JPH02500909A - シグマ脳受容体リガンドおよびそれらの使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 シグマ脳受容体リガンドおよびそれらの使用木光里至宜量 本発明は、シグマ脳受容体を選択的に結合するグアニジン化合物、それらの含む 薬剤組成物、有機化合物のシグマ脳受容体結合活性を生体外で測定する方法、そ のような活性を有する化合物の精神病診断および治療における使用、およびその ような活性および有用性を有する新規なＮ、　Ｎ”−ジ置換化合物に関する。 多数の置換グアニジンが米国特許文献に開示されている。 例えば１，４１１，７３２および１，４２２．５０６はゴム加硫促進剤としての ジフェニルグアニジンを開示する。 １．５９７，２３３はゴム加硫促進剤としてのＮ−０−）リルーＮ′−フェニル グアニジンを開示する。 １．６７２．４３１は特に水溶性塩類の形で治療目的のために有用なＮ。 Ｎ”−ジー０−メトキシフェニルグアニジンを開示する。 １．７３０．３３８はゴム加硫促進剤としてのＮ−Ｐ−ジメチルアミノフェニル −Ｎｏ−フェニルグアニジンを開示する。 １．７９５．７３８はＮ−ジエチル−Ｎｏ−フェニルグアニジン、Ｎ−ジエチル −Ｎｏ−イソアミルグアニジン、Ｎ−ジメチル−Ｎｏ−イソアミルグアニジンお よびＮ−ジメチル−Ｎｏ−エチルグアニジンを含むＮ、　Ｎ’　−ジアルキル− ジー置換グアニジン類の製造方法を開示する。 １．８５０，６８２はイミン窒素原子上に追加の置換基を有するジ置換グアニジ ンゴム加硫促進剤の製造方法を開示する。 ２．１４５．２１４は殺寄生虫剤としてのジ置換グアニジン類、例えばジアリー ルグアニジン類、特にジキシリルグアニジンの使用を開示する。 ２．２５４．００９は対称ジー２−オクチルグアニジンを、２，２７４．４７６ および２．２８９．５４２は対称ジシクロへキシルグアニジンを殺虫剤および蛾 幼虫忌避剤として開示する。 ２．６３３，４７４はゴム加硫促進剤としての１．３−ビス（０−エチルフェニ ル）グアニジンおよび１．３−ビス（Ｐ−エチルフェニル）グアニジンを開示す る。 ３．１１７，９９４は静バクテリア化合物としてＮ、Ｎ’　、Ｎ”−トリ置換グ アニン類およびそれらの塩類を開示する。 ３、１４０．２３１は抗高血圧剤としてのＮ−メチル−およびＮ−エチル−Ｎ” −オクチルグアニジンおよびそれらの塩類を開示する。 ３．２５２，８１６は抗高血圧剤としての種々のＮ−置換および未置換シンナミ ルグアニジン類、および一般に対応するＮｏ−およびＮｏ−アルキル置換化合物 およびそれらの塩類を開示する。 ３．５４７．９５１は抗高血圧活性を有する１、３−ジオキソラン−４−イル− アルキル置換グアニジン類を記載し、そして他方のアミノ基上の可能な置換基と してｎ−ブチルを含む低級アルキルを開示する。 ３．２７０．０５４は交感神経抑制剤および抗ビールス剤としてのＮ’　−およ び／またはＮ”窒素原子上に最大２個のアルキル基を有するＮ−２−アダマント −１−イル−およびＮ−２−ホモアダマント−１−イルオキシエチル−チオエチ ル−および−アミノエチルーグアニジン誘導体を開示する。 ３．３０１．７５５は低グリセリン血症および抗高血圧剤としてのＮ−エチレン 性未置換アルキルグアニジン類および対応するＮ”−および／またはＮ”−低級 アルキル化合物を開示する。 ３．４０９．６６９は降圧剤としてのＮ−シクロヘキシルアミノ−（３゜３−ジ アルキル置換プロピル）−グアニジン類および対応するＮ”−アルキル−および ／またはＮ”−アルキル置換化合物を開示する。 ３．２４８．４２６（実施例５）はその置換基が疎水性炭化水素基であり、その 一方がナフチルメチルであり、他方がｎ−ブチル基である１゜３−ジ置換グアニ ジンを開示する。 ３、６３９．４７７は食欲減退作用を有する化合物としてプロポキシグアニジン を開示する。 ３．８０４．８９８は血圧降下剤としてＮ−ベンズシクロブテニルおよびＮ−ベ ンズシクロブテニル−アルキル−グアニジンおよび対応するＮ”−アルキルおよ び／またはＮｏ−アルキル置換化合物を開示する。 ３．９６８．２４３はＮ−アラルキル置換グアニジン類および対応するＮ。 −アルキル−Ｎ″′−アルキルおよびＮ”、Ｎｏ−アラルキル化合物が心臓不整 脈の治療に有用であることを開示する。 ３．９７５．５３３は０−ハロベンジリデンアミノグアニジン類および精神抑う つ症を克服するための抗うつ剤としてのそれらの使用を開示する。 ４．００７．１８１は抗不整脈および利尿作用を有するとしてイミン窒素上にア ダマンチルによって置換された種々のＮ、Ｎ”−ジ置換グアニジン類を開示する 。 ４．０５１，２５６は抗ビールス剤としてＮ−フェニルおよびＮ−ピリジル−Ｎ ｏ−シクロアルキルグアニジンを記載する。 ４．１０９，０１４は血管収縮剤としてＮ−ヒドロキシ置換グアニジン類および 対応するＮ”−メチルジ置換グアニジン類を開示する。 ４、１６９．１５４は抑うつ症の治療におけるグアニジン類の使用を開示する。 ４．３９３，０７７は神経節ブロッキング剤としてＮ−置換および未置換フェニ ル、Ｎ−置換メチル−Ｎｏ−未置換モノ置換お、よび置換−Ｎ”−未置換および 置換グアニジン類を開示する。 ４．４７１．１３７は化学合成において立体障害塩基であるＮ、Ｎ、Ｎ’　。 Ｎｏ−テトラアルキルグアニジン類を記載する。 他の置換グアニジン類の例として、例えば１，４２２．５０６τ１．６４０．１ ８０：３．１５９．６７６；　３，２２８．９７５；　３．２４８，４２６：　 ３，２８３．００３；　３，３２０，２２９；　３．５４７゜９５１：　３．６ ３９，４７７；　３．７８４．６４３：　３．９７５．５３３；　４．０６０． ４４０；および４．１６１゜５４１を見よ。 Ｇｅ１ｕｋ、　Ｈ，Ｗ、、　ｅｔａｌ、　Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、　１２＋７１ ２（１９６９）は可能性ある抗ビールス剤として、Ｎ、Ｎ’−ジー（アダマンタ ン−１−イル）グアニジン塩酸塩、Ｎ−（アダマンクン−１−イル）−Ｎ”−シ クロヘキシルグアニジン塩酸塩、およびＮ−（アダシンクン−１−イル）−Ｎ’ 　−ベンジルグアニジン塩酸塩を含む、種々のアダマンチルジ置換グアニジン類 の合成を記載する。 われわれは、ある種のＮ、　Ｎ’−ジ置換グアニジン類は選択的シグマ受容体結 合性を持っていることを発見した。 Ｎ−アリルノルメ、タゾシン（ＳＫＦｌｏ、０４７）およびサイフラジシンのよ うなある種のペンゾモルファンアヘン剤は、無痛覚に加え、ヒトに幻覚、離情症 、めいていおよび他の精神異常発現効果を生ぜしめる。サル、イヌおよびネズミ においては、精神異常発現アヘン剤はモルヒネまたは頚アヘンペプタイドのよう な古典的アヘン剤の投与で観察されるのと異なる行動的および自律的効果を生ず る。脳中の特異的“類アヘン”受容体はそのような異型性効果を仲介するものと 信じられる。　Ｍａｒｔｉｎ　ｅｔ　ａｌ、（１９７６）　Ｊ、　Ｐｈａｒｍａ ｃｏｌ。 Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、　１９７．５１７−５３２参照。シグマ受容体はフェンサ イクリジン（ＰＣＰ、エンジェルダスト）の精神異常発現効果をも仲介するもの と信じられ、または代わりにそのような精神異常発現アヘン剤は特異性ＰＣＰ受 容体に作用する。Ｚｕｋｉｎ、　Ｒ，Ｓ、　＆　Ｚｕｋｉｎ＋　Ｓ、　Ｒ，。 （１９８１）　Ｍｏ１．　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　２０１２４６−２５４；　５ ｈａｎｎｏｎ、　Ｈ，Ｅ、＋（１９８３）　Ｊ。 Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、　２２５，１４４−１５２；　Ｗ ｈｉｔｅ、　Ｊ、　Ｍ、　＆　Ｈｏｌｔｚｍａｎ。 Ｓ、Ｇ、＋（１９８３）　Ｐｓｙｃｈｏｐａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　８０＋　１− ９：　Ｚｕｋｉｎ　ｅｔ　ａｌ、（１９８６）　Ｊ。 Ｎｅｕｒｏｃｈｅｓ＋、　４６．１０３２−１０４１参照、ＰＣＰは精神分裂病 において観察されるのに似た行動的症候群をヒトに発生させる乱用薬物である。 Ａｎｉｌｉｎｅ＋　Ｏ，＆　Ｐｉｔｔｓ、　Ｆ、Ｎ、Ｊｒ、、（１９８２）　Ｃ ＲＣＣｒ１ｔｉｃａｌ　Ｒｉｖ、　Ｔｏｘｉｃａｌ。 １０．１４５−１７７参照。シグマアヘン剤およびＰＣＰの強力な精神異常発現 効果のため、シグマ（および／またはＰＣＰ）受容体は精神病、特に精神分裂病 においである役割を果たしているものと信じられる。 正常および異常脳機能におけるシグマ受容体の役割の系統的研究は、特異的シグ マ受容体結合アッセイおよびバイオアッセイの不存在によって妨げられていた。 そのような特異的アッセイの開発はよく特徴化された、高度に選択的なそして強 力なシグマ受容体リガンドを必要とする。最近の研究は、脳膜はインビトロで（ ＋）（’Ｈ］５ＫＰ１０．０４７（Ｓｕ、　Ｔ、Ｐ、、（１９８２）　Ｊ、　Ｐ ｈａｒａ＋ａｃｏ１．　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、　２２３．２４８−２９０）で、 （＋）（’８１エチルケタゾシン（Ｔａ−、Ｓ、Ｗ、、（１９８３）　Ｐｒｏｃ 。 Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ｔｌ、ｓ、Ａ、　８０．６７３０−６７０ ７）で、または（＋）　（３８１５ＫＦ１０＋０４７（Ｔａｔａ、　ＳＪ、　＆ 　Ｃｏｏｋ、　Ｌ、（１９８４）　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃ ｉ。 υ、Ｓ、Ａ、８１．　５６１８−５６７２１；　Ｍａｒｔｉｎ、ｅｔ　ａｌ、（ １９８４）　Ｊ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ。 Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、　２３１，５３９−５４４：および選択的でないがＭｉｃ ｈｅｌｓｏｎ、　Ｍ、Ｍ。 ＆　Ｌａｂｔｉ、　Ｒ，Ａ、（１９８５）　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍｕｎ、　Ｃｈｅ ｗ、　Ｐａｔｈｌ、　Ｐｈａｒｓａｃｏｌ、　４７＋２５５．２６３；　Ｇｕｎ ｄｌａｃｈ　ｅｔ　ａｌ、　（１９８５）　Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｐｈａｒｍａｃｏ ｌ、　１１３．４６５−４６６：　Ｌａｒｇｒｎｔ　Ｂ、Ｌ、、　Ｇｕｎｄｌａ ｃｈ、　Ａ、Ｌ、　＆　５ｎｙｄｅｒ、　Ｓ、Ｈ，（１９８６）　Ｊ。 Ｐｈａｍａｃｏｌ、　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、、（印刷中））で、そして他のもの よりシグマ受容体に対して明らかに一層選択的な（＋）［’Ｈ１３−（３−ヒド ロキシフェニル）−Ｎ−（１−プロピル）ピペリジン（（＋）（’Ｈ）　Ｐ　Ｐ 　Ｐ　）　（Ｌａｒｇｅｎｔ　ｅｔ　ａｌ＋　（１９８４）　Ｐｒｏｃ、　Ｎａ ｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ。 Ｕ、Ｓ、Ａ、　８１．４９８３−４９８７）で標識できることを示している。　 Ｍａｒｔｉｎおよび協力者＋　Ｋｅａｔｓ　＆　Ｔｅ１ｆｏｒｄ、　Ｋｅａｔｓ 、　Ａ、Ｓ、　＆　Ｔｅ１ｆｏｒｄ、　Ｊ。 “Ａｎａｌｇｅｓｉｃｓ　：　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ａｓｐｅｃｔ、”、　Ｍｏ１ ｅｃｕｌａｒ　Ｍｏｄｉｆｆｃａｔｉｏｎ　ｉｎＤｒｕｇ　Ｄｅｓｉｇｎ、Ｒ， Ｆ、Ｇｏｕｌｄ＋　ｅｄ、八ｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　Ｃｈｅ＋ｍ１ｓｔｒｙ　５ ｅｒｉｅｓ１４５、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、　Ｗａｓｈ、　Ｄ、Ｃ ，（１９６４）＋およびＨａｅｒｔｚｅｎ＋Ｈａｅｒｔｚｅｒ＋＋　Ｃ，Ａ、Ｃ ｙｃｌａ、ｚｏｃｉｎｅ　ａｎｄ　Ｎａ１ｏｒｐｈｉｎｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｄ ｄｉｃｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ　（ＡＲ ＣＩ）、　Ｐｓｙｃｈｏ−ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉａ　（Ｂｅｒｌ、）１８、 ３６６−３７７（１９７０）による初期の試験管内研究の後、多数の研究者は異 なるアヘン剤受容体（ミュー受容体、カッパ受容体およびシグマ受容体）を試験 管内で生化学的に特徴化することを述べた。 