KR20220166834A - 세포 노화 억제용 조성물 및 세포 노화를 억제하는 방법 - Google Patents
세포 노화 억제용 조성물 및 세포 노화를 억제하는 방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은, 세포 노화를 효과적으로 억제할 수 있는 세포 노화 억제용 조성물 및 세포 노화를 억제하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은, 세사민류의 1종 이상을 유효 성분으로서 함유하는 세포 노화 억제용 조성물 등에 관한 것이다.
본 발명은, 세사민류의 1종 이상을 유효 성분으로서 함유하는 세포 노화 억제용 조성물 등에 관한 것이다.
Description
본 발명은 세포 노화 억제용 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 세포 노화를 억제하는 방법 등에 관한 것이다.
세포 노화란, 세포의 증식이 불가역적으로 정지된 상태를 말한다. 예컨대, 인간 등의 포유류의 정상 체세포에는, 분열 가능한 횟수에 한계가 있어, 어느 일정 횟수, 세포 분열을 반복하면 세포 분열을 불가역적으로 정지시킨다.
아포토시스와는 달리, 세포 노화를 일으킨 세포(노화 세포)는 스스로 사멸하지 않는다. 이 때문에 가령(加齡)에 따라, 노화 세포가 조직 및 기관에 축적된다(비특허문헌 1). 노화 세포는, 세포 주기를 정지시키고 있을 뿐만 아니라, 그 세포로서의 기능도 저하되고 있다. 또한, 노화 세포로부터 분비되는 생리 활성 인자에 의해 주위의 정상 세포에 장애를 주어 장기의 기능 저하 등을 일으킨다. 세포 노화를 억제하기 위한 기술로서, 예컨대 특허문헌 1에는, 아스타잔틴 및 니코틴산토코페롤을 유효 성분으로서 함유하는 간엽계 줄기세포의 세포 노화 억제제가 기재되어 있다.
세포 노화에 관한 마커로서, 노화 관련 산성 β-갈락토시다아제(Senescence-associated β-galactosidase: SA-β-Gal) 등이 알려져 있다.
[비특허문헌 1] Herbig U, Ferreira M, Condel L, Carey D, Sedivy JM. Cellular Senescence in Aging Primates. Science. 2006; 311(5765): 1257-1257.
본 발명의 목적은, 세포 노화를 효과적으로 억제할 수 있는 세포 노화 억제용 조성물을 제공하는 것이다. 또한, 본 발명은 세포 노화를 억제하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명자들은 상기 과제를 해결하기 위해 예의 연구한 결과, 세사민류가 세포 노화를 억제하는 작용을 갖는 것을 발견하였다.
본 발명은 이들에 한정되는 것은 아니지만, 이하의 세포 노화 억제용 조성물, 세포 노화를 억제하는 방법 등을 포함한다.
[1] 세사민류의 1종 이상을 유효 성분으로서 함유하는 세포 노화 억제용 조성물.
[2] 세사민류의 1종 이상이, 세사민 및/또는 에피세사민인 상기 [1]에 기재된 조성물.
[3] 경구용 조성물인 상기 [1] 또는 [2]에 기재된 조성물.
[4] 음식품인 상기 [1] 내지 [3] 중 어느 하나에 기재된 조성물.
[5] 피부 외용제인 상기 [1] 또는 [2]에 기재된 조성물.
[6] 화장료인 상기 [5]에 기재된 조성물.
[7] 「세포 노화 억제」, 「노화 세포화 억제」, 「세포 노화를 예방한다」, 「노화 세포를 만들게 하지 않는다」 및 「노화 세포의 증가를 억제한다」로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 이상의 표시를 붙인 상기 [1] 내지 [6] 중 어느 하나에 기재된 조성물.
[8] 세사민류의 1종 이상을 투여하는, 세포 노화를 억제하는 방법.
[9] 세포 노화를 억제하기 위한 세사민류의 1종 이상의 용도.
본 발명에 따르면, 세포 노화를 효과적으로 억제할 수 있는 세포 노화 억제용 조성물을 제공할 수 있다. 또한, 본 발명에 따르면, 세포 노화를 억제하는 방법을 제공할 수 있다.
