JPS58116497A - アミノプロピルアミノブレオマイシン誘導体及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規アミノプロピルアミノプレオマイシン誘導
体に関する。　プレオマイシンは１９６６年本発明者の
一人である悔涙らにより発見された制癌性抗生物質で（
悔涙ら：ジャーナル・オブ・アンチビオチフス、２００
頁、１９６６年）放＆１．菌ストレプトミセス・バーチ
シラスにより生産されるｌ原子の２価の銅を容易にキレ
ートする塩基性水溶性糖ペプチドで、通常の培養法では
１６種の含銅体が生産され、単離されている。（例えば
、悔涙ら：ジャーナル・オブ・アンチビオチフス１９Ａ
、２１０頁、１９６６年）、これらプレオマイシンのう
ち、ＡＩ、Ａ２．Ａ５．Ｂ２．デメチルＡ２等は、その
混合物の脱銅体（以下「プレオマイシン・コンプレック
ス」という、）が現在すでに癌治療の臨床面で広く使用
されており、とくに偏平上皮癌を中心に、皮膚癌、頭頚
部癌、肺癌、悪性リンパ腫などの優れた成績をあげてい
る。

また、米国特許第［２２２８２号及び米国特許第Ｒｅ３
０４５１号には種々のプレオマイシン類が開示されてい
る。

しかしながら、プレオマイシン類は使用法によっては肺
毒性などの副作用を生じるため、使用法等がいちじるし
く制限される。

そこで本発明者らはプレオマイシン類の肺毒性などの副
作用をへらすために種々研究の結果、アミノプロピル−
Ｎ−メチル−アミノプロピルアミノプレオマイシン（以
下ＡＰＭＰ−ＢＬＭと略す）のアミノ基を修飾すること
によりＡＰＭＰ−ＢＬＭの肺毒性が著しるしく減するこ
とを見いだし本発明を完成した。

本発明の新規アミノプロピルアミノプレオマイシン誘導
体は含銅体及び脱銅体の双方を含み、一般式［Ｉ］ ［Ｂ　Ｘ　］−ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ａ−（ＣＨ２）３
−Ｂ　　［Ｉ　］［式中［Ｂ　Ｘ］は次式 で表わせる（含銅体の場合はキレート銅を省略）プレオ
マイシン酸のカルボキシル基から水酸基を除いた残基を
示し、Ａは式 は水素原子、低級アルキル、ベンジル、Ｒ２は低級アル
キル、ベンジル、Ｒは低級アルキレンであ４ す る）を示しＢは式−Ｎ−Ｒ３で示される基（ここでＲ３
，Ｒ４はそれぞれ（１）水素原子、（２）９フエこル、
ナフチル、フリル、チオフェン、ノルボルネン、シクロ
アルキル、で１つ以上置換されていてモヨイアルキル崖
（これらの置換基はさらに／’１ｌｌｆｆゲン原子、低
級７ノシキル、低級アルコキシ、シフ）、ハロゲノメチ
ル、ベンジルオキシ、から選ばれる１種又は２種以上で
置換していてもよい））を示す、但し、Ｒ３，Ｒ４のど
ちらか少なくとも一方は水素原子以外の基である。］で
表わされる。

上記において、低級アルキルとしては、例えばメチル、
エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブ
チル等が、ハロゲンとしては、例えばフッ素、塩素、臭
素等が、低級アルキレン基としては、例えばエチレン、
トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキ
サメチレン等が、シクロアルキルとしては１例えばシク
ロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロ
オクチル、シクロデカニル、シクロウンデカニル等が、
低級アルコキシとしては、例えばメトキシ、エトキシ、
プロポキシ、ブトキシ等が、ハロゲノメチルとしては、
例えばトリフルオロメチル、トリクロロメチル等が挙げ
られる。

１　　　１　　　　　　１ −Ｎ−１−Ｎ−等が、−Ｎ−とじては例えば２ 等があげられる。

上記一般式［Ｉ］で表わされる化合物のうち薬理活性の
点から好ましいものとしては、Ａがキル、Ｒ２がなし、
または、低級アルキルまたはベンジル、Ｂにおける、Ｒ
３がクロロ置換フェニルメチルまたはエチル、シアノ置
換ベンジル、０５〜Ｃ１ｌのシクロアルキルで置換され
た低級アルキル、Ｒ４が一水素、ベンジルである化合物
が挙表の化合物があげられる。

晰 啼 瞑　−Ｎ　　　曽　　　呻　　　り　　　■　　　ト　
　　ψ０　　　−１　　　０４　　　　曽　　　寸　　
　膿　　　ロ　　　ト■　　　−＋１　　’　　　＋ｌ
　　　　＋ｌ　　　　ｍ−１ｍ　　　　＋４　　　　＋
１Ｃ’Ｊ　　　　ＩＮ　　　　ＣＮ　　　　の　　　曽
　　　の　　　□　　　凶　　　のＣ’）　　　　　Ｃ
’Ｉ　　　　　Ｃ’ｌ　　　　　（’）　　　　　呻　
　　　寸　　　　　　　マ　　　　　　　マー　　　〇 〇〇 寸の 寸寸 なお化合物基中のｒＢＬＭＪは「プレオマイシン」の語
を示す。これらの中でも化合物　Ｎｏ、　？。

１５．１Ｂ、１９，２０，２２，３２，３４，３５，３
７．３８，３９，４１，４２，４３゜４４．４５等はと
くに好ましい。

上記一般式［Ｉ］で示される本発明化合物は次のように
製造することができる。

一般式［ｊＩ］ ［ＢＸ］−ＮＨ−（Ｃ）１２）３−Ａ−（Ｃ：Ｒ２）３
−ＮＲ２［１１］［式中［ＢＸ］、　Ａは前記と同じ。

］で示されるアミノプロピルアミノプレオマイシンに、
一般式［ＩＩＩ］ Ｒ５−ＧＯ−Ｒ８，［ＩＩＩ］ １式中Ｒ５，Ｒ８はそれぞれ（１）水素原子（２）シク
ロアルキル　（３）シクロアルキル又はフェニルで１つ
以上置換されてもよいアルキル（フェニルはさらにハロ
ゲン原子で置換されてもよい）（４）ハロゲン原子、低
級アルキル、低級アルコキシ、ベンジルオキシ、シアノ
、ハロゲノメチルの１種又は２種以上で置換されていて
もよいフェニル（５）ナフチル　（６）チオフェン　（
７）フリルを示す。］で示されるカルボニル化合物を還
元的に縮合することにより、前記一般式［ｒ］の化合物
を得ることが出来る。

縮合に用いる還元剤としては、シアン水素化ホウ素ナト
リウムなどの水素化ホウ素化合物などがあげられる。ま
たパラジウム炭素などの触媒をもちいて接触還元をおこ
なってもよい。カルボニル化合物はｌ−１，５モルを用
いれば、主としてＲ４が水素の誘導体、３モル以上用い
ればＲ３，Ｒ４が同じ誘導体が得られるが、望ましい添
加量はＲ４が水素の誘導体では１．２モル、Ｒ３，Ｒ４
が同じ誘導体では１０モル、Ｒ１，Ｒ３，Ｒ４が同じ誘
導体（化合物番号４０）では１５モルである。又式Ｌ■
■ｔ）の化合物と応時間を増加させれば添加量を減じて
もよい。

