JPS5836960B2 - １−β−Ｄ−リボフラノシル−１．２．４−トリアゾ−ル−３−カルボキシアミドの製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 過去１０年間に、多くのヌクレオシド類縁体が良好な抗
腫瘍及び抗ウイルス活性を示すことが判明した。

現在公知の合戒ヌクレオシド抗ウイルス剤のうち、最も
重要なものは、一般に、５−ヨード−２−デオキシウリ
デン（ＩＤＵ）、９−β一Ｄ−アラビノフラノシルアテ
ニン（ ａｒａ −Ａ ） 及び１−β一Ｄ−アラビノ
フラノシルシトシン（ａｒａ−Ｃ）であると考えられて
いる。

しかしながらこれら化合物は、ヒトの呼吸器疾患（イン
フルエンザ、風邪）を起こさせる菌を包含しないウイル
スの限られたスペクトルに対してのみ有効である。

呼吸器疾患ウイルスに対して有効であることの認められ
ているヌクレオシド類縁体は、１一β−Ｄ−リボフラノ
シル−１・２・４−トリアゾールー３−カルボキシアミ
ドであり、これは米国特許出願第２４０２５２号（１９
７１年６月１日米国特許出願第１４９０１７号明細書に
記載の１・２・４−トリアゾールヌクレオシドなる名称
で出願されている発明の一部継続出願である）により１
・２・４−トリアゾールヌクレオシドなる名称で１９７
２年３月３１日に出願されている明細書に記載されてい
る。

後者化合物の特定の誘導体は、これらウィルスに対する
顕著な作用を有することも判明しており、更に、このよ
うな化合物の特定のトリアゾール塩基、■・２・４−ト
リアゾールー３−カルボキシアミド及び１ ・２・４−
トリアゾー／Ｌ／−３−チオカルポキシアミドは、同様
にこれら呼吸器系ウイルスに対して優れた抗ウイルス作
用を有する。

各各の化合物の化学構造及び合成は、既に報告されてい
る（ Ｌａｔｖｉｊａｓ ＰＳＲ Ｚｉｎａｔｎｕ
Ａｋａｄ．Ｖｅｓｔｉｓ．Ｋｉｍ． Ｓｅｒ．１ ９
６ ５（２） ２ ０ ４ 〜２ ０ ８ Ｃｈｅ
ｍ．Ａｂｓｔ．６ ３ １ ３ ２ ４ ３ （１９
６５）参照〕。

ところで、１・２・４−トリアゾールー３−カルポキシ
アミドは、酵素的な変換により１−β一Ｄ−リボフラノ
シル−１・２・４−１・リアソール−３−カルボキシア
ミドに変じることができることを発見し、前記ヌクレオ
シドは、重要な有効抗ウイルス化合物である。

後に記載のように、トリアゾール塩基は、酵素ヌクレオ
シドホスホリラーゼと反応して所定の変換作用をする。

従って、本発明は、次の構造式を有する抗ウイルス剤と
して使用される化合物の製法に関する：〔式中ＸはＯ（
この場合、化合物は１・２・４−トリアゾールー３−カ
ルポキシアミドである）又はＳ（この化合物は１・２・
４−トリアゾールー３−チオカルポキシアミドである）
を表わし、ＹはＨ、アルカリ金属又はアミンを表わす〕
。

１一β一Ｄ−リボフラノシル−１・２・４−トリアゾー
ルー３−カルボキシアミドの合成の際に、トリアゾール
塩基を後に記載の適当な条件で酵素ヌクレオシドホスホ
リラーゼと反応させることができる。

