KR101731480B1

KR101731480B1 - A cosmetic composition comprising eastern prickly pear extract having antioxidant activity

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Publication number: KR101731480B1
Application number: KR1020150012724A
Authority: KR
Inventors: 김미향; 김수야; 윤유진; 주재경; 김서연; 천지현; 이주영
Original assignee: 김수야; 신라대학교 산학협력단
Priority date: 2015-01-27
Filing date: 2015-01-27
Publication date: 2017-05-08
Also published as: KR20160092287A

Abstract

본 발명은 피부섬유아세포 재생능을 가진 천년초 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 구체적으로 항산화 활성 및 피부섬유아세포 재생능을 가진 천년초(Opintia humifusa) 씨 메탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 활성 및 피부세포 재생능을 가진 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다. 상기 천년초 씨 메탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 다른 용매 또는 다른 부위를 사용한 것에 비하여 항산화 활성 및 피부섬유아세포 재생능이 현저하게 우수하여, 항산화 기능이 우수한 화장료 조성물의 원료를 개발한 것이므로, 기존 식용 또는 목욕제 등 외용으로 사용되던 천년초의 새로운 활용도를 개발하였다는 점에서 그 의미가 크다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising as an active ingredient an extract of Chenille seeds having the ability to regenerate skin fibroblasts, The present invention relates to a functional cosmetic composition having an antioxidative activity and skin cell regeneration ability, which comprises an ethyl acetate fraction of a methanol extract of C. humifusa as an active ingredient. The ethylacetate fraction of the methanol extract of Cheonnyun Cho has remarkably excellent antioxidative activity and regeneration ability of the dermal fibroblast, as compared with the other solvent or other parts, and thus the raw material of the cosmetic composition having excellent antioxidative function has been developed. It is significant in that it has developed a new utilization of the tsunami first used for external use.

Description

TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a cosmetic composition having an antioxidative activity,

본 발명은 피부세포 노화방지능, 구체적으로 항산화 활성 및 피부섬유아세포 보호능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition having antioxidative activity against skin aging, specifically antioxidative activity and protective ability against dermal fibroblast.

피부는 체중의 15% 내지 20%를 차지하는 인체의 가장 큰 기관으로서, 모든 장기와 기관을 싸고 있고, 외부 환경으로부터 신체를 보호하며, 체내의 수분과 온도를 유지하여 체내의 항상성을 조절하는데 중요한 역할을 하는 인체의 기관이다.Skin is the largest organ of the human body, which accounts for 15% to 20% of body weight. It is important to protect all the organs and organs, to protect the body from the external environment, to maintain the body's moisture and temperature, Is an organ of the human body.

이러한 피부 또한, 다른 장기와 같이 나이가 들어감에 따라 노화현상이 일어나는데, 피부의 노화 현상은 구체적으로 내인성 노화와 외인성 노화로 나누어질 수 있다.Such skin also becomes aged as it grows with other organs. Skin aging can be divided into endogenous aging and extrinsic aging.

상기 내인성 노화는 시간이 지남에 따라 교원섬유, 탄력섬유 등 세포외 기질 단백질의 합성 양이 줄어들고 탄력이 감소되며 피부세포 내 수분이 손실되고 각질층의 구조가 변화하는 자연적 노화를 의미한다. 한편, 상기 외인성 노화는 자외선, 공기오염, 담배연기, 스트레스 등과 같은 외부자극이 반복되면서, 상기 외부자극이 원인이 되는 노화로, 대표적으로 광노화를 들 수 있다. 상기 광노화는 자외선 등의 과도한 광노출에 의해 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)이 발생되고, 이로 인해 사이토카인(cytokine)의 생성이 촉진되어 여러 신호전달 체계를 활성화시킴으로써, 결과적으로 activatorprotetin-1(AP-1)과 nuclearfactor-kB(NF-kB)의 활성화에 의한 염증반응이 유도되어 피부를 구성하는 지질, 단백질, 핵산, 효소 등이 손상되어 노화가 일어나는 것을 의미한다.The endogenous aging means natural aging in which the amount of synthesis of extracellular matrix proteins such as collagen fibers and elastic fibers is reduced, elasticity is reduced, moisture in the skin cells is lost, and the structure of the stratum corneum changes over time. On the other hand, the extrinsic aging is aging caused by the external stimuli while external stimuli such as ultraviolet rays, air pollution, tobacco smoke, stress and the like are repeated, and the photoaging is typically exemplified. In the photo-aging, reactive oxygen species (ROS) are generated by excessive light exposure such as ultraviolet rays, thereby promoting the generation of cytokines and activating various signal transduction systems. As a result, activator protein-1 (AP-1) and nuclearfactor-kB (NF-kB) induced inflammation, resulting in damage to lipids, proteins, nucleic acids and enzymes that constitute the skin, leading to aging.

상기 자외선 노출에 의한 피부에서의 활성산소종 생성은 증가된 활성산소종의 생성이 항산화 방어 기전을 손상시켜 피부 단백질과 다른 고분자들의 산화 스트레스와 광 손상을 야기하는 것으로 알려져 있다. 또한, 피부에 다양한 형태로 영향을 주어 깊은 주름, 잔주름, 피부 거침, 피부 건조와 같은 현상을 발생시켜 피부노화를 유발시키는 것으로 알려져 있다.It is known that the production of reactive oxygen species by exposure to ultraviolet light causes the oxidation of the oxidative stress and photodamage of skin proteins and other macromolecules due to the damage of the antioxidant defense mechanism by the increase of active oxygen species. In addition, it is known to cause skin aging by causing various phenomena such as deep wrinkles, fine wrinkles, skin roughness, and skin dryness by affecting the skin in various forms.

