JPS63209579A - 冬虫夏草の培養法 - Google Patents
冬虫夏草の培養法Info
- Publication number
- JPS63209579A JPS63209579A JP4339087A JP4339087A JPS63209579A JP S63209579 A JPS63209579 A JP S63209579A JP 4339087 A JP4339087 A JP 4339087A JP 4339087 A JP4339087 A JP 4339087A JP S63209579 A JPS63209579 A JP S63209579A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cordyceps sinensis
- culture
- carbon source
- germ
- extract
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241001248610 Ophiocordyceps sinensis Species 0.000 title claims abstract description 56
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 16
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims abstract description 8
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 241000190633 Cordyceps Species 0.000 claims abstract description 7
- 241001248590 Isaria Species 0.000 claims abstract description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims abstract 3
- 238000012136 culture method Methods 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 15
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 9
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 abstract description 11
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 7
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 abstract description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract description 4
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 abstract 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 30
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 17
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000306 component Substances 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 8
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 6
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 5
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 5
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 4
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 241001264174 Cordyceps militaris Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 3
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 3
- RLQZIECDMISZHS-UHFFFAOYSA-N 2-phenylcyclohexa-2,5-diene-1,4-dione Chemical compound O=C1C=CC(=O)C(C=2C=CC=CC=2)=C1 RLQZIECDMISZHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 2
- AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L barium carbonate Chemical compound [Ba+2].[O-]C([O-])=O AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000138 effect on histamine Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 description 2
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 2
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 2
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEOBEOJCBAYXBA-UHFFFAOYSA-N A2P5P Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1OP(O)(O)=O AEOBEOJCBAYXBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 241000235349 Ascomycota Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 240000008620 Fagopyrum esculentum Species 0.000 description 1
- 235000009419 Fagopyrum esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- BLAKAEFIFWAFGH-UHFFFAOYSA-N acetyl acetate;pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1.CC(=O)OC(C)=O BLAKAEFIFWAFGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- LFVGISIMTYGQHF-UHFFFAOYSA-N ammonium dihydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].OP(O)([O-])=O LFVGISIMTYGQHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000387 ammonium dihydrogen phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000007883 bronchodilation Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000009989 contractile response Effects 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000000916 dilatatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000011597 hartley guinea pig Methods 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 230000000297 inotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000005246 left atrium Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 235000019837 monoammonium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000004118 muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N nifedipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC)C1C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001597 nifedipine Drugs 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は天然冬虫夏草〔コルダイセブス シネンシス(
Cordyceps 5inensis) ]とほぼ同
等の有効成分及び生理活性を有する液体培養産生物を得
ることができる、冬虫夏草菌糸体の新規な液体培養法に
関する。
Cordyceps 5inensis) ]とほぼ同
等の有効成分及び生理活性を有する液体培養産生物を得
ることができる、冬虫夏草菌糸体の新規な液体培養法に
関する。
天然冬虫夏草は、優れた生薬であることが知られている
。例えば、動物の気管支の拡張作用、マウスに対する鎮
静作用、抗菌作用等の生理活性を有する。又、主に病後
の身体の調整補益用等として臨床応用もされている。
。例えば、動物の気管支の拡張作用、マウスに対する鎮
静作用、抗菌作用等の生理活性を有する。又、主に病後
の身体の調整補益用等として臨床応用もされている。
ところが天然冬虫夏草は、虫に寄生、その子実体を形成
するもので天然には極(希にしか生育せずしかも原産地
が中国であることから、我国で不染にしかも安価に入手
することは難しい。そのため、天然冬虫夏草に含まれて
いる生理活性物質を病理薬として利用したり、あるいは
病後の身体の調整補益用として、広く用いられるには到
っていない。
するもので天然には極(希にしか生育せずしかも原産地
が中国であることから、我国で不染にしかも安価に入手
することは難しい。そのため、天然冬虫夏草に含まれて
いる生理活性物質を病理薬として利用したり、あるいは
病後の身体の調整補益用として、広く用いられるには到
っていない。
そこで、近年、冬虫夏草群の菌糸体を人工培養する方法
〔特公昭61−53033:l及び人工培養物から生理
活性物質を採取する方法〔特開昭5’l−193415
1が提案されている。
〔特公昭61−53033:l及び人工培養物から生理
活性物質を採取する方法〔特開昭5’l−193415
1が提案されている。
しかるに、特公昭61−53033に記載の方法は、冬
虫夏草の人工増殖法にすぎず、冬虫夏草を培養すること
によって有用な生理活性物質を産生ずる方法ではなかっ
た。又特開昭57−193415に記載の方法は、特定
の冬虫夏草を用いて抗@瘍性物質を製造する方法であっ
て、冬虫夏草を人工培養することによって天然冬虫夏草
が有する有効成分及び生理活性とほぼ同等の有効成分及
び生理活性を有する産生物を得るものではなかった。
虫夏草の人工増殖法にすぎず、冬虫夏草を培養すること
によって有用な生理活性物質を産生ずる方法ではなかっ
た。又特開昭57−193415に記載の方法は、特定
の冬虫夏草を用いて抗@瘍性物質を製造する方法であっ
て、冬虫夏草を人工培養することによって天然冬虫夏草
が有する有効成分及び生理活性とほぼ同等の有効成分及
び生理活性を有する産生物を得るものではなかった。
そこで本発明の目的は、天然冬虫夏草が有する有効成分
及び生理活性とほぼ同等の有効成分及び生理活性を有す
る液体培養産生物を常時、多量かつ安価に供給する方法
を提供することにある。
及び生理活性とほぼ同等の有効成分及び生理活性を有す
る液体培養産生物を常時、多量かつ安価に供給する方法
を提供することにある。
本発明は、炭素源と穀類胚芽上を含有する液体培地中で
冬虫夏草菌糸体を培養することを特徴とする冬虫夏草の
培養法に関する。
冬虫夏草菌糸体を培養することを特徴とする冬虫夏草の
培養法に関する。
以下本発明について説明する。
本発明において、培地成分としては、「炭素源」および
「穀類胚芽」を用いる。炭素源および穀類胚芽は、培地
成分として通常入手しうるちのであればいずれでもよい
。
「穀類胚芽」を用いる。炭素源および穀類胚芽は、培地
成分として通常入手しうるちのであればいずれでもよい
。
「炭素源」の例とし°Cは、グルコース、フラクトース
、マルトース、シュークロース、でんぷん、糖蜜などが
挙げられる。
、マルトース、シュークロース、でんぷん、糖蜜などが
挙げられる。
「穀類胚芽」の例としては、小麦胚芽、大麦胚芽、ライ
麦胚芽などが挙げられ、特に小麦胚芽が好ましい。又、
あわ、えん麦、きびそば、トウモロコシ、ひえ、なども
穀類胚芽として使用できる。
麦胚芽などが挙げられ、特に小麦胚芽が好ましい。又、
あわ、えん麦、きびそば、トウモロコシ、ひえ、なども
穀類胚芽として使用できる。
本発明においては、液体培地成分として、前記炭素源及
び穀類胚芽を含有する培地を用いることによって、天然
冬虫夏草とほぼ同等の有効成分及び生理活性を有する培
養物を得ることができる。
び穀類胚芽を含有する培地を用いることによって、天然
冬虫夏草とほぼ同等の有効成分及び生理活性を有する培
養物を得ることができる。
本発明においては、産生物の収率及び培地成分単位重量
当りの産生量を高めるという観点から、前記炭素源0.