反応は溶媒として、メタノール、水、ジメチルフォルム
アミド、アセトニトリル、それらの混合液が用いられる
。温度は０〜５０℃がよい。よりくわしくは、Ｒ４が水
素の誘導体ではＯ′ｃがら２５℃、ケトンを用いる場合
、Ｒ，３、Ｒ４が同じ誘導体で特に立体障害の大きいア
ルデヒド、又は溶解度の低いアルデヒドを用いる場合は
３５〜５０℃に暖めることが望ましい０反応時間は３時
間〜７０時間がよい。立体障害の大きいアルデヒド、又
は溶解度の低いアルデヒドを用いる場合は時間を長くす
る゛ことが有効である。

以上のようにして得られた誘導体を単離するには、水素
化ホウ素化合物を用いた場合には、塩酸で反応液のｐＨ
を１に合わせ室温で５〜１０分撹拌し過剰の還元剤を分
解したのち中和し、メタノールを減圧で溜去した後、過
剰のアルデヒド、ケトンをエーテル又はブタノールで抽
出除去し、続いて次の脱塩操作を行なった。即ち吸着樹
脂たとえばアンバーライト＠ＸＡＤ−２（ローム・アン
ド争ハース社製）を蒸留水を用いて充填したカラムに　
注入して、目的物を吸着する。蒸留水で塩類をあらい流
した後、酸性の含水メタノール、たとえば１１５０規定
塩酸水溶液−メタノール（ｌ：４ｖ／ｖ）で溶出し、青
色のプレオマイシン誘導体の分画を集め必要ならば、陰
イオン交換樹脂、ダウエックスの４４（ＯＨ型；ザ・ダ
ウ・ケミカル社製）で中和したのち、減圧下で濃縮して
凍結乾燥すると、誘導体の青色粗粉末かえられる。

さらに純度をあげるためつぎの操作を行なう。

上記の粉末を蒸留水に溶解し、あらかじめｐＨ４，５、
１／２０モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液でＶ衡化した
ＣＭセファデックス＠Ｃ−２５（Ｎａ＋Ｍ：ファルマシ
ア、ファインケミカル社製）を充填したカラムに注入し
吸着する。上記の緩衝液に連続的に塩化ナトリウムを加
えることによりナトリウム濃度を１．０モルまで除々に
上昇させる直線濃度勾配法により溶出する。もし目的物
の分画に不純物の混入が認められれば、上記のクロマト
７′。

グラフィーにつｌいて吸着樹脂たとえばアンへ−ライｈ
”＠ＸＡＤ−２を用いるクロマトグラフィーをおこなっ
てもよい、樹脂を緩衝液、たとえば４％酢酸アンモニウ
ム水溶液、を用いて充填したカラムに粗物質の水溶液を
注入して、目的物を吸着する。緩衝液に連続的にメタノ
ールを加えることによりメタノール濃度を除々に上昇さ
せる直線濃度勾配法により溶出する。この時未反応の原
料は最も早く、次いでＲ４が水素の誘導体が溶出し、Ｒ
３，Ｒ４が同じ誘導体が最後に溶出する性質があるので
、紫外線吸収モニターを用いることにより分離すること
が可能である。もし目的物の分画に不純物の混入が認め
られれば、上記のクロマトグラフィーを再度行ない完全
除去をはかればよい。

このようにして得られる目的物の分画のメタノールを減
圧で溜去した後、先に用いたアン／＜−ライトＸＡＤ−
２脱塩法で脱塩したのち、凍結乾燥すると、アミノプロ
ピルアミノプレオマイシン誘導体の含銅体が青色の無定
形粉末で得られる。

このようにして得られるアミノプロピルアミノプレオマ
イシン誘導体の含銅体を公知の方法、たとえばＥＤＴＡ
を用いる方法（特公昭５２−３１８７５）で脱銅すれば
脱銅体が得られる。

その−例を説明すると、含銅体を蒸留水に溶解し、これ
を蒸留水で充填したアンバーライトＱｘＡＤ−２のカラ
ムに注入し吸着する。樹脂を塩化ナトリウムと５％のエ
チレンジアミン四酢酸・２ナトリウム（以下ｒＥＤＴＡ
・２Ｎａ」という）からなる水溶液でカラムを洗うと、
銅イオンはＥＤＴＡ・２Ｎａにより運び去られ、アミノ
プロピルアミノプレオマイシン誘導体（脱銅体）が樹＋
１ｔｔ上に残る。塩化ナトリウムで洗いＥＤＴＡ・２Ｎ
ａを除去し、さらに蒸留水で洗浄する。最後に酸性含水
メタノール、たとえば１１５０規定塩酸水溶液−メタノ
ール（１：４　　ｖ／ｖ）で溶出し波長２９０ミリミク
ロン付近に吸収極大を示す分画を集める。ダウエックス
の４４（ＯＨ型；ザ・ダウ拳ケミカル社製）でｐｉ（ｅ
　、　Ｏに合わせた後、減圧下で濃縮し、凍結乾燥する
とアミノプロピルアミノプレオマイシン誘導体の脱銅体
・塩酸塩が白色の無定製粉末で得られる。

もし、上記の塩酸水溶液のかわりに、硫酸水溶液を用い
れば硫酸塩が得られる。このように、１−記溶出工程で
用いられる酸の種類を選択することにより、所望の塩と
することができる。

以上に説明した方法により製造されるアミノプロピルア
ミノプレオマイシン誘導体を６規定塩酸水中で、１０５
℃、２０時間加水分解にかけると、ＢＬＭ類に共通する
分解生成物［Ｌ−）レオニン、β−アミノ−β−（４−
アミノ−６−カルポキシー５−メチル−ピリミジン−２
−イル）プロピオン酸、４−アミノ−３−オキシ−２−
メチル−ｎ−ペンタン酸、β−オキシ−し−ヒスチジン
、β−アミノ−Ｌ−アラニン、２’−（２−アミノエチ
ル）−２，４’−ビナアゾール−４−カルボン酸］とア
ミンが検出された。又アンバーリスト１５を用いたメタ
ツリシスでは、プレオマイシンと同じＬ　−クロース、
３−０−力ルバモイル−〇−マンノースのメチルグリコ
シドがガスクロマトグラフィーで検出された。

以上の事実は本発明の方法によって製造された４丁　τ
　い　る　。

一般式［ＩＩ］の化合物としては、 １）３−　［Ｎ−（３−７ミノプロビル）アミノ］プロ
ピルアミノブレオマイシン　（ＡＰＲ）　、　２）３−
［Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−メチルアミノコプ
ロピルアミノブレオマイシン　（ＡＰＨＰ）、３）３−
　［Ｎ−（３−７ミノプロビル）−Ｎ、Ｎ−ジメチルア
ミノ】プロピルアミノプレオマイシン（ＭＭＨＨ）　、
　４）　３−　［Ｎ−（３−７ミノプロビル）−Ｎ、Ｎ
−ジエチルアミノコプロピルアミノブレオマイシン（Ｅ
ＥＨＨ）　、　５）　３−　［Ｎ　−（３−アミノプロ
ピル）−Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノコプロピルアミノプレ
オマイシン　（ＢＢＨＨ）　。