최근, 환경오염이나 이상기후 등으로 인한 피부손상이 더욱 많이 야기되면서, 이러한 피부손상의 예방 및 개선에 대한 수요가 증가하고 있으며, 이러한 수요 증가로 인해 기능성 화장품 연구에서 기존 미백이나 주름예방과 달리 피부손상의 예방 및 개선과 이를 위한 항산화 활성과 관련된 신소재 개발은 새롭게 각광받는 분야로, 그 중요성이 더욱 증대되고 있다.In recent years, there has been a growing demand for prevention and improvement of skin damages due to environmental pollution and abnormal climatic conditions. As a result of this increase in demand, in functional cosmetic research, The development of new materials related to the prevention and improvement of damage and the antioxidant activity for this purpose is a newly emerging field, and its importance is increasing more and more.

특히, 환경오염으로 인해 민감성 피부를 가진 소비자가 증가하면서, 화학소재에 의한 자극을 최소화하기 위하여, 여러 기능성을 가진 천연물을 이용한 화장품에 대한 수요가 지속적으로 증가 추세에 있다.Especially, as consumers who have sensitive skin due to environmental pollution increase, the demand for cosmetics using various functional natural products is continuously increasing in order to minimize stimulation by chemical materials.

이러한 이유로 피부 내에서 부작용이 나타나지 않으면서 효능을 나타낼 수 있는 천연물 유래 기능성 소재의 개발에 관심이 주목되고 있으며, 천연물질을 이용한 다양한 기능성 화장품의 개발과 효능 성분 개발에 관한 많은 연구들이 보고되고 있다.For this reason, attention has been drawn to the development of functional materials derived from natural materials, which can exhibit efficacy without adverse effects in the skin, and many studies on the development of various functional cosmetics using natural substances and the development of effective ingredients have been reported.

현재까지, 국내에서는 귤, 자몽, 알로에, 해조류 등을 기능성 화장품 및 비누의 원료로 사용하고 있고 천연물 유래의 화학물질을 이용한 피부노화방지 효능의 화장품 원료 개발도 진행 중이다.So far, in Korea, tangerine, grapefruit, aloe, algae, etc. have been used as raw materials for functional cosmetics and soaps, and raw materials for cosmetics with anti-aging properties using natural chemical substances are under development.

이와 관련하여, 현재까지 연구가 진행된 다양한 식물 자원을 바탕으로 항산화활성 및 피부세포보호능을 갖는 피부노화방지능에 관한 연구가 진행되었으나, 천년초 추출물을 이용하여 체계적이고 과학적인 연구를 통해 피부노화 방지 즉, 항산화 활성 및 피부세포 보호를 위한 최적 조건을 확인한 연구결과는 아직 보고되지 아니하였다.In this regard, studies on the antioxidant activity and the ability to protect skin against aging have been carried out based on various plant resources that have been studied so far. However, In other words, the results of studies confirming the optimal conditions for antioxidant activity and protection of skin cells have not been reported yet.

KRKR 10-123864910-1238649 BB KRKR 10-140255010-1402550 BB KRKR 2013-00597802013-0059780 AA

상기 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명의 목적은 항산화 활성과 피부세포보호능이 우수한 천연물질 유래 성분을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a cosmetic composition containing as an active ingredient a component derived from a natural substance having excellent antioxidative activity and skin cell protective ability.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 천년초(Opintia humifusa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention cheonnyeoncho (Opintia humifusa extract as an active ingredient.

보다 구체적으로, 본 발명은 항산화 활성 및 피부섬유아세포 재생능을 가진 천년초(Opintia humifusa) 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.More specifically, the present invention relates to an antioxidant activity inhibitor, humifusa extract of the present invention as an active ingredient.

상기 화장료 조성물은 항산화 활성 및 피부세포 재생능을 가진 기능성 화장료 조성물일 수 있다.The cosmetic composition may be a functional cosmetic composition having antioxidant activity and skin cell regeneration ability.

또한, 상기 천년초는 천년초 씨앗일 수 있으며, 이러한 측면에서 상기 천년초 추출물은 천년초 씨앗의 메탄올 추출물일 수 있다.In addition, the perennial plant may be a methanol extract of the perennial plant seeds.

본 명세서에 사용된 용어 "유효성분"은 피부 상태에 적용하여 예방, 개선 또는 보완 효과를 제공하는 화장료 조성물의 성분을 의미한다.As used herein, the term "active ingredient" refers to a component of a cosmetic composition that is applied to a skin condition to provide a preventive, ameliorative or supplemental effect.

본 명세서에 사용된 용어 "화장료 조성물"은 인체를 청결 및 미화하여 매력을 더하고 용모를 밝게 변화시키거나 피부 및 모발의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 조성물로 세정제(detergents) 및 화장제(cosmetics)를 포함하는 개념이다.As used herein, the term "cosmetic composition" refers to a composition used in the human body to clean and fineen the human body to add charm, brightens appearance, or maintains or promotes the health of skin and hair, (cosmetics).

본 발명의 발명자들은 종래 부작용이 문제되거나 그 효과 자체가 미비하였던 화학물질 유래 화장료 조성물의 기능성 성분을 대체하기 위하여, 항산화 활성을 갖는 여러 식물 등, 천연 물질 유래의 유효성분에 대해 연구하던 중, 천년초의 추출물이 항산화 활성이 매우 우수하고, 특히 천년초 씨의 메탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획이 다른 분획용매에 의한 분획에 비하여, 현저하게 우수한 항산화활성과 피부섬유아세포 보호능 또는 피부섬유아세포 재생능을 가진 다는 것을 확인하여, 본 발명을 완성하였다.
The inventors of the present invention have been studying active ingredients derived from natural materials such as various plants having antioxidative activity in order to replace functional ingredients of cosmetic compositions derived from chemical substances which have had problems with conventional side effects or the effects thereof are insufficient, Extract of the present invention has an excellent antioxidative activity, and in particular, the ethyl acetate fraction of the methanol extract of the Chennaceae seed has remarkably excellent antioxidative activity and the ability to regenerate the dermal fibroblast or the skin fibroblast regeneration ability as compared with the fraction of the other fraction solvent The present invention has been completed.

