은 키메라 항체 xi40F6 및 인간화 항체 hz40F6-1.1, hz40F6-1.2, hz40F6-1.3, hz40F6-1.4, hz40F6-2.1, hz40F6-2.2, hz40F6-2.3 및 hz40F6-2.4의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제는 이펙터 세포이고, NIH-3T3-CLDN18.2 (A) 및 NUGC-4 (B)는 표적 세포이다.
도 11은 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1, hz28G3-1.3 및 hz40F6-1.4의 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 PBMC는 이펙터 세포이고, NIH-3T3-CLDN18.2 (A), KATOIII (B) 및 NUGC-4 (C)는 표적 세포이다.
도 12는 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1, hz28G3-1.3, hz40F6-1.1, hz40F6-1.2, hz40F6-1.3, hz40F6-1.4, hz40F6-2.1, hz40F6-2.2, hz40F6-2.3 및 hz40F6-2.4의 CDC 활성을 제시하며, 여기서 NIH-3T3-CLDN18.2는 표적 세포이다.
도 13은 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1 및 hz28G3-1.3의 내재화 활성을 제시하며, 여기서 U2OS-CLDN18.2 (A) 및 NUGC-4 (B)는 표적 세포이다.
도 14는 키메라 항체 xi28G3 및 인간화 항체 hz28G3-1.1 및 hz28G3-1.3의 비-특이적 ADCC 활성을 제시하며, 여기서 PBMC는 이펙터 세포이고, NIH-3T3-CLDN18.1은 표적 세포이다.
본원에서 사용된 용어는 단지 특정 실시양태를 설명하기 위한 것이며 제한적이 아닌 것으로 이해되어야 한다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 기술분야의 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다.
용어 "항체"는 적어도 하나의 항원 (예를 들어, CLDN18.2) 결합 도메인을 갖는 결합 단백질을 지칭한다. 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 무손상 항체 또는 그의 임의의 단편 (모노클로날 항체 또는 그의 단편 포함), 및 항체 변이체 또는 그의 단편일 수 있다. 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 예는 모노클로날 항체, 단일특이적 항체, 다중특이적 항체, Fab 단편, F(ab')2 단편, Fd 단편, Fv 단편, dAb, 단리된 CDR 영역, 단일-쇄 Fv (scFv), 나노바디, 및 관련 기술분야에 공지된 임의의 항체 단편을 포함한다. 본원에 개시된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4 이소타입의 것일 수 있다. 용어 "이소타입"은 중쇄 불변 영역 유전자에 의해 코딩되는 항체 부류를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 IgG1 이소타입의 것이다. 본원에 개시된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 마우스, 래트, 토끼, 비-인간 영장류 (예를 들어, 침팬지, 시노몰구스 원숭이, 거미 원숭이 또는 마카크), 라마 및 인간을 포함하나 이에 제한되지는 않는 임의의 종으로부터 유래될 수 있다. 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 뮤린 항체, 키메라 항체, 인간화 항체 또는 인간 항체일 수 있다. 달리 언급되지 않는 한, 본 개시내용에서 "항체"는 전장 항체 및 그의 임의의 항원-결합 부분 (또는 "항원-결합 단편") 또는 단일 쇄를 포함한다.
전형적인 "전장 항체"는 2개의 중쇄 (H) 및 2개의 경쇄 (L)를 포함하는 당단백질이며, 여기서 중쇄 및 경쇄는 디술피드 결합에 의해 연결되고, 각 중쇄는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 3개의 도메인, 즉 CH1, CH2 및 CH3으로 이루어진 중쇄 불변 영역으로 이루어지고, 각 경쇄는 경쇄 가변 영역 (VL) 및 하나의 도메인 CL로 이루어진 경쇄 불변 영역으로 이루어지고, VH 및 VL 영역은 또한 초가변 영역 (즉, 상보성 결정 영역 (CDR)) 및 상대적으로 보존된 서열을 갖는 프레임워크 영역 (FR)으로 나눌 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 3개의 CDR 및 4개의 FR로 이루어지며, 하기 순서로 아미노-말단에서 카르복실-말단으로 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 항체의 가변 영역은 항원과 상호작용하는 결합 도메인을 포함한다. 항체의 불변 영역은 면역 시스템의 다양한 세포 (예를 들어, 이펙터 세포) 및 고전적 보체 시스템의 제1 구성성분 (C1q)을 포함하는 숙주 조직 또는 인자에 대한 이뮤노글로불린의 결합을 매개할 수 있다.
항체의 "항원-결합 단편" 또는 "항원-결합 부분"은 항원 (예를 들어, CLDN18.2 단백질)에 특이적으로 결합하는 기능성을 보유하는 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다. 항체의 항원 결합 기능성은 전장 항체의 단편에 의해 구현될 수 있다는 것이 입증되었다. 항체의 "항원-결합 부분/단편"이라는 용어에 포함되는 예는 하기를 포함한다: (i) Fab 단편: VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편; (ii) 힌지 영역에서 디술피드 브릿지에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 아암의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (v) VH 도메인으로 이루어진 dAb 단편 (문헌 [Ward et al., Nature. 341:544-546 (1989)] 참조); (vi) 단리된 상보성 결정 영역 (CDR); 및 (vii) 단일 중쇄 가변 도메인 및 2개의 불변 도메인을 포함하고 경쇄가 없는 항체인 나노바디. 더욱이, Fv 단편의 2개 도메인 VL 및 VH가 상이한 유전자에 의해 코딩되지만, VL 및 VH 도메인은 재조합 수단에 의해 링커를 통해 VL 및 VH 쌍이 단일-쇄 Fv (scFv)로 지칭되는 1가 분자를 형성하는 단일 단백질 쇄로 연결될 수 있으며; 문헌 [Bird et al., Science. 242:423-426 (1988)]; [Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 85:5879-5883 (1988)]을 참조한다. 이러한 단일-쇄 항체는 또한 용어 "항원-결합 부분/단편" 내에 포함된다. 더욱이, 항원-결합 부분/단편을 포함하는 재조합 폴리펩티드, 융합 단백질 및 면역접합체가 또한 용어 "항원-결합 부분/단편" 내에 포함된다. 이들 항체 단편은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 통상적인 기술을 사용하여 수득될 수 있고, 단편은 전장 항체와 동일한 방법을 사용하여 기능적 스크리닝에 적용될 수 있다.
"마우스 항체" 또는 "뮤린 항체"는 프레임워크 영역 및 가변 영역의 CDR이 마우스 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된 항체를 지칭한다. 더욱이, 항체가 불변 영역을 포함하는 경우, 불변 영역은 또한 마우스 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된다. 본 개시내용의 뮤린 항체는 마우스 배선 이뮤노글로불린 서열에 의해 코딩되지 않는 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관내 무작위 돌연변이 또는 점 돌연변이에 의해 또는 생체내 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있지만, "마우스 항체" 또는 "뮤린 항체"는 다른 포유동물 종으로부터 유래된 CDR 서열이 마우스 프레임워크 서열에 삽입된 항체를 포함하지 않는다.
"키메라 항체"는 뮤린 항체의 가변 영역을 인간 항체의 불변 영역과 융합함으로써 수득되는 항체이며, 뮤린 항체에 의해 유도되는 면역 반응을 감소시킬 수 있다. 키메라 항체의 확립은 먼저 뮤린 특이적 모노클로날 항체를 분비하는 하이브리도마를 확립하고, 하이브리도마 세포로부터 가변 영역 유전자를 클로닝한 후, 필요에 따라 인간 항체의 불변 영역 유전자를 클로닝하고, 마우스 가변 영역 유전자 및 인간 불변 영역 유전자를 키메라 유전자에 연결한 후, 키메라 유전자를 발현 벡터에 삽입하고, 최종적으로 진핵생물 시스템 또는 원핵생물 시스템에서 키메라 항체를 발현하는 것을 포함한다. 본 개시내용에서, 키메라 항체는 "xi"로도 표시된다.
"인간화 항체"는 비-인간 항체로부터 유래된 상보성 결정 영역 (CDR) 및 인간 항체로부터 유래된 프레임워크 및 불변 영역을 포함하는 항체를 지칭한다. 예를 들어, 본원에 제공된 CLDN18.2에 결합하는 인간화 항체는 하나 이상의 뮤린 항체로부터 유래된 CDR 뿐만 아니라 인간 프레임워크 및 불변 영역을 포함할 수 있다. 그러므로, 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 인간화 항체는 인간화 항체의 CDR이 유래된 뮤린 항체와 동일한 CLDN18.2 상의 에피토프에 결합한다. 예시적인 인간화 항체가 본원에 제공된다. 본원에 제공된 중쇄 및 경쇄 CDR을 포함하는 CLDN18.2에 결합하는 추가적인 인간화 항체 또는 그의 변이체는 임의의 인간 프레임워크 서열을 사용하여 생성될 수 있으며 또한 본 개시내용에 포함된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용에서 사용하기에 적합한 프레임워크 서열은 본원에 제공된 프레임워크 서열과 구조가 유사한 것들을 포함한다. 본원에 제공된 항체의 특성을 변경하기 위해 프레임워크 영역에 추가적인 변형이 이루어질 수 있다. 이러한 추가적인 프레임워크 영역 변형은 화학적 변형, 면역원성을 감소시키거나 T 세포 에피토프를 제거하기 위한 점 돌연변이, 또는 원래 배선 서열의 잔기로의 역돌연변이를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 추가적인 변형은 배선 서열로의 역돌연변이를 포함하여 본원에 예시된 돌연변이에 상응하는 것들을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 인간화 항체의 인간 VH 및/또는 VL 프레임워크 영역 내의 하나 이상의 아미노산은 부모 뮤린 항체 내의 상응하는 아미노산으로 역돌연변이된다. 본 개시내용에서, 인간화 항체는 "hz"로도 표시된다.
참조 항체 또는 다른 결합 단백질과 관련된 분자 또는 폴리펩티드를 지칭하는데 사용되는 경우, 본원에 기재된 바와 같은 "유래된"은 분자 또는 폴리펩티드가 참조 항체 또는 다른 결합 단백질과 동일한 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있음을 의미한다.
"단리된"은 표적 화합물 (예를 들어, 항체, 항원-결합 단편 또는 핵산 분자)이 자연 환경으로부터 단리되었음을 의미한다.
"동일성"은 2개 이상의 핵산 서열 사이 또는 2개 이상의 폴리펩티드 서열 사이의 유사성을 지칭한다. 본 개시내용의 서열 동일성은 적어도 85%, 90% 또는 95%, 바람직하게는 적어도 95%이다. 비제한적인 예는 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%를 포함한다. 2개 서열 사이의 서열 비교 및 퍼센트 동일성 결정은 국립 생명공학 연구 센터의 BLASTN/BLASTP 알고리즘을 디폴트 설정으로 사용하여 수행될 수 있다.
