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KR101840618B1 - 종양 억제 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의해 종양 억제 유전자 관련된 질환의 치료 - Google Patents

종양 억제 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의해 종양 억제 유전자 관련된 질환의 치료 Download PDF

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KR101840618B1
KR101840618B1 KR1020177033273A KR20177033273A KR101840618B1 KR 101840618 B1 KR101840618 B1 KR 101840618B1 KR 1020177033273 A KR1020177033273 A KR 1020177033273A KR 20177033273 A KR20177033273 A KR 20177033273A KR 101840618 B1 KR101840618 B1 KR 101840618B1
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antisense
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조셉 콜라드
올가 크로코바 셔만
Original Assignee
큐알엔에이, 인크.
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Abstract

본 발명은 종양 억제 유전자의 발현 및/또는 기능을 조절하는, 특히, 천연 안티센스 올리고뉴클레오티드의 표적화에 의해 조절하는 안티센스 올리고뉴클레오티드에 관한 것이다. 본 발명은 이러한 안티센스 올리고뉴클레오티드를 확인하고, 종양 억제 유전자의 발현과 관련된 질병 및 장애의 치료에 이를 이용하는 것에 관계한다.

Description

종양 억제 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의해 종양 억제 유전자 관련된 질환의 치료{TREATMENT OF TUMOR SUPPRESSOR GENE RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPT TO THE GENE}
관련 출원의 교차-참고
본 출원은 2008년 12월 4일자 출원된 U.S. 가특허출원 61/119,973, 2009년 3월 4일자 출원된 U.S. 가특허출원 61/157,249, 2009년 4월 3일자 출원된 U.S. 가특허출원 61/166,381 그리고 2009년 2월 23일자 출원된 U.S. 가특허출원 61/154,594를 우선권으로 주장하며, 이들 각 서류는 전문이 참고문헌에 통합된다.
발명의 분야
본 발명의 구체예들은 종양 억제 유전자(종양 억제 유전자s) 및 관련 분자들의 발현 및/또는 기능을 조절하는 올리고뉴클레오티드를 포함한다.
DNA-RNA 및 RNA-RNA 하이브리드화(Hybridization)는 DNA 복제, 전사 및 해독을 포함하는 여러 측면의 핵산 기능에 중요하다. 하이브리드화는 특정 핵산을 탐지하거나 또는 이의 발현을 변경시키는 다양한 기술의 중심이다. 안티센스 뉴클레오티드는 표적 RNA에 하이브리드되어, RNA 접합(splicing), 전사, 해독, 및 복제를 간섭함으로써 유전자 발현을 붕괴시킨다. 안티센스 DNA는 DNA-RNA 하이브리드가 대부분의 세포 유형에 존재하는 리보뉴클레아제 H의 활성에 의해 절단되는 기질로서의 기능을 하는 추가된 특징을 가진다. 안티센스 분자들은 올리고데옥시뉴클레오티드 (ODNs)의 경우 세포안으로 운반될 수 있거나, 또는 내생성 유전자로부터 RNA 분자들로 발현될 수 있다. FDA는 최근 안티센스 약물, VITRAVENE™ (사이토메갈로바이러스 레티니티스(cytomegalovirus retinitis) 치료용)을 승인하였는데, 이는 안티센스가 치료요법적 유용성을 가진다는 것을 반영한다.
요약
본 요약은 본 발명의 성질 및 물질을 간략하게 나타내는 본 발명의 요약으로 제공된다. 이는 청구범위의 범주 또는 의미를 해석하거나 제한하는데 이용되어서는 안된다는 것을 인지해야 한다.
한 구체예에서, 본 발명은 상응하는 센스 유전자를 상향-조절하는 천연 안티센스 전사체의 임의 부분에 표적되는 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용함으로써, 천연 안티센스 전사체의 작용을 억제하는 방법을 제공한다. 또한, 본 발명에서는 천연 안티센스 전사체의 억제는 siRNA, 리보자임 및 소분자들에 의해 이루어질 수 있으며, 이 또한 본 발명의 범주내에 있는 것으로 간주된다.
한 구체예는 환자의 세포 또는 조직에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 또는 발현을 생체내 또는 시험관에서 조절하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 길이가 5 내지 30개의 뉴클레오티드인 안티센스 올리고뉴클레오티드를 상기 세포 또는 조직과 접촉시키고, 이때, 올리고뉴클레오티드는 서열 번호:8의 뉴클레오티드 1-1675 또는 서열 번호:9의 뉴클레오티드 1 내지 518, 또는 서열 번호: 10의 뉴클레오티드 1 내지 759 또는 서열 번호:11의 뉴클레오티드 1 내지 25892 또는 서열 번호:12의 뉴클레오티드 1 내지 279 또는 서열 번호:13의 뉴클레오티드 1 내지 1982 또는 서열 번호:14의 뉴클레오티드 1 내지 789 또는 서열 번호:15의 뉴클레오티드 1 내지 467 내 (도 5)의 5 내지 30개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 폴리뉴클레오티드의 역 상보성(reverse complement)과 최소한 50% 서열 동일성(Sequence identity)을 보유하며; 따라서, 환자의 세포 또는 조직에서 생체내 또는 시험관에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 것을 포함한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 천연 안티센스 서열, 예를 들면, 서열 번호: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 또는 15에 제공되는 폴리뉴클레오티드, 및 이에 대한 임의의 변이체들, 대립유전자들, 상동체들, 돌연변이체들, 유도체들, 단편들 및 상보성 서열들을 표적한다. 안티센스 올리고뉴클레오티드의 예시는 서열 번호: 16 내지 36 (도 6~9)에서 제시하고 있다.
또다른 구체예는 환자의 세포 또는 조직에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 또는 발현을 생체내 또는 시험관에서 조절하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 길이가 5 내지 30개의 뉴클레오티드인 안티센스 올리고뉴클레오티드를 상기 세포 또는 조직과 접촉시키고, 이때, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 안티센스의 역 보체(reverse complement)와 최소한 50% 서열 동일성을 보유하며; 따라서, 환자의 세포 또는 조직에서 생체내 또는 시험관에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 것을 포함한다.
또다른 구체예는 환자의 세포 또는 조직에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 또는 발현을 생체내 또는 시험관에서 조절하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 길이가 5 내지 30개의 뉴클레오티드인 안티센스 올리고뉴클레오티드를 상기 세포 또는 조직과 접촉시키고, 이때, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 안티센스 폴리뉴클레오티드에 대한 안티센스 올리노뉴클레오티드와 최소한 50% 서열 동일성을 보유하며; 따라서, 환자의 세포 또는 조직에서 생체내 또는 시험관에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 것을 포함한다.
바람직한 구체예에서, 조성물은 센스 및/또는 안티센스 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드에 결합하는 하나 이상의 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 변형된 또는 치환된 뉴클레오티드를 포함한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 변형된 결합(bonds)을 포함한다.
또다른 구체예에서, 변형된 뉴클레오티드는 포스포로티오에이트, 메틸포스포네이트, 펩티드 핵산, 2’-O-메틸, 플루오르- 또는 탄소, 메틸렌 또는 잠금 핵산 (LNA:locked nucleic acids) 분자들을 포함하는 변형된 염기들을 포함한다. 바람직하게는, 변형된 뉴클레오티드는 α-L-LNA을 포함하는 잠금 핵산 분자들이다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 환자의 피하, 근육내, 정맥내 또는 복막내로 투여된다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 약학 조성물로 투여된다. 치료 섭생은 환자에게 안티센스 화합물을 최소한 한 번 투여하는 것을 포함하지만, 이와 같은 치료는 시간을 두고 다중 약량을 포함하는 것으로 변형될 수 있다. 치료는 하나 이상의 상이한 유형의 치료법과 병용될 수 있다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 리포좀 안에 포집되거나 또는 운반체 분자(가령, 콜레스테롤, TAT 펩티드)에 부착된다.
한 구체예는 생체 또는 시험관에서 환자의 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 길이가 5 내지 30개 뉴클레오티드로 된 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드를 상기 세포 또는 조직과 접촉시키고, 이에 의해 생체 또는 시험관에서 환자의 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 것을 포함하며, 이때 최소한 하나의 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드에 대한 천연 안티센스의 역 보체에 최소한 50% 서열 동일성을 가진다.
한 구체예는 생체 또는 시험관에서 환자의 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 길이가 5 내지 30개 뉴클레오티드로 된 안티센스 올리고뉴클레오티드를 상기 세포 또는 조직과 접촉시키고, 이에 의해 생체 또는 시험관에서 환자의 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 것을 포함하며, 이때 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드에 최소한 50% 서열 동일성을 가진다.
또다른 구체예는 생체 또는 시험관에서 환자의 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 천연 안티센스 부분을 표적으로 하는 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드를 상기 세포 또는 조직과 접촉시켜; 이에 의해 생체 또는 시험관에서 환자의 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능 및/또는 발현을 조절하는 것을 포함한다.
한 구체예에서, 종양 억제 유전자의 발현 및/또는 기능은 대조군과 비교하여 생체 또는 시험관에서 증가된다.
또다른 구체예에서, 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 천연 안티센스 서열을 표적으로 한다.
*또다른 구체예에서, 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드는 에리트로포에틴 (EPO) 폴리뉴클레오티드의 코딩 및/또는 넌-코딩 핵산 서열을 포함하는 핵산 서열을 표적으로 한다.
또다른 구체예에서, 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 중첩 및/또는 비-중첩 서열을 표적으로 한다.
한 구체예에서, 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드는 최소한 하나의 변형된 슈가 모이어티, 최소한 하나의 변형된 뉴클레오시드간 링키지, 최소한 하나의 변형된 뉴클레오티드, 및 이의 조합으로 부터 선택된 하나 이상의 변형을 포함한다.
관련된 구체예에서, 하나 이상의 변형은 2'-O-메톡시에틸 변형된 슈가 모이어티, 2'-메톡시 변형된 슈가 모이어티, 2'-O-알킬 변형된 슈가 모이어티, 2환 슈가 모이어티, 그리고 이의 조합들로 부터 선택된 최소한 하나의 변형된 슈가 모이어티를 포함한다
또다른 구체예에서, 하나 이상의 변형은 포스포로티오에이트, 2'- O-메톡시에틸 (MOE), 2'-플루오르, 알킬포스포네이트, 포스포로디티오에이트, 알킬포스포노티오에이트, 포스포르아미데이트, 카르바메이트, 카르보네이트, 포스페이트 트리에스테르, 아세타아미데이트, 카르복시메틸 에스테르, 그리고 이의 조합들로부터 선택된 최소한 하나의 변형된 뉴클레오시드간 링키지를 포함한다.
한 구체예에서, 하나 이상의 변형은 펩티드 핵산 (PNA), 잠김 핵산(LNA), 아라비노-핵산(FANA), 유사체, 유도체 그리고 이의 조합들로부터 선택된 최소한 하나의 변형된 뉴클레오티드를 포함한다.
또다른 구체예에서, 최소한 하나의 올리고뉴클레오티드는 서열 번호: 16 내지 36에서 제시된 최소한 하나의 올리고뉴클레오티드 서열을 포함한다.
또다른 구체예는 생체 또는 시험관에서 포유동물 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자 유전자의 기능 및/또는 발현을 조절하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 상기 세포 또는 조직을 길이가 5 내지 30개 뉴클레오티드인 최소한 하나의 짧은 간섭 RNA (siRNA) 올리고뉴클레오티드와 접촉시키고, 그리고 생체 또는 시험관에서 포유동물 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자의 기능 및/또는 발현을 조절하는 것을 포함하며, 이때 최소한 하나의 siRNA는 종양 억제 유전자의 안티센스 폴리뉴클레오티드에 특이적이며, 최소한 하나의 siRNA 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 안티센스 및/또는 센스 핵산 분자의 최소한 약 5개 연속 핵산의 상보 서열에 대해 최소한 50% 서열 동일성을 가진다.
한 구체예에서, 상기 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 안티센스 및/또는 센스 핵산 분자에 최소한 약 5개 연속 핵산의 상보적인 서열에 최소한 80% 서열 동일성을 가진다.
또다른 구체예는 생체 또는 시험관에서 포유동물 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자의 기능 및/또는 발현을 조절하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 상기 세포 또는 조직을 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 센스 및/또는 천연 안티센스 가닥의 넌코딩 및/또는 코딩 서열에 특이적인 길이가 약 5 내지 30개 뉴클레오티드인 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드와 접촉시키고, 그리고 생체 또는 시험관에서 포유동물 세포 또는 조직내에서 종양 억제 유전자의 기능 및/또는 발현을 조절하는 것을 포함하며, 그리고 이때 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드는 서열 번호: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 및 15의 최소한 하나의 핵산 서열에 최소한 50% 서열 동일성을 가진다.
한 구체예는 최소한 하나의 변형된 슈가 모이어티; 최소한 하나의 변형된 뉴클레오티드간 링키지; 최소한 하나의 변형된 뉴클레오티드, 그리고 이의 조합들로부터 선택된 최소한 하나의 변형을 포함하는 합성, 변형된 올리고뉴클레오티드를 제공하며, 여기서 올리고뉴클레오티드는 정상 기준과 비교하였을 때 생체 또는 시험관에서 종양 억제 유전자에 하이브리드되고, 이 유전자의 발현 또는 기능을 조절하는 안티센스 화합물이다.
한 구체예에서, 최소한 하나의 변형은 포스포로티오에이트, 알킬포스포네이트, 포스포로디티오에이트, 알킬포스포노티오에이트, 포스포르아미데이트, 카르바메이트, 카르보네이트, 포스페이트 트리에스테르, 아세타아미데이트, 카르복시메틸 에스테르, 그리고 이의 조합들로 구성된 군으로부터 선택된 최소한 하나의 뉴클레오티드간 링키지를 포함한다.
또다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 최소한 하나의 포스포로티오에이트 뉴클레오티드간 링키지를 포함한다.
관련된 구체예에서, 상기 올리고뉴클레오티드는 포스포로티오에이트 뉴클레오티드간 링키지의 기본골격을 포함한다.
한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 펩티드 핵산, 잠김 핵산 (LNA), 유사체, 유도체, 그리고 이의 조합들로부터 선택된 최소한 하나의 변형된 뉴클레오티드를 포함한다.
또다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 포스포로티오에이트, 알킬포스포네이트, 포스포로디티오에이트, 알킬포스포노티오에이트, 포스포르아미데이트, 카르바메이트, 카르보네이트, 포스페이트 트리에스테르, 아세타아미데이트, 카르복시메틸 에스테르, 그리고 이의 조합들으로부터 선택된 뉴클레오티드간 링키지는 포함하는 다수의 변형을 포함한다.
한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 펩티드 핵산, 잠김 핵산 (LNA), 유사체, 유도체, 그리고 이의 조합들로부터 선택된 변형된 뉴클레오티드를 포함하는 다수의 변형을 포함한다.
또다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 2'-O-메톡시에틸 변형된 슈가 모이어티, 2'-메톡시 변형된 슈가 모이어티, 2'-O-알킬 변형된 슈가 모이어티, 2환 슈가 모이어티, 그리고 이의 조합들로부터 선택된 최소한 하나의 변형된 슈가 모이어티를 포함한다.
또다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 2'-O-메톡시에틸 변형된 슈가 모이어티, 2'-메톡시 변형된 슈가 모이어티, 2'-O-알킬 변형된 슈가 모이어티, 2환 슈가 모이어티, 그리고 이의 조합들로부터 선택된 변형된 슈가 모이어티를 포함하는 다수의 변형을 포함한다.
또다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 안티센스 및/또는 센스 가닥에 하이브리드되는, 최소한 약 5 내지 30개 뉴클레오티드이며, 여기서 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 안티센스 및/또는 센스 코딩 및/또는 넌코딩 핵산 서열의 최소한 약 5개의 연속 핵산의 상보 서열에 최소한 약 20% 서열 동일성을 가진다.
또다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 안티센스 및/또는 센스 코딩 및/또는 넌코딩 핵산 서열의 최소한 약 5개의 연속 핵산의 상보 서열에 최소한 약 80% 서열 동일성을 가진다.
또다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 정상 기준과 비교하였을 때, 생체 또는 시험관에서 최소한 하나의 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드에 하이브리드되며, 이의 발현 및/또는 기능을 조절한다.
한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 서열 번호: 16 내지 36에서 제시된 서열중 하나를 포함한다.
본 발명의 한 구체예는 하나 이상의 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드에 특이적인 하나 이상의 올리고뉴클레오티드를 포함하는 조성물을 제공하며, 상기 폴리뉴클레오티드는 안티센스 서열, 상보 서열, 대립유전자, 동소체, 이소폼, 변이체, 유도체, 돌연변이체, 단편 또는 이의 조합을 포함한다.
관련된 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 서열 번호: 16 내지 36에서 제시된 임의의 하나의 뉴클레오티드 서열과 비교하였을 때 최소한 약 40% 서열 동일성을 가진다.
특정 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 서열 번호: 16 내지 36에서 제시하는 임의의 뉴클레오티드 서열을 포함한다.
한 구체예에서, 서열 번호: 16 내지 36에서 제시된 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 변형 또는 뉴클레오티드 치환을 포함한다.
또다른 구체예에서, 하나 이상의 변형은 포스포로티오에이트, 메틸포스포네이트, 펩티드 핵산, 잠김 핵산 (LNA) 분자, 그리고 이의 조합들로부터 선택된다.
본 발명의 구체예는 최소한 하나의 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드 및/또는 이의 최소한 하나의 인코드된 산물과 관련된 질환 또는 이상을 치료 또는 예방하는 방법을 제공하는데, 이 방법은
최소한 하나의 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 천연 안티센스 서열에 결합하고, 최소한 하나의 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 발현을 조절하는 최소한 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드의 치료 유효량을 환자에게 투여하고; 이에 의해 최소한 하나의 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드 및/또는 이의 최소한 하나의 인코드된 산물과 관련된 질환 또는 이상을 치료 또는 방지하는 것을 포함한다.
특정 구체예에서, 최소한 하나의 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드와 관련된 질병은 증가된 또는 감소된 아팝토시스와 관련된 질환, 조직/세포 노화, 암(표 1에 언급된 것들을 포함), 자가면역 질환, AIDS를 포함하는 면역결핍 질환, 노화, 신경퇴행성 질환 또는 장애(가령, Alzheimer 질환, 운동실조 모세관확장증, Parkinson 질환, 근위축성 측색 경화증, Huntington 질환 등), 과형성 질환(가령, 켈로이드), 류마티스 관절염, 관상 심장 질환 허혈성 세포 사멸, 림프증식성 장애, 아테롬성경화증, 골다공증, 골수이형성 증후군, 독소-유도된 질환, 바이러스 감염, 상처-치유, Cowden 질환 (CD), Lhermitte-Duclos 질환 (LDD) , Bannayan-Zonana 중후군(BZS, Bannayan-Riley-Ruvalcaba 증후군, Ruvalcaba-Myhre-Smith 증후군 및 Riley-Smith 증후군이라고도 함), 이식, 아파톱시스-관련된 질환 또는 장애, 대사 질환 또는 이상(가령, 당뇨병), 신장 질환 또는 장애, 심근경색/심부전, 허혈, 폐혈증, 특히 조혈성 염증 세포가 과다하게 많은 염증 질환, 증식성 질환, 아파톱시스 증가를 통하여 염증 질환 치료용 치료 패러다임이 있는 질환 또는 장애로부터 선택된다.
본 발명의 구체예는 생체 투여용 최소한 하나의 올리고뉴클레오티드를 확인하고 선별하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 질병과 관련된 표적 폴리뉴클레오티드를 선택하고; 선택된 표적 폴리뉴클레오티드에 대해 안티센스 배향으로 상보적인 최소한 5개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 올리고뉴클레오티드를 확인하고; 그리고 스트린젼트 조건하에 안티센스 올리고뉴클레오티드와 표적 폴리뉴클레오티드의 하이브리드의 열융점을 측정하고; 그리고 수득된 정보에 기초하여 생체내 투여용 최소한 하나의 올리고뉴클레오티드를 선택하는 것을 포함한다.
다른 측면들은 하기에서 설명된다.
도 1
도 1a와 1b는 실시간 PCR 결과를 나타내는 그래프로서, 기준과 비교하였을 때, 리포펙타민 2000을 이용하여 도입된 포스포티오에이트 올리고뉴클레오티드로 HepG2 세포를 처리한 후, TP73 mRNA에서 배수 변화를 보여준다. 실시간 PCR 결과에서, HepG2 세포에서 p73 mRNA 수준은 p73as (도 1a)에 대해 기획된 oligos로 처리한 후 48시간 시점에서 상당히 증가되었음을 보여준다. 동일한 시료들에서, p73as RNA의 수준들은 p73as에 대한 oligos로 처리한 후에 상당히 감소되었다(도 1b). oligo 1, oligo 2 및 oligo 3에서 표시된 막대들은 차례로 서열 번호: 16, 17 및 18로 처리된 샘플에 대응한다.
도 1c는 실시간 PCR 결과를 나타내는 그래프로서, 기준과 비교하였을 때, 리포펙타민 2000을 이용하여 도입된 포스포티오에이트 올리고뉴클레오티드로 HepG2 세포를 처리한 후, TP73 mRNA에서 배수 변화+표준 편차를 보여준다. 실시간 PCR 결과에서, HepG2 세포에서 p73 mRNA 수준은 p73 안티센스 Hs.668503에 대해 기획된 oligos중 두 개와, 그리고 p73 안티센스 Hs.674463에 대해 기획된 oligos중 한 개 처리한 후 48시간 시점에서 상당히 증가되었음을 보여준다. p73 Hs.668503_1, p73 Hs.668503_2, p73 Hs.674463_1 및 p73 Hs.674463_2에서 표시된 막대들은 차례로 서열 번호: 19, 20, 21, 및 22로 처리된 샘플에 대응한다.
도 1d는 실시간 PCR 결과를 나타내는 그래프로서, 기준과 비교하였을 때, 리포펙타민 2000을 이용하여 도입된 포스포티오에이트 올리고뉴클레오티드로 TM4 세포를 처리한 후, TP73 mRNA에서 배수 변화+표준 편차를 보여준다. 실시간 PCR 결과에서, 마우스 TM4 세포에서 p73 mRNA 수준은 마우스 p73 안티센스 Hs.668503에 대해 기획된 oligos중 한 개와, 그리고 마우스 p73 안티센스 WDR8에 대해 기획된 oligos중 한 개 처리한 후 48시간 시점에서 상당히 증가되었음을 보여준다. p73 마우스 Hs.668503 _1, p73 마우스 Hs.668503 _10, p73 마우스 Hs.668503 _14, p73 마우스 Hs.668503 _15, p73 마우스 WDr8 _1, p73 마우스 WDr8 _7, p73 마우스 WDr8 _8 및 p73 마우스 WDr8 _3에서 표시된 막대들은 차례로 서열 번호: 20 내지 30으로 처리된 샘플에 대응한다.
도 2는 실시간 PCR 결과를 나타내는 그래프로서, 기준과 비교하였을 때, 리포펙타민 2000을 이용하여 도입된 포스포티오에이트 올리고뉴클레오티드로 HUVEC 세포를 처리한 후, TP73 mRNA에서 배수 변화를 보여준다. 실시간 PCR 결과에서, HUVEC 세포에서 p53 mRNA 수준은 p53에 대해 기획된 모든 siRNAs로 처리한 후(oligo1, P=0.003, oligo2 P=0.001, 및 oligo2 P=0.03) 48시간 시점에서 상당히 증가되었음을 보여준다. oligo1, oligo2, 및 oligo3에서 표시된 막대들은 차례로 서열 번호: 31, 32 및 33으로 처리된 샘플에 대응한다.
도 3은 실시간 PCR 결과를 나타내는 그래프로서, 기준과 비교하였을 때, 리포펙타민 2000을 이용하여 도입된 포스포티오에이트 올리고뉴클레오티드로 HepG2 세포를 처리한 후, PTEN mRNA에서 배수 변화를 보여준다. 실시간 PCR 결과에서, 마우스 HepG2 세포에서 PTEN mRNA 수준은 PTEN 안티센스 Hs.624903에 대해 기획된 oligos중 한 개로 처리한 후 48시간 시점에서 상당히 증가되었음을 보여준다. PTEN Hs.607931_2, PTEN Hs.624903_2, PTEN Hs.624903_3에서 표시된 막대들은 차례로 서열 번호: 34, 35 및 36으로 처리된 샘플에 대응한다.
도 4에서:
서열 번호: 1: 호모 사피엔스(Homo sapiens) 종양 억제 유전자 (TP73) 전사체 변이체 1, mRNA. (NCBI 수탁번호.: NM_005427.2)
서열 번호: 2 - p73의 게놈 서열(엑손은 대문자로, 인트론은 소문자로 나타낸다).
서열 번호: 3 - p73의 마우스 게놈 서열(엑손은 대문자로, 인트론은 소문자로 나타낸다).
서열 번호: 4: 호모 사피엔스(Homo sapiens) 종양 단백질 p53 (TP53), 전사체 변이체 1, mRNA. (NCBI 수탁번호.: NM_000546.4)
서열 번호: 5 - p53의 게놈 서열 (NCBI 수탁번호: NM_001126115).
서열 번호: 6: 호모 사피엔스(Homo sapiens) 포스파타제 및 텐신 동사체 (PTEN), mRNA. (NCBI 수탁번호.: NM_000314).
서열 번호: 7: PTEN의 게놈 서열 (엑손은 대문자로, 인트론은 소문자로 나타낸다).
도 5 에서
서열 번호: 8: 천연 안티센스 서열 p73as (NCBI 수탁번호.: NM_017818.2)
서열 번호: 9: p73 천연 안티센스 서열 Hs.668503
서열 번호: 10: p73 천연 안티센스 서열 Hs.674463
서열 번호: 11: p73 마우스 천연 안티센스 서열
서열 번호: 12: p73 마우스 천연 안티센스 서열: Hs.668503 (cDNA와 게놈 서열에서 일치하는 염기들은 대문자로 표시하였다).
서열 번호: 13: p53 천연 안티센스 서열 (NCBI 수탁번호.: NM_018081.2)
서열 번호: 14: PTEN 천연 안티센스 서열 (Hs.624903)
서열 번호: 15: PTEN 천연 안티센스 서열 (Hs. 607931)
도 6은 안티센스 올리고뉴클레오티드, 서열 번호: 16 내지 22를 나타내며. ‘r’은 RNA를 나타내며, * 는 포스포티오에이트 결합을 나타낸다.
도 7은 안티센스 올리고뉴클레오티드, 서열 번호: 23 내지 30을 나타내며, * 는 포스포티오에이트 결합을 나타낸다.
도 8은 천연 안티센스 서열 NM_018081에 대한 p53 안티센스 올리고뉴클레오티드, 서열 번호: 31 내지 33을 나타낸다.
도 9는 천연 안티센스 서열 Hs.624903 and Hs. 607931에 대한 PTEN 안티센스 올리고뉴클레오티드, 서열 번호: 34 내지 36을 나타낸다. ‘r’은 RNA를 나타낸다.
도 10은 센스 올리고뉴클레오티드, 서열 번호: 37 내지 42를 나타낸다. ‘r’은 RNA를 나타낸다.
센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 37은 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 19의 역 보체다,
센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 38은 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 20의 역 보체다,
센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 39는 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 21의 역 보체다; 그리고
센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 34는 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 22의 역 보체다.
도 11은 Applied Biosystems Taqman gene Expression Assay에 의해 기획된 분석의 서열 번호: 41 및 42를 나타낸다
서열 번호: 41은 p73 표적 서열, 엑손 2 (Hs00232088_ml)이며
서열 번호: 42는 p73as 표적 서열, 엑손 7 (Hs00215135_ml 및 Hs00892470_g1)이다.
도 12는 Applied Biosystems Taqman gene Expression Assay에 의해 기획된 분석의 서열 번호: 43 및 44를 나타낸다.
서열 번호: 43은 p53 표적 서열 (Hs00153340_ml)이며
서열 번호: 44는 p53as (WDR79) 표적 서열 (Hs00216360_m1)이다
도 13은 센스 올리고뉴클레오티드, 서열 번호: 45 내지 47을 나타낸다. ‘r’은 RNA를 나타낸다.
센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 45는 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 34의 역보체다,
센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 46은 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 35의 역보체다; 그리고
센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 47은 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열 번호: 36의 역보체다.
본 발명의 몇 가지 측면들이 설명을 위한 실시예를 참고하여 하기에서 설명된다. 본 발명의 충분한 이해를 제공하기 위하여 많은 특정 설명들, 상관관계 및 방법들이 제시되어 있다. 당업자는 그러나, 하나 이상의 특정 세부 사항 없이도 또는 다른 방법들을 이용하여 본 발명을 실시할 수 있다는 것을 인지할 것이다. 본 발명은 실시 또는 과정의 순서에 제한을 받지 않는데, 그 이유는 일부 실시는 상이한 순서로 또는 다른 실시 또는 과정과 동시에 일어날 수도 있기 때문이다. 또한, 본 발명에 따른 방법을 이행하는데 설명된 모든 실시 또는 과정이 필요한 것은 아니다.
여기에서 설명된 모든 유전자, 유전자 이름 및 유전자 산물들은 여기에서 설명된 방법 및 조성물을 적용시킬 수 있는 임의의 종으로부터 얻은 상도체들에 상응하다. 따라서, 용어들은 인간 및 마우스의 유전자 및 유전자 산물들을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 특정 종으로부터의 유전자 또는 유전자 산물들이 설명되어 있을 때, 이 내용은 예를 든 것이며, 명백하게 다른 표시가 없는 한 이것에 한정시키는 것으로 해석되어서는 안된다. 따라서, 여기에서 설명된 유전자의 경우, 예를 들면, 일부 구체예에서, 포유류 핵산 및 아미노산 서열들은 다른 포유류, 물고기, 양서류, 파충류 및 조류를 포함하나 이에 한정되지 않는 다른 동물로부터 얻은 상동성 및/또는 동족(orthologous) 유전자 및 유전자 산물들을 포함한다. 바람직한 구체예들에서, 유전자 또는 핵산 서열들은 인간의 것이다.
정의
여기에서 설명된 용어는 특정 구체예를 설명하기 위한 목적이며, 본 발명을 이에 한정시키고자 하는 의도는 아니다. 여기에서 사용된 것과 같이, 단수형( "a", "an" 및 "the")은 명시적으로 다른 언급이 없는 한 복수의 개념을 포함한다. 더욱이, 포함하는(including), 포함하다(includes), 가지는(having), 가지다(has), ~와 함께(with) 또는 이의 변형은 명세서 또는 청구범위에 사용되었을 때, “포함하는(comprising)”과 유사한 의미로 이용된다.
"약" 또는 "대략"은 당업자가 결정할 수 있는 특정 값의 수용가능한 오차 범위내에 있다는 것을 말하며, 이 값이 어떻게 측정되는지 또는 결정되는 지에 따라 부분적으로 달라지며, 가령, 측정 시스템의 제한에 의해 부분적으로 달라질 수 있다. 예를 들면, "약" 은 해당 기술 분야의 실행시 1 또는 1 이상의 표준 편차를 의미할 수 있다. 대안으로, "약"은 주어진 값의 최대 20%, 바람직하게는 최대 10%, 더욱 바람직하게는 최대 5%, 그리고 여전히 바람직하게는 최대 1%의 범위가 된다. 대안으로, 생물학적 시스템 또는 프로세스에 대해 특히, 이 용어는 크기의 배수, 바람직하게는 해당 값의 5배, 더욱 바람직하게는 2배 범위 내에 있음을 의미한다. 명세서 및 청구범위에서 특정 값이 사용되었을 때, 다른 언급이 없는 한, “약”은 특정 값의 허용가능한 오차 범위 내에 있는 것으로 간주되어야 한다.
여기에서 사용된 것과 같이, "mRNA"는 표적 유전자의 현재 공지의 mRNA 전사체 및 밝혀질 수 있는 임의의 추가 전사체들을 포함한다.
*"안티센스 올리고뉴클레오티드" 또는 "안티센스 화합물"은 또 다른 RNA 또는 DNA (표적 RNA, DNA)에 결합하는 RNA 또는 DNA 분자를 의미한다. 예를 들면, 이것이 RNA 올리고뉴클레오티드이면, RNA-RNA 상호작용에 의해 또다른 RNA 표적에 결합하고, 그리고 표적 RNA의 활성을 변경시킨다(Eguchi et al., 1991 Ann. Rev. Biochem. 60, 631-652). 안티센스 올리고뉴클레오티드는 특정 폴리뉴클레오티드의 발현 및/또는 기능을 상향 또는 하향 조절할 수 있다. 이 정의는 치료, 진단 또는 다른 관점에서 유용한 임의의 외부 RNA 또는 DNA 분자를 포함한다. 이러한 분자들은 예를 들면, 안티센스 RNA 또는 DNA 분자들, 간섭 RNA (RNAi), 마이크로(micro) RNA, 디코이 RNA 분자들, siRNA, 효소적 RNA, 치료요법적 에디팅(therapeutic editing) RNA 그리고 항진 및 길항 RNA, 안티센스 올리고머 화합물, 안티센스 올리고뉴클레오티드, 외부 유도 서열(EGS: external guide sequence) 올리고뉴클레오티드, 선택적 스플라이스(alternate splicers), 프라이머, 프로브, 그리고 표적 핵산의 최소한 일부분에 하이브리드되는 기타 올리고머 화합물들을 포함한다. 이와 같이, 이들 화합물들은 단일-가닥, 이중-가닥, 부분적으로 단일-가닥, 또는 환형 올리고머 화합물들의 형태로 도입될 수 있다.
본 발명의 내용에서, "올리고뉴클레오티드"는 리보핵산 (RNA) 또는 데옥시리보핵산 (DNA)의 올리고머 또는 폴리머 또는 이의 모방체(mimetics)를 말한다. "올리고뉴클레오티드"는 천연 및/또는 변형된 모노머 또는 링키지의 선형 또는 원형 올리고머를 포함하는데, 예를 들면, 데옥시리보뉴클레오시드, 리보뉴클레오시드, 치환된 그리고 이의 알파-아노머 형, 펩티드 핵산 (PNA), 잠금 핵산 (LNA), 포스포로티오에이트, 메틸포스포네이트, 그리고 이와 유사한 것을 포함한다. 올리고뉴클레오티드는 왓슨-크릭 형태의 염기쌍, Ho또는 역 Ho유형의 염기쌍 또는 이와 유사한 것과 같은 모노머-대-모노머 상호작용의 정기적 패턴 방식으로 표적 폴리뉴클레오티드에 특이적으로 결합한다.
올리고뉴클레오티드는 상이한 부분들로 구성된 “키메라”가 될 수 있다. 본 발명의 내용에서, "키메라" 화합물은 두 개 이상의 화학적 부분, 예를 들면, DNA 구역, RNA 구역, PNA 구역 등을 포함하는 올리고뉴클레오티드이다. 각 화학적 구역은 최소한 한 개의 모노머 단위, 가령, 올리고뉴클레오티드 화합물의 경우는 뉴클레오티드로 구성된다. 이와 같은 올리고뉴클레오티드는 일반적으로 최소한 한 가지 구역을 포함하는데, 여기서 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 원하는 성질을 나타내기 위하여 변형된다. 올리고뉴클레오티드의 원하는 성질은 뉴클레아제 분해에 대한 증가된 저항성, 증가된 세포 흡수(uptake), 및/또는 표적 핵산에 대한 증가된 결합 친화력을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 올리고뉴클레오티드의 상이한 구역들은 따라서 상이한 성질들을 가질 수 있다. 본 발명의 키메라 올리고뉴클레오티드는 상기에서 설명된 것과 같이, 두개 이상의 올리고뉴클레오티드, 변형된 올리고뉴클레오티드, 올리고뉴클레오시드 및/또는 올리고뉴클레오티드 유사체들의 혼합형 구조로 형성될 수 있다.
올리고뉴클레오티드는 즉, 고유 DNA와 같이 구성적으로 연결되거나 또는 스페이스(spacer)를 통하여 연결될 때, 모노머가 “리지스터(register)”에서 연결될 수 있는 구역으로 구성될 수 있다. 스페이스들은 구역 사이에서 공유 “다리”를 구성하도록 의도되며, 그리고 바람직한 경우에 길이는 약 100개 탄소 원자를 초과하지 않는다. 스페이스들은 상이한 기능을 수행할 수 있는데, 예를 들면, 음성 또는 양성 전하를 가지며, 특정 핵산 결합 성질(삽입자[intercalators], 홈 결합자[groove binders], 독소, 형광체 등), 친지성(lipophilic)화, 예를 들면, 알파-헬릭스를 유도하는 알라닌 함유 펩티드와 같은 특정 2차 구조를 유도하는 기능을 수행할 수 있다.
여기에서 사용된 것과 같이 "종양 억제 유전자" 및 "종양 억제 유전자"는 모든 패밀리 멤버들, 돌연변이체들, 대립유전자들, 단편들, 종, 코딩 및 넌-코딩 서열들, 센스 및 안티센스 폴리뉴클레오티드 스트랜드를 포함한다.