이하 본 발명을 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 항산화 활성 및 피부섬유아세포 재생능을 가진 천년초(Opintia humifusa) 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising an ethyl acetate fraction of an extract of Opuntia humifusa having an antioxidative activity and a skin fibroblast regeneration ability as an active ingredient.

상기 천년초(Opintia humifusa, Eastern prickly pear)는 우리나라에 자생하는 오핀티아 속(Opintia sp.) 선인장 중 내륙에서 월동이 가능한 선인장으로, 제주도에 자생하는 선인장인 백년초와 구분된다. 상기 천년초는 줄기의 형태가 손바닥과 비슷하여 손바닥선인장으로도 불리운다The above- Humifusa , Eastern prickly pear) is an indigenous winter cactus among the Opuntia spp ., which is native to Korea. It is distinguished from a cactus that is native to Jeju Island. The shape of the trunk is similar to that of the palm of the hand and is also called the palm cactus

상기 천년초는 다육질의 여러해살이 풀 즉, 다년생 현화식물로 줄기는 일반적인 선인장처럼 다육질로서 몇 군데가 마디처럼 잘록한 경절이 있고, 상기 경절은 원통 모양, 공 모양, 타원 모양 등 그 모양이 여러 가지이며, 그 모양에 따라 분류되기도 한다. 상기 경절에는 헛물관이 있고, 표피 가까이에 관다발이 있으며, 새순에 달리는 잎은 바늘처럼 생겼고, 육질로서 완전히 자란 다음에 떨어진다. 떡잎은 바소꼴 또는 삼각형이며 같은 육질로서 화피와 포가 서로 다르다. 일반적으로, 상기 천년초는 자체수분을 절반 이하로 감소시켜, 영하 20℃에서도 얼어 죽지 않고 월동이 가능하여, 생명력을 유지할 수 있는 것으로 알려져 있다.The above millennium is a fleshy perennial plant, that is, a perennial flowering plant. The stem is fleshy like a common cactus, and there are several places where it is constricted like a node, and the shape is cylindrical, ball shape, elliptical shape, It is also classified according to its shape. In this passage there is a vasculature, and there is a vascular bundle near the epidermis. Leaves running on the spikes are like needles, full grown as flesh and then fall off. The cotyledon is basal or triangular in shape and has the same flesh quality. Generally, it is known that the water of the millennia reduces its own water to less than half, and can survive freezing and freezing even at a temperature of minus 20 < 0 > C, thereby maintaining vitality.

상기 천년초의 경우, 종래 동초강목 등을 통해 상기 천년초 즙이 변비 치료효과, 이뇨효과, 장운동의 활성화 및 식욕증진 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 천년초 줄기를 이용한 항산화 활성, 항비만활성, 간 보호 효과 등이 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 천년초에 관한 연구는 주로 줄기와 열매 특히, 줄기에 관한 수행되어 왔으며, 이러한 연구 결과로 천년초 과육 및 줄기는 식품으로 판매되고 있다. 이와 같이, 예로부터 다양한 방법으로 사용되어온 천년초의 경우, 식품이나 의약으로 사용되어 왔으므로, 그 안전성은 보장된 것이라고 평가된다.In the case of the above-mentioned millennia, it is known that the above-mentioned Tianyuan early juice has the effect of treating the constipation, the diuretic effect, the activation of the intestinal tract and the appetite enhancement through the Dongshu gangmyeong etc. and the antioxidant activity, antiobesity activity, . Studies on these millennia have been carried out mainly on stem and fruit, especially stems. As a result of these studies, the millennia flesh and stem have been sold as food. As described above, in the case of the millenniaceps that have been used in various ways since the past, it has been used as food or medicine, and therefore, the safety is evaluated as being guaranteed.

상기 천년초는 바람직하게는 천년초 열매의 씨 즉, 천년초 씨 또는 천년초 씨앗일 수 있다.Preferably, the millet seeds may be seeds of millet seeds, that is, millet seeds or millet seeds.

상기 천년초 추출물은 천년초 씨의 용매 추출법에 의해 제조된 용매 추출물일 수 있으며, 상기 용매 추출물은 물, 유기용매 및 이들의 혼합물로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나의 용매, 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 5의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나의 용매, 더욱 바람직하게는 메탄올을 이용하여 제조한 것일 수 있다.The quinterniaceae extract may be a solvent extract prepared by a solvent extraction method of Chennai seeds, and the solvent extract may be any solvent selected from the group consisting of water, an organic solvent and a mixture thereof, preferably water, Alcohol, and a mixture thereof, more preferably, methanol.