"결합에 대해 경쟁하는" 항체는 표적에 대한 다른 항체의 결합을 부분적으로 또는 완전히 차단하는 항체를 지칭한다. 2개의 항체가 표적에 대한 결합에 대해 서로 경쟁하는지 여부, 즉 하나의 항체가 표적에 대한 다른 항체의 결합을 차단하는지 여부 및 어느 정도까지 차단하는지 여부는 관련 기술분야에 공지된 경쟁 검정, 예를 들어 고체상 직접 또는 간접 방사성면역검정 (RIA), 고체상 직접 또는 간접 효소 면역검정 (EIA), 샌드위치 경쟁 검정 등을 사용하여 결정될 수 있다. 특정 실시양태에서, 하나의 항체는 표적에 대한 결합에 대해 다른 항체와 경쟁하고 표적에 대한 다른 항체의 결합을 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 100%만큼 차단한다.
2개 이상의 항체가 "동일한 에피토프에 결합한다"는 것은 주어진 방법에 의해 결정된 바와 같이 항체가 아미노산 잔기의 동일한 세그먼트에 결합한다는 것을 의미한다. 항체가 본원에 기재된 항체와 "동일한 CLDN18.2 상의 에피토프"에 결합하는지 여부를 결정하기 위한 기술은 예를 들어, 에피토프 맵핑 방법, 예컨대 효모 표면 디스플레이에 의한 에피토프 맵핑, 항원:항체 복합체의 결정의 X선 회절 분석, 및 수소/중수소 교환 질량 분석법 (HDX-MS)을 포함한다.
최대 유효 농도의 절반으로도 공지된 용어 "EC50"은 특정된 노출 시간 후에 최대 효과의 50%를 유발할 수 있는 항체의 농도를 지칭한다. 최대 억제 농도의 절반으로도 공지된 용어 "IC50"은 항체가 없는 경우에 비해 특정 생물학적 또는 생화학적 기능을 50%만큼 억제하는 항체의 농도를 지칭한다. EC50 및 IC50 둘 다는 ELISA 또는 FACS 검정 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 다른 방법에 의해 측정될 수 있다.
"환자" 또는 "대상체"는 임의의 인간 또는 비-인간 동물을 포함한다. 용어 "비-인간 동물"은 모든 척추동물, 예를 들어 포유동물 및 비-포유동물, 바람직하게는 포유동물, 예를 들어 비-인간 영장류, 양, 개, 고양이, 소 및 말을 포함한다.
"유효 용량" 또는 "유효량"은 원하는 효과를 달성하거나 적어도 부분적으로 달성하기에 충분한 양을 지칭한다. 약물 또는 치료제의 치료 "유효량" 또는 "유효 용량"은 질환 또는 장애와 연관된 증상을 예방하거나 개선하기에 충분한 양, 바람직하게는 단독으로 또는 또 다른 치료제와 조합하여 사용될 때 질환 증상의 중증도의 감소 또는 무증상 단계의 빈도 및 지속시간의 증가를 유발하거나 질환으로 인한 손상 또는 무능력을 예방하는 양을 지칭한다. 치료 유효량은 치료될 질환과 관련되며, 여기서 실제 유효량은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 쉽게 결정될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같은 "약"은 특정 값에 대해 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 결정된 허용가능한 오차 범위 내에 있음을 의미하며, 이는 값이 측정되거나 결정되는 방법, 즉 측정 시스템에 의한 제한에 부분적으로 좌우될 것이다. 예를 들어, "약"은 관련 기술분야에서 실행되는 바와 같이 1 또는 1 초과의 표준 편차 내에 있음을 의미할 수 있다. 대안적으로, "약"은 최대 ±5%의 범위, 예를 들어 ±2%, ±1% 또는 ±0.5%가 주어진 특정 수치 범위 내에서 변동하는 것을 의미할 수 있다. 본 개시내용 또는 청구범위에 특정 값이 제공되는 경우, 달리 언급되지 않는 한, "약"은 해당 특정 값에 대해 허용가능한 오차 범위 범위 내에 있음을 의미하는 것으로 간주되어야 한다. 이러한 맥락에서, 달리 언급되지 않는 한, 한 단계의 파라미터 또는 조건 값은 디폴트에 의해 모두 "약"으로 변형된다.
달리 명시되지 않는 한, 단어 "하나"는 "적어도 하나" 또는 "적어도 1종"을 의미하고, 문구 "적어도 하나"는 "하나 이상"과 동일한 의미이며, "및/또는"은 "및" 또는 "또는"을 지칭하는데 사용된다.
본원에 기재된 바와 같이, 임의의 백분율 범위, 비율 범위 또는 정수 범위는 달리 표시되지 않는 한 나열된 범위 내의 임의의 정수 값을 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
본 개시내용에서, 문맥상 달리 언급하지 않는 한, 단어 "포함한다", "포괄한다" 및 "함유한다"는 단계 또는 요소 또는 단계 또는 요소의 그룹을 포함하지만 임의의 다른 단계 또는 요소 또는 단계 또는 요소의 그룹을 배제하지 않는 것으로 해석될 것이다. "...로 이루어진다"는 문구 "...로 이루어진다"에 의해 정의된 것을 포함하고 이에 제한된다는 것을 의미한다. 그러므로, 문구 "...로 이루어진다"는 나열된 요소가 필수이거나 필요하며 다른 요소가 존재할 수 없음을 의미한다. "...로 실질적으로 이루어진다"는 문구에 의해 정의된 임의의 요소를 포함하고, 본 개시내용에 상세히 설명된 바와 같은 나열된 요소의 활성 또는 효과를 방해하지 않거나 유리한 다른 요소로 제한된다는 것을 의미한다. 그러므로, 문구 "...로 실질적으로 이루어진다"는 나열된 요소가 필수이거나 필요하지만 다른 요소는 옵션이며 나열된 요소의 활성 또는 효과에 영향을 미치는지 여부에 따라 존재할 수도 있고 없을 수도 있음을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 달리 언급되지 않는 한, 용어 "핵산", "핵산 서열" 및 "유전자"는 포스포디에스테르 결합에 의해 연결된 2개 이상의 뉴클레오티드의 생성물을 지칭하기 위해 상호교환가능하게 사용된다.
본원에서 명백하게 달리 명시되지 않는 한, 단수형 용어는 복수형 대상을 포함하며, 그 반대도 마찬가지이다.
본 개시내용의 측면은 아래에 더 자세히 설명된다.
본 개시내용의 예시적인 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 중쇄 가변 영역, 경쇄 가변 영역 및 CDR의 아미노산 서열 ID (서열식별번호)가 하기 표 1에 제공된다. 일부 항체는 동일한 CDR을 갖고, 일부 항체는 동일한 VH 또는 VL을 갖는다. 항체의 중쇄 불변 영역은 인간 IgG1, IgG2 또는 IgG4 불변 영역 또는 그의 변이체, 바람직하게는 인간 IgG1 불변 영역 또는 그의 변이체 (예를 들어, 서열식별번호: 61에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 61에 제시된 아미노산 서열과 비교하여 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함함)일 수 있다. 항체의 경쇄 불변 영역은 인간 κ 불변 영역 또는 인간 λ 불변 영역 또는 그의 변이체, 바람직하게는 인간 κ 불변 영역 또는 그의 변이체 (예를 들어, 서열식별번호: 62에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 62에 제시된 아미노산 서열과 비교하여 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함함)일 수 있다. 이들 항체는 또한 마우스 IgG1 중쇄 불변 영역 및/또는 마우스 κ 불변 영역을 포함할 수 있다.
표 1. 가변 영역 및 CDR의 아미노산 서열 ID (서열식별번호)
용어 "상보성 결정 영역", "CDR" 또는 "초가변 영역"은 주로 항원 결합에 기여하는 항체의 가변 영역 내의 6개 초가변 영역 중 하나를 지칭한다. 항체 가변 영역의 아미노산 서열을 고려하여, CDR의 아미노산 서열 경계는 "카바트" 넘버링 체계 (문헌 [Kabat et al. (1991), Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th edition, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD] 참조), "코티아" 넘버링 체계 (문헌 [Al-Lazikani et al. (1997), JMB 273:927-948] 참조), ImMunoGenTics (IMGT) 넘버링 체계 (Lefranc M.P., Immunologist, 7, 132-136 (1999); Lefranc, M.P. et al., Dev. Comp. Immunol., 27, 55-77 (2003)), AbM 넘버링 체계 (옥스포드 몰레큘라(Oxford Molecular)의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에 의해 정의됨), 컨택트(Contact) 넘버링 체계 (이용가능한 복합체 결정 구조의 분석에 기초함), 및 카바트, 코티아, IMGT, AbM 및 컨택트 정의 체계 중 2개 이상의 조합을 포함한 다양한 널리 공지된 체계 중 임의의 체계를 사용하여 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다. 예를 들어, 고전적 형식의 경우, 카바트 체계에 따라, 중쇄 가변 영역 (VH)의 CDR 아미노산 잔기는 31-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) 및 95-102 (HCDR3)로 넘버링되고; 경쇄 가변 영역 (VL)의 CDR 아미노산 잔기는 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) 및 89-97 (LCDR3)로 넘버링된다. 예를 들어, 코티아 체계에 따라, VH의 CDR 아미노산은 26-32 (HCDR1), 52-56 (HCDR2) 및 95-102 (HCDR3)로 넘버링되고; VL의 아미노산 잔기는 26-32 (LCDR1), 50-52 (LCDR2) 및 91-96 (LCDR3)으로 넘버링된다. 카바트 체계 및 코티아 체계의 조합에 따라, CDR은 인간 VH의 아미노산 잔기 26-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) 및 95-102 (HCDR3) 및 인간 VL의 아미노산 잔기 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) 및 89-97 (LCDR3)로 구성된다. IMGT 체계에 따라, VH의 CDR 아미노산 잔기는 대략 26-35 (CDR1), 51-57 (CDR2) 및 93-102 (CDR3)로 넘버링되고, VL의 CDR 아미노산 잔기는 대략 27-32 (CDR1), 50-52 (CDR2) 및 89-97 (CDR3)로 넘버링된다. IMGT 체계에 따라, 항체의 CDR은 프로그램 IMGT/DomainGapAlign을 사용하여 결정될 수 있다.
CDR의 아미노산 서열 경계는 상이한 넘버링 체계에 따라 상이하다. 달리 명시되지 않는 한, 주어진 항체 또는 그의 영역 (예를 들어, 가변 영역)의 용어 "CDR" 또는 "상보성 결정 영역"은 임의의 공지된 체계에 의해 정의된 상보성 결정 영역을 포함한다는 것이 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이해될 것이다. 표 1 및 표 11에 제시된 CDR 서열은 상기 넘버링 체계 중 하나에 따라 정의되었으나, 다른 CDR 넘버링 체계에 따라 정의된 상응하는 아미노산 서열이 또한 본 개시내용의 보호 범위 내에 속할 것이다.
