Nothing Special   »   [go: up one dir, main page]

KR101962483B1 - 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자 - Google Patents

혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자 Download PDF

Info

Publication number
KR101962483B1
KR101962483B1 KR1020137013908A KR20137013908A KR101962483B1 KR 101962483 B1 KR101962483 B1 KR 101962483B1 KR 1020137013908 A KR1020137013908 A KR 1020137013908A KR 20137013908 A KR20137013908 A KR 20137013908A KR 101962483 B1 KR101962483 B1 KR 101962483B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ser
val
leu
thr
seq
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
KR1020137013908A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20130108407A (ko
Inventor
도모유키 이가와
젠지로 삼페이
데츠오 고지마
데츠히로 소에다
아츠시 무토
다케히사 기타자와
유키코 니시다
치후미 이마이
츠카사 스즈키
가즈타카 요시하시
Original Assignee
추가이 세이야쿠 가부시키가이샤
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 filed Critical 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤
Publication of KR20130108407A publication Critical patent/KR20130108407A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101962483B1 publication Critical patent/KR101962483B1/ko
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/36Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood coagulation factors
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52Constant or Fc region; Isotype
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565Complementarity determining region [CDR]
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75Agonist effect on antigen
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Magnetically Actuated Valves (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

혈액응고 제IX 인자/활성화 혈액응고 제IX 인자 및 혈액응고 제X 인자의 쌍방에 특이적으로 결합하여, 혈액응고 제VIII 인자의 보조인자 기능, 즉 활성화 혈액응고 제IX 인자에 의한 혈액응고 제X 인자 활성화를 촉진하는 기능을 대체하는 기능을 갖는 각종의 이중특이성 항체를 제작하였다. 이들 항체 중에서, 혈액응고 제VIII 인자의 기능을 대체하는 활성이 높은 다중특이성 항원 결합 분자를 찾아내는데 성공하였다.

