JPS6214792A

JPS6214792A - フラクトオリゴ糖高含有物の製造法

Info

Publication number: JPS6214792A
Application number: JP14997985A
Authority: JP
Inventors: Hidemasa Hidaka; 日高　秀昌; Masao Hirayama; 匡男平山
Original assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Current assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date: 1985-07-10
Filing date: 1985-07-10
Publication date: 1987-01-23
Also published as: FR2584739A1; FR2584739B1; GB8616262D0; GB2179946B; GB2179946A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（イ）産業上の利用分野本発明は難う触性甘味料、低カロリー甘味料及び腸内ビ
フィズス菌の選択的増殖因子として食品分野に使用され
ているフラクトオリゴ糖を高度に含有するフラクトオリ
ゴ糖高含有物の製造法を提供するものである。

（ロ）従来の技術及び発明が解決しようとする問題点本発明におけるフラクトオリゴ糖とは、ショ糖にフラク
トースが１分子結合した五糖類（以下、Ｇ　Ｆ　ｚと称
する）、ショ糖にフラクトースが２分子結合した四糖類
（以下、ＣＦ３と称する）、ショ糖にフラクトースが３
分子結合した五糖類（以下、Ｇ　Ｆ　ａと称する）、シ
ョ糖にフラクトースが４分子結合した六糖頚（以下、Ｇ
ＦＳと称する）及びこれ等の混合物を意味する。このフ
ラクトオリゴ糖は難う触性であり、しかも生体内の消化
酵素では消化されない難消化性糖である。更には、腸内
におけるビフィズス菌の特異的生育促進効果を有するこ
とが本発明者らにより明らかにされている（たとえば特
開昭５６−１５４９６７号、特公昭５９−５３８３４号
）。

これ等のフラクトオリゴ糖は、たとえばショ糖に植物や
微生物の生産するフラクトース転移作用を有する酵素を
作用させることにより工業的に製造されている。

しかし、この方法により得られる糖混合物の組成は反応
条件により種々の値をとり得るが、たとえばグルコース
２８％、フラクトース２％、ショ糖１１％、ＣＦ２２８
％、ＧＦ：＋　２５％、ＧＦａ６％であり、通常単糖類
を２５％以上及び原料ショ糖を１０％以上含んでいる。

従って、更にフラクトオリゴ糖を高度に含有するフラク
トオリゴｔＪＮ高含有物を得るには、種々の煩雑な精製
操作を行う必要があった。

最近、フラクトオリゴ糖の難消化性、ビフィズス菌生育
促進効果２休内脂質低下作用等の優れた作用が明らかに
されるに従い、ｊＰ−糖およびショ糖を減少させたフラ
クトオリゴ糖高含有物の用途が拡大されつつあり、工業
的に安価なフラクトオリゴ糖高含有物を製造する方法が
切望されている。

フラクトース転移反応により得られた糖組成物からフラ
クトオリゴ糖高含有物を得る従来の手段としては、活性
炭クロマトグラフ法やイオン交換クロマト法による精製
が一般的に用いられるが、ラクトオリゴ糖、特に三糖類
であるＣＦ、との分離が悪い。そのため、このような手
段でフラクトオリゴ糖高含有物を得ようとすれば、必然
的に収率は低下する。

このように単１８Ｍ及び二＃Ｎ類を減少させたフラクト
オリゴ糖高含有物を安価に工業的規模で製造する方法に
は未だ改善すべき課題が残されているのが現状である。

（ハ）問題点を解決するための手段本発明者らは前記特開昭５６−１５４９６７号の発明を
改良すべく更に検討を重ねた結果、ショ糖にフラクトー
ス転移作用を有する酵素を作用させるフラクトース転移
反応によりフラクトオリゴ糖を生産する際に副生ずるグ
ルコースがフラクト−ス転移反応を阻害する事実を解明
し、阻害するグルコースを除去することにより産業上有
利なフラクトオリゴ糖高含有物を製造しうろことを見い
出し、かかる知見に基いて本発明を完成させるに至った
・すなわち本発明は、ショ糖にフラクトース転移作成をも
つ酵素を作用させるフラクトース転移反応によりフラク
トオリゴ糖を主成分とする糖混合物を得るにあたり、副
生するグルコースを減少させる操作を実施することを特
徴とするフラクトオリゴ糖高含有物の製造法である。