인간 CLDN18.2에 결합하는 다른 항체의 VH 및/또는 VL 서열 (또는 CDR 서열)은 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 VH 및/또는 VL 서열 (또는 CDR 서열)과 "혼합되고 쌍형성"될 수 있다. 바람직하게는, VH 및 VL 쇄 (또는 그의 CDR)가 혼합되고 쌍형성되는 경우, 특정 VH/VL 쌍의 VH 서열은 구조적으로 유사한 VH 서열로 치환될 수 있다. 마찬가지로, 특정 VH/VL 쌍의 VL 서열을 구조적으로 유사한 VL 서열로 치환하는 것이 바람직하다.
그러므로, 한 실시양태에서, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 하기를 포함한다:
(a) 표 1에 나열된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
(b) 표 1에 나열된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역, 또는 또 다른 항-CLDN18.2 항체의 VL, 여기서 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.2에 특이적으로 결합함.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 하기를 포함한다:
(a) 표 1에 나열된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3; 및
(b) 표 1에 나열된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3, 또는 또 다른 항-CLDN18.2 항체의 경쇄 가변 영역 CDR, 여기서 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.2에 특이적으로 결합함.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 표 1에 나열된 HCDR2 및 다른 항-CLDN18.2 항체의 CDR(들), 예를 들어 추가 항-CLDN18.2 항체의 HCDR1 및/또는 HCDR3 및/또는 추가 항-CLDN18.2 항체의 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3을 포함한다.
더욱이, CDR3 도메인이 CDR1 및/또는 CDR2 도메인과 독립적이고 동종항원에 대한 항체의 결합 특이성을 독립적으로 결정할 수 있으며, 동일한 결합 특이성을 갖는 다중 항체가 CDR3 서열에 기초하여 예측될 수 있다는 것은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 표 1에 나열된 HCDR2, 표 1에 나열된 HCDR3 및/또는 표 1에 나열된 LCDR3, 뿐만 아니라 추가 항-CLDN18.2 항체의 CDR(들)을 포함하며, 여기서 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.2에 특이적으로 결합한다. 또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 표 1에 나열된 LCDR2 및 추가 항-CLDN18.2 항체의 CDR(들)을 추가로 포함하며, 여기서 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.2에 특이적으로 결합한다. 또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 표 1에 나열된 HCDR1 또는 표 1에 나열된 LCDR1, 및 추가 항-CLDN18.2 항체의 CDR(들)을 추가로 포함하며, 여기서 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.2에 특이적으로 결합한다. 이들 항체는 바람직하게는 (a) 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체와 인간 CLDN18.2에 대한 결합에 대해 경쟁하고/거나, (b) 그와 동일한 기능적 특성을 유지하고/거나, (c) 그와 동일한 에피토프에 결합하고/거나, (d) 그와 유사한 결합 친화성을 갖는다.
또 다른 실시양태에서, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역은 하나 이상의 보존적 변형을 포함할 수 있다. 일부 보존적 변형은 항체의 항원 결합 능력을 제거하지 않는다는 것이 관련 기술분야에서 이해된다.
따라서, 한 실시양태에서, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 각각 CDR1, CDR2 및 CDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서:
(a) HCDR1 서열은 표 1에 나열된 서열 및/또는 그의 보존적 변형을 포함하고/거나;
(b) HCDR2 서열은 표 1에 나열된 서열 및/또는 그의 보존적 변형을 포함하고/거나;
(c) HCDR3 서열은 표 1에 나열된 서열 및/또는 그의 보존적 변형을 포함하고/거나;
(d) LCDR1 및/또는 LCDR2 및/또는 LCDR3 서열은 표 1에 나열된 서열 및/또는 그의 보존적 변형을 포함하고;
(e) 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 인간 CLDN18.2에 특이적으로 결합한다.
본원에서 사용된 바와 같은 용어 "보존적 변형"은 항체의 결합 특성에 유의한 영향을 미치거나 변경하지 않는 아미노산 변형을 지칭한다. 이러한 보존적 변형은 아미노산 치환, 첨가 및 결실을 포함한다. 관련 기술분야에 공지된 표준 기술, 예를 들어 점 돌연변이 및 PCR-매개 돌연변이를 사용하여 변형이 본 개시내용의 항체에 도입될 수 있다. 보존적 아미노산 치환은 아미노산 잔기를 유사한 구조적 또는 화학적 특성 (예를 들어, 유사한 측쇄)을 갖는 아미노산 잔기로 치환하는 것을 지칭한다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 계열이 관련 기술분야에 공지되어 있다. 이러한 아미노산 잔기 계열은 염기성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 리신, 아르기닌 및 히스티딘), 산성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 아스파르트산 및 글루탐산), 비하전된 극성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인 및 트립토판), 비-극성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌 및 메티오닌), β-분지형 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 트레오닌, 발린 및 이소류신) 및 방향족 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판 및 히스티딘)을 포함한다. 그러므로, 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 CDR 영역 내의 하나 이상의 아미노산 잔기는 동일한 측쇄 계열의 다른 아미노산 잔기로 치환될 수 있으며, 생성된 항체는 본원에 기재된 기능적 검정을 사용하여 기능성에 대해 테스트될 수 있다.
본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 가변 영역 (CDR 및/또는 프레임워크 영역 포함) 변형을 포함하거나, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 예를 들어 항체의 이펙터 기능성을 변경하기 위해 Fc 변형을 추가로 포함할 수 있다.
그러므로, 본 개시내용의 한 실시양태는 본 개시내용에 상기 기재된 서열의 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 본 개시내용에 상기 기재된 서열의 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하지만 본 개시내용에 상기 기재된 서열과 상이한 프레임워크 서열을 포함하는 단리된 항-CLDN18.2 모노클로날 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 제공한다. 이러한 프레임워크 서열은 공개 DNA 데이터베이스 또는 배선 항체 유전자 서열을 포함한 공개 참고문헌에서 찾을 수 있다. 이러한 프레임워크 서열은 바람직하게는 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체에 사용되는 프레임워크 서열과 구조적으로 유사한 것이다. 예를 들어, 일부 경우에, 프레임워크 영역의 잔기를 돌연변이시키는 것이 유익할 수 있으며; 이러한 돌연변이는 항체의 항원 결합 능력을 유지하거나 향상시킬 수 있다 (예를 들어 미국 특허 번호 5,530,101; 5,585,089; 5,693,762 및 6,180,370 참조).
또 다른 유형의 가변 영역 변형은 표적 항체의 하나 이상의 특성 (예를 들어, 친화성 및 물리화학적 특성)을 개선하기 위해 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3 내의 아미노산 잔기를 돌연변이시키는 것이다. 돌연변이는 점 돌연변이 또는 PCR-매개 돌연변이에 의해 도입될 수 있고, 항체 결합 또는 다른 기능적 특성에 대한 돌연변이의 효과는 관련 기술분야에 공지된 시험관내 또는 생체내 검정을 통해 평가될 수 있다. 보존적 변형은 아미노산 치환, 첨가 또는 결실, 바람직하게는 치환일 수 있다. 더욱이, 전형적으로 각 CDR 내의 1, 2, 3, 4 또는 5개 이하의 잔기가 변경된다.
한 실시양태에서, 본원에 제공된 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 하기를 포함한다: (a) 본 개시내용의 HCDR1 서열 또는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 HCDR1; (b) 본 개시내용의 HCDR2 서열 또는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 HCDR2; (c) 본 개시내용의 HCDR3 서열 또는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 HCDR3; (d) 본 개시내용의 LCDR1 서열 또는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 LCDR1; (e) 본 개시내용의 LCDR2 서열 또는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 LCDR2; 및 (f) 본 개시내용의 LCDR3 서열 또는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 LCDR3.
본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 항체 특성을 개선하기 위해 VH 및/또는 VL에 프레임워크 영역 변형을 포함한다. 일반적으로, 이러한 프레임워크 영역 변형은 항체의 면역원성을 감소시킬 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 프레임워크 잔기가 상응하는 배선 서열로 "역돌연변이"된다. 이들 잔기는 항체 프레임워크 서열을 생성된 항체의 배선 서열과 비교함으로써 식별될 수 있다.
또 다른 유형의 프레임워크 영역 변형은 프레임워크 영역의 하나 이상의 잔기 또는 심지어 하나 이상의 CDR을 돌연변이시켜 T 세포 에피토프를 제거하여, 이에 의해 항체가 생성할 수 있는 면역원성을 감소시키는 것을 포함한다. 이 방법은 "탈면역화"로도 공지되어 있으며, 미국 특허 공개 번호 20030153043에 더 자세히 기재되어 있다.
더욱이, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 Fc 변형을 포함하며, 이는 아미노산 삽입, 결실 또는 치환일 수 있고, 전형적으로 항체의 하나 이상의 기능적 특성, 예를 들어 혈청 반감기, 보체 결합, Fc 수용체 결합 및/또는 항원-의존적 세포성 세포독성을 변경하는데 사용된다.
더욱이, 본 개시내용의 항체 또는 그의 항원-결합 단편은 또한 화학적으로 변형되거나 (예를 들어, 하나 이상의 화학적 관능기를 연결함으로써), 그의 글리코실화를 변경하여 항체의 하나 이상의 기능적 특성을 변경하도록 변형될 수 있다. 다른 실시양태에서, Fc 영역은 PEG화에 의해 변형된다 (예를 들어, 항체 또는 그의 단편을 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)과 반응시킴으로써). 다른 실시양태에서, 항체의 글리코실화가 변경된다.
본 개시내용은 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편의 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역 또는 CDR을 코딩하는 단리된 핵산 분자를 추가로 제공한다. 본 개시내용의 핵산 분자는 DNA 또는 RNA일 수 있고, 인트론 서열을 포함할 수 있거나 포함하지 않을 수 있다. 본 개시내용의 핵산 분자는 단일-가닥 또는 이중-가닥일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 핵산 분자는 cDNA 분자이다.
본 개시내용의 핵산은 표준 분자 생물학 기술을 사용하여 수득될 수 있다. 하이브리도마에 의해 발현된 항체의 경우, 하이브리도마로부터 제조된 항체를 코딩하는 경쇄 및 중쇄 cDNA는 표준 PCR 증폭에 의해 또는 cDNA 클로닝 기술을 사용하여 수득될 수 있다. 이뮤노글로불린 유전자 라이브러리로부터 수득된 항체의 경우 (예를 들어, 파지 디스플레이 기술 사용), 이러한 항체를 코딩하는 핵산은 유전자 라이브러리로부터 회수될 수 있다.