Description

혈액응고 제VIII 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자{Multi-specific antigen-binding molecule having alternative function to function of blood coagulation factor VIII}
본 발명은 효소반응을 증강하는 보조인자인 혈액응고 제VIII 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자 및 그 분자를 유효성분으로서 함유하는 의약 조성물에 관한 것이다.
혈우병 A는 선천성의 혈액응고 제VIII 인자(F.VIII)의 기능 저하 또는 결손에 의한 출혈 이상증이다. 혈우병 A 환자의 출혈에 대해서는, F.VIII 제제가 통상 투여된다(on-demand 투여). 또한, 최근 들어서는, 출혈을 방지하기 위해, 예방적으로 F.VIII 제제가 투여된다(예방 투여, 비특허문헌 1 및 2). F.VIII 제제의 혈중 반감기는 약 12~16시간 정도이다. 그 때문에, 계속적인 예방을 위해서는, 주에 3회 F.VIII 제제가 환자에게 투여된다(비특허문헌 3 및 4). 또한, on-demand투여에 있어서는, 재출혈을 방지하기 위해, F.VIII 제제를 필요에 따라 일정 간격으로 추가 투여한다. 또한, F.VIII 제제의 투여는 정맥내에 실시된다. 따라서, F.VIII 제제와 비교하여 투여의 부담이 적은 약제가, 강하게 요구되고 있었다.
가끔, F.VIII에 대한 항체(인히비터)가 혈우병 환자에게 발생한다. 인히비터는 F.VIII 제제의 효과를 없앤다. 인히비터가 발생한 환자(인히비터 환자)의 출혈에 대해서는 바이패스 제제가 투여된다. 그들의 작용 메커니즘은, F.VIII의 기능, 즉 활성화 혈액응고 제IX 인자(F.IXa)에 의한 혈액응고 제X 인자(F.X)의 활성화를 촉매하는 기능에 비의존적이다. 그 때문에, 바이패스 제제가 출혈을 충분히 멈출 수 없는 케이스가 있다. 따라서, 인히비터의 존재에 좌우되지 않으며, 또한 F.VIII의 기능을 대체하는 약제가, 강하게 요구되고 있었다.
최근, 그 해결수단으로서, F.VIII의 기능을 대체하는 항체 및 그으 사용이 개시되었다(특허문헌 1, 2 및 3). 그 항체는, 항F.VIII 자기 항체를 갖는 후천성 혈우병, 및 폰 빌레브란트 인자(vWF)의 기능 이상 또는 결손에 기인하는 폰 빌레브란트병에도 유효하다고 생각되나, 반드시 F.VIII의 기능을 대체하는 활성이 충분한 것은 아니었다. 이에 보다 높은 지혈효과를 나타내는 약제로서, 그 항체보다도 더욱 F.VIII의 기능을 대체하는 활성이 높은 항체가 요망되고 있었다.
WO 2005/035754 WO 2005/035756 WO 2006/109592
Blood 58, 1-13 (1981) Nature 312, 330-337(1984) Nature 312, 337-342(1984) Biochim.Biophys.Acta 871, 268-278(1986)
본 발명은 효소반응을 증강하는 보조인자인 F.VIII의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자의 제공을 과제로 한다.
본 발명자들은 예의 연구를 행한 결과, F.IX/F.IXa 및 F.X 양쪽에 특이적으로 결합하여, F.VIII의 보조인자 기능, 즉 F.IXa에 의한 F.X 활성화를 촉진하는 기능을 대체하는 기능(F.Xa 생산 촉진 기능)을 갖는 각종의 이중특이성 항체 중에서, 공지의 것보다도 우수한 F.Xa 생산 촉진 활성을 갖는 이중특이성 항체를 발견하는 것에 성공하였다.
또한, F.VIII의 기능을 대체하는 활성을 갖는 이중특이성 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성의 향상에 중요한 당해 항체의 아미노산 서열의 위치를 발견하는 것에 성공하여, 당해 아미노산을 치환함으로써, F.VIII 기능을 대체하는 활성이 더욱 상승한 이중특이성 항체를 취득하는 것에 성공하였다. 또한, F.VIII의 기능을 대체하는 활성이 높을뿐 아니라, F.Xase 저해작용이 낮다고 하는, 양쪽의 성질을 충족시키는 것이 매우 곤란한 이중특이성 항체를 취득하는 것에 성공하였다.
즉 본 발명은 효소반응을 증강하는 보조인자인 F.VIII의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자 및 그 분자를 유효성분으로서 포함하는 의약 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 이하에 관한 것이다.
〔1〕혈액응고 제IX 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제IX 인자를 인식하는 제1 항원 결합 부위, 및 혈액응고 제X 인자를 인식하는 제2 항원 결합 부위를 포함하는, 혈액응고 제VIII 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자로서, 그 혈액응고 제VIII 인자의 기능을 대체하는 기능이, 서열번호:165와 166으로 이루어지는 H쇄 및 서열번호:167로 이루어지는 공통 L쇄를 갖는 이중특이성 항체(hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ)와 비교하여 높은 활성화 혈액응고 제X 인자(F.Xa) 생산 촉진 활성에 기인하는 기능인, 다중특이성 항원 결합 분자.
〔2〕혈액응고 제IX 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제IX 인자를 인식하는 제1 항원 결합 부위를 포함하는 제1 폴리펩티드 및 혈액응고 제IX 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제IX 인자를 인식하는 제3 항원 결합 부위를 포함하는 제3 폴리펩티드, 및 혈액응고 제X 인자를 인식하는 제2 항원 결합 부위를 포함하는 제2 폴리펩티드 및 혈액응고 제X 인자를 인식하는 제4 항원 결합 부위를 포함하는 제4 폴리펩티드를 포함하는, 〔1〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자.
〔3〕제1 폴리펩티드와 제3 폴리펩티드가 각각 혈액응고 제IX 인자 또는 활성화 혈액응고 제IX 인자에 대한 항체의 H쇄 또는 L쇄의 항원 결합 부위를 포함하고, 제2 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 각각 혈액응고 제X 인자에 대한 항체의 H쇄 또는 L쇄의 항원 결합 부위를 포함하는, 〔2〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자.
〔4〕제1 폴리펩티드의 항원 결합 부위가 하기 (a1)~(a11)로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 CDR을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하고, 제2 폴리펩티드의 항원 결합 부위가 하기 (b1)~(b11)로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 CDR을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 갖는 〔3〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자:
(a1) 서열번호:75, 76, 77(Q1의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a2) 서열번호:78, 79, 80(Q31의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a3) 서열번호:81, 82, 83(Q64의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a4) 서열번호:84, 85, 86(Q85의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a5) 서열번호:87, 88, 89(Q153의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a6) 서열번호:90, 91, 92(Q354의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a7) 서열번호:93, 94, 95(Q360의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a8) 서열번호:96, 97, 98(Q405의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a9) 서열번호:99, 100, 101(Q458의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a10) 서열번호:102, 103, 104(Q460의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a11) 서열번호:105, 106, 107(Q499의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b1) 서열번호:108, 109, 110(J232의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b2) 서열번호:111, 112, 113(J259의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b3) 서열번호:114, 115, 116(J268의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b4) 서열번호:117, 118, 119(J300의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b5) 서열번호:120, 121, 122(J321의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b6) 서열번호:123, 124, 125(J326의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b7) 서열번호:126, 127, 128(J327의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b8) 서열번호:129, 130, 131(J339의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b9) 서열번호:132, 133, 134(J344의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b10) 서열번호:135, 136, 137(J346의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b11) 서열번호:174, 175, 176(J142의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위.
〔5〕제1 폴리펩티드의 항원 결합 부위가 하기 (a1)~(a11)로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 가변영역을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하고, 제2 폴리펩티드의 항원 결합 부위가 하기 (b1)~(b11)로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 가변영역을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 갖는 〔3〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자:
(a1) 서열번호:35(Q1의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a2) 서열번호:36(Q31의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a3) 서열번호:37(Q64의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a4) 서열번호:38(Q85의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a5) 서열번호:39(Q153의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a6) 서열번호:40(Q354의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a7) 서열번호:41(Q360의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a8) 서열번호:42(Q405의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a9) 서열번호:43(Q458의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a10) 서열번호:44(Q460의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a11) 서열번호:45(Q499의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b1) 서열번호:46(J232의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b2) 서열번호:47(J259의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b3) 서열번호:48(J268의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b4) 서열번호:49(J300의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b5) 서열번호:50(J321의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b6) 서열번호:51(J326의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b7) 서열번호:52(J327의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b8) 서열번호:53(J339의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b9) 서열번호:54(J344의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b10) 서열번호:55(J346의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b11) 서열번호:172(J142의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위.
〔6〕제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드에 포함되는 항원 결합 부위가 하기 (c1)~(c10)으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 L쇄 CDR을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하는, 〔3〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자:
(c1) 서열번호:138, 139, 140(L2의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c2) 서열번호:141, 142, 143(L45의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c3) 서열번호:144, 145, 146(L248의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c4) 서열번호:147, 148, 149(L324의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c5) 서열번호:150, 151, 152(L334의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c6) 서열번호:153, 154, 155(L377의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c7) 서열번호:156, 157, 158(L404의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c8) 서열번호:159, 160, 161(L406의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c9) 서열번호:137, 138, 139(L408의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c10) 서열번호:177, 178, 179(L180의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위.
〔7〕제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드에 포함되는 항원 결합 부위가 하기 (c1)~(c10)으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 L쇄 가변영역을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하는, 〔3〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자:
(c1) 서열번호:56(L2의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c2) 서열번호:57(L45의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c3) 서열번호:58(L248의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c4) 서열번호:59(L324의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c5) 서열번호:60(L334의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c6) 서열번호:61(L377의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c7) 서열번호:62(L404의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c8) 서열번호:63(L406의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c9) 서열번호:64(L408의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c10) 서열번호:173(L180의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위.
〔8〕추가로 제1 및 제2 폴리펩티드가 항체의 H쇄 정상영역을 포함하고, 제3 및 제4 폴리펩티드가 항체의 L쇄 정상영역을 포함하는, 〔3〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자.
〔9〕제1 및 제2 폴리펩티드가 항체의 H쇄 정상영역을 포함하고, 제3 및 제4 폴리펩티드가 항체의 L쇄 정상영역을 포함하는 〔3〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자로서, 또한 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 공통 L쇄인, 〔3〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자.
〔10〕제1 폴리펩티드가 하기 (d1)~(d6)의 그룹으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열 또는 하기 (d7)~(d9)의 그룹으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 항체의 H쇄 정상영역을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 상기 제1 폴리펩티드와는 상이한 그룹으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 항체의 H쇄 정상영역을 포함하는, 〔8〕 또는 〔9〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자:
(d1) 서열번호:65(G4k)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d2) 서열번호:66(z7)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d3) 서열번호:67(z55)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d4) 서열번호:68(z106)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d5) 서열번호:69(z118)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d6) 서열번호:70(z121)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d7) 서열번호:71(G4h)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d8) 서열번호:72(z107)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d9) 서열번호:73(z119)에 기재된 H쇄 정상영역.
〔11〕제3과 제4 폴리펩티드가 하기 (e)의 아미노산 서열로 이루어지는 항체의 L쇄 정상영역을 포함하는, 〔8〕 또는 〔9〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자:
(e) 서열번호:74(k)에 기재된 L쇄 정상영역.
〔12〕제1 폴리펩티드가 하기 (a1)~(a14)로부터 선택되는 어느 하나의 항체 H쇄를 포함하고, 제2 폴리펩티드가 하기 (b1)~(b12)로부터 선택되는 어느 하나의 항체 H쇄를 포함하며, 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 하기 (c1)~(c10)으로부터 선택되는 어느 하나의 항체 L쇄를 포함하는, 〔8〕 또는 〔9〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자:
(a1) 서열번호:1(Q1-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a2) 서열번호:2(Q31-z7)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a3) 서열번호:3(Q64-z55)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a4) 서열번호:10(Q64-z7)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a5) 서열번호:11(Q85-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a6) 서열번호:12(Q153-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a7) 서열번호:13(Q354-z106)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a8) 서열번호:14(Q360-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a9) 서열번호:15(Q360-z118)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a10) 서열번호:16(Q405-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a11) 서열번호:17(Q458-z106)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a12) 서열번호:18(Q460-z121)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a13) 서열번호:19(Q499-z118)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a14) 서열번호:20(Q499-z121)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b1) 서열번호:4(J268-G4h)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b2) 서열번호:5(J321-G4h)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b3) 서열번호:6(J326-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b4) 서열번호:7(J344-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b5) 서열번호:21(J232-G4h)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b6) 서열번호:22(J259-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b7) 서열번호:23(J300-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b8) 서열번호:24(J327-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b9) 서열번호:25(J327-z119)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b10) 서열번호:26(J339-z119)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b11) 서열번호:27(J346-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b12) 서열번호:170(J142-G4h)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(c1) 서열번호:8(L2-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c2) 서열번호:9(L45-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c3) 서열번호:28(L248-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c4) 서열번호:29(L324-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c5) 서열번호:30(L334-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c6) 서열번호:31(L377-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c7) 서열번호:32(L404-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c8) 서열번호:33(L406-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c9) 서열번호:34(L408-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c10) 서열번호:171(L180-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄.
〔13〕제1 폴리펩티드가, 〔12〕의 (a1)~(a14) 중 어느 하나에 기재된 항체의 H쇄와 (c1)~(c10) 중 어느 하나에 기재된 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항원 결합 부위를 포함하고, 제2 폴리펩티드가, 〔12〕의 (b1)~(b12) 중 어느 하나에 기재된 항체의 H쇄와 (c1)~(c10) 중 어느 하나에 기재된 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항원 결합 부위를 포함하는, 〔1〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자.
〔14〕제1 폴리펩티드가, 하기 (e1)~(e3)으로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 H쇄를 포함하고, 제2 폴리펩티드가 하기 (f1)~(f3)으로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 H쇄를 포함하며, 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 하기 (g1)~(g4)로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 L쇄를 포함하는, 〔8〕 또는 〔9〕에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자:
(e1) 〔12〕의 (a1)~(a14) 중 어느 하나의 항체의 H쇄와 (c1)~(c10) 중 어느 하나에 기재된 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 H쇄,
(e2) (e1)로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 34번 위치, 35번 위치, 49번 위치, 61번 위치, 62번 위치, 96번 위치, 98번 위치, 100번 위치, 100b번 위치 및 102번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환되어 있는 항체의 H쇄,
(e3) (e1)로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 34번 위치의 아미노산 잔기가 이소류신, 35번 위치의 아미노산 잔기가 아스파라긴, 글루타민 또는 세린, 49번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 61번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 62번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 96번 위치의 아미노산 잔기가 세린 또는 트레오닌, 98번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 100번 위치의 아미노산 잔기가 페닐알라닌 또는 티로신, 100b번 위치의 아미노산 잔기가 글리신, 또는, 102번 위치의 아미노산 잔기가 티로신인 항체의 H쇄,
(f1) 〔12〕의 (b1)~(b12) 중 어느 하나의 항체의 H쇄와 (c1)~(c10) 중 어느 하나의 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 H쇄,
(f2) (f1) 중 어느 하나의 항체 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 35번 위치, 53번 위치, 73번 위치, 76번 위치, 96번 위치, 98번 위치, 100번 위치 및 100a번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환되어 있는 항체의 H쇄,
(f3) (f1) 중 어느 하나의 항체 H쇄로서, Kabat 넘버링에 의한 35번 위치의 아미노산 잔기가 아스파라긴산, 53번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 73번 위치의 아미노산 잔기가 리신, 76번 위치의 아미노산 잔기가 글리신, 96번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 98번 위치의 아미노산 잔기가 티로신, 100번 위치의 아미노산 잔기가 티로신, 또는, 100a번 위치의 아미노산 잔기가 히스티딘인 항체의 H쇄,
(g1) 〔12〕의 (a1)~(a14) 중 어느 하나의 항체의 H쇄와 (c1)~(c10) 중 어느 하나의 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 L쇄,
(g2) 〔12〕의 (b1)~(b12) 중 어느 하나의 항체의 H쇄와 (c1)~(c10) 중 어느 하나의 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 L쇄,
(g3) (g1) 및 (g2) 중 어느 하나의 항체의 L쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 27번 위치, 30번 위치, 31번 위치, 32번 위치, 50번 위치, 52번 위치, 53번 위치, 54번 위치, 55번 위치, 92번 위치, 93번 위치, 94번 위치 및 95번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환되어 있는 항체의 L쇄,
(g4) (g1) 및 (g2) 중 어느 하나의 항체의 L쇄로서, Kabat 넘버링에 의한 27번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 30번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 31번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 32번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민, 50번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌 또는 글루타민, 52번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 53번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 54번 위치의 아미노산 잔기가 리신, 55번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 92번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 93번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 94번 위치의 아미노산 잔기가 프롤린, 또는, 95번 위치의 아미노산 잔기가 프롤린인 항체의 L쇄.
〔15〕다중특이성 항원 결합 분자가 다중특이성 항체인, 〔1〕~〔14〕 중 어느 하나에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자.
〔16〕이하의 (a)~(u) 중 어느 하나에 기재된 이중특이성 항체:
(a) 제1 폴리펩티드가 서열번호:1에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:4에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q1-G4k/J268-G4h/L45-k),
(b) 제1 폴리펩티드가 서열번호:1에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:5에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q1-G4k/J321-G4h/L45-k),
(c) 제1 폴리펩티드가 서열번호:2에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:6에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:8에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q31-z7/J326-z107/L2-k),
(d) 제1 폴리펩티드가 서열번호:3에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:7에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z55/J344-z107/L45-k),
(e) 제1 폴리펩티드가 서열번호:10에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:6에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z7/J326-z107/L334-k),
(f) 제1 폴리펩티드가 서열번호:10에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:7에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z7/J344-z107/L406-k),
(g) 제1 폴리펩티드가 서열번호:11에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:4에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q85-G4k/J268-G4h/L406-k),
(h) 제1 폴리펩티드가 서열번호:11에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:5에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q85-G4k/J321-G4h/L334-k),
(i) 제1 폴리펩티드가 서열번호:12에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q153-G4k/J232-G4h/L406-k),
(j) 제1 폴리펩티드가 서열번호:13에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:22에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:29에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q354-z106/J259-z107/L324-k),
(k) 제1 폴리펩티드가 서열번호:14에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q360-G4k/J232-G4h/L406-k),
(l) 제1 폴리펩티드가 서열번호:15에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:23에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q360-z118/J300-z107/L334-k),
(m) 제1 폴리펩티드가 서열번호:16에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:28에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q405-G4k/J232-G4h/L248-k),
(n) 제1 폴리펩티드가 서열번호:17에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:27에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:34에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q458-z106/J346-z107/L408-k),
(o) 제1 폴리펩티드가 서열번호:18에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:25에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q460-z121/J327-z119/L334-k),
(p) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:24에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J327-z107/L334-k),
(q) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:24에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:31에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J327-z107/L377-k),
(r) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:27에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:28에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J346-z107/L248-k),
(s) 제1 폴리펩티드가 서열번호:20에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:25에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:32에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z121/J327-z119/L404-k),
(t) 제1 폴리펩티드가 서열번호:20에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:26에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:31에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z121/J339-z119/L377-k),
(u) 제1 폴리펩티드가 서열번호:12에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:170에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:171에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q153-G4k/J142-G4h/L180-k).
〔17〕〔1〕~〔15〕 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자 또는 〔16〕에 기재된 이중특이성 항체를 코드하는 핵산.
〔18〕〔17〕에 기재된 핵산이 삽입된 벡터.
〔19〕〔17〕에 기재된 핵산 또는 〔18〕에 기재된 벡터를 포함하는 세포.
〔20〕〔19〕에 기재된 세포를 배양함으로써, 〔1〕~〔15〕 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자 또는 〔16〕에 기재된 이중특이성 항체를 제조하는 방법.
〔21〕〔1〕~〔15〕 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자 또는 〔16〕에 기재된 이중특이성 항체, 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 의약 조성물.
〔22〕출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료에 사용되는 의약 조성물인, 〔21〕에 기재된 조성물.
〔23〕출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환이, 혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환인, 〔22〕에 기재된 조성물.
〔24〕혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이 혈우병 A인, 〔23〕에 기재된 조성물.
〔25〕혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이, 혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자에 대한 인히비터가 출현하고 있는 질환인, 〔23〕에 기재된 조성물.
〔26〕혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이 후천성 혈우병인, 〔23〕에 기재된 조성물.
〔27〕혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이 폰 빌레브란트병인, 〔23〕에 기재된 조성물.
〔28〕〔1〕~〔15〕 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자 또는 〔16〕에 기재된 이중특이성 항체, 또는, 〔21〕~〔27〕 중 어느 한 항에 기재된 조성물을 투여하는 공정을 포함하는, 출혈, 출혈을 수반하는 질환 또는 출혈에 기인하는 질환을 예방 및/또는 치료하는 방법.
〔29〕적어도〔1〕~〔15〕 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자 또는 〔16〕에 기재된 이중특이성 항체, 또는 〔21〕~〔27〕 중 어느 한 항에 기재된 조성물을 포함하는, 〔28〕에 기재된 예방 및/또는 치료하는 방법에 사용하기 위한 키트.
또한 본 발명은 이하에 관한 것이다.
〔30〕〔1〕~〔15〕 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자 또는 〔16〕에 기재된 이중특이성 항체, 또는, 〔21〕~〔27〕 중 어느 한 항에 기재된 조성물의, 출혈, 출혈을 수반하는 질환 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료제의 제조에 있어서의 사용.
〔31〕출혈, 출혈을 수반하는 질환 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료용의, 〔1〕~〔15〕 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자 또는 〔16〕에 기재된 이중특이성 항체, 또는, 〔21〕~〔27〕 중 어느 한 항에 기재된 조성물.
또한 본 발명은 효소반응을 증강하는 보조인자인 F.VIII의 기능을 대체하는 기능을 갖는 이중특이성 항체 및 그 항체를 유효성분으로서 포함하는 의약 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 이하에 관한 것이다.
〔32〕혈액응고 제IX 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제IX 인자를 인식하는 제1 항원 결합 부위, 및 혈액응고 제X 인자를 인식하는 제2 항원 결합 부위를 포함하는, 혈액응고 제VIII 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 이중특이성 항체로서, 이하의 (a)~(u) 중 어느 하나에 기재된 이중특이성 항체;
(a) 제1 폴리펩티드가 서열번호:1에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:4에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q1-G4k/J268-G4h/L45-k),
(b) 제1 폴리펩티드가 서열번호:1에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:5에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q1-G4k/J321-G4h/L45-k),
(c) 제1 폴리펩티드가 서열번호:2에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:6에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:8에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q31-z7/J326-z107/L2-k),
(d) 제1 폴리펩티드가 서열번호:3에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:7에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z55/J344-z107/L45-k),
(e) 제1 폴리펩티드가 서열번호:10에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:6에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z7/J326-z107/L334-k),
(f) 제1 폴리펩티드가 서열번호:10에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:7에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z7/J344-z107/L406-k),
(g) 제1 폴리펩티드가 서열번호:11에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:4에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q85-G4k/J268-G4h/L406-k),
(h) 제1 폴리펩티드가 서열번호:11에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:5에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q85-G4k/J321-G4h/L334-k),
(i) 제1 폴리펩티드가 서열번호:12에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q153-G4k/J232-G4h/L406-k),
(j) 제1 폴리펩티드가 서열번호:13에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:22에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:29에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q354-z106/J259-z107/L324-k),
(k) 제1 폴리펩티드가 서열번호:14에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q360-G4k/J232-G4h/L406-k),
(l) 제1 폴리펩티드가 서열번호:15에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:23에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q360-z118/J300-z107/L334-k),
(m) 제1 폴리펩티드가 서열번호:16에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:28에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q405-G4k/J232-G4h/L248-k),
(n) 제1 폴리펩티드가 서열번호:17에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:27에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:34에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q458-z106/J346-z107/L408-k),
(o) 제1 폴리펩티드가 서열번호:18에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:25에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q460-z121/J327-z119/L334-k),
(p) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:24에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J327-z107/L334-k),
(q) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:24에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:31에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J327-z107/L377-k),
(r) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:27에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:28에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J346-z107/L248-k),
(s) 제1 폴리펩티드가 서열번호:20에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:25에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:32에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z121/J327-z119/L404-k),
(t) 제1 폴리펩티드가 서열번호:20에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:26에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:31에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z121/J339-z119/L377-k),
(u) 제1 폴리펩티드가 서열번호:12에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:170에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:171에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q153-G4k/J142-G4h/L180-k).
〔33〕〔32〕에 기재된 이중특이성 항체를 코드하는 핵산.
〔34〕〔33〕에 기재된 핵산이 삽입된 벡터.
〔35〕〔33〕에 기재된 핵산 또는 〔34〕에 기재된 벡터를 포함하는 세포.
〔36〕〔35〕에 기재된 세포를 배양함으로써, 〔32〕에 기재된 이중특이성 항체를 제조하는 방법.
〔37〕〔32〕에 기재된 이중특이성 항체, 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 의약 조성물.
〔38〕출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료에 사용되는 의약 조성물인, 〔37〕에 기재된 조성물.
〔39〕출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환이, 혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환인, 〔38〕에 기재된 조성물.
〔40〕혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이 혈우병 A인, 〔39〕에 기재된 조성물.
〔41〕혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이, 혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자에 대한 인히비터가 출현하고 있는 질환인, 〔39〕에 기재된 조성물.
〔42〕혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이 후천성 혈우병인, 〔39〕에 기재된 조성물.
〔43〕혈액응고 제VIII 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자의 활성 저하에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이 폰 빌레브란트병인, 〔39〕에 기재된 조성물.
〔44〕〔32〕에 기재된 이중특이성 항체, 또는 〔37〕~〔43〕 중 어느 한 항에 기재된 조성물을 투여하는 공정을 포함하는, 출혈, 출혈을 수반하는 질환 또는 출혈에 기인하는 질환을 예방 및/또는 치료하는 방법.
〔45〕〔32〕에 기재된 이중특이성 항체, 또는 〔37〕~〔43〕 중 어느 한 항에 기재된 조성물을 포함하는, 〔44〕에 기재된 예방 및/또는 치료하는 방법에 사용하기 위한 키트.
〔46〕〔32〕에 기재된 이중특이성 항체, 또는 〔37〕~〔43〕 중 어느 한 항에 기재된 조성물의, 출혈, 출혈을 수반하는 질환 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방/ 또는 치료제의 제조에 있어서의 사용.
〔47〕출혈, 출혈을 수반하는 질환 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료용의, 〔32〕에 기재된 이중특이성 항체, 또는 〔37〕~〔43〕 중 어느 한 항에 기재된 조성물.
본 발명에 의해 효소 및 그 효소의 기질 양쪽을 인식하는 항체로서, F.VIII의 기능을 대체하는 활성이 높은 다중특이성 항원 결합 분자가 제공되었다. 또한, 효소 및 그 효소의 기질 양쪽을 인식하는 항체로서, F.VIII의 기능을 대체하는 활성이 높고, 또한 F.Xase 저해작용이 낮은 다중특이성 항원 결합 분자가 제공되었다. 인간화 항체는 일반적으로, 혈중에서의 안정성이 높고 면역원성도 낮은 것으로 생각되는 것으로부터, 본 발명의 다중특이성 항체는 의약품으로서 매우 유망할 것으로 생각된다.
도 1은 F.Xase 저해작용을 설명한 도면이다. (a) F.VIIIa는 F.IXa와 복합체(F.Xase)를 형성하여, F.X를 활성화한다. (b) 이중특이성 항체는, F.IXa 및 F.X에 결합하여, F.X를 활성화한다. (c) F.VIIIa 및 이중특이성 항체의 양자가, 경합하지 않고 F.X를 활성화한다. (d) 이중특이성 항체가 F.IXa 및/또는 F.X에 결합함으로써, F.Xase와 F.X의 복합체의 형성을 저해한다. (e) 이중특이성 항체가 F.IXa 및/또는 F.X에 결합함으로써, F.Xase의 활성을 저해한다.
도 2는 스크리닝을 설명한 도면이다. 인간 F.IXa 및 인간 F.X에 대한 항체 유전자를 약 200종류씩 제작하여, 동물세포 발현 벡터에 삽입하였다. 항F.IXa 항체와 항F.X 항체의 조합으로서 4만 이상의 이중특이성 항체를 일과성 발현하였다. F.Xa 생산 촉진 활성 및 F.Xase 저해작용을 평가하여, F.Xa 생산 촉진 활성이 높고 F.Xase 저해작용이 낮은 이중특이성 항체를 스크리닝하였다. 추가로 필요에 따라 아미노산 치환을 행함으로써, 프로토타입 항체를 제작하였다.
도 3은 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ, Q1-G4k/J268-G4h/L45-k, Q1-G4k/J321-G4h/L45-k, Q31-z7/J326-z107/L2-k, Q64-z55/J344-z107/L45-k의 F.Xa 생산 촉진 활성을 나타내는 도면이다. 항체 용액의 농도는 300, 30, 3 ㎍/mL(Human Factor IXa, Novact(등록상표) M, Human Factor X와 항체 용액을 혼합한 후의 농도는 100, 10, 1 ㎍/mL), 효소반응 시간은 10분간, 발색시간은 50분간이다. 결과, 이들 항체는, WO 2006/109592에 기재된 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ와 비교하여, 높은 F.Xa 생산 촉진 활성을 나타내었다.
도 4는 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ, 프로토타입 항체, 및 아미노산 치환을 도입한 개변 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성을 나타내는 도면이다. 항체 용액의 농도는 300, 30, 3 ㎍/mL(Human Factor IXa, Novact(등록상표) M, Human Factor X와 항체 용액을 혼합한 후의 농도는 100, 10, 1 ㎍/mL), 효소반응 시간은 2분간, 발색시간은 20분간이다. 결과, 이들 개변 항체는 프로토타입 항체보다도 높은 F.Xa 생산 촉진 활성을 나타내었다.
도 5는 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ, 프로토타입 항체, 및 아미노산 치환을 도입한 개변 항체의 F.Xase 저해작용을 나타내는 도면이다. hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ, Q1-G4k/J268-G4h/L45-k, Q31-z7/J326-z107/L2-k, Q1-G4k/J321-G4h/L45-k, Q64-z55/J344-z107/L45-k, Q85-G4k/J268-G4h/L406-k, Q85-G4k/J321-G4h/L334-k, Q64-z7/J344-z107/L406-k, Q64-z7/J326-z107/L334-k, Q153-G4k/J142-G4h/L180-k, Q405-G4k/J232-G4h/L248-k, Q360-G4k/J232-G4h/L406-k, Q153-G4k/J232-G4h/L406-k, Q458-z106/J346-z107/L408-k, Q360-z118/J300-z107/L334-k, Q499-z118/J327-z107/L377-k, Q499-z121/J327-z119/L404-k, Q499-z121/J339-z119/L377-k, Q499-z118/J346-z107/L248-k, Q354-z106/J259-z107/L324-k, Q460-z121/J327-z119/L334-k, 및 Q499-z118/J327-z107/L334-k의 F.VIIIa 존재하에 있어서의 F.IXa에 의한 F.X 활성화에 대한 영향을 나타내는 도면이다. 항체의 F.Xase 저해작용은, 항체 첨가 반응액의 흡광도로부터 항체 무첨가 반응액의 흡광도를 뺀 값으로 나타내었다. 항체 용액의 농도는 300, 30 ㎍/mL(Human Factor IXa, F.VIIIa, Human Factor X와 항체 용액을 혼합한 후의 농도는 100, 10 ㎍/mL), 효소반응 시간은 6분간, 발색시간은 14분간이다. 가로축의 F.Xase 저해작용의 값이 플러스로 갈수록, F.Xase 저해작용이 약하다. 결과, WO 2006/109592에 기재된 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ는 강한 F.Xase 저해작용을 나타내었다. 본 발명의 항체 모두, hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ와 비교하여, 약한 F.Xase 저해작용을 나타내거나, 또는 저해작용을 나타내지 않았다.
도 6a는 프로토타입 항체, 및 아미노산 치환을 도입한 개변 항체의 아미노산 서열을 나타낸 도면이다. Ref열에 서열명이 기재되어 있지 않은 경우는 Name열의 가변영역 서열을 기재하였다. Kabat 넘버링으로 해당하는 번호에 아미노산이 없는 개소는 「-(하이푼)」을 표시하였다. Name열과 Ref열의 가변영역을 비교하여, 동일한 아미노산의 개소를 「.(도트)」로서 표시하고, 상이한 개소는 Name열의 가변영역의 아미노산을 표시하였다. F.Xa 생산 촉진 활성 향상에 중요한 것이 명백해진 아미노산은 테두리를 둘러서 표시하였다.
도 6b는 도 6a의 계속되는 도면이다.
도 6c는 도 6b의 계속되는 도면이다.
도 6d는 도 6c의 계속되는 도면이다.
본 명세서 중에 기재되는 다중특이성 항원 결합 분자란, 적어도 2종류의 상이한 항원에 대해 특이적으로 결합할 수 있는 제1 항원 결합 부위와 제2 항원 결합 부위를 포함한다. 제1 항원 결합 부위와 제2 항원 결합 부위는, 각각, F.IX 및/또는 F.IXa와 F.X에 대해 결합 활성을 가지고 있으면 특별히 한정되지 않으나, 예를 들면, 항체, Scaffold 분자(항체 유사 분자), 펩티드 등의 항원과의 결합에 필요한 부위, 또는 당해 부위를 포함하는 단편을 들 수 있다. Scaffold 분자란, 타겟 분자에 결합함으로써 기능을 발휘하는 분자로, 하나 이상의 표적 항원에 결합할 수 있는 입체 구조적으로 안정한 폴리펩티드라면, 어떠한 폴리펩티드이더라도 사용할 수 있다. 그러한 폴리펩티드의 예로서는, 예를 들면, 항체 가변영역, 피브로넥틴(WO 2002/032925), Protein A 도메인(WO 1995/001937), LDL 수용체 A 도메인(WO 2004/044011, WO 2005/040229), 안키린(WO 2002/020565) 등 외에, Nygren등(Current Opinion in Structural Biology, 7:463-469(1997), Journal of Immunol Methods, 290:3-28(2004)), Binz등(Nature Biotech 23:1257-1266(2005)), Hosse등(Protein Science 15:14-27(2006))에 기재된 분자를 들 수 있다. 또한, Curr Opin Mol Ther. 2010 Aug;12(4):487-95.나 Drugs. 2008;68(7):901-12.에 기재되어 있는 표적 항원에 결합할 수 있는 펩티드 분자를 사용하는 것도 가능하다.
본 발명에 있어서, 다중특이성 항원 결합 분자로서는, 적어도 2종류의 상이한 항원과 결합할 수 있는 분자라면 특별히 한정되지 않으나, 예를 들면, 항체나 Scaffold 분자 및 이들의 단편 등의 상기 항원 결합 부위를 포함하는 폴리펩티드, 핵산분자나 펩티드로 이루어지는 앱타머 등을 들 수 있고, 단일 분자여도 되고 이들의 다량체여도 된다. 바람직한 다중특이성 항원 결합 분자로서는, 적어도 2개의 상이한 항원에 대해 특이적으로 결합할 수 있는 다중특이성 항체를 들 수 있다. 본 발명의 F.VIII의 기능을 대체하는 활성을 갖는 항체에 있어서는, 특히 바람직한 항체로서, 2개의 상이한 항원에 대해 특이적으로 결합할 수 있는 이중특이성 항체(bispecific antibody; BsAb)(이중특이성 항체라 불리는 경우도 있다)를 들 수 있다.
본 발명에 있어서 「공통 L쇄」란, 상이한 2종 이상의 H쇄와 회합하여, 각각의 항원에 대해 결합능을 나타낼 수 있는 L쇄이다. 여기서, 「상이한 H쇄」란, 바람직하게는 상이한 항원에 대한 항체의 H쇄를 가리키나, 그것에 한정되지 않고, 아미노산 서열이 서로 상이한 H쇄를 의미한다. 공통 L쇄는, 예를 들면 WO 2006/109592에 기재된 방법에 따라 취득할 수 있다.
본 발명에 있어서의 다중특이성 항원 결합 분자(바람직하게는 이중특이성 항체)는, 2종 이상의 상이한 항원에 대해 특이성을 갖는 항체 또는 항체 단편으로 이루어지는 분자이다. 본 발명의 항체는 특별히 제한되지 않으나, 단일클론 항체인 것이 바람직하다. 본 발명에서 사용되는 단일클론 항체로서는, 인간, 마우스, 랫트, 햄스터, 토끼, 양, 낙타, 원숭이 등의 동물 유래의 단일클론 항체 뿐 아니라, 키메라 항체, 인간화 항체, bispecific 항체 등 인위적으로 개변한 유전자 재조합형 항체도 포함된다.
또한, 본 발명의 다중특이성 항원 결합 분자가 되는 항체의 L쇄는, 상이한 것이어도 되나, 공통의 L쇄를 가지고 있는 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서의 다중특이성 항원 결합 분자는, 유전자 재조합 기술을 사용하여 생산시킨 재조합형 항체인 것이 바람직하다.(예를 들면, Borrebaeck CAK and Larrick JW, THERAPEUTIC MONOCLONAL ANTIBODIES, Published in the United Kingdom by MACMILLAN PUBLISHERS LTD, 1990 참조). 재조합형 항체는, 그것을 코드하는 DNA를 하이브리도마, 또는 항체를 생산하는 감작 림프구 등의 항체 생산 세포로부터 클로닝하여, 적당한 벡터에 삽입하고, 이것을 숙주(숙주세포)에 도입하여 생산시킴으로써 얻을 수 있다.
또한, 본 발명에 있어서의 항체에는, 전체 항체 뿐 아니라 항체 단편이나 저분자화 항체, 및 항체 수식물이 포함되어도 된다.
예를 들면 항체 단편이나 저분자화 항체로서는, 디아바디(diabody;Db), 선형 항체, 단일 사슬 항체(이하, scFv라고도 기재한다) 분자 등이 포함된다. 여기서, 「Fv」 단편은 최소의 항체 단편으로, 완전한 항원 인식 부위와 결합 부위를 포함한다.
「Fv」 단편은 하나의 H쇄 가변영역(VH) 및 L쇄 가변영역(VL)이 비공유 결합에 의해 강하게 연결된 다이머(VH-VL 다이머)이다. 각 가변영역의 3개의 상보가닥 결정영역(complementarity determining region; CDR)이 상호작용하여, VH-VL 다이머의 표면에 항원 결합 부위를 형성한다. 6개의 CDR이 항체에 항원 결합 부위를 부여하고 있다. 그러나, 하나의 가변영역(또는, 항원에 특이적인 3개의 CDR만을 포함하는 Fv의 절반)이더라도, 전체 결합 부위보다도 친화성은 낮으나, 항원을 인식하여, 결합하는 능력을 갖는다.
또한, Fab 단편(F(ab)라고도 불린다)은 추가로, L쇄의 정상영역 및 H쇄의 정상영역(CH1)을 포함한다. Fab' 단편은, 항체의 힌지영역으로부터의 1 또는 그 이상의 시스테인을 포함하는 H쇄 CH1영역의 카르복시 말단 유래의 수 잔기를 부가적으로 갖는 점에서 Fab 단편과 상이하다. Fab'-SH란, 정상영역의 1 또는 그 이상의 시스테인 잔기가 유리(遊離) 티올기를 갖는 Fab'를 나타내는 것이다. F(ab') 단편은, F(ab')2 펩신 소화물의 힌지부의 시스테인에 있어서의 디설피드 결합의 절단에 의해 제조된다. 화학적으로 결합된 그 밖의 항체 단편도 당업자에게는 알려져 있다.
디아바디는, 유전자 융합에 의해 구축된 2가(bivalent)의 저분자화 항체를 가리킨다(Holliger P et al., Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90: 6444-6448 (1993), EP404,097호, WO 93/11161호 등). 디아바디는, 2개의 폴리펩티드 사슬로 구성되는 다이머로, 폴리펩티드 사슬은 각각, 동일한 사슬 중에서 L쇄 가변영역(VL) 및 H쇄 가변영역(VH)이, 서로 결합할 수 없을 정도로 짧은, 예를 들면, 2~12 잔기가 바람직하고, 더욱이 3~10 잔기가 바람직하며, 특히 5 잔기 정도의 링커에 의해 결합되어 있다. 동일 폴리펩티드 사슬 상에 코드되는 VL과 VH는, 그 사이의 링커가 짧기 때문에 단쇄 가변영역 프래그먼트를 형성할 수 없어 이량체를 형성하기 때문에, 디아바디는 2개의 항원 결합 부위를 갖게 된다.
단일 사슬 항체 또는 scFv 항체 단편에는, 항체의 VH 및 VL영역이 포함되고, 이들 영역은 단일 폴리펩티드 사슬 중에 존재한다. 일반적으로, Fv 폴리펩티드는 추가로 VH 및 VL영역 사이에 폴리펩티드 링커를 포함하고 있고, 이것에 의해 scFv는, 항원 결합을 위해 필요한 구조를 형성할 수 있다(scFv의 총설에 대해서는, Pluckthun 『The Pharmacology of Monoclonal Antibodies』Vol.113(Rosenburg and Moore ed(Springer Verlag, New York) pp.269-315, 1994)을 참조). 본 발명에 있어서의 링커는, 그 양단에 연결된 항체 가변영역의 발현을 저해하는 것이 아니라면 특별히 한정되지 않는다.
IgG 타입 이중특이성 항체는 IgG 항체를 생산하는 하이브리도마 2종을 융합함으로써 생성되는 hybrid hybridoma(quadroma)에 의해 분비시킬 수 있다(Milstein C et al. Nature 1983, 305: 537-540). 또한 목적의 2종의 IgG를 구성하는 L쇄 및 H쇄의 유전자, 합계 4종의 유전자를 세포에 도입함으로써 공발현시킴으로써 분비시킬 수 있다.
이때 H쇄의 CH3영역에 적당한 아미노산 치환을 행함으로써 H쇄에 대해서 헤테로 조합의 IgG를 우선적으로 분비시키는 것도 가능하다(Ridgway JB et al. Protein Engineering 1996, 9: 617-621, Merchant AM et al. Nature Biotechnology 1998, 16: 677-681, WO 2006/106905, Davis JH et al. Protein Eng Des Sel. 2010, 4: 195-202.).
또한, L쇄에 관해서는, H쇄 가변영역에 비해 L쇄 가변영역의 다양성이 낮은 것으로부터, 양 H쇄에 결합능을 부여할 수 있는 공통의 L쇄가 얻어지는 것이 기대되어, 본 발명의 항체는, 공통의 L쇄를 갖는 것을 특징으로 하는 것이다. 이 공통 L쇄와 양 H쇄 유전자를 세포에 도입함으로써 IgG를 발현시킴으로써 효율이 좋은 이중특이성 IgG의 발현이 가능해진다.
또한, Fab'를 화학적으로 가교함으로써도 이중특이성 항체를 제작할 수 있다. 예를 들면 한쪽 항체로부터 조제한 Fab'를 o-PDM(ortho-phenylenedi-maleimide)로 말레이미드화하고, 이것과 다른 한쪽의 항체로부터 조제한 Fab'를 반응시킴으로써, 상이한 항체 유래 Fab'끼리를 가교시켜 이중특이성 F(ab')2를 제작할 수 있다(Keler T et al. Cancer Research 1997, 57: 4008-4014). 또한 Fab'-티오니트로안식향산(TNB) 유도체와 Fab'-티올(SH) 등의 항체 단편을 화학적으로 결합하는 방법도 알려져 있다(Brennan M et al. Science 1985, 229: 81-83).
화학가교 대신에 Fos, Jun 등에 유래하는 류신 지퍼(leucine zipper)를 사용하는 것도 가능하다. Fos, Jun은 호모다이머도 형성하는데, 헤테로다이머를 우선적으로 형성하는 것을 이용한다. Fos 류신 지퍼를 부가한 Fab'와 Jun의 그것을 부가한 다른 한쪽의 Fab'를 발현 조제한다. 온화한 조건으로 환원한 단량체 Fab'-Fos, Fab'-Jun을 혼합하여 반응시킴으로써 이중특이성 F(ab')2를 형성할 수 있다(Kostelny SA et al. J of Immunology, 1992, 148: 1547-53). 이 방법은 Fab'에는 한정되지 않고, scFv, Fv 등에 있어서도 응용 가능하다.
또한, IgG-scFv(Protein Eng Des Sel. 2010 Apr;23(4):221-8)나 BiTE 등의 sc(Fv)2(Drug Discov Today. 2005 Sep 15;10(18):1237-44.), DVD-Ig(Nat Biotechnol. 2007 Nov;25(11):1290-7. Epub 2007 Oct 14., MAbs. 2009 Jul;1(4):339-47. Epub 2009 Jul 10.) 등 외(IDrugs 2010, 13:698-700), two-in-one 항체(Science. 2009 Mar 20;323(5921):1610-4., Immunotherapy. 2009 Sep;1(5):749-51.), Tri-Fab나 탠덤 scFv, 디아바디 등의 이중특이성 항체도 알려져 있다(MAbs. 2009 November ; 1(6): 539-547.). 또한 scFv-Fc, scaffold-Fc 등의 분자형을 사용해도, 헤테로 조합의 Fc를 우선적으로 분비시킴으로써(Ridgway JB et al. Protein Engineering 1996, 9: 617-621, Merchant AM et al. Nature Biotechnology 1998, 16: 677-681, WO 2006/106905, Davis JH et al. Protein Eng Des Sel. 2010, 4: 195-202.), 이중특이성 항체를 효율적으로 제작할 수 있다.
디아바디에 있어서도 이중특이성 항체를 제작할 수 있다. 이중특이성 디아바디는 2개의 cross-over scFv 단편의 헤테로 다이머이다. 즉 2종의 항체 A, B 유래의 VH와 VL을 5 잔기 전후의 비교적 짧은 링커로 연결함으로써 제작된 VH (A)-VL (B), VH (B)-VL (A)를 사용하여 헤테로 다이머를 구성함으로써 생성된다(Holliger P et al. Proc of the National Academy of Sciences of the USA 1993, 90: 6444-6448).
이때, 2종의 scFv를 15 잔기 정도의 유연한 비교적 긴 링커로 연결한다(단일 사슬 디아바디:Kipriyanov SM et al. J of Molecular Biology. 1999, 293: 41-56), 적당한 아미노산 치환(knobs-into-holes: Zhu Z et al. Protein Science. 1997, 6: 781-788, VH/VL interface engineering: Igawa T et al. Protein Eng Des Sel. 2010, 8:667-77.)을 행함으로써 목적의 구성을 촉진시키는 것도 가능하다.
2종의 scFv를 15 잔기 정도의 유연한 비교적 긴 링커로 연결함으로써 제작할 수 있는 sc(Fv)2도 이중특이성 항체가 될 수 있다(Mallender WD et al. J of Biological Chemistry, 1994, 269: 199-206).
항체 수식물로서는, 예를 들면, 폴리에틸렌글리콜(PEG) 등의 각종 분자와 결합한 항체를 들 수 있다. 본 발명의 항체에는, 이들 항체 수식물도 포함된다. 본 발명의 항체 수식물에 있어서는, 결합되는 물질은 한정되지 않는다. 이러한 항체 수식물을 얻는 데는, 얻어진 항체에 화학적인 수식을 행함으로써 얻을 수 있다. 이들 방법은 이 분야에 있어서 이미 확립되어 있다.
본 발명의 항체는, 인간 항체, 마우스 항체, 랫트 항체 등을 포함하고, 그 유래는 한정되지 않는다. 또한 키메라 항체나 인간화 항체 등의 유전자 개변 항체여도 된다.
인간 항체의 취득방법은 이미 알려져 있고, 예를 들면, 인간 항체 유전자의 모든 레퍼토리를 갖는 형질전환 동물(transgenic animal)을 목적의 항원으로 면역함으로써 목적의 인간 항체를 취득할 수 있다(국제특허출원 공개번호 WO 93/12227, WO 92/03918,WO 94/02602, WO 94/25585,WO 96/34096, WO 96/33735 참조).
유전자 개변 항체는, 기지의 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 구체적으로는, 예를 들면 키메라 항체는, 면역 동물의 항체의 H쇄, 및 L쇄의 가변영역과, 인간 항체의 H쇄 및 L쇄의 정상영역으로 이루어지는 항체이다. 면역 동물 유래의 항체의 가변영역을 코드하는 DNA를, 인간 항체의 정상영역을 코드하는 DNA와 연결하고, 이것을 발현 벡터에 삽입하고 숙주에 도입하여 생산시킴으로써, 키메라 항체를 얻을 수 있다.
인간화 항체는, 재구성(reshaped) 인간 항체라고도 칭해지는 개변 항체이다. 인간화 항체는, 면역 동물 유래의 항체의 CDR을, 인간 항체의 상보성 결정영역으로 이식함으로써 구축된다. 그 일반적인 유전자 재조합 수법도 알려져 있다(유럽특허출원 공개번호 EP 239400, 국제특허출원 공개번호 WO 96/02576, Sato K et al, Cancer Research 1993, 53: 851-856, 국제특허출원 공개번호 WO 99/51743 참조).
본 발명의 다중특이성 항원 결합 분자는, F.IX 및/또는 F.IXa, 및 F.X를 인식하고, 보조인자의 F.VIII의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자로서, 지금까지 F.VIII의 기능을 대체하는 기능을 갖는 이중특이성 항체로서 공지로 되어 있는 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ(WO 2006/109592에 기재)와 비교하여, 높은 F.Xa 생산 촉진 활성을 갖는 것을 특징으로 한다. 또한, 본 발명의 항체는, 통상, 항F.IXa 항체에 있어서의 가변영역과, 항F.X 항체에 있어서의 가변영역을 포함하는 구조를 갖는다.
즉 본 발명은 F.IX 및/또는 F.IXa를 인식하는 제1 항원 결합 부위, 및 F.X를 인식하는 제2 항원 결합 부위를 포함하는, F.VIII의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자로서, 그 F.VIII의 기능을 대체하는 기능이, 서열번호:165와 166으로 이루어지는 H쇄 및 서열번호:167로 이루어지는 공통 L쇄를 갖는 이중특이성 항체(hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ)와 비교하여 높은 F.Xa 생산 촉진 활성에 기인하는 기능인, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다.
본 발명에 있어서의 다중특이성 항원 결합 분자는, F.IX 및/또는 F.IXa를 인식하는 항원 결합 부위를 포함하는 제1 폴리펩티드 및 제3 폴리펩티드, 및 F.X를 인식하는 항원 결합 부위를 포함하는 제2 폴리펩티드 및 제4 폴리펩티드를 포함한다. 제1 폴리펩티드와 제3 폴리펩티드, 및 제2 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드에는, 항체의 H쇄의 항원 결합 부위와 항체의 L쇄의 항원 결합 부위가 포함된다.
예를 들면 본 발명에 있어서의 다중특이성 항원 결합 분자는, 제1 폴리펩티드와 제3 폴리펩티드가 각각 F.IX 또는 F.IXa에 대한 항체의 H쇄 또는 L쇄의 항원 결합 부위를 포함하고, 제2 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 각각 F.X에 대한 항체의 H쇄 또는 L쇄의 항원 결합 부위를 포함한다.
이때, 제1 폴리펩티드와 제3 폴리펩티드, 및 제2 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드에 포함되는 항체의 L쇄의 항원 결합 부위는, 공통의 L쇄여도 된다.
본 발명에 있어서의 항체의 L쇄의 항원 결합 부위를 포함하는 폴리펩티드는, 바람직하게는, F.IX, F.IXa 및/또는 F.X에 결합하는 항체의 L쇄의 전부 또는 일부의 서열을 포함하는 것이다.
본 발명의 항체의 제1 폴리펩티드의 항원 결합 부위의 바람직한 태양으로서 구체적으로는, 후술하는 실시예에 기재된