６）３（Ｎ−［３°−（Ｎ’（３−７ミノプロビル）−
Ｎ’、Ｎ゛−ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ、Ｎ−ジ
メチルアミノ）プロピルアミノプレオマイシン（ＰＰ４
Ｍ）　、　７）　３−　［４−（３−７ミノプロビル）
−ピペラジン−１−イルー］プロピルアミノブレオマイ
シン　（ＰＹ）　８）　３−［Ｎ−（３−／アミノプロ
ピル）−Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジルアミノコプロピルア
ミノブレオマイシン　（ＭＢＺＨＨ）等が挙げられる。

但しく　）内は略号を示す。

一般式［ＩＩＩ］の化合物としては、 ｐ−クロロフェニルアセトアルデヒド、フェニルアセト
アルデヒド、ベンズアルデヒド、ｐ−クロロベンズアル
デヒド、ｍ−クロロベンズアルデヒド、０−クロロベン
ズアルデヒド、ｍ、ｐ−ジクロロベンズアルデヒＦ、Ｏ
，Ｐ−ジクロロヘンズアルデヒド、ｐ−フルオロベンズ
アルデヒド、ｐ−ブロモベンズアルデヒド、ペンタフル
オロベンズアルデヒド、ｐ−メチルベンズアルデヒド、
ｐ−ジエチルアミノベンズアルデヒド、ｐ−メトキシベ
ンズアルデヒド、０．ｐ−ジメトキシベンズアルデヒド
、ｐ−クロロフェニルメチルケトン、ｍ、ｐ−ジベンジ
ルオキシベンズアルデヒド、３−フェニルプロパナール
、ジフェニルアセトアルデヒド、ｐ−シアノベンズアル
デヒド、ｍ−）リフルオロメチルベンズアルデヒド、１
１３−ジフェニルアセトン、アセトフェノン、フルフラ
ール、チオフェン−２−アルデヒド、シクロ−ヘキサノ
ン、シクロ−ペンチル−アルデヒド、シクロ−へキシル
−アルデヒド、シクロ−ヘキシル−アセトアルデヒド、
シクロ−ペンチル−アルデヒド、シクロ−オクチル−ア
ルデヒド、シクロ−ウンデカノイルアルデヒド、５−ノ
ルボルネン−２−アルデヒド等が挙げられる。

前記一般式［ＩＩ］の化合物は次のように合成される。

１）プレオマイシン酸と一般式　［ＩＶ］ＮＨ２−（Ｃ
Ｈ２）３−Ａ−（ＣＨ２）３−ＮＯ３［ＩＶ］［式中Ａ
は前記に同じ、］ で示される化合物を、公知の方法（たとえば、特開昭５
４−６３０８９号参照）と同様にして、縮合するか、（
２）米国特許第Ｒｅ　３０４５１号に開示される方法、
すなわち、一般式［ＩＶ］で示されるアミンを添加して
、ストレプトミセス・バーチシラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ　ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓ）に属するプレオマ
イシン生産菌例えばストレプトミセス・バーチシラスＮ
Ｋ−８８−１４４（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ
１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ　Ｎｏ、３１３０７
）を培養することによっても得ることができる。

一般式［ＩＶ］の化合物としては、例えば、■）ビス（
３−７ミノプロビル）アミン、２）ビス（３−アミノプ
ロピル）メチルアミン、３）ビス（３−アミノプロピル
）−ジエチルアンモニウム塩、４）ビス（３−７ミノプ
ロビル）−ジエチルアンモニウム塩、５）ビス（３−ア
ミノプロピル）〜ジブチルアンモニウム塩、６）１．３
−（ビス（３−アミノプロピル）ジメチルアミノ）プロ
パン、　　７）１．４−（どス（３−７ミノプロビル）
）ピペラジン、８）ビス（３−アミノプロピル）−メチ
ル−ベンジルアンモニウム塩等が挙げられる。

上記一般式［Ｉ　Ｖ］の化合物のうち、一般式［ＩＶａ
ｌ　、　［ＩＶｂｌ １ ＮＲ２−（Ｃ：Ｒ２）３−Ｎ−（ＣＨ２）３−Ｎ）１２
　［ＩＶａｌ２ （式中Ｒ１，Ｒ２，Ｒは前記に同じ、）で示される化合
物は本発明者らによって初めて合成された新規化合物で
あり、例えば次のようにして合成される。すなわち、一
般式［ＩＶａｌの化合物のうちＲ１とＲ２が同一である
化合物の製造法は一般式［Ｖ］ １ ＮＲ２−（Ｃ）＋２）３−Ｎ−Ｒ２［Ｖ］（式中Ｒ１，
Ｒ２は同一で、前記に同じ、）で示される３−７ミノブ
ロビルＮ、Ｎジアルキルアミンを１．５当量の塩化ベン
ゾイルと反応せしめ、反応物をアルカリ性にして、有機
溶媒で抽出し、一般式［ＶＩ］ 旧 Ｃ８Ｈ５−ＣＯ−ＭＨ−（ＣＨ２）３−Ｎ−Ｒ２［ＶＩ
］（式中Ｒ１，Ｒ２は同一で、前記に同じ、）で示され
る、３−ベンズアミドプロピルＮ、Ｎジアルキルアミン
となし、次に３−ブロモプロピルフタルイミドと反応さ
せ一般式［ＶＩＩ］１ Ｃ８）１５−ＣＯＮＨ−（Ｃ）１２）３−Ｎ−（（１Ｍ
２）３−Ｎ＝Ｐｈｔｈ　［ＶＩＩ］２ （式中ｐｈｔｈはフタリル基を示し、Ｒ１、Ｒ２は同一
で、前記に同じ。） で示される四級塩とし、次いで６規定塩酸と１１０度８
時間加熱して加水分解後副生ずるフタル酸、安息香酸を
除き、濃縮し塩酸を出来るだけ除いた後、蒸留水に溶か
し陰イオン交換樹脂（ＣＩ型）のカラムを通し濃縮する
と、Ｒ１、Ｒ２が同一である［ＩＶａｌの塩酸塩を得る
ことが出来る。この方法により得られる化合物としては
例えば−ビス（３−アミノプロピル）−ジメチルアンモ
ニウム塩、ビス（３−７ミノプロビル）−ジエチルアン
モニウム塩、ビス（３−７ミノプａピル）−ジプチルア
ン・モニウム塩等が挙げられる。又、化合物［ＩＶａｌ
　のうちＲ１とＲ２が異なる化合物は例えば、Ｎ−メチ
ルベンジルアミンに塩基存在下２当量の３−ブ’ｆＸ、
％プロピルフタルイミドと反応さ夕（する四級塩を上記
と同様に加水分解して得られる。この方法により得られ
る化合物としては例えばビス（３−７ミノプロビル）−
メチル−ベンジルアンモニウム塩等が挙げられる。

又、式［ＩＶｂｌで示される化合物は、例えば、１　、
３−　（ビス−ジメチルアミノ）プロパンに、３−ブロ
モプロピルフタルイミドと反応させ１゜３−（ビス（３
−フタルイミドプロピル）ジメチルアミノ）プロパンと
し１次い上記と同様に加水分解後副生ずるフタル酸を除
き、イオン交換後、濃縮することにより得ることができ
る。この方法により得られる化合物としては、例えば、
ｌ。