試験管内試験における別のシグマ受容体の存在の最初の証拠は、トリチウム標識 した５ＫＦ−１０，０４７によって明らかに選択的に標識されたモルモット脳膜 中のエトルフィン到達不能結合部位を記載する雑文中にＳｕ　（１９８２）によ って提供された。５ＫＦ−１０，０４７は脳中の多数の類アヘン受容体を標識し 得るという事実を克服するため、Ｓｕは過剰の未標識エトルフィンの存在下トリ チウム標識５ＫＦ−１０，０４７を使用して彼の受容体結合アッセイを実施した 。エトルフィンはデルタ受容体、ミュー受容体およびカッパ受容体を殆ど等しい 力価を持って結合することが知られた非常に強いアヘン剤アゴニストである。Ｓ ｕはエトルフィンを脳膜調製物中のすべてのミュー、カッパおよびデルタ受容体 を飽和させるために使用した。これは彼をして明らかにミュー、カッパおよびデ ルタ受容体と異なるシグマ結合部位を検出することを可能とした。 別の実在物としてシグマ受容体を同定することにおける主要な躍進は、Ｔａ＋ｗ 　ｅｔ　ａｌ　（１９８４）がシグマ受容体の選択的標識における以前の問題は 、すべての以前の実験においては５ＫＦ−１０，０４７のラセミ体が使われてい たという事実によって引き起されていたことを示した時に発生した。Ｔａｒａは トリチウム標識（＋）ＳＫＦ−１０゜０４７異性体を使用してミュー、デルタお よび類アヘン受容体とは異なるシグマ受容体を選択的に標識できたことを示した 。他方、Ｔａｍは（−）ＳＫＦ−１０，０４７はミューおよびカッパ受容体を明 らかに標識したが、シグマ受容体は標識しないことを示した。　ＴａＩＩ。 Ｓ、Ｗ、、　Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｐｈａｒｍ、　１０９．３３−４０１９８５）参 照。この発見は今や確認されている。（Ｍｆａｒｔｉｎ　ｅｔ　ａＬ　１９８４ 　）行動実験Ｋｈｕｚａｎ　ｅｔ　ａｌ、　Ｎｅｕｒｏｐｈａｍ、　２３＋　９ ８３−９８７　（１９８４）；　Ｂｒａｄｙｅｔ　ａｌ、　５ｃｉｅｎｃｅ　２ １５．１７８−１８０　（１９８１）から、５ＫＦ−１０，０４７の精神異常発 現効果に単独に責任あるのは（＋）ＳＫＦ−１０，０４７異性体であるという証 拠がある。 シグマ受容体の生学的特徴化の最も重要な発見の一つは、この受容体は幻覚誘発 および精神異常発現効果を有することが知られたすべての合成アヘン剤を結合す るということであった。生体内で精神異常発現効果を持たないアヘン剤はこの受 容体へ結合しない、最も重要なことに、幻覚誘発アヘン薬物のほかに、シグマ受 容体は精神分裂病患者の幻覚の治療に臨床的に使用される多数の抗精神病薬をも 結合する−（ＴａｇおよびＣｏｏｋ、　１９８４　）シグマ受容体への抗精神病 薬結合に関する最初の観察（Ｓｕ、　１９８２　）はその後床、く確認され、そ して臨床的に使用されている最も強力な抗精神病薬の一つである、放射標識した ハロペリドールを使用した時、脳膜調製物中の結合部分の約半分は実際にシグマ 受容体であり、結合部位の他の半分は明らかにドパミン受容体であることを示し たＴａｇおよびＣｏｏｋ（１９８４）によって拡張された。 長年大部分の抗精神病薬はまたドパミン拮抗剤であることが知られ、そして以前 精神病患者における抗精神病薬の有益な作用はこれら薬物のドパミン受容体ブロ ッキング効果に帰因していた。しかしながらＴｅ腸の業績から、多数の臨床的に 使用される精神病薬はシグマ部位へも結合することが明らかである。それ故シグ マ受容体へ結合するすべての抗精神病薬は幻覚の緩和の有益効果を一方的にまた は他に発生させることができる。これらの観察を総合すると、シグマ受容体を精 神病、特に幻覚が主要臨床症状である精神分裂病の病原論に関与する主要候補に する。 現在使用されている抗精神病および精神分裂病薬は、主としてそれらのドパミン 受容体に対する作用のため非常に強い副作用を持っている。副作用は脳の運動機 能を制御する錐体外路神経系への不可逆的損傷をしばしば含む、長期間抗精神分 裂病薬療法下にある患者は協調運動を制御する彼らの能力の永久的損傷をしばし ば含む。 われわれは、シグマ受容体へ結合する新規な化合物のクラスを同定した。 以上の研究は、シグマ結合部位は１）右旋性ベンゾモルフアンへの立体選択性お よびナロキソンに対する非惑受性、２）ハロペリドールに対する高い親和性と、 そして強力ドパミン受容体ブロッカ−であることが既知のフェノチアジン抗精神 病薬に対する緩和なないし高い親和性、３）ドパミンおよびアポモルフアンに対 する非惑受性の特徴を持っている。この策謀する薬物選択性プロフィルは、正常 および異常脳機能におけるシグマ受容体の役目の完全な分析を必要とする。それ を実施するためには、高度に選択的でそして強力なシグマ受容体活性化合物のス ペクトルが利用できることが必須である。本発明はそのような化合物およびその ような活性を有する他の薬物を同定する方法を提供する。 本生里立旦煎 本発明の一目的は、シグマ受容体部位へ選択的に結合する新規な化合物のクラス を提供することである。 本発明の他の一目的は、放射標識され、そして有機化合物のシグマ受容体結合活 性を生体外でアッセイするために有用な化合物を提供することである。 別の目的は、シグマ受容体活性を有する化合物を含む薬剤組成物を提供すること である。 なお他の目的は、有機化合物のシグマ受容体結合活性を測定する方法を提供する ことである。 なお他の目的は、シグマ受容体活性と、そして抗精神病および抗うつ病薬として の有用性を有する化合物をアッセイするための生体外スクリーニング方法を提供 することである。 なお他の目的は、シグマ受容体系機能障害と、異常精神病様行動を示す哺乳類に おけるそのような行動との関係を決定する方法を提供することである。 他の目的は本発明が関係する分野の当業者には自明であろう。 主発里見塁翌 組成物面において、本発明は一般式 （式中、ＲおよびＲ′はそれぞれアダマンチル、シクロヘキシル、または少なく とも炭素数６の単環炭素環アリールであり、そのうちＲおよびＲ”の環炭素原子 の少なくとも一つは少なくとも一つのトリチウム原子を持っている。）のトリチ ウム標識Ｎ、Ｎ’　−ジ置換グアニジン類に関する。 他の組成物面において、本発明は単離した哺乳類脳膜へ結合したＮ、　Ｎ’−ジ ー（４−［’Ｈ］−２−Ｈｌルフェニル）−グアニジンを試験管内で置換する、 その水溶性プロトン化形におけるＮ、　Ｎ”−ジ置換グアニジンの、精神病行動 を示す、もしくは慢性抑うつ症に罹患しているヒトのシグマ脳受容体変調活性を 変えるのに有効な量を単位投与量あたり含んでいる、単位投与形のそしてヒトへ の全身投与に適した薬剤組成物に関する。 方法面において、本発明は、 ａ）精神異常発現ベゾモルファン結合活性を有する単離した哺乳類脳膜の既知量 を、（ｉ）前記脳膜のシグマ受容体へ結合することができる既知量の、シグマ脳 受容体を選択的に結合するトリチウム標ｍＮ、Ｎ’−ジ置換グアニジンおよび（ ｉｉ）シグマ受容体結合性についてアッセイすべき水溶性有機化合物の変化する 既知量との混合物と接触させるステップ、ｂ）ステップａ）において脳膜へ結合 しなかった前記トリチウム標識化合物から前記脳膜を分離するステップ、Ｃ）ス テップａ）において採用した前記有機化合物のモル量に対する、ステップｂ）に おいて分離された結合トリチウム標識化合物の割合のモル関係から、前記有機化 合物のシグマ受容体結合活性を決定するステップ を含む有機化合物のシグマ脳受容体結合活性を測定する方法に関する。 他の方法面において、本発明はその電気的刺激に応答しての収縮がシグマ受容体 結合活性によって増大された単離されたマウス輪静管を試験管内で接触させ、そ してその増大の反転を決定することを含む、シグマ受容体結合活性を有する幻覚 誘発性ベンゾモルフアンに対する拮抗剤の試験管内スクリーニング方法に関する 。 他の方法面において、本発明は、哺乳類脳膜へ結合したＮ、　Ｎ’−ジー（４− （’Ｈ］−２−Ｈｌルフェニル）−グアニジンを試験管内で置換する水溶性Ｎ、 　Ｎ’−ジ置換グアニジンの、該哺乳類のシグマ脳受容体変調精神的活動を変え るのに有効なシグマ脳受容体変調量を投与することを含む、シグマ受容体機能障 害に対する哺乳類の異常精神病様行動の関係を決定する方法に関する。 他の方法面において、本発明は、幻覚誘発性ベンゾモルフアンのシグマ受容体活 性に対する拮抗剤であり、および／または哺乳類脳膜へ結合したＮ、Ｎ”−ジー （４−（”１３−２−メチルフェニル）−グアニジンを試験管内で置換する水溶 性Ｎ、Ｎ”−ジ置換グアニジン、好ましくは式■の化合物を、抑うつ症もしくは 幻覚をそれぞれ緩和するのに有効な量において投与することを含む、慢性抑うつ 症または幻覚に関連した精神病、例えば精神分裂病に罹患しているヒトを治療す る方法に関する。 詳豊星徽抜 われわれは、モルモット脳膜結合部位から（＋）　−（’Ｈｌ５ＫＦ１０．０４ ７を置換するそれらの能力によって証明されるように、本発明のジ置換グアニジ ン類はシグマ受容体結合活性を有することを発見した。われわれはまた、これら 化合物の一つの〔３Ｈ１−標識誘導体、すなわち（”Ｈｌ−１，３−ジ−オルソ トリルグアニジン（Ｎ、Ｎ’−ジー（４−（３１１−２−メチルフェニル）−グ アニジン）。 （［３Ｂ　］−ＤＴＧ）　、式 は、モルモット脳膜ホモジネートおよびスライド標本化したラットおよびモルモ ット脳切片中のシグマ受容体結合部位へ、可逆的に、飽和的に、選択的にそして 高い親和力で結合することを発見した。 われわれは、（＋）−（”Ｈ１３−ＰＰＰは同じ部位へ結合することを確立した 。本発明の選択的シグマリガンドの利用可能性は生体外および生体内におけるシ グマ受容体の特徴化を容易にする。 本発明の好ましいＮ、　Ｎ″−ジ置換グアニジン類は式のものであり、式中Ｒお よびＲ゛は各自生なくとも炭素数４のアルキル基、または少なくとも炭素６の炭 素環アリール基であり、例えばＲおよびＲ′は同一または異なって、炭素数４以 上、例えば４〜１２のアルキル、好ましくは直鎖アルキルおよびさらに好ましく は炭素数４〜８のアルキル基、例えばブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、 アミル、ヘキシル、オクチル、ノニルおよびデシル；炭素数３〜１２のシクロア ルキル、例えばシクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプ チル、１．４−メチレンシクロヘキサン、アダマンチル、シクロペンチルメチル 、シクロヘキシルメチル、１−または２−シクロヘキシルエチル、および１−１ ２−または３−シクロヘキシルプロピル；例えば炭素数１８までのそして１〜３ 個の独立のもしくは縮合芳香環を含んでいる炭素環アリール、アルカリールまた はアラルキル、例えばフェニル、０−ｌｍ−もしくはＰ−）リル、ｍ、ｍ’−ジ エチルフェニル、ｏ−、ｍ−もしくはｐ−エチルフェニル、ｍ、ｍ”−ジエチル フェニル、ｍ−メチル−ｍ゛−エチルフェニル、０−プロピルフェニル、ナフチ ル、２−ナフチル、およびビフェニルである。 加えて、グアニジン基に比較して化学的にそして生理学的に不活性な１，２．３ またはそれ以上の置換基、例えば炭素数１〜８のアルキル、例えばメチル、エチ ル；ハロ、例えばクロロ、ブロモ、イオド、フルオロ；ニトロ：アジド；シアノ ：イソシアナート、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、トリ フルオロメチル、炭素数１〜８のアルコキシ例えばメトキシ、エトキシおよびプ ロポキシ、アシロキシ例えば炭素数１〜８のアルカノイルオキシ、例えばアセト キシおよびベンゾキシ、アミド例えばアセタミド、Ｎ−エチルアセタミド、カル バミド例えばカルバミル、Ｎ−メチルカルバミル、　Ｎ、　Ｎ’−ジメチルカル バミル等がＲおよびＲ′炭化水素基上に存在してもよい。 