カルボキシアミド化合物は、次の例に記載の方法で製造
でき、これらの例中、温度及び融点は「℃」で表わされ
る。

例■ ３−シアノー１・２・４−トリアゾール トリエチルオルトホルメート（１５０ｒｒＬｌ）及び１
−シアノホルムイミジツク酸ヒドラジド〔Ｋ．マツダ（
Ｍａｔｓｕｄａ ）及びＬ． Ｔ．モリン（Ｍｏｒｉ
ｎ ）のＪ．Ｏｒｇ，Ｃｈｅｍ．２６ ３７８３（１
９６１））（２５．２′？、０．３０モル）の混合物を
Ｏ℃に冷却し、乾燥塩化水素ガスで飽和されたジオキサ
ンの溶液（４．０ｙｄ）を攪拌下に加えた。

混合物を水浴中で５時間冷却し、２５℃で１５時間攪拌
し続げた。

混合物を蒸発乾涸させ、残分にエーテル（５００ｒＩＬ
ｌ）を加えた。

溶液を濾過し、水で洗浄し、かつ有機相を硫酸マグネシ
ウム上で乾燥させた。

溶液を濾過し、エーテルを除去した。酢酸エチルーベン
ゼンからの生放物の結晶化により、融点１８５〜１８７
℃の３−シアノー１・２・４一トリアゾール１６．Ｃｌ
（５６．８％）が得られた。

化合物のすべての特性は、シペンス（ Ｃｉｐｅｎｓ
）及びグリンステインス（ Ｇｒｉｎｓｔｅｉｎｓ ）
による方法Ｃ Ｌａｔｖｉｊａｓ ＰＳＲ Ｚｉｎａｔ
ｎｕ．Ａｋａｄ，Ｖｅｓｔｉｓ．Ｋｉｍ．Ｓｅｒ．１９
６５（２） ２０４ 〜２０８Ｃｈｅｍ．ＡｂＳｔ．
更３ １３２４３（１９６５）参照〕で製造した試料
のそれと同じであった。

Ｃ３Ｈ２Ｎ４に対する分析： 計算値 Ｃ３８．３０ Ｈ２．１４ Ｎ５９．５６
実測値 Ｃ３８．２９ Ｈｌ、９８ Ｎ５９．１６
例■ １・２・４−トリアゾールー３−カルボキシアミド １・２・４−トリアゾールー３−カルボン酸メチルを過
剰のアンモニアと共に反応が完結するまで加熱した。

混合物を冷却し、生成物を集めた。水からの再結晶によ
り、融点３１３〜３１５℃（分解）の１・２・４−トリ
アゾールー３−カルボキシアミドがほぼ定量的に得られ
た。

Ｃ３Ｈ４Ｎ４０に対する分析値： 計算値 Ｃ３２．１４ Ｈ３．６０ Ｎ４９．９９
実測値 Ｃ３２．３７ Ｈ３．７３ Ｎ５０．０９
例■ １・２・４−トリアゾールー３−チオカルポキシアミド 例■の３−シアノー１・２・４−トリアゾール（４．７
Ｐ、０．０５０モル）、エタノール（５０１ｒＬｌ）及
びトリエチルアミン（８，Ｑｍｌ）の混合物を室温で４
時間攪拌し、その間、硫化水素ガスをこの混合物に吹き
込んだ。

溶剤を除去し、残分に水を加えると、生成物２．７？が
得られた。

水からの再結晶により、融点３５０℃の１・２・４−ト
リアゾールー３−チオカルボキシアミドが得られた。

Ｃ３Ｈ４Ｎ４Ｓに対する分析値： 計算値 Ｃ２８．１２ Ｈ３．１５ Ｎ４３．７２
Ｓ ２ ５． ０ ２ 実測値 Ｃ２８．１２ Ｈ３．１８ Ｎ４３．６Ｏ
Ｓ２５．０９ 例■ １・２・４−トリアゾールー３−カルボキシアミドナト
リウム塩 ■・２・４−トリアゾールー３−カルポキシアミド（１
１２Ｐ、１ ０． ０ ｍモル）、水酸化ナトリウム（
０．４（１、１０．０ｍモル）及び水（１０．０ｍｌ）
よりなる溶液を凍結させ、試料を凍結乾朦させた。