３−（ビス（３−７ミノプロビル）ジメチルアミノ）プ
ロパン４塩酸塩が挙げられる。

次に本発明のアミノプロピルアミノプレオマイシン誘導
体の代表的な化合物につき、理化学的性質を第２表に示
す。

トド呻０クトａｏｏのり　　ヘーー〇〜００　０′１０
０’１ＯＯＯＯ’ｌ　　■　ψ　　　　　００００００
−Ｑ　ｍ　Ｑ　ｍ　＋１−Ｑ　Ｑ　Ｏ＋ｌ　＋１−＋ｌ
　＋Ｉ　−〇の〇〇■へＶ寸Ｌｌ’）００　　　へｅＱ
Ｆｌ呻−■ｃｏｃｏｈクトトψｂ　トＣｏ　　　ｈ口の
のψ■００００００００００　　００００００００　ａ
：ｌＣｏ　ＯＱ）　Ｏ’ｌ　ａ）−Ｎ　ｈ　ト０００１
）　ＯＱ’ｌ　ＣＤ　Ｑ）−ψ−唖−−−−曽ｃＩＪｏ
呻−＋ｌ　＋＋１　＋４　＋ｌ　＋１ａ′１ｃｏ　ｃｎ
　ｃｏ　ｃｎ　ａｎ　Ｏ’ｌ　ｃｎ　ｃｏ　ｕ’ｓ　ａ
ｎ　Ｌｌ’）　ａｒｔ　ａｒｔ　ｏ’＋　Ｏ’＋　Ｇ’
Ｉ　Ｏ’）ＣｉＪ　ＯＪ　ＣｉＪ　ｃＶＪＯＪ９Ｊ　Ｎ
　ＩＮ　ｅＪ　ｅ’）　ＯＪ　ＯＪ　ＩＮ　ｅＪ　Ｎ　
ＯＪ　Ｎ　Ｃ’Ｊへ Ｎ曽呻唖ロトψ■０−　〜０寸のロト ＋１　＋４　＋ｌ　ｍ　＋ｌ　＋ｌ　＋１−へｅ’Ｊ　
　　〜〜〜〜〜〜（）　（）　−ノ　（）　（）　（）
　−ノ　（）　（）　（）　（）　（）　（）　（）　
（）　（）　（）　（）次に本発明の化合物の代表例に
よって調べた生物学的諸性質を以下に説明する。

ｌ）ミコバクテリウム・スメグマチス・ＡＴＣＣ６９７
、及びバチルス・ズブチリスに対する抗菌活性 上記の検定菌を用いて、寒天平板円筒法により測定した
。ただし、標準物質プレオマイシンＡ２（脱銅体）を１
１００ｈｃ力価１ｔａｇとした。

２）培養ＨｅＬａ５３細胞に対する増殖阻害効果プラス
チック・シャーレの培養基（１０％仔牛血清添加ＨＥＭ
）にＨｅＬａ５３細胞を接種し、２日後にプレオマイシ
ン類を添加した。さらに３日間培養を続けた後、細胞数
を測定した。増殖阻害率は次式％式％） ［式中、Ａは被験試料添加後３日目の最終細胞数、Ｂは
被験試料を添加しない対照における最終細胞数、Ｃは被
験試料添加時の細胞数を表わす、］を用いて算出した。

試料濃度と阻止率のグラフから、ＩＤ５０値（５０％阻
害のための濃度）を求めた。以上１）、２）の結果を第
３表に示す。

：、、３９４　囲４　ｏ　Ｏト００　Ｎ　ｖ　ｎ　ｘＱ
ＩＩＫ＋壕　　　のω〜−の−のｏ　ｔ’−ｔ。

＋”ｐ、　　　　ｔｘｓ　ＯＯＮ　Ｏｖ　ｃｏ　Ｏｖ　
−χ　狭　　　　　　　Ｗ　■　曽　寸　■　呻　ω　
寸　寸　０唄　欅・Ｋ　　へωＮ−寸り〜０−０ ４Ｊ５車 憾 ハ＾凸日ロ　凸 １日ｏ′Ｊｖ８へ ０１ｒ１”　”　”　Ｎ　　Ｎ　　ＣＬ　”ＨＮ　　Ｎ
　　Ｎ　　ＣＯＣＱ　”　Ｎ智　　−ＥＩＣＱ中−−Ｎ
鎮 −に）Ｎ−ｔ−１＋−ＪＣＪＣＪＯ：ｌ閃υ−１！：１
Ｃ）Ｃ）υロロー菌 ２　Σ　Σ　Σ　Σ　Σ　Σ　Σ　Σ　Σ套　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０重　電　−
Ｎｃｖ）呻りロトψ■− 好　　瞭 ＯＬｌ”Ｉ　ＯＣ’Ｊ　　■　Ｃｏ　ＯＯＬｆ’ｌ　　
の　ＯＬｌ’）　ｔｏ　ｏ　ｏ　ｏ　　ｅｎ　　。

ロトυ唖の叶０−トドψ寸寸０曽Ｖの〇−Ｏｅｌ　ＯＯ
Ｏ’＋−１−００００＋１−０００−■ト凶■〜り寸ト
ｖり嘘００■の口ω０００−ｕ＋Ｉｈ　Ｉ：ｙ１ｕ’）
　４　Ｃｏ　Ｅｌ　（ｙ　Ｏａｚ　ｃｏ　４　ｅＪ　ｃ
’）　０）Ｌｌ’）ＣＯｅ’ｌｌトｅ１．ｌＬ１′）Ｃ
’）Ｏｆ’−ＬＯＦＩＬｌ”１ＯＩＪ’）Ｃｏ−−１＋
ＩＣ０−クー００呻■呻寸〜へ寸００−ロ０−−■Ｃｏ
曽呻Ｏ呻−ｏｏｏ−ｏり呻りＬＯ（７１Ｌｌ’）　ｕ’
）　−１Ｌｌ’）の４０００）ＦＷＮＯＯ’＋■■■ｏ
′１寸−００寸０−ののへψ■■トクークトクーω寸の
−Ｖωωの〜呻ト寸膿寸Ｖ−〜　　　−ヘ一　　　−一 〆）　　　　　口・ ＾ＯＱ＋誓ハ 山″″″″′Ｎ日 ′−′　　凶　に）ｃｏ″＜　　　　に）ＮＮｃｒ５＋
１−１ｏ　　　　　ＮＮ　ｅ−Σ　　　　０Ｃｆｌ菌０
くＮ　に）中央−←　Ｎに）匡−Ｎ−〇Σ−ＣＱＧＬ＋
−χ−（ｅＺＯＥｌｋ：）ニー−へΣロＯＱ−ロＯトス
く０口く−トロ０ΣΣΣΣΣΣΣΣΣΣΣΣΣΣΣΣΣ
Σ−へ０寸［Ｆ］Φトψ■０−〜凶神唖ωトψ＋１−、
−１１−１　＋１−ｅｌ　ｍ−ＣＩＪ　Ｎ　ｅｌ、１〜
へへＮ〜へｃ＋’）ｗａ）ａＯｃｏａ）ｔ’−■ＯＯＯ
Ｏ（０−＋　Ｏ−−ｃｏｕ′）＋ｕ”＋ｔｃ＋ｃｑのＩ
Ｎ　ｈ　ＯＣ’）　Ｏ’ｌ■りＯψψｏｏｏｏｏｏｏｏ
ｏ〜〜−ｏ　ｏ　ｏ　ｏ　。