フラクトース転移作用を有する酵素を用いてショ糖より
フラクトオリゴ糖混合物を得る反応は次の（１）式で表
わされる。

＋ＧＦ４（ｆχ）＋ＧＦｓ（ｇχ）（式中、Ｇはグルコース、Ｆはフラクトース。

ＣＦはシヨ糖、　Ｇ　Ｆ　ｚ　、Ｇ　Ｆ　＊　、　Ｇ　
Ｆ　ａおよびＧＦＳはショ糖にフラクトースがそれぞれ
１，２．３及び４分子結合した三糖類、四糖類、五糖類
及び六塘類を示し、ａ、　、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ及びｇ
は生成する糖組成を重量パーセントで示す数字である。

）従って、上記糖組成物中のフラクトオリゴ糖を分解す
ることなく、単ｔＪ！　’Ｒ及びシ＝１ｉＪ！を減少さ
せることができれば、フラクトオリゴ糖高含有物を得る
ことができることになる。本発明者等は、この点につき
鋭意検討を重ねた結果、グルコースを減少させる操作と
して■微生物によりグルコースを資化させる方法、■酵
素によりグルコースを変換する方法を用いることにより
フラクトオリゴ糖高含有物を有効に、かつ低コストで製
造し得ることを見い出し、本発明を完成させたものであ
る。

ここでグルコースを減少させる操作は、ショ糖よりフラ
クトオリゴ抛高含有物を得る間に実施されるものであり
、フラクトース転移反応と同時に並行して実施してもよ
く、またフラクトース転移反応により一度フラクトオリ
ゴ糖混合物を得た後に本操作を実施してもよい。

更に本発明の特徴について説明すると、従来のフラクト
ース転移反応によるフラクトオリゴ糖の製造法において
は、フラクトオリゴ糖の含有率は６０％未満に留まり、
原料シ＝！糖の１０〜１２％が残存する欠点を有してい
た。本発明を構成するグルコースを除去する操作を特に
フラクトース転移反、応と同時に並行して実施する場合
には、フラクトース転移反応速度が向上し、フラクトオ
リゴ糖の含有率が驚くべきことに９７％にも達し得るこ
とを本発明者らは見い出した。従って、本発明は単にフ
ラクトオリゴ糖高含有物を有効に、かつ低コストで得る
ことのみならず、原料ショ糖の有効利用及び反応時間の
短縮等の利点をも有する。

グルコースを減少させる操作が■微生物によりグルコー
スを資化させる方法である時に用いられる微生物の性質
としては次のものが挙げられる。ショ糖を原料としたフ
ラクトース転移反応と同時にグルコースを減少させる操
作を実施する（以下、同時法と称する）場合には、次の
（イ）、（ロ）。

（ハ）に示される微生物菌体を用いることができる。（
イ）グルコースを資化し、ショ糖及びフラクトオリゴ糖
を分解する作用（以下、インベルターゼ作用と称する）
を示さない微生物菌体。（ロ）グルコースを資化してイ
ンベルターゼ作用の弱い微生物菌体。但し、ここで言う
インベルターゼ作用の弱い微生物菌体とは、シｇ糖及び
フラクトオリゴ糖を分解してグルコースを生成する活性
がグルコースを資化する活性よりも弱い微生物菌体を意
味するものであり、具体的にはグルコース、ショ糖及び
フラクトオリゴ糖を含む基質に微生物菌体を作用させた
時にグルコースの量を減少させる微生物菌体として理解
することができる。（ハ）微生物菌体のもつショ糖及び
フラクトオリゴ１店を分解する作用を阻害する試剤（以
下、インベルターゼ阻害剤と称する）の共存下で、ショ
糖及びフラクトオリゴ糖の分解作用が有効に阻害されて
、グルコースを資化することができる微生物菌体。

但し、ここで言うショ糖及びフラクトオリゴ糖の分解作
用が有効に阻害されて、グルコースを資化することがで
きる微生物菌体とは、インベルターゼ阻害剤の存在下で
グルコース、ショ糖及びフラクトオリゴ糖を含む基質に
微生物菌体を作用させた時にグルコースの減少が認めら
れるものとして理解することができる。

