JPS58219115A - ウイルス感染症の進展を阻止する獣医用薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 過去１０年間に、多くのヌクレオシド類縁体が良好な抗
臓瘍及び抗ウィルス活性を示すことが判明した。現在公
知の合成ヌクレオシド抗ウィルス剤のうち、最も重要な
ものは、一般に、５−ヨード−２′−デオキシクリデン
（よりＵ　）、９−β−■−アラビノフラノシルアデニ
ン（ａｒａ−ム）及び１−β−Ｄ−アラビノ７ラノシル
シトシン（ａｒａ　−０）であると考えられている。

しかしながらこれら化合物は、ヒトの呼吸器疾患（イン
フルエンず、風邪）を起こさせる＃ｉを包ｔしないウィ
ルスの限られたスペクトルに対してのみ有効である。呼
吸器疾患ウィルスに対して有効であることの認められて
いるヌクレオシド類縁体は、１−β−Ｄ−リボフラノシ
ルー１．２．４−）リアゾール−６−カルボキシアミド
であり、これは米国特許出願第２４０２５２号（１９７
１年６月１日米国特許出願 第１４９０１７号明細書に記載の１．２．４−トリアゾ
ールヌクレオシドなる名称で出願されている発明の一部
継続出願である）により１゜２．４−トリ、アゾールヌ
クレオシドなる名称で１９７２年６月６１日に出願され
ている明細書に鱈己載されている。

後者化合物の特定の誘導体は、これらウィルスに対する
顕著な作用を有することも判明しており、更に、このよ
うな化合物の特定のトリアゾール塩基、１，２．４−）
リアクール−３−カルボキシアミド及び１．２．４−）
リアゾール−６−チオカルボキシアミドは、同様にこれ
ら呼吸器系ウィルスに対して優れた抗ウィルス作用を有
する。各々の化合物の化学構造及び合成は、ａＫ報告さ
れている（　Ｌａｔｖｉｊａｓ　ＰＡＲＺｉｎａｔｎｕ
　Ａｋａｄ、　Ｔｅ５ｔｉｓ、　Ｋｉｎ、　８ｅｒ、　
１９６５　（２）２０４〜２０８０ｈｅｍ、Ａ１）ａｔ
、　６３１３２４５　（１９６５）参照〕。

ところで、１，２．４−）リアクール−６−カルボ−ジ
アミドは、酵素的な変換にょ９１−β−Ｄ−リボフラノ
シルー１．２．４−）リアゾール−３−カルホキシアき
ドに変じることができることを発見し、前記ヌクレオシ
ドは、重要な有効抗ウィルス化合物である。後に記載の
ように、トリアゾール塩基は、酵素ヌクレオシｘ（１′
） ドホスホリラーゼと反応して所定の変換作用をする。

従って、本発明は、次の構造式を有する抗ウィルス剤と
しての化合物の使用に関する：１ 〔式中Ｘは０（この場合、化合物は１，２．４−トリア
ゾール−３−カルボキシアミドである）又れ８（この化
合物は１，２．４−）’ｊアゾール−６−チオカルポキ
シアミドである）を表わし、ＹはＨ１アルカリ金属又は
アミンｔ−表わす〕０１−β−Ｄ−リボフラノシルー１
．２．４−トリアゾール−３−カルボキシアミドの合成
の際には、トリアゾール塩基を後に記載の適過な条件で
＃票ヌクレオシドホスホリラーゼと反応させることかで
き仝・ このカルボキシアミド化合物は、次の例に記　　　　　
載の方法で製造でき、これらの例中、温度及び融点はｒ
　’ＯＪで表わされる。

例　Ｉ（参考例） ３−シアノ−１，２，４−トリアゾールトリエチルオル
トホルメート（１５０ｍ）及び１−シアノホルムイミジ
ツク酸ヒドラジド〔乙マツダ（ＭａｔｓｕｃＬａ　）及
びり、’ｌ’、−＆すｙ　（Ｍａｒｉｎ）のＪ、Ｏｒｇ
、Ｏ］１ｌｅＤ１．２６３７８３　（１９６１））　（
２５−２，９，０，３０モル）の混合物を０℃に冷却し
、乾燥塩化水素ガスで飽和されたジオキサンの溶液（４
，０ｍ）を攪拌下に加えた。混合物を水浴中で５＃間冷
却し、２５℃で１５時間攪拌し続けた。混合物を蒸発乾
個させ、残分にエーテル（５００ｍ）ｆ：加えた。溶液
を濾過し、水で洗浄し、かつ有機相を硫酸マグネシウム
上で乾燥させた。溶液を濾過し、エーテルを除去した。