상기 유기용매는 탄소수 1 내지 5의 알코올, 상기 알코올 희석수, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매와 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산, 또는 디클로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다. 상기 탄소수 1 내지 5의 알코올은 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜 피나콜 등의 2가 알코올인 글리콜 또는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 이소프로판올 등의 1가 알코올일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 알코올 희석수는 1가 알코올 또는 2가 알코올을 10%(v/v) 내지 99.9%(v/v)로 물에 희석한 것일 수 있다.The organic solvent may be a polar solvent such as an alcohol having 1 to 5 carbon atoms, a diluted alcohol, ethylacetate or acetone, or a nonpolar solvent such as ether, chloroform, benzene, hexane or dichloromethane or a mixture thereof. The alcohol having 1 to 5 carbon atoms may be a glycol such as ethylene glycol, propylene glycol or butylene glycol pinacol, or a monohydric alcohol such as methanol, ethanol, propanol, butanol or isopropanol, but is not limited thereto . In addition, the alcohol diluted water may be a diluted solution of monohydric alcohol or divalent alcohol in water at 10% (v / v) to 99.9% (v / v).

상기 천년초 추출물은 용매 추출법에 의한 용매 추출물일 수 있다. 보다 구체적으로 상기 천년초 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법, 즉 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조될 수 있으며, 일 예로, 냉침추출법, 온침추출법, 열 추출법, 초음파 추출법, 수증기 증류법 또는 초임계유체 추출법이나 아임계유체 추출법 등의 방법으로 제조된 것일 수 있다. 상기 추출법을 수행하기 위해서는 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다.The perennial plant extract may be a solvent extract by a solvent extraction method. More specifically, the citrus extract may be prepared according to a conventional method known in the art, that is, a conventional method for producing a plant extract. Examples of the extract include a cold extraction method, a warm extraction method, a heat extraction method, an ultrasonic extraction method, And may be produced by a method such as a critical fluid extraction method or a subcritical fluid extraction method. Conventional extraction equipment, ultrasonic milling extractors or fractionators may be used to carry out the extraction method.

상기 천년초 추출물의 분획물은 천년초 씨, 천년초 씨의 건조물 또는 천년초 씨의 건조물의 분쇄물에 추출용매를 가하여 추출함으로써 제조된 조추출물에 분획용매를 가하여 분획하여 제조된 것일 수 있다.The fraction of the mushroom extract may be one prepared by extracting the crude extract of the mushroom extract, the dried product of the mushroom, the dried product of the mushroom, or the dried product of the mushroom, with a fraction solvent.

또한, 상기 용매로 추출한 추출물은 이후, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 에틸에테르, 클로로포름, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 용매로 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 상기 분획 시 용매는 2종 이상 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하거나 혼합하여 사용하여, 각 용매 분획물을 제조할 수 있다.Further, the extract extracted with the solvent may be further fractionated with any one solvent selected from the group consisting of hexane, methylene chloride, acetone, ethyl acetate, ethyl ether, chloroform, water, and mixtures thereof. Two or more kinds of solvents may be used for the fractionation, and each solvent fraction may be used sequentially or in combination according to the polarity of the solvent.

상기 분획용매는 바람직하게는 최종 제조된 천년초 추출물의 분획물의 항노화 효과, 구체적으로 항산화 효과 및 피부섬유아세포 보호능의 측면에서 효과가 우수한 에틸아세테이트 일 수 있다.The fraction solvent may preferably be ethyl acetate having an excellent effect in terms of anti-aging effect, specifically antioxidative effect and skin fibroblast protection function of the fraction of the perennial plant extract.

상기 제조된 추출물 또는 상기 분획과정을 수행하여 수득한 분획물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 구체적으로 상기 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 상기 농축은 감압 농축기, 일예로 회전 증발기를 이용하여 감압 농축할 수 있으며, 상기 건조는 일예로 동결건조법으로 수행할 수 있다.The thus-prepared extract or the fraction obtained by performing the fractionation process may be filtered, concentrated or dried to remove the solvent, and may be subjected to both filtration, concentration and drying. Specifically, the filtration can be performed using a filter paper or a vacuum filter, and the concentration can be reduced by using a vacuum concentrator, for example, a rotary evaporator. The drying can be performed by, for example, freeze-drying.

상기 천년초 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 항산화 활성이 우수하고 피부섬유아세포 재생능이 뛰어나므로, 광노화 등에 의한 피부노화의 예방 및 개선에 효과적으로 이용될 수 있다. 이러한 측면에서, 항산화 활성 및 피부섬유아세포 재생능을 가진 천년초 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 화장료 조성물, 구체적으로 항산화 활성 및 피부세포 재생능을 가진 기능성 화장료 조성물의 유효성분으로 활용될 수 있다.Since the ethyl acetate fraction of the citrus extract has an excellent antioxidative activity and excellent dermal fibroblast regeneration ability, it can be effectively used for prevention and improvement of skin aging due to photoaging and the like. In this respect, the ethyl acetate fraction of the Chennaceae extract having antioxidant activity and regeneration ability of the skin fibroblast can be used as an effective ingredient of a cosmetic composition, specifically, a functional cosmetic composition having antioxidative activity and skin cell regeneration ability.

상기 화장료 조성물은 상기 천년초 추출물, 바람직하게는 천년초 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 전체 조성물에 대하여 0.0001 내지 50중량% 또는 0.001 내지 25중량% 또는 0.01 내지 10중량% 포함될 수 있다. 보다 구체적으로, 천년초 추출물, 바람직하게는 천년초 추출물의 에틸아세테이트 분획물의 함량은 피부노화의 예방 또는 개선 효과의 달성을 위하여 최소치 이상의 함량이어야 하나, 피부자극 여부 및 과량 첨가에 따른 사용감 저하나 각종 제형에의 적용 가능성을 고려하여, 상기 범위 이내에서 자유롭게 조절될 수 있다.The cosmetic composition may contain 0.0001 to 50 wt.%, Or 0.001 to 25 wt.%, Or 0.01 to 10 wt.% Of the citrus extract, preferably the ethyl acetate fraction of the citrus extract. More specifically, the content of the ethyl acetate fraction of the perennial plant extract, preferably the perennial plant extract, should be at least a minimum content for the purpose of preventing or improving the aging of the skin. However, It can be freely adjusted within the above range in consideration of the applicability of the present invention.