도 1은 과산화수소로 처리하고, 세사민류 첨가 배지 또는 비첨가 배지에서 배양한 정상 인간 섬유아세포의 SA-β-Gal 활성을 나타낸 그래프이다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물(이하, 단순히 본 발명의 조성물이라고 하는 경우도 있음)은, 세사민류의 1종 이상을 유효 성분으로서 함유한다.
본 발명에 있어서, 세사민류란, 세사민 및 그 유연체(類緣體)를 포함하는 화합물의 총칭이다. 세사민은, 참깨에 포함된 주요 리그난 화합물의 일종이다. 세사민 유연체로는, 에피세사민 외에, 예컨대 일본 특허 공개 평성 제4-9331호 공보에 기재된 디옥사비시클로[3.3.0]옥탄 유도체를 들 수 있다. 세사민류의 1종 이상으로서, 이들 화합물의 1종을 단독으로 이용하여도 좋고, 2종 이상을 이용하여도 좋다. 세사민류의 구체예로는, 세사민, 에피세사민, 세사미놀, 에피세사미놀, 세사몰, 세사몰린 등을 예시할 수 있고, 이들의 입체 이성체 또는 라세미체를 단독으로, 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 본 발명에 있어서는, 세사민류의 1종 이상으로서, 세사민 및/또는 에피세사민이 바람직하고, 세사민 및 에피세사민이 보다 바람직하다. 세사민 및 에피세사민을 이용하는 경우, 이들의 비율은 특별히 한정되지 않지만, 예컨대, 세사민:에피세사민(중량비)이 1:0.1∼1:9가 바람직하고, 1:0.3∼1:3이 보다 바람직하며, 1:0.5∼1:2가 더욱 바람직하다.
본 발명에서 사용되는 세사민류는, 그 형태나 제조 방법 등에 의해, 전혀 제한되지 않는다. 예컨대, 세사민의 경우는, 참기름으로부터 공지된 방법(예컨대, 일본 특허 공개 평성 제4-9331호 공보에 기재된 방법)에 의해 추출한 세사민(세사민 추출물 또는 정제물이라 함)을 이용할 수 있다. 또한, 시판되고 있는 참기름(액상)을 그대로 이용할 수도 있다. 그러나, 참기름을 이용한 경우에는, 참기름 특유의 풍미가 관능적으로 바람직하지 못하다고 평가되는 경우도 있기 때문에, 참기름으로부터 추출된 무미 무취인 세사민 추출물(또는 세사민 정제물)을 이용하는 것이 바람직하다. 또한, 참기름을 이용한 경우, 세사민 함유량이 낮기 때문에, 바람직한 양의 세사민을 배합하고자 하면, 처방되는 조성물의 단위 투여당 체적이 지나치게 커지기 때문에, 섭취에 문제점을 발생시키는 경우가 있다. 특히, 경구 섭취용으로 제제화한 경우는, 제제(정제, 캡슐 등)가 지나치게 커져 섭취에 지장이 생긴다. 따라서, 섭취량이 적어서 좋다고 하는 관점에서도 참기름으로부터의 세사민 추출물(또는 세사민 정제물)을 이용하는 것이 바람직하다. 합성에 의해 세사민류를 얻을 수도 있다. 그 방법으로는, 예컨대, 세사민, 에피세사민에 대해서는 Beroza 연구진의 방법[J. Am. Chem. Soc., 78, 1242(1956)]으로 합성할 수 있다.
세포 노화란, 상기한 바와 같이 세포의 증식이 정지된 상태를 말한다. 개체의 노화 요인은 다양하며, 개체 레벨의 노화와 세포 노화의 연관성은 밝혀지지 않았지만, 노령의 동물에 있어서, 가령에 따라 세포 노화를 일으킨 세포(노화 세포)가 증가하는 것, 또한, 인간의 초대 배양 세포를 계대하면 어느 분열 한계에 접어들어 노화 세포가 되는 것이 발견되고 있다. 노화 세포로부터 분비되는 생리 활성 인자는, 주위의 정상 세포에 악영향을 주는 것으로 생각되고 있다. 노화 세포는, 그 세포로서의 기능도 저하되고 있다. 세포 노화를 억제하는 것은, 세포 노화 또는 노화 세포의 증가에 기인하는 상태 또는 질환, 예컨대, 세포의 기능 저하, 장기의 기능 저하, 전신의 기능 저하 등의 예방 또는 개선에 유효하다. 대상에 있어서 세포 노화를 억제하여 노화 세포의 증가(축적)를 억제함으로써, 세포의 기능 유지, 장기의 기능 유지, 전신의 기능 유지 등의 효과를 얻을 수 있을 것으로 기대된다.