酢酸エチル−ベンゼンからの生成物の結晶化により、融
点１８５〜１８７℃の３−シアノ−１゜２．４−トリア
シー”ル１６．０，９（５６，８ｔｓ）が得られた。化
合物のすべての特性は、シペンス（０１ｐ６ｎ８　）及
びグリンスティンス（Ｇｒｉｎｓｔｅｉｎｓ　）による
方法（Ｌａｔｖｉｊａｓ　Ｐ８ＲＺｉｎａｔｎｕ、　Ａ
ｋａａ。

Ｔｅ５ｔｉｓ、Ｋｉｎ、Ｓｅｒ、１９６５　（２）２０
４〜２０８　０ｈｅｍ。

Ａｂ８ｔ、６３１３２４３（１９６５）参照〕で製造し
た試料のそれと同じであった。

０、ＨｌａＮ、に対する分析： 計算値　０３８．３０　　Ｈ２，１４Ｎ　５９．５６実
側値　０３８．２９　１１１．９８　　Ｎ　５９．１６
例　Ｉ（参考例） １．２．４−トリアゾール−６−カルボキシアミド １．２．４−）リアゾール−３−カルボン酸メチルを過
剰のアンモニアと共に反応が完結するまで加熱した。混
合物を冷却し、生成物ｆ！：集めた。水からの再結晶に
よシ、融点６１３〜３１５°Ｃ（分解）の１．２．４１
リアゾール−３−カルボキシアミドがほぼ定量的に得ら
れた０ ０、Ｈ４Ｎ４０に対する分析０！ｉ＝ 計算値　０３２．１４　　Ｈ３，６０Ｎ　４９．９９実
測値　０３２．３７　　Ｈ３，７３Ｎ　５０．０９例　
■（参考例） １ｊ２．４−）リアゾール−６−ケンカルがキシアミド 例■の６−ジアツー１．２．４−トリ１”アゾール（４
，７ｇ、０．０５０モル）、エタノール（５０ｍ）及び
トリエチルアンン（８，０ｍ）の混合物を室温で４時間
攪拌し、その間、硫化水素ガスをこの混合物に吹き込ん
だ。溶剤を除去し、残分に水を加えると、生成物２．７
ｇが得られた。水からの再結晶により、融点３５０℃の
１．２．４−）リアゾール−６−ケンカルがキシアミド
が得られた。

０、Ｈ４Ｎ４Ｂに対する分析値： 計算値　０２８．１２　　Ｈ３，１５Ｎ　４３．７２　
８２５．０２実測値　０２８．１２　　Ｈ５，１８Ｎ　
４３．６０　８２５．０９例　■（影考例） １．２．４１リアゾール−３−カルボキシアミド（１，
１２ｇ、１０．０ｍモル）、水酸化ナトリウム（０，４
０ｇ、１０．０ｍモル）及び水（１０，０ｍ）よりなる
齢液を凍結させ、試料管凍結乾燥させた。生成物は、融
点〉３２０℃を有する１、２．４−トリアゾール−３−
カルボキシアミドナトリウム塩の手水和物として得られ
た。

０、Ｅ３Ｎ４ＯＮａす４Ｈ２０に対する分析値：計算値
　０２５．１８　　Ｈ２，８２Ｎ　３９．１（Ｓ　　Ｎ
ｍ　ＩＳ、Ｌ１７実測ｉｔ　Ｏ２５，２４Ｈ２，７８Ｍ
　３８．９２　１１ａ　１６．００他の生理学的に認容
性のアルカリ金属及びアミン塩例えば塩素塩が同様に製
造される。

１．２．４−）リアゾール−６−カルボキシアミドは、
約５〜９の範囲の−値で、約０〜５０℃の範囲の温度、
有利に約２５〜約６５００の温度で、約０．０１５〜０
．７５１ｖ／ｓｄ’Ｎｉに約０．１５η／ｌａｔの酵素
濃度の酵素ヌクレオシドホスホリラーゼ六の反応によｐ
ｌ−β−Ｄ−リポフシノシルー１，２．４−）リアゾー
ル−６−カルボキシアミドに変じることができる。トリ
アゾール塩基が５　Ｘ　１０−５　Ｍより大きいｍ度で
存在する際に、満足な結果が得られた。一般に０．１〜
２時間特に約０．５〜１時間がこの反応に擬木される。