特に好ましいのは、例えばｏ−、ｍ−もしくはｐ−位において、またはフェニル がジ置換の時ｏ−，ｐ−もしくはｍ＝、ｍ’　−位において前記置換基の一つ以 上で置換された、必ずしも同じでなくてもよいＲおよびＲ”が各自フェニルであ る、またはＲがここに定義したものであり、Ｒｏがアダマンチルである式■の化 合物である。 特定の例は、ＲおよびＲｏが両方ともフェニルまたはＰ−）リル；Ｒがｏ−トリ ルでＲｏがｐ−プロモーｏ−トリル、ｐ−ＣＦ、−。 −トリル、Ｐ−イオドーｏ−）リル、ｐ−イオドフェニル、Ｐ−アジド−０−ト リル、シクロヘキシルまたはアダマンチル；そしてＲがフェニルでＲｏがｐ−ブ ロモ−ｏ−）リル、ｐ−イオドー〇−トリル、ｍ−ニトロフェニル、またはＰ− イオドフェニルである化合物である。 本発明の高度に活性のジ置換グアニジン類、例えばＤＴＧは、フェニル軸を持つ （＋）３−ＰＰＰと、そして舟型のピペリジン核とアリル軸を持つ（＋）−３Ｋ ＦＩ０，０４７と実質上同じ立体構造を持っている。シグマ受容体結合活性を有 する化合物の立体構造のこの類似性は、他のＮ、　Ｎ’　−ジ置換グアニジン類 のシグマ受容体結合活性の可能性レベルを予測するためのスクリーニング技術を 提供する。 ＲおよびＲｏが炭素環アリールである前記化合物の意図する均等物は、アリール 基が複素環、例えば２−および４−ピリジル、２−および３−Ｎ−メチルピロリ ル、２−および３−フラニル、２−および３−チオフラニル、２−および３−ベ ンゾフラニル、２−ベンゾオキサゾイル等である化合物である。 単離および／または製造され、そして前記試験管内（’）Ｉ］ＤＴＧ置換活性を 有することが見出された化合物の例は、Ｎ、Ｎ’　−ジプチルグアニジン、Ｎ、 Ｎ“−ジフェニルグアニジン、Ｎ、Ｎ’　−ジーｏ−トリルグアニジン、Ｎ、Ｎ ’−ジー（２−メチル−４−ブロモフェニル）グアニジン、およびＮ、　Ｎ’− ジー（２−メチル−４−イオドフェニル）グアニジン、Ｎ−（２−メチル−アジ ドフェニル）−Ｎ”−（２−メチルフェニル）グアニジン、Ｎ−（アダマンチル ）−Ｎ’　−（２−メチルフェニル）グアニジンである。 ジ置換グアニジン類のシグマ受容体活性のレベルは、各自２０回トライアルの期 間をもって分離トライアル回避模範においてサイフラジシン（２，０■／ｋｇ） と食塩水の腹腔的注射を判別するように訓練されたラットを使用する差別的刺激 性テストにおいて生体内で決定することもできる。例えば、ＤＴＧおよびＤＰＧ はサイフラジシンと同じ濃度において完全に代替可能であった。（Ｈｏｌｔｚｍ ａｎ、　ｓ、ｃ、ＩＥｍｅｒｏｙ　ＩＪｎｉｖｅｒｓｉｔｙ、　Ａｔ１ａｎｔａ 、　Ｇｅｏｒｇｉａ、私信）試験管内における化合物のシグマ受容体活性は、そ の電気的刺激に応答しての収縮が化合物、好ましくは幻覚誘発性シグマベンゾモ ルフアン、例えば（＋）−ＰＰＰによって増大された単離したマウス輪精管を試 験管内において種々濃度のテスト化合物と接触させ、そしてもしあれば前記増大 の反転の量を決定（測定）することよりなるスクリーニング操作によって決定す ることもできる。 われわれによって実施された実験のこれからの議論はこれら選択的シグマ受容体 リガンドの一つ、すなわちＮ、Ｎ’−ｏ−）リルグアニジン（ＤＴＣ；）に関す るが、該化合物の活性および有用性は単離したモルモット脳膜へ試験管内で結合 したＮ、Ｎ’−ジー（４−［’）Ｉ］−２−メチルフェニル）グアニジンと試験 管内で競合し、そして置換する他のジ置換グアニジン類に対して匹敵して当ては まる。 本発明のシグマ受容体結合活性測定方法の実施において、（＋）−３ＫＦ１０， ０４７等精神異常発現ベンゾモルフアン結合活性を有する、哺乳類例えばヒトも しくは他の霊長類、ブタ、ネズミ類例えばラットもしくはモルモットの脳膜の既 知量と、適当な水性ビヒクル、例えば生理食塩水中において、通常適当な水性ビ ヒクル中の溶液中の（ｉ）脳膜の前記の量へ完全に結合できる量の本発明のシグ マ受容体活性を有するトリチウム標識Ｎ、Ｎ’−ジ置換グアニジンと、（ｉｉ） 投与量レスポンスカーブが得られるように十分に変化させた既知量のそのシグマ 受容体活性をアッセイすべき水溶性有機化合物との混合物とを接触させる。投与 量レスポンスカーブを得るための技術は標準的であり、当業者には良く知られて いる。典型的には、そのような混合物１０ないし１２０、そして好ましくは３０ ないし９０を使用して、混合物中に存在するトリチウム標識化合物のモル量１０ −３ないし１０３０間を変化するモル量を使用することができる。 もしアッセイすベロき有機化合物がシグマ受容体結合活性を持っていれば、その ような有機化合物の不存在下においては膜へ結合するトリチウム標識の一部は結 合せず、そしてそのため膜から分離することができる。結合せずに残っている量 は有機化合物のシグマ受容体活性と、そしてトリチウム標識化合物に対する混合 物中のそのそル比に正比例する。 二つの化合物は任意の便利な合計濃度、例えば１０−１ないし１０’ｍＭにおい て使用することができる。 次にステップにおいて、膜を分離し、その中でステップ（ａ）が実施された溶液 がなくなるまで洗浄する０次にステップにおいて、膜からこのように分離された トリチウム標識化合物の量が、例えば分離された溶液および洗液の合計放射能レ ベルを測定し、そして有機化合物の不存在下前記のステップを同じ量のトリチウ ム標識Ｎ。 Ｎ”−ジ置換グアニジンについて実施した時得られる放射能と比較することによ って決定される。 この方法の次のステップにおいては、有機化合物のシグマ受容体結合活性がこの ようにして得られた投与量レスポンスカーブから決定される。 以上のステップのすべては慣用であり、そしてシグマ受容体結合活性を有する他 のタイプの３Ｈ標識化合物について先行技術において採用されている。しかしな がら本発明方法は、本発明のトリチウム標識Ｎ、Ｎ”−ジ置換グアニジン類はシ グマ受容体による結合に対して高度に選択的であり、そのため他の瓶受容体へ結 合する有機化合物と競合しない点においてユニークである。 これらジ置換グアニジン類は慣用の化学反応により、例えばＲおよびＲｏが同じ である時は、対応するアミンと臭化シアンとの反応によって容易に製造すること ができる。使用することができる他の方法は、アミンとあらかじめ製造したアル キルまたはアリルシアナミドの反応を含む。５ａｆｅｒ＋　Ｓ、Ｒ，ａｔ　ａｔ 、　Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、＋　１３＝９２４（１９４８）を参照。これは 置換基が同じでない１．３−ジ置換グアニジンの製造のためわれわれの研究室に おいて採用した方法である。非対称グアニジン類の最近の合成については、Ｇ、 Ｊ、Ｄｕｒａｎｔ　ｅｔ　ａｌ＋　Ｊ。 Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｗ、、　２８：１４１４（１９８５）およびＣ，Ａ、Ｍａｒｙ ａｎｏｆｆ　ｅｔ　ａｌ−＋　Ｊ、Ｏｒｇ。 Ｃｈｅ＋＊、、　５１：１８８２（１９８６）を見よ。 試験管内でシグマ受容体の特徴化は選択的薬物リガンドの不存在のため困難であ った。大部分のベンゾモルファンアヘン剤は他のアヘン剤受容体（ミュー、デル タ、カッパ）と交差反応し、それ故受容体の特徴化および単離には限られた価値 しかない、　Ｐａ５ｔｅｒｎａｋ　ｅｔａｌ、（１９８１）　Ｊ、Ｐｈａｒｍｃ ｏｌ、　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒ、　２１９．１９２−１９８；　Ｚｕｋｉｎ、　Ｒ ，Ｓ、　＆Ｚｕｋｉｎ＋　Ｒ，Ｓ、　＆　Ｚｕｋｉｎ、　Ｓ、Ｒ，＋（１９８１ ）　Ｍｏ１．　Ｐｈａｒｎ＋、　２０＋　２４６−２５４；Ｔａ１１．　ＳＪ、 、（１９８５）　Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｐｈａｒｍｃｏｌ、　１０９．３３−４１参 照。（’ＨＡＤＴＧは特異的にそして高い親和力を持ってモルモット脳膜中の単 一クラスの結合部位へ結合する。これら部位の結合特性および薬物特異性プロフ ィルは、１）ナロクソン非惑受性および（＋）ＳＫＦＩなベンゾモルファンアヘ ン剤の右旋性異性体に対する立体選択性、２）ハロペリドールおよびある種のフ ェノチアジン抗精神病薬に対する高い親和力、３）（−）ブタクラモールに対す る立体選択性、および４）ドパミンおよびアポモルフインに対する非感受性を含 む、シグマ受容体に対して提案されたものと一致する。（’ＨＩＤＴＧＨはシグ マ部位に対し選択的であるたった二つの公知化合物の一つである。もともとドパ ミン自家受容体拮抗体として提案された他のもの、（＋）（”８１３−ＰＰＰは 、最近ラット脳膜結合アッセイにおいてシグマ部位に対して選択的であることが 示された＊　Ｌａｒｇｅｎｔ　ｅｔａｌ、　（１９８４）前出参照、われわれの 実験はモルモットにおいてこれら知見を確認し、そして〔知ＩＤＴＧおよび（＋ ）［”）１１３−ＰＰＰは実質上同じ受容体結合特性および薬物選択性プロフィ ルを持っていることを示した。以前の研究は、シグマ部位は（±）　（’Ｈ）　 ５ＫＦＩ０．０４７．　（＋）［３Ｈ］エチルケタゾシンおよび（＋）（”Ｈ］ ５ＫＦＩ０，０４７で標識できることを示した。しかしながら、これらリガンド はシグマ部位に対して選択的でなく、そして結合アッセイにおいて交差反応する 非シグマ結合部位をマスクするために適当な薬物の存在を必要とする。 （３Ｈ］ＤＴＧはシグマリガンドとして多数の利点を持っている。 それはシグマ部位に対して高度に選択的であり（（’）ｌ　ｌ５ＫＦ１０゜０４ ７および（＋）［３Ｈ］エチルケタゾシンと異なって）、それは高程度の特異的 結合を有しく総結合の９０〜９７％）、そしてそれはキラルでない比較的単純な 化学構造を有する（（＋）（”）１１３−ＰＰＰおよびベンゾモルファンアヘン 剤と異なって）。これらの特徴は、構造対活性研究のための類縁体の合成のため の、そして不可逆的シグマ受容体リガンドの設計のための、例えばＲおよびＲｏ の少な（とも一方がアジド置換炭素環アリールである式■の化合物の良い出発化 合物である。 （３Ｈ］ＤＴＧで標識したシグマ部位は、それがナロクソン不感受性であり、そ してベンゾモルフアン薬物の右旋性異性体に対し立体選択性を示すので、普通の （ミュー、デルタ、カッパ）アヘン剤受容体に明らかに関係しない。これはアヘ ン剤の左旋性異性体に対して選択的なナロクソン感受性アヘン剤受容体に比較し て逆の立体選択性である。シグマ受容体はそれ故シグマ“アヘン剤”受容体と呼 ぶべきではない。精神異常発現アヘン剤の右旋性異性体に対するシグマ受容体の 薬物選択性は、ベンゾモルフアン薬物の慣用のアヘン剤受容体活性とシグマ（行 動的）活性との間を弁別するように計画された動物実験における右旋性対左旋性 アヘン剤の薬理学的プロフィルとよ（相関する。Ｃｏｗａｎ、　Ａ、（１９８１ ）　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉ、　２８．１５５９−１５７０；Ｂｒａｄｙ、　Ｋ、Ｔ、 　ｅｔ　ａｌ、（１９８２）　５ｃｉｅｎｃｅ　２１５＋　１７８−１８０；　 Ｋｈａｚａｎ、　Ｎ、　ｅｔａｌ　（１９８４）　Ｎｅｕｒｏｐｈａｒ＋ａａｃ ｏ１．２３．９８３−９８７参照。 （”ＨＩＤＴＧを用いるオートラジオグラフィー研究はスライド標本としたネズ ミ脳切片におけるシグマ部位を可視化し、そしてシグマ部位は（’ＨＩＤＴＧ結 合の分布がミュー、デルタ、カッパアヘン剤受容体の分布から区別されるから、 ミュー、デルタおよびカッパ受容体から異なっていることを確認する。しかしな がら（’Ｈ］ＤＴＧ結合部位の解剖学的分布は、（＋）（”ＨＦ２−ＰＰＰ結合 部位の分布に同じか非常に類偵しており、二つの放射性リガンドは同じ結合部位 を標識することをさらに確認する。（’Ｈ］ＤＴＧ結合部位のハロペリドールお よびドパミン自家受容体拮抗体でもあるある種のフェノチアジン抗精神病薬（表 ■）に対する高い親和性は、シグマ受容体とドパミンＤｔ受容体との関係につい て疑問を生じる。提出された結果は、ドパミン受容体のオートラジオグラフィー 分布は似ておらず、そしてドパミンおよびアポモルフインは（３Ｈ）ＤＴＧ結合 部位と相互反応しないため、［’Ｈ］ＤＴＧ部位はドパミンＤｚ受容体から明瞭 に区別される。 さらに、〔３Ｈ１で標識したシグマ部位は、（＋）ブタクラモールに対して立体 選択性であるドパミンＤ２受容体に比較して逆の立体選択性である（−）ブタク ラモールに対し立体選択性である。 ［３Ｈ］ＤＴＧで標識したハロペリドール感受性シグマ部位は、競合実験におい て強力な幻覚誘発性ＰＣＰに対して緩和な親和性を持つことが発見された。これ は（＋）（’ＨＩＳＫＦＩ０．０４７または（十）［’Ｈ］３−ＰＰＰをシグマ 部位の標識に使用した他者による知見と一致する。しかしながらＰＣＰ受容体結 合アッセイにおいては、〔コＨＩＰＣＰはＺｕｋｉｎおよび協力者、　Ｚｕｋｉ ｎ　ｅｔ　ａｌ、（１９８１，１９８６）前出、によってＰＣＰ／シグマアヘン 剤受容体と命名され、（３ＨＩＤＴＧまたは（＋）［’Ｈ］３−ＰＰＰで標識し たハロペリドール感受性シグマ部位とは別物であるハロペリドール非感受性ＰＣ Ｐ結合部位を主に（専らでなく）標識した。対称的に、（”ＨＩＤＴＧは、すべ ての特異性結合はハロペリドールによって置換され、そして［″Ｈ］ＤＴＣ；結 合の解剖学的分布はＰＣＰ受容体の分布から区別されるから、ハロペリドール感 受性シグマ部位を専ら標識するように見える。さらに未標１１ｉＤＴＧは［”Ｈ ］−ＰＣＰ結合アッセイにおいて実質上不活性である（　Ｓ、　Ｗｉｌｌｉａｍ 　Ｔａｏ＋、　Ｅ、１．ＤｕＰｏｎｔ　ＤｅＮｅｍｏｕｒｓ　＆　Ｃｏ、　Ｗｉ １ｍｉｎｇｔｏｒ＋＋　Ｄｅｌａｓｖａｒｅ、私信）。これら二つの結合部位の どちらがＰＣＰおよび精神異常発現ベンゾモルファンアヘン剤の行動的効果を発 生させるのに責任があり、そしてそれ故Ｍａｒｔｉｎｅｔ　ａｌ　（１９７６） 、前出によって仮説されたシグマ受容体に相当するかについてつくらか論争が存 在する。　Ｚｕｋｉｎ及び彼の協力者はＰＣＰおよび精神異常発現性ベンゾモル ファンアヘン剤の行動効果はそれへペンゾモルファンアヘン剤が緩和を親和力を もって結合するハロペリドール非感受性ＰＣＰ部位によって仲介されると主張し た。 Ｌａｒｇｅｎｔ　ｅｔ　ａｌ　（１９８６）前出は、ＰＣＰおよび精神異常発現 性アヘン剤（７）　行動効果はハロペリドール感受性シグマ部位を通じて仲介さ れることが等しく可能があることを示唆する情況証拠を引用した。 （３）１］ＤＴＧはハロペリドール感受性シグマ部位のみを標識し、そしてハロ ペリドール非感受性ＰＣＰ部位を有意義に相互作用しないので、プロトタイプの シグマリガンドとして本発明のＤＴＧまたは他の対称置換グアニジン類を使用す る行動研究はこの論争を解決するに違いない。 多分このおよび他の研究から生まれたシグマ部位の薬物選択性についての発見の 最も重要な局面は、それらは精神分裂病の治療に臨床的に使用される非常に強力 な催幻覚薬（ハロペリドール、フェノチアジン類）と相互作用することである。 この策謀する薬物選択性プロフィルは抗精神病薬作用および異常脳機能における シグマ受容体の役目の研究を目的とした研究を容易にする。選択的シダマリガン トとしてＤＴＧおよび類似のＮ、Ｎ’　−ジ置換グアニジン類の利用可能性はそ のような研究を容易にするのに役立つに違いない。 グアニジン類一般および特にＮ、Ｎ’　−ジフェニルグアニジンのように、式■ の化合物を含む本発明のジ置換グアニジン類はゴム、例えば天然ゴムおよびエポ キシ基含有アクリルゴムの加硫促進剤であり、そしてＮ、Ｎ’−ジフェニルグア ニジンと同じ態様でそのような目的に使用することができる。このため（３Ｈ］ ＤＴＧは加硫ゴム製品、例えばタイヤトレッド中へ添加することができ、水によ るそれからのゴムの損失速度を放射能の損失速度によってモニターすることがで きる。 本発明の化合物はシグマ受容体に対して高度に選択的な親和性を有する。従って それらはベンゾモルフアンの活性の一部、すなわち他の非シグマ受容体へのベン ゾモルフアンの結合によって生成されたものではない、ハロペリドール惑受性シ グマ受容体への結合によって生じたものを持つことができる。例えば、ベンゾモ ルフアンはシグマ受容体において散瞳および頻脈およびそれらの顕著な精神異常 発現効果を発生させるように作用し得る。従ってＤＴＧは、今日までベンゾモル フアンの非シグマ受容体との交差反応性によって妨げられていたシグマ受容体に よって仲介される生理学的効果を示すための効果的な道具である。加えて、式■ の化合物の少なくとも一部、例えばＮ、Ｎ’−ジエフェニルおよびＮ、Ｎ’　− ジー０−メチルグアニジンは、シグマ受容体がノルアドレナリン放出を刺激する マウス輪精管中の神経末端中のシグマ受容体上の拮抗剤であり（われわれによっ て発見された現象であり、そしてＣＮＳ刺激剤および抗うつ薬のための新しいス クリーニングテストを提供する）、そしてそのため血圧降下剤（抗高血圧剤）で ある。弐■の他の化合物はアゴニストであり、そのため血圧を上昇する。催幻覚 ベンゾモルフアン、例えば（＋）３−ＰＰＰおよびＴＣＰの例えばマウス輪精管 のシグマ部位におけるシグマ受容体結合活性に対する拮抗剤である化合物は、幻 覚に関連した精神病、例えば精神分裂病の症状の緩和に有用である。 本発明の治療方法面、例えば幻覚に関連した精神病に罹患しているヒトの治療の 実施においては、そのヒトへ、幻覚を緩和するのに有効な量において、催幻覚性 ベンゾモルフアンのシグマ受容体結合活性に対する拮抗剤である水溶性Ｎ、Ｎ’ −ジ置換グアニジンが投与される。好ましくは該グアニジンは、ＲおよびＲ′が 同じで、そして各自生なくとも炭素数４のアルキル基、炭素数３ないし１２のシ クロアルキル基、または少なくとも炭素数６の炭素環アリール基である式■の化 合物の一つである。好ましい面においてはヒトは精神分裂病であり、他の好まし い面においては、化合物はＮ、Ｎ”−ジー（２−メチルフェニル）グアニジン、 Ｎ−アダマンチル−Ｎ。 −シクロへキシルグアニジン、Ｎ−アダマンチル−Ｎ’−（２−メチルフェニル ）グアニジン、Ｎ−シクロへキシル−Ｎ’−（２−メチルフェニル）グアニジン 、Ｎ、Ｎ’−（２−シクロヘキシル）グアニジンまたはＮ、　Ｎ’−ジー（２− アダマンチル）グアニジンである。 Ｎ、Ｎ’−ジ置換グアニジン類、例えば式Ｉの化合物は、プロトタイプのシグマ ベンゾモルフアンに対してアゴニスト的、アンタゴニスト的または逆アゴニスト 的態様に作用することができる。従ってアンタゴニストとして作用する化合物は 、実験動物による標準的テストによって決定することができる、ベンゾモルフア ンによって発生するものと反対方向に瞳孔寸法、脈拍および精神活動に作用する ことが期待できる０個々の化合物の与えられた投与量についての活性のタイプお よびレベルは活性の各自についての良く知られた薬理学プロトコールを使用する 日常的実験によって慣例的に決定することができ、その投与量において処置し得 る対応する症例は薬理学的結果に基いて当業者に良く知られているであろう。本 発明の化合物は、既知の薬剤プロリキシンおよびソラジンに類似して、精神病的 状態、例えば精神分裂病を治療するそれらの抗精神病活性のため、およびシグマ 受容体中毒状態の診断のために特に価値がある。 本発明の３Ｈ−Ｄ　Ｔ　Ｇは、シグマ受容体結合部位に対する選択的リガンドで ある、本発明のジ置換グアニジンのような化合物のためのスクリーニング道具と して有用である。それらはそのままでシグマ受容体仲介催幻覚精神障害の診断お よび治療に有用な化合物のスクリーニングに有用である。例えば、推定される天 然リガンドに対するアゴニストである化合物は内分泌性リガンドの過多の結果で あるそのような精神障害を一時的に再発させ、そして天然リガンドの異常な不足 の結果である精神障害を緩和するであろう。置換ジグアニジンが推定内分泌リガ ンドに対する拮抗剤である時は反対が発生する。どちらの場合でも、投与したリ ガンドによる精神障害の一時的変化は、それはシグマ受容体関連病であることを 確認し、それによって可能性ある他の原因、例えば薬物中毒を排除し、そしてそ の治療を容易化する。 （’Ｈ）ＤＴＧはわれわれの研究室において決定したように高い親和力をもって ヒト脳膜受容体へ結合する。それ故（Ｈ）ＤＴＧの他の用途は、受容体密度また は正常組織（影響されない対照）と対比して精神または神経病理を示す患者の死 後組織における機能の測定によって精神病の神経化学を開拓することである。こ の論題は受容体結合アッセイおよびオートラジオグラフィーによって研究するこ とができる。 本発明の化合物は経口的に、または注射、例えば筋肉内、腹腔内または静脈内注 射によって投与することができる。最適投与量は慣用方法によって決定すること ができる。本発明に使用するジ置換グアニジン類の全部でなくても大部分が実質 上水不溶性のため、それらは通常それらのプロトン化形で、例えば有機もしくは 無機酸の薬剤学的に許容し得る塩として、例えば塩酸塩、硫酸塩、ヘミ硫酸塩、 リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、クエン酸塩等として投与される。 本発明の化合物は慣用の賦形剤、すなわち薬剤学的に許容し得る、活性化合物と 有害的に反応しない非経口、経口または局所用途に適した有機もしくは無機担体 物質との混合物中に使用することができる。適当な薬剤学的に許容し得る担体は 、水、食塩水、アルコール、植物油、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラク トース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフ ィン、香油、脂肪酸モノ−およびジグリセライド、ペンタエリスリトール脂肪酸 エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等を含むが、そ れらに限らない、製剤は滅菌することができ、もし望むならば補助剤、例えば滑 沢剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧調節塩類、緩衝剤、着色剤、矯 味および／または芳香物質、および活性化合物と有害に反応しない類似物質を混 合することができる。 非経口用途のためには、溶液、好ましくは油性または水性溶液、懸濁液、エマル ジョン、座薬を含む内植等が特に適当である。アルプルは便利な単位投与量であ る。 経口使用のためには、錠剤、丸剤またはタルクおよび／または炭水化物担体また は結合剤その他を有するカプセルが特に適当であり、担体は好ましくはラクトー スおよび／またはコーンスターチおよび／またはバレイショデンプンである。甘 味をつけたビヒクルが使用されるシロップ、エリキサ−等を使用することができ る。活性物質が例えばマイクロカプセル化、多層コーティング等によって応差的 に崩壊し得るコーティングによって保護されている徐放製剤を処方することがで きる。 一般に本発明の化合物は、単位投与あたりＮ、Ｎ’　−ジ置換グアニジンを約０ ．１ないし約ＩＱ３ｍＭ含む単位投与形に分配される。 非経口投与、例えばｉ、　ｐ、またはｉ、ｍ、が好ましく、本発明の化合物は精 神病、例えば精神分裂病に悩んでいるヒトの治療に特に価値がある。この点に関 し、それらは既知のメジャートランキライザーと実質上同じ態様で使用すること ができる。　゛使用される活性化合物の実際に好ましい量は、使用される特定の 化合物、処方された特定の組成物、投与モード、および特定の投与部位に応じて 変わることが認められるであろう。与えられた投与プロトコールに対する最適の 投与割合は、以上のガイドラインに関して実施して慣用の投与量決定テストを使 用して当業者により容易に確かめることができる。 Ｎ、　Ｎ’　−シーｏ−）’Ｊルグアニジンのシグマ受容体結合活性は、内因性 シグマ受容体リガンドの精製および特徴化に関する研究の間に発見された。この 研究の初期において、多数の抽出溶媒がウシ脳から内因性シグマ受容体リガンド の抽出するそれらの適正についてテストされた。ある種の抽出溶媒（特にアセト ン）はモルモット脳膜結合部位から（＋）（３Ｈ）ＳＫＦｌｏ、０４７を強力に 置換した未同定物質を含んでいた。この物質の受容体結合特徴化は、結合活性は 競合的で、可逆的で、むしろ強力であることを示した。これら溶媒中に発見され た３化命物の強力なシグマ受容体結合性のため、これら化合物は逆相ＨＰＬＣ操 作を使用して均一にあるまで精製さみ合わせによって決定された。抽出溶媒から 精製された三つのシグマ受容体結性化合物の一つは１．３−ジー０−トリルグア ニジン（ＤＴＧ）であることが証明された。 その構造上の特徴化の後、合成りＴＧが（＋）　（”Ｈ）　ＳＫＦ　１０゜０４ ７結合アッセイにおいてテストされ、そして（＋）　（”Ｈ）　５ＫＦ１０，０ ４７をその脳膜結合部位から７０ｍＭのＫｄをもって置換することが発見された 。この置換は競合的であり、そして完全に可逆的であった。 