*여기에서 사용된 것과 같이, 종양 단백질 73, p73, TP73은 본 출원에서 호환된다.
여기에서 사용된 것과 같이, 단어 TRP53, 종양 억제제 p53, p53, P53 항원 NY-CO-13, 세포 종양 항원 p53, FLJ92943, LFS1, 그리고 인단백질 p53은 본 출원에서 호환된다.
여기에서 사용된 것과 같이, PTEN, 10q23del, BZS, MGC11227, MHAM, MMAC1, 다중 진행된 암 1에서 돌연변이된(Mutated in multiple advanced cancers 1), 포스파타제 및 텐신 동사체, 포스파티딜이노시톨-3,4,5-트리포스페이트 3-포스파타제 및 이중-특이성 단백질 포스파타제 PTEN, PTEN1, TEP1는 본 출원에서 호환된다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "~에 특이적인 올리고뉴클레오티드 " 또는 "올리고뉴클레오티드 표적"은 (i) 표적 유전자의 일부와 안정적인 복합체를 형성할 수 있는, 또는 (ii) 표적 유전자의 mRNA 전사체의 일부분과 안정적인 듀플렉스를 형성할 수 있는 서열을 가지는 올리고뉴클레오티드를 말한다. 복합체와 듀플렉스 의 안정성은 이론적인 계산 및/또는 시험관 분석에 의해 결정될 수 있다. 하이브리드화 복합체 및 듀플렉스의 안정성을 결정하는 예시적인 분석들은 하기 실시예에서 설명된다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "표적 핵산"은 DNA로부터 전사된 DNA, RNA(premRNA 및 mRNA를 포함한), 그리고 RNA, 코딩, 넌코딩 서열들, 센스 또는 안티센스 폴리뉴클레오티드로부터 유도된 cDNA를 포함한다. 올리고머 화합물과 이의 표적 핵산의 특이적 하이브리드화는 핵산의 정상적인 기능을 간섭한다. 핵산에 특이적으로 하이브리드하는 화합물들에 의한 표적 핵산의 이와 같은 기능의 조절을 일반적으로 "안티센스"라고 한다. 간섭되는 DNA 기능은 예를 들면, 복제 및 전사를 포함한다. 간섭되는 RNA의 기능은 모든 중요한 기능들, 예를 들면, RNA가 단백질 해독 부위로 전위(translocation), RNA로부터 단백질의 해독, 하나 이상의 mRNA 종을 생산하기 위하여 RNA의 접합 및 RNA가 참여하거나 RNA에의해 수행되는 촉매 활성을 포함한다. 표적 핵산 기능에 대해 이와 같은 간섭 효과는 인코드된 산물 또는 올리고뉴클레오티드의 발현 조절이다.
RNA 간섭 "RNAi"은 "표적" 핵산 서열들에 대해 서열-특이적 상동성을 가지는 이중 가닥의 RNA(dsRNA) 분자들에 의해 중재된다(Caplen, N. J., et al.(2001), Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98:9742-9747). 본 발명의 특정 구체예에서, 중개물질들은 5-25개의 뉴클레오티드 "작은 간섭(Small interference)" RNA 듀플렉스 (siRNAs)다. siRNAs는 Dicer로 알려진 RNase 효소에 의해 dsRNA의 프로세싱으로부터 유도된다(Bernstein, E., et al.(2001), Nature 409:363-366). siRNA 듀플렉스 산물들은 RISC로 불리는 다중-단백질 siRNA 복합체 용어(RNA Induced Silencing Complex)로 모인다. 임의의 특정 이론에 결합되지 않고, RISC는 표적 핵산 (적합하게는 mRNA)으로 유도되는 것으로 보이는데, 여기서 siRNA 듀플렉스는 촉매적 방식으로 절단을 중개하기 위한 서열-특이적 방식으로 상호작용한다(Bernstein, E., et al.(2001), Nature 409:363-366; Boutla, A., et al.(2001), Curr. Biol. 11:1776-1780 ). 본 발명에 따라 이용될 수 있는 작은 간섭 RNAs는 당분야에 잘 알려진 과정 및 당업자에 친숙할 수 있는 과정에 따라 합성되고, 이용될 수 있다. 본 발명의 방법에 이용되는 작은 간섭 RNAs는 적합하게는 약 1 내지 약 50개 뉴클레오티드 (nt) 사이를 포함한다. 비-제한적인 구체예에서, siRNAs는 약 5 내지 약 40 nt, 약 5 내지 약 30 nt, 약 10 내지 약 30 nt, 약 15 내지 약 25 nt, 또는 약 20-25 뉴클레오티드를 포함할 수 있다.
적절한 올리고뉴클레오티드의 선택은 자동적으로 핵산 서열들을 배열하고, 동일 또는 상동 구열을 표시하는 컴퓨터 프로그램을 이용하여 실시된다. 이와 같은 프로그램을 이용하여 수득된 핵산 서열들을 비교하는데, 예를 들면, GenBank와 같은 데이터베이스를 조사하거나 또는 PCR 산물들의 서열화에 의해 비교된다. 종간의 핵산 서열들의 비교로 종간에 적절한 동일성 정도를 나타내는 핵산 서열들의 선택이 가능하다. 서열화되지 않은 유전자의 경우, 서든 블랏을 실행하여, 표적이 되는 종과 다른 종간에 유전자의 동일성 수준을 결정한다. 당분야에 공지된 것과 같이, 다양한 수준의 엄격성(stringency)에서 서든 블랏을 실행함으로써, 동일성의 거의 정확한 측정이 가능하다. 이와 같은 과정으로 제어되어야 하는 개체에서 표적 핵산 서열에 대해 높은 수준의 상보성(complementarity)을 나타내고, 다른 종의 대응 핵산 서열들에 대해 더 낮은 수준의 상보성을 나타내는 올리고뉴클레오티드를 선택할 수 있다. 당업자는 본 발명에 이용되는 유전자에서 절절한 구역을 선택하는데 있어서 상당한 허용 범위가 있다는 것을 인지할 것이다.
"효소적 RNA"라는 의미는 효소 활성을 가진 RNA 분자를 말한다 (Cech, 1988 J. American. Med. Assoc. 260, 3030-3035). 효소적 핵산(리보자임)은 표적 RNA에 우선적으로 결합함으로써 작용한다. 이와 같은 결합은 표적 RNA를 절단하기 위하여 작용하는 분자의 효소적 부분에 아주 근접해 있는 효소적 핵산의 표적 결합 부분을 통하여 일어난다. 따라서, 효소적 핵산은 우선 표적 RNA를 인지하고, 그다음 염기-쌍을 통하여 표적 RNA에 결합하고, 일단 정확한 부위에 결합되면, 표적 RNA를 절단하기 위하여 효소적으로 작용한다.
"디코이(decoy) RNA"란 리간드용 천연 결합 도메인을 닯은 RNA 분자를 말한다. 따라서, 디코이 RNA는 특정 리간드에 결합하는 것에 대하여 천연 결합 표적과 경쟁한다. 예를 들면, HIV 트란스-활성화 반응(TAR) RNA의 과다 발현은 "디코이"로 작용하여 HIV tat 단백질에 효과적으로 결합하고, 이에 의해 HIV RNA에 인코드된 TAR 서열에 결합되는 것이 방해되는 것으로 알려져 있다(Sullenger et al., (1990), Cell, 63, 601-608). 이것은 특정 실시예를 말한다. 당업자는 이것이 하나의 예시일 뿐이며, 당분야에 일반적으로 공지된 기술을 이용하여 다른 구체예들을 만들 수 있다는 것을 인지할 것이다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "모노머"는 모노머 단위 가령 약 3-4개에서 수백개의 모노머 단위 범위의 올리고뉴클레오티드를 만들기 위하여, 포스포디에스테르 결합 또는 이의 유사체들에 의해 연결된 모노머를 일반적으로 나타낸다. 포스포디에스테르 링키지의 예로는 아래에서 더 상세하게 설명하겠지만, 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트, 메틸포스포르네이트, 포스포로셀레노에이트, 포스포르아미데이트 그리고 이와 유사한 것을 포함한다.
본 발명의 내용에서, 용어 “뉴클레오티드”는 자연적으로 생성되는 뉴클레오티드 뿐만 아니라 비-자연적으로 생성되는 뉴클레오티드를 포함한다. 기존에“비-자연적으로 생성되는”것으로 간주되는 다양한 뉴클레오티드들이 후속적으로 자연계에서 발견되고 있다는 것을 당업자는 분명하게 알 것이다. 따라서, "뉴클레오티드"는 공지의 퓨린 및 피리미딘 이종고리(heterocycles) 뿐만 아니라 이종고리 유사체 및 이의 호변체(tautomers)를 포함한다. 다른 유형의 뉴클레오티드의 실예는 아데닌, 구아닌, 티민, 시토신, 우라실, 퓨린, 산틴, 디아미노퓨린, 8-옥소-N6-메틸아데닌, 7-데아자산틴, 7-데아자구아닌, N4,N4-에타노시토신, N6,N6-에타노-2,6-디아미노퓨린, 5-메틸시토신, 5-(C3-C6)-알키닐시토신, 5-플루오르우라실, 5-브로모우라실, 슈도이소시토신, 2-하이드록시-5-메틸-4-트리아졸로피리딘, 이소시토신, 이소구아닌, 이노신을 포함하는 분자들, 그리고 Benner et al., U.S. Pat No. 5,432,272에서 설명된 "비-자연적으로 생성되는" 뉴클레오티드가 있다. 용어 "뉴클레오티드"는 이들 모든 실시예 및 이의 유사체 그리고 및 호변체를 포함한다. 특히, 관심대상이 되는 뉴클레오티드들은 아데닌, 구아닌, 티민, 시토신, 및 우라실을 포함하는 것들과, 인간에서 치료 및 진단 용도와 연관하여 자연적으로 생성되는 뉴클레오티드로 간주된다. 뉴클레오티드는 Kornberg and Baker, DNA Replication, 2nd Ed. (Freeman, San Francisco, 1992)에서 설명된 것과 같이, 천연 2'-데옥시 및 2'-하이드록시 당 뿐만 아니라 이들의 유사체를 포함한다.
뉴클레오티드와 관련된 "유사체들"은 변형된 염기 모이어티 및/또는 변형된 슈가 모이어티를 가지는 합성 뉴클레오티드를 포함하고, 이들은 Scheit, Nucleotide Nucleotides, John Wiley, New York, 1980; Freier & Altmann, (1997) Nucl. Acid. Res., 25(22), 4429-4443, Toulm, J.J., (2001) Nature Biotechnology 19:17-18; Manoharan M.,(1999) Biochemica et Biophysica Acta 1489:117-139; Freier S. M., (1997) Nucleic Research, 25:4429-4443, Uhlman, E., (2000) Drug Discovery & Development, 3: 203-213, Herdewin P., (2000) Antisence & Nucleic Acid Drug Dev., 10:297-310); 2'-O, 3`-C-linked [3.2.0] bicycloarabinonucleosides(N.K Christiensen., et al, (1998) J. Am. Chem. Soc., 120: 5458-5463, Prakash TP, Bhat B. (2007) Curr Top Med Chem. 7(7):641-9; Cho, E.J., et al., (2009) Annual Review of Analytical Chemistry, 241-264에서 설명되어 있다. 이와 같은 유사체들은 가령, 듀플렉스 또는 트리플렉스 안정성, 특이성 또는 이와 유사한 것과 같은 결합 성질들을 강화시키도록 기획된 합성 뉴클레오시드를 포함한다.
여기에서 사용된 것과 같이, "하이브리드화"는 올리고머 화합물들의 실질적인 상보성 가닥들이 쌍을 이루는 것을 의미한다. 쌍을 이루는 한 가지 기전은 즉 올리고머 화합물들의 상보성 뉴클레오시드 또는 뉴클레오티드 염기(뉴클레오티드) 사이에 수소 결합을 형성하는 것으로, 이것들은 Watson-Crick, Ho또는 역 Ho수소 결합이 될 수 있다. 예를 들면, 아데닌 및 티민은 수소 결합 형성을 통하여 쌍을 이루는 상보성 뉴클레오티드이다. 하이브리드화는 다양한 환경에서 일어날 수 있다.
안티센스 화합물은 화합물이 표적 핵산에 결합하여 표적 핵산의 정상적인 기능을 간섭하여, 기능 및/또는 활성의 조정이 야기될 때 “특이적으로 하이브리드가능”하며, 그리고 특이적 결합이 바람직한 조건들, 가령, 시험관 분석 또는 치료요법적 처치의 경우 생리학적 조건들, 그리고 시험관 분석의 경우 분석이 실행되는 조건하에서 비-표적 핵산 서열들에 안티센스 화합물의 비-특이적 결합을 회피할 수 있는 충분한 수준의 상보성이 있다.
여기에서 사용된 것과 같이, "엄격한(stringent) 하이브리드화 조건" 또는 "엄격한 조건"은 본 발명의 화합물이 이의 표적 서열에 하이브리드할 수 있지만, 다른 서열에는 소수로 하이브리드되는 조건을 말한다. 엄격한 조건은 서열-의존성으로, 상이한 환경에서 달라지며, 본 내용에서, 올리고머 화합물이 표적 서열에 하이브리드되는 “엄격한 조건”은 조사되는 올리고머 화합물의 조성 및 성질 그리고 이를 조사하는 분석에 의해 결정된다. 일반적으로, 엄격한 하이브리드화 조건은 Na++ 또는 K++ (가령, 낮은 이온 강도)와 같은 무기 양이온을 가진 저농도 염(<0.15M), 20℃ 내지 25℃ 이상의 온도, 올리고머 화합물:표적 서열 복합체의 Tm 미만, 및 포름아미드, 디메틸포름아미드, 디메틸 술폭시드 또는 계면활성제 도데실 설페이트 나트륨(SDS)과 같은 변성제의 존재를 포함한다. 예를 들면, 하이브리드화 비율은 각 1% 포름아미드에 대해 1.1% 감소된다. 높은 엄격성 하이브리드화 조건의 예는 60℃에서, 30분간, 0.1× 염화나트륨-구연산나트륨 완충액(SSC)/0.1% (w/v) SDS이다.
여기에서 사용된 것과 같이, "상보성(complementary)"은 하나 또는 두 개의 올리고머 가닥상에서 두 개 뉴클레오티드 사이에 정확한 쌍을 형성하는 능력을 말한다. 예를 들면, 안티센스 화합물의 특정 위치에서 뉴클레오티드는 표적 핵산의 특정 위치에 있는 뉴클레오티드와 수소 결합을 할 수 있고, 이 표적 핵산이 DNA, RNA, 또는 올리고뉴클레오티드 분자이면, 올리고뉴클레오티드와 표적 핵산 사이에 수소 결합 위치는 상보성 위치로 간주된다. 올리고머 화합물 및 추가 DNA, RNA, 또는 올리고뉴클레오티드 분자는 각 분자에서 충분한 수의 상보성 위치를 서로 수소 결합을 할 수 있는 뉴클레오티드가 차지하고 있을 때, 서로에 대해 상보성이다. 따라서, "특이적으로 하이브리드가능한" 및 "상보성"은 올리고머화합물과 표적 핵산 사이에 안정적이고 특이적인 결합이 발생되도록 충분한 수의 뉴클레오티드에서 정확한 쌍 또는 상보성 수준을 나타내는데 이용된다.
올리고머 화합물의 서열은 특이적으로 하이브리드될 수 있는 이의 표적 핵산의 서열에 대해 100% 상보성일 필요가 없다. 더욱이, 올리고뉴클레오티드는 중재 또는 인접 단편들이 하이브리드화 이벤트에 관여하지 않는 하나 이상의 단편들(가령, 루프 구조, 미스메치 또는 헤어핀 구조)에 대해 하이브리드할 수 있다. 본 발명의 올리고머 화합물은 이들이 표적하는 표적 핵산 서열내에 표적 구역에 대해 최소한 약 70%, 또는 최소한 약 75%, 또는 최소한 약 80%, 또는 최소한 약 85%, 또는 최소한 약 90%, 또는 최소한 약 95%, 또는 최소한 약 99% 서열 상보성을 포함한다. 예를 들면, 20개 뉴클레오티드의 안티센스 화합물중 18개 뉴클레오티드가 표적 구역에 상보성이며, 따라서, 특이적으로 하이브리드될 수 있고, 이는 90% 상보성을 나타낸다. 이 실시예에서, 나머지 비-상보성 뉴클레오티드는 뭉쳐있거나 상보성 뉴클레오티드와 함께 산재되어 있을 수 있고, 그리고 서로 또는 상보성 뉴클레오티드에 인접해있을 필요는 없다. 이와 같이, 표적 핵산과 완벽한 상보성을 가지는 두 구역에 인접한 4개의 비-상보성 뉴클레오티드를 가지는, 길이가 18개 뉴클레오티드인 안티센스 화합물은 표적 핵산과 77.8%의 전체적인 상보성을 가질 것이며, 따라서, 이는 본 발명의 범위내에 있다. 표적 핵산의 구역과 안티센스 화합물의 상보성 비율은 당분야에 공지된 BLAST 프로그램 (기초적인 로컬 배열 조사 도구) 및 PowerBLAST 프로그램(Altschul et al., (1990) J. Mol. Biol., 215, 403-410; Zhang and Madden, (1997) Genome Res., 7, 649-656)를 이용하여 통상적으로 결정될 수 있다. 상동성 비율, 서열 동일성 또는 상보성은 예를 들면, Gap 프로그램 (Wisconsin Sequence Analysis Package, Version 8 for Unix, genetics Computer Group, University Research Park, Madison Wis.)에 의해 결정될 수 있다(Smith and Waterman (Adv. Appl. (1981) Math., 2, 482-489)의 알고리즘을 이용하는 디폴트 세팅 이용).
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "열적 융점(Tm)"은 정의된 이온 강도, pH 및 핵산 농도에서 표적 서열에 상보성인 올리고뉴클레오티드의 50%가 평형상태에서 표적 서열에 하이브리드되는 온도를 말한다. 일반적으로, 엄격한 조건은 염 농도가 pH 7.0 내지 8.3에서 최소한 약 0.01 내지 1.0 M Na 이온 농도(또는 다른 염)이고, 온도는 짧은 올리고뉴클레오티드 (가령, 10개 내지 50개 뉴클레오티드)의 경우 최소한 약 30℃가 된다. 엄격한 조건들은 포름아미드와 같은 불안정화 물질을 첨가하여 얻을 수도 있다.
여기에서 사용된 것과 같이, "조절(modulation)"은 유전자 발현에서 증가(자극) 또는 감소(억제)를 의미한다.
폴리뉴클레오티드 서열의 내용에서 이용된 용어 "변이체(변이체)"는 야생형 유전자와 관련된 폴리뉴클레오티드 서열을 포함한다. 이 정의는 예를 들면, "대립유전자(allelic)" "접합(splice)," "종(species)" 또는 "다형(polymorphic)" 변이체들를 포함할 수 있다. 접합 변이체는 기준 분자에 대해 상당한 동일성을 가질 수 있지만, 일반적으로 mRNA 프로세싱 동안 엑손의 대체 접합으로 인하여 어느 정도의 숫자의 폴리뉴클레오티드를 가질 것이다. 대응하는 폴리펩티드는 추가 기능을 하는 도메인을 가지거나 또는 도메인이 없을 수 있다. 종 변이체들은 종간에 다양한 폴리뉴클레오티드 서열들이다. 본 발명에서는 야생형 유전자 산물들의 변이체들이 특히 유용하다. 핵산 서열에서 최소한 한 가지 돌연변이로 인하여 변이체들이 만들어지며, 그리고 이는 변경된 mRNA 또는 폴리펩티드가 만들어질 수 있는데, 이들의 구조 또는 기능은 변경되거나 변경되지 않을 수 있다. 임의의 주어진 자연 또는 재조합 유전자는 대립유전자적 형태가 없거나, 또는 하나 또는 많은 대립유전자적 형태를 가질 수 있다. 변이체를 야기시키는 공통의 돌연변이적 변화는 일반적으로 뉴클레오티드의 자연적 결손, 추가 또는 치환 때문이다. 이들 각 변화의 유형은 단독으로 발생되거나 주어진 서열에서 1회 이상 다른 것들과 함께 조합적으로 발생될 수 있다.
생성된 폴리펩티드는 일반적으로 서로에 대해 상당한 아미노산 동일성을 가질 것이다. 다형(polymorphic) 변이체는 주어진 종의 개체간에 특정 유전자의 폴리뉴클레오티드 서열에서 변이다. 다형 변이체들은 또한 "단일 뉴클레오티드 다형" (SNPs) 또는 한 개 염기에 의해 폴리뉴클레오티드 서열이 변화되는 단일 염기 돌연변이를 포함한다. SNPs의 존재는 질병 상태에 대한 경향 즉, 민감성 대 저항성을 가진 특정 집단의 지표가 될 수 있다.
유도체 폴리뉴클레오티드는 예를 들면, 수소를 알킬, 아실 또는 아미노 기로 대체되는 화학적 변형을 받게 되는 핵산을 포함한다. 유도체들, 가령, 유도체 올리고뉴클레오티드는 변형된 슈가 모이어티 또는 인터-슈가 링키지와 같은 비-자연적으로 생성되는 부분을 포함할 수 있다. 이들중 예를 들면, 당분야에 공지된 포스포로티오에이트 및 기타 황 함유 종이 된다. 유도체 핵산은 또한 방사능뉴클레오티드, 효소, 형광 물질, 화학적 발광 물질, 발색성 물질, 기질, 공인자, 억제제, 자석 입자들 그리고 이와 유사한 것을 포함하는 라벨을 가질 수 있다.
"유도체" 폴리펩티드 또는 펩티드는 예를 들면, 글리코실화, 페길화, 포스포릴화, 황산화, 환원/알킬화, 아실화, 화학적 결합, 또는 약하게 포르말린 처리에 의해 변형된 것이다. 유도체는 방사능동위원소, 형광물질 및 효소 라벨을 포함하나 이에 한정되지 않는, 직간접적으로 탐지가능한 라벨을 포함하도록 변형될 수 있다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "동물" 또는 "환자"는 예를 들면, 인간, 양, 엘크, 사슴, 뮬 사슴, 밍크, 포유류, 원숭이, 말, 소, 돼지, 염소, 개, 고양이, 쥐, 마우스, 새, 닭, 파충류, 물고기, 곤충 및 거미류를 포함한다는 의미다.
"포유류"는 일반적으로 건강관리를 받는 온혈 포유류(가령, 인간 및 길들여진 동물들)을 포함한다. 예로는 고양이과, 개과, 말과, 소 그리고 인간을 포함한다.
"치료하는(Treating 또는 treatment)"는 포유류에서 질병 상태를 치료하는 것을 말하는데, (a) 포유류에서 질병 상태의 발생을 방지하고, 특히 이와 같은 포유류가 해당 질병에 걸리기 쉬우나 아직 걸린 것으로 진단되지 않은 경우; (b) 질병 상태를 억제, 가령, 질병의 발생을 억제하는; 및/또는 (c) 질병의 상태를 경감시키는, 예를 들면, 원하는 지점에 도달할 때까지 질병 상태를 회복시키는 것을 포함한다. 또한, 치료는 질병의 증상을 개선(가령, 통증 또는 불편함을 줄이는)을 포함하는데, 이와 같은 개선이 질병에 직접적으로 영향(가령, 원인, 전파, 발현 등)을 주거나 주지 않을 수 있다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "암"은 임의의 악성 종양, 특히 폐, 신장 또는 갑상선에서 발생되는 임의의 악성 종양을 말한다. 암은 자체로 “종양”이거나 또는 암의 종양 세포를 포함하는 조직으로 나타난다. 종양의 예로는 섬유육종, 점액육종, 지방육종, 연골육종, 골형성 육종, 척색종, 혈관육종, 내막육종, 림프관육종, 림프관내막육종, 윤활막종, 중피종, Ewing 종양, 평활근육종, 횡문근육종, 결장 암종, 췌장암, 유방암, 난소암, 전립선암, 편평세포암종, 기저세포암종, 선암종, 땀샘암종, 피지선암종, 유두암종, 유두선암종, 담관낭선종, 수질암, 기관지암종, 신장세포암종, 간암종, 담관암종, 융모막암종, 정소상피종, 태생암종, Wilms 종양, 경부암, 고환종양, 폐암종, 소세포 폐암종, 방광 암종, 상피암종, 신경교종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종, 상의종, 송과체종, 혈관아세포종, 청신경종, 핍지교종, 수막종, 흑색종, 신경아세포종, 및 망막아종을 포함하는 이에 한정되지 않는 육종 및 암종을 포함한다. 상기에서 명시된 것과 같이, 본 발명은 폐, 신장 및 갑상선 종양의 감별 진단을 특히 허용한다.
폴리뉴클레오티드 및 올리고뉴클레오티드 조성물 및 분자들
표적: 한 구체예에서, 표적은 종양 억제 유전자와 연합된 센스 및/또는 안티센스 넌코딩 및/또는 코딩 서열들을 포함하나 이에 한정되지 않는 종양 억제 유전자의 핵산 서열들을 포함한다.
종양 억제제(Tumor Suppressor)는 이 유전자의 산물이 세포 분할을 조절하는 유전자다. 종양 억제제는 온코진(oncogenes)과는 상이하여 성장 조건이 적합하지 않다면 세포 분할을 억제하는 산물을 생산한다. 세포의 "파괴(breaks)"를 촉발시킬 수 있는 조건은 DNA 손상, 성장 인자의 부족 또는 분할 장치에서의 결함을 포함한다. 종양 억제 유전자가 돌연변이되어 이의 기능 상질 또는 감소가 되는 경우, 세포는 다른 유전적 변화와 통상적으로 복합되어, 암으로 진행될 수 있다. 이는 돌연변이형내에 수득된 기능(또는 조절 기능의 상실)을 가지는 온코진과 대조적이다. 종양 억제 유전자의 예는 p53 (TP53): 세포 분할을 조절하는 전사 인자; 전사 인자의 활성을 변경시키고, 따라서 세포 분할을 조절하는 Rb; 전사 인자의 이용성을 조절하는 APC; DNA 복구에 관여하는 BRCA을 포함한다.
p53 종양 억제제는 다양한 유형의 스트레스에 반응하여 성장 정지, 아팝토시스 및 세포 노화를 포함하는 항-증식 효과를 발휘한다 (Levine A.J., (1997) Cell 88:323-31; Oren M., (1999) J. Biol. Chem. 274: 36031-034). p53은 DNA 손상 반응(가령, ATM/ATR 활성화), 비정상적 온코진 이벤트(가령, Myc or Ras 활성화) 및 매일 세포 프로세스(가령, 성장 인자 자극)을 포함하는 다양한 원천으로부터 시그날생성 경로를 모니터하는 조절 회로의 중심점으로 간주할 수 있다. p53 돌연변이는 모든 인간 종양의 절반 이상에서 존재하였고(Hollstein et al., (1999) Mutat Res. 431:199-209), p53 경로의 다른 성분들에 결함, 가령 ARF 종양 억제제는 야생형 p53을 함유하는 종양 세포에서 관찰되었다(Sherr, C.J., (2001) Nat Rev Mol Cell Biol 2:731-737; Sharpless N.E., et al., (2004) J Clin Invest 113:160-8). p53 경로의 활성화는 보편적인 것은 아니지만, 인간 암의 공통적인 특징으로 보인다.
암과 비정상적 세포 증식이 주요 역할을 하는 기타 장애 치료에 이러한 폴리뉴클레오티드의 조절은 상당히 유일할 것이다. 예를 들면, p53은 정상 세포에서 이의 활성 수준이 매우 낮게 유지되는 단명(short-lived) 단백질이다. 종양 억제에 필요한 p53 분자 기능은 내생성 유전자 발현 조절에 전사 인자로 작용하는 능력과 관련된다. 따라서, p53 자체의 조절은 종양 생성 및 정상적인 세포 성장 유지에 p53의 영향에 중요하다. 안티센스 화합물은 표적 DNA 또는 RNA에 이 화합물의 경합할 때 특이적으로 하이브리드하여, 유용성이 상실되며, 그리고 생체내 분석 또는 치료의 경우 생리학적 조건에서, 그리고 시험관 분석의 경우 분석이 실행되는 조건하에서 특이적 결합이 바람직한 조건하에 비-표적 서열에 대한 안티센스 화합물의 비-특이적 결합을 피하기 위한 충분한 상보성 수준을 가진다.
Figure 112017114222420-pat00001
Figure 112017114222420-pat00002
상기 목록은 비-제한적이며, 본 발명은 상기 목록에 명시안된 다른 종양 억제제의 사용도 포함함을 이해해야 한다. 종양 억제제 분야에 종사하는 기술자는 공개된 문헌에서 설명하는 추가 종양 억제제를 확인할 수 있다.
상기 표 1에서, 표시된 유전자는 이 유전자 및 이의 변이체의 근원이 될 수 있는 상이한 mRNA 전사체를 포함하는 이들 유전자 및 이의 현재 알려진 모든 변이체, 앞으로 밝혀질 임의의 추가 유전자 변이체 및 안티센스 서열을 포함한다. 상기 목록은 또한 넌-코딩 RNA 분자 또는 폴리뉴클레오티드 부분을 포함한다. 그러나, 일반적으로 이러한 변이체들은 상기 표 1의 임의의 폴리뉴클레오티드의 서열에 유의적인 서열 동일성을 가지고, 예를 들면, 상기 표 1의 서열에 최소한 약 70% 서열 동일성, 일반적으로 표 1의 서열에 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 98% or 99% 서열 동일성을 가질 것이다. 변이체의 서열 동일성은 BLAST 프로그램(ncbi.nclm.nih.gov/blast/)과 같은 표준 기술에 의해 결정될 수 있다.
또다른 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 비정상적인 세포 성장 또는 종양을 억제하는 하나 이상의 분자에 특이적이다. 여기에는 세포를 형질변환시키고, 종양-이전 단계, 전-전이(pre-metastasis), 전이 등과 같은 단계에 관여하는 인자들과 같이 분자 활성을 억제하는 인자들을 포함한다. 다른 예는 발달 유전자 산물(가령, 흡착 분자, 사이클린 키나제 억제제, Wnt 패밀리 구성원, Pax 패밀리 구성원, Winged 헬릭스 패밀리 구성원, Hox 패밀리 구성원, 사이토킨/림포틴 및 이들의 수용체, 성장/분화 인자 및 이들의 수용체, 신경전달물질 및 이들의 수용체들); ; 온코진 산물들(가령, ABL1, BCL1, BCL2, BCL6, CBFA2, CBL, CSF1R, ERBA, ERBB, ERB2, ETS1, ETV6, FGR, FOS, FYN, HCR, HRAS, JUN, KRAS, LCK, LYN, MDM2, MLL, MYB, MYC, MYCL1, MYCN, NRAS, PIM1, PML, RET, SRC, TAL1, TCL3, AND YES); 종양 억제 유전자 산물들 (가령, APC, BRCA1, BRCA2, MADH4, MCC, NF1, NF2, RBI, TP53, 및 WT1) 그리고 효소들(가령, ACC 합성효소 및 산화효소, ACP 탈포화효소(desaturases) 및 수산화효소, ADP-포도상 피로포스포릴라제, ATPases, 알코올 탈수소효소, 아밀라제, 아밀로글루코시다제, 카탈라제, 셀룰라제, 찰콘 합성효소, 치티나제, 사이클로옥시게나제, 데카복실라제, 덱스트리나제, DNA 및 RNA 폴리메라제, 갈락토시다제, 글루카나제, 포도상 산화효소, 미립-결합된 전분 합성효소, GTPases, 헬리카제, 헤미셀룰라제, 인테그라제, 이눌리나제, 인버타제, 이소메라제, 키나제, 락타제, 리파제, 피로옥시게나제, 리소자임, 노팔린 합성, 옥토핀 합성효소, 펙틴에스트라제, 퍼옥시다제, 포스포타제, 포스포리파제, 포스포릴라제, 티라제, 식물 성장 조절물질 합성효소, 폴리락락투로나제, 프로테나제, 그리고 펩티다제, 풀라나제, 리콤비나제, 역전사효소, RUBISCOs, 토포이소메라제 및 실라나제 등을 포함하는 이에 한정되지 않는다.
안티센스 화합물을 이용하여 수득된 줄기 세포로부터 생성된 세포/조직으로 치료될 수 있는 예시적인 종양 억제 유전자-중재된 질환 및 이상은 증가된 또는 감소된 아팝토시스와 관련된 질환, 조직/세포 노화, 암(표 1에 언급된 것들을 포함), 자가면역 질환, AIDS를 포함하는 면역결핍 질환, 노화, 신경퇴행성 질환 또는 장애(가령, Alzheimer 질환, 운동실조 모세관확장증, Parkinson 질환, 근위축성 측색 경화증, Huntington 질환 등), 과형성 질환(가령, 켈로이드), 류마티스 관절염, 관상 심장 질환 허혈성 세포 사멸, 림프증식성 장애, 아테롬성경화증, 골다공증, 골수이형성 증후군, 독소-유도된 질환, 바이러스 감염, 상처-치유, Cowden 질환 (CD), Lhermitte-Duclos 질환 (LDD) , Bannayan-Zonana 중후군(BZS, Bannayan-Riley-Ruvalcaba 증후군, Ruvalcaba-Myhre-Smith 증후군 및 Riley-Smith 증후군이라고도 함), 이식, 아파톱시스-관련된 질환 또는 장애, 대사 질환 또는 이상(가령, 당뇨병), 신장 질환 또는 장애, 심근경색/심부전, 허혈, 폐혈증, 특히 조혈성 염증 세포가 과다하게 많은 염증 질환, 증식성 질환, 아파톱시스 증가를 통하여 염증 질환 치료용 치료 패러다임이 있는 질환 또는 장애로부터 선택된다.
바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 넌코딩 구역을 포함하나 이에 한정되지 않은 종양 억제 유전자의 폴리뉴클레오티드에 특이적이다. 종양 억제 유전자 표적은 종양 억제 유전자의 변이체들; SNP를 포함하는 종양 억제 유전자의 돌연변이체들; 종양 억제 유전자의 넌코딩 서열들; 대립유전자들, 단편들 그리고 이와 유사한 것을 포함한다. 바람직하게는 올리고뉴클레오티드는 안티센스 RNA 분자다.
본 발명의 구체예에 따르면, 표적 핵산 분자는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드 단독에 국한되지 않고, 종양 억제 유전자의 동소체, 수용체, 상동체들, 넌-코딩 구역 및 상동체들, 그리고 이와 유사한 것 중 임의의 것까지 확장된다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 변이체들, 대립유전자들, 상동체들, 돌연변이체들, 유도체들, 단편들 및 상보성 서열들을 포함하나 이에 한정되지 않는 종양 억제 유전자 표적의 자연적 안티센스 서열(코딩 및 넌-코딩 구역에 자연적 안티센스)을 표적으로 한다. 바람직하게는 올리고뉴클레오티드는 안티센스 RNA 또는 DNA 분자이다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 본 발명의 올리고머 화합물들은 화합물에 있는 하나 이상의 뉴클레오티드 위치에서 상이한 염기가 존재하는 변이체들도 포함한다. 예를 들면, 첫번째 뉴클레오티드가 아데닌이라면, 변이체들은 이 위치에 티미딘, 구아노신, 시티딘 또는 이 위치에 있는 기타 천연 또는 비-천연 뉴클레오티드를 포함하도록 만들어질 수 있다. 안티센스 화합물의 임의의 위치에서 일어날 수 있다. 그 다음 이들 화합물은 표적 핵산의 발현을 억제하는 이들 능력을 측정하기 위하여 여기에서 설명된 방법에 의해 테스트된다.
일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 50% 내지 약 60%이다. 일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 60% 내지 약 70%이다. 일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 70% 내지 약 80%이다. 일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 80% 내지 약 90%이다. 일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 90%, 약 92%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 약 99% 또는 약 100%이다.
안티센스 화합물은 화합물이 표적 핵산에 결합하여 표적 핵산의 정상적인 기능을 간섭하여 활성을 잃게 만들 때 특이적으로 하이브리드가능하며, 그리고 특이적 결합이 바람직한 조건들하에서 안티센스 화합물이 비-표적 핵산 서열에 비-특이적 결합을 피할 수 있도록 충분한 상보성이 있다. 이와 같은 조건은 생체내 분석 또는 치료요법적 처리의 경우 생리학적 조건, 그리고 분석이 시험관 분석의 경우에 실시되는 조건등을 포함한다.