2〜10wハ%、好ましくは4〜8w/v%及び前記穀
類胚芽0.2〜5.0W#%、好ましくは0.5〜3、
Ov/ν%を含有する液体培地を用いることが好ましい
。さらに、本発明においては、液体培地中の穀類胚芽と
炭素源の重量比を穀類胚芽1に対して炭素源1〜8とす
ることが好ましい。
当りの産生量を高めるという観点から、前記炭素源0.
2〜10wハ%、好ましくは4〜8w/v%及び前記穀
類胚芽0.2〜5.0W#%、好ましくは0.5〜3、
Ov/ν%を含有する液体培地を用いることが好ましい
。さらに、本発明においては、液体培地中の穀類胚芽と
炭素源の重量比を穀類胚芽1に対して炭素源1〜8とす
ることが好ましい。
より高収量で産生物を得ることができるからである。所
望により、本発明に用いる液体培地には、前記2成分に
加えて、リン、マンガン、マグネシウム、カルシウム、
鉄などの一般にカビ類の培養に用いられるミネラル成分
、ビタミン類、核酸類、アミノ酸類、澱粉、酵母エキス
、ペプトンなどのごとき他の栄養成分を適宜添加しても
良い。
望により、本発明に用いる液体培地には、前記2成分に
加えて、リン、マンガン、マグネシウム、カルシウム、
鉄などの一般にカビ類の培養に用いられるミネラル成分
、ビタミン類、核酸類、アミノ酸類、澱粉、酵母エキス
、ペプトンなどのごとき他の栄養成分を適宜添加しても
良い。
本発明に用いる液体培地は、常法に従って調整すること
ができ、例えば、所定の各成分を水に添加し分散、溶解
させることによって得ることができる。得られた培地は
、常法に従って121tにて滅菌処理を施した後、冬虫
夏草菌糸体の培養に用いる。
ができ、例えば、所定の各成分を水に添加し分散、溶解
させることによって得ることができる。得られた培地は
、常法に従って121tにて滅菌処理を施した後、冬虫
夏草菌糸体の培養に用いる。
本発明においては、不完全菌類に属する冬虫夏草、子の
う菌類に属するバラカフ菌目、バラカフ歯科冬虫夏草の
菌糸体を用いることができ、例えば表1に示す黍虫夏草
の菌糸体を用いることができる。
う菌類に属するバラカフ菌目、バラカフ歯科冬虫夏草の
菌糸体を用いることができ、例えば表1に示す黍虫夏草
の菌糸体を用いることができる。
冬虫夏草菌糸体の培養は、前記液体培地に適当量の種菌
系を接種し、好気的条件下に行なう。通常、種菌糸の接
種量は2〜10m1/100ml培地が適当であり、1
00〜300r、p、m、の撹拌下、温度20〜30℃
、通気1110.5〜3. Ovvmの条件下で4〜l
O日間培養を行なう。
系を接種し、好気的条件下に行なう。通常、種菌糸の接
種量は2〜10m1/100ml培地が適当であり、1
00〜300r、p、m、の撹拌下、温度20〜30℃
、通気1110.5〜3. Ovvmの条件下で4〜l
O日間培養を行なう。
培養終了後、得られた培養物(菌糸体と培養液)は白色
〜褐色の粘性を示す液体である。味はやや甘く、不快な
風味はなく小麦胚芽等の香ばしい風味を有している。又
、得られた培養物は、天然冬虫夏草とほぼ同等の多糖類
、核酸系物質、アミノ酸等を含有する。又生理活性につ
いても抗腫瘍活性、ヒスタミンに対する作用、筋収縮力
抑制作用、利尿作用、鎮痛作用、冠拡張作用及び安全性
において、天然冬虫夏草と同等もしくはそれ以上の作用
を示す。
〜褐色の粘性を示す液体である。味はやや甘く、不快な
風味はなく小麦胚芽等の香ばしい風味を有している。又
、得られた培養物は、天然冬虫夏草とほぼ同等の多糖類
、核酸系物質、アミノ酸等を含有する。又生理活性につ
いても抗腫瘍活性、ヒスタミンに対する作用、筋収縮力
抑制作用、利尿作用、鎮痛作用、冠拡張作用及び安全性
において、天然冬虫夏草と同等もしくはそれ以上の作用
を示す。
本発明の培養法により得られた産生物は、天然冬虫夏草
の代替物として、そのまま医薬品あるいは健康食品等と
して用いることができるほか、さらに分画等して生理活
性を有する物質を得るために用いる製造原料として用い
ることもできる。
の代替物として、そのまま医薬品あるいは健康食品等と
して用いることができるほか、さらに分画等して生理活
性を有する物質を得るために用いる製造原料として用い
ることもできる。
以下本発明を実施例によりさらに説明する。
実施例1
グルコース60g1小麦胚芽15 g 5KI12P0
゜0.3 g S K2)IFO40,3g S M
gSO4・ 7H200,3gを水1βに混合溶解し、
液体培地(pH5,5)を得た。該培地を5001T1
1容の首長振盪フラスコに100mRづつ分注し、オー
トクレーブで120t30分間滅菌した。次いでポテト
デキストロース寒天培地上で成育したイサリア フエI
Jす(Isaria felina )(^TCCN
a 26680 )及びコルダイセプス ミリタリス(
Cordyceps m1ltaris )(IFON
a 30377 )の菌糸体の約1 cdをそれぞれ滅
菌した各フラスコ中の培地に接種し、25℃7日間往復
振盪培養(145rpm 、損復幅8cm)を行った。
゜0.3 g S K2)IFO40,3g S M