VH 및 VL을 코딩하는 DNA 단편이 수득되면, 추가 작업, 예를 들어 가변 영역 유전자를 전장 항체 쇄 유전자, Fab 단편 유전자 또는 scFv 유전자로 전환하는 작업이 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 이들 DNA 단편에 대해 수행될 수 있다. 이들 작업에서, VH 또는 VL을 코딩하는 DNA 단편은 또 다른 단백질 (예를 들어, 항체 불변 영역 또는 가요성 링커)을 코딩하는 DNA 단편에 작동가능하게 연결된다. 이 경우에 사용된 바와 같은 용어 "작동가능하게 연결된"은 2개의 DNA 단편에 의해 코딩된 아미노산 서열이 리딩 프레임에 있도록 2개의 DNA 단편이 함께 연결되는 것을 의미한다.
VH를 코딩하는 단리된 DNA는 VH를 코딩하는 DNA를 중쇄 불변 영역 (CH1, CH2 및 CH3)을 코딩하는 또 다른 DNA 분자에 작동가능하게 연결함으로써 전장 중쇄 유전자로 전환될 수 있다. 인간 중쇄 불변 영역 유전자의 서열은 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 인간 중쇄 불변 영역 유전자를 포함하는 DNA 단편은 표준 PCR 증폭에 의해 수득될 수 있다. 중쇄 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM 또는 IgD 불변 영역일 수 있으나, 바람직하게는 IgG1 불변 영역이다.
VL을 코딩하는 단리된 DNA는 VL을 코딩하는 DNA를 경쇄 불변 영역 CL을 코딩하는 또 다른 DNA 분자에 작동가능하게 연결함으로써 전장 경쇄 유전자로 전환될 수 있다. 인간 경쇄 불변 영역 유전자의 서열은 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 인간 경쇄 불변 영역 유전자를 포함하는 DNA 단편은 표준 PCR 증폭에 의해 수득될 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 경쇄 불변 영역은 κ 또는 λ 불변 영역일 수 있다.
본 개시내용의 모노클로날 항체 (mAb)는 문헌 [Kohler and Milstein (1975) Nature 256:495]에서 관련 기술분야에 널리 공지된 체세포 혼성화 (하이브리도마) 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 모노클로날 항체를 제조하기 위한 다른 실시양태는 B 림프구의 바이러스 또는 발암성 형질전환 및 파지 디스플레이 기술을 포함한다. 키메라 또는 인간화 항체가 또한 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 미국 특허 4,816,567; 5,225,539; 5,530,101; 5,585,089; 5,693,762 및 6,180,370을 참조하며, 이들 각각의 내용은 본원에 참조로 명시적으로 포함된다.
본 개시내용의 항체는 또한 예를 들어 유전자 형질감염 방법과 조합된 재조합 DNA 기술을 사용하여 숙주 세포 트랜스펙토마에서 제조될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Morrison, S. (1985) Science 229:1202]). 한 실시양태에서, 표준 분자 생명공학을 사용하여 수득된 부분 또는 전장 경쇄 및 중쇄를 코딩하는 DNA는 유전자가 전사 및 번역 조절 서열에 작동가능하게 연결되도록 하나 이상의 발현 벡터에 삽입된다. 이 경우에, 용어 "작동가능하게 연결된"은 벡터 내의 전사 및 번역 조절 서열이 항체 유전자의 전사 및 번역을 조절하는 의도된 기능을 수행하도록 항체 유전자를 벡터에 연결하는 것을 지칭한다. 용어 "조절 서열"은 항체 유전자의 전사 또는 번역을 제어하는 프로모터, 인핸서 및 다른 발현 제어 요소 (예를 들어, 폴리아데닐화 신호)를 포함한다.
항체 경쇄 유전자 및 항체 중쇄 유전자는 동일한 발현 벡터 또는 상이한 발현 벡터에 삽입될 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 가변 영역은 VH는 벡터의 CH에 작동가능하게 연결되고 VL은 벡터의 CL에 작동가능하게 연결되도록 전장 항체 유전자를 구축하기 위해 원하는 이소타입의 중쇄 불변 영역 및 경쇄 불변 영역을 코딩하는 발현 벡터에 삽입된다. 더욱이, 대안적으로, 재조합 발현 벡터는 숙주 세포로부터 항체 쇄의 분비를 촉진하는 신호 펩티드를 코딩할 수 있다. 항체 쇄 유전자는 신호 펩티드가 리딩 프레임에서 항체 쇄 유전자의 아미노 말단에 연결되도록 벡터에 클로닝될 수 있다. 신호 펩티드는 이뮤노글로불린 신호 펩티드 또는 이종 신호 펩티드 (즉, 비-이뮤노글로불린 단백질로부터의 신호 펩티드)일 수 있다.
경쇄 및 중쇄를 발현시키기 위해, 표준 기술을 사용하여 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 발현 벡터로 숙주 세포를 형질감염시킨다. 용어 "형질감염시킨다"는 외인성 DNA를 원핵 또는 진핵 숙주 세포에 도입하기 위한 다양한 기술, 예컨대 전기천공, 인산칼슘 침전 및 DEAE-덱스트란 형질감염을 포함한다. 원핵 또는 진핵 숙주 세포에서 본 개시내용의 항체를 발현시키는 것이 이론적으로는 가능하지만, 진핵 세포에서 항체를 발현시키는 것이 바람직하고, 포유동물 숙주 세포에서 항체를 발현시키는 것이 가장 바람직하다. 이는 진핵 세포, 특히 포유동물 세포가 원핵 세포보다 적절하게 폴딩되고 면역학적으로 활성인 항체를 어셈블리하고 분비할 가능성이 더 높기 때문이다. 본 개시내용의 재조합 항체를 발현시키기에 바람직한 포유동물 숙주 세포는 차이니즈 햄스터 난소 세포 (CHO 세포) (문헌 [Urlaub and Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220]에 기재된 바와 같은 DHFR 선택가능한 마커와 함께 사용되는 dhfr-CHO 세포 포함, DHFR 선택가능한 마커는 예를 들어 문헌 [R. J. Kaufman and P. A. Sharp (1982) J. Mol. Biol. 159:601-621]에 기재되어 있음), NSO 골수종 세포, COS 세포, 및 SP2 세포를 포함한다. 항체 유전자를 코딩하는 재조합 발현 벡터가 포유동물 숙주 세포에 도입되는 경우, 항체는 숙주 세포에서 항체의 발현을 허용하기에 충분한 기간 동안, 또는 바람직하게는 숙주 세포가 성장하는 배지로의 항체의 분비를 허용하기에 충분한 기간 동안 숙주 세포를 배양함으로써 제조된다. 항체는 표준 단백질 정제 방법을 사용하여 숙주 세포 또는 그의 세포 배양물로부터 단리될 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편, 핵산 분자, 재조합 폴리펩티드, 융합 단백질, 다중특이적 항체, 면역접합체, 키메라 항원 수용체 또는 유전자 벡터, 및 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 용어 "제약상 허용되는 담체 또는 부형제"는 수의학적 용도를 위한 담체 또는 부형제 및 인간을 위한 약물을 포함하여, 제약 조성물의 제조에 사용될 수 있고 일반적으로 안전하고, 무독성이며, 생물학적으로 불활성이고 위험하지 않은 담체 또는 부형제를 지칭한다.
본 개시내용의 제약 조성물은 정맥내, 근육내, 피하, 비경구, 척수 또는 표피 투여 (예를 들어, 주사 또는 주입에 의해)에 적합하다. 투여 경로에 따라, 활성 성분은 활성 성분을 불활성화시킬 수 있는 산 및 다른 자연 조건으로부터 보호하기 위해 물질에 캡슐화될 수 있다. 본원에서 사용된 문구 "비경구 투여"는 정맥내, 근육내, 동맥내, 척수강내, 피막내, 안와내, 심장내, 피내, 복강내, 경기관, 피하, 표피하, 관절내, 피막하, 거미막하, 척수내, 경막외 및 흉골내 주사 및 주입을 포함하나 이에 제한되지는 않는 주사에 의해 전형적으로 수행되는 장내 및 국소 투여 이외의 투여 방식을 지칭한다. 대안적으로, 본 개시내용의 제약 조성물은 비-비경구 경로, 예를 들어 국소, 표피 또는 점막 경로를 통해, 예컨대 비강내, 경구, 질, 직장, 설하 또는 국소 투여를 통해 투여될 수 있다.
본 개시내용의 제약 조성물은 멸균 수용액 또는 분산액의 형태일 수 있다. 이는 또한 마이크로에멀젼, 리포솜 또는 고농도의 약물에 적합한 다른 정렬된 구조로 제형화될 수 있다.
투여 요법은 최상의 원하는 반응 (예를 들어, 치료 반응)을 제공하도록 조정된다. 예를 들어, 단일 큰 용량이 투여될 수 있거나, 시간 경과에 따라 다중 분할 용량이 투여될 수 있거나, 또는 치료 상황의 중요성에 비례하여 용량이 감소 또는 증가될 수 있다. 대안적으로, 항체는 지속-방출 제형으로서 투여될 수 있으며, 이 경우 필요한 투여 빈도가 감소된다.
항체 투여 시, 용량은 숙주 체중 kg당 약 0.0001 mg 내지 100 mg 범위일 수 있다.
전술한 발명은 명확한 이해를 목적으로 예시 및 실시예를 제공함으로써 매우 상세하게 설명되었지만, 본 개시내용의 교시에 비추어 특정 변화 및 변형이 첨부된 청구범위의 사상 또는 범위를 벗어나지 않고 본 개시내용에 대해 이루어질 수 있다는 것이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 본 개시내용은 제한하려는 의도가 아닌 하기 실시예의 설명에 의해 추가로 설명된다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 실질적으로 유사한 결과를 생성하기 위해 변화되거나 변형될 수 있는 다양한 중요하지 않은 파라미터를 쉽게 식별할 것이다.
달리 표시되지 않는 한, 본 개시내용의 실시는 관련 기술분야 내의 단백질 화학, 생화학, 재조합 DNA 기술 및 약리학의 통상적인 방법을 사용할 것이다. 하기 실시예에 포함된 시약, 재료 및 기구는 달리 언급되지 않는 한 관련 기술분야에서 상업적으로 이용가능한 것일 수 있다.
실시예
실시예 1. 항-CLDN18.2 하이브리도마 모노클로날 항체의 생성
안정적인 세포주의 구축
인간 CLDN18.2 (서열식별번호: 1)를 코딩하는 cDNA를 유전자 합성에 의해 수득한 후, 발현 벡터 pcDNA3.1에 서브클로닝하였다. 리포펙타민 2000 형질감염 시약 (써모(Thermo), 카탈로그 번호 11668019)의 지침서에 따라 발현 벡터를 U2OS 세포 및 NIH-3T3 세포에 각각 형질감염시켜 안정적인 세포주 U2OS-CLDN18.2 및 NIH-3T3-CLDN18.2를 각각 수득하였다.