DNA, RNA, 키메라, 치환된 등의 안티센스 화합물은 표적 DNA 또는 RNA 분자에 화합물이 특이적으로 결합하여 표적 DNA 또는 RNA의 정상적인 기능을 간섭하여, 활성을 잃게 만들 때 특이적으로 하이브리드가능하며, 그리고 특이적 결합이 바람직한 조건들하에서 안티센스 화합물이 비-표적 핵산 서열에 비-특이적 결합을 피할 수 있도록 충분한 상보성이 있다. 이와 같은 조건은 생체내 분석 또는 치료요법적 처리의 경우 생리학적 조건, 그리고 분석이 시험관 분석의 경우에 실시되는 조건등을 포함한다.
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또 다른 바람직한 구체예에서, 예를 들면, PCR, 하이브리드화 등을 이용하여 확인되고, 확장된, 서열 번호: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 및 15에서 제시된 하나 이상의 서열, 그리고 이와 유사한 것인 안티센스 서열을 포함하나 이에 한정되지 않는 종양 억제 유전자의 표적화는 종양 억제 유전자의 기능 또는 발현을 조절한다. 한 구체예에서, 기준과 비교하였을 때, 발현 또는 기능은 상향 조절된다. 또 다른 바람직한 구체예에서, 기준과 비교하였을 때, 발현 또는 기능은 하향 조절된다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 PCR, 하이브리드화 등을 이용하여 확인되고, 확장된 안티센스 서열들을 포함하는, 서열 번호: 16 내지 36에서 제시된 핵산 서열들을 포함한다. 이들 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 변형된 뉴클레오티드, 더 짧은 또는 더 긴 단편들, 변형된 결합 그리고 이와 유사한 것을 포함할 수 있다. 변형된 결합 또는 뉴클레오티드간(internucleotide) 링키지의 예는 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트 또는 이와 유사한 것을 포함한다. 또 다른 바람직한 구체예에서, 뉴클레오티드는 인(phosphorus) 유도체이다. 본 발명의 변형된 올리고뉴클레오티드내 슈가 또는 슈가 유사 모이어티에 부착될 수 있는 인 유도체 (또는 변형된 인산염 기)는 일인산염, 이인산염, 삼인산염, 알킬인산염, 알칸인산염, 포스포로티오에이트 그리고 이와 유사한 것이 될 수 있다. 상기 명시된 인산염 유사체의 준비 및 뉴클레오티드, 변형된 뉴클레오티드 및 올리고뉴클레오티드으로의 결합은 당분야에 공지되어 있기 때문에, 여기에서 설명할 필요는 없다.
안티센스의 특이성 및 감응도는 치료 용도로 당업자에 의해 이용된다. 안티센스 올리고뉴클레오티드는 동물 및 사람에게서 질병 상태를 치료하는 치료 모이어티로 이용될 수 있다. 안티센스 올리고뉴클레오티드는 인간에게 안전하고 효과적으로 투여되었으며, 여러 임상 시도가 현재 진행중이다. 따라서 올리고뉴클레오티드는 세포, 조직, 동물 특히 인간의 치료를 위한 치료 섭생에 유용하도록 설정될 수 있는 유용한 치료요법적 형태가 될 수 있다.
본 발명의 구체예에서, 올리고머 안티센스 화합물, 특히 올리고뉴클레오티드는 표적 핵산 분자들에 결합하고, 표적 유전자에 의해 인코드된 분자들의 발현 및/또는 기능을 조절한다. 간섭되는 DNA의 기능은 예를 들면, 복제 및 전사를 포함한다. 간섭되는 RNA의 기능은 예를 들면, RNA를 단백질 해독 부위로 전위, RNA로부터 단백질 해독, 하나 이상의 mRNA 종을 만들기 위한 RNA의 접합 및 RNA가 관여하거나 RNA에 의해 실시될 수 있는 촉매 활성과 같은 모든 중요한 기능을 포함한다. 기능은 원하는 기능에 따라 상향-조절되거나 억제될 수 있다.
안티센스 화합물들은 안티센스 올리고머 화합물, 안티센스 올리고뉴클레오티드, 외부 유도 서열 (EGS) 올리고뉴클레오티드, 선택적 스플라이스, 프라이머, 프로브, 및 표적 서열의 최소한 일부에 하이브리드되는 다른 올리고머 화합물을 포함한다. 이와 같이, 이들 화합물들은 단일-가닥, 이중-가닥, 부분적으로 단일-가닥, 또는 원형 올리고머 화합물의 형태로 도입될 수 있다.
본 발명의 내용에서 특정 핵산 분자에 안티센스 화합물의 표적화는 다단계 프로세스가 될 수 있다. 이 프로세스는 통상적으로 기능이 조절되는 표적 핵산의 확인으로 시작된다. 이 표적 핵산은 예를 들면, 유전자의 발현이 특정 질환 또는 질병 상태와 연관된 세포 유전자(또는 이 유전자로부터 전사된 mRNA) 또는 감염성 물질의 핵산 분자가 될 수 있다. 본 발명에서 표적 핵산은 종양 억제 유전자를 인코드한다.
표적화 프로세스는 발현의 조절과 같은 원하는 효과를 얻기 위하여 안티센스 상호작용을 위하여 표적 핵산 내 최소한 하나의 표적 구역, 단편 또는 부위의 결정을 통상적으로 포함한다. 본 발명의 내용에서, 용어 "구역(region)"은 최소한 한 가지 확인가능한 구조, 기능 또는 성질을 가지는 표적 핵산의 일부로 정의된다. 표적 핵산의 구역내에 단편이 있다. 단편(Segments)은 표적 핵산 내에 구역의 더 작은 또는 하위 부분으로 정의된다. 본 발명에서 사용된 부위(Sites)는 표적 핵산내에 위치로 정의된다.
바람직한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자의 천연 안티센스 서열들에 결합하고, 그리고 종양 억제 유전자(서열 번호: 1, 4 및 6)의 발현 및/또는 기능을 조절한다. 안티센스 서열들의 예로 서열 번호: 8 내지 36을 포함한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 하나 이상의 단편에 결합하고, 그리고 종양 억제 유전자의 발현 및/또는 기능을 조절한다. 단편들은 종양 억제 유전자 센스 또는 안티센스 폴리뉴클레오티드의 최소한 5개의 연속 뉴클레오티드를 포함한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자의 천연 안티센스 서열들에 특이적이며, 종양 억제 유전자의 천연 안티센스 서열들에 올리고뉴클레오티드의 결합으로 종양 억제 유전자의 발현 및/또는 기능이 조절된다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드 화합물은 서열 번호: 16 내지 36에서 제시된 서열들을 포함하는데, 이의 안티센스 서열들은 예를 들면, PCR, 하이브리드화 등을 이용하여 확인되고 연장된다. 이들 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 변형된 뉴클레오티드, 더 짧은 또는 더 긴 단편들, 변형된 결합 그리고 이와 유사한 것을 포함한다. 변형된 결합 또는 뉴클레오티드간 링키지의 예는 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트 또는 이와 유사한 것을 포함한다. 또 다른 바람직한 구체예에서, 뉴클레오티드는 인 유도체를 포함한다. 본 발명의 변형된 올리고뉴클레오티드내에 슈가 또는 슈가 유사체 모이어티에 부착될 수 있는 인 유도체 (또는 변형된 인산염 기)는 일인산염, 이인산염, 삼인산염, 알킬인산염, 알칸인산염, 포스포로티오에이트 그리고 이와 유사한 것이 될 수 있다. 상기 명시된 인산염 유사체의 준비 및 뉴클레오티드, 변형된 뉴클레오티드 및 올리고뉴클레오티드으로의 결합은 당분야에 공지되어 있기 때문에, 여기에서 설명할 필요는 없다.
당분야에 공지된 것과 같이, 해독 개시 코돈은 일반적으로 5'-AUG (전사된 mRNA 분자들에서; 대응하는 DNA 분자에서는 5'-ATG)이기 때문에, 해독 개시 코돈은 "AUG 코돈" "시작 코돈" 또는 "AUG 시작 코돈"으로 지칭되기도 한다. 소수의 유전자는 RNA 서열 5'-GUG, 5'-UUG 또는 5'-CUG을 가지는 해독 개시 코돈을 가지며; 그리고 5'-AUA, 5'-ACG 및 5'-CUG는 생체에서 기능을 하는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 용어 "해독 개시 코돈" 및 "시작 코돈"은 많은 코돈 서열들을 포함하는데, 각 경우에 시작 아미노산은 일반적으로 메티오닌(진핵세포의 경우) 또는 포르밀메티오닌(원핵생물의 경우)이다. 진핵생물 및 원핵생물 유전자는 두 개 이상의 대체 시작 코돈을 가지는데, 이들중 임의의 것이 특정 세포 유형 또는 조직에서, 또는 특정 조건하에서 해독 개시에 선호적으로 이용될 수 있다. 본 발명의 내용에서, "시작 코돈" 및 "해독 개시 코돈"은 코돈의 서열과 무관하게, 종양 억제 유전자를 인코드하는 유전자로부터 전사된 mRNA의 해독을 생체내에서 개시하는데 이용되는 코돈을 지칭한다. 유전자의 해독 종료 코돈 (또는 "중지 코돈")은 다음 세 개 서열중 하나를 가질 수 있다; 5'-UAA, 5'-UAG 및 5'-UGA (대응하는 DNA 서열들은 차례로 각각 5'-TAA, 5'-TAG 및 5'-TGA이다).
용어 "시작 코돈 구역" 및 "해독 개시 코돈 구역"은 해독 개시 코돈으로부터 임의의 방향(가령, 5' 또는 3')으로 약 25 내지 약 50 개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 mRNA 또는 유전자의 일부분을 지칭한다. 유사하게, 용어 "중지 코돈 구역" 및 "해독 종료 코돈 구역"은 해독 종료 코돈으로부터 어느 방향이건(5' 또는 3') 약 25개 내지 약 50개 연속 뉴클레오티드를 포함하는 mRNA 또는 유전자의 일부분을 말한다. 결과적으로, "시작 코돈 구역" (또는 "해독 개시 코돈 구역") 및 "중지 코돈 구역" (또는 "해독 종료 코돈 구역")은 본 발명의 안티센스 화합물에 효과적으로 표적화되는 모든 구역이다.
오픈 리딩 프레임(ORF) 또는 해독 개시 코돈과 해독 종료 코돈 사이에 구역을 말하는 것으로 당분야에 공지된 "코딩 구역"은 효과적으로 표적화될 수 있는 구역이다. 본 발명의 내용 범위내에서, 표적화된 구역은 유전자의 오픈 리딩 프레임(ORF)의 해독 개시 또는 종료 코돈을 포함하는 유전자내 구역이다.
또 다른 표적 구역은 해독 개시 코돈으로부터 5' 방향으로 mRNA의 일부분을 지칭할 때 당분야에서 공지된 5' 무해독 구역(5'UTR)을 포함하면, 따라서 5' 캡 부위와 mRNA의 해독 개시 코돈 사이에 뉴클레오티드(또는 이 유전자에서 상응하는 뉴클레오티드)도 포함된다. 또 다른 표적 구역은 해독 종료 코돈으로부터 3' 방향으로 mRNA의 일부분을 지칭할 때 당분야에서 공지된 3' 무해독 구역(3'UTR)을 포함하면, 따라서 해독 종료 코돈과 mRNA의 5' 말단 사이에 뉴클레오티드(또는 이 유전자에서 상응하는 뉴클레오티드)도 포함된다. mRNA의 5' 캡 부위는 5'-5' 삼인산염 링키지를 통하여 mRNA의 5'-최말단 잔기에 결합된 N7-메틸화된 구아노신 잔기를 포함한다. mRNA의 5' 캡 구역은 5' 캡 구조 자체 뿐만 아니라 캡 부위에 인접한 첫 50개 뉴클레오티드를 포함하는 것으로 간주된다. 본 발명에 적합한 또 다른 표적 구역은 5' 캡 구역이다.
일부 진핵 mRNA 전사체는 바로 해독되며, 많은 것들은 “인트론”이라고 공지된 하나 이상의 구역을 포함하는데, 이는 해독되기 전에 전사체로부터 잘려나간다. 나머지(그리고 해독된) 구역들은 “엑손”으로 알려져 있으며, 함께 접목되어, 연속 mRNA를 형성한다. 한 구체예에서, 접목 부위 가령, 인트론-엑손 접합 또는 엑손-인트론 접합 부위를 표적화하는 것은 질병에 이상 접합이 연관되거나 또는 특정 접합 산물의 과다 생산이 질병과 연관되는 상황에서 특히 유용하다. 재배열 또는 결손으로 인한 이상 융합 접합은 표적 부위의 또 다른 구체예다. 상이한 유전자 소스로부터 두 개(또는 그 이상)의 mRNA의 접합 프로세스를 통하여 생산된 mRNA 전사체는 "융합 전사체"로 공지되어 있다. 인트론은 예를 들면, DNA 또는 pre-mRNA를 표적으로 하는 안티센스 화합물을 이용하면 효과적으로 표적화될 수 있다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 표적 폴리뉴클레오티드의 코딩 및/또는 넌-코딩 구역에 결합하여, 표적 분자의 발현 및/또는 기능을 조절한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 천연 안티센스 폴리뉴클레오티드에 에 결합하여, 표적 분자의 발현 및/또는 기능을 조절한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 센스 폴리뉴클레오티드에 결합하여, 표적 분자의 발현 및/또는 기능을 조절한다.
대체(alternative) RNA 전사체는 DNA의 동일한 게놈 구역으로부터 만들어질 수 있다. 이와 같은 대체 전사체들은 일반적으로 "변이체들"로 알려져 있다. 좀더 특이적으로, "pre-mRNA 변이체들"은 동일한 게놈 DNA로부터 생산되지만, 동일한 게놈 DNA로부터 만들어진 다른 전사체와 이들의 시작 또는 중지 위치에서 상이하며, 인트론 및 엑손 서열을 모두 포함하고 있는 전사체다.
접합 동안 하나 이상의 엑손 또는 인트론 구역 또는 이의 일부분을 잘라낼 때, pre-mRNA 변이체들은 더 작은 "mRNA 변이체들"을 만든다. 결과적으로, mRNA 변이체들은 pre-mRNA 변이체들로 프로세스되고, 각 독특한 pre-mRNA 변이체들은 접합의 결과로 독특한 mRNA 변이체를 항상 만들어낸다. 이와 같은 mRNA 변이체들은 또한 "대체 접합 변이체들"로 공지되어 있다. pre-mRNA 변이체의 접합이 발생되지 않는다면, pre-mRNA 변이체는 mRNA 변이체와 동일하게 된다.
변이체들은 전사의 시작 또는 중지에 대한 대체 신호를 이용하여 만들어질 수 있다. Pre-mRNAs 및 mRNAs는 하나 이상의 시작 코돈 또는 중지 코돈을 보유할 수 있다. 대체 시작 코돈을 이용하는 pre-mRNA 또는 mRNA으로부터 기인된 변이체들은 pre-mRNA 또는 mRNA의 “대체 시작 변이체들”로 공지되어 있다. 대체 중지 코돈을 이용하는 이들 전사체들은 pre-mRNA 또는 mRNA의 "대체 중지 변이체들"로 공지되어 있다. 대체 중지 변이체중 한 가지 특정 유형은 "polyA 변이체"이며, 만들어진 다중 전사체들은 전사 기전에 의해 “polyA 중지 신호”중 하나의 대체 선택하고, 따라서, 독특한 polyA 부위에서 종료된 전사체를 만듦으로써 생성된 것이다. 본 발명의 내용 범위에서, 여기에서 설명된 변이체들의 유형이 표적 핵산의 구체예이기도 하다.
안티센스 화합물이 하이브리드되는 표적 핵산 상의 위치는 활성 안티센스 화합물이 표적으로 하는 표적 구역의 최소한 5개 뉴클레오티드 길이 부분으로 정의된다.
특정 예시적인 표적 단편들의 특이적 서열이 여기에서 제시되어 있지만, 당업자는 이들은 본 발명의 범위내에서 특정 구체예를 설명하고, 묘사하기 위함이라는 것을 인지할 것이다. 추가적인 표적 단편들은 본 내용을 근거하여 당업자들이 용이하게 인지할 수 있다.
설명된 바람직한 표적 단편으로부터 선택된 최소한 5개의 연속 뉴클레오티드 스트레치를 포함하는 길이가 5-100개 뉴클레오티드 표적 단편들은 표적화에 적합한 것으로 간주된다.
표적 단편은 설명된 바람직한 표적 단편의 5'-말단으로부터 최소한 5개 연속 뉴클레오티드(나머지 뉴클레오티드는 표적 단편의 5' 말단의 바로 상류에서 시작하고, DNA 또는 RNA가 약 5 내지 약 100개 뉴클레오티드를 포함할 때 까지 연속되는동일한 DNA 또는 RNA의 연속 스트레치다)를 포함하는 DNA 또는 RNA 서열들을 포함할 수 있다. 유사하게, 바람직한 표적 단편은 바람직한 표적 단편의 3'-말단으로부터 최소한 5개 연속 뉴클레오티드(나머지 뉴클레오티드는 표적 단편의 3' 말단의 바로 하류에서 시작하고, DNA 또는 RNA가 약 5 내지 약 100개 뉴클레오티드를 포함할 때 까지 연속되는 동일한 DNA 또는 RNA의 연속 스트레치다)를 포함하는 DNA 또는 RNA 서열들을 포함할 수 있다. 표적 단편을 갖춘 기술 분야에 당업자는 과도한 실험없이 추가적으로 바람직한 표적 단편을 확인할 수 있을 것이다.
하나 이상의 표적 구역, 단편 또는 부위가 확인되었다면, 안티센스 화합물은 표적에 충분한 상보성을 가진, 가령, 충분히 잘 하이브리드되고, 원하는 효과를 제공하기 위하여 충분한 특이성을 가진 것이 선택된다.
본 발명의 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 특정 표적의 안티센스 가닥에 결합한다. 올리고뉴클레오티드는 길이가 최소한 5개 뉴클레오티드이며, 그리고 표적 뉴클레오티드의 전체 길이를 수용하도록 합성하기 위하여, 서열들을 중첩하는 각 올리고뉴클레오티드 표적이 되도록 합성될 수 있다. 표적은 또한 코딩 뿐만 아니라 넌-코딩 구역을 포함한다.
한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드에 의해 특정 핵산을 표적하는 것이 바람직하다. 특정 핵산에 안티센스 화합물의 표적화는 다단계 프로세스다. 프로세스는 기능이 조절되는 핵산 서열의 확인으로 통상적으로 시작된다. 이는 예를 들면, 유전자의 발현이 특정 질환 또는 질환 상태와 연관되는 세포 유전자(또는 이 유전자로부터 전사된 mRNA), 또는 넌코딩 RNA(ncRNA)와 같은 넌코딩 폴리뉴클레오티드가 될 수 있다.
RNAs는 (1) 메신져 RNAs (mRNAs), 이는 단백질로 해독되며, 및 (2) 단백질-넌코딩 RNAs (ncRNAs)로 분류될 수 있다. ncRNAs는 마이크로RNAs, 안티센스 전사체 및 고밀도의 중지 코돈을 포함하며, 임의의 광범위한 “오픈 리딩 프레임”이 부족한 다른 전사 단위 (TU)를 포함한다. 많은 ncRNAs는 단백질-코딩 좌의 3' 무해독 구역 (3'UTRs)에서 개시 부위로부터 시작되는 것으로 보인다. ncRNAs는 아주 드물고, FANTOM 협회에 의해 서열화된 ncRNA의 최소한 절반은 폴리아데닐화되지 않는 것으로 간주된다. 대부분의 조사자들은 분명한 이유로 프로세스되고, 세포질로 배출된 폴리아데닐화된 mRNA에 초점을 맞추고 있다. 최근, 폴리아데닐화안된 핵 RNA 세트는 매우 크고, 이와 같은 전사체중 많은 것들은 소위 인터진(intergenic) 구역에서 생성된다(Cheng, J. et al. (2005) Science 308 (5725), 1149-1154; Kapranov, P. et al. (2005). Genome Res 15 (7), 987-997). ncRNAs가 유전자 발현을 조절할 수 있는 기전은 표적 전사체와의 염기쌍에 의한 것이다. 염기쌍에 의해 기능을 하는 RNA는 (1) 동일한 유전적 위치에서, 그러나 이들이 작용하는 RNA에 반대 가닥상에서 인코드되어, 이들 표적에 대해 완벽한 상보성을 나타내는 cis-인코드된 RNAs, 및 (2) 이들이 작용하는 RNA와는 별개의 염색체 위치에서 인코드되며, 표적과 완벽한 염기쌍을 일반적으로 나타내지 않는 trans-인코드된 RNAs로 분류될 수 있다.
이론에 구애되지 않고, 여기에서 설명되는 안티센스 올리고뉴클레오티드에 의한 안티센스 폴리뉴클레오티드의 혼란은 상응하는 센스 메신져 RNA의 발현을 변경시킬 수 있다. 그러나, 이와 같은 조절은 부조화적(discordant)(안티센스 녹다운은 메신져 RNA 상승을 결과한다) 또는 조화적(concordant)(안티센스 녹다운은 수반되는 메신져 RNA 감소를 결과한다). 이와 같은 경우에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 안티센스 전사체의 중첩 또는 중첩되지 않는 부위로 표적화되어, 표적의 녹다운 또는 제거를 초래할 수 있다. 코딩 뿐만 아니라 넌-코딩 안티센스는 동일한 방식으로 표적화될 수 있으며, 그리고 어느 쪽이든 조화 또는 비조화 방식으로 상응하는 센스 전사체를 조절할 수 있다. 표적에 대항하여 이용되는 새로운 올리고뉴클레오티드를 확인하는데 사용되는 전략은 안티센스 올리고뉴클레오티드에 의한 안티센스 RNA 전사체의 녹다운 또는 원하는 표적을 조절하는 임의의 다른 수단에 기초될 수 있다.
전략 1: 부조화적인 조절의 경우, 안티센스 전사체의 녹다운은 통상적(센스) 유전자의 발현을 상승시킨다. 후자 유전자가 공지의 또는 가상 약물 표적에 인코드한다면, 이의 안티센스 반대편의 녹다운은 수용체 항진 또는 효소 자극물질의 작용을 의식적으로 모방할 수 있다.
전략 2: 조화적 조절의 경우, 안티센스 및 센스 전사체 모두 동시에 녹다운 시킬 수 있어, 통상의(센스) 유전자 발현의 상승적 환원을 얻을 수 있다. 예를 들면, 안티센스 올리고뉴클레오티드가 녹다운을 얻는데 이용된다면, 이 전략은 센스 전사체를 표적으로 하는 하나의 안티센스 올리고뉴클레오티드, 그리고 상응하는 안티센스 전사를 표적으로 하는 또 다른 안티센스 올리고뉴클레오티드, 또는 중첩 센스 및 안티센스를 동시에 표적으로 하는 단일 대칭적 안티센스 올리고뉴클레오티드에 적용할 수 있다.
본 발명에 따르면, 안티센스 화합물들은 안티센스 올리고뉴클레오티드, 리보자임, 외부 유도 서열 (EGS) 올리고뉴클레오티드, siRNA 화합물, 단일 또는 이중-가닥 RNA 간섭 (RNAi) 화합물, 가령 siRNA 화합물, 그리고 표적 핵산의 최소한 일부분에 하이브리드하여, 이의 기능을 조절하는 기타 올리고머 화합물들을 포함한다. 이와 같이, 안티센스 화합물들은 DNA, RNA, DNA-like, RNA-like, 또는 이의 혼합물이 될 수 있거나, 또는 하나 이상의 상기 것들의 모방체가 될 수 있다. 이들 화합물은 단일-가닥, 이중-가닥, 원형 또는 헤어핀 올리고머 화합물이 될 수 있으며, 그리고, 내부에 또는 말단이 중배(bulges), 미스메치 또는 루프와 같은 구조적 요소를 포함할 수 있다. 안티센스 화합물은 선형으로 준비될 수 있지만, 결합되거나 원형 및/또는 분지형으로 준비될 수 있다. 안티센스 화합물은 두 가작이 하이브리드되어 전체적으로 또는 부분적으로 이중-가닥 화합물을 형성하거나 또는 하이브리드화를 허용하고, 전체적으로 또는 부분적으로 이중-가닥 화합물의 형성을 위하여 충분히 자가-상보성을 가진 단일 가닥과 같은 구조체를 포함할 수 있다. 두 개 가닥이 서로 자유 3' 또는 5' 말단을 남기고 내부적으로 연결되거나 또는 연속적인 헤어핀 구조 또는 루프를 형성하도록 연결될 수 있다. 헤어핀 구조는 단일 가닥으로 된 연장부를 만드는 5' 또는 3' 말단상에 오버행(overhang)을 포함할 수 있다. 이중 가닥의 화합물은 선택적으로 양단에 오버행을 포함할 수 있다. 추가 변형은 말단, 선택된 뉴클레오티드 위치, 슈가 위치중 하나에 부착된, 또는 뉴클레오티드간 링키지 중 하나에 부착된 콘쥬게이트 군을 포함할 수 있다. 대안으로, 두 개 가닥은 비-핵산 모이어티 또는 링커 군을 통하여 링크될 수 있다. 한 개 가닥으로부터만 형성된 경우, dsRNA는 듀플렉스를 형성하기 위하여 자체에 둘로 접히는 자가-상보성 헤어핀 유형 분자의 형태를 취할 수 있다. 따라서, dsRNAs는 완전히 또는 부분적으로 이중 가닥이 될 수 있다. 유전자 발현의 특이적 조절은 유전자전이 세포계에서 dsRNA 헤어핀의 안정적 발현에 의해 이루어질 수 있지만, 그러나, 일부 구체예에서, 유전자 발현 또는 기능은 상향 조절된다. 두 개 가닥으로부터 형성될 때, 또는 듀플렉스를 형성하기 위하여 자체에 둘로 접히는 자가-상보성 헤어핀 유형 분자의 형태를 취하는 단일 가닥의 경우, 두 개 가닥(또는 단일 가닥의 듀플렉스 형성 구역)은 Watson-Crick 방식으로 염기쌍을 이루는 상보성 RNA 가닥이다.
일단 시스템내로 도입되면, 본 발명의 화합물들은 점유-기반 기전(occupancy-based mechanisms)을 통하여 표적 핵산의 절단 또는 다른 변형을 얻기 위하여 하나 이상의 효소 또는 구조적 단백질의 작용을 유도할 수 있다. 일반적으로, 핵산 (올리고뉴클레오티드를 포함)은 "DNA-like" (가령, 하나 이상의 2'-데옥시 슈가를 가지고, 그리고 U 염기 대신 일반적으로 T를 가짐) 또는 "RNA-like" (가령, 하나 이상의 2'-하이드록시 또는 2'-변형된 슈가를 가지고, 그리고 T 염기 대신 U 염기를 일반적으로 가짐)으로 설명될 수 있다. 핵산 헬릭스는 한 가지 이상의 구조 유형을 채택할 수 있지만, 가장 흔하게는 A- 및 B-형이 된다. 일반적으로, B-형-유사 구조를 가지는 올리고뉴클레오티드는 "DNA-like"이며, 그리고 A-형-유사 구조를 가지는 올리고뉴클레오티드는 "RNA-like"이다. 일부(키메라) 구체예에서, 안티센스 화합물은 A- 및 B-형 구역을 포함한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 바람직한 올리고뉴클레오티드 또는 안티센스 화합물은 최소한 하나의 안티센스 RNA, 안티센스 DNA, 키메라 안티센스 올리고뉴클레오티드, 변형된 링키지를 포함하는 안티센스 올리고뉴클레오티드, 간섭 RNA (RNAi), 짧은 간섭 RNA (siRNA); 마이크로, 간섭 RNA (miRNA); 작은, 일시적, RNA (stRNA); 또는 짧은 헤어핀 RNA (shRNA); 작은 RNA-유도된 유전자 활성(RNAa); 작은 활성화 RNAs (saRNAs), 또는 이의 조합을 포함한다.
dsRNA는 또한 “작은 RNA-유도된 유전자 활성화” 또는 RNAa 기전인 유전자 발현을 활성화시킬 수 있다. dsRNAs 표적화 유전자 프로모터는 관련 유전자의 강력한 전사 활성화를 유도한다. RNAa는 “작은 활성화 RNA(saRNA)"로 불리는 합성 dsRNA를 이용하여 인산 세포에서 설명되었다. 현재까지 다른 유기체들에서 RNAa가 보존되는지는 밝혀지지 않았다.
작은 이중-가닥 RNA (dsRNA), 가령, 작은 간섭 RNA (siRNA) 및 마이크로RNA (miRNA)는 RNA 간섭(RNAi)로 알려진 진화론적으로 보존된 기전의 촉발자로 밝혀졌다. RNAi는 리모델링 크로마틴을 통하여 유전자 침묵을 일관되게 유도하여, 전사 억제, 상보성 mRNA 분해 또는 단백질 해독을 차단시킨다. 그러나, 실시예 부분에서 상세하게 설명된 경우에서, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드 및 이의 인코드된 산물들의 발현 및/또는 기능을 증가시크는 것으로 보인다. dsRNAs는 작은 활성화된 RNAs (saRNA)으로 작용할 수 있다. 이론에 구애되지 않고, 유전자 프로모터에서 서열들을 표적화함으로써, saRNAs는 dsRNA-유도된 전사 활성화 (RNAa)로 불리는 현상에서 표적 유전자 발현을 유도할 수 있다.
추가 구체예에서, 여기에서 확인된 "바람직한 표적 단편"은 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 발현을 조절하는 추가 화합물을 스크리닝하는데 이용될 수 있다. "조절물질(modulators)"은 종양 억제 유전자를 인코드하는 핵산 분자의 발현을 감소 또는 증가시키는 화합물이며, 바람직한 표적 단편에 상보성인 최소한 5개-뉴클레오티드 부분을 포함한다. 스크리닝 방법은 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드를 인코드하는 핵산 분자의 바람직한 표적 단편을 하나 이상의 후보 조절물질과 접촉시키고, 그리고 종양 억제 유전자의 센스 또는 천연 안티센스 폴리뉴클레오티드(가령, 서열 번호: 16 내지 30)를 인코드하는 핵산 분자의 발현을 감소 또는 증가시키는 하나 이상의 후보 조절물질을 선택하는 단계로 구성된다. 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드를 인코드하는 핵산 분자의 발현을 조절(가령, 감소 또는 증가)시킬 수 있는 것으로 일단 확인되면, 그 다음 조절물질은 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 기능의 추가 연구, 또는 본 발명에 따른 연구, 진단 또는 치료 물질로 이용될 수 있다.
천연 안티센스 서열의 표적화는 바람직하게는 표적 유전자의 기능을 조절하고, 예를 들면, p73 유전자(NCBI 수탁번호 NM_005427.2), p53 유전자(NCBI 수탁번호.: NM_000546.4) 및 PTEN 유전자 (NCBI 수탁번호.: NM_000314). 바람직한 구체예에서, 표적은 종양 억제 유전자 유전자의 안티센스 폴리뉴클레오티드다. 바람직한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드(p73: NCBI 수탁번호 NM_005427.2; p53: NCBI 수탁번호.: NM_000546.4; PTEN: NCBI 수탁번호.: NM_000314)의 센스 및/또는 천연 안티센스 서열들, 변이체들, 대립유전자들, 이소폼, 상동체들, 돌연변이체들, 유도체들, 단편들 및 이들의 상보성 서열들이다. 바람직하게는, 올리고뉴클레오티드는 안티센스 분자이며, 그리고 표적은 안티센스 및/또는 센스 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 코딩 및 넌코딩 구열을 포함한다.
본 발명의 바람직한 표적 단편은 본 발명의 각 상보성 안티센스 화합물과 복합되어 안정화된 이중-가닥 (duplexed) 올리고뉴클레오티드를 형성할 수도 있다.
이와 같은 이중 가닥의 올리고뉴클레오티드 모이어티는 당분야에서 표적 발현을 조절하고, 해독을 조절하고 뿐만 아니라 안티센스 기전을 통하여 RNA 프로세싱을 조절하는 것으로 알려져 있다. 더욱이, 이중-가닥 모이어티는 화학적 변형을 받을 수도 있다(Fire et al., (1998) Nature, 391, 806-811; Timmons and Fire, (1998) Nature, 395, 854; Timmons et al., (2001) gene, 263, 103-112; Tabara et al., (1998) Science, 282, 430-431; Montgomery et al., (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 15502-15507; Tuschl et al., (1999) gene Dev., 13, 3191-3197; Elbashir et al., (2001) Nature, 411, 494-498; Elbashir et al., (2001) gene Dev. 15, 188-200). 예를 들면, 이와 같은 이중-가닥 모이어티는 표적에 대한 듀플렉스의 안티센스 가닥의 고유한 하이브리드화에 의해 표적을 저해하여, 표적의 효소적 분해를 촉발시키는 것으로 알려져 있다. (Tijsterman et al., (2002) Science, 295, 694-697).
바람직한 구체예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드 (p73: NCBI 수탁번호 NM_005427.2; p53: NCBI 수탁번호.: NM_000546.4; PTEN: NCBI 수탁번호.: NM_000314), 변이체들, 대립유전자들, 이소폼, 상동체들, 돌연변이체들, 유도체들, 단편들 및 이의 상보성 서열들을 표적한다. 바람직하게는 올리고뉴클레오티드는 안티센스 분자다.
본 발명의 구체예에 따르면, 표적 핵산 분자는 종양 억제 유전자에만 국한되지 않으며, 종양 억제 유전자 분자들의 이소폼, 수용체, 상동체들 그리고 이와 유사한 것까지 확장된다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 천연 안티센스 서열, 예를 들면, 폴리뉴클레오티드(서열 번호: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 및 15) 및 이의 임의의 변이체들, 대립유전자들, 상동체들, 돌연변이체들, 유도체들, 단편들 및 상보성 서열들을 표적한다. 안티센스 올리고뉴클레오티드의 예는 서열 번호: 16 내지 36에서 제시된다.
한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 예를 들면, 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드와 연합된 넌코딩 센스 및/또는 안티센스 서열들을 포함하나 이에 한정되지 않는 종양 억제 유전자 안티센스의 핵산 서열에 상보성이거나 또는 이에 결합하고, 그리고 종양 억제 유전자 분자들의 발현 및/또는 기능을 조절한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 천연 안티센스의 핵산 서열(서열 번호: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 및 15)에 상보성이거나 또는 이에 결합하고, 그리고 종양 억제 유전자 분자들의 발현 및/또는 기능을 조절한다.
바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 서열 번호: 16 내지 36의 최소한 5개의 연속 뉴클레오티드 서열들을 포함하고, 종양 억제 유전자 분자들의 발현 및/또는 기능을 조절한다.
폴리뉴클레오티드 표적은 종양 억제 유전자의 패밀리 멤버, 종양 억제 유전자의 변이체들; SNP를 포함하는, 종양 억제 유전자의 돌연변이체들 ; 종양 억제 유전자의 넌코딩 서열들; 종양 억제 유전자의 대립유전자들; 종 변이체들, 단편들 그리고 이와 유사한 것을 포함하는 종양 억제 유전자를 포함한다. 바람직하게는 올리고뉴클레오티드는 안티센스 분자다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드를 표적화하는 올리고뉴클레오티드는 안티센스 RNA, 간섭 RNA (RNAi), 짧은 간섭 RNA (siRNA); 마이크로 간섭 RNA (miRNA); 작은, 일시적 RNA (stRNA); 또는 짧은, 헤어핀 RNA (shRNA); 작은 RNA-유도된 유전자 활성화 (RNAa); 또는, 작은 활성화 RNA (saRNA)를 포함한다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드(가령, 서열 번호: 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 및 15)의 표적화는 이들 표적의 발현 또는 기능을 조절한다. 한 구체예에서, 발현 또는 기능은 기준과 비교하였을 때 상향-조절된다. 또 다른 바람직한 구체예에서, 발현 또는 기능은 기준과 비교하였을 때 하향-조절된다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 안티센스 화합물은 서열 번호: 16 내지 36에서 제시된 것과 같은 서열들을 포함한다. 이들 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 변형된 뉴클레오티드, 더 짧은 또는 더 긴 단편들, 변형된 결합 그리고 이와 유사한 것을 포함할 수 있다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 서열 번호: 16 내지 36은 하나 이상의 LNA 뉴클레오티드를 포함할 수 있다.
바람직한 표적 핵산의 조절은 당분야에 공지된 몇 가지 방식으로 실행될 수 있다. 예를 들면, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 등. 효소적 핵산 분자들(가령, 리보자임)은 뉴클레오티드 염기 서열-특이적 방식으로 다른 별도의 핵산 분자들을 반복적으로 절단하는 능력을 포함하여 하나 이상의 다양한 반응을 촉매할 수 있는 핵산 분자들이다. 이러한 효소적 핵산 분자들은 예를 들면, 임의의 RNA 전사체를 실질적으로 표적화시키는데 이용될 수 있다 (Zaug et al., 324, Nature 429 1986; Cech, 260 JAMA 3030, 1988; and Jefferies et al., 17 Nucleic Acids Research 1371, 1989).