gSO4・ 7H200,3gを水1βに混合溶解し、
液体培地(pH5,5)を得た。該培地を5001T1
1容の首長振盪フラスコに100mRづつ分注し、オー
トクレーブで120t30分間滅菌した。次いでポテト
デキストロース寒天培地上で成育したイサリア フエI
Jす(Isaria felina )(^TCCN
a 26680 )及びコルダイセプス ミリタリス(
Cordyceps m1ltaris )(IFON
a 30377 )の菌糸体の約1 cdをそれぞれ滅
菌した各フラスコ中の培地に接種し、25℃7日間往復
振盪培養(145rpm 、損復幅8cm)を行った。
得られた培養産生物を常法にしたがい、乾燥菌糸体量、
残存グルコース量、菌体外生産物量、総培養生産物量を
測定しその結果を表2に示した。
残存グルコース量、菌体外生産物量、総培養生産物量を
測定しその結果を表2に示した。
表 2
菌体外生産物量=溶存固形分−残存グルコース量総培養
生産物量=乾燥閑体量−菌体外生産物量参考例1 (培
養産生物含有核酸成分の比較)市販の天然冬虫夏草を乾
燥後粉砕して得られた粉末及び実施例1で■、フェリナ
及びC,ミIJタリスを用いて得た培養産生物を凍結乾
燥し、粉砕して得られた粉末をそれぞれサンプルとした
。
生産物量=乾燥閑体量−菌体外生産物量参考例1 (培
養産生物含有核酸成分の比較)市販の天然冬虫夏草を乾
燥後粉砕して得られた粉末及び実施例1で■、フェリナ
及びC,ミIJタリスを用いて得た培養産生物を凍結乾
燥し、粉砕して得られた粉末をそれぞれサンプルとした
。
サンプル3gを水150+nj!に浸漬し80℃、1時
間撹拌抽出を行なった。抽出濾液を常法にしたがって、
活性炭吸着処理及びアンモニア・エタノール溶液による
溶出処理を行なった。得られた溶液を下記条件の高速液
体クロマトグラフィーにより、核酸成分及びその含有量
について分析した。
間撹拌抽出を行なった。抽出濾液を常法にしたがって、
活性炭吸着処理及びアンモニア・エタノール溶液による
溶出処理を行なった。得られた溶液を下記条件の高速液
体クロマトグラフィーにより、核酸成分及びその含有量
について分析した。
結果を第1図及び表3に示した。その結果、本発明の培
養法による培養産生物中には、天然冬虫夏草と同様に5
’ IMF、5’ AMP、ウリジン、イノシン、ヒ
ポキサンチン、アデノシン、アデニンが含まれておりか
つ両者のクロマトパターン第1図及び各核酸成分の含有
率(表3)が類似していた。これらの結果は、本発明の
培養法により得られた培養産生物が天然冬虫夏草の成分
とほぼ同等であることを示す。
養法による培養産生物中には、天然冬虫夏草と同様に5
’ IMF、5’ AMP、ウリジン、イノシン、ヒ
ポキサンチン、アデノシン、アデニンが含まれておりか
つ両者のクロマトパターン第1図及び各核酸成分の含有
率(表3)が類似していた。これらの結果は、本発明の
培養法により得られた培養産生物が天然冬虫夏草の成分
とほぼ同等であることを示す。
表 3
〔高速液体クロマトグラフィーの条件〕使用機種:島津
製作所製LC−6A カラム 5hodex Pak B−8045ma+X
500 mll+溶出液 Ao、01M クエン酸 80.03M リン酸二水素アンモ ニウム A→B リニアグラジェント (60分)流速 1m
β/mβ /旧型 UV(260nm) 参考例2 培養冬虫夏草の多糖成分の比較天然冬虫夏草
の乾燥粉砕物25.6 gをクロロホルト・メタノール
1:1の混液で脱脂した。次いでクロロホルム・メタノ
ールを除去後、250mβの水にけん濁させ、2時間じ
ゃ線抽出を2度行ったく抽出固形公約5g)。得られた
抽出液にエタノールを濃度36%になるまで加え、析出
した沈殿を遠心分離によって除去し、さらにエタノール
を濃度44%になるまで加えた。この時析出した沈殿を
遠心分離によって集め、再び水に溶解し、分画分子量3
.500の透析膜を用いて透析後、凍結乾燥して試料約
280 mgを得た。
製作所製LC−6A カラム 5hodex Pak B−8045ma+X
500 mll+溶出液 Ao、01M クエン酸 80.03M リン酸二水素アンモ ニウム A→B リニアグラジェント (60分)流速 1m
β/mβ /旧型 UV(260nm) 参考例2 培養冬虫夏草の多糖成分の比較天然冬虫夏草
の乾燥粉砕物25.6 gをクロロホルト・メタノール
1:1の混液で脱脂した。次いでクロロホルム・メタノ
ールを除去後、250mβの水にけん濁させ、2時間じ
ゃ線抽出を2度行ったく抽出固形公約5g)。得られた
抽出液にエタノールを濃度36%になるまで加え、析出
した沈殿を遠心分離によって除去し、さらにエタノール
を濃度44%になるまで加えた。この時析出した沈殿を
遠心分離によって集め、再び水に溶解し、分画分子量3
.500の透析膜を用いて透析後、凍結乾燥して試料約
280 mgを得た。
一方、実施例1でC,ミリタリスを用いて得た培養ブロ
スを遠沈し、菌体を除去した。得られた上澄200m1
にエタノールを濃度23%になるまで加え、析出した沈
澱を遠心分離によって集めた。集めた沈殿を再び水に溶
