JPS6214792A - Production of composition containing large amount of fructooligosaccharide - Google Patents
Production of composition containing large amount of fructooligosaccharideInfo
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- JPS6214792A JPS6214792A JP14997985A JP14997985A JPS6214792A JP S6214792 A JPS6214792 A JP S6214792A JP 14997985 A JP14997985 A JP 14997985A JP 14997985 A JP14997985 A JP 14997985A JP S6214792 A JPS6214792 A JP S6214792A
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Abstract
Description
【発明の詳細な説明】
(イ)産業上の利用分野
本発明は難う触性甘味料、低カロリー甘味料及び腸内ビ
フィズス菌の選択的増殖因子として食品分野に使用され
ているフラクトオリゴ糖を高度に含有するフラクトオリ
ゴ糖高含有物の製造法を提供するものである。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION (a) Field of Industrial Application The present invention is directed to the use of fructo-oligosaccharides, which are used in the food field as hard-to-tactile sweeteners, low-calorie sweeteners, and selective growth factors for intestinal bifidobacteria. The present invention provides a method for producing a product containing a high content of fructooligosaccharides.
(ロ)従来の技術及び発明が解決しようとする問題点
本発明におけるフラクトオリゴ糖とは、ショ糖にフラク
トースが1分子結合した五糖類(以下、G F zと称
する)、ショ糖にフラクトースが2分子結合した四糖類
(以下、CF3と称する)、ショ糖にフラクトースが3
分子結合した五糖類(以下、G F aと称する)、シ
ョ糖にフラクトースが4分子結合した六糖頚(以下、G
FSと称する)及びこれ等の混合物を意味する。このフ
ラクトオリゴ糖は難う触性であり、しかも生体内の消化
酵素では消化されない難消化性糖である。更には、腸内
におけるビフィズス菌の特異的生育促進効果を有するこ
とが本発明者らにより明らかにされている(たとえば特
開昭56−154967号、特公昭59−53834号
)。(b) Problems to be solved by the prior art and the invention Fructooligosaccharides in the present invention are pentasaccharides in which one molecule of fructose is bound to sucrose (hereinafter referred to as G F z), Molecularly bonded tetrasaccharide (hereinafter referred to as CF3), 3 fructose in sucrose
pentasaccharides with molecular bonds (hereinafter referred to as G Fa), hexasaccharide necks with four molecules of fructose bonded to sucrose (hereinafter referred to as G
FS) and mixtures thereof. This fructooligosaccharide is a non-digestible sugar that is difficult to digest and cannot be digested by digestive enzymes in living organisms. Furthermore, the present inventors have revealed that it has a specific growth-promoting effect on bifidobacteria in the intestines (for example, JP-A-56-154967, JP-B-Sho 59-53834).
これ等のフラクトオリゴ糖は、たとえばショ糖に植物や
微生物の生産するフラクトース転移作用を有する酵素を
作用させることにより工業的に製造されている。These fructooligosaccharides are industrially produced, for example, by reacting sucrose with an enzyme having a fructose transfer action produced by plants or microorganisms.
しかし、この方法により得られる糖混合物の組成は反応
条件により種々の値をとり得るが、たとえばグルコース
28%、フラクトース2%、ショ糖11%、CF228
%、GF:+ 25%、GFa6%であり、通常単糖類
を25%以上及び原料ショ糖を10%以上含んでいる。However, the composition of the sugar mixture obtained by this method can take various values depending on the reaction conditions; for example, glucose 28%, fructose 2%, sucrose 11%, CF228
%, GF: +25%, GFa6%, and usually contains 25% or more of monosaccharides and 10% or more of raw material sucrose.
従って、更にフラクトオリゴ糖を高度に含有するフラク
トオリゴtJN高含有物を得るには、種々の煩雑な精製
操作を行う必要があった。Therefore, in order to obtain a fructooligo-tJN-rich product containing a high degree of fructooligosaccharide, it was necessary to perform various complicated purification operations.
最近、フラクトオリゴ糖の難消化性、ビフィズス菌生育
促進効果2休内脂質低下作用等の優れた作用が明らかに
されるに従い、jP−糖およびショ糖を減少させたフラ
クトオリゴ糖高含有物の用途が拡大されつつあり、工業
的に安価なフラクトオリゴ糖高含有物を製造する方法が
切望されている。Recently, as the excellent effects of fructooligosaccharides such as indigestibility, bifidobacterial growth promoting effect, and intra-liquid lipid lowering effect have been revealed, the use of fructooligosaccharide-rich products with reduced jP-sugar and sucrose has been discovered. There is a need for an industrially inexpensive method for producing products with a high content of fructooligosaccharides.
フラクトース転移反応により得られた糖組成物からフラ
クトオリゴ糖高含有物を得る従来の手段としては、活性
炭クロマトグラフ法やイオン交換クロマト法による精製
が一般的に用いられるが、ラクトオリゴ糖、特に三糖類
であるCF、との分離が悪い。そのため、このような手
段でフラクトオリゴ糖高含有物を得ようとすれば、必然
的に収率は低下する。Conventional methods for obtaining high fructooligosaccharide content from sugar compositions obtained by fructose transfer reaction generally involve purification by activated carbon chromatography or ion exchange chromatography. Separation from certain CFs is poor. Therefore, if an attempt is made to obtain a product with a high content of fructooligosaccharide by such means, the yield will inevitably decrease.
このように単18M及び二#N類を減少させたフラクト
オリゴ糖高含有物を安価に工業的規模で製造する方法に
は未だ改善すべき課題が残されているのが現状である。At present, there are still problems to be solved in the method of producing a product with a high content of fructooligosaccharides with reduced amounts of mono-18M and di-N at low cost on an industrial scale.