単離されそして特徴化された他の二つの化合物は、ジフェニルグアニジン（ＤＰ Ｇ）およびジブチルグアニジン（ＤＢＧ）であって、両方とも（＋）（”Ｈ）Ｓ ＫＦｌｏ、０４７結合アッセイにおいて活性であった。 （＋）（”）Ｉ）ＳＫＦｌｏ、０４７をその結合部位から置換するＤＴＧおよび 関連化合物の高い力価のため、ＤＴＧのトリチウム標識誘導体を合成することが 決定された。そのためＮ、　Ｎ’−ジー（２−メチル−４−ブロモフェニル）グ アニジンがトリチウムガスによる接触還元にかけられ、これは二つの臭素原子を トリチウム原子で置換し、Ｎ、Ｎ’−ジー（ｐ　（”Ｈ）　−ｏ−）リル）グア ニジンを以下に記載するように生成した。 これ以上考究することなく、当業者は以上の説明を使用して、本発明をその全範 囲にわたって利用できるものと信じられる。それ故以下の好ましい具体例は単に 例証と解すべきであり、開示の残部の限定と解すべきではない。 以上の説明および以下の実施例において、すべての温度は未補正の摂氏で述べら れ、そしてすべてのパーセントおよび部は、特記しない限り重量による。 製−盈 一般的操作： 融点は未補正である。ＮＭＲスペクトルは３００ＭＨｚで作動するゼネラル、エ レクトリックＱＢ−３００スペクトロメーターに記録した。化学的シフト（δ） は参照として重水素化した溶媒の残存プロトン信号（ＣＨＣＤ、ＯＤ　δ３．３ ００．　ＣＨＣｌｓ　δ７．２６０゜ＨＤＯδ４．８０）、または溶媒の１３０ 信号（ＣＤ、ＯＤ　δ４９゜Ｑ　Ｑ、ＣＤＣＩｓ　δ７７．　ＯＯ）を使用して 与えられる。すべての溶媒は試薬級品質であワた。乾燥溶媒が必要な場合、それ らは使用前ＣａＨｔまたはＮａから蒸留された。 アダマンタン−１−イルシアナミドは、Ｇｅ１ｕｋ、　ＮＪｊ、、ｅｔ　ａｌ＋ 　Ｊ。 Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｗ−、１９６９，１２，７１２−７１６によって以前記載され たように、アミン゛とエチルエーテル中の臭化シアンとから製造された。（２− メチルフェニル）シアナミドも同様にして製造された。 Ｎ、Ｎ’−ジー（アダマンクン−１−イル）グアニジン塩酸塩は、Ｇｅ１ｕｋ　 ｅｔ　ａｌの方法に従って合成された。 蒸留水（７０ｍ）中具化シアン（８４６ｍｇ、　８．０６ミリモル）のかきまぜ た溶液へ、４−ブロモ−２−メチルアニリン（アルドリッチ、エーテル／ペンタ ンから再結晶）２．９９７ｇ（１６，１１ミリモル）を少量づつ加えた。添加中 白色沈澱が生成した。混合物を８０℃で４時間かきまぜた。０℃で１２時間冷却 した時、粘着性の黄色油が分離し、そして捨てた。透明な水相を約３０ｄへ濃縮 した。生成した白色沈澱を混合物を加熱して再溶解した。これを４℃で１２時間 放置した。口過は白色固体４３０■を与えた。そのうち２００■部分を熱水１０ Ｉｄに溶かし、１０％ＫＯＨ溶液５ｉｄで処理した。 混合物をＣＨＣ１３で抽出し、抽出液を塩水で洗い、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏａで乾燥し た。溶媒の蒸発は褐色の固体１７１■を与え・ＣＨＣ１３がらの再結晶は小さい 白色針状晶として４−Ｂｒ−ＤＴＧ１２０■（８％）を与えた。ｍｐ２０９−２ １０℃；ＮＭＲ（３００ＭＨｚ。 ＣＨｚ　ＯＤ　、　Ｔ　Ｍ　Ｓ　）δ２．２４　（ｓ、３）、７．１２−７．２ ５　（ＡＢ。 ２、Ｊ＝８Ｈｚ　）、７．３５　（ｓ、ｌ）　；　夏　Ｒ（ＫＢｒ）　３４６０ ゜３３４０．１６３０ｃｍ−’；元素分析ＣＩｓ　Ｈ＋　ｓ　Ｎ　３　Ｂ　ｒ　 、計算値：Ｃ９４５，３７；Ｈ，３，８１；Ｎ、１０．５８　；実測値：Ｃ，４ ５，３４；Ｈ。 ３．５６．Ｎ、１０．５０ ２、３Ｈ−ＮＮ’−ジー０−トリルグアニジン　３ＨＤＴＧこのように製造した ４−Ｂｒ−ＤＴＧ２５ｍｇ（０，１ミリモル）を〔３Ｈ〕ガス（７）２０Ｃｉの 存在下接触還元のためＡｍｅｒｓｈａｍ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（ＡｒｌｉＡ ｒｌｌｎ　）ｌｅｉｇｈｔ、　１１１　）　ヘ提出した。各自２５％エタノール ０゜２ｉ中の粗製放射活性生成物２ｍＣ１分量づつを溶出のため０．１％トリフ ロロ酢酸中ＣＨ，ＣＮ勾配（６０分内に０−３５％）を用いてＶｙｄａｃ　ＴＰ ２１８オクタデカシリカカラム上の逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−Ｈ ＰＬＣ）によって精製した。流量はｌｄｌ／分であった。１分分画を集めた。こ の分画の部分標本を１００倍希釈し、もとの分画の０．１μｌに相当する希釈し た分画１０μＥ部分標本を１０Ｍ１シンチレ一シヨン流体に溶解し、シンチレー シジンスペクトロメーター中でカウントした。ＨＰＬＣ装置は２台のＷａ　ｔｅ ｒｓＨＰＬＣポンプと、自動電子勾配コントローラーと、そしてＫｒａ　ｔｏｓ 可変波長ＵＶ分光光度計からなっていた。放射活性は、４１分における主要な対 称的ＵＶ　（２２０ｎｍ）吸収ピークと一致する主要な対称的ピークとして溶出 した。これは標準的未標識ＤＴＧがこのＲＰ−ＨＰＬＣにおいてカラムから出現 するのと同じ溶出時間である。 （’Ｈ）ＤＴＧの比活性は、定量的ＵＶ−分光分析によって決定された主要ＵＶ 吸収ピーク下にあるＤＴＧの量と、そして定量的液体シンチレーションスペクト ロメトリーによって決定したこのピークに関連した放射活性の量を基にして、５ ２Ｃｉ／ミリモルであること２−メチルフェニルシアナミド（１，１０７ｇ、０ ．３８０ミリモル、０−トルイジンから５ａｆｅｒ、　ｅｔ　ａｌ　（１９４８ ）の方法によって製造〕と２−メチル−４−ニトロアニリン塩酸塩とのクロロベ ンゼン（４５ｍ）中の激しくかきまぜた混合物を９０°Ｃで３時間加熱し、２５ °Ｃへ冷却した。得られる淡黄色沈澱を集め、ＣＨＩＣＩ□で洗い、乾燥すると 所望の生成物の塩酸塩２．２８４ｇ（９１％）を与えた。ＮＭＲにより純粋。６ ８１■サンプルを無水エタノールから２回再結晶すると、次の反応に適当な淡黄 色微結晶として所望生成物の６００ｍｇ（８８％）を与えた。ｍｐ　１９６−２ ００’Ｃ；ＮＭＲ（ＣＤＯＤ、３００ＭＨｚ）　２．３７　（ｓ、３）、２．４ ７　（ｓ、３）、７．３３−７．４０　（ｍ、４）、７．５９　（ｄ、１）、８ ．１８　（ｄｄ、１）、８゜２７　（ｄ、１）塩酸塩の４７３■サンプルを熱水 に溶かし、口過し、２５℃へ冷却し、５Ｎ　ＮａＣＨ３１ｄで処理した。生成し た題記化合物の明白色沈澱（遊離塩基）を乾燥しく４０３■、９２％）、そして ９５％エタノールから２回再結晶し、黄色板状晶として分析用サンプルを得た。 ｍｐ１７７−１７９℃；ＮＭＲ（ＤＣ３０Ｄ、３００ＭＨｚ）　２．３１　（ｓ 、６）、　７．０１−７．３５　（ｍ、５）、　７．９８　（ｄｄ、１）、８． ０６　（ｄ、１）元素分析Ｃｌｓ　ＨＩｂ　Ｎ　４０　！に対する計算値　Ｃ６ ３，３７；Ｈ，５，６７；Ｎ、１９．７１　ｉ実測値　Ｃ２６３，４１；Ｈ，５ ，４２、Ｎ、１９．９０ｂ、Ｎ−（２−メチル−４−アミノフェニル）−Ｎ’　 −（２−メチルフェニル）グアニジン　ａ バール水素化フラスコへ無水エタノール３０ｄ中のＮ−（２−メチル−４−ニト ロフェニル）−Ｎ’−（２−メチルフェニル）グアニジン塩酸塩（４７８μｌｇ ）の溶液を仕込んだ。炭末上３０％Ｐｄ（７１ｍｇ）を加え、混合物を６０ｐｓ ｉで２５°Ｃにおいて１２時間水素化した。すべての以後の操作はアルゴン雰囲 気中で実施した。混合物を遠心し、セライトを通して口過し、口液を減圧下２　 ｍｌｌへ濃縮した。エーテル（２１ｄ）を加え、２０℃において４時間後白色沈 澱を集め、乾燥し、次の反応に適当な題記化合物（アミン塩酸塩の４０６＋ｎｇ 　（７８％）を得た。ｍ　ｐ　２３２．５−２３４．５°Ｃ，ＮＭＲ（ＣＤ　ｙ 　ＯＤ　、３００　Ｍ　Ｈｚ　）６２．２２　（ｓ、３）、２．３４　（ｓ、３ ）。 ６．６０　（ｄｄ、１）、６．６６　（ｄ、１）、６．９８　（ｄ、１）、７． ２６−７．３８　（ｍ、４） ｃ、Ｎ−２−メチル−４−イソシア　−トフェニル　−Ｎ”−２−メチルフェニ ル　グアニジンＷ　ＤＴＧＩＴＮａＯＡｃ　（１，７６７ｇ、２１．５ミリモル ）およびＨＯＡｃ（０゜８３９ｇ、１４．０ミリモル）を溶液の最終容積が１０ ０１ｄになるように乾燥メタノール中に溶かした。この溶液の１２．７　ｄ部分 標本をＮ−（２−メチル−４−アミノフェニル）−Ｎ’　−（２−メチルフェニ ル）グアニジン塩酸塩１９９■（０，６８６ミリモル）へＡｒ雰囲気下で加えた 。次にチオフォスゲン（５４，７μＩ！、８６．７ｍｇ、　Ｏ。 た。反応をシリカゲルＴＬＣ（５００：　１００　：　１＝ＣＨＣ１ｓ　：Ｍｅ ＯＨ：　ＨＯＡｃ）によって判定してかきまぜて完結した。水（２０ｄ）を加え 、混合物を１９−へ減圧濃縮した。 次のステップは、イソチオシアネート基が他の分子上のグアニジン遊離塩基と反 応することを最小にするためすばやい順序で実施した。上の１９ｄｆｉ縮液を０ °Ｃへ冷却し、そして氷冷した飽和ＮａＨｃ　ｏ　ｓ　（１５ｄ　）で処理した 。白色沈澱を含んでいる生成した混合物をＣＨＣｌ３　（４Ｘ１５ｄ）で抽出し た。合併した抽出液を氷冷した食塩水で洗い、乾燥しくＭ　ｇ　Ｓ　Ｏ−４）　 、セライトで口過し、０濃縮し、ヘキサンを加えた。最終混合物の蒸発乾固はガ ム状の白色固体（２６３■９１１５％）として粗製塩酸塩を与えた。これを無水 エタノール（２ｄ）中に取り、エーテル（８０ｄ）を加え、得られた白色懸濁液 を放置して白色針状晶の小塊を得た。結晶を遠心し、エーテルで洗い、ＣａＸ２ ｍｌ＞、乾燥して題記化合物１７３■（７６％）を得た。ｍｐ１９５−１９７° Ｃ（予熱した浴）　；ＮＭＲ（ＣＤｚＯＤ、３００　Ｍ　Ｈｚ　）６２．３４７ 　（ｓ、３）、２．３５１　（ｓ。 ３）、７．２３　（ｄ、１）、７．３１　（ｓ、１）、７．３７，７．２６−７ ゜４０　（ｍ、４）；　ＩＲ（ＫＢｒ）３４６６．３１３８．２９２７゜２１５ ２．２１１９．　１６４６．１６３１ｃｍ−’元素分析Ｃ＋ｔｈＨ＋ｔＣＩＮ４ Ｓに対する計算値：Ｃ，５７，７４：Ｈ。 ５．１５；Ｎ、１６．８３；実施値：　Ｃ，５７，６０；Ｈ，５，２０；Ｎ。 １６、６４ ＤＩＣ；ＩＴのトリートリチウム化物はＮ−（２−メチル−４−二トロー６−ブ ロモフェニル）−Ｎ’　−（２−メチル−４，６−ジブロモフェニル）グアニジ ンの接触トリチウム化（Ａａａｅｒｓｈａｍ）によって製造したトリチウム化し たＮ−（２−メチル−４−アミノフェニル）−Ｎ’　−（２−メチルフェニル） グアニジンから出発して製造される。トリートリチウム化したアミノ化合物はそ の製造が後で記載され、そしてシグマ受容体の可溶化に使用した４−アジド化合 物のトリチウム化物の製造のための直前の前駆体としても使用された。 Ｎ−ア゛マン　ソー１−イルーＮ°−シクロへキシルグアニジンＣＩ アダマンクン−１−イルシアナミド（５１４■、２．９２ミリモル）およびシク ロヘキシルアミン塩酸塩（３９８■、２．９３ミＩＪ　モル）を−所に微細に粉 砕し、２００　’Ｃで１ｏ分間加熱した。生成するガラス状固体を粉砕し、沸騰 する５％ＨＣ１５０ｄで２回抽出した。不溶物を口過し、乾燥した。３４６■、 ｍｐ２６４−２７０″Ｃ（ｐ、ｈ、ｂ、２４０℃）水性抽出液を２５℃へ冷却す ると白色沈澱が生成し、これを口取する。５６■合計粗製物収率４４％粗製物サ ンプル５０■のＥ　ｔ　ＯＨ／　Ｅ　ｔ　ｚ　Ｏからの結晶化は白色針状結晶（ ２５ｍｇ、　ｍｐ　２６９−２７１°Ｃ（ｐ、ｈ、ｂ、２４０”Ｃ）文献値２６ ８−２６９℃）を与えた。ＩＨＮＭＲ（ＣＤｓＯＤ）１．２０８−１．４７４　 （ｍ、５Ｈ）、１．７４４　（ｓ、９Ｈ）、１．９６７　（ｓ、８Ｈ）、２．１ １９　（ｓ、３Ｈ）、３．４３４　（ｍ、ＩＨ）。 ＩりＣＮＭＲ（ＣＤ３０Ｄ）（結合しないブロードバンド）２５．５５．２６． ２６．３０．９６，３３．７４，３６１４，４２．７３Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ ’　−（２−メチルフェニル　グアニジン乾燥クロロベンゼン中シクロヘキシル アミン塩酸塩（３１０■。 ２．２８ミリモル）および（２−メチルフェニル）シアナミド（３６５■、２． フロミリモル）の懸濁液を１２５−１３５°Ｃで４時間加熱した。溶媒を加熱減 圧蒸発し、残渣をＣＨｚＣｌｚと２０Ｘ８ｄｌＯ％にＨＣＩに分配した。水性抽 出液をｐＨ９−９，５へアルカリ性とし、４℃で一夜放置した後白色沈澱を集め た。Ｅ　ｔ　ＯＨ／ＨｚＯからの再結晶は白色針状晶１４０■（２２％）を与え た。