후기의 실시예에 나타내는 바와 같이, 세사민류는, 세포 노화의 지표인 노화 관련 산성 β-갈락토시다아제(SA-β-Gal)의 활성 상승을 억제하였기 때문에, 세포 노화를 억제하는 작용을 갖는다. 세사민류는, 대상에 있어서 세포 노화를 억제하기 위한 유효 성분으로서 사용할 수 있다.
세사민류는, 천연물이나 음식품에 포함되어 식경험이 있는 화합물이다. 이 때문에 안전성의 관점에서, 세사민류는, 예컨대 매일 섭취하는 데에도 문제가 적을 것으로 생각된다. 본 발명에 따르면, 안전성이 높은 물질을 유효 성분으로서 포함하고, 세포 노화를 억제하는 작용을 갖는 세포 노화 억제용 조성물 등을 제공할 수 있다.
본 발명에 있어서의 세포 노화 억제 효과는, 공지된 세포 노화 마커에 의해 확인할 수 있다. 세포 노화에 따른 현상으로는, 예컨대 SA-β-Gal 활성의 상승 등을 들 수 있다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물로서, SA-β-Gal 활성의 상승을 억제하는 것이 바람직하다.
인간 등의 포유동물에서는, 통상 가령에 따라 대사 등이 저하되기 때문에, 가령에 따라 노화 세포의 제거 속도가 느려질 것으로 추측된다. 세포 노화를 억제하는 것은, 예컨대 중장년자에 있어서 노화 세포의 증가를 억제하기 위해 특히 유효한 것으로 생각된다. 중장년자는 고령자를 포함한다.
인간 등의 대상에 있어서 세포 노화를 억제함으로써, 대상에 있어서의 노화 세포의 증가를 억제할 수 있다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물은, 세포의 기능 저하, 장기의 기능 저하, 전신의 기능 저하 등의 상태 또는 질환의 예방 또는 개선을 위해 사용할 수 있다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물은, 세포 노화를 억제함으로써, 가령에 따른 장기의 기능 저하, 가령에 따른 전신의 기능 저하 등을 예방 또는 개선하기 위해 사용할 수 있다.
본 명세서에서 예방은, 발증을 방지하는 것, 발증을 지연시키는 것, 발증률을 저하시키는 것, 발증의 리스크를 경감하는 것 등을 포함한다. 상태 또는 질환의 개선은, 상태 또는 질환으로부터 회복시키는 것, 상태 또는 질환의 증상을 경감하는 것, 상태 또는 질환의 증상을 호전시키는 것, 상태 또는 질환의 진행을 지연시키는 것, 방지하는 것 등을 포함한다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 치료적 용도(의료 용도) 또는 비치료적 용도(비의료 용도) 모두에 적용할 수 있다. 비치료적이라고 하는 것은, 의료 행위, 즉 인간의 수술, 치료 또는 진단을 포함하지 않는 개념이다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 예컨대, 음식품, 화장료, 의약품, 의약부외품, 사료 등의 형태로 할 수 있다. 본 발명의 조성물은, 그 자체가 세포 노화 억제를 위해 이용되는 음식품, 화장료, 의약품, 의약부외품, 사료 등이어도 좋고, 이들에 배합하여 사용되는 소재 또는 제제 등이어도 좋다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 일례로서, 제의 형태로 제공할 수 있지만, 본 형태에 한정되는 것은 아니다. 상기 제를 그대로 조성물로서, 또는, 상기 제를 포함하는 조성물로서 제공할 수도 있다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물은, 세포 노화 억제제라고 할 수도 있다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 경구용 조성물, 비경구용 조성물 중 어느 것이어도 좋다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물은, 바람직하게는 경구용 조성물이다. 경구용 조성물로는, 음식품, 경구용 의약품, 의약부외품, 사료를 들 수 있고, 바람직하게는 음식품 또는 경구용 의약품이며, 보다 바람직하게는 음식품이다.