(ハ)問題点を解決するための手段
本発明者らは前記特開昭56−154967号の発明を
改良すべく更に検討を重ねた結果、ショ糖にフラクトー
ス転移作用を有する酵素を作用させるフラクトース転移
反応によりフラクトオリゴ糖を生産する際に副生ずるグ
ルコースがフラクト−ス転移反応を阻害する事実を解明
し、阻害するグルコースを除去することにより産業上有
利なフラクトオリゴ糖高含有物を製造しうろことを見い
出し、かかる知見に基いて本発明を完成させるに至った
・
すなわち本発明は、ショ糖にフラクトース転移作成をも
つ酵素を作用させるフラクトース転移反応によりフラク
トオリゴ糖を主成分とする糖混合物を得るにあたり、副
生するグルコースを減少させる操作を実施することを特
徴とするフラクトオリゴ糖高含有物の製造法である。(c) Means for Solving the Problems The present inventors have conducted further studies to improve the invention of JP-A No. 56-154967, and found that fructose is produced by treating sucrose with an enzyme that has a fructose transfer action. We clarified the fact that glucose, which is a by-product during the production of fructooligosaccharide by transfer reaction, inhibits fructose transfer reaction, and we found that it is possible to produce industrially advantageous products with high fructooligosaccharide content by removing the inhibiting glucose. Based on these findings, we have completed the present invention.In other words, the present invention involves the steps of obtaining a sugar mixture containing fructooligosaccharide as the main component through a fructose transfer reaction in which an enzyme capable of producing a fructose transfer is applied to sucrose. This is a method for producing a product with a high content of fructooligosaccharide, which is characterized by carrying out an operation to reduce by-product glucose.
フラクトース転移作用を有する酵素を用いてショ糖より
フラクトオリゴ糖混合物を得る反応は次の(1)式で表
わされる。The reaction for obtaining a fructooligosaccharide mixture from sucrose using an enzyme having fructose transfer activity is expressed by the following equation (1).
+GF4(fχ)+GFs(gχ) (式中、Gはグルコース、Fはフラクトース。+GF4(fχ)+GFs(gχ) (In the formula, G is glucose and F is fructose.
CFはシヨ糖、 G F z 、G F * 、 G
F aおよびGFSはショ糖にフラクトースがそれぞれ
1,2.3及び4分子結合した三糖類、四糖類、五糖類
及び六塘類を示し、a、 、b、c、d、e、f及びg
は生成する糖組成を重量パーセントで示す数字である。CF is sucrose, G F z , G F *, G
F a and GFS indicate trisaccharides, tetrasaccharides, pentasaccharides, and hexasaccharides in which 1, 2.3, and 4 fructose molecules are bonded to sucrose, respectively, and a, , b, c, d, e, f, and g
is a number indicating the sugar composition produced in weight percent.
)従って、上記糖組成物中のフラクトオリゴ糖を分解す
ることなく、単tJ! ’R及びシ=1iJ!を減少さ
せることができれば、フラクトオリゴ糖高含有物を得る
ことができることになる。本発明者等は、この点につき
鋭意検討を重ねた結果、グルコースを減少させる操作と
して■微生物によりグルコースを資化させる方法、■酵
素によりグルコースを変換する方法を用いることにより
フラクトオリゴ糖高含有物を有効に、かつ低コストで製
造し得ることを見い出し、本発明を完成させたものであ
る。) Therefore, without decomposing the fructooligosaccharide in the sugar composition, the simple tJ! 'R and C=1iJ! If this can be reduced, a product with high fructooligosaccharide content can be obtained. As a result of intensive studies on this point, the present inventors have determined that they can reduce glucose by using two methods: (1) assimilating glucose by microorganisms, and (2) converting glucose by enzymes. The present invention has been completed by discovering that it can be manufactured effectively and at low cost.
ここでグルコースを減少させる操作は、ショ糖よりフラ
クトオリゴ抛高含有物を得る間に実施されるものであり
、フラクトース転移反応と同時に並行して実施してもよ
く、またフラクトース転移反応により一度フラクトオリ
ゴ糖混合物を得た後に本操作を実施してもよい。The operation for reducing glucose here is carried out while obtaining a product with a high fructooligosaccharide content from sucrose, and may be carried out in parallel at the same time as the fructose transfer reaction. This operation may be carried out after obtaining the mixture.
更に本発明の特徴について説明すると、従来のフラクト
ース転移反応によるフラクトオリゴ糖の製造法において
は、フラクトオリゴ糖の含有率は60%未満に留まり、
原料シ=!糖の10〜12%が残存する欠点を有してい
た。本発明を構成するグルコースを除去する操作を特に
フラクトース転移反、応と同時に並行して実施する場合
には、フラクトース転移反応速度が向上し、フラクトオ
リゴ糖の含有率が驚くべきことに97%にも達し得るこ
とを本発明者らは見い出した。従って、本発明は単にフ
ラクトオリゴ糖高含有物を有効に、かつ低コストで得る
ことのみならず、原料ショ糖の有効利用及び反応時間の
短縮等の利点をも有する。Further explaining the features of the present invention, in the conventional method for producing fructooligosaccharides by fructose transfer reaction, the content of fructooligosaccharides remains below 60%,
Raw material =! The defect was that 10-12% of the sugar remained. In particular, when the operation of removing glucose, which constitutes the present invention, is carried out in parallel with the fructose transfer reaction, the rate of the fructose transfer reaction increases, and the fructooligosaccharide content surprisingly increases to 97%. The present inventors have found that it is possible to achieve this. Therefore, the present invention not only allows a product with a high fructooligosaccharide content to be obtained effectively and at low cost, but also has advantages such as effective use of raw material sucrose and shortening of reaction time.
グルコースを減少させる操作が■微生物によりグルコー
スを資化させる方法である時に用いられる微生物の性質
としては次のものが挙げられる。ショ糖を原料としたフ
ラクトース転移反応と同時にグルコースを減少させる操
作を実施する(以下、同時法と称する)場合には、次の
(イ)、(ロ)。When the operation for reducing glucose is (2) assimilating glucose by microorganisms, the properties of the microorganisms used include the following. When carrying out the operation of reducing glucose simultaneously with the fructose transfer reaction using sucrose as a raw material (hereinafter referred to as a simultaneous method), the following (a) and (b) are carried out.