＠Ｏ凶（ＯｃＩＪＱ　ＩＮ　Ｏｒ’−０００’ｌ　ＯＯ
ＯＯＯ呻寸寸呻の寸呻０寸Ｖψトｏ００の〇 −曽−−１ｅ’）　　ｔ’−００ＬＯＬＯ寸−Ｃｏへ〇
−ＩＮＩＯＥＩｃ１１３　−１０−Ｉ　　　　Ｓ＋−＋
（ＯＬｎ−一〜　−Ｎ＋Ｉ　　　−ｍ ４　０　４　　ｃｏ　　Ｏ’）４　４　０　０　０　　
ｃｏ　　Ｏｏ　　ＯＯＯ。

ｍＦ）ＣＪＯ−Ｃ００：ｌ＋Ｅ＋−１１唖０００ＪＹＯ
寸０■ψ〜−Ｎの口■ｈ寸ｏＯ寸ｃ”’ｚ。

Ｌｌ’）　ｔｏ　ｔｏψ（Ｏｉｍｏトｓ寸（０（０１−
ｅＱ−凶ＯＪ　ｅＪ　−１−〜−一　　−〜−−呻菌 Ｑ　　　　　　　　　　Ｎ ＧＬ＋　　　ＮＮ　　ＮＮ　　　ｈｌ　　Ｎ鎮Σに）に
）　　中−〇鎗−ＮＮ国０…−Ｑ工閃Ｏ１：：）悶ロロ
０ロロ中−ロυ口υ０Ｌ）Ｃ）Ｃ）Ｌ）２ＱΣΣに）−
トド山−トトドΣΣΣΣΣΣΣスに）−Σ　くル−−−
−ａ′１０−〜０寸りＯトω００−〜０寸りｃＳＪυの
のψυＣ’）　Ｆｌ　ｅＱ　Ｃ’）　（”）寸寸寸寸寸
呻３）マウスの詰責性（肺線維化）ＩＣＲ系マウス（雄
性１５週令）を一群９匹として用いた。各薬剤の投与量
は、５　Ｂ／ｋｇとし、１日１回、連続１０日間、腹腔
内注射し、投与終了後、５週間飼育し、観察後、屠殺剖
検し、肺の線維化の頻度、及び程度を調べた。

成績は、投与群の肺線維化をもつマウス数の頻度（Ｉｎ
ｃｉｄｅ’ｎｃｅ）及び、の強弱の程度（Ｇｒａｄｅ）
について比較した。その結果を第４表に示す。

００００００００００００００ ｔｎＱ）０１１’）Ｌｌ’１ＯＱ）ＯＯＯＯＯＯＯＯＯ
ＯＬｆ）ｏｏｏｏｏｃ＋ｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏｏ−＋０
００００００００００００００００１’Ｊト ’ｕ　ｕ　’ｕ　’＋／　ｕ　％ｊ　％ｕ　’−ｊ　％
ｊ　ｕ　　％Ｊ　’、ｊ　％ｊ　’ｕ　’、ｊ　　％ｊ
　’−ｊ　’、ｊトクトトトトクトトトトトトトトトト
ト寸 ａ）ＩＮＯＣＯＣＯＯＮＯＯＯＯＯＯＯＯＯＯ−＋　ｅ
Ｉ′）Ｏ−−＋　ＯＭ　ＯＯＯＯＯＯＯＯＯＯＣ０００
０００００００ｏ　ＯＯＯＯＯＯＯｍ−〜　−”ｅ’Ｊ
　　　　　　　　　　　ＯＶワＶすｖｖワ冒り！ｖｖワ
！すｖ！！−一一一〜ｅ’Ｊへ０００の０寸寸寸寸呻く
なお表中の点数は下記のとおりである。

０点二線維化を認めない。

１点：肺胞に浸出液の蓄積がみられ、肺胞中隔に線維化
様変化が見られる。

２点：数か所にみられる線維化 ４点：散在性にみられる線維化 ６点：２７３以上の広範囲にみられる線維化また、表中
の比はブレオマイシンコンブレックスとの比率を示す。

以上の結果から明らかなように、本発明化合物は培養Ｈ
ｅＬａ５３細胞に対する増殖阻害活性が強く、優れた抗
菌活性をも有しており、詰責性を著しく減じていること
がわかり、臨床面での有用性を強く示唆している。

次に本発明を実施例により具体的に説明する。

実施例１ Ａステ・ンプ ３−［Ｎ−メチル−Ｎ−（３−アミノプロピル）アミノ
コプロピルブレオマイシン３塩酸塩（含銅体）　１．０
ｇを３０ｍ１のメタノールに溶解し、シクロウンデカン
カルボキサアルデヒド２２７ｍｇを添加し、ついで２Ｅ
１ｍｇのシアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加した。室
温１６時間反応した後、６規定塩酸水溶液で反応液のｐ
Ｈを１．０−４と下げ、１０分間放置して反応を止めた
。ｌ規定水酸化ナトリウムで中和したのち、減圧下でメ
タノールを溜去し、残液に蒸留水を加えて５０ｍ　ｌと
した。これを５（１ｍｌのエーテルで抽出し過剰のアル
デヒドを除いた。予め４％酢酸アンモニウム水溶液／２
％酢酸水溶液（ｌ：ｌｖ／ｖ）を用いて充填したアンバ
ーライト＠ｘＡＤ　−２（＋：＋−ム・アンド・ハース
社製）のカラムに（１００ｍ　ｌ容）に注入して、目的
物を吸着した。

上記緩衝液５００ｍ１にメタノール５００ｍ　ｌを連続
的ニ加える直線濃度勾配法により溶出した。メタノール
濃度１３５％　　前後で溶出される波長２９０ミリミク
ロン付近に吸収極大を示す目的の分画２００＋ｍｌをあ
つめた。この分画からメタノールを減圧溜去して得た水
溶液を予め蒸留水で充填したアンバーライト＠ＸＡＤ−
２（ローム・アンド・ハース社製）のカラムに（１０ｈ
ｌ容）に注入して、目的物を吸着した。蒸留水１５０ｍ
１でカラムをあらった後、１１５０Ｍ塩酸水溶液−メタ
ノール（ｌ：４マ／マ）で溶出した。プレオマイシン誘
導体の青色の分画を集め、陰イオン交換樹脂、ダウエッ
クス＠４４（ＯＨ型；ザ・ダウ争ケミカル社製）で中和
したのち、減圧下で濃縮して凍結乾燥した。

上記の粉末を蒸留水１０＋ｓｌに溶解し、あらがじめｐ
　Ｈ４，５、１／２０モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液
で平衡化したＣＭセファデックス＠Ｃ−２５（Ｎａ十型
：ファルマシア、ファインケミカル社製）を充填したカ
ラム（１００ｍｌ容）に注入し吸着した。

