JPS6223823B2 - - Google Patents
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- JPS6223823B2 JPS6223823B2 JP2049180A JP2049180A JPS6223823B2 JP S6223823 B2 JPS6223823 B2 JP S6223823B2 JP 2049180 A JP2049180 A JP 2049180A JP 2049180 A JP2049180 A JP 2049180A JP S6223823 B2 JPS6223823 B2 JP S6223823B2
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Classifications
-
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- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
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- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は生理活性物質で、かつ免疫学的に明ら
かに異なる単位からなる集合体、例えば３種のイ
ソ酵素αα型、αγ型、γγ型からなるラツト脳
エノラーゼのような集合体のうちαγ型の如きハ
イブリツト型蛋白質類を酵素免疫測定法により特
異的に測定する方法に関するものである。 近年、動物体液中の生理活性物質の多くのもの
について免疫学的に明らかに異なる単位からなる
集合体、即ちハイブリツト型蛋白質類の存在が明
らかにされており、更にこのものの体内における
挙動を測定することが広く試みられている。 例えばクレアチンキナーゼイソ酵素（MM型、
MB型、BB型）のうちMB型の血中における増加
現象を測定することにより心筋硬塞症を診断する
ことができ、さらにフイブリノーゲンのプラスミ
ン分解産物の一つであるFDP−Ｙ断片（FDP−
Ｙ断片はさらに分解されるとFDP−Ｄ断片およ
びFDP−Ｅ断片を生じるが、FDP−Ｄ断片と
FDP−Ｅ断片は互に免疫学的に異なる物質であ
る。）の血中における増加を測定することによ
り、汎発性血管内凝固症候群（DIC）の診断をし
ようとする試みもある。 しかしながら、これらハイブリツト型蛋白質類
の測定方法には末だ十分なものがなく、より簡単
にかつより正確に測定出来る方法が求められてい
る。即ち、これまで開発されてきた方法は、煩雑
であつたり、交差反応が起る為、正確な値が得ら
れなかつたり、感度が良くなかつたりで、いずれ
も不十分なものである。 最近になつて特開昭54−119291において酵素免
疫測定法（以下EIAと云う）によるクレアチンキ
ナーゼイソ酵素の検出測定法が提案されている
が、この方法はクレアチンキナーゼのイソ酵素
（MM型、MB型、BB型からなる。）を構成する免
疫学的に明らかに異なる単位であるＭ抗原及びＢ
抗原のうちＢ抗原に特異性を持つ抗体（抗Ｂ抗
体）を使用し、あらかじめ標識酵素と抗Ｂ抗体を
結合したものとの間に、抗原抗体反応をさせ、
MB型及びBB型と標識酵素を抗体を介して結合さ
せ、しかるのち、標識酵素活性を測定することに
より、BB型及びMB型イソ酵素量を求める方法で
ある。 しかし、この方法は、もともとクレアチンキナ
ーゼは血清中には、通常BB型が少ないために、
BB型、MB型の総和を測定するもので、この方法
での結果をMB型の量としても大きな誤差にはな
らず、たまたまクレアチンキナーゼの場合にの
み、この方法によりMB型クレアチンキナーゼを
測定出来たのにすぎず、BB型のようなホモダイ
マー型イソ酵素をも同時に測定するため、特異的
にMB型のようなハイブリツト型蛋白質類のみを
測定する方法とはいえないのである。 そこで本発明者らは、生理活性物質中の目的と
するハイブリツト型蛋白質類のみを特異的に、し
かもEIA法により感度よく測定する方法を求めて
鋭意研究した結果、本発明を完成したものであ
る。 即ち、本発明は体液中の生理活性物質であつて
免疫学的に異なる単位の集合体であるハイブリツ
ト型蛋白質類の測定に際し、その集合体の構成々
分である単位の一方に特異性を持ち、かつ固相に
結合せしめた不溶性抗体と集合体との間で、まず
抗原抗体反応（１次反応）を行つて不溶性抗体と