다른 일 양태에 있어서, 세포 노화 억제용 조성물은, 피부 외용제(피부 외용 조성물)로서 사용할 수 있다. 피부 외용제는, 화장료, 의약품, 의약부외품 등을 포함하고, 바람직하게는 화장료이다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물을 피부의 세포 노화를 억제하기 위해 사용하는 경우, 상기 조성물을 피부 외용제로 하는 것이 바람직하고, 화장료가 보다 바람직하다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 본 발명의 효과를 해치지 않는 한, 세사민류의 1종 이상에 더하여, 임의의 첨가제, 임의의 성분을 함유할 수 있다. 이들 첨가제 및 성분은, 조성물의 형태 등에 따라 선택할 수 있고, 일반적으로 음식품, 화장료, 의약품, 의약부외품, 사료 등에 사용 가능한 것을 사용할 수 있다. 본 발명의 조성물을, 음식품, 화장료, 의약품, 의약부외품, 사료 등으로 하는 경우, 그 제조 방법은 특별히 한정되지 않고, 일반적인 방법에 의해 제조할 수 있다.
예컨대 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물을 음식품으로 하는 경우, 세사민류의 1종 이상에, 음식품에 사용 가능한 성분(예컨대, 식품 소재, 필요에 따라 사용되는 식품 첨가물 등)을 배합하여, 여러 가지 음식품으로 할 수 있다. 음식품은 특별히 한정되지 않고, 예컨대, 일반적인 음식품, 건강 식품, 건강 음료, 기능성 표시 식품, 특정 보건용 식품, 건강 보조 식품, 환자용 음식품 등을 들 수 있다. 상기 건강 식품, 기능성 표시 식품, 특정 보건용 식품, 건강 보조 식품 등은, 예컨대, 세립제, 정제, 과립제, 산제, 캡슐제, 츄어블제, 드라이 시럽제, 시럽제, 액제, 음료, 드링크제, 유동식 등의 각종 제제 형태로서 사용할 수 있다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물을 화장료로 하는 경우, 세사민류의 1종 이상에, 화장료에 사용 가능한 성분(예컨대, 화장료에 허용되는 담체, 첨가제 등)을 배합하여 여러 가지 화장료로 할 수 있다. 화장료의 제품 형태는 특별히 한정되지 않고, 예컨대, 화장수, 미용액, 팩, 유액, 크림, 선크림 등의 스킨 케어 화장료 등을 들 수 있다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물을 의약품 또는 의약부외품으로 하는 경우, 예컨대, 세사민류의 1종 이상에, 약리학적으로 허용되는 담체, 필요에 따라 첨가되는 첨가제 등을 배합하여, 각종 제형의 의약품 또는 의약부외품으로 할 수 있다. 그와 같은 담체, 첨가제 등은, 의약품 또는 의약부외품에 사용 가능하고, 약리학적으로 허용되는 것이면 좋으며, 예컨대, 부형제, 결합제, 붕괴제, 윤활제, 항산화제, 착색제 등의 1 또는 2 이상을 들 수 있다. 의약품 또는 의약부외품의 투여(섭취) 형태로는, 경구 또는 비경구(경피, 경점막, 경장, 주사 등) 투여의 형태를 들 수 있다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물을 의약품 또는 의약부외품으로 하는 경우, 경구용 의약품 또는 의약부외품으로 하는 것이 바람직하다. 경구 투여를 위한 제형으로는, 액제, 정제, 산제, 세립제, 과립제, 당의정, 캡슐제, 현탁액, 유제, 츄어블제 등을 들 수 있다.
다른 일 양태에 있어서, 의약품 또는 의약부외품은, 피부 외용제로 하는 것이 바람직하다. 피부 외용제의 제형 등은 특별히 한정되지 않고, 예컨대 용액, 유액, 크림, 겔, 분말, 에어졸, 미스트, 캡슐 및 시트 등 임의의 형태로 할 수 있다.