(ハ)に示される微生物菌体を用いることができる。(
イ)グルコースを資化し、ショ糖及びフラクトオリゴ糖
を分解する作用(以下、インベルターゼ作用と称する)
を示さない微生物菌体。(ロ)グルコースを資化してイ
ンベルターゼ作用の弱い微生物菌体。但し、ここで言う
インベルターゼ作用の弱い微生物菌体とは、シg糖及び
フラクトオリゴ糖を分解してグルコースを生成する活性
がグルコースを資化する活性よりも弱い微生物菌体を意
味するものであり、具体的にはグルコース、ショ糖及び
フラクトオリゴ糖を含む基質に微生物菌体を作用させた
時にグルコースの量を減少させる微生物菌体として理解
することができる。(ハ)微生物菌体のもつショ糖及び
フラクトオリゴ1店を分解する作用を阻害する試剤(以
下、インベルターゼ阻害剤と称する)の共存下で、ショ
糖及びフラクトオリゴ糖の分解作用が有効に阻害されて
、グルコースを資化することができる微生物菌体。The microbial cells shown in (c) can be used. (
b) Action to assimilate glucose and decompose sucrose and fructooligosaccharides (hereinafter referred to as invertase action)
Microbial cells that do not exhibit (b) Microbial cells that utilize glucose and have weak invertase action. However, the term "microbial cells with weak invertase action" as used herein refers to microbial cells whose activity of decomposing sig sugars and fructooligosaccharides to produce glucose is weaker than the activity of assimilating glucose. Specifically, it can be understood as a microbial cell that reduces the amount of glucose when it acts on a substrate containing glucose, sucrose, and fructooligosaccharide. (c) The decomposition action of sucrose and fructooligosaccharides is effectively inhibited in the coexistence of a reagent that inhibits the action of microorganisms to decompose sucrose and fructooligosaccharide (hereinafter referred to as an invertase inhibitor). , a microbial cell that can assimilate glucose.
但し、ここで言うショ糖及びフラクトオリゴ糖の分解作
用が有効に阻害されて、グルコースを資化することがで
きる微生物菌体とは、インベルターゼ阻害剤の存在下で
グルコース、ショ糖及びフラクトオリゴ糖を含む基質に
微生物菌体を作用させた時にグルコースの減少が認めら
れるものとして理解することができる。However, the microbial cells that can effectively inhibit the decomposition of sucrose and fructooligosaccharides and assimilate glucose refer to microorganisms that can assimilate glucose, including glucose, sucrose, and fructooligosaccharides in the presence of an invertase inhibitor. This can be understood as a decrease in glucose observed when microbial cells are allowed to act on a substrate.
また、ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用
させるフラクトース転移反応によりフラクトオリゴ糖を
主成分とする糖混合物を得た後、副生したグルコースを
減少させる操作を実施する場合(以下、段階法と称する
)には、前記(イ)。In addition, when a sugar mixture containing fructooligosaccharide as the main component is obtained by a fructose transfer reaction in which an enzyme with a fructose transfer effect is applied to sucrose, an operation is performed to reduce the by-product glucose (hereinafter referred to as the step method). ) refers to (a) above.
(ロ)、(ハ)に記載されている微生物菌体に加えて(
ニ)フラクトオリゴ糖を分解する作用をもたずにグルコ
ース、シ=1糖を資化する微生物菌体を用いることがで
きる。In addition to the microbial cells listed in (b) and (c), (
d) A microbial cell that assimilates glucose and monosaccharide without having the action of decomposing fructooligosaccharide can be used.
これら(イ)〜(ニ)に用いられる微生物菌体としては
酵母、糸状菌、細菌の培養菌体の中より選択することが
できる。中でも前記の(イ)〜(ニ)に用いられる菌体
としてはインベルターゼ作用を示さない酵母菌体または
インベルターゼ作1日の弱い酵母菌体を好適に使用する
ことができる。The microbial cells used in (a) to (d) can be selected from cultured cells of yeast, filamentous fungi, and bacteria. Among these, yeast cells that do not exhibit invertase activity or weak yeast cells that have been producing invertase for one day can be suitably used as the cells used in (a) to (d) above.
具体的にはサツカロミセス(Saccharomyce
s)属(サツカロミセス・セレビシェ(Sacchar
om cescerevisiae)等)、ピヒア(P
ichia)属(ピヒア・メンプランファシェンス(P
ichia membranaefaciens)等)
、ハンセヌラ(Ilansenula)属(ハンセヌラ
・ムラキイ (Ilansenula mrakii)
等)、キャンディダ(Candida)属(キャンディ
ダ・クルゼイ(Candidakrusei)等)が用
いられるが、特に前記(イ)または(ロ)の方法に用い
られる酵母菌体としては市販の酵母に公知の方法により
酸処理等の化学処理を施した酵母、あるいは変異処理法
、細胞融合法等により選別したインベルターゼ作用が弱
いかまたは示さない酵母菌株が好適に使用される。また
、(ハ)の方法に用いられる微生物は前記インベルター
ゼ作用の弱い酵母に加えて、インベルターゼ作用を示す
微生物も使用できるが、その際にはインベルターゼ阻害
剤を共存させることが必要となる。この目的に使用され
るインベルターゼ阻害剤としてはオリゴスタチン(SF
−1130xl+ x2 、特公昭59−46597号
参照)、ノジリマイシン、デオキシノジリマイシン等が
挙げられるが、オリゴスタチンを好ましく使用すること
ができる。更に(ニ)の方法に用いられる微生物として
は、前記の酵母に加えてフラクトオリゴ糖を分解する作
用をもたずにグルコース、ショ糖を資化する微生物も使
用することができる。具体的には前記の酵母に加えて、
細菌のラクトバチルス(Lactobacillus)
属(ラクトバチルス・ファーメンタム(Lactoba
cillus fermentum)等)、ビフィドバ
クテリウム(Bifidobacterium)属(ビ
フィドバクテリウム・ビヒダム(Bifidobact
eriumbif idum)等)が挙げられる。Specifically, Saccharomyces
s) genus (Saccharomyces cerevisiae)
om cescerevisiae), Pichia (P
ichia) genus (Pichia memplanfascens (P
ichia membranaefaciens), etc.)
, genus Ilansenula (Ilansenula mrakii)
etc.), Candida genus (Candida krusei, etc.) are used, but in particular, the yeast cells used in the method (a) or (b) above are those using known methods for commercially available yeast. Yeast that have been chemically treated such as acid treatment, or yeast strains that have weak or no invertase activity that have been selected by mutation treatment methods, cell fusion methods, etc. are preferably used. Furthermore, as the microorganism used in the method (c), in addition to the aforementioned yeast having a weak invertase action, microorganisms showing an invertase action can also be used, but in this case, it is necessary to coexist with an invertase inhibitor. Invertase inhibitors used for this purpose include oligostatin (SF
-1130xl + Furthermore, as the microorganisms used in the method (d), in addition to the above-mentioned yeast, microorganisms that assimilate glucose and sucrose without having the action of decomposing fructooligosaccharides can also be used. Specifically, in addition to the yeast mentioned above,
Bacteria Lactobacillus
Genus (Lactobacillus fermentum)
Bifidobacterium (Bifidobacterium etc.), Bifidobacterium (Bifidobacterium
erium bifidum), etc.).
これ等の微生物は適当な培地、たとえばグルコース5.