集合体との結合物を作り、ついで該結合物と他方
の単位に特異性を持ち、かつ標識酵素と結合した
標識酵素抗体との間で抗原抗体反応（２次反応）
を行つて両者の免疫学的複合物を作り、ここに得
られる複合物に結合した標識酵素の活性を測定す
ることにより免疫学的に異なる集合体の量のみを
求めることを特徴とするハイブリツト型蛋白質類
の特異的な酵素免疫測定法である。 次に本発明の測定法の原理を模式図にて説明す
る。第１図に示す免疫学的に異なる単位よりなる
集合体の混合物（AA型、AB型、BB型）のモデ
ルにおいて、AB型の如き集合体のみを特異的に
測定する方法を示す。 即ちAB型の単位Ａ及びＢをそれぞれ抗原と
し、抗原Ａに特異的な抗体（抗Ａ抗体２）および
抗原Ｂに特異的な抗体（抗Ｂ抗体３）を用意す
る。まず抗Ａ抗体を固相１に結合させておき、こ
のものと集合体の混合物とを反応させた場合に第
１図Ａに示す如き抗原抗体反応（１次反応）が生
じる。即ち抗体を介して固相に結合するのは単位
Ａを含むAA型及びAB型であり、単位Ａを持たな
いBB型は結合物を作らない。 ついで結合物のみを洗浄分取し、これに標識酵
素と結合した抗Ｂ抗体を反応せしめる（２次反
応）と、該標識酵素と結合した抗Ｂ抗体は単位Ｂ
を持つハイブリツト型蛋白質類であるAB型とは
反応するが単位Ｂを持たないAA型とは反応しな
い。したがつて標識酵素が結合するのは第１図Ｂ
に示す如く、集合体混合物（AA型、AB型、BB
型）のうちAB型のみである。そこで、結合した
標識酵素活性を測定すれば集合体混合物からAB
型集合体、即ちハイブリツト型蛋白質類のみを特
異的に測定することができることになる。 本発明の測定方法は、生体体液中におけるイソ
酵素、代謝分解産物等多くのハイブリツト型蛋白
質類を正確に定量することができるので、代謝現
象、病気の診断等に益するものである。 次に本発明の試験例及び実施例を示す。 試験例 １ 標準検体としてFDP−Ｙ（フイブリノーゲン
分解物）を用い、このものをそれぞれＧ液
〔0.3MNaCl、１ｍMMgCl2、0.1％NaN3、0.5％ゼ
ラチン、0.1Mε−アミノカプロン酸および0.02
％トリプシンインヒビターを含む0.01Mリン酸ナ
トリウム緩衝液（PH7.0）〕で稀釈し、その0.5ml
（０〜1000フエムトモルのFDP−Ｙを含む。但し
フエムトモルは１×10-15モルの意である。）に抗
FDP−Ｅ抗体結合固相（抗血清の合IgG画分をφ
３×４mmのシリコンゴム片に物理的に吸着させた
もの）１個ずつを入れ、30℃で３時間振盪する。
反応液を吸引除去後１mlのＧ液で不溶性抗体−集
合体を洗い、ついでＧ液で稀釈した抗（FDP−
Ｄ）Fab′−Gal（Fab′−Galは抗体Fab′フラグメ
ントとβ−ガラクトシダーゼの複合体である）３
ｍUnits／0.2mlにそれぞれの不溶性抗体−集合体
を入れ、30℃で一夜静置する。反応生成物をＧ液
で洗つてから、各溶性抗体−集合体に結合したβ
−ガラクトシダーゼ活性を測定した。 なお抗（FDP−Ｄ）Fab′−Galの調製法及びβ
−ガラクトシダーゼ活性の測定法は加藤ら「化学
と生物」14巻737−744頁（昭和51年）に記載され
ている。即ち、抗（FDP−Ｄ）Fab′−Galの調製
法は抗体IgG画分をペプシンで分解し、得られた
Ｆ（ab′）2フラグメントを還元すると１価のSH基
を持つて抗体Fab′フラグメントになり、これと
天然にSH基を持つた大腸菌のβ−ガラクトシダ
ーゼをＮ・Ｎ−０−フエニレンデイマレイイミド
で結合させる方法であり、β−ガラクトシダーゼ
の活性測定法は螢光基質（４−メチルウンベリフ
エリール−β−ガラクトシド）を用いて測定し
た。 この場合の検量線を第２図ａに示す。これによ
り試料中のFDP−Ｙの0.1ng（又は0.65フエムト
モル）の微量を検出することができる。一方、こ
の測定系においてFDP−Ｙの代わりにFDP−
Ｄ、FDP−Ｅを加えても第２図ｂ，ｃの検量線
に示される如くβ−ガラクトシダーゼ活性の増加
はみられず、これら抗原の共存下においても交差
現象が生じないことがわかる。したがつて、この
測定方法はFDP−Ｙのみを特異的に測る方法で
あることが分る。 試験例 ２ 標準検体としてラツト脳エノラーゼのイソ酵素
の１つであるαγ型イソ酵素を用い、このものを
それぞれＡ液〔0.1MNaCl、１ｍMMgCl2、0.1％
NaN3および0.1％牛血清アルブミンを含む0.01M
リン酸ナトリウム緩衝液（PH7.0）〕で稀釈し、そ