生成物は、融点〉３２０℃を有する１・２・４−トリア
ゾールー３−カルボキシアミドナトリウム塩の手水和物
として得られた。

Ｃ３Ｈ３Ｎ４ ０Ｎａ Ｈ ｉ ／ ２ Ｈ２ ０に対
する分析値：計算値 Ｃ２５．１８ Ｈ２．８２
Ｎ３９．１６Ｎａ １ ６．０ ７ 実測値 Ｃ２５．２４ Ｈ２．７８ Ｎ３８．９２
Ｎａ １ ６．０ ０ 他の生埋学的に認容性のアルカリ金属及びアミン塩例え
ば塩素塩が同様に製造される。

１・２・４−トリアゾールー３−カルボキシアミドは、
約５〜９の範囲のｐＨ値で、約Ｏ〜５０℃の範囲の温度
、有利に約２５〜約３５℃の温度で、約０．０１５〜０
．７５１ｎ９／Ｔｎｌ特に約０．１５■／ｍｌ３の酵素
濃度の酵素ヌクレオシドホスホリラーゼとの反応により
１−β一Ｄ−リボフラノシル−１・２・４−トリアゾー
ルー３−カルボキシアミドに変じることができる。

トリアゾール塩基が５Ｘ１０−５Ｍより大きい濃度で存
在する際に、満足な結果が得られた。

一般に０．１〜２時間特に約０．５〜１時間がこの反応
に要求される。

酵素源は、動物、組織又はバクテリアであってよい。

主要バクテリア源は、Ｅ．コリ（ Ｃｏｌｉ ）及びイ
ーストであり、種々の動物源も存在し、牛牌臓、ラット
肝臓、子牛肝臓、子牛胸腺、牛肝臓、猿脳、馬肝臓、子
牛牌臓、ヒトの赤血球、魚皮及び魚筋肉をも包含する。

次の実施例からこの合成はより良好に理解されるであろ
う。

例■ ■−β一Ｄ−リボフラノシル−１・２・４−トリアゾー
ルー３−カルポキシアミド １ ・２・４−トリアゾールー３−カルポキシアミドか
らの精製子牛牌臓ヌクレオシドホスホリラーゼを経て１
−β一Ｄ−リボフラノシル−１・２・４−トリアゾール
ー３−カルボキシアミドの合成この恒温保持試料は、最
終量０．１３５ｍｌ中に、トリスＨＣＩ（ｐＨ ７．４
）５０μモル、リボースー１−ホスフエート０，２５
μモル、１・２・４−チアゾール−３−カルボキシアミ
ド（Ｈ”）４２μＣ／μモル、０．０５μモル及び子牛
牌臓ヌクレオシドホスホリラーゼ（シグマ・ケミカル・
Ｃｏ・Ｓｔ・ルイス・Ｍｏ ） ８ ０μ１を含有した
。

試料を２５℃で５分間恒温保持し、次いでドライアイス
ーイソプロパノール中で凍結させて反応を停止させる。

次いで氷解させた試料の少量を、１・２・４−トリアゾ
ールー３−カルポキシアミド及び１−β一Ｄ−リボフラ
ノシル−１・２・４トリアゾールー３−カルボキシアミ
ドの標準溶液と共にシリカゲル上に点滴し、イソプロパ
ノール：ＮＨ４０Ｈ ：Ｈ２０ （ ７ ： １ ：
２ ）中で分離させる。

■・２・４−トリアゾールー３−カルボキシアミドと一
致するクロマトグラムの領域を除き、１・２・４−トリ
アゾールー３−カルポキシアミドの１−β−Ｄ−リボフ
ラノシル−１・２・４一チアゾール−３−カルボキシア
ミドへの変換率を測定するように計測した。

１・２・４−トリアゾールー３−カルポキシアミドを用
いるヌクレオシドホスホリラーゼ評価の結果 前記のことから、所定変換率は、酵素濃度の増加に伴な
い達或される変換率は太き《なることを示していること
は明らかである。