Q1의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:75, 76, 77),
Q31의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:78, 79, 80),
Q64의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:81, 82, 83),
Q85의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:84, 85, 86),
Q153의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:87, 88, 89),
Q354의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:90, 91, 92),
Q360의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:93, 94, 95),
Q405의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:96, 97, 98),
Q458의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:99, 100, 101),
Q460의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:102, 103, 104),
Q499의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:105, 106, 107),
의 아미노산 서열로 이루어지는 항원 결합 부위, 또는 이들과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 들 수 있다.
또한, 제2 폴리펩티드의 항원 결합 부위는, 바람직한 태양으로서 구체적으로는, 후술하는 실시예에 기재된
J232의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:108, 109, 110),
J259의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:111, 112, 113),
J268의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:114, 115, 116),
J300의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:117, 118, 119),
J321의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:120, 121, 122),
J326의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:123, 124, 125),
J327의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:126, 127, 128),
J339의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:129, 130, 131),
J344의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:132, 133, 134),
J346의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:135, 136, 137),
J142의 H쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:174, 175, 176),
에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항원 결합 부위, 또는 이들과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 들 수 있다.
즉 본 발명은 제1 폴리펩티드의 항원 결합 부위가 하기 (a1)~(a11)로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 CDR을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하고, 제2 폴리펩티드의 항원 결합 부위가 하기 (b1)~(b11)로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 CDR을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 갖는 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다:
(a1) 서열번호:75, 76, 77(Q1의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a2) 서열번호:78, 79, 80(Q31의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a3) 서열번호:81, 82, 83(Q64의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a4) 서열번호:84, 85, 86(Q85의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a5) 서열번호:87, 88, 89(Q153의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a6) 서열번호:90, 91, 92(Q354의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a7) 서열번호:93, 94, 95(Q360의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a8) 서열번호:96, 97, 98(Q405의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a9) 서열번호:99, 100, 101(Q458의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a10) 서열번호:102, 103, 104(Q460의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a11) 서열번호:105, 106, 107(Q499의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b1) 서열번호:108, 109, 110(J232의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b2) 서열번호:111, 112, 113(J259의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b3) 서열번호:114, 115, 116(J268의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b4) 서열번호:117, 118, 119(J300의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b5) 서열번호:120, 121, 122(J321의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b6) 서열번호:123, 124, 125(J326의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b7) 서열번호:126, 127, 128(J327의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b8) 서열번호:129, 130, 131(J339의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b9) 서열번호:132, 133, 134(J344의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b10) 서열번호:135, 136, 137(J346의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b11) 서열번호:174, 175, 176(J142의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위.
또한, 제3과 제4 폴리펩티드의 항원 결합 부위의 바람직한 태양으로서 구체적으로는, 후술하는 실시예에 기재된
L2의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:138, 139, 140),
L45의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:141, 142, 143),
L248의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:144, 145, 146),
L324의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:147, 148, 149),
L334의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:150, 151, 152),
L377의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:153, 154, 155),
L404의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:156, 157, 158),
L406의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:159, 160, 161),
L408의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:162, 163, 164),
L180의 L쇄 CDR1, 2, 3의 각 서열(서열번호:177, 178, 179)
에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항원 결합 부위, 또는 이들과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 들 수 있다.
즉 본 발명은 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드에 포함되는 항원 결합 부위가 하기 (c1)~(c10)으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 L쇄 CDR을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하는, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다:
(c1) 서열번호:138, 139, 140(L2의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c2) 서열번호:141, 142, 143(L45의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c3) 서열번호:144, 145, 146(L248의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c4) 서열번호:147, 148, 149(L324의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c5) 서열번호:150, 151, 152(L334의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c6) 서열번호:153, 154, 155(L377의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c7) 서열번호:156, 157, 158(L404의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c8) 서열번호:159, 160, 161(L406의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c9) 서열번호:137, 138, 139(L408의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c10) 서열번호:177, 178, 179(L180의 L쇄 CDR)에 기재된 L쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위.
본 발명에 기재된 Q1, Q31, Q64, Q85, Q153, Q354, Q360, Q405, Q458, Q460, Q499의 H쇄 가변영역의 아미노산 서열은 각각, 이하의 서열번호로 나타내어진다.
Q1:서열번호:35
Q31:서열번호:36
Q64:서열번호:37
Q85:서열번호:38
Q153:서열번호:39
Q354:서열번호:40
Q360:서열번호:41
Q405:서열번호:42
Q458:서열번호:43
Q460:서열번호:44
Q499:서열번호:45
본 발명에 기재된 J232, J259, J268, J300, J321, J326, J327, J339, J344, J346, J142의 H쇄 가변영역의 아미노산 서열은 각각, 이하의 서열번호로 나타내어진다.
J232:서열번호:46
J259:서열번호:47
J268:서열번호:48
J300:서열번호:49
J321:서열번호:50
J326:서열번호:51
J327:서열번호:52
J339:서열번호:53
J344:서열번호:54
J346:서열번호:55
J142:서열번호:172
즉 본 발명은 제1 폴리펩티드의 항원 결합 부위가 하기 (a1)~(a11)로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 가변영역을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하고, 제2 폴리펩티드의 항원 결합 부위가 하기 (b1)~(b11)로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 가변영역을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 갖는 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다:
(a1) 서열번호:35(Q1의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a2) 서열번호:36(Q31의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a3) 서열번호:37(Q64의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a4) 서열번호:38(Q85의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a5) 서열번호:39(Q153의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a6) 서열번호:40(Q354의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a7) 서열번호:41(Q360의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a8) 서열번호:42(Q405의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a9) 서열번호:43(Q458의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a10) 서열번호:44(Q460의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(a11) 서열번호:45(Q499의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b1) 서열번호:46(J232의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b2) 서열번호:47(J259의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b3) 서열번호:48(J268의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b4) 서열번호:49(J300의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b5) 서열번호:50(J321의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b6) 서열번호:51(J326의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b7) 서열번호:52(J327의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b8) 서열번호:53(J339의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b9) 서열번호:54(J344의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b10) 서열번호:55(J346의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(b11) 서열번호:172(J142의 H쇄 가변영역)에 기재된 H쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위.
또한, 본 발명에 기재된 L2, L45, L248, L324, L334, L377, L404, L406, L408, L180의 L쇄 가변영역의 아미노산 서열은 각각, 이하의 서열번호로 나타내어진다.
L2 :서열번호:56
L45 :서열번호:57
L248:서열번호:58
L324:서열번호:59
L334:서열번호:60
L377:서열번호:61
L404:서열번호:62
L406:서열번호:63
L408:서열번호:64
L180:서열번호:173
즉 본 발명은 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드에 포함되는 항원 결합 부위가 하기 (c1)~(c10)으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 L쇄 가변영역을 포함하는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하는, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다:
(c1) 서열번호:56(L2의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c2) 서열번호:57(L45의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c3) 서열번호:58(L248의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c4) 서열번호:59(L324의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c5) 서열번호:60(L334의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c6) 서열번호:61(L377의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c7) 서열번호:62(L404의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c8) 서열번호:63(L406의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c9) 서열번호:64(L408의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위,
(c10) 서열번호:173(L180의 L쇄 가변영역)에 기재된 L쇄 가변영역의 아미노산 서열을 갖는 항원 결합 부위.
또한, 각 서열의 CDR1~3 및 FR1~4의 아미노산 서열은 도 6a~d에 기재된 바와 같다.
본 발명에서 개시되어 있는 가변영역을 사용하여 전장 항체를 제작하는 경우, 정상영역은 특별히 한정되지 않고, 당업자에게 공지의 정상영역을 사용하는 것이 가능하며, 예를 들면, Sequences of proteins of immunological interest, (1991), U.S. Department of Health and Human Services. Public Health Service National Institutes of Health나, An efficient route to human bispecific IgG, (1998). Nature Biotechnology vol. 16, 677-681, 등에 기재되어 있는 정상영역을 사용할 수 있다. 본 발명의 항체 정상영역의 바람직한 예로서, IgG 항체의 정상영역을 들 수 있다. IgG 항체의 정상영역을 사용하는 경우, 그 종류는 한정되지 않고, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 등의 서브클래스의 IgG 정상영역을 사용하는 것이 가능하다. 또한, 이들 서브클래스의 IgG의 정상영역에 대해, 정상영역 부분에 아미노산 변이를 도입해도 된다. 도입하는 아미노산 변이는, 예를 들면, Fcγ 수용체로의 결합을 증대 또는 저감시킨 것(Proc Natl Acad Sci U S A. 2006 Mar 14;103(11):4005-10., MAbs. 2009 Nov;1(6):572-9.), FcRn으로의 결합을 증대 또는 저감시킨 것(J Biol Chem. 2001 Mar 2;276(9):6591-604, Int Immunol. 2006 Dec;18(12):1759-69., J Biol Chem. 2006 Aug 18;281(33):23514-24.) 등을 들 수 있는데, 이들에 한정되는 것은 아니다. 이중특이성 항체를 제작하기 위해 2종류의 H쇄를 헤테로 회합화시킬 필요가 있다. CH3 도메인을 매개로 2종류의 H쇄를 헤테로 회합화시키기 위해, knobs-into-hole 기술(J Immunol Methods. 2001 Feb 1;248(1-2):7-15, J Biol Chem. 2010 Jul 2;285(27):20850-9.), 정전반발 기술(WO 2006/106905), SEEDbody 기술(Protein Eng Des Sel. 2010 Apr;23(4):195-202.) 등을 사용하는 것이 가능하다. 또한, 본 발명의 항체는 당쇄가 개변 또는 결손되어 있어도 된다. 당쇄가 개변된 항체의 예로서는, 예를 들면, 글리코실화가 수식된 항체(WO 99/54342 등), 당쇄에 부가하는 푸코오스가 결손된 항체(WO 00/61739, WO 02/31140, WO 2006/067847, WO 2006/067913 등), 2등분(bisecting) GlcNAc를 갖는 당쇄를 갖는 항체(WO 02/79255 등) 등을 들 수 있다. 당쇄가 결손된 IgG 항체를 제작하는 방법으로서, EU 넘버링 297번째의 아스파라긴에 변이를 도입하는 방법(J Clin Pharmacol. 2010 May;50(5):494-506.), IgG를 대장균으로 생산시키는 방법(J Immunol Methods. 2002 May 1;263(1-2):133-47., J Biol Chem. 2010 Jul 2;285(27):20850-9.) 등이 알려져 있다. 또한, IgG의 C 말단의 리신 결손에 수반되는 이질성(heterogeneity)이나 IgG2의 힌지영역의 디설피드 결합의 엇갈림에 수반되는 이질성을 아미노산의 결손·치환을 도입함으로써 저감시키는 것도 가능하다(WO 2009/041613)).
예를 들면 본 발명은 제1 및 제2 폴리펩티드가 항체의 H쇄 정상영역을 포함하고, 제3 및 제4 폴리펩티드가 항체의 L쇄 정상영역을 포함하는, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다.
또한 본 발명은 제1 폴리펩티드가 하기 (d1)~(d6)의 그룹으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열 또는 하기 (d7)~(d9)의 그룹으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 항체의 H쇄 정상영역을 포함하고, 제2 폴리펩티드가 상기 제1 폴리펩티드와는 상이한 그룹으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어지는 항체의 H쇄 정상영역을 포함하는, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다:
(d1) 서열번호:65(G4k)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d2) 서열번호:66(z7)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d3) 서열번호:67(z55)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d4) 서열번호:68(z106)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d5) 서열번호:69(z118)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d6) 서열번호:70(z121)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d7) 서열번호:71(G4h)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d8) 서열번호:72(z107)에 기재된 H쇄 정상영역,
(d9) 서열번호:73(z119)에 기재된 H쇄 정상영역.
또한 본 발명은 제3과 제4 폴리펩티드가 하기 (e)의 아미노산 서열로 이루어지는 항체의 L쇄 정상영역을 포함하는, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다:
(e) 서열번호:74(k)에 기재된 L쇄 정상영역.
본 발명에 있어서 「F.VIII의 기능을 대체하는」이란, F.IX 및/또는 F.IXa, 및 F.X를 인식하고, F.X의 활성화를 촉진하는(F.Xa 생산을 촉진하는) 것을 의미한다.
본 발명에 있어서의 「F.Xa 생산 촉진 활성」은, 본 발명의 다중특이성 항원 결합 분자가, 예를 들면, F.XIa(F.IX 활성화 효소), F.IX, F.X, F 합성 기질 S-2222(F.Xa의 합성 기질), 인지질로 이루어지는 측정계에서 평가함으로써 확인할 수 있다. 본 측정계는 혈우병 A 증례에 있어서의 질환의 중증도 및 임상증상과 상관성을 나타낸다(Rosen S, Andersson M, Blomba¨ck M et al. Clinical applications of a chromogenic substrate method for determination of FVIII activity. Thromb Haemost 1985; 54: 811-23). 즉, 본 측정계에서, 보다 높은 F.Xa 생산 촉진 활성을 나타내는 피검물질은, 혈우병 A에 있어서의 출혈증상에 대해, 보다 우수한 지혈효과를 나타내는 것이 기대된다. 그 결과로써, F.VIII의 기능을 대체하는 활성을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자로서, hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ 보다 높은 활성을 갖는 분자라면, 우수한 혈액응고 촉진 활성을 얻는 것이 가능하여, 출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료용 의약 성분으로서 우수한 효과를 얻을 수 있다. 당해 의약 성분으로서의 우수한 효과를 얻기 위해서는, 예를 들면〔실시예 2〕에 기재된 조건으로 측정한 경우의 F.Xa 생산 촉진 활성이, hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ 이상인 것이 바람직하고, 특히, Q153-G4k/J142-G4h/L180-k와 동등 또는 그 이상인 것이 보다 바람직하다. 또한, 여기에서 말하는 F.Xa 생산 촉진 활성이란, 항체 용액의 20분간의 흡광도 변화치로부터, 용매 20분간의 흡광도 변화치를 뺀 값이다.
본 발명의 바람직한 태양으로서는, F.IX 및/또는 F.IXa, 및 F.X를 인식하고, F.VIII의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항체이다.
본 발명의 상기 다중특이성 항체는, 바람직하게는, 항F.IX/F.IXa 항체의 H쇄 CDR 또는 이것과 기능적으로 동등한 CDR과, 항F.X 항체의 H쇄 CDR 또는 이것과 기능적으로 동등한 CDR을 포함하는 항체이다.
또한 본 발명의 항체는, 항F.IX/IXa 항체에 있어서의,
서열번호:75, 76, 77(Q1의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:78, 79, 80(Q31의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:81, 82, 83(Q64의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:84, 85, 86(Q85의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:87, 88, 89(Q153의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:90, 91, 92(Q354의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:93, 94, 95(Q360의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:96, 97, 98(Q405의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:99, 100, 101(Q458의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:102, 103, 104(Q460의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:105, 106, 107(Q499의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
으로 이루어지는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위와, 항F.X 항체에 있어서의
서열번호:108, 109, 110(J232의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:111, 112, 113(J259의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:114, 115, 116(J268의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:117, 118, 119(J300의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:120, 121, 122(J321의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:123, 124, 125(J326의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:126, 127, 128(J327의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:129, 130, 131(J339의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:132, 133, 134(J344의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:135, 136, 137(J346의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열,
또는 서열번호:174, 175, 176(J142의 H쇄 CDR)에 기재된 H쇄 CDR1, 2, 3의 아미노산 서열
로 이루어지는 항원 결합 부위 또는 이것과 기능적으로 동등한 항원 결합 부위를 포함하는 항체인 것이 바람직하다.
또한, 본 발명에 있어서, 항원 결합 부위가 기능적으로 동등하다는 것은, 당해 항원 결합 부위를 포함하는 다중특이성 항원 결합 분자가 갖는 F.VIII의 기능을 대체하는 활성이 동등한 것을 의미한다.
본 발명에 있어서, 「동등」이란, 반드시 같은 정도의 활성일 필요는 없고, 활성이 증강되어 있어도 되고, 또한, 상기 측정계에서 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ 보다도 높은 활성 또는, 바람직하게는 〔실시예 2〕에 기재된 조건으로 측정한 경우의 F.Xa 생산 촉진 활성이 Q153-G4k/J142-G4h/L180-k와 동등 또는 그 이상의 활성을 갖는 한, 활성이 감소되어 있어도 된다.
전술한 항체는, 전술한 단락번호 <0413>의 측정계에서 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ 보다도 높은 활성, 바람직하게는 〔실시예 2〕에 기재된 조건으로 측정한 경우의 F.Xa 생산 촉진 활성이 Q153-G4k/J142-G4h/L180-k와 동등 또는 그 이상의 활성을 갖는 한, 가변영역(CDR서열 및/또는 FR서열)의 아미노산 서열에 1 또는 복수의 아미노산이 치환, 결실, 부가 및/또는 삽입되어 있어도 된다. 아미노산 서열에 있어서, 1 또는 복수의 아미노산이 치환, 결실, 부가 및/또는 삽입하기 위한, 당업자에게 잘 알려진 방법으로서는, 단백질에 변이를 도입하는 방법이 알려져 있다. 예를 들면, 당업자라면, 부위 특이적 변이 유발법(Hashimoto-Gotoh, T, Mizuno, T, Ogasahara, Y, and Nakagawa, M. (1995) An oligodeoxyribonucleotide-directed dual amber method for site-directed mutagenesis. Gene 152, 271-275, Zoller, MJ, and Smith, M.(1983) Oligonucleotide-directed mutagenesis of DNA fragments cloned into M13 vectors.Methods Enzymol. 100, 468-500, Kramer,W, Drutsa,V, Jansen,HW, Kramer,B, Pflugfelder,M, and Fritz,HJ(1984) The gapped duplex DNA approach to oligonucleotide-directed mutation construction. Nucleic Acids Res. 12, 9441-9456, Kramer W, and Fritz HJ(1987) Oligonucleotide-directed construction of mutations via gapped duplex DNA Methods. Enzymol. 154, 350-367, Kunkel,TA(1985) Rapid and efficient site-specific mutagenesis without phenotypic selection.Proc Natl Acad Sci U S A. 82, 488-492) 등을 사용하여 아미노산 서열에 적당히 변이를 도입함으로써, 목적의 F.VIII의 기능을 대체하는 활성을 갖는 다중특이성 폴리펩티드 다량체와 기능적으로 동등한 변이체를 조제할 수 있다.
이와 같이, 가변영역에 있어서, 1 또는 복수의 아미노산이 변이되어 있어, 전술 단락번호 <0413>의 측정계에서 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ 보다도 높은 활성, 바람직하게는 〔실시예 2〕에 기재된 조건으로 측정한 경우의 F.Xa 생산 촉진 활성이 Q153-G4k/J142-G4h/L180-k와 동등 또는 그 이상의 활성을 갖는 항체도 또한 본 발명의 항체에 포함된다.
아미노산 잔기를 개변하는 경우에는, 아미노산 측쇄의 성질이 보존되어 있는 다른 아미노산으로 변이되는 것이 바람직하다. 예를 들면 아미노산 측쇄의 성질로서는, 소수성 아미노산(A, I, L, M, F, P, W, Y, V), 친수성 아미노산(R, D, N, C, E, Q, G, H, K, S, T), 지방족 측쇄를 갖는 아미노산(G, A, V, L, I, P), 수산기 함유 측쇄를 갖는 아미노산(S, T, Y), 황원자 함유 측쇄를 갖는 아미노산(C, M), 카르복실산 및 아미드 함유 측쇄를 갖는 아미노산(D, N, E, Q), 잔기 함유 측쇄를 갖는 아미노산(R, K, H), 및 방향족 함유 측쇄를 갖는 아미노산(H, F, Y, W)을 들 수 있다(괄호 안은 모두 아미노산의 일문자 표기를 나타낸다). 이들의 각 그룹의 아미노산의 치환을 보존적 치환이라 칭한다. 어느 아미노산 서열에 대한 1 또는 복수 개의 아미노산 잔기의 결실, 부가 및/또는 다른 아미노산에 의한 치환에 의해 수식된 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드가 그의 생물학적 활성을 유지하는 것은 이미 알려져 있다(Mark, D. F. et al., Proc.Natl.Acad.Sci.USA (1984)81:5662-6; Zoller, M. J. and Smith, M., Nucleic Acids Res.(1982)10:6487-500; Wang, A. et al., Science(1984)224:1431-3; Dalbadie-McFarland, G. et al., Proc.Natl.Acad.Sci.USA (1982)79:6409-13). 이러한 변이체는, 본 발명의 가변영역(예를 들면 CDR 서열, FR 서열, 가변영역 전체)의 아미노산 서열과 적어도 70%, 보다 바람직하게는 적어도 75%, 보다 바람직하게는 적어도 80%, 더욱 바람직하게는 적어도 85%, 더욱이 보다 바람직하게는 적어도 90%, 그리고, 가장 바람직하게는 적어도 95%의 아미노산 서열의 동일성을 갖는다. 본 명세서에 있어서 서열의 동일성은, 서열 동일성이 최대가 되도록 필요에 따라 서열을 정렬화하고, 적당히 갭을 도입한 후, 기초가 된 중쇄 가변영역 또는 경쇄 가변영역의 아미노산 서열의 잔기와 동일 잔기의 비율로서 정의된다. 아미노산 서열의 동일성은, 후술하는 방법에 의해 결정할 수 있다.
또한, 가변영역(CDR 서열 및/또는 FR 서열)의 아미노산 서열에 있어서, 1 또는 복수의 아미노산이 치환, 결실, 부가 및/또는 삽입되어 있고, 전술한 단락번호 <0413>의 측정계에서 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ 보다도 높은 활성, 바람직하게는 〔실시예 2〕에 기재된 조건으로 측정한 경우의 F.Xa 생산 촉진 활성이 Q153-G4k/J142-G4h/L180-k와 동등 또는 그 이상의 활성을 갖는 가변영역의 아미노산 서열은, 그 가변영역의 아미노산 서열을 코드하는 염기서열로 이루어지는 핵산에 스트린젠트한 조건하에서 하이브리다이즈하는 핵산으로부터 얻는 것도 가능하다. 가변영역의 아미노산 서열을 코드하는 염기서열로 이루어지는 핵산에 스트린젠트한 조건하에서 하이브리다이즈하는 핵산을 단리(isolation)하기 위한, 스트린젠트한 하이브리다이제이션 조건으로서는, 6 M 요소, 0.4% SDS, 0.5×SSC, 37℃의 조건 또는 이것과 동등한 스트린젠시의 하이브리다이제이션 조건을 예시할 수 있다. 보다 스트린젠시가 높은 조건, 예를 들면, 6 M 요소, 0.4% SDS, 0.1×SSC, 42℃의 조건을 사용하면, 보다 상동성이 높은 핵산의 단리를 기대할 수 있다. 단리된 핵산의 서열의 결정은, 후술하는 공지의 방법에 의해 행하는 것이 가능하다. 단리된 핵산의 상동성은, 염기서열 전체에서, 적어도 50% 이상, 더욱 바람직하게는 70% 이상, 더욱 바람직하게는 90% 이상(예를 들면, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상)의 서열의 동일성을 갖는다.
상기 하이브리다이제이션 기술을 이용하는 방법 대신에, 가변영역의 아미노산 서열을 코드하는 염기서열 정보를 토대로 합성한 프라이머를 사용하는 유전자 증폭법, 예를 들면, 폴리머라아제 연쇄반응(PCR)법을 이용하여, 가변영역의 아미노산 서열을 코드하는 염기서열로 이루어지는 핵산과 스트린젠트한 조건하에서 하이브리다이즈하는 핵산을 단리하는 것도 가능하다.
염기서열 및 아미노산 서열의 동일성은, Karlin and Altschul에 의한 알고리즘 BLAST(Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1993)90:5873-7)에 의해 결정할 수 있다. 이 알고리즘을 토대로, BLASTN이나 BLASTX라 불리는 프로그램이 개발되어 있다(Altschul et al.,J.Mol.Biol.(1990)215:403-10). BLAST에 기초하여 BLASTN에 의해 염기서열을 해석하는 경우에는, 파라미터는 예를 들면 score=100, wordlength=12로 한다. 또한, BLAST에 기초하여 BLASTX에 의해 아미노산 서열을 해석하는 경우에는, 파라미터는 예를 들면 score=50, wordlength=3으로 한다. BLAST와 Gapped BLAST 프로그램을 사용하는 경우에는, 각 프로그램의 디폴트 파라미터를 사용한다. 이들의 해석방법의 구체적인 수법은 공지이다(NCBI (National Center for Biotechnology Information)의 BLAST(Basic Local Alignment Search Tool)의 웹사이트를 참조;http://www.ncbi.nlm.nih.gov).
또한 본 발명은 상기 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체도 제공한다.
어느 항체가 다른 항체와 중복되는 에피토프를 인식하는지 여부는, 양자의 에피토프에 대한 경합에 의해 확인할 수 있다. 항체 간의 경합은, 경합 결합 어세이에 의해 평가할 수 있고, 그 수단으로서 효소결합 면역흡착 검정법(ELISA), 형광 에너지 전이 측정법(FRET)이나 형광 미량 측정기술(FMAT(등록상표)) 등을 들 수 있다. 항원에 결합한 그 항체의 양은, 중복되는 에피토프로의 결합에 대해 경합하는 후보 경합 항체(피검항체)의 결합능에 간접적으로 상관하고 있다. 즉, 중복되는 에피토프에 대한 피검항체의 양이나 친화성이 커질수록, 그 항체의 항원으로의 결합량은 저하되고, 항원으로의 피검항체의 결합량은 증가한다. 구체적으로는, 항원에 대해, 적당한 표지를 한 그 항체와 평가 대상 항체를 동시에 첨가하고, 표지를 이용하여 결합하고 있는 그 항체를 검출한다. 항원에 결합한 그 항체량은, 그 항체를 사전에 표지해 둠으로써, 용이하게 측정할 수 있다. 이 표지는 특별히 제한되지는 않으나, 수법에 따른 표지방법을 선택한다. 표지방법은, 구체적으로는 형광 표지, 방사 표지, 효소 표지 등을 들 수 있다.
예를 들면, F.IX, F.IXa 또는 F.X를 고상화한 비드에 형광 표지한 그 항체와, 비표지의 그 항체 또는 피검항체를 동시에 첨가하고, 표지된 그 항체를 형광 미량 측정기술에 의해 검출한다.
여기서 말하는 「중복되는 에피토프에 결합하는 항체」란, 표지 그 항체에 대해, 비표지의 그 항체의 결합에 의해 결합량을 50% 저하시키는 농도(IC50)에 대해, 피검항체가 비표지 그 항체의 IC50의 통상, 100배, 바람직하게는 80배, 더욱 바람직하게는 50배, 더욱 바람직하게는 30배, 보다 바람직하게는 10배 높은 농도로 적어도 50%, 표지 그 항체의 결합량을 저하시킬 수 있는 항체이다.
전술한 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 항원 결합 부위를 갖는 다중특이성 항원 결합 분자는, 우수한 F.VIII 기능을 대체하는 활성을 얻는 것이 가능하다. 또한, 전술한 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 항원 결합 부위는, 보다 우수한 F.VIII 기능을 대체하는 활성을 얻기 위해 1 또는 복수의 아미노산을 개변하는 것이 가능하다. 항원 결합 부위의 아미노산을 개변 후, 전술한 측정계에서 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ 보다도 높은 활성, 바람직하게는 〔실시예 2〕에 기재된 조건으로 측정한 경우의 F.Xa 생산 촉진 활성이 Q153-G4k/J142-G4h/L180-k 동등 또는 그 이상의 활성을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자를 선택함으로써, 보다 우수한 F.VIII 기능을 대체하는 활성을 얻을 수 있다. 본 발명의 우수한 F.VIII 기능을 대체하는 활성을 얻기 위해서는, 특히, 이하의 아미노산 개변이 바람직하다.
(1) F.IX 및/또는 F.IXa를 인식하는 항체 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 34번 위치, 35번 위치, 49번 위치, 61번 위치, 62번 위치, 96번 위치, 98번 위치, 100번 위치, 100b번 위치 및 102번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환된다.
(2) F.X를 인식하는 항체 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 35번 위치, 53번 위치, 73번 위치, 76번 위치, 96번 위치, 98번 위치, 100번 위치 및 100a번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환된다.
(3) 항체 L쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 27번 위치, 30번 위치, 31번 위치, 32번 위치, 50번 위치, 52번 위치, 53번 위치, 54번 위치, 55번 위치, 92번 위치, 93번 위치, 94번 위치 및 95번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환된다.
또한, 본 발명에 있어서, 보다 우수한 F.VIII 기능을 대체하는 활성을 얻기 위한 바람직한 항체의 아미노산으로서는, 이하의 (4)~(6)을 들 수 있다. 이들의 아미노산은, 항체 H쇄가 사전에 그러한 아미노산을 가지고 있어도 되고, 아미노산을 개변함으로써 그러한 서열을 갖는 항체 H쇄로 해도 된다.
(4) F.IX 및/또는 F.IXa를 인식하는 항체 H쇄가, Kabat 넘버링에 의한 34번 위치의 아미노산 잔기가 이소류신, 35번 위치의 아미노산 잔기가 아스파라긴, 글루타민 또는 세린, 49번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 61번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 62번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 96번 위치의 아미노산 잔기가 세린 또는 트레오닌, 98번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 100번 위치의 아미노산 잔기가 페닐알라닌 또는 티로신, 100b번 위치의 아미노산 잔기가 글리신, 또는, 102번 위치의 아미노산 잔기가 티로신인 항체의 H쇄,
(5) F.X를 인식하는 항체 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 35번 위치의 아미노산 잔기가 아스파라긴산, 53번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 73번 위치의 아미노산 잔기가 리신, 76번 위치의 아미노산 잔기가 글리신, 96번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 98번 위치의 아미노산 잔기가 티로신, 100번 위치의 아미노산 잔기가 티로신, 또는, 100a번 위치의 아미노산 잔기가 히스티딘인 항체의 H쇄,
(6) 항체 L쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 27번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 30번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 31번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 32번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민, 50번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌 또는 글루타민, 52번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 53번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 54번 위치의 아미노산 잔기가 리신, 55번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 92번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 93번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 94번 위치의 아미노산 잔기가 프롤린, 또는, 95번 위치의 아미노산 잔기가 프롤린인 항체의 L쇄.
상기의 (1)~(6)의 항체의 아미노산 잔기 중, 특히 우수한 F.VIII 유사 활성을 얻기 위한 바람직한 위치의 아미노산 잔기로서는, 이하의 (1)~(3)을 들 수 있다.
(1) F.IX 및/또는 F.IXa를 인식하는 항체 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 34번 위치, 35번 위치, 61번 위치, 98번 위치, 100번 위치 및 100b번 위치의 아미노산 잔기, 그 중에서도 61번 위치 및 100번 위치의 아미노산 잔기
(2) F.X를 인식하는 항체 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 35번 위치, 53번 위치, 73번 위치, 96번 위치, 98번 위치, 100번 위치 및 100a번 위치의 아미노산 잔기
(3) 항체 L쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 27번 위치, 30번 위치, 31번 위치, 32번 위치, 50번 위치, 52번 위치, 53번 위치, 93번 위치, 94번 위치 및 95번 위치의 아미노산 잔기, 그 중에서도 27번 위치, 30번 위치, 31번 위치, 50번 위치, 53번 위치, 94번 위치 및 95번 위치의 아미노산 잔기
즉 본 발명은 제1 폴리펩티드가 하기 (a1)~(a14)로부터 선택되는 어느 하나의 항체 H쇄와 하기 (c1)~(c10)으로부터 선택되는 어느 하나의 항체 L쇄로 이루어지고, 제2 폴리펩티드가 하기 (b1)~(b12)로부터 선택되는 어느 하나의 항체 H쇄와 하기 (c1)~(c10)으로부터 선택되는 어느 하나의 항체 L쇄로 이루어지는, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다:
(a1) 서열번호:1(Q1-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a2) 서열번호:2(Q31-z7)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a3) 서열번호:3(Q64-z55)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a4) 서열번호:10(Q64-z7)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a5) 서열번호:11(Q85-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a6) 서열번호:12(Q153-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a7) 서열번호:13(Q354-z106)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a8) 서열번호:14(Q360-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a9) 서열번호:15(Q360-z118)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a10) 서열번호:16(Q405-G4k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a11) 서열번호:17(Q458-z106)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a12) 서열번호:18(Q460-z121)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a13) 서열번호:19(Q499-z118)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(a14) 서열번호:20(Q499-z121)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b1) 서열번호:4(J268-G4h)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b2) 서열번호:5(J321-G4h)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b3) 서열번호:6(J326-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b4) 서열번호:7(J344-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b5) 서열번호:21(J232-G4h)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b6) 서열번호:22(J259-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b7) 서열번호:23(J300-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b8) 서열번호:24(J327-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b9) 서열번호:25(J327-z119)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b10) 서열번호:26(J339-z119)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b11) 서열번호:27(J346-z107)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(b12) 서열번호:170(J142-G4h)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 H쇄,
(c1) 서열번호:8(L2-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c2) 서열번호:9(L45-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c3) 서열번호:28(L248-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c4) 서열번호:29(L324-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c5) 서열번호:30(L334-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c6) 서열번호:31(L377-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c7) 서열번호:32(L404-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c8) 서열번호:33(L406-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c9) 서열번호:34(L408-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄,
(c10) 서열번호:171(L180-k)에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 항체 L쇄.
또한 본 발명은 제1 폴리펩티드가, 상기 (a1)~(a14) 중 어느 하나에 기재된 항체의 H쇄와 상기 (c1)~(c10) 중 어느 하나에 기재된 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항원 결합 부위를 포함하고, 제2 폴리펩티드가, 상기 (b1)~(b12) 중 어느 하나에 기재된 항체의 H쇄와 상기 (c1)~(c10) 중 어느 하나에 기재된 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항원 결합 부위를 포함하는, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다.
또한 본 발명은 제1 폴리펩티드가, 하기 (e1)~(e3)으로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 H쇄를 포함하고, 제2 폴리펩티드가 하기 (f1)~(f3)으로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 H쇄를 포함하며, 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 하기 (g1)~(g4)로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 L쇄를 포함하는, 다중특이성 항원 결합 분자를 제공한다:
(e1) 상기 (a1)~(a14) 중 어느 하나의 항체의 H쇄와 상기 (c1)~(c10) 중 어느 하나에 기재된 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 H쇄,
(e2) 상기 (e1)로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 34번 위치, 35번 위치, 49번 위치, 61번 위치, 62번 위치, 96번 위치, 98번 위치, 100번 위치, 100b번 위치 및 102번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환되어 있는 항체의 H쇄,
(e3) 상기 (e1)로부터 선택되는 어느 하나의 항체의 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 34번 위치의 아미노산 잔기가 이소류신, 35번 위치의 아미노산 잔기가 아스파라긴, 글루타민 또는 세린, 49번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 61번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 62번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 96번 위치의 아미노산 잔기가 세린 또는 트레오닌, 98번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 100번 위치의 아미노산 잔기가 페닐알라닌 또는 티로신, 100b번 위치의 아미노산 잔기가 글리신, 또는, 102번 위치의 아미노산 잔기가 티로신인 항체의 H쇄,
(f1) 상기 (b1)~(b12) 중 어느 하나의 항체의 H쇄와 상기 (c1)~(c10) 중 어느 하나의 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 H쇄,
(f2) 상기 (f1) 중 어느 하나의 항체 H쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 35번 위치, 53번 위치, 73번 위치, 76번 위치, 96번 위치, 98번 위치, 100번 위치 및 100a번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환되어 있는 항체의 H쇄,
(f3) 상기 (f1) 중 어느 하나의 항체 H쇄로서, Kabat 넘버링에 의한 35번 위치의 아미노산 잔기가 아스파라긴산, 53번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 73번 위치의 아미노산 잔기가 리신, 76번 위치의 아미노산 잔기가 글리신, 96번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 98번 위치의 아미노산 잔기가 티로신, 100번 위치의 아미노산 잔기가 티로신, 또는, 100a번 위치의 아미노산 잔기가 히스티딘인 항체의 H쇄,
(g1) 상기 (a1)~(a14) 중 어느 하나의 항체의 H쇄와 상기 (c1)~(c10) 중 어느 하나의 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 L쇄,
(g2) 상기 (b1)~(b12) 중 어느 하나의 항체의 H쇄와 상기 (c1)~(c10) 중 어느 하나의 항체의 L쇄로 이루어지는 항체가 결합하는 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는 항체의 L쇄,
(g3) 상기 (g1) 및 (g2) 중 어느 하나의 항체의 L쇄에 있어서의 Kabat 넘버링에 의한 27번 위치, 30번 위치, 31번 위치, 32번 위치, 50번 위치, 52번 위치, 53번 위치, 54번 위치, 55번 위치, 92번 위치, 93번 위치, 94번 위치 및 95번 위치의 아미노산 잔기로부터 선택되는, 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산으로 치환되어 있는 항체의 L쇄,
(g4) 상기 (g1) 및 (g2) 중 어느 하나의 항체의 L쇄로서, Kabat 넘버링에 의한 27번 위치의 아미노산 잔기가 리신 또는 아르기닌, 30번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 31번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 32번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민, 50번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌 또는 글루타민, 52번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 53번 위치의 아미노산 잔기가 아르기닌, 54번 위치의 아미노산 잔기가 리신, 55번 위치의 아미노산 잔기가 글루타민산, 92번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 93번 위치의 아미노산 잔기가 세린, 94번 위치의 아미노산 잔기가 프롤린, 또는, 95번 위치의 아미노산 잔기가 프롤린인 항체의 L쇄.
또한, 본 발명의 항체(클론)에 대해서는, 탈아미드화, 메티오닌산화 등의 회피나 항체의 구조 안정화를 목적으로 아미노산 잔기를 치환해도 된다.
본 발명의 다중특이성 항원 결합 분자를 얻는 방법은 특별히 제한되지 않고, 어떠한 방법으로 취득되어도 된다. 예를 들면, 이중특이성 항체의 제조방법의 일례로서는, WO 2006/109592나 WO 2005/035756, WO 2006/106905, WO 2007/114325에 기재된 방법에 따라 이중특이성 항체를 제작 후, 목적의 보조인자 기능 대체 활성을 갖는 항체를 선택해서 취득할 수 있다.
예를 들면 본 발명에 있어서는, 이하의 (a)~(u) 중 어느 하나에 기재된 이중특이성 항체가 제공된다:
(a) 제1 폴리펩티드가 서열번호:1에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:4에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q1-G4k/J268-G4h/L45-k),
(b) 제1 폴리펩티드가 서열번호:1에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:5에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q1-G4k/J321-G4h/L45-k),
(c) 제1 폴리펩티드가 서열번호:2에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:6에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:8에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q31-z7/J326-z107/L2-k),
(d) 제1 폴리펩티드가 서열번호:3에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:7에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z55/J344-z107/L45-k),
(e) 제1 폴리펩티드가 서열번호:10에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:6에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z7/J326-z107/L334-k),
(f) 제1 폴리펩티드가 서열번호:10에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:7에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z7/J344-z107/L406-k),
(g) 제1 폴리펩티드가 서열번호:11에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:4에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q85-G4k/J268-G4h/L406-k),
(h) 제1 폴리펩티드가 서열번호:11에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:5에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q85-G4k/J321-G4h/L334-k),
(i) 제1 폴리펩티드가 서열번호:12에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q153-G4k/J232-G4h/L406-k),
(j) 제1 폴리펩티드가 서열번호:13에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:22에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:29에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q354-z106/J259-z107/L324-k),
(k) 제1 폴리펩티드가 서열번호:14에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q360-G4k/J232-G4h/L406-k),
(l) 제1 폴리펩티드가 서열번호:15에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:23에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q360-z118/J300-z107/L334-k),
(m) 제1 폴리펩티드가 서열번호:16에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:28에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q405-G4k/J232-G4h/L248-k),
(n) 제1 폴리펩티드가 서열번호:17에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:27에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:34에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q458-z106/J346-z107/L408-k),
(o) 제1 폴리펩티드가 서열번호:18에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:25에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q460-z121/J327-z119/L334-k),
(p) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:24에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J327-z107/L334-k),
(q) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:24에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:31에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J327-z107/L377-k),
(r) 제1 폴리펩티드가 서열번호:19에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:27에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:28에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z118/J346-z107/L248-k),
(s) 제1 폴리펩티드가 서열번호:20에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:25에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:32에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z121/J327-z119/L404-k),
(t) 제1 폴리펩티드가 서열번호:20에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:26에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:31에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q499-z121/J339-z119/L377-k),
(u) 제1 폴리펩티드가 서열번호:12에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:170에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:171에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q153-G4k/J142-G4h/L180-k).
본 발명의 항체는, 후술하는 항체를 생산하는 세포나 숙주 또는 정제방법에 의해, 아미노산 서열, 분자량, 등전점 또는 당쇄의 유무나 형태 등이 상이할 수 있다. 그러나, 얻어진 항체가, 본 발명의 항체와 동등한 기능을 가지고 있는 한, 본 발명에 포함된다. 예를 들면, 본 발명의 항체를 원핵세포, 예를 들면 대장균에서 발현시킨 경우, 본래의 항체의 아미노산 서열의 N 말단에 메티오닌 잔기가 부가된다. 본 발명의 항체는 이러한 항체도 포함한다.
본 발명의 이중특이성 항체는 당업자에게 공지의 방법에 의해 제조하는 것이 가능하다.
예를 들면, 얻어진 항F.IX/F.IXa 항체 또는 항F.X 항체의 서열을 토대로, 당업자에게 공지의 유전자 재조합기술을 사용하여 항체를 제작하는 것이 가능하다. 구체적으로는, 항F.IX/F.IXa 항체 또는 항F.X 항체의 서열을 토대로 항체를 코드하는 폴리뉴클레오티드를 구축하고, 이것을 발현 벡터에 도입한 후, 적당한 숙주세포에서 발현시키면 된다(예를 들면, Co, M. S. et al., J. Immunol. (1994) 152, 2968-2976 ; Better, M. and Horwitz, A. H., Methods Enzymol. (1989) 178, 476-496 ; Pluckthun, A. and Skerra, A., Methods Enzymol. (1989) 178, 497-515 ; Lamoyi, E., Methods Enzymol. (1986) 121, 652-663 ; Rousseaux, J. et al., Methods Enzymol. (1986) 121, 663-669 ; Bird, R. E. and Walker, B. W., Trends Biotechnol. (1991) 9, 132-137 참조).
벡터의 예로서는, M13계 벡터, pUC계 벡터, pBR322, pBluescript, pCR-Script 등을 들 수 있다. 또한, cDNA의 서브클로닝, 잘라내기를 목적으로 한 경우, 상기 벡터 외에, 예를 들면, pGEM-T, pDIRECT, pT7 등을 들 수 있다. 본 발명의 항체를 생산하는 목적에 있어서 벡터를 사용하는 경우에는, 특히, 발현 벡터가 유용하다. 발현 벡터로서는, 예를 들면, 대장균에서의 발현을 목적으로 한 경우는, 벡터가 대장균에서 증폭되는 바와 같은 특징을 갖는 것 외에, 숙주를 JM109, DH5α, HB101, XL1-Blue 등의 대장균으로 한 경우에 있어서는, 대장균에서 효율적으로 발현할 수 있는 프로모터, 예를 들면, lacZ 프로모터(Ward등, Nature (1989) 341, 544-546;FASEB J. (1992) 6, 2422-2427), araB 프로모터(Better등, Science (1988) 240, 1041-1043), 또는 T7 프로모터 등을 가지고 있는 것이 불가결하다. 이러한 벡터로서는, 상기 벡터 외에 pGEX-5X-1(파마시아 제조), 「QIAexpress system」(퀴아겐 제조), pEGFP, 또는 pET(이 경우, 숙주는 T7 RNA 폴리머라아제를 발현하고 있는 BL21이 바람직하다) 등을 들 수 있다.
또한, 발현 플라스미드의 벡터에는, 항체 분비를 위한 시그날 서열이 포함되어 있어도 된다. 항체 분비를 위한 시그날 서열로서는, 대장균의 페리플라즘으로 생산시키는 경우, pelB 시그날 서열(Lei, S. P. et al J. Bacteriol. (1987) 169, 4379)을 사용하면 된다. 숙주세포로의 벡터의 도입은, 예를 들면 염화칼슘법, 전기천공법을 사용해서 행할 수 있다.
대장균 이외에도, 예를 들면, 본 발명의 항체를 제조하기 위한 벡터로서는, 포유동물 유래의 발현 벡터(예를 들면, pcDNA3(인비트로겐사 제조)나, pEF-BOS(Nucleic Acids. Res.1990, 18(17),p5322), pEF, pCDM8), 곤충세포 유래의 발현 벡터(예를 들면「Bac-to-BAC baculovairus expression system」(기브코 BRL 제조), pBacPAK8), 식물 유래의 발현 벡터(예를 들면 pMH1, pMH2), 동물 바이러스 유래의 발현 벡터(예를 들면, pHSV, pMV, pAdexLcw), 레트로바이러스 유래의 발현 벡터(예를 들면, pZIPneo), 효모 유래의 발현 벡터(예를 들면, 「Pichia Expression Kit」(인비트로겐 제조), pNV11, SP-Q01), 고초균 유래의 발현 벡터(예를 들면, pPL608, pKTH50)를 들 수 있다.
CHO 세포, COS 세포, NIH3T3 세포 등의 동물세포에서의 발현을 목적으로 한 경우에는, 발현 플라스미드의 벡터가 세포 내에서 발현시키기 위해 필요한 프로모터, 예를 들면 SV40 프로모터(Mulligan등, Nature (1979) 277, 108), MMLV-LTR 프로모터, EF1α 프로모터(Mizushima등, Nucleic Acids Res. (1990) 18, 5322), CMV 프로모터 등을 가지고 있는 것이 불가결하여, 세포로의 형질전환을 선발하기 위한 유전자(예를 들면, 약제(네오마이신, G418 등)에 의해 판별할 수 있는 약제 내성 유전자)를 가지면 더욱 바람직하다. 이러한 특성을 갖는 벡터로서는, 예를 들면, pMAM, pDR2, pBK-RSV, pBK-CMV, pOPRSV, pOP13 등을 들 수 있다.
또한, 유전자를 안정적으로 발현시키며, 또한, 세포 내에서의 유전자의 카피 수의 증폭을 목적으로 하는 경우에는, 핵산 합성 경로를 결손한 CHO 세포에 그것을 상보하는 DHFR 유전자를 갖는 벡터(예를 들면, pSV2-dhfr(「Molecular Cloning 2nd edition」 Cold Spring Harbor Laboratory Press, (1989)) 등)를 도입하고, 메토트렉세이트(MTX)에 의해 증폭시키는 방법을 들 수 있고, 또한, 유전자의 일과성 발현을 목적으로 하는 경우에는, SV40 T 항원을 발현하는 유전자를 염색체 상에 갖는 COS 세포를 사용하여 SV40의 복제 기점을 갖는 벡터(pcD 등)로 형질전환하는 방법을 들 수 있다. 복제 개시점으로서는, 또한, 폴리오마 바이러스, 아데노바이러스, 소유두종 바이러스(BPV) 등의 유래의 것을 사용하는 것도 가능하다. 또한, 숙주세포계에서 유전자 카피 수의 증폭을 위해, 발현 벡터는 선택 마커로서, 아미노글리코시드트랜스페라아제(APH) 유전자, 티미딘키나아제(TK) 유전자, 대장균 크산틴구아닌포스포리보실트랜스페라아제(Ecogpt) 유전자, 디히드로엽산환원효소(dhfr) 유전자 등을 포함할 수 있다.
이것에 의해 얻어진 본 발명의 항체는, 숙주세포내 또는 세포외(배지 등)로부터 단리하여, 실질적으로 순수하고 균일한 항체로서 정제할 수 있다. 항체의 분리, 정제는, 통상의 항체의 정제에서 사용되고 있는 분리, 정제방법을 사용하면 되고, 조금도 한정되는 것은 아니다. 예를 들면, 크로마토그래피 칼럼, 필터, 한외여과, 염석, 용매침전, 용매추출, 증류, 면역침강, SDS-폴리아크릴아미드겔 전기영동, 등전점 전기영동법, 투석, 재결정 등을 적당히 선택, 조합하면 항체를 분리, 정제할 수 있다.
크로마토그래피로서는, 예를 들면 친화성 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 소수성 크로마토그래피, 겔여과, 역상 크로마토그래피, 흡착 크로마토그래피 등을 들 수 있다(Strategies for Protein Purification and Characterization: A Laboratory Course Manual. Ed Daniel R. Marshak et al., Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1996). 이들 크로마토그래피는, 액상 크로마토그래피, 예를 들면 HPLC, FPLC 등의 액상 크로마토그래피 등을 사용해서 행할 수 있다. 친화성 크로마토그래피에 사용하는 칼럼으로서는, Protein A 칼럼, Protein G 칼럼을 들 수 있다. 예를 들면, Protein A를 사용한 칼럼으로서, Hyper D, POROS, Sepharose FF(GE Amersham Biosciences) 등을 들 수 있다. 본 발명은 이들 정제방법을 사용하여, 고도로 정제된 항체도 포함한다.
얻어진 항체는, 균일하게까지 정제할 수 있다. 항체의 분리, 정제는 통상의 단백질에서 사용되고 있는 분리, 정제방법을 사용하면 된다. 예를 들면 친화성 크로마토그래피 등의 크로마토그래피 칼럼, 필터, 한외여과, 염석, 투석, SDS 폴리아크릴아미드겔 전기영동, 등전점 전기영동 등을 적당히 선택, 조합하면, 항체를 분리, 정제할 수 있으나(Antibodies : A Laboratory Manual. Ed Harlow and David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory, 1988), 이들에 한정되는 것은 아니다. 친화성 크로마토그래피에 사용하는 칼럼으로서는, Protein A 칼럼, Protein G 칼럼 등을 들 수 있다.
본 발명에 있어서의 항체의 하나의 태양으로서는, 보조인자 F.VIII를 대체하는 기능을 갖는 것으로부터, 본 발명의 항체는, 그 보조인자의 활성(기능) 저하에 기인하는 질병에 대해서, 유효한 약제로 되는 것이 기대된다. 상기 질병으로서, 예를 들면, 출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환 등을 들 수 있다. 특히, F.VIII/F.VIIIa의 기능 저하나 결손에 의해 출혈 이상증을 일으키는, 혈우병에 대한 우수한 치료효과가 생각된다. 그 중에서도, 혈우병 중, 선천성의 F.VIII/F.VIIIa 기능 저하 또는 결손에 의한 출혈 이상증을 일으키는, 혈우병 A에 대한 우수한 치료제로 되는 것이 기대된다.
본 발명에서는, 본 발명에 기재된 항체 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 (의약) 조성물을 제공한다. 예를 들면, 본 발명의 항체가 F.IX 또는 F.IXa, 및 F.X 양쪽을 인식하고, F.VIII의 기능을 대체하는 항체는, 예를 들면, 출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 의약품(의약 조성물) 또는 약제로 되는 것이 기대된다.
본 발명에 있어서, 출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환이란, 바람직하게는 F.VIII 및/또는 활성화 혈액응고 제VIII 인자(F.VIIIa)의 활성의 저하 내지 결손에 의해 발증 및/또는 진전되는 질환이다. 이러한 질환으로서는, 예를 들면 상기 혈우병 A, F.VIII/F.VIIIa에 대한 인히비터가 출현하고 있는 질환, 후천성 혈우병, 폰 빌레브란트병 등을 들 수 있지만, 이들 질환에 특별히 제한되지 않는다.