の各0.5ml（０〜1000フエムトモルの該イソ酵素
を含む。）に抗γ抗体結合固相を１個ずつ入れ、
４℃で５時間振盪する。反応液を吸引除去後、１
mlのＡ液で各不溶性抗体−集合体を洗い、ついで
Ａ液で稀釈した（抗α）Fab′−Gal3ｍUnits／0.2
mlにそれぞれの不溶性集合体を入れ４℃で一夜振
盪する。〔抗γ抗体および抗α抗体の調製法は
「生化学」51巻782頁（昭和54年）に準じて行な
う。〕得られた反応生成物をＡ液で洗つてから、
各不溶性集合体に結合したβ−ガラクトシダーゼ
活性を測定し、検量線を求めた。これを第３図に
示す。図中ｄは標準検体をラツト脳エノラーゼの
イソ酵素の１つであるαγ型とした場合のもので
あり、このαγ型に代えて同じくイソ酵素である
αα型、γγ型を用いた場合をｅ，ｆに示す。 この結果から明らかの如く、本発明によるラツ
ト脳エノラーゼのハイブリツト型イソ酵素である
αγ型抗原を測定する方法は、交差反応を起すこ
となく、特異的にαγ型のみを測定する方法であ
ることがわかる。 次に本発明の実施例について説明する。 実施例 １ ラツト脳１〜５の各１ｇに１mlの緩衝液を加え
て細飽組織を破壊して粗抽出液を得、これをＧ液
で希釈し、各脳１mg相当量を抗γ抗体結合固相と
接触させ４℃で５時間振盪する。反応後１mlのＡ
液で洗滌し、ついで、Ａ液で稀釈した（抗α）
Fab′−Galを３ｍUnits／0.2mlに不溶性抗体−集
合体を入れ、４℃で一夜振盪する。 得られた反応生成物をＡ液で洗滌し、不溶性抗
体−集合体に結合したβ−ガラクトシダーゼ活性
を測定し、エノラーゼαγ型イソ酵素を定量し
た。 エノラーゼαγ型イソ酵素量を測定した結果を
表１に示した。 【表】
かに異なる単位からなる集合体、例えば３種のイ
ソ酵素αα型、αγ型、γγ型からなるラツト脳
エノラーゼのような集合体のうちαγ型の如きハ
イブリツト型蛋白質類を酵素免疫測定法により特
異的に測定する方法に関するものである。 近年、動物体液中の生理活性物質の多くのもの
について免疫学的に明らかに異なる単位からなる
集合体、即ちハイブリツト型蛋白質類の存在が明
らかにされており、更にこのものの体内における
挙動を測定することが広く試みられている。 例えばクレアチンキナーゼイソ酵素（MM型、
MB型、BB型）のうちMB型の血中における増加
現象を測定することにより心筋硬塞症を診断する
ことができ、さらにフイブリノーゲンのプラスミ
ン分解産物の一つであるFDP−Ｙ断片（FDP−
Ｙ断片はさらに分解されるとFDP−Ｄ断片およ
びFDP−Ｅ断片を生じるが、FDP−Ｄ断片と
FDP−Ｅ断片は互に免疫学的に異なる物質であ
る。）の血中における増加を測定することによ
り、汎発性血管内凝固症候群（DIC）の診断をし
ようとする試みもある。 しかしながら、これらハイブリツト型蛋白質類
の測定方法には末だ十分なものがなく、より簡単
にかつより正確に測定出来る方法が求められてい
る。即ち、これまで開発されてきた方法は、煩雑
であつたり、交差反応が起る為、正確な値が得ら
れなかつたり、感度が良くなかつたりで、いずれ
も不十分なものである。 最近になつて特開昭54−119291において酵素免
疫測定法（以下EIAと云う）によるクレアチンキ
ナーゼイソ酵素の検出測定法が提案されている
が、この方法はクレアチンキナーゼのイソ酵素
（MM型、MB型、BB型からなる。）を構成する免
疫学的に明らかに異なる単位であるＭ抗原及びＢ
抗原のうちＢ抗原に特異性を持つ抗体（抗Ｂ抗
体）を使用し、あらかじめ標識酵素と抗Ｂ抗体を
結合したものとの間に、抗原抗体反応をさせ、
MB型及びBB型と標識酵素を抗体を介して結合さ
せ、しかるのち、標識酵素活性を測定することに
より、BB型及びMB型イソ酵素量を求める方法で
ある。 しかし、この方法は、もともとクレアチンキナ
ーゼは血清中には、通常BB型が少ないために、
BB型、MB型の総和を測定するもので、この方法
での結果をMB型の量としても大きな誤差にはな
らず、たまたまクレアチンキナーゼの場合にの
み、この方法によりMB型クレアチンキナーゼを
測定出来たのにすぎず、BB型のようなホモダイ
マー型イソ酵素をも同時に測定するため、特異的
にMB型のようなハイブリツト型蛋白質類のみを
測定する方法とはいえないのである。 そこで本発明者らは、生理活性物質中の目的と
するハイブリツト型蛋白質類のみを特異的に、し
かもEIA法により感度よく測定する方法を求めて
鋭意研究した結果、本発明を完成したものであ