解し、分画分子量3.500の透析膜を用いて透析後、
凍結乾燥して試料約100mgを得た。
スを遠沈し、菌体を除去した。得られた上澄200m1
にエタノールを濃度23%になるまで加え、析出した沈
澱を遠心分離によって集めた。集めた沈殿を再び水に溶
解し、分画分子量3.500の透析膜を用いて透析後、
凍結乾燥して試料約100mgを得た。
各試料をそれぞれ約2 mgとり3N−硫酸で100℃
6時間加水分解した後、炭酸バリウムで中和し、遠心分
離により得た上澄をアンバーライ) I R−120B
で脱塩した。次に脱塩物を水素化ホウ禦ナトリウムで還
元し、アンバーライトIR−120Bを用いて過剰の水
素化ホウ素ナトリウムを除去しa縮乾固した。さらに乾
固物を無水酢酸−ピリジンでアセチル化し、溶媒を留去
後クロロホルト、に溶解しガスクロマトグラフィーを行
った。結果を第2図に示す。その結果、天然冬虫夏草及
び実施例10C,ミリタリスについてのタロマドグラム
は、非常に類似しており、両者の構成糖がほぼ同一であ
ることを示した。ガスクロマトグラフィーはヤナコG−
3800、水素炎イオン化検出器を用い、396ECN
SS−Mを充填したガラスカラム(3,4mmX 2.
5 rn)を使用し、キャリアガスとして窒素を50m
1/ m i nの割合で流して行った。
6時間加水分解した後、炭酸バリウムで中和し、遠心分
離により得た上澄をアンバーライ) I R−120B
で脱塩した。次に脱塩物を水素化ホウ禦ナトリウムで還
元し、アンバーライトIR−120Bを用いて過剰の水
素化ホウ素ナトリウムを除去しa縮乾固した。さらに乾
固物を無水酢酸−ピリジンでアセチル化し、溶媒を留去
後クロロホルト、に溶解しガスクロマトグラフィーを行
った。結果を第2図に示す。その結果、天然冬虫夏草及
び実施例10C,ミリタリスについてのタロマドグラム
は、非常に類似しており、両者の構成糖がほぼ同一であ
ることを示した。ガスクロマトグラフィーはヤナコG−
3800、水素炎イオン化検出器を用い、396ECN
SS−Mを充填したガラスカラム(3,4mmX 2.
5 rn)を使用し、キャリアガスとして窒素を50m
1/ m i nの割合で流して行った。
実施例2
グルコース3〜lO%及び小麦胚芽0.5〜2%を適宜
組合せた組成をもつ液体培地を実施例1に準じて作成し
、滅菌した。次いでポテトデキストロース寒天培地上で
成育した冬虫夏草である■。
組合せた組成をもつ液体培地を実施例1に準じて作成し
、滅菌した。次いでポテトデキストロース寒天培地上で
成育した冬虫夏草である■。
フェリナ(l5aria felina ) 及びC
,ミリタリス(Cordyceps m1ltaris
)の菌糸体の約1 cdを、それぞれ滅菌した各フラ
スコ中の培地に接種し、25℃7日間往復振盪培養(1
45rpm %振復幅8ca+)を行った口 得られた培養産生物を常法にしたがい乾燥菌糸体量、菌
体外生産物量、総培養生産物量を測定した。■、フエリ
ナの結果を表4に、C,ミリタリスの結果を表5に示し
た。
,ミリタリス(Cordyceps m1ltaris
)の菌糸体の約1 cdを、それぞれ滅菌した各フラ
スコ中の培地に接種し、25℃7日間往復振盪培養(1
45rpm %振復幅8ca+)を行った口 得られた培養産生物を常法にしたがい乾燥菌糸体量、菌
体外生産物量、総培養生産物量を測定した。■、フエリ
ナの結果を表4に、C,ミリタリスの結果を表5に示し
た。
比較例1
グルコース30g、ペプトン5g1酵素エキス5 gS
KN2PO40,3g、 K21(PO40,3gSM
gSO4・7■200.3gを水1βに混合溶解し、液
体培地(pH5,5)を得た。該培地をを用いて実施例
1と同様にして1、フエリナ及びC,ミリタリスを培養
した。培養産生物中のの乾燥菌糸体量等を表6に示す。
KN2PO40,3g、 K21(PO40,3gSM
gSO4・7■200.3gを水1βに混合溶解し、液
体培地(pH5,5)を得た。該培地をを用いて実施例
1と同様にして1、フエリナ及びC,ミリタリスを培養
した。培養産生物中のの乾燥菌糸体量等を表6に示す。
参考例3
実施例1に準じて液体培養を行ない、得られた培養産生
物と天然冬虫夏草の生理活性の比較を以下に示す。
物と天然冬虫夏草の生理活性の比較を以下に示す。
実施例1と同様の方法で得た冬虫夏草培養液を10、0
00rpmで15分間遠心分離して菌体と上清に分けた
。菌体はさらに適当量の水を加え、沸騰水中で2時間抽
出を行なった。菌体熱水抽出液と培養上清を合し、濾過
後これを減圧下40℃にてロータリーエバポレーターで
濃縮し、さらに凍結乾燥を行ない試料を得た。
00rpmで15分間遠心分離して菌体と上清に分けた
。菌体はさらに適当量の水を加え、沸騰水中で2時間抽
出を行なった。菌体熱水抽出液と培養上清を合し、濾過
後これを減圧下40℃にてロータリーエバポレーターで
濃縮し、さらに凍結乾燥を行ない試料を得た。
尚、冬虫夏草として1.アタイビコラ(I。
atypicola ) を用いた培養は、培地成分
中のグルコースを6%とし、小麦胚芽を1.5%とした