치료 또는 예방 목적으로 사용되는 본 발명의 항체를 유효성분으로서 포함하는 의약 조성물은, 필요에 따라, 그들에 대해 불활성인 적당한 약학적으로 허용되는 담체, 매체 등과 혼화하여 제제화할 수 있다. 예를 들면, 멸균수나 생리식염수, 안정제, 부형제, 산화방지제(아스코르브산 등), 완충제(인산, 구연산, 히스티딘, 다른 유기산 등), 방부제, 계면활성제(PEG, Tween 등), 킬레이트제(EDTA 등), 결합제 등을 들 수 있다. 또한, 기타 저분자량의 폴리펩티드, 혈청 알부민, 젤라틴이나 면역 글로불린 등의 단백질, 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 글루타민산, 아스파라긴산, 메티오닌, 아르기닌 및 리신 등의 아미노산, 다당 및 단당 등의 당류나 탄수화물, 만니톨이나 소르비톨 등의 당알코올을 포함하고 있어도 된다. 주사용 수용액으로 하는 경우에는, 예를 들면 생리식염수, 포도당이나 기타 보조제를 포함하는 등장액, 예를 들면, D-소르비톨, D-만노오스, D-만니톨, 염화나트륨을 들 수 있고, 적당한 용해 보조제, 예를 들면 알코올(에탄올 등), 폴리알코올(프로필렌글리콜, PEG 등), 비이온성 계면활성제(폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머 188, HCO-50) 등과 병용해도 된다. 또한, 제제 중에 히알루로니다아제(hyaluronidase)를 혼합함으로써, 보다 커다란 액량을 피하 투여하는 것도 가능하다(Expert Opin Drug Deliv. 2007 Jul;4(4):427-40.).
또한, 필요에 따라 본 발명의 항체를 마이크로캡슐(히드록시메틸셀룰로오스, 젤라틴, 폴리[메틸메타크릴산] 등의 마이크로캡슐)에 봉입하거나, 콜로이도 드러그 딜리버리 시스템(리포솜, 알부민 마이크로스피어, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐 등)으로 하는 것도 가능하다("Remington's Pharmaceutical Science 16th edition", Oslo Ed. (1980) 등 참조). 또한, 약제를 서방성 약제로 하는 방법도 공지로, 본 발명의 항체에 적용 가능하다(Langer et al., J.Biomed.Mater.Res. 15: 267-277 (1981); Langer, Chemtech. 12: 98-105 (1982); 미국특허 제3,773,919호;유럽특허 출원공개(EP) 제58,481호; Sidman et al., Biopolymers 22: 547-556 (1983);EP 제133,988호).
본 발명의 의약 조성물의 투여량은, 제형의 종류, 투여방법, 환자의 연령이나 체중, 환자의 증상, 질환의 종류나 진행의 정도 등을 고려하여, 최종적으로는 의사의 판단에 따라 적당히 결정되는 것이나, 일반적으로 성인의 경우는, 1일당 0.1~2000 ㎎을 1~수 회에 나눠서 투여할 수 있다. 보다 바람직하게는 0.2~1000 ㎎/일, 더욱이 보다 바람직하게는 0.5~500 ㎎/일, 더욱이 보다 바람직하게는 1~300 ㎎/일, 더욱이 보다 바람직하게는 3~100 ㎎/일, 가장 바람직하게는 5~50 ㎎/일이다. 이들 투여량은 환자의 체중이나 연령, 투여방법 등에 따라 변동되나, 당업자라면 적당한 투여량을 적절히 선택하는 것이 가능하다. 투여기간도 환자의 치유경과 등에 따라 적절히 결정하는 것이 바람직하다.
또한 본 발명은 본 발명의 항체를 코드하는 유전자 또는 핵산을 제공한다. 또한, 본 발명의 항체를 코드하는 유전자 또는 핵산을 유전자 치료용 벡터에 삽입하여, 유전자 치료를 행하는 것도 생각할 수 있다. 투여방법으로서는, naked 플라스미드에 의한 직접 투여 외에, 리포솜 등에 팩키징하거나, 레트로바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터, 백시니아 바이러스 벡터, 폭스바이러스 벡터, 아데노바이러스 관련 벡터, HVJ 벡터 등의 각종 바이러스 벡터로서 형성하거나(Adolph『바이러스 게놈법』, CRC Press, Florid (1996) 참조), 또는, 콜로이드금입자 등의 비드 담체에 피복(WO 93/17706 등)하여 투여할 수 있다. 그러나, 생체내에 있어서 항체가 발현되어, 그 작용을 발휘할 수 있는 한 어떠한 방법에 의해 투여해도 된다. 바람직하게는, 적당한 비경구 경로(정맥내, 복강내, 피하, 피내, 지방조직내, 유선조직내, 흡입 또는 근육내의 경로를 매개로 주사, 주입, 또는 가스 유도성 입자 충격법(전자총 등에 의함), 점비약 등 점막 경로를 매개로 하는 방법 등)에 의해 충분한 양이 투여된다. ex vivo에 있어서 리포솜 트랜스펙션, 입자 충격법(미국특허 제4,945,050호), 또는 바이러스 감염을 이용하여 혈액세포 및 골수 유래 세포 등에 투여하여, 그 세포를 환자에게 재도입함으로써 본 발명의 항체를 코드하는 유전자를 투여해도 된다. 유전자 치료에서는, 본 발명의 항체를 코드하는 임의의 유전자를 사용하는 것이 가능하고, 예를 들면, 전술한 Q1, Q31, Q64, Q85, Q153, Q354, Q360, Q405, Q458, Q460, Q499, J232, J259, J268, J300, J321, J326, J327, J339, J344, J346, J142, L2, L45, L248, L324, L334, L377, L404, L406, L408, L180의 CDR을 코드하는 염기서열을 포함하는 유전자를 들 수 있다.
또한 본 발명은 본 발명의 항체 또는 조성물을 투여하는 공정을 포함하는, 출혈, 출혈을 수반하는 질환, 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료하기 위한 방법을 제공한다. 항체 또는 조성물의 투여는, 예를 들면, 상기 방법에 의해 실시할 수 있다.
또한 본 발명은 적어도 본 발명의 항체 또는 조성물을 포함하는, 상기 방법에 사용하기 위한 키트를 제공한다. 그 키트에는, 그 밖에, 주사통, 주사바늘, 약학적으로 허용되는 매체, 알코올 면포, 반창고, 또는 사용방법을 기재한 지시서 등을 팩키지해 두는 것도 가능하다.
또한 본 발명은 본 발명의 다중특이성 항원 결합 분자 또는 이중특이성 항체, 또는 조성물의, 출혈, 출혈을 수반하는 질환 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료제의 제조에 있어서의 사용에 관한 것이다.
또한 본 발명은 출혈, 출혈을 수반하는 질환 또는 출혈에 기인하는 질환의 예방 및/또는 치료용의, 본 발명의 다중특이성 항원 결합 분자 또는 이중특이성 항체, 또는 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 명세서에 있어서 인용된 모든 선행기술문헌은, 참조로써 본 명세서에 포함된다.
실시예
이하, 본 발명을 실시예에 의해 구체적으로 설명하나, 본 발명은 이들 실시예에 제한되는 것은 아니다.
〔실시예 1〕 F.Xa 생산 촉진 활성을 갖는 이중특이성 항체의 제작
WO 2006/109592에서는, F.VIII의 기능을 대체하는 활성을 갖는 이중특이성 항체로서, hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ를 취득하였다. 그러나, 본 항체는, F.IXa가 F.VIIIa를 보조인자로서 F.X를 활성화하는 반응을 저해하는 작용이 있을 가능성이 생각되었다.
도 1에 기재된 바와 같이, F.IX/F.IXa 또는 F.X에 결합하는 항체는, F.IXa와 F.VIIIa의 복합체(Factor Xase(F.Xase)) 형성을 저해, 또는, F.Xase 활성(F.X의 활성화)을 저해할 가능성이 있다. 이하, F.Xase 형성 저해 및/또는 F.Xase 활성 저해작용을, F.Xase 저해작용으로 기재한다. F.Xase 저해작용은, F.VIIIa를 보조인자로 하는 응고반응의 저해로, 환자에게 남아 있는 F.VIII의 기능, 또는, 투여한 F.VIII 제제의 기능을 억제할 가능성이 있다. 그 때문에, 이중특이성 항체의 목적인 F.Xa 생산 촉진 활성이 높은 것이 바람직하나, 또한 F.Xase 저해작용도 낮은 것이 바람직하다. 특히, F.VIII의 기능을 유지하고 있는 환자나 F.VIII 제제에 의한 치료를 받고 있는 환자의 경우는, F.Xa 생산 촉진 활성과 F.Xase 저해작용은, 가능한 한 분리되어 있는 것이 바람직하다.
그러나, F.Xase 저해작용은, 항원(F.IXa 및/또는 F.X)에 결합한다고 하는 항체의 기본적인 성질에 의한 것으로, 한편, F.Xa 생산 촉진 활성을 갖는(F.VIII의 기능을 대체하는) 이중특이성 항체에 있어서도, 항원(F.IXa 및 F.X)에 결합할 필요가 있다. 그 때문에, F.Xase 저해작용을 갖지 않고 F.Xa 생산 촉진 활성을 갖는(F.VIII의 기능을 대체하는) 이중특이성 항체의 취득은, 매우 곤란할 것으로 예상된다. 마찬가지로, 이중특이성 항체에 아미노산 치환을 도입함으로써, F.Xase 저해작용을 저감시키면서, 목적인 F.Xa 생산 촉진 활성을 상승시키는 것은, 매우 곤란할 것으로 예상된다.
본 발명자들은, 당업자 공지의 방법, 즉 항원(인간 F.IXa 또는 인간 F.X)을 면역한 동물의 항체 생산 세포로부터 항체 유전자를 취득하고, 필요에 따라 아미노산 치환을 도입함으로써, 인간 F.IXa 및 인간 F.X에 대한 항체 유전자를 약 200 종류씩 제작하였다. 각 항체 유전자를 동물세포 발현 벡터에 삽입하였다.
항인간 F.IXa 항체 H쇄 발현 벡터, 항인간 F.X 항체 H쇄 발현 벡터 및 공통 항체 L쇄 발현 벡터가 HEK293H 세포 등 포유류세포로 동시에 트랜스펙션됨으로써, 항F.IXa 항체와 항F.X 항체의 조합으로서 4만 이상의 이중특이성 항체를 일과성 발현하였다. 또한, 비교 참조로서, WO 2006/109592에 기재된 이중특이성 항체인 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ(서열번호:165/166/167)를 조제하였다.
WO 2006/106905 또는 WO 1996/027011에 기재된 변이가 각 H쇄의 CH3 도메인에 도입되어 있기 때문에, 이중특이성 항체가 주로 발현하고 있다고 생각되었다. 세포의 배양상청 중의 항체를, Protein A를 사용하여 당업자 공지의 방법에 의해 정제하였다.
본 발명자들은, 이들 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성을 이하의 방법으로 측정하였다. 반응은 모두 실온에서 행해졌다.
0.1% 소혈청 알부민을 포함하는 트리스 완충 생리식염수(이하, TBSB라 칭한다)로 희석한 항체 용액 5 μL를, 27 ng/mL의 Human Factor IXa beta(Enzyme Research Laboratories) 2.5 μL 및 6 IU/mL의 Novact(등록상표) M(화학급 혈청요법 연구소) 2.5 μL와 혼합한 후, 384 웰 플레이트 중에서 실온에서 30분 인큐베이션하였다.
이 혼합액 중의 효소반응은, 24.7 ㎍/mL의 Human Factor X(Enzyme Research Laboratories) 5 μL를 첨가하여 개시시키고, 10분 후, 0.5 M EDTA 5 μL를 첨가하여 정지시켰다. 발색반응은 발색기질 용액 5 μL를 첨가함으로써 개시시켰다. 50분간의 발색반응 후, 405 nm의 흡광도 변화를 SpectraMax 340PC384(Molecular Devices)를 사용해서 측정하였다. F.Xa 생산 촉진 활성은, 항체 첨가 반응액의 흡광도로부터 항체 무첨가 반응액의 흡광도를 뺀 값으로 나타내었다.
Human Factor IXa, Novact(등록상표) M 및 Human Factor X의 용매는 TBCP(93.75 μM 인지질 용액(SYSMEX CO.), 7.5 mM CaCl2, 1.5 mM MgCl2를 포함하는 TBSB)였다. 발색기질 용액인 S-2222TM(CHROMOGENIX)은, 정제수로 1.47 ㎎/mL에 용해하여, 본 어세이에 사용하였다.
본 발명자들은, 항체의 F.Xase 저해작용을 평가하기 위해, F.VIIIa 존재하에 있어서의 F.IXa에 의한 F.X 활성화에 대한 영향을 이하의 방법으로 측정하였다. 반응은 모두 실온에서 행해졌다.
0.1% 소혈청 알부민을 포함하는 트리스 완충 생리식염수(이하, TBSB라 칭한다)로 희석한 항체 용액 5 μL를, 80.9 ng/mL의 Human Factor IXa beta(Enzyme Research Laboratories) 2.5 μL와 혼합한 후, 384 웰 플레이트 중에서 실온에서 30분 인큐베이션하였다.
추가로 1.8 IU/mL의 F.VIIIa(제작방법은 후술) 2.5 μL를 첨가하고, 30초 후, 이 혼합액 중의 효소반응은, 24.7 ㎍/mL의 Human Factor X(Enzyme Research Laboratories) 5 μL를 첨가하여 개시시켰다. 6분 후, 0.5 M EDTA 5 μL를 첨가하여 정지시켰다. 발색반응은 발색기질 용액 5 μL를 첨가함으로써 개시시켰다. 14분간의 발색반응 후, 405 nm의 흡광도 변화를 SpectraMax 340PC384(Molecular Devices)를 사용해서 측정하였다. 항체의 F.Xase 저해작용은, 항체 첨가 반응액의 흡광도로부터 항체 무첨가 반응액의 흡광도를 뺀 값으로 나타내었다.
또한, F.VIIIa는 5.4 IU/mL의 코지네이트(등록상표) FS(바이엘 약품 주식회사)와 1.11 ㎍/mL의 Human alpha Thrombin(Enzyme Research Laboratories)을 1:1의 용량비로 혼합하고, 실온에서 1분간 인큐베이션 후, 혼합액의 반용량인 7.5 U/mL의 Hirudin(Merck KgaA)을 첨가함으로써 조제하였다. 조제한 용액을 1.8 IU/mL의 FVIIIa로 하고, Hirudin을 첨가로부터 1분 후에 어세이에 사용하였다.
Human Factor IXa, Human Factor X, 코지네이트(등록상표) FS, Human alpha Thrombin, Hirudin의 용매는 TBCP(93.75 μM 인지질 용액(SYSMEX CO.), 7.5 mM CaCl2, 1.5 mM MgCl2를 포함하는 TBSB)였다. 발색기질 용액인 S-2222TM(CHROMOGENIX)은, 정제수로 1.47 ㎎/mL에 용해하여, 본 어세이에 사용하였다.
각 이중특이성 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성을 도 3, 도 4에, 각 이중특이성 항체의 F.Xase 저해작용을 도 5에 나타내었다. F.Xa 생산 촉진 활성을 상승시키는 다양한 아미노산 치환을 발견하였으나, 예상된 바와 같이 F.Xa 생산 촉진 활성을 상승시키는 아미노산 치환의 대부분이, F.Xase 저해작용도 상승시켜 버려, F.Xase 저해작용을 억제하는 동시에 F.Xa 생산 촉진 활성을 상승시키는 것은 매우 곤란하였다.
그러한 상황하에서, 본원 발명자들은 F.Xa 생산 촉진 활성이 높고 F.Xase 저해작용이 낮은 이중특이성 항체로서, Q1-G4k/J268-G4h/L45-k, Q1-G4k/J321-G4h/L45-k, Q31-z7/J326-z107/L2-k, Q64-z55/J344-z107/L45-k를 얻었다. 또한, 항인간 F.IXa 항체 H쇄로서, Q1-G4k(서열번호:1), Q31-z7(서열번호:2), Q64-z55(서열번호:3), 프로토타입 항인간 F.X 항체 H쇄로서, J268-G4h(서열번호:4), J321-G4h(서열번호:5), J326-z107(서열번호:6), J344-z107(서열번호:7), 프로토타입 공통 항체 L쇄로서, L2-k(서열번호:8), L45-k(서열번호:9)를 취득하였다. 서열명의 하이푼 앞은 가변영역을 나타내고 있고, 하이푼 뒤는 정상영역을 나타내고 있다. 각 이중특이성 항체명은, 트랜스펙션하는 각 사슬의 서열명을 나열함으로써 나타내어진다.
hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ에 가까운 F.Xa 생산 촉진 활성을 가지고 있었던 이중특이성 항체의 대부분은, 예상된 바와 같이 높은 F.Xase 저해작용을 가지고 있었으나, 이들 이중특이성 항체(Q1-G4k/J268-G4h/L45-k, Q1-G4k/J321-G4h/L45-k, Q31-z7/J326-z107/L2-k, Q64-z55/J344-z107/L45-k)는, WO 2006/109592에 기재된 hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ 보다도 높은 F.Xa 생산 촉진 활성을 갖고, 낮은 F.Xase 저해작용을 가지고 있는 것이 발견되었다. 본 발명자들은, 이들 4개의 항체를 프로토타입 항체로 하여, 추가로 F.Xa 생산 촉진 활성을 상승시키고, F.Xase 저해작용을 감약시키는 검토를 행하였다. F.Xa 생산 촉진 활성을 상승시키고, F.Xase 저해작용을 감약시키는 이중특이성 항체의 스크리닝에 대해서 도 2에 나타내었다.
〔실시예 2〕 개변 항체의 제작
본 발명자들은, 변이 도입을 위한 PCR 등의 당업자 공지의 방법에 의해, 프토로 타입 항체의 각 사슬에 대해 실시예 1에서 발견된 F.Xa 생산 촉진 활성 및 F.Xase 저해작용에 영향을 미치는 다양한 아미노산 변이를 조합해서 도입하고, 개변된 사슬의 조합을 대규모로 평가함으로써, 4개의 프로토타입 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성을 추가로 상승시키고, F.Xase 저해작용을 감약시키는 아미노산 치환의 스크리닝을 행하였다.
아미노산 치환이 도입된 각 개변 이중특이성 항체는, 프로토타입 항체와 동일한 방법으로 일과성으로 발현되어, 정제되었다. 이들 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성을 이하의 방법으로 측정하였다. 반응은 모두 실온에서 행해졌다.
0.1% 소혈청 알부민을 포함하는 트리스 완충 생리식염수(이하, TBSB라 칭한다)로 희석한 항체 용액 5 μL를, 27 ng/mL의 Human Factor IXa beta(Enzyme Research Laboratories) 2.5 μL 및 6 IU/mL의 Novact(등록상표) M(화학급 혈청요법 연구소) 2.5 μL와 혼합한 후, 384 웰 플레이트 중에서 실온에서 30분 인큐베이션하였다.
이 혼합액 중의 효소반응은, 24.7 ㎍/mL의 Human Factor X(Enzyme Research Laboratories) 5 μL를 첨가하여 개시시키고, 2분 후, 0.5 M EDTA 5 μL를 첨가하여 정지시켰다. 발색반응은 발색기질 용액 5 μL를 첨가함으로써 개시시켰다. 20분간의 발색반응 후, 405 nm의 흡광도 변화는 SpectraMax 340PC384(Molecular Devices)를 사용해서 측정하였다. F.Xa 생산 촉진 활성은, 항체 첨가 반응액의 흡광도로부터 항체 무첨가 반응액의 흡광도를 뺀 값으로 나타내었다.
Human Factor IXa, Novact(등록상표) M 및 Human Factor X의 용매는 TBCP(93.75 μM 인지질 용액(SYSMEX CO.)), 7.5 mM CaCl2, 1.5 mM MgCl2를 포함하는 TBSB)였다. 발색기질 용액인 S-2222TM(CHROMOGENIX)은, 정제수로 1.47 ㎎/mL에 용해해서 사용하였다.
이미 기재한 방법으로, 항체의 F.Xase 저해작용도 평가하였다.
각 개변 이중특이성 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성을 도 4에, 각 이중특이성 항체의 F.Xase 저해작용을 도 5에 기재하였다.
본원 발명자들은 F.Xa 생산 촉진 활성이 높고 F.Xase 저해작용이 낮은 이중특이성 항체로서, Q85-G4k/J268-G4h/L406-k, Q85-G4k/J321-G4h/L334-k, Q64-z7/J344-z107/L406-k, Q64-z7/J326-z107/L334-k를 얻었다. 또한, 항인간 F.IXa 항체 H쇄로서, Q64-z7(서열번호:10), Q85-G4k(서열번호:11), F.Xa 생산 촉진 활성이 상승된 공통 항체 L쇄로서, L334-k(서열번호:30), L406-k(서열번호:33)를 발견하였다. Q85-G4k/J268-G4h/L406-k, Q85-G4k/J321-G4h/L334-k, Q64-z7/J344-z107/L406-k, Q64-z7/J326-z107/L334-k는, F.Xase 저해작용이 약간 상승하고 있지만, F.Xa 생산 촉진 활성은 크게 상승하였다. 이들 개변 항체는, F.Xase 저해작용의 상승에 비해 F.Xa 생산 촉진 활성이 매우 큰 것으로부터, 프로토타입 항체 보다도 F.Xa 생산 촉진 활성과 F.Xase 저해작용을 추가로 분리할 수 있었다. 이와 같이, F.Xase 저해작용을 억제하는 동시에 F.Xa 생산 촉진 활성을 상승시키는 조합을 발견하였다.
이중특이성 항체에 의해 F.VIII의 기능을 대체하기 위해서는, 발견된 프로토타입 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성은 보다 높은 것이 바람직한 한편으로, F.VIII의 기능을 유지하고 있는 환자나 F.VIII 제제에 의한 치료를 받고 있는 환자에 대해서도 임상에서 사용하기 위해서는, F.Xase 저해작용은 보다 낮은 것이 바람직할 것으로 생각되었다. 그 때문에, 추가로 개변을 행하여, F.Xase 저해작용을 상승시키지 않고, F.Xa 생산 촉진 활성을 추가로 상승시킨 이중특이성 항체의 제작을 행하였다.
그 결과, F.Xa 생산 촉진 활성이 높고 F.Xase 저해작용이 낮은 이중특이성 항체로서, Q153-G4k/J232-G4h/L406-k, Q354-z106/J259-z107/L324-k, Q360-G4k/J232-G4h/L406-k, Q360-z118/J300-z107/L334-k, Q405-G4k/J232-G4h/L248-k, Q458-z106/J346-z107/L408-k, Q460-z121/J327-z119/L334-k, Q499-z118/J327-z107/L334-k, Q499-z118/J327-z107/L377-k, Q499-z118/J346-z107/L248-k, Q499-z121/J327-z119/L404-k, Q499-z121/J339-z119/L377-k, Q153-G4k/J142-G4h/L180-k를 얻었다. 또한 항인간 F.IXa 항체 H쇄로서, Q153-G4k(서열번호:12), Q354-z106(서열번호:13), Q360-G4k(서열번호:14), Q360-z118(서열번호:15), Q405-G4k(서열번호:16), Q458-z106(서열번호:17), Q460-z121(서열번호:18), Q499-z118(서열번호:19), Q499-z121(서열번호:20), F.Xa 생산 촉진 활성이 상승한 항인간 F.X 항체 H쇄로서, J232-G4h(서열번호:21), J259-z107(서열번호:22), J300-z107(서열번호:23), J327-z107(서열번호:24), J327-z119(서열번호:25), J339-z119(서열번호:26), J346-z107(서열번호:27), J142-G4h(서열번호:170), 공통 항체 L쇄로서 L248-k(서열번호:28), L324-k(서열번호:29), L377-k(서열번호:31), L404-k(서열번호:32), L408-k(서열번호:34), L180-k(서열번호:171)를 발견하였다.
이들 항체는, F.Xa 생산 촉진 활성이 매우 높은 한편으로, F.Xase 저해작용은 억제되어 있는 것으로부터, F.VIII의 기능을 유지하고 있는 환자나 F.VIII 제제에 의한 치료를 받고 있는 환자에 대해서도 매우 유용한 성질을 가지고 있는 것으로 생각된다. 항체는 일반적으로 반감기가 길고, 피하투여가 가능한 것으로부터, 이들 이중특이성 항체는, 혈우병 A에 있어서의 기존의 FVIII 제제의 정맥내 투여에 의한 정기 보충 요법과 비교하여, 높은 가치를 혈우병 A 환자에게 부여하는 것이 가능할 것으로 생각된다.
실시예 1 및 실시예 2에서 사용한 각 사슬의 가변영역의 서열 비교를 도 6a~6d에 나타내었다. 이중특이성 항체의 F.Xa 생산 촉진 활성을 향상시키기 위해서는, 예를 들면 이하의 아미노산이 중요한 것이 명확해졌다. 항인간 F.IXa 항체 H쇄에 있어서의 34번 위치의 이소류신, 35번 위치의 아스파라긴 또는 글루타민 또는 세린, 49번 위치의 세린, 61번 위치의 아르기닌, 62번 위치의 글루타민산, 96번 위치의 세린 또는 트레오닌, 98번 위치의 리신 또는 아르기닌, 99번 위치의 세린 또는 글루타민산, 100번 위치의 페닐알라닌 또는 티로신, 100b번 위치의 글리신, 102번 위치의 티로신 등. 항인간 F.X 항체 H쇄에 있어서의 35번 위치의 아스파라긴산, 53번 위치의 아르기닌, 73번 위치의 리신, 76번 위치의 글리신, 96번 위치의 리신 또는 아르기닌, 98번 위치의 티로신, 100번 위치의 티로신, 100a번 위치의 히스티딘 등. 공통 항체 L쇄에 있어서의 27번 위치의 리신 또는 아르기닌, 30번 위치의 글루타민산, 31번 위치의 아르기닌, 32번 위치의 글루타민, 50번 위치의 아르기닌 또는 글루타민, 52번 위치의 세린, 53번 위치의 아르기닌, 54번 위치의 리신, 55번 위치의 글루타민산, 92번 위치의 세린, 93번 위치의 세린, 94번 위치의 프롤린, 95번 위치의 프롤린 등(가변영역의 아미노산 번호는 Kabat 넘버링(Kabat EA et al. 1991. Sequences of Proteins of Immunological Interest.NIH)에 따른다).
본 발명에 의해 효소 및 그 효소의 기질 양쪽을 인식하는 항체로서, F.VIII의 기능을 대체하는 활성이 높은 다중특이성 항원 결합 분자가 제공되었다. 또한, 효소 및 그 효소의 기질 양쪽을 인식하는 항체로서, F.VIII의 기능을 대체하는 활성이 높고, 또한, F.Xase 저해작용이 낮은 다중특이성 항원 결합 분자가 제공되었다.
인간화 항체는 일반적으로, 혈중에서의 안정성이 높고 면역원성도 낮다고 생각되는 것으로부터, 본 발명의 다중특이성 항체는 의약품으로서 매우 유망할 것으로 생각된다.
SEQUENCE LISTING <110> CHUGAI SEIYAKU KABUSHIKI KAISHA <120> MULTIPLE SPECIFIC ANTIGEN-BINDING MOLECULES THAT SUBSTITUTE FUNCTION OF BLOOD COAGULATION FACTOR VIII <130> C1-A1007P <150> JP 2010-257022 <151> 2010-11-17 <160> 179 <170> PatentIn version 3.4 <210> 1 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 1 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg His Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Leu Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 2 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 2 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Leu Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 3 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 3 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Phe Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 4 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 4 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Arg Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Cys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 <210> 5 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 5 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Cys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 <210> 6 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 6 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Asn His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn Arg Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 <210> 7 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 7 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Lys Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Gln Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn Arg Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 <210> 8 <211> 213 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 8 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Lys Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Gly Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 115 120 125 Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 130 135 140 Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 145 150 155 160 Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190 Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205 Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 9 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 9 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Lys Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 10 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 10 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Phe Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 11 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 11 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Tyr Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 12 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 12 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Arg Ala Gly His Asn Tyr Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 13 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 13 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly His Asn Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 14 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 14 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly His Asn Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 15 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 15 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly His Asn Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 <210> 16 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 16 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly His Asn Phe Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 17 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 17 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly Lys Ser Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 <210> 18 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 18 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly Arg Glu Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn Arg Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 <210> 19 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 19 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Thr Gly Arg Glu Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 <210> 20 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 20 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Thr Gly Arg Glu Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn Arg Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 <210> 21 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 21 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Cys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 <210> 22 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 22 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn Arg Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 <210> 23 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 23 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn Arg Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 <210> 24 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 24 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn Arg Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 <210> 25 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 25 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 <210> 26 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 26 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 <210> 27 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 27 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn Arg Tyr Thr Gln Glu Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 <210> 28 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 28 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Lys Asn Ile Glu Arg Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 29 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 29 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Asp Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 30 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 30 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 31 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 31 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 32 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 32 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 33 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 33 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 34 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 34 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Asp Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 35 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 35 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg His Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Leu Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 36 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 36 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Leu Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 37 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 37 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Phe Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 38 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 38 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ala Gly His Asn Tyr Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 39 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 39 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Arg Ala Gly His Asn Tyr Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 40 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 40 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly His Asn Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 41 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 41 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly His Asn Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 42 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 42 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly His Asn Phe Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 43 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 43 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly Lys Ser Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 44 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 44 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Ser Gly Arg Glu Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 45 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 45 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr 20 25 30 Asp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Thr Gly Arg Glu Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 46 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 46 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 47 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 47 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 48 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 48 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Arg Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 49 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 49 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 50 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 50 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 51 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 51 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Asn His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 52 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 52 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 53 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 53 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 54 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 54 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Lys Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Gln Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 55 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 55 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ile Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr His Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 56 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 56 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Lys Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Gly Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 57 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 57 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Lys Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 58 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 58 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Lys Asn Ile Glu Arg Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 59 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 59 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Asp Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 60 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 60 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 61 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 61 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 62 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 62 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 63 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 63 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 64 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 64 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Asp Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 65 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 65 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu 325 <210> 66 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 66 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu 325 <210> 67 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 67 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu 325 <210> 68 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 68 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu 325 <210> 69 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 69 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Pro 325 <210> 70 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 70 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Lys Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Pro 325 <210> 71 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 71 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Cys Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu 325 <210> 72 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 72 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Tyr Thr Gln Glu Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Pro 325 <210> 73 <211> 325 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 73 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Glu Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Pro 325 <210> 74 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 74 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 1 5 10 15 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 20 25 30 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 35 40 45 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 50 55 60 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 65 70 75 80 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 85 90 95 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 <210> 75 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 75 Tyr Tyr Asp Met Ala 1 5 <210> 76 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 76 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg His Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 77 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 77 Arg Ala Gly His Asn Leu Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 1 5 10 <210> 78 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 78 Tyr Tyr Asp Met Ala 1 5 <210> 79 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 79 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 80 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 80 Arg Ala Gly His Asn Leu Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 1 5 10 <210> 81 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 81 Tyr Tyr Asp Met Ala 1 5 <210> 82 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 82 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 83 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 83 Arg Ala Gly His Asn Phe Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Phe 1 5 10 <210> 84 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 84 Tyr Tyr Asp Met Ala 1 5 <210> 85 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 85 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 86 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 86 Arg Ala Gly His Asn Tyr Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 87 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 87 Tyr Tyr Asp Ile Asn 1 5 <210> 88 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 88 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 89 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 89 Arg Ala Gly His Asn Tyr Gly Ala Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 90 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 90 Tyr Tyr Asp Ile Asn 1 5 <210> 91 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 91 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 92 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 92 Arg Ser Gly His Asn Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 93 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 93 Tyr Tyr Asp Ile Gln 1 5 <210> 94 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 94 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 95 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 95 Arg Ser Gly His Asn Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 96 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 96 Tyr Tyr Asp Ile Ser 1 5 <210> 97 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 97 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 98 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 98 Arg Ser Gly His Asn Phe Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 99 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 99 Tyr Tyr Asp Ile Gln 1 5 <210> 100 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 100 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 101 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 101 Arg Ser Gly Lys Ser Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 102 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 102 Tyr Tyr Asp Ile Gln 1 5 <210> 103 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 103 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 104 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 104 Arg Ser Gly Arg Glu Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 105 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 105 Tyr Tyr Asp Ile Gln 1 5 <210> 106 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 106 Ser Ile Ser Pro Ser Gly Gln Ser Thr Tyr Tyr Arg Arg Glu Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 107 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 107 Arg Thr Gly Arg Glu Tyr Gly Gly Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 108 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 108 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 109 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 109 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 110 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 110 Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 111 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 111 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 112 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 112 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 113 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 113 Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 114 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 114 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 115 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 115 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 116 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 116 Arg Lys Ser Arg Gly Tyr His Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 117 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 117 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 118 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 118 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 119 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 119 Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 120 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 120 Asp Asn Asn Met His 1 5 <210> 121 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 121 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 122 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 122 Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 123 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 123 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 124 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 124 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 125 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 125 Arg Lys Ser Tyr Gly Asn His Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 126 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 126 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 127 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 127 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 128 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 128 Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr Tyr Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 129 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 129 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 130 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 130 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 131 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 131 Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 132 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 132 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 133 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 133 Asp Ile Asn Thr Lys Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 134 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 134 Arg Gln Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 135 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 135 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 136 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 136 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 137 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 137 Arg Lys Ser Tyr Gly Tyr His Leu Asp Glu 1 5 10 <210> 138 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 138 Lys Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Lys Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 139 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 139 Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser 1 5 <210> 140 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 140 Gln Gln Tyr Tyr Ser Gly Leu Thr 1 5 <210> 141 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 141 Lys Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Lys Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 142 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 142 Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser 1 5 <210> 143 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 143 Gln Gln Tyr Tyr Ser Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 144 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 144 Lys Ala Ser Lys Asn Ile Glu Arg Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 145 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 145 Arg Ala Ser Arg Lys Glu Ser 1 5 <210> 146 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 146 Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 147 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 147 Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 148 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 148 Arg Ala Asp Arg Lys Glu Ser 1 5 <210> 149 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 149 Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 150 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 150 Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 151 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 151 Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser 1 5 <210> 152 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 152 Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 153 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 153 Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln Leu Ala 1 5 10 <210> 154 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 154 Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser 1 5 <210> 155 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 155 Gln Gln Tyr Ser Ser Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 156 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 156 Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln Leu Ala 1 5 10 <210> 157 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 157 Gln Ala Ser Arg Lys Glu Ser 1 5 <210> 158 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 158 Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 159 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 159 Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln Leu Ala 1 5 10 <210> 160 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 160 Arg Ala Ser Arg Lys Glu Ser 1 5 <210> 161 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 161 Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 162 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 162 Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Gln Leu Ala 1 5 10 <210> 163 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 163 Arg Ala Asp Arg Lys Glu Ser 1 5 <210> 164 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 164 Gln Gln Tyr Ser Asp Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 165 <211> 118 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 165 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Gln Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn Arg Lys Phe 50 55 60 Arg Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Gly Gln Gly Tyr Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Glu Gly Thr 100 105 110 Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 166 <211> 119 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 166 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Gln Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Lys Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Ile Met Thr Ile Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Arg Ser Tyr Gly Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Arg Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 167 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 167 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asn Tyr Ile Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 168 <211> 326 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 168 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly 325 <210> 169 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 169 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 1 5 10 15 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 20 25 30 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 35 40 45 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 50 55 60 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 65 70 75 80 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 85 90 95 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 <210> 170 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 170 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Thr Met Thr Ile Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Arg Ser Tyr Gly Tyr Tyr His Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Cys Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 <210> 171 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 171 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 172 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 172 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn 20 25 30 Asn Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Thr Met Thr Ile Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Arg Ser Tyr Gly Tyr Tyr His Asp Glu Trp Gly Glu Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 173 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 173 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Arg Lys Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 174 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 174 Asp Asn Asn Met Asp 1 5 <210> 175 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 175 Asp Ile Asn Thr Arg Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Glu Glu Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 176 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 176 Arg Arg Ser Tyr Gly Tyr Tyr His Asp Glu 1 5 10 <210> 177 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 177 Lys Ala Ser Arg Asn Ile Glu Arg Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 178 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 178 Ser Ala Ser Arg Lys Glu Ser 1 5 <210> 179 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial sequence <400> 179 Gln Gln Tyr Tyr Ser Pro Pro Leu Thr 1 5