0%、酵母エキス2.0%を含有する培地にそれぞれの
微生物の至適温度、たとえば25〜30°Cで5〜72
時間培養し、培養終了後、培養液を濾過または遠心分離
の手段により除去した菌体を用いることができる。These microorganisms are grown in a suitable medium such as glucose 5.
0% yeast extract and 2.0% yeast extract at the optimum temperature of each microorganism, e.g. 5-72°C at 25-30°C.
The cells can be used after culturing for a period of time and removing the culture solution by filtration or centrifugation after completion of the culture.
グルコースを除去させる操作が■酵素によりグルコース
を変換する方法である時に用いられる酵素としては、一
般にグルコースを他の化合物に変換する酵素が使用でき
る。中でもグルコース・オキシダーゼにより酸化する方
法が好ましく使用される。ここで、用いられるグルコー
ス・オキシダーゼとしてはアスペルギルス(匙μ7属ま
たはペニシリウム(Penicillium)属等の微
生物が生産するグルコース・オキシダーゼが通常入手し
易いので好ましい。しかし、必要ならば藻類または動植
物起源のグルコース・オキシダーゼを利用することも可
能である。When the operation for removing glucose is (2) converting glucose using an enzyme, enzymes that generally convert glucose into other compounds can be used as the enzyme. Among these, the method of oxidizing with glucose oxidase is preferably used. Here, as the glucose oxidase used, glucose oxidase produced by microorganisms such as Aspergillus (genus Aspergillus or Penicillium) is preferred because it is usually easily available.However, if necessary, glucose oxidase of algae or animal or plant origin It is also possible to use oxidases.
前述のように■微生物によりグルコースを資化させる方
法及び■酵素によりグルコースを変換する方法を用いて
、フラクトオリゴ糖の製造工程においてグルコースを減
少させる操作を実施することにより目的とするフラクト
オリゴ糖高含有物を得ろことができるが、工業的製造条
件について種種検討した結果、以下の条件で実施するこ
とが好ましいことが判明した。As mentioned above, the desired fructooligosaccharide-rich product can be obtained by performing an operation to reduce glucose in the fructooligosaccharide manufacturing process using the methods of (1) assimilating glucose by microorganisms and (2) converting glucose by enzymes. However, as a result of examining various industrial manufacturing conditions, it was found that it is preferable to carry out the process under the following conditions.
フラクトース転移反応に用いられるショ糖濃度は5〜7
0%、好ましくは20〜60%とする。The sucrose concentration used for fructose transfer reaction is 5-7
0%, preferably 20-60%.
また、反応p■、反応温度は微生物の起源により異なる
が、pH4,0〜8.0.温度25〜65℃とする。フ
ラクトース転移反応に用いられる酵素量はシヨ糖1g当
り0.08〜300単位、好ましくは1〜50単位とす
る。ここで酵素の単位は次のように表わす。すなわち、
25%ショtJ!溶液1.0ml、酵素液0.5 m
l 、 Mc l1vain 9’fJ−重液(pH5
,0)1.0mffをそれぞれ混合して40℃、30分
酵素反応させた時に1分間に1μmoleのGF2を生
成させる酵素量を1単位として表示する。In addition, the reaction p■ and reaction temperature vary depending on the origin of the microorganism, but the pH is 4.0 to 8.0. The temperature shall be 25-65°C. The amount of enzyme used in the fructose transfer reaction is 0.08 to 300 units, preferably 1 to 50 units per gram of sucrose. Here, the enzyme unit is expressed as follows. That is,
25% shot tJ! 1.0ml of solution, 0.5ml of enzyme solution
l, Mcl1vain 9'fJ-heavy liquid (pH 5
.
フラクト−ス転移反応と同時にグルコースを除去する操
作を微生物により実施する場合(同時法)には、前記の
フラクトース転移反応の開始時にグルコースを資化する
微生物菌体を加えて反応を実施することが好ましい。加
える微生物菌体の量は、微生物の起原により異なるが、
シシ糖1g当り湿菌体0.01g〜10g、好ましくは
0.1g〜1gとする。また、インベルターゼ阻害剤を
添加する場合には、阻害剤の種類によって異なるが、シ
ヨを店1g当り0.01mg〜100mg、好ましくは
0.1mg〜10■とする。この条件で反応を行ない、
反応終了後、加熱して酵素及び微生物を失活させ、微生
物菌体を遠心分離機等で除去した濾液を活性炭により脱
色し、さらにイオン交換樹脂で脱塩した後、?層線する
ことにより目的とするフラクトオリゴ糖高含有物を得る
。When the operation of removing glucose at the same time as the fructose transfer reaction is carried out using microorganisms (simultaneous method), it is possible to carry out the reaction by adding microorganisms that assimilate glucose at the start of the fructose transfer reaction. preferable. The amount of microbial cells to be added varies depending on the origin of the microorganism, but
The amount of wet bacterial cells is 0.01 g to 10 g, preferably 0.1 g to 1 g, per 1 g of sucrose. Further, when an invertase inhibitor is added, the amount is 0.01 mg to 100 mg, preferably 0.1 mg to 10 mg per gram of invertase, although it varies depending on the type of the inhibitor. The reaction is carried out under these conditions,
After the reaction is completed, enzymes and microorganisms are inactivated by heating, microbial cells are removed using a centrifuge, the filtrate is decolorized with activated carbon, and further desalted with an ion exchange resin. By layering, the desired product with high fructooligosaccharide content is obtained.
フラクトース転移反応によりフラクトオリゴ社岬を主成
分とする糖混合物を得た後に、グルコースを減少させる
操作を微生物を用いて実施する場合(段階法)は、以下
の条件で実施することが好ましい。フラクトース転移反
応終了後、加熱して酵素を失活させてフラクトオリゴ糖
を主成分とする糖混合物を得る。この糖混合物にグルコ
ースを資化する微生物菌体を加え、更に反応を継続する
。When a sugar mixture containing Fructooligosha Misaki as a main component is obtained by a fructose transfer reaction and then an operation for reducing glucose is carried out using a microorganism (step method), it is preferably carried out under the following conditions. After the fructose transfer reaction is completed, the enzyme is inactivated by heating to obtain a sugar mixture containing fructooligosaccharide as the main component. Microbial cells that assimilate glucose are added to this sugar mixture, and the reaction is continued.