上記の緩衝液に連続的に塩化ナトリウムを加えることに
よりナトリウム濃度を１．０モルまで除々に上昇させる
直線濃度勾配法により溶出した。５５０ｍ１の溶出液を
流し、０．６５モル前後で溶出する青色の分画１２０１
を集め、先に用いたアンバーライ）＠ＸＡＤ−２脱塩法
で脱塩したのち、凍結乾燥すると、３−（Ｎ−メチル−
Ｎ−［３’−（シクロウンデカニルメチルアミノ）プロ
ピルコアミノ）プロピルアミノブレオマイシンの含銅体
８？２ｍｇが青色の無定形粉末で得られた。（収率７８
％）Ｂステップ Ａステップで得た含銅体８７２ｍｇを１８ｍ　ｌの蒸留
水に溶解し、脱銅のため蒸留水で充填したアンバーライ
トＸＡＤ−２のカラム（１００ｍｌ容）に注入し吸着す
る。樹脂を塩化ナトリウムと５％のＥＤＴＡ・２Ｎａか
らなる水溶液３００１で洗い、２％塩化ナトリウム１０
０ｍ１　、蒸留水１５０ｍ　ｌの順序で洗浄した後、最
後に１７５０規定塩酸水溶液−メタノ−）Ｌｙ　（１：
　４　　ｖ／ｖ）　テ溶出し波長２９０ミリミクロン付
近に吸収極大を示す分画を集めた。ダウエックス　４４
（ＯＨ型；ザ・ダウ・ケミカル社製）でｐＨ６，０に合
わせた後、減圧下で濃縮し、凍結乾燥して３−（Ｎ−メ
チル−Ｎ−［３°−（シクロウンデカニルメチルアミノ
）プロピル］アミン）プロピルアミノブレオマイシン（
化合物Ｎｏ、３２）の脱銅体＠３塩酸塩７５８ｍｇが白
色の無定型粉末で得られた。（収率８０％） 氷晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大は２８１＋＋ｇＥ
　１％／１ｃｍは８７であった。臭化カリ錠剤法で測定
した赤外吸収極大波数（ｃｍ−’）は３４２５，２９５
０．１６５０．１５５０．１５２０，１４４０，１４０
０．１２Ｂ０，１１９０，１１４０．１１００　。

１０Ｈ，１Ｇ２０，１３８０．８００であった。

その他の理化学的性状は第２表に示した通りである。

上記の反応でアルデヒドとしてｍ、ｐ−ジベンジルオキ
シベンズアルデヒド９８８ｍｇを用いて２７６Ｃで７０
１１ｆ間反応した後上記の方法で精製、及び脱銅し３−
（Ｎ−メチル−Ｎ−［３’−（ビス（ｍ、ｐ−ジベンジ
ルオキシベンジル）アミン）プロピル］アミン）プロピ
ルアミノブレオマイシン（化合物Ｎｏ、３４）の脱銅体
・３塩酸塩７８２ｍｇを無色無定型粉末として得た。　
（収率５７％） 氷晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大は２８５ｍ＃ＬＥ
１％／　１ｃｍは８８であった。臭化カリ錠剤法で測定
した赤外吸収極大波数（ｃｍ−１）は３４２５．２９５
０　、１８５０．１５５０．１５１０，１４６０，１４
３０．１３Ｂ０，１３２０，１２７０．ｌｌ８０゜１１
４０、１０１３０．１０２０．９８０，８００，７３０
，１３９０．１３５０　　であった。

同様にアルデヒドとしてシクロオクタンカルボキサアル
デヒド１７４ｍｇを用い室温で２４時間反応した後精製
、脱銅して、３−（Ｎ−メチル−Ｎ−［３’−（シクロ
オクチルメチルアミノ）プロピルコアミノ）プロピルア
ミノブレオマイシン（化合物Ｎｏ、２２）の脱銅体拳３
塩酸塩１３０５＋ａｇを無色無定型粉末として得た。　
（収率５８％） 水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大は２９１ｍｇＥ１
％／１ｃｍは８６であった。臭化カリ錠剤法で測定した
赤外吸収極大波数（ａＩｌｌ−’）は３４２５．２９２
５．　ＩＥｉ５０、＋５５０．１５２０，１４４０，１
４００，１３３０．１２８０．　ｌｌ８０，１１４０゜
１＋００．　１０１３０，１０２０，９８０，８００で
めった。

本実施例と同様にして第５表の化合物が製造された。

ｔｏ　−＋　Ｖ３　ＬＯＣｏ　ｃｖ）Ｃｎ　ｈ　−＋　
Ｏｕ’）　Ｃｏ　Ｏの千沢　　ロトａ：１呻ののめトド
のト０ωり優 ヘー＋ｌ−，−＋　＋１　＋−１＋ｌ　Ｎ　Ｌｆ’）ク
ー＋４　Ｑ　＋ｍ−ｍ　＋１一 一〜ト トクＯ 〜Ｎト ｃＩＪＩＮへ ０へ０ 〜−り ２υ Ｄ　＼　− Ｎ０→ ｃｌＩ）ｅ＋′）曽 実施例２ Ａステップ ３−［Ｎ、Ｎ−ジエチル−Ｎ−（３−アミノプロピル）
］アミノプロピルアミノプレオマイシン３塩酸塩（含銅
体）　１．０　ｇを３０ｍ　ｌのメタノールに溶解し、
ベンズアルデヒド６４２ｍｇを添加し、ついで５１ｍｇ
のシアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加した。室温１６
時間反応した後、実施例１と同様に塩酸処理、エーテル
抽出、アンバーライト＠ＸＡＤ−２カラムによるクロマ
トグラフィーを行なった後、先に用いたアンバーライト
ＸＡＤ−２脱塩法で脱塩したのち、凍結乾燥すると、３
−［Ｎ。

Ｎ−ジエチル−（３−ジベンジルアミノ）プロピルコア
ミノプロピルアミノプレオマイシンの含銅体が青色の無
定形粉末で８３２　ｍｇ得られた。（収率７５％） Ｂステップ Ａステップで得た含銅体８３２＋ａｇを１７＋ａｌの蒸
留水に溶解し、実施例ＩＢステップと同様に脱銅し、減
圧下で濃縮し、凍結乾燥して３−Ｉ　Ｎ　、　Ｎ−ジエ
チル−（３−ジベンジルアミノ）プロピルコアミノプロ
ピルアミノプレオマイシン（化合物Ｎｏ、３７）の脱銅
体・３塩酸塩が白色の無定型粉末として７３９ｍｇ得ら
れた。（収率８２ｚ）水晶の蒸留水で測定した紫外吸収
極大は２８１ｍ終Ｅ　１％／１ｃｍは９０であった。臭
化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｍ−りは
　３４２５．２９？５，２９２５．　１Ｂ４０，１５５
０，１５２０．１４９０．１４５０．１４００，１３２
０．１２Ｂ０．１１９０，１１４０，１１００゜１０８
０．１０２０．　９８０，１３１０，８００，７４０．
８１３０であった。

又、原料として、３−（Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−［３’
−（Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−（３°゛−アミノプロピル
アミノ）プロピル］）アミノプロピルアミノプレオマイ
シン・４塩酸塩（含銅体）１．０ｇを用い、ベンズアル
デヒド６０７５ｇを上記と同様に反応させ、精製、脱銅
して、３−（Ｎ。

Ｎ−ジメチル−Ｎ−［３’−（Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−
（３”−ジベンジルアミノプロピルアミノ）プロピルア
ミノ］）プロピルアミノブレオマイシン（化合物Ｎｏ、
４１）の４塩酸塩の脱銅体５８７■を無色無定型粉末と
して得た。（収率５５％）水晶の蒸留水で測定した紫外
吸収極大は２８１ｍｐＥ１％／１ｃｍは８４↑あった。

臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｍ−’
）は３４２５，２！３５０，１Ｅｉ５０゜１５Ｂ０，１
４９０，１４Ｅ１０，１４００，１３３０．１２Ｂ０．
　１１９０．ＩＩＥＩｏ。