Claims (29)

  1. 혈액응고 제IX 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제IX 인자를 인식하는 제1 항원 결합 부위, 및 혈액응고 제X 인자를 인식하는 제2 항원 결합 부위를 포함하는 다중특이성 항원 결합 분자로서, 상기 제1 항원 결합 부위가 이하의 (a)~(n) 및 (u) 중 어느 하나에 기재된 이중특이성 항체에 결합하는 혈액응고 제IX 인자 및/또는 활성화 혈액응고 제IX 인자상의 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하고, 상기 제2 항원 결합 부위가 상기 이중특이성 항체에 결합하는 혈액응고 제X 인자상의 에피토프와 중복되는 에피토프에 결합하는, 다중특이성 항원 결합 분자:
    (a) 제1 폴리펩티드가 서열번호:1에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:4에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q1-G4k/J268-G4h/L45-k),
    (b) 제1 폴리펩티드가 서열번호:1에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:5에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q1-G4k/J321-G4h/L45-k),
    (c) 제1 폴리펩티드가 서열번호:2에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:6에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:8에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q31-z7/J326-z107/L2-k),
    (d) 제1 폴리펩티드가 서열번호:3에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:7에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:9에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z55/J344-z107/L45-k),
    (e) 제1 폴리펩티드가 서열번호:10에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:6에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z7/J326-z107/L334-k),
    (f) 제1 폴리펩티드가 서열번호:10에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:7에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q64-z7/J344-z107/L406-k),
    (g) 제1 폴리펩티드가 서열번호:11에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:4에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q85-G4k/J268-G4h/L406-k),
    (h) 제1 폴리펩티드가 서열번호:11에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:5에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q85-G4k/J321-G4h/L334-k),
    (i) 제1 폴리펩티드가 서열번호:12에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q153-G4k/J232-G4h/L406-k),
    (j) 제1 폴리펩티드가 서열번호:13에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:22에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:29에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q354-z106/J259-z107/L324-k),
    (k) 제1 폴리펩티드가 서열번호:14에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:33에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q360-G4k/J232-G4h/L406-k),
    (l) 제1 폴리펩티드가 서열번호:15에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:23에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:30에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q360-z118/J300-z107/L334-k),
    (m) 제1 폴리펩티드가 서열번호:16에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:21에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:28에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q405-G4k/J232-G4h/L248-k),
    (n) 제1 폴리펩티드가 서열번호:17에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:27에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:34에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q458-z106/J346-z107/L408-k),
    (u) 제1 폴리펩티드가 서열번호:12에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄, 제2 폴리펩티드가 서열번호:170에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 H쇄 및 제3 폴리펩티드와 제4 폴리펩티드가 서열번호:171에 기재된 공통 L쇄로 이루어지는 이중특이성 항체(Q153-G4k/J142-G4h/L180-k).
  2. 제 1 항에 있어서,
    혈액응고 제VIII 인자의 기능을 대체하는, 다중특이성 항원 결합 분자.
  3. 제 2 항에 있어서,
    혈액응고 제VIII 인자의 기능을 대체하는 기능이, 서열번호: 165와 166으로 이루어지는 H쇄 및 서열번호: 167로 이루어지는 공통 L쇄를 갖는 이중특이성 항체(hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ)와 비교하여 높은 활성화 혈액응고 제X 인자(F, Xa) 생산 촉진 활성에 기인하는 기능인, 다중특이성 항원 결합 분자.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
    다중특이성 항원 결합 분자가 다중특이성 항체인, 다중특이성 항원 결합 분자.
  5. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자를 코드하는 핵산.
  6. 제 5 항에 기재된 핵산이 삽입된 벡터.
  7. 제 5 항에 기재된 핵산 또는 상기 핵산이 삽입된 벡터를 포함하는 숙주세포.
  8. 제 7 항에 기재된 숙주세포를 배양함으로써, 다중특이성 항원 결합 분자 또는 이중특이성 항체를 제조하는 방법.
  9. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자, 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는, 혈우병 A, 후천성 혈우병 또는 폰 빌레브란트병의 예방 및/또는 치료를 위한 의약 조성물.
  10. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 기재된 다중특이성 항원 결합 분자를 포함하는, 혈우병 A, 후천성 혈우병 또는 폰 빌레브란트병을 예방 및/또는 치료하는 방법에 사용하기 위한 키트.
  11. 삭제
  12. 삭제
  13. 삭제
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 삭제
  21. 삭제
  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 삭제
  25. 삭제
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 삭제
  29. 삭제
KR1020137013908A 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자 Active KR101962483B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JPJP-P-2010-257022 2010-11-17
JP2010257022 2010-11-17
PCT/JP2011/076486 WO2012067176A1 (ja) 2010-11-17 2011-11-17 血液凝固第viii因子の機能を代替する機能を有する多重特異性抗原結合分子