加える微生物菌体の量は、微生物の起原により異なるが
、ショ糖1g当り湿菌体0.01g〜102g、好まし
くは0.1g−1gとする。また、インベルターゼ阻害
剤を添加する場合には、阻害剤の種類によっても異なる
が、シー!塘1g当り0.011FIT?〜100mg
、好ましくは0.1■〜10owとする。ここで、m続
する反応は25℃〜65℃、好ましくは25℃〜40℃
で行ない、反応終了後、加熱して微生物を失活させ、遠
心分離機等で微生物菌体を除去した濾液を活性炭により
脱塩し、さらにイオン交換樹脂で脱塩した後、濃縮する
ことにより目的物であるフラクトオリゴ糖高含有物を得
る。The amount of microbial cells to be added varies depending on the origin of the microorganisms, but is 0.01 to 102 g of wet microbial cells per gram of sucrose, preferably 0.1 to 1 g. Also, when adding an invertase inhibitor, it depends on the type of inhibitor, but C! 0.011FIT per 1g? ~100mg
, preferably 0.1 to 10 ow. Here, the reaction lasting from 25°C to 65°C, preferably from 25°C to 40°C
After the reaction is completed, the microorganisms are inactivated by heating, and the microorganisms are removed using a centrifuge, etc. The filtrate is desalted using activated carbon, further desalted using an ion exchange resin, and then concentrated. A product with high fructooligosaccharide content is obtained.
グルコース・オキシダーゼにより酸化する方法を用いて
グルコースを除去する操作を行う場合には、グルコース
・オキシダーゼはフラクトース転移反応の開始時から加
えてもよく (同時法)、また既にフラクトース転移反
応を終了した+N ?IB合物に加えてもよい(段階法
)。同時法及び段階法のいずれの場合にも、グルコース
・オキシダーゼはシヨ糖基質1g当り10〜2000単
位、好ましくは100〜1000単位に相当する量を添
加する。この際、炭酸カルシウムを対液1〜5%、好ま
しくは2〜3%加えるごとが望ましい。When performing an operation to remove glucose using a method of oxidizing glucose with glucose oxidase, glucose oxidase may be added from the beginning of the fructose transfer reaction (simultaneous method), or the +N ? It may also be added to the IB compound (stepwise method). In both the simultaneous method and the stepwise method, glucose oxidase is added in an amount corresponding to 10 to 2000 units, preferably 100 to 1000 units, per gram of sucrose substrate. At this time, it is desirable to add 1 to 5%, preferably 2 to 3%, of calcium carbonate to the liquid.
尚、ここでグルコース・オキシダーゼの単位とは次のよ
うに定義されるものである。2%グルコース溶液1 m
l 、 McllvaiJl街液(J)H6,重液3
ml及びグルコース・オキシダーゼ酵素液1mlの反応
組成において30℃、10分間振盪反応を行なった後、
反応液1mlをソモギー通定法の銅試薬中に加えて反応
を停止させ、ソモギー滴定法にて残存グルコース星を求
め、1分間に反応液Sme中で14.48■のグルコー
スを酸化する(酸素吸収〒としてl、Qmffに相当)
l!iy素量を1000単位と定める。Incidentally, the unit of glucose oxidase is defined as follows. 2% glucose solution 1 m
l, Mcllvai Jl street liquid (J) H6, heavy liquid 3
After carrying out a shaking reaction at 30° C. for 10 minutes with a reaction composition of 1 ml of glucose oxidase enzyme solution and 1 ml of glucose oxidase enzyme solution,
The reaction was stopped by adding 1 ml of the reaction solution to the copper reagent of the standard Somogyi method, and the remaining glucose star was determined by the Somogyi titration method, and 14.48 μg of glucose was oxidized in the reaction solution Sme per minute (oxygen absorption). 〒 as l, equivalent to Qmff)
l! iy elementary quantity is set as 1000 units.
グルコース・オキシダーゼをフラクトース転移反応開始
時より添加する同時法においては、前記のフラクトース
転移反応の条件下で、好ましくは通気攪拌下で反応を行
ない、反応終了後、加熱によ/:J酵素を失活させ、沈
澱物を除去し、更に活性炭による脱色、イオン交換樹脂
を用いた脱塩を行った後、濃縮して目的とするフラクト
オリゴ糖高含有物を得る。また、フラクトース転移反応
後にグルコースを除去する段階法の場合には、フラクト
ース転移反応終了後、加熱して酵素を失活させた転移反
応混合溶液にグルコース・オキシダーゼ及び炭酸カルシ
ウムを添加し、更に通気撹拌下に反応を継続する。反応
終了後、加熱して酵素を失活させ、沈澱物を除去した濾
液を活性炭で脱色し、更にイオン交換樹脂を用いて脱塩
した後、濃縮して目的物であるフラクトオリゴ塘を高含
有物を得る。In the simultaneous method in which glucose oxidase is added from the start of the fructose transfer reaction, the reaction is carried out under the above-mentioned conditions for the fructose transfer reaction, preferably under aeration and stirring, and after the reaction is completed, the /:J enzyme is lost by heating. The mixture is activated, the precipitate is removed, and further decolorized with activated carbon and desalted using an ion exchange resin, and then concentrated to obtain the desired product with a high fructooligosaccharide content. In addition, in the case of a step method in which glucose is removed after the fructose transfer reaction, after the fructose transfer reaction is completed, glucose oxidase and calcium carbonate are added to the transfer reaction mixed solution that has been heated to inactivate the enzyme, and further aerated and stirred. Continue the reaction below. After the reaction is completed, the enzyme is inactivated by heating, the precipitate is removed, the filtrate is decolorized with activated carbon, and further desalted using an ion exchange resin, and then concentrated to obtain a product with a high content of the target product, fructooligo. get.
このようにして得られたフラクトオリゴ糖高含有物のシ
ー!糖からの変換率及び糖組成は高速液体クロマトグラ
フィー、たとえばシマズP N Hzカラム(島原製作
所製)を用い、アセトニトリル:水(70:30(ν/
V))の溶媒系による高速液体クロマトグラフィーによ
り分析定量することができる。See the product with high fructooligosaccharide content obtained in this way! The conversion rate from sugar and the sugar composition were determined using high-performance liquid chromatography, for example, a Shimazu P N Hz column (manufactured by Shimabara Seisakusho), using acetonitrile:water (70:30 (ν/
It can be analytically quantified by high performance liquid chromatography using the solvent system V)).