ｍｐ１４５　１４６Ｌ、’ＨＮＭＲ（ＣＤｓＯＤ）１．１４９　２．０５４ 　（ｍ。 １０Ｈ）、　２．１６４　（ｓ、３Ｈ）、３．５０　（ｍ、ＩＨ）、６．８７５ （ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．５Ｈｚ　）、６．９６８　（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７．５Ｈｚ） 。 ７．１１８　（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．１７７　（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７ 、５　Ｈｚ　）分析値：Ｃ＋４Ｈｚ＋Ｎｓにする計算値　Ｃ，７２，６９；Ｈ。 ９．１５；Ｎ、１８．１６　実測値　Ｃ，７２，７２；Ｈ，９，２４：Ｎ。 １８、１８ Ｎ−ア゛マン　ノー１−イル　−Ｎ”−２−メチルフェニルグアニジン 乾燥クロロベンゼン中アダマンタン−１−イルシアナミド（１５１ｇ、０．８５ ７ミリモル）およびｏ−）ルイジン塩酸塩（１Ｂ６■。 ０、８５７ミリモル）の懸濁液を１００−１３０°Ｃの間で４．５時間加熱した 。クロロベンゼンを加熱減圧蒸発し、残渣（２８５■）を水１８Ｍ１に取った。 ガム状の不溶物は捨てる。水性抽出液をｐＨ９−９，５に調節すると沈！（１９ ４■、７１％）が生成した。ＥｔＯＨ／Ｈ，Ｏからの２回の再結晶は分析サンプ ルを与えた。ｍｐ１６０−１６１″Ｃ，’ＨＮＭＲ（ＣＤ３００）　１．７４２ 　（３，６Ｈ）　、２−０５０　（ｄ、６Ｈ，Ｊ＝２．４ｚ）、　２．０２９　 （ｓ、３Ｈ）、６．９５６　（ｊ、ＩＨ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．０５６　（ｔ 、ＬＨ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）。 ７．１６８　（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．２１３　（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７ 、５　Ｈｚ　）分析値ＣＩ＊　Ｈｚ　ｓ　Ｎ　３　：計算値Ｃ，？６．２８　； Ｈ，８，８９；Ｎ、１４．８３：実測値Ｃ，７６，２５：Ｈ，８，８６；Ｎ、１ ４．６０アダマンクン−１−イルシアナミド（２９９ｍｇ、１．７０ミリモル） およびＯ−ヨードアニリン塩酸塩（４３３■、１．７０ミリモル）を−所に微細 に粉砕し、２００℃で１０分間加熱した。生成した黒色ガラス状固体を粉砕し、 そしてＥｔＯＨ／Ｅｔ、Ｏから５回再結晶した。生成する淡青色針状晶（８０■ ）をＥｔＯＨ４ｄに溶かし、底から頂部までセライト、炭末、活性アルミナおよ び砂を詰めた短い（＜ＩＣＩ）カムを通した。無色の溶出液をＥｔｚ０５ｍ１１ ！で希釈し、−夜Ｅｔｚｏ拡散チャンバー内に放置した。白色針状晶を吸引口過 して集めた。４０ｇ、ｍｐ２７４−２７５°ＣさらにＥｔ、０５ｍｇの添加は同 じ物質の２番晶（３１■）を与えた。合計収率２１％ＩＨＮＭＲ（ＣＤｓＯＤ） １．７７９　（ｓ、６Ｈ）、　２．０９０　（ｓ、６Ｈ）　。 ２．１６５　（ｓ、３Ｈ−）、７．１６８　（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７ ゜３８８　（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝９．１Ｈｚ）、７．５０３　（ｔ、ＩＨ，Ｊ＝８゜ １Ｈｚ）、７．３８８　（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝９．１Ｈｚ）、７．５０３　（ｔ。 ＩＨ，Ｊ＝７．８Ｈ２）、８．００４　（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）Ｎ−（２ −メチルフェニル）−Ｎ’　−（２−メチル−４−アミノフェニル）グアニジン 塩酸塩（１１２■、０．３４１ミリモル）をＨ，０２ｄおよび濃ＨＣｌ１００μ ｆ（１，２ミリモル）中に溶かした。溶液を水浴中で冷やし、そしてＨ，０４５ ０μｌ中のＮａＮ０゜（４２■、０．６１ミリモル）の溶液を添加した。反応混 合物は黄色になり、そして４５分間かきまぜ、次に固体Ｎ　ａ　Ｎｓ　（４３■ 、０゜６６１ミリモル）を一度に加えた。Ｎｔの発生が止んだ後、泡状の固体（ ｌ１ｍｇ）を除去し、捨てた。固体のＮａＯＨ（９６ｍｇ、　２．４１ミリモル ）を加え、明黄色沈澱をＥｔ２０　（３Ｘ５＃１１りで抽出した。合併したＥｔ ｚＯ層を蒸発し、黄色固体をＥｔＯＨ／ＨｚＯから結晶化した。ＮＭＲ（ＣＤｉ ＯＤ）２．２７９　（ｓ、３Ｈ）、２．２８４　（ｓ、３Ｈ）、６．８６４　（ ｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝２．４Ｈｚ、８．４Ｈｚ）。 ６．９１４　（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）、７．０５５　（ｔｄ、ＩＨ，Ｊ＝ １．８Ｈｚ、７．２Ｈｚ）、７．１３６−７．２２９　（ｍ、４Ｈ）遊離塩基と してＮ−（２−メチル−４−ニトロフェニル）−Ｎ　“−（２−メチルフェニル ）グアニジン（２８１■、０．９８７ミリモル）をＭｅＯＨ４１１１中に溶かし 、水浴中で冷却した。Ｎ−ブロモスクシンイミド（Ｈ２Ｏから新たに再結晶）（ ５３１■、２．９８ミリモル）を１５分にわたって２回加えた。１．５時間後掲 色のスラッジ状反応混合物をＭｅＯＨ４ＩＩｌで希釈し、２５°Ｃへ暖めた。褐 色の固体を口取しく２６６■）、アセトン／　Ｈｚ　Ｏから結晶し、褐色針状晶 （２，６ｍｇ、４２％、ｍｐ１９３−１９５°Ｃ）を得た。　０．０１　ｎｎｎ Ｈｇおよび１７０℃でのこれら結晶の晶華は明白色無定型固体（３８■。 ｍｐ２１０　２１３°Ｃ）として分析サンプルを与えた。ＮＭＲ（ＣＤゴＯＤ） 　２．３５７　（ｓ、３Ｈ）、２．４８８　（ｓ、３Ｈ）、７゜４４４　（ｄ、 ＩＨ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）、７．６６９　（ｄ、ＬＨ，Ｊ＝１゜８Ｈｚ）、８．０ ３３　（ｄ、ＩＨ，２，１Ｈｚ）、８．２６７　（ｄ、ＩＨ。 Ｊ＝１．８Ｈｚ）、８．０３３　（ｄ、ＩＨ，２，１Ｈｚ）、８．２６７　（ｄ 。 ＩＨ，２，４Ｈ２）分析値ＣＩｓ　ＨＩ３Ｂ　ｒ　！　Ｎ　ａ　Ｏｚに対する計 算値Ｃ１３４，５８；Ｈ，２，５２；Ｎ、１０．７５　：実測値Ｃ，３４，６４ 、Ｈ。 ２．４７；Ｎ、１０．６５ モルモ・・ト”への　３ＨＤＴＧ　への（’Ｑｌ）ＤＴＧの合成の高比放射能（ ５２Ｃ３／ミリモル）の純粋な均質生成物を与えた。（’Ｈ）ＤＴＣ，は、特異 的に、飽和的に、可逆的に、そして高い親和性をもってモルモット脳膜へ結合し た。０゜９　ｎＭ　（’Ｈ）　ＤＴＧ　（３０，０ＯＯｃ　ｐｍ、５０％カウン ティング効率）における典型的実験においては、総結合は２，７００　ｃ　ｐ　 ｍであったが、１０ｎＭ　ＤＴＧまたは１０ｎＭハロペリドールの存在下におけ る非特異的結合は５０〜１５０ｃｐｍであった。日常的に結合の９０〜９７％の 特異的結合が観察された。室温において（３）１）ＤＴＧの結合は６０〜９０分 後平衡に達し、そしてそれは１０ｎＭ　ＤＴＧの添加後完全に可逆的であった。 特異的結合は２〜４０■組織（アッセイ試験管あたりのもとの湿った脳重量）の 間では組織濃度に比例した。膜の不存在下におけるガラス繊維フィルターへの放 射能の結合は１０〜２Ｑｃｐｍであった。１００°Ｃにおける１０分間のアッセ イ前の膜の煮沸は、室温における３０分間のトリプシンおよびプロナーゼ（０， ０１■／ｄ）による膜の処理と同様に特異性〔３Ｈ〕ＤＴＧ結合の殆ど完全に（ ９０％）消失させ、タンパク成分が受容体結合能力に対して重要であることを指 示する。 モルモット脳膜への（’Ｈ）ＤＴＧの平衡飽和結合を測定するため、ここに記載 のように調製した膜を５０ｍＭ）リス／ＨＣｌ１ｍｆｆ１中の０．３ｍＭないし ９０ｍＭの種々の濃度において（’Ｈ）ＤＴＧと室温で１２０分間インキュベー トした。得られた値は４回測定の平均でてあった。 飽和データのスキャッチャード解析は、２８ｍＭの見掛けＫＤを持った直線スキ ッチャードプロットと、８４ピコモル／ｇ脳組織（もとの湿重量）の結合部位の 最大数（Ｂｍａｘ）を示す。カーブ適合プログラムリガンド（Ｍｕｎｓｏｎ、　 Ｐ、Ｊ、　＆　Ｒｏｄｂａｒｄ＋　Ｄ、＋Ａｎａ１．　Ｂｉｏｃｈｅｍ。 １０７、２２０−２３９　’）による結合データの解析は一部位結合モデルとの 高い両立性を示した。 ・　リガンド　入ア・・セイ 凍結したモルモット脳（Ｐｅ１−Ｆｒｅｅｚｅ、　Ｒｏｇｅｒｓ＋　ＡＫ　）を ポリトロンホモジナイザーを使用して０．３２　Ｍショ糖中の１０容（Ｗ／Ｖ） 中でホモジナイズした。ホモジネートを４°Ｃで９００Ｘｇにお（１て１０分間 遠心した。上清を集め、４℃で２０分間２２．ＯＯＸｇで遠心した。ベレットを ５０ｍＭ）リス／ＨＣＩ緩衝液ｐ　Ｈ７，４の１０容中に再懸濁し、３７°Ｃで ３０分間インキュベートし、そして４°Ｃで２２．ＯＯＯＸｇにおいて２０分間 再び遠心した。ペレ・ントを次に５０ｍＭ）リス／ＨＣＩ緩衝液ｐ　Ｈ７，４の １０容中に再懸濁し、この膜懸濁液の１０ｍｆｆ１部分標本を結合ア・ンセイに 使用するまで一７０°Ｃで冷凍保存した。シグマ受容体数または（”Ｈ）　ＤＴ Ｃ；結合のための親和力に対する一７０°Ｃにおける膜の長期保存（〉３月）の 影響は見られなかった。 放射性受容体アッセイのため、凍結膜懸濁液の部分標本を解凍し、５０ｍＭ）リ ス／ＨＣ１緩衝液ｐ　Ｈ７，４で１０倍に希釈した。１２×７５１１ＩＩ１１ポ リスチレンまたはガラス試験管へ膜懸濁液０．８−と、０゜９ｍＭの最終濃度の ための（３Ｈ）　Ｄ、ＴＧまたは（＋）〔ゴＨ）３−ＰＰ　Ｐ　０．１１ｄと、 そして未標識薬物もしくは緩衝液０．１　ｍｌを加えた。 最終インキュベーション容積ｌｄ中のタンパク濃度は８００μｇであり、脳組織 （もとの湿重量）の３２■に相当する。非特異的結合は（’Ｈ）ＤＴＧおよび（ ＋）（’Ｈ）３−ＰＰＰの両方に対して１０ｎＭ　ＤＴＧまたはハロペリドール の存在下残っている結合として定義した。室温において９０分間インキュベーシ ョン後、膜懸濁液をＢｒａｎｄｅｌ　４８ウェル細胞ハーベスタ−（Ｂｒａｎｄ ｅｌ、　ＧａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇＭＤ　）を用い、Ｗｈａｔｍａｎ　Ｇ　Ｆ　 ／　Ｂガラス繊維フィルターを通して速かに真空口過した。フィルター氷冷した ５０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ７，４室温）３Ｘ５ｄで洗った０口過物をＣｙｔｏ ｓｃｉｎｔ　（ＷｅｓｔｃｈｅｍＰｒｏｄｕｃｔｓ、　Ｓａｎ　Ｄｉｅｇｏ、　 ＣＡ　）各１０ｄ中に溶かし、カウンティング効率３５〜５０％において液体シ ンチレーションスペクトロメトリーによって放射能を測定した。飽和データをＩ ＢＭパーソナルコンピューターＡＴ上のデータ解析プログラム、Ｅ　Ｂ　Ｄ　Ａ 　ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ。 ｃ、ａ、、（１９８３）　Ｃｏｍｐｕｔｅｒ　Ｐｒｏｇｒａｍｓ　Ｂｉｏｍｅｄ 、　１７＋　１０７−１１４およびＬＩＧＡＮＤ　Ｍｕｎｓｏｎ＋　ＰＪ、＆　 Ｒｏｄｂａｒｄ、Ｄ＋（１９８０）　Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、１０７＋２２ ０−２３９の両方を用いてＳｃａ　ｔｃｈａｒｄ　解析によって評価した。ＩＣ ５０値はセミ対数グラフ上へ置換カーブをプロットし、そして補内法によって決 定した。 ３ＨＤＴＧ　人の′・ 典型的なシダマリガントと考えられる薬物と、そして他の神経伝達物質、神経変 調物質および薬物受容体と考えられる薬物との置換実験を行った。これら実験は 、（’Ｈ）ＤＴＧ結合部位は右旋性ベンゾモルファンアヘン剤に対し、そして（ −）ブタクラモールに対して立体選択性であり、アセチルコリン、ベンゾジアゼ ピン、ＣＡＢＡに対して高い親和性を有する薬物や、ミュー、デルタまたはカッ パ類アヘン剤受容体と有意義に相互作用せず、そしてハコペリドール抗精神病薬 のフェノチアジン群に属するいくつかの薬物に対して高い親和性を有しくハロペ リドールはテストした薬物のうち最高の置換能力を持っていた）、そしていくつ かの三環抗うつ剤、ＰＣＰ、およびカッパ類アヘン剤受容体リガンドＵ５０．