１・２・４−トリアゾールー３−カルポキシアミド又は
１・２・４−トリアゾールー３−チオカルボキシアミド
のいずれかを抗ウイルス剤として使用する際には、全重
量に対して、この薬剤を通例約０．００１〜５％特に約
０．０１〜２．５％の量を適当な稀釈剤中で用いられ、
即ち、伝染の激しさ、一般的健康及び寄生主の年令など
の要因の数に依り決まる実際の量で使用される。

いずれにせよ、実際の量は、この薬剤の化学療法的に有
効な量を寄生主に与えるに充分な量であるべきであり、
これは当業者にとって容易に決定することができる。

１形式では、この化合物は、米国特許第 ３０１４８４４号明細書に記載の型のエーロゾル鼻スプ
レーとして使用でき、この記載は、液体駆出剤例えば低
級アルカン（炭素原子数最高５）、低級塩化アルキル又
は弗素化されたか又はフルオルクロル化された低級アル
カン（フレオンなる商品名で入手される）中に懸濁され
た抗ウィルス化合物を所定量含有することが記載されて
いる。

般に、この駆出剤は室温及び大気圧でガスであり、約１
８℃（６５ｐ）（大気圧下）以下の沸点を有し、もちろ
ん無毒である。

特に好適なこのような駆出剤は、ジクロロジフルオロメ
タン（フレオン１２）、ジクロルテトラフルオルエタン
（フレオン１４）及びトリクロルモノフルオルメタン（
フレオン１１）である。

懸濁液中で使用する際に、抗ウイルス剤は、例えば直径
１００μ以下特に２５μ以下及び殊に約０．５〜４μに
細分されているべきである。

界面活性剤特に非イオン性の炭素原子数６〜２２を有す
る脂肪酸、例えばカプロン酸、カプリル酸、ラウリン酸
、パルミチン酸、ステアリン酸、リノレイン酸等のエス
テル又は部分エステルが粉末の集塊をさげるのを助ける
ために有利である。

通例、比較的少量の界面活性剤例えば約０．１〜５重量
％特に０．２５〜１．０重量％が使用されるが、所望に
よってはより多量も使用できる。

同様に、前記のカルボキシアミド抗ウイルス剤は、米国
特許第２８６８６９１号明細書に記載のような好適な溶
剤としての液体駆出剤中に溶かすことができる。

所望の場合には、抗ウイ・ルス剤のいずれかを寄生主に
注射することができ、この場合は、溶液１ｍｌ当り薬剤
約１０〜５００■を含有する生理学的食塩水又は懸濁液
の形であってよい。

抗ウイルス剤は、経口製剤としてカプセル又は錠剤の形
で適用できる。

錠剤及びカプセルは１錠又は１カプセル当り化合物約１
０〜５００■を含有する。

抗ウィルス化合物の所望投与量は前記のように患者の条
件により変じるが、通常１日当り約１０〜２０００■の
範囲である。

有効にＲＮＡ又はＤＮＡウイルスを阻止するために、血
清１ｍｌ当り化合物約３２μ２の濃度が必要である。

カプセルは、慣用のゼラチンカプセルであり、前記量の
抗ウイルス剤に加えて、少量、例えば５重量％より少な
い、特に１，Ｏ％より少ない量のステアリン酸マグネシ
ウム又は他の流動化剤例えばアビセル（ Ａｖｉｃｅｌ
（カルボキシメチルセルロース）〕を含有していてよ
い。

錠剤は、前記の抗ウィルス剤及び結合剤（これはゼラチ
ン溶液、水中のデンプンペースト、ポリビニルピロリド
ン、水中のポリビニルアルコール）を典型的な糖衣と共
に含有する。

この抗ウイルス剤は門τ膏、クリーム、乳液又は局所溶
液として、処 べきウイルス皮膚感染症の条件に応じ
て局所的に適用でき、ここで前記量の抗ウイルス剤を標
準的な賦形剤又はこのような局所適用で通例用いられる
他の成分と共に処方される。