また、ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用
させるフラクトース転移反応によりフラクトオリゴ糖を
主成分とする糖混合物を得た後、副生したグルコースを
減少させる操作を実施する場合（以下、段階法と称する
）には、前記（イ）。

（ロ）、（ハ）に記載されている微生物菌体に加えて（
ニ）フラクトオリゴ糖を分解する作用をもたずにグルコ
ース、シ＝１糖を資化する微生物菌体を用いることがで
きる。

これら（イ）〜（ニ）に用いられる微生物菌体としては
酵母、糸状菌、細菌の培養菌体の中より選択することが
できる。中でも前記の（イ）〜（ニ）に用いられる菌体
としてはインベルターゼ作用を示さない酵母菌体または
インベルターゼ作１日の弱い酵母菌体を好適に使用する
ことができる。

具体的にはサツカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅ
ｓ）属（サツカロミセス・セレビシェ（Ｓａｃｃｈａｒ
ｏｍ　ｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）等）、ピヒア（Ｐ
ｉｃｈｉａ）属（ピヒア・メンプランファシェンス（Ｐ
ｉｃｈｉａ　ｍｅｍｂｒａｎａｅｆａｃｉｅｎｓ）等）
、ハンセヌラ（Ｉｌａｎｓｅｎｕｌａ）属（ハンセヌラ
・ムラキイ　（Ｉｌａｎｓｅｎｕｌａ　ｍｒａｋｉｉ）
等）、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属（キャンディ
ダ・クルゼイ（Ｃａｎｄｉｄａｋｒｕｓｅｉ）等）が用
いられるが、特に前記（イ）または（ロ）の方法に用い
られる酵母菌体としては市販の酵母に公知の方法により
酸処理等の化学処理を施した酵母、あるいは変異処理法
、細胞融合法等により選別したインベルターゼ作用が弱
いかまたは示さない酵母菌株が好適に使用される。また
、（ハ）の方法に用いられる微生物は前記インベルター
ゼ作用の弱い酵母に加えて、インベルターゼ作用を示す
微生物も使用できるが、その際にはインベルターゼ阻害
剤を共存させることが必要となる。この目的に使用され
るインベルターゼ阻害剤としてはオリゴスタチン（ＳＦ
−１１３０ｘｌ＋　ｘ２　、特公昭５９−４６５９７号
参照）、ノジリマイシン、デオキシノジリマイシン等が
挙げられるが、オリゴスタチンを好ましく使用すること
ができる。更に（ニ）の方法に用いられる微生物として
は、前記の酵母に加えてフラクトオリゴ糖を分解する作
用をもたずにグルコース、ショ糖を資化する微生物も使
用することができる。具体的には前記の酵母に加えて、
細菌のラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）
属（ラクトバチルス・ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａ
ｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）等）、ビフィドバ
クテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属（ビ
フィドバクテリウム・ビヒダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍｂｉｆ　ｉｄｕｍ）等）が挙げられる。

これ等の微生物は適当な培地、たとえばグルコース５．
０％、酵母エキス２．０％を含有する培地にそれぞれの
微生物の至適温度、たとえば２５〜３０°Ｃで５〜７２
時間培養し、培養終了後、培養液を濾過または遠心分離
の手段により除去した菌体を用いることができる。

グルコースを除去させる操作が■酵素によりグルコース
を変換する方法である時に用いられる酵素としては、一
般にグルコースを他の化合物に変換する酵素が使用でき
る。中でもグルコース・オキシダーゼにより酸化する方
法が好ましく使用される。ここで、用いられるグルコー
ス・オキシダーゼとしてはアスペルギルス（匙μ７属ま
たはペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属等の微
生物が生産するグルコース・オキシダーゼが通常入手し
易いので好ましい。しかし、必要ならば藻類または動植
物起源のグルコース・オキシダーゼを利用することも可
能である。