なお、フラクトオリゴ糖のG F zとしては0−β−
D〜フラクトフラノシル−(2→1) −〇−β−フラ
クトフラノシル−(2→1)−α−D−グルコピラノシ
ド、O−β−D−フラクトフラノシル−(2→6)−〇
−β−グルコピラノシル−(1→2)−β−D−フラク
トフラノシド、o−β−D−フラクトフラノシル−(2
−6)−0−β−フラクトフラノシル−(2→l)−α
−D−グルコピラノシド等があり、GFtとしては〇−
β−D−フラクトフラノシルー(2→(1−0−β−D
−フラクトフラノシル)z=1)−α−D−グルコピラ
ノシ、ド、0−β−D−フラクトフラノシル−(2−6
)−0(β−D−フラクトフラノシル−(2−2)3−
0−α−D−グルコピラノシル−(1−2)−β−D−
フラクトフラノシド等があり、GF、としては0−β−
D−フラクトフラノシル−(2→〔1−〇−β−D−フ
ラクトフラノシルー233−1)−α−D−グルコピラ
ノシド等がある。In addition, G F z of fructooligosaccharide is 0-β-
D~Fructofuranosyl-(2→1) -〇-β-Fructofuranosyl-(2→1)-α-D-glucopyranoside, O-β-D-Fructofuranosyl-(2→6)-〇- β-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-fructofuranoside, o-β-D-fructofuranosyl-(2
-6) -0-β-fructofuranosyl-(2→l)-α
-D-glucopyranoside, etc., and GFt is 〇-
β-D-Fructofuranosyl (2→(1-0-β-D
-fructofuranosyl)z=1)-α-D-glucopyranosyl, 0-β-D-fructofuranosyl-(2-6
)-0(β-D-fructofuranosyl-(2-2)3-
0-α-D-glucopyranosyl-(1-2)-β-D-
There are fructofuranosides, etc., and GF is 0-β-
Examples include D-fructofuranosyl-(2→[1-〇-β-D-fructofuranosyl-233-1)-α-D-glucopyranoside.
(ニ)発明の効果
ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用させる
フラクトース転移反応によりフラクトオリゴ糖を得る場
合に、本発明によるグルコースを減少させる畏作の実施
の有無によるフラクトオ、リゴ糖の生成率および糖組成
の比較を表に示す。(d) Effects of the invention When fructo-oligosaccharides are obtained by a fructo-transfer reaction in which an enzyme with a fructose-transfer action is applied to sucrose, the production rate of fructo-oligosaccharides is determined by the presence or absence of the cultivation method for reducing glucose according to the present invention. and a comparison of sugar composition is shown in the table.
表の結果かられかるように、グルコースをWt少させる
操作を実施した時に生成するフラクトオリゴl17i(
cF、〜G F 4 )の含有率は78〜98%に及び
、従来の方法におけるフラクトース転移反応のみによる
生成物中のフラクトオリゴ糖含有率の約60%を大rl
+に超えたフラクトオリゴ糖高含有率を、イオン交換ク
ロマト法等の分画操作を用いることなく、従って分画繰
作による収率の低下をきたすことなく、得ることができ
る。また、原料ショ糖の残存量よりフラクトース転移反
応の速度を比較すると、たとえば20%ショ糖を基質l
した実験1ではショ糖残存率が15%に達するにはグル
コース減少剤を共存させていない対照の実験では20時
間を要するが、グルコース減少剤としてサツカロミセス
・セレビシェ属菌体を用いた時には12時間で到達して
いるように、反応速度も大巾に加速されている。この事
実は実験2の40%ショ糖を基質とした時にも認められ
ている。As can be seen from the results in the table, fructo-oligo l17i (
The content of cF, ~G F 4 ) ranges from 78 to 98%, and approximately 60% of the fructooligosaccharide content in the product produced only by the fructose transfer reaction in the conventional method
A high content of fructooligosaccharides exceeding + can be obtained without using fractionation operations such as ion-exchange chromatography, and therefore without reducing the yield due to repeated fractionation operations. In addition, when comparing the rate of fructose transfer reaction based on the remaining amount of raw material sucrose, for example, 20% sucrose is
In Experiment 1, it took 20 hours for the sucrose residual rate to reach 15% in the control experiment without a glucose-reducing agent, but it took 12 hours when Saccharomyces cerevisiae cells were used as the glucose-reducing agent. As we have reached this point, the reaction speed has also been greatly accelerated. This fact was also observed in Experiment 2 when 40% sucrose was used as the substrate.
このように、本発明によれば反応時間が短縮されること
も工業的に実施する際には大きな利点となる。As described above, according to the present invention, the shortening of the reaction time is also a great advantage when it is carried out industrially.
(ホ)実施例 次に、本発明の実施例を示す。(e) Examples Next, examples of the present invention will be shown.
実施例1
アスペルギルス・ニガー(幻月り山則駐虹朋亘FERM
−P 5886を三角フラスコ中で粉末ブイヨン2.0
%、 シq IIJ!5.0%、CMC0,5%を含む
培地350mlに植菌し、28℃で20時間培養したも
のを種培養液とした。301ジャーファーメンタ−にシ
ョ糖5.0%、酵母エキス3.6%。Example 1 Aspergillus niger
- P 5886 in powdered broth 2.0 in an Erlenmeyer flask.
%, Siq IIJ! The seeds were inoculated into 350 ml of a medium containing 5.0% CMC and 0.5% CMC, and cultured at 28° C. for 20 hours, which was used as a seed culture solution. 301 jar fermenter with 5.0% sucrose and 3.6% yeast extract.
CMC0,5%を含む培地151を入れpH6,5に調
節後、120℃で30分殺菌した。次いで、この培地に
上記種培養液350mj2を無菌的に植菌し、28℃で
72時間培養した6培養終了後、培養液を遠心分離して
フラクトース転移活性を有する粗酵素菌体2.8kgを
得た。この粗酵素のフラクトース転移活性は1580単
位/g菌体を有していた。Medium 151 containing 0.5% CMC was added and the pH was adjusted to 6.5, followed by sterilization at 120° C. for 30 minutes. Next, 350 mj2 of the above seed culture solution was aseptically inoculated into this medium and cultured at 28°C for 72 hours. After 6 incubations, the culture solution was centrifuged to obtain 2.8 kg of crude enzyme cells having fructose transfer activity. Obtained. The fructose transfer activity of this crude enzyme was 1580 units/g bacterial cells.