이때, 유효성분의 함량 및 추가 성분의 함량은 제형 또는 화장료 조성물에 함유되는 성분들의 함량에 따라 상기 범위 내에서 적절히 조절될 수 있다.At this time, the content of the active ingredient and the content of the additional ingredient may be appropriately adjusted within the above range depending on the content of the ingredients contained in the formulation or cosmetic composition.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 외용연고, 기초화장품, 메이크업 화장품, 바디 화장품 또는 면도용 화장품 등의 용도로 제공될 수 있으며, 상기 기초화장품의 예로는 에센스, 로션, 크림, 젤, 화장수, 팩, 마사지 크림, 유액 등이 있을 수 있고, 상기 메이크업 화장품의 예로는 파운데이션, 립스틱, 아이새도, 아이라이너, 마스카라, 아이브로우 펜슬, 메이크업 베이스 등이 있을 수 있으며, 바디 화장품으로는 비누, 액체 세정제, 입욕제, 썬 스크린 크림, 썬 오일 등이 있을 수 있고, 면도용 화장품으로는 애프터셰이브로션, 셰이빙 크림 등이 있다.The cosmetic composition of the present invention can be used for the external ointment for skin, basic cosmetics, makeup cosmetics, body cosmetics or shaving cosmetics. Examples of the basic cosmetics include essences, lotions, creams, gels, lotions, Cream, emulsion, etc. Examples of the make-up cosmetic may include a foundation, a lipstick, an eye shadow, an eyeliner, a mascara, an eyebrow pencil and a makeup base. Examples of body cosmetics include soaps, liquid cleansing agents, , Sunscreen cream, sun oil, and shaving cosmetics include aftershave lotion and shaving cream.

본 발명의 화장료 조성물에는 유효성분으로 천년초 추출물, 바람직하게는 천년초 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 포함하거나, 상기 유효성분에 추가로 항산화활성 또는 피부세포보호능을 갖는 기능성 물질이나 물성 개선을 위한 부형제, 희석제 등의 물질이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 물질이나 물성 개선을 위한 물질은 본 발명의 효과를 유지하는 범위 내에서 추가될 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention may contain, as an active ingredient, a tubercanthopteran extract, preferably an ethyl acetate fraction of a tubercle bloom extract, or a functional material having an antioxidative activity or a skin cell protective function, an excipient for improving physical properties, May be further included. The functional material or the material for improving the physical properties may be added within the range of maintaining the effect of the present invention.

일 예로, 상기 화장료 조성물에는 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류 또는 합성 고분자 물질 등이 추가로 첨가될 수 있다. 이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로 유지 성분, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 안료, 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, pH 조정제, 알코올, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제 또는 정제수 등일 수 있다.For example, the cosmetic composition may further contain a perfume, a pigment, a bactericide, an antioxidant, an antiseptic, a moisturizer, a thickening agent, an inorganic salt, or a synthetic polymer material to improve physical properties. An organic pigment, an organic pigment, an ultraviolet absorber, a pH adjuster, an alcohol, a blood circulation accelerator, a cold agent, a limiting agent, or purified water may be used as a blending component that may be added.

또한, 상기 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩타이드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군중에서 선택된 1종 이상을 더욱 포함할 수 있다.The cosmetic composition may further include at least one selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, high molecular weight peptides, polymeric polysaccharides, sphingolipids and seaweed extracts.

상기 유효성분 이외의 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되지 않으며, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.The components other than the above-mentioned effective components may be added within the range that does not impair the objects and effects of the present invention.

또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있으며, 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형 일 예로 스프레이, 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등의 제형일 수 있다.The cosmetic composition may take the form of a solution, an emulsion, a viscous mixture or the like, and may be in the form of a spray, an emulsion, a cream, a lotion, a pack, a foundation, a lotion, a serum, Or the like.

보다 구체적으로 본 발명의 화장료 조성물은 스프레이, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클린저, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트리젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스 및 팩의 제형을 포함할 수 있다.More particularly, the cosmetic composition of the present invention can be used as a cosmetic composition in the form of a spray, a soap, a cleansing foam, a cleansing lotion, a cleansing cream, a body lotion, a body cleanser, a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astigmant, a lotion, , Massage cream, nutritional cream, moisturizing cream, hand cream, foundation, essence, nutritional essence and pack.

일 예로, 본 발명의 제형이 스프레이 또는 파우더인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히 본 발명의 제형이 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.For example, when the formulation of the present invention is spray or powder, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, particularly when the formulation of the present invention is a spray In addition, propellants such as chlorofluorohydrocarbons, propane / butane or dimethyl ether may be included.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal fiber, plant fiber, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제, 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르일 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a solvent or an emulsifier is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, -Butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid esters of sorbitan.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linolenic derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters.