他は、実施何1に従って行った。
中のグルコースを6%とし、小麦胚芽を1.5%とした
他は、実施何1に従って行った。
市販の天然冬虫夏草をミキサーで粉砕後適当璽の水を加
え沸騰水中で2時間抽出した。抽出液を濾過後前述した
方法に従い、濃縮、凍結乾燥を行な一1試料を得た。
え沸騰水中で2時間抽出した。抽出液を濾過後前述した
方法に従い、濃縮、凍結乾燥を行な一1試料を得た。
これらの試料を用いて種々の生理活性試験を行った。
(1) モルモット心筋に対する作用(負の変力作用
)ヘ−x メh −ヲ有t ルバートレー系モルモット
(400−450g)左心房を34℃に保温し95%酸
素、5%炭炭酸ガス台ガスを通気1、タクレlx溶ti
、 (NaC16,92g、KCi、35 g−、C
aCCO,5g、NaHCO32゜1 g S KI
I2PO<0、16 glMgSo、 178200.
29 gSGlucose2、0 g 、水lβ>10
+nj7を含むオルガンバス中に0.5gの静止張力を
与え懸垂し、発現する収縮反応が一定になった後、被験
試料を0.1%投与した。反応はフォース トランスジ
ューサー(Force transducer )(日
本光電社製)で等尺的に測定した。
)ヘ−x メh −ヲ有t ルバートレー系モルモット
(400−450g)左心房を34℃に保温し95%酸
素、5%炭炭酸ガス台ガスを通気1、タクレlx溶ti
、 (NaC16,92g、KCi、35 g−、C
aCCO,5g、NaHCO32゜1 g S KI
I2PO<0、16 glMgSo、 178200.
29 gSGlucose2、0 g 、水lβ>10
+nj7を含むオルガンバス中に0.5gの静止張力を
与え懸垂し、発現する収縮反応が一定になった後、被験
試料を0.1%投与した。反応はフォース トランスジ
ューサー(Force transducer )(日
本光電社製)で等尺的に測定した。
収縮抑制率は、被験試料投与前の収縮に対する百分率で
算出し、表7に示す。培養抽出物はいずれも天然冬虫夏
草抽出物と同程度の作用を示した。
算出し、表7に示す。培養抽出物はいずれも天然冬虫夏
草抽出物と同程度の作用を示した。
表 7
(2)モルモット回腸の電気刺激による収縮力抑制作用
モルモット回腸を前記(1)と同様に懸垂し、簡易型電
気刺激装置(日本光電社製)で周波数0.1Hz、時間
Q、 5m secの条件で電気刺激を与えその収縮反
応が一定するまで安定させた。その後、被験試料を0.
003%投与しその反応を測定した。反応はアイソトニ
ック トランスジコ・−サー(l5otonic tr
ansducer )(日本光電社製)により等張的に
測定した。
気刺激装置(日本光電社製)で周波数0.1Hz、時間
Q、 5m secの条件で電気刺激を与えその収縮反
応が一定するまで安定させた。その後、被験試料を0.
003%投与しその反応を測定した。反応はアイソトニ
ック トランスジコ・−サー(l5otonic tr
ansducer )(日本光電社製)により等張的に
測定した。
収縮抑制率は被験試料投与前の収縮に対する百分率で算
出し、表8に示す。培養抽出物は、いずれも天然冬虫夏
草抽出物と同程度の活性を示した。
出し、表8に示す。培養抽出物は、いずれも天然冬虫夏
草抽出物と同程度の活性を示した。
表 8
(3) 血管に対する作用
ラットより摘出した血管(大動脈)を34℃に保温し、
95%酸素、5%炭酸ガス混合ガスを通気しtモ生理溶
液(Na1l! 6.92 g、 KCfo、35g
、NatlCO32,1g5KLPL O,16g。
95%酸素、5%炭酸ガス混合ガスを通気しtモ生理溶
液(Na1l! 6.92 g、 KCfo、35g
、NatlCO32,1g5KLPL O,16g。
MgSO4・7H2Q O,29g、グルコース2.0
g 。
g 。
水1fり10mβを含むオルガンバス中に懸垂後、Ca
″−1,4mMを添加し組織内へC「°の流入j=よっ
て収縮させておいた血管に被験試料載03%を作用させ
た。その時のパターンを第3図に示す。本発明の培養法
によって得られた培養物からの抽出物は、天然冬虫夏草
抽出物と同様にわずかに血管を拡張させるものであった
。
″−1,4mMを添加し組織内へC「°の流入j=よっ
て収縮させておいた血管に被験試料載03%を作用させ
た。その時のパターンを第3図に示す。本発明の培養法
によって得られた培養物からの抽出物は、天然冬虫夏草
抽出物と同様にわずかに血管を拡張させるものであった
。
(4) ヒスタミンに対する作用
ハートレー系モルモット(体! 400〜450 g
)より摘出した回腸あるいは気管連鎖標本を34υに保
温し95%酸素、5%炭酸ガス混合ガスを通気したタイ
ロード液(CaCj!20.2 glにC10,2g、
MgC1’20.1gS NaCβ8.0g、〜at(
COa 1. Og 5NaHzPOs 0.005
g−グルコース1. Og 、水1jり20+r+7’
を含むオーガン・バス中に懸垂後、適当な濃度のヒスタ
ミンを添加した。その収縮が安定した後、被験試料0.