シヨ$1! 100 gを含む20%シg糖水溶液をp
H5,5とし、上記のフラクトース転移活性を有する粗
酵素菌体1.58g(シー3IJg 1 g当り25単
位)及び市販のパン酵母を0.25 N硫酸で30°C
l2O分間処理した酵母(フラクトオリゴ糖分解活性1
単位/g・乾燥酵母以下、以後酸処理酵母と称する)5
0g (ショ糖1g当り0.5g)を添加し、40″C
で22時間反応させた。次いで、100℃で10分加熱
して酵素反応を停止させたのち濾過することにより菌体
を除去した。Shyo $1! 20% sig sugar aqueous solution containing 100 g p
H5.5, 1.58 g of crude enzyme cells having the above-mentioned fructose transfer activity (25 units per 1 g of C3IJg) and commercially available baker's yeast were heated at 30°C in 0.25 N sulfuric acid.
Yeast treated for 120 minutes (Fructooligosaccharide degrading activity 1
unit/g dry yeast (hereinafter referred to as acid-treated yeast) 5
Add 0g (0.5g per 1g of sucrose) and heat at 40″C.
The mixture was allowed to react for 22 hours. Next, the enzyme reaction was stopped by heating at 100° C. for 10 minutes, and the bacterial cells were removed by filtration.
得られた濾液を常法により活性炭で脱色し、さらにイオ
ン交換樹脂で脱塩することによりフラクトオリゴ糖高含
有物を固形物換算で59g得た。The obtained filtrate was decolorized with activated carbon in a conventional manner and further desalted with an ion exchange resin to obtain 59 g of a substance with high fructooligosaccharide content in terms of solid matter.
このものの糖組成はGF、〜GF、95%、シヨ糖5%
であった。The sugar composition of this product is GF, ~GF, 95%, sucrose 5%
Met.
一方、上記の条件で反応を12時間で停止させ、以下同
様に処理した時にはフラクトオリゴ糖高含有物を固形物
換算で70g得た。この時の糖組成はCF2〜GF、8
0%、シー!糖20%であった。On the other hand, when the reaction was stopped in 12 hours under the above conditions and treated in the same manner, 70 g of a product with high fructooligosaccharide content was obtained in terms of solid matter. The sugar composition at this time is CF2 to GF, 8
0%, see! The sugar content was 20%.
また、酸処理酵母を併用することなく上記の条件で24
時間反応させ、以下同様に処理した時にはフラクトオリ
ゴ糖を含む糖混合物を固形物換算で98g得た。この時
の糖組成はG F z〜GF455%、シーItJ!1
5%、グルコース28%であった。In addition, under the above conditions without using acid-treated yeast,
When the mixture was reacted for a period of time and treated in the same manner, 98 g of a sugar mixture containing fructooligosaccharide was obtained in terms of solid matter. The sugar composition at this time is GFz~GF455%, See ItJ! 1
5% and glucose 28%.
実施例2
実施例1において酸処理酵母を併用することなくフラク
トース転移反応を24時間行なった後、反応液を100
℃、10分加熱してフラクトース転移反応を停止させた
。得られた反応液に実施例1と同じ酸処理酵母50g(
初発シヨ糖1g当り0.5g)を加え、40℃で10時
間攪拌した。次いで、100℃で10分加熱し、冷却後
濾過することにより菌体を除去した。得られた濾液を常
法により活性炭で脱色し、さらにイオン交換樹脂で脱塩
すると、フラクトオリゴ糖高含有物を固形物換算で67
g得た。このものの糖組成はCF、〜GF、79%、シ
ヨ糖21%であった。Example 2 After performing the fructose transfer reaction for 24 hours without using acid-treated yeast in Example 1, the reaction solution was reduced to 100%
℃ for 10 minutes to stop the fructose transfer reaction. 50 g of the same acid-treated yeast as in Example 1 (
0.5 g per 1 g of initial sucrose) was added, and the mixture was stirred at 40°C for 10 hours. Next, the cells were heated at 100° C. for 10 minutes, cooled, and filtered to remove bacterial cells. The obtained filtrate was decolorized with activated carbon in a conventional manner and further desalted with an ion exchange resin, resulting in a high fructooligosaccharide content of 67% in terms of solid matter.
I got g. The sugar composition of this product was 79% CF, ~GF, and 21% sucrose.
実施例3
シーJ糖100gを含む40%ショ糖液をpH5,5と
し、実施例1で得たフラクトース転移活性を有する粗酵
素菌体1.58g(シヨtJ!Ig当り25単位)およ
び酸処理酵母50g(ショtF1g当り0.5g>添加
し、40°Cで16時間反応させた。Example 3 A 40% sucrose solution containing 100 g of C.J. sugar was adjusted to pH 5.5, and 1.58 g of the crude enzyme cells having fructose transfer activity obtained in Example 1 (25 units per S.J.Ig) were treated with acid. 50 g of yeast (0.5 g per 1 g of shot F) was added and reacted at 40°C for 16 hours.
以下、実施例1と同、様に処理することによりフラクト
オリゴ糖高含有物を固形物換算で64g得た。Thereafter, the same treatment as in Example 1 was carried out to obtain 64 g of a material containing high fructooligosaccharide in terms of solid matter.
このものの糖組成はCF、〜GF497%、シヨ糖3%
であった。The sugar composition of this product is CF, ~GF497%, sucrose 3%
Met.
一方、上記の条件で反応を8時間で停止させ、以下同様
に処理した時にはフラクトオリゴ糖高含有物を固形分換
算で76g得た。このものの糖組成はGF2〜OF、8
6%、ショ糖14%であった。On the other hand, when the reaction was stopped in 8 hours under the above conditions and treated in the same manner, 76 g of a product containing a high fructooligosaccharide content was obtained in terms of solid content. The sugar composition of this product is GF2-OF, 8
6%, sucrose 14%.
また、酸処理酵母を併用することなく上記の条件で16
時間反応させ、以下同様に処理した時にはフラクトオリ
ゴ糖を含む糖混合物を固形分換算で97g得た。この時
の糖組成はG F z〜GF。In addition, under the above conditions without using acid-treated yeast,
When the mixture was reacted for a time and treated in the same manner, 97 g of a sugar mixture containing fructooligosaccharide was obtained in terms of solid content. The sugar composition at this time is GFz~GF.
58%、シヨ糖11%、グルコース27%であった。58%, sucrose 11%, and glucose 27%.
実施例4
ショtl! 10 gを含む10%ショ糖水溶液をpH
5,5とし、実施例1で得られたフラクトース転移活性
を有する粗酵素菌体0.16g、グルコース。Example 4 Shotl! 10% sucrose aqueous solution containing 10 g
5.5, 0.16 g of the crude enzyme cells having fructose transfer activity obtained in Example 1, and glucose.