이들의 서열-특이성 때문에, 효소적 핵산 분자들의 trans-절단은 인간 질환에 대한 치료 물질로써 가능성을 보여준다 (Usman & McSwiggen, (1995) Ann. Rep. Med. Chem. 30, 285-294; Christoffersen and Marr, (1995) J. Med. Chem. 38, 2023-2037). 효소적 핵산 분자들은 세포성 RNA의 배경내에 특이적 RNA 표적을 절단하도록 고안될 수 있다. 이러한 절단 이벤트는 mRNA 비-기능성을 제공하여, 이 RNA로부터 단백질 발현을 폐기시킨다. 이러한 방식에서, 질환 상태와 연관된 단백질의 합성이 선택적으로 억제될 수 있다.
일반적으로, RNA 절단 활성을 가진 효소적 핵산은 먼저 표적 RNA에 결합함으로써 작용한다. 이와 같은 결합은 표적 RNA를 절단하기 위하여 작용하는 분자의 효소적 부분에 근접하게 유지된 효소적 핵산의 표적 결합 부분을 통하여 일어난다. 따라서, 효소적 핵산은 우선 표적 RNA를 인지하고, 그 다음 상보성 염기 쌍을 통하여 표적 RNA에 결합하고, 그리고 정확한 부위에 일단 결합되면, 효소적으로 작용하여 표적 RNA를 절단한다. 이러한 표적 RNA의 전략적 절단으로 인코드된 단백질의 합성을 지시하는 능력을 파괴시킬 것이다. 효소적 핵산이 이의 RNA표적에 결합하여 이를 절단시킨 후, RNA로부터 방출되어 또 다른 표적을 찾고, 새로운 표적에 반복적으로 결합하고, 이를 절단할 수 있다.
이와 같은 시험관 선별(발달)의 몇 가지 전략(Orgel, (1979) Proc. R. Soc. London, B 205, 435)이 이용되어, 절단, 및 포스포디에스테르 링키지와 아미드 링키지의 결찰과 같은 다양한 반응을 촉매할 수 있는 새로운 핵산 촉매를 개발하였다(Joyce, 1989, gene, 82, 83-87; Beaudry et al., 1992, Science 257, 635-641; Joyce, 1992, Scientific American 267, 90-97; Breaker et al., 1994, TIBTECH 12, 268; Bartel et al., 1993, Science 261:1411-1418; Szostak, 1993, TIBS 17, 89-93; Kumar et al., 1995, FASEB J., 9, 1183; Breaker, 1996, Curr. Op. Biotech., 7, 442).
촉매 활성을 조절할 수 있는 리보자임의 개발은 유전자 발현을 조절하기 위한 목적으로 RNA-절단 리보자임을 이용하는 임의의 전략에 상당히 기여할 수 있다. 해머 머리모양의 리보자임은 예를 들면, Mg2+ 공인자의 포화 농도 존재(10mM)하에 약 1min-1의 촉매속도(kcat)로 기능을 한다. 인위적인 "RNA 리가아제" 리보자임은 약 100 min-1의 속도로 상응하는 자가-변형 반응을 촉매하는 것으로 나타났다. 또한, DNA로 구성된 기질 결합 팔(arm)을 가지고 있는 특정 변형된 해머머리 리보자임은 100 min-1에 근접한 다중 턴-오버 속도로 RNA 절단을 촉매한다. 최종적으로, 특정 뉴클레오티드 유사체를 가진 해머머리의 촉매 코어내에 특이적 잔기의 대체는 촉매 속도에서 약 10배 개선 변형된 리보자임을 제공한다. 이와 같은 발견은 리보자임이 대부분의 자가-절단 리보자임에 의해 시험관에서 보여주는 것보다 상당히 큰 촉매 속도로 화학적 변형을 촉진시킬 것이라는 것을 설명한다. 그 다음 특정 자가-절단 리보자임의 구조를 최적화시켜 최대 촉매 활성을 제공하거나, 또는 전제적으로 RNA 포스포디에스테르 절단에 대해 상당히 더 빠른 속도를 보여주는 새로운 RNA 모티프를 만드는 것이 가능하다.
“해머머리” 모델을 적용시킨 RNA 촉매에 의해 RNA 기질의 분자내 절단은 1987년 처음 나타났다(Uhlenbeck, O. C. (1987) Nature, 328: 596-600). RNA 촉매가 회수되었고, 다중 RNA 분자들과 반응되었는데, 이는 진정한 촉매임을 설명하는 것이다.
“해머머리” 모티프에 기초하여 고안된 촉매적 RNA를 이용하여 표적 서열들과 필수적인 염기쌍을 유지하도록 하기 위하여 촉매 RNA내에 적절한 염기 변화를 만듦으로써 특이적 표적 서열들을 절단하였다(Haseloff and Gerlach, (1988) Nature, 334, 585; Walbot and Bruening, (1988) Nature, 334, 196; Uhlenbeck, O. C. (1987) Nature, 328: 596-600; Koizumi, M., (1988) FEBS Lett., 228: 228-230). 이것은 특이적 표적 서열들을 절단하기 위하여 촉매 RNA의 사용을 허락하며, 그리고 "헤머머리" 모델에 따라 고안된 촉매 RNA는 생체에서 특이적 기질 RNA를 절단하는 것이 가능하다는 것을 나타낸다(Haseloff and Gerlach, (1988) Nature, 334, 585; Walbot and Bruening, (1988) Nature, 334, 196; Uhlenbeck, O. C. (1987) Nature, 328: 596-600 참고).
RNA 간섭 (RNAi)은 포유류 및 포유류 세포에서 유전자 발현을 조절하는 강력한 도구가 되었다. 이와 같은 방식은 발현 플라스미드 또는 바이러스 및 siRNA로 프로세스되는 작은 헤어핀 RNA에 대한 코딩 서열을 이용하여 RNA 자체로 또는 DNA로 작은 간섭 RNA(siRNA) 운반을 요구한다. 이 시스템은 pre-siRNA를 세포질로 효과적으로 운반할 수 있는데, 세포질에서 이들 RNA는 활성이 있으며, 유전자 발현을 위하여 조절된 그리고 조직 특이적인 프로모터의 사용을 허용한다.
바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드 또는 안티센스 화합물은 comprises 리보핵산 (RNA) 및/또는 데옥시리보핵산 (DNA)의 올리고머 또는 폴리머, 또는 이의 모방체, 키메라, 유사체 또는 동사체를 포함한다. 이 용어는 자연적으로 생성된 뉴클레오티드, 슈가들 및 공유적 인터뉴클레오시드 (기본골격) 링키지로 구성된 올리고뉴클레오티드 뿐만 아니라, 유사하게 기능을 하는 비-자연적으로 생성되는 부분들을 포함하는 올리고뉴클레오티드를 포함한다. 이와 같은 변형된 또는 치환된 올리고뉴클레오티드는 예를 들면, 강화된 세포성 취입, 표적 핵산에 대해 강화된 친화력 그리고 뉴클레아제 존재시 증가된 안정성과 같은 바람직한 성질들 때문에 고유 형태를 능가하는 것이 종종 바람직하다.
본 발명에 따르면, 올리고뉴클레오티드 또는 "안티센스 화합물"은 안티센스 올리고뉴클레오티드 (가령 RNA, DNA, 이의 모방체, 키메라, 유사체 또는 동사체), 리보자임, 외부 유도 서열 (EGS) 올리고뉴클레오티드, siRNA 화합물, 단일- 또는 이중-가닥 RNA 간섭 (RNAi) 화합물 가령, siRNA 화합물, saRNA, aRNA, 및 표적 핵산의 최소한 일부분에 하이브리드되어 이의 기능을 조절하는 기타 올리고머 화합물을 포함한다. 이와 같이, 올리고뉴클레오티드 또는 "안티센스 화합물"은 DNA, RNA, DNA-like, RNA-like, 또는 이의 혼합물들일 수 있고, 또는 하나이상의 이들의 모방체가 될 수도 있다. 이들 화합물들은 단일-가닥, 이중-가닥, 원형 또는 헤어핀 올리고머 화합물이 될 수 있으며, 그리고 내부 또는 말단 불룩한 부분, 미스메치 또는 루프와 같은 구조적 요소들을 포함할 수 있다. 안티센스 화합물들은 일반적으로 선형으로 준비되지만, 원형 및/또는 가지형이 되기 위해 결합하거나 다른 방식으로 준비될 수 있다. 안티센스 화합물은 예를 들면, 두 개 가닥이 하이브리드되어 완전하게 완전하게 또는 부분적으로 이중-가닥 화합물을 형성하거나 또는 하이브리드화 및 완전하게 또는 부분적으로 이중-가닥 화합물의 형성을 허용하기 위하여 충분한 자가-상보성을 가진 단일 가닥과 같은 구조체를 포함할 수 있다. 두 가닥은 내부적으로 연결되어 자유 3' 또는 5' 말단을 남겨놓거나 또는 연속 헤어핀 구조 또는 루프를 형성하기 위해 연결될 수 있다. 헤어핀 구조는 5' 또는 3' 말단에 단일 가닥의 연장부를 만드는 오버행을 포함할 수 있다. 이중 가닥의 화합물들은 선택적으로 양단에 오버행을 포함할 수 있다. 추가 변형은 말단, 선택된 뉴클레오티드 위치, 슈가 위치중 하나에 부착된, 또는 뉴클레오티드간 링키지 중 하나에 부착된 콘쥬게이트 군을 포함할 수 있다. 대안으로, 두 개 가닥은 비-핵산 모이어티 또는 링커 군을 통하여 링크될 수 있다. 한 개 가닥으로부터만 형성된 경우, dsRNA는 듀플렉스를 형성하기 위하여 자체에 둘로 접히는 자가-상보성 헤어핀 유형 분자의 형태를 취할 수 있다. 따라서, dsRNAs는 완전히 또는 부분적으로 이중 가닥이 될 수 있다. 유전자 발현의 특이적 조절은 유전자전이 세포계에서 dsRNA 헤어핀의 안정적 발현에 의해 이루어질 수 있다(Hammond et al., (1991) Nat. Rev. genet., 2, 110-119; Matzke et al., (2001) Curr. Opin. Genet. Dev., 11, 221-227; Sharp, (2001) gene Dev., 15, 485-490). 두 개 가닥으로부터 형성될 때, 또는 듀플렉스를 형성하기 위하여 자체에 둘로 접히는 자가-상보성 헤어핀 유형 분자의 형태를 취하는 단일 가닥의 경우, 두 개 가닥(또는 단일 가닥의 듀플렉스 형성 구역)은 Watson-Crick 방식으로 염기쌍을 이루는 상보성 RNA 가닥이다.
일단 시스템내로 도입되면, 본 발명의 화합물들은 점유-기반 기전(occupancy-based mechanisms)을 통하여 표적 핵산의 절단 또는 다른 변형을 얻기 위하여 하나 이상의 효소 또는 구조적 단백질의 작용을 유도할 수 있다. 일반적으로, 핵산 (올리고뉴클레오티드를 포함)은 "DNA-like" (가령, 하나 이상의 2'-데옥시 슈가를 가지고, 그리고 U 염기 대신 일반적으로 T를 가짐) 또는 "RNA-like" (가령, 하나 이상의 2'-하이드록시 또는 2'-변형된 슈가를 가지고, 그리고 T 염기 대신 U 염기를 일반적으로 가짐)으로 설명될 수 있다. 핵산 헬릭스는 한 가지 이상의 구조 유형을 채택할 수 있지만, 가장 흔하게는 A- 및 B-형이 된다. 일반적으로, B-형-유사 구조를 가지는 올리고뉴클레오티드는 "DNA-like"이며, 그리고 A-형-유사 구조를 가지는 올리고뉴클레오티드는 "RNA-like"이다. 일부(키메라) 구체예에서, 안티센스 화합물은 A- 및 B-형 구역을 포함한다.
본 발명에 따른 안티센스 화합물은 길이가 약 5 내지 약 80 뉴클레오티드 (가령, 약 5 내지 약 80개의 링크된 뉴클레오시드)의 안티센스 부분을 포함할 수 있다. 이는 안티센스 가닥 또는 안티센스 화합물의 일부분의 길이를 말한다. 환언하면, 본 발명의 단일-가닥 안티센스 화합물은 약 5 내지 약 80 뉴클레오티드를 포함하며, 그리고 본 발명의 이중-가닥 안티센스 화합물(예를 들면, dsRNA)은 길이가 5개 내지 약 80개 뉴클레오티드로 된 센스 및 안티센스 가닥 또는 일부분을 포함한다. 이것은 길이가 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개, 30개, 31개, 32개, 33개, 34개, 35개, 36개, 37개, 38개, 39개, 40개, 41개, 42개, 43개, 44개, 45개, 46개, 47개, 48개, 49개, 50개, 51개, 52개, 53개, 54개, 55개, 56개, 57개, 58개, 59개, 60개, 61개, 62개, 63개, 64개, 65개, 66개, 67개, 68개, 69개, 70개, 71개, 72개, 73개, 74개, 75개, 76개, 77개, 78개, 79개, 또는 80개 뉴클레오티드 또는 이 범위내 임의의 수의 안티센스 부분을 포함한다는 것을 당업자는 이해할 것이다.
한 구체예에서, 본 발명의 안티센스 화합물은 길이가 10개 내지 50개 뉴클레오티드의 안티센스 부분을 가진다. 이것은 길이가 10개, 11개, 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개, 30개, 31개, 32개, 33개, 34개, 35개, 36개, 37개, 38개, 39개, 40개, 41개, 42개, 43개, 44개, 45개, 46개, 47개, 48개, 49개, 또는 50개 뉴클레오티드 또는 이 범위내 임의의 수의 안티센스 부분으로 구체화된다는 것을 당업자는 이해할 것이다.
한 구체예에서, 본 발명의 안티센스 화합물은 길이가 12개 또는 13개 내지 30개 뉴클레오티드의 안티센스 부분을 가진다. 이것은 길이가 12개, 13개, 14개, 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 23개, 24개, 25개, 26개, 27개, 28개, 29개, 또는 30개 뉴클레오티드 또는 이 범위내 임의의 수의 안티센스 부분으로 구체화된다는 것을 당업자는 이해할 것이다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 본 발명의 올리고머 화합물은 화합물내에 하나 이상의 뉴클레오티드 위치에 상이한 염기가 존재하는 변이체를 포함한다. 예를 들면, 첫번째 뉴클레오티드가 아데노신이라면, 변이체들은 이 위치에 티미딘, 구아노신 또는 시티딘을 포함하도록 만들어질 수 있다. 안티센스 또는 dsRNA 화합물의 임의의 위치에서 일어날 수 있다. 이들 화합물은 표적 핵산의 발현을 억제하는 이들 능력을 측정하기 위하여 여기에서 설명된 방법에 의해 테스트된다.
일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 40% 내지 약 60%이다. 일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 60% 내지 약 70%이다. 일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 70% 내지 약 80%이다. 일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 80% 내지 약 90%이다. 일부 구체예에서, 안티센스 화합물과 표적 사이에 상동성, 서열 동일성 또는 상보성은 약 90%, 약 92%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 약 99% 또는 약 100%이다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 서열 번호:16 내지 36에 제시된 핵산 분자들과 같은 안티센스 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 치환 또는 변형을 포함한다. 한 구체예에서, 뉴클레오티드는 잠금 핵산 (LNA)으로 치환된다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 및 서열 번호: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 및 15의 서열과 연관된 코딩 및/또는 넌코딩 서열들의 핵산 분자들 센스 및/또는 안티센스의 하나 이상의 구역을 표적한다. 올리고뉴클레오티드는 서열 번호: 1 내지 15의 중첩 구역을 표적한다.
본 발명의 특정 바람직한 올리고뉴클레오티드는 키메라 올리고뉴클레오티드다. 본 발명의 내용에서 "키메라 올리고뉴클레오티드" 또는 "키메라"는 두개 이상의 화학적으로 별개의 구역을 포함하며, 각 구역은 최소 한 개의 뉴클레오티드로 구성되는, 올리고뉴클레오티드다. 이와 같은 올리고뉴클레오티드는 일반적으로 하나 이상의 유익한 성질(예를 들면, 증가된 뉴클레아제 저항성, 세포내로의 증가된 취입, 표적에 대한 증가된 결합 친화력)을 부여하는 변형된 뉴클레오티드의 최소 한 구역과 RNA:DNA 또는 RNA:RNA 하이브리드를 절단할 수 있는 기질이 되는 구역을 포함한다. 예를 들면, RNase H는 RNA:DNA 듀플렉스의 RNA 가닥을 절단하는 세포성 엔도뉴클레아제다. 따라서, RNase H의 활성화는 RNA 표적의 절단을 초래하여, 유전자 발현의 안티센스 조절의 효과를 강화시킨다. 결과적으로, 동일한 표적 구역에 하이브리드되는 포스포로티오에이트 데옥시올리고뉴클레오티드와 비교하였을 때, 키메라 올리고뉴클레오티드가 사용되면, 더 짧은 올리고뉴클레오티드로 필적할 수 있는 결과를 종종 얻을 수 있다. RNA 표적의 절단은 겔 전기영동 및 필요하다면, 당분야에 공지된 핵산 하이브리드 기술와 연합하여 일반적으로 탐지될 수 있다. 바람직한 구체예에서, 키메라 올리고뉴클레오티드는 표적 결합 친화력을 증가시키도록 변형된 최소한 한 구역과, RNAse H에 대한 기질로 작용하는 한 구역을 포함한다. 올리고뉴클레오티드가 이의 표적에 대한 친화력(이 경우, ras를 인코드하는 핵산)은 올리고뉴클레오티드/표적 쌍의 Tm을 측정함으로써 일반적으로 결정되는데, 이것은 올리고뉴클레오티드와 표적이 분리되는 온도이며; 해리는 분광광도계에 의해 탐지된다. Tm이 높을수록 표적에 대한 올리고뉴클레오티드의 친화력이 커진다.
본 발명의 키메라 안티센스 화합물은 상기에서 설명된 것과 같이 두개 이상의 올리고뉴클레오티드, 변형된 올리고뉴클레오티드, 올리고뉴클레오시드 및/또는 올리고뉴클레오티드 모방체의 혼성 구조로 형성될 수 있다. 이와 같은 화합물을 당분야에서 하이브리드(hybrids) 또는 겜퍼(gapmers)라고 한다. 이와 같은 하이브리드 구조의 제조에 대해 교시하는 대표적인 미국 특허는 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다: US 특허 제5,013,830호; 제5,149,797호; 제5,220,007호; 제5,256,775호; 제5,366,878호; 제5,403,711호; 제5,491,133호; 제5,565,350호; 제5,623,065호; 제5,652,355호; 제5,652,356호; 및 제5,700,922호, 이들 각각은 참고문헌에 통합된다.
또 다른 바람직한 구체예에서, 변형된 올리고뉴클레오티드의 구역은 슈가의 2'위치에서 변형된 최소한 뉴클레오티드를 포함하는데, 바람직하게는 2'-O알킬, 2'-O-알킬-O-알킬 또는 2'-플루오르-변형된 뉴클레오티드이다. 다른 바람직한 구체예에서, RNA 변형은 피리미딘의 리보즈, 염기가 소실된 잔기(abasic residues) 또는 RNA의 3' 말단에서 역전된 염기상에 2'-플루오르, 2'-아미노 및 2' O-메틸 변형을 포함한다. 이와 같은 변형은 올리고뉴클레오티드에 통상적으로 통합되며, 그리고 이들 올리고뉴클레오티드는 주어진 표적에 대해 2'-데옥시올리고뉴클레오티드보다 더 높은 Tm(가령, 더 높은 표적 결합 친화력)을 가지는 것을 보여주었다. 증가된 친화력의 효과는 유전자 발현의 RNAi 올리고뉴클레오티드 억제를 상당히 강화시키는 것이다. RNAse H는 RNA:DNA 듀플렉스의 RNA 가닥을 절단하는 세포성 엔도뉴클레아제이며; 따라서, 이 효소의 활성화로 RNA 표적이 절단되며, 그리고 RNAi 억제의 효과는 상당히 강화될 것이다. RNA 표적의 절단은 겔 전기영동에 의해 통상적으로 설명될 수 있다. 또 다른 바람직한 구체예에서, 키메라 올리고뉴클레오티드는 또한 뉴클레아제 저항성을 강화시키기 위하여 변형된다. 세포는 핵산을 분해시킬 수 있는 다양한 엑소- 및 엔도-뉴클레아제를 포함한다. 다수의 뉴클레오티드 및 뉴클레오시드 변형은 고유한 올리고데옥시뉴클레오티드 보다 뉴클레아제 절단에 더 저항성을 가지도록 올리고뉴클레오티드가 통합된 것들이다. 뉴클레아제 저항성은 올리고뉴클레오티드를 세포 추출물 또는 분리된 뉴클레아제 용액과 항온처리하고, 통상적으로 겔 전기영동에 의해 시간이 경과한 후에 남아있는 고유 올리고뉴클레오티드의 수준을 측정함으로써 결정된다. 뉴클레아제 저항성을 강화시키도록 변형된 올리고뉴클레오티드는 변형안된 올리고뉴클레오티드보다 더 긴 시간 동안 고유한 상태로 존재한다. 다양한 올리고뉴클레오티드 변형이 뉴클레아제 저항성을 강화시키거나 부여한다는 것이 설명되었다. 최소한 하나의 포스포로티오에이트 변형을 포함하는 올리고뉴클레오티드가 더 바람직하다. 일부 경우, 표적 결합 친화력이 강화된 올리고뉴클레오티드 변형은 독립적으로 뉴클레아제 저항성을 강화시킨다. 일부 바람직한 변형은 De Mesmaeker et al. (1995) Acc. Chem. Res. 28:366-374에서 찾아볼 수 있다.
본 발명에서 구상된 일부 바람직한 올리고뉴클레오티드의 특정 예는 변형된 기본골격을 포함하는 것들, 예를 들면, 포스포로티오에이트, 포스포트리에스테르, 메틸 포스포네이트, 짧은 쇄 알킬 또는 사이클로알킬 인터슈가 링키지 또는 짧은 쇄 이형원자 또는 이형사이클 인터슈가 링키지를 포함한다. 가장 바람직한 것은 포스포로티오에이트 기본골격을 가진 올리고뉴클레오티드 및 이형원자 기본골격을 가진 올리고뉴클레오티드, 특히, CH2--NH--O--CH2, CH,--N(CH3)--O--CH2 [메틸렌(메틸이미노) 또는 MMI 기본골격으로 공지됨], CH2--O--N(CH3)--CH2, CH2--N(CH3)--N(CH3)--CH2 및 O--N (CH3)--CH2--CH2 기본골격을 가지며, 이때 고유 포스포디에스테르 기본골격은 O--P--O--CH로 나타낸다). De Mesmaeker et al. (1995) Acc. Chem. Res. 28:366-374)에서 설명된 아미드 기본골격 또한 바람직하다. 몰포리노 기본골격 구조를 가진 올리고뉴클레오티드 또한 바람직하다(Summerton and Weller, U.S. 특허 제5,034,506호). 다른 바람직한 구체예에서, 펩티드 핵산 (PNA) 기본골격와 같은 올리고뉴클레오티드의 포스포디에스테르 기본골격은 폴리아미드 기본골격과 대체되며, 뉴클레오티드는 폴리아미드 기본골격의 아자 질소 원자에 직간접적으로 결합된다 (Nielsen et al. (1991) Science, 254, 1497). 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 치환된 슈가 모이어티를 또한 포함할 수 있다. 바람직한 올리고뉴클레오티드는 2' 위치에 다음중 하나를 포함한다: OH, SH, SCH3, F, OCN, OCH3 OCH3, OCH3 O(CH2)n CH3, O(CH2)n NH2 또는 O(CH2)nCH3 이때, n은 1 내지 약 10이다; C1 내지 C10 저가알킬, 알콕시알콕시, 치환된 저가 알킬, 알카릴 또는 아랄킬; Cl; Br; CN; CF3; OCF3; O--, S--, 또는 N-알킬; O--, S--, 또는 N-알케닐; SOCH3; SO2 CH3; ONO2; NO2; N3; NH2; 헤테로사이클로알킬; 헤테로사이클로알카릴; 아미노알킬아미노; 폴리알킬아미노; 치환된 실일; RNA 절단기; 종양 억제 생성기 군; 삽입기(intercalator); 올리고뉴클레오티드의 약리역학적 성질을 개선시키는 기; 또는 올리고뉴클레오티드 및 유사한 성질을 가진 다른 치환기의 약리역학적 성질을 개선시키는 기. 바람직한 변형은 2'-메톡시에톡시[2'-O-CH2CH2OCH3, 2'-O-(2-메톡시에틸)로 공지되기도 함]을 포함한다(Martin et al., (1995) Helv. Chim. Acta, 78, 486). 다른 바람직한 변형은 2'-메톡시 (2'-O--CH3), 2'-프로폭시 (2'-OCH2 CH2CH3) 및 2'-플루오르 (2'-F)를 포함한다. 올리고뉴클레오티드상의 다른 위치에 유사한 변형이 있을 수 있는데, 특히, 3' 말단 뉴클레오티드과 5' 말단 뉴클레오티드의 5'위치의 슈가의 3' 위치에 있을 수 있다. 올리고뉴클레오티드는 또한 펜토퓨라노실기 대신 사이클로부틸과 같은 슈가 모방체를 가질 수 있다.
올리고뉴클레오티드는 또한 추가적으로 또는 대안으로, 뉴클레오티드 (당분야에서 흔히 간단히 “염기”라고 부른다) 변형 또는 치환을 포함할 수 있다. 여기에서 사용된 것과 같이, "변형안된" 또는 "천연" 뉴클레오티드는 아데닌 (A), 구아닌 (G), 티민 (T), 시토신 (C) 및 우라실 (U)을 포함한다. 변형된 뉴클레오티드는 천연 핵산에 드물게 또는 일시적으로 발견되는 뉴클레오티드, 가령, 하이포산틴, 6-메틸아데닌, 5-Me 피리미딘, 특히 5-메틸시토신 (5-메틸-2'데옥시시토신이라고 하기도 하고, 당분야에서 5-Me-C 라고 지칭하기도 함), 5-하이드록시메틸시토신 (HMC), 글리코실 HMC 및 겐토바이오실 HMC, 뿐만 아니라 합성 뉴클레오티드, 가령, 2-아미노아데닌, 2-(메틸아미노)아데닌, 2-(이미다졸일알킬)아데닌, 2-(아미노알킬아미노)아데닌 또는 다른 헤테로치환된 알킬아데닌, 2-티오우라실, 2-티오티민, 5-브로모우라실, 5-하이드록시메틸우라실, 8-아자구아닌, 7-데아자구아닌, N6(6-아미노헥실)아데닌 및 2,6-디아미노퓨린을 포함한다(Kornberg, A., DNA Replication, W. H. Freeman & Co., San Francisco, 1980, pp75-77; Gebeyehu, G., et al. (1987) Nucl. Acids Res. 15:4513). 당분야에 공지된 “범용(universal)” 염기, 가령, 이노신이 포함될 수 있다. 5-Me-C 치환은 0.6-1.2℃로 핵산 듀플렉스 안정성을 증가시키는 것으로 확인되었고,(Sanghvi, Y. S., in Crooke, S. T. and Lebleu, B., eds., 안티센스 Research and Applications, CRC Press, Boca Raton, 1993, pp. 276-278) 그리고 현재 가장 바함직한 염기 치환이다.
본 발명의 올리고뉴클레오티드의 또 다른 변형은 올리고뉴클레오티드의 활성 또는 세포성 취입을 강화시키는 올리고뉴클레오티드 하나 이상의 모이어티 또는 콘쥬게이트에 화학적으로 연결된 것을 포함한다. 이러한 모이어티는 콜레스테롤 모이어티, 콜레스테릴 모이어티(Letsinger et al., (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86, 6553), 콜린산(Manoharan et al. (1994) Bioorg. Med. Chem. Let. 4, 1053), 티오에테르, 가령, 헥실-S-트리틸티올(Manoharan et al. (1992) Ann. N.Y. Acad. Sci. 660, 306; Manoharan et al. (1993) Bioorg. Med. Chem. Let. 3, 2765), 티오콜레스테롤 (Oberhauser et al., (1992) Nucl. Acids Res. 20, 533), 알파 쇄, 가령, 도데칸디올 또는 운데실 잔기(Saison-Behmoaras et al. EMBO J. 1991, 10, 111; Kabanov et al. (1990) FEBS Lett. 259, 327; Svinarchuk et al. (1993) Biochimie, 75, 49), 포스포리피드, 가령, 디-헥사데실--rac-글리세롤 또는 트리에틸암모늄 1,2-디-O-헥사데실-rac-글리세로-3-H-포스포네이트(Manoharan et al. (1995) Tetrahedron Lett. 36, 3651; Shea et al. Nucl. Acids Res. 1990, 18, 3777), 폴리아민 또는 폴리에틸렌 글리콜 쇄(Manoharan et al. (1995) Nucleosides & Nucleotides, 14, 969), 또는 아다만탄 아세트산(Manoharan et al. (1995) Tetrahedron Lett. 36, 3651)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 친지성 모이어티를 포함하는 올리고뉴클레오티드 및 이와 같은 올리고뉴클레오티드를 준비하는 방법들은 당분야에 공지되어 있다. 예를 들면, U.S. 특허 제5,138,045호, 제5,218,105호 및 제5,459,255호.
주어진 올리고뉴클레오티드의 모든 위치들이 균일하게 변형될 필요는 없으며, 그리고 전술한 변형중 하나 이상이 단일 올리고뉴클레오티드에 통합되거나 또는 올리고뉴클레오티드내 단일 뉴클레오티드에만 통합될 수 있다. 본 발명은 여기에서 정의된 키메라 올리고뉴클레오티드가 되는 올리고뉴클레오티드를 포함한다.
또 다른 구체예에서, 본 발명의 핵산 분자는 염기가 소실된(abasic) 뉴클레오티드, 폴리에테르, 폴리아민, 폴리아미드, 펩티드, 탄수화물, 지질 또는 폴리하이드로카본 화합물을 포함하나 이에 한정되지 않는 또 다른 모이어티와 콘쥬게이트된다. 이들 분자들은 슈가, 염기 또는 인산염 기의 몇 군데 위치에서 핵산 분자를 포함하는 임의의 하나 이상의 뉴클레오티드에 링크될 수 있다는 것을 당업자는 인지할 것이다.
본 발명에 이용된 올리고뉴클레오티드는 잘 알려진 고형상 합성 기술을 통하여 통상적으로 그리고 일상적으로 만들어질 수 있다. 이와 같은 합성을 위한 장비는 Applied Biosystems을 포함하는 몇 군데 업자들이 판매한다. 이와 같은 합성을 위한 임의의 기타 수단들이 이용될 수 있으며; 올리고뉴클레오티드의 실질적인 합성은 본 발명의 분야에 숙지된 자의 능력 범위내에 있다. 포스포로티오에이트 및 알킬화된 유도체들과 같은 다른 올리고뉴클레오티드를 준비하기 위한 유사한 기술을 이용하는 것 또한 공지되어 있다. 형광 라벨된, 바이오티닐화된 또는 콜레스테롤-변형된 올리고뉴클레오티드와 같은 기타 변형된 올리고뉴클레오티드를 합성하기 위하여 유사한 기술 및 시판되는 변형된 아미디트(amidites) 및 조절된 포어 글라스(CPG) 산물들, 가령, 바이오틴, 플로오레신, 아크리딘 또는 솔라렌(psoralen)-변형된 아미디트 및/또는 CPG (Glen Research, Sterling VA)으로부터 시판되는 것 이용)을 이용하는 것 또한 공지되어 있다.
본 발명에 따르면, 효과, 특이성 및 작용 기간을 강화시키기 위하여 LNA 모노머와 같은 변형을 이용하면, MOE, ANA, FANA, PS 등과 같은 현재 화학물질로 구성된 올리고뉴클레오티드의 투여 경로를 확장시킨다(Uhlman, et al., (2000) Current Opinions in Drug Discovery & Development Vol 3 No 2). 현재 올리고뉴클레오티드에서 일부 모노머를 LNA 모노머로 치환시키면 이루어질 수 있다. LNA 변형된 올리고뉴클레오티드는 부모 화합물과 유사한 크기를 가질 수 있고, 또는 더 큰, 또는 바람직하게는 더 작은 크기를 가질 수 있다. 이와 같은 LNA-변형된 올리고뉴클레오티드는 약 70% 미만의, 더욱 바람직하게는 약 60% 미만의, 가장 바람직하게는 약 50% 미만의 LNA 모노머를 포함하며, 이들 크기는 약 5개 내지 25개 뉴클레오티드, 더욱 바람직하게는 약 12개 내지 20 개 뉴클레오티드 사이가 된다.
바람직한 변형된 올리고뉴클레오티드 기본골격은 포스포로티오에이트, 키랄 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트, 포스포트리에스테르, 아미노알킬포스포트리에스테르, 메틸 및 3'알킬렌 포스포네이트 및 키랄 포스포네이트를 포함하는 기타 알킬 포스포네이트, 포스피네이트, 3'-아미노 포스포르아미데이트 및 아미노알킬포스포르아미데이트를 포함하는 포스포르아미데이트, 티오노포스포르아미데이트, 티오노알킬포스포네이트, 티오노알킬포스포트리에스테르, 및 정상적인 3'-5' 링키지를 가진 보라노포스페이트, 이들의 2'-5' 링크된 유사체들, 그리고 역전된 극성을 가진 것들(이때, 뉴클레오시드 단위의 인접된 쌍은 3'-5'에서 5'-3'로 또는 2'-5'에서 5'-2'로 링크된)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 다양한 염, 혼합된 염 및 자유 산 형태도 포함된다.
상기 인-함유 링키지의 제조를 교시하는 대표적인 미국 특허는 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다: US 특허 제3,687,808호; 제4,469,863호; 제4,476,301호; 제5,023,243호; 제5,177,196호; 제5,188,897호; 제5,264,423호; 제5,276,019호; 제5,278,302호; 제5,286,717호; 제5,321,131호; 제5,399,676호; 제5,405,939호; 제5,453,496호; 제5,455,233호; 제5,466,677호; 제5,476,925호; 제5,519,126호; 제5,536,821호; 제5,541,306호; 제5,550,111호; 제5,563,253호; 제5,571,799호; 제5,587,361호; 및 제5,625,050호, 이들 각각은 참고문헌에 통합된다.
인 원자를 포함하지 않는 바람직한 변형된 올리고뉴클레오티드 기본골격은 짧은 쇄 알킬 또는 사이클로알킬 인터뉴클레오시드 링키지, 혼합된 이형원자 및 알킬 또는 사이클로알킬 인터뉴클레오시드 링키지, 또는 하나 이상의 짧은 쇄 이형원자 또는 이형사이클 인터뉴클레오시드 링키지에 의해 형성된 기본 골격을 가진다. 이들은 몰포리노 링키지 (뉴클레오시드의 슈가 부분으로부터 일부 형성된); 실로옥산 기본골격; 설파이드, 술포옥시드 및 술폰 기본골격; 포름아세틸 및 티오포름아세틸 기본골격; 메틸렌 포름아세틸 및 티오포름아세틸 기본골격s; 알켄 함유 기본골격; 술파메이트 기본골격; 메틸렌이미노 및 메틸렌하이드라지노 기본골격; 술포네이트 및 술폰아미드 기본골격; 아미드 기본골격; 그리고 N, O, S 및 CH2 성분 부분이 혼합된 것을 가지는 것들을 포함한다.
상기 올리고뉴클레오시드의 제조를 교시하는 대표적인 미국 특허는 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다; 미국 특허 제5,034,506호; 제5,166,315호; 제5,185,444호; 제5,214,134호; 제5,216,141호; 제5,235,033호; 제5,264,562호; 제5,264,564호; 제5,405,938호; 제5,434,257호; 제5,466,677호; 제5,470,967호; 제5,489,677호; 제5,541,307호; 제5,561,225호; 제5,596,086호; 제5,602,240호; 제5,610,289호; 제5,602,240호; 제5,608,046호; 제5,610,289호; 제5,618,704호; 제5,623,070호; 제5,663,312호; 제5,633,360호; 제5,677,437호; 및 제5,677,439호, 이들 각각은 참고문헌에 통합된다.
기타 바람직한 올리고뉴클레오티드 모방체에 있어서, 슈가 및 인터뉴클레오시드 링키지, 가령, 뉴클레오티드 단위의 기본 골격은 신규한 군으로 대체된다. 염기 단위는 적합한 핵산 표적 화합물과의 하이브리드화를 위해 유지된다. 올리고머 화합물중 하나인, 우수한 하이브리드화 성질을 가진 것으로 확인된 올리고뉴클레오티드 모방체를 펩티드 핵산 (PNA)이라 지칭한다. PNA 화합물, 올리고뉴클레오티드의 슈가-기본 골격은 아미드 함유 기본골격, 특히 아미도에틸글리신 기본골격으로 치환된다. 핵염기는 보유되며, 기본 골격의 아미드 부분의 아자 질소 원자에 직간접적으로 결합된다. PNA 화합물의 제조를 교시하는 대표적인 미국 특허는 US 특허 제5,539,082호; 제5,714,331호; 및 제5,719,262호를 포함하나 이에 한정되지 않으며, 이들 각각은 참고문헌에 통합된다. PNA 화합물의 추가 교시는 Nielsen et al., (1991) Science, 254, 1497-1500에서 볼 수 있다.
