KR20000059389A - 신규한 번데기동충하초 균주와 그 종균 및 자실체 재배방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 야생에서 분리한 신규한 번데기 동충하초 균주와 이 균주를 잡균의 오염없이 배양하여 얻은 종균 및 그 자실체의 대량 재배방법에 관한 것으로 야생에서 서식하는 나방류 번데기에서 신규한 동충하초 균주 Cordceps militaris JBARES1를 분리하여 배양한 원균을 잡균 오염없이 종균배양하고 이를 배지에 접종 및 배양하여 발이시킨 후 최적의 생육조건을 유지시켜 동충하초 자실체를 대량 재배하는 뛰어난 효과가 있다.
Description
본 발명은 신규한 번데기 동충하초 균주와 종균 및 그 자실체 재배방법에 관한 것이다. 더욱상세하게는 야생에서 분리한 신규한 동충하초 균주와 이 균주를 배양하여 얻은 종균 및 그 자실체 재배방법에 관한 것이다.
동충하초라는 이름은 원래 겨울에는 곤충의 몸에 있다가 여름에는 풀처럼 나온다는 말로 곤충이나 절지동물, 균류, 고등식물의 종자에 기생하는 모든 균류의 총칭이다. 균학적으로는 자낭균강, 불완전균강, 접합균강에 속하며, 지금까지 알려진 곤충 침입 곰팡이균은 800여종이지만 그중에서 버섯을 형성하는 것으로 대표적인 것이 자낭균류의 동충하초에 속하는 300여종으로 우리나라의 경우 76종이 채집되어 분리동정되었으며 일부 종에서만 그 재배가 시도되고 있을 뿐이다.
동충하초는 땅속에 있는 죽은 유충에 기생하며 그의 단백질을 영양원으로 성장하는 버섯이며 겨울에는 벌레 그대로 땅 위에 있다가 여름이 되면 등가운데를 뚫고 풀이 자라나듯이 나와서 버섯으로 된다. 따라서 동충하초는 그 영양원이 살아 있는 곤충의 단백질이 전환된 것이다. 동충하초균은 잠자리, 벌, 개미, 나방, 흰개미, 파리, 노린재 같은 곤충이외에 거미, 진드기와 같은 곤충에 달라붙어 기생한다. 동충하초도 버섯의 일종이므로 포자로 증식하지만 포자가 떨어지는 곳이면 어느곳에서나 증식되는 것은 아니다. 송이버섯이 살아있는 소나무뿌리, 그것도 자기가 좋은 환경을 가질 수 있는 소나무뿌리에 부착하는 것처럼 동충하초균도 자기가 좋아하는 곤충에 부착한다. 자연계에서 매미동충하초는 매미에 기생한다. 즉 기생하는 대상(곤충)에 의하여 버섯의 형이 여러 가지로 된다. 매미에 기생하는 포자는 나비의 유충이나 번데기에 기생할 수 는 없다. 번데기 동충하초의 포자는 공기중에 떠다니다가 일부 포자가 나비 번데기에 떨어지기도 하고 곤충의 눈과 입을 통하여 그 체내에 들어가게 된다. 여기서부터 동충하초 포자의 체내 침입이 시작된다. 살아있는 곤충은 최고급의 단백질 영양원을 가지고 있다. 포자는 체액의 흐름을 따라서 지방조직이나 단백질을 사용하여 포자는 활발히 증식한다. 포자들이 심장에 도달할 때가 되면 번데기는 죽게되고 포자는 체내에 균사체를 형성하고 균핵을 형성하게 된다. 그리하여 여름이 되면 피부의 약한 곳을 뚫고 균핵에서 자실체가 지상을 향해서 뻗어나가게 된다. 이것이 동충하초의 번식방법이다.