る。 即ち、本発明は体液中の生理活性物質であつて
免疫学的に異なる単位の集合体であるハイブリツ
ト型蛋白質類の測定に際し、その集合体の構成々
分である単位の一方に特異性を持ち、かつ固相に
結合せしめた不溶性抗体と集合体との間で、まず
抗原抗体反応（１次反応）を行つて不溶性抗体と
集合体との結合物を作り、ついで該結合物と他方
の単位に特異性を持ち、かつ標識酵素と結合した
標識酵素抗体との間で抗原抗体反応（２次反応）
を行つて両者の免疫学的複合物を作り、ここに得
られる複合物に結合した標識酵素の活性を測定す
ることにより免疫学的に異なる集合体の量のみを
求めることを特徴とするハイブリツト型蛋白質類
の特異的な酵素免疫測定法である。 次に本発明の測定法の原理を模式図にて説明す
る。第１図に示す免疫学的に異なる単位よりなる
集合体の混合物（AA型、AB型、BB型）のモデ
ルにおいて、AB型の如き集合体のみを特異的に
測定する方法を示す。 即ちAB型の単位Ａ及びＢをそれぞれ抗原と
し、抗原Ａに特異的な抗体（抗Ａ抗体２）および
抗原Ｂに特異的な抗体（抗Ｂ抗体３）を用意す
る。まず抗Ａ抗体を固相１に結合させておき、こ
のものと集合体の混合物とを反応させた場合に第
１図Ａに示す如き抗原抗体反応（１次反応）が生
じる。即ち抗体を介して固相に結合するのは単位
Ａを含むAA型及びAB型であり、単位Ａを持たな
いBB型は結合物を作らない。 ついで結合物のみを洗浄分取し、これに標識酵
素と結合した抗Ｂ抗体を反応せしめる（２次反
応）と、該標識酵素と結合した抗Ｂ抗体は単位Ｂ
を持つハイブリツト型蛋白質類であるAB型とは
反応するが単位Ｂを持たないAA型とは反応しな
い。したがつて標識酵素が結合するのは第１図Ｂ
に示す如く、集合体混合物（AA型、AB型、BB
型）のうちAB型のみである。そこで、結合した
標識酵素活性を測定すれば集合体混合物からAB
型集合体、即ちハイブリツト型蛋白質類のみを特
異的に測定することができることになる。 本発明の測定方法は、生体体液中におけるイソ
酵素、代謝分解産物等多くのハイブリツト型蛋白
質類を正確に定量することができるので、代謝現
象、病気の診断等に益するものである。 次に本発明の試験例及び実施例を示す。 試験例 １ 標準検体としてFDP−Ｙ（フイブリノーゲン
分解物）を用い、このものをそれぞれＧ液
〔0.3MNaCl、１ｍMMgCl2、0.1％NaN3、0.5％ゼ
ラチン、0.1Mε−アミノカプロン酸および0.02
％トリプシンインヒビターを含む0.01Mリン酸ナ
トリウム緩衝液（PH7.0）〕で稀釈し、その0.5ml
（０〜1000フエムトモルのFDP−Ｙを含む。但し
フエムトモルは１×10-15モルの意である。）に抗
FDP−Ｅ抗体結合固相（抗血清の合IgG画分をφ
３×４mmのシリコンゴム片に物理的に吸着させた
もの）１個ずつを入れ、30℃で３時間振盪する。
反応液を吸引除去後１mlのＧ液で不溶性抗体−集
合体を洗い、ついでＧ液で稀釈した抗（FDP−
Ｄ）Fab′−Gal（Fab′−Galは抗体Fab′フラグメ
ントとβ−ガラクトシダーゼの複合体である）３
ｍUnits／0.2mlにそれぞれの不溶性抗体−集合体
を入れ、30℃で一夜静置する。反応生成物をＧ液
で洗つてから、各溶性抗体−集合体に結合したβ
−ガラクトシダーゼ活性を測定した。 なお抗（FDP−Ｄ）Fab′−Galの調製法及びβ
−ガラクトシダーゼ活性の測定法は加藤ら「化学
と生物」14巻737−744頁（昭和51年）に記載され
ている。即ち、抗（FDP−Ｄ）Fab′−Galの調製
法は抗体IgG画分をペプシンで分解し、得られた
Ｆ（ab′）2フラグメントを還元すると１価のSH基
を持つて抗体Fab′フラグメントになり、これと
天然にSH基を持つた大腸菌のβ−ガラクトシダ
ーゼをＮ・Ｎ−０−フエニレンデイマレイイミド
で結合させる方法であり、β−ガラクトシダーゼ
の活性測定法は螢光基質（４−メチルウンベリフ
エリール−β−ガラクトシド）を用いて測定し
た。 この場合の検量線を第２図ａに示す。これによ
り試料中のFDP−Ｙの0.1ng（又は0.65フエムト
モル）の微量を検出することができる。一方、こ
の測定系においてFDP−Ｙの代わりにFDP−
Ｄ、FDP−Ｅを加えても第２図ｂ，ｃの検量線
に示される如くβ−ガラクトシダーゼ活性の増加
はみられず、これら抗原の共存下においても交差
現象が生じないことがわかる。したがつて、この
測定方法はFDP−Ｙのみを特異的に測る方法で