본 발명의 또 다른 바람직한 구체예에서, 포스포로티오에이트 기본골격를 가진 올리고뉴클레오티드, 이형원자 기본골격, 특히, CH2-NH-O-CH2-, -CH2-N(CH3)-O-CH2-(메틸렌(메틸이미노) 또는 MMI 기본골격으로 공지됨), -CH2-O-N(CH3)-CH2-, -CH2N(CH3)-N(CH3) CH2- 및-O-N(CH3)-CH2-CH2-를 가진 올리고뉴클레오티드가 되며, 이때, 고유 포스포디에스테르 기본골격은 상기 언급된 US 특허 제5,489,677호의 -O-P-O-CH2-, 그리고 상기 언급된 US 특허 제5,602,240호의 아미드 기본 골격이다. 또한, 상기 언급된 US 특허 제5,034,506호의 몰포리노 기본골격 구조를 가진 올리고뉴클레오티드가 바람직하다.
변형된 올리고뉴클레오티드는 하나 이상의 치환된 슈가 모이어티를 포함할 수 있다. 바람직한 올리고뉴클레오티드는 2' 위치에 다음중 하나를 포함한다: OH; F; O-, S-, 또는 N-알킬; O-, S-, 또는 N-알케닐; O-, S-또는 N-알키닐; 또는 O 알킬-O-알킬, 이때, 알킬, 알케닐 및 알키닐은 치환된 또는 치환안된 C 내지 CO 알킬 또는 C2 내지 CO 알케닐 및 알키닐이다. 특히 바람직한 것은 O(CH2)nOmCH3, O(CH2)n, OCH3, O(CH2)nNH2, O(CH2)nCH3, O(CH2)nONH2, 및 O(CH2n)ON(CH2)nCH3)2 이며, 이때 n과 m은 1 내지 약 10이 될 수 있다. 다른 바람직한 올리고뉴클레오티드는 2' 위치에 다음중 하나를 포함한다: C 내지 CO, (저가 알킬, 치환된 저가 알킬, 알카릴, 아랄킬, O-알카릴 또는 O-아랄킬, SH, SCH3, OCN, Cl, Br, CN, CF3, OCF3, SOCH3, SO2CH3, ONO2, NO2, N3, NH2, 헤테로사이클로알킬, 헤테로사이클로알카릴, 아미노알킬아미노, 폴리알킬아미노, 치환된 실일, RNA 절단기; 종양 억제제 생성기 군; 삽입기(intercalator); 올리고뉴클레오티드의 약리역학적 성질을 개선시키는 기; 또는 올리고뉴클레오티드 및 유사한 성질을 가진 다른 치환기의 약리역학적 성질을 개선시키는 기. 바람직한 변형은 2'-메톡시에톡시[2'-O-CH2CH2OCH3, 2'-O-(2-메톡시에틸) 또는 2'-MOE로 공지되기도 함]을 포함한다(Martin et al., (1995) Helv. Chim. Acta, 78, 486). 다른 바람직한 변형은 2'-메톡시에톡시 (2'-O-CH2CH2OCH3, 2'-O-(2-메톡시에틸) 또는 2'-MOE으로 공지되기도 함) (Martin et al., (1995) Helv. Chim. Acta, 78, 486-504) 가령, 알콕시알콕시 기를 포함한다. 추가 바람직한 변형은 2'-디메틸아미노옥시에톡시, 가령, O(CH2)2ON(CH3)2 기, (하기 실시예에서 설명되는 것과 같이 2'-DMAOE로 공지되기도 함) 그리고 2'-디메틸아미노에톡시에톡시 (당분야에서 2'-O-디메틸아미노에톡시에틸 또는 2'-DMAEOE), 가령, 2'-O-CH2-O-CH2-N (CH2)2을 포함한다.
다른 바람직한 변형은 2'-메톡시(2'-OCH3), 2'-아미노프로폭시(2'-O CH2CH2CH2NH2) 및 2'-플루오르 (2'-F)을 포함한다. 올리고뉴클레오티드의 다른 위치, 특히 3' 말단 뉴클레오티드에서 3' 위치의 슈가 또는 2'-5' 링크된 올리고뉴클레오티드에서, 그리고 5' 말단 뉴클레오티드의 5' 위치에 유사한 변형이 만들어질 수 있다. 올리고뉴클레오티드는 또한 펜토퓨라노실 슈가 대신 사이클로부틸 모이어티와 같은 슈가 모방체를 가질 수 있다. 이와 같은 변형된 슈가 구조의 제조를 교시하는 대표적인 미국 특허는 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다: US 특허 제4,981,957호; 제5,118,800호; 제5,319,080호; 제5,359,044호; 제5,393,878호; 제5,446,137호; 제5,466,786호; 제5,514,785호; 제5,519,134호; 제5,567,811호; 제5,576,427호; 제5,591,722호; 제5,597,909호; 제5,610,300호; 제5,627,053호; 제5,639,873호; 제5,646,265호; 제5,658,873호; 제5,670,633호; 및 제5,700,920호, 이들 각각은 참고문헌에 통합된다.
올리고뉴클레오티드는 또한 추가적으로 또는 대안으로, 뉴클레오티드 (당분야에서 흔히 간단히 “염기”라고 부른다) 변형 또는 치환을 포함할 수 있다. 여기에서 사용된 것과 같이, "변형안된" 또는 "천연" 뉴클레오티드는 아데닌 (A), 구아닌 (G), 티민 (T), 시토신 (C) 및 우라실 (U)을 포함한다. 변형된 뉴클레오티드는 5-메틸시토신 (5-me-C), 5-하이드록시메틸 시토신, 산틴, 하이포산틴, 2-아미노아데닌, 아데닌과 구아닌의 6-메틸 및 다른 알킬 유도체들, 아데닌과 구아닌의 2-프로필 및 다른 알킬 유도체들, 2-티오우라실, 2-티오티민 및 2-티오시토신, 5-할로우라실 및 시토신, 5-프로피닐 우라실 및 시토신, 6-아조 우라실, 시토신 및 티민, 5-우라실 (슈도-우라실), 4-티오우라실, 8-할로, 8-아미노, 8-티올, 8-티오알킬, 8-하이드록실 및 다른 8-치환된 아데닌 및 구아닌, 5-할로 특히 5-브로모, 5-트리플루오르메틸 및 다른 5-치환된 우라실 및 시토신, 7-메틸무아닌 및 7-메틸아데닌, 8-아자구아닌 및 8-아자아데닌, 7-데아자구아닌 및 7-데아자아데닌 그리고 3-데아자구아닌 및 3-데아자아데닌과 같은 다른 합성 및 천연 뉴클레오티드를 포함한다.
또한, 뉴클레오티드는 미국 특허 No. 3,687,808호, 'The Concise Encyclopedia of Polymer Science And Engineering', pages 858-859, Kroschwitz, J.I., ed. John Wiley & Sons, 1990, those disclosed by Englisch et al., 'Angewandle Chemie, International Edition', 1991, 30, page 613, 및 Sanghvi, Y.S., Chapter 15, 'Antisence Research and Applications', pages 289-302, Crooke, S.T. and Lebleu, B. ea., CRC Press, 1993에 설명된 것들을 포함한다. 이와 같은 뉴클레오티드의 일부는 본 발명의 올리고머 화합물의 결합 친화력을 증가시키는데 특히 유용하다. 이들은 2-아미노프로필아데닌, 5-프로피닐우라실 및 5-프로피닐시토신을 포함하는 5-치환된 피리미딘, 6-아자피리미딘 및 N-2, N-6 및 0-6 치환된 퓨린을 포함한다. 5-메틸시토신 치환은 핵산 듀플렉스 안정도를 0.6-1.2℃ 증가시킨 것으로 나타났고(Sanghvi, Y.S., Crooke, S.T. and Lebleu, B., eds, 'Antisence Research and Applications', CRC Press, Boca Raton, 1993, pp. 276-278) 그리고 2'-O메톡시에틸 슈가 변형과 복합하였을 때 특히 바람직한 염기 치환이다.
상기 변형된 뉴클레오티드 및 기타 변형된 뉴클레오티드의 제조를 교시하는 대표적인 미국 특허는 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다: US 특허 제3,687,808호, 제4,845,205호; 제5,130,302호; 제5,134,066호; 제5,175,273호; 제5,367,066호; 제5,432,272호; 제5,457,187호; 제5,459,255호; 제5,484,908호; 제5,502,177호; 제5,525,711호; 제5,552,540호; 제5,587,469호; 제5,596,091호; 제5,614,617호; 제5,750,692호, 및 제5,681,941호, 이들 각각은 참고문헌에 통합된다.
본 발명의 올리고뉴클레오티드의 기타 변형은 올리고뉴클레오티드 하나 이상의 모이어티 또는 콘쥬게이트에 화학적으로 연결되는 것을 포함하는데, 이는 활성, 세포 분포 또는 올리고뉴클레오티드의 세포 취입을 강화시킨다.
이와 같은 모이어티는 콜레스테롤 모이어티(Letsinger et al., (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1989, 86, 6553-6556), 담즙산(Manoharan et al., (1994) Bioorg. Med. Chem. Let., 4, 1053-1060), 티오에테르, 가령, 헥실-S-트리릴티올 (Manoharan et al., (1992) Ann. N. Y. Acad. Sci., 660, 306-309; Manoharan et al., (1993) Bioorg. Med. Chem. Let., 3, 2765-2770), 티오콜레스테롤 (Oberhauser et al., (1992) Nucl. Acids Res., 20, 533-538), 지방족 쇄 가령, 도데칸디올 또는 운데실 잔기(Kabanov et al., (1990) FEBS Lett., 259, 327-330; Svinarchuk et al., Biochimie, 1993, 75, 49-54), 인지질 가령, 디-헥사데실-rac-글리세롤 또는 트리에틸암모늄 1,2-디-O-헥사데실-rac-글리세로-3-H-포스포네이트(Manoharan et al., (1995) Tetrahedron Lett., 36, 3651-3654; Shea et al., (1990) Nucl. Acids Res., 18, 3777-3783), 폴리아민 또는 폴리에틸렌 글리콜 쇄(Mancharan et al., (1995) Nucleoside & Nucleotide, 14, 969-973), 또는 아다만탄 아세트산(Manoharan et al., (1995) Tetrahedron Lett., 36, 3651-3654), 팔미틸 모이어티(Mishra et al., (1995) Biochim. Biophys. Acta, 1264, 229-237), 또는 옥타데실아민 또는 헥실아미노-카르보닐-t 옥시콜레스테롤 모이어티(Crooke et al., (1996) J. Pharmacol. Exp. Ther., 277, 923-937)와 같은 지질 모이어티를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
이와 같은 올리고뉴클레오티드 콘쥬게이트의 제법을 교시하는 대표적인 미국 특허는 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다: US 특허 제4,828,979호; 제4,948,882호; 제5,218,105호; 제5,525,465호; 제5,541,313호; 제5,545,730호; 제5,552,538호; 제5,578,717호, 제5,580,731호; 제5,580,731호; 제5,591,584호; 제5,109,124호; 제5,118,802호; 제5,138,045호; 제5,414,077호; 제5,486,603호; 제5,512,439호; 제5,578,718호; 제5,608,046호; 제4,587,044호; 제4,605,735호; 제4,667,025호; 제4,762,779호; 제4,789,737호; 제4,824,941호; 제4,835,263호; 제4,876,335호; 제4,904,582호; 제4,958,013호; 제5,082,830호; 제5,112,963호; 제5,214,136호; 제5,082,830호; 제5,112,963호; 제5,214,136호; 제5,245,022호; 제5,254,469호; 제5,258,506호; 제5,262,536호; 제5,272,250호; 제5,292,873호; 제5,317,098호; 제5,371,241호; 제5,391,723호; 제5,416,203호; 제5,451,463호; 제5,510,475호; 제5,512,667호; 제5,514,785호; 제5,565,552호; 제5,567,810호; 제5,574,142호; 제5,585,481호; 제5,587,371호; 제5,595,726호; 제5,597,696호; 제5,599,923호; 제5,599,928호 및 제5,688,941호, 이들 각각은 참고문헌에 통합된다.
약물 발견: 본 발명의 화합물은 약물 발견 및 표적 유효화 분야에 적용시킬 수 있다. 본 발명은 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드와 질병 상태, 표현형 또는 조건 사이에 존재하는 상관 관계를 설명하기 위하여 약물 발견 노력에서 여기에서 확인된 화합물의 이용 및 바람직한 표적 단편의 이용을 포함한다. 이들 방법은 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드를 탐지 또는 조절하는 것을 포함하며, 시료, 조직, 세포 또는 유기체를 본 발명의 화합물과 접촉시키고, 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 핵산 또는 단백질 수준을 측정하거나 및/또는 처치후 일정 시간에서 관련된 표현형 또는 화학적 엔드포인트를 측정하고, 그리고 선택적으로 처리안된 샘플의 측정된 값과 본 발명의 화합물로 처리된 화합물의 값을 비교하는 것을 포함한다. 이들 방법은 표적 유효화 프로세스를 위하여 미지의 유전자 기능을 결정하기 위하여, 또는 특정 질환, 상태 또는 표현형의 치료 또는 예방을 위한 표적으로 특정 유전자 산물의 유효성을 결정하기 위한 다른 실험과 나란히 또는 복합하여 실행될 수 있다.
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유전자 발현의 상향 조절 또는 억제의 평가:
외인성 핵산을 숙주 세포 또는 유기체로의 전달은 세포 또는 유기체내 핵산이 존재하는 것을 직접적으로 탐지함으로써 평가될 수 있다. 이와 같은 탐지는 당분야에 공지된 몇 가지 방법에 의해 실현될 수 있다. 예를 들면, 외인성 핵산의 존재는 서든 블랏 또는 핵산과 연합된 뉴클레오티드 서열을 특이적으로 증폭시키는 프라이머를 이용한 폴리메라제 쇄 반응(PCR)에 의해 탐지될 수 있다. 외인성 핵산의 발현은 유전자 발현 분석을 포함하는 통상적인 방법을 이용하여 측정될 수 있다. 예를 들면, 외인성 핵산으로부터 생성된 mRNA는 노던 블랏 또는 역 전사 PCR (RT-PCR)을 이용하여 탐지되고 정량화될 수 있다.
외인성 핵산으로부터의 RNA 발현 또한 효소적 활성 또는 리포터 또는 리포터 단백질 활성을 측정함으로써 탐지될 수 있다. 예를 들면, 외인성 핵산이 효과물질 RNA를 생산하고 있다는 것을 나타내는 것과 같이 표적 핵산 발현에서 증가 또는 감소로써 안티센스 조절 활성을 간접적으로 측정할 수 있다. 서열 보존에 근거하여, 프라이머를 고안하고, 이를 표적 유전자의 코딩 구역을 증폭시키는데 이용할 수 있다. 우선, 각 유전자의 가장 많이 발현된 코딩 구열을 이용하여 모델 기준 유전자를 구축할 수 있는데, 이때 임의의 코딩 또는 넌코딩 구역이 이용될 수 있다. 리포터 코딩 구역과 이의 폴리(A) 신호 사이에 각 코딩 구역을 삽입시켜 각 기준 유전자를 어셈블리한다. 이와 같은 플라스미드는 유전자의 상류 부분에 리포터 유전자를 가지고, 그리고 3' 넌-코딩 구역에 잠재적인 RNAi 표적을 가지는 mRNA를 만든다. 종양 억제제 생성기 유전자를 조절함으로써 개별 안티센스 올리고뉴클레오티드의 효과를 분석할 수 있다. 본 발명의 방법에 유용한 종양 억제제 생성기 유전자는 아세토하이드록시산 합성효소 (AHAS), 알칼리 포스파타제(AP), 베타 갈락토시다제(LacZ), 베타 글루코로니다제(GUS), 클로람페니콜 아세틸전이효소(CAT), 녹색 형광 단백질 (GFP), 적색 형광 단백질 (RFP), 황색 형광 단백질 (YFP), 청록색 형광 단백질 (CFP), 양고추냉이 과산화효소 (HRP), 루시페라제(Luc), 호팔린 합성효소 (NOS), 옥토파인 합성효소 (OCS), 그리고 이들의 유도체들을 포함한다. 암피실린, 블레오마이신, 클로람페니콜, 젠타마이신, 하이그로마이신, 카나마이신, 린코마이신, 메토트렉세이트, 포스피노트리친, 퓨로마이신 및 테트라사이클린에 저항성을 부여하는 다중 선택성 마커가 이용된다. 종양 억제제 생성기 유전자의 조절을 결정하는 방법은 당분야에 공지되어 있으며, 이들 방법은 형광 측정법(가령, 형광 분광학, 형광 활성화된 세포 분류(FACS), 형광 현미경), 항생제 저항성 측정을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
키트, 연구 시약, 진단제 및 치료제
본 발명의 화합물을 진단, 치료 및 예방용으로 이용하거나 연구 시약 및 키트 성분으로 이용할 수 있다. 더욱이, 당업자들은 정교한 특이성으로 유전자 발현을 저해시킬 수 있는 안티센스 올리고뉴클레오티드를 이용하여 특정 유전자의 기능을 밝히거나 또는 생물학적 경로의 다양한 구성부의 기능들을 구별한다.
키트, 진단 그리고 다양한 생물학적 시스템에 사용하기 위하여, 본 발명의 화합물은 단독으로 또는 다른 화합물 또는 치료제와 복합하여, 세포 및 조직에서 발현되는 유전자의 일부 또는 전체의 발현 패턴을 밝히기 위한 차등적 및/또는 복합적 분석에 도구로 유용하다.
여기에서 사용된 것과 같이, 용어 "생물학적 시스템" 또는 "시스템"은 종양 억제 유전자 유전자의 산물들을 발현시키는, 또는 이를 발현시키도록 능력을 갖춘 임의의 유기체, 세포, 세포 배양물 또는 조직으로 정의된다. 시스템에는 인간, 유전자전이 동물, 세포, 세포 배양물, 조직, 이형이식편, 이식물 및 이의 조합을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
비-제한적 실시예로써, 하나 이상의 안티센스 화합물로 처리된 세포 또는 조직에서의 발현 패턴은 안티센스 화합물로 처리안된 기준 세포 또는 조직과 비교되며, 그리고 생성된 패턴은 검사되는 유전자의 질병 연관성, 신호 경로, 세포 국소화, 발현 수준, 크기, 구조 또는 기능에 관련되기 때문에 차등적인 유전자 발현 수준에 대해 분석된다. 자극된 또는 자극되지 않은 세포, 그리고 발현 패턴에 영향을 주는 다른 화합물들의 존부하에 이와 같은 분석들이 실행될 수 있다.
*당분야에 공지된 유전자 발현 분석 방법의 예로는 DNA 어래이 또는 마이크로어래이 (Brazma and Vilo, (2000) FEBS Lett., 2000 480, 17-24; Celis, et al., (2000) FEBS Lett., 480, 2-16), SAGE (유전자 발현의 일련의 분석)(Madden, et al., (2000) Drug Discov. Today, 2000, 5, 415-425), READS (절단된 cDNAs의 제한 효소 증폭) (Prashar and Weissman, (1999) Methods Enzymol., 303, 258-72), TOGA (total gene expression analysis) (Sutcliffe, et al., (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 97, 1976-81), 단백질 어래이 및 단백체학(proteomics) (Celis, et al., (2000) FEBS Lett., 480, 2-16; Jungblut, et al., Electrophoresis, 1999, 20, 2100-10), 발현된 서열 tag (EST) 서열화(Celis, et al., (2000) FEBS Lett., 480, 2-16; Larsson, et al., (2000) J. Biotechnol., 80, 143-57), 차감성 RNA 핑거프린팅 (SuRF) (Fuchs, et al., (2000) Anal. Biochem., 286, 91-98; Larson, et al., (2000) Cytometry, 41, 203-208), 차감성 클로닝, 차등적 디스플레이(DD) (Jurecic and Belmont, (2000) Curr. Opin. mircobiol., 3, 316-21), 비교성 게놈 하이브리드화 (Carulli, et al., (1998) J. Cell Biochem. Suppl., 1998, 31, 286-96), FISH (형광 원위치 하이브리드화) 기술 (Going and Gusterson, (1999) Eur. J. Cancer, 35, 1895-904) 및 대량 분광학 방법(To, Comb. (2000) Chem. High Throughput Screen, 3, 235-41)을 포함한다.
본 발명의 화합물은 이들 화합물이 종양 억제 유전자를 인코드하는 핵산에 하이브리드하기 때문에 연구 및 진단에 유용하다. 예를 들면, 효과적인 종양 억제 유전자 조절물질로써 여기에서 설명되는 조건 및 효과를 가지고 하이브리드되는 올리고뉴클레오티드는 유전자 증폭 또는 탐지에 유리한 조건하에 효과적인 프라이머 또는 프로브다. 이들 프라이머 및 프로브는 종양 억제 유전자를 인코드하는 핵산 분자들의 특이적 탐지를 요구하는 방법 및 종양 억제 유전자 탐지 또는 추가 연구에 유용한 이들 핵산 분자들의 증폭에 유용하다. 당분야에 공지된 방법에 의해 안티센스 올리고뉴클레오티드, 특히, 본 발명의 프라이머 및 프로브와 종양 억제 유전자를 인코드하는 핵산의 하이브리드를 탐지할 수 있다. 이와 같은 수단은 올리고뉴클레오티드에 효소의 콘쥬게이션, 올리고뉴클레오티드의 방사능라벨링 또는 임의의 다른 적합한 탐지 수단을 포함할 수 있다. 샘플에서 종양 억제 유전자의 수준을 탐지하기 위한 탐지 수단을 이용한 키트를 준비할 수 있다.
치료요법적 용도로 당업자는 안티센스의 특이성 및 감응성을 이용한다. 인간을 포함하는 동물의 질병 상태를 치료하는데 치료요법적 모이어티로 안티센스 화합물을 이용하였다. 안티센스 올리고뉴클레오티드 약물은 인간에게 안전하고 효과적으로 투여되었으며, 그리고 다수의 임상 시험이 현재 진행중이다. 따라서, 안티센스 화합물은 세포, 조직 및 동물, 특히 인간의 치료용 치료 섭생에 유용하도록 설정되는 유용한 치료 양식이 될 수 있다.
치료용으로, 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 발현을 조절하여 치료될 수 있는 질환 또는 장애에 민감한 동물, 특히 인간을 본 발명에 따른 안티센스 화합물을 투여함으로써 치료한다. 예를 들면, 한 가지 비-제한적인 구체예에서, 이 방법은 치료를 요하는 동물에게 종양 억제 유전자 조절물질의 치료요법적 효과량을 투여하는 단계를 포함한다. 본 발명의 종양 억제 유전자 조절물질은 종양 억제 유전자 단백질의 활성을 효과적으로 조절하거나 또는 종양 억제 유전자 단백질의 발현을 효과적으로 조절한다. 한 구체예에서, 동물에서 종양 억제 유전자의 활성 또는 발현은 기준과 비교하여 약 10% 저해된다. 바람직하게는, 동물에서 종양 억제 유전자의 활성 또는 발현은 약 30% 저해된다. 더욱 바람직하게는, 동물에서 종양 억제 유전자의 활성 또는 발현은 약 50% 또는 그 이상으로 저해된다. 따라서, 올리고머 화합물은 종양 억제 유전자 mRNA의 발현을 기준과 비교하였을 때 최소한 10%, 최소한 50%, 최소한 25%, 최소한 30%, 최소한 40%, 최소한 50%, 최소한 60%, 최소한 70%, 최소한 75%, 최소한 80%, 최소한 85%, 최소한 90%, 최소한 95%, 최소한 98%, 최소한 99%, 또는 100% 조절한다.
한 구체예에서, 동물에서 종양 억제 유전자의 활성 또는 발현은 기준과 비교하였을 때 약 10% 증가된다. 동물에서 종양 억제 유전자의 활성 또는 발현은 기준과 비교하였을 때 약 30% 증가된다. 더욱 바람직하게는, 동물에서 종양 억제 유전자의 활성 또는 발현은 기준과 비교하였을 때 약 50% 또는 그 이상 증가된다. 따라서, 올리고머 화합물은 종양 억제 유전자 mRNA의 발현을 기준과 비교하였을 때, 최소한 10%, 최소한 50%, 최소한 25%, 최소한 30%, 최소한 40%, 최소한 50%, 최소한 60%, 최소한 70%, 최소한 75%, 최소한 80%, 최소한 85%, 최소한 90%, 최소한 95%, 최소한 98%, 최소한 99%, 또는 100% 조절한다.
예를 들면, 종양 억제 유전자의 발현 환원은 혈청, 혈액, 지방 조직, 간 또는 임의의 기타 체액, 동물의 조직 또는 기관에서 측정될 수 있다. 바람직하게는, 분석될 체액, 조직 또는 기관에 포함된 세포는 종양 억제 유전자 펩티드를 인코드하는 핵산 분자 및/또는 종양 억제 유전자 단백질 자체를 포함한다.
본 발명의 화합물들은 적절한 약리학적으로 허용가능한 희석제 또는 캐리어에 효과량의 화합물을 첨가하여 약학 조성물로 이용될 수 있다. 본 발명의 화합물의 용도 및 방법은 예방학적으로 유용하다.
콘쥬게이트(Conjugates)
본 발명의 올리고뉴클레오티드의 또 다른 변형은 올리고뉴클레오티드의 활성, 세포 분포 또는 세포 취입을 강화시키는 하나 이상의 모이어티 또는 콘쥬게이트에 올리고뉴클레오티드를 화학적으로 연결시키는 것을 포함한다. 이와 같은 모이어티 또는 콘쥬게이트는 1차 또는 2차 하이드록시기와 같은 기능기에 공유적으로 결합된 콘쥬게이트기를 포함한다. 본 발명의 콘쥬게이트기는 삽입자, 종양 억제제 생성기 분자들, 폴리아민, 폴리아미드, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리에테르, 올리고머의 약력학 성질을 강화시키는 기, 그리고 올리고머의 약동학 성질을 강화시키는 기를 포함한다. 일반적인 콘쥬게이트기는 콜레스테롤, 지질, 인지질, 바이오틴, 페나진, 폴레이트, 페탄트리딘, 안트라퀴논, 아크리딘, 플루오레세인, 로다민, 쿠마린 및 염료를 포함한다. 본 발명의 내용에서 올리고머의 약력학 성질을 강화시키는 기는 취입을 개선시키고, 분해에 저항성을 강화시키고, 및/또는 표적 핵산과 서열 특이적 하이브리드를 강화시키는 기들을 포함한다. 본 발명의 내용에서 올리고머의 약동학 성질을 강화시키는 기는 본 발명의 화합물의 취입, 분포, 대사 또는 배출을 개선시키는 기들을 포함한다. 대표적인 콘쥬게이트 기는 국제 특허 출원 PCT/US92/09196 (1992년 10월 23일 출원) 및 U.S. 특허 제6,287,860호에서 설명되며, 참고문헌에 통합된다. 콘쥬게이트 모이어티는 콜레스테롤 모이어티, 콜린산, 티오에테르, 가령, 헥실-5-트리틸티올, 티오콜레스테롤, 지방족 쇄, 가령, 도데칸디올 또는 운데실 잔기, 인지질 가령, 디-헥사데실-rac-글리세롤 또는 트리에틸암모늄 1,2-디-O-헥사데실-rac-글리세로-3-H포스포네이트, 폴리아민 또는 폴리에틸렌 글리콜, 쇄 또는 마다만탄 아세트산, 팔미틸 모이어티, 또는 옥타데실아민 또는 헥실아미노-카르보닐-옥시콜레스테롤 모이어티와 같은 지질 모이어티를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 올리고뉴클레오티드는 활성 약물 물질, 예를 들면, 아스피린, 와르파린, 페닐부타존, 이부프로펜, 수프로펜, 펜부펜, 케토프로펜, (S)-(+)-프라노프로펜, 카르프로펜, 단실사르코신, 2,3,5-트리요호드벤조산, 풀루페나민산, 폴린산, 벤조티아디아지드, 클로로티아지드, 디아제핀, 인도메티신, 바르비투레이트, 세팔로스포린, 술파 약물, 당뇨병치료제, 항균제 또는 항생제에 콘쥬게이트될 수도 있다.
이와 같은 올리고뉴클레오티드 콘쥬게이트의 제조를 교시하는 대표적인 미국 특허는 U.S. 특허 제4,828,979호; 제4,948,882호; 제5,218,105호; 제5,525,465호; 제5,541,313호; 제5,545,730호; 제5,552,538호; 제5,578,717호; 제5,580,731호; 제5,580,731호; 제5,591,584호; 제5,109,124호; 제5,118,802호; 제5,138,045호; 제5,414,077호; 제5,486,603호; 제5,512,439호; 제5,578,718호; 제5,608,046호; 제4,587,044호; 제4,605,735호; 제4,667,025호; 제4,762,779호; 제4,789,737호; 제4,824,941호; 제4,835,263호; 제4,876,335호; 제4,904,582호; 제4,958,013호; 제5,082,830호; 제5,112,963호; 제5,214,136호; 제5,082,830호; 제5,112,963호; 제5,214,136호; 제5,245,022호; 제5,254,469호; 제5,258,506호; 제5,262,536호; 제5,272,250호; 제5,292,873호; 제5,317,098호; 제5,371,241호; 제5,391,723호; 제5,416,203호, 제5,451,463호; 제5,510,475호; 제5,512,667호; 제5,514,785호; 제5,565,552호; 제5,567,810호; 제5,574,142호; 제5,585,481호; 제5,587,371호; 제5,595,726호; 제5,597,696호; 제5,599,923호; 제5,599,928호 및 제5,688,941호을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
제제(Formulations)
본 발명의 화합물은 다른 분자들, 화합물의 분자 구조 또는 혼합물, 예를 들면, 리포좀, 수용체-표적화된 분자들, 흡수(uptake), 분포 및/또는 흡수를 지원하는 경구, 직장, 국소 또는 기타 제제와 혼합, 포집, 콘쥬게이트 또는 연합될 수 있다. 취입, 분포 및/또는 흡수-지원 제제를 만드는 방법을 교시하는 대표적인 미국 특허는 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다: U.S. 특허 제5,108,921호; 제5,354,844호; 제5,416,016호; 제5,459,127호; 제5,521,291호; 제5,543,165호; 제5,547,932호; 제5,583,020호; 제5,591,721호; 제4,426,330호; 제4,534,899호; 제5,013,556호; 제5,108,921호; 제5,213,804호; 제5,227,170호; 제5,264,221호; 제5,356,633호; 제5,395,619호; 제5,416,016호; 제5,417,978호; 제5,462,854호; 제5,469,854호; 제5,512,295호; 제5,527,528호; 제5,534,259호; 제5,543,152호; 제5,556,948호; 5,580,575호; 및 5,595,756호, 이들 각각은 참고문헌에 통합된다.
비록 안티센스 올리고뉴클레오티드는 표적 발현 및/또는 기능을 조절하기 위하여 벡터로 투여할 필요는 없지만, 본 발명의 구체예는 안티센스 올리고뉴클레오티드의 발현을 위한 발현 벡터 구조체에 관계하는데, 이 벡터 구조체는 프로모터, 하이브리드 프로모터 유전자 서열들를 포함하며, 그리고 강력한 구성 프로모터 활성 프로모터 활성 또는 원하는 경우 유도될 수 있는 프로모터 활성을 보유한다.
구체예에서, 본 발명은 적절한 핵산 운반 시스템와 함께 전술한 안티센스 올리고뉴클레오티드중 최소한 하나를 투여하는 것을 포함한다. 한 구체예에서, 이 시스템은 폴리뉴클레오티드에 작용가능하도록 링크된 비-바이러스 벡터를 포함한다. 이와 같은 비-바이러스 벡터의 예는 올리고뉴클레오티드 만을 포함하거나(가령 서열 번호: 16 내지 36 중 임의의 하나 이상) 또는 적합한 단백질, 폴리사카라이드 또는 지질 제제와 복합된 것을 포함한다.
추가로 적합한 핵산 운반 시스템은 바이러스 벡터를 포함하는데, 일반적으로 아데노바이러스, 아데노바이러스-연합된 바이러스(AAV), 헬퍼-의존성 아데노바이러스, 레트로바이러스 또는 Japan-리포좀 (HVJ) 복합체의 헤마글루티닌 바이러스중 최소한 하나로부터 서열을 포함한다. 바람직하게는, 바이러스 벡터는 폴리뉴클레오티드에 작용가능하도록 링크된 강력한 진핵 프로모터 가령, 사이토메갈로바이러스 (CMV) 프로모터를 포함한다.
추가적으로 바람직한 벡터는 바이러스 벡터, 융합 단백질 및 화학적 콘쥬게이트를 포함한다. 레트로바이러스 벡터는 Moloney 뮤린 백혈병 바이러스 및 HIV-계 바이러스를 포함한다. 한 가지 바람직한 HIV-계 바이러스 벡터는 최소한 두 개 벡터를 포함하는데, gag 및 pol 유전자는 HIV 게놈의 것이며, env 유전자는 또 다른 바이러스에서 유래된 것이다. DNA 바이러스 벡터가 바람직하다. 이들 벡터들은 오소폭스(orthopox) 또는 아비폭스(avipox) 벡터와 같은 폭스 벡터, 허피스바이러스 벡터 예를 들면, 허피스 심플렉스 I 바이러스(HSV) 벡터(Geller, A.I. et al., (1995) J. Neurochem, 64: 487; Lim, F., et al., in DNA Cloning: Mammalian Systems, D. Glover, Ed. (Oxford Univ. Press, Oxford England) (1995); Geller, A.I. et al., (1993) Proc Natl. Acad. Sci.: U.S.A.:90 7603; Geller, A.I., et al., (1990) Proc Natl. Acad. Sci USA: 87:1149], Adenovirus Vectors [LeGal LaSalle et al., Science, 259:988 (1993); Davidson, et al., (1993) Nat. genet. 3: 219 ; Yang, et al., (1995) J. Virol. 69: 2004 ) 및 아데노-연합된 바이러스 벡터(Kaplitt, M.G., et al., (1994) Nat. genet. 8:148)를 포함한다.
본 발명의 안티센스 화합물은 임의의 약리학적으로 수용가능한 염, 에스테르 도는 이와 같은 에스테르의 염, 또는 인간을 포함하는 동물에게 투여시 생물학적 활성 대사물질 또는 이의 잔기를 직간접적으로 제공할 수 있는 임의의 다른 화합물을 포함한다.
용어 "약리학적으로 허용가능한 염"은 본 발명의 화합물의 생리학적 그리고 약리학적으로 허용가능한 염을 지칭하는데, 가령, 부모 화합물의 바람직한 생물학적 활성을 보유하지만, 화합물에 바람직하지 못한 독성 효과를 부여하지 않는 염을 말한다. 올리고뉴클레오티드의 경우, 약리학적으로 허용가능한 염의 바람직한 예시 및 이의 용도는 U.S. 특허 제6,287,860호에서 추가 설명되고 있으며, 이는 참고문헌에 통합된다.
본 발명은 본 발명의 안티센스 화합물을 포함하는 약학 조성물 및 제제를 포함한다. 본 발명의 약학 조성물은 국소 또는 전신 치료가 바람직한지 그리고 치료될 부위에 따라 여러 방법으로 투여될 수 있다. 투여는 국소(눈, 질 및 직장 운반을 포함하는 점막 포함), 네블리라이즈를 포함하여 분말 또는 에어로졸의 흡입 또는 들여마시는 것을 통하여 폐; 기관내(intratracheal), 비강, 상피 또는 경피, 구강 또는 장관외가 될 수 있다. 장관외(Parenteral) 투여는 정맥, 동맥내, 피하, 복막 또는 근육 주사 또는 주입; 또는 두개내(intracranial), 가령, 수막강내 또는 뇌실내 투여를 포함한다. 최소한 하나의 2'-O-메톡시에틸 변형을 가진 올리고뉴클레오티드는 경구 투여용으로 특히 유용한다. 국소 투여를 위한 약학 조성물 및 제제는 경피 패취, 연고, 로션, 크림, 겔, 드롭, 좌약, 스프레이, 액상 및 분말을 포함한다. 통상적인 약리학적으로 캐리어, 수용성, 분말 또는 오일 베이스, 농후제 그리고 이와 유사한 것이 필수적이거나 바람직할 수 있다. 피복된 콘돔, 장갑 그리고 이와 유사한 것이 유용할 수 있다.