의약품은, 비인간 동물용 의약이어도 좋다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물을 사료로 하는 경우에는, 세사민류의 1종 이상을 사료에 배합하면 된다. 사료에는 사료 첨가제도 포함된다. 사료로는, 예컨대, 소, 돼지, 닭, 양, 말 등에 이용하는 가축용 사료; 토끼, 래트, 마우스 등에 이용하는 소동물용 사료; 개, 고양이, 새 등에 이용하는 펫푸드 등을 들 수 있다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물에 포함되는 세사민류의 함유량은 특별히 한정되지 않고, 그 형태 등에 따라 설정할 수 있다.
본 발명의 조성물 중의 세사민류의 총 함유량은, 예컨대, 상기 조성물 중에 0.001 중량% 이상이 바람직하고, 0.01 중량% 이상이 보다 바람직하며, 0.05 중량% 이상이 더욱 바람직하고, 또한, 10 중량% 이하가 바람직하며, 5 중량% 이하가 보다 바람직하다. 일 양태에 있어서, 세사민류의 총 함유량은, 본 발명의 조성물 중에 0.001∼10 중량%가 바람직하고, 0.01∼5 중량%가 보다 바람직하며, 0.05∼5 중량%가 더욱 바람직하다. 상기 총 함유량은, 세사민류의 화합물을 2종 이상 함유하는 경우는, 이들의 합계 함유량이다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 그 형태 또는 제형에 따라 자체 공지된 여러 가지 방법으로 섭취 또는 투여할 수 있다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물은, 경구로 섭취(경구 투여)되는 것이 바람직하다. 다른 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물을 피부 외용제로 하는 경우는, 피부에 적용할 수 있다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물의 투여량(섭취량이라고도 할 수 있음)은 특별히 한정되지 않는다. 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물의 투여량은, 세포 노화 억제 효과를 얻을 수 있는 양이면 되고, 투여 형태, 투여 방법, 대상의 체중 등에 따라 적절하게 설정하면 된다.
일 양태에 있어서, 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물을 인간(성인)을 대상으로 섭취시키거나 또는 투여하는 경우, 세사민류의 총 투여량은, 1일당 체중 60 kg일 때, 바람직하게는 0.5 mg 이상, 보다 바람직하게는 1 mg 이상, 더욱 바람직하게는, 3 mg 이상, 또한, 바람직하게는 200 mg 이하, 보다 바람직하게는 100 mg 이하, 더욱 바람직하게는 80 mg 이하이다. 일 양태에 있어서, 세사민류의 총 투여량은, 인간(성인)이면, 1일당 체중 60 kg일 때, 바람직하게는 0.5∼200 mg, 보다 바람직하게는 1∼100 mg, 더욱 바람직하게는 3∼80 mg이다. 상기 양을, 1일 1회 이상, 예컨대, 1일 1회 또는 수회(예컨대 2∼3회)에 나누어 섭취시키거나 또는 투여하는 것이 바람직하다. 일 양태에 있어서는, 상기 양의 세사민류를, 인간에게 경구로 섭취시키거나 또는 투여하는 것이 바람직하다. 일 양태에 있어서는, 세사민 및/또는 에피세사민을, 세사민 및 에피세사민의 총 투여량으로서 1일당 체중 60 kg일 때, 바람직하게는 0.5∼200 mg, 보다 바람직하게는 1∼100 mg, 더욱 바람직하게는 3∼80 mg, 인간(성인)에게 경구로 섭취시키거나 또는 투여하는 것이 바람직하다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 인간에게, 체중 60 kg당, 1일당 상기 양의 세사민류를 섭취시키거나 또는 투여하기 위해 사용할 수 있다. 상기 총 투여량은, 세사민류의 화합물을 2종 이상 사용하는 경우는, 이들의 합계량이다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 계속해서 섭취 또는 투여되는 것이 바람직하다. 세사민류를, 계속적으로 섭취 또는 투여함으로써, 보다 높은 세포 노화 억제 효과를 얻을 수 있을 것으로 기대된다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은, 바람직하게는 1주일 이상, 보다 바람직하게는 4주일 이상, 더욱 바람직하게는 8주일 이상, 특히 바람직하게는 12주일 이상 계속해서 섭취 또는 투여되는 것이 바람직하다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물을 섭취시키거나 또는 투여하는 대상(투여 대상이고도 할 수도 있음)은 특별히 한정되지 않는다. 바람직하게는 인간 또는 비인간 포유동물이며, 보다 바람직하게는 인간이다.