酵素源は、動物、組織又はバクテリアでめってよい。主
要バクテリア源は、虱コＩＪ　（０Ｏ１ｉ　）及びイー
ストであり、掘々の動物源も存在し、牛牌臓、ラット肝
臓、子牛肝臓、子牛胸腺、牛肝臓、猿脳、馬肝臓、子牛
膵臓、ヒトの赤血球、魚皮及び魚筋肉をも包含する。

次の実施例からこの合成はよｐＪｉｌＬ好に理解される
でめろう。

例　Ｖ（−考例） １．２．４−）リアゾール−６−カルボキシアミドから
の精製子牛膵臓ヌクレオシドホスホリラーゼｔ−経て１
−β−Ｄ−リボ７ラノシルー１．２．４−トリアゾール
−３−カルボキシアミドの〜合成。

この恒温保持試料は、最終量０．１３５−中にトリスＨ
ａｔ　（ｐＨ７，４）　５０μ七ル、リボース−１−ホ
スフェート０．２５μモル、１，２．４−チアゾール−
３−カルボキシアミド（Ｈ”）４２μＯ／μモル、０．
０５μモル及び子牛膵臓ヌクレオシドホスホリラーゼ（
シグマ・ケンカル・００　＠　８ｔ　＠　Ａ／（スＩ　
ＭＯ）　８０　Ｉ４１’ｋｔ有シｆ、−０試料ｔ−２５
℃で５分間恒温保持し、次いでドライアイスーイソプ日
パノール中で凍結させて反応を停止させる。次いで氷解
させた試料の少量を、１，２．４−）リアゾール−３−
カルボキシアミド及び１−β−Ｄ−リボ７ラノシルー１
．２．４−１リアゾール−３−カルボキシアミドの標準
溶液と共にシリカデル上に点滴し、イソノロパ／−Ａ／
：　ｌｌＨ４０Ｈ：　ＨｊＩＯ（７：１：２）中で分離
させる。１，２．４−）リアゾール−３−カルボキシア
ミドと一致するりｐマドグラムの領域を除き、１．２．
４−）リアゾール−３−カルボキシアミドの１−β−Ｄ
−リポフンノシルー１　ｚ　２−４−チアゾール−３−
カルボキシアミドへの変換率を測定するように計測した
０ アミドを用いるヌクレオシドホスホリラーゼ評− 価の結果 試　　料　　　　　　　　　　　　　変換率Ｃ％）−酵
　素　　　　　　　　　　　　０．８−リボース−１−
ｐ＋＃Ｘ　　８０μ１１．１＋酵　素　２０μ＆　　　
　　　　　　５７．９＋＃　素　４０μ＆　　　　　　
　　　　　４８．４＋酵　素　６０μ＃　　　　　　　
　　　　５４．１前記のことから、所定変換率は、酵素
濃度の増加に伴ない達成される変換率は大きくなること
を示していることは明らかである。

１．２．４−）リアゾール−３−カルボキシアミド又は
１１２．４−）リアゾール−６−チオカルボキシアミド
のいずれかを抗ウィルス剤として使用する際には、全重
量に対して、この薬剤を通例約０．００１〜５％特に約
ｏ、ｏｉ〜２．５饅の菫を適当な稀釈剤中で用いられ、
即ち、伝染の激しさ、一般的健康及び寄生主の年令など
の要因の数に依り決まる実際の量で使用される。