あることが分る。 試験例 ２ 標準検体としてラツト脳エノラーゼのイソ酵素
の１つであるαγ型イソ酵素を用い、このものを
それぞれＡ液〔0.1MNaCl、１ｍMMgCl2、0.1％
NaN3および0.1％牛血清アルブミンを含む0.01M
リン酸ナトリウム緩衝液（PH7.0）〕で稀釈し、そ
の各0.5ml（０〜1000フエムトモルの該イソ酵素
を含む。）に抗γ抗体結合固相を１個ずつ入れ、
４℃で５時間振盪する。反応液を吸引除去後、１
mlのＡ液で各不溶性抗体−集合体を洗い、ついで
Ａ液で稀釈した（抗α）Fab′−Gal3ｍUnits／0.2
mlにそれぞれの不溶性集合体を入れ４℃で一夜振
盪する。〔抗γ抗体および抗α抗体の調製法は
「生化学」51巻782頁（昭和54年）に準じて行な
う。〕得られた反応生成物をＡ液で洗つてから、
各不溶性集合体に結合したβ−ガラクトシダーゼ
活性を測定し、検量線を求めた。これを第３図に
示す。図中ｄは標準検体をラツト脳エノラーゼの
イソ酵素の１つであるαγ型とした場合のもので
あり、このαγ型に代えて同じくイソ酵素である
αα型、γγ型を用いた場合をｅ，ｆに示す。 この結果から明らかの如く、本発明によるラツ
ト脳エノラーゼのハイブリツト型イソ酵素である
αγ型抗原を測定する方法は、交差反応を起すこ
となく、特異的にαγ型のみを測定する方法であ
ることがわかる。 次に本発明の実施例について説明する。 実施例 １ ラツト脳１〜５の各１ｇに１mlの緩衝液を加え
て細飽組織を破壊して粗抽出液を得、これをＧ液
で希釈し、各脳１mg相当量を抗γ抗体結合固相と
接触させ４℃で５時間振盪する。反応後１mlのＡ
液で洗滌し、ついで、Ａ液で稀釈した（抗α）
Fab′−Galを３ｍUnits／0.2mlに不溶性抗体−集
合体を入れ、４℃で一夜振盪する。 得られた反応生成物をＡ液で洗滌し、不溶性抗
体−集合体に結合したβ−ガラクトシダーゼ活性
を測定し、エノラーゼαγ型イソ酵素を定量し
た。 エノラーゼαγ型イソ酵素量を測定した結果を
表１に示した。 【表】
第１図は本発明の原理をモデル化したものであ
り、第２図は試験例１において標準検体として
FDP−Ｙを用いた場合の標準曲線ならびにFDP
−ＤおよびFDP−Ｅと交差反応を起さないこと
を示すものであり、第３図は試験例２において標
準検体としてラツト脳エノラーゼのイソ酵素の１
つであるαγ型イソ酵素を用いた場合の標準曲線
ならびにαα型及びγγ型と交差反応を示さない
図である。 第１図中１……固相、２……抗Ａ抗体、３……
抗Ｂ抗体であり、第２図中ａ……FDP−Ｙ、ｂ
……FDP−Ｄ、ｃ……FDF−Ｅ、であり第３図
中ｄ……αγ型イソ酵素、ｅ……αα型イソ酵
素、ｆ……γγ型イソ酵素である。
り、第２図は試験例１において標準検体として
FDP−Ｙを用いた場合の標準曲線ならびにFDP
−ＤおよびFDP−Ｅと交差反応を起さないこと
を示すものであり、第３図は試験例２において標
準検体としてラツト脳エノラーゼのイソ酵素の１
つであるαγ型イソ酵素を用いた場合の標準曲線
ならびにαα型及びγγ型と交差反応を示さない
図である。 第１図中１……固相、２……抗Ａ抗体、３……
抗Ｂ抗体であり、第２図中ａ……FDP−Ｙ、ｂ
……FDP−Ｄ、ｃ……FDF−Ｅ、であり第３図
中ｄ……αγ型イソ酵素、ｅ……αα型イソ酵
素、ｆ……γγ型イソ酵素である。
Claims (1)
- １ 生理活性物質で、かつ免疫学的に異なる単位
からなる集合体であるハイブリツト型蛋白質類の
測定に際し、その集合体の構成成分である単位の
一方に特異性を持つ抗体を固相に結合させて不溶
性抗体を調製し、まず該単位と該不溶性抗体とで
抗原抗体反応を行ない、該不溶性抗体に集合体を
結合させ、不溶性抗体−集合体の複合物を得、こ
れに集合体の他方の単位に特異性を持ち、かつ標
識酵素と結合した抗体を作用せしめ、不溶性抗体
−集合体の複合物に結合した標識酵素活性を測定
することにより、免疫学的に異なる部分の単位か
らなる集合体の量を求めることを特徴とするハイ