Related Child Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137018781A Division KR101398363B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
KR1020137018788A Division KR101398290B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
KR1020197007879A Division KR102099580B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20130108407A KR20130108407A (ko) 2013-10-02
KR101962483B1 true KR101962483B1 (ko) 2019-03-29

Family

ID=46084097

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197007879A Active KR102099580B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
KR1020137013908A Active KR101962483B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
KR1020137018781A Active KR101398363B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
KR1020137018788A Active KR101398290B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197007879A Active KR102099580B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137018781A Active KR101398363B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
KR1020137018788A Active KR101398290B1 (ko) 2010-11-17 2011-11-17 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자

Country Status (28)

Country Link
US (11) US9334331B2 (ko)
EP (2) EP2644698B1 (ko)
JP (10) JP6013915B2 (ko)
KR (4) KR102099580B1 (ko)
CN (2) CN105859889B (ko)
AU (2) AU2011330184B2 (ko)
BR (1) BR112013012213A2 (ko)
CA (1) CA2817964C (ko)
DK (1) DK2644698T3 (ko)
ES (1) ES2660151T3 (ko)
FR (1) FR18C1031I2 (ko)
HR (1) HRP20180421T1 (ko)
HU (2) HUE038305T2 (ko)
LT (2) LT2644698T (ko)
LU (1) LUC00076I2 (ko)
MX (1) MX355060B (ko)
MY (1) MY166429A (ko)
NL (1) NL300940I2 (ko)
NO (3) NO2644698T3 (ko)
PH (2) PH12013500974A1 (ko)
PL (1) PL2644698T3 (ko)
PT (1) PT2644698T (ko)
RS (1) RS57038B1 (ko)
RU (3) RU2620071C2 (ko)
SI (1) SI2644698T1 (ko)
TR (1) TR201802772T4 (ko)
TW (4) TWI452136B (ko)
WO (1) WO2012067176A1 (ko)