본 발명의 천년초 씨 추출물은 항산화 활성 및 피부세포 보호능을 가지며, 더 나아가 본 발명의 발명자는 해당 천년초 씨 추출물이 특정 용매를 이용하여 분획물을 제조하는 경우 그 효과가 현저하게 상승됨을 확인하였고, 이로부터 본 발명에서 선택된 분획용매인 에틸아세테이트로 분획한 분획물이 다른 분획물에 비하여 현저하게 우수한 항산화활성을 가질 뿐만 아니라, 종래 항산화물질로 보고된 비타민 C(Vit C) 보다도 우수한 항산화 활성을 가지며, 피부섬유아세포 보호능을 가진다는 것을 확인하였다. 본 발명에서 이용된 천년초는 천연물질로, 식용 또는 약용으로 사용되어, 독성과 부작용이 없는 것으로 확인되었으므로, 이러한 천년초를 이용하여, 최적의 조건을 확립하여 피부보호를 위한 화장품 활성물질의 개발하였다는 점에서 본 발명의 산업적 의의가 있다.The inventor of the present invention has confirmed that the effect of the present invention is remarkably enhanced when a fraction thereof is prepared using a specific solvent, The fractions fractionated with ethyl acetate as the fraction solvent selected in the present invention have remarkably excellent antioxidative activity as compared with the other fractions and have an antioxidative activity superior to that of vitamin C (Vit C) And it was confirmed that it has the ability to protect cells. It has been confirmed that the terniculate plant used in the present invention is used as a natural substance, edible or medicinal, and has no toxicity and side effects. Therefore, a cosmetic active material for skin protection has been developed by establishing optimal conditions by using such There is an industrial significance of the present invention.

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명의 유효성분인 천년초 추출물의 에탈아세테이트 분획물은 다른 분획물에 비하여 항산화 효과가 현저하게 우수하고, 피부세포보호능이 뛰어날 뿐만 아니라, 상기 천년초 추출물의 분획물의 분획대상인 천년초는 독성과 부작용이 없어, 안전성이 보장된 것이므로, 천년초 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 부작용 없이 항산화 활성 및 피부세포보호능을 갖는 화장품의 유효성분이란 점에서 산업적 효과가 클 것으로 예상된다.As described above, the ethanetetraacetate fraction of the quinternial root extract of the present invention, which is an effective ingredient of the present invention, is remarkably superior in antioxidative effect as compared with the other fractions, and is excellent in protecting skin cells. In addition, It is expected that the cosmetic composition containing the extract of Chenille seeds will have a great industrial effect because it is an effective ingredient of cosmetics having antioxidant activity and skin cell protective ability without side effects.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 천년초 추출물의 각 분획물의 제조과정을 나타낸 순서도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 천년초 추출물의 각 분획물의 항산화 효과를 확인하기 위한, DPPH 라디칼 소거능(DPPH radical-scavenging activity)을 확인한 그래프로, 상기 가로축은 추출물의 사용함량이고, 상기 세로축은 DPPH 라디칼 소거능을 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 천년초 추출물의 각 분획물의 항산화 효과를 확인하기 위한, SOD 활성(SOD-like activity)을 확인한 그래프로, 상기 가로축은 추출물의 사용함량이고, 상기 세로축은 SOD 활성을 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 NIH3T3 세포에서 천년초 추출물의 각 분획물의 세포보호능을 확인하기 위하여, MTT 실험(MTT Assay)를 수행한 결과를 나타낸 그래프로, 상기 가로축은 추출물의 사용함량이고, 상기 세로축은 아무런 시료를 처리하지 않은 대조군 대비 세포 생존도를 나타낸 것이며, 도 4a은 에틸아세테이트 분획을 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, 도 4b는 부탄올 분획을 처리한 실험결과를 나타낸 것이며, 도 4c는 헥산 분획을 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, 도 4d는 물 분획층을 처리한 실험결과를 나타낸 것이다.FIG. 1 is a flow chart illustrating a process for preparing fractions of a Cheilinopsis root extract according to an embodiment of the present invention.
FIG. 2 is a graph showing DPPH radical scavenging activity for confirming the antioxidative effect of each fraction of the T. acutissimum extract according to an embodiment of the present invention, wherein the abscissa is the content of the extract, Shows the DPPH radical scavenging ability.
FIG. 3 is a graph showing SOD-like activity for confirming the antioxidative effect of each fraction of the T. acutissimum extract according to an embodiment of the present invention, wherein the abscissa is the amount of the extract used and the ordinate is the SOD Activity.
FIG. 4 is a graph showing the results of MTT assay (MTT assay) in order to examine the cytoprotective effect of each fraction of the perennial herb extract in NIH3T3 cells according to an embodiment of the present invention. FIG. 4A shows experimental results of treating the ethyl acetate fraction, FIG. 4B shows experimental results of treating the butanol fraction, and FIG. 4c shows the results of the hexane fraction treatment, and FIG. 4d shows the experimental results of treating the water fraction layer.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시 할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail so that those skilled in the art can easily carry out the present invention. The present invention may, however, be embodied in many different forms and should not be construed as being limited to the embodiments set forth herein.

실시예Example 1. One. 천년초Millennium 추출물 및 The extract and 분획물의Fraction 제조 Produce

항산화 효과 및 세포 보호능이 우수한 최적의 분획물을 확인하기 위하여, 분획용매에 따른 4종의 천년초 추출물의 분획물을 제조하였다.To identify the optimal fractions with excellent antioxidative and cytoprotective properties, fractions of four quercetin powder extracts were prepared according to the fraction solvent.

우선, 천년초 씨앗 추출물은 다음과 같은 방법으로 제조하였다.First, the seed extract of Chenille seeds was prepared by the following method.

우선, 2014년 10월 구입한 천년초의 열매를 유수에서 세척한 후 불순물을 제거하고, 세척된 천년초의 열매를 동결건조한 후 씨앗을 분리한 후 분쇄하여 분말을 제조하였다.First, in October 2014, the fruit of the millennia early purchased was washed in running water, the impurities were removed, the washed millet seedlings were lyophilized, and the seeds were separated and pulverized to prepare a powder.