従って軟膏は、油性基剤の理由から慢性条件に対して推
奨され、クリーム、乳液及び局所溶液は、急性で皮下疾
患に推奨される。

軟膏とは異なり、クリームは一般に水溶性であり、消失
特性を示す。

エマルジョンは、複数の薬剤での処置が指示される必要
のある時に使用され、その１方は媒体中に不溶で、他方
は溶かされ、複数の乳化された賦形剤相は均一な分散に
必要である。

局所溶液は、溶剤中の活性成分の溶液で、粘度がクリー
ムと容易に蒸発しうる溶剤例えばアルコールとの中間で
、伸びと作用の延長の平衡が達威される。

一般に適用される多くの局所軟膏、クリーム及び溶液処
方の例は、次の物質の組成である：軟膏 （ａ） 佐薬を含まない石油 （ｂ） プラスチベース（スキップ■ｎＣ．より入手
され炭化水素ゲル及びポリエチレンと鉱油から成ってい
る） クリーム （ａ） メチルパラベン（ Ｍｅｔｈｙｌ Ｐａｒ
ａｂｅｎ ） ＵＳＰプロビルパラベン（ Ｐｒｏｐｙ
ｌ Ｐａｒａｂｅｎ ）ＵＳＰ スペルマセテイ（ Ｓｐｅｒｍａｃｅｔｉ ） Ｕ Ｓ
Ｐラウリル硫酸ナトリウム ＵＳＰ ステアリルアルコール ＵＳＰ セチルアルコール ＵＳＰ グリセリン ＵＳＰ 山 ステアリン酸 プロピレングリコール ソルビタンモノステアレート及びオレエートポリオキシ
エチレンソルビタンモノステアレート クエン酸 メチルー及びプロビルパラベン （Ｃ）水性基剤 ソルビン酸カリウム メチルー及びプロビルパラベン グリセロールモノステアレート スクアラン ポリソルベート ８０（ＵＳＰ） スペルマセテイ ステアロイルアルコール ンルビタール溶液 （ｄ） ポリエチレングリコール ４００（ＵＳＰ）
プロピレングリコール カルボキシメチレン モノアシノレアミン 二酸化チタン ブチル化されたヒドロキシトルエン 局所溶液 （ａ） ポリビニルアルコールー水 （ｂ） ポリエチレングリコール ４００従って、局
所ベヒクルは通例、主剤に加えて軟釈剤、鹸化剤、乳化
剤、溶剤、浸透剤、ｐＨ調節剤、可塑化剤、軟化剤、保
存剤、硬化剤、顔料及び香料などすべて文献に公知のも
のである。

膣感染症に対する使用にとって、活性剤の最大分散を生
ぜしめる局所賦形剤が有利である。

例えば膣クリーム （ａ）クリセロールモノステアレート コーン油 グリセリン 安息香酸 グルタミン酸 水 （ｂ） グリセリン エチノレアルコール 液体石油 ポリエチレングリコールエーテル：脂肪アルコール錯体
パラベン保存剤 水 膣坐剤 （ａ） ラクトース ポリエチレングリコール ４００ ポリソルベート ８０ ポリエチレングリコール ４０００ グリセリン 乳酸 （ｂ） ポリエチレングリコール ポリオキシエチレンパルミテート 乳酸 膣適用のための局所用ベヒクルは、通常のバクテリアが
繁殖する酸性条件にｐＨ一調節して、体防禦機構を弱め
ないようにする。

もちろん、当業者はこのこと及び抗ウイルス剤の局所適
用に包含される他の考察を充分に注意している。

局所製剤は、ウイルスを有効に阻止する割合の活性物質
即ち、組成物全重量の約０．０１〜１０重量％、特に０
．０２５〜１重量％殊に０．０２５〜０．１重量％を含
有する。