ブリツト型蛋白質類の特異的な免疫測定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2049180A JPS56118671A (en) | 1980-02-22 | 1980-02-22 | Measuring method of specific enzyme immunity of hybrid type protein |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2049180A JPS56118671A (en) | 1980-02-22 | 1980-02-22 | Measuring method of specific enzyme immunity of hybrid type protein |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS56118671A JPS56118671A (en) | 1981-09-17 |
| JPS6223823B2 true JPS6223823B2 (ja) | 1987-05-25 |
Family
ID=12028613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2049180A Granted JPS56118671A (en) | 1980-02-22 | 1980-02-22 | Measuring method of specific enzyme immunity of hybrid type protein |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS56118671A (ja) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3016575A1 (de) * | 1980-04-30 | 1981-11-05 | Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt | Verfahren zur immunologischen bestimmung von enzymen, mittel zur durchfuehrung des verfahrens und seine verwandung |
| GB2078953B (en) * | 1980-06-30 | 1984-06-13 | Int Immunoassay Lab Inc | Two site cross-reaction immunometric sandwich assay method |
| CA1176560A (en) * | 1980-09-30 | 1984-10-23 | Peter C. Harpel | Process for determining inhibitor-enzyme complexes and composition for use therein |
| JPS5899758A (ja) * | 1981-12-09 | 1983-06-14 | Amano Pharmaceut Co Ltd | セクレタリ−・コンポ−ネントの定量法 |
| JPS58198758A (ja) * | 1982-05-15 | 1983-11-18 | Amano Pharmaceut Co Ltd | ヒトエノラーゼの定量方法 |
| US4515890A (en) * | 1982-11-08 | 1985-05-07 | Abbott Laboratories | Immunoassay of terminal deoxynucleotidyl transferase |
| JPS59111062A (ja) * | 1982-12-16 | 1984-06-27 | Amano Pharmaceut Co Ltd | β型エノラ−ゼの測定法 |
| EP0327418B1 (fr) * | 1988-01-19 | 1995-04-12 | Institut Pasteur | Procédé immunométrique pour le dosage de particules de lipoprotéine, anticorps monoclonaux anti-Lp(a) et application au diagnostic de l'athérosclérose |
-
1980
- 1980-02-22 JP JP2049180A patent/JPS56118671A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS56118671A (en) | 1981-09-17 |
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