オキシダーゼ5000単位(シヨtAW1g当り500
単位)及び炭酸カルシウムを対液2.5%添加し、40
℃で通気攪拌しながら200時間反応せた。5000 units of oxidase (500 units per 1g of AW)
Unit) and calcium carbonate were added at 2.5% to the liquid, and 40
The reaction was carried out at ℃ for 200 hours while stirring with ventilation.
反応終了後、100℃で10分加熱して反応を停止し、
沈澱物及び菌体を遠心分離で除去した′d@液を活性炭
で脱色し、さらにイオン交換樹脂で脱塩することにより
フラクトオリゴ糖高含有物を固形分換算で5.6g得た
。このものの糖組成はG F z〜GF、86%、ショ
糖9%、グルコース5%であった。After the reaction is completed, the reaction is stopped by heating at 100°C for 10 minutes.
The 'd@ solution from which the precipitate and bacterial cells were removed by centrifugation was decolorized with activated carbon and further desalted with an ion exchange resin to obtain 5.6 g of a substance with high fructooligosaccharide content in terms of solid content. The sugar composition of this product was 86% GFz~GF, 9% sucrose, and 5% glucose.
Claims (1)
せるフラクトース転移反応によりフラクトオリゴ糖を主
成分とする糖混合物を得るにあたり、副生するグルコー
スを減少させる操作を実施することを特徴とするフラク
トオリゴ糖高含有物の製造法。 2、ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用さ
せるフラクトース転移反応と、副生するグルコースを減
少させる操作とを同時に実施する特許請求の範囲第1項
記載の方法。 3、ショ糖にフラクトース転移作用をもつ酵素を作用さ
せるフラクトース転移反応によりフラクトオリゴ糖を含
む糖混合物を得た後、副生したグルコースを減少させる
操作を実施する特許請求の範囲第1項記載の方法。 4、副生するグルコースを減少させる操作が、微生物に
よりグルコースを資化させる操作である特許請求の範囲
第1〜3項のいずれかに記載の方法。 5、副生するグルコースを減少させる操作が、微生物の
ショ糖及びフラクトオリゴ糖を分解する作用を阻害する
試剤の共存下に微生物によりグルコースを資化する操作
である特許請求の範囲第1〜3項のいずれかに記載の方
法。 6、グルコースを減少させる操作が、微生物によりグル
コースとショ糖を資化させる操作である特許請求の範囲
第3項記載の方法。 7、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、シ
ョ糖及びフラクトオリゴ糖を分解する作用をもたない微
生物である特許請求の範囲第4項記載の方法。 8、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、フ
ラクトオリゴ糖およびショ糖を分解する作用の弱い微生
物である特許請求の範囲第4項記載の方法。 9、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、酵
母である特許請求の範囲第4項記載の方法。 10、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、
インベルターゼ作用を示さない酵母である特許請求の範
囲第7項記載の方法。 11、グルコースを資化させる操作に用いる微生物が、
細菌である特許請求の範囲第4項記載の方法。 12、微生物のショ糖及びフラクトオリゴ糖を分解する
作用を阻害する試剤がインベルターゼ阻害剤である特許
請求の範囲第5項記載の方法。 13、副生するグルコースを減少させる操作が、酵素に
よりグルコースを変換する操作である特許請求の範囲第
1〜3項のいずれかに記載の方法。 14、副生するグルコースを減少させる操作が、グルコ
ース・オキシダーゼによりグルコースを酸化する操作で
ある特許請求の範囲第13項記載の方法。[Scope of Claims] 1. In obtaining a sugar mixture containing fructooligosaccharide as a main component by a fructose transfer reaction in which an enzyme having a fructose transfer action is applied to sucrose, an operation is performed to reduce glucose by-produced. Characteristic method for producing products with high fructooligosaccharide content. 2. The method according to claim 1, wherein the fructose transfer reaction in which an enzyme having a fructose transfer effect is applied to sucrose and the operation of reducing by-product glucose are carried out simultaneously. 3. The method according to claim 1, which comprises obtaining a sugar mixture containing fructooligosaccharide by a fructose transfer reaction in which an enzyme having a fructose transfer effect is applied to sucrose, and then performing an operation to reduce by-produced glucose. . 4. The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the operation for reducing by-product glucose is an operation for assimilating glucose by microorganisms. 5. Claims 1 to 3, wherein the operation for reducing by-product glucose is an operation for assimilating glucose by microorganisms in the presence of a reagent that inhibits the action of microorganisms to decompose sucrose and fructooligosaccharides. The method described in any of the above. 6. The method according to claim 3, wherein the operation for reducing glucose is an operation for assimilating glucose and sucrose by microorganisms. 7. The method according to claim 4, wherein the microorganism used in the operation to assimilate glucose is a microorganism that does not have the ability to degrade sucrose and fructooligosaccharides. 8. The method according to claim 4, wherein the microorganism used in the operation to assimilate glucose is a microorganism that has a weak effect of degrading fructooligosaccharides and sucrose. 9. The method according to claim 4, wherein the microorganism used in the operation to assimilate glucose is yeast. 10. The microorganism used in the operation to assimilate glucose is
The method according to claim 7, wherein the yeast does not exhibit invertase action. 11. The microorganisms used in the operation to assimilate glucose are
5. The method according to claim 4, which is a bacterium. 12. The method according to claim 5, wherein the agent that inhibits the action of microorganisms to degrade sucrose and fructooligosaccharides is an invertase inhibitor. 13. The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the operation for reducing by-product glucose is an operation for converting glucose with an enzyme. 14. The method according to claim 13, wherein the operation for reducing by-product glucose is an operation for oxidizing glucose with glucose oxidase.
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JP14997985A JPS6214792A (en) | 1985-07-10 | 1985-07-10 | Production of composition containing large amount of fructooligosaccharide |
GB8616262A GB2179946B (en) | 1985-07-10 | 1986-07-03 | Process for producing sugar mixture having high fructo-oligosaccharide content |
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JP14997985A JPS6214792A (en) | 1985-07-10 | 1985-07-10 | Production of composition containing large amount of fructooligosaccharide |
Publications (1)
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JPS6214792A true JPS6214792A (en) | 1987-01-23 |
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Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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JP14997985A Pending JPS6214792A (en) | 1985-07-10 | 1985-07-10 | Production of composition containing large amount of fructooligosaccharide |
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