일 양태에 있어서, 투여 대상으로서, 세포 노화 억제를 필요로 하거나 또는 희망하는 대상 등을 들 수 있다. 이러한 대상으로서, 예컨대, 중장년자 등을 들 수 있다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물은, 중장년자용 세포 노화 억제용 조성물로서 적합하게 사용된다. 중장년자는, 예컨대, 40세 이상의 인간이어도 좋다. 일 양태에 있어서, 중장년자 중에서도, 대상으로서 고령자가 바람직하다. 고령자는, 예컨대, 60세 이상 또는 65세 이상의 인간이어도 좋다. 투여 대상은, 건상인(健常者)이어도 좋다. 본 발명의 조성물은, 예컨대, 세포 노화 억제에 의해 예방 또는 개선을 기대할 수 있는 상태 또는 질환의 예방 등을 목적으로 건상인에 대하여 사용할 수도 있다.
세포 노화 억제의 대상이 되는 세포의 종류는 특별히 한정되지 않고, 예컨대, 섬유아세포, 상피세포, 표피세포, 기저세포, 줄기세포, 지방세포, 신경세포, 근세포, 골결근세포, 평활근세포, 근섬유아세포, 근위성세포, 위성세포, 골아세포, 간세포, 간성세포, 신세포, 간질세포, 혈액세포, 면역계세포, 내피세포, 혈관내피세포, 주피세포, 렌즈세포, 망막세포 등을 들 수 있다. 일 양태에 있어서, 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물은 섬유아세포의 세포 노화 억제를 위해 바람직하게 사용된다. 섬유아세포는 거의 모든 장기에서 조직의 지지, 구조 형성에 필수적인 세포다.
본 발명의 세포 노화 억제용 조성물에는, 예컨대, 「세포 노화 억제」, 「노화 세포화 억제」, 「세포 노화를 예방한다」, 「노화 세포를 만들게 하지 않는다」 및 「노화 세포를 줄인다」로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 또는 2 이상의 기능 표시 등이 붙여져 있어도 좋다.
본 발명의 일 양태에 있어서, 본 발명의 조성물은, 상기 표시가 붙여진 음식품 또는 피부 외용제인 것이 바람직하고, 음식품 또는 화장료인 것이 보다 바람직하며, 음식품인 것이 더욱 바람직하다. 또한 상기 표시는, 상기 기능을 얻기 위해 이용하는 취지의 표시여도 좋다. 상기 표시는, 조성물 자체에 붙여져도 좋고, 조성물의 용기 또는 포장에 붙여져 있어도 좋다.
본 발명은, 이하의 방법도 포함한다.
세사민류의 1종 이상을 투여하고, 세포 노화를 억제하는 방법.
세사민류의 1종 이상을 대상에 투여함으로써, 대상에 있어서 세포 노화를 억제하는 것이 가능해진다.
상기 방법은, 치료적인 방법이어도 좋고, 비치료적인 방법이어도 좋다.
본 발명은, 이하의 용도도 포함한다.
세포 노화를 억제하기 위한, 세사민류의 1종 이상의 용도.
세사민류의 1종 이상은, 세포 노화를 억제하기 위해 사용할 수 있다.
상기 용도는, 치료적인 용도여도 좋고, 비치료적인 용도여도 좋다.