約１０重量％までが不応性状態の治療に使用できる。

もちろん、このような製剤の他の成分の量は、通常使用
されているこのような成分の量に一致し、適当な処方の
決定は、当業者にとってはこの記載内で容易に可能であ
る。

抗ウイルス剤が適用される形式は、処理される特定のウ
イルス感染症に依り決まる。

例えば、感染がインフルエンザ又は他の呼吸器系ウイル
スにより起され、それが上部呼吸腔中であることが明ら
かであるなら、有利な処置法はエーロゾル鼻スプレーで
ある。

それというのは、これは感染の位置に対して最も有効に
達するからである。

経口又は注射による治療は、感染の重症度に依り決まる
。

感染が下部呼吸器系感染又は他の系のウイルス感染であ
ることが明らかである場合に有利な処理形式は、経口で
あるか又は注射による。

感染症が局所的なもの、例えば口唇匍行疹（唇ヘルペス
、急性天＠癒）、陰部庖疹（陰茎又は膣のウイルス感染
）、帯状庖疹（ Ｓｈｉｎｇｌｅｓ ）、水痘（ ｃｈ
ｉｃｋｅｎｐｏｘ ）、エクツエマ・ヘルペテイクム
（ ｅｘｚｅｍａ ｈｅｒｐｅｔｉｃｕｒｎ ）、皮
膚庖疹（ｈｅｒｐｅｓｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ ）等であ
る場合に、適当な適用は、前記のような局所適用により
、可能な場合は前記のような経口処置又は注射処置とも
組合される。

例示のために次の局所適用の処方を示す：軟膏 本発明のトリアゾールの各々の詳細な抗ウイルス活性は
示されている。

これらはシドウエル（ Ｓｉｄｗｅｌｌ ）等の方法に
よるウィルスー惹起細胞病理効果（ＣＰＥ）を用いる活
性試験で試験した〔アプライド・マイクロバイオロジイ
＊＊ （ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ ） ２ ２ ： ７ ９ ７ 〜８０１（
１９７１）参照〕。

要するに、ＣＰＥ法には、水中のビタミン、アミノ酸、
血清、緩衝液、ペニシリン、ストレプトマイシン及び指
示染料よりなる細胞培養媒体中への抗ウイルス剤の溶解
も包含される。

この細胞培養媒体中に懸濁されたウイルスをＫＢ細胞の
達成された単一層に加え、次いで１５分以内に同量の抗
ウィルス剤を加えた。

感染され処理された細胞は次の顕微鏡試験で評価した。

各実験に対する対照は、細胞対照（細胞と細胞培地のみ
）、ウイルス対照（細胞とウィルス及び細胞培地）及び
毒性対照（細胞及び細胞培地）を包含する。

前記のアプライド・マイクロバイオロジイに記載のシド
ウエル等のウィルス評価（ＶＲ）系をＣＰＥ阻止の程度
を評価するために用いた。

０．５より大きいＶＲは顕著な抗ウィルス活性を示して
おり、０．５より小さいＶＲは、僅かな抗ウィルス作用
を示している。

麻疹ウイルスを用いる実験で、前記の方法を、感染細胞
を抗ウィルス化合物を含有する寒天一血清一重炭酸塩で
被覆するとウィルス斑点は識別できた。

この斑点は４日目に中性赤色染料で染色され、抗ウイル
ス化合物への露呈の際に生じる斑点数の減少を測定した
。

この実験に対する方法は、ウエア（Ｗｅａｒ ）等によ
り記載されている（ Ｅｘｐｔｌ．ａｎｄ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ ｐａｔｈｏｌ ．９ ： ４ ０ ５−４
１７、（１９６８年）参照〕。