４ ８８Ｈを含むいくつかの他のクラスの精神作用薬に対して緩和な親和性を有する ことを示した。 （以下余白） 表　■ ハロペリドール　５±０．２　１７±ＩＤＴＧ　２Ｂ±１　５３±９ ベルフエナジン　４２±１０　２１±３（＋）ペンタゾシン　４３±２　８±３ （−）ペンタゾシン　１３５±３　８１±１（±）ペンタゾシン　６９±Ｉ　Ｎ Ｄ （＋）３−ＰＰＰ　７６±４　３３±１２（−）３−ＰＰＰ　１２８±２１　２ ３５±６０（＋）サイフラジシン　３６５±２５　４７±１２（−）サイフラジ シン　２．６００±２１０　１．０００±０スビベロン　６９０±２１　ＮＤ （−）ブタクラモール　５３０±４９　１８５±５（＋）ブタクラモール　２． １５０±２５０　２．１００±７１（＋）ＳＫＦｌｏ、０４７　６２５±８８　 ９３±５（−）ＳＫＦｌｏ、０４７　４．０００±５６６　２．８５０±３９０ ＰＣＰ　１，０５０±１０６　１，０００±７１トリフロロペラジン　３４５± ４　ＮＤトリフルプロマシン　６０６±５７　ＮＤクロルプロマジン　１　、４ ７５±２６５　ＮＤアミトリブチリン　３００±７　ＮＤ イミブラミン　５２０±１４　ＮＤ デスイブラミン　４，０００±２１２　ＮＤノルトリブチリン　２．０００±６ ４０　ＮＤグアナベンズ　４．６００±２８３　ＮＤクロニジン　＞１０，００ ０　Ｎ　Ｄ コカイン　＞１０．０００　ＮＤ ＊ＩＣｓ。はシグマ受容体が（”Ｈ）ＤＴＧの半最大置換を生ずるの　に要する 薬物のモル濃度である。これは薬物のシグマ受容体結合　能力の直接の測定であ る。ＮＤ＝測定せず上のＩＣ，。は２〜４別実験（３回）からの平均値を表す。 以下の化合物は１０ｎＭ濃度において有意義な置換をおこさなかった。 スコポラミン、５−０Ｈ−）リプタミン、ジアゼパム、ビククリン、ＧＡＢＡ、 ガンマ−グアニジン酪酸、モルフイン、ＤＡＧＯ，メトルファミド、グイノルフ ィンＡ、（ｌｅｕ’）エンケファリン、ベーターエンドルフィン、ナロキソン、 グアニジノ酢酸、クレアチン、クレアチニン、１．１−ジメチルグアニジン、メ チルグアニジン、ベータグアニジノプロピオン酸、シメチジン＋　”Ｈ３−ＰＰ Ｐ　人と　９した　３ＨＤＴＧ　への゛ｌ１ モルモットにおける（＋）（３Ｈ）３−ＰＰＰと（’Ｈ）ＤＴＧ結合の薬物特異 性とを比較して、（＋）（”Ｈ）３−ＰＰＰはモルモット脳膜と特異的に、飽和 的に（直線状スキッチャートプロット）、可逆的にそして高い親和性をもって結 合することがわかった。（Ｋｐ＝　３０　ｎ　Ｍ、　Ｂｉ＋ａｘ＝　８０ピ’： Ｉ　モアＬ／　／　ｇ新鮮扇型４３）　モア！ｚモｙ　）　ニ’Ｊ３ける（＋） （”Ｈ）３−ＰＰＰ結合の薬物特異性プロフィル（表Ｉ）は、ラットについて報 告されたものと非常に似ていることがわかった。Ｌａｒｇｅｔ　ｅｔ　ａｌ、　 （１９８４）前出参照。さらに（＋）　（３Ｈ）　３−ＰＰＰおよび（３Ｈ）Ｄ ＴＧ結合アッセイにおける薬物特異性プロフィルとは高度に相関しており（γ＝ ０．９５；Ｐ−≦−０．００００１　）　、これは同じ部位を標識している二つ の化合物と一致している。 オート−ジオグーフィー　売 雄のＳｐｒａｇｕｅ　Ｄａｗｌｅｙラット（２００−２５０ｇ）およびＮＩＨモ ルモット（３００−３５０ｇ）とを殺し、それらの脳を速やかに取出し、Ｈｅｒ ｋｅｎｈａｍ、　Ｍ、　＆　Ｐｅｒｔ、　Ｃ，Ｂ、＋（１９８２）　Ｊ、　Ｎｅ ｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ　２＋　１１２９−１１４９の方法に従った受容体オート ラジオグラフィーのために処理した。 １５μｍ厚みのスライドに取付けた切片を１■／ｄのウシ血清アルブミン（ＢＳ Ａ）および〔コＨ）ＤＴＧ２ｎＭを含有するトリス／ＨＣＩ　（ｐＨ８，０，２ ２℃）中で４５分間インキュベートした。隣接した切片を非特異的結合を測定す るため１０ｎＭハロペリドールまたは１０ｎＭ　ＤＴＧとインキュベートした。 インキュベーションは１■／ｄＢＳＡを加えた１０ｍＭ）リス／ＨＣＩ　（ｐＨ ７，４゜４℃）中の４×２分の洗浄により停止し、冷空気流中で急速乾燥し、そ して３Ｈ感光性フイルム（ｓＨ−ウルトラフィルム、ＬＫＢ）を備えたＸ線フィ ルム中に置いた。フィルムを６〜８週後に現像した（Ｄ−１９，コダック）。 コＨＤＴＧ　”のオー　−ジオグーフィーロ（”Ｈ）ＤＴＧを用いるモルモット およびラット脳切片についての受容体オートグラフィー研究は、ラットおよびモ ルモットの灰白質全体に拡散分布した特異的結合の低密度を示した。この均質な 結合パターン上に鼓状のそして感覚および運動の構造の不均質の集中した結合の 分布が重なっていた。この結合パターンはラットよりもモルモットにおいて明瞭 であった。（＋）（３Ｈ）ＤＴＧ結合についての同様な観察は報告されている。 Ｌａｒｇｅｎ　ｅｔ　ａｌ＋　（１９８６）前出参照。 このため（”Ｈ）ＤＴＣ結合の記載は主としてモルモットから誘導された。前脳 においては、（”Ｈ）ＤＴＧによって中程度ないし密に標識された肢構造はブロ ー力の対角帯、中隔、視床下部（特に副脳室核）９前後の視床核および不定帯で あった。中程度ないし密に標識した感覚および運動視床核は味覚リレーおよび網 状核を含んでいた。 標識された他の視床核は副脳室および手綱核であった。非常に高密度の標識は脈 絡叢に見られた。皮質においては高密度の（’Ｈ）　ＤＴＧ標識は後脳膨大梨状 体の層■／■および鼻内皮質を占めた。皮質の残部は均質結合の低密度を含んで いた。海馬形成はピラミッド顆粒球層中の別々の結合に示された。中脳の感覚お よび運動区域は〔Ｈ）ＤＴＧによって選択的に標識された。眼運動核、およびさ らに尾状に滑車核は非常に高密度に標識され、そして上圧および赤核は中程度レ ベルの結合を持っていた。標識された他の中脳核は背線、脚間核、中央灰質、原 質、ち密部であった０モルモットにおけるち密部の選択的標識はラットの点質全 体に存在する低ないし中程度標識に匹敵する。加えて、非常に密な標識は下交連 器官に見られた。 後脳においては青色部位が最も密に標識された部位であった。 った。小脳の灰白質全体および脳矯網状核中にも中程度ないし高密度結合が見ら れた。 ３ＨＡＺ−ＤＴＧ　人〇゛・ ハロペリドール怒受性シグマ受容体は高い親和力をもって〔３Ｈ〕（＋）　３− 　（３−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−（１−プロビリピペリジン（（３１）（＋ ）３−ＰＰＰ）および〔りＨ）　１．３−ジ−ロートリルグアニジン（（”Ｈ） ＤＴＧ）と結合する。その構造を解明するため、新規なりＴＧの放射性光年安定 性誘導体である（’Ｈ）　−ｍ−アジド−１，３−ジー０−トリルグアニジン（ （’Ｈ）ＡＺ−ＤＴＧ）を用いてモルモット脳からのシグマ受容体の光親和性標 識を行った。暗所において（’Ｈ）ＡＺ−ＤＴＧは高親和力（Ｋ＝２８ＨＭ）を もって脳膜中のシグマ部位へ可逆的に結合する。脳膜への〔３Ｈ〕ＡＺ−ＤＴＧ 結合の薬物特異性プロフィルはプロトタイプシグマリガンド（’Ｈ）ＤＴ（：、 および（３Ｈ）（＋）３−ＰＰＰのそれと同じである。光親和性標識のため、プ ロテアーゼ阻害剤を含有する脳懸濁液を（’Ｈ）ＡＺ−ＤＴＧと暗所でブレイン キュベートし、口過し、ｈｈａｔｍａｎ　Ｇ　Ｆ　／　Ｂガラス繊維フィルター 上で洗った。フィルターを次に長波長ＵＶ光で１５分間照射した。フィルター結 合タンパクは５０ｍＭ）リスｐＨ７，４，０，１％ドデシル硫酸ナトリウムで可 溶化した。可溶化したタンパクを５ＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動にか ける。５ＤＳ−ＰＡＧＥゲルの螢光写真は、（’Ｈ）ＡＺ−ＤＴＧは２９ｋＤポ リペプチド中に選択的に取込まれることがわがった。このポリペプチドの標識は １０ＨＭの濃度においてシグマリガンドＤＴＧ、（＋）３−ＰＰＰ、（＋）ペン タゾシン、およびハロペリドールによって完全に阻止されたが、同じ濃度におい てモルフイン、セロトニン、ドパミン、スコポラミンまたはＧＡＢＡによっては 標識は影響されなかった。これらの結果は、ハロペリドール惑受性シグマ受容体 の結合サブユニットのサイズの最初の見積もりを表す。 マウス　の　・に１°　れた　ルエピネフィＩン　の１弦 体重２５−３０ｇの雄５ｗ１ｓｓ　Ｗｅｂｓｔｅｒ　マウスを話頭によってと殺 し、輸精管を取出し、洗浄し、２５０■の静止張力においてＳｕｌ器官浴中に取 付けた０組織は３７°Ｃに保った変性クレーブス溶液［組成（ｍＭ）：ＮａＣ１ １１Ｂ、ＫＣｌ４．７５．ＣａＣ１ｚ　２．５４゜ＮａＨＣＯｓ　２５．０．Ｋ ＨｚＰｏ、０．９３．Ｄ−グルコース１１．０゜ナｏキソ７ＨＣＩ　０．００１ 　］　Ｔ：浸し、９５％０．および５％ＣＯ。 で泡立てた。組織は２Ｃ１１１離した白金リング電極を介して０．１　Ｈｚにお いて（超最高電圧、１ミリ秒持続時間）　Ｇｒａｓｓ　Ｓ　８８刺激器によって 刺激し、Ｇｒａｓｓポリグラフへ接続したＧｒ’ａｓｓ　Ｆ　７０．０３　）ラ ンスジューサーを介して等尺的に収縮を記録した。薬物のアゴニスト力価は単一 投与量の通用、薬物に対するレスポンスが安定した時けいれん高さの測定、オー バーフローによって薬物の洗出しによって決定した。ＮＥ濃度を測定した研究に ついては、以下の改変を除いて上のプロトコールに従った。６本の輸精管を１． ０ｇの静止張力において単一の５−浴に平行に取付け、組織をアゴニスト投与量 の存在下２０分間そのままにし、その期間の終了時浴液を集め、ドライアイス上 で象、速冷結し、ＮＥ含量の分析のための電気化学的検出能を持った高速液体ク ロマトグラフィーにかけた。 （＋）３−ＰＰＰ、ＴＣＰはＭＶＤ浴液へ適用した時、開始が急速で、２〜５分 で安定な高原に達し、そして化合物を洗い出すことによって急速に逆転する電気 的刺激けいれん振幅の増大を引き起す。 （＋）３−ＰＰＰに対するレスポンスは投与量依存態様で２５１．０＋３．１Ｈ Ｍ　ＳＥＭ（ｎ＝１５）の安定な再現し得る最高まで増大する。ＴＣＰに対する レスポンスは２７．６＋３．２ＨＭ　ＳＥＭ　（ｎ＝１２）のＥ　Ｃｓ。をもっ て３３８．２　＋２７．４３　Ｅ　Ｍの最高まで増する。（＋）３−ＰＰＰの存 在下２０分インキニベーション後の浴液中のＮＥ含量の測定は、２００ｎＭにお いて著明な増大を示す。２００ｎＭ　ＴＣＰのインキュベーション後のＮＥ含量 も有意に増大する。 マウス　のノルアドレ　リン　ｒ上の　・シグマ風主生 （＋）３−ＰＰＰおよびＴＣＰはマウス輸精管（ＭＶＤ）においてＮＥの電気的 に刺激した放出を増大するように作用する。中央結合部位において示されたこれ らリガンドの受容体特異性は、これらはＭＶＤにおいて別々の受容体において共 通の最終レスポンスを発生するように作用することを示唆する。これらの知見と 一致するＰＣＰ作用に対してＢａｒｔｓｃｈａｔおよびＢｌａｕｓｔｅｉｎ、　 Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔ、　Ａｃａｄ。 Ｓｃｉ、　Ｕ、Ｓ、Ａ、、　１９６６．８３：１８９−１９２によって提案され た一つの機序は、作用電位延長および神経伝達物質放出の増大をもたらす電圧制 御された非不活性化に゛チャンネルの阻止である。シグマ受容体の作用機序は以 前には特徴化されていなかった。われわれは、ＭＶＤはこの部位における競合的 拮抗物質を同定するための有用なモデルシステムを提供することを発見した。 シグマ受容体結合部位は（＋）　（’Ｈ）　３−ヒドロキシフェニル−Ｎ−（１ −プロピル）ピペリジン（（＋）（３Ｈ）３−ＰＰＰ）およびシグマ受容体結合 活性を有するトリチウム標識Ｎ、Ｎ’−ジ置換グアニジン類、例えば（３）１） 　１．　３−ジー０−）リルグアニジン（（”Ｈ）ＤＴＧ）によって選択的に標 識することができる。この結合部位の生理学的機能はこれまで未知であった。わ れわれは、あらかじめ負荷したマウス輸精管（ＭＶＤ）からの（Ｈ）ノルエピネ フィリン（（’Ｈ）ＮＥ）の電気的に刺激された放出の（＋）３−ＰＰＰ増大は 催幻覚性シグマベンゾモルフアンに対する拮抗剤であるＮ。 Ｎ゛−ジ置換グアニジン類により、例えば２９ＨＭのに、を待ったＤＴＧにより 、そして４００ｎＭのＫＥを持ったＮ、　Ｎ’　−ジ−ローフェニルグアニジン によって競合的に拮抗されることを発見した。 これは脳膜結合アッセイにおいて２８ＨＭのＤＴＧに対するに、および４００ｎ ＭのＤＴＰＧに対するＫｆに匹敵する。