前述のように■微生物によりグルコースを資化させる方
法及び■酵素によりグルコースを変換する方法を用いて
、フラクトオリゴ糖の製造工程においてグルコースを減
少させる操作を実施することにより目的とするフラクト
オリゴ糖高含有物を得ろことができるが、工業的製造条
件について種種検討した結果、以下の条件で実施するこ
とが好ましいことが判明した。

フラクトース転移反応に用いられるショ糖濃度は５〜７
０％、好ましくは２０〜６０％とする。

また、反応ｐ■、反応温度は微生物の起源により異なる
が、ｐＨ４，０〜８．０．温度２５〜６５℃とする。フ
ラクトース転移反応に用いられる酵素量はシヨ糖１ｇ当
り０．０８〜３００単位、好ましくは１〜５０単位とす
る。ここで酵素の単位は次のように表わす。すなわち、
２５％ショｔＪ！溶液１．０ｍｌ、酵素液０．５　ｍ　
ｌ　、　Ｍｃ　ｌ１ｖａｉｎ　９’ｆＪ−重液（ｐＨ５
，０）１．０ｍｆｆをそれぞれ混合して４０℃、３０分
酵素反応させた時に１分間に１μｍｏｌｅのＧＦ２を生
成させる酵素量を１単位として表示する。

フラクト−ス転移反応と同時にグルコースを除去する操
作を微生物により実施する場合（同時法）には、前記の
フラクトース転移反応の開始時にグルコースを資化する
微生物菌体を加えて反応を実施することが好ましい。加
える微生物菌体の量は、微生物の起原により異なるが、
シシ糖１ｇ当り湿菌体０．０１ｇ〜１０ｇ、好ましくは
０．１ｇ〜１ｇとする。また、インベルターゼ阻害剤を
添加する場合には、阻害剤の種類によって異なるが、シ
ヨを店１ｇ当り０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ、好ましくは
０．１ｍｇ〜１０■とする。この条件で反応を行ない、
反応終了後、加熱して酵素及び微生物を失活させ、微生
物菌体を遠心分離機等で除去した濾液を活性炭により脱
色し、さらにイオン交換樹脂で脱塩した後、？層線する
ことにより目的とするフラクトオリゴ糖高含有物を得る
。

フラクトース転移反応によりフラクトオリゴ社岬を主成
分とする糖混合物を得た後に、グルコースを減少させる
操作を微生物を用いて実施する場合（段階法）は、以下
の条件で実施することが好ましい。フラクトース転移反
応終了後、加熱して酵素を失活させてフラクトオリゴ糖
を主成分とする糖混合物を得る。この糖混合物にグルコ
ースを資化する微生物菌体を加え、更に反応を継続する
。

加える微生物菌体の量は、微生物の起原により異なるが
、ショ糖１ｇ当り湿菌体０．０１ｇ〜１０２ｇ、好まし
くは０．１ｇ−１ｇとする。また、インベルターゼ阻害
剤を添加する場合には、阻害剤の種類によっても異なる
が、シー！塘１ｇ当り０．０１１ＦＩＴ？〜１００ｍｇ
、好ましくは０．１■〜１０ｏｗとする。ここで、ｍ続
する反応は２５℃〜６５℃、好ましくは２５℃〜４０℃
で行ない、反応終了後、加熱して微生物を失活させ、遠
心分離機等で微生物菌体を除去した濾液を活性炭により
脱塩し、さらにイオン交換樹脂で脱塩した後、濃縮する
ことにより目的物であるフラクトオリゴ糖高含有物を得
る。

グルコース・オキシダーゼにより酸化する方法を用いて
グルコースを除去する操作を行う場合には、グルコース
・オキシダーゼはフラクトース転移反応の開始時から加
えてもよく　（同時法）、また既にフラクトース転移反
応を終了した＋Ｎ　？ＩＢ合物に加えてもよい（段階法
）。同時法及び段階法のいずれの場合にも、グルコース
・オキシダーゼはシヨ糖基質１ｇ当り１０〜２０００単
位、好ましくは１００〜１０００単位に相当する量を添
加する。この際、炭酸カルシウムを対液１〜５％、好ま
しくは２〜３％加えるごとが望ましい。