2%を投与しその反応を測定した。第4図に回腸を用い
たときの結果を、第5図に気管を用いたときの結果をそ
れぞれ示す。本発明の培養法によって得られた培養物か
らの抽出物は、天然冬虫夏草抽出物と同様に回腸、気管
でのヒスタミンの作用を抑えるものであった。
)より摘出した回腸あるいは気管連鎖標本を34υに保
温し95%酸素、5%炭酸ガス混合ガスを通気したタイ
ロード液(CaCj!20.2 glにC10,2g、
MgC1’20.1gS NaCβ8.0g、〜at(
COa 1. Og 5NaHzPOs 0.005
g−グルコース1. Og 、水1jり20+r+7’
を含むオーガン・バス中に懸垂後、適当な濃度のヒスタ
ミンを添加した。その収縮が安定した後、被験試料0.
2%を投与しその反応を測定した。第4図に回腸を用い
たときの結果を、第5図に気管を用いたときの結果をそ
れぞれ示す。本発明の培養法によって得られた培養物か
らの抽出物は、天然冬虫夏草抽出物と同様に回腸、気管
でのヒスタミンの作用を抑えるものであった。
(5)抗腫瘍活性
試験動物は、ICR−JCL、5週齢雌性マウス(体重
20〜25g)を採用した。ザルコマ(Sarcoma
) 180 @癌細胞はマウスの腹腔内に復水型で1週
間毎に継代しているものを用いた。試験に当っては、接
種後−週間目の腹水中の腫瘍細胞をとり出し、約2X1
0’個を含有する生理食塩水0.1mj!を試験マウス
の右脇腹下部皮下に移植した。移植して24時間後に被
験試料を生理食塩水に1%の濃度になるように溶解し1
21℃15分間滅菌した溶液0.05m1をマウスの筋
肉内に投与した。対照マウスは滅菌生理食塩水を0.0
5m1同様に投与した。
20〜25g)を採用した。ザルコマ(Sarcoma
) 180 @癌細胞はマウスの腹腔内に復水型で1週
間毎に継代しているものを用いた。試験に当っては、接
種後−週間目の腹水中の腫瘍細胞をとり出し、約2X1
0’個を含有する生理食塩水0.1mj!を試験マウス
の右脇腹下部皮下に移植した。移植して24時間後に被
験試料を生理食塩水に1%の濃度になるように溶解し1
21℃15分間滅菌した溶液0.05m1をマウスの筋
肉内に投与した。対照マウスは滅菌生理食塩水を0.0
5m1同様に投与した。
@瘍移植後、30日経過してマウスを解剖し、増殖した
固型@瘍を摘出してその重量を測定することで対照群と
の比較を行なった。尚マウスは10匹を一群とした。
固型@瘍を摘出してその重量を測定することで対照群と
の比較を行なった。尚マウスは10匹を一群とした。
その結果天然冬虫夏草抽出物の抗腫瘍活性は、わずかで
あったのに対し、コルダイセブス メロラビリス(Co
dyceps memorabilis) を用いた
培養産生物からの培養抽出物は、腫瘍抑制率71.0%
の抗腫瘍活性を示した。腫瘍抑制率は次式を用いて算出
した。
あったのに対し、コルダイセブス メロラビリス(Co
dyceps memorabilis) を用いた
培養産生物からの培養抽出物は、腫瘍抑制率71.0%
の抗腫瘍活性を示した。腫瘍抑制率は次式を用いて算出
した。
C5:対照群の平均腫瘍重量
TS:試験群 /1
(6) マウス利尿作用
ddY雄性マウスを21時間絶食、絶水した後、0.9
%生理食塩水に懸濁した被験試料を経口投与後(50m
l /kg) 2匹を1群として尿採取装置に入れ、
2時間内に排泄された尿をろ紙に吸着させ、尿重量を測
定した。尿重量の増加率は、次式を用いて算出した(表
9)。
%生理食塩水に懸濁した被験試料を経口投与後(50m
l /kg) 2匹を1群として尿採取装置に入れ、
2時間内に排泄された尿をろ紙に吸着させ、尿重量を測
定した。尿重量の増加率は、次式を用いて算出した(表
9)。
A:対照群の平均尿重量
B:被験試料の 〃
この結果、本発明により得られた培養抽出物には、いず
れも天然冬虫夏草と同様の利尿作用が認められた。
れも天然冬虫夏草と同様の利尿作用が認められた。
表 9
(7)鎮痛作用〈フェニルキノン法)
ヘンダーシElットらの方法(J、 Pharmaco
l。
l。
εXp、 Ther、、 125,273 (1957
):l 1.:従った。
):l 1.:従った。
体重20g前後の雄性ddY マウス(1群6匹)に被
験試料を経口投与し、1時間後に0.02%フェニルキ
ノン溶液0.2mj!/20gを腹腔的投与し、その際
生じるストレッチ症状の回数を20分間測定した。
験試料を経口投与し、1時間後に0.02%フェニルキ
ノン溶液0.2mj!/20gを腹腔的投与し、その際
生じるストレッチ症状の回数を20分間測定した。
抑制率は次式を用いて算出したく表10)。
し
C:対照群のストレッチ症状の平均回数D:被験試料群
の 〃 その結果、本発明の培養法により得られた培養抽出物は
、天然冬虫夏草抽出物、と同等かそれより高い鎮痛抑制
作用が認められた。
の 〃 その結果、本発明の培養法により得られた培養抽出物は
、天然冬虫夏草抽出物、と同等かそれより高い鎮痛抑制
作用が認められた。
表 1O
(8)麻酔犬冠血流増加作用
雑種成犬に30mg/kgのベンドパルビタールを静脈
内に投与して麻酔し、先後らの方法〔日本薬理学雑誌、
57巻、380ページ(1961) )に従って、左冠
動脈を潅流しその血液潰を測定した。
内に投与して麻酔し、先後らの方法〔日本薬理学雑誌、
57巻、380ページ(1961) )に従って、左冠
動脈を潅流しその血液潰を測定した。