인간 CLDN18.1 (서열식별번호: 2)을 코딩하는 cDNA를 유전자 합성에 의해 수득한 후, 발현 벡터 pcDNA3.1에 서브클로닝하였다. 리포펙타민 2000 형질감염 시약 (써모, 카탈로그 번호 11668019)의 지침서에 따라 발현 벡터를 U2OS 세포 및 NIH-3T3 세포에 각각 형질감염시켜 안정적인 세포주 U2OS-CLDN18.1 및 NIH-3T3-CLDN18.1을 각각 수득하였다.
마우스의 면역화
5 × 106개 내지 10 × 106개 NIH-3T3-CLDN18.2 세포를 각 마우스에 복강내 주사함으로써 BALB/c 마우스를 면역원인 NIH-3T3-CLDN18.2 세포로 면역화하고, 면역화를 총 5회 동안 2주마다 1회 수행하였다. 융합 3일 전, 각 마우스는 러시 면역화를 위해 1 × 107개 NIH-3T3-CLDN18.2 세포를 복강내 주사받았다. 면역화 완료 후, 항-CLDN18.2 특이적 항체의 역가 검정을 위해 각 마우스로부터 혈청을 수집하였다. 후속 비장 세포 융합을 위해 더 높은 항체 역가를 갖는 마우스를 선택하였다.
세포 융합
전기융합 기술에 기초하여, 면역화된 마우스로부터의 비장 세포 (1 × 108개)를 전기융합 시스템 (BTX, ECM2001)을 사용하여 SP2/0 골수종 세포 (5 × 107개)와 융합하여 하이브리도마 세포를 수득하였다. 융합 후, 세포를 HAT 완전 배지에 재현탁하고, 96-웰 플레이트에 0.2 mL/웰로 첨가하고, 7-10일 동안 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 배양한 후, 하이브리도마 세포 배양 상청액을 검출을 위해 취하였다.
하이브리도마의 스크리닝
CLDN18.2에 대한 항체의 결합 활성을 ELISA에 의해 검출하였다. U2OS-CLDN18.2 세포를 96-웰 플레이트에 10000개 세포/웰로 첨가하고, 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 밤새 배양하였다. 세포 배양 상청액을 버리고, 96-웰 플레이트를 PBS 완충액으로 3회 세척하고, 2% 폴리옥시메틸렌을 첨가한 후, 실온에서 30분 동안 고정화하였다. 96-웰 플레이트를 PBS 완충액으로 3회 세척하고, 하이브리도마 세포 배양 상청액을 100 μL/웰로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 96 웰 플레이트를 PBS 완충액으로 3회 세척하고, HRP-염소 항-마우스 IgG Fcγ (잭슨 이뮤노리써치(Jackson immunoresearch), 카탈로그 번호 115-035-071)를 100 μL/웰로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 96-웰 플레이트를 PBS 완충액으로 3회 세척하고, TMB (써모, 카탈로그 번호 00-4201-56)를 100 μL/웰로 첨가한 후, 혼합물을 10분 동안 인큐베이션한 후, 반응을 정지시키기 위해 정지 용액 (2N H2SO4)을 50 μL/웰로 첨가하였다. 마이크로플레이트 판독기 (써모, 바리오스칸 플래시(Varioskan Flash))를 사용하여 450 nm 파장의 OD 값을 판독하였다.
ELISA 검출에 대해 양성인 하이브리도마 세포를 선택하고, CLDN18.2를 자연적으로 발현하는 세포주 KATOIII 및 NUGC-4에 대한 하이브리도마 세포 배양 상청액 중의 항체의 결합 활성을 FACS 방법에 의해 검출하였다 (방법에 대해서는 실시예 3 참조).
실시예 2. 항-CLDN18.2 키메라 항체의 생성
cDNA의 획득
ELISA 및 FACS 검출에 대해 양성인 하이브리도마 세포 (28G3, 40F6, 22F12, 34G6 및 10D8)를 선택하고, 총 RNA 추출 키트 (타카라(Takara), 카탈로그 번호 9767)를 사용하여 세포로부터 주형으로서 총 RNA를 단리하고, 키트 (써모, 카탈로그 번호 18080051) 지침서에 따라 슈퍼스크립트(superscript) III 역전사효소를 사용하여 제1 가닥 cDNA를 합성하였다. 주형으로서 제1 쇄 cDNA를 사용함으로써, 마우스 IgG 프라이머 및 카파 프라이머를 사용하여 PCR 증폭을 수행하여, 그러므로 항체의 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역의 서열을 수득하였다. 0.5 μg/mL 에티듐 브로마이드를 함유하는 1% 아가로스/트리스-보레이트 겔에서 PCR 혼합물을 전기영동적으로 분리하였다. 예상된 크기의 DNA 단편을 겔로부터 절단하고 정제하였다. 정제된 PCR 생성물을 pMD-19T 벡터 (타카라, 카탈로그 번호 6013)에 클로닝한 후, 이를 LB 고체 배양 플레이트에서 배양하기 위해 DH5α 적격 이. 콜라이(E. coli) 세포 (타카라, 카탈로그 번호 9057)에 형질감염시켰다. LB 고체 배양 플레이트로부터 단일 콜로니를 선택하고, DNA 시퀀싱을 수행하였다. 항체 (뮤린 항체 28G3, 40F6, 22F12, 34G6 및 10D8)의 중쇄 가변 영역 서열 및 경쇄 가변 영역 서열을 수득하였다.
키메라 항체의 구축 및 발현
FcgRIIIa와 IgG1의 상호작용은 푸코스 발현-관련 유전자 FUT8을 녹아웃시킴으로써 개선될 수 있으며, 이에 의해 항체의 ADCC 활성이 향상된다 (Shields et al., 2002; Yamane-Ohnuki et al., 2004). 본 실시예에서, FUT8-녹아웃 CHO-S 세포 (CHO-S Fut8-/-세포로 지정됨)를 사용하여 탈푸코실화된 항체를 제조하였다.
마우스 VL 영역 유전자 단편을 인간 κ 쇄 불변 영역에 연결하여 키메라 경쇄를 구축하였으며, 마우스 VH 영역 유전자 단편을 인간 IgG1 불변 영역에 연결하여 키메라 중쇄를 구축하였다. 단백질 발현을 위해 각 항체에 상응하는 키메라 중쇄 발현 플라스미드 및 키메라 경쇄 발현 플라스미드를 CHO-S Fut8-/-세포에 공동-형질감염시켰다. 형질감염된 세포를 37℃, 8% CO2에서 배양하였다. 7-10일 배양 후, 세포를 원심분리하여 세포 배양 상청액을 수득하였으며, 단백질 A 컬럼 (지이 헬스케어(GE healthcare))을 사용하여 세포 배양 상청액 중의 키메라 항체를 정제하였다. 인간 κ 경쇄 불변 영역은 서열식별번호: 62에 제시된 아미노산 서열을 가졌고, 인간 IgG1 불변 영역은 서열식별번호: 61에 제시된 아미노산 서열을 가졌다.
실시예 3. 항-CLDN18.2 항체의 결합 활성의 결정
FACS 방법에 기초하여, CLDN18.2를 과발현하는 세포주 U2OS-CLDN18.2 및 CLDN18.2를 자연적으로 발현하는 세포주 KATOIII (중국과학원 세포 은행) 및 NUGC-4 (중국과학원 세포 은행)에 대한 항-CLDN18.2 항체의 결합 활성을 분석하였다. IMAB362 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 63 및 64에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 양성 대조군으로서 사용하였고, IgG1 이소타입 대조군 항체 (또한 본 개시내용의 실시예에서 IgG1로 지정됨, 사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 67 및 68에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 음성 대조군으로서 사용하였다.
세포 농도를 PBS로 조정하고, 세포 (U2OS-CLDN18.2, KATOIII 또는 NUGC-4 세포)를 96-웰 플레이트에 3 × 105개 세포/웰로 첨가한 후, 상이한 농도의 테스트 항체를 96-웰 플레이트의 각 웰에 첨가하고, 혼합물을 4℃에서 60분 동안 인큐베이션하였다. KATOIII 및 NUGC-4 세포의 경우, xi40F6 및 xi34G6 항체의 최종 농도는 300 nM, 100 nM, 33.33 nM, 11.11 nM, 3.7 nM, 1.23 nM, 0.41 nM 및 0.14 nM이었고, xi10D8, xi22F12 및 xi28G3 항체의 최종 농도는 300 nM, 60 nM, 12 nM, 2.4 nM, 0.48 nM, 0.096 nM, 0.0192 nM 및 0.00384 nM이었고; U2OS-CLDN18.2 세포의 경우, 테스트 항체의 최종 농도는 150 nM, 50 nM, 16.67 nM, 5.56 nM, 1.85 nM, 0.62 nM, 0.21 nM 및 0.07 nM이었다. 상청액을 버리고, 세포를 미리 냉각된 PBS 완충액으로 3회 세척하고, 1:200으로 희석된 PE-염소 항-인간 IgG Fcγ (잭슨 이뮤노리써치, 카탈로그 번호 109-116-170)를 100 μL/웰로 첨가하고, 혼합물을 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 세포를 미리 냉각된 PBS 완충액으로 3회 세척하고, 100 μL의 PBS 완충액에 재현탁한 후, 유동 세포계측기 (싸토리우스(Sartorius), iQUE3)를 사용하여 형광 신호를 검출하였다. CLDN18.2에 대한 항-CLDN18.2 항체의 결합 능력을 염색의 평균 형광 강도 (MFI)에 의해 측정하였다.
U2OS-CLDN18.2, KATOIII 및 NUGC-4 세포에 대한 항-CLDN18.2 키메라 항체의 결합 활성은 도 1에 제시되어 있고, 결합 EC50에 대한 데이터는 표 2.1, 표 2.2 및 표 2.3에 제시되어 있다. 3개의 상이한 세포의 경우, xi28G3, xi40F6, xi22F12 및 xi34G6의 결합 활성은 IMAB362보다 우수하였고, xi10D8의 결합 활성은 IMAB362와 비슷하였다.