상기 천년초 열매 분쇄물 건조 시료 50 g 에 메탄올 1 L를 가하고, 70℃에서 4시간 추출한 후, 감압 농축하는 과정을 2회 반복하고, 건조하여, 최종적으로 천년초 씨앗 추출물을 제조하였다.1 g of methanol was added to 50 g of the above-dried starch-dried fruit powder, and the resulting mixture was extracted at 70 캜 for 4 hours and then concentrated under reduced pressure. The dried concentrate was finally dried to prepare a seed extract.

상기 천년초 씨앗 추출물을 이용한 분획물의 제조는 다음과 같은 방법으로 수행하였다.The fractions using the seed extract of Millennium seeds were prepared as follows.

상기 분획물은 상기 천년초 씨앗 메탄올 추출물에 증류수를 가하여 얻은 액에 도 1에 나타낸 바와 같이, 헥산(hexane), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 부탄올(butanol)의 순서대로 용매를 가하고, 분획하는 방법으로 분획층을 분리한 후, 각각의 분획층을 감압 농축 후 동결 건조하는 방법으로 제조하였다.As shown in FIG. 1, the fraction is prepared by adding a solvent in the order of hexane, ethyl acetate, and butanol in the order of a solution obtained by adding distilled water to the methanol extract of the millet seeds, After separating the layers, each of the fraction layers was concentrated under reduced pressure and freeze-dried.

상기 동결 건조하여 얻은 천년초 씨앗 분획물 분말은 실험에 사용하기 전까지 각각 -20℃에서 보관하였다.
The above-obtained lyophilized seeds fraction powder was stored at -20 ° C until used in the experiment.

실시예Example 2. 2. 천년초Millennium 추출물의 분획용매 별 항산화 효과 측정 Determination of antioxidative effect of extracts by fraction solvent

천년초 씨앗 추출물의 분획용매 별 항산화 효과를 측정하기 위하여, DPPH 라디칼 소거능과 SOD 활성을 측정하였다.DPPH radical scavenging activity and SOD activity were measured in order to measure antioxidant effect of each fraction solvent of the seed extract.

우선, DPPH(1-1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 소거능(DPPH radical) 측정은 Blois의 방법에 따라 각 시료의 DPPH radical에 대한 환원력을 측정하는 방법으로 수행하였다.First, DPPH (1-1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging ability (DPPH radical) measurement was performed by measuring the reducing power of DPPH radical of each sample according to the Blois method.

우선, 각 분획물을 에탄올에 용해한 후 농도별로 희석하고 시료와 에탄올에 용해시킨 150 μM DPPH를 혼합하여 30분 동안 반응시킨 다음, ELISA reader를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하는 방법으로 수행하였으며, 양성대조군으로 비타민 C(Vit C)를 이용하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.First, each fraction was dissolved in ethanol, diluted by the concentration, and 150 μM DPPH dissolved in ethanol and the sample were mixed and reacted for 30 minutes. Then, the absorbance was measured at 540 nm using an ELISA reader. Vitamin C (Vit C) was used as a control, and the results are shown in Fig.

상기 도 2에 나타낸 바와 같이, 에탈아세테이트 분획물은 부탄올 분획이나 헥산 분획 또는 물 분획에 비하여 현저하게 우수한 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었고, 특히, 50 ㎍/ml에서도 90%가 넘는 DPPH radical 소거능을 나타내었으며, 양성 대조군인 비타민 C와 유사한 DPPH radical 소거능을 나타내어, 다른 농도에 비하여 우수한 항산화 활성을 갖는 것이 확인되었다.As shown in FIG. 2, the ethalacetate fraction showed DPPH radical scavenging ability remarkably superior to the butanol fraction, the hexane fraction or the water fraction. Especially, the DPPH radical scavenging ability was more than 90% even at 50 ㎍ / ml, DPPH radical scavenging ability similar to that of vitamin C, which is a positive control group, was found to be superior to other concentrations.

또한, SOD(Superoxide dismutase) 유사활성은 Marklund 등의 방법에 따라, 다음과 같은 방법으로 수행하였다.In addition, SOD (superoxide dismutase) -like activity was carried out by the following method according to the method of Marklund et al.

구체적으로, H₂O₂로 전환시키는 반응을 촉매하는 pylogallol의 생성량을 측정하여 SOD 유사활성으로 나타내기 위하여, 시료를 농도별로 희석하여, 시료 10 ㎕에 pH 8.5로 보정한 tris-HCl buffer(50 mM tris [hydroxymethyl] amino-methane, 10 mM EDTA, pH 8.5)와 7.2 mM pyrogallol를 첨가하여 25℃에서 10분간 반응시킨 후, 1N HCl를 가하여 반응을 정지시켰다. 반응액 중 산화된 pyrogallol의 양은 ELISA reader를 사용하여 420 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.Specifically, to measure the amount of pylogallol catalyzing the conversion of H ₂ O ₂ to SOD-like activity, 10 μl of the sample was diluted by concentration, and a tris-HCl buffer (50 mM tris [hydroxymethyl] amino-methane, 10 mM EDTA, pH 8.5) and 7.2 mM pyrogallol were added and reacted at 25 ° C for 10 min. Then, 1N HCl was added to stop the reaction. The amount of pyrogallol oxidized in the reaction solution was measured at 420 nm using an ELISA reader. The results are shown in FIG.