본 발명의 약학 제제는 통상적으로 단위 약형으로 제공될 수 있는데, 이는 약학 산업분야에 공지된 기술에 따라 제조될 수 있다. 이와 같은 기술은 활성 성분들을 약학적 캐리어 또는 부형제와 연합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제제는 활성 성분들을 액상 캐리어 또는 미세하게 분할된 캐리어 또는 이들 모두와 연합되도록 하고, 그 다음 필요에 따라 산물의 모양을 만들어 제조할 수 있다.
본 발명의 조성물은 정제, 캡슐, 겔 캡슐, 액체 시럽, 연질 겔, 좌약 및 관장제를 포함하나 이에 한정되지 않는 많은 가능한 약형으로 제조될 수 있다. 본 발명의 조성물은 액상, 비-액상 또는 혼합형 매질에 현탁액으로 조제될 수 있다. 수용성 현탁액은 카르복시메틸셀룰로오즈, 솔비톨 및/또는 덱스트란을 포함하는 현탁액의 점성을 증가시키는 물질을 더 포함할 수 있다. 현탁액은 안정화제를 포함할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 용액, 에멸젼, 리포좀-함유 조제물을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 약학 조성물 및 제제는 하나 이상의 침투 강화제, 캐리어, 부형제 또는 기타 활성 또는 비활성 성분을 포함할 수 있다.
에멸젼은 일반적으로 액체에 0.1 μm를 초과하는 방울의 형태로 분산된 또 다른 액체로 구성된 이종(heterogeneous) 시스템이다. 에멸젼은 분산된 상에 추가하여 추가 성분, 그리고 수용성 상, 오일상 또는 별도의 상에 용액으로 존재하는 활성 성분을 포함할 수 있다. 본 발명의 구체예로 마이크로에멸젼이 포함된다. 에멸젼 및 이의 용도는 당분야에 공지되어 있으며, U.S. 특허 제6,287,860호에서 추가 설명된다.
본 발명의 제제는 리포좀 제제를 포함한다. 본 발명에 이용된 것과 같이, 용어 "리포좀"은 구형 이중층 또는 이중층에 배열된 양쪽성 지질로 구성된 소포를 말한다. 리포좀은 단층라멜라 또는 다층라멜라로 친지성 물질로 형성된 막과 운반될 조성물을 포함하는 수용성 내부를 가진다. 양이온성 리포좀은 안정한 복합체를 형성하기 위하여 음전하를 띈 DNA 분자들과 상호작용하는 것으로 보이는 양전하를 띈 리포좀이다. pH-민감성 또는 음전하를 띈 리포좀은 복합체보다는 DNA를 포집하는 것으로 간주된다. 양이온성 및 비-양이온성 리포좀은 세포로 DNA을 운반하는데 이용된다.
리포좀은 또한 “공간적으로 안정화된” 리포좀을 포함하는데, 여기에서 사용된 이 용어는 하나 이상의 특화된 지질을 포함하는 리포좀을 말한다. 리포좀에 통합되었을 때, 이와 같은 특화된 지질은 이와 같은 특화된 지질이 없는 리포좀과 비교하였을 때 순환 반감기가 강화된 리포좀을 만든다. 공간적으로 안정화된 리포좀의 예는 리포좀의 소포-형성된 지질 부분이 하나 이상의 글리코리피드를 포함하거나 또는 하나 이상의 친지성 폴리머, 가령, 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 모이어티로 유도화된 것들이다. 리포좀 및 이의 용도는 U.S. 특허 제6,287,860호에서 설명되고 있다.
본 발명의 약학 제제 및 조성물은 계면활성제 또한 포함할 수 있다. 약물, 제제 및 에멸젼에서 계면활성제의 이용은 당분야에 잘 공지되어 있다. 계면활성제 및 이의 용도는 U.S. 특허 제6,287,860호에서 추가 설명되고 있으며, 이는 참고문헌에 통합된다.
한 구체예에서, 본 발명은 핵산, 특히 올리고뉴클레오티드의 효과적인 운반을 위하여 다양한 침투 강화제를 이용한다. 세포 막을 가로질러 비-친지성 약물의 융합을 지원하는 것에 추가하여, 침투 강화제는 또한 친지성 약물의 침투성을 강화시킨다. 침투 강화제는 계면활성제, 지방산, 담즙산, 킬레이트제 그리고 비-킬레이트 비-계면활성제로 된 5가지 넓은 범주중 하나에 속하는 것으로 분류될 수 있다. 침투 강화제 및 이의 용도는 U.S. 특허 제6,287,860호에서 추가 설명되고 있으며, 이는 참고문헌에 통합된다.
당업자는 제제는 투여 경로와 같은 이들의 의도된 용도에 따라 통상적으로 기획된다는 것을 인지할 것이다.
본 발명의 올리고뉴클레오티드와 국소 운반제가 혼합된 국소 투여용 바람직한 제제가 포함되는데, 국소 운반제는 지질, 리포좀, 지방산, 지방산 에스테르, 스테로이드, 킬레이트제 및 계면활성제등이 된다. 바람직한 지질 및 리포좀은 중성(가령, 디올레일-포스파티딜 DOPE 에탄올아민, 디미리스토일포스파티딜 콜린 DMPC, 디스테아로일포스파티딜 콜린), 음성(가령, 디미리스토일포스파티딜 글리세롤 DMPG) 및 양이온(가령, 디올레일테트라메틸아미노프로필 DOTAP 및 디올레일-포스파티딜 에탄올아민 DOTMA)을 포함한다.
국소 또는 기타 투여용으로, 본 발명의 올리고뉴클레오티드는 리포좀내에 포집되거나 양이온 리포좀에 복합체를 형성할 수 있다. 대안으로, 올리고뉴클레오티드는 지질, 특히, 양이온 지질에 복합될 수 있다. 바람직한 지방산 및 에스테르, 이의 약리학적으로 허용가능한 염 그리고 이들의 용도는 U.S. 특허 제6,287,860호에서 추가 설명되어 있다.
경구 투여용 조성물 및 제제는 분말 또는 과립, 미립자, 나노입자, 물 또는 비-수용성 매질에서의 현탁액 또는 용액, 캡슐, 겔 캡슐, 사셋, 태블릿 도는 미니테블릿을 포함한다. 농후제, 향료, 희석제, 에멸젼화제, 분산 보조제 또는 결합제가 바람직할 수 있다. 바람직한 경구 제제는 본 발명의 올리고뉴클레오티드와 하나 이상의 침투 강화제, 계면활성제 및 킬레이터와 함께 투여되는 것들이다. 바람직한 계면활성제는 지방산 및/또는 이의 에스테르 또는 염, 담즙산 및/또는 이의 염을 포함한다. 바람직한 담즙산/염 그리고 지방산 및 이의 용도들은 U.S. 특허 제 6,287,860호에서 추가 설명되고 있으며, 이는 참고문헌에 통합된다. 침투 강화제, 예를 들면, 지방산/염과 담즙산/염의 복합 또한 바람직하다. 특히 바람직한 조합은 라우르산, 카프리산 및 UDCA의 나트륨염이다. 추가 침투 강화제는 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에테르, 폴리옥시에틸렌-20-세틸 에테르를 포함한다. 본 발명의 올리고뉴클레오티드는 분무된 건조 과립을 포함하는 과립형으로 경구로 운반될 수 있고, 또는 미립자 또는 나노입자를 형성하기 위하여 복합될 수 있다. 올리고뉴클레오티드 복합제 및 이의 용도는 U.S. 특허 제6,287,860호에 추가 설명되어 있으며, 이는 참고문헌에 통합된다.
장관외, 기관내 또는 심실내 투여를 위한 조성물 및 제제는 완충액, 희석액 및 기타 적합한 첨가제(침투 강화제, 캐리어 화합물 및 기타 약리학적으로 허용가능한 캐리어 또는 부형제를 포함하나 이에 한정되지 않음)을 포함하는 멸균 수용액을 포함할 수 있다.
본 발명의 특정 구체예는 하나 이상의 올리고머 화합물 및 항-안티센스 기전에 의해 기능을 하는 하나 이상의 다른 치료제를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 이와같은 화학요법제의 예로는 다우노루비신, 다우노마이신, 닥티노마이신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 에소루비신, 블레오마이신, 마포스파미드, 이포스파미드, 시토신 아라비노시드, 비스클로로에틸-니트로조우레아, 부술판, 미토마이신 C, 악티노마이신 D, 미트라마이신, 프레드니손, 하이드록시프로게스테론, 테스토스테론, 탐옥시펜, 다카르바진, 프로카르바진, 헥사메틸멜라민, 펜타메틸멜라민, 미토산트론, 암사크린, 클로람부칠, 메틸사이클로헥실니트로조우레아, 질소 무스타드, 멜파란, 사이클로포스파미드, 6-멀캅토퓨린, 6-티오구아닌, 시타라빈, 5-아자시티딘, 하이드록시우레아, 데옥시코포르미신, 4-하이드록시퍼옥시사이클로-포스포라미드, 5-플루오르우라실 (5-FU), 5-플루오르데옥시우리딘(5-FUdR), 메토트렉세이트(MTX), 콜치신, 탁솔, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 에토포시드(VP-16), 트리메트레세이트, 이리노테칸, 포토테칸, 겜시타빈, 테니포시드, 시스플라틴 및 디에틸스틸베스트롤(DES)과 같은 암 화학치료 약물을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 화합물과 함께 이용되면, 이와 같은 화학요법제는 개별적으로 (가령, 5-FU 및 올리고뉴클레오티드), 연속적으로(가령, 일정 시간동안 5-FU 및 올리고뉴클레오티드, 그 다음 MTX 및 올리고뉴클레오티드), 또는 하나 이상의 다른 화학요법제(가령, 5-FU, MTX 및 올리고뉴클레오티드, 또는 5-FU, 방사능요법 및 올리고뉴클레오티드)와 병용하여 이용될 수 있다. 비-스테로이드성 소염제를 포함하나 이에 한정되지 않는 소염제 약물 그리고 코르티코스테로이드, 항바이러스 약물(리비비린, 비다라빈, 아시클로비르 및 강시클로비르를 포함하나 이에 한정되지 않는)이 본 발명의 조성물에 복합될 수 있다. 안티센스 화합물 및 다른 비-안티센스 약물의 복합 또한 본 발명의 범위안에 있다. 두 개 이상의 복합 화합물이 함께 또는 연속적으로 이용될 수 있다.
다른 관련된 구체예에서, 본 발명의 조성물은 하나 이상의 안티센스 화합물, 특히 제1핵산을 표적으로 하는 올리고뉴클레오티드 그리고 제 2 핵산 표적을 표적으로 하는 하나 이상의 추가 안티센스 화합물을 포함한다. 예를 들면, 제1 표적은 종양 억제 유전자의 특정 안티센스 서열이 되며, 그리고 제 2 표적은 또 다른 뉴클레오티드 서열의 구역이 될 수 있다. 대안으로, 본 발명의 조성물은 동일한 종양 억제 유전자핵산 표적의 상이한 구역을 표적으로 하는 두 개이상의 안티센스 화합물을 포함할 수 있다. 다양한 안티센스 화합물의 예들이 여기에서 설명되며, 기타 화합물들은 당분야에 공지된 적합한 화합물들 중에서 선택될 수 있다. 두 개 이상의 복합 화합물이 함께 또는 연속적으로 이용될 수 있다.
약액주입(Dosing):
치료 조성물의 제제 및 이의 후속적인 투여(약액주입)은 당분야의 기술에 속한다. 약액주입은 수 일 내지 수개월 지속되는 치료 과정, 또는 치료 효과 또는 질병 상태의 감소가 수득되는 날까지의 치료 과정과 함께 치료될 질병 상태의 중증도, 반응성에 따라 달라진다. 최적의 약액주입 일정은 환자의 신체에 약물 축적 측량으로부터 계산될 수 있다. 당업자는 최적의 주입량, 방법 및 반복률을 용이하게 결정할 수 있다. 최적의 약량은 개별 올리고뉴클레오티드의 상대적 효능에 따라 다양해질 수 있으며, 그리고 일반적으로 시험관 및 생체내 동물 모델에서 효과가 발견되는 EC50에 근거하여 예측된다. 일반적으로, 투약량은 체중 kg당 0.01㎍ 내지 100 g이 되며, 매일, 주단위, 월단위 또는 년단위로 한번 또는 4년 내지 30년마다 한번씩 제공될 수 있다. 당업자는 측정된 잔류 시간 및 체액 또는 조직에서 약물의 농도에 근거하여 약액주입에 대한 반복률을 용이하게 결정할 수 있을 것이다. 성공적인 처치후, 질병 상태의 재발을 방지하기 위하여 환자가 유지요법을 받도록 하는 것이 바람직하며, 이때 올리고뉴클레오티드는 체중 kg당 0.01 ㎍ 내지 100 g 범위의 유지 약량으로, 하루에 1회 이상 내지 매 20년마다 1회로 투여된다.
본 발명의 다양한 구체예들이 상기에서 설명되었는데, 이는 예를 든 것이며, 이에 한정되지 않음을 인지해야 한다. 본 발명의 범위 또는 사상을 벗어나지 않고, 본 발명의 내용에 따라 설명된 구체예에 대해 여러 변화가 만들어질 수 있다. 따라서, 본 발명의 범위는 상기 설명된 임의의 구체예에 한정되어서는 안된다.
여기에서 언급된 모든 문헌들은 참고문헌에 통합된다. 본 출원에서 언급된 모든 공고 및 특허 문헌은 각 공개 또는 특허 문헌이 개별적으로 언급된 것과 같은 수준으로 모든 목적을 위하여 참고문헌에 통합된다. 본 서류에 다양한 참고문헌에서, 출원인은 이들을 본 발명의 “선행 기술”로 인정하지 않는다. 본 발명의 조성물 및 방법의 구체예는 다음의 실시예에서 설명된다.
실시예
다음의 비-제한적 실시예는 본 발명의 선택된 구체예들을 설명하는 것이다. 나타낸 성분들에서 비율의 변화 및 대체 성분은 당업자에 자명하며, 본 발명의 구체예의 범위내에 있다.
실시예 1:
종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드의 센스 및/또는 안티센스 가닥에 대한 핵산 분자 안티센스에 특이적인 안티센스 올리고뉴클레오티드의 기획
상기에서 명시된 것과 같이, 용어 "~특이적인 올리고뉴클레오티드" 또는 "올리고뉴클레오티드 표적"은 (i) 표적 유전자의 부분과 안정적인 복합체를 형성할 수 있는, 또는 (ii) 표적 유전자의 mRNA 전사체의 일부분과 안정적인 듀플렉스를 형성할 수 있는 서열을 가진 올리고뉴클레오티드를 말한다.
적절한 올리고뉴클레오티드의 선택은 핵산 서열들을 자동으로 배열하고, 동일 또는 동사체 구열을 표시하는 컴퓨터 프로그램을 이용하여 실사한다. 이와 같은 프로그램을 이용하여 GenBank와 같은 데이터베이스를 조사하거나 또는 PCR 산물들을 서열화하여 수득된 핵산 서열들을 비교한다. 특정 종 범위로부터 핵산 서열을 비교하면, 종간에 적절한 동일성 수준을 나타내는 핵산을 선택할 수 있다. 유전자사 서열화안된 경우, 서든 블랏을 실시하여 표적 종과 다른 종의 유전자 사이에 동일성 수준을 결정한다. 다양한 엄격성 수준에서 서든 블랏을 실시함으로써, 당분야에 공지된 바와 같이, 적절한 동일성 수준을 얻을 수 있다. 이 과정에 의해 조절되어야 할 개체에서 표적 핵산 서열에 대해서는 높은 수준의 상보성을 나타내고, 그리고 다른 종의 대응하는 핵산 서열들에 대해서는 낮은 수준의 상보성을 나타내는 올리고뉴클레오티드의 선택이 허용된다. 당업자는 본 발명에 사용하기 위한 유전자의 적절한 구역을 선택하는 것에 상당한 허용범위가 있다는 것을 인지할 것이다.
안티센스 화합물은 표적 핵산에 화합물이 결합하여, 표적 핵산의 정상적인 기능을 간섭하여 기능 및/또는 활성이 조절되어 “특이적으로 하이브리드가능하며”, 그리고 특이적 결합이 바람직한 조건들, 가령, 생체 분석 또는 치료요법적 처치의 경우 생리학적 조건, 또는 분석이 시험관 분석으로 실행되는 경우의 조건하에서 비-표적 핵산 서열에 안티센스 화합물의 비-특이적 결합을 회피할 수 있도록 충분한 수준의 상보성이 있다.
여기에서 설명된 올리고뉴클레오티드의 하이브리드화 성질은 당분야에 공지된 하나 이상의 시험관 분석에 의해 결정될 수 있다. 예를 들면, 여기에서 설명된 올리고뉴클레오티드의 성질은 용융 곡선 분석(Melting curve assay)을 이용하여 표적 천연 안티센스와 잠재적인 약물 분자들 사이에 결합 강도를 측정함으로써 수득될 수 있다.
표적 천연 안티센스와 잠재적인 약물 분자(Molecule) 사이에 결합 강도는 용융 곡선 분석과 같은 분자간 상호작용의 강도를 측정하는 확립된 방법중 임의의 것을 이용하여 예측될 수 있다.
용융 곡선 분석은 천연 안티센스/분자 복합체에서 이중 가닥으로부터 단일 가닥 형태로 신속하게 전이가 일어나는 온도를 결정한다. 이 온도는 두 개 분자 사이에 상호작용 강도의 신뢰성있는 척도로 광범위하게 인정된다.
용융 곡선 분석은 실제 천연 안티센스 RNA 분자 또는 분자의 결합 부위에 상응하는 합성 DNA 또는 RNA 뉴클레오티드의 cDNA 복사체를 이용하여 실시된다. 이 분석을 실행하기 위하여 모든 필수 시약을 포함하는 다중 키트를 이용한다(가령 Applied Biosystems Inc. MeltDoctor kit). 이들 키트들은 이중 가닥 DNA (dsDNA) 결합 염료 (가령, ABI HRM 염료, SYBR Green, SYTO, 등) 중 하나를 포함하는 적절한 완충액을 포함한다. dsDNA 염료의 성질은 이들이 자유형에서는 형광을 방출하지 않지만, dsDNA에 결합되면 상당한 형광성이라는 것이다.
이 분석을 실행하기 위하여, cDNA 또는 대응하는 올리고뉴클레오티드를 특정 제조업자의 프로토콜에 명시된 농도에서 분자와 혼합시킨다. 혼합물을 95℃로 가열시켜, 모든 미리-형성된 dsDNA 복합체를 해리시키고, 그 다음 실온으로 서서히 냉각시키거나 또는 키트 제조업자가 정한 다른 낮은 온도로 냉각시켜, DNA 분자들이 어닐(anneal)되도록 한다. 새로 형성된 복합체를 다시 95℃ 가열시키고, 반응에 의해 생성된 형광물질의 양에 대한 데이터를 동시에 수집한다. 형광 강도는 반응에 존재하는 dsDNA의 양에 역비례한다. 키트에 사용가능한 실시간 PCR 장비(가령 ABI’s STumore Suppressor genene Plus 실시간 PCR 시스템 또는 LightTyper instrument, Roche Diagnostics, Lewes, UK)를 이용하여 데이터를 수거할 수 있다.
적합한 소프트웨어(예를 들면, LightTyper (Roche) 또는 SDS Dissociation Curve, ABI)를 이용하여 온도(x-축)에 대해 온도에 따른 형광물질의 네가티브 유도체를 플롯팅하여(y축상에 -d(Fluorescence)/dT) 용융 피크를 만든다. dsDNA 복합체에서 단일 가닥 분자들로의 신속한 전이 온도를 확인하기 위하여 데이터를 분석한다. 이 온도를 Tm 이라고 하며, 두 분자간의 상호작용 강도에 직접적으로 비례한다. 일반적으로, Tm은 40℃를 넘는다.
실시예 2: 종양 억제 유전자 폴리뉴클레오티드 유전자 발현의 조절
HepG2 세포를 네이키드 안티센스 올리고뉴클레오티드로 처리:
ATCC (cat# HB-8065)의 HepG2 세포를 37℃, 5% CO2에서 성장 배지(MEM/EBSS (Hyclone cat #SH30024, 또는 Mediatech cat # MT-10-010-CV) +10% FBS (Mediatech cat# MT35-011-CV)+ 페니실린/스트렙토마이신(Mediatech cat# MT30-002-CI))에서 성장시켰다. 실험 하루전, 세포는 1.5×105/㎖의 농도로 6개 웰 플레이트에 재도말시키고, 37℃, 5% CO2에서 항온처리하였다. 실험 당일, 6개 웰 플레이트에 있는 배지는 새로운 성장 배지로 대체하였다. 모든 안티센스 올리고뉴클레오티드를 20 μM의 농도가 되도록 물에 희석시켰다. 이 용액 2 ㎕를 400 ㎕의 Opti-MEM 배지 (Gibco cat#31985-070) 및 4 ㎕의 Lipofectamine 2000 (Invitrogen cat# 11668019)와 실온에서 20분간 혼합시키고, HepG2 세포가 있는 6개 웰 플레이트의 각 웰에 제공하였다. 올리고뉴클레오티드 용액 대신 물 2㎕를 포함하는 유사한 혼합물을 허위-처리된 기준으로 이용하였다. 37℃, 5% CO2에서 3-18시간 동안 항온처리후, 배지를 새로운 성장 배지로 교환하였다. 안티센스 올리고뉴클레오티드를 추가시킨 후 48시간 후, 배지를 제거하였고, SV Total RNA Isolation 시스템(Promega (cat # Z3105)) 또는 RNeasy Total RNA Isolation 키트(Qiagen (cat# 74181))를 이용하여 제조업자의 지시에 따라 세포로부터 RNA를 추출하였다. 600 ng의 RNA를 Verso cDNA 키트 (Thermo Scientific (cat#AB1453B)) 또는 High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit(cat# 4368813)를 이용하여 제조업자의 프로토콜에 따라 실시된 역전사 반응에 첨가하였다. 이와 같은 역전사 반응에서 cDNA를 이용하여 ABI Taqman gene Expression Mix (cat#4369510) 및 ABI에서 기획한 프라이머/프로브을 이용하여 실시간 PCR에 의해 유전자 발현을 모니터하였다. 다음과 같은 PCR 주기가 이용되었다: 50℃ 2분, 95℃ 10분, StepOne Plus Real Time PCR Machine(Applied Biosystems Inc. 또는 Mx4000 열 사이클러(Stratagene))을 이용하여 [95℃ 15초, 60℃ 1분]을 40회.
처리된 샘플과 위장-처리된 샘플간에 18S-표준화된 dCt 값에서 차이에 근거하여 안티센스 올리고뉴클레오티드로 처리후 유전자 발현에서 폴드 변화가 계산되었다.
p73 이용된 발현 분석(ABI cat#s), MGB와 모든 프로브
p73: Hs00232088_ml (표적 서열 ACCTCTGGAGCTCTCTGGAAC, 엑손 2 서열 번호: 41)
p73as: Hs00215135_ml (표적 서열 TATGATGGAAAGGTGCGCATCCTTA, 엑손 7 서열 번호: 42) 및 Hs00892470_g1
결과:
실시간 PCR 결과에서, HepG2 세포에서 종양 억제 유전자 mRNA 수준은 종양 억제 유전자 (종양 억제 유전자 _1, P=0.02, 및 종양 억제 유전자 _2, P=0.04, 도 1a)에 대한 siRNA중 두 개로 처리한 후 48시간에 상당히 증가되었다는 것을 보여준다. 동일한 시료에서 종양 억제 유전자 RNA는 종양 억제 유전자에 대한 siRNA로 처리한 후 감소되었다(도 1b).
실시간 PCR 결과에서, HepG2 세포에서 종양 억제 유전자 mRNA 수준은 종양 억제 유전자 안티센스 Hs.668503에 대해 기획된 oligo중 두 개와 종양 억제 유전자 안티센스 Hs.674463에 대해 기획된 oligo중 한 개로 처리한 후 48시간에 상당히 증가되었다는 것을 보여준다.
실시간 PCR 결과에서, HepG2 세포에서 PTEN mRNA 수준은 PTEN 안티센스 hs.624903에 대해 기획된 oligo중 한 개로 처리한 후 48시간에 상당히 증가되었다는 것을 보여준다. (탐지 프로브: Applied Biosystems Taqman Gene Expression Assay: Hs02621230_s1)
TM4 세포를 안티센스 올리고뉴클레오티드로 처리:
Vero76 세포[ATCC (cat# CRL-1715)]를 37℃, 5% CO2에서 (MEM/EBSS (Hyclone cat #SH30024, 또는 Mediatech cat # MT-10-010-CV) +10% FBS (Mediatech cat# MT35-011-CV)+페니실린/스트렙토마이신(Mediatech cat# MT30-002-CI)에서 성장시켰다. 실험 하루전, 세포는 1.5×105/㎖의 농도로 6개 웰 플레이트에 재도말시키고, 37℃, 5% CO2에서 항온처리하였다. 실험 당일, 6개 웰 플레이트에 있는 배지는 새로운 성장배지로 대체하였다. 모든 안티센스 올리고뉴클레오티드를 20 μM의 농도가 되도록 물로 희석시켰다. 이 용액 2 ㎕를 400 ㎕의 Opti-MEM 배지 (Gibco cat#31985-070) 및 4 ㎕의 Lipofectamine 2000 (Invitrogen cat# 11668019)와 실온에서 20분간 혼합시키고, TM4 세포가 있는 6개 웰 플레이트의 각 웰에 제공하였다. 올리고뉴클레오티드 용액 대신 물 2㎕를 포함하는 유사한 혼합물을 허위-처리된 기준으로 이용하였다. 37℃, 5% CO2에서 3-18시간 동안 항온처리후, 배지를 새로운 성장 배지로 교환하였다. 안티센스 올리고뉴클레오티드를 추가시킨 후 48시간 후, 배지를 제거하였고, SV Total RNA Isolation 시스템(Promega (cat # Z3105)) 또는 RNeasy Total RNA Isolation 키트(Qiagen (cat# 74181))를 이용하여 제조업자의 지시에 따라 세포로부터 RNA를 추출하였다. 600 ng의 RNA를 Verso cDNA 키트 (Thermo Scientific (cat#AB1453B)) 또는 High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit(cat# 4368813)를 이용하여 제조업자의 지시에 따라 실시된 역전사 반응에 첨가하였다. 이와 같은 역전사 반응에서 cDNA를 이용하여 ABI Taqman Gene Expression Mix (cat#4369510) 및 ABI에서 기획한 프라이머/프로브(Applied Biosystems Taqman Gene Expression Assay: Hm00660220_ml, Appliend Biosystems Inc., Foster City CA에서 제공)을 이용하여 실시간 PCR에 의해 유전자 발현을 모니터하였다. 다음과 같은 PCR 주기가 이용되었다: 50℃ 2분, 95℃ 10분, StepOne Plus Real Time PCR Machine (Applied Biosystems)을 이용하여 [95℃ 15초, 60℃ 1분]을 40회.
처리된 샘플과 위장-처리된 샘플간에 18S-표준화된 dCt 값에서 차이에 근거하여 안티센스 올리고뉴클레오티드로 처리후 유전자 발현에서 폴드 변화가 계산되었다.
결과:
실시간 PCR 결과에서, TM4 세포에서 종양 억제 유전자 mRNA 수준은 종양 억제 유전자 안티센스 Hs.668503에 대해 기획된 oligo중 하나와 종양 억제 유전자 안티센스 WDR8에 대해 기획된 oligo중 하나로 처리한 후 48시간에 상당히 증가되었다는 것을 보여준다(도 1d).
HUVEC 세포를 안티센스 올리고뉴클레오티드로 처리
HUVEC 세포[ATCC (Promo Cell cat# C-12253)]를 37℃, 5% CO2에서 상피 성장 배지(Promo Cell cat #C-22010)에서 성장시켰다. 실험 하루전, Promo Cell Detach Kit (cat#C-41200)를 이용하여 세포는 1.5×105/㎖의 농도로 6개 웰 플레이트에 재도말시키고, 37℃, 5% CO2에서 항온처리하였다. 실험 당일, 6개 웰 플레이트에 있는 배지는 새로운 상피 성장배지로 대체하였다. 모든 안티센스 올리고뉴클레오티드를 20 μM의 농도가 되도록 희석시켰다. 이 용액 2 ㎕를 400 ㎕의 Opti-MEM 배지 (Gibco cat#31985-070) 및 4 ㎕의 Lipofectamine 2000 (Invitrogen cat# 11668019)와 실온에서 20분간 혼합시키고, HUVEC 세포가 있는 6개 웰 플레이트의 각 웰에 제공하였다. 올리고뉴클레오티드 용액 대신 물 2㎕를 포함하는 유사한 혼합물을 허위-처리된 기준으로 이용하였다. 37℃, 5% CO2에서 3-18시간 동안 항온처리후, 배지를 새로운 성장 배지로 교환하였다. 안티센스 올리고뉴클레오티드를 추가시킨 후 48시간 후, 배지를 제거하였고, SV Total RNA Isolation 시스템(Promega (cat # Z3105)) 또는 RNeasy Total RNA Isolation Kit(Qiagen (cat# 74181))를 이용하여 제조업자의 지시에 따라 세포로부터 RNA를 추출하였다. 600 ng의 RNA를 Verso cDNA 키트 (Thermo Scientific (cat#AB1453B))를 이용하여 제조업자의 프로토콜에 따라 실시된 역전사 반응에 첨가하였다. 이와 같은 역전사 반응에서 cDNA를 이용하여 ABI Taqman Gene Expression Mix (cat#4369510) 및 ABI에서 기획한 프라이머/프로브(Applied Biosystems Taqman Gene Expression Assays: Hs00153340_m1 and Hs00216360_m1, Applied Biosystems Inc., Foster City CA에서 제공)을 이용하여 실시간 PCR에 의해 유전자 발현을 모니터하였다. 다음과 같은 PCR 주기가 이용되었다: 50℃ 2분, 95℃ 10분, StepOne Plus Real Time PCR Machine (Applied Biosystems Inc.) 또는 Mx4000 thermal cycler (Stratagene)을 이용하여 [95℃ 15초, 60℃ 1분]을 40회.
처리된 샘플과 위장-처리된 샘플간에 18S-표준화된 dCt 값에서 차이에 근거하여 안티센스 올리고뉴클레오티드로 처리후 유전자 발현에서 폴드 변화가 계산되었다.
P53 이용된 발현 분석 (ABI cat#s), FAM/MGB를 가지는 모든 프로브: 18S: 4319413E
P53: Hs00153340_m1 (표적 서열 CTTCCCTGGATTGGCAGCCAGACTG, 서열 번호: 43)
P53as: Hs00216360_m1 (표적 서열 ATATGCAGAAATGGTCCCTGTCCTT, 서열 번호: 44)
결과:
실시간 PCR 결과에서, HUVEC 세포에서 p53 mRNA 수준은 p53as에 대해 기획된 모든 siRNA로 처리한 후 48시간에 상당히 증가되었다는 것을 보여준다(도 2).
본 발명은 하나 이상의 실행에 대해 설명되고 묘사되었지만, 본 명세서 및 첨부된 도면을 이해하면 당업자는 동등한 변형 및 변화가 있을 수 있다는 것을 인지할 것이다. 또한, 본 발명의 특정 성질들은 몇 가지 실행중 하나에 대해 설명되었지만, 이와 같은 성질이 다른 하나 이상의 성질과 복합될 수 있으며, 이는 임의의 주어진 또는 특정 부분에 바람직할 수 있다.
내용의 요약은 기술 내용을 신속하게 확인할 수 있도록 도와줄 것이다. 이는 다음의 청구범위의 범위 또는 영역을 이해하거나 범위를 한정하는데 이용되어서는 안될 것이다.