尚、ここでグルコース・オキシダーゼの単位とは次のよ
うに定義されるものである。２％グルコース溶液１　ｍ
　ｌ　、　ＭｃｌｌｖａｉＪｌ街液（Ｊ）Ｈ６，重液３
ｍｌ及びグルコース・オキシダーゼ酵素液１ｍｌの反応
組成において３０℃、１０分間振盪反応を行なった後、
反応液１ｍｌをソモギー通定法の銅試薬中に加えて反応
を停止させ、ソモギー滴定法にて残存グルコース星を求
め、１分間に反応液Ｓｍｅ中で１４．４８■のグルコー
スを酸化する（酸素吸収〒としてｌ、Ｑｍｆｆに相当）
　ｌ！ｉｙ素量を１０００単位と定める。

グルコース・オキシダーゼをフラクトース転移反応開始
時より添加する同時法においては、前記のフラクトース
転移反応の条件下で、好ましくは通気攪拌下で反応を行
ない、反応終了後、加熱によ／：Ｊ酵素を失活させ、沈
澱物を除去し、更に活性炭による脱色、イオン交換樹脂
を用いた脱塩を行った後、濃縮して目的とするフラクト
オリゴ糖高含有物を得る。また、フラクトース転移反応
後にグルコースを除去する段階法の場合には、フラクト
ース転移反応終了後、加熱して酵素を失活させた転移反
応混合溶液にグルコース・オキシダーゼ及び炭酸カルシ
ウムを添加し、更に通気撹拌下に反応を継続する。反応
終了後、加熱して酵素を失活させ、沈澱物を除去した濾
液を活性炭で脱色し、更にイオン交換樹脂を用いて脱塩
した後、濃縮して目的物であるフラクトオリゴ塘を高含
有物を得る。

このようにして得られたフラクトオリゴ糖高含有物のシ
ー！糖からの変換率及び糖組成は高速液体クロマトグラ
フィー、たとえばシマズＰ　Ｎ　Ｈｚカラム（島原製作
所製）を用い、アセトニトリル：水（７０：３０（ν／
Ｖ））の溶媒系による高速液体クロマトグラフィーによ
り分析定量することができる。

なお、フラクトオリゴ糖のＧ　Ｆ　ｚとしては０−β−
Ｄ〜フラクトフラノシル−（２→１）　−〇−β−フラ
クトフラノシル−（２→１）−α−Ｄ−グルコピラノシ
ド、Ｏ−β−Ｄ−フラクトフラノシル−（２→６）−〇
−β−グルコピラノシル−（１→２）−β−Ｄ−フラク
トフラノシド、ｏ−β−Ｄ−フラクトフラノシル−（２
−６）−０−β−フラクトフラノシル−（２→ｌ）−α
−Ｄ−グルコピラノシド等があり、ＧＦｔとしては〇−
β−Ｄ−フラクトフラノシルー（２→（１−０−β−Ｄ
−フラクトフラノシル）ｚ＝１）−α−Ｄ−グルコピラ
ノシ、ド、０−β−Ｄ−フラクトフラノシル−（２−６
）−０（β−Ｄ−フラクトフラノシル−（２−２）３−
０−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１−２）−β−Ｄ−
フラクトフラノシド等があり、ＧＦ、としては０−β−
Ｄ−フラクトフラノシル−（２→〔１−〇−β−Ｄ−フ
ラクトフラノシルー２３３−１）−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド等がある。

（ニ）発明の効果ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用させる
フラクトース転移反応によりフラクトオリゴ糖を得る場
合に、本発明によるグルコースを減少させる畏作の実施
の有無によるフラクトオ、リゴ糖の生成率および糖組成
の比較を表に示す。

表の結果かられかるように、グルコースをＷｔ少させる
操作を実施した時に生成するフラクトオリゴｌ１７ｉ（
ｃＦ、〜Ｇ　Ｆ　４　）の含有率は７８〜９８％に及び
、従来の方法におけるフラクトース転移反応のみによる
生成物中のフラクトオリゴ糖含有率の約６０％を大ｒｌ
＋に超えたフラクトオリゴ糖高含有率を、イオン交換ク
ロマト法等の分画操作を用いることなく、従って分画繰
作による収率の低下をきたすことなく、得ることができ
る。また、原料ショ糖の残存量よりフラクトース転移反
応の速度を比較すると、たとえば２０％ショ糖を基質ｌ
した実験１ではショ糖残存率が１５％に達するにはグル
コース減少剤を共存させていない対照の実験では２０時
間を要するが、グルコース減少剤としてサツカロミセス
・セレビシェ属菌体を用いた時には１２時間で到達して
いるように、反応速度も大巾に加速されている。この事
実は実験２の４０％ショ糖を基質とした時にも認められ
ている。