상기 도 3에 나타낸 바와 같이, 천년초 씨앗 분획물의 SOD 유사 활성능은 DPPH 라디칼 소거능의 결과와 유사하게, 에틸아세테이트 분획이 다른 분획 즉 부탄올 분획, 헥산 분획 및 물 분획 보다 모든 농도에서 높은 활성을 나타내었다. 특히, 에틸아세테이트 분획은 100 ㎍/ml 농도에서부터 약 100%에 가까운 활성을 나타내어, 양성 대조군인 비타민 C와 유사한 활성을 나타내어, 항산화 활성이 매우 우수한 것으로 확인되었다.
As shown in FIG. 3, the SOD-like activity of the Chennaceae seed fraction was similar to that of the DPPH radical scavenging activity, and the ethyl acetate fraction showed higher activity at all concentrations than the other fractions, ie, the butanol fraction, the hexane fraction and the water fraction . In particular, the ethyl acetate fraction exhibited activity close to 100% from 100 μg / ml, showing similar activity to vitamin C as a positive control, and thus it was confirmed that the antioxidative activity was very excellent.

실시예Example 3. 3. 천년초Millennium 추출물의 분획용매 별 세포 보호 효과 측정 Measurement of cytoprotective effect of extracts on fraction solvent

천년초 추출물의 분획용매 별 세포 보호효과를 확인하기 위하여, 피부세포를 이용한 피부세포의 증식여부를 확인하였다.In order to confirm the cytoprotective effect of the fraction solvent of the extract of T. kansenensis, skin cells were proliferated using the skin cells.

우선, 피부세포는 한국세포주은행에서 분양받은 섬유아세포인 NIH-3T3 세포를 이용하였고, 상기 세포 배양은 10% FBS와 1% antibiotics를 포함한 α-DMEM 배지를 이용하여 수행하였다. 상기 세포배양은 37℃의 온도 조건 및 5%의 CO₂ 조건의 배양기(incubator)에서 2일 마다 배지를 교환하면서 실험에 사용하였다.First, the skin cells were cultured in fibroblast NIH-3T3 cells, which were cultured in Korean Cell Line Bank, and the cell culture was carried out using? -DMEM medium containing 10% FBS and 1% antibiotics. The cell culture was used for the experiment while exchanging the medium every two days in an incubator at 37 ° C and 5% CO ₂ condition.

상기 세포 증식 여부는 MTT assay 방법을 사용하여 측정하였다.The cell proliferation was measured using MTT assay.

우선, 상기 배양한 NIH3T3 세포를 96 well plate에 seeding 하였다. 그 후 농도 별로 준비된 천년초 씨앗 분획물을 첨가하고 37℃의 온도 조건 및 5%의 CO₂ 조건의 배양기에서 48시간 배양하였다. 이 후, MTT시약을 처리하고, 배양한 후, 배지를 제거하고 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 첨가하여 생성된 불용성의 formazan 결정을 용해시킨 뒤, ELISA reader로 550 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 도 4에 나타내었다. 상기 세포 증식률은 천년초 씨앗 분획물 처리군의 흡광도를 대조군의 흡광도에 대한 백분율로 나타내었다.First, the cultured NIH3T3 cells were seeded in a 96-well plate. Then, the prepared seeds of the perennial seeds were added and cultured for 48 hours in an incubator at 37 ° C and 5% CO ₂ . Subsequently, the MTT reagent was treated and cultured, the medium was removed, DMSO (dimethyl sulfoxide) was added to dissolve the resulting insoluble formazan crystals, and the absorbance at 550 nm was measured with an ELISA reader. 4. The cell proliferation rate was expressed as a percentage of the absorbance of the control group in terms of the absorbance of the control group.

상기 도 4에 나타낸 바와 같이, 에틸아세테이트 분획물은 낮은 농도에서도 대조군 대비 피부섬유아세포 NIH3T3의 증식이 현저하게 촉진되었으며, 1,000 ㎍/ml 농도에서는 약 180%에 가까운 활성을 나타낸 반면, 부탄올 분획의 경우, 100 ㎍/ml 이상의 농도에서는 증식이 억제되었고, 물 분획은 500 ㎍/ml 이상의 농도에서, 헥산 분획은 1,000 ㎍/ml 이상의 농도에서 증식이 억제되었으로, 피부섬유아세포 세포 보호능은 에틸아세테이트 분획이 가장 우수한 것으로 확인되었다.
As shown in FIG. 4, in the ethyl acetate fraction, the proliferation of the dermal fibroblast NIH3T3 was significantly promoted at a low concentration and the activity was nearly 180% at the concentration of 1,000 μg / ml, whereas in the butanol fraction, At the concentration of 100 ㎍ / ml or more, the proliferation was inhibited. The water fraction was inhibited at the concentration of 500 ㎍ / ml or more and the hexane fraction was inhibited at the concentration of 1,000 ㎍ / ml or more. The protective ability of the dermal fibroblast cell was inhibited by the ethyl acetate fraction It was confirmed to be the most excellent.

Claims

Functional cosmetic composition having an antioxidative activity and skin cell regeneration ability containing an ethyl acetate fraction of an extract of Opuntia humifusa seed methanol having an antioxidant activity and a skin fibroblast regeneration ability as an active ingredient.

Freezing and drying the washed Opuntia humifusa fruit, and then separating and pulverizing the seed to prepare a milled product of the millennia ;
Adding methanol to the milled pulp of the first millennium and extracting it at 70 ° C for 4 hours to prepare a methanol extract of the seed millet; And
Adding a distilled water to the methanol extract of the millennium seed to produce a methanol extract of the seed millet, adding hexane to the methanol extract of the millet seed, adding the mixture to the extract, allowing the stratum to separate and removing the hexane layer, After removing the hexane layer and adding the same amount of ethyl acetate to the remaining solution, the mixture was allowed to stand for separation, and then an ethyl acetate layer was obtained as an upper layer. Ethyl acetate fraction of the methanol extract step
And a method for producing an ethyl acetate fraction of a methanol extract of a perennial plant seed having the ability to regenerate dermal fibroblasts.

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