いずれに・せよ、実際の量は、この薬剤の化学療法的に
有効な量を寄生主に与えるに充分な量であるべきであり
、これは当業者にとって容易に決定することができる。

１形式では、この化合物は、米国特許 第３０１４８４４号明細書に記載の型のエーロゾル鼻ス
プレーとして使用でき、この記載は、液体駆出剤例えば
低級アルカン（炭素原子数最高５）、低級塩化アルキル
又は弗素化されたか又紘フルオルクロル化された低級ア
ルカン（フレオンなる商品名で入手される）中に懸濁さ
れた抗ウィルス化合物を所定量含有することが記載され
ている。一般に、との駆出剤は室温及び大気圧でガスで
あり、約１８℃（６５０Ｐ）（大気圧下）以下の沸点を
有し、もちろん無毒である。特に好適なこのような駆出
剤は、ジクμロジフルオロメタン（フレオン１２）、ジ
クロルテトラフルオルエタン（フレオン１４）及びト　
　　　□ジクロルモノフルオルメタン（フレオン１１）
でめる。懸濁液中で使用する際に、抗ウィルス剤は、例
えば直径１００μ以下特に２５μ以下及び殊に約０．５
〜４μに細分されているべきである。界面活性剤特に非
イオン性の炭素原子数６〜２２ｔ−有する脂肪酸、例え
ばカッロン酸、カゾリル酸、２′ウリン酸、パルミチン
酸、ステアリン酸、リルイン酸岬のエステル又は部分エ
ステルが粉末の集塊をさけるのを助けるために有利であ
る。通例、比較的少量の界面活性剤例えば約０．１〜５
重蓋チ特に０．２５〜１．０重量％が使用されるが、所
望によってはよシ多量も使用できる。同様に、前記のカ
ルボキシアミド抗ウィルス剤は、米国特許第２８６８６
９１号明細書に記載のような好適な溶剤としての液体駆
出剤中に溶かすことができる。

所望の場合には、抗ウィルス剤のいずれかを寄生主に注
射することができ、この場合は、溶液１−当り薬剤約１
０〜５００ｗｇを含有する生理学的食塩水又は懸濁液の
形であってよい。

抗ウィルス剤は、経口製剤としてカプセル又は錠剤の形
で適用できる。ｆｊ＃剤及びカプセルは１錠又は１カプ
セル当り化合物約１０〜５００岬を含有する。抗ウィル
ス化合物のＰＩＴ望投与菫は前記のように患者の条件に
より変じるが、通常１日当り約１０〜２０００〜の範囲
である。

有効にＲＮＡ又はＤＮＡウィルスを阻止するために、崩
清１ｊＩ７当り化合物約６２μノのｆＭ度が必要である
。カプセルは、慣用のゼラチンカプセルであり、前記電
の抗ウィルス剤に加えて、少量、例えば５１菫饅より少
ない、臀に１．０％より少ない菫のステアリン酸マグネ
シウム又は他の流動化剤例えはアビセル（Ａｖｉｃａｌ
　（カルボキシメチルセルロース）〕ヲ含有していてよ
い。錠剤は、前記の抗ウィルス剤及び結合剤（これはゼ
ラチン溶液、水中のデンゾンペースト、ポリビニルピロ
リドｙ、水、中の？リビニルアルコール）ｙ１′典型的
な糖衣と共に含有する。

この抗ウィルス剤は、軟膏、クリーム、乳液又は局Ｆ９
Ｔ′＃ｊ液として、処置丁べきウィルス皮膚感染症の条
件に応じて局所的に適用でき、ここで前記普の抗ウィル
ス剤Ｙ４Ｆ準的な賦形剤又はこのような局所適用で通例
用いられる他の成分と共に処方される。従って軟膏は、
油性基剤の理山がら洟性条件に対して推奨され、クリー
ム、乳液及び局所溶液は、急性で皮下疾患に推奨される
。軟質とは異なり、クリームは一般に水溶性であり、消
失特性を示す。エマルジョンは、板数の薬剤での処置か
指示される必要のある時に使用され、その１方は媒体中
に不溶で、他力は浴かされ、個数の乳化された賦形剤相
は均一な分散に必要である。局所溶液は、溶剤中の活性
成分の溶液で、釉層がクリームと容易に蒸発しうる溶剤
例えはアルコールとの中間で、伸びと作用の姑長の平衡
が達成される。