표 2.1. 세포 수준에서 항-CLDN18.2 키메라 항체의 결합에 대한 EC50
표 2.2. 세포 수준에서 항-CLDN18.2 키메라 항체의 결합에 대한 EC50
표 2.3. 세포 수준에서 항-CLDN18.2 키메라 항체의 결합에 대한 EC50
실시예 4. 항-CLDN18.2 항체의 비-특이적 결합
FACS 방법에 기초하여, CLDN18.1 (서열식별번호: 2)을 과발현하는 세포주 U2OS-CLDN18.1에 대한 항-CLDN18.2 항체의 결합 활성을 분석하였다. 세포 농도를 PBS로 조정하고, U2OS-CLDN18.1 세포를 96-웰 플레이트에 3 × 105개 세포/웰로 첨가한 후, 테스트 항체를 96-웰 플레이트의 각 웰에 첨가하고, 항체의 최종 농도는 200 nM이었고, 혼합물을 4℃에서 60분 동안 인큐베이션하였다. 상청액을 버리고, 세포를 미리 냉각된 PBS 완충액으로 3회 세척하고, 1:200으로 희석된 PE-염소 항-인간 IgG Fcγ (잭슨 이뮤노리써치, 카탈로그 번호 109-116-170)를 100 μL/웰로 첨가하고, 혼합물을 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 세포를 미리 냉각된 PBS 완충액으로 3회 세척하고, 100 μL의 PBS 완충액에 재현탁한 후, 유동 세포계측기 (싸토리우스, iQUE3)를 사용하여 형광 신호를 검출하였다. U2OS-CLDN18.1 세포에 대한 항-CLDN18.2 항체의 비특이적 결합을 염색의 평균 형광 강도 (MFI)에 의해 측정하였다. IgG1 이소타입 대조군 항체 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 67 및 68에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 대조군으로서 사용하였고, IgG1 이소타입 대조군 항체의 2배를 벤치마크로서 사용하여, 비특이적 결합의 존재 또는 부재를 결정하였다.
결과는 표 3에 제시되어 있다. 대조군에서 항-CLDN18.2 키메라 항체 및 IgG1 이소타입 대조군 항체의 MFI 값은 유사하였으며, 이는 항-CLDN18.2 키메라 항체가 U2OS-CLDN18.1 세포에 비-특이적으로 결합하지 않았음을 나타낸다.
표 3. U2OS-CLDN18.1 세포에 대한 항-CLDN18.2 키메라 항체의 비-특이적 결합
실시예 5. 항-CLDN18.2 항체의 ADCC 활성
리포터 유전자 방법에 기초하여, KATOIII, NUGC-4 및 U2OS-CLDN18.2를 표적 세포로서 및 CD16a v158 및 NFAT-루시페라제로 안정적으로 형질감염된 Jurkat 세포 (Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제) (BPS 바이오사이언스(BPS Bioscience), 카탈로그 번호 60541)를 이펙터 세포로서 사용하여 항-CLDN18.2 항체의 항체-의존적 세포성 세포독성 (ADCC) 활성을 결정하였다. IMAB362 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 63 및 64에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 양성 대조군으로서 사용하였고, IgG1 이소타입 대조군 항체 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 67 및 68에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 음성 대조군으로서 사용하였다.
KATOIII, NUGC-4 및 U2OS-CLDN18.2 세포를 각각 배지로 2.4 × 105개 세포/mL로 희석하고, 각 세포 현탁액을 96-웰 플레이트에 100 μL/웰로 첨가하고, 혼합물을 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 밤새 인큐베이션하였다. 다음날, 배양 상청액을 버리고, 96-웰 플레이트를 PBS 완충액으로 1-3회 세척하였다. 그 후, 상이한 농도의 테스트 항체를 96-웰 플레이트에 60 μL/웰로 첨가하였으며; KATOIII 세포의 경우, 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체의 최종 농도는 20 nM, 2 nM, 0.2 nM, 0.02 nM, 0.002 nM, 0.0002 nM, 0.00002 nM 및 0.000002 nM이었고, IMAB362의 최종 농도는 2000 nM, 200 nM, 20 nM, 2 nM, 0.2 nM, 0.02 nM, 0.002 nM 및 0.0002 nM이었고; NUGC-4 세포의 경우, 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 및 IMAB362의 최종 농도는 1333.33 nM, 133.33 nM, 13.33 nM, 1.33 nM, 0.133 nM, 0.0133 nM, 0.00133 nM 및 0.000133 nM이었고; U2OS-CLDN18.2 세포의 경우, 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체 및 IMAB362의 최종 농도는 1.334 nM, 0.267 nM, 0.053 nM, 0.011 nM, 0.002 nM, 0.0004 nM 및 0.00009 nM이었다. 그 후, Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제 세포를 꺼내고; Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제 세포 현탁액을 5:1의 이펙터 세포:표적 세포의 비율에 기초하여 40 μL/웰로 96-웰 플레이트에 첨가하였다. 이펙터 세포 및 표적 세포가 충분히 혼합되어 서로 접촉되도록 저속 원심분리를 수행하였고, 혼합물을 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 5-6시간 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 검출 시약을 반딧불이 루시페라제 검출 키트 (바자임(Vazyme), 카탈로그 번호 DD1203-03)의 지침서에 따라 100 μL/웰로 첨가하고, 혼합물을 15-30분 동안 방치하고, 마이크로플레이트 판독기 (써모, 바리오스칸 플래시)를 사용하여 형광 신호를 검출하였다.
리포터 유전자 실험에서, 항-CLDN18.2 키메라 항체의 ADCC 활성은 도 2에 제시되어 있고, 결합 EC50에 대한 데이터는 표 4에 제시되어 있다. 3개의 상이한 세포의 경우, 키메라 항체 xi28G3, xi40F6, xi34G6 및 xi22F12는 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제 세포의 NFAT 신호의 활성화를 유의하게 유도할 수 있었고, IMAB362보다 우수하였다.
표 4. 항-CLDN18.2 키메라 항체의 ADCC 활성 (이펙터 세포로서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제 사용)
PBMC의 사멸 효과에 기초하여, KATOIII 및 NUGC-4를 표적 세포로서 및 PBMC를 이펙터 세포로서 사용하여 항-CLDN18.2 항체의 ADCC 활성을 검출하였다. IMAB362 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 63 및 64에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐) 및 15F9 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 65 및 66에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 양성 대조군으로서 사용하였고, IgG1 이소타입 대조군 항체 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 67 및 68에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 음성 대조군으로서 사용하였다.
KATOIII 및 NUGC-4 세포를 각각 배지로 2 × 105개 세포/mL로 희석하고, 각 세포 현탁액을 96-웰 플레이트에 50 μL/웰로 첨가하였다. 그 후, 상이한 농도의 테스트 항체를 96-웰 플레이트의 웰에 첨가하였으며; KATOIII 세포의 경우, 테스트 항체의 최종 농도는 66.7 nM, 8.34 nM, 1.04 nM, 0.13 nM, 0.016 nM, 0.002 nM, 0.00025 nM 및 0.00003 nM이었고; NUGC-4 세포의 경우, 테스트 항체의 최종 농도는 600 nM, 100 nM, 16.67 nM, 2.78 nM, 0.46 nM, 0.077 nM, 0.013 nM 및 0.002 nM이었다. PBMC 세포를 소생시키고; PBMC 세포 현탁액 (4 × 106/mL의 세포 밀도)을 20:1의 이펙터 세포:표적 세포의 비율에 기초하여 50 μL/웰로 96-웰 플레이트에 첨가하였다. 이펙터 세포 및 표적 세포가 충분히 혼합되어 서로 접촉되도록 저속 원심분리를 수행하였고, 혼합물을 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 18시간 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 96-웰 플레이트를 플레이트 원심분리기에 배치하고, 250 g/분에서 5분 동안 원심분리하고, 각 웰로부터의 50 μL의 상청액을 96-웰 검출 플레이트에 첨가하였다. LDH 작업 용액을 CytoTox96 Non-Radio 키트 (프로메가(Promega), 카탈로그 번호 PR-G1780)의 지침서에 따라 제조한 후, 50 μL/웰로 96-웰 검출 플레이트에 첨가하고, 충분히 혼합한 후, 혼합물을 실온에서 25-35분 동안 암실에서 인큐베이션하였다. 정지 용액을 50 μL/웰로 첨가하고, 충분히 혼합한 후, 마이크로플레이트 판독기 (써모, 바리오스칸 플래시)를 사용하여 490 nm 파장의 OD 값을 판독하였다.
도 3 및 표 5에 제시된 바와 같이, PBMC 사멸 실험에서, 항-CLDN18.2 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6 및 xi34G6의 ADCC 활성은 IMAB362 및 15F9보다 우수하였다.
표 5. 항-CLDN18.2 키메라 항체의 ADCC 활성 (이펙터 세포로서 PBMC 사용)
"NA"는 해당 없음을 나타내고, "/"는 검출가능하지 않음을 나타낸다
실시예 6. 항-CLDN18.2 항체의 CDC 활성
셀타이터-글로(CellTiter-Glo) 발광 세포 생존성 검정 방법에 기초하여, KATOIII 및 U2OS-CLDN18.2를 표적 세포로서 사용하여 항체의 보체-의존적 세포독성 (CDC) 활성을 검출하였다. IMAB362 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 63 및 64에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 양성 대조군으로서 사용하였고, IgG1 이소타입 대조군 항체 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 67 및 68에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 음성 대조군으로서 사용하였다.
KATOIII 및 U2OS-CLDN18.2를 각각 배지로 8 × 105개 세포/mL로 희석하고, 각 세포 현탁액을 96-웰 플레이트에 50 μL/웰로 첨가하였다. 그 후, 상이한 농도의 테스트 항체를 96-웰 플레이트에 50 μL/웰로 첨가하였으며; KATOIII 세포의 경우, 테스트 항체의 최종 농도는 50 nM, 10 nM, 2 nM, 0.4 nM, 0.08 nM, 0.016 nM, 0.0032 nM 및 0.00064 nM이었고; U2OS-CLDN18.2 세포의 경우, 테스트 항체의 최종 농도는 333.33 nM, 66.67 nM, 13.33 nM, 2.67 nM, 0.53 nM, 0.11 nM, 0.02 nM 및 0.004 nM이었다. 그 후, 보체 (퀴델(Quidel), 카탈로그 번호 A113)를 96-웰 플레이트에 50 μL/웰로 첨가하여 보체의 최종 농도가 10%가 되도록 하였다. 보체 및 표적 세포가 충분히 혼합되어 서로 접촉되도록 혼합물을 저속으로 원심분리한 후, 96-웰 플레이트를 진탕하면서 37℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 혼합물을 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 셀타이터-글로 발광 세포 생존성 검정 (프로메가, 카탈로그 번호 G7572)을 110 μL/웰로 첨가한 후, 혼합물을 실온에서 5-15분 동안 암실에서 인큐베이션하고, 최종적으로 마이크로플레이트 판독기 (써모, 바리오스칸 플래시)를 사용하여 형광 값을 측정하였다.
결과는 도 4 및 표 6에 제시되어 있다. 항-CLDN18.2 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6, xi34G6 및 xi10D8은 모두 강한 CDC 효과를 유도할 수 있었고, xi22F12, xi28G3, xi40F6 및 xi34G6의 활성은 IMAB362보다 더 강하였다.
표 6. 항-CLDN18.2 키메라 항체의 CDC 활성
"/"는 검출가능하지 않음을 나타낸다
실시예 7. 항-CLDN18.2 항체의 내재화 활성
항체 내재화 인간 시약 (싸토리우스, 카탈로그 번호 90564)의 지침서에 따라, NUGC-4 및 NIH-3T3-CLDN18.2를 표적 세포로서 사용하여 항-CLDN18.2 항체의 내재화 활성을 검출하였다.