SEQUENCE LISTING <110> Collard, Joseph Khorkova, Olga <120> TREATMENT OF TUMOR SUPPRESSOR GENE RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPT TO THE GENE <130> 37092-708601 <140> PCT/US2009/66654 <141> 2009-12-03 <150> 61/119973 <151> 2008-12-04 <150> 61/157249 <151> 2009-03-03 <150> 61/166381 <151> 2009-04-03 <150> 61/154594 <151> 2009-02-23 <160> 47 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 2845 <212> DNA <213> homo sapiens <400> 1 aggggacgca gcgaaaccgg ggcccgcgcc aggccagccg ggacggacgc cgatgcccgg 60 ggctgcgacg gctgcagagc gagctgccct cggaggccgg cgtggggaag atggcccagt 120 ccaccgccac ctcccctgat gggggcacca cgtttgagca cctctggagc tctctggaac 180 cagacagcac ctacttcgac cttccccagt caagccgggg gaataatgag gtggtgggcg 240 gaacggattc cagcatggac gtcttccacc tggagggcat gactacatct gtcatggccc 300 agttcaatct gctgagcagc accatggacc agatgagcag ccgcgcggcc tcggccagcc 360 cctacacccc agagcacgcc gccagcgtgc ccacccactc gccctacgca caacccagct 420 ccaccttcga caccatgtcg ccggcgcctg tcatcccctc caacaccgac taccccggac 480 cccaccactt tgaggtcact ttccagcagt ccagcacggc caagtcagcc acctggacgt 540 actccccgct cttgaagaaa ctctactgcc agatcgccaa gacatgcccc atccagatca 600 aggtgtccac cccgccaccc ccaggcaccg ccatccgggc catgcctgtt tacaagaaag 660 cggagcacgt gaccgacgtc gtgaaacgct gccccaacca cgagctcggg agggacttca 720 acgaaggaca gtctgctcca gccagccacc tcatccgcgt ggaaggcaat aatctctcgc 780 agtatgtgga tgaccctgtc accggcaggc agagcgtcgt ggtgccctat gagccaccac 840 aggtggggac ggaattcacc accatcctgt acaacttcat gtgtaacagc agctgtgtag 900 ggggcatgaa ccggcggccc atcctcatca tcatcaccct ggagatgcgg gatgggcagg 960 tgctgggccg ccggtccttt gagggccgca tctgcgcctg tcctggccgc gaccgaaaag 1020 ctgatgagga ccactaccgg gagcagcagg ccctgaacga gagctccgcc aagaacgggg 1080 ccgccagcaa gcgtgccttc aagcagagcc cccctgccgt ccccgccctt ggtgccggtg 1140 tgaagaagcg gcggcatgga gacgaggaca cgtactacct tcaggtgcga ggccgggaga 1200 actttgagat cctgatgaag ctgaaagaga gcctggagct gatggagttg gtgccgcagc 1260 cactggtgga ctcctatcgg cagcagcagc agctcctaca gaggccgagt cacctacagc 1320 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gacctgatca tgttcacaga ctattttcca aagatggtga gagtcatgga 20880 gactggttgg gacttgcgtg tatcattaac aggtacataa ttcaactggt gtgtgtgtgg 20940 ggggggggag ggtgtttcgg gcaggtgcaa gcgatgaagc atttagatga cctccacgtg 21000 tgcacacagg tcacggcggg ggcaaggagc aagacatgat gactgtgact agggagtaag 21060 gtattggggg cccagagctt gggttggtcc tgaggtccac tagccgttgc cagggatttt 21120 caagaggctg ttcccaaagt ggtcagcaga tggcgcaact acccacacat ggcctccctg 21180 ggagatcaca gtttggcagg tatgggatgt tttcaagtcc tagatgaagc tgttatcttt 21240 ctgtagaaga ctcagaagct cagctataac aagcagattc ttgccttaat ttcctgatgc 21300 tgtgacttag cattttggga actcagcggg ccctcctttt tgaagtgctg agaatggatc 21360 ccaggcctcc cacatgctct gccacttgag atgcttcctc taagactgag ccccaccttt 21420 gatacctgtg agaatcctga gcacgctggg gtgggttctc agagctgcat ggggctcctc 21480 cagagctggt accacacaca cacacacaca cacacacgga ggattgttgt gtgtgtggtc 21540 cttccagagc cagctgcact ttgggtcgtg cacagggtgt gcaccgctgg aagtttgcct 21600 caggaggcaa tcctcgcact gccccaagct ctgcgattgt tgtgcttccc atgttaacct 21660 cggtcactga gtcaaagaat ccacaacaga tgcagaggta actttgaaag agaaccgggt 21720 tcccagactg gagaggtggc tcagcaggca aaggtctttg ctgccaccct gatgaccaga 21780 gttcaattcc tgggtcccac acagtggaag gagagaagaa actcatgtag attgtccttt 21840 gacctccaca cactctgaga catacgtata tacacacatg agttaaatgc acacacagac 21900 gggactagag aaagagcaca gctcctacca cccagcccca tcttggcagt tgtctccctg 21960 atgtcccctc tcacatctcc ctctctgttc tcctacaggg acccattctg ataatccaga 22020 atgatctgat ctgagacccc ctctctcagt aacttcacca aagaccccgt ttccaaatca 22080 ggccccacgg ggggatgtgg gcatgaggac atgggctttc ctagggaagc tatgcaattc 22140 agatgtgcca tctccccaga tgtgaacaga taccatccct gcttgcagtg atgggtaaat 22200 atcccataca cttgccatcc caggccttcc tccctgaccc ccctgtggta aagggtagat 22260 atacagtgat gggtggaggc ctgggatggg ccaggccagg cctatgctgg gaaaccacat 22320 ggtggctgga cggcagtctg ctgtgtagcg ttatatcggc ttgatactgg ctagagtcat 22380 tggggaaacc tcagttgaga aaatagcccc caccagacag gcctgtgggc aaacttatgt 22440 aacattttct tttcttttct tttcttttat ttatttattt atttatttat tttggttttt 22500 cgagacagtg tttctctgta tagccctggc tgtcctggaa ctcactctgt agaccaggct 22560 ggcctcgaac tcagaaatcc gcctgcctct gcctcctgag tgctgggatt ataggcgtgt 22620 gccaccacgc ccggctgtaa cattttctta attggtgagt aatatggggg gggggggctc 22680 tgcccatttc atgtggtgcc accttagggc aaggtagtcc tgtgttgtat aagaaaggct 22740 gagccagcct tgggaggtaa tgcagtggtg agcagaatct ctctacggcc tctgcttcag 22800 ttcctgcctt caaattcctg cctcgagttc ctggcctgac ttccctcagt gatggactct 22860 gacctgagag ttgtaagaag aaataaatct ttcctcttct aatcactttc gatcatggtg 22920 tttcatcaca gcagtgaaaa cagaaactaa gacagtagct agatacccat tgaagctgga 22980 caggctggat gctcagttac tgagcaggag ccagcctcca gggacatagt taggtttcat 23040 gtcatgctca aggtcaggat agagtgagtg gtataggcca ggcagctggc cgccaacagg 23100 gccaagccta agccctgggc aaaatcctat gccctgaccc cgtagtgagc cttagcccat 23160 gtgagtcagc gtacttaggg gccttccatt ttggcttctc tctcacagca gggttggagc 23220 tttagaaatg gatgtgggaa tgggcgaacc acaggcttgt aaatggatcg tttgtcgttt 23280 agatggggca ttgcatgtgt gctttgctct ccagagacta tccccatctg tctcttgagt 23340 tttgccaaat tctgctcacc cctaatgatg ccatctgccc aaacaggtga ctgtggtcac 23400 cacactgcac ctgaggacct gatgatactt taggtgtctg tttctctttt gctttttgag 23460 agagagagtc ttaacatgtt gcacaggtca gcctccaaac tccgatcctt ctgcctcagc 23520 ctccttggtg gagtactggg atcaaagaca ggcgtggctc ttgggctgtg agccaacctt 23580 tggtatcact taggctagcc tctcacctgt tagaagctga catgaaaact cagacaaaac 23640 actagattgt cctcttggga tggtggcctt cggctcagca gctgatgtcc ctgtggctgc 23700 tggggtactt tgggtttctg tctggagggc tatctcttcc agctctgaga tgcgtcaggc 23760 tggagagcag gcagccagca tggttctggg aaaggaggga gcggtttgct ttggaaatta 23820 gcgctgtggt tcgagctctc ctcttcccca cattattttc cctccagcca aagacgattc 23880 taattatttc cagtagagaa tgagacaagg acagcgaaaa gtatcgtctg ctcggggaac 23940 aacggtgaag gccttaatcc atgccactgg gagagacagg cagagctctg tgaattcaag 24000 gctaaactgg tctctacagt gagcttgagc acagccaagg ctagtggagg tgtgggggga 24060 gtgcttttta ggaaaatgag agcagttgtt ctccaagtgt gaaaaaaatg gaactgcagc 24120 ctcgcctctt gtctccttgg gatgaactgc caagcaaagt ccaacccaga gtgtcatcag 24180 ggttgtgact cagtgacatt ttagcacact gctggtggaa gccacggcgg cagggtggac 24240 ggaggaaggg aaaatcctag gagatcctag gaggtgggtg ctgtagccac gggttctggc 24300 ctggtgtgaa taccactcaa ttcgtgaaaa ctcaggacta aataaataaa tatatgtgtg 24360 ggccaggcat ggtggcacat gcctttaatc tttagcattc aggagtcaga ggcaggtgga 24420 tcttttagtt caaggccaga atggtctaca gaaagagttc caaggcagcc agagctatat 24480 agagaaaccc tgtctcaaaa aacaaaaaca aaaaaacaac gaaatgtttg tgtgtggtgt 24540 attaatgttt tgctttaata aatatatttg tgtttcacat gatgctcaat gtccacagag 24600 gctcagaaga ggacattgga tccctaggaa ttagagttac agagcattga gtgactggcc 24660 atgtgggtgc tgggaatcaa acccaggtcc tctaggagag cagtcagtgc tcttaaccac 24720 tgatttatct ttccagactc aagggcaaat tcgatcttta ccctgtgaat gggatgatca 24780 gaccctaaag tggaatgtga cacgtgacct attttcaata aaggatagaa ctgatggccc 24840 accctcctcc tgaagccagc actgtggttc gtcaatatgc ccaagcccac aagagggcgc 24900 catgccaaca gtccagttcc tgcagatatc ctgaggttct tgacagcaca tttaaggcag 24960 ttgcagctaa attccaaagt aactaaaagg aactggatag attaacctct aaattaattt 25020 ggaacaatga ccaagaattg ccattataag accaacaaga ttcctcggca ggtaaaagtg 25080 actgttgaca agcctaatga cctgggtttg acccccgtgg cacacatcat agaggaaaag 25140 gaccagttcc atcaagttgt cctctgatcc ctacacgtgc acagcggcac atgtgatacc 25200 caataaatga atgagtctaa taaaaaaatt taaaagtatc tgcagggaaa accaagtaac 25260 ggatttctca gacctatgga tacagctatg taaagccaat acccagagtt atatcaggaa 25320 ggtctcagtg gccagctctt gctctgtctt gttccagcaa ggaaggacaa ctgacacaac 25380 aattctagat gcagtcattg gaaacaccca gaagcgggtg ctgcatgtgt tgagctagga 25440 gagaatatga tatcagtagt atcctggtga ccagctagcc attcgtcctc tccctgaatg 25500 gcagacaggg atggactccg agtgagaaaa tacacacaac agattgaaca acagagcaag 25560 cagccacctt cctgagccaa gtgccttatg cattttcaca ggcatgttta catgaggaca 25620 ttatcatgca agtacttgat gaacccggag tgcgctctcc ccctcgactc gcccctgcac 25680 ttatttctga gtgatgggga gacaagccga gtgcacacct cgtggaattg agccgccctg 25740 ttgaccatgt tgtgactgtc actccagccc gtgagacaat ttgaaataat catgtccaac 25800 cagctgtcgt aatttgttag ctgtaaagtt gcaatatgct tgctgtgagt tacagaactg 25860 tattaaatac attgtcattt gattcctagt tt 25892 <210> 12 <211> 279 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 12 atggagagag cagacataca tctccggtgc aggtaccctg ctcagaccaa gccggagcca 60 gcctactggc agcccattct ctccggcaaa gctagacaca atatgagcaa ttgctgcgat 120 ttctccataa gtgctcttgt ttcccctaat aattcacgtt tcatctccac aataaacatt 180 gttagaactc ttctctgggc tttaaatata cataattgct ccccgtgcca gtaaaaggta 240 ttaattccat ttatgcattc cataaacttt taggataac 279 <210> 13 <211> 1982 <212> DNA <213> homo sapien <400> 13 gtcccggctc cgcgggttcc gtgggtcgcc cgcgaaatct gatccgggat gcggcggccc 60 aatcggaagg tggaccgaaa tcccgcgaca gcaagaggcc cgtagcgacc cgcggtgcta 120 aggaacacag tgctttcaaa agaattggcg tccgctgttc gcctctcctc ccgggagtct 180 tctgcctact cccagaagag gagggaagca caggtgggtt tctttagctc tgcgtcggat 240 ccctgagaac ttcgaagcca tcctggctga ggctaatctc cgctgtgctt cctctgcagt 300 atgaagactt tggagactca accgttagct ccggactgct gtccttcaga ccaggaccca 360 gctccagccc atccttctcc ccacgcttcc ccgatgaata aaaatgcgga ctctgaactg 420 atgccaccgc ctcccgaaag gggggatccg ccccggttgt ccccagatcc tgtggctggc 480 tcagctgtgt cccaggagct acgggagggg gacccagttt ctctctccac tcccctggaa 540 acagagtttg gttcccctag tgagttgagt cctcgaatcg aggagcaaga actttctgaa 600 aatacaagcc ttcctgcaga agaagcaaac gggagccttt ctgaagaaga agcgaacggg 660 ccagagttgg ggtctggaaa agccatggaa gatacctctg gggaacccgc tgcagaggac 720 gagggagaca ccgcttggaa ctacagcttc tcccagctgc ctcgatttct cagtggttcc 780 tggtcagagt tcagcaccca acctgagaac ttcttgaaag gctgtaagtg ggctcctgac 840 ggttcctgca tcttgaccaa tagtgctgat aacatcttgc gaatttataa cctgccccca 900 gagctgtacc atgaggggga gcaggtggaa tatgcagaaa tggtccctgt ccttcgaatg 960 gtggaaggtg ataccatcta tgattactgc tggtattctc tgatgtcctc agcccagcca 1020 gacacctcct acgtggccag cagcagccgg gagaacccga ttcatatctg ggacgcattc 1080 actggagagc tccgggcttc ctttcgcgcc tacaaccacc tggatgagct gacggcagcc 1140 cattcgctct gcttctcccc ggatggctcc cagctcttct gtggcttcaa ccggactgtg 1200 cgtgtttttt ccacggcccg gcctggccga gactgcgagg tccgagccac atttgcaaaa 1260 aagcagggcc agagcggcat catctcctgc atagccttca gcccagccca gcccctctat 1320 gcctgtggct cctacggccg ctccctgggt ctgtatgcct gggatgatgg ctcccctctc 1380 gccttgctgg gagggcacca agggggcatc acccacctct gctttcatcc cgatggcaac 1440 cgcttcttct caggagcccg caaggatgct gagctcctgt gctgggatct ccggcagtct 1500 ggttacccac tgtggtccct gggtcgagag gtgaccacca atcagcgcat ctacttcgat 1560 ctggacccga ccgggcagtt cctagtgagt ggcagcacga gcggggctgt ctctgtgtgg 1620 gacacggacg ggcctggcaa tgatgggaag ccggagcccg tgttgagttt tctgccccag 1680 aaggactgca ccaatggcgt gagcctgcac cctagcctgc ctctcctggc cactgcctcc 1740 ggtcagcgtg tgtttcctga gcccacagag agtggggacg aaggagagga gctgggcctt 1800 cccttgctct ccacgcgcca cgtccacctt gaatgtcggc ttcagctctg gtggtgtggg 1860 ggggcgccag actccagcat ccctgatgat caccagggcg agaaagggca gggaggaacg 1920 gagggaggtg tgggtgagct gatataaaaa ggtttttatg ataaaaaaaa aaaaaaaaaa 1980 aa 1982 <210> 14 <211> 789 <212> DNA <213> homo sapiens <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> n is a, c, g, t or u <220> <221> misc_feature <222> (21)..(21) <223> n is a, c, g, t or u <220> <221> misc_feature <222> (30)..(30) <223> n is a, c, g, t or u <400> 14 taaacgggna aagatgcctt nctttttaan cctaattgaa ttttaaatgt ccttttgaca 60 caaaaaggta tatacatgac acagctacac aacctttttt caactggaca acaagtgtca 120 aaaccctgtg gatgtatagg gtaaaacaag attggtcagg aaaagagaat tgttcctata 180 actggtaatc tgacacaatg tcctattgcc attaaaaaaa aaaggtccat tttcagttta 240 ttcaagttta ttttcatggt gttttatccc tcttgataaa aaaaaattca gacttttgta 300 atttgtgtat gctgatcttc atcaaaaggt tcattctctg gatcagagtc agtggtgtca 360 gaatatctat aatgatcagg ttcattgtca ctaacatctg ttgttacaga agtttaactt 420 gctagcctcc ggatttgacg gctcctctac tgcctttgag aagtacagtt tcaccttaaa 480 ttttggagaa aacgttcacg ttgactttgt ctttattttc ttacggcaag acaatttttt 540 gttataagta agttcctata cttcccttgc atttatttta caccctccta tatctgtcaa 600 tctttatcta tttttttgtt taacaataaa cccactaatt tccctacttt ttcttccaac 660 gttatccacc tatcacctgg atcataaata atgtttttct tccccataag ttcaaaactt 720 tttccccctc tttttttcca cccctctttt tgattcttcg caataaacct ttatttgttt 780 tctccccac 789 <210> 15 <211> 467 <212> DNA <213> homo sapiens <400> 15 aagaaatggc atatttgaag aaatcatatg gctagacaaa acaaactaga tagattgtga 60 agctagatag actaaacctc agtcttgatt actaattaca agctgaatgt ataaatcttt 120 tccttcagag gcataaaggt aagagttatg aatcaaatgg aaggaccaaa atgcttccca 180 atgaagtatt ttcttggtga agttattgca atctaaggtc tgaaaatcag ctgtacagga 240 actttatcag taacctaaaa gatgatcaat cagcctcagt gactaacgac actgagaaga 300 gaccaacgta aaaactagca caccagatta atttaccaca aagatattct caccataatc 360 agaaaacctg ccctctattc agagtattca ctcttttttg gtatgagtac taatctggct 420 gggtcgaatt agtgcttagt tgaatacaga attaaaataa tgtgaag 467 <210> 16 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 16 gcctccttat acaccactat c 21 <210> 17 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 17 gtgctggatc tggtctaggc 20 <210> 18 <211> 19 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 18 accactgcct ctgtctcca 19 <210> 19 <211> 27 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 19 cugcucuggc uguggucagu gccucgg 27 <210> 20 <211> 27 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targerts natural antisense <400> 20 auucccuucc auaggcauga gacuguu 27 <210> 21 <211> 27 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 21 ccaagcugcu ggaagcaugu acuggug 27 <210> 22 <211> 27 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 22 agacggucuc auagguggaa uuugcug 27 <210> 23 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 23 gatgtatgtc tgctctctcc a 21 <210> 24 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 24 ggcttggtct gagcagggta 20 <210> 25 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 25 cctgcaccgg agatgtatgt c 21 <210> 26 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 26 ccggagatgt atgtctgctc t 21 <210> 27 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 27 gcccaccacc tcattattcc c 21 <210> 28 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 28 ccagtcccaa gtccagcaga 20 <210> 29 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 29 gcctccgtga actcctcctt 20 <210> 30 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 30 gttccgccca ccacctcatt 20 <210> 31 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 31 ggagcaagaa cuuucugaat t 21 <210> 32 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 32 ccaaucagcg caucuacuut t 21 <210> 33 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 33 ccaccaauca gcgcaucuat t 21 <210> 34 <211> 27 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 34 uucauaacuc uuaccuuuau gccucug 27 <210> 35 <211> 27 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 35 auucugacac cacugacucu gauccag 27 <210> 36 <211> 27 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 36 auuaccaguu auaggaacaa uucucuu 27 <210> 37 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 37 gaggcacuga ccacagccag agcag 25 <210> 38 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 38 cagucucaug ccuauggaag ggaat 25 <210> 39 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 39 ccaguacaug cuuccagcag cuugg 25 <210> 40 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 40 gcaaauucca ccuaugagac cguct 25 <210> 41 <211> 21 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 41 acctctggag ctctctggaa c 21 <210> 42 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 42 tatgatggaa aggtgcgcat cctta 25 <210> 43 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 43 cttccctgga ttggcagcca gactg 25 <210> 44 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 44 atatgcagaa atggtccctg tcctt 25 <210> 45 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 45 gaggcauaaa gguaagaguu augaa 25 <210> 46 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 46 ggaucagagu cagugguguc agaat 25 <210> 47 <211> 25 <212> DNA <213> artificial <220> <223> targets natural antisense <400> 47 gagaauuguu ccuauaacug guaat 25

Claims (5)

  1. 서열 번호: 14 내지 15 중에서 하나의 종양 억제 유전자 천연 안티센스 전사체 폴리뉴클레오티드에 상보적인 합성 올리고뉴클레오티드에 있어서, 상기 올리고뉴클레오티드는 종양 억제 유전자 PTEN의 발현을 상향조절하는 안티센스 화합물이고, 그리고 상기 올리고뉴클레오티드는 서열 번호: 36에 제시된 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 올리고뉴클레오티드.
  2. 제1항에 있어서, 올리고뉴클레오티드는 siRNA 화합물인 것을 특징으로 하는 올리고뉴클레오티드.
  3. 제1항에 있어서, 종양 억제 유전자의 발현은 최소한 10% 증가하는 것을 특징으로 하는 올리고뉴클레오티드.
  4. 제1항에 있어서, 다음을 포함하는 하나 이상의 변형을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 올리고뉴클레오티드:
    a. 포스포로티오에이트, 2'-O-메톡시에틸(MOE), 2'-플루오르, 알킬포스포네이트, 포스포로디티오에이트, 알킬포스포노티오에이트, 포스포르아미데이트, 카르바메이트, 카르보네이트, 포스페이트 트리에스테르, 아세트아미데이트, 카르복시메틸 에스테르, 그리고 이들의 조합으로부터 선택되는 최소한 하나의 변형된 뉴클레오시드간 링키지;
    b. 펩티드 핵산(PNA), 잠금 핵산(LNA), 아라비노-핵산(FANA), 그리고 이들의 조합으로부터 선택되는 최소한 하나의 변형된 뉴클레오티드; 또는
    c. 2'-O-메톡시에틸 변형된 슈가 모이어티, 2'-메톡시 변형된 슈가 모이어티, 2'-O-알킬 변형된 슈가 모이어티, 바이사이클 슈가 모이어티, 그리고 이들의 조합으로부터 선택되는 최소한 하나의 변형된 슈가 모이어티.
  5. 제1항의 올리고뉴클레오티드 및 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제약학적 조성물에 있어서. 암을 치료하는데 이용되는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물.
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Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2049664B1 (en) 2006-08-11 2011-09-14 Prosensa Technologies B.V. Single stranded oligonucleotides complementary to repetitive elements for treating DNA repeat instability associated genetic disorders
KR101840618B1 (ko) 2008-12-04 2018-03-20 큐알엔에이, 인크. 종양 억제 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의해 종양 억제 유전자 관련된 질환의 치료
CN102317458B (zh) 2008-12-04 2018-01-02 库尔纳公司 通过红细胞生成素(epo)天然反义转录物的抑制对epo相关疾病的治疗
JP6083735B2 (ja) * 2009-12-31 2017-02-22 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド インスリン受容体基質２（ｉｒｓ２）および転写因子３（ｔｆｅ３）に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるインスリン受容体基質２（ｉｒｓ２）関連疾患の治療
EP2593547B1 (en) * 2010-07-14 2017-11-15 CuRNA, Inc. Treatment of discs large homolog (dlg) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to dlg
US9920317B2 (en) 2010-11-12 2018-03-20 The General Hospital Corporation Polycomb-associated non-coding RNAs
DK2638163T3 (en) 2010-11-12 2017-07-24 Massachusetts Gen Hospital POLYCOMB-ASSOCIATED NON-CODING RNAs
KR102010598B1 (ko) 2010-11-23 2019-08-13 큐알엔에이, 인크. Nanog에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 nanog 관련된 질환의 치료
US10196637B2 (en) 2011-06-08 2019-02-05 Nitto Denko Corporation Retinoid-lipid drug carrier
TWI658830B (zh) 2011-06-08 2019-05-11 日東電工股份有限公司 Ｈｓｐ47表現調控強化用類視色素脂質體
ITMI20120275A1 (it) * 2012-02-24 2013-08-25 Biogenera Societa A Responsabilita Limitata Oligonucleotidi per la modulazione dell'espressione genica e loro usi
CA3103101C (en) * 2012-04-23 2023-01-17 Biomarin Technologies B.V. Rna modulating oligonucleotides with improved characteristics for the treatment of neuromuscular disorders
JP2015518714A (ja) 2012-05-16 2015-07-06 ラナ セラピューティクス インコーポレイテッド 遺伝子発現を調節するための組成物及び方法
JP2015523854A (ja) 2012-05-16 2015-08-20 ラナ セラピューティクス インコーポレイテッド Ｓｍｎ遺伝子ファミリー発現を調節するための組成物及び方法
EP2850182A4 (en) 2012-05-16 2016-01-20 Rana Therapeutics Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR MODULATING THE EXPRESSION OF ATP2A2
EA201492122A1 (ru) 2012-05-16 2015-10-30 Рана Терапьютикс, Инк. Композиции и способы для модулирования экспрессии utrn
CN104583402A (zh) 2012-05-16 2015-04-29 Rana医疗有限公司 用于调节mecp2表达的组合物和方法
EA201492121A1 (ru) 2012-05-16 2015-10-30 Рана Терапьютикс, Инк. Композиции и способы для модулирования экспрессии семейства генов гемоглобина
US10837014B2 (en) 2012-05-16 2020-11-17 Translate Bio Ma, Inc. Compositions and methods for modulating SMN gene family expression
WO2013173605A1 (en) * 2012-05-16 2013-11-21 Rana Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating pten expression
WO2015023937A1 (en) * 2013-08-16 2015-02-19 Rana Therapeutics, Inc. Heterochromatin forming non-coding rnas
US20160230172A1 (en) * 2013-10-14 2016-08-11 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of c9orf72 antisense transcript
US11162096B2 (en) 2013-10-14 2021-11-02 Ionis Pharmaceuticals, Inc Methods for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
WO2016070060A1 (en) 2014-10-30 2016-05-06 The General Hospital Corporation Methods for modulating atrx-dependent gene repression
US10793855B2 (en) 2015-01-06 2020-10-06 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
EP3271460A4 (en) 2015-03-17 2019-03-13 The General Hospital Corporation INTERACTOME RNA OF COMPLEX REPRESSIVE POLYCOMB 1 (PRC1)
US10407678B2 (en) 2015-04-16 2019-09-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
CN114224907A (zh) 2015-07-02 2022-03-25 希望之城 包括硫代磷酸化寡脱氧核苷酸的化合物和组合物及其使用方法
US11584932B2 (en) 2016-11-01 2023-02-21 The Research Foundation For The State University Of New York 5-halouracil-modified microRNAs and their use in the treatment of cancer
CN109022462B (zh) * 2017-06-08 2021-12-21 中山大学附属第一医院 一种PTEN基因的上游开放阅读框31aa-uORF核苷酸及其编码的多肽的应用
IL314908A (en) 2018-03-29 2024-10-01 Technion Res & Dev Foundation Vesicles comprising a pten inhibitor and uses of same
CN110184271A (zh) * 2019-06-04 2019-08-30 遵义医科大学珠海校区 一种mRNA-like ncRNA、抑制其表达的反义RNA及两者的应用
RU2763992C1 (ru) * 2020-10-08 2022-01-12 федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ бесконтактной стимуляции транскрипционной активности гена ингибитора циклинзависимой киназы 2 в опухолевых клетках предстательной железы

Family Cites Families (399)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3687808A (en) 1969-08-14 1972-08-29 Univ Leland Stanford Junior Synthetic polynucleotides
US4469863A (en) 1980-11-12 1984-09-04 Ts O Paul O P Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof
US4534899A (en) 1981-07-20 1985-08-13 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
US4426330A (en) 1981-07-20 1984-01-17 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
US5023243A (en) 1981-10-23 1991-06-11 Molecular Biosystems, Inc. Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same
US4476301A (en) 1982-04-29 1984-10-09 Centre National De La Recherche Scientifique Oligonucleotides, a process for preparing the same and their application as mediators of the action of interferon
JPS5927900A (ja) 1982-08-09 1984-02-14 Wakunaga Seiyaku Kk 固定化オリゴヌクレオチド
FR2540122B1 (fr) 1983-01-27 1985-11-29 Centre Nat Rech Scient Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application
US4605735A (en) 1983-02-14 1986-08-12 Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha Oligonucleotide derivatives
US4948882A (en) 1983-02-22 1990-08-14 Syngene, Inc. Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis
NZ207394A (en) 1983-03-08 1987-03-06 Commw Serum Lab Commission Detecting or determining sequence of amino acids
US4824941A (en) 1983-03-10 1989-04-25 Julian Gordon Specific antibody to the native form of 2'5'-oligonucleotides, the method of preparation and the use as reagents in immunoassays or for binding 2'5'-oligonucleotides in biological systems
US4587044A (en) 1983-09-01 1986-05-06 The Johns Hopkins University Linkage of proteins to nucleic acids
US5118800A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide
US5118802A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside
US5550111A (en) 1984-07-11 1996-08-27 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof
FR2567892B1 (fr) 1984-07-19 1989-02-17 Centre Nat Rech Scient Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons
US5367066A (en) 1984-10-16 1994-11-22 Chiron Corporation Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites
US5430136A (en) 1984-10-16 1995-07-04 Chiron Corporation Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites
US5258506A (en) 1984-10-16 1993-11-02 Chiron Corporation Photolabile reagents for incorporation into oligonucleotide chains
US4828979A (en) 1984-11-08 1989-05-09 Life Technologies, Inc. Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection
US4754065A (en) 1984-12-18 1988-06-28 Cetus Corporation Precursor to nucleic acid probe
FR2575751B1 (fr) 1985-01-08 1987-04-03 Pasteur Institut Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques
US5235033A (en) 1985-03-15 1993-08-10 Anti-Gene Development Group Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof
US5506337A (en) 1985-03-15 1996-04-09 Antivirals Inc. Morpholino-subunit combinatorial library and method
US5166315A (en) 1989-12-20 1992-11-24 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5034506A (en) 1985-03-15 1991-07-23 Anti-Gene Development Group Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages
US5185444A (en) 1985-03-15 1993-02-09 Anti-Gene Deveopment Group Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages
US5405938A (en) 1989-12-20 1995-04-11 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4762779A (en) 1985-06-13 1988-08-09 Amgen Inc. Compositions and methods for functionalizing nucleic acids
US4800159A (en) 1986-02-07 1989-01-24 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences
US5317098A (en) 1986-03-17 1994-05-31 Hiroaki Shizuya Non-radioisotope tagging of fragments
JPS638396A (ja) 1986-06-30 1988-01-14 Wakunaga Pharmaceut Co Ltd ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体
EP0260032B1 (en) 1986-09-08 1994-01-26 Ajinomoto Co., Inc. Compounds for the cleavage at a specific position of RNA, oligomers employed for the formation of said compounds, and starting materials for the synthesis of said oligomers
US5276019A (en) 1987-03-25 1994-01-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US5264423A (en) 1987-03-25 1993-11-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US4904582A (en) 1987-06-11 1990-02-27 Synthetic Genetics Novel amphiphilic nucleic acid conjugates
CA1340032C (en) 1987-06-24 1998-09-08 Jim Haralambidis Lucleoside derivatives
US5585481A (en) 1987-09-21 1996-12-17 Gen-Probe Incorporated Linking reagents for nucleotide probes
US4924624A (en) 1987-10-22 1990-05-15 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof
US5188897A (en) 1987-10-22 1993-02-23 Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates
US5525465A (en) 1987-10-28 1996-06-11 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same
DE3738460A1 (de) 1987-11-12 1989-05-24 Max Planck Gesellschaft Modifizierte oligonukleotide
US5403711A (en) 1987-11-30 1995-04-04 University Of Iowa Research Foundation Nucleic acid hybridization and amplification method for detection of specific sequences in which a complementary labeled nucleic acid probe is cleaved
ATE151467T1 (de) 1987-11-30 1997-04-15 Univ Iowa Res Found Durch modifikationen an der 3'-terminalen phosphodiesterbindung stabilisierte dna moleküle, ihre verwendung als nukleinsäuresonden sowie als therapeutische mittel zur hemmung der expression spezifischer zielgene
US5288512A (en) 1987-12-15 1994-02-22 The Procter & Gamble Company Reduced calorie fats made from triglycerides containing medium and long chain fatty acids
US5082830A (en) 1988-02-26 1992-01-21 Enzo Biochem, Inc. End labeled nucleotide probe
JPH03503894A (ja) 1988-03-25 1991-08-29 ユニバーシィティ　オブ　バージニア　アランミ　パテンツ　ファウンデイション オリゴヌクレオチド　ｎ‐アルキルホスホラミデート
NL8800756A (nl) 1988-03-25 1989-10-16 Vereniging Voor Christelijk Wetenschappelijk Onderwijs Genetisch gemanipuleerde plantecellen en planten, alsmede daarvoor bruikbaar recombinant dna.
US5278302A (en) 1988-05-26 1994-01-11 University Patents, Inc. Polynucleotide phosphorodithioates
US5109124A (en) 1988-06-01 1992-04-28 Biogen, Inc. Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine
US5216141A (en) 1988-06-06 1993-06-01 Benner Steven A Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages
US5175273A (en) 1988-07-01 1992-12-29 Genentech, Inc. Nucleic acid intercalating agents
US5262536A (en) 1988-09-15 1993-11-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Reagents for the preparation of 5'-tagged oligonucleotides
US5512439A (en) 1988-11-21 1996-04-30 Dynal As Oligonucleotide-linked magnetic particles and uses thereof
US5599923A (en) 1989-03-06 1997-02-04 Board Of Regents, University Of Tx Texaphyrin metal complexes having improved functionalization
US5457183A (en) 1989-03-06 1995-10-10 Board Of Regents, The University Of Texas System Hydroxylated texaphyrins
US5354844A (en) 1989-03-16 1994-10-11 Boehringer Ingelheim International Gmbh Protein-polycation conjugates
US5108921A (en) 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5391723A (en) 1989-05-31 1995-02-21 Neorx Corporation Oligonucleotide conjugates
US5256775A (en) 1989-06-05 1993-10-26 Gilead Sciences, Inc. Exonuclease-resistant oligonucleotides
US4958013A (en) 1989-06-06 1990-09-18 Northwestern University Cholesteryl modified oligonucleotides
US5227170A (en) 1989-06-22 1993-07-13 Vestar, Inc. Encapsulation process
US6203976B1 (en) 1989-07-18 2001-03-20 Osi Pharmaceuticals, Inc. Methods of preparing compositions comprising chemicals capable of transcriptional modulation
US5451463A (en) 1989-08-28 1995-09-19 Clontech Laboratories, Inc. Non-nucleoside 1,3-diol reagents for labeling synthetic oligonucleotides
US5134066A (en) 1989-08-29 1992-07-28 Monsanto Company Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs
US5254469A (en) 1989-09-12 1993-10-19 Eastman Kodak Company Oligonucleotide-enzyme conjugate that can be used as a probe in hybridization assays and polymerase chain reaction procedures
US5591722A (en) 1989-09-15 1997-01-07 Southern Research Institute 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity
US5527528A (en) 1989-10-20 1996-06-18 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Solid-tumor treatment method
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5356633A (en) 1989-10-20 1994-10-18 Liposome Technology, Inc. Method of treatment of inflamed tissues
US5399676A (en) 1989-10-23 1995-03-21 Gilead Sciences Oligonucleotides with inverted polarity
US5264564A (en) 1989-10-24 1993-11-23 Gilead Sciences Oligonucleotide analogs with novel linkages
DE69034150T2 (de) 1989-10-24 2005-08-25 Isis Pharmaceuticals, Inc., Carlsbad 2'-Modifizierte Oligonukleotide
US5264562A (en) 1989-10-24 1993-11-23 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide analogs with novel linkages
US5292873A (en) 1989-11-29 1994-03-08 The Research Foundation Of State University Of New York Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe
US5177198A (en) 1989-11-30 1993-01-05 University Of N.C. At Chapel Hill Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates
US5457189A (en) 1989-12-04 1995-10-10 Isis Pharmaceuticals Antisense oligonucleotide inhibition of papillomavirus
US5130302A (en) 1989-12-20 1992-07-14 Boron Bilogicals, Inc. Boronated nucleoside, nucleotide and oligonucleotide compounds, compositions and methods for using same
US5469854A (en) 1989-12-22 1995-11-28 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods of preparing gas-filled liposomes
US5580575A (en) 1989-12-22 1996-12-03 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic drug delivery systems
US5486603A (en) 1990-01-08 1996-01-23 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide having enhanced binding affinity
US5587470A (en) 1990-01-11 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 3-deazapurines
US5578718A (en) 1990-01-11 1996-11-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Thiol-derivatized nucleosides
US5681941A (en) 1990-01-11 1997-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted purines and oligonucleotide cross-linking
US5459255A (en) 1990-01-11 1995-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-2 substituted purines
US5646265A (en) 1990-01-11 1997-07-08 Isis Pharmceuticals, Inc. Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites
US5623065A (en) 1990-08-13 1997-04-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped 2' modified oligonucleotides
US5587361A (en) 1991-10-15 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5670633A (en) 1990-01-11 1997-09-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression
US5852188A (en) 1990-01-11 1998-12-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having chiral phosphorus linkages
US5149797A (en) 1990-02-15 1992-09-22 The Worcester Foundation For Experimental Biology Method of site-specific alteration of rna and production of encoded polypeptides
US5220007A (en) 1990-02-15 1993-06-15 The Worcester Foundation For Experimental Biology Method of site-specific alteration of RNA and production of encoded polypeptides
AU7579991A (en) 1990-02-20 1991-09-18 Gilead Sciences, Inc. Pseudonucleosides and pseudonucleotides and their polymers
US5214136A (en) 1990-02-20 1993-05-25 Gilead Sciences, Inc. Anthraquinone-derivatives oligonucleotides
US5321131A (en) 1990-03-08 1994-06-14 Hybridon, Inc. Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling
US5470967A (en) 1990-04-10 1995-11-28 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages
US5264618A (en) 1990-04-19 1993-11-23 Vical, Inc. Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules
GB9009980D0 (en) 1990-05-03 1990-06-27 Amersham Int Plc Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides
US6034233A (en) 1990-05-04 2000-03-07 Isis Pharmaceuticals Inc. 2'-O-alkylated oligoribonucleotides and phosphorothioate analogs complementary to portions of the HIV genome
DE69032425T2 (de) 1990-05-11 1998-11-26 Microprobe Corp., Bothell, Wash. Teststreifen zum Eintauchen für Nukleinsäure-Hybridisierungsassays und Verfahren zur kovalenten Immobilisierung von Oligonucleotiden
IE66205B1 (en) 1990-06-14 1995-12-13 Paul A Bartlett Polypeptide analogs
US5650489A (en) 1990-07-02 1997-07-22 The Arizona Board Of Regents Random bio-oligomer library, a method of synthesis thereof, and a method of use thereof
US5688941A (en) 1990-07-27 1997-11-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods of making conjugated 4' desmethyl nucleoside analog compounds
US5218105A (en) 1990-07-27 1993-06-08 Isis Pharmaceuticals Polyamine conjugated oligonucleotides
US5618704A (en) 1990-07-27 1997-04-08 Isis Pharmacueticals, Inc. Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling
US5138045A (en) 1990-07-27 1992-08-11 Isis Pharmaceuticals Polyamine conjugated oligonucleotides
US5623070A (en) 1990-07-27 1997-04-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US5602240A (en) 1990-07-27 1997-02-11 Ciba Geigy Ag. Backbone modified oligonucleotide analogs
US5610289A (en) 1990-07-27 1997-03-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogues
US5677437A (en) 1990-07-27 1997-10-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
JPH0874B2 (ja) 1990-07-27 1996-01-10 アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド 遺伝子発現を検出および変調するヌクレアーゼ耐性、ピリミジン修飾オリゴヌクレオチド
US5608046A (en) 1990-07-27 1997-03-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds
US5541307A (en) 1990-07-27 1996-07-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof
US5489677A (en) 1990-07-27 1996-02-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms
NZ239247A (en) 1990-08-03 1993-11-25 Sterling Drug Inc Oligonucleosides containing a non-phosphate inter nucleoside linkage
US5245022A (en) 1990-08-03 1993-09-14 Sterling Drug, Inc. Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides
US5177196A (en) 1990-08-16 1993-01-05 Microprobe Corporation Oligo (α-arabinofuranosyl nucleotides) and α-arabinofuranosyl precursors thereof
US5512667A (en) 1990-08-28 1996-04-30 Reed; Michael W. Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides
US5214134A (en) 1990-09-12 1993-05-25 Sterling Winthrop Inc. Process of linking nucleosides with a siloxane bridge
US5561225A (en) 1990-09-19 1996-10-01 Southern Research Institute Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages
AU662298B2 (en) 1990-09-20 1995-08-31 Gilead Sciences, Inc. Modified internucleoside linkages
US5432272A (en) 1990-10-09 1995-07-11 Benner; Steven A. Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases
KR930702373A (ko) 1990-11-08 1993-09-08 안토니 제이. 페이네 합성 올리고누클레오티드에 대한 다중 리포터(Reporter)그룹의 첨합
IE913929A1 (en) 1990-11-13 1992-05-20 Immunex Corp Bifunctional selectable fusion genes
JP3220180B2 (ja) 1991-05-23 2001-10-22 三菱化学株式会社 薬剤含有タンパク質結合リポソーム
US5714331A (en) 1991-05-24 1998-02-03 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility
US5539082A (en) 1993-04-26 1996-07-23 Nielsen; Peter E. Peptide nucleic acids
US5719262A (en) 1993-11-22 1998-02-17 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having amino acid side chains
US5371241A (en) 1991-07-19 1994-12-06 Pharmacia P-L Biochemicals Inc. Fluorescein labelled phosphoramidites
US6307040B1 (en) 1992-03-05 2001-10-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression
US5571799A (en) 1991-08-12 1996-11-05 Basco, Ltd. (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response
US5474796A (en) 1991-09-04 1995-12-12 Protogene Laboratories, Inc. Method and apparatus for conducting an array of chemical reactions on a support surface
US5521291A (en) 1991-09-30 1996-05-28 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Conjugates for introducing nucleic acid into higher eucaryotic cells
NZ244306A (en) 1991-09-30 1995-07-26 Boehringer Ingelheim Int Composition for introducing nucleic acid complexes into eucaryotic cells, complex containing nucleic acid and endosomolytic agent, peptide with endosomolytic domain and nucleic acid binding domain and preparation
US5661134A (en) 1991-10-15 1997-08-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating Ha-ras or Ki-ras having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5576302A (en) 1991-10-15 1996-11-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating hepatitis C virus having phosphorothioate linkages of high chiral purity
ES2103918T3 (es) 1991-10-17 1997-10-01 Ciba Geigy Ag Nucleosidos biciclicos, oligonucleotidos, procedimiento para su obtencion y productos intermedios.