一般に適用される多くのＭｌ）ＰＩＴ軟貴、クリーム及
び齢液処力の例は、次の物置の組成である：軟膏 ａ）佐薬を含まない石油 ｂ）　　ｆラスチベース（スキップエｎｃ、より入手さ
れ炭化水素ゲル及びポリエチレンと鉱油から成っている
） クリーム ａ）メチルパラベン（Ｍｅｔｈｙｌ　Ｐａｒａｂｅｎ　
）　Ｕ８Ｐプ。ｔルパラペン（Ｐｒｏｐｙｌ　Ｐａｒａ
ｂｅｎ）　Ｕ８Ｆスペルマセテイ（８ｐｅｒｍａｃｅｔ
ｉ　）　Ｕ８Ｆラウリル硫酸ナトリウム　ＵＳＦ ステアリルアルコール　ＵＳＦ セチルアルコール　ＵＳＦ グリセリン　ＵＳＦ ｂ）ステアリン酸 プロピレングリコール ソルビタンモノステアレート及びオレエートポリオキシ
エチレンソルビタンモノステアレートクエン酸 メチル−疎びプロビルパラベン Ｃ）水性基剤 ソルビン酸カリウム メチル−及びプロビルパラベン グリセロールモノステアレート スクアラン ポリソルベート　８０（Ｕｓｐ） スペルマセテイ ステアロイルアルコール ソルビタール溶液 ｄ）ポリエチレングリコール　４００　（Ｕｓｐ）プロ
ピレングリコール カルボキシメチレン モノアシルアミン 二酸化チタン ブチル化されたヒドロキシトルエン 局所溶液 ａ）ポリビニルアルコール−水 ｂ）ポリエチレングリコール　４００ 従って、局所ベヒクルは通例、主剤に加えて軟釈剤、鹸
化剤、乳化痢、溶剤、浸透剤、ｐ）１調ｊｋＴｈ剤、可
塑化剤、軟化剤、保存剤、硬化剤、顔料及び香料などす
べて文献に公知のものである。

豚感架症に対する使用にとって、活性剤の最大分散を生
せしめる局所賦形剤が有オＵである、例えは 豚クリーム ａ）　　グリセロールモノステアレートコーン油 グリセリン 安息香酸 グルタミン酸 水 ｂ）グリセリン エチルアルコール 液体石油 ポリエチレングリコールエーテル：脂肪アルコール錯体
パラベン保存剤 水 膣坐剤 ａ）　ラクト−、ス ポリエチレングリコール　４００ ポリソルベー）　　８０ ポリエチレングリコール　４０００ グリセリン 乳酸 ｂ）ポリエチレングリコール ポリオキシエチレンパルミテート 乳酸 ｍ適用のための局所用ベヒクルは、通常のバクテリアが
繁殖する酸性条件に画一調節して、体防票機構ｙｔｈめ
ないようにする。もちろん、当業者はこのこと及び抗ウ
ィルス剤の局７９′Ｆ２！１用に包含される他の考察を
充分に注意している。

Ｎ６所製剤は、ウィルスを有効に阻止する割合の活性物
質即ち１組成吻合重倉の約０．０１〜１０麺−ｍｓ、特
に０．０２５〜１重量−殊に０．０２５〜０．１１ｔ％
Ｙ含有する。約１０１ｔ％までが不応性状態の治療に使
用できる。もちろん、このような製剤の他の成分の童は
、通常便用されているこのような成分の倉に一致し、適
当な処方の法定は、当業者にとってはこの記載内で容易
ｌ１ｃ−ｉＪ能である。　　　　、□・抗ウィルス剤が
適用される形式は、処理される軸足のウィルス感染症に
依り決まる。例えば、感染がインフルエンず又は他の呼
吸器系ウィルスにより起され、それが上部呼吸腔中であ
ることが明らかであるなら、有利な処置法はエーロプル
鼻スプレーである。それというのは、これは感染の位置
に対して最も有効に避するからである。経口又は注射に
よる治療は、感染の１症度に依り決まる。感染が下部呼
吸器系感染又は他の糸のウィルス感染であることが明ら
かである場合に有利な処理形式ｋｉ、に口であるか又は
注射による。感染症が局側的かもの、例えは口唇匍行疹
（族ヘルペス、急性大抱倫）、陰部庖珍（隘茎又は脂の
ウィルス感染）、帯状庖疹（８ｈｉｎｇ’ｌｅａ　）、
水痘（ｃｈｉｃｋｅｎｐｏｘ　）、エクツエマ・ヘルペ
テイクＡ　（ａｘｚｅｍａ　ｈｅｒｐｓｔｉａｕｍ）、
皮７９４庖ｄ　（ｈｅｒｐｅｓ　ｄｅｒｍａｔｉｔｉｇ
　）等である場合に、適当なｍｌは、前記のような局所
適用により、可能な場合は前記のような経口処置又は注
射処置とも組合される。