NUGC-4 및 NIH-3T3-CLDN18.2 세포를 각각 배지로 2 × 106개 세포/mL로 희석하고, 각 세포 현탁액을 96-웰 플레이트에 20 μL/웰로 첨가하였다. 테스트 항체를 각각 내재화 시약과 충분히 혼합하고, 테스트 항체 및 내재화 시약의 혼합물을 37℃에서 15분 동안 암실에서 인큐베이션한 후, 96-웰 플레이트에 20 μL/웰로 첨가하고, 생성된 혼합물을 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 2시간 동안 인큐베이션하였으며; 테스트 항체의 최종 농도는 20 nM, 6.67 nM, 2.22 nM, 0.74 nM, 0.25 nM, 0.08 nM, 0.027 nM 및 0.009 nM이었다. 인큐베이션 후, 유동 세포계측기 (싸토리우스, iQUE3)를 사용하여 형광 신호 (MFI)를 검출하였다. 항체의 내재화 활성을 형광 값에 의해 평가하였고, 결과는 도 5에 제시되어 있다.
실시예 8. 항-CLDN18.2 항체의 비-특이적 ADCC 활성
리포터 유전자 방법에 기초하여, NIH-3T3-CLDN18.1 세포를 표적 세포로서 및 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제를 이펙터 세포로서 사용하여 NIH-3T3-CLAN18.1 세포에 대한 항-CLDN18.2 항체의 비-특이적 ADCC 활성을 분석하였으며, 테스트 항체의 최종 농도는 333.33 nM, 66.67 nM, 13.33 nM, 2.67 nM, 0.53 nM, 0.107 nM, 0.021 nM 및 0.004 nM이었다. 구체적인 방법에 대해서는 실시예 5를 참조한다.
결과는 도 6에 제시되어 있다. 항-CLDN18.2 키메라 항체 xi22F12, xi28G3, xi40F6 및 xi34G6은 모두 NIH-3T3-CLDN18.1 세포에 대해 ADCC 효과를 갖지 않았던 반면, xi10D8 및 IMAB362는 NIH-3T3-CLDN18.1 세포에 대해 약한 ADCC 활성을 가졌다.
실시예 9. 항-CLDN18.2 모노클로날 항체의 인간화
뮤린 항체 28G3 (중쇄 가변 영역: 서열식별번호: 11; 경쇄 가변 영역: 서열식별번호: 16) 및 40F6 (중쇄 가변 영역: 서열식별번호: 29; 경쇄 가변 영역: 서열식별번호: 34)을 인간화를 위해 선택하였다.
뮤린 항체 28G3 및 40F6은 컴퓨터-보조 설계와 조합하여 CDR-그라프팅에 의해 인간화되었다. 뮤린 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열과 가장 높은 서열 상동성을 갖는 인간 배선 항체 서열을 정렬에 의해 단백질 데이터베이스로부터 선택하였다. 뮤린 항체 28G3 및 40F6의 상보성 결정 영역 (CDR)을 선택된 인간 배선 항체 서열의 프레임워크 영역 사이에 그라프팅하고, 프레임워크 영역 내의 CDR 및/또는 아미노산 잔기를 추가로 돌연변이시켜 더 많은 후보 가변 영역 서열을 수득하였다.
인간화 VL 영역 유전자 단편을 인간 κ 쇄 불변 영역에 연결하여 인간화 경쇄를 구축하였으며, 인간화 VH 영역 유전자 단편을 인간 IgG1 불변 영역에 연결하여 인간화 중쇄를 구축하였다. 실시예 2의 방법에 따라 형질감염 및 발현을 수행한 후, 단백질 A 컬럼을 사용하여 세포 배양 상청액 중의 인간화 항체를 정제하였다. 인간 κ 경쇄 불변 영역은 서열식별번호: 62에 제시된 아미노산 서열을 가졌고, 인간 IgG1 불변 영역은 서열식별번호: 61에 제시된 아미노산 서열을 가졌다.
실시예 10. 항-CLDN18.2 인간화 항체의 특징화
결합 활성
FACS 방법에 기초하여, CLDN18.2를 자연적으로 발현하는 세포주 KATOIII (중국과학원 세포 은행) 및 NUGC-4 (중국과학원 세포 은행)에 대한 항-CLDN18.2 인간화 항체의 결합 활성을 분석하였다. hz28G3-1.1, hz28G3-1.2, hz28G3-1.3, hz28G3-1.4, hz28G3-2.1, hz28G3-2.2, hz28G3-2.3, hz28G3-2.4 및 xi28G3의 최종 농도는 150 nM, 50 nM, 16.67 nM, 5.56 nM, 1.85 nM, 0.62 nM, 0.21 nM 및 0.07 nM이었고, hz40F6-1.1, hz40F6-1.2, hz40F6-1.3, hz40F6-1.4, hz40F6-2.1, hz40F6-2.2, hz40F6-2.3, hz40F6-2.4 및 xi40F6의 최종 농도는 300 nM, 100 nM, 33.33 nM, 11.11 nM, 3.7 nM, 1.23 nM, 0.41 nM 및 0.14 nM이었다. 구체적인 방법에 대해서는 실시예 3을 참조한다.
항-CLDN18.2 인간화 항체의 결합 활성은 도 7-8에 제시되어 있고, 결합 EC50에 대한 데이터는 표 7.1 및 표 7.2에 제시되어 있다. hz40F6-1.1 및 hz40F6-2.1의 결합 활성이 키메라 항체 xi40F6보다 더 약한 점을 제외하고는, 나머지 인간화 항체의 결합 활성은 상응하는 키메라 항체와 비슷하거나 그보다 우수하였고, 모든 인간화 항체의 결합 활성은 IMAB362보다 우수하였다.
표 7.1. 항-CLDN18.2 인간화 항체의 결합 활성
표 7.2. 항-CLDN18.2 인간화 항체의 결합 활성
ADCC 활성
리포터 유전자 방법에 기초하여, KATOIII, NUGC-4, NIH-3T3-CLDN18.2 및 U2OS-CLDN18.2를 표적 세포로서 및 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제를 이펙터 세포로서 사용하여 항-CLDN18.2 인간화 항체의 ADCC 활성을 분석하였다. NIH-3T3-CLDN18.2 및 U2OS-CLDN18.2 세포의 경우, 테스트 항체의 최종 농도는 13.33 nM, 2.22 nM, 0.37 nM, 0.062 nM, 0.01 nM, 0.0017 nM, 0.00029 nM 및 0.000048 nM이었고; NUGC-4 세포의 경우, 테스트 항체의 최종 농도는 1333.33 nM, 133.33 nM, 13.33 nM, 1.33 nM, 0.133 nM, 0.0133 nM, 0.00133 nM 및 0.000133 nM이었고; KATOIII 세포의 경우, 본 개시내용의 항-CLDN18.2 항체의 최종 농도는 20 nM, 2 nM, 0.2 nM, 0.02 nM, 0.002 nM, 0.0002 nM, 0.00002 nM 및 0.000002 nM이었고, IMAB362의 최종 농도는 2000 nM, 200 nM, 20 nM, 2 nM, 0.2 nM, 0.02 nM, 0.002 nM 및 0.0002 nM이었다. 구체적인 방법에 대해서는 실시예 5를 참조한다.
리포터 유전자 실험에서, 항-CLDN18.2 인간화 항체의 ADCC 활성은 도 9 및 도 10에 제시되어 있고, EC50 결합에 대한 데이터는 표 8.1 및 표 8.2에 제시되어 있다. 2개의 상이한 세포의 경우, 항-CLDN18.2 인간화 항체는 모두 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제 세포의 NFAT 신호 활성화를 유의하게 유도할 수 있었고, 인간화 항체의 ADCC 활성은 상응하는 키메라 항체와 비슷하였고 IMAB362보다 우수하였다.
표 8.1. 항-CLDN18.2 인간화 항체의 ADCC 활성 (이펙터 세포로서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제 사용)
표 8.2. 항-CLDN18.2 인간화 항체의 ADCC 활성 (이펙터 세포로서 Jurkat-CD16a v158-NFAT-루시페라제 사용)
PBMC 사멸 방법에 기초하여, KATOIII, NUGC-4 및 NIH-3T3-CLDN18.2를 표적 세포로서 및 PBMC를 이펙터 세포로서 사용하여 항-CLDN18.2 인간화 항체의 ADCC 활성을 분석하였다. 테스트 항체의 최종 농도는 66.7 nM, 8.34 nM, 1.04 nM, 0.13 nM, 0.016 nM, 0.002 nM, 0.00025 nM 및 0.000032 nM이었다. 구체적인 방법에 대해서는 실시예 5를 참조한다.
도 11 및 표 9에 제시된 바와 같은 결과. PBMC 사멸 실험에서, 항-CLDN18.2 인간화 항체 hz28G3-1.3의 ADCC 활성은 xi28G3과 비슷하였고 15F9보다 유의하게 우수하였다.
표 9. 항-CLDN18.2 인간화 항체의 ADCC 활성 (이펙터 세포로서 PBMC 사용)
CDC 활성
셀타이터-글로 발광 세포 생존성 검정 방법에 기초하여, NIH-3T3-CLDN18.2를 표적 세포로서 사용하여 항체의 CDC 활성을 검출하였다. IMAB362 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 63 및 64에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐) 및 15F9 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 65 및 66에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 양성 대조군으로서 사용하였고, IgG1 이소타입 대조군 항체 (사내 제조됨, 본 개시내용에서 서열식별번호: 67 및 68에 제시된 바와 같은 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 가짐)를 음성 대조군으로서 사용하였다. NIH-3T3-CLDN18.2 세포를 0.1% BSA를 함유하는 배지로 8 × 105개 세포/mL로 희석하고, 세포 현탁액을 96-웰 플레이트에 50 μL/웰로 첨가하였다. 그 후, 상이한 농도의 테스트 항체를 96-웰 플레이트에 50 μL/웰로 첨가하였다. hz28G3-1.1, hz28G3-1.3 및 xi28G3의 최종 농도는 100 nM, 25 nM, 6.25 nM, 1.56 nM, 0.39 nM, 0.098 nM, 0.024 nM 및 0.006 nM이었고, hz40F6-1.1, hz40F6-1.2, hz40F6-1.3, hz40F6-1.4, hz40F6-2.1, hz40F6-2.2, hz40F6-2.3, hz40F6-2.4 및 xi40F6의 최종 농도는 333.33 nM, 66.67 nM, 13.33 nM, 2.67 nM, 0.53 nM, 0.11 nM, 0.02 nM 및 0.004 nM이었다. 구체적인 방법에 대해서는 실시예 6을 참조한다.
결과는 도 12 및 표 10.1 및 표 10.2에 제시되어 있다. 항-CLDN18.2 인간화 항체는 모두 강한 CDC 효과를 유도할 수 있었고, 몇몇 항체를 제외하고는, 다른 인간화 항체의 CDC 활성은 상응하는 키메라 항체와 비슷하였다.