Families Citing this family (173)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4966497B2 (ja) * 2002-11-15 2012-07-04 ゲンマブ エー/エス Cd25に対するヒトモノクローナル抗体
EP3050963B1 (en) 2005-03-31 2019-09-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for production of polypeptide by regulation of assembly
WO2007114325A1 (ja) 2006-03-31 2007-10-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 二重特異性抗体を精製するための抗体改変方法
ES2892925T3 (es) 2006-03-31 2022-02-07 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Métodos para controlar la farmacocinética en sangre de anticuerpos
ES2666650T3 (es) 2006-12-29 2018-05-07 OstéoQC Inc. Métodos para alterar el crecimiento óseo mediante la administración de antagonista o agonista de sost o wise
EA020465B1 (ru) * 2007-02-16 2014-11-28 Мерримак Фармасьютикалз, Инк. ИЗОЛИРОВАННЫЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА, КОТОРЫЕ СВЯЗЫВАЮТСЯ С ErbB3, НАБОРЫ И КОМПОЗИЦИИ, ИХ СОДЕРЖАЩИЕ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
CL2008002886A1 (es) 2007-09-26 2009-12-04 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Region constante de un anticuerpo humano; anticuerpo anti-receptor de interleucina-6 (il-6) y composicion farmaceutica que la comprende.
EP3127921A1 (en) 2007-09-26 2017-02-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substition in cdr
WO2010107110A1 (ja) 2009-03-19 2010-09-23 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
WO2010107109A1 (ja) 2009-03-19 2010-09-23 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
CN102770537A (zh) * 2009-12-25 2012-11-07 中外制药株式会社 用于纯化多肽多聚体的多肽的修饰方法
TWI505838B (zh) 2010-01-20 2015-11-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Stabilized antibody solution containing
JP5889181B2 (ja) 2010-03-04 2016-03-22 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
SMT202000095T1 (it) * 2010-05-14 2020-03-13 Amgen Inc Formulazioni di anticorpi anti-sclerostina ad alta concentrazione
CN107596365A (zh) 2010-06-18 2018-01-19 埃克斯生物科技公司 关节炎治疗
EP2644698B1 (en) 2010-11-17 2018-01-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Multi-specific antigen-binding molecule having alternative function to function of blood coagulation factor viii
DK2647707T3 (en) 2010-11-30 2018-11-19 Chugai Pharmaceutical Co Ltd CYTOTOXICITY-INducing THERAPEUTIC AGENT
EP2686418A4 (en) 2011-03-17 2015-04-22 Minerva Biotechnologies Corp METHOD FOR THE PRODUCTION OF PLURIPOTENTAL STEM CELLS
US8790651B2 (en) 2011-07-21 2014-07-29 Zoetis Llc Interleukin-31 monoclonal antibody
EP2787078B1 (en) 2011-10-31 2019-05-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule having regulated conjugation between heavy-chain and light-chain
MX2019001355A (es) 2012-05-10 2023-01-17 Bioatla Llc Anticuerpos monoclonales multiespecíficos.
HUE044363T2 (hu) * 2012-09-26 2019-10-28 Univ Wuerzburg J Maximilians Növekedési és differenciálódási faktor 15 (GDF-15) elleni monoklonális antitestek
WO2014050926A1 (ja) 2012-09-28 2014-04-03 中外製薬株式会社 血液凝固反応の評価方法
US9708404B2 (en) * 2012-12-21 2017-07-18 Seattle Genetics, Inc. Anti-NTB-A antibodies and related compositions and methods
KR102208861B1 (ko) * 2012-12-21 2021-01-27 아베오 파마슈티컬즈, 인크. 항-gdf15 항체
TWI682781B (zh) 2013-07-11 2020-01-21 美商再生元醫藥公司 藉由投與il-4r抑制劑治療嗜酸性食道炎的方法
CN105722859B (zh) * 2013-07-25 2021-05-07 西托姆克斯治疗公司 多特异性抗体、多特异性可活化抗体及其使用方法
DK3050896T3 (da) 2013-09-27 2021-07-19 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Fremgangsmåde til fremstilling af en polypeptid-heteromultimer
RS62373B1 (sr) * 2013-11-06 2021-10-29 Janssen Biotech Inc Anti-ccl17 antitela
US11072647B2 (en) * 2013-12-19 2021-07-27 Onsejo Nacional DE Investigation Cientiticay Tecnica TGF-receptor II isoform, fusion peptide, methods of treatment and methods in vitro
NZ720353A (en) * 2013-12-30 2019-12-20 Epimab Biotherapeutics Inc Fabs-in-tandem immunoglobulin and uses thereof
US11485787B2 (en) * 2014-02-05 2022-11-01 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Agents that modulate RGMb-neogenin-BMP signaling and methods of use thereof
US20170204174A1 (en) * 2014-03-26 2017-07-20 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Monoclonal antibodies to growth and differentiation factor 15 (gdf-15), and uses thereof for treating cancer cachexia and cancer
CN105294857B (zh) * 2014-06-18 2019-02-19 上海交通大学 基于fix的抗原表位及其应用
WO2015196142A1 (en) * 2014-06-20 2015-12-23 Aveo Pharmaceuticals, Inc. Treatment of congestive heart failure and other cardiac dysfunction using a gdf15 modulator
TW201625299A (zh) * 2014-06-20 2016-07-16 Chugai Pharmaceutical Co Ltd 用於因第viii凝血因子及/或活化的第viii凝血因子的活性降低或欠缺而發病及/或進展的疾病之預防及/或治療之醫藥組成物
US9212225B1 (en) * 2014-07-01 2015-12-15 Amphivena Therapeutics, Inc. Bispecific CD33 and CD3 binding proteins
CA2955084C (en) * 2014-07-16 2023-08-29 Transgene Sa Combination of oncolytic virus with immune checkpoint modulators
JP6858559B2 (ja) 2014-08-20 2021-04-14 中外製薬株式会社 蛋白質溶液の粘度測定方法
TWI701435B (zh) * 2014-09-26 2020-08-11 日商中外製藥股份有限公司 測定fviii的反應性之方法
TWI700300B (zh) 2014-09-26 2020-08-01 日商中外製藥股份有限公司 中和具有第viii凝血因子(fviii)機能替代活性的物質之抗體
WO2016075612A1 (en) * 2014-11-12 2016-05-19 Rinat Neuroscience Corp. Inhibitory chimeric antigen receptors
WO2016104657A1 (ja) * 2014-12-26 2016-06-30 橋本 正 癌治療剤
AU2015373910B2 (en) 2015-01-02 2021-11-18 Takeda Pharmaceutical Company Limited Bispecific antibodies against plasma kallikrein and factor XII
JP6763783B2 (ja) 2015-01-30 2020-09-30 学校法人 埼玉医科大学 抗alk2抗体
CN107108729A (zh) 2015-02-05 2017-08-29 中外制药株式会社 包含离子浓度依赖性的抗原结合结构域的抗体,fc区变体,il‑8‑结合抗体,及其应用
JP2018508509A (ja) * 2015-02-22 2018-03-29 ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッド Cd137に結合する抗体医薬
CN108064236B (zh) * 2015-03-31 2021-12-10 免疫医疗有限公司 新颖的il33形式、il33的突变形式、抗体、测定及其使用方法
WO2016159213A1 (ja) 2015-04-01 2016-10-06 中外製薬株式会社 ポリペプチド異種多量体の製造方法
WO2016166014A1 (en) * 2015-04-17 2016-10-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with coagulation factors and multispecific antibodies
JP2018123055A (ja) * 2015-04-24 2018-08-09 公立大学法人奈良県立医科大学 血液凝固第viii因子(fviii)の機能を代替する多重特異性抗原結合分子を含有する、血液凝固第xi因子(fxi)異常症の予防および/または治療に用いられる医薬組成物
EP3287791B1 (en) * 2015-04-24 2025-02-19 Public University Corporation Nara Medical University Method for evaluating coagulation ability of blood specimen, and reagent, reagent kit and device to be used therein
BR112017025479A2 (pt) 2015-05-29 2018-08-07 Amphivena Therapeutics Inc métodos para utilizar proteínas de ligação cd33 e cd3 biespecíficas
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie
WO2017022651A1 (ja) 2015-07-31 2017-02-09 中外製薬株式会社 アニオン性ポリマーによる抗体を含有する組成物の精製方法
KR102538745B1 (ko) 2015-09-18 2023-06-01 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 Il-8에 결합하는 항체 및 그의 사용
TW202417497A (zh) 2015-10-12 2024-05-01 美商再生元醫藥公司 活化瘦素受體的抗原結合蛋白
RU2727914C2 (ru) * 2015-11-17 2020-07-24 Сучжоу Санкадия Биофармасьютикалз Ко., Лтд. Антитело против лиганда 1 запрограммированной гибели клеток (pd-l1), его антигенсвязывающий фрагмент и их медицинское применение
US20200270363A1 (en) * 2015-12-25 2020-08-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody having enhanced activity, and method for modifying same
JP7219005B2 (ja) * 2015-12-28 2023-02-07 中外製薬株式会社 Fc領域含有ポリペプチドの精製を効率化するための方法
CA3011092A1 (en) * 2016-01-12 2017-07-20 Palleon Pharmaceuticals Inc. Use of siglec-7 or siglec-9 antibodies for the treatment of cancer
AR108240A1 (es) 2016-04-28 2018-08-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulaciones que contienen anticuerpos
CN113372446A (zh) * 2016-06-08 2021-09-10 苏州康乃德生物医药有限公司 用于结合白细胞介素4受体的抗体
AU2017283787B2 (en) * 2016-06-15 2020-09-17 Novartis Ag Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (BMP6)
EP3478830B1 (en) 2016-07-01 2024-04-10 Resolve Therapeutics, LLC Optimized binuclease fusions and methods
EP4512829A3 (en) * 2016-07-14 2025-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against tim3 and uses thereof
JP7050677B2 (ja) * 2016-07-29 2022-04-08 中外製薬株式会社 増強されたfviii補因子機能代替活性を有する二重特異性抗体
PL3506931T3 (pl) 2016-09-01 2024-10-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sposoby zapobiegania lub leczenia alergii poprzez podawanie antagonisty il-4r
NZ752298A (en) 2016-09-06 2025-02-28 Hoffmann La Roche Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor ix and/or activated coagulation factor ix and coagulation factor x and/or activated coagulation factor x
US11390675B2 (en) * 2016-09-21 2022-07-19 Nextcure, Inc. Antibodies for Siglec-15 and methods of use thereof
CA3034105A1 (en) * 2016-09-23 2018-03-29 Csl Limited Coagulation factor binding proteins and uses thereof
US20180118811A1 (en) * 2016-10-19 2018-05-03 Invenra Inc. Antibody constructs
MX2019005397A (es) 2016-11-08 2019-10-09 Regeneron Pharma Proteinas de union a antigeno que antagonizan el receptor de leptina.
BR112019010349A2 (pt) * 2016-11-23 2019-10-08 Bioverativ Therapeutics Inc Anticorpos anti-fixa, anti-fxz e antifxa, molécula biespecífica, ácido nulceico, composiçãofarmacêutica e uso dos anteriores
KR20190096409A (ko) * 2016-12-21 2019-08-19 메레오 바이오파마 3 리미티드 불완전 골형성증 치료에서의 항-스클레로스틴 항체의 용도
WO2018138297A1 (en) * 2017-01-27 2018-08-02 Kymab Limited Anti-opg antibodies
TWI837084B (zh) 2017-02-01 2024-04-01 丹麥商諾佛 儂迪克股份有限公司 促凝血抗體
SG11201907159SA (en) * 2017-02-16 2019-09-27 Xbiotech Inc Treatment of hidradenitis suppurativa
WO2018156180A1 (en) 2017-02-24 2018-08-30 Kindred Biosciences, Inc. Anti-il31 antibodies for veterinary use
PT3592379T (pt) 2017-03-31 2024-05-31 Cellectis Sa Células imunitárias manipuladas universais dotadas de recetor antigénico quimérico anti-cd22
TW201836636A (zh) * 2017-03-31 2018-10-16 公立大學法人奈良縣立醫科大學 含有替代凝血因子viii功能之多特異性抗原結合分子之用於預防和/或治療凝血因子ix異常症的醫藥組合物
TWI841526B (zh) * 2017-04-13 2024-05-11 荷蘭商賽羅帕公司 抗-SIRPα 抗體
SG10201913497XA (en) * 2017-05-26 2020-02-27 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Biopharmaceutical compositions and related methods
BR112019025048A2 (pt) * 2017-06-01 2020-06-30 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. anticorpo anti-cd40, fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, e uso médico dos mesmos
GB201709970D0 (en) 2017-06-22 2017-08-09 Kymab Ltd Bispecific antigen-binding molecules
TWI726228B (zh) * 2017-08-09 2021-05-01 國立臺灣大學 Cd14拮抗分子用於治療癌症
JP2020531438A (ja) * 2017-08-16 2020-11-05 ドラゴンフライ セラピューティクス, インコーポレイテッド Nkg2d、cd16、およびegfr、hla−e、ccr4、またはpd−l1に結合するタンパク質
SG11202001311VA (en) 2017-08-22 2020-03-30 Sanabio Llc Soluble interferon receptors and uses thereof
MX2020003219A (es) * 2017-09-21 2020-07-20 Imcheck Therapeutics Sas Anticuerpos que tienen especificidad para btn2 y usos de los mismos.
WO2019065795A1 (ja) * 2017-09-29 2019-04-04 中外製薬株式会社 血液凝固第viii因子(fviii)補因子機能代替活性を有する多重特異性抗原結合分子および当該分子を有効成分として含有する薬学的製剤
RU2698048C2 (ru) * 2017-10-03 2019-08-21 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО К IL-5Rα
CR20240273A (es) * 2017-11-01 2024-08-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Variantes e isoformas de anticuerpos con actividad biológica reducida (divisional 2020-229)
CN111386285B (zh) 2017-11-15 2024-08-27 诺和诺德股份有限公司 增强fx活化的因子x结合物
WO2019104157A1 (en) * 2017-11-21 2019-05-31 The University Of Vermont And State Agricultural College Highly specific zika neutralizing human antibodies
SG11202005146VA (en) 2017-12-18 2020-06-29 Regeneron Pharma Bispecific antigen binding molecules that bind leptin receptor and/or gp130, and methods of use thereof
CN109957026A (zh) * 2017-12-22 2019-07-02 成都恩沐生物科技有限公司 共价多特异性抗体
WO2019140229A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against tim3 and uses thereof
JP7458790B2 (ja) * 2018-01-31 2024-04-01 元一 加藤 Il-6阻害剤を含有する喘息の治療剤
EP4434587A3 (en) 2018-02-08 2025-01-01 Dragonfly Therapeutics, Inc. Antibody variable domain combinations targeting the nkg2d receptor
RU2758378C1 (ru) * 2018-02-09 2021-10-28 Галдерма Холдинг СА Немолизумаб в лечении атопического дерматита с экскориацией от умеренной до тяжелой
SG11202007945UA (en) 2018-02-20 2020-09-29 Dragonfly Therapeutics Inc Multi-specific binding proteins that bind cd33, nkg2d, and cd16, and methods of use
US12215142B2 (en) * 2018-03-16 2025-02-04 National University Corporation Shiga University Of Medical Science Antibody fragment degrading and removing abnormal TDP-43
CN112040980A (zh) * 2018-04-06 2020-12-04 瑞泽恩制药公司 用于治疗代谢功能障碍或低瘦蛋白血症的瘦蛋白受体激动剂抗体
KR102275514B1 (ko) * 2018-05-09 2021-07-09 주식회사 굳티셀 조절 t 세포 표면 항원의 에피토프 및 이에 특이적으로 결합하는 항체
WO2019225568A1 (ja) 2018-05-21 2019-11-28 中外製薬株式会社 ガラス容器に封入された凍結乾燥製剤
CN115649558A (zh) 2018-05-28 2023-01-31 中外制药株式会社 填充喷嘴
US20210231654A1 (en) 2018-06-04 2021-07-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for detecting complex
CA3100818A1 (en) * 2018-06-13 2019-12-19 Kymab Limited Treatments etc
FR3082427B1 (fr) 2018-06-14 2020-09-25 Lab Francais Du Fractionnement Combinaison de facteur vii et d'un anticorps bispecifique anti-facteurs ix et x
TWI822815B (zh) * 2018-07-14 2023-11-21 財團法人生物技術開發中心 抗-人類pd-l1之抗體及其用途
US11220554B2 (en) 2018-09-07 2022-01-11 Novo Nordisk A/S Procoagulant antibodies
MA53322A (fr) * 2018-08-01 2021-11-10 Novo Nordisk As Anticorps procoagulants améliorés
US12161890B2 (en) * 2018-08-07 2024-12-10 Cz Biohub Sf, Llc Antibodies against dengue virus and related methods
EA202091888A1 (ru) 2018-08-08 2020-10-23 Драгонфлай Терапьютикс, Инк. Вариабельные домены антител, нацеленные на рецептор nkg2d
MX2021001841A (es) * 2018-08-20 2021-05-13 Pfizer Anticuerpos anti-gdf15, composiciones y metodos de uso.
AU2019347408A1 (en) * 2018-09-28 2021-04-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule comprising altered antibody variable region
PE20211072A1 (es) * 2018-09-28 2021-06-09 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Moleculas de union a antigeno capaces de unirse al cumulo de diferenciacion 3 (cd3) y al cumulo de diferenciacion 137 (cd137) pero no simultaneamente
WO2020077120A1 (en) * 2018-10-10 2020-04-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University BLOCKADE OF RGMb FOR TREATING INFLAMMATORY BOWEL DISEASE AND COLITIS
US10815308B2 (en) * 2018-12-21 2020-10-27 Kymab Limited FIXaxFX bispecific antibody with common light chain
PE20211295A1 (es) * 2018-12-21 2021-07-20 23Andme Inc Anticuerpos anti il-36 y procedimientos de uso de estos
US20220082573A1 (en) * 2018-12-29 2022-03-17 Berysol Gmbh Selenium binding protein 1 detection from body fluids for diagnosis of peracute tissue damage
MA55372A (fr) * 2019-03-21 2022-01-26 Regeneron Pharma Combinaison d'inhibiteurs de la voie il-4/il-13 et d'ablation de plasmocytes pour traiter une allergie
SG11202110626SA (en) * 2019-03-27 2021-10-28 Umc Utrecht Holding Bv Engineered iga antibodies and methods of use
KR20240046282A (ko) * 2019-04-17 2024-04-08 노보 노르디스크 에이/에스 이중 특이적 항체
PH12021552763A1 (en) * 2019-05-03 2022-07-04 Nat Univ Singapore Treatment and prevention of metabolic diseases
JP2022544393A (ja) * 2019-08-12 2022-10-18 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド マクロファージ刺激1受容体(mst1r)バリアント及びその使用
WO2021037037A1 (en) * 2019-08-27 2021-03-04 Elpiscience (Suzhou) Biopharma, Ltd. Novel anti-cd39 antibodies
CN113795510A (zh) * 2019-08-29 2021-12-14 荣昌生物制药(烟台)股份有限公司 抗pd-l1抗体及其应用
WO2021048285A1 (en) * 2019-09-14 2021-03-18 Immundiagnostik Ag Medicinal preparation for treating fibrosis with anti bsp antibodies
WO2021061842A1 (en) 2019-09-23 2021-04-01 Twist Bioscience Corporation Variant nucleic acid libraries for single domain antibodies
CN112625130B (zh) * 2019-09-24 2023-08-29 财团法人工业技术研究院 抗-tigit抗体及使用之方法
TWI745114B (zh) 2019-10-11 2021-11-01 日商中外製藥股份有限公司 用於後天性血友病a之預防及/或治療之醫藥組成物、及包含該醫藥組成物之製品
JP7676371B2 (ja) 2019-10-11 2025-05-14 エフ・ホフマン-ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 薬剤用量決定デバイスおよび方法
IL292106A (en) 2019-10-11 2022-06-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Pharmaceutical composition which can be used for prevention and/or treatment of acquired hemophilia a, and product comprising said pharmaceutical composition
US11890353B2 (en) * 2019-10-15 2024-02-06 Northwestern University Anti-polyethylene glycol (PEG) antibody mouse model for rigorous assessment of PEG-based therapies
JP7250938B2 (ja) * 2019-12-06 2023-04-03 コリア アトミック エナジー リサーチ インスティテュート 抗-tm4sf4抗体及びこの用途
CA3159465A1 (en) * 2019-12-06 2021-06-10 Lukas BAMMERT Humanized cldn18.2 antibodies
KR20220110753A (ko) * 2019-12-10 2022-08-09 에이비엘바이오 주식회사 항-bcma/항-4-1bb 이중특이성 항체 및 그의 용도
CN115052898A (zh) 2020-01-30 2022-09-13 诺和诺德股份有限公司 双特异性因子viii模拟抗体
EP4110819A1 (en) * 2020-02-28 2023-01-04 Apexigen, Inc. Anti-sirpa antibodies and methods of use
AU2020260519A1 (en) * 2020-03-23 2021-10-07 Medimmune Limited Methods for treating atopic dermatitis and related disorders
EP4132969A4 (en) * 2020-04-07 2024-05-01 Fred Hutchinson Cancer Center ANTI-MESOTHELIN ANTIGEN BINDING MOLECULES AND THEIR USES
JP2023106635A (ja) 2020-04-17 2023-08-02 中外製薬株式会社 二重特異性抗原結合分子ならびに、それに関連する組成物、組成物の製造のための使用、キット、および方法
BR112022021450A2 (pt) * 2020-04-24 2022-12-27 Millennium Pharm Inc O cd19 ou fragmento de ligação, método de tratamento de um câncer, composição farmacêutica, ácido nucleico, vetor, e, célula isolada
TW202204420A (zh) * 2020-04-30 2022-02-01 美商建南德克公司 Kras特異性抗體及其用途
US12157771B2 (en) 2020-05-06 2024-12-03 Dragonfly Therapeutics, Inc. Proteins binding NKG2D, CD16 and CLEC12A
KR102778279B1 (ko) * 2020-05-18 2025-03-11 현대자동차주식회사 솔레노이드 밸브
JP2023527775A (ja) * 2020-05-22 2023-06-30 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Il-4r阻害剤の投与により好酸球性食道炎を処置する方法
JPWO2021235537A1 (ko) 2020-05-22 2021-11-25
EP4192880A4 (en) 2020-08-05 2025-04-30 Synthekine Inc IL10 RECEPTOR BINDING MOLECULES AND METHODS OF USE THEREOF
MX2023001490A (es) 2020-08-05 2023-04-27 Synthekine Inc Moleculas de union a il27r\03b1 y metodos de uso.
WO2022031890A1 (en) 2020-08-05 2022-02-10 Synthekine, Inc. Ifngr2 binding molecules and methods of use
KR20230061390A (ko) 2020-08-05 2023-05-08 신테카인, 인크. Il27 수용체 결합과 관련된 조성물 및 방법
US12122839B2 (en) 2020-08-05 2024-10-22 Synthekine, Inc. IFNGR binding synthetic cytokines and methods of use
IL300623A (en) * 2020-08-21 2023-04-01 Genzyme Corp Anti-FGFR3 antibodies and methods of use
US11739137B2 (en) * 2020-10-30 2023-08-29 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy Single domain antibodies to SARS-CoV-2 nucleocapsid protein
WO2022099090A1 (en) * 2020-11-06 2022-05-12 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind tgfbrii
US20220257614A1 (en) * 2021-02-16 2022-08-18 New York Medical College Use of 12-lipoxygenase inhibitors in the treatment of covid-19
MX2023009544A (es) * 2021-02-17 2023-11-28 Gammadelta Therapeutics Ltd Anticuerpos anti-variable delta 1 de tcr multiespecíficos.
EP4313309A1 (en) * 2021-03-22 2024-02-07 Novimmune S.A. Bispecific antibodies targeting cd47 and pd-l1 and methods of use thereof
EP4314075A4 (en) * 2021-03-24 2025-04-09 Twist Bioscience Corp VARIANT NUCLEIC ACID BANKS FOR CD3
CA3216395A1 (en) * 2021-04-23 2022-10-27 Astrazeneca Ab Treatment of lupus nephritis with anti-type i inf receptor antibody anifrolumab
KR20240082388A (ko) 2021-10-08 2024-06-10 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 프리필드 시린지 제제의 조제 방법
CN118414166A (zh) * 2021-12-01 2024-07-30 中外制药株式会社 含有抗体的制剂的制备方法
KR20230130561A (ko) 2022-03-02 2023-09-12 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 Fviii 모방 이중특이적 항체를 2주마다 1회 투여하는 방법
KR20230130560A (ko) 2022-03-02 2023-09-12 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 Fviii 모방 이중특이적 항체의 주 1회 투여 방법
KR20230130558A (ko) 2022-03-02 2023-09-12 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 Fviii 모방 이중특이적 항체의 월 1회 투여 방법
CN119486774A (zh) 2022-04-26 2025-02-18 中外制药株式会社 含有药物制剂的内置过滤器的注射器
KR20250022761A (ko) 2022-06-10 2025-02-17 후지필름 다이오신쓰 바이오테크놀로지스 유케 리미티드 세포의 작출 방법, 헤테로 다량체 단백질의 제조 방법, 바이스페시픽 항체의 제조 방법, 벡터 세트, 포유동물 세포, cho 세포, 및 세포 풀의 작출 방법
MA71385A (fr) 2022-07-08 2025-04-30 Novo Nordisk A/S Composés isvd hautement puissants capables de remplacer fviii(a)
KR102749341B1 (ko) 2022-07-08 2025-01-06 노보 노르디스크 에이/에스 FVIII(a)를 치환할 수 있는 매우 강력한 ISVD 화합물
WO2024225440A1 (ja) * 2023-04-28 2024-10-31 公立大学法人奈良県立医科大学 血友病aを有する対象の処置のための、活性化凝固第ix因子及び凝固第x因子と結合する二重特異性抗体と血液凝固第x因子の併用
WO2024261245A1 (en) 2023-06-23 2024-12-26 Novo Nordisk Health Care Ag Methods of administering fviii mimetic bispecific antibodies once every second month

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006109592A1 (ja) 2005-04-08 2006-10-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 血液凝固第viii因子の機能代替抗体