例示のために次の局所適用の処方を示す：軟膏 抗ウィルス剤　　　　　　　　　１．０１１ｔ％プラス
チベース　　　　　　　９９．０　　＃クリーム 抗ウィルス剤　　　　　　　　　１．Ｏｍｆｉ％バニシ
ングクリーム　　　　　９９．０　　＃溶液 抗ウィルス剤　　　　　　　　　１・０１童チ局１９Ｔ
溶液　　　　　　　　　　９９．０　１本発明のトリア
ゾールの各々の詐細な抗つルス活性番ｊ示されている。

これらはシトウェル（８，１Ｗ６１１　）等の方法によ
るフィルス−惹起細胞病理効果（ＯＰＭ　）を用いる活
性試談で試駆した〔アプライド・マイクロバイオロシイ
（ＡｐｐｌｉｅｄＭｉｏｒｏｂｉｏｌｏｇ７　）　２２
　：　７９７〜８０１　（１９７１）参照〕。賛するに
、０ＰＩｎ法には、水中のビタミン、アミノ酸、血清、
緩衝液、ペニシリン、ストレプトマイシン及び指示染料
よりなる細胞培養媒体中への抗ウィルス剤の溶解も包含
される。

この細胞培養媒体中に階調されたウィルスなＫＢ細胞の
達成された単一層に加え、次いで１５分以内に同量の抗
ウィルス剤！加えた。感染され処理された細胞は次の融
微鋭試験で評価した。

各実験に対する対照は、細胞対照（細胞と細胞培地のみ
）、ウィルス対照（細胞とウィルス及び細胞培地）及び
褌性対照（細胞及び細胞培地）ン包宣する。

前記のアプライド・マイクロバイオロジイに記載のシト
ウェル等のウィルス評価（ＶＲ）糸イ　　Ｖ　ＯＰＥ阻
止の程度を評価するために用いた。０．５より大きいＶ
Ｒは融着た抗ウィルス活性を示しており、０．５よりノ
ドさいＶＲは、僅かな抗ウィルス活性を示している。

麻疹ウィルス対照いる実験で、前記の方法を。

感染細胞を抗ウィルス化合物を含有する寒天−崩渭−１
炭酸地で機種するとウィルス斑点は識別できた。この斑
点は４日目に中性赤色染料で東色され、抗ウィルス化合
物への麹呈の際に住じる斑点数の減少音測定した。この
実験に対する方法は、ウェア（Ｗｅａｒ）等により記載
されている［　１ｘｐｔｌａｎｄ　Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ
　ｐａｔｈｏｌ　９：４Ｑ５−４１７、（１９６８年）
参照〕。

この抗ウイルス実験の結果な次の第１表に示す： 第１表 細胞培養系中の １．２．４−）リアゾール−３−カルホキシアきド（１
）、１．２．４−）リアゾール−３−チオカルホキシア
きド（２）及び１−β−Ｄ−リボフラノシルー１．２．
４−トリアゾール−３−カルボキシアミド（３） ウィルス評価 タイ７°１ヘルペス　　　　０．６−０．９　０．４−
０．８　１．０−１．５タイプ２ヘルペス　　　　０．
４　　　　０．５　　　　１．６ワタシニア症　　　　
　　０．８　　　　０．５　　　　０．９−１．０タイ
ゾ１人リノ（Ｒｈｉｎｏ）　　０．４−０．５　０．２
−０．４　０．６タイプ１６リノ　　　　　０．５　　
　　０．４　　　　０．５タイゾ　８リノ　　　　　０
．２　　　　０．５　　　　０．８タイプ５６リノ　　
　　　０．５　　　　０．４　　　　０．９タイゾ６パ
ラインフルエンデ　０．５−０．７　０．２−０．４　
０．６−１．０麻１　　　５００　　　　９９　　　１
００　　　１００１００　　　　　　９７　　　　９８
　　　　９４２０　　　　　　３４　　　　　５　　　
　３０例　　■ 各々の抗ウィルス剤Ｙマ、ウスにおけるインフルエンデ
Ａ２感染一対する効果に関して試験した。肴成マウス）
＆’［物の約６５優が８〜１６日以内に死亡するのに充
分な瀘のインフルエ／ずＡ２ウィルスのエーロゾルに無
呈した。ｐｖ当初に４時間前つィルス無呈し、食塩中に
懸濁させた積々のＩＭＫの化合物で、１日２回６〜９日
腹腔内処理した。対照には、ウィルス対照（ウィルスに
篇呈し食塩だけで処置）、拗性対照（つイルス稀釈物（
ＭＥＭ）で疑偽感染させ、試験化合物で処理した）及び
正常対照（Ｓ染させず、処理せず）が包含される。実験
の間に死亡する動物を毎日観察し、２５５日目住残マゆ
スの肺を取り出し、起っているウィルス性硬変の程度ン
０〜４の尺度で評価する。次いで、ｈを過当な群にプー
ルし、燐酸塩緩衝食塩（ＰＢＳ、　ｐ）１７．２．０．
２　Ｍ　ｐｏ、　、０．１５　Ｍ　Ｈａ（Ｊ）　１５ｍ
ｅ中でホモジナイズした。ホモジナイズされた肺ｗ１４
ｍ物ヲ１５０　Ｏｒ、ｐ、ｍ−で１５分間遠心し、ＦＢ
日各稀釈物に同量の０．５９６モルモット赤血球細胞中
で２倍に稀釈した。肺中のウィルスの尺度である赤色細
胞凝集の程＆を、室温で４５分間恒温保持の後に記録し
た。この赤色細胞凝集＋１ｉ’１ｗＬｌ尚りのへマグル
チニン（）ＴＡ）価として表験した。