結果は、3μgのニフェジピン投与時の血流増加量を1
00とした時の被験試料の血流増加量の割合で示した。
00とした時の被験試料の血流増加量の割合で示した。
また、効果の持続時間を半減期(Tl/2分)で求めた
(表11)。
(表11)。
その結果、本発明の培養法により(尋られた培養抽出物
は、天然冬虫夏草抽出物、とほぼ同様の弱い冠拡張作用
を示した。
は、天然冬虫夏草抽出物、とほぼ同様の弱い冠拡張作用
を示した。
表 11
()は持続時間
(9)簡易急性毒性
ddY系雄性マウスを1群5匹とし、被験試料を30m
g/kg、100mg/kg、 300mg/kg[腔
内投与、及び100mg/kg、 300mg/kg、
1000mg/kg経口投与し、2日5日目の致死を調
べた。
g/kg、100mg/kg、 300mg/kg[腔
内投与、及び100mg/kg、 300mg/kg、
1000mg/kg経口投与し、2日5日目の致死を調
べた。
結果は、表12に示す通り本発明の培養法により得られ
た培養抽出物は、天然冬虫夏草抽出物と同様に毒性は認
められなかった。
た培養抽出物は、天然冬虫夏草抽出物と同様に毒性は認
められなかった。
表 12
αO血小板凝集抑制活性
健康な人の血(9容量)に3.8%クエン酸ソーダ(l
容量)を混和し1000rpmで10分間遠心分離し、
上澄としてPPP (多血小板血漿)を採取した。この
PRPと被験試料を混和し、惹起物質としてADPを用
いその凝集反応をアグリブダ(東京第−科学製)で測定
した。凝集抑制率はADPのみによる凝集率に対する百
分率で算出した。
容量)を混和し1000rpmで10分間遠心分離し、
上澄としてPPP (多血小板血漿)を採取した。この
PRPと被験試料を混和し、惹起物質としてADPを用
いその凝集反応をアグリブダ(東京第−科学製)で測定
した。凝集抑制率はADPのみによる凝集率に対する百
分率で算出した。
結果は表13に示す通り、本発明の培養法により得られ
た培養抽出物は、天然冬虫夏草抽出物と同程度の作用を
示した。
た培養抽出物は、天然冬虫夏草抽出物と同程度の作用を
示した。
表 13
〔発明の効果〕
本発明によれば、天然冬虫夏草とほぼ同等の、成分及び
生理活性を有する冬虫夏草培養産生物を効率良く得るこ
とが出来る。本発明により得られた産生物は、天然冬虫
夏草の代替物としてそのままであるいは分画、又何らか
の処理をほどこして、食品、医薬品、香粧品等利用する
ことができる。
生理活性を有する冬虫夏草培養産生物を効率良く得るこ
とが出来る。本発明により得られた産生物は、天然冬虫
夏草の代替物としてそのままであるいは分画、又何らか
の処理をほどこして、食品、医薬品、香粧品等利用する
ことができる。
第1図は、本発明の培養法により得られた培養産生物(
A図):1.フェリナ、(B図):C。 ミリタリス〕及び天然冬虫夏草(0図)の核酸成分の高
速液体クロマトグラムを示す。第2図は、本発明の培養
法により得られた培養産生物(B図)及び天然冬虫夏草
(A図)の多糖成分のガスクロマトグラムを示す。第3
図は、本発明の培養法により得られた培養産生物からの
抽出物((B図):■、アクイピコラ、(0図)二〇、
ミリタリス〕及び天然冬虫夏草抽出物(A図)の血管(
ラット大動脈)に対する拡張作用を示す。第4図は、本
発明の培養法により得られた培養産生物からの抽出物[
(B図):1.フェリナ〕及び天然冬虫夏草抽出物(A
図)のモルモット回腸におけるヒスタミン収縮に対する
作用を示す。第5図は、本発明の培養法により得られた
培養産生物からの抽出物((B図):■、フエリナ〕及
び天然冬虫夏草抽出物(A図)のモルモット気管におけ
るヒスタミン収縮に対する作用を示す。 第3図 ’C””1.4m+M
A図):1.フェリナ、(B図):C。 ミリタリス〕及び天然冬虫夏草(0図)の核酸成分の高
速液体クロマトグラムを示す。第2図は、本発明の培養
法により得られた培養産生物(B図)及び天然冬虫夏草
(A図)の多糖成分のガスクロマトグラムを示す。第3
図は、本発明の培養法により得られた培養産生物からの
抽出物((B図):■、アクイピコラ、(0図)二〇、
ミリタリス〕及び天然冬虫夏草抽出物(A図)の血管(
ラット大動脈)に対する拡張作用を示す。第4図は、本
発明の培養法により得られた培養産生物からの抽出物[
(B図):1.フェリナ〕及び天然冬虫夏草抽出物(A
図)のモルモット回腸におけるヒスタミン収縮に対する
作用を示す。第5図は、本発明の培養法により得られた
培養産生物からの抽出物((B図):■、フエリナ〕及
び天然冬虫夏草抽出物(A図)のモルモット気管におけ
るヒスタミン収縮に対する作用を示す。 第3図 ’C””1.4m+M
Claims (7)
- (1)炭素源と穀類胚芽とを含有する液体培地中で冬虫
夏草菌糸体を培養することを特徴とする冬虫夏草の培養
法。 - (2)炭素源がグルコースである特許請求の範囲第1項
記載の培養法。 - (3)穀類胚芽が小麦胚芽である特許請求の範囲第1項
記載の培養法。 - (4)冬虫夏草菌糸体がコルダイセプス(Cordyc
eps)属に属する菌の菌糸体である特許請求の範囲第
1項記載の培養法。 - (5)冬虫夏草菌糸体がイサリア(Isaria)属に
属する菌の菌糸体である特許請求の範囲第1項記載の培
養法。 - (6)液体培地中の炭素源の含有量が0.2〜10w/
v%であり、かつ液体培地中の穀類胚芽の含有量が0.