このように、本発明によれば反応時間が短縮されること
も工業的に実施する際には大きな利点となる。

（ホ）実施例次に、本発明の実施例を示す。

実施例１アスペルギルス・ニガー（幻月り山則駐虹朋亘ＦＥＲＭ
−Ｐ　５８８６を三角フラスコ中で粉末ブイヨン２．０
％、　シｑ　ＩＩＪ！５．０％、ＣＭＣ０，５％を含む
培地３５０ｍｌに植菌し、２８℃で２０時間培養したも
のを種培養液とした。３０１ジャーファーメンタ−にシ
ョ糖５．０％、酵母エキス３．６％。

ＣＭＣ０，５％を含む培地１５１を入れｐＨ６，５に調
節後、１２０℃で３０分殺菌した。次いで、この培地に
上記種培養液３５０ｍｊ２を無菌的に植菌し、２８℃で
７２時間培養した６培養終了後、培養液を遠心分離して
フラクトース転移活性を有する粗酵素菌体２．８ｋｇを
得た。この粗酵素のフラクトース転移活性は１５８０単
位／ｇ菌体を有していた。

シヨ＄１！　１００　ｇを含む２０％シｇ糖水溶液をｐ
Ｈ５，５とし、上記のフラクトース転移活性を有する粗
酵素菌体１．５８ｇ（シー３ＩＪｇ　１　ｇ当り２５単
位）及び市販のパン酵母を０．２５　Ｎ硫酸で３０°Ｃ
ｌ２Ｏ分間処理した酵母（フラクトオリゴ糖分解活性１
単位／ｇ・乾燥酵母以下、以後酸処理酵母と称する）５
０ｇ　（ショ糖１ｇ当り０．５ｇ）を添加し、４０″Ｃ
で２２時間反応させた。次いで、１００℃で１０分加熱
して酵素反応を停止させたのち濾過することにより菌体
を除去した。

得られた濾液を常法により活性炭で脱色し、さらにイオ
ン交換樹脂で脱塩することによりフラクトオリゴ糖高含
有物を固形物換算で５９ｇ得た。

このものの糖組成はＧＦ、〜ＧＦ、９５％、シヨ糖５％
であった。

一方、上記の条件で反応を１２時間で停止させ、以下同
様に処理した時にはフラクトオリゴ糖高含有物を固形物
換算で７０ｇ得た。この時の糖組成はＣＦ２〜ＧＦ、８
０％、シー！糖２０％であった。

また、酸処理酵母を併用することなく上記の条件で２４
時間反応させ、以下同様に処理した時にはフラクトオリ
ゴ糖を含む糖混合物を固形物換算で９８ｇ得た。この時
の糖組成はＧ　Ｆ　ｚ〜ＧＦ４５５％、シーＩｔＪ！１
５％、グルコース２８％であった。

実施例２実施例１において酸処理酵母を併用することなくフラク
トース転移反応を２４時間行なった後、反応液を１００
℃、１０分加熱してフラクトース転移反応を停止させた
。得られた反応液に実施例１と同じ酸処理酵母５０ｇ（
初発シヨ糖１ｇ当り０．５ｇ）を加え、４０℃で１０時
間攪拌した。次いで、１００℃で１０分加熱し、冷却後
濾過することにより菌体を除去した。得られた濾液を常
法により活性炭で脱色し、さらにイオン交換樹脂で脱塩
すると、フラクトオリゴ糖高含有物を固形物換算で６７
ｇ得た。このものの糖組成はＣＦ、〜ＧＦ、７９％、シ
ヨ糖２１％であった。