Family Cites Families (233)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
JPS5824836B2 (ja) 1974-10-14 1983-05-24 ノウミボウサイコウギヨウ カブシキガイシヤ カサイナドノツウホウソウチ
JPS5334319A (en) 1976-09-12 1978-03-30 Nat Jutaku Kenzai Entrance device of unit residence
US4208479A (en) 1977-07-14 1980-06-17 Syva Company Label modified immunoassays
IE52535B1 (en) 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4474893A (en) 1981-07-01 1984-10-02 The University of Texas System Cancer Center Recombinant monoclonal antibodies
US4444878A (en) 1981-12-21 1984-04-24 Boston Biomedical Research Institute, Inc. Bispecific antibody determinants
JPS59162441U (ja) 1983-04-14 1984-10-31 千代田紙業株式会社 吹込口を有する重包包装
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
DE152746T1 (de) 1984-01-12 1986-04-10 Chiron Corp., Emeryville, Calif. Monoklonale antikoerper gegen faktor-viii-c.
US4945050A (en) 1984-11-13 1990-07-31 Cornell Research Foundation, Inc. Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
JPH06104071B2 (ja) 1986-08-24 1994-12-21 財団法人化学及血清療法研究所 第▲ix▼因子コンホメ−シヨン特異性モノクロ−ナル抗体
JPH0338228Y2 (ko) 1986-09-26 1991-08-13
US5004697A (en) 1987-08-17 1991-04-02 Univ. Of Ca Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier
US5322678A (en) 1988-02-17 1994-06-21 Neorx Corporation Alteration of pharmacokinetics of proteins by charge modification
US6010902A (en) 1988-04-04 2000-01-04 Bristol-Meyers Squibb Company Antibody heteroconjugates and bispecific antibodies for use in regulation of lymphocyte activity
IL89491A0 (en) 1988-11-17 1989-09-10 Hybritech Inc Bifunctional chimeric antibodies
JPH0646389Y2 (ja) 1989-05-12 1994-11-30 ナショナル住宅産業株式会社 ハンドグリップ取付構造
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
ATE177321T1 (de) 1989-12-11 1999-03-15 Immunomedics Inc Verfahren zum aufspüren von diagnostischen oder therapeutischen mitteln durch antikörper
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
TW212184B (ko) 1990-04-02 1993-09-01 Takeda Pharm Industry Co Ltd
JPH05184383A (ja) 1990-06-19 1993-07-27 Dainabotsuto Kk 二重特異性抗体
JPH05199894A (ja) 1990-08-20 1993-08-10 Takeda Chem Ind Ltd 二重特異性抗体および抗体含有薬剤
ES2246502T3 (es) 1990-08-29 2006-02-16 Genpharm International, Inc. Animales no humanos transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
KR100249937B1 (ko) 1991-04-25 2000-04-01 나가야마 오사무 인간 인터루킨-6 수용체에 대한 재구성 인간 항체
JPH05304992A (ja) 1991-06-20 1993-11-19 Takeda Chem Ind Ltd ハイブリッド・モノクローナル抗体および抗体含有薬剤
JPH07501451A (ja) 1991-11-25 1995-02-16 エンゾン・インコーポレイテッド 多価抗原結合タンパク質
EP0746609A4 (en) 1991-12-17 1997-12-17 Genpharm Int NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS CAPABLE OF PRODUCING HETEROLOGOUS ANTIBODIES
JPH0767688B2 (ja) 1992-01-21 1995-07-26 近畿コンクリート工業株式会社 Pcコンクリートパネル
US5667988A (en) 1992-01-27 1997-09-16 The Scripps Research Institute Methods for producing antibody libraries using universal or randomized immunoglobulin light chains
JPH05203652A (ja) 1992-01-28 1993-08-10 Fuji Photo Film Co Ltd 抗体酵素免疫分析法
JPH05213775A (ja) 1992-02-05 1993-08-24 Otsuka Pharmaceut Co Ltd Bfa抗体
US6749853B1 (en) 1992-03-05 2004-06-15 Board Of Regents, The University Of Texas System Combined methods and compositions for coagulation and tumor treatment
JP3881689B2 (ja) 1992-03-11 2007-02-14 パウダージェクト ヴァクシンズ,インコーポレイテッド 免疫不全ウイルス用の遺伝子ワクチン
US6129914A (en) 1992-03-27 2000-10-10 Protein Design Labs, Inc. Bispecific antibody effective to treat B-cell lymphoma and cell line
US5744446A (en) 1992-04-07 1998-04-28 Emory University Hybrid human/animal factor VIII
SG48760A1 (en) 1992-07-24 2003-03-18 Abgenix Inc Generation of xenogenetic antibodies
ZA936260B (en) 1992-09-09 1994-03-18 Smithkline Beecham Corp Novel antibodies for conferring passive immunity against infection by a pathogen in man
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
JP3720353B2 (ja) 1992-12-04 2005-11-24 メディカル リサーチ カウンシル 多価および多重特異性の結合タンパク質、それらの製造および使用
EP0754225A4 (en) 1993-04-26 2001-01-31 Genpharm Int HETEROLOGIC ANTIBODY-PRODUCING TRANSGENIC NON-HUMAN ANIMALS
EP0660937A1 (en) 1993-07-01 1995-07-05 Dade International Inc. Process for the preparation of factor x depleted plasma
FR2707189B1 (fr) 1993-07-09 1995-10-13 Gradient Ass Procédé de traitement de résidus de combustion et installation de mise en Óoeuvre dudit procédé.
UA40577C2 (uk) 1993-08-02 2001-08-15 Мерк Патент Гмбх Біспецифічна молекула, що використовується для лізису пухлинних клітин, спосіб її одержання, моноклональне антитіло (варіанти), фармацевтичний препарат, фармацевтичний набір (варіанти), спосіб видалення пухлинних клітин
IL107742A0 (en) 1993-11-24 1994-02-27 Yeda Res & Dev Chemically-modified binding proteins
DE122009000068I2 (de) 1994-06-03 2011-06-16 Ascenion Gmbh Verfahren zur Herstellung von heterologen bispezifischen Antikörpern
US5945311A (en) 1994-06-03 1999-08-31 GSF--Forschungszentrumfur Umweltund Gesundheit Method for producing heterologous bi-specific antibodies
CN1162184C (zh) 1994-07-11 2004-08-18 德克萨斯州立大学董事会 用于脉管系统特异性凝血的组合物及其应用
HU221385B1 (en) 1994-07-13 2002-09-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Reconstituted human antibody against human interleukin-8
US6309636B1 (en) 1995-09-14 2001-10-30 Cancer Research Institute Of Contra Costa Recombinant peptides derived from the Mc3 anti-BA46 antibody, methods of use thereof, and methods of humanizing antibody peptides
EP2107070A1 (en) 1994-10-07 2009-10-07 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Rheumatoid arthritis remedy containing IL-6 antagonist as active ingredient
CN101011574B (zh) 1994-10-21 2012-10-03 岸本忠三 Il-6受体的抗体在制备药物组合物中的用途
AU4289496A (en) 1994-12-02 1996-06-19 Chiron Corporation Method of promoting an immune response with a bispecific antibody
US6485943B2 (en) 1995-01-17 2002-11-26 The University Of Chicago Method for altering antibody light chain interactions
JP3590070B2 (ja) 1995-02-28 2004-11-17 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 優れた微生物安定性を有する無炭酸飲料製品の製造
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
DE69637481T2 (de) 1995-04-27 2009-04-09 Amgen Fremont Inc. Aus immunisierten Xenomäusen stammende menschliche Antikörper gegen IL-8
AU2466895A (en) 1995-04-28 1996-11-18 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
ATE283926T1 (de) 1995-09-11 2004-12-15 Kyowa Hakko Kogyo Kk Antikörper gegen die alpha-kette von humanem interleukin 5 rezeptor
MA24512A1 (fr) 1996-01-17 1998-12-31 Univ Vermont And State Agrienl Procede pour la preparation d'agents anticoagulants utiles dans le traitement de la thrombose
EP0938499A1 (en) 1996-07-19 1999-09-01 Amgen Inc. Analogs of cationic proteins
JPH10165184A (ja) 1996-12-16 1998-06-23 Tosoh Corp 抗体、遺伝子及びキメラ抗体の製法
US5990286A (en) 1996-12-18 1999-11-23 Techniclone, Inc. Antibodies with reduced net positive charge
US6884879B1 (en) 1997-04-07 2005-04-26 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
US20070059302A1 (en) 1997-04-07 2007-03-15 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
US20020062010A1 (en) 1997-05-02 2002-05-23 Genentech, Inc. Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
ES2246069T3 (es) 1997-05-02 2006-02-01 Genentech, Inc. Procedimiento de preparacion de anticuerpos multiespecificos que tienen componentes comunes y multimericos.
US20030207346A1 (en) 1997-05-02 2003-11-06 William R. Arathoon Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
DE19725586C2 (de) 1997-06-17 1999-06-24 Gsf Forschungszentrum Umwelt Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper
US5980893A (en) 1997-07-17 1999-11-09 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Agonist murine monoclonal antibody as a stimulant for megakaryocytopoiesis
US6207805B1 (en) 1997-07-18 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Prostate cell surface antigen-specific antibodies
US6342220B1 (en) 1997-08-25 2002-01-29 Genentech, Inc. Agonist antibodies
ATE373712T1 (de) 1997-10-03 2007-10-15 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Natürlicher menschlicher antikörper
CN1073412C (zh) 1998-03-19 2001-10-24 中国科学院化学研究所 一种高分子微包囊的制备方法
BR9909382A (pt) 1998-04-03 2000-12-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticorpo humanizado contra o fator tissular humano (tf) e processo de produção de anticorpo humanizado
DK1071700T3 (da) 1998-04-20 2010-06-07 Glycart Biotechnology Ag Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet
DE19819846B4 (de) 1998-05-05 2016-11-24 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Multivalente Antikörper-Konstrukte
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
JP2002522063A (ja) 1998-08-17 2002-07-23 アブジェニックス インコーポレイテッド 増加した血清半減期を有する改変された分子の生成
CN1214043C (zh) 1998-12-01 2005-08-10 蛋白质设计实验室股份有限公司 抗γ-干扰素的人化抗体
US6972125B2 (en) 1999-02-12 2005-12-06 Genetics Institute, Llc Humanized immunoglobulin reactive with B7-2 and methods of treatment therewith
EP2270147B2 (en) 1999-04-09 2020-07-22 Kyowa Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP1074842A1 (en) 1999-07-21 2001-02-07 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Catalytic anti-factor VIII allo-antibodies
SK782002A3 (en) 1999-07-21 2003-08-05 Lexigen Pharm Corp FC fusion proteins for enhancing the immunogenicity of protein and peptide antigens
NL1012907C2 (nl) * 1999-08-25 2001-02-27 Amb It Holding Bv Stelsel voor het bepalen van de positie van een transponder.
AT411997B (de) 1999-09-14 2004-08-26 Baxter Ag Faktor ix/faktor ixa aktivierende antikörper und antikörper-derivate
SE9903895D0 (sv) 1999-10-28 1999-10-28 Active Biotech Ab Novel compounds
JP2004505609A (ja) 2000-04-03 2004-02-26 オックスフォード グリコサイエンシズ(ユーケー) リミテッド 核酸分子、ポリペプチド、ならびにアルツハイマー病の診断および処置を含むそれらの使用
AU6627201A (en) 2000-05-03 2001-11-12 Mbt Munich Biotechnology Gmbh Cationic diagnostic, imaging and therapeutic agents associated with activated vascular sites
WO2001090192A2 (en) 2000-05-24 2001-11-29 Imclone Systems Incorporated Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production
US7160540B2 (en) 2000-06-30 2007-01-09 Regents Of The University Of Minnesota Methods for detecting activity of clottings factors
EP1304573A4 (en) 2000-07-17 2006-06-07 Chugai Pharmaceutical Co Ltd METHOD FOR SCREENING A LIGAND WITH BIOLOGICAL ACTIVITY
DK1332209T3 (da) 2000-09-08 2010-03-29 Univ Zuerich Samlinger af repeatproteiner indeholdende repeatmoduler
BR0114475A (pt) 2000-10-06 2003-12-23 Kyowa Hakko Kogyo Kk Célula para a produção de composição de anticorpo
AU2002213441B2 (en) 2000-10-12 2006-10-26 Genentech, Inc. Reduced-viscosity concentrated protein formulations
CA2418835A1 (en) 2000-10-16 2002-04-25 Phylos, Inc. Protein scaffolds for antibody mimics and other binding proteins
WO2002033073A1 (fr) 2000-10-20 2002-04-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anticorps agoniste degrade
EP2357187A1 (en) 2000-12-12 2011-08-17 MedImmune, LLC Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof
CA2442801A1 (en) 2001-04-02 2002-10-10 Idec Pharmaceutical Corporation Recombinant antibodies coexpressed with gntiii
CA2443903C (en) 2001-04-13 2018-03-20 Biogen, Inc. Antibodies to vla-1
US20030157561A1 (en) 2001-11-19 2003-08-21 Kolkman Joost A. Combinatorial libraries of monomer domains
JP4281869B2 (ja) 2001-06-22 2009-06-17 中外製薬株式会社 抗グリピカン3抗体を含む細胞増殖抑制剤
US20030049203A1 (en) 2001-08-31 2003-03-13 Elmaleh David R. Targeted nucleic acid constructs and uses related thereto
PL213948B1 (pl) 2001-10-25 2013-05-31 Genentech Inc Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje
US20030190705A1 (en) 2001-10-29 2003-10-09 Sunol Molecular Corporation Method of humanizing immune system molecules
DE10156482A1 (de) 2001-11-12 2003-05-28 Gundram Jung Bispezifisches Antikörper-Molekül
JP2006506943A (ja) 2002-02-11 2006-03-02 ジェネンテック・インコーポレーテッド 抗原結合速度の大きい抗体変異体
EP1500665B1 (en) 2002-04-15 2011-06-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha METHODS FOR CONSTRUCTING scDb LIBRARIES
EP1505148B1 (en) 2002-04-26 2009-04-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of screening for agonistic antibodies
JP2004086862A (ja) 2002-05-31 2004-03-18 Celestar Lexico-Sciences Inc タンパク質相互作用情報処理装置、タンパク質相互作用情報処理方法、プログラム、および、記録媒体
EP1510943A4 (en) 2002-05-31 2007-05-09 Celestar Lexico Sciences Inc INTERACTION PREDICTION DEVICE
AU2003256266A1 (en) 2002-06-12 2003-12-31 Genencor International, Inc. Methods and compositions for milieu-dependent binding of a targeted agent to a target
JP4836451B2 (ja) 2002-07-18 2011-12-14 メルス ベー ヴェー 抗体混合物の組換え生産
EP1539947A4 (en) 2002-08-15 2006-09-06 Epitomics Inc HUMANIZED RABBIT ANTIBODIES
WO2004032134A2 (en) 2002-10-07 2004-04-15 Mempile Inc. Tight focusing method and system
GB0224082D0 (en) 2002-10-16 2002-11-27 Celltech R&D Ltd Biological products
JPWO2004060919A1 (ja) 2002-12-26 2006-05-11 中外製薬株式会社 ヘテロ受容体に対するアゴニスト抗体
WO2004065611A1 (ja) 2003-01-21 2004-08-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 抗体の軽鎖スクリーニング方法
CA2515081A1 (en) 2003-02-07 2004-08-19 Protein Design Labs, Inc. Amphiregulin antibodies and their use to treat cancer and psoriasis
GB2400851B (en) 2003-04-25 2004-12-15 Bioinvent Int Ab Identifying binding of a polypeptide to a polypeptide target
GB2401040A (en) 2003-04-28 2004-11-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for treating interleukin-6 related diseases
CA2527694C (en) 2003-05-30 2015-07-14 Hendricus Renerus Jacobus Mattheus Hoogenboom Fab library for the preparation of anti vegf and anti rabies virus fabs
EP2272868B1 (en) 2003-06-05 2015-03-04 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
US8597911B2 (en) 2003-06-11 2013-12-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for producing antibodies
US7297336B2 (en) 2003-09-12 2007-11-20 Baxter International Inc. Factor IXa specific antibodies displaying factor VIIIa like activity
JP2005101105A (ja) 2003-09-22 2005-04-14 Canon Inc 位置決め装置、露光装置、デバイス製造方法
WO2005035753A1 (ja) * 2003-10-10 2005-04-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 機能蛋白質を代替する二重特異性抗体
JPWO2005035754A1 (ja) 2003-10-14 2006-12-21 中外製薬株式会社 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
AU2004284090A1 (en) 2003-10-24 2005-05-06 Avidia, Inc. LDL receptor class A and EGF domain monomers and multimers
EP1697415A1 (en) 2003-11-12 2006-09-06 Biogen Idec MA Inc. NEONATAL Fc RECEPTOR (FcRn)-BINDING POLYPEPTIDE VARIANTS, DIMERIC Fc BINDING PROTEINS AND METHODS RELATED THERETO
PT2383295E (pt) 2003-12-10 2015-06-16 Squibb & Sons Llc Anticorpos ip-10 e suas utilizações
LT2418220T (lt) 2003-12-10 2017-10-10 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Interferono-alfa antikūnai ir jų panaudojimas
CA2550996A1 (en) 2003-12-22 2005-07-14 Centocor, Inc. Methods for generating multimeric molecules
US20050266425A1 (en) 2003-12-31 2005-12-01 Vaccinex, Inc. Methods for producing and identifying multispecific antibodies
ES2362667T3 (es) 2004-01-09 2011-07-11 Pfizer Inc. ANTICUERPOS FRENTE A MAdCAM.
AU2005227326B2 (en) 2004-03-24 2009-12-03 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the Fc region
WO2005112564A2 (en) 2004-04-15 2005-12-01 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Germline and sequence variants of humanized antibodies and methods of making and using them
AR049390A1 (es) 2004-06-09 2006-07-26 Wyeth Corp Anticuerpos contra la interleuquina-13 humana y usos de los mismos
AU2005259992A1 (en) 2004-06-25 2006-01-12 Medimmune, Llc Increasing the production of recombinant antibodies in mammalian cells by site-directed mutagenesis
SI2471813T1 (sl) 2004-07-15 2015-03-31 Xencor, Inc. Optimirane Fc variante
RU2367667C2 (ru) 2004-08-19 2009-09-20 Дженентек, Инк. Полипептидные варианты с измененной эффекторной функцией
MX2007002856A (es) 2004-09-02 2007-09-25 Genentech Inc Metodos para el uso de ligandos receptores de muerte y anticuerpos c20.
WO2006031994A2 (en) 2004-09-14 2006-03-23 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin fc domains
AU2005284006A1 (en) 2004-09-14 2006-03-23 Health Protection Agency Vaccine
US7563443B2 (en) 2004-09-17 2009-07-21 Domantis Limited Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof
US7462697B2 (en) 2004-11-08 2008-12-09 Epitomics, Inc. Methods for antibody engineering
CA2587766A1 (en) 2004-11-10 2007-03-01 Macrogenics, Inc. Engineering fc antibody regions to confer effector function
EP1830947A4 (en) 2004-12-14 2012-04-18 Ge Healthcare Bio Sciences Ab CLEANING OF IMMUNOGLOBULINS
EP1829961A4 (en) 2004-12-22 2008-06-04 Chugai Pharmaceutical Co Ltd PROCESS FOR PREPARING ANTIBODY USING A CELL WHOSE FUCOSE CARRIER FUNCTION IS INHIBITED
US20060263357A1 (en) 2005-05-05 2006-11-23 Tedder Thomas F Anti-CD19 antibody therapy for autoimmune disease
EP3050963B1 (en) 2005-03-31 2019-09-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for production of polypeptide by regulation of assembly
WO2006106903A1 (ja) 2005-03-31 2006-10-12 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha sc(Fv)2構造異性体
BRPI0611464A2 (pt) 2005-04-15 2010-09-08 Genentech Inc molécula antagonista de hgf/c-met, métodos de modulação, método para tratar uma condição patológica associada com ativação de c-met, ácido nucléico, célula hospedeira, artigo de fabricação, método para fabricar a molécula antagonista de hgf/c-met e usos de uma molécula antagonista de hgf/c-met
EP1900814A4 (en) 2005-06-10 2010-07-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd SCREED SC (FV) 2-MUTANTE
US8945543B2 (en) 2005-06-10 2015-02-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Stabilizer for protein preparation comprising meglumine and use thereof
AU2006261920A1 (en) 2005-06-23 2007-01-04 Medimmune, Llc Antibody formulations having optimized aggregation and fragmentation profiles
AU2006270168B2 (en) 2005-07-15 2012-05-03 The University Of Vermont And State Agriculture College Highly sensitive immunoassays and antibodies for detection of blood factor VIII
HUE025240T2 (en) 2005-08-19 2016-03-29 Wyeth Llc Anti-GDF-8 antagonist antibodies and their use in the treatment of ALS and other disorders associated with GDF-8
WO2007060411A1 (en) 2005-11-24 2007-05-31 Ucb Pharma S.A. Anti-tnf alpha antibodies which selectively inhibit tnf alpha signalling through the p55r
ES2892925T3 (es) * 2006-03-31 2022-02-07 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Métodos para controlar la farmacocinética en sangre de anticuerpos
WO2007114325A1 (ja) 2006-03-31 2007-10-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 二重特異性抗体を精製するための抗体改変方法
ES2429407T3 (es) 2006-06-08 2013-11-14 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Agente preventivo o remedio para enfermedades inflamatorias
WO2007147901A1 (en) 2006-06-22 2007-12-27 Novo Nordisk A/S Production of bispecific antibodies
US20100034194A1 (en) 2006-10-11 2010-02-11 Siemens Communications Inc. Eliminating unreachable subscribers in voice-over-ip networks
WO2008090960A1 (ja) 2007-01-24 2008-07-31 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. ガングリオシドgm2に特異的に結合する遺伝子組換え抗体組成物
WO2008119353A1 (en) 2007-03-29 2008-10-09 Genmab A/S Bispecific antibodies and methods for production thereof
CA2688275A1 (en) 2007-05-31 2008-12-04 Genmab A/S Stable igg4 antibodies
KR20100065158A (ko) 2007-08-23 2010-06-15 엘에프비 바이오테크놀로지스 인자 ⅷ의 c1 도메인에 대향하는 저해 항체의 저해 활성을 중화시키는 항-개별특이형의 항체들
WO2009041621A1 (ja) 2007-09-26 2009-04-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 抗il-6レセプター抗体
EP3127921A1 (en) 2007-09-26 2017-02-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substition in cdr
CL2008002886A1 (es) 2007-09-26 2009-12-04 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Region constante de un anticuerpo humano; anticuerpo anti-receptor de interleucina-6 (il-6) y composicion farmaceutica que la comprende.
ES2394471T3 (es) 2007-09-28 2013-02-01 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anticuerpo Anti-Glipicano 3 que tiene una cinética mejorada en plasma
PE20091174A1 (es) 2007-12-27 2009-08-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo
SI2235064T1 (sl) 2008-01-07 2016-04-29 Amgen Inc. Metoda za izdelavo heterodimernih molekul - protitelesa fc z uporabo elektrostatičnih usmerjevalnih učinkov
BRPI0911431B8 (pt) 2008-04-11 2021-05-25 Chugai Pharmaceutical Co Ltd composição farmacêutica compreendendo um antígeno e método para aumentar o número de antígenos que podem ser ligados por um anticorpo
EP2294087B1 (en) 2008-05-01 2014-05-14 Amgen, Inc. Anti-hepcidin antibodies and methods of use
TWI440469B (zh) 2008-09-26 2014-06-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Improved antibody molecules
WO2010107109A1 (ja) 2009-03-19 2010-09-23 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
EP2233500A1 (en) 2009-03-20 2010-09-29 LFB Biotechnologies Optimized Fc variants
CN102369214B (zh) 2009-04-07 2019-04-12 罗氏格黎卡特股份公司 三价、双特异性抗体
CA2759233C (en) 2009-04-27 2019-07-16 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Method for making heteromultimeric molecules
CN101906160A (zh) 2009-06-05 2010-12-08 苏州泽璟生物制药有限公司 一种抗人凝血因子ⅷ单克隆抗体及其制备方法和用途
CN103833855A (zh) 2009-06-26 2014-06-04 瑞泽恩制药公司 容易地分离的具有天然免疫球蛋白形式的双特异性抗体
CN102770537A (zh) * 2009-12-25 2012-11-07 中外制药株式会社 用于纯化多肽多聚体的多肽的修饰方法
TWI505838B (zh) 2010-01-20 2015-11-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Stabilized antibody solution containing
AU2011222012C1 (en) 2010-03-02 2015-02-26 Kyowa Kirin Co., Ltd. Modified antibody composition
NZ602220A (en) 2010-03-11 2014-10-31 Rinat Neuroscience Corp Antibodies with ph dependent antigen binding
WO2011125674A1 (ja) 2010-03-31 2011-10-13 Jsr株式会社 アフィニティークロマトグラフィー用充填剤
CN103097417B (zh) 2010-04-20 2019-04-09 根马布股份公司 含异二聚体抗体fc的蛋白及其制备方法
RU2624027C2 (ru) 2010-04-23 2017-06-30 Дженентек, Инк. Получение гетеромультимерных белков
CA2797981C (en) 2010-05-14 2019-04-23 Rinat Neuroscience Corporation Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them
WO2011157283A1 (en) 2010-06-14 2011-12-22 Paion Deutschland Gmbh Treatment of coagulopathy with hyperfibrinolysis
CA2808154A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 Medimmmune Limited Monomeric polypeptides comprising variant fc regions and methods of use
CA2815266C (en) 2010-11-05 2023-09-05 Zymeworks Inc. Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain
EP2644698B1 (en) 2010-11-17 2018-01-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Multi-specific antigen-binding molecule having alternative function to function of blood coagulation factor viii
SG188638A1 (en) 2011-03-25 2013-05-31 Glenmark Pharmaceuticals Sa Hetero-dimeric immunoglobulins
MX340498B (es) * 2011-06-30 2016-07-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Polipeptido heterodimerizado.
LT2771364T (lt) 2011-10-27 2019-09-10 Genmab A/S Heterodimerinių baltymų gamyba
EP2787078B1 (en) 2011-10-31 2019-05-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule having regulated conjugation between heavy-chain and light-chain
RS62689B1 (sr) 2011-11-04 2021-12-31 Zymeworks Inc Dizajn stabilnog heterodimernog antitela sa mutacijama u fc domenu
LT2794905T (lt) 2011-12-20 2020-07-10 Medimmune, Llc Modifikuoti polipeptidai, skirti bispecifinių antikūnų karkasams
GB201203071D0 (en) 2012-02-22 2012-04-04 Ucb Pharma Sa Biological products
GB201203051D0 (en) 2012-02-22 2012-04-04 Ucb Pharma Sa Biological products
RU2014140137A (ru) 2012-03-08 2016-04-27 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Лекарственный препарат антитела к бета-амилоиду
EP3517548A1 (en) 2012-03-13 2019-07-31 NovImmune S.A. Readily isolated bispecific antibodies with native immunoglobulin format
RS59263B1 (sr) 2012-04-20 2019-10-31 Merus Nv Postupci i sredstva za proizvodnju heterodimernih ig-sličnih molekula
US9540449B2 (en) 2012-08-13 2017-01-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-PCSK9 antibodies with pH-dependent binding characteristics
WO2014050926A1 (ja) 2012-09-28 2014-04-03 中外製薬株式会社 血液凝固反応の評価方法
US9714291B2 (en) 2012-10-05 2017-07-25 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Heterodimer protein composition
CA2889951C (en) 2012-11-02 2023-04-18 Zymeworks Inc. Crystal structures of heterodimeric fc domains
UY35148A (es) 2012-11-21 2014-05-30 Amgen Inc Immunoglobulinas heterodiméricas
KR102545617B1 (ko) 2012-11-28 2023-06-20 자임워크스 비씨 인코포레이티드 가공된 면역글로불린 중쇄-경쇄 쌍 및 이들의 용도
BR112015022119A2 (pt) 2013-03-15 2017-08-29 Abbvie Biotherapeutics Inc Polipeptídeo, composto conjugado, composição farmacêutica, ácido nucleico, vetor, células hospedeiras procariótica e eucariótica, método de produção de um polipeptídeo, e, método de tratamento
DK3050896T3 (da) 2013-09-27 2021-07-19 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Fremgangsmåde til fremstilling af en polypeptid-heteromultimer
CN105873953A (zh) 2013-11-04 2016-08-17 格兰马克药品股份有限公司 重靶向t细胞的异源二聚免疫球蛋白的产生
UA117289C2 (uk) 2014-04-02 2018-07-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифічне антитіло
US11306156B2 (en) 2014-05-28 2022-04-19 Zymeworks Inc. Modified antigen binding polypeptide constructs and uses thereof
TW201625299A (zh) 2014-06-20 2016-07-16 Chugai Pharmaceutical Co Ltd 用於因第viii凝血因子及/或活化的第viii凝血因子的活性降低或欠缺而發病及/或進展的疾病之預防及/或治療之醫藥組成物
TWI700300B (zh) 2014-09-26 2020-08-01 日商中外製藥股份有限公司 中和具有第viii凝血因子(fviii)機能替代活性的物質之抗體
TWI701435B (zh) 2014-09-26 2020-08-11 日商中外製藥股份有限公司 測定fviii的反應性之方法
JP6630036B2 (ja) 2014-09-30 2020-01-15 Jsr株式会社 標的物の精製方法、及び、ミックスモード用担体
WO2016159213A1 (ja) 2015-04-01 2016-10-06 中外製薬株式会社 ポリペプチド異種多量体の製造方法
JP2018123055A (ja) 2015-04-24 2018-08-09 公立大学法人奈良県立医科大学 血液凝固第viii因子(fviii)の機能を代替する多重特異性抗原結合分子を含有する、血液凝固第xi因子(fxi)異常症の予防および/または治療に用いられる医薬組成物
US20200270363A1 (en) 2015-12-25 2020-08-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody having enhanced activity, and method for modifying same
JP7219005B2 (ja) 2015-12-28 2023-02-07 中外製薬株式会社 Fc領域含有ポリペプチドの精製を効率化するための方法
AR108240A1 (es) 2016-04-28 2018-08-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulaciones que contienen anticuerpos
CA3025162A1 (en) 2016-05-26 2017-11-30 Qilu Puget Sound Biotherapeutics Corporation Mixtures of antibodies
JP2019530641A (ja) 2016-07-19 2019-10-24 アイベントラス・インコーポレイテッドIbentrus,Inc. 二重特異性タンパク質およびその製造方法
JP7050677B2 (ja) 2016-07-29 2022-04-08 中外製薬株式会社 増強されたfviii補因子機能代替活性を有する二重特異性抗体
NZ752298A (en) 2016-09-06 2025-02-28 Hoffmann La Roche Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor ix and/or activated coagulation factor ix and coagulation factor x and/or activated coagulation factor x
WO2019065795A1 (ja) 2017-09-29 2019-04-04 中外製薬株式会社 血液凝固第viii因子(fviii)補因子機能代替活性を有する多重特異性抗原結合分子および当該分子を有効成分として含有する薬学的製剤

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006109592A1 (ja) 2005-04-08 2006-10-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 血液凝固第viii因子の機能代替抗体

Also Published As

Publication number Publication date
JP6823677B2 (ja) 2021-02-03
RS57038B1 (sr) 2018-05-31
KR20130102113A (ko) 2013-09-16
TW201631153A (zh) 2016-09-01
US20250154285A1 (en) 2025-05-15
PH12016502073A1 (en) 2018-01-29
JP2017046697A (ja) 2017-03-09
JP2013150604A (ja) 2013-08-08
NO2018024I1 (no) 2018-07-10
FR18C1031I2 (fr) 2020-09-25
NO2023034I1 (no) 2023-09-06
LUC00076I2 (en) 2018-07-30
RU2620071C2 (ru) 2017-05-22
RU2013118448A (ru) 2014-10-27
MY166429A (en) 2018-06-26
KR102099580B1 (ko) 2020-04-10
HUS1800029I1 (hu) 2018-07-30
US20220267470A1 (en) 2022-08-25
PT2644698T (pt) 2018-01-31
CN105859889B (zh) 2020-01-07
KR101398363B1 (ko) 2014-05-22
CA2817964A1 (en) 2012-05-24
LTPA2018507I1 (lt) 2018-06-25
HK1223379A1 (zh) 2017-07-28
WO2012067176A1 (ja) 2012-05-24
AU2011330184A1 (en) 2013-05-09
US9334331B2 (en) 2016-05-10
TWI452136B (zh) 2014-09-11
TWI629355B (zh) 2018-07-11
NL300940I2 (nl) 2018-10-25
US20130330345A1 (en) 2013-12-12
US20230212315A1 (en) 2023-07-06
RU2534564C1 (ru) 2014-11-27
EP2644698B1 (en) 2018-01-03
TR201802772T4 (tr) 2018-03-21
JP2019129826A (ja) 2019-08-08
PH12013500974A1 (en) 2013-07-08
JP6710131B2 (ja) 2020-06-17
TW201414835A (zh) 2014-04-16
AU2011330184B2 (en) 2016-03-10
US20160222129A1 (en) 2016-08-04
EP3318633A1 (en) 2018-05-09
TW201243049A (en) 2012-11-01
JP2021065233A (ja) 2021-04-30
JP5246906B1 (ja) 2013-07-24
JP2025084889A (ja) 2025-06-03
KR20130108407A (ko) 2013-10-02
US20170022293A1 (en) 2017-01-26
BR112013012213A2 (pt) 2020-09-01
DK2644698T3 (en) 2018-01-22
TWI452135B (zh) 2014-09-11
AU2016203564A1 (en) 2016-06-16
JPWO2012067176A1 (ja) 2014-05-12
LTC2644698I2 (lt) 2019-09-10
JP2013143942A (ja) 2013-07-25
US20190315884A1 (en) 2019-10-17
JP2022191374A (ja) 2022-12-27
HRP20180421T1 (hr) 2018-04-20
MX2013005394A (es) 2013-07-29
NO2644698T3 (ko) 2018-06-02
LT2644698T (lt) 2018-02-26
CN105859889A (zh) 2016-08-17
US20140370018A1 (en) 2014-12-18
US10450381B2 (en) 2019-10-22
JP6013915B2 (ja) 2016-10-25
JP2025098032A (ja) 2025-07-01
RU2534347C1 (ru) 2014-11-27
KR20190033644A (ko) 2019-03-29
JP5246905B1 (ja) 2013-07-24
TW201414836A (zh) 2014-04-16
KR20130102640A (ko) 2013-09-17
HUE038305T2 (hu) 2018-10-29
EP2644698A4 (en) 2015-07-01
US20140037632A1 (en) 2014-02-06
ES2660151T3 (es) 2018-03-21
EP2644698A1 (en) 2013-10-02
AU2016203564B2 (en) 2017-11-02
US20240376228A1 (en) 2024-11-14
MX355060B (es) 2018-04-03
PH12016502073B1 (en) 2024-04-05
CN103298937B (zh) 2016-05-25
SI2644698T1 (en) 2018-05-31
FR18C1031I1 (ko) 2018-08-31
CN103298937A (zh) 2013-09-11
RU2534564C3 (ru) 2019-11-12
PL2644698T3 (pl) 2018-06-29
KR101398290B1 (ko) 2014-05-22
JP2024116410A (ja) 2024-08-27
US20240059795A1 (en) 2024-02-22
CA2817964C (en) 2018-06-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101962483B1 (ko) 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자
HK1223379B (zh) 具有代替凝血因子viii的功能的功能的多特異性抗原結合分子
HK1186206A (en) Multi-specific antigen-binding molecule having alternative function to function of blood coagulation factor viii
HK1186206B (en) Multi-specific antigen-binding molecule having alternative function to function of blood coagulation factor viii

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

Patent event date: 20130530

Patent event code: PA01051R01D

Comment text: International Patent Application

A107 Divisional application of patent
PA0104 Divisional application for international application

Comment text: Divisional Application for International Patent

Patent event code: PA01041R01D

Patent event date: 20130717

PG1501 Laying open of application
A201 Request for examination
AMND Amendment
PA0201 Request for examination

Patent event code: PA02012R01D

Patent event date: 20161116

Comment text: Request for Examination of Application

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event date: 20180202

Patent event code: PE09021S01D

AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
PE0601 Decision on rejection of patent

Patent event date: 20180827

Comment text: Decision to Refuse Application

Patent event code: PE06012S01D

Patent event date: 20180202

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event code: PE06011S01I

AMND Amendment
PX0901 Re-examination

Patent event code: PX09011S01I

Patent event date: 20180827

Comment text: Decision to Refuse Application

Patent event code: PX09012R01I

Patent event date: 20180731

Comment text: Amendment to Specification, etc.

Patent event code: PX09012R01I

Patent event date: 20161116

Comment text: Amendment to Specification, etc.

PX0701 Decision of registration after re-examination

Patent event date: 20181221

Comment text: Decision to Grant Registration

Patent event code: PX07013S01D

Patent event date: 20181123

Comment text: Amendment to Specification, etc.

Patent event code: PX07012R01I

Patent event date: 20180827

Comment text: Decision to Refuse Application

Patent event code: PX07011S01I

Patent event date: 20180731

Comment text: Amendment to Specification, etc.

Patent event code: PX07012R01I

Patent event date: 20161116

Comment text: Amendment to Specification, etc.

Patent event code: PX07012R01I

X701 Decision to grant (after re-examination)
A107 Divisional application of patent
PA0104 Divisional application for international application

Comment text: Divisional Application for International Patent

Patent event code: PA01041R01D

Patent event date: 20190319

GRNT Written decision to grant
PR0701 Registration of establishment

Comment text: Registration of Establishment

Patent event date: 20190320

Patent event code: PR07011E01D

PR1002 Payment of registration fee

Payment date: 20190320

End annual number: 3

Start annual number: 1

PG1601 Publication of registration
PR1001 Payment of annual fee

Payment date: 20220311

Start annual number: 4

End annual number: 4

PR1001 Payment of annual fee

Payment date: 20240308

Start annual number: 6

End annual number: 6