2〜5w/v%である特許請求の範囲第1項記載の培養
法。 - (7)穀類胚芽と炭素源の重量比が穀類胚芽1に対して
炭素源1〜8である特許請求の範囲第1項記載の培養法
。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP4339087A JPS63209579A (ja) | 1987-02-26 | 1987-02-26 | 冬虫夏草の培養法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP4339087A JPS63209579A (ja) | 1987-02-26 | 1987-02-26 | 冬虫夏草の培養法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS63209579A true JPS63209579A (ja) | 1988-08-31 |
Family
ID=12662468
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP4339087A Pending JPS63209579A (ja) | 1987-02-26 | 1987-02-26 | 冬虫夏草の培養法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS63209579A (ja) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20020087193A (ko) * | 2001-05-14 | 2002-11-22 | 주식회사 엔에스케이텍 | 코디셉스 시넨시스의 액체 배양 방법 |
KR100365041B1 (ko) * | 2000-05-30 | 2002-12-16 | 해성견업 주식회사 | 동충하초의 재배방법 |
KR100465283B1 (ko) * | 2002-02-07 | 2005-01-13 | 김삼덕 | 동충하초 균사체 및 그 배양 방법 |
SG129276A1 (en) * | 2003-04-10 | 2007-02-26 | Auric Pacific Nutritech Pte Lt | Large-scale production method for cordyceps and ganoderma |
CN104350942A (zh) * | 2014-10-21 | 2015-02-18 | 广西平果利华茧丝绸有限公司 | 一种用桑枝蚕蛹粉制备虫草菌丝体的方法 |
-
1987
- 1987-02-26 JP JP4339087A patent/JPS63209579A/ja active Pending
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100365041B1 (ko) * | 2000-05-30 | 2002-12-16 | 해성견업 주식회사 | 동충하초의 재배방법 |
KR20020087193A (ko) * | 2001-05-14 | 2002-11-22 | 주식회사 엔에스케이텍 | 코디셉스 시넨시스의 액체 배양 방법 |
KR100465283B1 (ko) * | 2002-02-07 | 2005-01-13 | 김삼덕 | 동충하초 균사체 및 그 배양 방법 |
SG129276A1 (en) * | 2003-04-10 | 2007-02-26 | Auric Pacific Nutritech Pte Lt | Large-scale production method for cordyceps and ganoderma |
CN104350942A (zh) * | 2014-10-21 | 2015-02-18 | 广西平果利华茧丝绸有限公司 | 一种用桑枝蚕蛹粉制备虫草菌丝体的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102731365B (zh) | 猴头菌抑制幽门螺杆菌的生物小分子及其在治疗消化道疾病中的应用 | |
US5759543A (en) | Application of a cell culture of a fusarium fungus strain producer for medical uses | |
WO1997039999A1 (fr) | Nouveaux composes de terphenyl et medicaments contenant ces composes | |
JP4587442B2 (ja) | 新規な高脂血症治療剤および食品 | |
JPH01228480A (ja) | 食用担子菌菌糸体培養抽出物の製造方法 | |
JP4081663B2 (ja) | Antrodiacamphorataの培養物の製造方法およびそれによって得られるプロダクト | |
US4229440A (en) | Pharmaceutical composition containing the polysaccharide KGF-C as active ingredient | |
WO1998056755A1 (fr) | Substances physiologiquement actives tkr2449, leur procede de preparation et micro-organisme | |
JPS63209579A (ja) | 冬虫夏草の培養法 | |
CN114456053B (zh) | 海洋真菌产的苯甲醛类化合物及其制备方法和抗炎用途 | |
JPS58318B2 (ja) | 制癌性物質の製造方法 | |
JPH11302191A (ja) | ハタケシメジ抽出物を活性成分とする免疫賦活剤及び抗腫瘍剤 | |
CN115025088A (zh) | 十氢萘吡啶酮生物碱及其药物组合物的应用 | |
KR101145426B1 (ko) | 혈류 개선용 조성물, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 건강기능식품 | |
CN107182201B (zh) | 含有由撕裂蜡孔菌生成的胞外多糖作为有效成分的用于预防或者治疗癌症的药学组合物 | |
JPH05271031A (ja) | プロポリス抽出物の製造方法 | |
WO2000032214A1 (en) | Preventives for hepatopathy | |
DE69720101T2 (de) | Makrolid Verbindung 0406 | |
JP2000159809A (ja) | シイタケ菌糸体抽出物の分画物及びその用途 | |
JP2847204B2 (ja) | 生産体としてのフサリウム菌類株の利用及びその適応原及び免疫変成効果を有する塩基に基づいた製法 | |
CN118680944A (zh) | 一种天麻素酯类衍生物在提高肠吸收能力及制备免疫调节剂中的应用 | |
BE881595A (fr) | Inducteur d'interferon et son procede de fabrication | |
JPS596890A (ja) | 抗腫瘍性物質5117およびその製造法 | |
JPH07277971A (ja) | 抗腫瘍剤、ヒト腫瘍細胞に対する選択的細胞障害剤、ヘプテリジン酸クロロヒドリンの生産菌及びその製造方法 | |
JPH02286623A (ja) | 抗ウイルス物質及びその製法 |