상기 방법 및 용도에 있어서, 세사민류 및 그 바람직한 양태는, 전술한 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물과 동일하다. 세사민류의 1종 이상으로서, 세사민류의 화합물 1종을 사용하여도 좋고, 2종 이상을 사용하여도 좋다. 상기 방법 및 용도에 있어서는, 1일에 1회 이상, 예컨대, 1일 1회∼수회(예컨대 2∼3회), 세사민류의 1종 이상을 대상에 투여하는(섭취시키는) 것이 바람직하다. 일 양태에 있어서, 상기 방법 및 용도에 있어서는, 세사민류를, 경구 투여(섭취)하는 것이 바람직하다. 다른 일 양태에 있어서는, 예컨대, 세사민류를 피부의 세포 노화를 억제하기위해 사용하는 경우에는, 세사민류의 1종 이상을 피부에 적용하는 것이 바람직하다.
상기 용도는, 바람직하게는 인간 또는 비인간 포유동물, 보다 바람직하게는 인간에게 있어서의 용도이다.
상기 방법 및 용도에 있어서는, 원하는 작용을 얻을 수 있는 양(유효량이라고 할 수도 있음)의 세사민류의 1종 이상을 사용하면 좋다. 세사민류의 바람직한 투여량이나 투여 대상 등은 전술한 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물과 동일하다. 세사민류는, 그대로 투여하여도 좋고, 이것을 포함하는 조성물로서 투여하여도 좋다. 예컨대, 전술한 본 발명의 세포 노화 억제용 조성물을 사용하여도 좋다. 일 양태에 있어서는, 세포의 기능 저하, 장기의 기능 저하, 전신의 기능 저하 등의 상태 또는 질환의 예방 또는 개선을 위해, 세사민류의 1종 이상을 사용할 수 있다. 일 양태에 있어서는, 세포 노화를 억제함으로써, 가령에 따른 장기의 기능 저하, 가령에 따른 전신의 기능 저하 등을 예방 또는 개선하기 위해, 세사민류의 1종 이상을 사용할 수 있다.
본 발명은, 세포 노화 억제용 조성물을 제조하기 위한, 세사민류의 1종 이상의 용도도 포함한다. 세포 노화 억제용 조성물 및 그 바람직한 양태 등은, 상기와 동일하다.
실시예
이하, 본 발명을 실시예에 기초하여 보다 구체적으로 설명한다. 또한, 본 발명은 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1>
(피험물질 조제)
세사민류[세사민:에피세사민의 비율(중량비)이 1:1이 되도록 제작한 세사민 및 에피세사민 혼합물, 순도 98%]를, 피험물질로서 사용하였다. 세사민류가 10 mM이 되도록 디메틸술폭시드(DMSO)에 용해하고, 세사민류의 종농도가 0.1, 0.3, 1, 3 또는 10 μM이 되도록 배지[10% 소태아 혈청(FBS), 1% 페니실린-스트렙토마이신 혼합 용액(Penicillin-Streptomycin mixed solution) 첨가 둘베코 개변 이글 배지(DMEM)]에서 희석하여, 피험물질 함유 배지로 하였다. DMSO만 용해한 배지를 비첨가 배지로 하였다.
(세포 배양)
정상 인간 섬유아세포(Thermo Fishsher Scientific사 제조, C0135C)는, 배지(10% FBS, 1% 페니실린-스트렙토마이신 혼합 용액 첨가 DMEM)를 이용하여 96웰 블랙 플레이트에 10,000 세포/0.1 mL/웰로 파종하고, CO2 인큐베이터(37℃, 5% CO2, 이하 동일)에서 배양하였다. 24시간 후, 배지를 피험물질 함유 배지(세사민류 농도: 0.1, 0.3, 1, 3 또는 10 μM) 또는 비첨가 배지(0.1 mL)로 교환하고, CO2 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 다음에, 100 μM H2O2(과산화수소) 첨가 DMEM 또는 H2O2 비첨가 DMEM로 교환하고, CO2 인큐베이터에서 1시간 H2O2 처리하여 세포 노화를 유도하였다. 직접적인 항산화 작용에 의한 결과가 얻어지는 것을 피하기 위해서, H2O2 함유 배지를 인산 완충액(PBS)으로 세정한 후, 피험물질 함유 배지 또는 비첨가 배지(0.1 mL)로 교환하고, CO2 인큐베이터에서 세포를 3일간 배양하여, 해석에 이용하였다. 피험물질 함유 배지 또는 비첨가 배지는, H2O2 처리 전 및 처리 후에 피험물질 농도가 동일한 배지를 사용하였다. 예컨대, H2O2 처리 전에 세사민류의 농도가 0.1 μM의 배지에서 배양한 세포는, H2O2 처리 후에도 세사민류의 농도가 0.1 μM의 피험물질 함유 배지에서 배양하였다. H2O2 처리 전에 피험물질 비첨가 배지에서 배양한 세포는, H2O2 처리 후에도 피험물질 비첨가 배지에서 배양하였다.