（ａ）　　処置スケジュール １．　当初に４時間の前−感染及び４時間の後−感染さ
せ１日２回９日間薬剤を適用し島２、　当初に４時間の
前−感染及び４時間の後。

−感染させ１日２回６日間薬剤を適用しｔも６、　当初
に４時間の前−感染及び４時間の後−感染させ１日２回
５日まで、手分の適用蓋で１日１回まず６日間更に３日
適用し島（ｔ））２５日後−感染における肺硬変の程度
。スケール０〜４’ｒ、０〜１００％のｈ硬変を示すた
めに用いた。

（Ｃ）４匹のマウスからのＪｉｌ＋ホモジネート中のへ
マグルチニンは、２５日後−感染時に評価した。

（ｄｐ）−煽然性（Ｏｈｉ　ｔ？価分析）（ｅｐ）−蓋
然性（を試験） 例■〜Ｖからの化合物１及び２の双方は、抗ウィルス活
性のスペクトルを有し、特にインフルエンザウィルスに
対して有効である。相対的な細胞ル性の研究結果は、細
胞構造の価かな変化ン示し、化合？ｌ！１１で６２〜１
０００μｉ／厘Ｉで細胞構造の僅かな変化及び化合物２
で１μＶｄまで低下した！！ｌｉＩ＆で同様な変化を起
こさせることが明らかである。各化合物は使用した水性
一体中に比数的不溶であり、抗ウィルス作用は細胞構造
中で低ρ・に限られていてよく、溶解度の相対的拓矢は
、動物実験の抗ウィルス作用を過度に限定しなかった。

動物狗性実験において、化合物１は、１０００’Ｒ９／
　Ｋｐ　／日の飯度で１日２回９日間腹腔内適用する際
にマウスに対して無害であり、化合物２は、同様な処首
法で２５０〜／９／日の低振度適用の際にｉｔ低下及び
死亡により示された中程展の衝性であった。

従って、１，２．４−トリアゾール−３−カルボキシア
ミドの抗ウィルス活性は、寄生主による１−β−Ｄ−リ
ボフラノシルー１．２．４−トリアゾール−６−カルボ
キシアミドへのその酵素的変換によることも誌められる
。とにかく、このような酵素変換により１−β−Ｄ−り
がフラノシル−１，２，４−トリアゾール−３−カルボ
キシアミドの合成法が得られる。この酵素は精製蛋白負
であってよいか又は、活発に代−するバクテリア又は具
−細胞中に存在しうる。活性の代−バクテリア又はλ−
細胞中に存在する場合は、これは、これら細胞又はこれ
ら細胞の突然変異体を用いる培養性が１．２．４−トリ
アゾール−３−カルボキシアミドからの１−β−Ｄ−リ
ボフラノシルー１．２．４−トリアゾール−３−カルボ
キシアミドの製造を行なわせることが期待される、

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）構造式： 〔式中ＸはＯ又は日を表わす〕の化合物を含有すること
   を特徴とする、ウィルス感染症の進展を阻止する獣医用
   薬剤。