これはＭＶＤにおいて電気的に刺激され たノルエピネフィリン（ＮＥ）放出の増大を仲介する機能的に活性なシグマ受容 体が存在し、そしてＤＴＧおよびＤＰＧはシグマ受容体において競合的拮抗物質 であることを示唆する。本発明のシグマ受容体バイオアッセイ系およびＮ、　Ｎ ”−ジ置換グアニジン拮抗物質は、シグマ受容体に対するベンゾモルフアン類お よび他の薬物の作用を決定するための、そしてこれら受容体の生理学的役割を研 究するための有用な道具である。 上に記載したように、選択的シグマリガンド（＋）３−ＰＰＰは、電気化学的検 出能を備えた逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ／ＥＣ）を使用 してＭＶＤ器官浴液をＮＥ分析にかけることによって測定されるように、ＭＶＤ において電気的に刺激したＮＥ放出の投与量依存増加を発生させる。（＋）３− ＰＰＰのこの前シナラプス性の作用をさらに詳しく研究するため、われわれは輸 精管を３０ＨＭデスオキシコルチコステロンアセテートを含有する（平滑筋組織 中への（３ＨＯＮＥの取込みを阻止するため）クレープズ／リンゲル緩衝液中で ３７°Ｃにおいて３０分間９５％０□１５％ＣＯｔの連続的吹込み下（”Ｈ）　 ＮＥ　（２５ｎＣｉ／ａｆ／４輪精管）とインキュベートすることによってＭＶ ＤのＮＥ神経末端を前負荷した。実験あたり４輪精管を個々に９５％０□１５％ ＣＯ□飽和クレープス／リンゲル緩衝液中の５−器官浴中に取付け、３７°Ｃに 維持した。 （＋）３−ＰＰＰは浴中への電気的に刺激した（’Ｈ）ＮＥ放出の投与量依存型 増大を生じさせた。（＋）３−ＰＰＰの変化投与量と一所に１０ｎＭ　ＤＴＧの 選択的シグマ受容体リガンドを浴液へ添加する時、［’Ｈ）ＮＥの放出に対する （＋）３−ＰＰＰの効果は完全に消失し、これはＤＴＧが（＋）３−ＰＰＰのＭ ＶＤ中ノ（’ｎ）ＮＥ関連放射能の放出に対する効果の拮抗剤であることを確認 する。 能膜結合アッセイにおいては、（＋）（３Ｈ）３−ＰＰＰおよび〔３Ｈ〕ＤＴＧ は同じ結合部位を選択的に標識する。この結合部位は、それがシグマ様行動効果 を持つことが知られたベンゾモルファンアヘン剤に対しては親和性を示すが、し かしシグマ様行動効果を欠くモルフインおよび他の古典的アヘン剤に対して示さ ない点でシグマ受容体の薬理学的基準を満足する。さらに、ＤＴＧはシグマ結合 部位から（”Ｈ）ＤＴＧを競合的に置換する。ＭＶＤ中（７）　（３Ｈ）　ＮＥ 放出に対する（＋）（’Ｈ）３−ＰＰＰの効果はシグマ受容体によって仲介され るから、そしてＤＴＧは（＋）３−ＰＰＰの作用を消失されるという事実によっ て証明されるようにＤＴＧは拮抗剤であるから、（＋）３−ＰＰＰに対するＤＴ Ｇの拮抗作用は、ＤＴＧの不存在下の（＋）３−ＰＰＰ対照投与量／レスポンス 曲線に比較して右側への４倍シフトを生ずる、１２０ｎＭ　ＤＴＧの存在下の（ ”Ｈ）ＮＥ放出に対する（＋）３−ＰＰＰの効果の投与量／レスポンス曲線によ って証明されるように、競合的である。ＤＴＧの不存在下およびＤＴＧ７０．２ ７０および９６０ｎＭの存在下における（＋）３−ＰＰＰ投与量／レスポンス関 係の５ｃｈｉｌｄ解析（＋）３−ＰＰＰ投与量／レスポンス曲線の右側への対応 した平行シフトを生ずる。　５ｃｈｉｌｄプロツトから誘導されたＤＴ、Ｃ拮抗 作用のｐＡｔ値は２９ｎＭの拮抗作用親和力（Ｋ１）に相当する。 １．３−ジフェニルグアニジン（ＤＴＧ）は（”ＨＯＮＥ放出に対する（＋）３ −ＰＰＰの拮抗物質であった。ＤＰＧも結合アッセイにおいてシグマ受容体へ結 合するが、しかしＤＴＧより低い親和性を有する。８０ｎＭ　ＤＴＧは（３Ｈ） ＮＥ放出に対する（＋）３−ＰＰＰの効果を完全に阻止するが、１．６ＨＭ　Ｄ ＴＧは（＋）３−ＰＰＰ投与量／レスポンス曲線の右側への４倍シフトを生ずる 。９２０．３，６００および１２，８００ｎＭにおける５ｃｈｉｌｄ解析は４０ ０ｎＭのＫＥに相当するＰＡｔ値を与えた。多数の対照実験は、（＋）３−ＰＰ Ｐの作用はＮＥ放出の増加を生ずる既知の機序や、またはそのようなＮＥ取込み 阻害またはアルファ２アドレナリン性受容体封鎖へ帰せられることを除外した。 機能的に活性な受容体において適当なバイオアッセイ系中の競合的拮抗物質の力 価（Ｋ、）は適当な結合アッセイにおけるその親和性に対応しなければならない が、アゴニストの力価は通常結合アッセイにおけるその親和性に比較してバイオ アッセイにおいて低いとの仮説は、ここに記載したバイオアッセイにおいて満足 された。二つの競合的拮抗物質ＤＴＧおよびＤＰＧについてのに１値は脳膜懸濁 液中の受容体を標識するために（３Ｈ）（＋）３−ＰＰＰまたは〔”Ｈ）ＤＴＧ を使用するシグマ受容体結合アッセイにおけるそれらのに、／Ｋｉ値に殆んど完 全に対応する。対称的に・、（＋）　３−ＰＰＰアゴニスト活性についてのＥＣ ５Ｏはその結合親和性より３桁低い。 併せて考えると、これらの知見は（＋）３−ｐＰＰの（”Ｈ）ＮＥ放出作用は真 の受容体仲介効果であり、そしてこの作用を仲介する受容体は（”Ｈ）（＋）３ −ＰＰＰおよび（”Ｉ（）ＤＴＧによって脳膜懸濁液中で選択的に標識されるシ グマ受容体に類似または同一であるらしいことを確立する。 以上の実施例は本発明の一般的にまたは特定的に記載した反応剤および／または 作業条件をもって以上の実施例に使用したそれらを置換することにより、類似の 成功度をもってくり返すことができる。 以上の説明から、当業者は本発明の本質的特徴を容易に確かめることができ、そ してその精神および範囲から逸脱することなく、種々の用途および条件に適応さ せるため本発明の種々の変更および修飾をすることができる。 国際調査報告

Claims (41)

【特許請求の範囲】
1. １．Ｎ−（４−アジド−２−メチルフェニル）−Ｎ′−（２−メチルフェニル） グアニジン。
2. ２．Ｎ，Ｎ′−ジ−（４−ハロ−２−メチルフェニル）グアニジン。
3. ３．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＲおよびＲ′は各自アダマンチル、シクロヘキシル、または少なくとも 炭素数６の単環炭素環アリールであり、そしてＲおよびＲ′の環炭素原子の少な くとも１個は少なくとも１個のトリチウム原子を持っている。）のトリチウム標 識Ｎ，Ｎ′−ジ置換グアニジン。
4. ４．ＲおよびＲ′の一方がアダマンチルであり、他方が２−チルフェニルである 第３項の化合物。
5. ５．ＲおよびＲ′の一方がアダマンチルであり、他方がシクロヘキシルである第 ３項の化合物。
6. ６．ＲおよびＲ′の両方がアダマンチルであるか、または両方がシクロヘキシル である第３項の化合物。
7. ７．ＲおよびＲ′の少なくとも一方がアジド置換炭素環アリールである第３項の 化合物。
8. ８．Ｎ，Ｎ′−ジ−（４−〔３Ｈ〕−２−メチルフェニル）グアニジンである第 ３項の化合物。
9. ９．単位投与量あたり、インビトロにおいて単離された哺乳類脳膜へ結合したＮ ，Ｎ′−ジ（４−〔３Ｈ〕−２−メチルフェニル）グアニジンを置換する水溶性 Ｎ，Ｎ′−ジ置換グアニジンの、ヒトのシグマ受容体変調活性を変えるのに有効 な量を含む、単位投与形にあり、そしてヒトヘ全身的投与に適した薬剤組成物。
10. １０．前記グアニジンは、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＲおよびＲ′は各自少なくとも炭素数４のアルキル基、炭素数３ないし １２のシクロアルキル基、または少なくとも炭素数６の炭素環アリール基である 。）の化合物である第９項の組成物。
11. １１．ＲおよびＲ′の少なくとも一方がｏ−トリルまたはアダマンチルである第 １０項の組成物。
12. １２．ＲおよびＲ′の少なくとも一方がｏ−トリルである第１０項の組成物。
13. １３．ＲおよびＲ′がｎ−ブチルである第１０項の組成物。
14. １４．ＲおよびＲ′がｏ−トリルである第１０項の組成物。
15. １５．ＲおよびＲ′がフェニルである第１０項の組成物。
16. １６．ＲおよびＲ′が２−メチル−４−ブロモフェニルである第１０項の組成物 。
17. １７．Ｒがｏ−トリルであり、Ｒ′がｐ−アジド−ｏ−リルである第１０項の組 成物。
18. １８．Ｒがｏ−トリルであり、Ｒ′がシクロヘキシルである第１０項の組成物。
19. １９．Ｒがトリルであり、Ｒ′がアダマンチルである第１０項の組成物。
20. ２０．ＲおよびＲ′の両方がアダマンチルである第１０項の組成物。
21. ２１．Ｒがアダマンチルであり、Ｒ′がフェニルである第１０項の組成物。
22. ２２．経口投与に適した第９項の組成物。
23. ２３．非経口注射に適した第９項の組成物。
24. ２４．単位投与量あたり、前記ジ置換グアニジンの約０．１ｍｇないし約１ｇを 含有している第９項の組成物。
25. ２５．ａ）水性媒体中において、精神異常発現性ベンゾモルファン結合活性を有 する単離された哺乳類脳膜を、（ｉ）前記脳膜のシグマ受容体へ結合することが できる既知量の、シグマ受容体へ選択的に結合するトリチウム標識Ｎ，Ｎ′−ジ 置換グアニジンと、そして（ｉｉ）シグマ受容体結合活性についてアッセイすべ き水溶性有機化合物の変化量との混合物を接触させ、ｂ）前記脳膜をステップａ ）において脳膜へ結合しなかった前記トリチウム標識化合物の残りから分離し、 ｃ）ステップｂ）において分離された結合したトリチウム標識化合物の、ステッ プａ）において採用した有機化合物のモル量に対する割合のモル関係から、前記 有機化合物のシグマ受容体結合活性を決定する、各ステップを含む有機化合物の シグマ受容体結合活性を決定する方法。
26. ２６．前記トリチウム標識化合物は、式▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＲおよびＲ′は各自少なくとも炭素数４のアルキル基か、または少なく とも炭素数６の炭素環アリール基である。）のジ置換グアニジンである第２５項 の方法。
27. ２７．前記トリチウム標識化合物はＮ，Ｎ′−ジ（４−〔３Ｈ〕−２−メチルフ ェニル）グアニジンである第２５項の方法。
28. ２８．前記脳膜は、プタ、ラット、ヒトまたはモルモット脳膜である第２５項の 方法。
29. ２９．前記有機化合物は、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＲおよびＲ′は各自少なくとも炭素数４のアルキル基か、または少なく とも炭素数６の炭素アリール基である。）のＮ，Ｎ′−ジ置換グアニジンである 第２５項の方法。
30. ３０．異常精神病行動を示す哺乳類へ、該哺乳類のシグマ受容体変調精神活動を 変えるのに有効な量の、哺乳類脳膜へ結合したＮ，Ｎ′−ジ−（ｐ−〔３Ｈ〕− ２−メチルフェニル）グアニジンをインビトロにおいて置換する水溶性ジ置換グ アニジンを投与することよりなる、そのような行動を示す哺乳類の異常精神病的 行動のシグマ受容体系機能障害に対する関係を決定する方法。
31. ３１．哺乳類がヒトである第３０項の方法。
32. ３２．ヒトが精神病である第３１項の方法。
33. ３３．幻覚関連精神病に罹患しているヒトヘ、幻覚を軽減するのに有効な量にお いて、催幻覚性ベンゾモルファンのシグマ受容体結合活性に対する拮抗物質であ る水溶性Ｎ，Ｎ′−ジ置換グアニジンを投与するよりなる、幻覚関連精神病に罹 患しているヒトの治療方法。
34. ３４．前記ジ置換グアニジンは、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＲおよびＲ′は各自少なくとも炭素数４のアルキル基、炭素数３ないし １２のシクロアルキル基か、または少なくとも炭素数６の炭素環アリール基であ る。）の化合物である第３３項の方法。
35. ３５．ヒトが精神分裂病である第３３項の方法。
36. ３６．前記化合物がＮ，Ｎ′−ジ−（２−メチルフェニル）グアニジンである第 ３４項の方法。
37. ３７．前記化合物がＮ−アダマンチル−Ｎ′−シクロヘキシルグアニジンである 第３４項の方法。
38. ３８．前記化合物がＮ−アダマンチル−Ｎ′−（２−メチルフェニル）グアニジ ンである第３４項の方法。
39. ３９．前記化合物がＮ−シクロヘキシル−Ｎ′−（２−メチルフェニル）グアニ ジンである第３４項の方法。
40. ４０．前記化合物がＮ，Ｎ′−ジ−（シクロヘキシル）グアニジンである第３４ 項の方法。
41. ４１．前記化合物がＮ，Ｎ′−ジ−（アダマンチル）グアニジンである第３４項 の方法。