(SA-β-Gal 활성의 측정)
세포 노화의 마커인 SA-β-Gal의 활성을 측정하였다.
우선, 세포수 정규화 키트[(주)도진카가쿠겐큐쇼]를 이용하여 세포수를 측정하였다. 워킹 용액(Working solution)(염색액을 켄칭 버퍼에서 500배 희석하여 조제)을 각 웰에 100 μL 첨가하고, CO2 인큐베이터에서 30분간 인큐베이트하여 핵염색하고, 형광 플레이트 리더로 형광 강도(세포수 RFU)를 측정하였다(Ex: 350 nm, Em: 461 nm). 다음에, 각 웰을 PBS로 세정한 후, 세포 노화 플레이트 어세이 키트[(주)도진카가쿠겐큐쇼]를 이용하여 SA-β-Gal 활성을 측정하였다. 용해 버퍼 50 μL를 각 웰에 첨가하고, 실온에서 10분간 인큐베이트하여 세포를 용해하였다. 다음에 SPiDER-β Gal 워킹 용액 50 μL를 각 웰에 첨가하고, 37℃에서 30분간 인큐베이트한 후, 형광 플레이트 리더로 형광 강도(SA-β-Gal RFU)를 측정하였다(Ex: 535 nm, Em: 580 nm). SPiDER-β Gal의 형광값을 핵염색의 형광값으로 보정하고, SA-β-Gal 활성을 산출하였다. 유의차 검정은, Student's t-test(vs H2O2 비처리) 또는 Dunnet's test(vs H2O2 처리, 피험물질 비첨가)에 의해 행하였다. 결과를 도 1에 나타낸다.
(결과)
도 1은 과산화수소로 처리하여, 피험물질(세사민류) 첨가 배지 또는 비첨가 배지에서 배양한 정상 인간 섬유아세포의 SA-β-Gal 활성을 나타낸 그래프이다. 도 1에 도시된 결과는, 평균±표준오차(N=3)이다. 도 1 중, # 및 *는 유의차가 있었던 것을 나타낸다[#p<0.05, Student's t-test(vs H2O2 비처리), *p<0.05, Dunnet's test(vs H2O2 처리, 피험물질 비첨가)]. 종축(SA-β-Gal RFU/세포수 RFU)은, 세포당 SA-β-Gal 활성을 나타낸다. 비첨가는 피험물질 비첨가 배지에서 배양한 세포를 나타낸다.
H2O2 처리에 의해, SA-β-Gal 활성이 유의하게 상승하였다. 세사민류는, SA-β-Gal 활성의 증가를 유의하게 억제하였다. 이들 결과로부터, 세사민 및 에피세사민은 세포 노화를 억제하는 효과를 갖는 것으로 나타났다.
Claims (9)
- 세사민류의 1종 이상을 유효 성분으로서 함유하는 세포 노화 억제용 조성물.
- 제1항에 있어서, 세사민류의 1종 이상이, 세사민 및/또는 에피세사민인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 경구용 조성물인 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 음식품인 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 피부 외용제인 조성물.
- 제5항에 있어서, 화장료인 조성물.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 「세포 노화 억제」, 「노화 세포화 억제」, 「세포 노화를 예방한다」, 「노화 세포를 만들게 하지 않는다」 및 「노화 세포의 증가를 억제한다」로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 이상의 표시를 붙인 조성물.
- 세사민류의 1종 이상을 투여하는, 세포 노화를 억제하는 방법.
- 세포 노화를 억제하기 위한, 세사민류의 1종 이상의 용도.
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