１１００　、１０ｆｔＯ、１０２０、１ｌ１８０．８０
０．７４０　、８００であった。

又、ベンズアルデヒドの代わりにシクロオクタンカルボ
アルデヒド１θ１ｍｇを用いて上記と同様に反応させ、
精製、脱銅を行なった結果、３−（Ｎ　、　Ｎ−ジメチ
ル−Ｎ−１３′−（Ｎ　、　Ｎ−ジメチル−Ｎ−（３”
−シクロオク、チルメチルアミノプロピルアミノ）プロ
ピル］）アミノプロピルアミノプレオマイシン（化合物
Ｎｏ、４２）の４塩酸塩の脱銅体５３９Ｂを無色無定型
粉末として得た。

（収率５２％） 水晶の茂留水で測定した紫外吸収極大は２９１ｍｐＥ　
１％／１ｃ＋ｗは８７であった。臭化カリ錠剤法で測定
した赤外吸収極大波数（ｃｍ’）は３４２５　、２９５
０　、１　？２０．１８８０、１５５０．１５２０，１
４８０．１４５０．１４００．１３Ｂ０，１２１３０゜
１１９０．１１４０，１１００，１０１３０．１０２０
，９８０，８８０．８００であった。

又原料として３−［４’−（３”−アミノプロピル）ピ
ペリジルコプロピルアミノブレオマイシン・４塩酸塩（
含銅体）　１．０ｇを用い、これにベンズアルデヒド８
２３ｍｇを上記と同様に反応させ、精製、脱銅を行なっ
た結果３−［４°−（３°°−７ミノプロビル）ピペリ
ジルコプロピルアミノブレオマイシン（化合物Ｎｏ、４
３）の４塩酸塩の脱銅体６９５ｍｇを無色無定型粉末と
して得た。（収率６５％） 水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大は２９１ｍｇＥ１
％／１ｃ＋ａは９３であった。臭化カリ錠剤法で測定し
た赤外吸収極大波数（ｃｍ−’）は３４２５，２９５０
．１６Ｂ０゜１５１３０、１５２０．１５００．１４８
０．１２６０．１１９０．１１４０，１１００１０Ｅ１
０，１０３０、９８０，８８０．８１０，７４０，７０
０であった。

本実施例と同様にして第６表の化合物が製造された。

実施例３ プレオマイシン酸銅キレート１０００ｍｇと２９４８ｍ
ｇの１−ヒドロキシベンズトリアゾール（以下Ｉ（ＯＢ
Ｔと略す）を１０１のジメチルフォルムアミドに溶解し
、０℃に冷却攪拌し、ジシクロへキシルカルボジイミド
（以下ｎｃｃと略す）　１５００＋ａｇ　（プレオマイ
シン醸に対して１０倍量）を加える。１０分後予め調製
しておいたＮ−（３−アミノプロピル）Ｎ、Ｎ−ジメチ
ルアミノプロピルアミン３塩酸増１１１５３ｍｇ　（プ
レオマイシンに対して１０倍量）とＮ−メチルモルフォ
リン２２０８ｍｇ　（プレオマイシンに対して３０倍量
）のジメチルフォルムアミド５１溶液を加える、室温で
４時間撹拌し反応させた０反応液に１０倍６のアセトン
を加え、目的物を沈澱させ、アセトンでよく洗った後こ
の沈澱を蒸留水に溶解し、あらかじめｐ　Ｈ４，５、ｌ
／２０モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化したＣ
ＭセファデックスＣ−２５（Ｎａ十型：ファルマシア、
ファインケミカル社製）を充填したカラム（１００ｇ＋
１容）に注入し吸着した。上記の緩衝液に連続的に塩化
ナトリウムを加えることによりナトリウム濃度を１．０
モルまで除々に上昇させる直線濃度勾配法により溶出し
た。０．４５モル前後で溶出する青色の分画を集め、先
に用いたアンバーライ）ＸＡＤ−２脱塩法で脱塩したの
ち、凍結乾燥すると３−　［Ｎ−（３−アミノプロピル
）−Ｎ、Ｎ−ジメチルコアミノプロピルアミノ−プレオ
マイシンの含銅体が青色の無定形粉末ｆ１２４ｍｇが得
られ凱 水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大は２９２ｍ　ＩＬ
及び２４３ｍでありＥ　１％／１ｃｍは夫々１２４及び
１５５であった。臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極
大波数（ｃｍ−’）は３４２５．２９７５．２８２５．
１７２０．１８４０．１５６０．１４６０．１４００．
１３７０．１３３０．１３００．１２５０．１２００、
１１４０．１１００．１０１３０．１０１０．９θ０　
、１３３０．８８０．７８０であった。

その他の理化学的性状は第７表に示した通りである。

本実施例と同様にして、第７表に示す化合物が合成され
た。

寸りＯ− 〇　　　　　　　−。

ク ー　　　　　　　−−０ ｏ　　　　　　　　　ｏ　　　　　　　　　ＯＯ’１へ
＼ト ３−７ミノプロピル一ジメチルアミン５０ｇと炭酸水素
ナトリウム８２ｇを蒸留水３００１に懸濁し、水冷下は
げしく攪拌しつつこれに１０５ｇ　（１・、５当量）の
塩化ベンゾイルを滴下する。室温で６詩間反応させ、反
応液を濃塩酸でｐＨ４とし過剰の塩化ベンゾイルをエチ
ルエーテルで抽出除去したのち水層を５規定ＮａＯＨで
ｐＨ１２にあわせ、クロロフォルムで抽出し硫酸ナトリ
ウムで乾燥し、溶媒を減圧下溜去すると、３−ベンズア
ミドプロピル−ジメチルアミンが９１ｇ得られた。

これに、Ｎ−３−ブロモプロピルフタルイミド（１当Ｊ
Ｌ）　１１８ｇの３００１テトラヒドロフラン溶液を加
え室温で１８時間攪拌した。析出する無色の結晶を濾取
しテトラヒドロフランで洗い乾燥し、四級塩の無色の結
晶１８８ｇを得た。収率９０％次いで６規定塩−１００
０ｍｌに溶解し１１０度８時間　′加熱して加水分解し
た。冷却後析出したフタル酸、安息香酸を濾過して除き
、減圧下濃縮乾固し過剰の塩酸を除去した。残液を蒸留
水に溶解しイオン交換樹脂ダウエックス＠−１カラム（
Ｃ１型−８００ｍ　ｌ容）を通過させた。流出液を減圧
下濃縮乾固すると、ビス（３−アミノプロピル）ジメチ
ルアンモニウム３塩酸塩９８ｇを得た。　Ｉ収率９０Ｘ
１本化合物は吸湿性が強く融点を測定できなかった。本
化合物の重水中で測定したＰＭＲスペクトルは６２．１
〜２．８ｐｐｍ、４Ｈ（ｍ）、　２．４ｐｐｍ、０Ｈ（
ｓ）、３．１〜３．９ｐｐｍ、８Ｈ（ｍ）　　［但し０
中はシグナル（１）型を示しｍはマルチプレット、Ｓは
シングレットを示す。

Ｊであり、上記の構造を有することを示している。臭化
カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｍ−１）は
３４２５．２８７５．２６２５．２０００．１６００．
１４８０．１４７０、１３５０．１３２０．１３００．
１２３０．１２００．１１６０．１１４０．１０６０．
１０４０．１０００、９３０．８４０、７６０であった
。