US6335434B1 (en) 1998-06-16 2002-01-01 Isis Pharmaceuticals, Inc., Nucleosidic and non-nucleosidic folate conjugates
US5605662A (en) 1993-11-01 1997-02-25 Nanogen, Inc. Active programmable electronic devices for molecular biological analysis and diagnostics
US5484908A (en) 1991-11-26 1996-01-16 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines
US5359044A (en) 1991-12-13 1994-10-25 Isis Pharmaceuticals Cyclobutyl oligonucleotide surrogates
US5700922A (en) 1991-12-24 1997-12-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. PNA-DNA-PNA chimeric macromolecules
US5595726A (en) 1992-01-21 1997-01-21 Pharmacyclics, Inc. Chromophore probe for detection of nucleic acid
US5565552A (en) 1992-01-21 1996-10-15 Pharmacyclics, Inc. Method of expanded porphyrin-oligonucleotide conjugate synthesis
FR2687679B1 (fr) 1992-02-05 1994-10-28 Centre Nat Rech Scient Oligothionucleotides.
US5573905A (en) 1992-03-30 1996-11-12 The Scripps Research Institute Encoded combinatorial chemical libraries
US5633360A (en) 1992-04-14 1997-05-27 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation
IL101600A (en) 1992-04-15 2000-02-29 Yissum Res Dev Co Synthetic partially phosphorothioated antisense oligodeoxynucleotides and pharmaceutical compositions containing them
US5434257A (en) 1992-06-01 1995-07-18 Gilead Sciences, Inc. Binding compentent oligomers containing unsaturated 3',5' and 2',5' linkages
EP0577558A2 (de) 1992-07-01 1994-01-05 Ciba-Geigy Ag Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte
US5272250A (en) 1992-07-10 1993-12-21 Spielvogel Bernard F Boronated phosphoramidate compounds
US5652355A (en) 1992-07-23 1997-07-29 Worcester Foundation For Experimental Biology Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
US5288514A (en) 1992-09-14 1994-02-22 The Regents Of The University Of California Solid phase and combinatorial synthesis of benzodiazepine compounds on a solid support
US6710174B2 (en) 2001-09-13 2004-03-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of vascular endothelial growth factor receptor-1 expression
EP0636696B1 (en) 1992-10-15 2002-09-04 Toray Industries, Inc. Process for producing recombinant major histocompatibility antigen class ii protein in microorganisms
US5583020A (en) 1992-11-24 1996-12-10 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Permeability enhancers for negatively charged polynucleotides
US5574142A (en) 1992-12-15 1996-11-12 Microprobe Corporation Peptide linkers for improved oligonucleotide delivery
JP3351476B2 (ja) 1993-01-22 2002-11-25 三菱化学株式会社 リン脂質誘導体及びそれを含有するリポソーム
US5476925A (en) 1993-02-01 1995-12-19 Northwestern University Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups
US5395619A (en) 1993-03-03 1995-03-07 Liposome Technology, Inc. Lipid-polymer conjugates and liposomes
GB9304618D0 (en) 1993-03-06 1993-04-21 Ciba Geigy Ag Chemical compounds
AU6449394A (en) 1993-03-30 1994-10-24 Sterling Winthrop Inc. Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them
AU6412794A (en) 1993-03-31 1994-10-24 Sterling Winthrop Inc. Oligonucleotides with amide linkages replacing phosphodiester linkages
DE4311944A1 (de) 1993-04-10 1994-10-13 Degussa Umhüllte Natriumpercarbonatpartikel, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Wasch-, Reinigungs- und Bleichmittelzusammensetzungen
US5462854A (en) 1993-04-19 1995-10-31 Beckman Instruments, Inc. Inverse linkage oligonucleotides for chemical and enzymatic processes
JPH08510130A (ja) 1993-05-11 1996-10-29 ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・ノース・キャロライナ・アト・チャペル・ヒル 異常スプライシングを阻害するアンチセンスオリゴヌクレオチドと同物質の利用法
JPH09500783A (ja) 1993-05-21 1997-01-28 ターゲッティッド ジェネティクス コーポレイション シトシンデアミナーゼ（ｃｄ）遺伝子に基づく二機能性選択融合遺伝子
US5534259A (en) 1993-07-08 1996-07-09 Liposome Technology, Inc. Polymer compound and coated particle composition
KR100356615B1 (ko) * 1993-07-13 2003-04-03 아방티 파르마 소시에테 아노님 결함아데노바이러스벡터및유전자치료에서그의사용
US5417978A (en) 1993-07-29 1995-05-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Liposomal antisense methyl phosphonate oligonucleotides and methods for their preparation and use
AU679566B2 (en) 1993-09-03 1997-07-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides
US5491084A (en) 1993-09-10 1996-02-13 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Uses of green-fluorescent protein
US5502177A (en) 1993-09-17 1996-03-26 Gilead Sciences, Inc. Pyrimidine derivatives for labeled binding partners
CA2177031A1 (en) 1993-11-30 1995-06-08 Moshe Szyf Inhibition of dna methyltransferase
US5908779A (en) 1993-12-01 1999-06-01 University Of Connecticut Targeted RNA degradation using nuclear antisense RNA
US5457187A (en) 1993-12-08 1995-10-10 Board Of Regents University Of Nebraska Oligonucleotides containing 5-fluorouracil
DE69425903T2 (de) 1993-12-09 2001-02-15 Thomas Jefferson University, Philadelphia Verbindungen und verfahren zur ortsspezifischen mutation in eukaryotischen zellen
US5446137B1 (en) 1993-12-09 1998-10-06 Behringwerke Ag Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides
US5595756A (en) 1993-12-22 1997-01-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents
US5519134A (en) 1994-01-11 1996-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolidine-containing monomers and oligomers
US5593853A (en) 1994-02-09 1997-01-14 Martek Corporation Generation and screening of synthetic drug libraries
WO1995022618A1 (en) 1994-02-22 1995-08-24 Dana-Farber Cancer Institute Nucleic acid delivery system, method of synthesis and uses thereof
US5902880A (en) 1994-08-19 1999-05-11 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. RNA polymerase III-based expression of therapeutic RNAs
US5539083A (en) 1994-02-23 1996-07-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Peptide nucleic acid combinatorial libraries and improved methods of synthesis
US6551618B2 (en) 1994-03-15 2003-04-22 University Of Birmingham Compositions and methods for delivery of agents for neuronal regeneration and survival
US6015880A (en) 1994-03-16 2000-01-18 California Institute Of Technology Method and substrate for performing multiple sequential reactions on a matrix
US5596091A (en) 1994-03-18 1997-01-21 The Regents Of The University Of California Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides
US5627053A (en) 1994-03-29 1997-05-06 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid
US5625050A (en) 1994-03-31 1997-04-29 Amgen Inc. Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics
US5525711A (en) 1994-05-18 1996-06-11 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes
US5807522A (en) 1994-06-17 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods for fabricating microarrays of biological samples
US5543152A (en) 1994-06-20 1996-08-06 Inex Pharmaceuticals Corporation Sphingosomes for enhanced drug delivery
US5525735A (en) 1994-06-22 1996-06-11 Affymax Technologies Nv Methods for synthesizing diverse collections of pyrrolidine compounds
US5549974A (en) 1994-06-23 1996-08-27 Affymax Technologies Nv Methods for the solid phase synthesis of thiazolidinones, metathiazanones, and derivatives thereof
US5597696A (en) 1994-07-18 1997-01-28 Becton Dickinson And Company Covalent cyanine dye oligonucleotide conjugates
US5597909A (en) 1994-08-25 1997-01-28 Chiron Corporation Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use
US5580731A (en) 1994-08-25 1996-12-03 Chiron Corporation N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith
US6645943B1 (en) 1994-10-25 2003-11-11 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
US5591721A (en) 1994-10-25 1997-01-07 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
US5512295A (en) 1994-11-10 1996-04-30 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Synthetic liposomes for enhanced uptake and delivery
GB9501465D0 (en) 1995-01-25 1995-03-15 King S College London Nucleoside phosphorothioate derivatives,synthesis and use thereof
DE19502912A1 (de) 1995-01-31 1996-08-01 Hoechst Ag G-Cap Stabilisierte Oligonucleotide
IT1275862B1 (it) 1995-03-03 1997-10-24 Consiglio Nazionale Ricerche Trascritto antisenso associato ad alcuni tipi di cellule tumorali ed oligodeossinucleotidi sintetici utili nella diagnosi e nel trattamento
IT1276642B1 (it) 1995-03-03 1997-11-03 Consiglio Nazionale Ricerche Trascritto antisenso presente in linfociti b ed oligodeossinucleotidi sintetici utili per inibirne l'azione
US5543165A (en) 1995-06-06 1996-08-06 Hill; Julie B. Process of making a soluble tea product with champagne-like properties
US5739311A (en) 1995-06-07 1998-04-14 Gen-Probe Incorporated Enzymatic synthesis of phosphorothioate oligonucleotides using restriction endonucleases
CA2245835A1 (en) 1995-06-14 1997-01-03 The Regents Of The University Of California Novel high affinity human antibodies to tumor antigens
US5569588A (en) 1995-08-09 1996-10-29 The Regents Of The University Of California Methods for drug screening
US5652356A (en) 1995-08-17 1997-07-29 Hybridon, Inc. Inverted chimeric and hybrid oligonucleotides
CN1308450C (zh) * 1995-11-30 2007-04-04 德克萨斯州立大学董事会 诊断和治疗肿瘤的方法及组合物
PL328563A1 (en) 1996-02-14 1999-02-01 Isis Pharmaceuticals Inc Oligonucleotides of modified sugar residues
IL125839A0 (en) 1996-03-14 1999-04-11 Genentech Inc Uses of gdnf and gdnf receptor
BR9708701A (pt) 1996-04-17 2000-01-04 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Inibidores anti-sense de expressão do fator de crescimento endotelial vascular.
US5786213A (en) 1996-04-18 1998-07-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Inhibition of endogenous gastrin expression for treatment of colorectal cancer
US5756710A (en) 1996-06-05 1998-05-26 The Trustees Of Columbia University In City Of New York Phosphorothioate oligonucleotides that bind to the V3-loop and uses thereof
US20040161777A1 (en) * 1996-06-06 2004-08-19 Baker Brenda F. Modified oligonucleotides for use in RNA interference
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
US20070275921A1 (en) * 1996-06-06 2007-11-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric Compounds That Facilitate Risc Loading
US5849902A (en) 1996-09-26 1998-12-15 Oligos Etc. Inc. Three component chimeric antisense oligonucleotides
US5739119A (en) 1996-11-15 1998-04-14 Galli; Rachel L. Antisense oligonucleotides specific for the muscarinic type 2 acetylcholine receptor MRNA
US7008776B1 (en) 1996-12-06 2006-03-07 Aventis Pharmaceuticals Inc. Compositions and methods for effecting the levels of high density lipoprotein (HDL) cholesterol and apolipoprotein AI very low density lipoprotein (VLDL) cholesterol and low density lipoprotein (LDL) cholesterol
US7235653B2 (en) 1996-12-31 2007-06-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide compositions and methods for the modulation of the expression of B7 protein
US6127533A (en) * 1997-02-14 2000-10-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-aminooxy-modified oligonucleotides
JP3756313B2 (ja) 1997-03-07 2006-03-15 武 今西 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体
DE19710159A1 (de) * 1997-03-12 1998-10-01 Hoechst Ag In vitro Transkriptionsverfahren zum Screening von Naturstoffen und anderen chemischen Substanzen
US6013786A (en) 1997-08-22 2000-01-11 Hybridon, Inc. MDM2-specific antisense oligonucleotides
US7572582B2 (en) 1997-09-12 2009-08-11 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
DE04020014T1 (de) 1997-09-12 2006-01-26 Exiqon A/S Bi-zyklische - Nukleosid,Nnukleotid und Oligonukleotid-Analoga
US6794499B2 (en) 1997-09-12 2004-09-21 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
US7285288B1 (en) 1997-10-03 2007-10-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Inhibition of Bcl-2 protein expression by liposomal antisense oligodeoxynucleotides
US7294459B1 (en) 1997-10-15 2007-11-13 President And Fellows Of Harvard College Cell regulatory genes, encoded products, and uses related thereto
US6034883A (en) 1998-01-29 2000-03-07 Tinney; Charles E. Solid state director for beams
US6175409B1 (en) 1999-04-02 2001-01-16 Symyx Technologies, Inc. Flow-injection analysis and variable-flow light-scattering methods and apparatus for characterizing polymers
US20030228597A1 (en) * 1998-04-13 2003-12-11 Cowsert Lex M. Identification of genetic targets for modulation by oligonucleotides and generation of oligonucleotides for gene modulation
US20040186071A1 (en) 1998-04-13 2004-09-23 Bennett C. Frank Antisense modulation of CD40 expression
US7321828B2 (en) 1998-04-13 2008-01-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. System of components for preparing oligonucleotides
US6221587B1 (en) 1998-05-12 2001-04-24 Isis Pharmceuticals, Inc. Identification of molecular interaction sites in RNA for novel drug discovery
EP1082012A4 (en) 1998-05-26 2002-01-16 Icn Pharmaceuticals NEW NUCLEOSIDES WITH BICYCLICAL SUGAR PART
US6833361B2 (en) 1998-05-26 2004-12-21 Ribapharm, Inc. Nucleosides having bicyclic sugar moiety
WO1999066946A1 (en) * 1998-06-24 1999-12-29 Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods for inducing apoptosis in e6-expressing cells
US6100090A (en) 1999-06-25 2000-08-08 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense inhibition of PI3K p85 expression
US20030139359A1 (en) 2001-12-04 2003-07-24 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of phospholipid scramblase 3 expression
US6242589B1 (en) 1998-07-14 2001-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphorothioate oligonucleotides having modified internucleoside linkages
US6867294B1 (en) 1998-07-14 2005-03-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped oligomers having site specific chiral phosphorothioate internucleoside linkages
US6214986B1 (en) 1998-10-07 2001-04-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of bcl-x expression
WO2000027424A2 (en) 1998-11-06 2000-05-18 Alcon Laboratories, Inc. Upregulation of endogenous prostaglandins to lower intraocular pressure
US5985663A (en) 1998-11-25 1999-11-16 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense inhibition of interleukin-15 expression
PT2314321E (pt) 1999-01-27 2014-09-26 Coda Therapeutics Inc Elemento de encaminhamento de um fluido de refrigeração de uma ferramenta de corte e processo para este encaminhamento
RU2233844C2 (ru) 1999-02-12 2004-08-10 Санкио Компани Лимитед Новые нуклеозидные и олигонуклеотидные аналоги
EP1163254B1 (en) 1999-02-26 2008-01-30 The University of British Columbia Trpm-2 antisense therapy
WO2000055318A2 (en) 1999-03-15 2000-09-21 University Of British Columbia Abc1 polypeptide and methods and reagents for modulating cholesterol levels
US20040137423A1 (en) 1999-03-15 2004-07-15 Hayden Michael R. Compositions and methods for modulating HDL cholesterol and triglyceride levels
JP5095888B2 (ja) 1999-03-18 2012-12-12 エクシコン エ／エス 特異的ｌｎａプライマによる遺伝子内における突然変異の検出
US7084125B2 (en) 1999-03-18 2006-08-01 Exiqon A/S Xylo-LNA analogues
US6734291B2 (en) 1999-03-24 2004-05-11 Exiqon A/S Synthesis of [2.2.1]bicyclo nucleosides
US6639059B1 (en) 1999-03-24 2003-10-28 Exiqon A/S Synthesis of [2.2.1]bicyclo nucleosides
EP1171078A4 (en) 1999-03-26 2002-11-06 Aventis Pharma Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR INFLUENCING THE BLOOD LEVELS OF HIGH DENSITY LIPOPROTEIN (HDL) CHOLESTEROL AND APOLIPOPROTEIN AI, VERY LOW DENSITY LIPOROTEIN (VLDL) CHOLESTEROL AND LOW DENSITY LIPOPROTEIN (LDL) CHOLESTER
ES2300261T3 (es) 1999-04-08 2008-06-16 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Potenciacion de la respuesta inmune para aplicaciones de vacunas y terapia genetica.
US6977295B2 (en) 1999-04-21 2005-12-20 Invitrogen Corporation Locked nucleic acid hybrids and methods of use
IL145497A0 (en) 1999-05-04 2002-06-30 Exiqon As L-ribo-lna analogues
US6525191B1 (en) 1999-05-11 2003-02-25 Kanda S. Ramasamy Conformationally constrained L-nucleosides
DE19925073C2 (de) 1999-06-01 2001-07-19 Stefan Weiss Nucleinsäuremoleküle mit spezifischer Erkennung von nativem PrP·S··c·, Herstellung und Verwendung
US6656730B1 (en) 1999-06-15 2003-12-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides conjugated to protein-binding drugs
WO2001000669A2 (en) 1999-06-25 2001-01-04 Genset A bap28 gene and protein
US20040006031A1 (en) 2002-07-02 2004-01-08 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of HMG-CoA reductase expression
US6147200A (en) 1999-08-19 2000-11-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-acetamido modified monomers and oligomers
AU7602400A (en) 1999-09-20 2001-04-24 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Secreted proteins and uses thereof
TR200200797T2 (tr) * 1999-09-25 2002-10-21 University Of Iowa Research Foundation İmmünostimülatör nükleik asitler
US6617442B1 (en) 1999-09-30 2003-09-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Human Rnase H1 and oligonucleotide compositions thereof
US6986988B2 (en) 1999-10-06 2006-01-17 Quark Biotech, Inc. Method for enrichment of natural antisense messenger RNA
WO2001025488A2 (en) 1999-10-06 2001-04-12 Quark Biotech, Inc. Method for enrichment of natural antisense messenger rna
JP4377494B2 (ja) * 1999-10-22 2009-12-02 東芝テック株式会社 情報入力装置
AU2778801A (en) 2000-01-07 2001-07-24 Baylor University Antisense compositions and methods
AU2001230913B2 (en) 2000-01-14 2005-06-30 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methanocarba cycloalkyl nucleoside analogues
US6303374B1 (en) 2000-01-18 2001-10-16 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of caspase 3 expression
US6287860B1 (en) 2000-01-20 2001-09-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of MEKK2 expression
JP2001247459A (ja) 2000-03-03 2001-09-11 Oakland Uniservices Ltd 癌の組み合わせ療法
AU4948801A (en) 2000-03-27 2001-10-08 Univ Delaware Targeted chromosomal genomic alterations with modified single stranded oligonucleotides
US6936467B2 (en) 2000-03-27 2005-08-30 University Of Delaware Targeted chromosomal genomic alterations with modified single stranded oligonucleotides
US7402434B2 (en) 2000-05-08 2008-07-22 Newman Stuart A Splice choice antagonists as therapeutic agents
EP1294754A1 (en) 2000-06-29 2003-03-26 Pharma Pacific Pty. Ltd. Interferon-alpha induced gene
EP1311262A4 (en) 2000-07-28 2005-06-01 Cancer Rec Tech Ltd COMBINED TREATMENT AGAINST CANCER
WO2002018388A1 (fr) 2000-08-29 2002-03-07 Takeshi Imanishi Analogues de nucleosides et derives d'oligonucleotides renfermant ces analogues
ATE385505T1 (de) 2000-09-02 2008-02-15 Gruenenthal Gmbh Antisense oligonukleotide gegen vr 1
US6444464B1 (en) 2000-09-08 2002-09-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of E2F transcription factor 2 expression
EP1319014A1 (en) 2000-09-20 2003-06-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of flip-c expression
US20030186920A1 (en) 2000-10-13 2003-10-02 Sirois Martin G. Antisense oligonucleotide directed toward mammalian vegf receptor genes and uses thereof
US20030228618A1 (en) 2000-11-24 2003-12-11 Erez Levanon Methods and systems for identifying naturally occurring antisense transcripts and methods, kits and arrays utilizing same
US20050222029A1 (en) 2001-01-04 2005-10-06 Myriad Genetics, Incorporated Compositions and methods for treating diseases
US7423142B2 (en) 2001-01-09 2008-09-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of anti-apoptotic genes
WO2002068470A2 (en) 2001-02-26 2002-09-06 Pharma Pacific Pty Ltd Interferon-alpha induced gene
US20020147165A1 (en) 2001-02-22 2002-10-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of calreticulin expression
WO2002085309A2 (en) * 2001-04-24 2002-10-31 Epigenesis Pharmaceuticals, Inc. Composition, formulations & kits for treatment of respiratory & lung disease with anti-sense oligonucleotides & a bronchodilating agent
AUPR497101A0 (en) 2001-05-14 2001-06-07 Queensland University Of Technology Polynucleotides and polypeptides linked to cancer and/or tumorigenesi
IL143379A (en) 2001-05-24 2013-11-28 Yissum Res Dev Co Oligonucleotide against human ache isoform r and its uses
US7053195B1 (en) 2001-06-12 2006-05-30 Syngenta Participatious Ag Locked nucleic acid containing heteropolymers and related methods
US7153954B2 (en) 2001-07-12 2006-12-26 Santaris Pharma A/S Method for preparation of LNA phosphoramidites
JP4210737B2 (ja) 2001-07-12 2009-01-21 ユニバーシティー オブ マサチューセッツ 遺伝子サイレンシングを仲介する低分子干渉リボ核酸のインビボにおける製造方法
US7425545B2 (en) 2001-07-25 2008-09-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of C-reactive protein expression
US20030096772A1 (en) 2001-07-30 2003-05-22 Crooke Rosanne M. Antisense modulation of acyl CoA cholesterol acyltransferase-2 expression
US7259150B2 (en) 2001-08-07 2007-08-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of apolipoprotein (a) expression
WO2003020739A2 (en) 2001-09-04 2003-03-13 Exiqon A/S Novel lna compositions and uses thereof
US20060088825A1 (en) 2001-09-17 2006-04-27 Ian Hayes Human delta-n p73 molecules and uses thereof
WO2003025177A2 (fr) * 2001-09-17 2003-03-27 Molecular Engines Laboratories Sequences impliquees dans les phenomenes de suppression tumorale, reversion tumorale, apoptose et/ou resistance aux virus et leur utilisation comme medicaments
US20040214766A1 (en) 2001-10-01 2004-10-28 Kari Alitalo VEGF-C or VEGF-D materials and methods for treatment of neuropathologies
JP4276945B2 (ja) 2001-10-10 2009-06-10 ソシエテ・デ・プロデュイ・ネスレ・エス・アー α−Ｄ−ガラクトシダーゼ活性が低下したコーヒー植物
AR037699A1 (es) 2001-12-04 2004-12-01 Monsanto Technology Llc Maiz transgenico con fenotipo mejorado
US7125982B1 (en) 2001-12-05 2006-10-24 Frayne Consultants Microbial production of nuclease resistant DNA, RNA, and oligo mixtures
US6965025B2 (en) 2001-12-10 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of connective tissue growth factor expression
CA2365811A1 (en) 2001-12-21 2003-06-21 Institut De Cardiologie A new gene therapy using antisense strategy to estrogen receptors (er .alpha. and/or er .beta.) to optimize vascular healing and cardioprotection after vascular injury
GB0130955D0 (en) 2001-12-24 2002-02-13 Cancer Res Ventures Expression system
KR20030056538A (ko) 2001-12-28 2003-07-04 주식회사 웰진 리본형 안티센스 올리고뉴클레오티드에 의한 형질전이성장 인자-β1의 효과적 저해제 개발
US20030191075A1 (en) 2002-02-22 2003-10-09 Cook Phillip Dan Method of using modified oligonucleotides for hepatic delivery
AU2003212729A1 (en) 2002-02-25 2003-09-09 Gunnar Norstedt Vitamin d upregulated protein 1 (vdup-1) methods and uses thereof
WO2003077215A2 (en) 2002-03-08 2003-09-18 Glen Research Corporation Fluorescent nitrogenous base and nucleosides incorporating same
GB2386836B (en) 2002-03-22 2006-07-26 Cancer Res Ventures Ltd Anti-cancer combinations
US7169916B2 (en) 2002-04-01 2007-01-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chloral-free DCA in oligonucleotide synthesis
US20050215504A1 (en) 2002-04-02 2005-09-29 Bennett C F Antisense modulation of sterol regulatory element-binding protein-1 expression
JP4338527B2 (ja) 2002-04-05 2009-10-07 サンタリス ファーマ アー／エス ＨＩＦ−１α発現を調節するオリゴマー化合物
US7569575B2 (en) 2002-05-08 2009-08-04 Santaris Pharma A/S Synthesis of locked nucleic acid derivatives
US6808906B2 (en) 2002-05-08 2004-10-26 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Directionally cloned random cDNA expression vector libraries, compositions and methods of use
US7199107B2 (en) 2002-05-23 2007-04-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of kinesin-like 1 expression
US7148342B2 (en) 2002-07-24 2006-12-12 The Trustees Of The University Of Pennyslvania Compositions and methods for sirna inhibition of angiogenesis
US20040033480A1 (en) 2002-08-15 2004-02-19 Wong Norman C.W. Use of resveratrol to regulate expression of apolipoprotein A1
US7750211B2 (en) 2002-09-10 2010-07-06 The Samuel Roberts Noble Foundation Methods and compositions for production of flavonoid and isoflavonoid nutraceuticals
WO2004030750A1 (en) 2002-09-25 2004-04-15 Pharmacia Corporation Antisense modulation of farnesoid x receptor expression
EP1549767A4 (en) 2002-09-26 2006-06-07 Amgen Inc MODULATION OF EXPRESSION OF FORKHEAD BOX O1A
AU2003261405A1 (en) 2002-11-01 2004-06-07 University Of Massachusetts Regulation of transcription elongation factors
MXPA05004722A (es) 2002-11-01 2005-08-03 Univ Pennsylvania Composiciones y metodos para la inhibicion del factor inducible por hipoxia 1 alfa con acido ribonucleico corto de interferencia.
GB2394658A (en) 2002-11-01 2004-05-05 Cancer Rec Tech Ltd Oral anti-cancer composition
AU2003291721A1 (en) * 2002-11-05 2004-06-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphorous-linked oligomeric compounds and their use in gene modulation
WO2004044139A2 (en) * 2002-11-05 2004-05-27 Isis Parmaceuticals, Inc. Modified oligonucleotides for use in rna interference
US7696345B2 (en) 2002-11-05 2010-04-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
US20060009410A1 (en) 2002-11-13 2006-01-12 Crooke Rosanne M Effects of apolipoprotein B inhibition on gene expression profiles in animals
PT2284266E (pt) * 2002-11-14 2013-12-17 Thermo Fisher Scient Biosciences Inc Siarn contra tp53
EP1569661B1 (en) 2002-11-18 2009-09-09 Santaris Pharma A/S Antisense design
US7314750B2 (en) * 2002-11-20 2008-01-01 Affymetrix, Inc. Addressable oligonucleotide array of the rat genome
US7144999B2 (en) 2002-11-23 2006-12-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of hypoxia-inducible factor 1 alpha expression
US7713738B2 (en) 2003-02-10 2010-05-11 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds for the modulation of survivin expression
US7598227B2 (en) 2003-04-16 2009-10-06 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of apolipoprotein C-III expression
US7339051B2 (en) 2003-04-28 2008-03-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of severe acute respiratory syndrome (SARS)
CA2525619A1 (en) * 2003-05-16 2005-03-03 Rosetta Inpharmatics, Llc Methods and compositions for rna interference
WO2004108081A2 (en) 2003-06-02 2004-12-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide synthesis with alternative solvents
EP2241572A3 (en) 2003-06-03 2011-04-06 Eli Lilly And Company Modulation of survivin expression
US7825235B2 (en) 2003-08-18 2010-11-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 2 expression
CN100558893C (zh) 2003-09-18 2009-11-11 Isis药物公司 eIF4E表达的调节
US20070009899A1 (en) * 2003-10-02 2007-01-11 Mounts William M Nucleic acid arrays for detecting gene expression in animal models of inflammatory diseases
US8258105B2 (en) 2003-10-07 2012-09-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotides optimized for kidney targeting
WO2005045034A2 (en) 2003-10-23 2005-05-19 Sirna Therapeutics, Inc. RNA INTERFERENCE MEDIATED TREATMENT OF PARKINSON DISEASE USING SHORT INTERERING NUCLEIC ACID (siNA)
KR20070006709A (ko) 2003-12-23 2007-01-11 산타리스 팔마 에이/에스 Ｂｃｌ-2의 조절을 위한 올리고머 화합물
BRPI0506826A (pt) 2004-01-12 2007-05-29 Univ Pennsylvania métodos para melhorar especìfica e seletivamente a expressão de gene de proteìna(s) morfogenéticas ósseas no tecido, dispositivo e métodos de tratamento e método para se determinar um sinal seletivo que gera um campo elétrico
US7468431B2 (en) 2004-01-22 2008-12-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eIF4E-BP2 expression
GB0403041D0 (en) 2004-02-11 2004-03-17 Milner Anne J Induction of apoptosis
US20050221354A1 (en) * 2004-02-18 2005-10-06 Wyeth Nucleic acid arrays for monitoring expression profiles of drug target genes
EP1566202A1 (en) 2004-02-23 2005-08-24 Sahltech I Göteborg AB Use of resistin antagonists in the treatment of rheumatoid arthritis
US7402574B2 (en) 2004-03-12 2008-07-22 Avi Biopharma, Inc. Antisense composition and method for treating cancer
US8394947B2 (en) * 2004-06-03 2013-03-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Positionally modified siRNA constructs
US7297786B2 (en) 2004-07-09 2007-11-20 University Of Iowa Research Foundation RNA interference in respiratory epitheial cells
US7427675B2 (en) 2004-08-23 2008-09-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for the characterization of oligonucleotides
US20090253583A1 (en) * 2004-09-27 2009-10-08 Med Biogene Inc. Hematological Cancer Profiling System
EP1833840B9 (en) 2004-11-09 2010-11-10 Santaris Pharma A/S Potent lna oligonucleotides for the inhibition of hif-1a
ZA200704254B (en) * 2004-11-09 2009-09-30 Santaris Pharma As LNA oligonucleotides and the treatment of cancer
US7220549B2 (en) 2004-12-30 2007-05-22 Helicos Biosciences Corporation Stabilizing a nucleic acid for nucleic acid sequencing
AU2006261732B2 (en) 2005-06-27 2011-09-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. RNAi modulation of HIF-1 and theraputic uses thereof
US20070213292A1 (en) * 2005-08-10 2007-09-13 The Rockefeller University Chemically modified oligonucleotides for use in modulating micro RNA and uses thereof
EP1937312B1 (en) 2005-08-30 2016-06-29 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds for modulation of splicing
WO2007051045A2 (en) 2005-10-28 2007-05-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of huntingtin gene
AU2006311725B2 (en) 2005-11-04 2011-11-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of NAV1.8 gene
EP2431467A3 (en) * 2005-11-17 2012-05-02 Board Of Regents, The University Of Texas Modulation of gene expression by oligomers targeted to chromosomal DNA
CA2631713A1 (en) 2005-12-02 2007-09-13 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Modulators of cdc2-like kinases (clks) and methods of use thereof
CN101374964B (zh) 2005-12-09 2013-07-17 贝勒研究院 外周血液白细胞转录模式的模块水平分析
WO2007071824A1 (en) 2005-12-20 2007-06-28 Oy Jurilab Ltd Novel genes and markers associated with high-density lipoprotein -cholesterol (hdl-c)
CN100356377C (zh) 2005-12-20 2007-12-19 无锡永中科技有限公司 文档显示方法
WO2007087113A2 (en) * 2005-12-28 2007-08-02 The Scripps Research Institute Natural antisense and non-coding rna transcripts as drug targets
US7569686B1 (en) 2006-01-27 2009-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for synthesis of bicyclic nucleic acid analogs
KR101304071B1 (ko) 2006-01-27 2013-09-06 아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드 6-변형된 바이시클릭 핵산 유사체
KR101462874B1 (ko) 2006-03-31 2014-11-18 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ｅｇ5 유전자의 발현을 억제하는 이본쇄 리보핵산
CA2651042A1 (en) 2006-05-05 2007-12-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating expression of sglt2
US7666854B2 (en) 2006-05-11 2010-02-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bis-modified bicyclic nucleic acid analogs
CN101490074B (zh) 2006-05-11 2013-06-26 Isis制药公司 5’-修饰的双环核酸类似物
NZ572666A (en) 2006-05-11 2010-11-26 Alnylam Pharmaceuticals Inc Compositions comprising double stranded rna and methods for inhibiting expression of the pcsk9 gene
EP1867338A1 (en) 2006-05-30 2007-12-19 Université Libre De Bruxelles Pharmaceutical composition comprising apolipoproteins for the treatment of human diseases
US20080199961A1 (en) * 2006-08-25 2008-08-21 Avi Biopharma, Inc. ANTISENSE COMPOSITION AND METHOD FOR INHIBITION OF miRNA BIOGENESIS
WO2008066672A2 (en) 2006-11-06 2008-06-05 Beth Israel Deaconess Medical Center Identification and use of small molecules to modulate transcription factor function and to treat transcription factor associated diseases
WO2008057556A2 (en) 2006-11-06 2008-05-15 Beth Israel Deaconess Medical Center Identification and use of small molecules to modulate ese-1 transcription factor function and to treat ese-1 transcription factor associated diseases
US8093222B2 (en) 2006-11-27 2012-01-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating hypercholesterolemia
US20100169996A1 (en) 2007-01-19 2010-07-01 Lionel Navarro Methods and compositions for modulating the sirna and rna-directed-dna methylation pathways
US20100255117A1 (en) 2007-04-06 2010-10-07 The Johns Hopkins University Methods and compositions for the treatment of cancer
US20080293142A1 (en) 2007-04-19 2008-11-27 The Board Of Regents For Oklahoma State University Multiple shRNA Expression Vectors and Methods of Construction
US9040774B2 (en) 2008-07-01 2015-05-26 Monsanto Technology Llc Recombinant DNA constructs encoding ribonuclease cleavage blockers and methods for modulating expression of a target gene
CA2739464C (en) 2008-10-03 2020-03-31 Opko Curna, Llc Treatment of apolipoprotein-a1 related diseases by inhibition of natural antisense transcript to apolipoprotein-a1
EP2177615A1 (en) 2008-10-10 2010-04-21 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Method for a genome wide identification of expression regulatory sequences and use of genes and molecules derived thereof for the diagnosis and therapy of metabolic and/or tumorous diseases
US8606289B2 (en) 2008-11-10 2013-12-10 Qualcomm Incorporated Power headroom-sensitive scheduling
EP2358382A2 (en) 2008-11-22 2011-08-24 The University of Bristol NOVEL USES OF VEGFxxxB
KR101840618B1 (ko) 2008-12-04 2018-03-20 큐알엔에이, 인크. 종양 억제 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의해 종양 억제 유전자 관련된 질환의 치료
WO2013080784A1 (ja) 2011-11-30 2013-06-06 シャープ株式会社 メモリ回路とその駆動方法、及び、これを用いた不揮発性記憶装置、並びに、液晶表示装置

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Drug Discov. Today, Vol. 11, No. 11-12, pp. 503-508 (2006.05.19.)

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