표 10.1. 항-CLDN18.2 인간화 항체의 CDC 활성
표 10.2. 항-CLDN18.2 인간화 항체의 CDC 활성
내재화 활성
항체 내재화 인간 시약 (싸토리우스, 카탈로그 번호 90564)의 지침서에 따라, NUGC-4 및 U2OS-CLDN18.2를 표적 세포로서 사용하여 항-CLDN18.2 인간화 항체의 내재화 활성을 검출하였다. NUGC-4 세포에서 테스트 항체의 최종 농도는 111.11 nM, 37.04 nM, 12.35 nM, 4.12 nM, 1.37 nM, 0.46 nM 및 0.15 nM이었고, U2OS-CLDN18.2 세포에서 테스트 항체의 최종 농도는 33.33 nM, 11.11 nM, 3.7 nM, 1.23 nM, 0.41 nM, 0.14 nM, 0.046 nM 및 0.015 nM이었다. 구체적인 방법에 대해서는 실시예 7을 참조한다. 항체의 내재화 활성을 형광 값에 의해 평가하였고, 결과는 도 13에 제시되어 있다.
비-특이적 ADCC 활성
PBMC 사멸 방법에 기초하여, NIH-3T3-CLDN18.1을 표적 세포로서 및 PBMC를 이펙터 세포로서 사용하여 NIH-3T3-CLDN18.1 세포에 대한 항-CLDN18.2 인간화 항체의 비-특이적 ADCC 활성을 분석하였다. 테스트 항체의 최종 농도는 66.7 nM, 8.34 nM, 1.04 nM, 0.13 nM, 0.016 nM, 0.002 nM 및 0.00025 nM이었다. 구체적인 방법에 대해서는 실시예 5를 참조한다.
결과는 도 14에 제시되어 있다. 항-CLDN18.2 인간화 항체 hz28G3-1.1 및 hz28G3-1.3은 NIH-3T3-CLDN18.1 세포에 대해 ADCC 효과를 갖지 않았다.
본 개시내용의 서열 정보는 하기 표 11에 요약하였다.
표 11. 서열 정보
모든 특허, 특허 개시내용 및 기타 식별된 간행물은 설명 및 개시의 목적으로 본원에 참조로 명시적으로 포함된다. 이러한 간행물은 오로지 본 개시내용의 출원일 이전에 개시되었기 때문에 제공된다. 이들 문서의 날짜 또는 이들 문서의 내용에 대한 설명에 대한 모든 진술은 본 출원인이 이용할 수 있는 정보에 기초하며, 날짜 또는 이들 문서의 내용의 정확성에 대한 어떠한 인정도 구성하지 않는다. 더욱이, 어떠한 국가에서든, 본원의 이러한 간행물에 대한 어떠한 언급도 해당 간행물이 관련 기술분야에서 일반적으로 인식되는 지식의 일부를 형성한다는 것을 인정하는 것으로 해석되어서는 안된다.
이상에서는 본 개시내용을 일반적인 설명 및 구체적인 실시양태를 통해 상세히 설명하였지만, 본 개시내용에 기초하여 변형 또는 개선이 이루어질 수 있다는 것은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 자명할 것이다. 따라서, 본 개시내용의 사상을 벗어나지 않는 범위에서 이루어진 이러한 변형 및 개선은 모두 본 개시내용의 보호 범위에 속한다.
서열목록 전자파일 첨부
Claims (20)
- 단리된 항-CLDN18.2 항체 또는 그의 항원-결합 단편으로서, 하기를 포함하는 항체 또는 그의 항원-결합 단편:
(i) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3, 여기서
(1) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(13) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함함; 및/또는
(ii) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3, 여기서
(1) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(9) 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함함. - 제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 하기를 포함하는 것인 항체 또는 그의 항원-결합 단편:
(i) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3, 여기서
(1) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 4 및 7에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 4 및 7에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 5 및 7에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 5 및 7에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 6 및 7에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 6 및 7에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 20 및 24에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 20 및 24에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 21 및 24에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 21 및 24에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 22 및 24에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 22 및 24에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 23 및 24에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 23 및 24에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 37, 38 및 39에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 37, 38 및 39에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 45, 46 및 47에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 45, 46 및 47에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(10) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2 및 중쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 53, 54 및 55에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 53, 54 및 55에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함함; 및/또는
(ii) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3, 여기서
(1) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 40, 41 및 42에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 40, 41 및 42에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 48, 49 및 50에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 48, 49 및 50에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(6) 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 56, 57 및 58에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 56, 57 및 58에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함함. - 제1항 또는 제2항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3을 포함하며, 여기서
(1) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 11의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 16의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 17의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 12의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 13의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 14의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 15의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 18의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 29의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 34의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(13) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(14) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 35의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(15) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 30의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(16) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 31의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(17) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 32의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(18) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 33의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 36의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(19) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 43의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 44의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나;
(20) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 51의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 52의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(21) 중쇄 CDR1은 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR2는 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄 CDR3은 서열식별번호: 59의 중쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR1은 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR1 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR2는 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR2 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 CDR3은 서열식별번호: 60의 경쇄 CDR3 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
항체 또는 그의 항원-결합 단편이 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3을 포함하며, 여기서
(1) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 4, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 4, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 5, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 5, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 3, 6, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 3, 6, 7, 8, 9 및 10에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 20, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 20, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 21, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 21, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 22, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 22, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 23, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 23, 24, 25, 26 및 27에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 20, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 20, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 21, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 21, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 22, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 22, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 19, 23, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 19, 23, 24, 25, 26 및 28에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 37, 38, 39, 40, 41 및 42에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 37, 38, 39, 40, 41 및 42에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(13) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 45, 46, 47, 48, 49 및 50에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 45, 46, 47, 48, 49 및 50에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(14) 중쇄 CDR1, 중쇄 CDR2, 중쇄 CDR3, 경쇄 CDR1, 경쇄 CDR2 및 경쇄 CDR3은 각각 서열식별번호: 53, 54, 55, 56, 57 및 58에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 53, 54, 55, 56, 57 및 58에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인
항체 또는 그의 항원-결합 단편. - 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 키메라 또는 인간화된 것인 항체 또는 그의 항원-결합 단편.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 하기를 포함하는 것인 항체 또는 그의 항원-결합 단편:
(i) 서열식별번호: 11, 12, 13, 14, 15, 29, 30, 31, 32, 33, 43, 51 또는 59에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 11, 12, 13, 14, 15, 29, 30, 31, 32, 33, 43, 51 또는 59에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및/또는
(ii) 서열식별번호: 16, 17, 18, 34, 35, 36, 44, 52 또는 60에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 16, 17, 18, 34, 35, 36, 44, 52 또는 60에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역. - 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함하며, 여기서
(1) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 11 및 16에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 11 및 16에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(2) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 12 및 17에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 12 및 17에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(3) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 13 및 17에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 13 및 17에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(4) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 14 및 17에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 14 및 17에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(5) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 15 및 17에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 15 및 17에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(6) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 12 및 18에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 12 및 18에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(7) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 13 및 18에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 13 및 18에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(8) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 14 및 18에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 14 및 18에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(9) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 15 및 18에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 15 및 18에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(10) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 29 및 34에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 29 및 34에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(11) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 30 및 35에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 30 및 35에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(12) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 31 및 35에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 31 및 35에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(13) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 32 및 35에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 32 및 35에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(14) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 33 및 35에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 33 및 35에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(15) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 30 및 36에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 30 및 36에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(16) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 31 및 36에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 31 및 36에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(17) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 32 및 36에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 32 및 36에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(18) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 33 및 36에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 33 및 36에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(19) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 43 및 44에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 43 및 44에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나;
(20) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 51 및 52에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 51 및 52에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나; 또는
(21) 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 서열식별번호: 59 및 60에 제시된 아미노산 서열, 또는 서열식별번호: 59 및 60에 제시된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인
항체 또는 그의 항원-결합 단편. - 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 IgG1, IgG2 또는 IgG4 이소타입의 것인 항체 또는 그의 항원-결합 단편.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 중쇄 불변 영역 및 경쇄 불변 영역을 추가로 포함하며, 여기서 중쇄 불변 영역은 서열식별번호: 61에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 61에 제시된 아미노산 서열과 비교하여 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하고, 경쇄 불변 영역은 서열식별번호: 62에 제시된 아미노산 서열 또는 서열식별번호: 62에 제시된 아미노산 서열과 비교하여 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 치환, 결실 또는 첨가를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 것인 항체 또는 그의 항원-결합 단편.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 (a) 인간 CLDN18.2에 결합하고/거나; (b) CLDN18.2를 발현하는 세포에 대해 항체-의존적 세포성 세포독성 (ADCC)을 유도하고/거나; (c) CLDN18.2를 발현하는 세포에 대해 보체-의존적 세포독성 (CDC)을 유도하는 것인 항체 또는 그의 항원-결합 단편.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 그의 항원-결합 단편이 모노클로날 항체, 단일특이적 항체, 나노바디, Fab 단편, F(ab')2 단편, Fd 단편, Fv 단편, dAb 단편, 단리된 CDR 영역, 단일-쇄 Fv 분자 및 이들의 조합으로부터 선택되는 것인 항체 또는 그의 항원-결합 단편.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 코딩하는 단리된 핵산 분자.
- 제11항에 따른 핵산 분자를 포함하는 발현 벡터.
- 제11항에 따른 핵산 분자 또는 제12항에 따른 발현 벡터를 포함하는 숙주 세포.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 그의 항원-결합 단편을 포함하는 다중특이적 항체.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 그의 항원-결합 단편 및 그에 연결된 기능적 단편을 포함하는 재조합 폴리펩티드 또는 융합 단백질.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 그의 항원-결합 단편 및 그에 연결된 치료제를 포함하는 면역접합체.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 그의 항원-결합 단편 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
- 치료 유효량의 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 그의 항원-결합 단편 또는 제17항에 따른 제약 조성물을 CLDN18.2-양성 질환의 예방, 경감 또는 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 CLDN18.2-양성 질환을 예방, 경감 또는 치료하는 방법.
- 제18항에 있어서, CLDN18.2-양성 질환이 암을 포함하는 것인 방법.
- 제19항에 있어서, 암이 위암, 식도암, 위장관암, 췌장암, 간암, 폐암, 기관지암, 중피종, 신장암, 난소암, 유방암, 방광암, 자궁암, 전립선암, 고환암, 항문암, 질암, 담관암, 담낭암, 두경부암, 척수 종양, 이비인후과 종양, 갑상선암, 중피종, 골암, 피부암, 흑색종, 선암종, 육종, 신경모세포종, 교모세포종, 뇌암, 중추신경계암, 신경내분비 종양, 백혈병, 림프종 및 골수종을 포함하는 것인 방법.
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