本実施例と同様にして、３−アミノプロピル−ジエチル
アミン、３−アミノプロピル−ジブチルアミン、を用い
ることにより夫々ビス（３−アミノプロピル）ジエチル
アンモニウム３塩酸塩、ビス（３−７ミノプロビル）ジ
ブチルアンモニウム３塩酸塩を得ることが出来た。これ
らの化合物の理化学的性状を第８表に示す。

実施例５ Ｎ、Ｎ、Ｎ’　、Ｎ’−テトラメチル−１，３−ジアミ
ノプロパン１３ｇをＮ−（３−ブロモプロピル）フタル
イミド（２当量）　５３．８．の３００ｍ１アセトこト
リル溶液を加え室温で１８時間攪拌した。ｌ、３−（（
３−フタルイミドプロピル）ジメチルアミノ）プロパン
・２臭化物が白色沈澱として生ずる。これを濾取しアセ
トニトリルで洗い、乾燥した。収率９０％ 次いで上記四級塩を６規定塩酸２００ｍ１に溶解し１１
０度８時間加熱して加水分解した。冷却後析出したフタ
ル酸を濾過して除き、イオン交換樹脂ダウエックスの一
１カラム（Ｃ１型：　１２００＋ａｌ容）を通過させ流
出液を減圧下濃縮乾固すると、１゜３−ビス（（３−ア
ミノプロピル）ジメチルアミン）プロパン命４塩酸塩２
８．７ｇを得た。

本化合物は吸湿性が強く融点を測定できなかった。本化
合物の重水中で測定したＰＭＲスペクトルは ６２．０　〜２．９ｐｐｍ、８Ｈ（ｍ）、　　６３．０
〜４．０．１２Ｈ（ｍ）。

δ３．４５，１２Ｈ（Ｓ）　［（）内は前記に同じ、】
であり、上記の構造を有することを示している。

第８表に示した条件でのＲｆ、Ｒｍは夫々０．０２゜２
．５６であった。臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極
大波数（ｃ＋ｍ−’）は３４２５．２９７５．２６００
．２０００．１７２０．１８００．１４８０．１４７０
．１４００．１３００．１２３０゜１２００．１１５０
．１０８０．１０００．８６０、８２０、８００．８５
０、７６０であった。

実施例６ Ｎ−メチルベンジルアミン２０ｇをテトラヒドロフラン
３００ｍ１に溶解しこれにトリエチルアミン１７ｇ　、
　Ｎ−（３−ブロモプロピル）フタルイミド８１１ｇを
添加し室温で１７時間攪拌した。析出する無色沈澱を濾
取し水−エタノールから再結晶し、無色の結晶７８ｇを
得た。（収率８０％） これを６規定塩酸３８０１に溶解し１１０℃８蒔間加熱
して加水分解した。冷却後析出するフタル酸を癌去し、
減圧下濃縮し過剰の塩酸を除き、蒸留水に溶解しイオン
交換樹脂ダウエックス＠　−１（ＣＩ型２００１容）の
カラムを通過させ、流出液を減圧下濃縮乾固して、ビス
（３−７ミノプロビル）−メチル−ベンジルアンモニウ
ム３塩酸塩４１ｇ！得た。

（収率９０χ） 本化合物は吸湿性が強く融点を測定できなかった。本化
合物の重水中で測定したＰＭＲスペクトルは６１．９〜
２．８ｐｐｍ、４Ｈ（ｍ）　、６２．９〜４．０ｐＰ１
１゜８Ｈ（ｍ）　、６３．２ｐｐｍ、３Ｈ（ｓ）、６４
．７０〜４．７５ｐｐｍ、２Ｈ（ｍ）　。

６７．７ｐｐｍ、５Ｈ（ｓ）［（）内は前記に同じ。ｌ
であり、上記の構造を有することを示している。第８表
に示した条件でｃ７）Ｒｆ、Ｒｍは夫々０．２９．２．
１４であった。臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大
波数（ｃｍ−’）は３４２５．２９７５．２６５０．２
０００．１６００．１４７０．１４００．１３１０．１
２２０．１２００．１１８０．１１４０．１０７０．１
０３０．１０００、　ｆｌｆｌｏ、　８８０、７８０．
７５０、７３０、７００、であった。

特許出願人　微生物化学研究会 １３０８−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　　一般式 ％式％） ［式中［ＢＸｌはプレオマイシン酸のカルボキシル基か
   ら水酸基を除いた残基を示し、Ａは式は水素原子、低級
   アルキル、ベンジル、Ｒ２は低級アルキル、ベンジル、
   Ｒは低級アルキレンであす る〕を示しＢは式−Ｎ−Ｒ３で示される基（ここでＲ３
   、Ｒ４はそれぞれ（１）水素原子、（２）、フェニル、
   ナフチル、フリル、チオフェン、ノルボルネン、シクロ
   アルキル、で１つ以上置換されていてもよいアルキル基
   （これらの置換基はさらにハロゲン原子、低級アルキル
   、低級アルコキシ、シアノ、ハロゲンメチル、ベンジル
   オキシ、から選ばれる１種又は２種以上で置換していて
   もよい））を示す、但し、Ｒ３，Ｒ４のどちらか少なく
   とも一方は水素原子以外の基である】で表わせるアミノ
   プロピルアミノプレオマイシン、および、その塩（２）
   　一般式 ％式％ ｃ式中［Ｂ　Ｘ］はプレオマイシン酸のカルボキシル、
   基から水酸基を除いた残基を示し、Ａは式は水素原子、
   低級アルキル、ベンジル、Ｒ２は低級アルキル、または
   ベンジル、Ｒは低級アルキレジｌである）を示す１で表
   わせるアミノプロピルアミノプレオマイシンを 一般式Ｒ５−Ｃｏ−Ｒｅ Ｅ式中Ｒ５，Ｒｅはそれぞれ（１）水素原子（２）シク
   ロアルキル（３）シクロアルキル又はフェニルで１つ以
   上置換されてもよいアルキル（フェニルはさらにハロゲ
   ン原子で置換されてもよい）（４）ハロゲン原子、低級
   アルキル、低級アルコキシ、ベンジルオキシ、シアノ、
   ハロゲノメチルの１種又は２種以上で置換されていても
   よいフェニル（５）ナフチル（６）チオフェン（７）フ
   リルを示す、】で表わせるカルボニル化合物と、還元的
   に縮合させることを特徴とする ［　Ｂ　Ｘ　］−ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ａ−（ＣＨ２）
   ３−ＢＨ３ 【式中　［ＢＸ］　、　Ａは前記と同じ、Ｂは式−Ｎ　
   −Ｒ３で示される基（ここでＲ３，Ｒ４はそれぞれ（１
   ）水素原子（２）、フェニル、ナフチル、フリル、チオ
   フェン、ノルボルネン、シクロアルキル、で１つ以上置
   換されていてもよいアルキル基（これら°−ジルオキシ
   、から選ばれる１種又は２種以上で置換していてもよい
   ））を示す、但し、Ｒ３，Ｒ４のどちらか少なくとも一
   方は水素原子以外の基である］で表わせる、アミノプロ
   ピルアミノプレオマイシン誘導体およびその塩の製造法
   。 （３）一般式 ％式％ れる基（ここでＲ１は水素原子、低級アルキル、ベンジ
   ル、Ｒ２は低級アルキル、　ベンジル、Ｒは低級アルキ
   レンである）で表わせるアミン