동충하초는 간염에 탁월한 치료효과(중국중약잡지(中國中藥雜誌) 15(1), 53, 1990)가 있고 당뇨병에 걸린 쥐의 혈당을 낮추며(Pharmaceutical Bulletin, 1993) 신장 기능을 활성화(요녕중의 잡지(療寧中醫 雜誌), 1995)시키다는 보고가 있다. 또 동충하초가 인체의 면역기능을 강화시켜 암의 예방 및 치료효과를 나타내고(중초약 잡지(中草藥 雜誌), 1985) 발모에 탁월한 효과를 나타낸다는 보고가 일본에서 있었다(일본피부과학회 잡지 The Journal of Dermatology, 1986). 그외에 예로부터 동충하초는 불로장생의 비약으로 알려져 있어 폐를 보호하고 신장을 튼튼하게 함으로써 영양 강장제로도 알려져 있으며 동충하초에 함유된 충초소, 충초산, 충초다 당에는 항균, 소염, 심장이나 뇌의 혈액순환을 개선하는 만니톨, 항간염, 항유행성 감기와 다종의 바이러스에 대한 저항력 등의 효과가 있다는 것으로 알려져 있다. 또한 동충하초의 영양액은 완전 자연 생물 제품으로 어떠한 호르몬이나 방부제도 들어 있지 않으므로 중년층과 노년층의 보양에 가장 이상적인 영양 식물일 뿐만아니라 정신적 활동이나 육체적 노동을 하는 사람에게 피로를 빨리 회복시켜 주는 효능을 지닌다.
그러나 상기와 같이 인체건강에 유익한 동충하초를 인공재배함에 있어서, 종균 접종시에 오염이 발생하여 종균배양에 어려움이 많았고 발이시에는 발이가 잘 되지 않고 생육조건이 까다로워 많은 양을 수확하지 못하였다.
따라서 본 발명자들은 상기와 같은 문제점을 해결하고자 야생에서 인시류에 발생한 자생 동충하초를 채집하여 자생균주를 분리하였고 이를 액체배양하여 종균을 얻은 후 종균을 번데기 및 곡물배지에 인공접종하여 발이 및 생육시키므로써 번데기 동충하초 자실체를 얻었다.
본 발명의 목적은 야생에서 분리한 신규한 번데기 동충하초 균주를 제공함에 있다. 본 발명의 다른 목적은 상기 신규한 번데기 동충하초 균주로부터 잡균의 오염없이 종균을 배양하고 이 종균을 배지에서 배양하여 동충하초 자실체를 대량 재배하는 방법을 제공함에 있다.
본 발명의 상기 목적은 야생에서 서식하는 나방류 번데기에서 신규한 동충하초 균주를 분리하여 배양한 원균을 종균배양하고 이를 배지에 접종 및 배양하여 발이시킨 후 최적의 생육조건을 유지시켜 동충하초 자실체를 얻으므로써 달성하였다.
이하 본 발명의 구성 및 작용을 설명한다.
도 1은 자생에서 채집한 번데기동충하초를 나타낸 사진도이다.
도 2는 본 발명 신규 균주 Cordceps militaris JBARES1의 균사 생장을 나타낸 사진도이다.
도 3은 본 발명 신규 균주 Cordceps militaris JBARES1의 액체종균 배양을 나타낸 사진도이다.
도 4는 본 발명 신규 균주 Cordceps militaris JBARES1의 발이모습을 나타낸 사진도이다.
도 5는 본 발명 신규 균주 Cordceps militaris JBARES1의 자실체가 생육된 모습을 나타낸 사진도이다.
본 발명은 야생에서 서식하는 나방류 번데기에서 신규한 동충하초 균주를 분리하는 단계; 분리한 원균을 감자 덱스트로스 아가(Potato dextrose agar;PDA)배지에서 배양하는 단계; 배양한 원균을 감자배지 및 곡물추출배지에서 액체배양하여 종균을 준비하는 단계; 동충하초 자실체를 얻기 위한 재배용 배지를 제조하는 단계; 상기 재배배지에 준비한 종균을 접종하고 배양하는 단계; 종균 접종된 재배배지를 발이실로 옮겨 발이시키는 단계 및; 최적의 생육조건을 유지하면서 번데기 동충하초 자실체를 재배하는 단계로 구성된다.
이하 본 발명의 구체적인 방법을 실시예를 들어 단계별로 상세히 설명하고자 하지만 본 발명의 권리범위는 본 실시예에만 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 신규한 동충하초 균주 분리, 종균 배양 및 자실체 재배
제 1단계: 번데기 동충하초 균주수집
야생에서 서식하는 나방류 번데기에서 균주를 분리하였다. 즉, 도 1에서 보는 바와 같이 동충하초 자실체의 길이가 3 ~ 6cm, 직경은 4 ~ 8mm 내외로 2 ~ 4개가 군생을 형성한 나방류 번데기에서 균주를 분리하였다.