この抗ウィルス実験の結果を次の第１表に示す：参考例 各々の抗ウイルス剤をマウスにおけるインフルエンザＡ
２感染に対する効果に関して試験した。

若成マウスを動物の約６５％が８〜１３日以内に死亡す
るのに充分な量のインフルエンザＡ２ ウィルスのエー
ロゾルに露呈した。

群を当初に４時間前ウイルス露呈し、食塩中に懸濁させ
た種々の濃度の化合物で、１日２回６〜９日腹腔内処理
した。

対照には、ウイルス対照（ウイルスに露呈し食塩だけで
処置）、毒性対照（ウイルス稀釈物（ＭＥＭ）で疑偽感
染させ、試験化合物で処理した）及び正常対照（感染さ
せず、処理せず）が包含される。

実験の間に死亡する動物を毎日観察し、２５日目に生残
マウスの肺を取り出し、起っているウイルス性硬変の程
度を０〜４０尺度で評価する。

次いで、肺を適当な群にプールし、燐酸塩緩衝食塩（Ｐ
ＢＳ，ｐＨ ７．２、０．２Ｍ ＰＯ４、０．１５ＭＮ
ａＣ ｌ ） １． ５ ｍｌ中でホモジナイズした。

ホモジナイズされた肺調製物を１ ５ ０ ０ ｒ．ｐ
．ｒｎ．で１５分間遠心し、ＰＢＳ各稀釈物に、同量の
０．５％モルモット赤血球細胞中で２倍に稀釈した。

肺中のウイルスの尺度である赤色細胞凝集の程度を、室
温で４５分間恒温保持の後に記録した。

この赤色細胞凝集をＩＴＩｌｌ当りのへマグルチニン（
ＨＡ）価として表現した。

例■〜■から、化合物１及び２の双方は、抗ウィルス活
性のスペクｌ・ルを有し、特にインフルエンザウイルス
に対して有効である。

相対的な細胞毒性の研究結果は、細胞構造の僅かな変化
を示し、化合物１で３２〜１０００μク／ＴｒＬｌで細
胞構造の僅かな変化及び化合物２で１μ？ ／ｒｕｌま
で低下した濃度で同様な変化を起こさせることが明らか
である。

各化合物は使用した水性媒体中に比較的不溶であり、抗
ウイルス作用は細胞構造中で僅かに限られていてよく、
溶解度の相対的損失は、動物実験の抗ウイルス作用を過
度に限定しなかった。

動物毒性実験において、化合物１は、１０００■／ｋｙ
／日の濃度で１日２回９日間腹腔内適用する際にマウス
に対して無害であり、化合物２は、同様な処置法で２５
０ｍ９／ｋｇ／日の低濃度適用の際に重量低下及び死亡
により示された中程度の毒性であった。

従って、■・２・４−トリアゾールー３−カルポキシア
ミドの抗ウイルス活性は、寄生主による１−β−Ｄ−リ
ボフラノシル−１・２・４−トリアゾールー３−カルポ
キシアミドへのその酵素的変換によることも認められる
。

とにかく、このような酵素変換により１−β−Ｄ−リボ
フラノシル−１・２・４−トリアゾールー３−カルポキ
シアミドの合成法が得られる。

この酵素は精製蛋白質であってよいか又は、活発に代謝
するバクテリア又は真菌細胞中に存在しうる。

活性の代謝バクテリア又は真菌細胞中に存在する場合は
、これは、これら細胞又はこれら細胞の突然変異体を用
いる培養法が１・２・４−トリアゾールー３−カルポキ
シアミドからの１−β−Ｄ−リボフラノシル−１・２・
４−トリアゾールー３−カルボキシアミドの製造を行な
わせることが期待される。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ １−β一Ｄ−リボフラノシル−１・２・４一トリア
   ゾールー３−カルポキシアミドを製造するために、１・
   ２・４−トリアゾールー３−カルボキシアミドをリボー
   ス−１−ホスフエートの存在、約５〜９のｐＨ値、及び
   約０〜５０℃の温度で酵素ヌクレオシドホスホリラーゼ
   と反応させることを特徴とする１−β−Ｄ−リボフラノ
   シル−１・２・４−トリアソ−／１／−３−カルボキシ
   アミドの製法。