実施例３シーＪ糖１００ｇを含む４０％ショ糖液をｐＨ５，５と
し、実施例１で得たフラクトース転移活性を有する粗酵
素菌体１．５８ｇ（シヨｔＪ！Ｉｇ当り２５単位）およ
び酸処理酵母５０ｇ（ショｔＦ１ｇ当り０．５ｇ＞添加
し、４０°Ｃで１６時間反応させた。

以下、実施例１と同、様に処理することによりフラクト
オリゴ糖高含有物を固形物換算で６４ｇ得た。

このものの糖組成はＣＦ、〜ＧＦ４９７％、シヨ糖３％
であった。

一方、上記の条件で反応を８時間で停止させ、以下同様
に処理した時にはフラクトオリゴ糖高含有物を固形分換
算で７６ｇ得た。このものの糖組成はＧＦ２〜ＯＦ、８
６％、ショ糖１４％であった。

また、酸処理酵母を併用することなく上記の条件で１６
時間反応させ、以下同様に処理した時にはフラクトオリ
ゴ糖を含む糖混合物を固形分換算で９７ｇ得た。この時
の糖組成はＧ　Ｆ　ｚ〜ＧＦ。

５８％、シヨ糖１１％、グルコース２７％であった。

実施例４ショｔｌ！　１０　ｇを含む１０％ショ糖水溶液をｐＨ
５，５とし、実施例１で得られたフラクトース転移活性
を有する粗酵素菌体０．１６ｇ、グルコース。

オキシダーゼ５０００単位（シヨｔＡＷ１ｇ当り５００
単位）及び炭酸カルシウムを対液２．５％添加し、４０
℃で通気攪拌しながら２００時間反応せた。

反応終了後、１００℃で１０分加熱して反応を停止し、
沈澱物及び菌体を遠心分離で除去した′ｄ＠液を活性炭
で脱色し、さらにイオン交換樹脂で脱塩することにより
フラクトオリゴ糖高含有物を固形分換算で５．６ｇ得た
。このものの糖組成はＧ　Ｆ　ｚ〜ＧＦ、８６％、ショ
糖９％、グルコース５％であった。

Claims

【特許請求の範囲】１、ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用さ
せるフラクトース転移反応によりフラクトオリゴ糖を主
成分とする糖混合物を得るにあたり、副生するグルコー
スを減少させる操作を実施することを特徴とするフラク
トオリゴ糖高含有物の製造法。２、ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用さ
せるフラクトース転移反応と、副生するグルコースを減
少させる操作とを同時に実施する特許請求の範囲第１項
記載の方法。３、ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用さ
せるフラクトース転移反応によりフラクトオリゴ糖を含
む糖混合物を得た後、副生したグルコースを減少させる
操作を実施する特許請求の範囲第１項記載の方法。４、副生するグルコースを減少させる操作が、微生物に
よりグルコースを資化させる操作である特許請求の範囲
第１〜３項のいずれかに記載の方法。５、副生するグルコースを減少させる操作が、微生物の
ショ糖及びフラクトオリゴ糖を分解する作用を阻害する
試剤の共存下に微生物によりグルコースを資化する操作
である特許請求の範囲第１〜３項のいずれかに記載の方
法。６、グルコースを減少させる操作が、微生物によりグル
コースとショ糖を資化させる操作である特許請求の範囲
第３項記載の方法。７、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、シ
ョ糖及びフラクトオリゴ糖を分解する作用をもたない微
生物である特許請求の範囲第４項記載の方法。８、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、フ
ラクトオリゴ糖およびショ糖を分解する作用の弱い微生
物である特許請求の範囲第４項記載の方法。９、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、酵
母である特許請求の範囲第４項記載の方法。１０、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、
インベルターゼ作用を示さない酵母である特許請求の範
囲第７項記載の方法。１１、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、
細菌である特許請求の範囲第４項記載の方法。１２、微生物のショ糖及びフラクトオリゴ糖を分解する
作用を阻害する試剤がインベルターゼ阻害剤である特許
請求の範囲第５項記載の方法。１３、副生するグルコースを減少させる操作が、酵素に
よりグルコースを変換する操作である特許請求の範囲第
１〜３項のいずれかに記載の方法。１４、副生するグルコースを減少させる操作が、グルコ
ース・オキシダーゼによりグルコースを酸化する操作で
ある特許請求の範囲第１３項記載の方法。