제 2단계: 원균배양
상기 제 1단계에서 분리한 원균을 감자 덱스트로스 아가(potato dextrose agar)배지에서 3 ~ 7일간 배양하였다. 도 2에서 보는 바와 같이 원균은 양모상으로 균총을 형성하며 생장하였고 상부는 백색 ~ 연한황색을 띄지만 하부는 백색 ~ 짙은 황색을 나타냈다. 본 발명에서 얻은 균주는 Cordceps militaris JBARES1로 명명하였고 한국과학기술연구원 생명공학연구소내 유전자은행에 1999년 2월 26일에 기탁번호 KCTC 8934P로 기탁하였다.
제 3단계; 원균 Cordceps militaris JBARES1 종균배양
본 단계에서는 도 3에서 보는 바와 같이 감자배지 및 곡무추출배지(현미, 대두, 옥수수 및 호밀 등)를 함유하는 삼각플라스크에 상기 제 2단계에서 배양한 원균 Cordceps militaris JBARES1의 배지 추출물을 넣고 3 ~ 10일 동안 액체 진탕배양하였다. 이때 종균배양시에는 진탕배양기를 이용하였으며 25℃, 150rpm에서 암배양하였다. 종균은 흰색 ~ 연한 회색을 나타냈다.
제 4단계; 동충하초 재배배지에 Cordceps militaris JBARES1
종균접종
재배용 용기는 유리, PP(propylene bottle) 배양병을 사용하였으며 배지재료는 번데기, 현미, 옥수수, 호밀 및 쌀을 사용하였다. 재배용 용기내에 30 ~ 70g 정도의 배지재료를 넣고 습도를 60 ~ 80%로 조절한 후 121℃, 1.5kg/cm2에서 20 ~ 40분 멸균한 다음 25℃로 냉각 후 무균실에서 Cordceps militaris JBARES1의 액체종균 5 ~ 15mL을 접종하였다.
제 5단계; 동충하초 균사체 배양
상기 제 4단계에서 Cordceps militaris JBARES1 종균을 접종한 용기를 온도 25℃, 공중습도 60 ~ 80%를 유지시키며 10 ~ 20일간 암배양하였다. 배양시 Cordceps militaris JBARES1 종균은 3일정도면 균사가 활착되어 배지내 침투되었다.
제 6단계; 동충하초 자실체 발이
상기 5단계에서 배양완성된 용기를 발이실로 옮겨서 온도 15 ~ 20℃, 공중습도 70 ~ 90% 및 광 1000 ~ 3000Lux의 발이조건을 유지시켜 5 ~ 10일 사이에 도 4에서 보는 바와 같은 동충하초가 발이되었다. 발이시 균총은 흰색에서 황색 ~ 적색으로 변하였고 약 50 ~ 1000개가 고루 발이되었다.
제 7단계; 동충하초 자실체 생육
상기 6단계에서 발이되어 나오기 시작하는 충초를 온도 15 ~ 20℃, 용기내 습도 70 ~ 90% 및 광 1000 ~ 3000Lux로 생육조건을 유지시키면서 10 ~ 40일간 생육시켰다. 생육결과, 도 5에서 보는 바와 같이 자실체수는 평균 10 ~ 50개, 무게 14.7g/병, 대길이 45mm, 대굵기 4.0mm이였으며 색은 황색 ~ 적색이였다.
본 발명은 상기 실시예를 통하여 설명한 바와 같이 신규한 번데기 동충하초 균주 Cordceps militaris JBARES1를 분리하였고 이 균주는 종균 배양시에 오염이 거의 없어 종균 수득이 용이하고 배양시에 균체형성량 및 발이량이 많아 자실체를 대량으로 재배할 수 있는 뛰어난 효과가 있으므로 버섯재배 농업상 매우 유용한 발명인 것이다.
Claims (3)
- 야생에서 분리한 번데기 동충하초 Cordceps militaris JBARES1 균주(KCTC 8934P).
- 제 1항 기재의 균주 Cordceps militaris JBARES1를 감자 고체배지에서 3 ~ 7일간 배양한 후 이 균주 배지추출물을 감자배지 또는 곡물추출배지에서 15 ~ 25℃의 온도에서 120 ~ 180rpm으로 3 ~ 10일간 진탕배양하여 얻는 것을 특징으로 하는 Cordceps militaris JBARES1 종균.
- 제 2항 기재의 종균을 번데기, 현미, 옥수수, 호밀, 쌀이 함유된 인공배양배지에서 배양하여 균사 활착시킨 후 자실체를 발이시키고 온도 15 ~ 20℃, 습도 70 ~ 90%, 광 1000 ~ 3000Lux를 유지시키면서 재배함을 특징으로 하는 동충하초 자실체 재배방법.
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